JP2005126402A

JP2005126402A - Ｃｏｍｔ阻害剤

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Publication number: JP2005126402A
Application number: JP2003394736A
Authority: JP
Inventors: Katsutoshi Terasawa; 捷年寺沢; Isao Adachi; 伊左雄足立; Atsushi Kato; 敦加藤
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2003-10-21
Filing date: 2003-10-21
Publication date: 2005-05-19

Abstract

【課題】ＣＯＭＴ阻害作用を有する生薬を探索し、副作用の少ないＣＯＭＴ阻害剤を提供する。
【解決手段】川きゅう及び桃仁の少なくとも１種を有効成分として含有するＣＯＭＴ阻害剤。
【選択図】なし

Description

本発明は、カテコール−Ｏ−メチル基転移酵素（ＣＯＭＴ）阻害作用を有する生薬に関し、さらに詳しくは、当該生薬を有効成分として含有するＣＯＭＴ阻害剤に関する。

錐体外路系の機能障害であるパーキンソン病は、１８１７年にロンドンの外科医ジェームズ・パーキンソン（ＪａｍｅｓＰａｒｋｉｎｓｏｎ）によって初めて報告された病気で、脳血管障害、老年期痴呆と並ぶ日本の三大神経疾患といわれている。日本の有病率は人口１０万人当たり５０〜１００人であり、年齢６５歳以上では約１５０人にも達する（非特許文献１参照）。さらに今後の高齢化に伴い患者数の増加が予想される。

パーキンソン病は、中脳黒質の進行性の変性により黒質・線条体系のドーパミン（ｄｏｐａｍｉｎｅ，以下適宜「ＤＡ」と略記する）神経細胞が変性・脱落し、線条体のＤＡ含量が正常値の２０％以下に低下すると発症する。発症はきわめて緩慢で、症状は多彩であり、運動系障害、精神系障害、自律神経系障害の三群に分けられ、四大症状として振戦、固縮、動作緩慢、姿勢保持障害が挙げられる。パーキンソン病の病変の主体である黒質・線条体系のＤＡ神経細胞が、変性・脱落する病因は不明であり、その症状を抑える対症療法にとどまっている（非特許文献２参照）。

治療には様々な薬物が使われており、一般的にはＤＡの前駆物質であるＬ−３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン（Ｌ−３，４−ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ，以下適宜「Ｌ−ＤＯＰＡ」と略記する）を投与し、脳内のＤＡを補充する方法がとられている。しかしながら、Ｌ−ＤＯＰＡを長期間大量に使用することによりｗｅａｒｉｎｇ−ｏｆｆ現象、ｏｎ−ｏｆｆ現象、不随意運動や精神症状など多くの副作用が現出し、ｗｅａｒｉｎｇ−ｏｆｆ現象に至ってはＬ−ＤＯＰＡの服用開始から５年で約４３％の患者に発現するという報告があり（非特許文献３参照）、Ｌ−ＤＯＰＡ補充療法における大きな問題点となっている。よって、Ｌ−ＤＯＰＡ補充療法は副作用の軽減を目的としてＬ−ＤＯＰＡ単独ではなく、他の薬剤との併用投与が行われている（非特許文献４参照）。併用薬剤としては、ドーパ脱炭酸酵素阻害薬（ＤＣＩ）、アマンタジン（ＤＡ放出促進薬）、ＤＡアゴニスト（ＤＡ受容体刺激剤）、抗コリン薬、ドロキシドパ、Ｂ型モノアミン酸化酵素（ＭＡＯ−Ｂ）阻害薬、カテコール−Ｏ−メチル基転移酵素（ｃａｔｅｃｈｏｌ−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，以下適宜「ＣＯＭＴ」と略記する）阻害剤がある。ＤＣＩは末梢でのＬ−ＤＯＰＡからＤＡへの代謝を抑制するために一般的にＬ−ＤＯＰＡとの合剤として経口投与されている。しかし、この合剤服用患者においては、ＤＣＩの作用によりＬ−ＤＯＰＡからＤＡへの代謝が抑制されているため、活性の保たれているＣＯＭＴによる代謝が亢進した状態になっている。よって、現在ＣＯＭＴ阻害剤は大きな期待を集めている。

ここで、ＣＯＭＴはカテコラミン（ｃａｔｅｃｈｏｌａｍｉｎｅ）の代謝酵素の一つであり、ＣＯＭＴ阻害剤は、末梢では投与されたＬ−ＤＯＰＡから３−Ｏ−メチルＤＯＰＡへの代謝を抑制して血管・脳関門を通過するＬ−ＤＯＡＰ量を増加させ、さらに中枢ではＤＡの代謝量を抑制し、Ｌ−ＤＯＰＡの作用時間を延長することを目的とし、ｗｅａｒｉｎｇ−ｏｆｆ現象の改善に有効である（非特許文献５参照）。

これまでにＣＯＭＴ阻害物質としては、ｔｏｌｃａｐｏｎｅ（商品名：Ｔａｓｍａｒ）（非特許文献６参照）、ｅｎｔａｃａｐｏｎｅ（商品名：Ｃｏｍｔａｎ）（非特許文献７参照）が合成されており、諸外国において使用されているが、Ｔａｓｍａｒ（商品名）は頻度は低いものの、重篤な肝障害が報告されている。

能勢隆之著「パーキンソン病、難病の最新情報−免疫から臨床・ケアまで−」南山堂出版、２００１年、ｐ１６９小川紀雄著「脳の老化と病気」講談社出版、１９９９年、ｐ１３８水野美邦著「パーキンソン病に対するｌｅｖｏｄｏｐａ長期治療の結果と問題点」日内医誌、１９８８年、ｐ５５３ＭａｔｔｈｉａｓＣ．Ｋｕｒｔｈ，Ｃｈａｒｌｅｓ，Ｈ．Ａｌｄｅｒ．，：ＣＯＭＴｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ；ＡｎｅｗｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｔｒａｔｅｇｙｆｏｒＰａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓｄｉｓｅａｓｅ：Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，５０，３１９９８ＰｅｒｅｚＲＡ．Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ−ＡｌｖａｒｅｚＥ．ＮｉｅｔｏＯ．ＰｉｅｄｒａｆｉｔａＦＪ．：Ｋｉｎｅｔｉｃｓｏｆｔｈｅｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅｔｉｇｈｔ−ｂｉｎｄｉｎｇｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｐｉｇｌｉｖｅｒｃａｔｅｃｈｏｌ−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｂｙ［２−（３，４−ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ−２−ｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌ）ｖｉｎｙｌ］ｐｈｅｎｙｌｋｅｔｏｎｅ．Ｊ．Ｅｎｚ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ，８，１２３−１３１，１９９４．ＺｕｒｃｈｅｒＧ，ＫｅｌｌｅｒＨＨ，ＫｅｔｔｌｅｒＲ，ＢｏｒｇｕｌｙａＪ，ＢｏｎｅｔｔｉＥＰ，ＥｉｇｅｎｍａｎｎＲ，ＤａＰｒａｄａＭ．：Ｒｏ４０−７５９２，ａｎｏｖｅｌ，ｖｅｒｙｐｏｔｅｎｔ，ａｎｄｏｒａｌｌｙａｃｔｉｖｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｃａｔｅｃｈｏｌ−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ：ａｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｓｔｕｄｙｉｎｒａｔｓ．ＡｄｖＮｅｕｒｏｌ．５３：４９７−５０３，１９９０．ＳａｖｏｌａｉｎｅｎＪ，ＬｅｐｐａｎｅｎＪ，ＦｏｒｓｂｅｒｇＭ，ＴａｉｐａｌｅＨ，ＮｅｖａｌａｉｎｅｎＴ，ＨｕｕｓｋｏｎｅｎＪ，ＧｙｎｔｈｅｒＪ，ＭａｎｎｉｓｔｏＰＴ，ＪａｒｖｉｎｅｎＴ．：Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄｉｎｖｉｔｒｏ／ｉｎｖｉｖｏｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｎｏｖｅｌｏｒａｌＮ−ａｌｋｙｌ−ａｎｄＮ，Ｎ−ｄｉａｌｋｙｌ−ｃａｒｂａｍａｔｅｅｓｔｅｒｓｏｆｅｎｔａｃａｐｏｎｅ．ＬｉｆｅＳｃｉ．６７，２０５−１６，２０００．ＢｏｈｒｍａｎｎＨ．，Ｓｔａｈｌ，Ｒ．，Ｍｉｔｓｉｈａｓｈｉ，Ｈ．：ＳｔｕｄｉｅｓｏｆｔｈｅｃｏｎｓｉｔｕｅｎｔｓｏｆＵｍｂｅｌｌｉｆｅｒａｅＰｌａｎｔｓ．ＸＩＩＩ．ＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｓｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅＣｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆＣｎｉｄｉｕｍｏｆｆｉｃｉｎａｌｅＭａｋｉｎｏ：Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１５，１６０６，１９６７．山岸喬、金島弘恭：センキュウの成分研究。Ｓｅｎｋｙｕｎｏｌｉｄｅの構造ならびに関連Ｐｈｔｈａｌｉｄｅのガスクロマトグラフィー・マススペクトロメトリーについて：薬学雑誌、９７，２３７、１９７７．太田節子、古川真智子、篠田雅人：放射線障害防護薬剤に関する研究（第２３報）フェルラ酸関連化合物の放射線障害防護効力：薬学雑誌，４，７９３，１９８４Ｏｚａｋｉ，Ｙ：Ａｎｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｆｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｐｙｒａｚｉｎｅａｎｄｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ，Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．４０，９５４，１９９２柴田丸、桜井信子、小野田真：生薬・升麻の薬理学研究（第２報）サラシナショウマの抗炎症作用：薬学雑誌，９７，９１１，１９７７，尹鐘朱：抗血栓中薬の研究：現代東洋医学，１４，１２０，１９９３Ｐａｎ，Ｊ．Ｘ．，Ｗａｎｇ，Ｗ．Ｆ．，Ｌｉｎ，Ｗ．Ｚ．Ｌｕ，Ｃ．Ｙ．，Ｈａｎ，Ｚ．Ｈ．，Ｙａｏ，Ｓ．Ｄ．Ｌｉｎ，Ｎ．Ｙ：ＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｏｆｈｙｄｒｏｘｙｃｉｎｎａｍｉｃａｃｉｄｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓｗｉｔｈｔｈｅＣｌ３ＣＯＯｒａｄｉｃａｌ：ａｐｕｌｓｅｒａｄｉｏｌｙｓｉｓｓｔｕｄｙ：ＦｒｅｅＲａｄｉｃａｌＲｅｓｅｒｃｈ，３０，２４１，１９９９Ｑｉａｏ，Ｚ．，Ｃｈｅｎ，Ｒ．：ＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆｐｒｏｐｏｌｉｓｆｒｏｍＨｅｎａｎ：ＣｈｉｎａＪ．Ｃｈｉｎ．Ｍａｔ．Ｍｅｄ．１６，４８１，１９９１Ｈｕｄｓｏｎ，Ｅ．Ａ．Ｄｉｎｈ，Ｐ．Ａ．Ｋｏｋｕｂｕｎ，Ｔ．，Ｓｉｍｍｏｎｄｓ，Ｍ．Ｓ．，Ｇｅｓｃｈｅｒ，Ａ．：Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｐｏｔｅｎｔｉａｌｌｙｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅｐｈｅｎｏｌｓｉｎｅｘｔｒａｃｔｓｏｆｂｒｏｗｎｒｉｃｅｔｈａｔｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｇｒｏｅｔｈｏｆｈｕｍａｎｂｒｅａｓｔａｎｄｃｏｌｏｎｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓ：ＣａｎｃｅｒＥｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙＢｉｏｍａｒｋｅｒｓａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，９，１１６３，２０００Ｓａｉｔｏ，Ｎ．，Ｔａｔｓｕｚａｗａ，Ｆ．，Ｈｏｎｇｏ，Ａ．，Ｗｉｎ，Ｋ．Ｗ．，Ｙｏｋｏｉ，Ｍ．，Ｓｈｉｇｉｈａｒａ，Ａ．，Ｈｏｎｄａ，Ｔ．，：Ａｃｙｌｔｅｄｐｅｌａｒｇｏｎｉｄｉｎ３−ａｍｂｕｂｉｏｓｉｄｅ−５−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅｓｉｎＭａｔｔｈｉｏｌａｉｎｃａｎａ：Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，４１，１６１３，１９９６Ｋｏｓｕｇｅ，Ｔ．，Ｉｓｈｉｄａ，Ｈ．，Ｉｓｈｉｉ，Ｍ：Ｓｔｕｄｉｅｓｏｎａｃｔｉｖｅｓｕｂｓｔａｎｃｅｓｉｎｔｈｅｈｅｒｂｓｕｓｅｄｆｏｒｏｋｅｔｓｕ（"ｓｔａｇｎａｎｔｂｌｏｏｄ"）ｉｎＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅ．ＩＩ．Ｏｎｔｈｅａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｖｅｐｒｉｎｃｉｐｌｅｉｎｐｅｒｓｉｃａｅｓｅｍｅｎ．：Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．３３，１４９６，１９８５鈴木優、尾崎幸鉱、原田正敏：トウキ、シャクヤクのウサギ生体子宮に対する作用：日薬理誌，８２，１６４，１９８５王昌恩、矢野真吾、渡辺和夫、田中治、庄司順三：駆お血生薬の薬理作用：桃仁および牡丹皮の抽出物と成分の摘出心房並びに血管標本に対する作用：和漢医薬誌，１０３，９３７，１９８３

本発明は、前記有機合成されたＣＯＭＴ阻害物質とは別に、生薬のような天然物にもＣＯＭＴ阻害物質が存在するか否かを検討し、副作用の少ないＣＯＭＴ阻害剤を提供することを課題とする。

本発明者らは、前記課題を解決すべく生薬の熱水可溶性画分に着目してスクリーニングを行った。川きゅう（センキュウ）をはじめとする１９種の生薬水溶性画分のＣＯＭＴ阻害活性を測定した結果、川きゅう及び桃仁に強い阻害活性が現れ、濃度依存性の阻害作用が再現性良く認められることを見出した。

かかる知見に基づく本発明の一つの態様は、川きゅう及び桃仁の少なくとも１種を有効成分として含有するＣＯＭＴ阻害剤である。

また、本発明の他の態様は、川きゅう及び桃仁の少なくとも１種を有効成分として含有するパーキンソン病の予防又は治療薬である。

本発明により、Ｌ−ＤＯＰＡによるｗｅａｒｉｎｇ−ｏｆｆや不随意運動などの副作用を軽減してパーキンソン病の治療を行うことができるＣＯＭＴ阻害剤の提供が可能となった。

本発明者らは、さらに川きゅう熱水抽出エキスからのＣＯＭＴ阻害物質の単利を目的とし、分画、精製、構造解析を行い、川きゅうより単離したｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ、５−ｈｙｄｒｏｘｙｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ、ｓｉｎａｐｉｃａｃｉｄがＣＯＭＴ阻害活性を有するとの知見を得た。

かかる知見に基づく本発明の他の態様は、ｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ、５−ｈｙｄｒｏｘｙｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ及びｓｉｎａｐｉｃａｃｉｄの少なくとも１種を含有するＣＯＭＴ阻害剤である。

本発明の他の態様は、ｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ、５−ｈｙｄｒｏｘｙｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ及びｓｉｎａｐｉｃａｃｉｄの少なくとも１種を含有するパーキンソン病の予防又は治療薬である。

本発明のおける「ＣＯＭＴ」は、カテコール−Ｏ−メチル基転移酵素（ｃａｔｅｃｈｏｌ−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ）の略記であり、本発明はこのＣＯＭＴを阻害して、パーキンソン病の予防又は治療に供することを特徴とする。

本発明における「川きゅう（センキュウ）」は、古くから婦人用薬の主薬として用いられており、貧血や虚血性の末梢血液循環を改善することが知られている局方生薬である。川きゅうには、代表的な薬理作用を示す成分としてｐｈｔｈａｌｉｄｅの誘導体が含有されていることが知られている（非特許文献８参照）。

本発明において「川きゅう（センキュウ）」は、原末のみならず、エキス等の抽出物であってもよく、その形態には特に限定はない。川きゅうの有効投与量（原生薬換算量）は病状により異なるが、おおよそ成人に対して１日当たり１．０〜３．０ｍｇであり、好ましくは２．０〜３．０ｍｇである。

本発明における「桃仁（トウニン）」もまた、婦人用薬の主薬として用いられ、末梢血液循環の改善、更年期障害の改善や瀉下効果を期待し処方に配合される。

本発明において「桃仁」は、原末のみならず、エキス等の抽出物であってもよく、その形態には特に限定はない。桃仁の有効投与量（原生薬換算量）は病状により異なるが、おおよそ成人に対して１日当たり２．０〜５．０ｍｇであり、好ましくは４．０〜５．０ｍｇである。

本発明において川きゅう及び桃仁は各々単独で配合しても、２種を組み合わせて配合してもよい。

本発明におけるＣＯＭＴ阻害剤は、例えば、川きゅうまたは桃仁の熱水抽出エキス等を含有する内服固形製剤（錠剤、散剤など）を調製し、１日１乃至数回に分けて患者に経口投与することができる。

以下に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明する。

［ＣＯＭＴの調製］
Ｗｉｓｔａｒ系雄性ラット（８週齢）をエーテル麻酔下で開腹し、下行大静脈より脱血死させた。肝臓を摘出し、それを細切して４倍量のＫＣｌ等張液を加え、ホモジナイズした。得られたホモジネートを４，２００ｘｇで２０分間遠心分離し、さらにその上清を７８、０００ｘｇで３０分間遠心分離し上清を得た。その上清に１Ｍ酢酸をｐＨ５．０になるように添加し、１０分放置後に４，７００ｘｇで１０分間遠心分離し上清を得た。上清３００ｍＬに対し硫酸アンモニウム５２ｇ（３０％飽和溶液）を加え４，７００ｘｇで１０分間遠心分離した。沈殿物を除去し、上清に硫酸アンモニウム３４ｇ（５０％飽和溶液）を加え４，７００ｘｇで１０分間遠心分離することによりＣＯＭＴ画分（沈殿物）を得た。これらの操作は０−５℃で行った。

［ＣＯＭＴ阻害活性の測定］
１００ｍＬリン酸緩衝液（ｐＨ７．８，１７５μＬ）、５００ｍＬＭｇＳＯ_４（６．０μＬ）、５ｍＭＳ−ａｄｅｎｏｓｙｌ−ｌ−ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ（３０μＬ）、６ｍＭｌ−ｅｐｉｎｅｐｈｉｒｉｎｅ（７０μＬ）、ＭｅＯＨで希釈したサンプル溶液（１０μＬ）、ＣＯＭＴ（１０μＬ）を混合し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。反応溶液に５００ｍＭ硼酸緩衝液（ｐＨ１３．０，１５０μＬ）、２％ｉｓｏａｍｙｌａｌｃｏｈｏｌを含むｄｉｃｈｌｏｒｏｅｔｈａｎｅ（９．０ｍＬ）を加えて反応を停止させた後、４，２００ｘｇ、４℃で２０分間遠心分離を行った。有機相８ｍＬを採取し０．１Ｍ塩酸（２．７ｍＬ）を加えて４、２００ｘｇ、４℃で２０分間遠心分離を行い上清を得た。生成したｍｅｔａｎｅｐｈｒｉｎｅ量を蛍光強度計（励起波長：２８５ｎｍ，蛍光波長：３３５ｎｍ）を用いて測定した。ＣｏｎｔｒｏｌはＭｅＯＨをサンプル溶液の代わりに用いた。酵素阻害率は、Ｃｏｎｔｒｏｌとの比較で算出した。

［ＣＯＭＴ阻害活性を指標としたスクリーニング］
測定には、以下の１９種類の生薬を用いた。
（測定に用いた生薬）
オウゴン、川きゅう（センキュウ）、桃仁、芍薬、桔梗、乾姜、ビャクジュツ、オウギ、ブクリョウ、柴胡、タイソウ、ソウジュツ、牛膝、甘草、杏仁、サンシュユ、厚朴、地黄、枳実。

上記各生薬熱水可溶性画分を終濃度０．５６ｍｇ／ｍＬになるように調製してＣＯＭＴ阻害活性を測定した。その中でＣＯＭＴ活性を８０％以下まで阻害したオンゴン、センキュウ、芍薬、桃仁についてさらに濃度を変えて測定を行ったところ、センキュウ、桃仁に強い阻害活性が濃度依存的に認められた（表１参照）。

［桃仁に含まれるＣＯＭＴ阻害成分］
桃仁の主成分であるａｍｙｇｄａｌｉｎや脂肪油であるｏｌｅｉｃａｃｉｄ、ｐａｌｍｉｔｉｃａｃｉｄなどには阻害活性は認められなかった。また阻害活性の反応系にＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）を添加し、非特異性の阻害成分の有無を確認したが、ＢＳＡ添加によっても桃仁熱水可溶性画分の阻害活性は低下しなかった。

［センキュウに含まれるＣＯＭＴ阻害成分の単離及び同定］
単離された３種類の活性成分はＵＶ吸収、ヨウ素発色、塩化第二鉄反応、Ｇｉｂｂｓ反応で陽性であり、^１３Ｃ−ＮＭＲよりそれらはｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ、５−ｈｙｄｒｏｘｙｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ並びにｓｉｎａｐｉｃａｃｉｄと同定された。センキュウからのｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄの単離は報告されているが、５−ｈｙｄｒｏｘｙｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ．ｓｉｎａｐｉｃａｃｉｄについては既知物質ではあるがセンキュウからの単離は報告されていない。

［センキュウ由来ＣＯＭＴ阻害成分の阻害活性］
Ｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ、５−ｈｙｄｒｏｘｙｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ、ｓｉｎａｐｉｃａｃｉｄのＣＯＭＴに対するＩＣ_５０を測定したところ、１．６９ｍＭ、２２μＭ、１．２２ｍＭであった。ＣＯＭＴはカテコールアミン基質のメタ位のＯＨ基にメチル基を転移させるためメタ位にＯＨ基のある５−ｈｙｄｒｏｘｙｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄが３つのｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐａｎｏｉｄの中で最も阻害活性が強かったと思われる。また、５−ｈｙｄｒｏｘｙｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄに関しては阻害様式をＬｉｎｅｗｅａｖｅｒ−ＢｕｒｋＰｌｏｔを作成して検討したところｅｐｉｎｅｐｈｅｒｉｎｅを基質としたときは拮抗阻害型、Ｓ−ａｄｅｎｏｓｙｌ−ｌ−ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅを基質としたときは非拮抗阻害型であることが判明した。阻害定数（Ｋｉ）は４３．２μＭであった。

これがＣＯＭＴに対して特異的に作用するものか確かめるためにＣＯＭＴ以外の酵素のａｌｄｏｓｅｒｅｄｕｃｔａｓｅ、ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ、β−ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ、ＭＡＯに対する阻害効果について検討を行った。

Ａｌｄｏｓｅｒｅｄｕｃｔａｓｅは、グルコース代謝副路であるポリオール代謝経路を構成する酵素でグルコースをソルビトールに変換する反応おいて触媒の役割を果たす。阻害剤としてエパルレスタットがある。Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅはヒトの赤血球、骨、血小板、白血球、腎臓、肝臓等多くの臓器に広く存在し、リン酸エステルを加水分解してリンを遊離する酵素で阻害剤にはｄｙｓｉｄｉｏｌｉｄｅ、ＲＫ−６８２、ＲＷＪ−６０４７５などがある。ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅは小腸に存在しており、糖類を分解する。阻害剤はアガルボース、ボグリボースがあり、糖の消化吸収を遅らせることにより高血糖を抑制する。ＭＡＯは生体内に広く分布しており、モノアミンの酸化的脱アミノ反応を触媒する酵素で、生体内のアミン代謝に関与している。また、ＣＯＭＴと同じくＤＡ、ｅｐｉｎｅｐｈｒｉｎｅ、ｎｏｒｅｐｉｎｅｐｈｒｉｎｅも代謝する。塩酸セレギニン、塩酸サフラジン、塩酸デプレニールなどがＭＡＯを阻害する。

この４つの酵素全てに対して単離された活性因子は阻害を示さなかったため、ＣＯＭＴを特異的に阻害すると考えられた。また、これまでにｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ、５−ｈｙｄｒｏｘｙｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ、ｓｉｎａｐｉｃａｃｉｄがＣＯＭＴを阻害するという報告はない。

前記検討により、センキュウより得られたｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ，５−ｈｙｄｒｏｘｙｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ、ｓｉｎａｐｉｃａｃｉｄがラット肝由来ＣＯＭＴに対し阻害活性を持つことが判明した。ｒｅｒｕｌｉｃａｃｉｄの薬理作用として放射線皮膚障害防護効力（非特許文献９参照）、子宮運動抑制（非特許文献１０参照）、抗炎症・鎮痛作用（非特許文献１１参照）、血小板凝集抑制作用（非特許文献１２参照）がある。また他の生薬では升麻，黄連，当帰，阿魏に含有されているとの報告がある。Ｓｉｎａｐｉｃａｃｉｄは抗酸化作用（非特許文献１３参照）、抗菌作用（非特許文献１４参照）、抗腫瘍作用（非特許文献１５参照）が報告されており、Ｍａｔｔｈｉｏｌａｉｎｃａｎａ（非特許文献１６参照）、Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａより単離されている。５−ｈｙｄｒｏｘｙｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄについての生理活性、植物からの単離の報告はない。

ツムラ医療用漢方製剤の適応のある漢方製剤中のセンキュウを含む漢方製剤の割合を各診療科ごとにみたところ、産婦人科、皮膚科、精神神経科がセンキュウを含む漢方製剤の割合が比較的高い結果となった。精神神経科においては、神経伝達物質のＣａｔｅｃｈｏｌａｍｉｎｅに関連するであろう疾患も多いため、センキュウが何らかの関与をしている可能性がある。

これらｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ、５−ｈｙｄｒｏｘｙｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ、ｓｉｎａｐｉｃａｃｉｄはＣＯＭＴ阻害薬のリード化合物となる可能性があり、化学修飾を行い誘導体を合成することなどによって、より強力なＣＯＭＴ阻害剤を開発することが可能と思われる。そのことは、Ｌ−ＤＯＰＡの脳内移行量を増加させ、Ｌ−ＤＯＰＡ投与量を減少させることにつながり、Ｌ−ＤＯＰＡによるｗｅａｒｉｎｇ−ｏｆｆや不随意運動などの副作用を軽減してパーキンソン病の治療を行う可能性を示唆するものである。

また、センキュウと同様にラット肝由来ＣＯＭＴ阻害活性を持つことが判明した桃仁は、これまで薬理作用として血管凝固抑制作用（非特許文献１７参照）、子宮収縮作用（非特許文献１８参照）、血液降下作用（非特許文献１９参照）などが報告されている。しかしながら、今後は副作用の少ないＣＯＭＴ阻害剤、パーキンソン病治療薬としての使用が期待される。

Claims

川きゅう及び桃仁の少なくとも１種を有効成分として含有するＣＯＭＴ阻害剤。
川きゅう及び桃仁の少なくとも１種を有効成分として含有するパーキンソン病の予防又は治療薬。