JP2005530691A - 新規なチロインジシンとその関連プロセス、薬学的組成物および方法 - Google Patents

Abstract

新規なチロインジシンアナローグ、その関連プロセス、薬学的組成物および方法に係る発明である。該チロインジシンは抗ウイルス、抗腫瘍、抗菌および抗炎症の広範な範囲の用途に有用である。該チロインジシンの好ましき実施例としては、化合物ＩＴ−３（ＮＳＣ−７１６８０２）がある。この発明の化合物は実験的には強力な抗ウイルスおよび抗癌活動を呈した。この発明はさらにチロインジシンアナローグを含むチロインジシンを使用した腫瘍、バクテリア、ウイルスおよび抗炎症障害の治療方法を提供するものである。またこの発明はチロインジシンアナローグを含んだチロインジシンの新規な合成を提供するものである。

Description

この発明は新規なチロインジシンアナローグとその関連プロセス、薬学的組成物および方法に関するものである。該チロインジシンは抗ウイルス、抗バクテリアおよび抗炎症などの広範な範囲の使用において有用なものである。該チロインジシンの好ましき実施例としてはＩＩ−２（ＤＣＢ−３５０１、ＮＳＣ−７１７３３５）およびＩＩ−３（ＤＣＢ−３５０３、ＮＳＣ−７１６８０２またはＺＨ−１５２）と指名されているチロインジシンアナローグを含むものである。この発明の化合物は実験的に強力な抗ウイルスおよび抗癌活動を呈したものである。またこの発明はチロインジシンアナローグを含むチロインジシンを用いての腫瘍、バクテリア、ウイルスおよび炎症障害治療方法を提供するものである。さらにこの発明はチロインジシンアナローグの合成を含むチロインジシンの合成を提供するものである。

抗癌、抗ウイルス、抗バクテリアまたは抗炎症活動を有する組成物の識別における進歩にも拘わらず、広い範囲でそのような性能を呈する生物学的に活発な組成物への必要性は続いて存在している。特にそのような障害に対してある程度のレベルの活動を呈する組成物への要望がある。そのような組成物は安全であり耐性がありかつ種々の薬剤形態および投与経路に適したものでなければならない。該組成物は必要とする患者に投与した場合に腫瘍、ウイルス、バクテリアおよび炎症障害に対して活発であり、かつＡＩＤＳなどの結核併発ウイルスなどのバクテリア性感染の治療に有効であるのが望ましい。特に抗薬剤性癌の治療に有効な化合物への要求がある。

現在までのところ、上記したような要求を広汎に満たすチロインジシンの可能性は確実ではなかったし、また実際には開発されもしなかった。さらに現在までのところ、チロインジシンは合成が非常に難しいとされていた。

チロインジシンＦ、Ｇ、ＨおよびＩ（チロＦ、チロＧ、チロＨおよびチロＩ）などのチロインジシン（「チロ」とも呼ばれる）はインド原産のチロフォーラインジカ（Ｔｙｌｏｐｈｏｒａ ｉｎｄｉｃａ）から単離されたアルカロイドの分類群に属するものである。Ａｌｉ，Ｍ．；ｅｔ ａｌ．，Ｔｙｌｏｐｈｏｒａ ｉｎｄｉｃａ．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ１９８９，２８，３５１３−３５１７。チロＦとＧとはインドリジディン部分上に第三ヒドロキシ基を有している。この群の化合物は天然からは極く限られた量だけ入手できたもので、その植物からの回収量が０．００４％および０．００１％と低いので現在では更なる研究のためには入手不可能である。
Ａｌｉ，Ｍ．；ｅｔ ａｌ．，Ｔｙｌｏｐｈｏｒａ ｉｎｄｉｃａ．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ１９８９，２８，３５１３−３５１７．

チロフォーラ（インドリジディン）アルカロイドの一般的な領域での合成作業は行われてきたものの、それらの強力（特にヒドロキシル化された）な化合物の光学的に活性な形態での合成は未だ明確を欠く。Ｆａｂｅｒ，Ｌ．；ｅｔ ａｌ．，Ｓｔｅｒｅｏｓｐｅｃｉｆｉｃ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ａ ９，１１，１２，１３，１３ａ，１４−ｈｅｘａｈｙｄｒｏｄｉｂｅｎｚｏ（ｆ，ｈ）−ｐｙｒｒｏｌｏ（１，２−［ｂ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ ａｌｋａｌｏｉｄ．Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ１９７３，５６，２８８２−２８８４；７）Ｃｏｍｉｎｓ，Ｄ．Ｌ．；Ｃｈｅｒｎ，Ｘ．；Ｍｏｒｇａｎ，Ｌ．Ａ．Ｅｎａｎｔｉｏｐｕｒｅ Ｎ−ａｃｙｌｄｉｈｙｄｒｏｐｙｒｉｄｏｎｅｓ ａｓ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｓ：Ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ−ｓｅｐｔｉｃｉｎｅ ａｎｄ−ｔｙｌｏｐｈｏｒｉｎｅ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９７，６２，７４３５−７４３８。
Ｆａｂｅｒ，Ｌ．；ｅｔ ａｌ．，Ｓｔｅｒｅｏｓｐｅｃｉｆｉｃ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ａ ９，１１，１２，１３，１３ａ，１４−ｈｅｘａｈｙｄｒｏｄｉｂｅｎｚｏ（ｆ，ｈ）−ｐｙｒｒｏｌｏ（１，２−［ｂ］ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ ａｌｋａｌｏｉｄ．Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ１９７３，５６，２８８２−２８８４；７）Ｃｏｍｉｎｓ，Ｄ．Ｌ．；Ｃｈｅｒｎ，Ｘ．；Ｍｏｒｇａｎ，Ｌ．Ａ．Ｅｎａｎｔｉｏｐｕｒｅ Ｎ−ａｃｙｌｄｉｈｙｄｒｏｐｙｒｉｄｏｎｅｓ ａｓ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｓ：Ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ−ｓｅｐｔｉｃｉｎｅ ａｎｄ−ｔｙｌｏｐｈｏｒｉｎｅ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９７，６２，７４３５−７４３８．

この発明は国立衛生研究所による１以上の政府許諾基金の支持を受けたものである。であるからして政府はこの発明についてある権利を保持するものである。

発明の目的

この発明の目的は、新規でバイオ的に活性なチロインジシンアナローグを提供することにあり、該チロインジシンアナローグは広範囲の腫瘍および炎症障害に対して活性であり、かつＥｐｓｔｅｉｎ−Ｂａｒｒウイルス（ＥＢＶ）炎症またはＥＢＶ関連リンパ腫または癌の治療として活性であることを証明している。

この発明のさらなる目的は、新規でバイオ的に活性なチロインジシンアナローグを提供することにあり、該チロインジシンアナローグは抗癌および抗炎症性薬学的組成物であり、または抗ＥＢＶ感染またはＥＢＶ関連リンパ腫または癌などのＥＢＶ感染に派生的と思われる状態に使用されるものである。

この発明のさらなる目的は、安全でかつ耐性のある新規なバイオ的に活性なチロインジシンアナローグを提供することにある。

この発明のさらなる目的は、この発明の新規なバイオ的に活性なチロインジシンアナローグを含むチロインジシンの使用方法を提供することにあり、これにより腫瘍および炎症障害、ＥＢＶ感染、またはＥＢＶ関連リンパ腫や癌などのＥＢＶ感染に二次的に現れる症状を治療しようとするものである。

この発明のさらなる目的は、新規でバイオ的に活性なチロインジシンアナローグを含むチロインジシンを製造するプロセスを提供することにある。この発明のさらなる目的は、抗薬剤性癌の治療に有用な新規でバイオ的に活性なチロインジシンアナローグを提供することにある。

発明の要旨

上記の諸目的を果たすべく、この発明のチロインジシンアナローグは一般的な構造式（Ａ）

を有しており、およびそのエピマー、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物または多形体であり、

ここでＹはＯ、Ｓ、ＮＨ、ＣＨ₂であるかまたは存在せず、Ｙが存在しない場合には全てのＺがＨではないという前提で各（Ｚ）は独立にＨ、（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキル、置換アルキル、アリル、置換アリル、アルキルシリル、複素環、置換複素環であり、（Ｕ）はＨ、（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキル、置換アルキル、アリル、置換アリル、アルキルシリル、複素環、置換複素環、またはＷと一緒に環を有する窒素中に二重結合を形成するかまたはＴと一緒に環を有する窒素中に二重結合を形成し、ＴはＨであってかつＲ₅が付加されている炭素と一緒に二重結合を形成するかまたはＹ（Ｕ）に付加された炭素と一緒に二重結合を形成し、ＷはＨであるかまたはＹ（Ｕ）に付加された炭素と一緒に環を有する窒素中に二重結合を形成し、Ｒ₅はＨ、ＯＨ、＝Ｏ（付加されている炭素と一緒にカルボニル基を形成する）、カルボキシル（カルボキシレート基）、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ_X基、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_X、または−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_X基であり、ここでＲ_XはＣ₂〜Ｃ₁₅アルキル、好ましくはＣ₂〜Ｃ₈アルキルであり、Ｒ₆はＨ、ＯＨ、＝Ｏ（付加されている炭素と一緒にカルボニルを形成し）、カルボキシル（カルボキシレート基）、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ_X基、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_X、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_X基であり、ここでＲ_Xは上記した通りであり、ＢはＹ（Ｚ）またはＣと一緒に各ＢとＣとが付加されている２個のフェニル環の間に結合を形成し、ＣはＹ（Ｚ）またはＢと一緒に各ＢとＣとが付加されている２個のフェニル環の間に結合を形成し、ｍは０〜４、好ましくは１または２であり、ｎは０〜３、好ましくは１または２である。

この発明の好ましい実施例は、構造式（Ｉ）および（ＩＩ）

を有する化合物およびそのエピマー、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物または多形体であり、

ここでＲ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄およびＲ₇は独立にＨ、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、置換アルキル、アリル、置換アリル、アルキルシリル、複素環、置換複素環であり、Ｒ₅はＨ、ＯＨ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ_X基、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_X、または−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_X基であり、Ｒ_XはＣ₂〜Ｃ₁₅アルキル、好ましくはＣ₂〜Ｃ₈アルキルであり、Ｒ₆はＨ、Ｏ（カルボニル基）、カルボキシル（カルボキシレート基）、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ_X基、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_Xまたは−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_X基であり、Ｒ_Xは上記した通りであり、
ＸはＨまたはＯＲ_bであり、Ｒ_bはＨ、アルキル、置換アルキル、アリル、置換アリル、複素環または置換複素環である。

好ましくはＲ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄はＭｅでありＲ₅はＨまたはＯＨ、より好ましくはＯＨであり、Ｒ₆はＨであり、Ｒ₇はＯＨであり、ＸはＯＨである。

いずれかの実施例において好ましくは、ＸはＨ、ＯＨ、Ｏ（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキル、Ｏ−ベンジルおよびたとえばＣ₁−Ｃ₄アルキル、メチル、エチル、ｉ−プロピルまたはｔ−ブチル、特にトリメチルシリル、トリ−ｉＰｒシリル、ジメチルｔ−ブチルシリル、Ｏ−ジアリルアルキルシリル（ジフェニルｔ−ブチルなどのような）またはＯ−トリアリルシリルなどのようなＯ−トリアルキルシリルである。

この発明の好ましい化合物としては図１５に示す構造式（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）および（ＶＩ）のものが有り、それぞれＮＳＣ７１７３３４、ＮＳＣ７１２８２２、ＮＳＣ７１７３３６およびＤＣＢ−３５０１とＤＣＢ−３５０３（ＤＣＢ−３５０３はまたＮＳＣ７１６８０２またはＺＨ−１５２とも呼ばれる）と命名されている。構造式（ＶＩ）（ＤＣＢ３５０１およびＤＣＢ３５０３）は特に好ましく、ＤＣＢ３５０３（ヒドロキシル「ｄｏｗｎ」）は特に好ましい。

他にも好ましい化合物としては図ａ、表１に示すものがある。化合物ＤＣＢ３５０１と３５０３とは、国立癌研究所（ＮＣＩ）スクリーンに使用されたときに、抜きんでた抗腫瘍活性を呈した。特にこの発明の化合物は種々の薬剤抵抗性腫瘍／癌および特に多重薬剤抵抗性腫瘍に対して顕著な抗腫瘍活性を呈するものである。

またこの発明は抗腫瘍（抗癌を含む）性、抗炎症性および抗ウイルス（抗ＥＢＶ）性のチロインジシンアナローグを含む薬剤化合物、および種々の腫瘍や炎症やＥＢＶ感染やＥＢＶ関連リンパ腫や癌の治療にこれらの薬剤化合物を使用する方法、およびこの発明の新規なチロインジシンアナローグを含むチロインジシンを形成するプロセスを提供するものである。

この発明によって国立癌研究所（ＮＣＩ）人間細胞ライン腫瘍パネルにおいて用いられたとき、チロＦとチロＧはそれぞれいくつかの３３，７４４化合物およびＮＣＩのＤＴＰ（Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ Ｐｒｏｇｒａｍ）の５４細胞ラインからのデータを含むスクリーン中で試験された最も強力な抗癌剤としてランク付けされた。

このランク付けシステムはスクリーン（チロＦおよびチロＧについて５４）の細胞ラインの数において総成長抑制（ＴＧＩ）を結果するのに必要とされる平均濃度に基づいたものであった。５０％成長抑制（ＧＩ₅₀）に必要とされる濃度は両方の化合物について＜１０^-10Ｍであって、最も近い敵対物よりも少なくとも２桁低い値である。事実多くの細胞ラインについてデータは計測外であって、＜１０^-10Ｍと命名された。

ＤＴＰパネルの腫瘍細胞に対してこの発明によってチロＦとＧのＬＣ₅₀値（初期の種付けされた細胞の５０％を減少させる濃度）が使われたとき、いくつかの黒色細胞腫および肺（小および非小）癌細胞ラインについての値は他の細胞ラインについてのそれらより２桁低く、これは黒色細胞腫および／または肺癌に対してこの発明により使用されたときにおけるそれら２種の化合物の選択性を証明している。

加えて、抗癌スクリーンＣＯＭＰＡＲＥを使って実験的な抗癌活性をテストした。ＣＯＭＰＡＲＥはＰａｕｌｌ，Ｋ．Ｄ．；Ｈａｍｅｌ，Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ａｇｅｎｔｓ；Ｆｏｙｅ，Ｗ．Ｏ．，Ｅｄ．；Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ：Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，１９９４，ｐ９−４５（Ｃｈａｐｔｅｒ２）に記載されている。

ＣＯＭＰＡＲＥは全てのＮＣＩデータベースを使って組成物の抗癌活性をランク付けするプログラム（形状認識アルゴリズム）であって、この発明に採用されたときにはチロＦとチロＧの活性を決定するのに用いられた。チロＦとチロＧとは標準的な抗腫瘍化合物のそれとは異なる活性形状を呈した。つまり「ＣＯＭＰＡＲＥネガティブ」であって、全ての既知の抗腫瘍化合物（例えばアルキレイター（ａｌｋｙｌａｔｏｒｓ）、ＤＮＡ−相互作用化合物およびトポイソメラーゼ活性剤）とは顕著に異なった（ａ）化学構造と（ｂ）活動のメカニズムであることを証明した。

理論によりこの発明を限定する積もりはないが、１０^-10Ｍ未満のＧＩ₅₀レベルを有した種々の細胞ラインの細胞成長を抑制すべくこの発明により使用されたときの、この発明のチロおよびチロアナローグの効果、そのエピマーや薬学的に受容可能な塩や溶媒和物や多形体の効果が与えられれば、細胞成長で重要な役割を果たす１以上の蛋白質とそれらの化合物が相互作用することになる。

この相互作用が下流側の事象を引き起こして細胞の捕捉を起こすことはあり得る。この発明の２種の化合物により殺される黒色素細胞腫または肺癌などのような細胞ラインでは、化合物とその推定上の対象蛋白質との相互作用により起こされる事象は成長のみが捕捉される細胞のそれとは異なることが証明されるだろう。

これに代えて、この発明の適用に起因すると考えられる細胞の死を招くメカニズムは細胞成長捕捉についてのそれとは異なることが有り得る。そのような場合には、１種以上の結合蛋白質の存在の可能性がある。最高の結合親和性を有する結合蛋白質は細胞捕捉を招くこともあり、全ての癌細胞に共通である。低親和性結合蛋白質は細胞の死を招き、かつ敏感な（細胞の死について）黒色素細胞腫または肺腫細胞ライン中にのみ存在かもしれない。しかしそのような理論的な仮定はこの発明を限定するものではない。

観点を変えて、この発明はチロおよびチロアナローグ、その薬学的に受容可能な塩や溶媒和物や多形体の使用を含むものであり、生体的には対象の腫瘍細胞上の抗体または蛋白質についての「弾頭」である。そのような有用性についての適切なリガンドは蛋白質の親和性クロマトグラフィー的分離に関連して、かつ蛋白質−薬剤共役プロドラッグとして、容易に決定されるものである。

この発明の実施例はチロやチロアナローグやその薬学的に受容可能な塩や溶媒和物や多形体の多種に亙る腫瘍細胞の治療における使用を含むものであり、チロインジシンの活動のメカニズムは異なる腫瘍に対して適用されたときとは異なるものである。この発明によって使用されたチロインジシンの活動はＭＤＲ（ｇｐ１７０）およびＭＲＰ（多重薬剤抵抗性蛋白質）オーバーエクスプレッション（ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ）による影響を受けない。この発明のチロやチロエピマーやその薬学的に受容可能な塩や溶媒和物や多形体はまたヒドロキシウレアやゲムシタビンやトポ−Ｉ薬剤やトポ−ＩＩ薬剤などの他の薬剤に抵抗を呈する癌細胞に対して活性であることを証明した。

さらにこの発明のチロやチロアナローグやその薬学的に受容可能な塩や溶媒和物や多形体がＮＦ−κＢ化合物影響転写に対して強力な活性を呈すること、したがって炎症、自己免疫障害、関節炎や喘息や線維症や腎炎などのＮＦ−κＢの活動に伴う病気や症状の治療における関連有用性を有していることが分かった。

さらにこの発明のチロやチロアナローグやその薬学的に受容可能な塩や溶媒和物や多形体を他の抗癌剤または関連する病気の炎症の治療のための他の化学製品と組み合わせて使用することができることが分かった。さらにこの発明のチロやチロアナローグやその薬学的に受容可能な塩や溶媒和物や多形体をプロドラッグに使用することができ、すると溶解性、安定性、吸収性および薬物動態学的な特徴を改良できることが分かった。

またこの発明は患者におけるＥＢＶ感染またはＥＢＶ関連リンパ腫または癌の発症の可能性を予防または低減するのにも使用できる。

発明の詳細な説明

この明細書において使用する用語は以下の意味を有するものである。

用語「アルキル」とは完全に飽和された単価の炭化水素遊離基であって、炭素と水素を含み、かつ直鎖、分枝または環状である。アルキル基の例としてはメチル、エチル、ｎ−ブチル、ｎ−ヘプチル、イソプロピル、２−メチルプロピル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンチルエチルおよびシクロヘキシルなどがある。「シクロアルキル基」とはシクロプロピルやシクロブチルやシクロペンチルやシクロヘキシルなどの環状アルキル基を言う。Ｃ₁−Ｃ₆アルキル基がこの発明において好ましく用いられ、特にＣ₁〜Ｃ₃が好ましい。

用語「置換アルキル」とは上記したようなアルキルを言い、１〜６個の炭素原子を含むアルキル、好ましくは１〜３個の炭素原子を含む低級アルキル、アリル、置換アリル、アシル、ハロゲン（すなわちアルキルハロ、例えばＣＦ₃）、ヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシアルキル、アミノ、アルキルおよびジアルキルアミノ、アシルアミノ、アシルオキシ、アリルオキシ、アリルオキシアルキル、カルボキシアルキル、カルボキサミド、チオ、チオエーテル、飽和および不飽和環状炭化水素、複素環などの１種以上の官能基を言う。用語「置換シクロアルキル」とはこの発明の記載のための用語「置換アルキル」の下に含まれるものと実質的に同じく定義される。

用語「アリル」とは置換または非置換単価の芳香族遊離基を言い、単一の環（例えばフェニル）または複数の縮合環（例えばナフチル）を有している。他の例としては１以上の窒素、酸素または硫黄原子を環中に有した複素環・芳香族環基（イミダゾール、フリル、ピロリル、ピリジル、チエニル、インドリルなど）がある。用語「ヘテロアリル」とはより一般的な用語「アリル」に包含されるものである。

用語「置換アリル」とは上記したようなアリルを言うもので、低アルキル、アシル、アリル、ハロゲン、アルキルハロ（例えばＣＦ₃）、ヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシアルキル、アミノ、アルキルおよびジアルキルアミノ、アシルアミノ、アシルオキシ、アリルオキシ、アリルオキシアルキル、カルボキシアルキル、カルボキサミド、チオ、チオエーテル、飽和および不飽和環状炭化水素、複素環などの１種以上の官能基を有するものである。

「複素環」とはカルボシリック（ｃａｒｂｏｃｙｌｉｃ）環を言うもので、１以上の炭素原子が１以上の窒素、酸素または硫黄などの異種原子で置換されている。その例としては、限定はしないが、ピペリジン、ピロリジン、モルフォリン、チオモルフォリン、ピペラジン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、２−ピロリジノン、δ−ベレロラクタム、δ−ベレロラクトンおよび２−ケトピペラジンなどが挙げられる。

用語「置換複素環」とは上記したような複素環を言うものであって、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、アシル、アリル、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシアルキル、アミノ、アルキルおよびジアルキルアミノ、アシルアミノ、アシルオキシ、アリルオキシ、アリルオキシアルキル、カルボキシアルキル、カルボキサミド、チオ、チオエーテル、飽和および不飽和環状炭化水素、複素環などの１以上の官能基を含むものである。用語「置換」が使われる他の例としては、置換基がその範疇に入り、明細書および与えられた化学化合物中に置換が起きるような状況に現れる置換基の定義から集められ得るものである。

用語「エピマー」とは２以上の非対称中心のうちのひとつのみにおいて構造の異なる化合物を言うものである。

用語「１以上の置換基」とは使える結合位置の数に基づいた１から無限数に等しい多数の置換基を言う。

用語「鏡像体」とは化合物の２個の立体異性体を言うものであって、互いに非重合鏡イメージである。ここで「立体異性体」とは同じ化学構造を有するが、空間中におけるその原子または基の配列が異なる化合物を言う。用語「鏡像選択プロセス」とは反応生成物の２種の可能な鏡像体の製造を好むプロセスである。「純鏡像」または「鏡像的に純」とは鏡像体により汚染されていない純粋な立体異性体を意味するものである。「ラセミ」混合物とは２個の鏡像体の混合物である。

用語「ハロゲン基」とはＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを言う。

用語「患者」とはこの発明の化合物を使った予防処置を含む処置を施される動物、好ましくは人間、を言う。人間の患者のような特殊な動物についての特殊な感染、症状または病気などの処置については、該用語はその特殊な動物を言う。

用語「腫瘍」とは、新生物、つまりは細胞増殖により正常な組織より速く成長して新たな成長を開始させた刺激が終わった後も継続する異常組織の形成と成長とを結果する病理学的なプロセスを表わすのに使われる。腫瘍は構造的組織および正常な組織との機能的協調の部分的または全体的欠如を呈し、通常良性（良性腫瘍）または悪性（癌）である他とは異なる組織の塊を形成する。用語「癌」とは種々のタイプの悪性新生物を言い、そのほとんどは周囲の組織を侵し、数個の場所に転移し、除去した後も再発し易く、適切な処置を欠いた場合には患者の死をきたすものである。癌という用語は腫瘍という用語に含まれるものである。

用語「薬剤抵抗性癌」または「多数薬剤抵抗性癌」とは１種以上の従来の癌薬（例えばヒドロキシウレア、ゲムシタビン、Ｔｏｐｏ−Ｉ薬、Ｔｏｐｏ−ＩＩ薬など）に抵抗する癌を言うものである。この発明の化合物はそれら薬剤の存在（共投与）または非存在下に投与され得る。

用語「炎症障害」または「自己免疫障害」とはＮＦ−κＢ投与転写、移植拒否（例えば腎臓同種移植拒否、心臓同種移植拒否、移植併発血管障害）、腎炎（例えば急性糸球体腎炎、ループス腎炎、尿細管間質性腎炎）、喘息（例えばアレルギー性喘息）、呼吸障害症候群、胃炎（例えばインドメタシン原因胃炎）、リューマチ病（例えば関節炎や紅斑性狼瘡）、自己免疫病（脈管炎、糖尿病、ＨＩＶ／ＡＩＤＳ）、敗血症、血栓症、冠状動脈症（例えば血管形成またはバイパス手術および虚血症後の再狭窄）に伴う障害である。特にこの発明の化合物はリューマチ性関節炎、炎症腸症、皮膚炎（乾癬およびアトピー性皮膚炎を含む）、自己免疫障害、組織および器官拒否、アルツハイマー症、ホジキン病、ＡＩＤＳを含むウイルス感染および運動失調毛細血管拡張を含むＮＦ−κＢの活性化に伴う障害の処置に有用である。

用語「薬学的に受容可能な塩」とは１以上の組成物（特にこの発明にあってはリン酸塩が望ましい）の塩の形態であって、非経口投与のためのサリン中または患者の胃腸内の胃液中への化合物の溶解度を高めるものであり、該化合物の溶解とバイオ実用性を促進するものである。薬学的に受容可能な塩としては薬学的に受容可能な無機または有機塩基および酸から引き出されるものが含まれる。適切な塩としてはカリウム、ナトリウム、カルシウムやマグネシウムやアンモニア塩などのアルカリ土類金属その他薬学においてよく知られている酸などのアルカリ金属から引き出されるものが含まれる。ナトリウムおよびカリウム塩は特にカルボキシル酸およびこの発明の組成物を含む遊離酸リン酸塩の中和塩として望ましい。

用語「塩」はこの発明の化合物と両立できる全ての塩を言う。化合物が癌を含む腫瘍の処置を含む薬学的な表示に用いられる場合には、用語「塩」は化合物を薬剤として用いることと両立する薬学的に受容可能な塩を意味する。

用語「抑制有効濃度」または「抑制有効量」とは疑わしい腫瘍の成長または複製を実質的にまたは著しく抑制するこの発明の化合物の濃度または量を言う。

用語「治療有効量」または「治療的に有効な量」とはその投与または使用（例えば腫瘍や炎症や自己免疫障害の処置を含む）において有効なこの発明の化合物の量または濃度を言うものである。したがって用語「有効量」とは化合物の使用において好ましい結果（例えば処置された病気または症状の変化を含む）を生じるこの発明の化合物の濃度または量を言うものである。処置された病気または症状のいかんに応じて、該変化とは寛解、癌または腫瘍のサイズまたは成長の減少、または好ましい生理学的結果などいずれにしてもである。

用語「予防有効量」とは炎症障害またはＥＢＶ感染または関連症状または病気を含む自己免疫障害の可能性を予防または低減するのに予防するために有効なこの発明の化合物の濃度または量を言うものである。

用語「有効量」とは意図された結果を得るべく使用または投与された化合物または組成物の量を言う。この用語は本明細書中で異なる意味で使われている有効量をも包含する概念である。

用語「エプスタインバーウイルス（ＥＢＶ）」とはバーキットリンパ腫の細胞培養中に発見されるウイルスを言う。構造的にはＥＢＶは他のヘルペスウイルスに等しく、ヌクレオカプシド中に含まれる複ストランドＤＮＡゲノムを有しており、ウイルスグリコ蛋白質を含んだ脂質エンベロープにより囲繞されている。外被プロイテンはエンベロープとヌクレオカプシドとの間の空間を占めている。ＥＢＶは感染性単核症中の原因因子である。エプスタイン−バーウイルスもＢ−細胞増殖性病気、リンパ増殖性症状、非遺伝性単食細胞症候群の原因因子として認識されており、希進歩性単核症的症候群やＡＩＤＳ患者の口腔毛髪白板症を含む種々の病状に関連するものである。

ＥＢＶはまたバーキットリンパ腫、鼻咽頭癌、ホジキン病、ＥＢＶ併発Ｔ−細胞リンパ腫および鼻Ｔ−細胞リンパ腫などのある種の癌に併発するものである。特にある種の患者（ＡＩＤＳなどの抑圧免疫システムを有した患者および免疫抑制剤で処置された臓器移植患者）はＥＢＶ発現、特にＥＢＶ併発リンパ腫に感染し易い。

用語「共投与」または「組合せ治療」とは少なくとも２種の有効量の活性化合物が腫瘍および／または癌または自己免疫障害、症状または病状を処置するのに使われる治療を言う。共投与という用語は好ましくは患者に同時に２種の活性化合物を投与することを包含するが、個々の化合物の有効量が患者中に同時に存在するにしても、必ずしも２種の化合物が患者に同時に投与されることは必要としない。

この発明の化合物は癌や他の種々の症状および／または病状を含む腫瘍の処置に対してバイオ的／薬理学的活性を有した薬剤的組成物中に、バイオ的な活性を呈する化合物合成の中間物として、現在の化合物や他のバイオ的に活性な化合物のバイオ的活性を決定する標準として、使用できる。それらの組成物は投与（選択的には薬学的に受容可能な付加物、キャリアーまたは添加剤と組み合わせて）の概念においてここに開示した１種以上の化合物の有効量を含んでいる。

この発明はさらに癌（特に薬剤抵抗性または多薬剤抵抗性の癌）を含む腫瘍の処置に関するもので、必要とする患者に前記の化合物の有効量を投与（選択的に薬学的に受容可能な付加物、キャリアー、添加剤と組み合わせて）するものである。またこの発明は腫瘍の成長を抑制する方法に関するもので、該腫瘍とは悪性腫瘍または癌を含むもので、開示した化合物の１種以上の抑制または治療有効量に腫瘍を曝すものである。

該方法は癌を含む腫瘍の処置に治療的に使用され、または関連アナローグの活性を決定したりこの発明の化合物の１種以上に対する患者の癌の反応程度を決定する分析などの比較テストに使用される。主たる有用性は癌（特に肺癌、乳癌および前立線癌など）を含む腫瘍の処置にある。

治療的な概念ではこの発明は良性・悪性腫瘍を含む腫瘍や動物または人間患者中の癌の処置方法に関するものであり、好ましき実施例にあっては例えば多薬剤抵抗性乳癌などの薬剤抵抗性を進めた癌のそれであり、この発明の化合物の１種以上の治療的有効量または濃度を投与して、処置される動物または人間患者中の腫瘍の成長または拡散を抑制または実際には後退させるものである。

この発明の組成物で処置できる癌としては、例えば胃癌、結腸癌、直腸癌、肝臓癌、膵臓癌、肺癌、乳癌、子宮頚管癌、子宮癌、卵巣癌、前立腺癌、精巣癌、嚢癌、腎臓癌、脳／中枢神経系癌、頭および首癌、咽喉癌、ホジキン病、非ホジキン白血病、多発性骨髄腫白血病、皮膚黒色素細胞種、急性リンパ線白血病、急性骨髄性白血病、ユーイング肉腫、小細胞肺癌、絨毛癌、平滑筋組織腫瘍、ウイルムス腫瘍、神経芽細胞腫、毛状細胞白血病、口腔／咽喉癌、食道癌、咽頭癌、黒色素細胞腫、腎臓およびリンパ腫などがある。この発明の化合物は特に肺癌、乳癌、前立線癌、癌の薬剤抵抗形態、特に多重薬剤抵抗形態の処置に有用である。

該方法の好ましい実施例にあっては、癌を含む腫瘍の処置には少なくとも１種の追加的な抗腫瘍剤を共投与するのが有利である。この概念においてこの発明においては１種以上のこの発明の化合物を少なくとも１種以上の追加的な抗腫瘍剤／抗癌剤の有効量と共投与する。例えば伝統的または非伝統的な抗腫瘍または抗癌剤が共投与されるが、それらとしては例えばエトポシド（ＶＰ−１６）、シス−プラチン（シスＤＤＰ）、カルボプラチン、ロバプラチン、オルマプラチン、オキサプラチン、ヘキサメチルマラミン、ＮＬＣＱ−１、メファラン（Ｌ−ＰＡＭ）、ジヒドロキシブスルファン、シクロフォスファミド（ＣＰＭ）などのアルキル化剤、ダウノルビシン、ドキソルビシン、マイトマイシン、アドリアマイシン、カンプトテシン、ビンカアルカロイド（ビンクリスチンとビンブラスチン）、ヒドロキシウレア、ゲムシタビン、トポ−Ｉ、トポ−ＩＩ剤、ポリヌクレオチドとオリゴヌクレオチド（センスおよびアンチセンス）、タキソールその他アメリカ特許第６，５００，８５８号に開示のタキソイド抗腫瘍剤、アメリカ特許第６，５００，８１２号に開示のメタシクリン化合物、アメリカ特許第６，４８６，３２２号に開示の抗血管形成剤、アザインドール誘導体、アメリカ特許第６，４８８，９３１２号に開示の他の組成物、アメリカ特許第６，４７９，６６２号に開示のジベンゾフルオレン誘導体、テモゾロマイド、ＡＰ／ＡＭＰとそのプロドラッグ形態などがある。
アメリカ特許第６，５００，８５８号 アメリカ特許第６，５００，８１２号 アメリカ特許第６，４８６，３２２号 アメリカ特許第６，４８８，９３１２号 アメリカ特許第６，４７９，６６２号

この発明の組成物は１種以上の薬学的に受容可能なキャリアーを用いて従来の方法で製造できる。薬学的に受容可能なキャリアーとしては、それに限定されるものではないが、イオン交換剤、アルミナ、アルミナステアレート、レシチン、人間血清アルブミンなどの血清蛋白、フォスフェートなどの緩衝物質、グリシン、ソルビン酸、カリウムソルベート、飽和植物油酸の部分グリセライド混合物、水、塩、硫酸プロラミンなどの電解質、リン酸水素二ナトリウムやリン酸水素カリウムや塩化ナトリウムや亜鉛塩やコロイダルシリカやケイ酸マグネシウムやポリビニルピロリドンやセルローズ基物質やポリエチレングリコールやナトリウムカルボキシメチルセルローズやポリアクリレートやワックスやポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマーやポリエチレングリコールや羊脂などがある。

この発明の組成物は経口的、非経口的、吸入スプレー、局部的、直腸経由、経鼻的、口腔経由、経膣的、移植保存経由などにより投与できる。用語「非経口的」とは皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑液内、胸骨内、包膜内、肝臓内、病巣内および頭蓋内注射または注入技術を含むものである。組成物は経口、腹膜内または静脈内で投与されるのが望ましい。

この発明の化合物の無菌注射可能形態は水性または油性懸濁液である。これらの懸濁液は適宜な分散または湿潤剤および懸濁剤を用いて公知の技術で製造できる。無菌注射可能調整物は例えば１，３−ブタンジオール中の溶液としての非毒性非経口受容可能な希釈剤または溶媒中の無菌注射可能溶液または懸濁液である。使用できる受容可能なビヒクルおよび溶媒は水、リンゲル溶液および等浸透圧塩化ナトリウム溶液である。

加えて従来は無菌不揮発性油が溶媒または懸濁媒体として使われている。この目的のためには、いかなるブランドの不揮発性油でも使用でき、合成モノ−またはジ−グリセライドなどがそれに含まれる。オレイン酸などの脂肪酸およびそのグリセライド誘導体は注射可能なものの調整において有用である。オリーブオイルまたはカスターオイル、特にポリオキシエチレン化したもののような天然の薬学的に受容可能なオイルも同様である。これらのオイル溶液または懸濁液はまたＰｈ．Ｈｅｌｖまたは同様なアルコールなどの長鎖アルコール希釈剤または分散剤を含んでいる。

この発明の薬理組成物はいかなる経口受容可能な薬剤形態でも経口投与することができ、該薬剤形態としては、限定されないが、カプセル、タブレット、水性懸濁液または溶液などがある。経口使用のためのタブレットの場合には、通常使用されるキャリアーとしてはラクトーゼとコーンスターチとがある。マグネシウムステアレートなどの平滑剤もまた一般に添加される。カプセル形態での経口投与のための有用な希釈剤としてはラクトーゼと乾燥コーンスターチとがある。経口使用のために水性懸濁液が必要な場合には、活性成分をエマルジョンおよび懸濁剤と組み合わせる。必要ならある種の甘味、芳香または着色剤なども添加できる。

以上に代えてこの発明の薬理組成物は直腸投与のために座薬形態で投与できる。これらの調製に際しては、薬剤を適切な非刺激性添加剤と混合するが、該添加剤は室温では固体状で直腸温度では液状となるものとし、直腸中で溶けて薬剤を解放する。そのような材料としてはココアバター、蜜蝋およびポリエチレングリコールなどがある。

この発明の薬理組成物はまた局部投与することもでき、特に処置の対象が局部施与により容易にアクセスできる領域または器官の場合はそうである。例えば眼、皮膚または下腸管などがある。それぞれについて適切な局部構造が簡単に調製できる。

下腸管のための局部施与は直腸座薬構造（上記参照）や潅腸構造などがある。局部経皮パッチも使用できる。

局部施与のための薬理組成物は適当な軟膏で調製でき、該軟膏は１種以上のキャリアー中に懸濁または溶解した活性成分を含んでいる。この発明の化合物の局部投与のキャリアーとしては、限定されないが、鉱物油、液体ペトロラタム、白色ペトロラタム、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、エマルジョン化ワックスおよび水などがある。これに代えて、ローションまたはクリーム状にもでき、そこに含まれる活性成分は１種以上の薬学的に受容可能なキャリアー中に懸濁または溶解している。適切なキャリアーとしては、限定されないが、鉱物油、ソルビタンモノステアレート、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリルアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコールおよび水がある。

目への使用については、組成物は等浸透圧ｐＨ調節無菌サリン中のミクロ化懸濁液として調製でき、また好ましくは等浸透圧ｐＨ調節無菌サリン中の溶液としても調製できる。防腐剤は添加してもしなくてもよく、防腐剤としてはベンジルアルコニウムクロライドなどがある。これに代えて、目への使用については、組成物はペトロラタムなどの軟膏中に調製してもよい。

組成物は鼻エアロゾルまたは吸入により投与することもできる。その組成物は公知の手法によりサリン中の溶液として調製でき、ベンジルアルコールや他の防腐剤を使用し、バイオ有用性を高める吸収促進剤、フルオロカーボンおよび／または他の従来の溶液化剤や分散剤も使用する。

１回の投与分の薬剤形態を製造するキャリアーと組み合わせるこの発明のチロの量は処置される主体および特定の投与モードに応じて変化する。投与量は約０．５〜２００ｍｇ／体重ｋｇ／日とするのが望ましく、約１〜１００ｍｇ／体重ｋｇ／日が患者に投与されるのがより望ましい。

特定の患者への投与量と処置の仕様は種々の要因により左右されるもので、使用された特定の化合物の活性、年齢、体重、一般的な健康状態、性別、ダイエット、投与時間、排出回数、薬剤の組合せ、医者の判断処置される病気または症状の厳しさなどがそれに含まれる。

化学。この発明の新規な化合物は一般に下記の方法で調製される。図６、７に示すスキームＩ、ＩＩはチロＧ骨格構造の合成を示している。スキームＩ、図６に示すように、この合成においては、敏感な１２ａ−ＯＨ基が作業順序の終りに加えられる。Ｉ−１とＩ−２（Ｅｔ₃Ｎ−Ａｃ₂Ｏ）の縮合により既知のα，β−不飽和カルボキシル酸Ｉ−３が得られる（Ｉｈａｒａ，Ｍ．；ｅｔ ａｌ．，Ｓｔｅｒｅｏｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ Ｑｕｉｎｏｌｉｚｉｄｉｎｅｓ ａｎｄ Ｉｎｄｏｌｉｚｉｄｉｎｅｓ Ｕｓｉｎｇ Ｔｒｉａｌｋｙｌｓｉｌｙｌ Ｔｒｉｆｌｕｒｏｒｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｐｈｏｎａｔｅ：Ｔｏｔａｌ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ−Ｔｙｌｏｐｈｏｒｉｎｅ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．１９８５，１１５９−１１６０）。これはついでそのメチルエステルＩ−４に変換された。ついでＶＯＦ₃環の閉鎖によりＩ−５が高収量で得られた。
Ｉｈａｒａ，Ｍ．；ｅｔ ａｌ．，Ｓｔｅｒｅｏｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ Ｑｕｉｎｏｌｉｚｉｄｉｎｅｓ ａｎｄ Ｉｎｄｏｌｉｚｉｄｉｎｅｓ Ｕｓｉｎｇ Ｔｒｉａｌｋｙｌｓｉｌｙｌ Ｔｒｉｆｌｕｒｏｒｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｐｈｏｎａｔｅ：Ｔｏｔａｌ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ−Ｔｙｌｏｐｈｏｒｉｎｅ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．１９８５，１１５９−１１６０

得られたアルコールＩ−６のＬｉＡｌＨ₄還元に続くトシレーション（ｔｏｓｙｌａｔｉｏｎ）によりＩ−７が得られ、ついでエチル（＋）−（Ｓ）−２−ピロリジン−５−カルボキシレートナトリウム塩（アルドリッチまたは合成された）で置換されて、光学的に活性なＩ−８を得た。ＮａＢＨ₄によるＩ−８の還元によりアルコールＩ−９が得られた。これの酸化（スワーン）によりアルデヒドＩ−１０を高収量で得た。Ｉ−１０の遊離基投与還元性環化（Ｈａｙｓ，Ｄ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．，Ｏｒｇａｎｏｔｉｎ ｈｙｄｒｉｄｅ ｃａｔａｌｙｚｅｄ ｃａｒｂｏｎ−ｃａｒｂｏｎ ｂｏｎｄ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ：Ｒａｄｉｃａｌ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｒｅｄｕｃｔｉｖｅ ｃｙｃｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎａｌｓ ａｎｄ ｅｎｏｎｅｓ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９６，６１，４−５；Ｈａｙｓ，Ｄ．Ｓ．；ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａ ｎｅｗ ｃａｔａｌｙｔｉｃ ｐｒｏｃｅｓｓ：Ｂｕ₃ＳｎＨ−ｃａｔａｌｙｚｅｄ ｒｅｄｕｃｔｉｖｅ ｃｙｃｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎａｌｓ ａｎｄ ｅｎｏｎｅｓ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ１９９９，５５，８８１５−８８３２）によりアルコールＩ−１１とＩ−１２のエピマー混合（１．２：１）が得られて、これがシリカゲルクロマトグラフィーにより分離された。
Ｈａｙｓ，Ｄ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．，Ｏｒｇａｎｏｔｉｎ ｈｙｄｒｉｄｅ ｃａｔａｌｙｚｅｄ ｃａｒｂｏｎ−ｃａｒｂｏｎ ｂｏｎｄ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ：Ｒａｄｉｃａｌ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｒｅｄｕｃｔｉｖｅ ｃｙｃｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎａｌｓ ａｎｄ ｅｎｏｎｅｓ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９６，６１，４−５ Ｈａｙｓ，Ｄ．Ｓ．；ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａ ｎｅｗ ｃａｔａｌｙｔｉｃ ｐｒｏｃｅｓｓ：Ｂｕ3ＳｎＨ−ｃａｔａｌｙｚｅｄ ｒｅｄｕｃｔｉｖｅ ｃｙｃｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎａｌｓ ａｎｄ ｅｎｏｎｅｓ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ１９９９，５５，８８１５−８８３２

Ｉ−１１についてＸ線結晶構造が得られて、図示された構造を証明した。これがベンジル位置に立体化学を構成し、立体化学を大きなネガティブ光学回転｛Ｉ−１１について［α］_D ²²−１０４°｝を特徴とする天然チロインジシンのそれと結びつけている。

図６、スキームＩにおいて、化合物Ｉ−１１はスワーン酸化によりそのエピマーＩ−１２に変換された。ＮａＢＨ₄還元。

図７のスキーム７においてマルチンスルフラン脱水（Ａｒｈａｒｔ，Ｒ．Ｊ．；Ｍａｒｔｉｎ，Ｊ．Ｃ．Ｓｕｌｆｕｒａｎｅｓ．Ｖ．Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ ｓｕｌｆｕｒ（ＩＶ）ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ．Ｄｉａｌｋｏｘｙｄｉａｒｙｌｓｕｌｆｕｒａｎｅｓ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９７２，９４，４９９７−５００３）によりアルケンＩＩ−１が得られ、ついでＡｌＨ₃による還元によりアルケンＩＩ−２を得た。ＳｅＯ₂ヒドロキシル化によるチロＧの１２ａ−ＯＨ基を加えようとしてベンジルアルコールＩＩ−３ａと３ｂの単離に至り、その構造がＭＳおよびＮＭＲ分光により確認された。
Ａｒｈａｒｔ，Ｒ．Ｊ．；Ｍａｒｔｉｎ，Ｊ．Ｃ．Ｓｕｌｆｕｒａｎｅｓ．Ｖ．Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ ｓｕｌｆｕｒ（ＩＶ）ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ．Ｄｉａｌｋｏｘｙｄｉａｒｙｌｓｕｌｆｕｒａｎｅｓ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９７２，９４，４９９７−５００３

ＮＭＲは正しい１２ａ−ＯＨ化合物（チロＧ）が形成されていることを示したが、それは多分ＳｅＯ₂反応で使われる反応／単離条件下で分解をするだろう。アルコールＩＩ−３ａとＩＩ−３ｂもバックレイとラポポートの工程（Ｂｕｃｋｌｅｙ，Ｔ．Ｆ．；Ｒａｐｏｐｏｒｔ，Ｈ．α−Ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ ａｓ ｃｈｉｒａｌ ｅｄｕｃｔｓ ｆｏｒ ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃ ｐｒｏｄｕｃｔｓ．Ｃｈｉｒａｌｌｙ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｓｙｎｔｈｅｓｅｓ ｏｆ ｔｙｌｏｐｈｏｒｉｎｅ ａｎｄ ｃｒｙｐｔｏｐｌｅｕｒｉｎｅ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９８３，４８，４２２２−４２３２）により合成できる。
Ｂｕｃｋｌｅｙ，Ｔ．Ｆ．；Ｒａｐｏｐｏｒｔ，Ｈ．α−Ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ ａｓ ｃｈｉｒａｌ ｅｄｕｃｔｓ ｆｏｒ ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃ ｐｒｏｄｕｃｔｓ．Ｃｈｉｒａｌｌｙ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｓｙｎｔｈｅｓｅｓ ｏｆ ｔｙｌｏｐｈｏｒｉｎｅ ａｎｄ ｃｒｙｐｔｏｐｌｅｕｒｉｎｅ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９８３，４８，４２２２−４２３２

スキームＩ、ＩＩに示した合成ルートの有用性および（Ｘ線研究がＩ−１１について行われる前に）それが図８に示すスキームＩＩＩで作用される正しい鏡像体であることの証明がＩ−１１から（＋）−（Ｓ）−チロフォリンへ行われた。合成されて抗腫瘍（乳）活性を報告された化合物、チロインジシン程に強力なものは皆無であったが。

チロインジシンＦ、Ｇ、Ｈ、Ｉの合成。（ａ）一般的考察。それぞれのチロインジシンＦ、Ｇ、Ｈ、Ｉのための合成スキームを説明する。予備的な研究により、それらの化合物について文献に報告されたものと合致するシステムについての立体化学の解明（単結晶Ｘ線回析分析）が齎された。この発明の合成アナローグであるＮＳＣ−７１６８０２、ＮＳＣ−７１７３３５はここに示したスキームが正しい立体化学を与えると言う強力な抗腫瘍活性証明を有している。

チロＦ、Ｇは滑らかなエピマー化の対象である。ここに示されたスキーム中の不安定結合を具えた第３ＯＨ基はエピマーの熱力学的混合物を示している。チロＨ、Ｉについて観察された活性とともに中間体ＮＳＣ−７１７３３５（化合物ＩＩ−２、スキームＩＩ）により呈された活性に鑑みて、第３ＯＨ機能は抗腫瘍活性には顕著な影響を有していない可能性がある。ＯＨ基の役割は非ヒドロキシル化等価物を使った並列抗腫瘍テストにより確立できる。

（ｂ）チロインジシンＧの合成。チロインジシンＧの合成スキームは最少イオンの選択的発生に基づいており、それは含酸素反応剤によるＣ−１２ａにおける求核的攻撃についての適切な概念を与えるものである。この目的のために、アリル的−ベンジル的Ｈに対するアリル的（１２ａＨ）選択を示しかつ図９中のスキームＩＶに示すようなＩＩ−２へのＨ−１２ａのＤＤＱ酸化抽出により最少イオンＡを形成するプロセスが開発された。ＭｅＯＨの添加は１２−ＯＭｅ化合物を与え、これは１Ｄと２ＤＮＭＲ分光およびＭＳにより期待された立体化学および示された構造であることが示される。

Ｈ₂Ｏも反応剤として用いられて１２ａ−ＯＨ化合物を直接に発生する。これに代えて、Ｈ₂ＯとＴＨＦ中のｔ−ＢｕＯＫにより発生されたガスマン−乾燥−ＯＨもひとつの可能性である。これに代えるアプローチとしてはＦ脱保護を可能とするＭｅ₃ＳｉＯＨ、または中性状態下でＤＤＱまたはＣＡＮにより除去可能なベンジルアルコール（例えば、Ｒ¹＝２，６−ジメトキシベンジル−、４−メトキシベンジル−、または２−ナフチルメチルエーテル）を使用するものがある。

チロＧ構造はベンジル的機能を有しており、かつＤＤＱと反応できることが認識されている。しかし（１）選択的にＤＤＱを使ってイミニウム種を発生できること、（２）上記したような置換ベンジルエーテルのいくつかは例外的にＤＤＱに対して適応性があることを考えると、上記したような反応スキームは支持することができる。反応は（１）ＤＤＱなしまたは非過剰でイミニウムイオンを発生すること、（２）７８℃でアルコールを添加することにより注意深く行うのが望ましい。アリルアルコールは他の代替え物であり、それからくるアリルエーテルは２−プロペニルエーテルのイリジウム触媒異性体化加水分解により除去できる。それらのアルコールとそのメチルエーテルが安定で単離できる多くの前例がある。

以上に代わるシドロキシル反応スキームもこの発明の範疇に入るものである。これらはポロノフスキー反応（Ｇｒｉｅｒｓｏｎ，Ｄ．Ｔｈｅ Ｐｏｌｏｎｏｖｓｙ Ｒｅａｃｔｉｏｎ．Ｏｒｇ．Ｒｅａｃｔ．１９９０，３９，８５−２９５）を用いるものであって、図１０、スキームＶに示すようにＩＩ−２について行われる。かくしてＩＩ−２はＮ−酸化物Ｖ−１に変換され、ついでトリフルオロアセチル化されてＮ−ＯＴＦＡ中間体Ｖ−Ａとなり、これが再配列されてＯ−ＴＦＡ誘導体Ｖ−２となる。Ｋ₂ＣＯ₃−ＭｅＯＨ処理下での脱保護によりチロＧが完成される。該製品の完全な特徴付けはＭＳおよびＮＭＲ分光により行われる。これは１２ａ−ＯＲおよび１２ａ−ＯＨの配列および／または相互転換の決定を含むものである。
Ｇｒｉｅｒｓｏｎ，Ｄ．Ｔｈｅ Ｐｏｌｏｎｏｖｓｙ Ｒｅａｃｔｉｏｎ．Ｏｒｇ．Ｒｅａｃｔ．１９９０，３９，８５−２９５

（ｃ）チロインジシンＦの合成。チロＧについて開発された方法論は図１１、スキームＶＩに示すようにチロＦ合成にも適用できる。４−メトキシベンズアルデヒド（ＶＩ−１）を３，４−ジメトキシフェニル酢酸（Ｉ−４）で縮合するとカルボキシル酸ＶＩ−２が得られ、これをＬｉＡｌＨ₄で還元して得られたアルコールをトシレーションしてトシレートＶＩ−３が得られる。トシレートをエチル（＋）−（Ｓ）−２−ピロリジン−５−カルボキシレートナトリウム塩で置換すると付加物ＶＩ−４が得られる。エステル機能の還元につづくスワーン酸化によりアルデヒドＶＩ−５が得られ、該アルデヒドは還元環化して飽和アルコールＶＩ−６とＶＩ−７を得る。チロＧの合成におけるように、ＶＩ−６は一連のＰＣＣ酸化−ＮａＢＨ₄還元によりＶＩ−７に変換できる。チロＧの例と同様に、Ｘ線分析で立体化学を確認する。

マルチンスルフラン脱水反応がＶＩ−７について行われて不飽和中間体ＶＩ−８が得られ、これをＬｉＡｌＨ₄で還元してＶＩ−９、抗腫瘍活性ＮＳＣ−７１７３３５のチロＦアナローグが得られる。インドリジディンＣ−８ａにおけるＨＯ−またはＲＯ−機能の取付けがチロＧについて述べられたプロセスにより完成される。製品の完全な特徴付けはＭＳおよびＮＭＲ分光により行われ、８ａ−ＯＲおよび８ａ−ＯＨ基の配列を含むものである。

（ｄ）チロインジシンＩの合成。チロＩが遊離フェノールＯＨ機能を有する限りでは、図１２、スキームＶＩＩに示すように保護基が必要である。強力な保護基、例えばベンジルが望ましい。ＩＩ−２の水素添加を試みると、Ｐｄ−Ｃと一緒の１原子Ｈ₂下中性状態下で二重結合は減少しない。したがってベンジル基の除去に伴う問題はほとんどない。

しかし必要なら、これに代わるスキームとしてはｔ−ＢｕＰｈ₂Ｓｉまたは（ｉ−Ｐｒ）₃Ｓｉ保護を用いるが、これはＦで除去可能である。（これに代えて、いかなる非水素化分解状態下でもベンジルは離すことが可能である。）したがって３−ベンジルオキシ−４，５−ジメトキシベンズアルデヒド（ＶＩＩ−１、アルドリッチまたは調製；またはシリル保護等価物）を３，４−ジメトキシフェニル酢酸で縮合するとカルボキシル酸ＶＩＩ−２が得られる。

ＬｉＡｌＨ₄による還元、ついで得られたアルコールのトシレーションによりトシレートＶＩＩ−３が得られる。エチル（＋）−（Ｓ）−２−ピロリジン−５−カルボキシレートナトリウム塩による置換により付加物ＶＩＩ−４が得られ、これをＮａＢＨ₄還元し、中間体アルコールをスワーン酸化するとアルデヒドＶＩＩ−５が得られる。還元環化によりアルコールＶＩＩ−６ｂとＶＩＩ−７との混合物が得られる。反応の立体選択性はＮＭＲ分光およびＨＰＬＣにより検査できる。立体化学はＸ線結晶学により決定できる。ジアストマー（ｄｉａｓｔｏｍｅｒ）の分離はクロマトグラフィーにより行うことができる。ＶＩＩ−６は一連のＰＣＣ酸化−ＮａＢＨ₄還元によりＶＩＩ−７に変換される。

マルチンスルフラン脱水反応剤は特定の立体化学のアルケンＶＩＩ−８を与える。ＬｉＡｌＨ₄還元、ついでスキームＩＩ（ＩＩ−２のＩＩ−３への変換）におけるようなＳｅＯ₂−ｔ−ＢｕＯＯＨヒドロキシル反応によりベンジルアルコールＶＩＩ−１０が得られる。化合物の相対的構造は１Ｄ、２ＤＮＭＲ分光により決定される。もし適当な結晶が得られるならばＸ線結晶学でもできる。酸でＶＩＩ−１０を処理することにより脱水反応が滑らかであることが証明される。水素添加（Ｈ₂／Ｐｄ−Ｃ）（またはシリル基、Ｂｕ₄ＮＦ）により目的のチロＩが得られる。該化合物はＭＳおよびＮＭＲ分光により特徴付けできる。

（ｅ）チロインジシンＨの合成。そのアリル基への非対称的な置換パターンの故に、チロインジシンＨはフェナンスレン閉環（図１３、スキームＶＩＩＩ）についてより直接なアプローチを必要とする。ある予備的な研究の結果によると、ＶＩＩＩ−４の非ヨード化タイプへのＶＯＦ₃閉鎖は悪い異性体になることが示されている。かくして３，４−ジメトキシフェニル酢酸はイオジンモノクロライド（ＩＣＩ）を使ってオルソ−ヨード化されて２−イオド−４，５−ジメトキシフェニル酢酸ＶＩＩＩ−１を与える。

同様にして、３−ヒドロキシ−４−メトキシベンズアルデヒドのヨード化により３−ヒドロキシ−２−イオド−４−メトキシベンズアルデヒドＶＩＩＩ−２を得て、ベンジル化（ｔ−ＢｕＰｈ₂ＳｉＣｌまたは（ｉ−Ｐｒ）₃ＳｉＣｌでシリル化）され、ＶＩＩＩ−３を得る。前の例で用いた状態下でＶＩＩＩ−１をＶＩＩＩ−３で縮合すると、カルボキシル酸ＶＩＩＩ−４が得られる。ＣｕＣＮまたはＰｄ（ＰＰｈ₃）₄を使ったウルマン−タイプカップリングの閉環はフェナンスレンカルボキシル酸ＶＩＩＩ−５を生じる。ＬｉＡｌＨ₄による還元と中間体アルコールのトシレーションによりトシレートＶＩＩＩ−６が形成される。

エチル（＋）−（Ｓ）−２−ピロリジン−５−カルボキシレートナトリウム塩によりトシレートを置換すると付加物ＶＩＩＩ−７が形成される。ＮａＢＨ₄による還元と中間体アルコールのスワーン酸化によりアルデヒドＶＩＩＩ−８が形成される。チロＧ合成（スキームＩ）の結果に近く還元環化が続き、化合物ＶＩＩＩ−９とＶＩＩＩ−１０について示したような正しい立体システムを形成する。ＮＭＲ研究、もし可能ならＸ線結晶構造、を使って構造を確定する。マルチンスルフラン脱水剤を使って、つづいてＬｉＡｌＨ₄還元、保護基の除去によりチロインジシンＨが形成される。

チロインジシンアナローグの合成。（ａ）一般的考察。アナローグＩＩ−３（ＮＳＣ−７１６８０２）およびＩＩ−２（ＮＳＣ−７１７３３５）およびチロＨ、Ｉは６０パネル実験スクリーンにおいて人間から引き出された腫瘍に対して活性であるという発見に基づくと、チロインジシンは変更に対して全く許容性であり、芳香族システムのみならずインドリジディンシステムにおいてもそうである。非ヒドロキシル化インドリジデインチロＨ、ＩおよびＩＩ−２は活性であるという事実は、ＯＨ基は強力な抗腫瘍活性に絶対に必要ではないが活性を約１０⁸ＭのＧＩ₅₀を超えて増加させるのに寄与する、という観念に支持を与えるものである。ＯＨ基を欠くチロインジシンアナローグはヘミアミナル（ｈｅｍｉａｍｉｎａｌ）、チロＦ、Ｇより化学的に安定である。

チロインジシンへの２通りの変更は（１）インドリジディン環システム中での変更と（２）芳香族システムでの変更とで作られる。前者は活性に対して深い効果を有しており、それは一連の腫瘍に対する活性のスペクトルを含んでいる。後者はｌｏｇＰおよび溶解性と薬剤性質と引出しにおいて重要である関連パラメータに役立つ。

（ｂ）チロインジシンシリーズにおけるコンジナーの合成。図１４、スキームＩＸはコンジナーの一覧リストを示し、該コンジナーは鉛化合物について開発されたルートからの１または２ステップのプロセスにより簡単に形成できるものである。

チロインジシンＧのクイノリジデインアナローグの合成。ディールス−アルダールートによりそのラセミ混合物として一群のキノリジジンアルカロイドが合成された。しかしそれらはいずれも抗腫瘍活性については明らかにはスクリーンされていない。図１６、スキームＸに要約された合成が行われる。必要なエチル（Ｓ）−５−オキソ−ピペリジン−２−カルボキシレートは合成するには高価である。合成を進めるにはラセミ化合物（アルドリッチ）が使われ、もし活性化合物が現れたら、光学的に活性な材料に切り換える。

溶解６員環システムはチロインジシン合成の溶解５，６−システムとは異なった挙動をするので、違うプロセスが必要となろう。Ｘ−１を形成する初期の縮合は前の例のように進むだろうが、還元閉環は濃縮アルコールＸ−２＋エピマーの異なる異性体混合物を形成する。構造はボールマンバンド（Ｂｏｈｌｍａｎｎ ｂａｎｄｓ）と呼ばれる簡単なＩＲＣ：Ｈストレッチで認識できる（Ｗｅｎｋｅｒｔ，Ｅ．；Ｒｏｙｃｈａｕｄｈａｒｉ，Ｄ．Ｋ．Ｔｈｅ Ｃ−３ ｃｏｎｆｉｇｕｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｒｔａｉｎ ｉｎｄｏｌ ａｌｋａｌｏｉｄｓ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９５６，７８，６４１７−６４１８）。Ｘ線結晶構造が得られるだろう。またＤＤＱ脱プロトン化はＸ−４中に形成されたイミニウム種として異なる挙動をして、多分より安定な存在物を形成する。他のチロインジシンのアナローグは同様に合成できる。
Ｗｅｎｋｅｒｔ，Ｅ．；Ｒｏｙｃｈａｕｄｈａｒｉ，Ｄ．Ｋ．Ｔｈｅ Ｃ−３ ｃｏｎｆｉｇｕｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｒｔａｉｎ ｉｎｄｏｌ ａｌｋａｌｏｉｄｓ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９５６，７８，６４１７−６４１８

支援合成。（ａ）支援合成。（ａ）親和性クロマトグラフィーのためのリガンドの合成。活性薬剤と相互作用する蛋白質を単離するための実験のためには、第３ＯＨ基はそのような共役には有用でないので、ＣＨ−セファロース４Ｂに付加するための反応性アミノ基を伴った活性化合物が望ましい。チロＨ、ＩのフェノールＯＨ基は機能するだろうが、アミノ基が望ましい。化合物ＩＩ−２（ＮＳＣ−７１７３３５）のアナローグの合成を図１７、スキームＸＩに示す。

かくして３−クロロメチル−４−メトキシベンズアルデヒドＸＩ−１がナトリウムベンジレートで反応されて３−ベンジルオキシメチル−４−メトキシベンズアルデヒドＸＩ−２を形成する。これに代えてシリル保護を用いることもできる。スキームＩ、ＩＩに要約されたプロセス中でこの保護アルコールを用いて、ＸＩ−３が合成できるが、これはＩＩ−２のベンジルオキシ−（またはシリルオキシ−）メチルアナローグである。水素化分解（または他の多くの方法）（またはシリルについてはＢｕ₄ＮＦ）トシレーション、アジド置換によるベンジル脱保護および還元（ハイドロジェネエーションまたはＰｈ₃Ｐとの反応により）の手順を用いて、アミノメチルアナローグＸＩ−４が形成できる。活性化ＣＨ−セファロース（ファルマシアにより活性エステルと言われている）との反応によりセファロース薬剤共役ＸＩ−５が形成される。例えば化合物ＸＩ−４が抗腫瘍活性について検査できる。

チロＧアナローグは、ＸＩ−４のアミノ機能の保護ついではスキームＩＶまたはＶにおける化学を行うことにより形成できる。フォルミル基は、酸または塩基中で除去できかつスキームＩＶのＤＤＱ反応剤またはスキームＶのトリフレーション（ｔｒｉｆｌａｔｉｏｎ）ステップに耐えることができるので、保護基として機能できる。合成はスキームＸＩ（ＸＩ−４、ＸＩ−７）に示すように進む。これに代えてＸＩ−３からのアジド誘導体をヒドロキシル反応させることもでき、製品を還元し、ついで活性化ＣＨ−セファロースとの共役に付す。他のアナローグ（チロＨ、Ｉ）および同族体として合成された活性化合物も同様にセファロース上での不動化のために変更できる。

これに代わる手順はＤＣＢ−３５００、−３５０１およびー３５０３のテザー化（ｔｅｔｈｅｒｅｄ）アナローグに至る。アリル環上のアミノ基または選択的に保護されたＯＨはテザー（ｔｅｔｈｅｒ）を塩基分子に連結または合成するアンカーとして機能する。

（ｂ）ラジオラベリング（ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｉｎｇ）のための化合物合成。ラジオラベリングは２通りの手順のいずれでも行える。つまり（１）最終製品上での³Ｈ₂による触媒交換ラベリングと（２）ＬｉＡｌ³Ｈ₄を使ってのアミド還元、ついでチロＦ、Ｇについてのヒドロキシル反応によるものである。交換反応はチロＨ、Ｉについては選択的な手法であって、敏感なヘミアミナル機能を有していない。チロＦ、Ｇについてはより手間の掛かる２ステップ手順がより有用である。しかしいかなる化合物における再配列も可能である。深い研究から選択された活性同族体はラジオラベリングのために評価される。

以下はこの発明の図６、８に示された化学的合成の実験的記載である。

（＋）−（Ｓ）−チロフォリン（図６、８）の総合成。実験的セクション。３，４−ジメトキシフェニル酢酸（Ｉ−１）。３，４−ジメトキシフェニルアセトニトリル（１２．１ｇ、６８．０ｍｍｏｌ）および水酸化ナトリウム（７．１ｇ、１７８ｍｍｏｌ）を水（２１ｍＬ）とエタノール（１０ｍＬ）との混合物に溶解し、還流下で１０ｈ加熱した。溶液を室温に冷却し水（５０ｍＬ）で希釈しエーテル（３Ｘ４０ｍＬ）で抽出した。真空中で溶解したエーテルを水性層から除去した。希釈塩酸による水性（エーテルなし）溶液の酸性化により白色沈殿物を得た。懸濁液を４℃に冷却して沈殿物を濾過回収してＩ−１（１１．８ｇ、８８．６％）を得た。ｍｐ９７−９９℃。

２，３−ビス−（３，４−ジメトキシフェニル）アクリル酸（Ｉ−３）。ベラトラルアルデヒド（Ｉ−２）（１５．６ｇ、９４．０ｍｍｌ）、酸Ｉ−１（２０．０ｇ、１０４ｍｍｏｌ）、無水酢酸（４０ｍＬ）およびトリエチルアミン（２０ｍＬ）を１００℃で一緒に蒸気を排除して２４ｈ加熱し、溶液を室温に冷却し、水（１００ｍＬ）を添加し、混合物を１ｈ攪拌した。ついで混合物を水性炭酸カリウム（７５ｇ、２５０ｍＬ）中に注ぎ、ガム状の材料が全て溶解するまで還流した。得られた溶液を冷却して、エーテル（２ｘ５０ｍＬ）で抽出し、濃縮塩酸（ｐＨ５）で注意深く酸性化して白色沈殿を形成した。分離した固体を回収してメタノールから再結晶化してＩ−３（１１．２ｇ、６８％）を得た。¹ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）：δ７．６７（ｓ，ｌＨ），６．５６−６．６９（ｍ，６Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ），３．６５（ｓ，３Ｈ），３．６２（ｓ，３Ｈ），３．４６（ｓ，３Ｈ）．¹³ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）：δ１６８．４２，１４９．７８，１４９．１１，１４８．４２，１４８．００，１４０．２３，１２９．５０，１２８．６２，１２７．３０，１２５．１８，１２２．１０，１１２．８０，１１２．３６，１１１．３８，１１０．３６，５５．９４，５５．７８，５５．２４，５２．３５。

メチル２，３−ビスー（３，４−ジメトキシフェニル）アクリレート（Ｉ−４）。２，３−ビスー（３，４−ジメトキシフェニル）アクリル酸Ｉ−３（３．４４ｇ，１０．０ｍｍｏｌ）を無水メタノール（１５０ｍＬ）中の１．５％濃縮硫酸の溶液中に溶解し、得られた溶液を１０ｈ還流加熱した。減圧下で溶媒を蒸発させた後、クロロフォルム（１００ｍＬ）と水（５０ｍＬ）を残留オイルに添加した。有機相を分離し、水性相をクロロフォルム（２ｘ３０ｍＬ）で抽出した。一緒にされた有機相を１０％ＮａＨＣＯ₃（５０ｍＬ）、水（４０ｍＬ）、ブリンで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥した。溶媒を蒸発させて製品Ｉ−４（３．１４ｇ、９５．３％）を形成した。¹ＨＮＭＲ（２５０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）：δ７．７７（ｓ，１Ｈ），６．５２−６．６９（ｍ，６Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），３．７９（ｓ，１Ｈ），３．４６（ｓ，３Ｈ）。

メチル２，３，６，７−テトラメトキシフェナンスレン−９−カルボキシレート（Ｉ−５）。乾燥ＣＨ₂Ｃｌ₂（４００ｍＬ）中のＩ−４（７．２ｇ、２０ｍｍｏｌ）の冷却溶液にトリフルオロ酢酸（６０ｍＬ）を添加し、ついでバナジウム（Ｖ）オキシトリフルオライド（７．２ｇ、６．００ｍｍｏｌ）を添加した。５℃で２日間攪拌した後、反応混合物を１Ｍ水性クエン酸で冷却し、有機層を１Ｍ水性クエン酸（３Ｘ１２０ｍＬ）とブリンで洗浄した。有機層を乾燥し（Ｎａ₂ＳＯ₄）、ショットシリカゲルカラムで濾過して溶媒の蒸発後にエステルＩ−５を得た（６．７２ｇ、９４．３％）。¹ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ８．６５（ｓ，ＩＨ），８．４２（ｓ，１Ｈ），７．７９（ｓ，１Ｈ），７．７５（ｓ，１Ｈ），７．２６（ｓ，１Ｈ），４．１４（ｓ，３Ｈ），４．１３（ｓ，３Ｈ），４．０８（ｓ，３Ｈ），４．０４（ｓ，３Ｈ），４．０２（ｓ，３Ｈ）．¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，７５ＭＨｚ）δ１６８．３６，１５１．３８，１４９．４１，１４９．１４，１３０．１４，１２７．２９，１２５．３０，１２４．７１，１２４．３７，１２２．３４，１０９．４４，１０７．０３，１０２．８５，１０２．６５，５６．３７，５６．２６，５６．２２，５６．１５，５２．３６。

（２，３，６，７−テトラメトキシフェナスレン−９−ｙｌ）メタノール（Ｉ−６）。乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の冷却リチウムアルミニウムハイドライド懸濁液（２．７０ｇ、７０．０ｍｍｏｌ）に乾燥ＴＨＦ（２００ｍＬ）中のＩ−５（３．５６ｇ、１．００ｍｍｏｌ）の溶液を３０分間滴下添加して、窒素雰囲気下で放置した。反応混合物を室温に４ｈ温め、０℃に冷却し、その温度でエチルアセテート（１００ｍＬ）と２Ｎ塩酸（７０ｍＬ）とを添加した。沈殿物を濾過してエチルアセテートで洗浄した。濾過物を濃縮し、残留オイルをフラッシュカラムクロマトグラフィー（４：１ ＣＨ₂Ｃｌ₂−ＥｔＯＡｃ）で精練してＩ−６（６．０４ｇ、９１．６％）を得た。¹ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ７．７２（ｓ，１Ｈ），７．６６（ｓ，１Ｈ），７．４６（ｓ，１Ｈ），７．０８（ｓ，１Ｈ），５．０４（ｓ，２Ｈ），４．０９（ｓ，３Ｈ），４．０７（ｓ，３Ｈ），４．０１（ｓ，３Ｈ），３．９６（ｓ，３Ｈ）．¹³ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ１４８．９５，１４８．６３，１４８．４３，１４８．３７，１３１．８２，１２５．５７，１２４．７２，１２４．３４，１２４．２４，１２３．６１，１０８．１０，１０４．５６，１０２．９３，１０２．４６，６４．５０，５５．９３，５５．９０，５５．８２，５５．７４。

２，３，６，７−テトラメトキシフェナンスレン−９−ｙｌ）メチルｐ−トルエンスルフォネート（Ｉ−７）。ＣＨ₂Ｃｌ₂（１０ｍＬ）中の氷冷アルコールＩ−６（５７０ｍｇ、１．８６ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（２１０ｍｇ、２．０８ｍｍｏｌ）溶液にＣＨ₂Ｃｌ₂（６ｍＬ）中のｐ−トルエンスルフォニルクロライド（４００ｍｇ、２．０５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で１０ｍｉｎ攪拌した。混合物に水（２０ｍＬ）を添加し、有機層を分離して飽和ＮａＨＣＯ₃、水とブリンで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ４上で乾燥した。真空中で溶媒を除去して、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１００：２ ＣＨ₂Ｃｌ₂−ＣＨ₃ＯＨ）で精練してＩ−７（７３７ｍｇ、８８％）を得て、つぎのステップで直接に使用した。

エチル（Ｓ）−５−オキソ−１−（２，３，６，７−テトラメトキシフェナスレン−９−ｙｌメチル）ピロリジン−２−カルボキシレート（Ｉ−８）。ＤＭＥ（１０ｍＬ）中のエチル（Ｓ）−（＋）−２−ピロリドン−５−カルボキシレート（４０８ｍｇ、２．６８ｍｍｏｌ）の溶液をＤＭＥ（６ｍＬ）中のナトリウムハイドライド（６２ｍｇ，２．６ｍｍｏｌ）の攪拌懸濁液に、氷浴温度Ｎ₂下で、滴下添加した。全てのナトリウムハイドライドが反応したとき、トシレートＩ−７（１．１０ｇ、２．２８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を７０℃で７２ｈ加熱した。溶媒のほとんどが蒸発した後、２Ｎエタノールカリウムハイドロオキサイド（２０ｍＬ）中で終夜還流させて鹸化した。反応混合物を室温に冷却し、クロロフォルム（１００ｍＬ）を添加し、有機層を１ＮＨＣｌとブリンで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥した。溶液を蒸発させ、残留オイルをカラムクロマトグラフィー（６：１ ＣＨ₂Ｃｌ₂−ＥｔＯＡｃ）で精練してＩ−８（７０６ｍｇ、６６．３％）を得た。ｍｐ１８５−１８６℃，［α］_D ²²＋１１３．８°（ｃ１．０，ＣＨ₂Ｃｌ₂）．ＩＲ（ＫＢｒ）３４４７，２９３０，２８４９，１７３７，１６８７，１５１３，１４７６，１４３５，１２５８，１２０１，１１５０，１０６４，１６３６，７７４ｃｍ^-1．¹ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ７．８２（ｓ，１Ｈ），７．７９（ｓ，１Ｈ），７．６３（ｓ，１Ｈ），７．４２（ｓ，１Ｈ），７．１７（ｓ，１Ｈ），５．５３（ｄ，Ｊ＝１４．７Ｈｚ），４．４２（ｄ，Ｊ＝１４．４Ｈｚ，１Ｈ），４．１３−３．９８（ｍ，１４Ｈ），３．８２（ｄｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ），２．６８−２．５６（ｍ，１Ｈ），２．４５−２．３５（ｍ，１Ｈ），２．２０−１．９５（ｍ，２Ｈ），１．１８（ｍ，３Ｈ）．¹³ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ１７４．４６，１７１．６０，１４９．４４，１４９．０４，１４８．９５，１４８．７６，１２７．０７，１２６．８２，１２５．４６，１２４．７８，１０８．１０，１０５．２２，１０３．０４，１０２．６７，６１．３４，５８．６８，５６．３６，５６．１３，５６．０５，５５．９５，４４．７９，２９．９３，２２．８３，１４．２．ＥＳＩＭＳ Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ₂₈Ｈ₂₉ＮＯ₇（Ｍ⁺）４６７．１９．Ｆｏｕｎｄ４６７．１９３。

（Ｓ）−５−ヒドロキシメチル−１−（２，３，６，７−テトラメトキシフェナンスレン−９−ｙｌメチル）ピロリジン−２−ワン（Ｉ−９）。ＴＨＦ（１５０ｍＬ）およびエタノール（４００ｍＬ）中のＩ−８（６．７０ｇ、１４．０ｍｍｏｌ）の溶液に室温でＮａＢＨ₄（２．０６ｇ、５５．８ｍｍｏｌ）を添加し、室温で６０ｈ攪拌した後、濃縮ＨＣｌ（１ｍＬ）を添加し、混合物を１ｈ攪拌し、溶媒を蒸発させ、残留オイルをフラッシュカラムクロマトグラフィーで精練してＩ−８（５．５３ｇ、９２．７％）を得た。ｍｐ２３６−２３７℃．［α］_D ²²＋９７．６°（ｃ１．０，ＣＨ₂Ｃｌ₂）ＩＲ（ＫＢｒ）３４３４，２９３６，２８３５，１７２７，１６６２，１６２２，１５１２，１４７５，１４３５，１２５６，１１９９，１１４９，１０６４，１０３８，８４０，７７３ｃｍ^-1．¹ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ７．７７（ｓ，１Ｈ），７．７３（ｓ，１Ｈ），７．５５（ｓ，１Ｈ），７４６（ｓ，１Ｈ），７．１４（ｓ，１Ｈ），５．３９−５．３５（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，ｌＨ），５．４５−４．５５（ｄｄ，Ｊ１５Ｈｚ，１Ｈ），４．０９（ｓ，１Ｈ），３．７８（ｍ，ｌＨ），３．４９（ｍ，２Ｈ），２．７０−２．６５（ｍ，１Ｈ），２．４７−２．０８（ｍ，１Ｈ），１．９２（ｍ，２Ｈ）．¹³ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ１７５．６２，１４９．４３，１４９．０４，１４８．９６，１４８．７８，１２７．４８，１２６．３５，１２５．４１，１２４．８７，１２４．６４，１２４．４３，１０８．０５，１０４．９２，１０３．１４，１０２．６５，６２．５７，５８．６４，５６．３９，５６．１２，５６．０１，５５．９３，４４．５１，３０．７５，２１．２７．ＥＳＩＭＳ Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ₂₄Ｈ₂₇ＮＯ₆（Ｍ⁺）４２５．２．Ｆｏｕｎｄ４２５．１８４２。

（Ｓ）−５−オキソ−１−（２，３，６，７−テトラメトキシフェナスレン−９−ｙｌメチル）−ピロリジン−２−カルバルデヒド（Ｉ−１０）。ＣＨ₂Ｃｌ₂（２５ｍＬ）中のオキサリルクロライド（２．２ｍＬ、２５ｍｍｏｌ）にアルゴン下−７８℃でＣＨ₂Ｃｌ₂（１５ｍＬ）中のＤＭＳＯ（３ｍＬ、５２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５ｍｉｎ攪拌し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２２０ｍＬ）中のアルコールＩ−９（５．１ｇ、１２ｍｍｏｌ）を１０ｍｉｎ間添加した。反応混合物を３０ｍｉｎ−７８℃で攪拌し、トリエチルアミン（２４．６ｍＬ、１７６．４ｍｍｏｌ）を攪拌しながら２０ｍｉｎ添加した。混合物を室温まで１０ｍｉｎ温め、分離用ファンネル含有水（１００ｍＬ）中に注いだ。有機層を分離し、水性層をジクロロメタン（２Ｘ５０ｍＬ）で抽出した。一緒にした有機層を１％ＨＣｌ（５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ₃（６０ｍＬ）、水とブリンで洗浄し、無水ＭｇＳＯ₄上で乾燥した。溶媒を蒸発させ、残留物をカラムクロマトグラフィーで精練し、（８：１ ＣＨ₂Ｃｌ₂−ＥｔＯＡｃ）で溶離し若干黄色気味の固体状でアルデヒドＩ−１０（５．０７ｇ、９６％）を得た。ｍｐ２０８−２１０℃．［α］_D ²²＋５６．７°（ｃ１．００ＣＨＣｌ₃）ＩＲ（ＫＢｒ）３４０４，２９３７，１７２９，１６６５，１６２１，１５１２，１４７５，１４３５，１２５６，１１９９，１１４９，１０６４，１０３８，８４１，７７３ｃｍ^-1．¹ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ９．２０（ｓ，１Ｈ），７．８０（ｓ，１Ｈ），７．７５（ｓ，１Ｈ），７．６０（ｓ，１Ｈ），７．３８（ｓ，１Ｈ），７．１５（ｓ，１Ｈ），５．３４−４．２９（ｄ，Ｊ１５Ｈｚ，１Ｈ），４．７３−４．６８（ｄ，Ｊ１５Ｈｚ，１Ｈ），４．１１（ｓ，３Ｈ），４．０９（ｓ，３Ｈ），４．０３（ｓ，３Ｈ），４．０２（ｓ，３Ｈ），３．８６−３．８０（ｍ，１Ｈ），２．５６−２．３８（ｍ，２Ｈ），２．１８−１．８９（ｍ，２Ｈ）．¹³ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ１９８．３７，１７４．４２，１４９．５５，１４９．０７，１４８．９８，１４８．７９，１２７．１０，１２６．６４，１２５．３２，１２４．８８，１２４．７７，１２４．４４，１０８．１４，１０４．９５，１０３．１２，１０２．５９，６４．５０，５６．３４，５６．０１，５５．９３，４５．３２，２９．６８，１９．２３．ＥＳＩＭＳ Ｃａｌｃｄ ｆｏｒＣ₂₄Ｈ₂₇ＮＯ₆（Ｍ⁺）４２５．２．Ｆｏｕｎｄｍ／ｚ４２５．１８４２。

（８ｂＲ，１２ａＳ，１３Ｒ，１３ａＳ）−１３−ヒドロキシ−２，３，６，７−テトラメトキシ−８ｂ，１１，１２，１２ａ，１３，１３ａ−ヘキサヒドロ−９Ｈ−９ａ−アザ−シクロペンタ［ｂ］トリフェニレン−１０−ワン（Ｉ−１１）および（８ｂＲ，１２ａＳ，１３Ｓ，１３ａＳ）−１３−ヒドロキシ−２，３，６，７−テトラメトキシ−８ｂ，１１，１２，１２ａ，１３，１３ａ−ヘキサヒドロ−９Ｈ−９ａ−アザ−シクロペンタ［ｂ］トリフェニレン−１０−ワン（Ｉ−１２）。１００ｍＬシールシュレンク管中の乾燥ベンゼン（１５ｍＬ）中のＩ−１０（２．１２ｇ、５．００ｍｍｏｌ）溶液にベンゼン（２．０ｍＬ）中の（Ｂｕ₃Ｓｎ）₂Ｏ（３８μＬ、０．７５ｍｍｏｌ）、ＰｈＳｉＨ₃（３１．０μＬ、２．５０ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（５８５μＬ、２．００ｍｍｏｌ）およびＡＩＢＮ（９０ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）を添加した。容器をシールし、振って、８０−８５℃のオイル浴中に配置した。１２ｈ後ＴＬＣ分析により全ての出発物質が消費されたこと示した。混合物を室温に冷却し、攪拌しながら２ｈに亙りテトラブチルアンモニウムフルオライド（ＴＨＦ中の１．０Ｍ溶液の３０．０ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）を添加し、その終りに１５ｍＬの２ＮＨＣｌを添加した。反応混合物をＣＨ₂Ｃｌ₂（３Ｘ５０ｍＬ）で抽出し、一緒にした有機抽出物を乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、濾過し濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（３：１：０．０１ ＣＨ₂Ｈ₂−ＥｔＯＡｃ−ＣＨ₃ＯＨで溶離）で精練して８２７ｍｇ（６８．８％）の化合物Ｉ−１１を得た。［α］_D ²²＋７８．３°（ｃ０．４８，ＣＨＣｌ₃）；ＩＲ（ＫＢｒ）３３９７，２９３７，１６６０，１６０７，１５１０，１４６４，１４０６，１２６７，１２４９，１２０２，１４０６，１２６７，１２４９，１２０２，１０１４，７７０ｃｍ^-1．¹ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）：δ７．１９（ｓ，１Ｈ），７．１１（ｓ，１Ｈ），７．０９（ｓ，１Ｈ），６．８２（ｓ，１Ｈ），４．８６（ｄ．Ｊ＝１４Ｈｚ，１Ｈ），３．９８（ｓ，３Ｈ），３．９５（ｓ，３Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），３．９２（ｓ，３Ｈ），３．４１（ｄｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，Ｊ＝１６．２Ｈｚ，１Ｈ），３．３０（ｔ，１Ｈ），３．１２（ｄ，Ｊ＝１４．１Ｈｚ，１Ｈ），３．０３（ｔ，１Ｈ），２．６９（ｄｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ），２．４４−２．２１（ｍ，３Ｈ），１．６９−１．５９（ｍ，１Ｈ）．¹³ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）：δ１７３．５０，１４８．８１，１４８．４７，１４７．７６，１４７．６７，１２７．１５，１２６．４７，１２６．３０，１２６．０１，１１２．７０，１０８．９５，１０７．２６，１０７．２７，７１．８５，６１．５１，５６．３０，５６．１９，５６．１１，５６．０８，４８．２０，３９．８４，３７．３９，３０．１５，２２．４９．ＨＲＭＳ Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ₂₄Ｈ₂₇ＮＯ₆（Ｍ⁺）４２５．２．Ｆｏｕｎｄ４２５．１８４２．ＣｏｍｐｏｕｎｄＩ−１２：（３０％）．［α］_D ²²−１０４．２°（ｃ１．０，ＣＨＣｌ₃）．ＩＲ（ＫＢｒ）３４３４，２９３４，１６８１，１６０６，１５０９，１４６２，１４０７，１２６８，１２０４，１１１９，１０３９，１０２４，１００７，８５８，７７８ｃｍ^-1．¹ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ７．３０（ｓ，１Ｈ），７．２０（ｓ，１Ｈ），７．１３（ｓ，１Ｈ），６．７５（ｓ，１Ｈ），５．０２−４．９７（ｄ，Ｊ＝１５Ｈｚ，１Ｈ），３．９８（ｓ，３Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），３．９１（ｓ，３Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），３．７８（ｍ，２Ｈ），３．２４（ｔ，１Ｈ），３．１１−３．１７（ｍ，１Ｈ），２．９８−３．００（ｍ，１Ｈ），２．３３（ｔ，２Ｈ），２．０５−２．１１（ｍ，２Ｈ）．¹³ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ１７４．２０，１４８．８４，１４８．７９，１４８．６６，１４８．０７，１２８．４７，１２７．５７，１２７．０６，１２６．００，１１０．９８，１０８．５８，１０７．３３，１０６．６３，７３．３１，６１．５７，５６．２９，５６．２６，５６．０７，４４．６０，３９．８３，３４．５０，３０．２８，１８．５４．ＨＲＭＳ Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ₂₄Ｈ₂₇ＮＯ₆（Ｍ⁺）４２５．２．Ｆｏｕｎｄ４２５．１８４２。

（８ｂＲ，１２ａＳ，１３Ｒ，１３ａＳ）−２，３，６，７−テトラメトキシ−１０−オキソ−８ｂ，９，１０，１１，１２，１２ａ，１３，１３ａ−オクタヒドロ−９ａ−アザ−シクロペンタ［ｂ］トリフェニレン−１３−ｙｌメタンスルフォネート（ＩＩＩ−１）。ＣＨ₂Ｃｌ₂（３５ｍＬ）中のアルコールＩ−１１（１．０６ｇ、２．５０ｍｍｏｌ）氷冷攪拌溶液とトリエチルアミン（９５０ｍｇ、９ｍｍｏｌ）にＣＨ₂Ｃｌ₂（３ｍＬ）中のメタンスルフォニルクロライド（８００ｍｇ、６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１０ｍｉｎ攪拌し、混合物に水（２０ｍＬ）を添加し、有機層を分離して、飽和ＮａＨＣＯ₃、水、ブリンで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ₂ＳＯ₄）、溶媒を蒸発させて得た残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１００：２ ＣＨ₂Ｃｌ₂−ＣＨ₃ＯＨ）で精練して１１（１．２５ｇ、１００％）を得た。ｍｐ２２２−２２４℃．［α］_D ²²＋９８．３°（ｃ０．４８，ＣＨＣｌ₃）．ＩＲ（ＫＢｒ）：３４３８，２９３５，１６８８，１６０７，１５６６，１５１１，１４６４，１４１０，１３４８，１２３９，１２０４，１１７４，１１１８，９５７，８３２，７７０，６９９ｃｍ^-1．¹ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ７．１６（ｓ，１Ｈ），７．１５（ｓ，１Ｈ），７．０４（ｓ，１Ｈ），６．８２（ｓ，１Ｈ），５．２８（ｓ，ｌＨ），４．８６（ｄ，Ｊ＝１８Ｈｚ，１Ｈ），３．９８（ｓ，３Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ），３．２９（ｓ，３Ｈ），３．６４（ｑ，１Ｈ），３．３６（ｂｒ，１Ｈ），３．１２（ｄｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，Ｊ＝１８Ｈｚ，１Ｈ），２．９５（ｄｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ，１Ｈ），２．３３（ｍ，３Ｈ），１．９８（ｍ，１Ｈ）．¹³ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ１７４．１５，１４９．６９，１４９．２４，１４８．５０，１４８．０２，１２７．１３，１２６．４０，１２６．０６，１２５．４６，１１３．５６，１０９．１７，１０７．６３，８２．１８，６１．１６，５６．５７，５６．２４，４６．４７，３９．９６，３８．４５，３８．０５，３０．１２，２２．３４．ＥＳＩＭＳ Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ₂₄Ｈ₂₇ＮＯ₆（Ｍ⁺）５０３．１６，Ｆｏｕｎｄ５０３．１６３。

２，３，６，７−テトラメトキシ−８ｂ−，１１，１２，１２ａ，テトラヒドロ−９Ｈ−９ａ−アザ−シクロペンタ［ｂ］トリフェニレン−１０−ワン（ＩＩＩ−２）。ＤＭＳＯ（５ｍＬ）中のメタンスルフォネートＩＩＩ−１（３５０ｍｇ、０．８，ｍｍｏｌ）とカリウムｔｅｒｔ−ブトオキサイド（１１６ｍｇ，１．３ｍｍｏｌ）の溶液を室温で６ｈ攪拌し、水（５ｍＬ）とエチルアセテート（２０ｍＬ）を添加し、有機層を分離し、水性層をエチルアセテート（３Ｘ２０ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を水とブリンで洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥した。溶媒を蒸発させて固体残留物を得て、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精練してＩＩＩ−２を得た（２３６ｍｇ、８２．６％）。ｍｐ２５２−２５４℃，［α］_D ²²＋１０８°（ｃ０．２５，ＣＨＣｌ₃）．ＩＲ（ＫＢｒ）：３４３８，２９３３，２８３７，１６８０，１６２０，１５１４，１４６８，１４２４，１２４９，１２１１，１１４８，１０４４，７７４，６９９ｃｍ^-1．¹ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ７．８２（ｓ，１Ｈ），７．８１（ｓ，１Ｈ），７．２７（ｓ，１Ｈ），７．１６（ｓ，１Ｈ），５．３２（ｄ，Ｊ＝１６．２Ｈｚ，１Ｈ），４．５０（ｄ，Ｊ＝１６．５Ｈｚ，１Ｈ），４．１１（ｓ，３Ｈ），４．１０（ｓ，３Ｈ），４．０４（ｓ，３Ｈ），４．０３（ｓ，３Ｈ），３．９３（ｍ，１Ｈ），３．４７（ｄｄ，Ｊ＝６Ｈｚ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ，１Ｈ），３．８６（ｔ，１Ｈ），２．６２−２．５１（ｍ，３Ｈ），２．２０５−１．９９（ｍ，１Ｈ）．¹³ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ１７３．９６，１４８．８３，１４８．６３，１２４．８８，１２４．３０，１２３．４３，１２３．３６，１２２．７１，１０３．６６，１０３．２８，１０３．２３，１０２．６８，５６．０６，５５．９０，５３．２２，４１．１３，３３．５６，３０．２４，２５．３７．ＥＳＩＭＳ Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ₂₄Ｈ₂₅ＮＯ₅（Ｍ⁺）４０７．１７，Ｆｏｕｎｄ４０７．１７３。

（＋）−（Ｓ）−チロフォリン。ＴＨＦ（５ｍＬ）中のリチウムアルミニウムハイドライド（５０ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に氷浴温度でＩＩＩ−２（１１０ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、反応混合物を室温に温め、４ｈ攪拌した。氷水、ＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２０ｍＬ）および飽和ＮＨ₄Ｃｌ（０．５ｍＬ）を添加し、混合物を１．５ｈ攪拌し、セライトのパッドで濾過して、減圧下で溶媒を除去し、残留物をＡｌ₂Ｏ₃（１００：０−１．５ ＣＨ₂Ｃｌ₂−ＣＨ₃ＯＨ）上でクロマトグラフィーして、（＋）−（Ｓ）−チロフォリン（９４ｍｇ、８８．６％）を得た。ｍｐ（２３０℃ｄｅｃ）ｍｅｌｔ２６０−２６１℃；［α］_D ²²＋４９°（ｃ０．４７５，ＣＨＣｌ₃）．ＩＲ（ＫＢｒ）：３４３５，２９６０，１６１９，１５１３，１４７０，１４２５，１２４７，１２１１，１１９８，１１５１．０ｃｍ^-1．¹ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ７．８２（ｓ，２Ｈ），７．３１（ｓ，１Ｈ），７．１５（ｓ，１Ｈ），４．６３（ｄ，Ｊ＝１４．４Ｈｚ，１Ｈ），４．１２（ｓ，６Ｈ），４．０６（ｓ，６Ｈ），３．６８（ｄ，Ｊ＝１４．４Ｈｚ，１Ｈ），３．４９（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），３．３９（ｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ，１Ｈ），２．９４（ｔ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，１Ｈ），２．４７−２．５３（ｍ，２Ｈ），２．２２−２．３０（ｍ，１Ｈ），１．９５−２．０９（ｍ，２Ｈ），１．７６−１．８５（ｍ，１Ｈ）．¹³ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ１４８．５１，１４８．３１，１４８．２３，１２６．１２，１２５．６５，１２４．１６，１２３．４９，１２３．２９，１０３．８３，１０３．２８，１０３．１６，１０２．９７，６０．２１，５６．０３，５５．９２，５５．８７，５５．１２，５３．９４，３３．１７，３１．２８，２１．６８．ＥＳＩＭＳ Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ₂₄Ｈ₂₇ＮＯ₄（Ｍ⁺）３９３．１９，ｆｏｕｎｄ３９３．１９４。

以下この発明の図７に示す化学合成の実験例を記載する。（Ｓ）−２，３，６，７−テトラメトキシ−８ｂ，１２，１２ａ−テトラヒドロ−９Ｈ，９ａ−アザ−シクロペンタ［ｂ］−トリフェニレン−１０−ワン（ＩＩ−１）。ＣＨ₂Ｃｌ₂（５ｍＬ）中のマルチンスルフラン脱水反応剤、ビス［α，α−ビス（トリフルオロメチル）ベンゼンメタノラート］−ジフェニルスルファー（８０６ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）をＣＨ₂Ｃｌ₂（６ｍＬ）中の化合物Ｉ−１２（２５５ｍｇ，０．６ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で添加した。反応混合物を室温に温め、６ｈ攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（６：２：０．２ ＣＨ₂Ｃｌ₂−ＥｔＯＡｃ−ＣＨ₃ＯＨで溶離）で精練して製品ＩＩ−１（９９ｍｇ、８１．６％）を固体状で得た。ｍｐ１２３−１２５℃；［α］_D ²²＋１０８°（ｃ０．２７，ＣＨＣｌ₃）．ＩＲ（ＫＢｒ）３４３５，２９３５，２８３３，１６８２，１６０６，１５１０，１４６３，１４０７，１２６８，１２０５，１１１９，１０４０，８５８，７７８ｃｍ^-1．¹ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ７．３１（ｓ，１Ｈ），７．１８（ｓ，１Ｈ），７．１２（ｓ，１Ｈ），６．９３（ｓ，１Ｈ），５．８４（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），４．９１（ｄ，Ｊ＝１４．４Ｈｚ，１Ｈ），４．３４（ｔ，１Ｈ），３．９９（ｓ，６Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ），３．５２（ｂｒ，１Ｈ），３．１２（ｄｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，Ｊ＝１４．８Ｈｚ，１Ｈ），２．５７−２．２９（ｍ，３Ｈ），１．６２−１．５５（ｍ，１Ｈ）．¹³ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ１７２．２８，１４９．３６，１４８．２３，１４７．５５，１３６．８０，１２９．２５，１２８．５０，１２６．５７，１２６．４５，１２２．８４，１０７．９５，１０７．２６，１０６．７３，１０６．３３，５６．４１，５６．３０，５６．１９，５６．０６，５４．９９，３８．５０，３６．２７，３１．５４，２５．８１．ＨＲＭＳ Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ₂₄Ｈ₂₇ＮＯ₅（Ｍ⁺）４０７．１７；Ｆｏｕｎｄ４０７．１７３．Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ₂₄Ｈ₂₅ＮＯ₅−Ｈ₂Ｏ：Ｃ，６７．７５，Ｈ，６．４０，Ｎ，３．２９．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，６７．５５，Ｈ，６．０５，Ｎ，３．３０。

（Ｓ）−２，３，６，７−テトラメトキシ−８ｂ，９，１０，１１，１２，１２ａ−ヘキサヒドロ−９ａ−アザ−シクロペンタ［ｂ］−トリフェニレン（ＩＩ−２）。ＴＨＦ（６ｍＬ）中の化合物ＩＩ−１（１６３ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で新たに用意されたアラン（ＴＨＦ中の０．２５Ｍ溶液のＡｌＨ₃、５．２ｍＬ、１．３ｍｍｏｌ）をゆっくり添加し、反応混合物を−２０〜−１５℃に２．５ｈ攪拌しながら温め、反応混合物を再び−５０℃に冷却し、５：９５−水−ＴＨＦ（３．５ｍＬ）で冷却した。溶媒を減圧下で除去し、残留物を０．０１ＮＮａＯＨ（４．５ｍＬ）とＣＨ₂Ｃｌ₂（２５ｍＬ）との間で仕切りした。水性層をＣＨ₂Ｃｌ₂（３Ｘ１０ｍＬ）で抽出し、一緒にした抽出物をブリン（１０ｍＬ）で洗浄し、（Ｎａ₂ＳＯ₄）上で乾燥し、減圧下で濃縮した。製品をシリカゲル（１００：３：０．０５ ＣＨ₂Ｃｌ₂−ＣＨ₃ＯＨ−ＮＨ₄ＯＨで溶離）上でフラッシュクロマトグラフィーで精練して化合物ＩＩ−２（１１９ｍｇ、７５．５％）を得た。

（１２Ｓ，１３Ｓ）−２，３，６，７−テトラメトキシ−９，１０，１１，１２，１２ａ，１３−ヘキサヒドロ−９ａ−アザ−シクロペンタ［ｂ］トリフェニレン−１３−ｏｌおよびチロインジシンＧ。二酸化セレン（８４ｍｇ、０．７７６ｍｍｏｌ）を氷浴温度に保たれたジオキサン（１ｍＬ）と蟻酸（９９％純度、２ｍＬ）中の化合物ＩＩ−２（１５０ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を室温に温めた後、２．５ｈ攪拌し、混合物を水（５ｍＬ）とＣＨ₂Ｃｌ₂（２５ｍＬ）で溶離し、セライトのパッドに通して非溶解材料を濾過し、濾過溶液をＣＨ₂Ｃｌ₂（２Ｘ２０ｍＬ）で抽出し、有機層を飽和Ｎａ₂Ｓ₂Ｏ₃溶液とＮａＣｌで洗浄し、無水ＭｇＳＯ₄上で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラム（１００：３ ＣＨ₂Ｃｌ₂−ＣＨ₃ＯＨで溶離）上でクロマトグラフィーしてＩＩ−３ａとＩＩ−３ｂとの混合物（１０２ｍｇ、６０％）と５０ｍｇ（３０％）のＩＩ−４（チロインジシンＧ）を得た。両方ともそのＮＭＲスペクトルの真材料との比較により識別した。

バイオ的な研究。化合物ＩＩ−３（ＮＳＣ−７１６８０２）を実験的な細胞培養研究でテストした。ＮＣＩデータを実質的にＳＫ−ＭＥＬ−２（ＧＩ₅₀＝０．１６μＭ）とＳＫ−ＭＥＬ−２８（ＧＩ₅₀＝０．７μＭ）細胞ラインで確認した。加えて、強力な活性が２通りの追加的な細胞ラインで示された。ＫＢ（頭および首癌）（ＧＩ₅₀＝０．２μＭ）およびＨｅｐＧ２（肝臓癌）（ＧＩ₅₀＝０．０６μＭ）。

交叉抵抗（ｃｒｏｓｓ−ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ）研究やクロノジェニック（ｃｌｏｎｏｇｅｎｉｃ）分析および細胞サイクル発展への効果を含むいくつかの研究が化合物ＩＩ−３（ＮＳＣ−７１６８０２）を使って細胞培養中で行われた。毒性および実験的な抗腫瘍研究がマウスにおいて化合物ＩＩ−３（ＮＳＣ−７１６８０２）を使って行われた。２種のチロインジシンアナローグＩＩ−３とＩＩ−２の成長抑止比較研究が細胞培養中で行われた。

図１８、表１Ａ、１Ｂに示すように、種々の抗腫瘍薬剤に抵抗するいくつかのＫＢおよびＨｅｐＧ２細胞ラインが開発された。データによると、ＶＰ−１６（エトポサイド）、ＶＣＲ（ビンクリスチン）、ＣＰＴ（カンプトセシン）およびＤＯＸ（ドキソルビシン）に抵抗性になった細胞はＩＩ−３（図中ＺＨ−１５２とされている）に敏感である。さらにこれらから、ＩＩ−３および他のチロインジシンの特有な行動の概念が支持され、ＩＩ−３（および他のチロインジシン）の行動のモードは抗癌薬剤のそれとは異なるという概念が支持される。

図１９に示すように、ＫＢとＨｅｐＧ２細胞がクロノジェニック効率を決定するのに利用された。細胞ラインは図２に示す濃度でＩＩ−３に２４時間曝露された。ついでそれらは薬剤なしで成長した。８代後、コロニーは染色されて計数された。ＨｅｐＧ２細胞はＫＢ細胞よりＩＩ−３に敏感であった。

図２０に示すように、ＫＢとＨｅｐＧ２細胞ラインを使って、化合物ＩＩ−３（１Ｘ５日、ｉｐ）は細胞成長懸濁液を呈した。成長抑制はＳ−相発展の原因となる目標における抑制に起因するものであった。該相はＤＮＡ複製に密な関係がある。ＨｅｐＧ２細胞のＫＢ細胞に対する優勢的な殺戮はこれらの２種の細胞ラインに異なるバイオ化学的決定因子が関与していることを示唆している。

図２１に示すように、Ｃ５７Ｂｌ／６マウスを使って、化合物ＩＩ−３に対する急性毒性は管理可能でありかつ１０日当り１０ｍｇ／ｋｇの投与量を抗腫瘍活性に使用できることおよびさらなる研究が確立された。

図２２に示すように、腫瘍罹病（ＨｅｐＧ２）マウスに１日当り１０ｍｇ／ｋｇｉｐで５日間化合物ＩＩ−３が投与された。体重損失（図５Ａに示す）と腫瘍成長（図５Ｂに示す）とがモニターされた。顕著な体重損失なしに深い抗腫瘍効果が呈された。

培養中でのＨｅｐＧ２とＫＢ細胞成長に対する化合物ＩＩ−２の効力は化合物ＩＩ−３の３〜５倍以上であることが発見された。これはＯＨ基が強力な抗腫瘍活性には必要でないことを示している。ＯＨ基の不必要性は化学的合成および化学的安定性のためには強力に有利である。

実験室的研究。（ａ）人間腫瘍モデルに罹病したヌードマウス中における抗腫瘍活性。人間の黒色素細胞腫細胞ラインＳＫ−ＭＥＬ−２およびＳＫ−ＭＥＬ−２８（１０⁶細胞）を年齢６週間のＮＣｒヌードマウス（Ｔａｃｏｎｉｃ、Ｇｅｒｍａｎｔｏｗｎ、ＮＹ）の横腹中に皮下移植（ｓ．ｃ．）した。公式長さ−幅²／２により決定されたように腫瘍がほぼ１００ｍｇの量に達したとき、薬剤処置実験を始めた。チロＦ、Ｇが毒性テストで決められた濃度で少なくとも５マウスのグループに投与された。５日間に亙って毎日異なる量の薬剤が１回投与された。

腫瘍重量を２日目毎に計算した。腫瘍重量が２ｇまたはマウスの体重の１０％を超えるとマウスを頚部転移で安楽死させた。腫瘍が抑制された場合には、腫瘍罹病マウスを４５日間観察した。最初は各投与量間で５倍の差異でもって３回腹膜内（ｉ．ｐ．）投与が行われた。投与量は抗腫瘍活性および薬剤による致死に応じて調節（上下）した。ＬＤ₁₀が使用された最大の投与量であった。一旦薬剤ｉ．ｐ．の抗腫瘍活性が確立されたら、経口投与（ｐ．ｏ．）に抗腫瘍効果が与えられ経口バイオ有用性が験された。ＳＫ−ＭＥＬ−２（敏感）とＳＫ−ＭＥＬ−２８（抵抗性）が使われ、これら２種の黒色素細胞腫細胞ラインはチロＦ、Ｇに対して異なる反応を有している。

（ｂ）毒性。ヌードマウス中のチロＦ、Ｇの抗腫瘍活性を評価する過程において、体重損失（２日毎）および血液異常（４日毎）により明らかになった毒性もモニターされた。血液をテストするときには、毛細管を使って後眼窩集網叢からヘパリン化血液のサンプルを２０μＬ採取した。これを２００μＬのノーマルサリンに添加しＢＣ９１００血液学分析器（Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｉｍｍｕｎｅ Ｓｙｓｔｅｍ、Ａｌｌｅｎｔｏｗｎ、ＰＡ）上で分析した。これによりマウス中の白血球、赤血球、血小板、ヘマトクリット、ヘモグロビン、平均小体体積、平均小体ヘモグロビンおよび血小板体積などがモニターできた。説明不能な毒性によるマウスの死亡があるときには、腸や肝臓や腎臓や肺や心臓や脳や骨髄などの組織を１０％フォルマリン中で固定した。パラフィン片を動物病理学で検査した。

（ｃ）問題となっている化合物の新陳代謝と薬力学的研究。チロＦ、Ｇの新陳代謝と薬力学が腫瘍罹病ヌードマウスにおいて研究された。放射性のチロＦ、Ｇをｉ．ｐ．または経口で投与した。薬剤注入後ヘパリン化血液（２００μＬ）を後眼窩集網叢から５、１５、３０ｍｉｎ１、２、４、８および２４ｈ採取した。マイクロフュージ（ｍｉｃｒｏｆｕｇｅ）管内での濃縮後、プラズマ上澄みを清浄な管に移した。１００％メタノールの２部を各プラズマサンプルに添加し、氷上で１５ｍｉｎ培養した。マイクロフュージ内で５ｍｉｎ間ほぼ１５０００ｒｐｍで遠心処理した後、上澄みを清浄な管に移し、上記のＨＰＬＣ分析まで７０□Ｃで貯蔵した。

直列パッカードラジオマティックフローシンチレーション分析器（Ｐａｃｋａｒｄ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ Ｃｏ．、Ｄｏｗｎｅｒｓ Ｇｒｏｖｅ、ＩＬ）を用いて各サンプルからの放射性をモニターした。加えて、同様な処置の後で、腫瘍および主たる器官（肝臓、腸、肺、腎臓、脳および骨髄など）中のチロ代謝産物を４、８、１６、２４ｈモニターした。ラジオラベルされたチロ代謝産物の構造的識別を分析した。曲線下のＴ_1/2領域や隙間や分散体積などのチロＦ、Ｇの薬力学的パラメータを決定するのにＷＩＮＬＩＮソフトウエアパッケージを用いた。

（ｄ）処置プロトコールの最適化。チロＦ、Ｇの薬力学および異なるルートでの投与と異なる処置スケジュールを用いた抗腫瘍活性の結果に基づいて、投与量と化合物のスケジュールを変更して、最低の毒性で最大の抗腫瘍活性を得た。

以下さらなる実験例を挙げる。

実験例１。材料と方法。材料。細胞培養媒体、ウシ胎児血清（ＦＢＳ）をＬｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから購入した。ＦｕＧＥＮＥ６トランスフェクション反応剤はＲｏｃｈｅから。標準化学治療剤、ＶＰ−１６、タキソール、ヒドロキシウレア、ノコダゾール、ゲムシタビン、カンプトセシン他、フォルスコリン、１２−Ｏ−テトラデカノイルフォルボル１３−アセテート（ＴＰＡ）、ＴＮＦαをシグマ−アルドリッチ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）およびカルビオケム（Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）から購入した。

プラスミド。ホタルルシフェラーゼレポーターベクトルｐＭｙｃ−ＴＡ−ｌｕｃ、ｐＥ２Ｆ−ＴＡ−ｌｕｃ、ｐＡＰ１−ｌｕｃ、ｐＣＲＥをクロンテック、Ｍｅｒｃｕｒｙ^TMパスウェイプロファイリングシステムから購入した。ｐＢＩＩＸ−ｌｕｃはＧｈｏｓｈ博士（エール大学）から提供された。レニラルシフェラーゼレポーターベクトルｐｈＲＬはプロメガより購入した。

細胞培養。人間肝細胞癌細胞ラインＨｅｐＧ２と人間鼻咽頭癌ＫＢ細胞を１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を補充したＰＲＭＩ１６４０媒体中に保持した。ＫＢ抵抗性細胞ライン、ＫＢ−ＭＤＲ、ＫＢ−７Ｄ、ＫＢ−７Ｄ−Ｒｅｖ、ＫＢ−Ｈｕ−Ｒ、ＫＢ−Ｈｕ−Ｒｅｖ、ＫＢ−１００、ＫＢ−１００−Ｒｅｖを図１、表２Ｂに示す。

実験例２。細胞毒性分析。細胞（１Ｘ１０⁴／ウエル）２４ウエル板に平板培養した。２４ｈ後、細胞を３世代回に亙って薬剤で処置した。ついで固定し５０％エタノール中の０．５％メチレンブルーで２ｈ染色し、生水で洗浄して過剰な色を除いた。板を乾燥し１％サルコシル中で懸濁させ、室温で３ｈ回転した。分光測光器（分子動力学）で測定した細胞へのメチレンブルー吸収量から細胞成長を５９５ｎｍで計量した。全ての実験は三つ組みウエルで行われ、少なくとも３回反復された（図１、表１Ｂ、１Ｃ参照）。

クロノジェニック分析。細胞（５Ｘ１０⁴／ウエル）を６−ウエル板に平板培養し、２４ｈ後、細胞を薬剤でさらに２４ｈ処置した。ついで細胞をトリプシン消化し、計数し、トリパンブルー染色により細胞生存能力を決定し、２００トリパンブルーネガティブ細胞を６ウエル板に三つ組み平板培養した。ついで８〜１０世代回成長させ、固定し、５０％エタノール中の０．５％メチレンブルーで１ｈ染色し、板を洗浄乾燥し、コロニーを計数した（図１、表１Ｃ参照）。

実験例３。動物研究。年齢４週の雄のＮＣＲ−ヌードマウスをタコニック（Ｔａｃｏｎｉｃ）より得て、腫瘍移植の１週間前実験室条件に順化させた。皮下注入２Ｘ１０⁶ＨｅｐＧ２細胞により人間ＨｅｐＧ２腫瘍異種移植を行った。１０日後、腫瘍移植後１１日目に８時間毎にＤＣＢ−３５００、ＤＣＢ−３５０３を３０ｍｇ／ｋｇで３投与量注入して処置を行ったＩ．Ｐ．。数式：腫瘍長Ｘ（腫瘍幅／２）²により腫瘍重量を推定した。（図１（ａ））

細胞サイクル分析。漸増濃度のＤＣＢ−３５００、ＤＣＢ−３５０３でＫＢとＨｅｐＧ２細胞を２４ｈ処置した。処置の終りに細胞をトリプシン消化して、得られた細胞懸濁液を１０００ｒｐｍで５ｍｉｎ遠心処理した。細胞を終夜７０％エタノール中で４℃で固定し、１０００ｒｐｍで５ｍｉｎ遠心処理し、氷冷ＰＢＳでペレットを２回洗浄した。

細胞ペレットを５０μｇ／ｍｌのピロピジウムイオダイド（シグマ−アルドリッチ）と１００μｇ／ｍｌのＲＮａｓｅＡ（シグマ−アルドリッチ）とを含む０．５ｍｌＰＢＳ中に懸濁させ、３７℃で３０ｍｉｎ培養し、ＦＡＣスキャンで細胞探索ソフト（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ Ｌａｂｗａｒｅ、Ｆｒａｎｋｌｉｎ Ｌａｋｅｓ、ＮＪ）を用いて分析し、そのデータをＭｏｄｆｉｔ ＬＴ ｖｅｒｓｉｏｎ３．１ソフトウェア（Ｖｅｒｉｔｙ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｈｏｕｓｅ、Ｔｏｐｓｈａｍ、ＭＥ）を用いて細胞サイクルプロフィルについて分析した。（図１、表３）

アポトーシス（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）分析。Ｖｙｂｒａｎｔ^TMアポトーシスキット（Ｖ−１３２４１、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ、Ｅｕｇｅｎｅ、ＯＲ）を用いてアポトーシスを決定した。要するに、１Ｘ１０⁶標準または処置された細胞をａｎｎｅｘｉｎ−ｂｉｎｄｉｎｇ緩衝液中で再懸濁させて、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ４８８ａｎｎｅｘｉｎＶとプロピジウムイオダイドで染色し、室温で１５ｍｉｎ培養した。染色細胞をフロー血球計（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｓｏｎ、Ｆｒａｎｋｌｉｎ Ｌａｋｅｓ、ＮＪ）で分析した。集団を３個のグループに分離した。生存細胞は低レベル蛍光を呈し、アポトーティック細胞は緑蛍光を呈し、壊死細胞は赤と緑蛍光を呈した。ＷｉｎＭＤＩ ｖｅｒｓｉｏｎ２．８ソフトウェアを用いてデータを分析した。（図３参照）

細胞成長抑制２４ｈ、ついで薬剤細胞（１Ｘ１０⁴／ウエル）なしの細胞成長を６−ウエル板に平板培養しモニターし、細胞をさらに２４ｈ薬剤で処置した。ついで薬剤含有媒体を除去し、細胞を薬剤なし媒体中でさらに１〜８日間培養し、各培養期間の終りに、細胞を固定し５０％エタノール中の０．５％メチレンブルーで染色し、１％サルコシル中で再懸濁させ、細胞成長を細胞毒性分析と同様に決定した。（図４参照）

共焦点顕微鏡。共焦点顕微鏡分析を前記と同様な手法で行った。要するに、５Ｘ１０⁴ＨｅｐＧ２およびＫＢを２２ｍｍｘ２２ｍｍを３５−ｍｍ培養皿中のガラスカバースリップ上に平板培養し、２４ｈ後、細胞を上記のように処置した。培養の終りに、細胞を４％パラフォルムアルデヒドで室温で３０ｍｉｎ固定し、０．５％トリトンＸ−１００を用いてＰＢＳ中で室温で１５ｍｉｎ浸透化した。ついで終夜ＰＢＳ中の３％ＢＳＡで培養して、非特定結合をブロックした。細胞をさらにｐ５３抗体（１：１００）、ＡＦＰ抗体（１：１００）またはアルブミン抗体（１：１００）で室温で１ｈ培養し、ＦＩＴＣ−共役抗ラビットまたは抗マウス抗体を続けた。細胞をアンチフエード（ａｎｔｉｆａｄｅ）反応剤（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ）でシールし、共焦点顕微鏡をレーザースキャン共焦点顕微鏡ＬＳＭ５１０（ツァイス）でスキャンした。（図２、４参照）。

トランスフェクションおよびルシフェラーゼ分析。ＨｅｐＧ２細胞を２Ｘ１０⁴／ウエル（４８−ウエル板）の密度で平板培養し、０．２μｇのホタルルシフェラーゼレポーターベクトルｐＭｙｃ−ＴＡ−ｌｕｃ、ｐＥ２Ｆ−ＴＡ−ｌｕｃ、ｐＡＰ１−ｌｕｃ、ｐＣＲＥ−ｌｕｃまたはｐＢＩＩＸ−ｌｕｃ（２個の縦反復ＮＦ−κＢ結合部位を含む）でそれぞれ、内部標準ベクトルプロモータなしのレニラルシフェラーゼレポーターベクトルｐｈＲＬ（プロメガ）とともに、ＦｕＧＥＮＥ６^TMトランスフェクション反応剤を用いて製造者の指示に従いトランスフェクトした。２０ｈ後、媒体を変えて、細胞を上記のように図凡例で示すように処置した。細胞抽出物を用意して、ルシフェラーゼ活性をデュアル−ルシフェラーゼ（ホタルおよびレニラルシフェラーゼ）分析キットを用いて製造者の指示に従って測定した。（図５Ａ−Ｇ参照）

実験例で言及される下記を示すものである。「Ａ．化学構造」は（＋）−（Ｓ）−チロフォリン（化合物「ＩＩＩ−２」およびＤＣＢ−３５００とも呼ばれる）、ＤＣＢ−３５０１、「図１５の化合物ＩＩ−３ａ」、図１８〜２２において、「ＺＨ−１５２」として）、ＤＣＢ−３５０２（「化合物ＩＩ−２」とも呼ばれる）、ＤＣＢ−３５０３（「ＮＳＣ７１６８０２」、図１５の「化合物ＩＩ−３ｂ」および「ＺＨ−１５２」とも呼ばれる）についての構造式を与えるものである。「表１、ＢおよびＣ」は、種々の抗癌剤に抵抗性を有するＫＢおよびＨｅｐＧ２癌細胞ラインに対してのＤＣＢ−３５００、ＤＣＢ−３５０１、ＤＣＢ−３５０２およびＤＣＢ−３５０３の使用についてのＥＣ₅₀およびＬＤ₅₀値を、与えるものであり、ＶＰ−１６（エトポシド）、ＶＣＲ（ビンクリスチン）、ＣＰＴ（カンプトテシン）およびＤＯＸ（ドクソルビシン）を含むものである。 「表２Ａ、Ｂおよび表３」はこの発明の化合物によりＫＢおよびＨｅｐＧ２癌細胞ラインが抑制されることを示している。表２はＫＢ細胞およびその薬剤抵抗性細胞の成長抑制についてのＤＣＢ−３５００、３５０１、３５０２，３５０３のＥＣ５０の効果を示す。この結果によれば、表中に示すようにＤＣＢ−３５００、３５０１、３５０２、３５０３は従来の抗癌剤との交差抵抗性を有してなく、このクラスの化合物は抗癌について新規なメカニズムを有しており新規な蛋白質を対象としていることを示唆している。 「表２Ａ、Ｂおよび表３」はこの発明の化合物によりＫＢおよびＨｅｐＧ２癌細胞ラインが抑制されることを示している。表３は細胞サイクル進展に対してのＤＣＢ−３５００、３５０３の衝撃を示している。ＫＢおよびＨｅｐＧ２細胞を種々の濃度のＤＣＢ−３５００、３５０３で２４ｈ処理した。処理の終りにおいて、細胞を洗浄し、ＰＢＳ中において再懸濁し、流体血球計算分析のためにＲｎａｓｅＡを含有するプロピジウムアイオダイドで染色した。Ｍｏｄｆｉｔソフトを用いてデータを分析した。表３に示す結果によれば、ＤＣＢ−３５００、３５０３処理はＫＢ細胞中ではＳ相を誘発するがＨｅｐＧ２細胞中ではしないことが分かる。 グラフＡ、Ｂ中の「図１（ａ）」はヌードマウス中のＨｅｐＧ２腫瘍ゼノグラフトの成長に対するＤＣＢ−３５００、３５０３の効果を示す。以下の説明は図１（ａ）に適用される。（Ａ）ヌードマウス中のＨｅｐＧ２腫瘍の成長に対するＤＣＢ−３５０３の効果であって、（■）は標準、（▲）はＤＣＢ−３５００、（▼）はＤＣＢ−３５０３である。（Ｂ）ヌードマウスの体重に対するＤＣＢ−３５００、３５０３の効果である。ＨｅｐＧ２細胞（２Ｘ１０⁶）をヌードマウス（平均体重２０ｇ）に１０日間皮下移植した。腫瘍移植後の１１日８時間ごとに３０ｍｇ／ｋｇでＤＣＢ−３５００、３５０３をＩ．Ｐ．を用いて３回投与して処理を行った。腫瘍重量は式、腫瘍長ｘ（腫瘍幅／２）²を用いて推定した。 実験例に記載したようなＫＢおよびＨｅｐＧ２細胞に対する種々の抗癌剤およびＤＣＢ−３５００、３５０３の効果の共焦点顕微鏡写真を示す。また従来の化学療法薬剤および３５００、３５０３に反応してのｐ５３の調製を示す。細胞は従来の抗癌剤およびＤＣＢ−３５００、３５０３で２４ｈ処理した。抗ｐ５３抗体を用いてｐ５３発現レベルを共焦点顕微鏡で分析した。 実験例に記載したＫＢおよびＨｅｐＧ２細胞に対するＤＣＢ−３５０３の効果についての流体血球計算データを示す。２Ｘ１０⁶非処理または３５０３処理ＫＢおよびＨｅｐＧ２細胞をＡｌｅｘａＦｌｏｕｒ４８８ａｎｎｅｘｉｎＶおよびプロピジウムアイオダイドで染色し、流体血球計算により分析した。アポトーティック（ａｐｏｐｔｏｔｉｃ）細胞（右下パネル）は緑蛍光色を呈した。壊死細胞（右上パネル）は赤と緑蛍光色を呈した。 実験例に示したＨｅｐＧ２細胞に対する（＋）−（Ｓ）−チロフォリン（「ＩＩＩ−２」またはＤＣＢ−３５００）およびアナローグＤＣＢ−３５０１、３５０２、３５０３の成長抑制効果を示すものである。Ａ）ＨｅｐＧ２における３５００とそのアナローグの成長抑制効果。ＨｅｐＧ２細胞をＤＣＢ−３５００、３５０１、３５０２、３５０３で２４ｈ処理して、ついで薬剤を除去し、細胞成長をモニターした。（Ｂ）ＨｅｐＧ２細胞をＤＣＢ−３５００でまたはなしで２４ｈ処理して、薬剤を除去し、抗ＡＦＰ抗体を使ってＡＦＰ発現を共焦点顕微鏡分析でモニターした。（Ｃ）ＨｅｐＧ２細胞をＤＣＢ−３５００でまたはなしで２４ｈ処理して、薬剤を除去し、５日後に抗炎症抗体を使って共焦点顕微鏡によりアルブミン発現を検知した。 実験例に示したように、ホタルルシフェラーゼ分析において決定されたようにＮＦ−κＢ投与転写に対する（＋）−（“Ｓ”）−チロフォリン（「ＩＩＩ−２」またはＤＣＢ−３５００）、ＤＣＢ−３５０２、３５０３の強力な活動を示す。ＨｅｐＧ２細胞をホタルルシフェラーゼレポーターベクターｐＭｙｃ−ＴＡ−ｌｕｃ、ｐＡＰ１−ｌｕｃ、ｐＣＲＥ−ｌｕｃまたはｐＢＩＩＸ−ｌｕｃ（２個の縦列反復ＮＦ−κＢ結合部）で一時的にトランスフェクトした。またプロモーターレスレニーラ（ｐｒｏｍｏｔｅｒｌｅｓｓ ｒｅｎｉｌｌａ）ルシフェラーゼレポーターベクターである内部標準ベクターｐｈＲＬ−ｌｕｃも用いた。トランスフェクションのつぎの日、細胞を増加した濃度の３５００で１ｈ予備処理した。ついで細胞を血清で２４ｈ刺激するか、ＴＰＡ、フォルスコリンまたはＴＮＦａで６ｈ刺激した。プロメガの二重ルシフェラーゼ分析キットを用いてホタルおよびレニーラウシフェラーゼ活動を測定した。データはホタルルシフェラーゼ活性を呈した。 実験例に示したように、ホタルルシフェラーゼ分析において決定されたようにＮＦ−κＢ投与転写に対する（＋）−（“Ｓ”）−チロフォリン（「ＩＩＩ−２」またはＤＣＢ−３５００）、ＤＣＢ−３５０２、３５０３の強力な活動を示す。ＨｅｐＧ２細胞をホタルルシフェラーゼレポーターベクターｐＭｙｃ−ＴＡ−ｌｕｃ、ｐＡＰ１−ｌｕｃ、ｐＣＲＥ−ｌｕｃまたはｐＢＩＩＸ−ｌｕｃ（２個の縦列反復ＮＦ−κＢ結合部）で一時的にトランスフェクトした。またプロモーターレスレニーラ（ｐｒｏｍｏｔｅｒｌｅｓｓ ｒｅｎｉｌｌａ）ルシフェラーゼレポーターベクターである内部標準ベクターｐｈＲＬ−ｌｕｃも用いた。トランスフェクションのつぎの日、細胞を増加した濃度の３５００で１ｈ予備処理した。ついで細胞を血清で２４ｈ刺激するか、ＴＰＡ、フォルスコリンまたはＴＮＦａで６ｈ刺激した。プロメガの二重ルシフェラーゼ分析キットを用いてホタルおよびレニーラウシフェラーゼ活動を測定した。データはホタルルシフェラーゼ活性を呈した。 実験例に示したように、ホタルルシフェラーゼ分析において決定されたようにＮＦ−κＢ投与転写に対する（＋）−（“Ｓ”）−チロフォリン（「ＩＩＩ−２」またはＤＣＢ−３５００）、ＤＣＢ−３５０２、３５０３の強力な活動を示す。ＨｅｐＧ２細胞をホタルルシフェラーゼレポーターベクターｐＭｙｃ−ＴＡ−ｌｕｃ、ｐＡＰ１−ｌｕｃ、ｐＣＲＥ−ｌｕｃまたはｐＢＩＩＸ−ｌｕｃ（２個の縦列反復ＮＦ−κＢ結合部）で一時的にトランスフェクトした。またプロモーターレスレニーラ（ｐｒｏｍｏｔｅｒｌｅｓｓ ｒｅｎｉｌｌａ）ルシフェラーゼレポーターベクターである内部標準ベクターｐｈＲＬ−ｌｕｃも用いた。トランスフェクションのつぎの日、細胞を増加した濃度の３５００で１ｈ予備処理した。ついで細胞を血清で２４ｈ刺激するか、ＴＰＡ、フォルスコリンまたはＴＮＦａで６ｈ刺激した。プロメガの二重ルシフェラーゼ分析キットを用いてホタルおよびレニーラウシフェラーゼ活動を測定した。データはホタルルシフェラーゼ活性を呈した。 実験例に示したように、ホタルルシフェラーゼ分析において決定されたようにＮＦ−κＢ投与転写に対する（＋）−（“Ｓ”）−チロフォリン（「ＩＩＩ−２」またはＤＣＢ−３５００）、ＤＣＢ−３５０２、３５０３の強力な活動を示す。ＨｅｐＧ２細胞をホタルルシフェラーゼレポーターベクターｐＭｙｃ−ＴＡ−ｌｕｃ、ｐＡＰ１−ｌｕｃ、ｐＣＲＥ−ｌｕｃまたはｐＢＩＩＸ−ｌｕｃ（２個の縦列反復ＮＦ−κＢ結合部）で一時的にトランスフェクトした。またプロモーターレスレニーラ（ｐｒｏｍｏｔｅｒｌｅｓｓ ｒｅｎｉｌｌａ）ルシフェラーゼレポーターベクターである内部標準ベクターｐｈＲＬ−ｌｕｃも用いた。トランスフェクションのつぎの日、細胞を増加した濃度の３５００で１ｈ予備処理した。ついで細胞を血清で２４ｈ刺激するか、ＴＰＡ、フォルスコリンまたはＴＮＦａで６ｈ刺激した。プロメガの二重ルシフェラーゼ分析キットを用いてホタルおよびレニーラウシフェラーゼ活動を測定した。データはホタルルシフェラーゼ活性を呈した。 実験例に示したように、ホタルルシフェラーゼ分析において決定されたようにＮＦ−κＢ投与転写に対する（＋）−（“Ｓ”）−チロフォリン（「ＩＩＩ−２」またはＤＣＢ−３５００）、ＤＣＢ−３５０２、３５０３の強力な活動を示す。ＨｅｐＧ２細胞をホタルルシフェラーゼレポーターベクターｐＭｙｃ−ＴＡ−ｌｕｃ、ｐＡＰ１−ｌｕｃ、ｐＣＲＥ−ｌｕｃまたはｐＢＩＩＸ−ｌｕｃ（２個の縦列反復ＮＦ−κＢ結合部）で一時的にトランスフェクトした。またプロモーターレスレニーラ（ｐｒｏｍｏｔｅｒｌｅｓｓ ｒｅｎｉｌｌａ）ルシフェラーゼレポーターベクターである内部標準ベクターｐｈＲＬ−ｌｕｃも用いた。トランスフェクションのつぎの日、細胞を増加した濃度の３５００で１ｈ予備処理した。ついで細胞を血清で２４ｈ刺激するか、ＴＰＡ、フォルスコリンまたはＴＮＦａで６ｈ刺激した。プロメガの二重ルシフェラーゼ分析キットを用いてホタルおよびレニーラウシフェラーゼ活動を測定した。データはホタルルシフェラーゼ活性を呈した。 実験例に示したように、ホタルルシフェラーゼ分析において決定されたようにＮＦ−κＢ投与転写に対する（＋）−（“Ｓ”）−チロフォリン（「ＩＩＩ−２」またはＤＣＢ−３５００）、ＤＣＢ−３５０２、３５０３の強力な活動を示す。ＨｅｐＧ２細胞をホタルルシフェラーゼレポーターベクターｐＭｙｃ−ＴＡ−ｌｕｃ、ｐＡＰ１−ｌｕｃ、ｐＣＲＥ−ｌｕｃまたはｐＢＩＩＸ−ｌｕｃ（２個の縦列反復ＮＦ−κＢ結合部）で一時的にトランスフェクトした。またプロモーターレスレニーラ（ｐｒｏｍｏｔｅｒｌｅｓｓ ｒｅｎｉｌｌａ）ルシフェラーゼレポーターベクターである内部標準ベクターｐｈＲＬ−ｌｕｃも用いた。トランスフェクションのつぎの日、細胞を増加した濃度の３５００で１ｈ予備処理した。ついで細胞を血清で２４ｈ刺激するか、ＴＰＡ、フォルスコリンまたはＴＮＦａで６ｈ刺激した。プロメガの二重ルシフェラーゼ分析キットを用いてホタルおよびレニーラウシフェラーゼ活動を測定した。データはホタルルシフェラーゼ活性を呈した。 実験例に示したように、ホタルルシフェラーゼ分析において決定されたようにＮＦ−κＢ投与転写に対する（＋）−（“Ｓ”）−チロフォリン（「ＩＩＩ−２」またはＤＣＢ−３５００）、ＤＣＢ−３５０２、３５０３の強力な活動を示す。ＨｅｐＧ２細胞をホタルルシフェラーゼレポーターベクターｐＭｙｃ−ＴＡ−ｌｕｃ、ｐＡＰ１−ｌｕｃ、ｐＣＲＥ−ｌｕｃまたはｐＢＩＩＸ−ｌｕｃ（２個の縦列反復ＮＦ−κＢ結合部）で一時的にトランスフェクトした。またプロモーターレスレニーラ（ｐｒｏｍｏｔｅｒｌｅｓｓ ｒｅｎｉｌｌａ）ルシフェラーゼレポーターベクターである内部標準ベクターｐｈＲＬ−ｌｕｃも用いた。トランスフェクションのつぎの日、細胞を増加した濃度の３５００で１ｈ予備処理した。ついで細胞を血清で２４ｈ刺激するか、ＴＰＡ、フォルスコリンまたはＴＮＦａで６ｈ刺激した。プロメガの二重ルシフェラーゼ分析キットを用いてホタルおよびレニーラウシフェラーゼ活動を測定した。データはホタルルシフェラーゼ活性を呈した。 スキームＩにおいて、この発明の化合物の合成を示す。 スキームＩＩにおいて、この発明の化合物の合成を示す。 スキームＩＩＩにおいて、図６、７のスキーム１、２の有用性の確認を示す。 スキームＩＶにおいて、この発明によるチロインジシンＧの合成を示す。 スキームＶにおいて、この発明によるポロノフスキー（Ｐｏｌｏｎｏｖｓｋｙ）反応を使った他のヒドロキシル化スキームを示す。 スキームＶＩにおいて、この発明によるチロインジシンＦの合成を示す。 スキームＶＩＩにおいて、この発明によるチロインジシンＩの合成を示す。 スキームＶＩＩＩにおいて、この発明によるチロインジシンＨの合成を示す。 スキームＩＸにおいて、この発明によるチロインジシンシリーズの同族体の合成を示す。 この発明のチロインジシンアナローグＮＳＣ７１７３３４、７１２８２２、７１７３３６、７１６８０２（ＤＣＢ−３５０１、３５０３）の構造式を示す。 スキームＸにおいて、この発明によるチロインジシンＧの合成を示す。 スキームＸＩにおいて、活性化ＣＨ−セファロース−ＮＳＣ−７１７３３５プロドラッグの合成を示す。 ＤＣＢ−３５０３を用いたＫＢ細胞ライン中での交差抵抗性の研究を示す。結局ＶＰ−１６、ＶＣＲ、ＣＰＴまたはＤＯＸに抵抗性を有するようになった細胞はそれでもＺＨ−１５２には敏感である。 クロノジェニック（ｃｌｏｎｏｇｅｎｉｃ）分析におけるＤＣＢ−３５０３（ＺＨ−１５２）の効果を示す。図示のように容器当り５Ｘ１０⁴で細胞を種付けし、ＤＣＢ−３５０３を１／３、１Ｘおよび３ＸＩＧ₅₀の濃度で添加した。２４ｈの処理後、細胞を計数して新たな６容器板に容器当り２００細胞を種付けした。８世代の時間の後、コロニーをメチレンブルーで染色し計数した。ＨｅｐＧ２のクローン効率は１０％であり、ＫＢについては９４％であった。両細胞ラインを上記濃度のＤＣＢ−３５０３に２４ｈ曝した。薬剤処理後の細胞のクローンジェニック（ｃｌｏｎｅｇｅｎｉｃ）効率の損失を示す。ＨｅｐＧ２はＫＢ細胞より遥かに敏感であった。このことは先の異なる過程を使った観察を支持するものである。 ＫＢおよびＨｅｐＧ２細胞成長へのＤＣＢ−３５０３の効果を示す。ＤＣＢ−３５０３は両細胞ラインのＳ相における細胞進化を遅延させる。かくしてＤＣＢ−３５０３によるそれら２種の細胞ラインの成長抑制はＳ相進化に関連する目標における抑制によるものである。さらなる生化学的決定要素はＫＢに対するＨｅｐＧ２の優先的な殺戮（クロノジェネシティ（ｃｌｏｎｏｇｅｎｅｃｉｔｙ）の損失）に役目を果たすのかもしれない。 Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおけるＤＣＢ−３５０３の毒性研究を示す。ＤＣＢ−３５０３は重量損失を起こすことにより１０ｍｇ／ｋｇの研究において毒性を呈した。 ＤＣＢ−３５０３を用いた毒性および腫瘍成長抑制を示す。ＤＣＢ−３５０３はヌードマウス（１実験）におけるＨｅｐＧ２成長に対して強力な抑制活動を呈した。 ＤＣＢ−３５０３を用いた毒性および腫瘍成長抑制を示す。ＤＣＢ−３５０３はヌードマウス（１実験）におけるＨｅｐＧ２成長に対して強力な抑制活動を呈した。

Claims (62)

1. 構造式
   

   

   を有する化合物およびそのエピマー、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体であり、ここでＹはＯ、Ｓ、ＮＨ、ＣＨ₂であるかまたは存在せず、Ｙが存在しないときに全てのＺがＨではない場合に、各（Ｚ）は独立にＨ、（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキル、置換アルキル、アリル、置換アリル、アルキルシリル、複素環、置換複素環であり、（Ｕ）はＨ、（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキル、置換アルキル、アリル、置換アリル、アルキルシリル、複素環、置換複素環またはＷと一緒に環を含む窒素中で二重結合を形成するかまたはＴと一緒に環を含む窒素中で二重結合を形成し、ＴはＨであって炭素と一緒にＲ₅が付加された二重結合を形成するかまたはＹ（Ｕ）に付加された炭素と一緒に二重結合を形成し、ＷはＨであるかまたは環を含む窒素中にＹ（Ｕ）に付加された炭素と一緒に二重結合を形成し、Ｒ₅はＨ、ＯＨ、＝Ｏ（それが付加されている炭素と一緒にカルボニル基を形成する）、カルボキシル（カルボキシレート基）、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ_X基、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_Xまたは−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_X基であり、ここでＲ_XはＣ₂〜Ｃ₁₅アルキル、好ましくはＣ₂〜Ｃ₈アルキルであり、Ｒ₆はＨ、ＯＨ、＝Ｏ（それが付加されている炭素と一緒にカルボニルを形成する）、カルボキシル（カルボキシレート基）、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ_X基、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_Xまたは−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_X基であり、ここでＲ_Xは上記した通りであり、ＢはＹ（Ｚ）またはＣと一緒に各ＢおよびＣが付加されている２個のフェニル環の間に結合を形成し、ＣはＹ（Ｚ）またはＢと一緒に各ＢおよびＣが付加されている２個のフェニル環の間に結合を形成し、ｍが０〜４であり、ｎが０〜３であることを特徴とする化合物。
2. 構造式
   

   

   を有する化合物およびそのエピマー、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体であり、ここでＲ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄およびＲ₇は同じまたは異なり、かつＨ、アルキル、置換アルキル、アリル、置換アリル、複素環または置換複素環であり、Ｒ₅はＨ、ＯＨ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ_X基、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_Xまたは−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_X基であり、ここでＲ_XはＣ₂〜Ｃ₁₅アルキルであり、Ｒ₆はＨ、＝Ｏ基、カルボキシル（カルボキシレート基）、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ_X基、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_Xまたは−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_X基であり、ここでＲ_Xは上記した通りであり、ＸはＨまたはＯＲであり、ＲはＨ、アルキル、置換アルキル、アリル、置換アリル、複素環または置換複素環であることを特徴とする請求１に記載の化合物。
3. 構造式
   

   

   を有する化合物およびエピマー、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体であることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
4. 構造式
   

   

   を有する化合物およびその鏡像体アナローグ、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体であることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
5. 構造式
   

   

   を有する化合物およびそのエピマーおよび鏡像体アナローグ、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体であることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
6. 構造式
   

   

   を有する化合物およびそのエピマーおよび鏡像体アナローグ、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体であることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
7. 構造式
   

   

   を有する化合物およびその鏡像体アナローグ、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体であることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
8. 構造式
   

   

   を有する化合物およびその鏡像体アナローグ、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体であることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
9. 構造式
   

   

   を有する化合物およびそのエピマーおよび鏡像体アナローグ、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体であることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
10. 構造式
    

    

    を有する化合物およびそのエピマーおよび鏡像体アナローグ、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体であることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
11. 構造式
    

    

    を有する化合物およびその鏡像体アナローグ、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体であることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
12. 構造式
    

    

    を有し、ここでＲはアルキル、置換アルキル、アリル、置換アリル、複素環または置換複素環、およびそのエピマーおよび鏡像体アナローグ、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体であることを特徴とする化合物。
13. 構造式
    

    

    を有する化合物およびそのエピマーおよび鏡像体アナローグ、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体であることを特徴とする化合物。
14. 構造式
    

    

    を有する化合物およびそのエピマーおよび鏡像体アナローグ、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体であることを特徴とする化合物。
15. 構造式
    

    

    を有する化合物およびそのエピマーおよび鏡像体アナローグ、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体であり、ここでＡは活性化ＣＨ−セファロース４Ｂであることを特徴とする化合物。
16. 構造式
    

    

    を有する化合物およびそのエピマーおよび鏡像体アナローグ、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体でありここでＸは活性化ＣＨ−セファロース４Ｂであることを特徴とする化合物。
17. （ａ）構造式
    

    

    のアルコールのマルチンスルフラン脱水反応を行って、
    構造式
    

    

    のアルケンを得て、（ｂ）還元反応媒体中でステップ（ａ）のアルケンを還元して、
    構造式
    

    

    のチロインジシンアナローグを得ることを特徴とするチロインジシンアナローグの製造プロセス。
18. 構造式
    

    

    のアルケンのＳｅＯ₂ヒドロキシル反応を行って、
    構造式
    

    

    のチロインジシンアナローグを得ることを特徴とするチロインジシンアナローグの製造プロセス。
19. ＡｌＨ₃を含んだ還元反応媒体中で構造式
    

    

    のアルケンを還元して、
    構造式
    

    

    のチロインジシンアナローグを得ることを特徴とするチロインジシンアナローグの製造プロセス。
20. （ａ）構造式
    

    

    のアルケンのポロノフスキー酸化を行って、
    構造式
    

    

    のＮ−酸化物を得て、（ｂ）Ｋ₂ＣＯ₃−ＭｅＯＨを含む反応媒体中においてステップ（ａ）のＮ−酸化物のトリフルオロアセチル化と脱保護とを行って、チロインジシンＧまたはチロインジシンＧアナローグを得ることを特徴とするチロインジシンＧまたはチロインジシンＧアナローグの製造プロセス。
21. （ａ）構造式
    

    

    の化合物のマルチンスルフラン脱水反応を行って、
    構造式
    

    

    の不飽和中間体を得て、（ｂ）還元反応媒体中でステップ（ａ）の中間体を還元して、
    構造式
    

    

    のチロインジシンアナローグを得ることを特徴とするチロインジシンアナローグの製造プロセス。
22. Ｈ₂／Ｐｄ−ＣまたはＢｕ₄ＮＦを含む反応媒体中において
    構造式
    

    

    の化合物の水素化分解を行って、
    構造式
    

    

    のチロインジシンアナローグを得ることを特徴とするチロインジシンＩの製造プロセス。
23. 構造式
    

    

    のアルケンのＳｅＯ₂ヒドロキシル反応を行って、
    構造式
    

    

    のチロインジシンアナローグを得るもので、ここでＲはＨ、Ｍｅ₃Ｓｉまたはアリルであることを特徴とするチロインジシンアナローグの製造プロセス。
24. （ａ）構造式
    

    

    の化合物をマルチンスルフラン脱水反応して、
    

    

    の不飽和中間体を得て、（ｂ）還元反応媒体中でステップ（ａ）の不飽和中間体を還元して、
    構造式
    

    

    のチロインジシンアナローグを得て、ここでＲはＨ、Ｍｅ₃Ｓｉまたはアリルであることを特徴とするチロインジシンアナローグの製造プロセス。
25. 構造式
    

    

    の化合物をＬｉＡｌＨ₄を含む還元反応媒体中において還元して、
    構造式
    

    

    のチロインジシンアナローグを得ることを特徴とするチロインジシンアナローグの製造プロセス。
26. 薬学的に受容可能なキャリアーと請求項１または２の化合物の治療有効量を含んだことを特徴とする薬学的組成物。
27. 薬学的に受容可能なキャリアーと請求項３〜１５または５５〜５８の化合物の治療有効量を含んだことを特徴とする薬学的組成物。
28. 必要とする腫瘍罹病哺乳動物に請求項１または２の化合物の１種以上の治療有効量を投与することを特徴とする哺乳動物の治療方法。
29. 必要とする腫瘍罹病哺乳動物に請求項３〜１５または５５〜５８の化合物の１種以上の治療有効量を投与することを特徴とする哺乳動物の治療方法。
30. 必要とする癌罹病哺乳動物に請求項１または２の化合物の１種以上の治療有効量を投与することを特徴とする哺乳動物の治療方法。
31. 必要とする癌罹病哺乳動物に請求項３〜１５または５５〜５８の化合物の１種以上の治療有効量を投与することを特徴とする哺乳動物の治療方法。
32. 癌が胃癌、結腸癌、直腸癌、肝臓癌、膵臓癌、肺癌、乳癌、子宮頚管癌、子宮癌、卵巣癌、前立腺癌、精巣癌、嚢癌、腎臓癌、脳または中枢神経系癌、頭部および頚部癌、咽喉癌、ホジキン病癌、非ホジキン白血病、多発性骨髄腫白血病、皮膚黒色素細胞腫、急性リンパ細胞白血病、急性骨髄性白血病、ユーイング肉腫、小細胞肺癌、絨毛癌、平滑筋組織腫瘍、ウイルムス腫瘍、神経芽細胞腫、毛状細胞白血病、口腔／咽喉癌、食道癌、咽頭癌、黒色素細胞腫、腎臓およびリンパ腫の１種以上であることを特徴とする請求項３０または３１に記載の方法。
33. 癌が抗薬性癌であることを特徴とする請求項３０に記載の方法。
34. 癌が、アルキル化剤、ＤＮＡ−相互作用化合物およびトポイソメラーゼ活性剤からなる群から選ばれる少なくとも１種の薬剤に対して、抵抗性であることを特徴とする請求項３３に記載の方法。
35. 癌が、エトポサイド、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、トポＩ薬およびトポＩＩ薬からなる群から選ばれた少なくとも１種の薬剤に対して、抵抗性であることを特徴とする請求項３３に記載の方法。
36. 請求項１または２の化合物が腫瘍成長の抑制のために投与されることを特徴とする請求項２８に記載の方法。
37. 請求項３〜１５または５５〜５８の化合物が腫瘍成長の抑制のために投与されることを特徴とする請求項２９に記載の方法。
38. 請求項１の化合物が、エトポサイド、シス−プラチン、カルボプラチン、ロバプラチン、オルマプラチン、オキサプラチン、ヘキサメチルマラミン、ＮＬＣＱ−１、メファラン、ジヒドロキシブスルファン、シクロフォスフアミド、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ミトミシン、アドリアミシン、カンプトセシン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ヒドロキシウレア、ゲミシタビン、トポ−Ｉおよびトポ−ＩＩ薬、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、タキソール、メタサイクリン、抗血管形成薬、アザインドール誘導体、ジベンゾフルオレン誘導体、テモゾロマイド、ＡＰ／ＡＭＰおよびそれらのプロドラッグ形態からなる群から選ばれた１種または化合物、と一緒に投与されることを特徴とする請求項２８に記載の方法。
39. 腫瘍が良性腫瘍であることを特徴とする請求項２８または２９に記載の方法。
40. 癌が悪性腫瘍であることを特徴とする請求項３０または３１に記載の方法。
41. 癌が薬剤抵抗性を発展させたことを特徴とする請求項３０〜３２のいずれかひとつに記載の方法。
42. 癌が多重薬剤抵抗性乳癌であることを特徴とする請求項３０〜３２のいずれかひとつに記載の方法。
43. 腫瘍の成長、拡散を抑制するかまたは縮小すべく請求項１または２の１種以上の化合物が哺乳動物に投与されることを特徴とする請求項２８または２９に記載の方法。
44. 腫瘍の成長、拡散を抑制するかまたは縮小すべく請求項３〜１５または５５〜５８の１種以上の化合物が哺乳動物に投与されることを特徴とする請求項２８または２９に記載の方法。
45. 哺乳動物が人間であることを特徴とする請求項２８〜４４のいずれかひとつに記載の方法。
46. 炎症または自己免疫障害罹病哺乳動物の治療方法であって、投与を必要とする哺乳動物に請求項１または２の化合物、エピマー、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体の１種以上の治療有効量を投与することを特徴とする治療方法。
47. 炎症または自己免疫障害罹病哺乳動物の治療方法であって、投与を必要とする哺乳動物に請求項３〜１５または５５〜５８の化合物、エピマー、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体の１種以上の治療有効量を投与することを特徴とする治療方法。
48. 炎症または自己免疫障害がＮＦ−κＢの活性化を伴うことを特徴とする請求項４６または４７に記載の方法。
49. 炎症または自己免疫障害が移植拒否症、移植併発血管障害、急性糸球体腎炎、ループス腎炎および尿細管間質性腎炎、喘息、呼吸障害症、胃炎、リューマチ性関節炎、紅斑性狼瘡、血管炎、糖尿病、ＡＩＤＳ、敗血症、血栓症、冠状動脈病、血管形成またはバイパス手術後の再狭窄、虚血症であることを特徴とする請求項４６または４７に記載の方法。
50. 炎症または自己免疫障害がリューマチ性関節炎、炎症腸病、喘息、皮膚炎、乾癬およびアトピー性皮膚炎、自己免疫病、組織および器官拒否、アルツハイマー病、ホジキン病、ＡＩＤＳ、運動失調毛細血管拡張症であることを特徴とする請求項４６または４７に記載の方法。
51. 必要とする患者に請求項１〜１５または５５〜５８の化合物の治療有効量を投与することを特徴とするＥＢＶ感染の治療方法。
52. 必要とする患者に請求項１〜１５または５５〜５８の化合物の治療有効量を投与することを特徴とするＥＢＶ関連リンパ腫または癌の治療方法。
53. 患者がＥＢＶ感染に罹病する可能性を防止または低減する方法であって、ＥＢＶ感染に罹病する危険のある患者に請求項１〜１５および５５〜５８の化合物の治療有効量を投与することを特徴とする方法。
54. 患者がＥＢＶ関連リンパ腫または癌に罹病する可能性を防止または低減する方法であって、治療を必要とする患者に請求項１〜１５および５５〜５８の化合物の治療有効量を投与することを特徴とする方法。
55. 構造式
    

    

    を有する化合物およびそのエピマー、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物または多形体であり、ここでＲ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄およびＲ₇は同じか異なり、かつＨ、アルキル、置換アルキル、アリル、置換アリル、アルキルシリル、複素環または置換複素環であり、ＹはＯ、Ｓ、ＮＨ、ＣＨ₂であるかまたは存在せず、ＵはＨ、（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキル、置換アルキル、アリル、置換アリル、アルキルシリル、複素環、置換複素環またはＷと一緒に環を含む窒素中に二重結合を形成し、Ｒ₅はＨ、ＯＨ、Ｏ（付加された炭素と一緒にカルボニル基を形成する）、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ_X基、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_X、または−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_X基であり、ここでＲ_XはＣ₂〜Ｃ₁₅アルキル、好ましくはＣ₂〜Ｃ₈アルキルであり、Ｒ₆はＨ、カルボキシル（カルボキシレート基）、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ_X基、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_X、または−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_X基であり、Ｒ_Xは上記した通りであり、ＸはＨまたはＯＲ_bであり、Ｒ_bはＨ、アルキル、置換アルキル、アリル、置換アリル、複素環、または置換複素環であることを特徴とする化合物。
56. 構造式
    

    

    を有した化合物、エピマー、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体であり、ここでＸはＨ、ＯＨ、Ｏ（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキル、Ｏ−ベンジル、トリアルキルシリル−Ｏまたはジアリルアルキルシリル−Ｏであることを特徴とする請求項５５に記載の化合物。
57. 構造式
    

    

    を有する化合物、エピマー、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体であり、ここでＲ₇はＨ、ＳｉＭｅ₃または
    

    

    であり、Ｒ_aはＨ、アルキル、置換アルキル、アリル、置換アリル、複素環または置換複素環であることを特徴とする請求項５５に記載の化合物。
58. 構造式
    

    

    を有した化合物およびそのエピマー、薬学的に受容可能な塩、溶媒和物またはその多形体であり、ここでＲ_dはＨまたはＣ₁−Ｃ₄アルキル基であることを特徴とする請求項５５に記載の化合物。
59. 腫瘍治療用の薬剤の製造のための請求項１〜１５および５５〜５８の化合物の使用方法。
60. 癌治療用の薬剤の製造のための請求項１〜１５および５５〜５８の化合物の使用方法。
61. 患者におけるＥＢＶ感染治療用の薬剤の製造のための請求項１〜１５および５５〜５８の化合物の使用方法。
62. 炎症または自己免疫障害治療用の薬剤の製造のための請求項１〜１５および５５〜５８の化合物の使用方法。

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