JP2004526733A - 強力な細胞接着阻害剤としての置換ｎ−アリールスルホニル−プロリン誘導体 - Google Patents

強力な細胞接着阻害剤としての置換ｎ−アリールスルホニル−プロリン誘導体 Download PDF

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Abstract

式（Ｉ）の化合物はＶＬＡ−４および／またはα４／β７の拮抗薬であることから、細胞接着および細胞接着が介在する病気の阻害または予防において有用である。これらの化合物は医薬組成物に製剤することができ、ＡＩＤＳ関連痴呆、アレルギー性結膜炎、アレルギー性鼻炎、アルツハイマー病、喘息、アテローム性動脈硬化、自己骨髄移植、ある種の中毒性神経炎および免疫に基づく神経炎、接触皮膚過敏症、潰瘍性大腸炎およびクローン病などの炎症性腸疾患、炎症性肺疾患、ウィルス感染の炎症性続発症、髄膜炎、多発性硬化症、多発性骨髄腫、心筋炎、臓器移植、乾癬、肺線維症、再狭窄、網膜炎、慢性関節リウマチ、敗血症性関節炎、卒中、腫瘍転移、ブドウ膜炎およびＩ型糖尿病の治療での使用に好適である。

Description

【技術分野】
【０００１】
本発明の化合物は、ＶＬＡ−４インテグリン（「最晩期抗原−４」；ＣＤ４９ｄ／ＣＤ２９；またはα４β１）、α４β７インテグリン（ＬＰＡＭ−１およびα４βｐ）および／またはらα９β１インテグリンの拮抗薬であり、ＶＬＡ−４結合、α４β７結合および／またはα９β１結合ならびに細胞の接着および活性化が介在する疾患の治療、予防および抑制において有用である。
【背景技術】
【０００２】
本発明は、白血球接着および白血球接着介在の疾病の阻害および防止に有用な強力な置換Ｎ−アリールスルホニル化プロリン誘導体に関するものである。本発明はさらに、そのような化合物を含む組成物およびそのような化合物を用いる治療方法に関するものでもある。
【０００３】
多くの生理プロセスにおいて、細胞が他の細胞および／または細胞外基質と近接することが必要である。そのような接着事象は、細胞の活性化、移動、増殖および分化に必要であると考えられる。細胞−細胞および細胞−基質の相互作用には、セレクチン類、インテグリン類、カドヘリン類（cadherins）および免疫グロブリン類などの細胞接着分子（ＣＡＭ）のいくつかのファミリーが介在している。ＣＡＭ類は、正常なプロセスおよび病態生理学的プロセスの両方で非常に重要な役割を果たす。従って、正常な細胞機能を障害することなく、ある種の疾患状態において、特定の関連するＣＡＭ類を標的とすることが、細胞−細胞相互作用および細胞−基質相互作用を阻害する有効かつ安全な治療薬には必須である。
【０００４】
インテグリンスーパーファミリーは、ほとんど全ての哺乳動物細胞種において各種組み合わせで認められるａおよびｂヘテロダイマーの膜貫通性受容体分子からなる構造的および機能的に関連する糖蛋白から構成されている。ＶＬＡ−４インテグリン（「最晩期抗原−４；ＣＤ４９ｄ／ＣＤ２９；またはα４β１）は、樹状細胞および大食細胞様細胞など、血小板および成熟好中球を除く全ての白血球上で発現されるインテグリンであり、それら細胞種の細胞−細胞相互作用および細胞−基質相互作用の主要介在物質である。ＶＬＡ−４のリガンドには、血管細胞接着分子−１（ＶＣＡＭ−１）およびフィブロネクチン（ＦＮ）のＣＳ−１領域などがある。ＶＣＡＭ−１はＩｇスーパーファミリーに属し、in vivoで炎症部位の内皮細胞上で発現される。ＶＣＡＭ−１は、催炎サイトカイン類に対する応答で、血管内皮細胞によって産生される。ＣＳ−１領域は、フィブロネクチンの領域内での選択的スプライシングによって生じる２５アミノ酸配列である。炎症状態におけるＶＬＡ／ＣＳ−１相互作用の役割が提唱されている（M.J.Elices,″The integrin α4β1(VLA-4) as a therapeutic target″ inCell Adhesion and Human Disease, Ciba Found.Symp., John Wiley & Sons, NY, 1995, p.79参照）。
【０００５】
α４β７（ＬＰＡＭ−１およびα４βｐとも称される）は、白血球上で発現されるインテグリンであり、消化管で移動・帰巣する白血球の主要介在物質である。α４β７のリガンドには、粘膜場所指定（addressing）細胞接着分子−１（ＭａｄＣＡＭ−１）およびα４β７の活性化においてはＶＣＡＭ−１およびフィブロネクチン（Ｆｎ）などがある。ＭａｄＣＡＭ−１はＩｇスーパーファミリーに属し、in vivoで小腸および大腸の腸関連の粘膜組織（「パイエル板」）ならびに哺乳期乳腺の内皮細胞上で発現される。ＭａｄＣＡＭ−１は、催炎刺激によってin vitroで誘発することができる。ＭａｄＣＡＭ−１は、リンパ球溢出の部位で選択的に発現され、インテグリンα４β７に特異的に結合する。
【０００６】
α９β１インテグリンは、気道平滑筋細胞、非腸上皮細胞および好中球で、さらには相対的に少ないが、肝細胞および基底角質細胞で認められる。特に好中球は、急性炎症応答に密接に関与している。好中球の関与および／または活性化の低減は、炎症を減らす効果があると考えられる。そこで、α９β１のそれの個々のリガンドへの結合の阻害が、急性炎症状態の治療において良い効果を有することが期待されると考えられる。
【０００７】
ｉ）ニューロン性脱髄様多発性硬化症のモデルである実験的アレルギー性脳脊髄炎；ｉｉ）各種段階の喘息のモデルとしてのヒツジおよびモルモットでの気管支反応高進；ｉｉｉ）炎症性関節炎のモデルとしてのラットにおけるアジュバント誘発関節炎；ｉｖ）ＮＯＤマウスにおける養子自己免疫性糖尿病；ｖ）臓器移植のモデルとしてのマウスでの心臓同種移植生存率；ｖｉ）炎症性大腸疾患の１形態であるヒト潰瘍性大腸炎に似たワタボウシタマリン類での特発性慢性大腸炎；ｖｉｉ）皮膚アレルギー反応モデルとしての接触過敏モデル類；ｖｉｉｉ）急性神経毒性腎炎；ｉｘ）腫瘍転移；ｘ）実験的自己免疫性甲状腺炎；ｘｉ）ラットにおける動脈閉塞後の虚血性組織損傷；およびｘｉｉ）アレルギー応答を弱めると考えられるＶＬＡ−４抗体によるＩＬ−４およびＩＬ−５などのＴＨ２Ｔ細胞サイトカイン産生の阻害（J. Clinical Investigation100, 3083 (1997)）など、いくつかの動物疾患モデルにおいて、抗α４抗体の中和あるいはＶＬＡ−４および／またはα４β７とそれらのリガンドとの間の相互作用を阻害するペプチドの遮断が、予防上および治療上の両方で有効であることが明らかになっている。そのような抗体の主要作用機序は、細胞外基質の成分に関連するＣＡＭとリンパ球および単核球との相互作用の阻害による、血管外の創傷もしくは炎症部位への白血球移動の抑制および／または白血球の初回抗原刺激および／または活性化の抑制であるように思われる。これら疾患の動物モデルを用いて、小分子ＶＬＡ−Ａ拮抗薬の効力を示すこともできる。
【０００８】
慢性関節リウマチ；各種のメラノーマ、癌腫および肉腫（多発性骨髄腫など）；炎症性肺障害；急性呼吸不全症候群（ＡＲＤＳ）；肺線維症；アテローム斑形成；再狭窄；ブドウ膜炎；および循環ショックなどの他の疾患において、ＶＬＡ−４相互作用が何らかの役割を果たしている可能性を支持する別の証拠が得られている（例えば、A.A.Postigo et al., ″The α4β1/VCAM-1 adhesion pathway in physiology and disease.″,Res.Immunol.,144, 723 (1994)およびJ.-X.Gao and A.C.Issekutz, ″Expression of VCAM-1 and VLA-4 dependent T-lymphocyte adhesion to dermal fibroblasts stimulated with proinflammatory cytokines.″,Immunol.89, 375 (1996)参照）。
【０００９】
現在、多発性硬化症およびクローン病治療のための臨床的開発において、ＶＬＡ−４に対する人化モノクローナル抗体（Antegren（登録商標）Athena Neurosciences/Elan）ならびに炎症性腸疾患治療のための臨床的開発において、α４β７に対するヒト化モノクローナル抗体（ACT-1（登録商標）/LDP-02 LeukoSite）がある。喘息および関節炎の治療に関する早期臨床試験においても、いくつかのＶＬＡ−４拮抗薬がある。現在もなお、ヒト医薬としての使用に好適な薬物動態特性および薬力学特性を有するＶＬＡ−４依存性、α４β７依存性および／またはα９β１依存性の細胞接着に対する強力な低分子量阻害薬が必要とされている。
【００１０】
ＰＣＴ特許出願ＷＯ９８／５３８１８には、ＶＣＡＭ−１とＶＬＡ−４を発現する細胞との間の結合の阻害薬として活性を有し、下記式を有する化合物が開示されている。
【００１１】
【化１】
【００１２】
ＰＣＴ特許出願ＷＯ９８／５３８１４には、ＶＣＡＭ−１とＶＬＡ−４を発現する細胞との間の結合の阻害薬として活性を有し、下記式を有する化合物が開示されている。
【００１３】
【化２】
【００１４】
ＰＣＴ特許出願ＷＯ９８／５３８１４には、ＶＣＡＭ−１とＶＬＡ−４を発現する細胞との間の結合の阻害薬として活性を有し、下記式を有する化合物が開示されている。
【００１５】
【化３】
【００１６】
ＰＣＴ特許出願ＷＯ９９／０６３９０、ＷＯ９９／０６４３１、ＷＯ９９／０６４３２、ＷＯ９９／０６４３３、ＷＯ９９／０６４３４、ＷＯ９９／０６４３５、ＷＯ９９／０６４３６およびＷＯ９９／０６４３７には、ＶＣＡＭ−１とＶＬＡ−４を発現する細胞との間の結合の阻害薬として活性を有し、下記式を有する化合物が開示されている。
【００１７】
【化４】
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明は、下記式Ｉの化合物またはその化合物の製薬上許容される塩を提供する。
【００１９】
【化５】
式中、
Ａは
１）Ｎ、
２）Ｎ＋−Ｏ−
であり；
ＸおよびＹは独立に、
１）ハロゲン、
２）Ｃ１−３アルキル、
３）Ｃ１−３アルコキシ
から選択され；
Ｒ１は、
１）水素、
２）Ｃ１−１０アルキル、
３）アリール−Ｃ１−１０アルキル
であり；
Ｒ２は、
１）水素または
２）Ｃ１−１０アルキル
であり；
Ｒ３ａおよびＲ３ｂの一方は、水素、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ３−１０シクロアルキル、−ＣＯ２Ｒｄ、アリールおよびヘテロアリールから選択され；他方は
１）水素、
２）Ｃ１−１０アルキル、
３）Ｃ２−１０アルケニル、
４）Ｃ２−１０アルキニル、
５）Ｃ３−１０シクロアルキル、
６）−ＯＲｄ、
７）−ＣＯ２Ｒｄ、
８）−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、
９）−ＮＲｄＲｅ、
１０）−ＮＲｄＳ（Ｏ）ｍＲｅ、
１１）−ＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｅ、
１２）−ＮＲｄＣ（Ｏ）ＯＲｅ、
１３）−ＮＲｄＣ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、
１４）アリールおよび
１５）ヘテロアリール
から選択され、
その場合にアルキル、アルケニルおよびアルキニルは、Ｒａから独立に選択される１〜４個の置換基によって置換されていても良く；アリールおよびヘテロアリールは、Ｒｂから独立に選択される１〜４個の置換基によって置換されていても良く；
Ｒ４ａおよびＲ４ｂの一方が水素、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ３−１０シクロアルキル、ＣＯ２Ｒｄ、アリールおよびヘテロアリールであり、他方が
１）水素、
２）Ｃ１−１０アルキル、
３）Ｃ２−１０アルケニル、
４）Ｃ２−１０アルキニル、
５）Ｃ３−１０シクロアルキル、
６）−ＯＲｄ、
７）−ＣＯ２Ｒｄ、
８）−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、
９）−ＮＲｄＲｅ、
１０）−ＮＲｄＳ（Ｏ）ｍＲｅ、
１１）−ＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｅ、
１２）−ＮＲｄＣ（Ｏ）ＯＲｅ、
１３）−ＮＲｄＣ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、
１４）−ＣＮ、
１５）アリールおよび
１６）ヘテロアリール
から選択され、
その場合にアルキル、アルケニルおよびアルキニルは、Ｒａから独立に選択される１〜４個の置換基によって置換されていても良く；、アリールおよびヘテロアリールは、Ｒｂから独立に選択される１〜４個の置換基によって置換されていても良く；あるいは
Ｒ４ａとＲ４ｂが一体となってオキソであり；
Ｒ５は、
１）水素；
２）ＯＨ；
３）ＯＣＨ３；または
４）ＮＨ２
であり；
Ｒａは、
１）−ＯＲｄ、
２）−ＮＲｄＳ（Ｏ）ｍＲｅ、
３）−ＮＯ２、
４）ハロゲン、
５）−Ｓ（Ｏ）ｍＲｄ、
６）−ＳＲｄ、
７）−Ｓ（Ｏ）２ＯＲｄ、
８）−Ｓ（Ｏ）ｍＮＲｄＲｅ、
９）−ＮＲｄＲｅ、
１０）−Ｏ（ＣＲｆＲｇ）ｎＮＲｄＲｅ、
１１）−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、
１２）−ＣＯ２Ｒｄ、
１３）−ＣＯ２（ＣＲｆＲｇ）ｎＣＯＮＲｄＲｅ、
１４）−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、
１５）−ＣＮ、
１６）−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、
１７）−ＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｅ、
１８）−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、
１９）−ＮＲｄＣ（Ｏ）ＯＲｅ、
２０）−ＮＲｄＣ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、
２１）−ＣＲｄ（Ｎ−ＯＲｅ）、
２２）ＣＦ３、
２３）−ＯＣＦ３、
２４）Ｃ３−８シクロアルキルまたは
２５）複素環
であり、
その場合に、シクロアルキルおよび複素環は、Ｒｃから独立に選択される１〜４個の基によって置換されていても良く；
Ｒｂは、
１）Ｒａから選択される基、
２）Ｃ１−１０アルキル、
３）Ｃ２−１０アルケニル、
４）Ｃ２−１０アルキニル、
５）Ａｒ１、
６）Ｃ１−１０アルキル−Ａｒ１
であり、
その場合にアルキル、アルケニル、アルキニルおよびＡｒ１は、Ｒｃから独立に選択される基から選択される１〜４個の置換基によって置換されていても良く；
Ｒｃは、
１）ハロゲン、
２）アミノ、
３）カルボキシ、
４）Ｃ１−４アルキル、
５）Ｃ１−４アルコキシ、
６）アリール、
７）アリールＣ１−４アルキル、
８）ヒドロキシ、
９）ＣＦ３、
１０）ＯＣ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル、
１１）ＯＣ（Ｏ）ＮＲｆＲｇまたは
１２）アリールオキシ
であり；
ＲｄおよびＲｅは独立に、水素、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ２−１０アルキニル、ＣｙおよびＣｙＣ１−１０アルキルから選択され、その場合にアルキル、アルケニル、アルキニルおよびＣｙはＲｃから独立に選択される１〜４個の置換基によって置換されていても良く；あるいは
ＲｄおよびＲｅは、それらが結合している原子と一体となって、酸素、硫黄およびＮ−Ｒｈから独立に選択される０〜２個の別のヘテロ原子を有する４〜７員の複素環を形成しており；
ＲｆおよびＲｇは独立に、水素、Ｃ１−１０アルキル、ＣｙおよびＣｙＣ１−１０アルキルから選択され；あるいは
ＲｆおよびＲｇは、それらが結合している炭素と一体となって、酸素、硫黄および窒素から独立に選択される０〜２個のヘテロ原子を有する５〜７員の複素環を形成しており；
Ｒｈは、Ｒｆおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒｆから選択され；
Ｃｙは、シクロアルキル、複素環、アリールおよびヘテロアリールから選択され；
Ａｒ１は、それぞれＲｃから独立に選択される１個もしくは２個の基によって置換されていても良いフェニル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニルおよびトリアジニルから選択され；
Ａｒ２は、１，４−フェニレンまたは２，５−ピリジレンであり；
ｍは１または２であり；
ｎは０、１または２である。
【００２０】
式Ｉの１実施形態ではＡｒ１は、Ｃ１−３アルキルによって置換されていても良いピリ
ジル、またはハロゲン、Ｃ１−３アルキル、フェニル、トリフルオロメチルおよびトリフルオロメトキシから独立に選択される１〜２個の基によって置換されていても良いフェニルである。この実施形態の１小群ではＡｒ１は、４位もしくは５位に第２の置換基を有していても良い３−置換フェニルであり、その置換基は独立に、塩素、フッ素、臭素、メチル、フェニル、トリフルオロメチルおよびトリフルオロメトキシから選択される。別の小群ではＡｒ１は、３−クロロフェニルまたは３，５−ジクロロフェニルである。Ａｒ１の例には、フェニル、３−ブロモフェニル、３−クロロフェニル、３−フルオロフェニル、３−ビフェニル、３−トリフルオロメチルフェニル、３−トリフルオロメトキシフェニル、４−クロロフェニル、４−メチルフェニル、３，５−ジクロロフェニル、３，４−ジクロロフェニル、３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル、３，５−ジメチル−フェニル、５−メチル−３−ピリジルなどがある。
【００２１】
式Ｉの別の実施形態ではＡｒ２は、１，４−フェニレンである。Ａｒ２の例には、以下に示した１，４−フェニレンおよび２，５−ピリジレンなどがある。
【００２２】
【化６】
式Ｉの別の実施形態では、ＸおよびＹの一方がハロゲンであり、他方がハロゲン、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシから選択される。この実施形態の１小群では、ＸおよびＹの一方が塩素であり、他方が塩素またはメトキシである。別の小群では、ＸおよびＹはそれぞれ塩素である。
【００２３】
式Ｉの別の実施形態では、Ｒ３ａおよびＲ３ｂはそれぞれ水素であり、Ｒ４ａおよびＲ４ｂの一方は水素またはＣ１−１０アルキルであり、他方は水素、Ｃ３−１０シクロアルキル、ピリジル、ＮＲｄＲｅ、ＯＲｄ、ＣＮ、ＣＯ２ＲｄおよびＣＯ２Ｈによって置換されていても良いフェニルから選択される。この実施形態の１小群では、Ｒ４ａおよびＲ４ｂの一方が水素であり、他方が水素、フェニル、Ｃ３−６シクロアルキル、ピリジル、ＣＮ、ＯＲｄおよびＣＯ２Ｒｄから選択される。別の小群では、Ｒ４ａおよびＲ４ｂの一方が水素であり、他方がＮＲｄＲｅである。Ｒ４ａ／４ｂの例には、水素、メチル、フェニル、シクロヘキシル、アミノ、イソプロピルアミノ、ジメチルアミノ、１−アゼチジニル、１−ピロリジニル、シクロプロピルアミノ、ヒドロキシ、シアノ、ｔ−ブチルオキシ、４−カルボキシフェニル、ｔ−ブトキシカルボニルおよび４−ピリジルなどがある。
【００２４】
式Ｉの別の実施形態では、Ｒ４ａおよびＲ４ｂはそれぞれ水素であり、Ｒ３ａおよびＲ３ｂの一方が水素、Ｃ１−１０アルキル、フェニルおよびＣ２−１０アルケニルから選択され、他方が水素、ＯＨによって置換されていても良いＣ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ３−１０シクロアルキル、ＯＨもしくはＣＯ２Ｈによって置換されていても良いフェニル、ＣＯ２Ｒｄ、ＯＲｄ、ＮＲｄＲｅおよびＮＲｄＣ（Ｏ）２Ｒｄから選択される。１小群においては、Ｒ３ａおよびＲ３ｂの一方が水素であり、他方が水素、ＯＨもしくはＣＯ２Ｈによって置換されていても良いフェニル、ＯＨによって置換されていても良いＣ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、ＣＯ２Ｒ、ＯＲｄ、ＮＲｄＲｅおよびＮＲＣ（Ｏ）２Ｒから選択される。別の小群では、Ｒ３ａおよびＲ３ｂの一方がＣ１−６アルキルであり、他方がＣ１−６アルキルおよびＯＲｄから選択される。別の小群では、Ｒ３ａおよびＲ３ｂはそれぞれＣ１−６アルキルまたはＣ２−６アルケニルである。Ｒ３ａ／３ｂの例には、水素、メチル、フェニル、ヒドロキシ、シクロヘキシル、カルボキシ、ヒドロキシメチル、メトキシ、４−ヒドロキシフェニル、４−カルボキシフェニル、ジメチルアミノ、アリルおよびアリルオキシカルボニルアミノなどがある。
【００２５】
式Ｉの１実施形態は、下記式Ｉａの化合物またはその化合物の製薬上許容される塩を提供する。
【００２６】
【化７】
式中、
Ａは、ＮまたはＮ＋Ｏ−であり；
Ｒ２は、Ｈまたはメチルであり；
Ｒ３ａおよびＲ３ｂの一方はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニルおよびフェニルから選択され、他方はＨ、ＯＨもしくはＣＯ２Ｈによって置換されていても良いフェニル、ＯＨによって置換されていても良いＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−６シクロアルキル、ＣＯ２Ｒｄ、ＯＲｄ、ＮＲｄＲｅおよびＮＲｄＣ（Ｏ）２Ｒｄから選択され；
Ｒ４ａおよびＲ４ｂの一方は、ＨおよびＣ１−６アルキルから選択され、他方はＨ、フェニル、Ｃ３−６シクロアルキル、ピリジル、ＣＮ、ＯＲｄ、ＮＲｄＲｅおよびＣＯ２Ｒｄから選択され；あるいは
Ｒ４ａとＲ４ｂが一体となってオキソである。
【００２７】
式Ｉａの１小群では、Ｒ３ａおよびＲ３ｂはそれぞれ水素であり；Ｒ４ａおよびＲ４ｂの一方は水素であり、他方はフェニル、Ｃ３−６シクロアルキル、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、ＣＯ２Ｈ、ピリジル、シアノおよびＮＲｄＲｅから選択される。１実施形態では、Ｒ４ａまたはＲ４ｂがフェニルである。別の実施形態では、Ｒ４ａまたはＲ４ｂがＮＲｄＲｅであり；ＲｄおよびＲｅは独立に、水素およびＣ１−１０アルキルから選択される。別の実施形態では、Ｒ４ａまたはＲ４ｂがＮＲｄＲｅであり；ＲｄとＲｅはそれらが結合している原子と一体となって、０の別のヘテロ原子を有する４〜７員の複素環を形成している。
【００２８】
式Ｉａの別の小群では、Ｒ４ａおよびＲ４ｂはそれぞれ水素であり；Ｒ３ａおよびＲ３ｂの一方が水素であり、他方がＯＨもしくはＣＯ２Ｈによって置換されていても良いフェニル、ＯＨによって置換されていても良いＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−６シクロアルキル、ＣＯ２Ｒｄ、ＯＲｄ、ＮＲｄＲｅおよびＮＲｄＣ（Ｏ）２Ｒｄから選択される。
【００２９】
式Ｉａの別の小群では、Ｒ３ａおよびＲ３ｂの一方が水素であり、他方がＯＨもしくはＣＯ２Ｈによって置換されていても良いフェニル、ＯＨによって置換されていても良いＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−６シクロアルキル、ＣＯ２Ｒｄ、ＯＲｄ、ＮＲｄＲｅおよびＮＲｄＣ（Ｏ）２Ｒｄから選択され；Ｒ４ａおよびＲ４ｂの一方が水素であり、他方がフェニル、Ｃ３−６シクロアルキル、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、ＣＯ２Ｈ、ピリジル、シアノおよびＮＲｄＲｅから選択される。
【００３０】
式Ｉの代表的化合物は以下の通りである。
【００３１】
【表１】
＊値がない場合は、変数は水素である。
【００３２】
【化８】
【００３３】
別の態様において本発明は、哺乳動物における細胞接着が介在する疾患、障害、状態または症状の予防または治療方法であって、前記哺乳動物に対して有効量の式Ｉの化合物を投与する段階を有する方法を提供する。
【００３４】
１実施形態において前記疾患または障害は、喘息、アレルギー性鼻炎、多発性硬化症、アテローム性動脈硬化、炎症性腸疾患、慢性関節リウマチおよび臓器移植から選択される。
【００３５】
別の態様において本発明は、哺乳動物におけるＶＬＡ−４の作用を防止する方法であって、前記哺乳動物に対して治療上有効量の式Ｉの化合物を投与する段階を有する方法を提供する。
【００３６】
本発明の別の態様は、式Ｉの化合物および製薬上許容される担体を含む医薬組成物を提供する。
【００３７】
「アルキル」ならびにアルコキシ、アルカノイルなどの接頭語「アルク」を有する他の基は、直鎖もしくは分岐あるいはそれらの組み合わせであっても良い炭素鎖を意味する。アルキル基の例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−およびｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニルなどがある。
【００３８】
「アルケニル」とは、直鎖もしくは分岐あるいはそれらの組み合わせであっても良い、１個以上の炭素−炭素二重結合を有する炭素鎖を意味する。アルケニルの例としては、ビニル、アリル、イソプロペニル、ペンテニル、ヘキセニル、ヘプテニル、１−プロペニル、２−ブテニル、２−メチル−２−ブテニルなどがある。
【００３９】
「アルキニル」とは、直鎖もしくは分岐あるいはそれらの組み合わせであっても良い、１個以上の炭素−炭素三重結合を有する炭素鎖を意味する。アルキニルの例としては、エチニル、プロパルギル、３−メチル−１−ペンチニル、２−へプチニルなどがある。
【００４０】
「シクロアルキル」とは、それぞれ３〜１０個の炭素原子を有する単環式または二環式の飽和炭素環を意味する。その用語には、結合点が非芳香族部分にある、アリール基に融合した単環式環も含まれる。シクロアルキルの例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、テトラヒドロナフチル、デカヒドロナフチル、インダニルなどがある。
【００４１】
「アリール」とは、炭素原子のみを有する単環式または二環式の芳香環を意味する。その用語には、結合点が芳香族部分にある、単環式シクロアルキル基または単環式複素環基に融合したアリール基も含まれる。アリールの例としては、フェニル、ナフチル、インダニル、インデニル、テトラヒドロナフチル、２，３−ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾピラニル、１，４−ベンゾジオキサニルなどがある。
【００４２】
「ヘテロアリール」とは、各環が５〜６個の原子を有する、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１個以上のヘテロ原子を有する単環式または二環式の芳香環を意味する。ヘテロアリールの例としては、ピロリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、ピラゾリル、ピリジル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、フラニル、トリアジニル、チエニル、ピリミジル、ピリダジニル、ピラジニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、フロ（２，３−ｂ）ピリジル、キノリル、インドリル、イソキノリルなどがある。
【００４３】
「複素環」とは、Ｎ、ＳおよびＯから選択される１個以上のヘテロ原子を有する単環式または二環式の飽和環であって、各環が３〜１０個の原子を有し、結合点が炭素または窒素であることができるものを意味する。その用語には、結合点が非芳香族部分にある、アリール基またはヘテロアリール基に融合した単環式複素環も含まれる。「複素環」の例としては、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、イミダゾリジニル、２，３−ジヒドロフロ（２，３−ｂ）ピリジル、ベンゾオキサジニル、テトラヒドロヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、ジヒドロインドリルなどがある。その用語には、窒素を介して結合した２−もしくは４−ピリドン類あるいはＮ−置換−（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジン−２，４−ジオン類（Ｎ−置換ウラシル類）などの非芳香族の部分不飽和単環式環も含まれる。
【００４４】
「ハロゲン」には、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素などがある。
【００４５】
光学異性体−ジアステレオマー−幾何異性体−互変異性体
式Ｉの化合物には、１個以上の不斉中心があることから、それらの化合物は、ラセミ体およびラセミ混合物、単独のエナンチオマー、ジアステレオマー混合物および個々のジアステレオマーとして得られる場合がある。本発明は、式Ｉの化合物のそのような異性体全てを包含するものとする。
【００４６】
本明細書に記載の化合物の中には、オレフィン系二重結合を有するものがあり、別段の指定がない限り、それらはＥおよびＺの両方の幾何異性体を含むものとする。
【００４７】
本明細書に記載の化合物の中には、互変異性体と称される、水素が異なった位置で結合した化合物として存在するものもある。そのような例としては、ケト−エノール互変異性体として知られるケトンとそれのエノール型が挙げられる。個々の互変異性体およびそれらの混合物は、式Ｉの化合物に含まれる。
【００４８】
式Ｉの化合物は、例えば、ＭｅＯＨもしくは酢酸エチルまたはそれらの混合液などの好適な溶媒からの分別結晶によって、エナンチオマーのジアステレオマー対に分離することができる。そうして得られるエナンチオマー対は、例えば分割剤としての光学活性アミン使用またはキラルＨＰＬＣカラムなどの従来の手段によって、個々の立体異性体に分離することができる。
【００４９】
別法として、一般式ＩまたはＩａの化合物のエナンチオマーを、立体配置が既知である光学的に純粋な原料または試薬を用いる立体特異的合成によって得ることができる。
【００５０】
塩
「製薬上許容される塩」という用語は、無機もしくは有機の塩基および無機もしくは有機の酸などの、製薬上許容される無毒性の塩基もしくは酸から製造される塩を指す。無機塩基から誘導される塩には、アルミニウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、銅塩、第二鉄塩、第一鉄塩、リチウム塩、マグネシウム塩、第二マンガン塩、第一マンガン塩、カリウム塩、ナトリウム塩、亜鉛塩などがある。特に好ましいものとしては、アンモニウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩およびナトリウム塩である。製薬上許容される有機無毒性塩基から誘導される塩には、１級、２級および３級アミン、天然の置換アミン類を含む置換アミン類、環状アミン類および塩基性イオン交換樹脂類などがあり、例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチル−モルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂類、プロカイン、プリン類、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなどがある。
【００５１】
本発明の化合物が塩基性の場合、無機酸もしくは有機酸などの製薬上許容される無毒性酸から塩を製造することができる。そのような酸には、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸などがある。特に好ましいものは、クエン酸、臭化水素酸、塩酸、マレイン酸、リン酸、硫酸および酒石酸である。
【００５２】
本明細書での使用において、式Ｉについて言及する場合には、製薬上許容される塩も含まれることは明らかであろう。
【００５３】
用途
式Ｉの化合物は、ＶＬＡ−４および／またはα４β７インテグリンの作用に拮抗する能力を有することから、ＶＬＡ−４および／またはα４β７インテグリンがそれぞれの各種リガンドに結合することで誘発される症状、障害または疾患を予防または退行させる上で有用である。そのように、その拮抗薬は、細胞の活性化、移動、増殖および分化などの細胞接着プロセスを阻害する。従って、本発明の別の態様は、ＶＬＡ−４および／またはα４β７の結合ならびに細胞の接着および活性化が介在する疾患または障害または症状の治療（予防、緩和、改善または抑制を含む）方法において、有効量の式Ｉの化合物を哺乳動物に投与する段階を有することを特徴とする方法を提供するものである。そのような疾患、障害、状態または症状には、（１）多発性硬化症、（２）喘息、（３）アレルギー性鼻炎、（４）アレルギー性結膜炎、（５）炎症性肺疾患、（６）慢性関節リウマチ、（７）敗血症性関節炎、（８）Ｉ型糖尿病、（９）臓器移植拒絶、（１０）再狭窄、（１１）自家骨髄移植、（１２）ウィルス感染の炎症性続発症、（１３）心筋炎、（１４）潰瘍性大腸炎およびクローン病などの炎症性腸疾患、（１５）ある種の中毒性神経炎および免疫に基づく神経炎、（１６）接触皮膚過敏症、（１７）乾癬、（１８）腫瘍転移、（１９）アテローム性動脈硬化症および（２０）肝炎などがある。
【００５４】
これら疾患または障害における本発明の化合物の用途は、文献で報告されている動物疾患モデルで示すことができる。以下は、そのような動物疾患モデルの例である。
【００５５】
ｉ）多発性硬化症に似たニューロン性脱髄のモデルである実験アレルギー性脳脊髄炎（例えば、T. Yednock et al., ″Prevention of experimental autoimmune encephalomyelitis by antibodies against α4β1integrin.″Nature, 356,63(1993)およびE. Keszthelyi et al., ″Evidence for a prolonged role ofα4integrin throughout active experimental allergic encephalomyelitis.″Neurology,47, 1053 (1996)参照）。
【００５６】
ｉｉ）喘息の各種相のモデルとしての、ヒツジおよびモルモットにおける気管支反応亢進（例えば、W. M. Abraham et al.,″α4-Integrins mediate antigen-induced late bronchial responses and prolonged airway hyperresponsiveness in sheep.″J. Clin. Invest.93, 776 (1993)およびA. A. Y. Milne and P. P. Piper, ″Role of VLA-4 integrin in leucocyte recruitment and bronchial hyperresponsiveness in the gunea-pig.″Eur. J. Pharmacol.,282, 243 (1995)参照）。
【００５７】
ｉｉｉ）炎症性関節炎モデルとしてのラットにおけるアジュバント誘発関節炎（C. Barbadillo et al., ″Anti-VLA-4 mAb prevents adjuvant arthritis in Lewis rats.″Arthr. Rheuma. (Suppl.),36, 95 (1993)およびD. Seiffge, ″Protective effects of monoclonal antibody to VLA-4 on leukocyte adhesion and course of disease in adjuvant arthritis in rats.″J. Rheumatol.,23, 12 (1996)参照）。
【００５８】
ｉｖ）ＮＯＤマウスにおける養子自己免疫糖尿病（J. L. Baron et al., ″The pathogenesis of adoptive murine autoimmune diabetes requires an interaction between α4-integrins and vascular cell adhesion molecule-1.″,J. Clin. Invest.,93, 1700 (1994), A. Jakubowski et al., ″Vascular cell adhesion molecule-Ig fusion protein selectively targets activated α4-integrin receptors in vivo: Inhibition of autoimmune diabetes in an adoptive transfer model in nonobese diabetic mice.″J. Immunol.,155, 938 (1995)およびX. D. Yang et al., ″Involvement of beta 7 integrin and mucosal addressin cell adhesion molecule-1 (MadCAM-1) in the development of diabetes in nonobese diabetic mice″,Diabetes,46, 1542 (1997)参照）。
【００５９】
ｖ）臓器移植のモデルとしてのマウスにおける心臓異型移植生存率（M. Isobe et al., ″Effect of anti-VCAM-1 and anti-VLA-4 monoclonal antibodies on cardiac allograft survival and response to soluble antigens in mice.″,Tranplant. Proc.,26, 867 (1994) and S. Molossi et al., ″Blockade of very late antigen-4 integrin binding to fibronectin with connecting segment-1 peptide reduces accelerated coronary arteripathy in rabbit cardiac allografts.″J. Clin Invest.,95, 2601 (1995)参照）。
【００６０】
ｖｉ）炎症性腸疾患の一つの形態であるヒト潰瘍性大腸炎に似たワタボウシタマリンでの自発慢性大腸炎（D. K. Podolsky et al., ″Attenuation of colitis in the Cotton-top tamarin by anti-α4integrin monoclonal antibody.″,J. Clin. Invest.,92, 372 (1993)参照）。
【００６１】
ｖｉｉ）皮膚アレルギー反応のモデルとしての接触過敏モデル（T. A. Ferguson and T. S. Kupper, ″Antigen-independent processes in antigen-specific immunity.″,J. Immunol.,150, 1172 (1993)およびP. L. Chisholm et al., ″Monoclonal antibodies to the integrin a-4 subunit inhibit the murine contact hypersensitivity response.″Eur. J. Immunol.,23, 682 (1993)参照）。
【００６２】
ｖｉｉｉ）急性腎毒性腎炎（M. S. Mulligan et al., ″Requirements for leukocyte adhesion molecules in nephrotoxic nephritis.″,J. Clin. Invest.,91, 577 (1993)参照）。
【００６３】
ｉｘ）腫瘍転移（例えば、M. Edward, ″Integrins and other adhesion molecules involved in melanocytic tumor progression.″,Curr. Opin. Oncol.,7, 185 (1995)参照）。
【００６４】
ｘ）実験自己免疫甲状腺炎（R. W. McMurray et al., ″The role of α4 integrin and intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) in murine experimental autoimmune thyroiditis.″Autoimmunity,23, 9 (1996)参照）。
【００６５】
ｘｉ）ラットでの動脈閉塞後の虚血性組織損傷（F. Squadrito et al., ″Leukocyte integrin very late antigen-4/vascular cell adhesion molecule-1 adhesion pathway in splanchnic artery occlusion shock.″Eur. J. Pharmacol.,318, 153 (1996)参照）。
【００６６】
ｘｉｉ）アレルギー応答を弱めると考えられるＶＬＡ−４抗体によるＩＬ−４およびＩＬ−５などのＴＨ２ Ｔ細胞サイトカイン産生の阻害（J. Clinical Investigation100, 3083 (1997)）。
【００６７】
用量範囲
式Ｉの化合物の予防用量または治療用量の大きさは、当然のことながら、治療対象の状態の重度の性質ならびに特定の式Ｉの化合物およびそれの投与経路によって変わる。それはさらに、個々の患者の年齢、体重および応答によっても変わる。概して、１日用量範囲は、哺乳動物の体重１ｋｇ当たり約０．００１ｍｇ〜約１００ｍｇ、好ましくは０．０１ｍｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、最も好ましくは０．１〜１０ｍｇ／ｋｇであって、単回投与または分割投与する。他方、上記の範囲外の用量を用いる必要がある場合もある。
【００６８】
静脈投与用組成物を用いる場合、好適な用量範囲は、式Ｉの化合物約０．００１ｍｇ〜約２５ｍｇ（好ましくは０．０１ｍｇ〜約１ｍｇ）／ｋｇ／日であり、細胞保護用には、式Ｉの化合物約０．１ｍｇ〜約１００ｍｇ（好ましくは約１ｍｇ〜約１００ｍｇ、より好ましくは約１ｍｇ〜約１０ｍｇ）／ｋｇ／日である。
【００６９】
経口組成物を用いる場合、好適な用量範囲は例えば、式Ｉの化合物約０．０１ｍｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．１ｍｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇであり、細胞保護用には、式Ｉの化合物約０．１ｍｇ〜約１００ｍｇ（好ましくは約１ｍｇ〜約１００ｍｇ、より好ましくは約１０ｍｇ〜約１００ｍｇ）／ｋｇ／日である。
【００７０】
眼球疾患の治療の場合、許容される眼科用剤型で式Ｉの化合物の０．００１〜１重量％溶液もしくは懸濁液を含む点眼用眼科製剤を用いることができる。
【００７１】
医薬組成物
本発明の別の態様は、式Ｉの化合物および製薬上許容される担体を含有する医薬組成物を提供するものである。医薬組成物などでの「組成物」という用語は、有効成分および担体を構成する不活性成分（製薬上許容される賦形剤）を含有する製品、ならびにいずれか２種類以上の成分の組み合わせ、複合体化または凝集、あるいは１以上の成分の解離、あるいは１以上の成分の他の種類の反応もしくは相互作用によって、直接もしくは間接的に生じる製品を包含するものとする。従って、本発明の医薬組成物は、式Ｉの化合物、別の有効成分および製薬上許容される賦形剤を混合することで得られる組成物を包含するものである。
【００７２】
哺乳動物、特にヒトに対して、有効な用量の本発明の化合物を与えるのに、好適な投与経路を用いることができる。例えば、経口、経直腸、局所、非経口、眼球、肺、経鼻などの投与経路を用いることができる。製剤には、錠剤、トローチ、分散液、懸濁液、液剤、カプセル、クリーム、軟膏、エアロゾルなどがある。
【００７３】
本発明の医薬組成物は、有効成分としての式Ｉの化合物または該化合物の製薬上許容される塩を含有するものであり、製薬上許容される担体および適宜に他の治療成分を含有することもできる。「製薬上許容される塩」という用語は、無機の塩基もしくは酸および有機の塩基もしくは酸などの製薬上許容される無毒性の塩基もしくは酸から製造される塩を指す。
【００７４】
上記組成物には、経口投与、経直腸投与、局所投与、非経口投与（皮下投与、筋肉投与および静脈投与など）、眼球投与（点眼）、肺投与（エアロゾル吸入）または経鼻投与に好適な組成物などがある。ただし、特定の場合に最も好適な経路は、治療対象の状態の性質および重度ならびに有効成分の性質によって決まる。それら組成物は簡便には、単位製剤で提供され、製薬業界で公知の方法によって製造することができる。
【００７５】
吸入投与の場合、本発明の化合物は簡便には、加圧パックまたは噴霧器から出るエアロゾル噴霧剤の形で投与する。該化合物は、製剤可能な粉剤として投与することができ、該粉末組成物は、通気粉剤吸入装置を用いる吸入させることができる。吸入に好ましい投与システムは、フルオロカーボン類または炭化水素類などの好適な推進剤中での式Ｉの化合物の懸濁液もしくは溶液として製剤することができる用量計量吸入（ＭＤＩ）エアロゾル、ならびに別の賦形剤を加えたまたは加えない、式Ｉの化合物の乾燥粉剤として製剤することができる乾燥粉剤吸入（ＤＰＩ）エアロゾルである。
【００７６】
式Ｉの化合物の好適な局所製剤には、経皮装置、エアロゾル、クリーム類、軟膏、ローション、散布剤などがある。
【００７７】
実際の使用では、式Ｉの化合物を、従来の医薬品配合法に従って、医薬用担体と十分に混和された有効成分として組み合わせることができる。担体は、例えば経口投与または非経口投与（静脈投与など）などの投与に望ましい剤型に応じて、各種形態のものとすることができる。経口製剤用の組成物を調製する場合、例えば懸濁液、エリキシル剤および液剤などの液体経口製剤の場合には、例えば水、グリコール類、オイル類、アルコール類、芳香剤、保存剤、着色剤などの通常の医薬用媒体を、あるいは例えば粉剤、カプセルおよび錠剤などの固体経口製剤の場合には、スターチ類、糖類、微結晶セルロース、希釈剤、造粒剤、潤滑剤、結合剤、崩壊剤などの担体を用いることができる。そして、液体製剤より固体製剤の方が好ましい。投与しやすさから、錠剤およびカプセルが最も有利な経口単位製剤であり、その場合は、固体医薬用担体を用いることは明らかである。所望に応じて、錠剤を、標準的な水系もしくは非水系の方法でコーティングすることができる。
【００７８】
上記のような一般的な製剤以外に、米国特許３８４５７７０号、３９１６８９９号、３５３６８０９号、３５９８１２３号、３６３０２００号および４００８７１９号に記載のような徐放手段および／または投与装置によって、式Ｉの化合物を投与することもできる。
【００７９】
経口投与に好適な本発明の医薬組成物は、それぞれが所定量の有効成分を含有するカプセル、カシェ剤または錠剤などの別個の単位として；粉剤もしくは粒剤として；あるいは水系液体、非水系液体中の液剤もしくは懸濁液、水中油型乳濁液または油中水型乳濁液として提供することができる。そのような組成物は、いかなる製薬法によっても製造可能であるが、いずれの方法でも、有効成分と１以上の必要な成分を構成する担体とを組み合わせる段階が含まれる。通常、該組成物は、有効成分と、液体担体もしくは細かく粉砕した固体担体またはその両方とを均一かつ十分に混合し、その後必要に応じて、取得物を所望の形に成形することで製造される。例えば錠剤は、適宜に１以上の補助成分とともに、圧縮または成形によって製造することができる。圧縮錠は、好適な機械で、適宜に結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、界面活性剤または分散剤と混合して、粉末もしくは顆粒などの自由に流動する形の有効成分を圧縮することで製造することができる。すりこみ錠は、好適な機械で、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末化合物の混合物を成形することで製造することができる。望ましくは各錠剤には、有効成分約１ｍｇ〜約５００ｍｇを含有させ、各カシェ剤またはカプセルには、有効成分約１〜約５００ｍｇを含有させる。
【００８０】
以下に、式Ｉの化合物についての代表的な医薬製剤の例を示す。
【００８１】
【表２】
【００８２】
【表３】
【００８３】
【表４】
【００８４】
【表５】
【００８５】
併用療法
式Ｉの化合物は、式Ｉの化合物が有用な疾患または状態の治療／予防／抑制または改善で使用される他の薬剤と併用することができる。そのような他薬剤は、それら薬剤に通常使用される経路および量で、式Ｉの化合物と同時または該化合物と順次に投与することができる。式Ｉの化合物を１以上の他薬剤と同時に使用する場合、そのような他薬剤と式Ｉの化合物とを含有する医薬組成物が好ましい。従って、本発明の医薬組成物には、式Ｉの化合物以外に、１以上の他の有効成分を含有するものが含まれる。別個に投与するかあるいは同じ医薬組成物に含有させて、式Ｉの化合物と併用することができる他の有効成分の例としては、
（ａ）米国特許５５１０３３２、ＷＯ９７／０３０９４、ＷＯ９７／０２２８９、ＷＯ９６／４０７８１、ＷＯ９６／２２９６６、ＷＯ９６／２０２１６、ＷＯ９６／０１６４４、ＷＯ９６／０６１０８、ＷＯ９５／１５９７３およびＷＯ９６／３１２０６に記載のような他のＶＬＡ−４拮抗薬；（ｂ）ベクロメタゾン、メチルプレドニソロン、ベタメタゾン、プレドニソン、デキサメタゾンおよびヒドロコルチゾンなどのステロイド類；（ｃ）シクロスポリン、タクロリマス（tacrolimus）、ラパマイシン（rapamycin）および他のＦＫ−５０６型免疫抑制剤などの免疫抑制剤；（ｄ）ブロモフェニラミン（bromopheniramine）、クロルフェニラミン、デキスクロルフェニラミン、トリプロリジン、クレマスチン、ジフェニルヒドラミン（diphenylhydramine）、ジフェニルピラリン、トリペレナミン、ヒドロキシジン、メトジラジン、プロメタジン、トリメプラジン、アザタジン（azatadine）、シプロヘプタジン、アンタゾリン、フェニラミン、ピリラミン、アステミゾール、テルフェナジン（terfenazine）、ロラタジン（loratadine）、セチリジン（cetirizine）、フェクソフェナジン（fexofenadine）、デスカルボエトキシロラタジン（descarboethoxyloratadine）などの抗ヒスタミン類（Ｈ１−ヒスタミン拮抗薬）；（ｅ）ｂ２−作働薬（テルブタリン、メタプロテレノール、フェノテロール、イソエタリン、アルブテロール、ビトルテロール、サルメテロール（salmeterol）およびピルブテロール）、テオフィリン、クロモリンナトリウム、アトロピン、臭化イプラトロピウム、ロイコトリエン拮抗薬（ザフィルルカスト（zafirlukast）、モンテルカスト（montelukast）、プランルカスト（pranlukast）、イラルカスト（iralukast）、ポビルカスト（pobilukast）、ＳＫＢ−１０６２０３）、ロイコトリエン生合成阻害薬（ジロイトン（zileuton）、ＢＡＹ−１００５）などの非ステロイド系抗喘息薬；（ｆ）プロピオン酸誘導体（アルミノプロフェン（alminoprofen）、ベノキサプロフェン、ブクロキシル酸（bucloxic acid）、カルプロフェン、フェンブフェン、フェノプロフェン、フルプロフェン（fluprofen）、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドプロフェン、ケトプロフェン、ミロプロフェン（miroprofen）、ナプロキセン、オキサプロジン、ピルプロフェン、プラノプロフェン、スプロフェン、チアプロフェン酸およびチオキソプロフェン（tioxaprofen））、酢酸誘導体（インドメタシン、アセメタシン、アルクロフェナク、クリダナク、ジクロフェナク、フェンクロフェナック、フェンクロジン酸（fenclozic acid）、フェンチアザク、フロフェナク（furofenac）、イブフェナック、イソキセパック、オキシピナク（oxpinac）、スリンダク、チオピナク（tiopinac）、トルメチン、ジドメタシン（zidometacin）およびゾメピラク）、フェナム酸（fenamic acid）誘導体（フルフェナム酸、メクロフェナム酸、メフェナム酸、ニフルム酸およびトルフェナム酸）、ビフェニルカルボン酸誘導体（ジフルニサルおよびフルフェニサル（flufenisal））、オキシカム類（イソキシカム、ピロキシカム、スドキシカム（sudoxicam）およびテノキシカム）、サリチル酸類（アセチルサリチル酸、スルファサラジン）およびピラゾロン類（アパゾン、ビズピペリロン（bezpiperylon）、フェプラゾン、モフェブタゾン、オキシフェンブタゾン、フェニルブタゾン）などの非ステロイド系抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）；（ｇ）セレコキシブ（celecoxib）、ロフェコキシブ（rofecoxib）およびパレコキシブ（parecoxib）などのシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）阻害薬；（ｈ）ホスホジエステラーゼＩＶ型（ＰＤＥ−ＩＶ）の阻害薬；（ｉ）ケモカイン受容体、特にＣＣＲ−１、ＣＣＲ−２およびＣＣＲ−３の拮抗薬；（ｊ）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害薬（ロバスタチン、シンバスタチン（simvastatin）、プラバスタチン（pravastatin）、フルバスタチン（fluvastatin）、アトルバスタチン（atorvastatin）および他のスタチン類）、金属封鎖剤（コレスチラミンおよびコレスチポール）、ニコチン酸、フェノフィブリン酸（fenofibric acid）誘導体（ゲムフィブロジル、クロフィブレート、フェノフィブレートおよびベンザフィブレート（benzafibrate））およびプロブコールなどのコレステロール低下剤；（ｋ）インシュリン、スルホニル尿素類、ビグアニド類（メトホルミン）、ａ−グルコシダーゼ阻害薬（アカルボース）およびグリタゾン類（glitazones）（トログリタゾン（troglitazone）、ピオグリタゾン（pioglitazone）、エングリタゾン（englitazone）、ＭＣＣ−５５５、ＢＲＬ４９６５３など）などの抗糖尿病薬；（ｌ）インターフェロンβ（インターフェロンβ−１ａ、インターフェロンβ−１ｂ）の製剤；（ｍ）ムスカリン拮抗薬（臭化イプラトロピウム）などの抗コリン作動薬；（ｎ）５−アミノサリチル酸およびそれのプロドラッグ、アザチオプリンおよび６−メルカプトプリンなどの代謝拮抗剤ならびに細胞毒性癌化学療法薬などの他の化合物などがあるが、これらに限定されるものではない。
【００８６】
第２の有効成分に対する式Ｉの化合物の重量比は変動し得るものであって、各成分の有効用量によって決まる。通常は、それぞれの有効用量を用いる。そこで例えば、式Ｉの化合物をＮＳＡＩＤと併用する場合、ＮＳＡＩＤに対する式Ｉの化合物の重量比は、約１０００：１〜約１：１０００、好ましくは約２００：１〜約１：２００の範囲である。式Ｉの化合物および他の有効成分の併用も、概して上記の範囲内であるが、各場合について、各有効成分の有効用量を用いるべきである。
【００８７】
下記の図式および実施例で使用される略称
４−ＤＭＡＰ：４−ジメチルアミノピリジン
Ａｃ２Ｏ：無水酢酸
ＡｃＣＮ：アセトニトリル
Ａｇ２Ｏ：酸化銀（Ｉ）
ＡＩＢＮ：２，２′−アゾビスイソブチロニトリル
ＢＦ３−Ｅｔ２Ｏ：三フッ化ホウ素・エーテラート
ＢＨ３−ＤＭＳ：ボランジメチルスルフィド錯体
Ｂｎ：ベンジル
ＢＯＣ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ＢＯＣ−ＯＮ：２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシイミノ）−２−フェニルアセトニトリル
ＢＯＰ：ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ブライン：飽和塩化ナトリウム溶液
ＣＢＺ：ベンジルオキシカルボニル
Ｃｙ３Ｐ：トリシクロヘキシルホスフィン
ＤＢＵ：１，８−ジアゾビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン
ＤＣＣ：ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＩＢＡＬ−Ｈ：水素化アルミニウムジイソブチル
ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＥ：１，２−ジメトキシエタン
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド
ＤＭＰＵ：１，３−ジメチル−３，４，５，６−テトラヒドロ−２（１Ｈ）−ピリミジノン
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＥＤＣ：１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩
Ｅｔ：エチル
Ｅｔ２Ｏ：ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＥｔＯＨ：エタノール
ＦＭＯＣ：９−フルオレニルメトキシルカルボニル
ｇまたはｇｍ：グラム
ｈまたはｈｒ：時間
ＨＡＴＵ：Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム・ヘキサフルオロホスフェート
ＨＢＴＵ：Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム・ヘキサフルオロホスフェート
ＨＯＡｃ：酢酸
ＨＯＡｔ：１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
in vacuo：ロータリーエバポレーション
ＫＯＡｃ：酢酸カリウム
ＬＤＡ：リチウムジイソプロピルアミド
ＬｉＨＭＤＳ：リチウムヘキサメチルジシリルアミド
ＭＣＰＢＡ：メタ−クロロ過安息香酸
Ｍｅ：メチル
ＭｅＩ：ヨウ化メチル
ＭｅＯＨ：メタノール
ｍｇ：ミリグラム
ＭＨｚ：メガヘルツ
ｍｉｎ：分
ｍＬ：ミリリットル
ｍｍｏｌ：ミリモル
ＭＰＬＣ：中圧液体クロマトグラフィー
ＭＳまたはｍｓ：質量スペクトラム
ＭＳＣＩ：メタンスルホニルクロライド
ＮＢＳ：Ｎ−ブロモコハク酸イミド
ＮＭＯ：４−メチル−モルホリン−Ｎ−オキサイド
Ｐｄ２ｄｂａ３：トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）
Ｐｈ：フェニル
Ｐｈ３Ｐ：トリフェニルホスフィン
ｐＴＳＡ：パラ−トルエンスルホン酸
ＰｙＢＯＰ：（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリピロリジノホスホニウム・ヘキサフルオロホスフェート
ｒｔ：室温
ＴＢＡＦ：テトラブチルアンモニウムフルオライド
ＴＢＳＣｌ：ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロライド
ｔ−Ｂｕ３Ｐ：トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィン
ＴＥＡ：トリエチルアミン
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ：ＴＨＦ
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー
ＴＭＳＣＨＮ２：トリメチルシリルジアゾメタン
ＴＭＳＣｌ：トリメチルシリルクロライド
ＴＭＳＩ：トリメチルシリルヨージド
ＴＰＡＰ：過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウム
ＴｓＣｌ：パラ−トルエンスルホニルクロライド。
【００８８】
添付の図式に示した手順によって、本発明の化合物を製造することができる。第１の方法（図式１）では、置換ピリジル−４−カルボン酸誘導体Ａを塩化チオニルで処理してカルボン酸クロライド誘導体とし、それを次に４−アミノ−（Ｌ）−フェニルアラニン誘導体と反応させて、アミドＢを得る。ＢにおけるＮ−ＢＯＣ−保護基を強酸（ＴＦＡまたはＨＣｌ）で脱離させて、遊離のアミンＣを得る。適切に置換された２−アゼチジニル−、２−ピロリジニル−または２−ピペリジニル−カルボン酸エステルＤを塩基（ＤＩＰＥＡまたはＮａ２ＣＯ３）存在下に置換アリールスルホニルクロライドでスルホニル化してスルホンアミドＥを得る。エステル保護基が含まれている場合は、それを水酸化物で処理して、遊離酸を得る。アミンＣおよび酸Ｅを適切なカップリング剤（例：ＰｙＢＯＰ、ＨＢＴＵ／ＨＯＡｔによって、Ｅの酸塩化物を予め形成）の存在下に一緒に反応させて、アミドＦを得る。Ｆにおけるエステルを水酸化物（Ｒ５がｎ−アルキルである場合）またはＴＦＡもしくはＨＣｌ（Ｒ５がｔｅｒｔ−ブチルである場合）で加水分解することができる。
【００８９】
【化９】
【００９０】
下記の実施例に詳細に記載の手順によって、本発明の化合物を製造することができる。これら実施例は本発明を説明するためのものであって、いかなる形態でも本発明の範囲を限定するものと解釈すべきではない。
【００９１】
（参考例１）
３，５−ジクロロイソニコチン酸
３，５−ジクロロピリジン（１０．００ｇ、６７．５７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（７０ｍＬ）溶液に、ＬＤＡの２．０Ｍ ＴＨＦ溶液３５．４ｍＬを−７８℃で加えた。反応液を１時間撹拌し、ＣＯ２ガスを２０分間溶液に吹き込んだ。反応液を１時間かけて昇温させて室温とし、１Ｎ ＮａＯＨ（１００ｍＬ）で反応停止し、Ｅｔ２Ｏ（５０ｍＬ）で洗浄した。水層を濃ＨＣｌで酸性とすることで、沈殿を形成させた。沈殿を濾取し、ＥｔＯＨから再結晶して、標題化合物を淡黄色固体として得た（７．１ｇ、３６．９７ｍｍｏｌ、５５％）。
【００９２】
【化１０】
【００９３】
（参考例２）
４−（（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ）−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル塩酸塩
段階Ａ
Ｎ−（ＢＯＣ）−４−（（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ）−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
３，５−ジクロロイソニコチン酸（３．１ｇ、１６．１１ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中スラリーをＤＭＦ（５０μＬ）および塩化チオニル（１．２３ｍＬ、１６．９１ｍｍｏｌ）で処理し、５時間加熱還流した。反応液を濃縮して、黄色油状物を得た。その油状物をＣＨ２Ｃｌ２５ｍＬに溶かし、Ｎ−（ＢＯＣ）−４−アミノ−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（４．００ｇ、１４．３９ｍｍｏｌ）および４−メチルモルホリン（２．７ｍＬ、２４．２１ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）溶液に０℃で加えた。この温度で２時間撹拌後、水（５０ｍＬ）で反応停止し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した（１００ｍＬで３回）。合わせた有機層を混合し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮して、黄色固体を得た。ＣＨ２Ｃｌ２での磨砕によって、白色固体５．５ｇを得た。
【００９４】
【化１１】
【００９５】
段階Ｂ
４−（（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ）−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル塩酸塩
Ｎ−（ＢＯＣ）−４−（（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ）−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（２．５０ｇ、５．３４ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）に溶かし、ＨＣｌ（ガス）で処理した。減圧下に濃縮して、標題化合物を黄色固体として得た（２．０５ｇ、４．５９ｍｍｏｌ、８６％）。
【００９６】
【化１２】
【００９７】
（参考例３）
Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−（Ｌ）−プロリン
段階Ａ
Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
（Ｌ）−プロリン・メチルエステル塩酸塩（８３８ｍｇ、５．０６ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）中混合物に０℃で、ＤＩＰＥＡ（２．６４ｍＬ、１５．２ｍｍｏｌ）および３，５−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（１．４９ｇ、６．０７ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）溶液を加えた。冷却浴を外し、混合物を室温で終夜撹拌した。それをＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、１Ｎ塩酸、飽和ＮａＨＣＯ３、飽和ブライン溶液で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ロータリーエバポレーションを行った。生成物を、１０％アセトン／ヘキサンを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルを得た。収量：１．４９ｇ。
【００９８】
段階Ｂ
Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−（Ｌ）−プロリン
段階ＡからのＮ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルをエタノール（５０ｍＬ）に溶かし、室温で１．５時間にわたり０．２Ｎ水酸化ナトリウム（２６．６ｍＬ）で処理した。混合物を氷ＨＯＡｃで酸性とし、ロータリーエバポレーションによって濃縮し、残留物をＣＨ２Ｃｌ２に溶かし、水、飽和ブライン溶液で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、留去して標題化合物を得た。収量１．４ｇ。
【００９９】
【化１３】
【０１００】
（参考例４）
Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン
段階Ａ
２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル塩酸塩
脱水ＭｅＯＨ（６５ｍＬ）溶液を０℃とし、それに塩化チオニル（９．０３ｍＬ、１２４ｍｍｏｌ）を５分間かけてゆっくり加えた。２−メチル−（Ｌ）−プロリン（BachemAG、カタログ番号Ｆ−３４４０、Bubendorf、Switzerland）（４．０ｇ、３１ｍｍｏｌ）を１回で加えた。反応液を０℃で５分間撹拌し、昇温させて室温とした。次に、反応液を７０℃で終夜加熱した。反応液を冷却し、溶媒を除去して、２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル塩酸塩を白色固体として得た（５．７２ｇ）。
【０１０１】
段階Ｂ
Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル塩酸塩（９５ｇ、５２．９ｍｍｏｌ）を脱水ＴＨＦおよびＣＨ２Ｃｌ２の混合液（１：１）（２５０ｍＬ）に溶かした。３，５−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（１３．０ｇ、５２．９ｍｍｏｌ）の脱水ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）溶液を加えた。反応液を氷浴で冷却し、ジイソプロピルエチルアミン（２０．５ｇ、１５８．６ｍｍｏｌ）を加えた。氷浴を外し、反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応液を濃縮し、乾燥して黄褐色固体を得た（１８．６８ｇ）。その固体を、１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを溶離液とするバイオテージ（Biotage）４０Ｍクロマトグラフィーシステムで精製して、Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルを純粋な白色固体として得た（１６．８ｇ、収率８５％）。
質量スペクトラム（ｍ／ｅ）３５２（Ｍ＋１）。
【実施例】
【０１０２】
（実施例１）
Ｎ−（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−（（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ）−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
４−（（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ）−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル塩酸塩（参考例３；１．００ｇ、２．２３ｍｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（１．１６ｇ、２．２３ｍｍｏｌ）およびＮ−（（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン（参考例４；０．７０ｇ、２．１３ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）懸濁液に、ＤＩＰＥＡ（１．０ｍＬ、５．６ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で２０時間撹拌し、減圧下に濃縮した。ヘキサン／酢酸エチル（１：１）を溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって、白色固体１．４１ｇ（２．０４ｍｍｏｌ、９６％）を得た。
【０１０３】
【化１４】
【０１０４】
（実施例２）
Ｎ−（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−（（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ）−（Ｌ）−フェニルアラニン
Ｎ−（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−（（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ）−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（実施例１）のＭｅＯＨ（５ｍＬ）溶液に、１Ｍ ＮａＯＨ溶液３ｍＬを加えた。反応液を室温で１時間撹拌し、水２５ｍＬで希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）で洗浄し、その洗浄液を廃棄した。水層を濃ＨＣｌでｐＨ＝１の酸性とし、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した（５０ｍＬで３回）。合わせた有機層を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮して、標題化合物を白色固体として得た（１．１０ｇ、１．６３ｍｍｏｌ、８０％）。
【０１０５】
【化１５】
【０１０６】
（実施例３）
Ｎ−（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−（Ｌ）−プロリル）−４−（（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）−アミノ）−（Ｌ）−フェニルアラニン
（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルに代えて（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（参考例３）を用い、実施例２に記載の手順に従って、Ｎ−（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−（Ｌ）−プロリル）−４−（（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ）−（Ｌ）−フェニルアラニンを製造した。
【０１０７】
【化１６】
【０１０８】
（実施例４）
Ｎ−（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−アゼチジン−２（Ｓ）−カルボニル）−４−（（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ）−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−アゼチジン−２（Ｓ）−カルボン酸
（Ｌ）−プロリン・メチルエステルに代えてアゼチジン−２（Ｓ）−カルボン酸・メチルエステルを用い、参考例３に記載の手順に従って、Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−アゼチジン−２（Ｓ）−カルボン酸を製造した。
【０１０９】
【化１７】
【０１１０】
段階Ｂ
Ｎ−（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−アゼチジン−２（Ｓ）−カルボニル）−４−（（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ）−（Ｌ）−フェニルアラニン
（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルに代えて（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−アゼチジン−２（Ｓ）−カルボン酸メチルエステルを用い、実施例２に記載の手順に従って、Ｎ−（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−アゼチジン−２（Ｓ）−カルボニル）−４−（（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ）−（Ｌ）−フェニルアラニンを製造した。
ＭＳｍ／ｅ６４７．２（Ｍ＋）。
【０１１１】
（実施例５）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′−クロロ−５′−メトキシ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−プロリル−（Ｌ）−４−ニトロフェニルアラニン・メチルエステル
Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン（１．２５ｇ、３．８５ｍｍｏｌ）、（Ｌ）−４−ニトロフェニルアラニン・メチルエステル塩酸塩（１．１０ｇ、４．２４ｍｍｏｌ）およびＰｙＢＯＰ（２．２０ｇ、４．２１ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）懸濁液に、ＤＩＰＥＡ（１．８ｍＬ、９．６４ｍｍｏｌ）を加えた。２０時間撹拌後、反応液を濃縮し、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（２：１）を溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル−（Ｌ）−４−ニトロフェニルアラニン・メチルエステルを白色泡状物として得た（１．５３ｇ、７３％）。
【０１１２】
段階Ｂ
（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル−４−アミノ−フェニルアラニン・メチルエステル
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル−（Ｌ）−４−ニトロフェニルアラニン・メチルエステル（１．５３ｇ、２．８９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２５ｍＬ）溶液に、塩化スズ（ＩＩ）・２水和物（６．４ｇ、２８．１９ｍｍｏｌ）を加え、反応液を５５℃で６時間撹拌した。反応液を冷却し、１Ｎ ＮａＯＨ水溶液（５０ｍＬ）を加えることで反応停止したところ、沈殿が生成した。その沈殿を濾去し、得られた透明溶液を飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮して、標題化合物を白色泡状物として得た（１．２３ｇ、８５％）。
【０１１３】
【化１８】
【０１１４】
段階Ｃ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′−クロロ−５′−メトキシ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
３−クロロ−５−メトキシ−イソニコチン酸（０．０２０ｇ、０．１０７ｍｍｏｌ）、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−アミノ−（Ｌ）−フェニルアラニンメチルエステル（０．０５０ｇ、０．０９７ｍｍｏｌ）およびＰｙＢＯＰ（０．０６１ｇ、０．１１６９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（０．２５０ｍＬ）懸濁液に、ＤＩＰＥＡ（０．０２７ｍＬ、０．１４６１ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を５時間撹拌し、濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製した。標題化合物を白色固体として単離した（０．０２０ｇ）。ＭＳｍ／ｅ６８３．２（Ｍ＋）。
【０１１５】
段階Ｄ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′−クロロ−５′−メトキシ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′−クロロ−５′−メトキシ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルのＭｅＯＨ（１ｍＬ）溶液に、１Ｎ ＮａＯＨ（０．２ｍＬ）を加えた。反応液を１時間撹拌し、分取ＨＰＬＣによって精製して、標題化合物を白色固体として得た（０．０１５ｇ）。ＭＳｍ／ｅ６６９．２（Ｍ＋）。
【０１１６】
（実施例６）
Ｎ−（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロピル）−（Ｌ）−３−（６−（（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ）−３−ピリジル）アラニン
段階Ａ
２−ブロモ−５−ブロモメチルピリジン
２−ブロモ−５−メチルピリジン（４．０１ｇ、２３．３１ｍｍｏｌ）、ＮＢＳ（５．１９ｇ、２９．１４ｍｍｏｌ）およびＡＩＢＮ（０．１９ｇ、１．１７ｍｍｏｌ）をＣＣｌ４（４６．６ｍＬ、２３．３１ｍｍｏｌ）に溶かした。反応混合物を７５℃で４時間加熱した。残留物を水で反応停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。粗混合物を、溶離液として７％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いるシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物２．６５ｇを得た。ＭＳｍ／ｅ２５１．９（Ｍ＋）。
【０１１７】
段階Ｂ
Ｎ−（ジフェニルメチレン）グリシン酸２−ブロモ−５−ｔｅｒｔ−ブチルメチルピリジン
２−ブロモ−５−ブロモメチルピリジン（２．６５ｇ、１０．６５ｍｍｏｌ）、Ｎ−（ジフェニルメチレン）グリシン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３．１５ｇ、１０．６５ｍｍｏｌ）、１０％水酸化セシウム・１水和物（１７．８８ｇ、１０６．５ｍｍｏｌ）およびＯ−アリル−Ｎ−（９−アントラセニルメチル）シンコニジニウムブロマイド（０．６４５ｇ、１．０６５ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（３１ｍＬ、１０．６５ｍｍｏｌ）に溶かした。反応混合物を冷却して−７８℃として４時間経過させ、次に−５０℃で１６時間経過させた。残留物を水で反応停止し、エーテルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。得られた粗混合物を次の段階で用いた。ＭＳｍ／ｅ４１１．２（Ｍ＋）。
【０１１８】
段階Ｃ
３−（６−ブロモ−３−ピリジン）アラニン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル
Ｎ−（ジフェニルメチレン）−グリシン酸２−ブロモ−５−ブチルメチルピリジン（１０．６５ｍｍｏｌ）を含む粗混合物をＴＨＦ（１０ｍＬ）、蒸留水（１０ｍＬ）およびＨＯＡｃ（５ｍＬ）の混合物に溶かした。反応混合物を室温で１．５時間混和した。残留物を２Ｎ ＨＣｌおよび水で反応停止した。得られた水層を濃ＮａＯＨで塩基性とし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮して所望の生成物１．５ｇを得た。
【０１１９】
ＭＳｍ／ｅ２４７．０（Ｍ＋）（質量スペクトラムは、所望の生成物からｔｅｒｔ−ブチルの質量を引いたものを示している）。
【０１２０】
段階Ｄ
Ｎ−（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−（Ｌ）−３−（６−ブロモ−３−ピリジル）アラニン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル
３−（６−ブロモ−３−ピリジン）アラニン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．７５ｇ、２．５ｍｍｏｌ）、Ｎ−３，５−ジクロロスルホニル−２−メチル−（Ｌ）−プロリン（０．９３ｇ、２．７５ｍｍｏｌ）およびＰｙＢＯＰ（１．４３ｇ、２．７５ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２．５ｍＬ、２．５ｍｍｏｌ）に溶かした。ＤＩＰＥＡ（０．６９ｍＬ、３．７５ｍｍｏｌ）を、反応混合物に加え、それを室温で２０時間撹拌した。残留物を水で反応停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。得られた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。粗混合物を、３５％酢酸エチル／ヘキサンを溶離液とするフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、所望の生成物０．７８ｇを得た。ＭＳｍ／ｅ６２２．２（Ｍ＋）。
【０１２１】
段階Ｅ
３，５−ジクロロピリジン−４−カルボン酸クロライド
３，５−ジクロロピリジン−４−カルボン酸（０．５ｇ、２．６ｍｍｏｌ；参考例１）をＣＨ２Ｃｌ２（１．７５ｍＬ）およびＤＭＦ（５０μＬ）に溶かした。塩化チオニル（０．２１ｍＬ、２．８６ｍＬ）を加え、反応混合物を５０℃で２０時間加熱した。残留物を減圧下に濃縮した。酸塩化物の形成をＴＬＣ（５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって観察し、粗生成物を次の段階で用いた。
【０１２２】
段階Ｆ
３，５−ジクロロピリジン−４−カルボキシアミド
３，５−ジクロロピリジン−４−カルボン酸クロライド（０．５４ｇ、２．６ｍｍｏｌ
）をＣＨ２Ｃｌ２（２．６ｍＬ、２．６ｍｍｏｌ）に溶かし、ＮＨ３（２．０Ｍジオキサン溶液）（６．５ｍＬ）を加えた。反応混合物を冷却して０℃とし、３０分間経過させた。残留物を水で反応停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。粗混合物を分取ＨＰＬＣによって精製して、所望の生成物０．１３５ｇを得た。ＭＳｍ／ｅ１９０．９（Ｍ＋）。
【０１２３】
段階Ｇ
Ｎ−（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−（Ｌ）−３−（６−（（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ）−３−ピリジル）アラニン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル
３，５−ジクロロピリジン−４−カルボキサミド（０．０１９ｇ、０．０９７ｍｍｏｌ）、Ｎ−（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−（Ｌ）−３−（６−ブロモ−３−ピリジル）アラニン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．０５ｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（０．０３７ｇ、０．１１３ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（０．００３ｇ、０．００３２ｍｍｏｌ）および９，９−ジメチル−４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）キサンテン（０．００５６ｇ、０．００９８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（０．５ｍＬ）に溶かした。反応混合物を５０℃で２０時間加熱した。残留物をＥｔＯＡｃに溶かし、シリカゲル層で濾過し、減圧下に濃縮した。粗混合物を分取ＨＰＬＣによって精製して、所望の生成物０．０１６ｇを得た。ＭＳｍ／ｅ７３２．２（Ｍ＋）。
【０１２４】
段階Ｈ
Ｎ−（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−（Ｌ）−３−（６−（（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ）−３−ピリジル）アラニン
Ｎ−（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−（Ｌ）−３−（６−（（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ）−３−ピリジル）アラニン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．０１６ｇ、０．０２ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）に溶かし、ＴＦＡ（１ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。残留物を減圧下に濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、所望の生成物１２ｍｇを得た。それをＥｔ２Ｏ／ヘキサンから結晶化させた。分取ＨＰＬＣによってさらに精製することで、エナンチオマー的に純粋な取得物を得た。
【０１２５】
【化１９】
【０１２６】
（実施例７）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロ−イソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．１０５ｇ、０．１５６ｍｍｏｌ）およびＭＣＰＢＡ（０．１３５ｇ、０．７８１ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２に溶かした。反応混合物を室温で撹拌した。ＴＬＣでは反応完結が示されなかったことから、反応液を加熱して５０℃とし、ＴＬＣによってモニタリングした。反応完結した時点で、残留物をＮａＨＣＯ３水溶液で反応停止し、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄した。得られた有機層を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。粗混合物を分取ＨＰＬＣによって精製して、所望の生成物を得た。
ＭＳｍ／ｅ６９１．２（Ｍ＋）。
【０１２７】
段階Ｂ
Ｎ−（Ｎ−［（３５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロ−イソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．１５６ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨに溶かし、反応液が透明となるまで１Ｎ ＮａＯＨを加えた（約１ｍＬ）。反応混合物を室温で約３０分間撹拌した。ＴＬＣで、反応完結したことが示された。ＴＦＡ数滴を溶液に加え、得られた固体を分取ＨＰＬＣによって精製して、標題化合物０．０５０ｇ（収率４７．６％）を得た。
ＭＳｍ／ｅ６７７．２（Ｍ＋）。
【０１２８】
（実施例８）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−ヒドロキシ−３−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−［（３，５ジクロロベンゼン）スルホニル］−グリシン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ｔ−ブチルグリシン塩酸塩（２．０ｇ、１１．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（３．１ｇ、２３．９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液に０℃で、３，５−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（２．１ｇ、１１．９ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を終夜で昇温させて室温とし、減圧下に濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｍ ＨＣｌ、ＮａＨＣＯ３、ブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。淡黄色固体をヘキサンで磨砕した。粗混合物を次の段階で用いた。
【０１２９】
段階Ｂ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−ヒドロキシ−３−メチル−（Ｌ）−プロリン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル
段階Ａからの生成物（０．２ｇ、０．５９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）溶液に、メチルビニルケトン（０．０４ｇ、０．５９ｍｍｏｌ）および次にＤＢＵ（０．１９７ｇ、１．２９ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を終夜撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｍ ＨＣｌ、ＮａＨＣＯ３およびブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮して橙赤色油状物を得た。粗混合物を次の段階で用いた。
【０１３０】
【化２０】
【０１３１】
段階Ｃ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−ヒドロキシ−３−メチル−（Ｌ）−プロリン 段階Ｂからの生成物のＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（２ｍＬ）を加えた。溶液を４時間撹拌し、減圧下に濃縮し、トルエンと共沸させて、過剰のＴＦＡを除去した。溶媒をロータリーエバポレーションによって除去し、粗生成物をそれ以上精製せずに次の段階で用いた。
【０１３２】
段階Ｄ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−ヒドロキシ−３−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
段階ＣからのＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−ヒドロキシ−３−メチル−（Ｌ）−プロリン（０．１ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、３，５−（ジクロロイソニコチノイル）アミノ−（Ｌ）−フェニルアラニン（０．１１４ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（０．０６ｇ、０．４２ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液に０℃で、ＤＩＰＥＡ塩基（０．０７３ｇ、０．５６ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（０．１０７ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を終夜で昇温させて室温とした。反応液をＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｍ ＨＣｌ、ＮａＨＣＯ３、ブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。粗混合物を、７５％ヘキサン／Ｅｔ２Ｏから１００％Ｅｔ２Ｏへの勾配溶離を行うシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、所望の生成物０．１３３７ｇを得た。それを次の段階で用いた。
【０１３３】
段階Ｅ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−ヒドロキシ−３−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階ＤからのＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−ヒドロキシ−３−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．１３４ｇ）のＴＨＦ溶液に、１Ｍ ＬｉＯＨを加えた。反応液を室温で４時間撹拌した。次に、２Ｎ ＨＣｌで反応停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。
ＭＳｍ／ｅ６９１．２（Ｍ＋）。
【０１３４】
（実施例９）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン
（４Ｓ，２Ｓ）Ｎ−ＢＯＣ−４−フェニル−ピロリジン−２−カルボン酸（１．０ｇ、３．４ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液に０℃で、ＴＦＡ（１５ｍＬ）を加えた。反応液を昇温させて室温とし、４時間経過させた。反応液を減圧下に濃縮し、トルエンと共沸させた。粗生成物を次の段階で用いた。
【０１３５】
段階Ｂ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン
段階Ａからの生成物（０．６６ｇ、３．４３ｍｍｏｌ）の飽和Ｎａ２ＣＯ３水溶液中の溶液に、３，５−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（１．７９ｇ、６．８６ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で終夜撹拌した。反応液をＥｔ２Ｏおよび水で希釈し、Ｅｔ２Ｏ層は廃棄した。水層を２Ｎ ＨＣｌでｐＨ＝４の酸性とし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を回収し、ブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮して淡橙赤色固体１．１ｇを得た。粗生成物を次の段階で用いた。
【０１３６】
段階Ｃ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
段階ＢからのＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン（０．１ｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、３，５−（ジクロロイソニコチノイル）アミノ−（Ｌ）−フェニルアラニン（０．１０２ｇ、０．２５ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（０．０５１ｇ、０．３７５ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液に０℃で、ＤＩＰＥＡ（０．０６５ｇ、０．５ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（０．０１５ｇ、０．２７５ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を終夜で昇温させて室温とした。反応をＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｍ ＨＣｌ、ＮａＨＣＯ３およびブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。粗混合物を、７５％ヘキサン／Ｅｔ２Ｏから１００％Ｅｔ２Ｏの勾配溶離を行うシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、所望の生成物６６．２ｍｇを得た。精製固体を次の段階で用いた。
ＭＳｍ／ｅ７５１．２（Ｍ＋）。
【０１３７】
段階Ｄ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ｃからの生成物（０．０６６ｇ、０．０８８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液に、１Ｍ ＬｉＯＨ（１ｍＬ）を加えた。反応液を室温で４時間撹拌した。反応液を２Ｎ ＨＣｌでｐＨ４の酸性とし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮してＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを得た。
ＭＳｍ／ｅ７３７．２（Ｍ＋）。
【０１３８】
（実施例１０）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−（Ｒ）−フェニル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−（Ｒ）−フェニル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａで４（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリンに代えて３（Ｒ）−フェニルピロリジン−２（Ｓ）−カルボン酸を用い、実施例９に記載の手順によって、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−（Ｒ）−フェニル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを製造した。
ＭＳｍ／ｓ７３７．２（Ｍ＋）。
【０１３９】
（実施例１１）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−ＢＯＣ−４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
ＢＯＣ−４（Ｓ）−フェニル−ピロリジン−２（Ｓ）−カルボン酸（４．０ｇ；１３．７３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３５ｍＬ）およびＣＨ２Ｃｌ２（３５ｍＬ）溶液中の溶液に０℃で、１０分間かけて１Ｍトリメチルシリルジアゾメタンのヘキサン溶液（１３．７３ｍＬ、２７．４６ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を３時間かけて昇温させて室温とした。ＨＯＡｃで反応停止した。トルエンを加え、反応液を減圧下に濃縮した。粗生成物を次の反応で用いた。
【０１４０】
段階Ｂ
Ｎ−ＢＯＣ−２−メチル−４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン、メチルエステル
段階ＡからのＮ−ＢＯＣ−４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（２．０ｇ、６．５６ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液に−７８℃で、３０分間かけて１Ｍ ＬｉＨＭＤＳのヘキサン溶液（９．８３ｍＬ、９．８３ｍｍｏｌ）を加え、−７８℃で３０分間撹拌した。反応液を０℃で１時間撹拌した。反応液を冷却して−７８℃とし、ＭｅＩ（４．６５ｇ、３２．７９ｍｍｏｌ）を滴下した。反応液を終夜で昇温させて室温とした。ＮＨ４Ｃｌで反応停止した。有機層を回収し、１Ｍ ＨＣｌ、ＮａＨＣＯ３、ブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。粗生成物を、７５％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサンを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、所望の生成物１．８５ｇを得た。
【０１４１】
【化２１】
【０１４２】
段階Ｃ
２−メチル−４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
段階ＢからのＮ−ＢＯＣ−２−メチル−４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（１．８５ｇ、５．８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ溶液に、ＨＣｌ（ガス）を１０分間かけて吹き込んだ。ＨＣｌ飽和溶液を室温で５時間撹拌し、減圧下に濃縮し、トルエンと共沸させた。粗生成物を次の段階で用いた。
【０１４３】
段階Ｄ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
段階Ｃからの２−メチル−４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（０．５９２ｇ、１．４２ｍｍｏｌ）および３，５−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（４．２６ｇ、１７．３ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液に０℃で、ＤＩＰＥＡ（１０ｇ；５７．９ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を３日間かけて昇温させて室温とした。反応液をＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｍ ＨＣｌ、ＮａＨＣＯ３、ブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。粗生成物を、５０％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサンを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。２つのジアステレオマーの混合物が認められた。
【０１４４】
段階Ｅ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン
段階ＤからのＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（２．０ｇ、５．４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ溶液に、１Ｍ ＮａＯＨを加えた。反応液を終夜還流させた。反応液をＥｔＯＡｃで希釈し、濃ＨＣｌでｐＨ４の酸性とし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。
【０１４５】
段階Ｆ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
段階ＥからのＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン（０．２ｇ、０．４８３ｍｍｏｌ）、４−（３，５−ジクロロイソニコチノイル）−アミノ−（Ｌ）−フェニルアラニン（０．１９５ｇ、０．４８３ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（０．１ｇ、０．７２５ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）溶液に０℃で、ＤＩＰＥＡ（０．１２５ｇ、０．９６６ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（０．１８４ｇ、０．４８３ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を終夜で室温とした。反応液をＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｍ ＨＣｌ、ＮａＨＣＯ３、ブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。２つのジアステレオマーをキラルシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって分離して、所望の生成物０．１５８３ｇを得た。
【０１４６】
段階Ｇ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリル）−４−（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階ＦからのＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−４−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．１５８３ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の一方の異性体のＴＨＦ溶液に、１Ｍ ＬｉＯＨ（１ｍＬ）を加えた。反応液を室温で４時間撹拌した。反応液をＥｔＯＡｃで希釈し、２Ｎ ＨＣｌでｐＨ４の酸性とし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。
【０１４７】
【化２２】
【０１４８】
（実施例１２）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−３−（Ｓ）−フェニル−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−３−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリンメチルエステル
段階ＡでＢＯＣ−４（Ｓ）−フェニル−ピロリジン−２（Ｓ）−カルボン酸に代えてＢＯＣ−３（Ｓ）−フェニル−ピロリジン−２（Ｓ）−カルボン酸を用い、実施例１１段階Ａ〜Ｄに記載の手順に従って、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−３−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリンメチルエステルを製造した。
【０１４９】
段階Ｂ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−３−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン
段階ＡからのＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−３−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリンメチルエステル（０．６０１ｇ）に、無希釈のＴＭＳＩ（５ｍＬ）を加えた。反応液を９５℃で終夜撹拌した。黒色溶液を減圧下に濃縮し、２Ｎ ＨＣｌで酸性とし、ＥｔＯＡｃで抽出し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。残留物を、２５％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサンから１００％Ｅｔ２Ｏへの勾配溶離を行うシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物０．１８０ｇを得た。
【０１５０】
段階Ｃ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−３−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリンカルボン酸クロライド
段階ＢからのＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−３−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン（０１８０ｇ、０．４３５ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液に塩化チオニル（１．０３ｇ、８．７ｍｍｏｌ）を加え、終夜撹拌還流した。反応液を減圧下に濃縮し、トルエンと共沸させた。粗酸塩化物を次の反応で用いた。
【０１５１】
段階Ｄ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−３−（Ｓ）−フェニル−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
段階Ｃからの酸塩化物Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−３−（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリンカルボン酸クロライド（０．１８ｇ、０．４ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液に０℃で、４−（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ−（Ｌ）−フェニルアラニン（０．１１ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．１ｇ、０．８０ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液を加えた。反応液を終夜で昇温させて室温とした。反応液をＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｍ ＨＣｌ、ＮａＨＣＯ３、ブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。粗生成物を、７５％Ｅｔ２Ｏ／ヘキサンを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、次の反応で用いた。
【０１５２】
段階Ｅ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−３（Ｓ）−フェニル−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階ＤからのＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−３−（Ｓ）−フェニル−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルのＴＨＦ溶液に、１Ｍ ＬｉＯＨを加えた。反応液を室温で４時間撹拌した。反応液を２Ｎ ＨＣｌでｐＨ４の酸性とし、ＥｔＯＡｃで抽出し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮してＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロ−ベンゼン）スルホニル］−２−メチル−３−（Ｓ）−フェニル−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）−アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンをピンク固体として得た。
ＭＳｍ／ｅ７５１．４（Ｍ＋）。
【０１５３】
（実施例１３）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−シクロヘキシル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−ＢＯＣ−３（Ｒ）−シクロヘキシル−（Ｌ）−プロリン
ＢＯＣ−３（Ｒ）−フェニル−ピロリジン−２（Ｓ）−カルボン酸（１．０ｇ、０．３０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ溶液に、ＰｔＯ２（０．１ｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を加え、それをパール振盪装置で約０．３４ＭＰａ（５０ｐｓｉ）のＨ２雰囲気下にて終夜振盪した。反応液をセライト層で濾過し、減圧下に濃縮した。粗生成物を次の反応で用いた。
【０１５４】
段階Ｂ
３（Ｒ）−シクロヘキシル−（Ｌ）−プロリン
段階ＡからのＮ−ＢＯＣ−３（Ｒ）−シクロヘキシル−（Ｌ）−プロリン（１．０ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ）溶液に０℃で、ＴＦＡ（６ｍＬ）を加えた。反応液を昇温させて室温とし、４時間経過させた。反応液を減圧下に濃縮し、トルエンと共沸させた。粗生成物を次の反応で用いた。
【０１５５】
段階Ｃ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３［（Ｒ）−シクロヘキシル−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
実施例９段階Ｂ〜Ｄに記載の手順に従って、３（Ｒ）−シクロヘキシル−（Ｌ）−プロリンからＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３［（Ｒ）−シクロヘキシル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを製造した。
ＭＳｍ／ｅ７４３．２（Ｍ＋）。
【０１５６】
（実施例１４）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４−（Ｓ）−シクロヘキシル−（Ｌ）−プロリル］−４−［（３，５−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階ＡでＢＯＣ−３（Ｒ）−フェニル−ピロリジン−２（Ｓ）−カルボン酸に代えてＢＯＣ−４（Ｓ）−フェニル−ピロリジン−２（Ｓ）−カルボン酸（１．０ｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を用い、実施例１３に記載の手順に従って、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４−（Ｓ）−シクロヘキシル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを製造した。
ＭＳｍ／ｓ７４３．２（Ｍ＋）。
【０１５７】
（実施例１５）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−シクロヘキシル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階ＡでＢＯＣ−３（Ｒ）−フェニル−ピロリジン−２（Ｓ）−カルボン酸に代えてラセミ体のＢＯＣ−３−フェニル−ピロリジン−２−カルボン酸（１．０ｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を用い、実施例１３に記載の手順に従って、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３［（Ｓ）−シクロヘキシル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを製造した。３，５−ジクロロ−ベンゼンスルホニルクロライドでスルホニル化した後、段階Ｃでシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによってシス（３Ｓ，２Ｓ）異性体を単離した。
ＭＳｍ／ｓ７３７．２（Ｍ＋）。
【０１５８】
（実施例１６）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−トランス−３−カルボキシ−２−メチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
アラニン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル・ｔｅｒｔ−ブチルイミン
アラニン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル塩酸塩２５．０ｇ（０．１４ｍｏｌ）、４Å粉末モレキュラーシーブス２０．０ｇ、ＴＥＡ２１ｍＬ（０．１５ｍｏｌ）および脱水ＣＨ２Ｃｌ２４００ｍＬ中混合物に、ピバロアルデヒド（pivaldehyde）１８ｍＬ（０．１６ｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１７時間撹拌し、Ｅｔ２Ｏ１リットルで希釈し、セライト層で濾過し、減圧下に濃縮してアラニン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル・ｔｅｒｔ−ブチルイミン３０ｇ（約１００％）を無色油状物として得た。それをそれ以上精製せずに用いた。
【０１５９】
【化２３】
【０１６０】
段階Ｂ
トランス−３−メトキシカルボニル−２−メチル−５−オキソ−プロリンα−ｔｅｒｔ−ブチルエステル
段階Ａからのイミン１５ｇ（７０．４ｍｍｏｌ）およびＬｉＢｒ６．７ｇ（７７．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３００ｍＬ）溶液に−１０℃で、フマル酸ジメチル１０．１ｇ（７０．４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２５ｍＬ）溶液と次にＤＢＵ１０．５ｍＬ（７０．４ｍｍｏｌ）を加えた。−１０℃で７５分後、ＮＨ４Ｃｌ水溶液で反応停止し、Ｅｔ２Ｏで希釈し、分液を行った。有機層をＮａＨＣＯ３（５０ｍＬで２回）、ブライン（５０ｍＬで１回）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。粗残留物をＭｅＯＨ２５０ｍＬおよびＨ２Ｏ８０ｍＬに溶かし、ＨＯＡｃ０．１ｍＬを加えた。反応液を１６時間還流し、冷却し、濃縮した。粗生成物をＥｔＯＡｃに溶かし、ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬで２回）、ブライン（５０ｍＬで１回）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮して固体を得た。ヘキサンでの磨砕によって、トランス−３−メトキシ−カルボニル−２−メチル−５−オキソ−プロリン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル７．７ｇをＴＬＣ分析によって均一な白色固体として得た。
【０１６１】
【化２４】
【０１６２】
段階Ｃ
トランス−３−メトキシカルボニル−２−メチル−５−チオカルボニル−プロリン・α−ｔｅｒｔ−ブチルエステル
の混合物段階Ｂからの２−メチル−３−メトキシカルボニル−５−オキソ−プロリン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル７．５ｇ（２５．８ｍｍｏｌ）およびローソン試薬６．２ｇ（１５．５ｍｍｏｌ）のトルエン（１００ｍＬ）中混合物を昇温させて７０℃として１時間経過させ、冷却し、濃縮して固体を得た。Ｅｔ２Ｏ／ヘキサンでの磨砕によって、２−メチル−３−メトキシ−カルボニル−５−チオカルボニル−プロリン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル６．６ｇをＴＬＣ分析によって均一な白色固体として得た。それをれ以上精製せずに次の反応で用いた。
【０１６３】
段階Ｄ
トランス−３−メトキシカルボニル−２−メチル−プロリン・α−ｔｅｒｔ−ブチルエステル
段階Ｃからの２−メチル−３−メトキシカルボニル−５−チオカルボニル−プロリン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル６．６ｇ（２１．５ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）溶液に、過剰のＲａＮｉを加えた。ＴＬＣ分析による判定で原料が消費されるまで、反応液を室温で撹拌した。混合物をセライト層で濾過し、減圧下に濃縮して無色油状物５ｇを得た。その油状物、Ｐｄ／ＣおよびＥｔＯＡｃ１００ｍＬの混合物を、Ｈ２風船下に２６時間撹拌した。混合物をセライト層で濾過し、濃縮して２−メチル−３−メトキシカルボニル−プロリン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル（単一のジアステレオマー）４．５ｇをＴＬＣ分析によって均一な無色油状物として得た。それをそれ以上精製せずに用いた。
【０１６４】
【化２５】
【０１６５】
段階Ｅ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−トランス−３−メトキシカルボニル−２−メチル−プロリン・α−ｔｅｒｔ−ブチルエステル
段階Ｄからの２−メチル−３−メトキシカルボニルプロリン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２．０ｇ、７．３ｍｍｏｌ）および３，５−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド２．６ｇ（１４．５ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）溶液に０℃で、ＤＩＰＥＡ３．８ｍＬ（２１．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を終夜で昇温させて室温とした。１４時間後、反応液をＥｔ２Ｏ１５０ｍＬで希釈し、１Ｍ ＨＣｌ（５０ｍＬで２回）、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬで２回）、ブライン（５０ｍＬで１回）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−トランス−３−メトキシカルボニル−２−メチル−プロリン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３．８ｇ）を明橙赤色固体として単離し、それをそれ以上精製せずに用いた。そのｔｅｒｔ−ブチルエステルをＣＨ２Ｃｌ２に溶かし、実施例８段階Ｃに記載の手順に従ってＴＦＡで処理して、Ｎ−［（３，５−ジクロロ−ベンゼン）スルホニル］−トランス−３−メトキシカルボニル−２−メチル−プロリンを得た。
【０１６６】
段階Ｆ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−トランス−３−メトキシカルボニル−２−メチルプロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）−スルホニル］−２−メチル−３−メトキシカルボニル−プロリン４２６ｍｇ（１．０８ｍｍｏｌ）、４−（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル塩酸塩４３５ｍｇ（１．０８ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ４９２ｍｇ（１．２９ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ２２０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ３４８ｍｇ（２．７３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液を室温で終夜撹拌した。所望の生成物を、３：１ヘキサン−Ｅｔ２Ｏそして３：１Ｅｔ２Ｏ−ヘキサン次に１００％Ｅｔ２Ｏを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、所望の生成物９００ｍｇを無色油状物として得た。次に、分取キラルＨＰＬＣ（ＡＳカラム、１５％ＥｔＯＨ／ヘキサン）による精製によって、極性が低い方のジアステレオマー４００ｍｇおよび極性が高い方のジアステレオマー３８６ｍｇを得た。
【０１６７】
段階Ｇ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−トランス−３−メトキシカルボニル−２−メチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ｆからの極性が低い方のジアステレオマー４００ｍｇのＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に０℃で、１Ｍ ＬｉＯＨ８ｍＬを加えた。反応液を０℃で２時間撹拌し、昇温させて室温とし、ＥｔＯＡｃで希釈し、ｐＨが約４となるまで２Ｍ ＨＣｌで酸性とした。分液を行い、水層をＥｔＯＡｃで抽出した（３回）。合わせた有機層を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮して、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−トランス−３−メトキシカルボニル−２−メチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン３５５ｍｇを無色泡状物として得た。
ＨＰＬＣ：ＭＳ７１９．１（Ｍ＋Ｈ）。
【０１６８】
（実施例１７）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−トランス−３−フェニル−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａで４（Ｓ）−フェニル−（Ｌ）−プロリンに代えてラセミ体の３−フェニルピロリジン−２−カルボン酸を用いて、実施例９に記載の手順に従って、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−トランス−３−フェニル−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを製造した。シスおよびトランスの最終生成物を、Ｅｔ２Ｏ、Ｅｔ２Ｏ／ＥｔＯＡｃ、Ｅｔ２Ｏ／ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨによる順次複数回の展開を行う分取薄層クロマトグラフィーによって分離して、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−トランス−３−フェニル−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンをジアステレオマーの１：１混合物として得た。 ＨＰＬＣ：ＭＳ７３７．３（Ｍ＋Ｈ）。
【０１６９】
（実施例１８）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−トランス−３−ヒドロキシメチル−２−メチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−トランス−３−カルボキシ−２−メチル−プロリン・α−ｔｅｒｔ−ブチルエステル
実施例１６段階ＥからのＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−トランス−３−メトキシカルボニル−２−メチル−プロリン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３．８ｇ、９．５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ中１Ｍ ＬｉＯＨによって加水分解して、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−トランス−３−カルボキシ−２−メチル−プロリン・α−ｔｅｒｔ−ブチルエステル３．３ｇを明黄褐色固体として得た。それをそれ以上精製せずに用いた。
【０１７０】
段階Ｂ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−トランス−３−ヒドロキシメチル−２−メチル−プロリン・α−ｔｅｒｔ−ブチルエステル
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−トランス−３−カルボキシ−２−メチル−プロリン・α−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３００ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌのＴＨＦ（４ｍＬ）溶液に、ＢＨ３・ＤＭＳ０．０９１ｍＬ（０．９６ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を昇温させて４５℃とし、ＴＬＣ分析（５〜６時間）による判定で原料が消費されるまでその温度に維持した。ＭｅＯＨを加えて過剰の還元剤を分解し、反応液を減圧下に濃縮して無色油状物を得た。それをそれ以上精製せずに用いた。
【０１７１】
【化２６】
【０１７２】
段階Ｃ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−トランス−３−ヒドロキシメチル−２−メチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
実施例１６段階Ｅ〜Ｇに記載の手順に従って、段階ＢからのＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−トランス−３−ヒドロキシメチル−２−メチル−プロリン・α−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１７５ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）をＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−トランス−３−ヒドロキシメチル−２−メチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンに変換した。
ＨＰＬＣ：ＭＳ６５９．２（Ｍ＋Ｈ）。
【０１７３】
（実施例１９）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−メトキシ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−ＢＯＣ−３（Ｒ）−メトキシ−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
Ｎ−ＢＯＣ−３（Ｒ）−ヒドロキシ−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル５００ｍｇ（２．０５ｍｍｏｌ）およびＭｅＩ １．７ｇ（１２．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に、Ａｇ２Ｏ４７３ｍｇ（２．０５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１８時間撹拌し、セライト層で濾過し、濃縮した。粗残留物をＥｔＯＡｃに溶かし、１Ｍ ＨＣｌ（１０ｍＬで２回）、飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬで２回）、ブライン（１０ｍＬで１回）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、濃縮してＮ−ＢＯＣ−３（Ｒ）−メトキシ−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル５００ｍｇを明黄色油状物として得た。それをそれ以上精製せずに用いた。
【０１７４】
【化２７】
【０１７５】
段階Ｂ
Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル−３（Ｒ）−メトキシ−（Ｌ）−プロリンメチルエステル
段階Ａからの生成物であるＮ−ＢＯＣ−３（Ｒ）−メトキシ−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（５００ｍｇ、１．９４ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ５ｍＬを加えた。ＴＬＣ分析による判定で原料が消費されるまで、反応液を室温で熟成させた。反応液を濃縮し、トルエンと共沸させ、それ以上精製せずに用いた。
【０１７６】
粗アミンのＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）溶液に０℃で、３，５−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド６８２ｍｇ（３．８８ｍｍｏｌ）および次にＤＩＰＥＡ１ｍＬ（９．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を１２時間かけて昇温させて室温とし、ＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｍ ＨＣｌ（５０ｍＬで２回）、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬで２回）、ブライン（５０ｍＬで１回）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。残留物を、３：１ヘキサン−Ｅｔ２Ｏから１：１ヘキサン−Ｅｔ２Ｏそして３：１ヘキサン−Ｅｔ２Ｏ次に１００％Ｅｔ２Ｏの順次勾配で溶離を行うシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル−３−（Ｒ）−メトキシ−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル１５０ｍｇをほぼ無色の油状物として得た。
【０１７７】
【化２８】
【０１７８】
段階Ｃ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−（Ｒ）−メトキシ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
実施例９に記載の手順（段階Ｄ（ＬｉＯＨ、ＭｅＯＨ）、段階Ｃ（３，５−（ジクロロイソニコチノイル）アミノ−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル、ＨＯＡｔ、ＤＩＰＥＡおよびＨＡＴＵ）、再度段階Ｄ（ＬｉＯＨ、ＭｅＯＨ））に従って、Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル−３（Ｒ）−メトキシ−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（１５０ｍｇ）からＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−（Ｒ）−メトキシ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを製造し、白色固体として得た。
ＨＰＬＣ：ＭＳ７０５．２（Ｍ＋Ｈ）。
【０１７９】
（実施例２０）
Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４−（Ｒ）−イソプロピルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・ギ酸塩
段階Ａ
Ｎ−ＢＯＣ−４（Ｓ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
Ｎ−ＢＯＣ−４（Ｓ）−ヒドロキシプロリン・メチルエステル（Bachem、１０ｇ、４０ｍｍｏｌ）およびＭｅＩ（１０ｍＬ、１６０ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ（１５０ｍＬ）溶液に−３０℃で、ＬＤＡ（Aldrich、１．５Ｍシクロヘキサン溶液、１００ｍＬ、１５０ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を４時間かけて昇温させて室温とした。反応液を冷却して−３０℃とし、飽和塩化アンモニウム水溶液（５０ｍＬ）で反応停止した。得られた混合物をＥｔＯＡｃとブラインとの間で分配し、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した（１００ｍＬで３回）。合わせた抽出液を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。残留物を、２０：１から１０：１ＣＨ２Ｃｌ２／アセトンを溶離液とするシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物を得た（ジアステレオマー的に純粋な取得物を得るには、繰り返しクロマトグラフィーが必要であった。先に溶出する少量成分の異性体、２．２ｇ、２１％）。それは放置していると固化する。文献報告（Noe, CR et al Pharmazie 1996, 51, 800）とのＮＭＲ比較によって、その立体化学を割り当てた。
【０１８０】
【化２９】
【０１８１】
段階Ｂ
Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｓ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
Ｎ−ＢＯＣ−４（Ｓ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（段階Ａ、２．２ｇ、８．５ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロライド（１．８ｇ、１２ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（１．１ｇ、１７ｍｍｏｌ）の脱水ＤＭＦ（４０ｍＬ）溶液を室温で終夜撹拌した。反応混合物をＥｔ２Ｏと水との間で分配し、生成物をＥｔ２Ｏで抽出した（２００ｍＬで２回）。合わせた抽出液を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下に濃縮した。残留物を脱水ＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）に溶かし、２，６−ジメチルルチジン（３．０ｍＬ、２６ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート（３．９ｍＬ、１７ｍｍｏｌ）を室温で加えた。２時間撹拌後、反応混合物を氷−水浴によって冷却し、フッ化カリウム（１．４ｇ、２４ｍｍｏｌ）の水溶液（水２０ｍＬ）を加えた。０℃で２時間撹拌後、反応混合物をエーテルと水との間で分配した。生成物をＥｔ２Ｏで抽出し（５０ｍＬで３回）、有機抽出液を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下に濃縮した。残留物をトルエンと共沸させ、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）およびＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶かした。溶液を氷水浴で冷却し、ＤＩＰＥＡ（４．４ｍＬ、２５ｍｍｏｌ）、４−ＤＭＡＰ（０．１０ｇ、０．８５ｍｍｏｌ）および３−クロロベンゼンスルホニルクロライド（２．７ｇ、１２ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を終夜で昇温させて室温とした。反応混合物を濃縮乾固し、残留物を４：１ヘキサン／ＥｔＯＡｃを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物のｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルエーテルを得た。それを直ちに使用した。そしてそのシリルエーテルのアセトニトリル（４０ｍＬ）溶液に０℃で、ＨＦ水溶液（４８％、４ｍＬ）を加え、反応液を終夜で昇温させて室温とした。反応混合物を５Ｎ ＮａＯＨ水溶液、ブラインおよびＥｔＯＡｃとの間で分配し、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した（１００ｍＬで３回）。合わせた抽出液を無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下に濃縮乾固して標題化合物を得た（３．０ｇ、段階Ａの生成物から９６％）。
【０１８２】
【化３０】
【０１８３】
段階Ｃ
Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
段階Ｂの生成物（３．１ｇ、９．０ｍｍｏｌ）の脱水ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）溶液に、ピリジン（３．６ｍＬ、４５ｍｍｏｌ）およびメシルクロライド（１．４ｍＬ、１８ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。室温で終夜撹拌後、反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、希硫酸第二銅（２回）およびブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮乾固して粗生成物を得た。それをそれ以上精製せずに用いた。そこで、残留物をＤＭＦ（２０ｍＬ）に溶かし、アジ化ナトリウム（３．０ｇ、４６ｍｍｏｌ）を加えた。５０℃で終夜撹拌後、追加のアジ化ナトリウム（３．０ｇ、４６ｍｍｏｌ）を加え、撹拌を７０℃でさらに４時間続けた。反応液を冷却して室温とし、得られた混合物をＥｔ２Ｏと水との間で分配した。生成物をＥｔ２Ｏで抽出した（１００ｍＬで３回）。合わせた抽出液を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下に濃縮し、残留物を４：１ヘキサン／ＥｔＯＡｃを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、生成物Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−アジゾ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルを得た。それをそれ以上精製せずに用いた。
【０１８４】
そこで、上記アジド（０．９０ｇ、２．５ｍｍｏｌ）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（０．７０ｇ、３．２ｍｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）溶液を二酸化白金（９０ｍｇ）のＥｔＯＡｃ（２ｍＬ）中スラリー（予め脱気し、水素充填したもの）に加えた。混合物を脱気し、風船の水素ガス雰囲気下にて室温で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮乾固し、残留物を４：１ヘキサン／ＥｔＯＡｃを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、生成物Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（１．１ｇ、段階Ｂの生成物から２８％）を得た。
【０１８５】
【化３１】
【０１８６】
段階Ｄ
Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン
段階ＣからのＮ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（１．１ｇ、２．５ｍｍｏｌ）の１：１：１ＴＨＦ／ＭｅＯＨ／水（計１２ｍＬ）溶液に、ＬｉＯＨ・１水和物（１．１ｇ、２６ｍｍｏｌ）を加えた。室温で終夜撹拌後、反応混合物をＥｔＯＡｃ／ブライン／０．５Ｍ硫酸水素ナトリウムの間で分配した。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し（２０ｍＬで３回）、有機抽出液を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮乾固して生成物Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン（１．０ｇ、９１％）を得た。
【０１８７】
【化３２】
【０１８８】
段階Ｅ
Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
実施例１に記載の手順によって、Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４−（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン（段階Ｄ、０．７５ｇ、１．８ｍｍｏｌ）を、４−［（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルにカップリングさせた（０．６９ｇ、５０％）。
【０１８９】
【化３３】
【０１９０】
段階Ｆ
Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（段階Ｅ、０．６９ｇ、０．８９ｍｍｏｌ）のＡｃＣＮ（５ｍＬ）および水（２ｍＬ）溶液に、ＬｉＯＨ・１水和物（０．１５ｇ、３．６ｍｍｏｌ）を加えた。室温で２時間撹拌後、反応混合物をＥｔＯＡｃ／ブライン／０５Ｍ硫酸水素ナトリウムの間で分配した。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し（５０ｍＬで２回）、有機抽出液を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して生成物Ｎ−［（Ｎ−（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン（０．６７ｇ、９９％）を得た。
【０１９１】
【化３４】
【０１９２】
段階Ｇ
Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−アミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・ＨＣｌ
Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンのサンプル（段階Ｆ、０．６２ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）を飽和塩化水素のＥｔＯＡｃ溶液７ｍＬで５時間にわたり室温で処理した。減圧下に濃縮することで、Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−アミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・塩酸塩を固体として得た（０．６１ｇ、１００％）。
【０１９３】
【化３５】
【０１９４】
段階Ｈ
Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−イソプロピルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・ギ酸塩
Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−アミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン塩酸塩（段階Ｇ、０．１０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１ｍＬ）中サンプルに、アセトン（０．０１０ｍＬ、０．１４ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．０４８ｍＬ、０．２７ｍｍｏｌ）および水素化ホウ素ナトリウムトリアセトキシ（０．１５ｇ、０．７０ｍｍｏｌ）を加えた。室温で終夜撹拌後、ギ酸（９６％、０．１ｍＬ）で反応停止し、ＤＭＳＯ（１ｍＬ）および水（１ｍＬ）で希釈した。得られた混合物を逆相分取ＨＰＬＣカラムに負荷し、アセトニトリルおよび水（０．１％ギ酸含有）で溶離して、Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−イソプロピルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・ギ酸塩（７４ｍｇ、７２％）を得た。
【０１９５】
【化３６】
【０１９６】
（実施例２１）
Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ジメチルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・ギ酸塩
実施例２０段階ＧからのＮ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−アミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン塩酸塩（０．３０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（３ｍＬ）中サンプルに、ホルムアルデヒド水溶液（０．３１ｍＬ、４．１ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．１４ｍＬ、０．８２ｍｍｏｌ）および水素化ホウ素ナトリウムトリアセトキシ（０．４４ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を加えた。室温で終夜撹拌後、ギ酸（９６％、０．２ｍＬ）で反応停止し、ジメチルスルホキシド（３ｍＬ）および水（３ｍＬ）で希釈した。得られた混合物を逆相分取ＨＰＬＣカラムに負荷し、アセトニトリルおよび水（０．１％ギ酸含有）で溶離して、Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ジメチルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・ギ酸塩（０．２１ｇ、６９％）を得た。
【０１９７】
【化３７】
【０１９８】
（実施例２２）
Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・ギ酸塩
段階Ａ
Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
実施例２０段階ＢからのＮ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｓ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（１．２ｇ、３．３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．４ｍＬ、８．３ｍｍｏｌ）の脱水ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）溶液に−２０℃で、無水トリフルオロメタンスルホン酸（０．８３ｍＬ、５．０ｍｍｏｌ）を滴下した。−２０℃で４５分間撹拌後、反応混合物の半量を別のフラスコに移し、アゼチジン（１．０ｇ、１８ｍｍｏｌ）を残りの溶液に加えた。反応液を終夜で昇温させて室温とし、得られた混合物を１：１：０．０２ヘキサン／ＥｔＯＡｃ／２ＭアンモニアＭｅＯＨ溶液を溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（０．５４ｇ、９７％）を得た。
【０１９９】
【化３８】
【０２００】
段階Ｂ
Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン
Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（段階Ａ、０．５４ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／ＭｅＯＨ／水（各１ｍＬ）溶液に、ＬｉＯＨ・１水和物（０．２７ｇ、６．４ｍｍｏｌ）を加えた。室温で終夜撹拌後、０．５Ｍ硫酸水素カリウムをｐＨ＝４となるまで加えることで反応停止した。生成した沈殿を濾取し、それを水およびエーテルで洗浄し、風乾してＮ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン（０．３４ｇ、６４％）を得た。
【０２０１】
段階Ｃ
Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
実施例１に記載の手順によって、Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン（段階Ｂ、０．１０ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）−アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルにカップリングさせて、Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．１３ｇ、６１％）を得た。
【０２０２】
【化３９】
【０２０３】
段階Ｄ
Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンメチルエステル（段階Ｃ、０．１２ｇ、０．１７ｍｍｏｌ）をＬｉＯＨ・１水和物（２８ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）を含むアセトニトリル（１ｍＬ）および水（０．５ｍＬ）に溶かし、室温で３時間撹拌した。ギ酸（９６％、０．２ｍＬ）で反応停止し、ＤＭＳＯ（１ｍＬ）および水（１ｍＬ）で希釈した。得られた混合物を逆相分取ＨＰＬＣカラムに負荷し、アセトニトリルおよび水（０．１％ギ酸含有）で溶離して、Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン（５５ｍｇ、４７％）を得た。
【０２０４】
【化４０】
【０２０５】
（実施例２３）
Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−ピロリジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・ギ酸塩
段階Ａ
Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−ピロリジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｓ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（実施例２０段階Ｂ）（１．２ｇ、３．３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．４ｍＬ、８．３ｍｍｏｌ）の脱水ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）溶液に−２０℃で、無水トリフルオロメタンスルホン酸（０．８３ｍＬ、５．０ｍｍｏｌ）を滴下した。−２０℃で４５分間撹拌後、反応混合物の半量を別のフラスコ（予め−２０℃に冷却したもの）に移し、ピロリジン（０．５ｍＬ、６．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を終夜で昇温させて室温とし、得られた混合物をシリカゲルカラムに負荷し、１：１：０から１：１：０．１ヘキサン／ＥｔＯＡｃ／２ＭアンモニアＭｅＯＨ溶液で溶離してＮ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−ピロリジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（７４ｍｇ、１２％）を得た。
【０２０６】
【化４１】
【０２０７】
段階Ｂ
Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−ピロリジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン
実施例２２段階Ｂに記載の手順によって、Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−ピロリジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（７４ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）をＮ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−ピロリジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリンに変換した（３５ｍｇ、５０％）。
【０２０８】
段階Ｃ
Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル−４（Ｒ）−（１−ピロリジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
実施例１に記載の手順によって、Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−ピロリジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン（段階Ｂ、３５ｍｇ、０．０９４ｍｍｏｌ）を４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルにカップリングさせて、Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−ピロリジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（５４ｍｇ、７９％）を得た。
【０２０９】
【化４２】
【０２１０】
段階Ｄ
Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−ピロリジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・ギ酸塩
実施例２２段階Ｄの手順に従って、Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−ピロリジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（５８ｍｇ、０．０８０ｍｍｏｌ）をＮ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−ピロリジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・ギ酸塩（３０ｍｇ、５３％）に変換した。
【０２１１】
【化４３】
【０２１２】
（実施例２４）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−アミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・塩酸塩
段階Ａ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｓ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
段階Ｂで３−クロロベンゼンスルホニルクロライドに代えて３，５−ジクロロベンゼンスルホニルクロライドを用い、実施例２０に記載の手順に従って、実施例２０段階ＡからのＮ−ＢＯＣ−４（Ｓ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（１．４ｇ、５．４ｍｍｏｌ）をＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｓ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（１．１ｇ、５５％）に変換した。
【０２１３】
【化４４】
【０２１４】
段階Ｂ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
実施例２０段階Ｃに記載の手順に従って、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｓ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（段階Ａ、０．２６ｇ、０．７０ｍｍｏｌ）をＮ−［（３，５−ジクロロ−ベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（０．１２ｇ、３６％）に変換した。
【０２１５】
【化４５】
【０２１６】
段階Ｃ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン
実施例２０段階Ｄに記載の手順に従って、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（０．１２ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）をＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン（０．１３ｇ、１００％）に変換した。
【０２１７】
【化４６】
【０２１８】
段階Ｄ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
実施例１に記載の手順によって、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４−（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン（段階Ｃ、０．１３ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルにカップリングさせて、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．１０ｇ、４５％）を得た。
【０２１９】
【化４７】
【０２２０】
段階Ｅ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−アミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
実施例２０段階Ｆに記載の手順によって、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−アミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（段階Ｄ、０．１０ｇ、０．１２ｍｍｏｌ）をＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン（９８ｍｇ、９９％）に変換した。
【０２２１】
【化４８】
【０２２２】
段階Ｆ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−アミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・塩酸塩
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン（８３ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）のサンプルを飽和ＨＣｌのＥｔＯＡｃ溶液３ｍＬで２時間にわたり室温で処理した。減圧下に濃縮することで、標題化合物を固体として得た（９４ｍｇ、１００％）。
【０２２３】
【化４９】
【０２２４】
（実施例２５）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−シクロプロピルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−シクロプロピルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン
Ｎ−［（３−クロロ−ベンゼン）スルホニル］−４（Ｓ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルに代えてＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｓ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（実施例２４段階Ａから）を用い、アゼチジンに代えてシクロプロピルアミンを用いて、実施例２２段階Ａに記載の手順に従って、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−シクロプロピルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン（０．２７ｇ、６６％）を製造した。
【０２２５】
【化５０】
【０２２６】
段階Ｂ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−シクロプロピルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
実施例１に記載の手順によって、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４−（Ｒ）−シクロプロピルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン（０．０２６ｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）を４−［（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルにカップリングさせて、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−シクロプロピルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．０２０ｇ、４０％）を得た。
ＭＳ：計算値Ｃ３１Ｈ３１Ｃ１４Ｎ５Ｏ６Ｓ７４１；実測値ｍ／ｅ７４２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２２７】
段階Ｃ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−シクロプロピルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・トリフルオロ酢酸塩
ＨＰＬＣ溶離液中のギ酸を０．１％ＴＦＡに代えて、実施例２２段階Ｄに記載の手順に従って、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−シクロプロピルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．０２０ｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）をＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−シクロプロピルアミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・トリフルオロ酢酸塩（０．０１２ｇ）に変換した。
【０２２８】
【化５１】
【０２２９】
（実施例２６）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階ＡでＮ−［（３−クロロ−ベンゼン）スルホニル］−４（Ｓ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルに代えてＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｓ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルを用い、実施例２２段階Ａ〜Ｄに記載の手順に従って、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを製造した。
【０２３０】
中間体化合物および標題化合物の特性決定データを以下に示してある。
【０２３１】
段階Ａ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
【０２３２】
【化５２】
【０２３３】
段階Ｂ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン
ＭＳ：計算値Ｃ１５Ｈ１８Ｃｌ２Ｎ２Ｏ４Ｓ３９２、実測値：ｍ／ｅ３９３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２３４】
段階Ｃ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
【０２３５】
【化５３】
【０２３６】
段階Ｄ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・ギ酸塩
【０２３７】
【化５４】
【０２３８】
（実施例２７）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・ギ酸塩
段階Ａ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン
段階ＡでＮ−ＢＯＣ−４（Ｓ）−ヒドロキシ−プロリン・メチルエステルに代えてＮ−ＢＯＣ−４（Ｒ）−ヒドロキシプロリン・メチルエステルを用い、段階Ｂで３−クロロ−ベンゼンスルホニルクロライドに代えて３，５−ジクロロベンゼンスルホニルクロライドを用いて、実施例２０に記載の手順に従って、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルを製造し、それ（０．５０ｇ、１．４ｍｍｏｌ）を実施例２０段階に記載の手順に従ってＬｉＯＨで処理して、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン（０．４９ｇ、１００％）を加えた。
【０２３９】
【化５５】
【０２４０】
段階Ｂ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
実施例１に記載の手順によって、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン（０．０８０ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルにカップリングさせて、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．１０ｇ、６４％）を得た。
【０２４１】
【化５６】
【０２４２】
段階Ｃ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ヒドロキシ−２−メチル）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．２３ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を、実施例２２段階Ｆに記載の手順に従ってＬｉＯＨと反応させて、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン（０．１０ｇ、４４％）を得た。
【０２４３】
【化５７】
【０２４４】
（実施例２８）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−メチル−（Ｌ）−プロリン
３（Ｓ）−メチル−（Ｌ）−プロリン（Acros、０．５０ｇ、３．９ｍｍｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３（０．８１ｇ、７．８ｍｍｏｌ）の水溶液（水１０ｍＬ）に０℃で、３，５−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（１．１ｇ、４．５ｍｍｏｌ）を加えた。室温で終夜撹拌後、反応混合物を濃ＨＣｌ（ｐＨ＝２）で酸性とし、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した（８ｍＬで３回）。有機抽出液を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下に濃縮乾固してＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−メチル−（Ｌ）−プロリンを得た（粗取得物、１．９ｇ）。
【０２４５】
【化５８】
【０２４６】
段階Ｂ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
実施例１に記載の手順によって、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−メチル−（Ｌ）−プロリン（０．０８０ｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルにカップリングさせて、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロ−ベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．０７６ｇ、４７％）を得た。
【０２４７】
【化５９】
【０２４８】
段階Ｃ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−メチル−２−メ チル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
実施例２２段階Ｆに記載の手順に従って、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−メチル−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（段階Ｂ、０．０７０ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）をＬｉＯＨと反応させた。反応混合物をブライン、０．５Ｍ硫酸水素ナトリウムおよび酢酸エチルの間で分配した。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、合わせた抽出液を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮して、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−メチル−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを得た。
【０２４９】
【化６０】
【０２５０】
（実施例２９）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−ヒドロキシ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階ＢでＮ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルに代えてＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｓ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルを用い、実施例２０に記載の手順に従って、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−ヒドロキシ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを製造した。中間体化合物および標題化合物の特性決定データを以下に示す。
【０２５１】
段階Ａ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−ヒドロキシ−（Ｌ）−プロリン
【０２５２】
【化６１】
【０２５３】
段階Ｂ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−ヒドロキシ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
【０２５４】
【化６２】
【０２５５】
段階Ｃ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
【０２５６】
【化６３】
【０２５７】
（実施例３０）
Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−シアノ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
４（Ｒ）−シアノ−（Ｌ）−プロリン塩酸塩
実施例２０段階Ｇに記載の手順に従って、Ｎ−ＢＯＣ−３（Ｒ）−シアノ−（Ｌ）−プロリン（ＲＳＰ、２．０ｇ、８．３ｍｍｏｌ）をＨＣｌガス／ＥｔＯＡｃで処理して、４（Ｒ）−シアノ−（Ｌ）−プロリン塩酸塩（１．５ｇ、１００％）を得た。
【０２５８】
段階Ｂ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−シアノ−（Ｌ）−プロリン
実施例２８段階Ａに記載の手順に従って、４（Ｒ）−シアノ−（Ｌ）−プロリン塩酸塩（１．５ｇ、８．５ｍｍｏｌ）を３，５−ジクロロベンゼンスルホニルクロライドおよびＮａ２ＣＯ３（１．５当量）と反応させて、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）−スルホニル］−４（Ｒ）−シアノ−（Ｌ）−プロリン（２．６ｇ、８７％）を得た。
【０２５９】
段階Ｃ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−シアノ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
実施例１に記載の手順によって、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−シアノ−（Ｌ）−プロリン（段階Ｂ、０．０８０ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）を４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルにカップリングさせて、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−シアノ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．１３ｇ、７０％）を得た。
【０２６０】
【化６４】
【０２６１】
段階Ｄ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−シアノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
実施例２０段階Ｆに記載の手順に従って、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−シアノ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．１３ｇ、０．１８ｍｍｏｌ）をＬｉＯＨと反応させた。粗反応混合物をブライン、１Ｍ ＨＣｌおよびＥｔＯＡｃの間で分配した。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、合わせた抽出液を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮してＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−シアノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン（０．１２ｇ、１００％）を得た。
【０２６２】
【化６５】
【０２６３】
（実施例３１）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシ−（Ｌ）−プロリン
実施例２８段階Ａに記載の手順に従って、４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシ−（Ｌ）−プロリン（Bachem、５．０ｇ、２７ｍｍｏｌ）を３，５−ジクロロベンゼンスルホニルクロライドおよびＮａ２ＣＯ３と反応させて、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシ−（Ｌ）−プロリン（９．３ｇ、８８％）を得た。
【０２６４】
【化６６】
【０２６５】
段階Ｂ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
実施例１に記載の手順によって、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシ−（Ｌ）−プロリン（０．０８０ｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルにカップリングさせて、Ｎ−（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．１１ｇ、７１％）を得た。
【０２６６】
【化６７】
【０２６７】
段階Ｃ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
ＴＨＦを共溶媒として加えて、実施例２０段階Ｆに記載の手順に従ってｍＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．１１ｇ、０．１４ｍｍｏｌ）をＬｉＯＨで処理した。反応混合物をブライン、０．５Ｍ硫酸水素ナトリウムおよび酢酸エチルの間で分配した。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、合わせた抽出液を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮してＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）−スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン（９９ｍｇ、９５％）を得た。
【０２６８】
【化６８】
【０２６９】
（実施例３２および３３）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−アセチル−２−エトキシカルボニル−３−（４−メトキシフェニル）プロリン・エチルエステル
チュンらの報告（Chung et al., J. Org. Chem. 1990, 55, 270）に記載の手順によって、Ｎ−アセチル−２−エトキシカルボニル−３−（４−メトキシフェニル）プロリン・エチルエステル（１３ｇ、７２％）を４−メトキシシンナムアルデヒド（Lancaster、８．１ｇ、５０ｍｍｏｌ）およびアセトアミドマロン酸ジエチル（Aldrich、９．９ｇ、４５ｍｍｏｌ）から製造した。
【０２７０】
【化６９】
【０２７１】
段階Ｂ
３−（４−ヒドロキシフェニル）プロリン・エチルエステル臭化水素酸塩
Ｎ−アセチル−２−エトキシカルボニル−３−（４−メトキシフェニル）プロリン・エチルエステル（１０ｇ、２７ｍｍｏｌ）のＨＢｒ水溶液（４８％、４０ｍＬ）およびＨＯＡｃ（１０ｍＬ）溶液を、窒素雰囲気下にて１２０℃で終夜加熱した。反応混合物を減圧下に濃縮し、残留物をアセトニトリル（２回）およびＥｔ２Ｏ／トルエン（１回）と共沸させて、３−（４−ヒドロキシフェニル）プロリン・エチルエステル臭化水素酸塩をジアステレオマーの混合物として得た。
【０２７２】
ＭＳ：計算値Ｃ１１Ｈ１３ＮＯ３２０７、実測値：ｍ／ｅ２０８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２７３】
段階Ｃ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−（４−ヒドロキシフェニル）−プロリン
実施例２８段階Ａに記載の手順に従って、３−（４−ヒドロキシフェニル）プロリン・エチルエステル臭化水素酸塩（段階Ｂ、３．３ｇ、１１ｍｍｏｌ）を３，５−ジクロロベンゼンスルホニルクロライドおよびＮａ２ＣＯ３（１．５当量）と反応させて、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−（４−ヒドロキシフェニル）−（Ｌ）−プロリン（３．７ｇ、７９％）を得た。
【０２７４】
ＭＳ：計算値Ｃ１７Ｈ１５Ｃｌ２ＮＯ５Ｓ４１５、実測値：ｍ／ｅ４１６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２７５】
段階Ｄ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−（４−ヒドロキシフェニル）−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
実施例１に記載の手順によって、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−（４−ヒドロキシフェニル）−（Ｌ）−プロリン（０．４ｇ、０．９６ｍｏｌ）を４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルにカップリングさせて、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−（４−ヒドロキシフェニル）−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルを得た。４種類の可能な異性体を部分的に２つの成分に分離し、それらをさらに逆相ＨＰＬＣによって精製した。各成分は、ＮＭＲによって２種類の異性体の約１：１混合物であることが明らかになった。
【０２７６】
ＭＳ：計算値Ｃ３３Ｈ２８Ｃｌ４Ｎ４Ｏ７Ｓ７６４、実測値：ｍ／ｅ７６５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２７７】
先に溶出した成分
【０２７８】
【化７０】
【０２７９】
後で溶出した成分
【０２８０】
【化７１】
【０２８１】
段階Ｅ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−（４−ヒドロキシフェニル）−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロ−ベンゼン）スルホニル］−３−（４−ヒドロキシフェニル）−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルの段階Ｄからの２つの成分のそれぞれを別個に、実施例２０段階Ｆに記載の手順に従ってＬｉＯＨで処理した。反応混合物をブライン、１Ｍ ＨＣｌおよびＥｔＯＡｃの間で分配した。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、抽出液を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮してＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−（４−ヒドロキシフェニル）−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを各成分ジアステレオマーの１：１混合物として得た。
【０２８２】
段階Ｄの先に溶出する成分からの異性体
【０２８３】
【化７２】
【０２８４】
段階Ｄの後で溶出する成分からの異性体
【０２８５】
【化７３】
【０２８６】
（実施例３４および３５）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−アセチル−２−エトキシカルボニル−３，３−ジメチルプロリン・エチルエステル
チュンらの報告（Chung et al., J. Org. Chem. 1990, 55, 270）に記載の手順によって、Ｎ−アセチル−２−エトキシカルボニル−３，３−ジメチルプロリン・エチルエステル（６．４ｇ、３８％）を３−メチル−２−ブテナール（Aldrich、５．０ｇ、５９ｍｍｏｌ）およびアセトアミドマロン酸ジエチル（Aldrich、１２ｇ、５４ｍｍｏｌ）から製造した。
【０２８７】
【化７４】
【０２８８】
段階Ｂ
３，３−ジメチルプロリン・エチルエステル臭化水素酸塩
Ｎ−アセチル−２−エトキシカルボニル−３−（４−メトキシフェニル）プロリン・エチルエステル（６．４ｇ、２２ｍｍｏｌ）のＨＢｒ水溶液（４８％、３５ｍＬ）およびＨＯＡｃ（５ｍＬ）溶液を窒素下に１２０℃で６５時間加熱した。反応混合物を減圧下に濃縮し、残留物をＡｃＣＮ（２回）およびＥｔ２Ｏ／トルエン（１回）と恐共沸させて、３，３−ジメチルプロリン・エチルエステル臭化水素酸塩（４８ｇ、９６％）を得た。
【０２８９】
ＭＳ：計算値Ｃ７Ｈ１３ＮＯ２１４３、実測値：ｍ／ｅ１４４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２９０】
段階Ｃ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリン
実施例２８段階Ａに記載の手順に従って、３，３−ジメチルプロリン・エチルエステル臭化水素酸塩（２．４ｇ、１１ｍｍｏｌ）を３，５−ジクロロベンゼンスルホニルクロライドおよびＮａ２ＣＯ３（１．５当量）と反応させて、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリンを得た（２．９ｇ、７６％）。
【０２９１】
段階Ｄ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
実施例１に記載の手順によって、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリン（０．０８０ｇ、０．２３ｍｏｌ）を４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルにカップリングさせて、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロ−ベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルを異性体の１：１混合物として得た（０．１３ｇ、８０％）。
【０２９２】
【化７５】
【０２９３】
上記で得られたジアステレオマー混合物の一部を、１５％エタノール／ヘキサンを溶離液とするキラルセル（Chiralcel）ＯＤカラムで２つの純粋な異性体に分離した。
【０２９４】
先に溶出した異性体
【０２９５】
【化７６】
【０２９６】
後で溶出した異性体
【０２９７】
【化７７】
【０２９８】
段階Ｅ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルの段階Ｄからの異性体のそれぞれを別個に、実施例２０段階Ｆに記載の手順に従ってＬｉＯＨで処理した。反応混合物をブライン、１Ｍ ＨＣｌおよびＥｔＯＡｃの間で分配した。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、合わせた抽出液を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮してＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを得た。
【０２９９】
段階Ｄの先に溶出する成分からの異性体
【０３００】
【化７８】
【０３０１】
段階Ｄの後で溶出する成分からの異性体
【０３０２】
【化７９】
【０３０３】
（実施例３６）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
実施例２からのＮ−（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−（（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ）−（Ｌ）−フェニルアラニン（０．０５０ｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（０．２５ｍＬ）溶液に、溶液が生成するまでＤＭＦを滴下した。ｍＣＰＢＡ（１００ｍｇ）を加え、反応液を５０℃で１８時間撹拌した。反応液を減圧下に濃縮し、ＡｃＣＮ／水７０：３０に溶かし、分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニル）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−（（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）アミノ）−（Ｌ）−フェニルアラニンを白色固体として得た（０．０４１ｇ、０．０５９ｍｍｏｌ、８０％）。
【０３０４】
【化８０】
【０３０５】
段階Ｂで適切なアリールスルホニルクロライドに代え、実施例９に記載の手順に従って下記の化合物を製造した。
【０３０６】
【表６】
【０３０７】
（実施例５０）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−２′−ヒドロキシ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
実施例１からのＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（１１３ｍｇ、０．１６４ｍｍｏｌ）を、実施例３６に記載の手順に従ってｍＣＰＢＡで処理して、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（６６ｍｇ、５７％）を得た。
【０３０８】
【化８１】
【０３０９】
段階Ｂ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（２′−アセトキシ−３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（２４ｍｇ、０．０３４１ｍｍｏｌ）の無水酢酸（０．５ｍＬ）溶液を１００℃で３時間加熱した。冷却して室温とした後、反応混合物をＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で希釈し、飽和ＮＨ４ＣＩ溶液（１０ｍＬ）で洗浄し、ＥｔＯＡｃで抽出した（１回）。合わせた抽出液をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮して明黄色油状物１８２ｍｇを得た。生成物を、１５分間にわたり流量１０ｍＬ／分の３０％から９５％ＡｃＣＮ／水（０．１％ＴＦＡ）を溶離液とする分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（２′−アセトキシ−３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（２０ｍｇ）を白色固体として得た。
【０３１０】
【化８２】
【０３１１】
段階Ｃ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−２′−ヒドロキシ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（２′−アセトキシ−３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（１５ｍｇ、０．０２０１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（０．５ｍＬ）溶液に、１Ｍ ＫＯＨ（０．０６０ｍＬ）を加えた。反応混合物を終夜にて室温で撹拌した。ＴＦＡ（１滴）を加えることで反応停止した。生成物を、１５分間にわたり流量１０ｍＬ／分での３０％から９０％ＡｃＣＮ／水（０．１％ＴＦＡ）を溶離液とする分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−２′−ヒドロキシ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン（９ｍｇ）を白色固体として得た。
【０３１２】
【化８３】
【０３１３】
（実施例５１）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−２′−メトキシ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−２′−メトキシ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン、メチルエステル
実施例５０段階ＡからのＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（４０ｍｇ、０．０５７７ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（０．５ｍＬ）溶液を氷冷し、それに塩化アセチル（０．００５ｍＬ、０．０７５ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．０１６ｍＬ、０．１１５ｍｍｏｌ）を加えた。クロルギ酸エチル（０．０１６ｍＬ、０．１５０ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．０１６ｍＬ、０．１１５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を終夜撹拌した。溶媒を減圧下に除去し、残留物を、１５分間かけて流量１０ｍＬ／分で３０％から９０％ＡｃＣＮ／水（０．１％ＴＦＡ）を溶離液とする分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−２′−メトキシ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（１５ｍｇ、３６％）を白色固体として得た。
【０３１４】
【化８４】
【０３１５】
段階Ｂ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−２′−メトキシ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−２′−メトキシ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（１５ｍｇ）を、実施例５０段階Ｃに記載の手順に従ってＭｅＯＨ性ＫＯＨで処理した。生成物を、１５分間かけて流量１０ｍＬ／分で３０％から９０％ＡｃＣＮ／水（０．１％ＴＦＡ）を溶離液とする分取ＨＰＬＣによって精製してＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）−スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−２′−メトキシ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン（１２ｍｇ、収率８２％）を白色固体として得た。
【０３１６】
【化８５】
【０３１７】
（実施例５２）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（２′−アミノ−３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（２′−アミノ−３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
実施例５０段階ＡからのＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（４０ｍｇ、０．０５６８ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）溶液に０℃で、ＴｓＣｌ（１２ｍｇ、０．０６２４ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を２０分間撹拌した。１０％ＮＨ４ＯＨ溶液（１ｍＬ）を加え、氷浴を外した。反応混合物を室温で４時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈し、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮して、粗生成物混合物４４ｍｇを得た。それを、１５分間かけて流量１０ｍＬ／分で３０％から９０％ＡｃＣＮ／水（０．１％ＴＦＡ）を溶離液とする分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（２′−アミノ−３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（４．７ｍｇ、収率１２％）を得た。
【０３１８】
【化８６】
【０３１９】
段階Ｂ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（２′−アミノ−３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（２′−アミノ−３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（４．７ｍｇ）を、実施例５０段階Ｃに記載の手順に従ってＭｅＯＨ性ＮａＯＨで処理した。生成物を、１５分間かけて流量１０ｍＬ／分で３０％から９０％ＡｃＣＮ／水（０．１％ＴＦＡ）を溶離液とする分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（２′−アミノ−３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン（３ｍｇ、収率６３％）を得た。
【０３２０】
【化８７】
【０３２１】
（実施例５３）
Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−（３−クロロベンゼン）スルホニル−３，３−ジメチルプロリン
３，３−ジメチルプロリン臭化水素酸塩（０．０５０ｇ、０．２２３ｍｍｏｌ）の水溶液（水０．２５ｍＬ）に、３−クロロベンゼンスルホニルクロライド（０．０６１ｇ、０．２９１ｍｍｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３（０．０６０ｇ、０．５５８ｍｍｏｌ）を加えた。室温で５時間撹拌後、反応液をＥｔＯＡｃ（１ｍＬ）で洗浄し、その有機層を廃棄した。水層を２Ｎ ＨＣｌ（５ｍＬ）で希釈し、生成物をＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液（５ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮してＮ−（３−クロロベンゼン）スルホニル−３，３−ジメチルプロリンを白色泡状物として得た。
【０３２２】
【化８８】
【０３２３】
段階Ｂ
Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
実施例１に記載の手順に従って、ＰｙＢＯＰ（０．０６１ｇ、０．１１７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．０５５ｍＬ、０．２９２ｍｍｏｌ）の存在下にＣＨ２Ｃｌ２（０．３ｍＬ）中にて、Ｎ−（３−クロロベンゼン）スルホニル−３，３−ジメチルプロリン（０．０３１ｇ、０．０９８ｍｍｏｌ）を４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル塩酸塩（０．０４８ｇ、０．１０７ｍｍｏｌ）にカップリングさせて、Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルを得た。それを精製せずに次の反応で用いた。
【０３２４】
段階Ｃ
Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階ＢからのＮ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルをＭｅＯＨ（０．３ｍＬ）に溶かし、１Ｎ ＮａＯＨ（０．２ｍＬ）で処理した。室温で３時間撹拌後、反応液をＴＦＡで酸性とし、減圧下に濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（Ｎ−［（３−クロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチルプロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを白色固体として得た。
ＭＳｍ／ｅ６８８．２（Ｍ＋）。
【０３２５】
（実施例５４）
Ｎ−（Ｎ−［３−クロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−（ＢＯＣ）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）−アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
Ｎ−（ＢＯＣ）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（参考例２、０．３ｇ、０．６４ｍｍｏｌ）およびｍＣＰＢＡ（０．２２ｇ、１．２８ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２に溶かした。反応混合物を室温で終夜撹拌した。ＴＬＣで原料が残っていることが示されたことから、追加のｍＣＰＢＡ（０．２２ｇ、１．２８ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を４５℃で２時間加熱した。溶液を減圧下に濃縮し、残留物を９０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−（ＢＯＣ）−４−［（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）−アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．３４ｇ）を得た。
【０３２６】
ＭＳｍ／ｅ４２８．０（質量スペクトラムは、親イオンピークとして、所望の生成物からＢＯＣの質量を引いたものを示している）。
【０３２７】
段階Ｂ
４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）−アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル塩酸塩
Ｎ−（ＢＯＣ）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）−アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．７ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃに溶かした。ＨＣｌガスを反応混合物に数分間吹き込んだ。得られた溶液を室温で１５分間撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮して、４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）−アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル塩酸塩（０．２５ｇ）を得た。
【０３２８】
段階Ｃ
Ｎ−（Ｎ−［３−クロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
実施例１に記載の手順に従って、ＰｙＢＯＰ（０．０６９ｇ、０．１３２ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．０６ｍＬ、０．３３ｍｍｏｌ）の存在下にＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中にて、４−（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）−アミノ−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．４８ｇ、０．１２５ｍｍｏｌ）および実施例５３段階ＡからのＮ−（３−クロロベンゼン）スルホニル−３，３−ジメチル−プロリン（０．０３６ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をカップリングさせて、分取ＨＰＬＣによる精製後に、Ｎ−（Ｎ−［３−クロロ−ベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）−アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルを得た。
【０３２９】
段階Ｄ
Ｎ−（Ｎ−［３−クロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−４ −［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
Ｎ−（Ｎ−［３−クロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルをＭｅＯＨ（０．５ｍＬ）に溶かし、１Ｎ ＮａＯＨ（約１ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応液をＴＦＡで酸性とし、分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（Ｎ−［３−クロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル−Ｎ−オキサイド）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン（０．０３５ｇ）を得た。
【０３３０】
ＭＳｍ／ｅ６７１．１。
【０３３１】
（実施例５５）
Ｎ−（Ｎ−［３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−３−（６−（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ−３−ピリジル）−アラニン
段階Ａ
２−［（Ｎ−ジフェニルメチレン）アミノ］−３−（４−ブロモ−３−ピリジニル）プロパン酸エチルエステル
Ｎ−（ジフェニルメチレン）グリシンエチルエステル（４．３０ｇ、１６．１１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２５ｍＬ）溶液に−７８℃で、リチウムジイソプロピルアミドの２．０Ｍ ＴＨＦ溶液（８．０ｍＬ、１６．０ｍｍｏｌ）を滴下した。−７８℃で３０分間撹拌後、２−ブロモ−５−ブロモメチル−ピリジンのＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を加え、反応液を昇温させて室温とした。１時間後、反応液をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮して黄色油状物を得た。油状物を、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（１０：１）を溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、２−［（Ｎ−ジフェニルメチレン）アミノ］−３−（４−ブロモ−３−ピリジニル）プロパン酸エチルエステルを淡黄色油状物として得た。
【０３３２】
段階Ｂ
３−（６−［３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−３−ピリジニル）−２−［（Ｎ−ジフェニルメチレン）アミノ］プロパン酸エチルエステル
２−［（Ｎ−ジフェニルメチレン）アミノ］−３−（４−ブロモ−３−ピリジニル）プロパン酸エチルエステル（２．００ｇ、４．５７ｍｍｏｌ）、３，５−ジクロロピリジン−４−カルボキサミド（０．９６ｇ、５．０３ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（０．０８３ｇ、０．０９１ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（２．００ｇ、６．４０ｍｍｏｌ）および９，９−ジメチル−４，５−ビス（ジフェニル−ホスフィノ）キサンテン（０．１６ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を、窒素下に７５℃で加熱した。１６時間後、反応液を冷却し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水した。溶媒を減圧下に除去し、次にヘキサン／ＥｔＯＡｃ（１０：１）を溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製を行って、３−（６−［３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）−アミノ］−３−ピリジニル）−２−［（Ｎ−ジフェニルメチレン）アミノ］プロパン酸エチルエステルを無色油状物（２ｇ）として得た。
ＭＳｍ／ｅ５７４．２（Ｍ＋）。
【０３３３】
段階Ｃ
３−（６−（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ−３−ピリジル）アラニン・エチルエステル
３−（６−［３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−３−ピリジニル）−２−［（Ｎ−ジフェニルメチレン）アミノ］プロパン酸エチルエステルのＴＨＦ（１０ｍＬ）および水（５ｍＬ）溶液に、氷ＨＯＡｃ（５ｍＬ）を加えた。３時間後、反応液を２Ｎ ＨＣｌ（２５ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出し（２５ｍＬで２回）、有機層を廃棄した。水層を１Ｎ ＮａＯＨで塩基性とし（ｐＨ＝１２）、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した（２５ｍＬで３回）。合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮して３−（６−（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ−３−ピリジル）−アラニン・エチルエステルを白色泡状物として得た。ＭＳｍ／ｅ３８３．１（Ｍ＋）。
【０３３４】
【化８９】
【０３３５】
段階Ｄ
Ｎ−（Ｎ−［３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−３−（６−（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ−３−ピリジル）−アラニン・エチルエステル
実施例１に記載の手順に従って、ＰｙＢＯＰ（０．０３６ｇ、０．０８５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．０２０ｍＬ、０．１０６ｍｍｏｌ）存在下にＣＨ２Ｃｌ２（０．２５ｍＬ）中にて、３−（６−（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ−３−ピリジル）−アラニン・エチルエステル（０．０２７ｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）および（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル−３，３−ジメチルプロリン（０．０２５ｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）をカップリングさせた。粗生成物を分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（Ｎ−［３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−３−（６−（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ−３−ピリジル）−アラニン・エチルエステルを油状物として得た。
【０３３６】
段階Ｅ
Ｎ−（Ｎ−［３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチルプロリル）−３−（６−（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ−３−ピリジル）−アラニン
Ｎ−（Ｎ−［３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチル−プロリル）−３−（６−（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ−３−ピリジル）−アラニン・エチルエステルをＭｅＯＨ（１．０ｍＬ）に溶かし、１Ｎ ＮａＯＨ（０．２ｍＬ）で処理した。室温で１８時間撹拌後、反応液をＴＦＡで酸性とした。溶媒を減圧下に除去し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（Ｎ−［３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジメチルプロリル）−３−（６−（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ−３−ピリジル）−アラニンを白色固体として得た。ＭＳｍ／ｅ６８８．２（Ｍ＋）。
【０３３７】
（実施例５６）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−（ＢＯＣ）−４（Ｒ）−（１−アゼチジニルプロリン・メチルエステル
Ｎ−［（３−クロロ−ベンゼン）スルホニル］−４（Ｓ）−ヒドロキシ−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルに代えてＮ−（ＢＯＣ）−４（Ｓ）−ヒドロキシ−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（Bachem、２．５ｇ、１０ｍｍｏｌ）を用い、実施例２２段階Ａに記載の手順に従って、Ｎ−（ＢＯＣ）−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルを製造した。生成物は１Ｈ−ＮＭＲによって回転異性体の混合物であり、それを次の段階で用いた。
【０３３８】
段階Ｂ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
Ｎ−（ＢＯＣ）−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルを、室温で２時間にわたりＨＣｌ（ガス）のジオキサン溶液（Aldrich、４Ｍ、８０ｍＬ）で処理した。反応混合物を減圧下に濃縮して乾固させ、残留物をＥｔ２Ｏ／ヘプタンと共沸させた。粗生成物を０℃でＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）およびＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶かし、４−ＤＭＡＰ（６１ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（３．５ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）および３，５−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（１．８ｇ、７．５ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を終夜で昇温させて室温とし、得られた混合物を減圧下に濃縮して乾固させた。残留物を、１：１ヘキサン／ＥｔＯＡｃから１：１：０．０１ヘキサン／ＥｔＯＡｃ／２Ｍ ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液を溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（２．５ｇ）を得た。
【０３３９】
【化９０】
【０３４０】
段階Ｃ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−（Ｌ）−プロリン
実施例２０段階Ｄに記載の手順によって、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−（Ｌ）−プロリンをＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルから製造した。
【０３４１】
段階Ｄ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
ＰｙＢＯＰおよびＤＩＰＥＡ存在下に、実施例１に記載の手順に従って、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−（Ｌ）−プロリンを４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル塩酸塩にカップリングさせた。
【０３４２】
【化９１】
【０３４３】
段階Ｅ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・ギ酸塩
実施例２０段階Ｆに従って、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルをＬｉＯＨで処理して、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）−スルホニル］−４（Ｒ）−（１−アゼチジニル）−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを得た。
【０３４４】
【化９２】
【０３４５】
（実施例５７）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−（４−カルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−（４−ヨードフェニル）−（Ｌ）−プロリン
３（Ｒ）−フェニル−ピロリジン−２（Ｓ）−カルボン酸（Acros、０．５０ｇ、２．６ｍｍｏｌ）、ヨウ素（０．２７ｇ、１．０ｍｍｏｌ）、ヨウ素酸ナトリウム（０．１０ｇ、０．５２ｍｍｏｌ）および濃Ｈ２ＳＯ４（９５％、０．３２ｍＬ、５．７ｍｍｏｌ）のＨＯＡｃ（５ｍＬ）中混合物を、７０℃で終夜加熱した。冷却して室温とした後、反応混合物を水（１ｍＬ）で希釈し、減圧下に濃縮乾固し、残留物をヘプタンと共沸させた（２回）。残留物を希Ｎａ２ＣＯ３水溶液（１．１ｇ、１０．４ｍｍｏｌ、水３０ｍＬ中）に懸濁させ、３，５−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（０．９６ｇ、３．９ｍｍｏｌ）を加えた。室温で終夜撹拌後、反応混合物をブライン／２Ｍ ＨＣｌ／ＥｔＯＡｃに投入し、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した（５０ｍＬで２回）。有機抽出液を無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下に濃縮乾固してＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−（４−ヨードフェニル）−（Ｌ）−プロリンを得た。それをそのまま次の反応に用いた。
【０３４６】
段階Ｂ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−（４−ヨードフェニル）−（Ｌ）−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］ −（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
ＰｙＢＯＰおよびＤＩＰＥＡ存在下に、実施例１に記載の手順に従って、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−（４−ヨードフェニル）−（Ｌ）−プロリンを４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル塩酸塩にカップリングさせた。
【０３４７】
ＭＳ：計算値Ｃ３３Ｈ２７Ｃｌ４ＩＮ４Ｏ６Ｓ８７４、実測値：ｍ／ｅ８７５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３４８】
段階Ｃ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−（４−メトキシカルボニル−フェニル）−（Ｌ）−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−（４−ヨードフェニル）−（Ｌ）−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．７９ｇ、０．９０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、酢酸パラジウム（６．０ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）および１，１′−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（２２ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）を加えた。一酸化酸素気流を反応液に５分間吹き込み、ＭｅＯＨ（０．７３ｍＬ、１８ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．２５ｍＬ、１８ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物に一酸化炭素風船を取り付け、６０℃で１８時間加熱した。反応混合物を冷却して室温とし、減圧下に濃縮し、残留物を１：１ヘキサン／ＥｔＯＡｃを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−（４−メトキシカルボニルフェニル）−（Ｌ）−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルを少量の原料とともに得た（０．７７ｇ）。
ＭＳ：計算値Ｃ３５Ｈ３０Ｃｌ４Ｎ４Ｏ８Ｓ８０６、実測値：ｍ／ｅ８０７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３４９】
段階Ｄ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−（４−カルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
実施例２０段階Ｆに記載の手順に従って、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−（４−メトキシカルボニル−フェニル）−（Ｌ）−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（０．７７ｇ）をＬｉＯＨで処理した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（ＹＭ−ＰａｃＫ ＰｒｏＣ１８カラム、１５０×２ｍｍ、１２分間かけて５０％から０％への０．１％ギ酸水溶液／アセトニトリル勾配で溶離；流量＝２０ｍＬ／分）によって精製した。ＮＭＲおよびＬＣ−ＭＳにより、分取ＨＰＬＣで最も速く移動する成分が、所望の生成物Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）−スルホニル］−３（Ｒ）−（４−カルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン（０．１８ｇ）と確認された。
【０３５０】
【化９３】
【０３５１】
２番目に溶出した化合物は、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）−スルホニル］−３（Ｒ）−フェニル−（Ｌ）−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン（０．１１ｇ）であった。
【０３５２】
【化９４】
【０３５３】
最後に溶出した化合物は、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）−スルホニル］−３（Ｒ）−（４−ヨードフェニル）−（Ｌ）−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン（０．０４２ｇ）であった。
【０３５４】
【化９５】
【０３５５】
（実施例５８）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−（４−カルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−トリチル−３（Ｓ）−ヒドロキシ−（Ｌ）−プロリン・ベンジルエステル
ディーン−スターク装置を用いて水を除去しながら、トランス−３−ヒドロキシ−（Ｌ）−プロリン（Ａcros、５．０ｇ、３８ｍｍｏｌ）、ベンジルアルコール（８．０ｍＬ、７６ｍｍｏｌ）およびｐＴＳＡ（７．４ｇ、３８ｍｍｏｌ）のベンゼン（３０ｍＬ）中混合物を終夜還流した。反応混合物を冷却して室温とし、減圧下に濃縮して乾固させた。残留物をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）に溶かし、ＴＥＡ（３２ｍＬ、０．２３ｍｏｌ）およびクロロトリメチルシラン（１９ｍＬ、０．１５ｍｏｌ）を加えた。溶液を７０℃で１時間加熱後、反応混合物を冷却して０℃とし、ＭｅＯＨ（３．１ｍＬ、７６ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１時間撹拌後、トリチルクロライド（１６ｇ、５７ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）溶液と次にＴＥＡ（８．０ｍＬ、５７ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３日間撹拌後、反応混合物をＥｔＯＡｃ１５０ｍＬで希釈し、沈殿をセライト濾過によって除去した。濾液を減圧下に濃縮乾固し、残留物をＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中Ｋ２ＣＯ３（２．２ｇ）とともに室温で５時間撹拌した。反応混合物をＴＨＦ（１００ｍＬ）で希釈し、ＫＦ（８．８ｇ）の水溶液（水４０ｍＬ）を加えた。室温で終夜撹拌後、反応混合物を冷却して０℃とし、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、０．５Ｍ重硫酸ナトリウム水溶液を注意深く加えることで中和した。反応混合物を水とＥｔＯＡｃに分配し、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した（３回）。合わせた抽出液を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下に濃縮乾固した。残留物を、４：１から１：４ヘキサン／Ｅｔ２Ｏを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−トリチル−３（Ｓ）−ヒドロキシ−（Ｌ）−プロリン・ベンジルエステル（８．８ｇ、４９％）を得た。
【０３５６】
【化９６】
【０３５７】
段階Ｂ
Ｎ−トリチル−３−ケト−（Ｌ）−プロリン・ベンジルエステル
Ｎ−トリチル−３−ヒドロキシ−（Ｌ）−プロリン・ベンジルエステル（８．８ｇ、１９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）溶液に、４−メチルモルホリンＮ−オキサイド（４．５ｇ、３８ｍｍｏｌ）および３Åモレキュラーシーブス（３ｇ）を加えた。室温で１５分間撹拌後、反応混合物を冷却して０℃とし、過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウム（１．０ｇ、２．８ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１５分間撹拌後、反応混合物をシリカゲル層で濾過し、濾液を減圧下に濃縮して乾固させた。残留物をＥｔ２Ｏ（１００ｍＬ）に溶かし、シリカゲル層で濾過した。濾液を減圧下に濃縮乾固して、Ｎ−トリチル−３−ケト−（Ｌ）−プロリン・ベンジルエステル（６．５ｇ、７４％）を得た。
【０３５８】
【化９７】
【０３５９】
段階Ｃ
Ｎ−トリチル−３−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−３，４−デヒドロ−（Ｌ）−プロリン・ベンジルエステル
Ｎ−トリチル−３−ケト−（Ｌ）−プロリン・ベンジルエステル（６．５ｇ、１４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液に−７８℃で、ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド（１．０Ｍ ＴＨＦ溶液１４ｍＬ、１４ｍｍｏｌ）を加えた。−７８℃で４５分間撹拌後、Ｎ−フェニルビス（トリフルオロメタンスルホンイミド）（６．５ｇ、１８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を加え、反応液を５時間かけて昇温させて−１０℃とした。反応液を飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（５０ｍＬ）で反応停止し、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した（５０ｍＬで２回）。合わせた抽出液を無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮乾固した。残留物を、２０：１ヘキサン／Ｅｔ２Ｏを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−トリチル−３−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−３，４−デヒドロ−（Ｌ）−プロリン・ベンジルエステル（０．９９ｇ、１２％）を得た。
【０３６０】
【化９８】
【０３６１】
段階Ｄ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−（４−メトキシカルボニルフェニル）−（Ｌ）−プロリン
Ｎ−トリチル−３−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−３，４−デヒドロ−（Ｌ）−プロリン・ベンジルエステル（０．７６ｇ、１．３ｍｍｏｌ）のジメトキシエタン（１５ｍＬ）溶液に、４−カルボキシフェニルボロン酸（０．４２ｇ、２．６ｍｍｏｌ）、ＬｉＣｌ（０．２７ｇ、６．４ｍｍｏｌ）、パラジウムテトラキス（トリフェニルホスフィン）（０．１５ｇ、０．１３ｍｍｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３水溶液（２Ｍ、５．３ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）を加えた。８０℃で終夜撹拌後、反応混合物を冷却して室温とし、ｐＨ＝４となるまで重硫酸ナトリウム水溶液を加えた。反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）で希釈し、ＴＬＣでカルボン酸中間体が完全に消費されたことが示されるまでトリメチルシリルジアゾメタン（２Ｍヘキサン溶液）で処理した。得られた混合物を水とＥｔＯＡｃとの間で分配し、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた抽出液を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮乾固した。残留物を１０：１ヘキサン／Ｅｔ２Ｏを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−トリチル−３−（４−メトキシカルボニルフェニル）−３，４−デヒドロ−（Ｌ）−プロリン・ベンジルエステル（０．３０ｇ）を得た。それをそのまま次の反応で用いた。
【０３６２】
そうして、Ｎ−トリチル−３−（４−メトキシカルボニルフェニル）−３，４−デヒドロ−（Ｌ）−プロリン・ベンジルエステル（０．３０ｇ）のＭｅＯＨ（５ｍＬ）溶液に、水酸化パラジウム／炭素（１０％、０．１０ｇ）を加え、得られた混合物を水素を充填した風船下に室温で終夜水素化した。得られた混合物を減圧下に濃縮乾固し、残留物をＮａ２ＣＯ３水溶液（０．１３ｇ、水１０ｍＬ中）に懸濁させ、それをセライト濾過し、セライトケーキを追加の水１０ｍＬで洗浄した。合わせた濾液に３，５−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（１．２ｇ、０．７３ｍＬ）を加え、反応液を室温で終夜撹拌した。得られた混合物をＥｔ２Ｏ（１５ｍＬ）で洗浄し、２Ｍ ＨＣｌで酸性とした。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し（１５ｍＬで２回）、合わせた抽出液を無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下に濃縮乾固してＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−（４−メトキシカルボニルフェニル）−（Ｌ）−プロリン（８０ｍｇ）を得た。
【０３６３】
【化９９】
【０３６４】
段階Ｅ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−（４−メトキシカルボニル−フェニル）−（Ｌ）−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−（４−メトキシ−カルボニルフェニル）−（Ｌ）−プロリン（８０ｍｇ）および塩化チオニル（０．５ｍＬ）のＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中混合物を、４０℃で３時間加熱した。冷却して室温とした後、反応混合物をトルエン（５ｍＬ）で希釈し、減圧下に濃縮して乾固させた。その残留物に３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル塩酸塩（７５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．０６１ｍＬ、０．４３ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中混合物を０℃で加えた。０℃で１時間および室温で１時間撹拌後、反応混合物をシリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィーに負荷し、１：１ヘキサン／酢酸エチルで溶離して、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−（４−メトキシ−カルボニルフェニル）−（Ｌ）−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（３０ｍｇ）を得た。
【０３６５】
【化１００】
【０３６６】
段階Ｆ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−（４−カルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
実施例２０段階Ｆに記載の手順に従って、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−（４−メトキシカルボニル−フェニル）−（Ｌ）−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（３０ｍｇ）をＬｉＯＨで処理して、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−（４−カルボキシ−フェニル）−（Ｌ）−プロリル）−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを得た。
【０３６７】
【化１０１】
【０３６８】
（実施例５９）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（４−カルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
４−ヒドロキシ−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル塩酸塩
４−ヒドロキシ−（Ｌ）−プロリン３３．０ｇ（０．２５ｍｏｌ）およびＭｅＯＨ ２００ｍＬの溶液に、塩化チオニル２０ｍＬ（０．２７ｍｏｌ）を加えた。反応液を１６時間加熱還流し、冷却して室温とし、減圧下に濃縮した。Ｅｔ２Ｏでの磨砕によって、４−ヒドロキシ−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル塩酸塩４４ｇ（９７％）を白色固体として得た。それをそれ以上精製せずに用いた。
【０３６９】
【化１０２】
【０３７０】
段階Ｂ
Ｎ−トリチル−４−ヒドロキシ−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
４−ヒドロキシ−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル塩酸塩１０ｇ（５５ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍＬ）溶液に、ＴＥＡ２１ｍＬ（２７６ｍｍｏｌ）と次にＴＭＳＣｌ ２１ｍＬ（１６６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間還流し、冷却して０℃とし、ＭｅＯＨ４．５ｍＬ（１１０ｍｍｏｌ）で処理した。反応液を昇温させて室温とし、１時間撹拌した。トリチルクロライド１８．５ｇ（６６ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ １１ｍＬ（７７ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）溶液を加え、反応液を１８時間撹拌した。混合物を減圧下に濃縮し、ＥｔＯＡｃで希釈し、セライト濾過し、濃縮して淡黄色油状物３０andｇを得た。
【０３７１】
その残留物のＭｅＯＨ溶液にＫ２ＣＯ３（５ｇ）を加え、得られたスラリー、ＴＬＣによる判定で完結するまで室温で撹拌した。反応液を減圧下に濃縮してＭｅＯＨを除去し、再度ＥｔＯＡｃに溶かし、ブラインで洗浄し（３回）、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮して淡黄色油状物２５ｇを得た。それはゆっくり結晶化した。その粗残留物をそれ以上精製せずに用いた。
【０３７２】
【化１０３】
【０３７３】
段階Ｃ
Ｎ−（Ｌ）−トリチル−４−オキソプロリン・メチルエステル
Ｎ−トリチル−４−ヒドロキシ−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル５ｇ（１２．９ｍｍｏｌ）、ＮＭＯ２．３ｇ（１９．３ｍｍｏｌ）、粉末３Åモレキュラーシーブス５ｇおよびＣＨ２Ｃｌ２１００ｍＬの混合物に０℃で、ＴＰＡＰ（約０．３ｇ）を加えた。混合物を０℃で４５分間、室温で１時間撹拌し、減圧下に濃縮した。残留物をＥｔ２Ｏに溶かし、シリカゲル層で濾過し、減圧下に濃縮した。残留物を、２：１ヘキサン：Ｅｔ２Ｏを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−（Ｌ）−トリチル−４−オキソプロリン・メチルエステル３．５ｇ（７０％）を白色固体として得た。
【０３７４】
【化１０４】
【０３７５】
段階Ｄ
Ｎ−トリチル−３，４−デヒドロ−４−［［（トリフルオロメチル）スルホニル］オキシ−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
Ｎ−（Ｌ）−トリチル−４−オキソプロリン・メチルエステル５．５ｇ（１４．２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６０ｍＬ）溶液に−７８℃で、ナトリウムヘキサメチルジシリルアミド（１７．１ｍＬ）の１Ｍヘキサン溶液を２０分間かけて滴下した。−７８℃で１時間後、Ｎ−フェニルトリフルオロメタンスルホンアミド６．６ｇ（１８．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を加えた。溶液を−７８℃で２．５時間撹拌し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で反応停止し、昇温させて室温とした。反応液をＥｔ２Ｏで希釈し、分液を行った。水層をＥｔ２Ｏで抽出し（３回）、合わせた有機層を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。残留物を、３：１ヘキサン：Ｅｔ２Ｏを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−トリチル−３，４−デヒドロ−４−［［（トリフルオロメチル）−スルホニル］オキシ］−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル５．９ｇを白色泡状物として得た。
【０３７６】
【化１０５】
【０３７７】
段階Ｅ
Ｎ−トリチル−３，４−デヒドロ−４−（４−カルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
Ｎ−トリチル−３，４−デヒドロ−４−［［（トリフルオロメチル）スルホニル］オキシ］−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル１．５ｇ（２．９ｍｍｏｌ）およびＬｉＣｌ ０．６２ｇ（１４．５ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（２０ｍＬ）溶液に、ｐ−カルボキシフェニルボロン酸０．９６ｇ（５．８ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）０．３３ｇ（０．２９ｍｍｏｌ）および２Ｍ Ｎａ２ＣＯ３溶液６．０ｍＬを加えた。反応液を昇温させて８０℃として１０時間経過させ、冷却した。混合物をＥｔＯＡｃおよびブラインで希釈し、分液を行った。有機層を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮して淡黄色固体を得た。残留物を、３：１ヘキサン：Ｅｔ２Ｏ、３：１Ｅｔ２Ｏ：ヘキサン、１００％Ｅｔ２Ｏ、１００％ＥｔＯＡｃ、１０％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃの段階的勾配で溶離を行うシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−トリチル−３，４−デヒドロ−４−（４−［カルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル０．９０ｇを淡黄色泡状物として得た。
【０３７８】
【化１０６】
【０３７９】
段階Ｆ
Ｎ−トリチル−３，４−デヒドロ−４−（４−ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリンメチルエステル
Ｎ−トリチル−３，４−デヒドロ−４−（４−カルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル０．８０ｇ（１．６４ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液に、Ｎ，Ｎ′−ジイソプロピル−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルイソ尿素（０．５ｍＬ）を加えた。１２時間撹拌後、追加のＮ，Ｎ′−ジイソプロピル−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルイソ尿素０．５ｍＬを加え、反応液を室温でさらに４８時間撹拌した。混合物をＥｔ２Ｏで希釈し、シリカゲル層で濾過し、減圧下に濃縮した。残留物３：１ヘキサン：Ｅｔ２Ｏを溶離液とするをシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−トリチル−３，４−デヒドロ−４−（４−ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリンメチルエステル０．３０ｇを１Ｈ−ＮＭＲ分析で若干不純物を含んだ無色泡状物として得た。
【０３８０】
【化１０７】
【０３８１】
段階Ｇ
４（Ｒ）−（４−ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
ＴＬＣ分析による判定でトリチル脱離が完結するまで、Ｎ−トリチル−３，４−デヒドロ−４−（４−ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル、１０％Ｐｄ／ＣおよびＥｔＯＨの混合物を１気圧のＨ２下に撹拌した。反応液をセライト層で濾過し、減圧下に濃縮した。残留物を３：１ヘキサン：Ｅｔ２Ｏ、３：１Ｅｔ２Ｏ：ヘキサン、１００％Ｅｔ２Ｏ、１００％ＥｔＯＡｃ、１０％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃの段階的勾配で溶離を行うシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、４（Ｒ）−（４−ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルをほぼ無色油状物として得た。
【０３８２】
【化１０８】
【０３８３】
段階Ｈ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（４−ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
４（Ｒ）−（４−ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシ−フェニル）−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル４０ｍｇ（０．１２３ｍｍｏｌ）および３，５−ジクロロベンゼン−スルホニルクロライド４６ｍｇ（０．２６ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ０．０７ｍＬ（０．３９ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１５時間撹拌後、トリアミン（Triamine）−３除去樹脂（Silicycle）を加え、さらに２時間撹拌を続けた。反応液を濾過し、減圧下に濃縮した。残留物を３：１ヘキサン：Ｅｔ２Ｏ、３：１Ｅｔ２Ｏ：ヘキサン、１００％Ｅｔ２Ｏの段階的勾配で溶離を行うシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（４−ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（５０ｍｇ）を得た。
【０３８４】
段階Ｉ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（４−ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリン
実施例２０段階Ｄに記載の手順に従って、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（４−ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（５０ｍｇ、０．０９７ｍｍｏｌ）を１Ｍ ＬｉＯＨのＴＨＦ溶液で処理して、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（４−ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリン（４７ｍｇ）を得た。
【０３８５】
段階Ｊ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（４−ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシ−フェニル）−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソ ニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル
実施例８段階Ｄに記載の手順に従って、ＨＡＴＵ（４４ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（２０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３１ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）の存在下に、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（４−ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリン（４７ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を３，５−（ジクロロイソニコチノイル）アミノ−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル塩酸塩（５１ｍｇ（０．１３ｍｍｏｌ）にカップリングさせた。粗生成物を３：１ヘキサン：Ｅｔ２Ｏ、３：１Ｅｔ２Ｏ：ヘキサン、１００％Ｅｔ２Ｏ、１００％ＥｔＯＡｃの段階的勾配で溶離を行うシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（４−ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（約１００ｍｇ）を無色油状物として得た。
【０３８６】
段階Ｋ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（４−ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシ−フェニル）−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（４−ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（１００ｍｇ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液に０℃で、１Ｍ ＬｉＯＨ ３ｍＬを加えた。反応液を０℃で２時間撹拌し、昇温させて室温とし、ＥｔＯＡｃで希釈し、ｐＨが約４となるまで２Ｍ ＨＣｌで酸性とした。分液を行い、水層をＥｔＯＡｃで抽出した（３回）。合わせた有機層を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮してＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロ−ベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（４−ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン（７０ｍｇ）を無色泡状物として得た。
ＨＰＬＣ：ＭＳ８３５．１（Ｍ＋Ｈ）。
【０３８７】
段階Ｌ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（４−カルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（４−ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン（７０ｍｇ）のＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）溶液に０℃で、ＴＦＡ２ｍＬを加えた。反応液を０℃で１時間撹拌し、昇温させて室温とした。逆相ＨＰＬＣによる判定で反応が完了した時点で、反応液を減圧下に濃縮した。Ｅｔ２Ｏでの磨砕によって、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（４−カルボキシフェニル）−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンをオフホワイト固体として得た。
ＨＰＬＣ：ＭＳ７７９．１（Ｍ＋Ｈ）。
【０３８８】
（実施例６０）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボキシ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−トリチル−３，４−デヒドロ−４−カルボキシ−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
実施例５９段階ＤからのＮ−トリチル−３，４−デヒドロ−４−［（トリフルオロメチル）スルホニル］オキシ］−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（１．５ｇ、２．９ｍｍｏｌ）、ＫＯＡｃ（１．１ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）、Ｐｈ３Ｐ（０．１５ｇ、０．５８ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＡｃ）２（０．０６ｇ、０．２９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中混合物に、無水ＣＯガスを２５分間吹き込んだ。ＣＯ風船下に１８時間にわたり、反応液を５０℃で加熱した。反応液を冷却し、ＥｔＯＡｃ、ブラインで希釈し、分液を行った。水層をＥｔＯＡｃで抽出した（３回）。合わせた有機層をブラインで洗浄し（５回）、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。残留物を３：１ヘキサン：Ｅｔ２Ｏ、３：１Ｅｔ２Ｏ：ヘキサン、１００％Ｅｔ２Ｏ、１００％ＥｔＯＡｃ、１０％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃの段階的勾配で溶離を行うシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−トリチル−３，４−デヒドロ−４−カルボキシ−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（０．６０ｇ）を得た。
【０３８９】
【化１０９】
【０３９０】
段階Ｂ
Ｎ−（Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボキシ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
実施例５９段階Ｆ〜Ｋに記載の手順によって、Ｎ−トリチル−３，４−デヒドロ−４−カルボキシ−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（４５０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）をＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル−カルボキシ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンに変換した。生成物を白色固体として単離した。
ＨＰＬＣ：ＭＳ７５９．７（Ｍ＋Ｈ）。
【０３９１】
（実施例６１）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−フェニル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−ＢＯＣ−３，４−デヒドロ−４−フェニル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
Ｎ−ＢＯＣ−３，４−デヒドロ−４−（トリフルオロメチル）スルホニル］オキシ］−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（W. Lubell et al., Tet. Lett. (1998), 39(12), 1595-8）６００ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）、ＬｉＣｌ３３６ｍｇ（８．０ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（２０ｍＬ）溶液に、フェニルボロン酸３９０ｍｇ（３．２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（Ｐｈ３Ｐ）４１８４ｍｇ（０．１６ｍｍｏｌ）および２Ｍ Ｎａ２ＣＯ３溶液５．０ｍＬを加えた。反応液を昇温させて８０℃として８時間経過させ、冷却した。混合物をＥｔＯＡｃおよびブラインで希釈し、分液を行った。水層をＥｔＯＡｃで抽出した（３回）。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。残留物を１：１ヘキサン：Ｅｔ２Ｏを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−ＢＯＣ−３，４−デヒドロ−４−フェニル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルを淡黄色油状物として得た。それは結晶化した。
【０３９２】
段階Ｂ
Ｎ−ＢＯＣ−４（Ｒ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
Ｎ−ＢＯＣ−３，４−デヒドロ−４−フェニル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル２６０ｍｇ（０．８６ｍｍｏｌ）、１０％Ｐｄ／ＣおよびＥｔＯＨの混合物を１気圧のＨ２下に２４時間撹拌した。反応液をセライト層で濾過し、減圧下に濃縮した。粗生成物を、それ以上精製せずに次の反応で用いた。
【０３９３】
【化１１０】
【０３９４】
段階Ｃ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
Ｎ−ＢＯＣ−４（Ｒ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル６２ｍｇのＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）溶液に０℃で、ＴＦＡ２ｍＬを加えた。反応液を０℃で１時間撹拌し、昇温させて室温とした。ＴＬＣ分析による評価で反応が完結した時点で、反応液を減圧下に濃縮した。その粗残留物のＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）溶液に０℃で、ＤＩＰＥＡ０．１８ｍＬ（１ｍｍｏｌ）と次に３，５−ジクロロ−ベンゼン）スルホニルクロライド７２ｍｇ（０．４１ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を終夜で昇温させて室温とした。１６時間後、反応液をＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｍ ＨＣｌ（３回）、ブライン（１回）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮してＮ−［（３，５−ジクロロ−ベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルを淡黄色油状物として得た。それをそれ以上精製せずに用いた。
【０３９５】
段階Ｄ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−フェニル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
実施例５９段階Ｉ〜Ｋに記載の手順に従って、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（０．２０ｍｍｏｌ）を反応させて、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−フェニル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを白色固体として得た。
ＨＰＬＣ：ＭＳ７３５．２（Ｍ＋Ｈ）。
【０３９６】
（実施例６２）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（４−ピリジル）−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａでフェニルボロン酸に代えて４−ピリジルボロン酸を用い、実施例６１段階Ａ〜Ｄに記載の手順に従って、実施例６１段階ＡからのＮ−ＢＯＣ−３，４−デヒドロ−４−［（トリフルオロメチル）スルホニル］オキシ］−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（４４０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を反応させて、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−（４−ピリジル）−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを得た。
ＨＰＬＣ：ＭＳ７３６．１（Ｍ＋Ｈ）。
【０３９７】
（実施例６３）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−（アリルオキシカルボニルアミノ）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−（アリルオキシカルボニルアミノ）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）−スルホニル］−２−メチル−３（Ｒ）−カルボキシ−（Ｌ）−プロリン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル（実施例１６段階Ｅで製造したメチルエステルのＬｉＯＨ加水分解から得たもの）１．０ｇ（２．６ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ１．４ｍＬ（１０．３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に０℃で、ＣｌＣＯ２Ｅｔ０．７４ｍＬ（７．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を昇温させて室温とし、さらに０．５時間撹拌し、再度冷却して０℃とし、ＮａＮ３０．８４ｇ（１２．９ｍｍｏｌ）の水溶液で処理した。反応液を７５分間かけて昇温させて室温とし、ＥｔＯＡｃおよびブラインで希釈した。分液を行い、水層をＥｔＯＡｃで抽出した（３回）。合わせた有機層を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮して油状物を得た。それは結晶化した。
【０３９８】
その粗残留物のトルエン（１０ｍＬ）溶液に、アリルアルコール（１０ｍＬ）を加え、反応液を終夜加熱還流した。１６時間後、反応液を減圧下に濃縮して、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−（アリルオキシカルボニルアミノ）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・ｔｅｒｔ−ブチルエステルを淡黄色油状物として得た。それは結晶化した。得られた粗残留物を、それ以上精製せずに用いた。
【０３９９】
【化１１１】
【０４００】
段階Ｂ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−（アリルオキシカルボニルアミノ）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）−スルホニル］−３（Ｒ）−（アリルオキシカルボニルアミノ）−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル５１５ｍｇ（１．１ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）溶液に０℃で、ＴＦＡ５ｍＬを加えた。反応を０℃で１時間撹拌し、昇温させて室温とした。ＴＬＣ分析による判定で反応が完結した時点で、反応液を減圧下に濃縮した。粗酸を実施例５９段階ＪおよびＫに記載の手順に従って反応させて、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−（アリルオキシカルボニルアミノ）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを明黄褐色固体として得た。
ＨＰＬＣ：ＭＳ７７２．１（Ｍ＋Ｈ）。
【０４０１】
（実施例６４）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−アミノ−２−メ チル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
実施例６３段階ＢからのＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）−スルホニル］−３（Ｒ）−（アリルオキシカルボニル−アミノ）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステル（最終ＬｉＯＨ加水分解の前）６５０ｍｇ（０．８３ｍｍｏｌ）およびＰｄ（Ｐｈ３Ｐ）４（約２０ｍｇ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液に、ＰｈＳｉＨ３０．２０ｍＬ（１．６ｍｍｏｌ）を加えた。約９０分間撹拌後、水０．２０ｍＬを加え、反応液を減圧下に濃縮してＮ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）−スルホニル］−３（Ｒ）−アミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルを得た。それをそれ以上精製せずに次の反応で用いた。
【０４０２】
実施例２０段階Ｆに記載の手順に従って、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−アミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・メチルエステルをＴＨＦ中１Ｍ ＬｉＯＨで加水分解して、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−アミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを得た。
ＨＰＬＣ：ＭＳ６８８．１（Ｍ＋Ｈ）。
【０４０３】
段階Ｂ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）−スルホニル］−３（Ｒ）−アミノ−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン１００ｍｇ（０．１５ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（１ｍＬ）溶液に、ＨＣＨＯ水溶液（３７％Ｈ２Ｏ溶液）１ｍＬと次にＮａＢＨ（ＯＡｃ）３１５４ｍｇ（０．７３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で４０時間撹拌し、ＥｔＯＡｃおよび１Ｍ ＮａＯＨで希釈し、１０分間撹拌した。水層を２Ｍ ＨＣｌで酸性とし、分液を行った。水相をＥｔＯＡｃで抽出し（３回）、合わせた有機層を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、濃縮した。粗残留物を分取逆相ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｒ）−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを白色固体として得た。
ＨＰＬＣ：ＭＳ７１６．２（Ｍ＋Ｈ）。
【０４０４】
（実施例６５）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−フェニル−３−カルボキシ−２−メチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
２−アミノ−３−フェニル−コハク酸ジメチルエステル塩酸塩
２−アミノ−３−フェニル−コハク酸（J. Med. Chem. (1973), 1277）１３ｇ（００５３ｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）溶液に、塩化チオニル２０ｍＬを加えた。溶液を２１時間還流し、冷却し、減圧下に濃縮した。粗残留物をトルエンと共沸させて、２−アミノ−３−フェニル−コハク酸ジメチルエステル塩酸塩を白色固体として得た。それをそれ以上精製せずに用いた。生成物は、１Ｈ−ＮＭＲ分析による判定でジアステレオマーの１：１混合物であった。
【０４０５】
段階Ｂ
２−（Ｎ−トリチル−アミノ）−３−フェニル−コハク酸ジメチルエステル
２−アミノ−３−フェニル−コハク酸ジメチルエステル塩酸塩５ｇ（１８．５ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）溶液に、ＴＥＡ７．７ｍＬ（５６ｍｍｏｌ）と次にトリチルクロライド６．２ｇ（２２．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で２日間撹拌し、減圧下に濃縮した。粗残留物にＥｔ２Ｏを加え、混合物をシリカゲル層で濾過し、減圧下に濃縮して無色油状物を得た。残留物を、３：１ヘキサン：Ｅｔ２Ｏを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、２−（Ｎ−トリチルアミノ）−３−フェニル−コハク酸ジメチルエステル６ｇを白色固体として得た。生成物は、１Ｈ−ＮＭＲ分析による判定でジアステレオマーの１．３：１混合物であった。
【０４０６】
【化１１２】
【０４０７】
段階Ｃ
２−（Ｎ−トリチル−アミノ）−３−カルボキシ−３−フェニル−ヘキス−５−エン酸ジメチルエステル
２−（Ｎ−トリチル−アミノ）−３−フェニル−コハク酸ジメチルエステル４．０ｇ（８．４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液に−７８℃で、１５分間かけてＫＨＭＤＳ（０．５Ｍトルエン溶液）４０．０ｍＬ（２０ｍｍｏｌ）を加えた。添加終了後、得られたエノレートを−７８℃で３０分間撹拌した。臭化アリル（無希釈）２．２ｍＬ（２５．１ｍｍｏｌ）を加え、反応液を−７８℃で０．５時間、−３０℃で２３時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で反応停止し、ＥｔＯＡｃで希釈した。分液を行い、水層をＥｔＯＡｃで抽出した（２回）。合わせた有機層を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、濃縮した。その残留物を、１：１ヘキサン：Ｅｔ２Ｏを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、２−（Ｎ−トリチル−アミノ）−３−カルボキシ−３−フェニル−ヘキス−５−エン酸ジメチルエステル３．８ｇを１Ｈ ＮＭＲ分析による判定でジアステレオマーの７：１混合物として得た。
【０４０８】
【化１１３】
【０４０９】
段階Ｄ
２−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−アミノ）−３−カルボキシ−３−フェニル−ヘキス−５−エン酸ジメチルエステル
２−（Ｎ−トリチル−アミノ）−３−カルボキシ−３−フェニル−ヘキス−５−エン酸ジメチルエステル３．７ｇ（７．１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１００ｍＬ）溶液に０℃で、塩化チオニル３．０ｍＬを加えた。反応液を昇温させて室温とした。ＴＬＣ分析による判定で原料が消費された時点で、反応液を減圧下に濃縮し、トルエンと共沸させた（２回）。その粗残留物のＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）溶液に０℃で、ピリジン１．７ｍＬ（２１．４ｍｍｏｌ）と次にＣｂｚＣｌ１．６ｍＬ（１０．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を終夜で昇温させて室温とし、２０時間後に減圧下で濃縮した。残留物を再度ＥｔＯＡｃに溶かし、１Ｍ ＨＣｌで洗浄し（３回）、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。その残留物を、１：１ヘキサン：Ｅｔ２Ｏを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、２−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−アミノ）−３−カルボキシ−３−フェニル−ヘキス−５−エン酸ジメチルエステルを１Ｈ ＮＭＲ分析による判定でジアステレオマーの７：１混合物として得た。
【０４１０】
段階Ｅ
Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−フェニル−３−メトキシカルボニル−２−メチル−プロリン・メチルエステル
２−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−アミノ）−３−カルボキシ−３−フェニル−ヘキス−５−エン酸ジメチルエステル１．０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｃ０．１５ｇ（２．４ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（１：１体積比、１０ｍＬ）溶液に−７８℃で、Ｏ３気流を溶液が青色となるまで吹き込んだ。過剰のオゾンを、反応液が無色となるまでＯ２気流でパージした。過剰のジメチルスルフィド（２ｍＬ）を加え、反応液を昇温させて室温とし、６０時間撹拌した。反応液をＥｔＯＡｃで希釈し、ＮａＨＣＯ３で洗浄し（３回）、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。
【０４１１】
その粗残留物、１０％Ｐｄ／ＣおよびＭｅＯＨ（５ｍＬ）の混合物を、１気圧のＨ２下に１８時間撹拌した。混合物をセライト層で濾過し、濃縮して、アミン７００ｍｇを１Ｈ ＮＭＲ分析による判定でジアステレオマーの１０：１混合物として得た。
【０４１２】
その粗取得物およびfＤＩＰＥＡ１．５ｍＬ（８．５ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）溶液に０℃で、３，５−ジクロロベンゼン−スルホニルクロライド１．０ｇ（５．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を終夜で昇温させて室温とした。１６時間後、反応液をＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｍ ＨＣｌで洗浄し（３回）、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。その残留物を、３：１ヘキサン：Ｅｔ２Ｏと次に１：１ヘキサン：Ｅｔ２Ｏそして次に３：１Ｅｔ２Ｏ：ヘキサンの段階的勾配で溶離を行うシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、淡黄色固体を得た。ヘキサンでの磨砕によって、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−フェニル−３−メトキシカルボニル−２−メチル−プロリン・メチルエステル７５０ｍｇを、１Ｈ ＮＭＲ分析による判定でジアステレオマーの＞１５：１混合物としての白色固体として得た。
【０４１３】
【化１１４】
【０４１４】
段階Ｆ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−フェニル−３−カルボキシ−２−メチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−フェニル−３−メトキシカルボニル−２−メチル−プロリン・メチルエステル１０５ｍｇ（０．２２ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２ｍＬ）、ＴＨＦ（２ｍＬ）および１Ｍ ＮａＯＨを８０℃で終夜高撹拌した。反応液を冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、２Ｍ ＨＣｌで酸性とした。分液を行い、水層をＥｔＯＡｃで抽出した（３回）。合わせた有機層を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。粗Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）−スルホニル］−３−フェニル−３−カルボキシ−２−メチル−プロリンをそれ以上精製せずに用いた。
【０４１５】
【化１１５】
【０４１６】
実施例５９段階ＪおよびＫに記載の手順に従って、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−フェニル−３−カルボキシ−２−メチル−プロリンを反応させて、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−フェニル−３−カルボキシ−２−メチル−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを白色固体として得た。
ＨＰＬＣ：ＭＳ７７９．０（Ｍ＋Ｈ）。
【０４１７】
（実施例６６〜６７）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４−メチル−４−カルボキシ−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−ベンジル−４−メトキシカルボニル−４−メチル−プロリン・エチルエステル（Ａ）およびＮ−ベンジル−３−メトキシカルボニル−３−メチル−プロリン・エチルエステル（Ｂ）
Ｎ−ベンジルグリシン・エチルエステル５００ｍｇ（２．６ｍｍｏｌ）、パラホルムアルデヒド３８８ｍｇ（１３ｍｍｏｌ）、メタクリル酸２−メチル３９０ｍｇ（３．９ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３３５７ｍｇ（２．６ｍｍｏｌ）およびトルエン１０ｍＬの混合物を、封管中１８０℃で１４時間加熱し、冷却した。反応液をＥｔＯＡｃおよびブラインで希釈し、分液を行った。有機層を無水ＭｇＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。その残留物を、３：１ヘキサン：Ｅｔ２Ｏ、次に１：１ヘキサン：Ｅｔ２Ｏ、次に３：１Ｅｔ２Ｏ：ヘキサン、そして次にＥｔ２Ｏという段階的勾配で溶離を行うシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、淡黄色油状物３２５ｍｇを得た。それは１Ｈ ＮＭＲ分析による判定で、Ｎ−ベンジル−４−メトキシカルボニル−４−メチル−プロリン・エチルエステル（Ａ）およびＮ−ベンジル−３−メトキシカルボニル−３−メチル−プロリン・エチルエステル（Ｂ）の３：１混合物であった。ＨＰＬＣ：ＭＳ３０６．２（Ｍ＋Ｈ）。
【０４１８】
段階Ｂ
４−メトキシカルボニル−４−メチル−プロリン・エチルエステル（Ａ）および３−メトキシカルボニル−３−メチル−プロリン・エチルエステル（Ｂ）
Ｎ−ベンジル−４−メトキシカルボニル−４−メチルプロリン・エチルエステル（Ａ）およびＮ−ベンジル−３−メトキシカルボニル−３−メチルプロリン・エチルエステル（Ｂ）３２５ｍｇ（１．１ｍｍｏｌ）、１０％Ｐｄ／ＣおよびＭｅＯＨの混合物を、１気圧のＨ２下に１７時間撹拌した。反応液をセライト濾過し、減圧下に濃縮して無色油状物２４０ｍｇを得た。それは１Ｈ ＮＭＲ分析による判定で、４−メトキシカルボニル−４−メチル−プロリン・エチルエステル（Ａ）と３−メトキシカルボニル−３−メチル−プロリン・エチルエステル（Ｂ）の約４：１混合物であった。その粗混合物をそれ以上精製せずに用いた。
【０４１９】
段階Ｃ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４−メトキシカルボニル−４−メチルプロリン・エチルエステル（Ａ）およびＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−メトキシカルボニル−３−メチル−プロリン・エチルエステル（Ｂ）
実施例２０段階Ｂに記載の手順に従って、４−メトキシカルボニル−４−メチルプロリン・エチルエステル（Ａ）および３−メトキシカルボニル−３−メチル−プロリン・エチルエステル（Ｂ）の混合物２３０ｍｇ（１．０７ｍｍｏｌ）を、Ｎ−（３，５−ジクロロベンゼンスルホニルクロライドと反応させて、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）−スルホニル］−４−メトキシカルボニル−４−メチルプロリン・エチルエステル（Ａ）およびＮ−［（３，５−ジクロロ−ベンゼン）スルホニル］−３−メトキシカルボニル−３−メチル−プロリン・エチルエステル（Ｂ）３１０ｍｇを１Ｈ ＮＭＲ分析による判定で約２．５：１の化合物混合物として得た。
【０４２０】
段階Ｄ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４−カルボキシ−４−メチル−プロリン（Ａ）およびＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−カルボキシ−３−メチル−プロリン（Ｂ）
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）−スルホニル］−４−メトキシカルボニル−４−メチルプロリン・エチルエステル（Ａ）およびＮ−［（３，５−ジクロロ−ベンゼン）スルホニル］−３−メトキシカルボニル−３−メチルプロリン・エチルエステル（Ｂ）の混合物３１５ｍｇ（０．７４ｍｍｏｌ）を、実施例２０段階Ｄに記載の手順に従ってＬｉＯＨで加水分解することで、標題化合物約３００ｍｇを１Ｈ−ＮＭＲ分析による判定で約３：１の化合物混合物として得た。混合物を分取逆相ＨＰＬＣによって精製して、白色固体６３ｍｇを得てそれを１Ｈ−ＮＭＲおよびＨＰＬＣ／ＭＳ分析による判定でＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）−スルホニル］−４−カルボキシ−４−メチルプロリン（Ａ）と割り当て、無色油状物２２５ｍｇを得てそれをＮ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３−カルボキシ−３−メチル−プロリン（Ｂ）と割り当てた。化合物Ａは単一のジアステレオマーであり、化合物Ｂはジアステレオマーの１１：１混合物であった。
【０４２１】
【化１１６】
【０４２２】
段階Ｅ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４−メチル−４−カルボキシ−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
実施例５９段階ＪおよびＫに記載の手順に従って、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４−カルボキシ−４−メチル−プロリン（Ａ）（６３ｍｇ）を反応させて、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４−メチル−４−カルボキシ−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを２種類の個々のジアステレオマーとして得た。それらはいずれも白色固体であった。
ＨＰＬＣ：ＭＳ７１７．０（Ｍ＋Ｈ）。
【０４２３】
（実施例６８）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−シクロヘキシル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロ−イソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−ＢＯＣ−４（Ｒ）−シクロヘキシル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
実施例段階ＢからのＮ−ＢＯＣ−４（Ｒ）−フェニル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（０．１６５ｇ、０．５４ｍｍｏｌ）、ＰｔＯ２（０．１ｇ、０．４４ｍｍｏｌ）およびＭｅＯＨの混合物を、約０．３４ＭＰａ（５０ｐｓｉ）のＨ２下に終夜振盪した。反応液をセライト層で濾過し、濃縮してＮ−ＢＯＣ−４（Ｒ）−シクロヘキシル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステルを得た。それをそれ以上精製せずに用いた。
【０４２４】
段階Ｂ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−シクロヘキシル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
実施例６１段階ＣおよびＤに記載の手順に従って、Ｎ−ＢＯＣ−４（Ｒ）−シクロヘキシル−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（０．１６ｇ、０．５４ｍｍｏｌ）を反応させて、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−４（Ｒ）−シクロヘキシル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３，５−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを固体として得た。
ＭＳｍ／ｅ７４３．２（Ｍ＋）。
【０４２５】
（実施例６９）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−（アリルオキシカルボニル−アミノ）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−メトキシカルボニル−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル
実施例１６段階Ｂでフマル酸ジメチルに代えてマレイン酸ジメチルを用いた以外、３（Ｒ）異性体について実施例６３段階Ａに記載の手順に従って、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−メトキシカルボニル−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・ｔｅｒｔ−ブチルエステルを製造した。
【０４２６】
段階Ｂ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−（アリルオキシカルボニル−アミノ）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
４（Ｒ）異性体について実施例６３段階ＡおよびＢに記載の手順に従って、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−メトキシカルボニル−２−メチル−（Ｌ）−プロリン・ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．６３ｇ、３．６ｍｍｏｌ）を反応させて、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３（Ｓ）−（アリルオキシカルボニル−アミノ）−２−メチル−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニンを固体として得た。ＭＳｍ／ｅ７７２．５（Ｍ＋）。
【０４２７】
（実施例７０）
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジアリル−４−オキソ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
段階Ａ
Ｎ−（ＢＯＣ）−３，３−ジアリル−４−オキソ−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル
Ｎ−（ＢＯＣ）−４−オキソ−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル（０．１９７ｇ）のＴＨＦ（３ｍＬ）およびＤＭＰＵ（１ｍＬ）溶液に、臭化アリル０．２８ｍＬを加えた。反応混合物を冷却して−７８℃とし、ＬｉＨＭＤＳ２．０ｍＬを反応液に滴下した。混合物を−７８℃で２時間撹拌し、昇温させて室温とし、窒素下に終夜撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌで反応停止し、水で希釈した。混合物をＥｔ２Ｏで抽出した（３回）。合わせたＥｔ２Ｏ層を水、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。減圧下に濃縮後、粗生成物を５％から１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｎ−（ＢＯＣ）−３，３−ジアリル−４−オキソプロリン・メチルエステル０．０９９ｇを単離した。
【０４２８】
【化１１７】
【０４２９】
段階Ｂ
３，３−ジアリル−４−オキソ−（Ｌ）−プロリン
Ｎ−（ＢＯＣ）−３，３−ジアリル−４−オキソ−（Ｌ）−プロリン・メチルエステル０．０９９ｇの水（０．４ｍＬ）およびＭｅＯＨ（１．６ｍＬ）溶液に、ＬｉＯＨ・１水和物２５．７ｍｇを加えた。反応混合物を２時間超音波処理した。混合物を１．２Ｎ ＨＣｌでｐＨ＝２の酸性とし、減圧下に濃縮した。残留物をＨＣｌ／ジオキサン溶液１．５ｍＬで１．５時間処理した。減圧下に濃縮後、３，３−ジアリル−４−オキソ−（Ｌ）−プロリン０．１２ｇを得た。それを精製せずに次の段階で用いた。
【０４３０】
【化１１８】
【０４３１】
段階Ｃ
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジアリル−４−オキソ−（Ｌ）−プロリン
３，３−ジアリル−４−オキソ−（Ｌ）−プロリンの水（２ｍＬ）およびジオキサン（２ｍＬ）溶液に、Ｎａ２ＣＯ３１１０ｍｇおよび３，５−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド１９２ｍｇを加えた。反応液を室温で終夜窒素下に撹拌した。混合物を水で希釈しｍＥｔ２Ｏで抽出した（３回）。水相をｐＨ＝２の酸性とし、ＥｔＯＡｃで抽出した（３回）。合わせたＥｔＯＡｃ層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、減圧下に濃縮した。残留物を、１％ＨＯＡｃ／５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを展開液とするシリカゲルでの分取ＴＬＣを溶離液とするによって精製して、Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジアリル−４−オキソ−（Ｌ）−プロリン（２０ｍｇ）を得た。
【０４３２】
【化１１９】
【０４３３】
段階Ｄ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジアリル−４−オ キソ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・ｔ−ブチルエステル
Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジアリル−４−オキソ−（Ｌ）−プロリン２０ｍｇのＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）溶液を、触媒量のＤＭＦ存在下にオキサリルクロライド０．０１ｍＬで処理した。１時間後、混合物を減圧下に濃縮した。残留物をＣＨ２Ｃｌ２０．５ｍＬに溶かし、ＤＩＰＥＡ０．０２５ｍＬ存在下に４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・ｔ−ブチルエステルの溶液に加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。水で反応停止し、５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを展開液とする分取ＴＬＣによって精製して、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジアリル−４−オキソ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・ｔ−ブチルエステル（１０ｍｇ）を得た。
ＨＰＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｅ＝８１０．９（Ｍ＋１）。
【０４３４】
段階Ｅ
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジアリル−４−オキソ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン
Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジアリル−４−オキソ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン・ｔ−ブチルエステル（１０ｍｇ）を、ＴＦＡ１ｍＬで１時間処理した。混合物を減圧下に濃縮して、Ｎ−（Ｎ−［（３，５−ジクロロベンゼン）スルホニル］−３，３−ジアリル−４−オキソ−（Ｌ）−プロリル）−４−［（３′，５′−ジクロロイソニコチノイル）アミノ］−（Ｌ）−フェニルアラニン（７ｍｇ）を得た。
ＨＰＬＣ−ＭＳ：保持時間＝３．６分、ｍ／ｅ＝７５４．９（Ｍ＋１）。
【０４３５】
（実施例７１）
ＶＣＡＭ−Ｉｇ融合蛋白へのＶＬＡ−４依存性結合の拮抗
段階Ａ：ＶＣＡＭ−Ｉｇの取得
鋳型としてのヒトＶＣＡＭ ｃＤＮＡ（R&D Systems）を用いるＰＣＲによって、ヒトＶＣＡＭ（GenBank Accession no.M30257）の信号ペプチドならびに領域１および２を増幅した。得られた６５０ｂｐのＰＣＲ産生物を、ＥｃｏＲＩおよびＢｃｌＩで消化し、ＥｃｏＲＩおよびＢａｍＨＩで消化した発現ベクターｐＩｇ−Ｔａｉｌ（R&D Systems, Minneapolis, MN）に連結した。ｐＩｇ−Ｔａｉｌベクターは、ヒトＩｇＧ１（GenBank Accession no.Z17370）のヒンジ部、ＣＨ２およびＣＨ３をコードするゲノム断片を有する。得られたＶＣＡＭ断片のＤＮＡ配列をシーケナーゼ（Sequenase；US Biochemical, Cleveland, OH）を用いて確認した。ＶＣＡＭ−Ｉｇ融合物全体をコードする断片を、ＥｃｏＲＩおよびＮｏｔＩの順でｐＩｇ−Ｔａｉｌから切り取り、ＥｃｏＲＩおよびＮｏｔＩで消化したｐＣＩ−ｎｅｏ（Promega, Madison, WI）に連結させた。ｐＣＩ−ｎｅｏ／ＶＣＡＭ−Ｉｇと称される得られたベクターを、カルシウム−リン酸ＤＮＡ沈殿（Specialty Media, Lavalette, NJ）を用いてＣＨＯ−Ｋ１（ATCC CCL 61）細胞にトランスフェクションした。０．２〜０．８ｍｇ／ｍＬ活性Ｇ４１８（Gibco, Grand Island, NY）を用いる標準プロトコールに従って、安定なＶＣＡＭ−Ｉｇ産生クローンを選択し、増殖させ、細胞上清について、１．５μｇ／ｍＬ（総蛋白）のヤギ抗ヒトＩｇＧ（Sigma, St.Louis, MO）で予めコーティングしておいたウェルへのジュルカット接着に介在する能力のスクリーニングを行った。次に、陽性のＣＨＯ−Ｋ１／ＶＣＡＭ−ＩｇクローンをＣＨＯ−ＳＦＭ無血清培地（Gibco）に使用し、ＶＣＡＭ−Ｉｇの安定発現についての選択下に維持した。メーカーの説明に従って、蛋白Ａ／Ｇセファロース（Pierce, Rockford, IL）でのアフィニティクロマトグラフィーによって、粗培養上清からＶＣＡＭ−Ｉｇを精製し、ＹＭ−３０膜（Amicon, Beverly, MA）での限外濾過により、５０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．６）中に脱塩した。
【０４３６】
段階Ｂ： １２５ Ｉ−ＶＣＡＭ−Ｉｇの取得
メーカーの説明に従って、１２５Ｉ−ボルトン・ハンター（Bolton Hunter）試薬（New England Nuclear, Boston, MA；カタログ番号ＮＥＸ１２０−０１４２）により、ＶＣＡＭ−Ｉｇを、１０００Ｃｉ／ｍｍｏｌより大きい比放射能まで標識した。紫外線検出および放射線検出を用いて、較正済みＨＰＬＣゲル濾過カラム（G2000SW；７．５×６００ｍｍ；Tosoh、日本）によって、未取り込み同位体から、標識蛋白を分離した。
【０４３７】
段階Ｃ：ＶＣＡＭ−Ｉｇ結合アッセイ
本発明の化合物のＤＭＳＯ溶液を、所望の最終アッセイ濃度の１００倍濃度で調製した。最終濃度は、０．００１ｎＭ〜１００μＭの範囲から選択した。ジュルカット細胞を４００×ｇで５分間遠心し、結合緩衝液（２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、３ｍＭ ＫＣｌ、２ｍＭグルコース、０．１％ウシ血清アルブミン、ｐＨ７．４）中に再懸濁させた。細胞を再度遠心し、ＭｎＣｌ２を補給した結合緩衝液に最終濃度１ｍＭで再懸濁させた。二連のウェルに、（ｉ）１ｍＭ ＭｎＣｌ２を含む結合緩衝液２００μＬ；（ｉｉ）１２５Ｉ−ＶＣＡＭ−Ｉｇの１ｍＭ ＭｎＣｌ２含有結合緩衝液溶液２０μＬ（最終濃度：約１００ｐＭ）；（ｉｉｉ）化合物溶液もしくはＤＭＳＯ２．５μＬ；および（ｉｖ）容量３０μＬ中の細胞０．５×１０６個を加えることで、ミリポアＭＨＶＢマルチスクリーンプレート（Millipore MHVB multiscreen plate；カタログ番号ＭＨＶＢＮ４５５０、Millipore Corp., MA）で化合物のアッセイを行った。プレートを室温で３０分間インキュベートし、真空ボックスで濾過し、同装置にて、１ｍＭ ＭｎＣｌ２を含む結合緩衝液１００μＬを加えることで洗浄を行った。マルチスクリーンプレートをアダプタプレート（Packard, Meriden, CT；カタログ番号６００５１７８）に挿入した後、マイクロシンチ−２０（Microscint-20, Packard；カタログ番号６０１３６２１）１００μＬを各ウェルに加えた。プレートを封止し、３０秒間振盪機にかけ、トップカウント（Topcount）マイクロプレート・シンチレーションカウンタ（Packard）でカウンティングした。ＤＭＳＯのみを含む対照ウェルを用いて、０％阻害に相当するＶＣＡＭ−Ｉｇ結合のレベルを求めた。細胞を省略した対照ウェルを用いて、１００％阻害に相当する結合レベルを求めた。細胞非存在下での１２５Ｉ−ＶＣＡＭ−Ｉｇの結合は通常、媒体存在下で細胞を用いて認められる値の５％未満であった。各試験ウェルについて阻害パーセントを計算し、バリデーション済みの４パラメータ適合アルゴリズムを用いて、１０ポイント力価測定から、ＩＣ５０を求めた。
【０４３８】
（実施例７２）
ＶＣＡＭ−Ｉｇ融合蛋白へのα ４ β ７ 依存性結合の拮抗
段階Ａ：α ４ β ７ 細胞系
ＲＰＭＩ−８８６６細胞（ヒトＢ細胞系α４ ＋β１ −β７；ウィルキンス博士（Prof.John Wilkins, University of Manitoba, Canada）から提供）を、３７℃および５％二酸化炭素の条件で、ＲＰＭＩ／１０％ウシ胎仔血清／ペニシリン１００Ｕ／ストレプトマイシン１００μｇ／２ｍＭ Ｌ−グルタミン中で成長させた。細胞を１０００ｒｐｍで５分間遠心してペレット状とし、２回洗浄し、結合緩衝液（２５ｍＭ Ｈｅｐｅｓ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、０．１％ＢＳＡ、３ｍＭ ＫＣｌ、２ｍＭグルコース、ｐＨ７．４）に再懸濁させた。
【０４３９】
段階Ｂ：α ４ β ７ ＶＣＡＭ−Ｉｇ結合アッセイ
本発明の化合物のＤＭＳＯ溶液を、所望の最終アッセイ濃度の１００倍濃度で調製した。最終濃度は、０．００１ｎＭ〜１００μＭの範囲から選択した。二連のウェルに、（ｉ）１．５ｍＭ ＭｎＣｌ２を含む結合緩衝液１００ｍＬ／ウェル；（ｉｉ）１２５Ｉ−ＶＣＡＭ−Ｉｇの結合緩衝液溶液１０ｍＬ／ウェル（最終アッセイ濃度＜５００ｐＭ）；（ｉｉｉ）被験化合物もしくはＤＭＳＯのみ１．５ｍＬ／ウェル；および（ｉｖ）ＲＰＭＩ−８８６６細胞懸濁液３８ｍＬ／ウェル（細胞１．２５×１０６個／ウェル）を加えることで、ミリポアＭＨＶＢマルチスクリーンプレート（カタログ番号ＭＨＶＢＮ４５５０）で化合物のアッセイを行った。プレートを室温で、プレート振盪機にて２００ｒｐｍで４５分間インキュベートし、真空ボックスで濾過し、同装置にて、１ｍＭ ＭｎＣｌ２を含む結合緩衝液１００ｍＬを加えることで洗浄を行った。マルチスクリーンプレートをアダプタプレート（Packard, Meriden, CT；カタログ番号６００５１７８）に挿入した後、マイクロシンチ−２０（Packard；カタログ番号６０１３６２１）１００ｍＬを各ウェルに加えた。プレートを封止し、３０秒間振盪機にかけ、トップカウントマイクロプレート・シンチレーションカウンタ（Packard）でカウンティングした。ＤＭＳＯのみを含む対照ウェルを用いて、０％阻害に相当するＶＣＡＭ−Ｉｇ結合のレベルを求めた。細胞を省略したウェルを用いて、１００％阻害に相当する結合レベルを求めた。各試験ウェルについて阻害パーセントを計算し、バリデーション済みの４パラメータ適合アルゴリズムを用いて、１０ポイント力価測定から、ＩＣ５０を求めた。

Claims (30)

  1. 下記式Ｉの化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
    ［式中、
    Ａは
    １）Ｎ、
    ２）Ｎ＋−Ｏ−
    であり；
    ＸおよびＹは独立に、
    １）ハロゲン、
    ２）Ｃ１−３アルキル、
    ３）Ｃ１−３アルコキシ
    から選択され；
    Ｒ１は、
    １）水素、
    ２）Ｃ１−１０アルキル、
    ３）アリール−Ｃ１−１０アルキル
    であり；
    Ｒ２は、
    １）水素または
    ２）Ｃ１−１０アルキル
    であり；
    Ｒ３ａおよびＲ３ｂの一方は、水素、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ３−１０シクロアルキル、−ＣＯ２Ｒｄ、アリールおよびヘテロアリールから選択され；他方は
    １）水素、
    ２）Ｃ１−１０アルキル、
    ３）Ｃ２−１０アルケニル、
    ４）Ｃ２−１０アルキニル、
    ５）Ｃ３−１０シクロアルキル、
    ６）−ＯＲｄ、
    ７）−ＣＯ２Ｒｄ、
    ８）−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、
    ９）−ＮＲｄＲｅ、
    １０）−ＮＲｄＳ（Ｏ）ｍＲｅ、
    １１）−ＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｅ、
    １２）−ＮＲｄＣ（Ｏ）ＯＲｅ、
    １３）−ＮＲｄＣ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、
    １４）アリールおよび
    １５）ヘテロアリール
    から選択され、
    その場合にアルキル、アルケニルおよびアルキニルは、Ｒａから独立に選択される１〜４個の置換基によって置換されていても良く；アリールおよびヘテロアリールは、Ｒｂから独立に選択される１〜４個の置換基によって置換されていても良く；
    Ｒ４ａおよびＲ４ｂの一方が水素、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ３−１０シクロアルキル、ＣＯ２Ｒｄ、アリールおよびヘテロアリールであり、他方が
    １）水素、
    ２）Ｃ１−１０アルキル、
    ３）Ｃ２−１０アルケニル、
    ４）Ｃ２−１０アルキニル、
    ５）Ｃ３−１０シクロアルキル、
    ６）−ＯＲｄ、
    ７）−ＣＯ２Ｒｄ、
    ８）−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、
    ９）−ＮＲｄＲｅ、
    １０）−ＮＲｄＳ（Ｏ）ｍＲｅ、
    １１）−ＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｅ、
    １２）−ＮＲｄＣ（Ｏ）ＯＲｅ、
    １３）−ＮＲｄＣ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、
    １４）−ＣＮ、
    １５）アリールおよび
    １６）ヘテロアリール
    から選択され、
    その場合にアルキル、アルケニルおよびアルキニルは、Ｒａから独立に選択される１〜４個の置換基によって置換されていても良く；、アリールおよびヘテロアリールは、Ｒｂから独立に選択される１〜４個の置換基によって置換されていても良く；あるいは
    Ｒ４ａとＲ４ｂが一体となってオキソであり；
    Ｒ５は、
    １）水素；
    ２）ＯＨ；
    ３）ＯＣＨ３；または
    ４）ＮＨ２
    であり；
    Ｒａは、
    １）−ＯＲｄ、
    ２）−ＮＲｄＳ（Ｏ）ｍＲｅ、
    ３）−ＮＯ２、
    ４）ハロゲン、
    ５）−Ｓ（Ｏ）ｍＲｄ、
    ６）−ＳＲｄ、
    ７）−Ｓ（Ｏ）２ＯＲｄ、
    ８）−Ｓ（Ｏ）ｍＮＲｄＲｅ、
    ９）−ＮＲｄＲｅ、
    １０）−Ｏ（ＣＲｆＲｇ）ｎＮＲｄＲｅ、
    １１）−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、
    １２）−ＣＯ２Ｒｄ、
    １３）−ＣＯ２（ＣＲｆＲｇ）ｎＣＯＮＲｄＲｅ、
    １４）−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、
    １５）−ＣＮ、
    １６）−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、
    １７）−ＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｅ、
    １８）−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、
    １９）−ＮＲｄＣ（Ｏ）ＯＲｅ、
    ２０）−ＮＲｄＣ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、
    ２１）−ＣＲｄ（Ｎ−ＯＲｅ）、
    ２２）ＣＦ３、
    ２３）−ＯＣＦ３、
    ２４）Ｃ３−８シクロアルキルまたは
    ２５）複素環
    であり、
    その場合に、シクロアルキルおよび複素環は、Ｒｃから独立に選択される１〜４個の基によって置換されていても良く；
    Ｒｂは、
    １）Ｒａから選択される基、
    ２）Ｃ１−１０アルキル、
    ３）Ｃ２−１０アルケニル、
    ４）Ｃ２−１０アルキニル、
    ５）Ａｒ１、
    ６）Ｃ１−１０アルキル−Ａｒ１
    であり、
    その場合にアルキル、アルケニル、アルキニルおよびＡｒ１は、Ｒｃから独立に選択される基から選択される１〜４個の置換基によって置換されていても良く；
    Ｒｃは、
    １）ハロゲン、
    ２）アミノ、
    ３）カルボキシ、
    ４）Ｃ１−４アルキル、
    ５）Ｃ１−４アルコキシ、
    ６）アリール、
    ７）アリールＣ１−４アルキル、
    ８）ヒドロキシ、
    ９）ＣＦ３、
    １０）ＯＣ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル、
    １１）ＯＣ（Ｏ）ＮＲｆＲｇまたは
    １２）アリールオキシ
    であり；
    ＲｄおよびＲｅは独立に、水素、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ２−１０アルキニル、ＣｙおよびＣｙＣ１−１０アルキルから選択され、その場合にアルキル、アルケニル、アルキニルおよびＣｙはＲｃから独立に選択される１〜４個の置換基によって置換されていても良く；あるいは
    ＲｄおよびＲｅは、それらが結合している原子と一体となって、酸素、硫黄およびＮ−Ｒｈから独立に選択される０〜２個の別のヘテロ原子を有する４〜７員の複素環を形成しており；
    ＲｆおよびＲｇは独立に、水素、Ｃ１−１０アルキル、ＣｙおよびＣｙＣ１−１０アルキルから選択され；あるいは
    ＲｆおよびＲｇは、それらが結合している炭素と一体となって、酸素、硫黄および窒素から独立に選択される０〜２個のヘテロ原子を有する５〜７員の複素環を形成しており；
    Ｒｈは、Ｒｆおよび−Ｃ（Ｏ）Ｒｆから選択され；
    Ｃｙは、シクロアルキル、複素環、アリールおよびヘテロアリールから選択され；
    Ａｒ１は、それぞれＲｃから独立に選択される１個もしくは２個の基によって置換されていても良いフェニル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニルおよびトリアジニルから選択され；
    Ａｒ２は、１，４−フェニレンまたは２，５−ピリジレンであり；
    ｍは１または２であり；
    ｎは０、１または２である。］
  2. Ａｒ１が、Ｃ１−３アルキルによって置換されていても良いピリジル、またはハロゲン、Ｃ１−３アルキル、フェニル、トリフルオロメチルおよびトリフルオロメトキシから独立に選択される１〜２個の基によって置換されていても良いフェニルである請求項１に記載の化合物。
  3. Ａｒ１が、４位もしくは５位に第２の置換基を有していても良い３−置換フェニルであり、該置換基が独立に、塩素、フッ素、臭素、メチル、フェニル、トリフルオロメチルおよびトリフルオロメトキシから選択される請求項１に記載の化合物。
  4. Ａｒ１が３，５−ジクロロフェニルである請求項１に記載の化合物。
  5. Ａｒ２が１，４−フェニレンである請求項１に記載の化合物。
  6. ＸおよびＹの一方がハロゲンであり、他方がハロゲン、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシから選択される請求項１に記載の化合物。
  7. ＸおよびＹの一方が塩素であり、他方が塩素またはメトキシである請求項１に記載の化合物。
  8. ＸおよびＹがそれぞれ塩素である請求項１に記載の化合物。
  9. Ｒ３ａおよびＲ３ｂがそれぞれ水素であり、Ｒ４ａおよびＲ４ｂの一方が水素またはＣ１−１０アルキルであり、他方が水素、Ｃ３−１０シクロアルキル、ピリジル、ＮＲｄＲｅ、ＯＲｄ、ＣＮ、ＣＯ２ＲｄおよびＣＯ２Ｈによって置換されていても良いフェニルから選択される請求項１に記載の化合物。
  10. Ｒ４ａおよびＲ４ｂの一方が水素であり、他方が水素、フェニル、Ｃ３−６シクロアルキル、ピリジル、ＣＮ、ＯＲｄおよびＣＯ２Ｒｄから選択される請求項９に記載の化合物。
  11. Ｒ４ａおよびＲ４ｂの一方が水素であり、他方がＮＲｄＲｅである請求項９に記載の化合物。
  12. Ｒ４ａおよびＲ４ｂがそれぞれ水素であり、Ｒ３ａおよびＲ３ｂの一方が水素、Ｃ１−１０アルキル、フェニルおよびＣ２−１０アルケニルから選択され、他方が水素、ＯＨによって置換されていても良いＣ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ３−１０シクロアルキル、ＯＨもしくはＣＯ２Ｈによって置換されていても良いフェニル、ＣＯ２Ｒｄ、ＯＲｄ、ＮＲｄＲｅおよびＮＲｄＣ（Ｏ）２Ｒｄから選択される請求項１に記載の化合物。
  13. Ｒ３ａおよびＲ３ｂの一方が水素であり、他方が水素、ＯＨもしくはＣＯ２Ｈによって置換されていても良いフェニル、ＯＨによって置換されていても良いＣ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、ＣＯ２Ｒ、ＯＲｄ、ＮＲｄＲｅおよびＮＲＣ（Ｏ）２Ｒから選択される請求項１２に記載の化合物。
  14. Ｒ３ａおよびＲ３ｂの一方がＣ１−６アルキルであり、他方がＣ１−６アルキルおよびＯＲｄから選択される請求項１２に記載の化合物。
  15. Ｒ３ａおよびＲ３ｂがそれぞれＣ１−６アルキルまたはＣ２−６アルケニルである請求項１２に記載の化合物。
  16. 下記式Ｉａの化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
    ［式中、
    Ａは、ＮまたはＮ＋Ｏ−であり；
    Ｒ２は、Ｈまたはメチルであり；
    Ｒ３ａおよびＲ３ｂの一方はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニルおよびフェニルから選択され、他方はＨ、ＯＨもしくはＣＯ２Ｈによって置換されていても良いフェニル、ＯＨによって置換されていても良いＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−６シクロアルキル、ＣＯ２Ｒｄ、ＯＲｄ、ＮＲｄＲｅおよびＮＲｄＣ（Ｏ）２Ｒｄから選択され；
    Ｒ４ａおよびＲ４ｂの一方は、ＨおよびＣ１−６アルキルから選択され、他方はＨ、フェニル、Ｃ３−６シクロアルキル、ピリジル、ＣＮ、ＯＲｄ、ＮＲｄＲｅおよびＣＯ２Ｒｄから選択され；あるいは
    Ｒ４ａとＲ４ｂが一体となってオキソである。］
  17. Ｒ３ａおよびＲ３ｂがそれぞれ水素であり；Ｒ４ａおよびＲ４ｂの一方が水素であり、他方がフェニル、Ｃ３−６シクロアルキル、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、ＣＯ２Ｈ、ピリジル、シアノおよびＮＲｄＲｅから選択される請求項１６に記載の化合物。
  18. Ｒ４ａまたはＲ４ｂがフェニルである請求項１７に記載の化合物。
  19. Ｒ４ａまたはＲ４ｂがＮＲｄＲｅであり；ＲｄおよびＲｅが独立に、水素およびＣ１−１０アルキルから選択される請求項１７に記載の化合物。
  20. Ｒ４ａまたはＲ４ｂがＮＲｄＲｅであり；ＲｄとＲｅがそれらが結合している原子と一体となって、０の別のヘテロ原子を有する４〜７員の複素環を形成している請求項１７に記載の化合物。
  21. Ｒ４ａおよびＲ４ｂがそれぞれ水素であり；Ｒ３ａおよびＲ３ｂの一方が水素であり、他方がＯＨもしくはＣＯ２Ｈによって置換されていても良いフェニル、ＯＨによって置換されていても良いＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−６シクロアルキル、ＣＯ２Ｒｄ、ＯＲｄ、ＮＲｄＲｅおよびＮＲｄＣ（Ｏ）２Ｒｄから選択される請求項１６に記載の化合物。
  22. Ｒ３ａおよびＲ３ｂの一方が水素であり、他方がＯＨもしくはＣＯ２Ｈによって置換されていても良いフェニル、ＯＨによって置換されていても良いＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−６シクロアルキル、ＣＯ２Ｒｄ、ＯＲｄ、ＮＲｄＲｅおよびＮＲｄＣ（Ｏ）２Ｒｄから選択され；Ｒ４ａおよびＲ４ｂの一方が水素であり、他方がフェニル、Ｃ３−６シクロアルキル、ヒドロキシ、Ｃ１−５アルコキシ、ＣＯ２Ｈ、ピリジル、シアノおよびＮＲｄＲｅから選択される請求項１６に記載の化合物。
  23. 哺乳動物における細胞接着を阻害する方法であって、該哺乳動物に対して有効量の請求項１に記載の化合物を投与する段階を有する方法。
  24. 哺乳動物における細胞接着が介在する疾患、障害、状態または症状を治療する方法であって、該哺乳動物に対して有効量の請求項１に記載の化合物を投与する段階を有する方法。
  25. 哺乳動物における喘息の治療方法であって、該哺乳動物に対して治療上有効量の請求項１に記載の化合物を投与する段階を有する方法。
  26. 哺乳動物におけるアレルギー性鼻炎の治療方法であって、該哺乳動物に対して治療上有効量の請求項１に記載の化合物を投与する段階を有する方法。
  27. 哺乳動物における多発性硬化症の治療方法であって、該哺乳動物に対して治療上有効量の請求項１に記載の化合物を投与する段階を有する方法。
  28. 哺乳動物における炎症の治療方法であって、該哺乳動物に対して有効量の請求項１に記載の化合物を投与する段階を有する方法。
  29. 哺乳動物における炎症性腸疾患の治療方法であって、該哺乳動物に対して治療上有効量の請求項１に記載の化合物を投与する段階を有する方法。
  30. 請求項１に記載の化合物および製薬上許容される担体を含む医薬組成物。
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