JP2004359603A

JP2004359603A - Cell death inhibitor

Info

Publication number: JP2004359603A
Application number: JP2003159752A
Authority: JP
Inventors: Tetsuto Sakurai; 桜井　　哲人; Takamasa Hitomi; 高正人見; Nobuhiko Miwa; 信比古三羽
Original assignee: Fancl Corp; Attenir Corp
Current assignee: Fancl Corp; Attenir Corp
Priority date: 2003-06-04
Filing date: 2003-06-04
Publication date: 2004-12-24

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a cell death inhibitor having excellent cell death inhibitory effect on cell deaths caused via ultraviolet radiation or active oxygen generated by ultraviolet radiation and having high performance in terms of its formulation in preparations for external use or oral preparations. <P>SOLUTION: The cell death inhibitor contains one or more ingredients selected from mallow, Shekwasha, kale and their extracts. Aging inhibitors, cosmetics, preparations for external use and oral preparations each containing this inhibitor are also provided respectively. <P>COPYRIGHT: (C)2005,JPO&NCIPI

Description

【０００１】
【発明が属する技術分野】
本発明は、細胞死を抑制する剤に関する。本発明の抑制剤は外用剤および経口剤として用いることができる。特に紫外線照射を原因とする細胞死の抑制効果に寄与する。
【０００２】
皮膚の老化は、生理的な老化とよるものと、光老化とよばれる紫外線による細胞や皮膚組織へのダメージによる老化によって進行する。この光老化は、紫外線などの刺激により皮膚組織で発生する活性酸素が一つの原因とされており、細胞を保護する細胞膜脂質を過酸化したり、さらに細胞中のＤＮＡに直接障害を与え、細胞の生存率を低下させ、皮膚の角層及び表皮細胞、真皮細胞、さらにはコラーゲンなどの結合組織にも多大なダメージを与える。
紫外線や活性酸素によって遺伝情報を含むＤＮＡは損傷を受けるが、細胞はこれらの損傷を元通りに修復するＤＮＡ修復機能を持っている。除去修復機構という仕組みがその代表的なもので、傷ついた部分を切り捨て、新しく元通りの塩基に修復することができる。また、紫外線のうちＡ波はＤＮＡ鎖を切断したり、ＤＮＡとタンパク質を結合させたりする。このように、ＤＮＡは活性酸素や紫外線によって損傷をうけるが、前記のような修復機能が働いても修復不可能な場合には、細胞はアポトーシスとよばれる細胞死をひきおこし、細胞の癌化などを防ぐ機構が働く。したがって、紫外線や活性酸素によるＤＮＡ鎖の損傷、あるいはアポトーシスを防ぐことは、皮膚の光老化を未然に防ぐことができる方策の一つである。
【０００３】
本出願人は、既に、皮膚老化防止用の化粧料として、チロシンの誘導体を利用するものを提案している（特許文献１）。他には、カスパーゼファミリーによる細胞死の誘導を抑制する植物抽出物を利用するもの（特許文献２）がある。また、一方、バラやツバキ等の植物から抽出したエキスにはムコ多糖断片化抑制があること（特許文献３）、皮膚老化防止のためにウコンなどの植物抽出エキスを含有したエラスターゼ阻害剤も提案され（特許文献４）、カンキツ植物の水蒸気蒸留水を配合した乾燥肌を改善し肌に艶と張りを与える化粧料組成物（特許文献５）、ブロッコリー等の植物から抽出したエキスを用いたアレルギー予防剤（特許文献６）知られている。
しかしながら、これらの先行文献には植物及びその組成物に紫外線による細胞死を抑制する効果については見出されていない。
【０００４】
【特許文献１】特開平１５−０６３９５９
【特許文献２】特開平１４−０８０３８２
【特許文献３】特開平７−３０９７７０
【特許文献４】特開平１４−２０５９５０
【特許文献５】特開平１３−２１３７１９
【特許文献６】特開平１２−１６９３８２
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明者は、皮膚に及ぼす障害に対して防御効果を示す薬剤を検討してきた。皮脂は保湿活性など皮膚防護効果を示すが、紫外線・外気・微生物などによって酸化変性を受けるとその生理効果は消失するばかりか、二次的に細胞障害を及ぼしうる。また、紫外線自体が直接的な細胞障害の原因となる。本発明では、紫外線や過酸化脂質による細胞死と細胞内パーオキシド・過酸化水素の生成及びそれらの防御効果を示す薬剤を研究開発することとした。薬剤の素材として、植物に注目した。
本発明は、細胞死抑制機能を有する植物からの精製物あるいは抽出物を提供することを目的としている。特に、紫外線、あるいは紫外線により発生する活性酸素を介した細胞死に対して、優れた細胞死抑制効果を有し、かつ外用剤あるいは経口剤への配合の面で優れた性能を有する細胞死抑制剤を提供することを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、こうした課題に対して鋭意研究を重ねた結果、ゼニアオイ、シークワーシャー、ケールまたはその抽出物に注目し、細胞死抑制効果に優れ、皮膚の老化防止に優れた効果を発揮することを認め、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、主に次の構成による。
【０００７】
１．ゼニアオイ、シークワシャー、ケールまたはその抽出物を１種又は２種以上含有することを特徴とする細胞死抑制剤。
２．抽出物がマルビジン−３，５−ジグルコシドを含むことを特徴とする１．記載の細胞死抑制剤。
３．細胞が真皮線維芽細胞、表皮角化細胞、血管内皮細胞、ランゲルハンス細胞、メラニン色素形成細胞の少なくとも一つから選ばれる１．又は２．記載の細胞死抑制剤。
４．１．乃至３．のいずれかに記載の細胞死抑制剤を含むことを特徴とする老化防止剤。
５．１．乃至３．のいずれかに記載の細胞死抑制剤あるいは４．記載の老化防止剤を含むことを特徴とする化粧料。
６．１．乃至３．のいずれかに記載の細胞死抑制剤あるいは４．記載の老化防止剤を含むことを特徴とする外用剤。
７．１．乃至３．のいずれかに記載の細胞死抑制剤あるいは４．記載の老化防止剤を含むことを特徴とする経口剤。
【０００８】
【発明の実施の形態】
本発明における植物については、その植物の全草又は葉、根、果実、種子、花のうちの一つ以上をそのまま又は粉砕して用いることができる。
また、抽出物としては、更にこれを常温又は加温下にて抽出するか又はソックスレー抽出器等の抽出器具を用いて抽出することにより得られる各種溶剤抽出液、その希釈液、その濃縮液又はその乾燥末を使用する。ここで抽出物は、２種以上の植物から得られたものであってもよい。
【０００９】
本発明の植物の抽出物を得るために用いられる抽出溶剤としては、極性溶剤、非極性溶剤のいずれをも使用することができる。例えば、水；メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等のアルコール類；プロピレングリコール、ブチレングリコール等の多価アルコール類；アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類；酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル類；テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等の鎖状及び環状エーテル類；ポリエチレングリコール等のポリエーテル類；ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素類；ヘキサン、シクロヘキサン、石油エーテル等の炭化水素類；ベンゼン、トルエン等の芳香族炭化水素類；ピリジン類等が挙げられ、これらは２種以上を混合して用いることもできる。
上記抽出物は、そのまま用いることもできるが、当該抽出物を希釈、濃縮若しくは凍結乾燥した後、粉末又はペースト状に調製して用いることもできる。植物抽出物の配合量は特に限定されないが、乾燥重量として０．０００１〜１０質量％程度とするのが適切である。
【００１０】
本発明組成物には、植物油のような油脂類、高級脂肪酸、高級アルコール、シリコーン、アニオン界面活性剤、カチオン界面活性剤、両性界面活性剤、非イオン界面活性剤、防腐剤、糖類、金属イオン封鎖剤、水溶性高分子のような高分子、増粘剤、粉体成分、紫外線吸収剤、紫外線遮断剤、ヒアルロン酸のような保湿剤、香料、ｐＨ調整剤、乾燥剤等を含有させることができる。ビタミン類、皮膚賦活剤、血行促進剤、常在菌コントロール剤、活性酸素消去剤、抗炎症剤、抗癌剤、美白剤、殺菌剤等の他の薬効成分、生理活性成分を含有させることもできる。
【００１１】
油脂類としては、例えばツバキ油、月見草油、マカデミアナッツ油、オリーブ油、ナタネ油、トウモロコシ油、ゴマ油、ホホバ油、胚芽油、小麦胚芽油、トリオクタン酸グリセリン、等の液体油脂、カカオ脂、ヤシ油、硬化ヤシ油、パーム油、パーム核油、モクロウ、モクロウ核油、硬化油、硬化ヒマシ油等の固体油脂、ミツロウ、キャンデリラロウ、綿ロウ、ヌカロウ、ラノリン、酢酸ラノリン、液状ラノリン、サトウキビロウ等のロウ類が挙げられる。
炭化水素類としては、流動パラフィン、スクワレン、スクワラン、マイクロクリスタリンワックス等が挙げられる。
【００１２】
高級脂肪酸として、例えばラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）等が挙げられる。
高級アルコールとして、例えば、ラウリルアルコール、ステアリルアルコール、セチルアルコール、セトステアリルアルコール等の直鎖アルコール、モノステアリルグリセリンエーテル、ラノリンアルコール、コレステロール、フィトステロール、オクチルドデカノール等の分枝鎖アルコール等が挙げられる。
シリコーンとして、例えば、鎖状ポリシロキサンのジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン等、環状ポリシロキサンのデカメチルシクロペンタシロキサン等が挙げられる。
【００１３】
アニオン界面活性剤として、例えば、ラウリン酸ナトリウム等の脂肪酸塩、ラウリル硫酸ナトリウム等の高級アルキル硫酸エステル塩、ＰＯＥラウリル硫酸トリエタノールアミン等のアルキルエーテル硫酸エステル塩、Ｎ−アシルサルコシン酸、スルホコハク酸塩、Ｎ−アシルアミノ酸塩等が挙げられる。
カチオン界面活性剤として、例えば、塩化ステアリルトリメチルアンモニウム等のアルキルトリメチルアンモニウム塩、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム等が挙げられる。
両性界面活性剤として、アルキルベタイン、アミドベタイン等のベタイン系界面活性剤等が挙げられる。
非イオン界面活性剤として、例えば、ソルビタンモノオレエート等のソルビタン脂肪酸エステル類、硬化ヒマシ油誘導体が挙げられる。
防腐剤として、例えばメチルパラベン、エチルパラベン等を挙げることができる。
【００１４】
金属イオン封鎖剤として、例えばエチレンジアミン四酢酸二ナトリウム、エデト酸、エデト酸ナトリウム塩等のエデト酸塩を挙げることができる。
高分子として、例えば、アラビアゴム、トラガカントガム、ガラクタン、グアーガム、カラギーナン、ペクチン、寒天、クインスシード、デキストラン、プルランカルボキシメチルデンプン、コラーゲン、カゼイン、ゼラチンメチルセルロース、メチルヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ）、アルギン酸ナトリウム等を挙げることができる。
増粘剤として、カラギーナン、トラガカントガム、クインスシード、カゼイン、デキストリン、ゼラチン、ＣＭＣ、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、グアーガム、キサンタンガム、ベントナイト等を挙げることができる。
【００１５】
粉末成分としては、タルク、カオリン、雲母、シリカ、ゼオライト、ポリエチレン粉末、ポリスチレン粉末、セルロース粉末、無機白色顔料、無機赤色系顔料、酸化チタンコーテッドマイカ、酸化チタンコーテッドタルク、着色酸化チタンコーテッドマイカ等のパール顔料、赤色２０１号、赤色２０２号等の有機顔料を挙げることができる。
紫外線吸収剤としては、パラアミノ安息香酸、サリチル酸フェニル、パラメトキシケイ皮酸イソプロピル、パラメトキシケイ皮酸オクチル、２，４−ジヒドロキシベンゾフェノン、等を挙げることができる。
紫外線遮断剤として、酸化チタン、タルク、カルミン、ベントナイト、カオリン、酸化亜鉛等を挙げることができる。
【００１６】
保湿剤として、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、１，２−ペンタンジオール、グリセリン、ジグリセリン、ポリグリセリン、キシリトール、マルチトール、マルトース、ソルビトール、ブドウ糖、果糖、コンドロイチン硫酸ナトリウム、ヒアルロン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、ピロリドンカルボン酸、シクロデキストリン等が挙げられる。
【００１７】
薬効成分としては、ビタミンＡ油、レチノール等のビタミンＡ類、リボフラビン等のビタミンＢ_２類、ピリドキシン塩酸塩等のＢ_６類、Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸リン酸エステル、Ｌ−アスコルビン酸モノパルミチン酸エステル、Ｌ−アスコルビン酸ジパルミチン酸エステル、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド等のビタミンＣ類、パントテン酸カルシウム等のパントテン酸類、ビタミンＤ_２、コレカルシフェロール等のビタミンＤ類；α−トコフェロール、酢酸トコフェロール、ニコチン酸ＤＬ−α−トコフェロール等のビタミンＥ類等のビタミン類を挙げることができる。
【００１８】
また、この他に共存させることが好ましい成分として、プラセンタエキス、グルタチオン、ユキノシタ抽出物等の美白剤、ローヤルゼリー、ぶなの木エキス等の皮膚賦活剤、カプサイシン、ジンゲロン、カンタリスチンキ、イクタモール、カフェイン、タンニン酸γ−オリザノール等の血行促進剤、グリチルリチン酸誘導体、グリチルレチン酸誘導体、アズレン等の消炎剤、アルギニン、セリン、ロイシン、トリプトファン等のアミノ酸類、常在菌コントロール剤のマルトースショ糖縮合物、塩化リゾチーム等を挙げることができる。
【００１９】
さらに、カミツレエキス、パセリエキス、ぶなの木エキス、ワイン酵母エキス、グレープフルーツエキス、スイカズラエキス、コメエキス、ブドウエキス、ホップエキス、コメヌカエキス、ビワエキス、ヨクイニンエキス、センブリエキス、メリロートエキス、バーチエキス、カンゾウエキス、シャクヤクエキス、サボンソウエキス、ヘチマエキス、トウガラシエキス、レモンエキス、ゲンチアナエキス、シソエキス、アロエエキス、ローズマリーエキス、セージエキス、タイムエキス、海藻エキス、キューカンバーエキス、ニンジンエキス、マロニエエキス、ハマメリスエキス、クワエキス等の各種抽出物を挙げることができる。
【００２０】
本発明の組成物は、例えば水溶液、油剤、乳液、けんだく液等の液剤、ゲル、クリーム等の半固形剤、粉末、顆粒、カプセル、マイクロカプセル、固形等の固形剤の形態で適用可能である。従来から公知の方法でこれらの形態に調製し、ローション剤、乳剤、ゲル剤、クリーム剤、軟膏、硬膏、ハップ剤、エアゾル剤、坐剤、粉末剤、顆粒剤、錠剤等の種々の剤型とすることができる。これらを身体に塗布、貼付、噴霧等により適用することができる。特にこれら剤型の中で、ローション剤、乳剤、クリーム剤、軟膏剤、硬膏剤、ハップ剤、エアゾル剤等が皮膚外用剤に適している。化粧料としては、化粧水、乳液、クリーム、パック等の皮膚化粧料、メイクアップベースローション、メイクアップクリーム、乳液状又はクリーム状あるいは軟膏型のファンデーション、口紅、アイカラー、チークカラーといったメイクアップ化粧料、ハンドクリーム、レッグクリーム、ボディローション等の身体用化粧料等、入浴剤、口腔化粧料、毛髪化粧料とすることができる。
【００２１】
＜注目植物の選択＞
本発明では、紫外線や過酸化脂質による細胞死と細胞内パーオキシド・過酸化水素の生成及びそれらの防御効果を示す薬剤の素材として次の方法によって、注目植物を選択した。
【００２２】
［試験例１：紫外線による細胞死防御試験］
（試験方法）
２４ウェルプレートに正常ヒト皮膚表皮由来細胞であるＨａＣａＴ細胞を４０００ｃｅｌｌｓ／ウエルになるように播種し、２０時間、３７℃、５％ＣＯ_２条件下で培養する。サンプルを含む培地に交換後、ＵＶＢ（１ｍＷ／ｃｍ^２）を３５秒間照射し、更に４８時間同条件で培養する。細胞を洗浄後、ＷＳＴ−１＜２−（４−Ｉｏｄｏｐｈｅｎｙｌ−３−（４−ｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌ）−５−（２，４−ｄｉｓｕｌｆｏｐｈｅｎｙｌ）−２Ｈ−ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ−Ｎａ＞を添加し、３時間反応後、マイクロプレートリーダーにより４５０ｎｍの吸光度を測定する。細胞生存率は紫外線を照射しない細胞の吸光度を１００％として紫外線を照射した時の各サンプルの吸光度から細胞生存率を計算する。
【００２３】
（結果）
図１に紫外線による細胞死防御試験の結果、高い有効性を示した植物抽出物を示す。紫外線を照射すると紫外線未照射の細胞と比較して３０％の細胞生存率であり、細胞死が認められるのに対して、ゼニアオイ抽出物、ケール抽出物、シークワーシャー抽出物を添加した系においては各々５５％、３２％、４６％の細胞生存率で細胞死を防御することが認められた。
【００２４】
［試験例２：酸化ストレスによる細胞死抑制試験］
（試験方法）
２４ウェルプレートに正常ヒト皮膚表皮由来細胞であるＨａＣａＴ細胞を４０００ｃｅｌｌｓ／ウェルになるように播種し、３７℃、５％ＣＯ_２９５％飽和蒸気下にて２０時間培養した。各種植物エキスを含む培地に交換後、過酸化脂質モデル物質としてヒドロペルオキシドの一種のｔ−ＢｕＯＯＨ（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｈｙｄｒｏｐｅｒｏｘｉｄｅ）を１７５μＭ添加し、さらに４８時間、同条件下にて培養した。細胞を洗浄後、（ミトコンドリア脱水素酵素活性に基づくＷＳＴ−１／吸光プレートリーダー法で計測した。
【００２５】
（結果）
ｔ−ＢｕＯＯＨによるＨａＣａＴ細胞死に対する各種植物エキスの防御効果を確認し、高い有効性を示した植物抽出物の結果を図２に示した。ｔ−ＢｕＯＯＨのみを添加した区においては細胞生存率が半分以下の０．１８に低下したのに対し、ゼニアオイ、シークワシャー、ケールの３検体は、０．０００５％、０．００２％添加区において細胞生存率が向上し、ヒト皮膚表皮由来細胞の酸化ストレスによる細胞死を防御する薬効が優れていることが認められた。
【００２６】
［試験例３：マルビジン−３，５−ジグルコシドによる細胞死抑制試験］
ゼニアオイ抽出物に含まれるマルビジン−３，５−ジグルコシドについて、試験例２と同じ方法で、細胞死抑制試験を行った。その結果を示した図３から明らかなように、０．０００１％、０．０００５％、０．００１％マルビジン−３，５−ジグルコシドによって酸化ストレスによる細胞死が抑制された。
【００２７】
［試験例４：ＵＶＡ照射後のＤＮＡ鎖切断に対する防御効果］
皮膚組織における、ＵＶＡ照射による細胞のＤＮＡ鎖切断をＴＵＮＥＬ（ＴｅｒｍｉｎａｌＤｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｙｌＴｒａｎｓｆｅｒａｓｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄＢｉｏｔｉｎｙｌａｔｅｄＤｅｏｘｙｕｒｉｄｉｎｅＴｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅＮｉｃｋｅｎｄ−ｌａｂｅｌｉｎｇ）染色法を用いて観察した。
皮膚組織としては、耳側部より採取したヒト皮膚摘出片を用い、ゼニアオイ抽出物適用群と無適用群に分け、紫外線Ａ波２１２Ｊ／ｃｍ^２を照射後、組織切片を定法に従いパラフィン包埋した。包埋組織片はミクロトームを用いて薄切し、スライドガラス上に切片標本を作成した。キシレンで脱パラフィン後、切片標本にＰｒｏｔｅｉｎａｓｅＫ溶液を室温で１０〜１５分間適用し、さらにＴＤＴＥｎｚｙｍｅ液によりヌクレオチドを標識後、Ａｎｔｉ−ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ−ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ抗体原液を適用し、結合反応を行った。呈色には、Ｄｉａｍｉｎｏｂｅｎｚｉｄｉｎｅを用いて室温で３〜６分間反応させ、メチルグリーン染色液によりカウンター染色を行い、光学顕微鏡像を撮影した。
【００２８】
（結果）
皮膚組織における、ＵＶＡ照射による細胞のＤＮＡ鎖切断試験の結果を図４に示した。ゼニアオイ抽出物を添加しなかった皮膚切片においては、ＴＵＮＥＬ染色について著しい陽性反応を示し、ＤＮＡの断片化が認められたが、ゼニアオイ抽出物添加区においては、ＴＵＮＥＬ染色の反応性は低く、非照射時とほぼ同程度であった。したがって、ゼニアオイ抽出物を皮膚に適用することによって、紫外線によるＤＮＡ断片化が抑制されることが明らかになった。
【００２９】
［試験例５：ゼニアオイ抽出物の皮膚への浸透性評価］
１０％ゼニアオイ抽出含有白色ワセリンをヒト皮膚組織片４ｃｍ^２あたり０．１ｇずつ塗布し、２時間室温下で放置した。２時間後、皮膚組織片を表皮層と真皮層に分離し、各層をメタノールにより抽出し、その抽出液中のゼニアオイ抽出物量をＨＰＬＣを用いて計測した。得られた抽出物量から、全塗布量中におけるゼニアオイ抽出物量を１としたときの、表皮及び真皮層に貯留しているゼニアオイ抽出物の割合を算出した結果を図５に示した。その結果、ゼニアオイ抽出物は表皮層のみならず、真皮層にまで浸透していることが確認できた。
【００３０】
【実施例】
次に実施例及び比較例をあげて本発明を具体的に明らかにする。
表１に示す配合で常法により、実施例及び比較例の皮膚用化粧料を調整した。
なお、表１は、重量％表示である。
［実施例１〜３及び比較例］
【００３１】
【表１】
細胞死抑制化粧料

【００３２】
（１）皮膚老化防止効果試験
（試験方法）
目尻に深さ１００μｍ程度のシワを有する中高年被験者１０名を対象に表１に示す美容液を４週間連続塗布し、その効果を評価した。すなわち、被験者の右目尻試験部位に１日１回、約０．５ｇを塗布し、試験開始前および試験終了後の皮膚の状態を判定基準により判定した。左目尻は試料を塗布せずに対照とした。
【００３３】
（判定基準）
著効；顕著な改善
有効；中程度の改善
やや有効；軽度の改善
無効；変化なし
【００３４】
（判定）
○；被験者のうち著効および有効を示す割合が８名以上の場合
△；被験者のうち著効および有効を示す割合が５〜７名の場合
×；被験者のうち著効および有効を示す割合が５名未満の場合
結果を表２に記載する。
下記の表２から明らかなように、ゼニアオイ、ケール、シークワシャー抽出物を配合した実施例の塗布により、目元のしわが改善され、ゼニアオイ、ケール、シークワシャー抽出物に皮膚老化改善効果があることが明らかとなった。
【００３５】
【表２】

【００３６】
（２）紅斑抑制効果試験
（試験方法）
中高年被験者１０名の右腕上腕内側部に実施例１〜３と比較例を１週間毎日塗布し、紫外線１．０ＭＥＤを照射し、紅斑の程度を評価した。すなわち、被験者の試験部位４ヶ所に、上記の実施例１〜３、比較例各々約０．５ｇの試料をそれぞれ塗布し、紫外線照射直後および試験終了後の皮膚の状態を判定基準により判定した。
【００３７】
（判定基準）
著効；変化なし
有効；軽度の紅斑
やや有効；中程度の紅斑
無効；顕著な紅斑又は水泡形成
（判定）
○；被験者のうち著効および有効を示す割合が８名以上の場合
△；被験者のうち著効および有効を示す割合が５名〜７名の場合
×；被験者のうち著効および有効を示す割合が５名未満の場合
結果を表３に記載する。表３から明らかなように、ゼニアオイ抽出物、ケール抽出物、シークワシャー抽出物を配合した実施例は、紫外線による紅斑形成の抑制に優れていることが認められた。
【００３８】
【表３】

【００３９】
【発明の効果】
本発明で使用する植物種であるゼニアオイ、シークワシャー、ケール及びその抽出物には細胞死抑制効果があることが確認できた。
細胞死は皮膚老化として現れる。皮膚の細胞死の因子として、紫外線照射があげられ、紫外線による活性酸素を介する皮膚細胞死が一つの大きなメカニズムである。本発明は、特に、この紫外線による活性酸素を介する皮膚の細胞死の抑制効果を示し、紫外線による皮膚の障害を防止しするので老化防止する効果を奏するので高度の機能性組成物として有用である。特に、過酸化脂質に対する長時間の防御機能が優れている。
抽出物の一種であるマルビジン−３，５−ジグルコシドによる細胞死抑制効果も確認することができた。
【図面の簡単な説明】
【図１】各植物エキスが、紫外線の影響による細胞死を抑制する効果を示すグラフ
【図２】各植物エキスが、酸化ストレスの影響による細胞死を抑制する効果を示すグラフ
【図３】マルビジン−３，５−ジグルコシドによる細胞死抑制効果を示すグラフ
【図４】ヒト皮膚摘出片に対するＵＶＡ照射において、ゼニアオイ抽出物が皮膚組織細胞中のＤＮＡ鎖切断を防御する効果を示す免疫組織染色写真
【図５】１０％ゼニアオイ抽出物配合ワセリンの皮膚への浸透率を示したグラフ[0001]
TECHNICAL FIELD OF THE INVENTION
The present invention relates to an agent for suppressing cell death. The inhibitor of the present invention can be used as an external preparation and an oral preparation. In particular, it contributes to the effect of suppressing cell death caused by ultraviolet irradiation.
[0002]
Aging of the skin progresses due to physiological aging and aging due to damage to cells and skin tissue by ultraviolet rays called photoaging. One of the causes of this photoaging is the active oxygen generated in the skin tissue due to the stimulus of ultraviolet rays or the like, which causes peroxidation of cell membrane lipids that protect cells and directly damages DNA in cells, And significantly damages the stratum corneum and epidermal cells, dermal cells, and even connective tissues such as collagen.
DNA containing genetic information is damaged by ultraviolet rays and reactive oxygen, and cells have a DNA repair function of repairing these damages. A typical example is a mechanism called an excision repair mechanism, in which a damaged portion can be cut off and a new base can be repaired. In addition, the A wave of ultraviolet rays cuts a DNA chain or binds DNA and protein. As described above, DNA is damaged by reactive oxygen and ultraviolet rays, but if repair cannot be performed even if the repair function described above works, cells will undergo cell death called apoptosis, resulting in canceration of cells. The mechanism that prevents Therefore, prevention of DNA chain damage or apoptosis due to ultraviolet rays or active oxygen is one of the measures that can prevent skin photoaging.
[0003]
The present applicant has already proposed a composition using a tyrosine derivative as a cosmetic for preventing skin aging (Patent Document 1). Others use a plant extract that suppresses the induction of cell death by the caspase family (Patent Document 2). On the other hand, extracts extracted from plants such as roses and camellias have mucopolysaccharide fragmentation inhibition (Patent Document 3), and an elastase inhibitor containing a plant extract such as turmeric for preventing skin aging is also proposed. (Patent Literature 4), a cosmetic composition (Patent Literature 5) for improving dry skin and imparting gloss and firmness to skin by adding steam distilled water of citrus plants, and allergy using extracts extracted from plants such as broccoli A prophylactic agent (Patent Document 6) is known.
However, these prior documents have not found any effect on plants and their compositions for suppressing cell death caused by ultraviolet rays.
[0004]
[Patent Document 1] Japanese Patent Laid-Open No. 15-063959
[Patent Document 2] JP-A-14-080382
[Patent Document 3] JP-A-7-309770
[Patent Document 4] JP-A-14-205950
[Patent Document 5] Japanese Patent Application Laid-Open No. 13-21719
[Patent Document 6] JP-A-12-169382
[0005]
[Problems to be solved by the invention]
The present inventor has studied drugs that have a protective effect against damage to the skin. Although sebum has skin-protecting effects such as moisturizing activity, it undergoes oxidative denaturation by ultraviolet rays, outside air, microorganisms, and the like, and not only loses its physiological effects, but can also cause secondary cell damage. In addition, ultraviolet light itself causes direct cell damage. In the present invention, research and development of drugs showing cell death by ultraviolet rays and lipid peroxide, generation of intracellular peroxide and hydrogen peroxide, and their protective effects are carried out. We focused on plants as a drug material.
An object of the present invention is to provide a purified product or extract from a plant having a cell death suppressing function. Particularly, a cell death inhibitor having an excellent cell death inhibitory effect on cell death via active oxygen generated by ultraviolet rays or ultraviolet rays, and having excellent performance in formulating into an external preparation or an oral preparation. The purpose is to provide.
[0006]
[Means for Solving the Problems]
The present inventors have conducted intensive studies on such problems, and as a result, paying attention to mallow, shirkwasher, kale or an extract thereof, it has an excellent cell death suppressing effect and an excellent effect of preventing skin aging. And completed the present invention.
That is, the present invention mainly has the following configuration.
[0007]
1. A cell death inhibitor comprising at least one kind of mallow, shikuwasha, kale or an extract thereof.
2. 1. The extract is characterized in that it contains malvidin-3,5-diglucoside. The cell death inhibitor according to the above.
3. The cells are selected from at least one of dermal fibroblasts, epidermal keratinocytes, vascular endothelial cells, Langerhans cells, and melanocyte-forming cells. Or 2. The cell death inhibitor according to the above.
4. 1. To 3. An anti-aging agent comprising the cell death inhibitor according to any one of the above.
5. 1. To 3. 3. The cell death inhibitor according to any of the above, or A cosmetic comprising the antioxidant according to any one of the preceding claims.
6. 1. To 3. 3. The cell death inhibitor according to any of the above, or An external preparation comprising the antioxidant according to any one of the preceding claims.
7. 1. To 3. 3. The cell death inhibitor according to any of the above, or An oral preparation comprising the anti-aging agent according to the above.
[0008]
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION
With respect to the plant of the present invention, one or more of the whole plant or the leaves, roots, fruits, seeds, and flowers of the plant can be used as they are or after being pulverized.
In addition, as the extract, it is further extracted at room temperature or under heating, or various solvent extracts obtained by extraction using an extraction device such as a Soxhlet extractor, a diluent thereof, a concentrate thereof or Use the dried powder. Here, the extract may be obtained from two or more kinds of plants.
[0009]
As the extraction solvent used for obtaining the plant extract of the present invention, any of a polar solvent and a non-polar solvent can be used. For example, water; alcohols such as methanol, ethanol, propanol, and butanol; polyhydric alcohols such as propylene glycol and butylene glycol; ketones such as acetone and methyl ethyl ketone; esters such as methyl acetate and ethyl acetate; tetrahydrofuran and diethyl ether Chain and cyclic ethers such as polyethylene glycol; polyethers such as polyethylene glycol; halogenated hydrocarbons such as dichloromethane, chloroform and carbon tetrachloride; hydrocarbons such as hexane, cyclohexane, petroleum ether; and fragrances such as benzene and toluene. Group hydrocarbons; pyridines, etc., and these can be used as a mixture of two or more.
The above extract may be used as it is, or may be used after being diluted, concentrated or freeze-dried, and then prepared in powder or paste form. The amount of the plant extract is not particularly limited, but is preferably about 0.0001 to 10% by mass as a dry weight.
[0010]
The composition of the present invention includes fats and oils such as vegetable oils, higher fatty acids, higher alcohols, silicones, anionic surfactants, cationic surfactants, amphoteric surfactants, nonionic surfactants, preservatives, saccharides, and metal ions. Including a blocking agent, a polymer such as a water-soluble polymer, a thickener, a powder component, an ultraviolet absorber, an ultraviolet ray blocking agent, a humectant such as hyaluronic acid, a fragrance, a pH adjuster, a desiccant, etc. Can be. Other medicinal components such as vitamins, skin activators, blood circulation promoters, resident bacteria control agents, active oxygen scavengers, anti-inflammatory agents, anti-cancer agents, whitening agents, bactericides, and other physiologically active components can also be contained.
[0011]
As fats and oils, for example, camellia oil, evening primrose oil, macadamia nut oil, olive oil, rapeseed oil, corn oil, sesame oil, jojoba oil, germ oil, liquid oils such as wheat germ oil, glyceryl trioctanoate, cocoa butter, coconut oil, Solid oils such as hydrogenated coconut oil, palm oil, palm kernel oil, mocro, mocro kernel oil, hydrogenated oil, hydrogenated castor oil, etc., beeswax, candelilla wax, cotton wax, bran wax, lanolin, lanolin acetate, liquid lanolin, sugarcane wax, etc. Waxes.
Examples of the hydrocarbons include liquid paraffin, squalene, squalane, and microcrystalline wax.
[0012]
Examples of higher fatty acids include lauric acid, myristic acid, palmitic acid, stearic acid, oleic acid, linoleic acid, linolenic acid, docosahexaenoic acid (DHA), eicosapentaenoic acid (EPA) and the like.
Examples of the higher alcohol include linear alcohols such as lauryl alcohol, stearyl alcohol, cetyl alcohol, and cetostearyl alcohol, and branched chain alcohols such as monostearyl glycerin ether, lanolin alcohol, cholesterol, phytosterol, and octyl dodecanol.
Examples of the silicone include a linear polysiloxane such as dimethylpolysiloxane and methylphenylpolysiloxane, and a cyclic polysiloxane such as decamethylcyclopentasiloxane.
[0013]
Examples of anionic surfactants include fatty acid salts such as sodium laurate, higher alkyl sulfates such as sodium lauryl sulfate, alkyl ether sulfates such as POE lauryl triethanolamine, N-acyl sarcosine acid, and sulfosuccinate. , N-acyl amino acid salts and the like.
Examples of the cationic surfactant include an alkyltrimethylammonium salt such as stearyltrimethylammonium chloride, benzalkonium chloride, and benzethonium chloride.
Examples of the amphoteric surfactant include betaine surfactants such as alkyl betaine and amido betaine.
Examples of the nonionic surfactant include sorbitan fatty acid esters such as sorbitan monooleate and hydrogenated castor oil derivatives.
Preservatives include, for example, methyl paraben, ethyl paraben and the like.
[0014]
Examples of the sequestering agent include edetates such as disodium ethylenediaminetetraacetate, edetic acid, and edetate sodium salt.
As the polymer, for example, gum arabic, tragacanth gum, galactan, guar gum, carrageenan, pectin, agar, quince seed, dextran, pullulan carboxymethyl starch, collagen, casein, gelatin methyl cellulose, methyl hydroxypropyl cellulose, hydroxyethyl cellulose, sodium carboxymethyl cellulose ( CMC), sodium alginate and the like.
Examples of the thickener include carrageenan, tragacanth gum, quince seed, casein, dextrin, gelatin, CMC, hydroxyethylcellulose, hydroxypropylcellulose, guar gum, xanthan gum, bentonite and the like.
[0015]
As the powder component, talc, kaolin, mica, silica, zeolite, polyethylene powder, polystyrene powder, cellulose powder, inorganic white pigment, inorganic red pigment, titanium oxide coated mica, titanium oxide coated talc, colored titanium oxide coated mica, etc. Organic pigments such as pearl pigments, Red No. 201 and Red No. 202 can be exemplified.
Examples of the ultraviolet absorber include paraaminobenzoic acid, phenyl salicylate, isopropyl paramethoxycinnamate, octyl paramethoxycinnamate, and 2,4-dihydroxybenzophenone.
Examples of the ultraviolet blocking agent include titanium oxide, talc, carmine, bentonite, kaolin, zinc oxide and the like.
[0016]
As a humectant, polyethylene glycol, propylene glycol, dipropylene glycol, 1,3-butylene glycol, 1,2-pentanediol, glycerin, diglycerin, polyglycerin, xylitol, maltitol, maltose, sorbitol, glucose, fructose, chondroitin Examples thereof include sodium sulfate, sodium hyaluronate, sodium lactate, pyrrolidone carboxylic acid, and cyclodextrin.
[0017]
The medicinal components include vitamin A oil, vitamin A such as retinol, vitamin B ₂ such as riboflavin, B ₆ such as pyridoxine hydrochloride, L-ascorbic acid, L-ascorbic acid phosphate, and L-ascorbic acid. monopalmitate, L- ascorbic acid dipalmitate ester, L- vitamin C such as ascorbic acid-2-glucoside, pantothenic acids such as calcium pantothenate, vitamin D _2, vitamin D such as cholecalciferol; alpha And vitamins such as vitamin Es such as tocopherol, tocopherol acetate, DL-α-tocopherol nicotinate.
[0018]
In addition, other components that are preferably allowed to coexist include whitening agents such as placenta extract, glutathione, and saxifraga extract, royal jelly, skin activators such as rape tree extract, capsaicin, zingerone, cantaristin tincture, itctamol, and caffeine. Blood circulation promoters such as γ-oryzanol tannate, glycyrrhizic acid derivatives, glycyrrhetinic acid derivatives, anti-inflammatory agents such as azulene, arginine, serine, leucine, amino acids such as tryptophan, maltose sucrose condensates of resident bacteria control agents, Lysozyme chloride and the like can be mentioned.
[0019]
In addition, chamomile extract, parsley extract, bamboo tree extract, wine yeast extract, grapefruit extract, honeysuckle extract, rice extract, grape extract, hop extract, rice bran extract, loquat extract, yokunin extract, assembly extract, melilot extract, birch extract, licorice extract, Peony extract, Soapwort extract, Loofah extract, Pepper extract, Lemon extract, Gentian extract, Perilla extract, Aloe extract, Rosemary extract, Sage extract, Thyme extract, Seaweed extract, Cucumber extract, Carrot extract, Maronie extract, Hamamelis extract, Mulberry extract And the like.
[0020]
The composition of the present invention can be applied in the form of, for example, aqueous solutions, oils, emulsions, semisolids such as gels, creams, semisolids, powders, granules, capsules, microcapsules, solids such as solids. is there. Various formulations such as lotions, emulsions, gels, creams, ointments, plasters, haptics, aerosols, suppositories, powders, granules, tablets and the like are prepared by conventionally known methods. It can be. These can be applied to the body by applying, sticking, spraying or the like. In particular, among these dosage forms, lotions, emulsions, creams, ointments, plasters, cataplasms, aerosols and the like are suitable for external preparations for the skin. Examples of cosmetics include skin cosmetics such as lotions, emulsions, creams, and packs, makeup base lotions, makeup creams, emulsions or creamy or ointment-type foundations, lipsticks, eye colors, and makeup colors such as cheek colors. Cosmetics, hand creams, leg creams, body lotions and other body cosmetics, bath preparations, oral cosmetics, and hair cosmetics.
[0021]
<Selection of attention plant>
In the present invention, a plant of interest was selected by the following method as a material for a drug that exhibits cell death and intracellular peroxide / hydrogen peroxide due to ultraviolet light and lipid peroxide, and their protective effects.
[0022]
[Test Example 1: Cell death protection test by ultraviolet rays]
(Test method)
HaCaT cells, which are cells derived from normal human skin epidermis, are seeded in a 24-well plate at 4000 cells / well, and cultured for 20 hours at 37 ° C., 5% CO ₂ . After replacing with a medium containing a sample, UVB (1 mW / cm ² ) is irradiated for 35 seconds, and further cultured for 48 hours under the same conditions. After washing the cells, WST-1 <2- (4-iodophenyl-3- (4-nitrophenyl) -5- (2,4-disulfophenyl) -2H-tetrazolium-Na> was added, and the reaction was performed for 3 hours. The absorbance at 450 nm is measured using a plate reader, and the cell viability is calculated from the absorbance of each sample when irradiated with ultraviolet light, with the absorbance of cells not irradiated with ultraviolet light as 100%.
[0023]
(result)
FIG. 1 shows a plant extract showing high efficacy as a result of a cell death protection test using ultraviolet light. Irradiation with ultraviolet light resulted in a cell viability of 30% as compared with cells not irradiated with ultraviolet light, and cell death was observed. In contrast, in a system to which a mallow extract, a kale extract, and a Shikuwasha extract were added. Was found to protect against cell death with 55%, 32%, and 46% cell viability, respectively.
[0024]
[Test Example 2: Cell death suppression test by oxidative stress]
(Test method)
HaCaT cells, which are cells derived from normal human skin epidermis, were seeded in a 24-well plate at 4000 cells / well, and cultured at 37 ° C under 5% CO ₂ 95% saturated steam for 20 hours. After the medium was replaced with a medium containing various plant extracts, 175 μM of t-BuOOH (tert-butylhydroxyperoxide), a kind of hydroperoxide, was added as a lipid peroxide model substance, and the cells were further cultured under the same conditions for 48 hours. After washing, the cells were counted by the WST-1 / absorbing plate reader method based on mitochondrial dehydrogenase activity.
[0025]
(result)
The protective effects of various plant extracts against HaCaT cell death by t-BuOOH were confirmed, and the results of the plant extracts showing high efficacy are shown in FIG. In the group to which only t-BuOOH was added, the cell viability decreased to less than half, that is, 0.18. On the other hand, the three samples of mallow, sea squirt, and kale showed that in the group where 0.0005% and 0.002% were added. It was confirmed that the cell survival rate was improved, and the drug efficacy for preventing cell death due to oxidative stress of human skin epidermis-derived cells was excellent.
[0026]
[Test Example 3: Cell death suppression test using malvidin-3,5-diglucoside]
For the malvidin-3,5-diglucoside contained in the mallow extract, a cell death inhibition test was performed in the same manner as in Test Example 2. As is clear from FIG. 3 showing the results, cell death due to oxidative stress was suppressed by 0.0001%, 0.0005%, and 0.001% malvidin-3,5-diglucoside.
[0027]
[Test Example 4: Protective effect against DNA strand breaks after UVA irradiation]
DNA strand breaks in the skin tissue by UVA irradiation in the skin tissue were observed using TUNEL (Terminal Deoxynucleotidyltransferase-medited Biotinylated Deoxyuridine Triphosphate Nickend-Labeling staining).
As the skin tissue, a human skin extirpated piece collected from the ear side was used, divided into a mallow extract-applied group and a non-applied group, and irradiated with ultraviolet A-wave 212 J / cm ² , and the tissue section was embedded in paraffin according to a standard method. . The embedded tissue section was sectioned using a microtome, and a section specimen was prepared on a slide glass. After deparaffinization with xylene, a proteinase K solution was applied to the section sample at room temperature for 10 to 15 minutes, and after labeling nucleotides with TDT Enzyme solution, an anti-digoxigenin-peroxidase antibody stock solution was applied to perform a binding reaction. For coloring, the reaction was carried out at room temperature for 3 to 6 minutes using Diabenbenzidine, counterstained with a methyl green staining solution, and an optical microscope image was taken.
[0028]
(result)
FIG. 4 shows the results of a DNA strand break test of cells in skin tissue by UVA irradiation. In the skin section to which the mallow extract was not added, a remarkable positive reaction was observed for TUNEL staining, and DNA fragmentation was observed. However, the reactivity of TUNEL staining was low in the mock extract-added section, and no irradiation was performed. It was about the same time. Therefore, it was revealed that DNA fragmentation due to ultraviolet rays was suppressed by applying the mallow extract to the skin.
[0029]
[Test Example 5: Evaluation of skin permeability of mallow extract]
White petrolatum containing 10% mallow extract was applied in an amount of 0.1 g per 4 cm ^{2 of} human skin tissue slices, and allowed to stand at room temperature for 2 hours. Two hours later, the skin tissue piece was separated into an epidermis layer and a dermis layer, each layer was extracted with methanol, and the amount of mallow extract in the extract was measured using HPLC. FIG. 5 shows the result of calculating the ratio of the mallow extract stored in the epidermis and the dermis layer when the amount of the mallow extract in the total application amount was set to 1, based on the obtained amount of the extract. As a result, it was confirmed that the mallow extract had penetrated not only into the epidermis but also into the dermis.
[0030]
【Example】
Next, the present invention will be specifically described with reference to Examples and Comparative Examples.
The skin cosmetics of Examples and Comparative Examples were prepared by the usual methods using the formulations shown in Table 1.
Table 1 is a percentage by weight.
[Examples 1 to 3 and Comparative Examples]
[0031]
[Table 1]
Cell death suppression cosmetics

[0032]
(1) Skin aging prevention effect test (test method)
The serums shown in Table 1 were applied to 10 middle-aged and elderly subjects having wrinkles with a depth of about 100 μm at the outer corners of the eyes for four consecutive weeks, and the effect was evaluated. That is, about 0.5 g was applied to the right eye corner test site of the subject once a day, and the skin condition before the start of the test and after the end of the test was determined according to the criteria. The left outer corner was used as a control without applying the sample.
[0033]
(Judgment criteria)
Significant effect; remarkable improvement effect; moderate improvement somewhat effective; mild improvement ineffective; no change [0034]
(Judgment)
；: When the ratio of the subjects showing the significant effect and effectiveness is 8 or more △: When the ratio of the subjects showing the significant effect and effectiveness is 5 to 7 ×; The results are shown in Table 2 when the number is less than five.
As is evident from Table 2 below, the application of the example in which the mallow, kale, and shikuwasha extracts were blended improved the wrinkles around the eyes, and the mallow, kale, and shikuwasha extracts had an effect of improving skin aging. Became clear.
[0035]
[Table 2]

[0036]
(2) Erythema suppression effect test (test method)
Examples 1 to 3 and Comparative Example were applied daily to the inner part of the upper arm of the right arm of 10 middle-aged subjects for one week, and irradiated with 1.0 MED of ultraviolet light to evaluate the degree of erythema. That is, about 0.5 g of each of the above Examples 1 to 3 and Comparative Example was applied to each of four test sites of the subject, and the skin condition immediately after the irradiation with the ultraviolet light and after the end of the test was determined according to the criteria.
[0037]
(Judgment criteria)
Efficient; No change Effective; Mild erythema slightly effective; Moderate erythema ineffective; Remarkable erythema or blister formation (judgment)
；: When the ratio of the subjects exhibiting a significant effect and effectiveness is 8 or more △: When the ratio of the subjects exhibiting a significant effect and effectiveness is 5 to 7 ×: Ratio of the subjects exhibiting the significant effect and effectiveness Is less than five, the results are shown in Table 3. As is clear from Table 3, it was recognized that Examples in which the mallow extract, the kale extract, and the Shikuwasha extract were blended were excellent in suppressing erythema formation due to ultraviolet rays.
[0038]
[Table 3]

[0039]
【The invention's effect】
It was confirmed that the plant species used in the present invention, mallow, sea squirrel, kale, and extracts thereof have a cell death inhibitory effect.
Cell death manifests as skin aging. Ultraviolet irradiation is a factor of skin cell death, and skin cell death via active oxygen by ultraviolet rays is one of the major mechanisms. The present invention is particularly useful as a highly functional composition because it exhibits the effect of inhibiting the cell death of the skin through the active oxygen due to the ultraviolet rays, and has the effect of preventing skin aging due to the ultraviolet rays, and thus has the effect of preventing aging. . In particular, it has an excellent long-term protective function against lipid peroxide.
The cell death inhibitory effect of malvidin-3,5-diglucoside, which is one of the extracts, was also confirmed.
[Brief description of the drawings]
FIG. 1 is a graph showing the effect of each plant extract on suppressing cell death caused by ultraviolet rays. FIG. 2 is a graph showing the effect of each plant extract on suppressing cell death caused by oxidative stress. FIG. 4 is a graph showing the cell death inhibitory effect of -3,5-diglucoside. FIG. 4 is a photograph of an immunohistochemical staining showing the effect of a mallow extract to protect DNA strand breaks in skin tissue cells upon UVA irradiation of a excised human skin. FIG. 5 is a graph showing the penetration rate of vaseline containing a 10% mallow extract into skin.

Claims

A cell death inhibitor comprising at least one kind of mallow, shikuwasha, kale or an extract thereof.

2. The cell death inhibitor according to claim 1, wherein the extract contains malvidin-3,5-diglucoside.

The cell death inhibitor according to claim 1 or 2, wherein the cells are selected from at least one of dermal fibroblasts, epidermal keratinocytes, vascular endothelial cells, Langerhans cells, and melanocyte-forming cells.

An anti-aging agent comprising the cell death inhibitor according to any one of claims 1 to 3.

A cosmetic comprising the cell death inhibitor according to any one of claims 1 to 3 or the anti-aging agent according to claim 4.

An external preparation comprising the cell death inhibitor according to any one of claims 1 to 3 or the anti-aging agent according to claim 4.

An oral preparation comprising the cell death inhibitor according to any one of claims 1 to 3 or the anti-aging agent according to claim 4.