JP2006061027A - 生体物質採取方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】特定の生体物質に親和性のある物質を先端部に固定した針を生きた細胞に刺し、所定時間後に前記針を生きた細胞より抜き、前記先端部から前記特定の生体物質を採取する。
【選択図】図1
Description
図1は実施例1の細胞内生体物質であるmRNAの採取法の流れを示す概略図である。図2(A)は、実施例1で使用する針の先端部の構成の一例を示す図であり、図2(B)は、針の全体構成を示す斜視図である。
CTGAGCGAGT GAGAACCTAC TG :(配列番号1)
AGCCACATCA GCTATGTCCA :(配列番号2)
次に、最初に針を刺した細胞に対して、16時間後に、再度、工程1)から工程4)を繰り返し、mRNAの採取とPCR増幅を行う。2回目の針刺しは、コンタミネーションを防ぐため、1回目の針刺しとは別の針3を用いる。
GTATGAGAAG GCTGAGATAA AGG :(配列番号3)
AGCTGCTTAT ATTTTGAGTA CAGG :(配列番号4)
このときのPCR条件は、94℃変性5秒間、52℃アニール10秒間、72℃10秒間のサイクルを35回繰り返す。
実施例2では、一回の針刺しでmRNAを生きた細胞から採取し、複数のcDNAを得る方法について述べる。ここでは実施例1と同様にPNAで出来たプローブ21が固定されている針3でmRNAを採取する。
実施例3では、特定のタンパク質とアフィニティーを有する抗体を固定し多針で特定物質を採取する例について述べる。図5(A)は、実施例3で採用しうる針先端部53を示す図であり、図5(B)は、実施例3で採用しうる針の全体構成を示す斜視図である。
[配列表]
SEQUENCE LISTING
<110> Onchip Cellomics Consortium
<120> A method of Preparation of Biomaterials
<130> NT04P0875
<160> 4
<210> 1
<211> 22
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 1
ctgagcgagt gagaacctac tg 22
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 2
agccacatca gctatgtcca 20
<210> 3
<211> 23
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 3
gtatgagaag gctgagataa agg 23
<210> 4
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 4
agctgcttat attttgagta cagg 24
Claims (7)
- 特定の生体物質に親和性のある物質を先端部に固定した針を生きた細胞に刺し、所定時間後に前記針を生きた細胞より抜き、前記先端部から前記特定の生体物質を採取する生体物質採取方法。
- 特定の生体物質に親和性のある物質と(Arg)n(n:1〜8)とを先端部に固定した針を生きた細胞に刺し、前記親和性のある物質を針先端部に捕捉し、前記細胞が生きたまま細胞に含まれる特定の生体物質を採取する生体物質採取方法。
- 特定の生体物質に親和性のある物質とTiO2とを先端部に固定した針を生きた細胞に刺し、前記親和性のある物質を針先端部に捕捉し、前記細胞が生きたまま細胞に含まれる特定の生体物質を採取する生体物質採取方法。
- 前記特定の生体物質がmRNAである請求項1または2記載の生体物質採取方法。
- mRNAのポリA部分に親和性のあるポリT配列の誘導体を有するプローブを先端部に固定した針を生きた細胞に刺し、所定時間後に前記針を細胞より抜き、前記針先端部に捕捉されたmRNAを採取し、前記採取されたmRNAをPCRで増幅して特定遺伝子のcDNAを得ることを特徴とする生体物質採取方法。
- 前記特定の生体物質がタンパク質である請求項1または2記載の生体物質採取方法。
- 特定の生体物質に親和性のある物質を先端部に固定した針を生きた細胞に刺し、所定時間後に前記針を生きた細胞より抜き、前記先端部から前記特定の生体物質を採取した後、さらに所定時間後に、特定の生体物質に親和性のある物質を先端部に固定した針を前記細胞に刺し、所定時間後に前記針を細胞より抜き、前記先端部から前記特定の生体物質を採取することを特徴とする生体物質採取方法。
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