JP2005519669A - 生体組織検査用マイクロ装置及び分析方法 - Google Patents
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Abstract
Description
図4は、市販のカテーテルを使用したマルチ・ファイバー・サンプリングのための装置及びハウジングの改良型を示す。ファイバー24、26及び28はコーティング30、32及び34によりそれぞれコーティングされており、このコーティングとして、装置の吸収力を増加させるために同一の種のコーティングを使用することも可能であるが、或いは優先的に各ファイバーは生きている動物の体内において関心のある成分のみを認識する抗体等の異なる高選択的なコーティングを有することもできる。
(実施例1)
(ステンレス鋼ワイヤ上のポリピロール・コーティングの製法及び生体組織における使用)
(実施例3)
(ファイバー/CEによる全ブドウ・サンプリング:インタフェース及びオフ−分離管脱着)
(全ブドウ・サンプリング:オフ−分離管脱着ファイバー/CEインタフェース)
(実施例4)
ガソリンスタンド・エア内のBTEXの定量分析におけるこの方法を使用することにより満足な結果が得られた。段階的工程を経た標準液の導入はこの技術を分野適用においてさらに有用にする。この方法は、いくつかの点において標準液追加、また外部較正にも類似している。これは漏れ、汚染及び分析機器に導入するために標準液をファイバーにロードする時間のロスを検出するために使用することができる。
(標準液の注射器射出及び標準液がロードされたファイバーによるGCシステムへのVOCs標準液の導入の比較)
(いくつかのVOCsのGC分析においてこの技術により得られた較正カーブ)
メタノール:A = 767.69 C+ 3564,R = 0.9937 (1−a)
アセトン:A = 3234.8C +22693, R2 = 0.9952 (1−b)
ジクロロメタン:A = 1004.6C + 7271. 5, R2=0. 9965 (1−c)
クロロホルム:A = 980.46 C + 719.5,R2 = 0.9993 (1−d)
ベンゼン:A = 106.18 C-1069.5, R2=0. 995 (2−a)
トルエン:A = 326.42 C-4320.8,R = 0.9993 (2−b)
エチルベンゼン:A = 711. 53 C-6136.8, R2=0. 9958 (2−c)
p−キシレン:A = 868.43 C-10704,R2 = 0.9994 (2−d)
o−キシレン:A = 995.98 C-9588.1,R2 = 0.9972 (2−e)
ここに、Aはクロマトグラフィのピーク面積(計数)であり、CはVOCs標準ガスの濃度(g/L)である。
(コーティングをゼロ・エアに曝した後の抽出相コーティング上のVOCsの安定性)
(テトラクロロエチレンが内部標準液として使用された場合のBTEXの反応ファクタ)
ベンゼン:F= 4. 265t +1.301,Ruz = 0.9979 (5−a)
トルエン:F= 5. 776t + 0.402,R2 = 0.9981 (5−b)
エチルベンゼン:F = 4. 663t-0.031,ruz = 0.9996 (5−c)
p−キシレン:F = 4. 623t-0. 247,R2 = 0.9993 (5−d)
o−キシレン:F = 4. 767t-0. 703,R2 = 0.9963 (5−e)
ここに、Fは反応ファクタであり、tはBTEXの単位を分とする時間である。
(実施例5)
Claims (95)
- 動物の体内又は動物組織内の1つ又は複数の関心のある成分を測定又は識別する方法において、
前記動物の体内又は組織内にファイバーを配置するステップであって、前記ファイバーが前記動物の体内又は組織から前記1つ又は複数の関心のある成分を吸着するために少なくとも一部が抽出相でコーティングされており、前記抽出相が前記動物の体内又は組織内に位置付けられている前記ステップと、
所定の時間の間、前記1つ又は複数の関心のある成分を前記抽出相に吸着させるステップと、
前記動物の体内又は組織から前記ファイバーを取出すステップと、
前記1つ又は複数の関心のある成分を測定又は識別のために前記抽出相から分析器に脱着させるステップとからなる、
方法。 - 前記抽出相が前記1つ又は複数の関心のある成分を特定的に吸着する、請求項1の方法。
- 前記抽出相が前記ファイバーの末端に位置する、請求項1又は2の方法。
- 前記所定の時間が前記関心のある成分の平衡時間と同じである、請求項1から3のいずれかの方法。
- 前記所定の時間が前記関心のある成分の平衡時間よりも短い、請求項1から3のいずれかの方法。
- 前記1つ又は複数の関心のある成分がバクテリア、ウイルス、亜細胞要素、生体高分子、DNA、蛋白質、薬物、薬代謝物、ホルモン、ビタミン、環境汚染物質、化学薬品、及び細胞からなるグループから選択される、請求項1から5のいずれかの方法。
- 前記動物が単細胞動物、生卵子、マウス、ネズミ、ウサギ、犬、羊、豚、猿及び人間からなるグループから選択される、請求項1から6のいずれかの方法。
- 前記動物組織が単離された細胞及び器官からなるグループから選択される、請求項1から6のいずれかの方法。
- 前記ファイバーが血管内に配置され、前記1つ又は複数の関心のある成分が前記血管内を流れる血液から吸着される、請求項1から7のいずれかの方法。
- 前記ファイバーを配置するステップがカテーテルを使用してファイバーを血管内の適所に導くことからなる、請求項9の方法。
- (a)前記ファイバーが、前記動物の筋肉、脳、軟部組織又は器官の中に配置され、前記1つ又は複数の関心のある成分が間質液又は細胞内液から吸着されるか、(b)前記ファイバーが脊柱、頭蓋骨又は骨格の中に配置され、前記関心のある成分が骨、脊髄液を含む内液、骨髄又は脳漿から吸着されるか、又は(c)前記ファイバーが動物の細胞内に配置され、成分が細胞内液又は動物の単細胞の亜細胞要素から抽出される、請求項1から4のいずれかの方法。
- 前記ファイバーが配置される間、シールされた挿入端を有するハウジング内に置かれ、前記方法が前記ファイバーが一旦動物内に配置されると前記挿入端を開口し、前記動物内に前記抽出相を曝すステップを含む、請求項1の方法。
- 前記ファイバーが前記配置の間不活性であり、その後関心のある成分の吸着を可能にするために電位の変化又は光学的方法を使用して前記抽出相を活性化する、請求項1から11のいずれかの方法。
- 前記ファイバーが列又は束にされた複数のファイバーからなり、前記ファイバーが前記動物内において単一の箇所に配置される、請求項1から13のいずれかの方法。
- 前記ファイバーが列又は束にされた複数のファイバーからなり、前記ファイバーが前記動物内において1箇所以上に配置される、請求項1から13のいずれかの方法。
- 前記抽出相が、さらに、吸着ステップの間において前記抽出相に保持される、強く結合した検量体からなる、請求項1から15のいずれかの方法。
- 前記抽出相が、さらに、吸着ステップにおいて対流状態又は拡散係数によって前記抽出相から開放される弱く結合した検量体からなる、請求項1から15のいずれかの方法。
- 前記関心のある成分と反応する強く結合した試薬が抽出前に前記抽出相に加えられる、請求項1から17のいずれかの方法。
- 前記強く結合した試薬が蛍光タグで関心のある成分を分類する、請求項18の方法。
- 前記試薬が酵素であり、関心のある成分が酵素の基質である、請求項18の方法。
- 前記基体が蛋白質であり、前記酵素がファイバーに直接前記蛋白質を消化する、請求項20の方法。
- 前記試薬がトリプシン又はトリプシン共同因子である、請求項20の方法。
- 前記関心のある成分に反応する試薬が吸着ステップ後に抽出相に加えられる、請求項1から17のいずれかの方法。
- 前記試薬が噴霧又は浸けることにより前記抽出相上に加えられる、請求項23の方法。
- 前記試薬が蛍光タグで前記関心のある成分を分類する、請求項23又は24の方法。
- 前記試薬が酵素で前記関心のある成分が酵素の基質である、請求項23又は24の方法。
- 前記試薬がトリプシンで、前記関心のある成分が蛋白質であり、前記蛋白質が前記抽出相上で消化される、請求項26の方法。
- 前記関心のある成分がDNA又はDNAフラグメントであり、前記ファイバーが周期的に交互に繰返される冷却及び加熱を受け、前記試薬がポリメラーゼ及び核酸酸からなり、且つ、該方法が結果として抽出相上のポリメラーゼ連鎖反応(PCR)を起こす、請求項23又は24の方法。
- 前記試薬がマトリックス支援レーザー脱離イオン化法(MALDI)において利用されるイオン化マトリックスからなる、請求項18、23及び24のいずれかの方法。
- 前記関心のある成分を前記抽出相から分析器へ脱着させるために前記ファイバーのレーザー照射を可能にするため、吸着ステップ後、前記分析器内にファイバーを配置するステップを含む、請求項29の方法。
- 前記ファイバーが前記抽出相のコーティングされていない領域で照射される、請求項30の方法。
- 前記ファイバーが複数の光ファイバーからなる、請求項30の方法。
- 前記分析器が飛行時間型質量分析計(TOFMS)及びイオン移動性分析計からなるグループから選択される分析計である、請求項30の方法。
- 脱着ステップ前に前記ファイバーを直接質量分析計に導入するステップをさらに含む、請求項1から28のいずれかの方法。
- 前記ファイバーを質量分析計に導入するステップがナノスプレー針内の少ない溶剤容量への挿入、その後の脱着ステップ及び脱着された関心のある成分のエレクトロ・スプレーを行うことを含む、請求項34の方法。
- 前記動物の体内又は組織から前記ファイバーを取出した後、前記ファイバーを高電圧に曝し、その結果として前記関心のある成分が前記抽出相から直接前記質量分析器へフィールド脱着される、請求項34の方法。
- 前記脱着ステップが前記抽出相からの関心のある成分の分離、及びガスクロマトグラフ、液体クロマトグラフ、キャピラリ電気泳動機器、キャピラリ電気クロマトグラフィ機器及びマイクロ流体装置からなるグループから選択された前記分析器内における成分の測定又は識別からなる、請求項1から28のいずれかの方法。
- 前記分離が分離キャピラリ又は分析器のチャンネル内で直接おこる、請求項37の方法。
- 前記脱着ステップが脱着溶液が入った小穴カートリッジ内において遂行され、続いて分析器内で関心のある成分を自動化測定又は識別する、請求項1から28のいずれかの方法。
- 前記ファイバーが動物又は組織内からファイバーを取除くステップの直後に小穴カートリッジ内に配置され、カートリッジがその後自動化測定又は識別前にシールされる、請求項39の方法。
- 薬物動態学的検査に用いられる、請求項1から40のいずれかの方法。
- 少なくとも部分的にコーティングされた端を有する1つ又は複数のファイバーであって、前記端が1つ又は複数の関心のある成分を吸着するために少なくとも部分的に抽出相でコーティングされているファイバーと、
前記ファイバーの少なくとも部分的にコーティングされた端を動物の体内又は動物組織内の適所に導くための配置装置とからなる、
動物の体内又は動物組織から1つ又は複数の関心のある成分を吸着する装置。 - 前記ファイバーの直径がミリメートルからナノメートルの範囲である、請求項42の装置。
- 前記ファイバーが溶融石英、プラスチック、カーボン及び金属ワイヤからなるグループから選択された物質からなる、請求項42又は43の装置。
- 前記ファイバーが溶融石英から形成された複数の光ファイバーからなる、請求項44の装置。
- 前記ファイバーがチューブの内側面が前記抽出相でコーティングされた中空のチューブからなる、請求項42の装置。
- 前記チューブからサンプルを吸引又は放出するために該チューブと連通しているポンプをさらに有する、請求項46の装置。
- 前記ファイバーが内側面にコーティングされた前記抽出相を有する中空のチューブであり、前記チューブが一端においてシールされ、該チューブ中に流体を流すために該チューブと連通しているポンプを有し、かくして、前記チューブを消耗し、前記抽出相の表面積を増加させる、請求項42の装置。
- 前記流体がガスである、請求項48の装置。
- さらに、保護及び簡単なハンドリングのために前記ファイバーを囲むシースを含む、請求項42の装置。
- 前記抽出相が生物学的適合性を有する、請求項42から50のいずれかの装置。
- 前記ファイバーが、さらに、少なくとも部分的に生物学的適合性を有する保護層でコーティングされている、請求項42から51のいずれかの装置。
- 前記生物学的適合性を有する保護層が前記抽出相を囲む、請求項52の装置。
- 前記生物学的適合性を有する保護層がポリピロール又は誘導されたセルロースからなる、請求項52又は53の装置。
- 前記抽出相が置換又は非置換したポリ(ジメチルシロキサン)、ポリアクリレート、ポリ(エチレングリコール)及びポリピロールからなるグループから選択されたポリ合成からなる、請求項52又は53の装置。
- 前記抽出相がその表面上の生体親和力剤からなり、前記生体親和力剤が精選された穴、分子認識部位、分子インプリントポリマー、及び固定化抗体からなるグループから選択される、請求項52又は53の装置。
- 前記抽出相が置換又は非置換のポリ(ジメチルシロキサン)、ポリアクリレート、ポリ(エチレングリコール)及びポリピロールからなるグループから選択されたポリ成分からなり、またさらに、前記抽出相がその表面上の生体親和力剤からなり、前記生体親和力剤が精選された穴、分子認識部分、分子インプリントポリマー、及び固定された抗体からなるグループから選択される、請求項42から54のいずれかの装置。
- 前記抽出相がMALDI−TOFMS分析の抽出及びイオン化マトリックスである、請求項42から57のいずれかの装置。
- 前記抽出相が検量体分子を含む、請求項42から58のいずれかの装置。
- 前記抽出相が強く結合した試薬を含む、請求項42から59のいずれかの装置。
- 前記試薬が蛍光分類部分及び酵素からなるグループから選択される、請求項60の装置。
- 前記試薬がトリプシン及びポリメラーゼからなるグループから選択された酵素からなる、請求項61の装置。
- 前記ファイバーが動物の体内又は動物組織内に適当に配置されている際にファイバーを曝すために開口されるように一端が閉じられたハウジング内に収納されている、請求項42から62のいずれかの装置。
- 前記ハウジングがシールリーフ構造により一端が閉じられたチューブである、請求項63の装置。
- 前記配置装置がカテーテルからなる、請求項42から64のいずれかの装置。
- 前記配置装置がx−y−zマイクロ配置ステージからなる、請求項42から64のいずれかの装置。
- 前記ファイバーが動物の体内又は動物組織内において1箇所以上に配置されるために複数のファイバーからなる、請求項42から66のいずれかの装置。
- 前記複数のファイバーがその表面に同じ前記抽出相をコーティングされている、請求項67の装置。
- 前記複数のファイバーの少なくとも2つがその表面に異なる前記抽出相をコーティングされている、請求項67の装置。
- 前記複数のファイバーの少なくとも2つが前記異なる関心のある成分を特定的に吸着するための抽出相を有する請求項69の装置。
- 前記配置装置が自動化システムからなる、請求項42から70のいずれかの装置。
- 前記自動化システムが動物又は動物組織に装着可能である、請求項71の装置。
- 前記配置装置が、さらに、前記ファイバーを前記抽出相からの関心のある成分を脱着させるために分析器内に配置するために使用される、請求項42から72のいずれかの装置。
- 前記配置装置が、さらに、前記ファイバーを直接分離キャピラリ又はチャンネル内に配置するために使用される、請求項42から72のいずれかの装置。
- 前記配置装置が、さらに、前記ファイバーを前記抽出相からの関心のある成分の脱着を容易にするレーザー光線に連結するのに使用される、請求項42から72のいずれかの装置。
- 前記配置装置が前記関心のある成分の分析器への脱着を容易にする、請求項75の装置。
- さらに、前記ファイバーの少なくとも部分的にコーティングされた端における動きを生成する撹拌機を有する、請求項42の装置。
- 前記撹拌機が生成する動きが前記ファイバーに対して軸方向又は水平である、請求項77の装置。
- 前記ファイバーがその内側面にコーティングされた前記抽出相を有する中空のチューブからなり、前記撹拌機が前記チューブ内にサンプルを吸引させるように働く、請求項77の装置。
- 前記撹拌機が前記チューブ内にサンプルを吸引するように該チューブに働きかける圧力差を生成する、請求項79の装置。
- 前記撹拌機が膨張可能なバルーンからなる、請求項77の装置。
- 前記装置が薬物動態学的研究に使用される、請求項42から81のいずれかの装置。
- 動物の体内又は動物組織内の1つ又は複数の関心のある成分を測定又は識別する方法において、前記方法が請求項42の方法で動物の体内又は相物組織内に装置を配置し、所定の時間前記1つ又は複数の関心のある成分を前記装置の抽出相に吸着し、前記動物の体内又は組織から装置を取出し、前記抽出相から前記1つ又は複数の関心のある成分を測定又は識別のために分析器へ脱着するステップからなる、動物の体内又は動物組織内の1つ又は複数の関心のある成分を測定又は識別する方法。
- 前記ファイバーが光ファイバーであり、方法が生動物の体内において直接行われる、請求項83の方法。
- さらに、前記抽出相に弱く結合された前記選択された化合物を含むことにより、選択された化合物を前記動物又は組織に送込むステップを含む、請求項83の方法。
- 所定の時間後、前記抽出相が測定のために残留している選択された化合物を脱着するため分析器へ導入される、請求項85の方法。
- 所定の時間後、前記抽出相が測定又は識別のために前記選択された化合物の代謝物を脱着するため分析器へ導入される、請求項85の方法。
- 前記ファイバーが配置の間一端で閉じられているハウジングにより守られており、その後、前記動物の体内又は動物組織内に前記ファイバーを曝すために前記ハウジングを開口する、請求項83の方法。
- さらに、前記ファイバーを前記動物の体内又は動物組織内において撹拌するステップからなる、請求項83の方法。
- 前記撹拌ステップが前記ファイバーの軸方向又は水平移動を生成する、請求項89の方法。
- 前記撹拌ステップが圧力差によりサンプルを中空ファイバーに入れる働きをする、請求項89の方法。
- 薬物動態学的研究に使用される、請求項83から91のいずれかの方法。
- マルチウェルプレートの複数の穴内に入っている液体サンプル中の1つ又は複数の関心のある成分を測定又は識別する方法において、
前記方法が複数のファイバーの末端を同時に前記複数の穴にそれぞれ沈められ、液体サンプルから関心のある成分を吸着させるために各ファイバーの末端が少なくとも部分的に抽出相でコーティングされているステップと、
所定の時間、前記関心のある成分を前記抽出相に吸着させるステップと、
穴から同時に前記ファイバーを取出すステップと、
脱着のために前記抽出相を分析器へ配置し、前記関心のある成分の測定又は識別をするステップとからなる、
方法。 - 前記分析器がMALDI分析器及びマルチチャンネル・マイクロ機械・マイクロ流体装置からなるグループから選択される、請求項93の方法。
- 前記マルチウェルプレートの複数の穴内に入った液体サンプルから1つ又は複数の関心のある成分を測定又は識別する請求項93の方法を用いた装置において、
それぞれが少なくとも部分的にコーティングされた末端を有し、前記端が前記関心のある成分を吸着するために少なくとも部分的に前記抽出相でコーティングされている複数のファイバーと、
前記ファイバーを前記穴から取出し、前記ファイバーを分析器へ配置するために前記マルチウェルプレートの複数の穴内の液体に沈む箇所に前記ファイバーのコーティングされた末端を導くための配置装置とからなる、
装置。
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