JP2005538084A - B型肝炎ウイルスの治療のためのl−fmauとの併用療法 - Google Patents
B型肝炎ウイルスの治療のためのl−fmauとの併用療法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2005538084A JP2005538084A JP2004521734A JP2004521734A JP2005538084A JP 2005538084 A JP2005538084 A JP 2005538084A JP 2004521734 A JP2004521734 A JP 2004521734A JP 2004521734 A JP2004521734 A JP 2004521734A JP 2005538084 A JP2005538084 A JP 2005538084A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- interferon
- virus
- dna
- ftc
- cells
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/66—Phosphorus compounds
- A61K31/675—Phosphorus compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pyridoxal phosphate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/191—Tumor necrosis factors [TNF], e.g. lymphotoxin [LT], i.e. TNF-beta
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/193—Colony stimulating factors [CSF]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/20—Interleukins [IL]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/21—Interferons [IFN]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/29—Hepatitis virus
- A61K39/292—Serum hepatitis virus, hepatitis B virus, e.g. Australia antigen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/10011—Adenoviridae
- C12N2710/10041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2710/10043—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2730/00—Reverse transcribing DNA viruses
- C12N2730/00011—Details
- C12N2730/10011—Hepadnaviridae
- C12N2730/10111—Orthohepadnavirus, e.g. hepatitis B virus
- C12N2730/10134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Virology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Mycology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Description
製造形態のインターフェロンがB型肝炎を治療するために使用される。この治療はインターフェロンを注射により約4ヶ月間投与することを含む。
3TC(エピビル,ラミブジン)としても公知のBCH−189(2’,3’−ジデオキシ−3’−チアシチジン)の(−)−エナンチオマーは、HIV及びHBVの両方に対して活性な抗ウイルス薬である。3TCは、複製のためにHIV及びHBVが必要とする逆転写酵素の産生を阻止することにより働くヌクレオシドアナログ逆転写酵素阻害剤(NRTI)と呼ばれる薬物の1種に属する。3TCは元々HIVの治療用に開発されたが、研究者らにより3TCがB型肝炎ウイルスに対しても働くことが発見された。1998年12月に、米国食品医薬品局(FDA)はB型肝炎ウイルス感染の治療用にエピビルHBVを承認した。
2002年9月20日に米国食品医薬品局は慢性B型肝炎の治療用にアデホビルジピボキシルを承認した。ヘプセラ(商品名)はアデホビルのジエステルプロドラッグであるアデホビルジピボキシルの商品名である。アデホビルは、天然基質デオキシアデノシントリホスフェートと競合し、ウイルスDNAに取り込まれた後DNA連鎖を停止させることによりB型肝炎ウイルス(HBV)DNAポリメラーゼを阻害するアデノシンモノホスフェートの非環式ヌクレオチドアナログである。アデホビルジピボキシルの化学名は9−[2−[ビス[(ピバロイルオキシ)メトキシ]ホスフィニル]メトキシ]−エチル]アデニンである。アデホビルは、細胞キナーゼにより活性代謝物のアデホビルジホスフェートにリン酸化される。例えば、米国特許第5,641,763号明細書及び同第5,142,051号明細書(発明の名称:ピリミジン及びプリン塩基のN−ホスホニルメトキシアルキル誘導体及びその抗ウイルス活性を有する治療組成物)を参照されたい。
β−L−FTC(β−2−ヒドロキシメチル−5−(5−フルオロシトシン−1−イル)−1,3−オキサチオラン,エントリヴァ:エントリシタビン)はHIVの治療用に承認されており、現在B型肝炎感染の治療用にヒトの臨床試験にかけられている。前記化合物はアヒルモデル(S.Aguesse−Germon,S.H.Liuら,Antimicrob.Agents Chemother.,42:369−376(1998);B.Seigneres,C.Pichoudら,(2000))及びウッドチャックにおいてB型肝炎ウイルスに対して強い活性を示す。HBVのウッドチャックモデルでは、FTCがウイルス複製を抑制するがウイルス浄化を誘導しないことが知見された(J.M.Cullen,S.L.Smithら,Antimicrob.Agents Chemother.,41:2076−2082(1997);B.E.Korba,R.F.Schinaziら,Antimicrob.Agents Chemother.,44:1757−60(2004))。
L−FMAU(クレブジン)は、HBV感染のインビトロモデル(酵素アッセイ及び組織培養実験)に基づいて、アヒル(S.Aguesse−Germon,S.H.Liuら,Antimicrob.Agents Chemother.,42:369−376(1998);B.Seigneres,C.Pichoudら,(2000))やウッドチャックのような実験的にB型肝炎を感染させた動物モデルにおいてB型肝炎ウイルス感染の治療のための別の有望な候補物質である。ウッドチャックモデルでは、L−FMAUは感染肝細胞の数を急速に減少させることが判明した(Y.Zhu,T.Yamamotoら,J.Virol.,75:311−22(2001))。Yung Chi Chung,Chung K.Chuらが最初に1994年に1−(2’−デオキシ−2’−フルオロ−β−L−アラビノフラノシル)−チミン(L−FMAU)がB型肝炎ウイルス及びエプスタイン−バーウイルスに対して優れた活性を発揮することを報告した。米国特許第5,587,362号明細書、同第5,567,688号明細書、同第5,565,438号明細書、同第5,808,040号明細書及び国際特許出願公開第95/20595パンフレットを参照されたい。国際特許出願公開第01/72294号パンフレットは、δ型肝炎感染の治療のために2’−デオキシ−2’−フルオロ−β−L−アラビノフラノシルチミン(L−FMAU)を使用することを開示している。
インターフェロンは、免疫系を調節し、他の細胞機能を調節するために身体により自然に産生されるタンパク質である。インターフェロンの主なクラスはインターフェロンα、インターフェロンβ、インターフェロンγ、インターフェロンω及びインターフェロンτである。インターフェロンは、インビボで安定性を高めるために修飾され得、この修飾にはペグ化または分子の安定性を高めるための他の手段が含まれる。
ウイルス複製をうまくコントロールし、ウイルス耐性変異体の出現を遅らすために、併用療法に基づいた抗ウイルス戦術を開発することは重要である(F.Zoulim,Antivir.Chem.Chemother,12(補遺1):131−142(2001))。併用療法によれば、ヒト免疫不全ウイルスで立証されているように交差耐性変異体の選択が防止される(Y.K.Chow,M.S.Hirschら,Nature,361:650−654(1993);S.Snyder,D.Z.D’Argenioら,Antimicrob.Agents Chemother.,44:1051−1058(2000);M.L.Villahermosaら,Biochemistry,36:13223−13231(1997))。幾つかの研究は、慢性ヘパドナウイルス感染の治療のためにポリメラーゼ阻害剤の併用の抗ウイルス効果の数個の実験モデルを用いた試験に向けられている(Korbaら,Antivir.Res.,45:19−32(2000);D.Colledge,S.Locarnini及びT.Shaw,Hepatology,26:216−225(1997);Colledgeら,Antimicrob.Agents Chemother.,44:551−560(2000))。B型肝炎感染に対する併用療法の開発は、慢性B型肝炎感染の罹患率及び致死率を更に下げるために現在必要な戦術の1つである。
を有するβ−L−ヌクレオシド、またはその医薬的に許容され得る塩またはプロドラッグの有効量を、場合により医薬的に許容され得る担体中の式:
を有するβ−L−ヌクレオシド、またはその医薬的に許容され得る塩またはプロドラッグと一緒に及び/または交互に且つ免疫調節剤(例えば、TH1サイトカイン)、特に本明細書に記載されているようなインターフェロンと一緒に及び/または交互に投与することを含む宿主、好ましくは哺乳動物、更に好ましくはヒトにおけるHBV感染を治療及び/または予防するための組成物及び方法を提供する。
を有するβ−L−ヌクレオシド、またはその医薬的に許容され得る塩またはプロドラッグの有効量を、場合により医薬的に許容され得る担体中の式:
を有するβ−L−ヌクレオシド、またはその医薬的に許容され得る塩またはプロドラッグと一緒に及び/または交互に且つ免疫調節剤(例えば、TH1サイトカイン)、特に本明細書に記載されているようなインターフェロンと一緒に及び/または交互に投与することを含む宿主、好ましくは哺乳動物、更に好ましくはヒトにおけるHBV感染を治療及び/または予防するための組成物及び方法を提供する。
本明細書中、用語「アルキル」は、特記しない限り、通常C1−10の飽和の直鎖、分枝鎖または環状の第1級、第2級または第3級炭化水素を指し、具体的にはメチル、トリフルオロメチル、CCl3、CFCl2、CF2Cl、エチル、CH2CF3、CF2CF3、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ブチル、イソブチル、t−ブチル、ペンチル、シクロペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、シクロヘキシル、シクロヘキシルメチル、3−メチルフェニル、2,2−ジメチルブチル及び2,3−ジメチルブチルが含まれる。この用語には置換及び未置換アルキル基が含まれる。アルキル基上の置換基は、ハロゲン(フッ素、塩素、臭素またはヨウ素)、ヒドロキシ、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アルコキシ、アリールオキシ、ニトロ、シアノ、スルホン酸、スルフェート、ホスホン酸、ホスフェートまたはホスホネートからなる群から選択される。これらの基は、例えば参照により本明細書に組込まれるGreenら,「有機合成の保護基(Protective Groups in Organic Synthesis)」,第2版,John Wiley and Sons(1991年)出版に教示されているように当業者に公知のように未保護であっても所要により保護されていてもよい。
本明細書に開示されている化合物が安定な非毒性酸または塩基塩を形成するのに十分な塩基性または酸性の場合には、化合物を医薬的に許容され得る塩として投与することが適当な場合がある。医薬的に許容され得る塩の例は生理学的に許容され得るアニオンを形成する酸で形成される有機酸付加塩、例えばトシレート、メタンスルホネート、アセテート、サイトレート、マロネート、タータレート、スクシネート、ベンゾエート、アスコルベート、α−ケトグルタレート及びα−グリセロホスフェートである。硫酸塩、硝酸塩、重炭酸塩及び炭酸塩を含めた適当な無機塩も形成され得る。
HBVによる影響を被っていたりB型肝炎ウイルスに曝されている宿主、特にヒトは、患者に対して有効量のL−FMAU及びβ−L−FTCをそれぞれ独立してまたは一緒に医薬的に許容され得る担体または希釈剤中の本明細書に記載されているインターフェロンを含めた免疫調節剤、例えばTH1サイトカイン、またはその医薬的に許容され得る塩またはエステルと一緒に及び/または交互に投与することにより治療され得る。活性成分は液体または固体形態で適当なルート、例えば経口、非経口、経腸、静脈、皮内、皮下、局所、鼻内、直腸により投与され得る。
本発明の別の態様は、HBVを治療すべく免疫調節剤を2つ以上の抗−HBV剤と一緒に及び/または交互に異なる作用方法及び/または相乗効果で送達するためにインビボ遺伝子治療方法を使用することである。遺伝子治療方法は、標的組織による発現のために必要なプロモーター及び/または他の遺伝因子に作動的に連結し得る免疫調節剤の発現を高めるための宿主(例えば、動物、特にヒト)への核酸(DNA、RAN、及びアンチセンスDNAまたはRNA)配列の導入に関する。前記した遺伝子治療並びに送達方法及び技術は当業界で公知である。例えば、国際特許出願公開第90/11092号パンフレット;同第98/11779号パンフレット;米国特許第5,693,622号明細書;同第5,705,151号明細書;同第5,580,859号明細書;H.Tabataら,Cardiovasc.Res.,35(3):470−479(1997);J.Chaoら,Pharmacol.Res.,35(6):517−522(1997);J.A.Wolff,Neuromuscul.Disord.,7(5);314−318(1997);B.Schwartzら,Gene Ther.,3(5):405−411(1996);Y.Tsurumiら,Circulation,94(12):3281−3290(1996)を参照されたい。
免疫調節剤を発現及び/または分泌させるべく細胞及び/または細胞株をトランスフェクトするために任意のアデノウイルスベクターを使用し得る。アデノウイルスは線状二本鎖DNAゲノムを含む非エンベロープウイルスである。多くはヒトにおいて良性呼吸器感染を生じさせる40血清型以上のアデノウイルス株があるが、サブ群C血清型2また5が主にベクターとして使用される。ライフサイクルは通常宿主ゲノムへの組み込みを含まず、むしろ宿主細胞の核においてエピソーム因子として複製するので挿入突然変異の危険はない。野生型アデノウイルスゲノムは約35kbであり、そのうちの最高30kbが外来DNAにより置換され得る(Smith(1995);Verma及びSomia(1997))。調節機能を有する初期転写単位は4個あり(E1、E2、E3及びE4)、構造タンパク質をコードする後期転写物がある。先祖ベクターは不活化されたE1またはE3遺伝子を有し、ミッシング遺伝子はヘルパーウイルス、プラスミドによりトランスに供給されるかまたはヘルパー細胞ゲノムに組み込まれる(ヒト胎児腎臓細胞、株293,F.L.Graham.J.Smiley,W.L.Russel及びR.Nairn,General Virology,36:59−72(1997))。第2世代ベクターは更にE2a温度感受性変異株(J.F.Engelhardt,L.Litsky及びJ.M.Wilson,Human Gene Therapy,5:1217−1229(1994))またはE4欠失(D.Armentano.J.Zabnerら,Journal of Virology,71:2408−2416(1997))を用いている。最も最近の“ガットレス”ベクターは逆方向末端反復(ITR)及び導入遺伝子の周りにパッケージング配列のみを含み、必要なウイルス遺伝子はすべてヘルパーウイルスによりトランスに与えられる(H.Chen,L.M.Mack,R.Kellyら,Proceedings of the National Academy of Sciences of the U.S.A.,94:1645−1650(1997))。
免疫調節剤を発現及び/または分泌させるべく細胞及び/または細胞株をトランスフェクトするために任意のレトロウイルスベクターを使用し得る。レトロウイルスはゲノムとして一本鎖RNA分子を含むエンベーロープウイルスの1種である。感染後、ウイルスゲノムは二本鎖DNAに逆転写され、これは宿主ゲノムに組み込まれ、タンパク質として発現する。このウイルスゲノムは少なくとも3個の遺伝子、すなわち(コアタンパク質をコードする)gag、(逆転写酵素をコードする)pol及び(ウイルスエンベロープタンパク質をコードする)envを含む約10kbである。ゲノムの各末端に、プロモーター及びエンハンサー領域及び組み込みに関与する配列を含む長末端反復(LTR)が存在する。更に、ウイルスDNA(psi)及びRNAスプライス部位をenv遺伝子に詰め込むのに必要な配列がある。ある種のレトロウイルスは、変異すると癌を引き起こす恐れがある癌原遺伝子を含むが、この癌原遺伝子はベクターの作成時に除去される。レトロウイルスは、原細胞癌遺伝子の近くに組み込み、LTRから不適切に発現することにより、または腫瘍抑制遺伝子を破壊することにより細胞を形質転換することもあり得る。挿入変異と称されるこの現象は、レトロウイルスをベクターとして使用したときに非常にまれではあるが起こり得る。
免疫調節剤を発現及び/または分泌させるべく細胞及び/または細胞株をトランスフェクトするために任意の単純ヘルペスウイルスベクターを使用し得る。単純ヘルペスウイルスタイプ1(HSV−1)はヒト向神経性ウイルスであり、神経系に遺伝子移入するためのベクターとしてHSV−1を用いることに現在興味が集中している。野生型HSV−1ウイルスはニューロンを感染させ、溶解性生活サイクルに進むかまたは潜伏状態で核内エピソームとして生き残ることができる。潜伏感染したニューロンは正常に機能し、免疫系により拒絶されない。潜伏ウイルスは転写的にほぼ沈黙しているが、潜伏中に機能し得るニューロン特異的プロモーターを有している。HSV−1に対する抗体はヒト集団において一般的であるが、ヘルペス感染に起因する脳炎のような合併症は非常にまれである。
ウイルスベクターはいずれもある程度免疫応答を誘導し、安全性のリスク(例えば、挿入突然変異及び毒性の問題)を有し得る。更に、その能力は限られており、大規模産生することは困難なことがある。従って、本発明の1実施態様では遺伝子移入の非ウイルス方法が使用される。この方法は少数のタンパク質のみを必要とし得、実質的に無限の能力を有し、感染または突然変異可能性を持たず、大規模産生が製薬技術を用いて可能である。非ウイルスDNA移入には3つの方法、すなわち裸DNA、リポソーム及び分子コンジュゲートがある。
免疫調節剤を宿主に送達するために裸DNAまたは核酸が使用され得る。これは、例えば筋細胞に直接注入し得る(J.A.Wolff,R.W.Malone,P.Williams,W.Chong,G.Acsadi,A.Jani及びP.L.Felgner,Science,247:1465−1468(1990))または組織に衝撃される金粒子に結合した(L.Cheng,P.R.Ziegelhoffer及びN.S.Yang,Proceedings of the National Academy of Sciences of the U.S.A.,90:4455−4459(1993))プラスミドの形態で送達し得る。用語「裸」核酸、DNAまたはRNAは、ウイルス配列、ウイルス粒子、リポソーム処方物、リポフェクチン、沈殿剤等のような細胞への進入を援助、助長または促進するように作用する送達ビヒクルを含まない配列を指す。余り効率的ではないが、これによりインビボで低レベルの発現が長期間生じ得る。他の遺伝子治療方法とは異なり、標的細胞に裸核酸配列を導入することの1つの大きな利点は細胞における免疫調節剤の合成が一時的なことである。研究により、非複製DNA配列を細胞に導入すると所望の免疫調節剤が6ヶ月までの期間産生され得ることが判明した。この方法の単純さ及び持続的発現により、DNAワクチンが開発された。従来の弱毒化及びタンパク質を主成分とするワクチンと比較して、例えば母性抗体に起因する既存の免疫により影響を受けず、比較的安価であり、1つのプラスミドで多数の病原性抗原を送達できる(E.Manickan,K.L.Karem及びB.T.Rouse,Critical Reviews in Immunology,17:139−154(1997))。HIVのような既存のワクチンがないか(C.Lekutis.J.W.Schiver,M.A.Liu及びL.N.Letvin,The Journal of Immunology,158:4471−4477(1997))またはインフルエンザのように現在のワクチンは十分に有効でない(M.D.Macklin,D.McCabeら,Journal of Virology,72:1491−1496(1998))病原体に対してDNAワクチンが開発されている。高保存遺伝子を用いて、Ulterら(J.B.Ulmer,J.J.Donnellyら,Science,254:1745−1749(1993))は、2つの血清学的に異なるインフルエンザウイルス株に対してマウスを免疫化し得た。しかしながら、多くの場合、DNAワクチンは既存のワクチンよりも有効ではないことが判明した(M.D.Macklin,D.McCabeら,Journal of Virology,72:1491−1496(1998))。免疫応答の実際のタイプは、適当なサイトカインをコードする遺伝子を同時形質転換することによりコントロールし得(Z.Xiang及びH.C.Ertl,Immunity,2:129−135(1995))、この方法は不適切な免疫応答を転送させるのに有用であり得る(E.Manickan,K.L.Karem及びB.T.Rouse,Critical Reviews in Immunology,17:139−154(1997))。裸DMAの他の用途には、ガンの免疫強化(以下に記載する、M.Corr,H.Tighe,D.Lee,J.Dudlerら,The Journal of Laboratory Investigation,159:4999−5004(1997))、膵臓インスリン機能の修復(I.D.Goldfine,M.S.German,H.Tsengら,Nature Biotechnology,15:1378−1382(1997))及び副行血管発生の刺激(S.Takeshita,Y.Tsurumiら,Laboratory Investigation,75:487−501(1996))が含まれる。筋組織での遺伝子産物の発現はコラゲナーゼ、パパベリン及び虚血性状態の同時投与により改善され得る(V.Budker,G.Zhang.I.Danko,P.Williams及びJ.Wolff,Gene Therapy,5:272−276(1998))。筋特異的プロモーター(M.Skarli,A.Kiriら,Gene Therapy,5:514−520(1998))及びポリAや転写停止配列のような他の遺伝子内調節配列(J.Hartikka,M.Sawdeyら,Human Gene Therapy,7:1205−1217(1996))を用いても導入遺伝子発現が改善される。
免疫調節剤は、当業界で公知の方法により調製し得るリポソーム処方物(例えば、(P.L.Felgnerら,Ann.N.Y.Acad.Sci.,772:126−139(1995)及びB.Abdallahら,Biol.Cell,85(1):1−7(1995)に教示されているようなもの)の形態でも送達し得る。リポソームは水性流体の一部を捕捉する脂質二重層である。DNAは自発的に(電荷により)カチオン性リポソームの外表面に会合し、このリポソームは細胞膜と相互作用する(J.H.Felgner,R.Kumarら,Journal of Biological Chemistry,269:2550−2561(1994))。インビボでは、特定細胞株の最高90%がトランスフェクトされ得る。カチオン性リポソームに少量のアニオン性脂質を配合することにより、DNAはリポソームの内表面に取り込まれ得、よって酵素分解から保護される(S.F.Alio,Biochemical Pharmacology,54:9−13(1997)に引用されているCrespoら(1996))。エンドソームとして細胞への摂取を助長するために、標的タンパク質はリポソーム、例えば抗−MHC抗体(C.Wang及びL.Huang,Proceedings of the National Academy of Sciences of the U.S.A.,84:7851−7855(1987))、トランスフェリン(J.C.Stavridis,G.Deliconstantinosら,Experimental Cell Research,164:568−572(1986))及びセンダイウイルスまたはそのFタンパク質(J.V.Dzau,M.J.Mann,R.Morishita及びY.Kaneda,Proceedings of the National Academy of Sciences of the U.S.A.,93:11421−11425(1996))中に配合されていた。センダイウイルスにより、更にプラスミドDNAはエンドソームから細胞質に逃げ、よって分解を避けることができる。DNA結合タンパク質(28kDの高移動度グループ1タンパク質)を配合すると、プラスミドが核に移動することにより転写が強化される(Dzauら,Am.J.Cardiol.,80(9A):331−391(1997),1997年11月6日発行)。
分子コンジュゲートは、DNA結合剤を結合させたタンパク質または合成リガンドから構成されている。細胞への送達は、リポソームの場合と同様の技術を用いて改善され得る。標的タンパク質には、アシアロ糖タンパク質(E.Wagner,M.Cotten,R.Foisner及びM.L.Birnstiel,Proceedings of the National Academy of Sciences of the U.S.A.,88:4255−4259(1991))、トランスフェリン(C.H.Wu,J.M.Wilson及びG.Y.Wu,Journal of Biological Chemistry,264:16985−16987(1989))、ポリマーIgA(T.Ferkol,C.S.Kaetzel及びP.B.Davis,Journal of Clinical Investigation,92:2394−2400(1993))及びアデノウイルス(J.Madon及びH.E.Blum,Hepatology,24:474−481(1996))が含まれる。導入遺伝子の発現は一過性である傾向にあり、エンドソーム/リポソーム分解により制限される。
AdIFN ウッドチャックインターフェロンγを発現するアデノウイルスベクター;
AdRFP ウッドチャックインターフェロンγ遺伝子を持たないアデノウイルスベクター;
CCC DNA DNAの共有結合閉環ウイルス形態;
DNA デオキシリボ核酸;
FTC 5−フルオロ−1−(2R,5S)−1,3−オキサチオラン−5−イル]シトシン;
GFP 緑色蛍光タンパク質;
HBV B型肝炎ウイルス;
IFN インターフェロン;
L−FMAU 1−(2−フルオロ−5−メチル−β,L−アラビノフラノシル)チミン;
M1、M2 治療開始後それぞれ1ヶ月目または2ヶ月目;
PCNA 増殖細胞核抗原;
PCR ポリメラーゼ連鎖反応;
Pfu プラーク形成単位;
RFP 赤色蛍光タンパク質;
RI 複製中間体;
RT 逆転写;
TUNEL ターミナルデオキシヌクレオチジルトランスフェラーゼ(TdT)媒介dUTPニック末端標識アッセイ;
WHV ウッドチャックB型肝炎ウイルス。
L−FMAU及びβ−L−FTCの投与:
通常、β−L−FTCはCullenら(Cullenら,Antimicrob.Agents Chemother.,41:2076−5082(1997)に記載されているプロトコルに従った投与した。具体的には、30mg/kgのβ−L−FTCを腹腔内投与した。
ウッドチャックB型肝炎ウイルス感染モデルは、慢性B型肝炎を患っているヒトで見られるウイルス感染の病歴に似ているので抗ウイルス剤を評価するための有用なモデルである。幾つかの研究で、この動物モデルが新しいヌクレオシドアナログの研究において特に抗ウイルス効果及び毒性に関する研究において確実に使用されることが判明している。
アデノウイルスベクターは、Heら(T.C.Heら,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,95:2509−14(1998))に記載されている手順に従って得た。このアデノウイルスベクターは、E1及びE3領域を欠失しているので複製欠損である。SV40プロモーターの制御下のeCFP遺伝子レポーターに結合させたCMVプロモーターの制御下のプレ−IFNγ遺伝子(aa 1−143)のコーディングカセットを有する組換えカセットを元のE1領域(454−3500)に挿入した(図1)。活性ウッドチャックIFNγ産生効率をウッドチャック細胞株WCH17のVSV感染からの保護により評価した。
L−FMAU+β−L−FTC+adIFNの評価:
実験的にWHVに感染させたウッドチャック(Marmotta monax)18匹をニューヨーク州サウスプリマスに所在のNortheastern Wildlifeから購入した。これらのウッドチャックは慢性的に感染しており、インビボ実験のために使用した。
肝生検:
治療前(TO)、治療中2回(M1,M2)及び休薬後4ヶ月目(M3)に全身麻酔下で開腹後外科的肝生検を実施した。アデノウイルス注射後毎回4日目に治療時生検を実施した。各サンプルの一部をウイルスDNA分析のために−80℃で保存した。別の部分は肝組織検査及び免疫染色のためにホルマリンで固定し、パラフィンに包埋した。最後の部分は電子顕微鏡研究(TO及びM2)のために1% 四酸化オスミウムで固定した。手術中肉眼で肝臓を調べた。
肝生検時に感染ウッドチャックから肝臓内ウイルスDNAを抽出した。10mM トリス−HCl(pH7.5)、10mM EDTA中でホモジナイズ後、肝サンプルを二分し、一方は(プロテイナーゼK消化し、フェノール−クロロホルム抽出し、エタノール沈殿させた後)総ウイルスDNAを分離するために、他方は(タンパク質結合DNAをSDS−KCl沈殿させ、フェノール−クロロホルム抽出し、エタノール沈殿させた後)非タンパク質結合の共有結合閉環(CCC)ウイルスDNAを単離するために使用した。サザンブロット分析のために使用される各サンプル中のDNAの量を正規化するために、DNA濃度をUV濃度測定分析により測定し、アガロースゲル用いる電気泳動後既に定量されているDNAと比較した。その後、全DNAまたはCCC DNA調製物に相当する核酸5μgを1.2%アガロースゲルを用いる電気泳動にかけ、ナイロン膜にブロットすることによりアルカリ移動させ、ウイルスDNAを上記した特異的ハイブリダイゼーションにより検出した。
ホルマリン固定した肝生検組織切片をヘマトキシリン−エオシン−サフラン(HES)染料で染色し、光学顕微鏡下で検査した。肝細胞壊死(好酸体)の程度、門脈路及び小葉内腔の炎症レベル及び線維症段階をMetavirスコア(Hepatology,20(1 Pt 1):15−20(1994))を用いて半定量的に評価した。肝生検切片は脂肪変性、小管増殖、肝細胞異形成及び肝細胞癌についても評価した。
ウイルス血症の分析:
ドットブロット分析
ウイルス血症を、ウッドチャックB型肝炎ウイルス(WHV)DNAを定量的に検出することにより評価した。WHV DNAをHighPure PCR鋳型DNA抽出キット(Roche Diagnostics)を用いて血清から抽出し、血清50μlに相当するサンプルを膜(Biodyne B,0.45μM,Merck Eurolab)上にWHV DNA標準物質の連続希釈物を用いてスポットした。固定手順後、フィルターを32P標識した完全長WHV DNAプローブとハイブリダイズした。ホスホイメージャースキャン(Amersham Pharmacia Biotech)の比較分析をImageQuantソフトウェアを用いて実施した。このアッセイの検出限界は6×107コピー/ml(200pg/ml)であった。
ウイルスプラス鎖DNAの合成に対するAd IFNの影響を内因生ポリメラーゼアッセイ(EPA)においてWHV粒子を用いて調べた。比較のために、DNA依存性DNAポリメラーゼ阻害剤のホスホノホルム酸(PFA)を対照として使用した。内因性ポリメラーゼ活性はリラックス環状DNAを含有する成熟粒子におけるウイルスプラス鎖DNAの完成に相当する。WHV随伴DNAポリメラーゼ活性は、部分精製したウイルス粒子50μlを(i)dATP、dCTP、dGTP(それぞれ100μl)及び3H−DTTP(0.17μM)を含有する反応緩衝液(50mM トリス−HCl(pH7.6),40mM MgCl2,60mM NH4Cl,0.5% NP40,10mM β−メルカプトエタノール)25μlと混合することによりアッセイした。酵素アッセイはHantzら(Q.Hantzら,Virology,Sep.,190(1):193−200(1992))に記載されているように実施した。簡単に説明すると、酵素反応物を37℃で3時間インキュベートし、GF/Cファイバーガラスフィルター(Whatman)上にスポットし、5% トリクロロ酢酸で十分に洗浄した。3H−dTTPの取り込み量をBeckman LS 6000SCシンチレーションカウンターを用いて測定した。このアッセイの検出限界は1,000cpm/mlであった。
ウイルス力価がドットブロットハイブリダイゼーションにより簡単に検出するには低すぎる場合には、リアルタイムPCR技術を用いた(例えば、Dandriら,Hepatology,32:139−46(2000)参照)。リアルタイムPCRが10コピーほどの少量のヒトHBV DNAを検出することは公知である。従って、ウイルス血症を完全に分析するために、リアルタイムPCRを用いて6×107コピー/ml(200pg/ml)以下のWHV DNAを検出するために使用した。同一WHV DNA標準物質をドットブロットアッセイ及びリアルタイムPCRアッセイのために使用した。ドットブロット陽性サンプルに対するPCRアッセイで類似の定量結果が生じた。この方法の検出限界の下限は25WHVコピー/μlであった。
接種物力価の測定:
アデノウイルスベクター接種物の抗ウイルス効果及び耐性を調べるために、4匹の動物にAd−IFNを3×107pfu(A33)、3×109pfu(A30)及び3×1011pfu(A32及びA34)の濃度で静注した。
有効性の研究−Ad IFNベクターの抗ウイルス効果の評価:
5匹のウッドチャック(A35、A36、A37、A38、A42)に3×109pfuの完全Ad IFNベクターを与えた。2匹のウッドチャック(A39、A40)からなるコントロール群には3×109pfuのAd GFPベクターを与え、1匹のウッドチャック(A41)は未治療であった(図4及び5)。
L−FMAU及びβ−L−FTCの評価:
結果はウイルス血症の有意な抑制を示し、β−L−FTC、L−FMAU及びAd IFNで治療したすべての動物でドットブロットアッセイの検出限界(6×107コピー/ml)以下のほぼ4〜5log単位減少した(図7参照)。しかしながら、対照(未治療、Ad GFP)またはAd IFNのみで治療したウッドチャックはウイルス血症の有意な変化を示さなかった(図8及び9)。
肝臓内ウイルスDNAのサザンブロット分析(図11)は、通常ウイルス血症パターンに一致していた肝臓内WHV複製中間体レベルの変化を示した。ウイルスDNA合成レベルの著しい減少がβ−L−FTC及びL−FMAU治療群で観察され、治療前レベルに比して肝臓内ウイルスDNA中間体レベルは82〜93%減少した(図12及び13)。CCC DNAはM1及びM2で肝臓において持続していたが、他のWHV DNA複製中間体は劇的に減少した。
肝臓内WHV DNA合成:
併用治療の結果とは異なって、Ad IFN単独では肝臓中の総ウイルスレベル及びCCC DNAレベルに影響を与えなかった(Ad GFP群の総DNAの+43%に比して、それぞれ+44%及び−6%)(図15)。
組換えアデノウイルスベクターによる肝細胞形質導入の評価:
アデノウイルス感染した肝細胞の数を調べるために、緑色蛍光タンパク質(GFP)に対する市販の抗体を用いて免疫染色した。しかしながら、観察された蛍光は対照に比して特異的でなく、肝細胞の天然蛍光または多分胆汁色素に起因し得る。
組織検査:
β−L−FTC併用治療した動物の肝生検切片の検査から、肝臓中の小葉病巣炎症が明らかとなった。Ad IFN治療群のウッドチャックはすべて高い炎症活性を示した(図15)。この群で6つの生検でMetavirスコアの最高炎症活性が観察された。反対に、L−FMAU及びβ−L−FTC治療群は同様のプロフィールを示さなかった。この群の6匹のウッドチャックのうち3匹のみが炎症活性の増加を示した。対照群では、MetavirスコアはAd IFNのみで治療した群でもずっと不変であった。
ウイルス血症の分析:
ウイルス血症はWHV DNAに対するドットブロット分析を用いて分析し、ウイルス血症が治療前値に戻るまでホスホイメージャーを用いて定量し得る。
肝臓内ウイルスDNA合成の分析:
治療後5ヶ月目に採取した生検の肝切片をサザンブロットハイブリダイゼーションにかけて、肝臓内ウイルスDNA合成を分析した。
WHVポリメラーゼ遺伝子配列決定:
PreS及びRT領域をPCR増幅後エスケープ変異体が抗ウイルスプロトコルの1つにより選択されるか否かを調べるために循環ビリオン由来のゲノム配列を分析し得る。
電子顕微鏡による肝ミトコンドリアの検査:
肝生検切片を150mM カコジル酸ナトリウムHCl(pH7.4)中1% 四酸化オスミウムで固定し、等級エタノールを用いて脱水し、メタノール性酢酸ウラニル及びクエン酸鉛で包埋し、透過型電子顕微鏡1200EXで分析すると、併用β−L−FTC治療のミトコンドリア毒性が妨げられる。
GFPまたはRFPの可視化:
アデノウイルスベクターで感染した細胞の数は、5μm厚の脱パラフィン化肝組織切片を適当なフィルターを用いる共焦点顕微鏡により直接観察することによりモニターし得る。
WHV感染肝細胞の数の評価:
WHV感染細胞の数は、表面及びキャプシドタンパク質を免疫染色することによりモニターすることができる。このためには、5μm厚の脱パラフィン化肝組織切片をWHVコアまたはpre−Sタンパク質に対するポリクローナル抗体を含む家兎血清と一晩インキュベートした。その後、切片をビオチニル化ヤギ抗−家兎免疫グロブリンGとインキュベートした。抗原−抗体複合体をストレプトアビジン−ホースラディッシュペルオキシダーゼを用いて明らかにした。ウイルスタンパク質を発現する感染肝細胞の数を肝切片の代表的領域で定量した。
肝細胞ターンオーバーの分析:
アポトーシスを受けた肝細胞の数はTUNEL(ターミナルデオキシヌクレオチジルトランスフェラーゼ媒介dUTPニック末端標識)方法(J.F.R.Kerr,A.H.Wyllie及びA.R.Currie,Br.J.Cancer,26:239−257(1972))を用いて測定し得る。細胞分裂周期有糸分裂において進行する肝細胞の数はPCNAについて免疫染色することにより測定し得る。
Claims (16)
- 独立して場合により医薬的に許容され得る担体中の、治療有効量のβ−L−FTC、L−FMAU及びインターフェロンまたはその医薬的に許容され得る塩もしくはプロドラッグを一緒にまたは交互に投与することを含む、B型肝炎ウイルスに感染しているヒトの治療または予防方法。
- β−L−FTCが実質的に純粋な形態にある請求の範囲第1項に記載の方法。
- β−L−FTCが少なくとも90重量%のβ−L−異性体である請求の範囲第1項に記載の方法。
- β−L−FTCが少なくとも95重量%のβ−L−異性体である請求の範囲第1項に記載の方法。
- インターフェロンがインターフェロンα、ペグ化インターフェロンα、インターフェロンα−2a、インターフェロンα−2b、ペグ化インターフェロンα−2a、ペグ化インターフェロンα−2b、ROFERON(登録商標)−A(インターフェロンα−2a)、PEGASYS(登録商標)(ペグ化インターフェロンα−2a)、INTRON(登録商標)A(インターフェロンα−2b)、PEG−INTRON(登録商標)(ペグ化インターフェロンα−2b)、インターフェロンβ、インターフェロンγ、インターフェロンτ、インターフェロンω、コンセンサスインターフェロン、INFERGEN(インターフェロンアルファコン−1)、OMNIFERON(天然インターフェロン)、REBIF(インターフェロンβ−1a)、ω−インターフェロン、経口インターフェロンα、インターフェロンγ−1b、SuperFeron(天然ヒトマルチサブタイプIFN−α)及びHuFeron(ヒトIFN−β)からなる群から選択される請求の範囲第1項に記載の方法。
- インターフェロンがインターフェロンαである請求の範囲第5項に記載の方法。
- インターフェロンがインターフェロンγである請求の範囲第5項に記載の方法。
- インターフェロンがインターフェロンβである請求の範囲第5項に記載の方法。
- B型肝炎ウイルスに感染している宿主の治療における、独立して場合により医薬的に許容され得る担体中の、β−L−FTC、L−FMAU及びインターフェロンまたはその医薬的に許容され得る塩もしくはプロドラッグの組合せの使用。
- β−L−FTCが実質的に純粋な形態にある請求の範囲第9項に記載の使用。
- β−L−FTCが少なくとも90重量%のβ−L−異性体である請求の範囲第9項に記載の使用。
- β−L−FTCが少なくとも95重量%のβ−L−異性体である請求の範囲第9項に記載の使用。
- インターフェロンがインターフェロンα、ペグ化インターフェロンα、インターフェロンα−2a、インターフェロンα−2b、ペグ化インターフェロンα−2a、ペグ化インターフェロンα−2b、ROFERON(登録商標)−A(インターフェロンα−2a)、PEGASYS(登録商標)(ペグ化インターフェロンα−2a)、INTRON(登録商標)A(インターフェロンα−2b)、PEG−INTRON(登録商標)(ペグ化インターフェロンα−2b)、インターフェロンβ、インターフェロンγ、インターフェロンτ、インターフェロンω、コンセンサスインターフェロン、INFERGEN(インターフェロンアルファコン−1)、OMNIFERON(天然インターフェロン)、REBIF(インターフェロンβ−1a)、ω−インターフェロン、経口インターフェロンα、インターフェロンγ−1b、SuperFeron(天然ヒトマルチサブタイプIFN−α)及びHuFeron(ヒトIFN−β)からなる群から選択される請求の範囲第9項に記載の使用。
- インターフェロンがインターフェロンαである請求の範囲第13項に記載の使用。
- インターフェロンがインターフェロンγである請求の範囲第13項に記載の使用。
- インターフェロンがインターフェロンβである請求の範囲第13項に記載の使用。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US39611702P | 2002-07-15 | 2002-07-15 | |
US60/396,117 | 2002-07-15 | ||
PCT/US2003/021811 WO2004006843A2 (en) | 2002-07-15 | 2003-07-11 | Combination therapies with l-fmau for the treatment of hepatitis b virus infection |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2005538084A true JP2005538084A (ja) | 2005-12-15 |
JP4806187B2 JP4806187B2 (ja) | 2011-11-02 |
Family
ID=30115974
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2004521734A Expired - Fee Related JP4806187B2 (ja) | 2002-07-15 | 2003-07-11 | B型肝炎ウイルスの治療のためのl−fmauとの併用療法 |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20050196379A1 (ja) |
EP (1) | EP1545557B1 (ja) |
JP (1) | JP4806187B2 (ja) |
KR (2) | KR20050042134A (ja) |
CN (1) | CN100536852C (ja) |
AT (1) | ATE544453T1 (ja) |
AU (2) | AU2003253888A1 (ja) |
CA (1) | CA2492554A1 (ja) |
ES (1) | ES2381266T3 (ja) |
SG (1) | SG165996A1 (ja) |
WO (2) | WO2004006843A2 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2016529323A (ja) * | 2013-09-03 | 2016-09-23 | オブシェストヴォ・ス・オグラニチェンノイ・オトヴェトストヴェンノストジュ・“ファームエンタープライジーズ” | インターフェロン受容体の密度の減少に関連する疾患を予防又は治療するための方法 |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE102004051804A1 (de) * | 2004-10-21 | 2006-04-27 | Max-Delbrück-Centrum Für Molekulare Medizin (Mdc) | Beta-L-N4-Hydroxycytosin-Desoxynucleoside und ihre Verwendung als pharmazeutische Mittel zur Prophylaxe oder Therapie von viralen Erkrankungen |
SG185545A1 (en) * | 2010-05-18 | 2012-12-28 | Bukwang Pharm Co Ltd | Composition for treating chronic hepatitis b, containing clevudine and adefovir dipivoxil |
KR20230130175A (ko) | 2014-12-26 | 2023-09-11 | 에모리 유니버시티 | N4-하이드록시시티딘, 이와 관련된 유도체 및 이의 항 바이러스적 용도 |
AU2018378832B9 (en) | 2017-12-07 | 2021-05-27 | Emory University | N4-hydroxycytidine and derivatives and anti-viral uses related thereto |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
IL76591A0 (en) * | 1984-10-05 | 1986-02-28 | Bioferon Biochem Substanz | Pharmaceutical compositions containing ifn-ypsilon and processes for the preparation thereof |
GB9110874D0 (en) * | 1991-05-20 | 1991-07-10 | Iaf Biochem Int | Medicaments |
US5703058A (en) * | 1995-01-27 | 1997-12-30 | Emory University | Compositions containing 5-fluoro-2',3'-didehydro-2',3'-dideoxycytidine or a mono-, di-, or triphosphate thereof and a second antiviral agent |
EP0986572B2 (en) * | 1997-06-06 | 2007-06-13 | Dynavax Technologies Corporation | Immunostimulatory oligonucleotides, compositions thereof and methods of use thereof |
CN1666742A (zh) * | 1998-11-02 | 2005-09-14 | 三角药物公司 | 对乙型肝炎病毒的联合治疗 |
EP1091748A2 (en) * | 1999-04-12 | 2001-04-18 | University of Madras | A pharmaceutical formulation useful for the treatment of hepatitis b, hepatitis c and other viral infections of the liver and a process for its preparation |
WO2001072123A1 (en) * | 2000-03-28 | 2001-10-04 | The Regents Of The University Of California | Methods for increasing a cytotoxic t lymphocyte response in vivo |
-
2003
- 2003-07-11 CA CA002492554A patent/CA2492554A1/en not_active Abandoned
- 2003-07-11 US US10/618,531 patent/US20050196379A1/en not_active Abandoned
- 2003-07-11 JP JP2004521734A patent/JP4806187B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2003-07-11 AU AU2003253888A patent/AU2003253888A1/en not_active Abandoned
- 2003-07-11 ES ES03764562T patent/ES2381266T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-07-11 AT AT03764562T patent/ATE544453T1/de active
- 2003-07-11 KR KR1020057000769A patent/KR20050042134A/ko active IP Right Grant
- 2003-07-11 CN CNB038218771A patent/CN100536852C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2003-07-11 KR KR1020117005008A patent/KR20110031250A/ko not_active Application Discontinuation
- 2003-07-11 EP EP03764562A patent/EP1545557B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-07-11 WO PCT/US2003/021811 patent/WO2004006843A2/en active Search and Examination
- 2003-07-11 SG SG200702805-3A patent/SG165996A1/en unknown
- 2003-07-15 AU AU2003253894A patent/AU2003253894A1/en not_active Abandoned
- 2003-07-15 WO PCT/US2003/021929 patent/WO2004006848A2/en not_active Application Discontinuation
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
JPN6010012858, SATA,M. et al, "Clinical evaluation of intramuscular administration of natural interferon−gamma in the treatment of", Kurume Med J, 1995, Vol.42, No.1, p.9−20 * |
JPN7010000698, SEIGNERES, B et al, Antiviral Research, 200203, Vol.53, No.3, A72 * |
JPN7010000699, DELANEY,W. et al, "Evolving therapies for the treatment of chronic hepatitis B virus infection", Expert Opin Investig Drugs, 200202, Vol.11, No.2, p.169−87 * |
JPN7010000701, AURISICCHIO,L. et al, "Liver−specific alpha 2 interferon gene expression results in protection from induced hepatitis", J Virol, 2000, Vol.74, No.10, p.4816−23 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2016529323A (ja) * | 2013-09-03 | 2016-09-23 | オブシェストヴォ・ス・オグラニチェンノイ・オトヴェトストヴェンノストジュ・“ファームエンタープライジーズ” | インターフェロン受容体の密度の減少に関連する疾患を予防又は治療するための方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU2003253888A1 (en) | 2004-02-02 |
US20050196379A1 (en) | 2005-09-08 |
WO2004006848A2 (en) | 2004-01-22 |
AU2003253894A8 (en) | 2004-02-02 |
CN1681518A (zh) | 2005-10-12 |
EP1545557B1 (en) | 2012-02-08 |
EP1545557A4 (en) | 2009-06-10 |
WO2004006843A3 (en) | 2004-07-22 |
AU2003253894A1 (en) | 2004-02-02 |
ES2381266T3 (es) | 2012-05-24 |
SG165996A1 (en) | 2010-11-29 |
JP4806187B2 (ja) | 2011-11-02 |
EP1545557A2 (en) | 2005-06-29 |
KR20050042134A (ko) | 2005-05-04 |
CN100536852C (zh) | 2009-09-09 |
ATE544453T1 (de) | 2012-02-15 |
WO2004006843A2 (en) | 2004-01-22 |
KR20110031250A (ko) | 2011-03-24 |
AU2003253888A8 (en) | 2004-02-02 |
WO2004006848A3 (en) | 2004-12-16 |
CA2492554A1 (en) | 2004-01-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR100855907B1 (ko) | 내성 HBV 균주 치료용 β-L-2'-데옥시뉴클레오시드 및병용 요법 | |
US20200276198A1 (en) | Combination therapy of an hbv capsid assembly inhibitor and an interferon | |
Lenaerts et al. | Clinical features and treatment of adenovirus infections | |
TW202104210A (zh) | Hiv蛋白酶抑制劑 | |
US20070197462A1 (en) | Treatment of EBV and KHSV infection and associated abnormal cellular proliferation | |
JP4806187B2 (ja) | B型肝炎ウイルスの治療のためのl−fmauとの併用療法 | |
US20220339281A1 (en) | Hepatitis b immunisation regimen and compositions | |
JP2022546402A (ja) | ウイルス感染症を処置するための組成物及び方法 | |
KR20220018552A (ko) | 항 간염 바이러스 의약품 제조를 위한 암렉사녹스의 용도 | |
US20130059812A1 (en) | Composition for treating chronic hepatitis b, containing clevudine and adefovir dipivoxil | |
US20160024013A1 (en) | Inhibitors of Protein Phosphatase-1 and Uses Thereof | |
TW202345859A (zh) | 用於治療b型肝炎病毒感染的方法 | |
SG185545A1 (en) | Composition for treating chronic hepatitis b, containing clevudine and adefovir dipivoxil | |
CN110623968A (zh) | 伊文思蓝在制备药物中的用途及药物组合物 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20060707 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100316 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20100609 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20100616 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100916 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20101130 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110328 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20110328 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20110525 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20110802 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20110812 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140819 Year of fee payment: 3 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |