【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、クマザサ抽出成分から有効成分を抽出する方法および抽出物に関する。本発明で得られた抽出物は、抗菌性、抗腫瘍性、抗ウイルス性などの材料として使用できる。なお、本発明では、細菌、真菌などの菌類、ウイルスなどの微生物を称して菌という。
【０００２】
【従来の技術】
一般に細菌を殺すのは細菌が栄養を取り込みたんぱく質などを作って増える生物であり、抗生物質を投与すると細菌は栄養物といっしょに取り込みその毒性で死ぬことが知られており、抗生物質は細菌に取り込まれやすいように作られている。一方、ウイルスはたんぱく質の殻とその中に遺伝情報だけを持つ粒子であり、動物の細胞に寄生し細胞を壊しながら増え続けるため炎症を起こし病気になる。だが、ウイルスは抗生物質を取り取り込まないため効果はなく、強い薬でたたこうとすると細胞まで殺してしまう。ウイルスの感染症には予防を目的にしたワクチンが有効である。毒性を弱めたウイルスを注射して、ウイルスに対する免疫を作れば感染しにくくなる。従って細菌とウイルスでは明らかに死滅させるメカニズムが異なっている。
【０００３】
一方、クマザサ抽出成分は、抗菌性、抗腫瘍性対策に有効であることが判明している（特許文献１参照）。しかし、クマザサ抽出成分がこの細菌とウイルスの両方の防御に有効であることを発見した。このように、真菌、細菌などの菌類、ウイルスなどの広範囲な微生物の繁殖抑制に効果がある材料は他に知られていない。
【０００４】
しかし、クマザサ抽出成分に関しては、リグニンや多糖類を多く含んでいることが推測されておりその成分は複雑で必ずしも明確ではない。また、クマザサ抽出成分の濃度を調整するには、クマザサ抽出成分を含む水溶液の水分を調整するしかなかった。
【０００５】
【特許文献１】ＷＯ９９／６２４４４号パンフレット。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、簡便かつ効果的に有効なクマザサ抽出物を得る方法を提供することである。すなわち、クマザサ抽出液の多数の成分から、抗菌性あるいは抗ウイルス性成分を精製できる製造方法を提供することである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明は、クマザサもしくはクマザサ抽出成分を、水非混和性溶剤で抽出する工程を含むこと特徴とするクマザサ抽出成分を含むクマザサ抽出物の製造方法に関する。
【０００８】
また、本発明は溶剤が、メチルエチルケトンである上記クマザサ抽出物の製造方法に関する。
【０００９】
また、本発明は上記製造方法で抽出されたクマザサ抽出物に関する。
【００１０】
また、本発明は上記クマザサ抽出物であって、活性度ＩＩのシリカゲルで、７０％エタノール水溶液で薄層クロマトグラフィーで展開したときのＲｆ値が、０．５８〜１．００である上記クマザサ抽出物に関する。
【００１１】
また、本発明は、上記クマザサ抽出物からなる抗菌性及び抗ウイルス性材料に関する。
【００１２】
【発明の実施の形態】
本発明は、クマザサ、もしくは、クマザサ抽出成分を、水非混和性溶剤で抽出することを特徴とする。
【００１３】
水非混和性溶剤とは、水の存在下クマザサ抽出物を含んだとき、水と分離しうる溶剤であり、抽出操作で水を除去できる溶剤である。従って、水、メタノール、エタノール、アセトンは、水非混和性溶剤に含まれない。水非混和溶剤の具体例としては、ヘキサン、シクロヘキサン、クロロホルム、トルエン、酢酸エチル、ブタノール、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトンなどが挙げられ、中でも、メチルエチルケトン（ＭＥＫ）が収量と扱い易さの点で特に好適に用いられる。
【００１４】
ＭＥＫで抽出した場合、得られる成分は、実施例に記載した通り、活性度ＩＩのシリカゲルで、７０％エタノール水溶液で薄層クロマトグラフィーで展開したときのＲｆ値が、０．５８〜１．００（ＦＲ１およびＦＲ２）であるクマザサ抽出物が効率よく抽出されていることが判明した。これらの区画は、リグニンを多く含み、また、大腸菌、黄色ブドウ球菌、緑膿菌などに対する抗菌性を有する成分が集中していることも判明した。
【００１５】
なお、シリカゲルの活性度については、薄層クロマトグラフィーの実際（第２版）鈴木郁生、斎藤行生、豊田正武著、廣川書店刊（平成２年刊）の１０−１２ページに記載されている。活性度ＩＩは、細孔直径６ｎｍのシリカゲルを用いた空調の効いた実験室での操作に相当する。
【００１６】
クマザサ抽出成分は、クマザサを水、アルコールなどの抽出溶剤に浸漬等してクマザサ抽出液として得ることができる。また、市販品として入手もできる。水、アルコールでの抽出方法には特に限定されないが、例えば特許３２１２２７８号公報に記載された方法を使用できる。溶剤で抽出するのは、一旦クマザサを水で抽出したクマザサ抽出成分でなくとも、クマザサそのものであってもよい。
【００１７】
本発明のクマザサ抽出物の形態は、溶液であっても、スプレードライ、凍結乾燥、デキストリンなどの造形剤の添加等した粉状であってもよい。さらに、濾過、カラム精製、溶剤洗浄などの選別工程を経たものであってもよい。また、抽出溶液は必要に応じて、水やアルコールなどの抽出溶剤以外の溶剤に置換してもよい。
【００１８】
クマザサ抽出成分を抗菌性および抗ウイルス性液として用いる場合は、従来使用されてきた濃度より高濃度で用いるのが好ましく、上記液中に含まれるクマザサ抽出成分の固形量は、１〜５０重量％で用いることが好ましい。クマザサ抽出成分は、様々な菌類ウイルス類に対して抗菌性及び抗ウイルス性が発揮され、例えば、大腸菌、黄色ブドウ球菌、緑膿菌、破傷風菌、クロストリジウム属ガス壊疸菌、カンジタ菌、白癬菌、ケカビ、クモノスカビ、アスペルギルス属菌、クリプトコッカス属菌、コクシジオイデス属菌、ヒストプラズマ属菌、
ヘルペスウイルス、コロナウイルスなどの菌またはウイルスに対する抗菌性及び抗ウイルス性を示すことが期待できる。
【００１９】
本発明のクマザサ抽出物は、粉状、または、種々の溶剤や水に溶解または分散して用いることができる。さらに、必要に応じて、その他の抗菌性材料、種々の添加剤、例えば、保湿材、着色剤、粘度調整剤、乳化剤、分散剤、紫外線吸収剤、酸化防止剤、芳香剤、吸着剤などを添加してもよい。
【００２０】
その他の抗菌剤としては、銀系・銅系の無機系や有機物系の抗菌剤が挙げられる。
【００２１】
保湿材としては、一般に吸湿性のあるものであればよく、特に限定されない。樹脂系内に水酸基やカルボン酸基のようなものを有しているものが代表してあげられ、アクリル酸類、ポリエチレングリコール等のグリコール類、水系ウレタン樹脂、ポリビニルアルコール樹脂、ポリビニルピロリドン、ポリエチレンオキサイド、ポリエチレングリコール鎖を有するポリエステル樹脂、ポリエチレングリコール鎖を有するポリウレタン樹脂、吸水性アクリル樹脂等が挙げられる。
【００２２】
着色剤としては特に限定させないが、食用色素、クロロフィル等の食品添加物として認められている色素が望ましい。
【００２３】
粘度調整剤としては、アクリル樹脂、ポリ酢酸ビニルおよびその鹸化物、ポリエステル、ポリエーテルなど公知の樹脂やワックスが挙げられる。樹脂などの使用は、菌の増殖を助長する水や酸素や栄養源の外部からの供給を遮断する効果と、クマザサ抽出成分の基材からの流出を抑える効果が期待できる。
【００２４】
乳化剤、分散剤、紫外線吸収剤、酸化防止剤、芳香剤などは、特に限定されないが人体に問題がないか影響の少ないものが望ましい。
【００２５】
吸着剤としては無機多孔質が挙げられ、無機多孔質としては、基本的には無機系の多孔質であれば特に問題がないが、例えば活性炭の炭素系、シリカ、アルミナ、マグネシア、ムライト、モンモリロナイト、ベントナイト、カオリン、ゼオライト、スメクタイト、ハロイサイト、カオリナイト、ケイソウ土、酸性白土、酸化チタン等のセラミック系、など挙げられる。活性炭は、炭素を有するものであるが、本発明では、無機多孔質に含まれるものとする。無機多孔質の添加量は、クマザサ抽出成分の固形分１００重量部に対して、１〜１００重量部用いるのが通常である。
【００２６】
本発明のクマザサ抽出物は、抗菌性及び抗ウイルス性を有するために、さまざまな抗菌性及び抗ウイルス性を必要とする用途に用いられる。例えば、抗菌性及び抗ウイルス性フィルタに用いることができる。
【００２７】
抗菌性及び抗ウイルス性フィルタは、不織布や布、紙、多孔質プラスチックのような透気性を有する基材に、本発明のクマザサ抽出物と必要に応じて添加剤を含んだ塗布液を、表面に塗布・含浸させたものである。
【００２８】
ここで使用する不織布としては、ポリエステル系、レーヨン系、ビニロン系、ポリプロピレン系、ナイロン系、アクリル系、アラミド系、等の布状、紙状、綿状の形態であり、スパンボンド法等につくられるものである。
【００２９】
本発明で用いられるフィルタは、刷毛、浸漬、ローラ、スプレー、注入、塗工機など種々の塗布方法により、基材に塗布することが可能である。塗工方法としては、ディップコート、コンマコート、グラビアコート、カーテンコート、ダイコート、リップコート、マイクログラビアコート、スロットダイコート、リバースコート、キスコート等が挙げられる。粉体噴霧のような方法を用いる事も可能である。
【００３０】
塗布量は、クマザサ抽出物の固形分で、基材１ｍ２あたりに０．１〜１５０ｇ塗布するのがよい。特に５〜１００ｇが望ましい。塗布量が少なすぎると除菌性効果が小さくなる。
【００３１】
抗菌性フィルタの一形態として、マスクがある。マスクは、長時間使用することにより、菌などが繁殖しやすい問題点を有している。本発明の抗菌性及び抗ウイルス性材料をマスクに使用する場合は、通常のマスク使用形態がそのまま適用でき、例えば、本発明の抗菌性及び抗ウイルス性材料を塗布した不織布または布、紙、多孔質プラスチック等からなる抗菌フィルタ単独でマスクと口の間に挟み用いる方法、ポケットのあるマスクでそのポケットにこの抗菌性及び抗ウイルス性フィルタを入れマスクにする方法、抗菌性及び抗ウイルス性フィルタの片側に粘着剤をつけてマスクに貼合する方法（内側貼合・外側貼合）、等があり、マスクもさらに、その他の不織布、布、網、シート、ガーゼなどと合わせて積層構造としたものであってもよい。
【００３２】
【実施例】
以下、実施例により、本発明をさらに詳細に説明する。なお、％は重量％を示す。
＜クマザサ抽出成分の製造＞
北海道天塩山系で９月に採取されたクマザサの乾燥葉を、加圧熱水タンクに入れ１２５℃１０分間処理し、冷却水で熱水を８０℃まで冷却し、エキスと含水固形分をスクリュープレスで分離して、含水率を約５０重量％とした。次に、約５０質量％含水固形分をオートクレーブに入れ、１８０℃で１０分間、飽和水蒸気による加圧熱水処理を行った。処理した含水固形分を、再度加圧熱水抽出タンクに入れて１１０℃で５分間処理してエキスを抽出させた。第１回目のエキスと第２回目のエキスを合わせ、珪藻土濾過し、固形分５０重量％となるまで減圧濃縮し、１１０〜１３０℃の流動殺菌処理してクマザサエキスを得た。
【００３３】
＜本発明のクマザサ抽出物の製造＞
上記クマザサエキス１ｇを蒸留水で１００ｍｌに希釈した。分液ロートで、ＭＥＫ１００ｍｌにて２回抽出したものをロータリーエバポレーターで濃縮乾固して０．０５ｇを得た。この試料を以下のＴＬＣ分取および抗菌性試験を行った。
＜ＴＬＣ（薄層クロマトグラフィー）分取＞
ＭＥＲＣＫ社製分取用薄層クロマトプレート（シリカゲル６０Ｆ２５４、２０ｃｍ×２０ｃｍ×０．５ｍｍ）を使用する直前に１２０℃オーブンで１時間加熱した（活性度ＩＩ）。
【００３４】
上記クマザサ抽出物１ｇを１ｇの蒸留水で希釈し、クロマトプレートに塗布した。
７０％エタノール水溶液で９０分間上昇法にて展開操作を行った。
Ｒｆ値により、表１で示す６つに分画された。
【００３５】
【００３６】
＜抗菌性試験＞
菌数をほぼ一定にした生理食塩水菌液に試料（濃度１００００ｐｐｍ）を２４時間接触させ、菌数をプレート法にて計測した。結果を表２および表３に示す。
【００３７】
なお、試験菌は、以下の通りである。
大腸菌：Ｅｓｃｈｅｒｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＮＢＲＣ ３９６２
黄色ブドウ球菌：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ＩＦＯ１２７３２
緑膿菌：Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ＮＢＲＣ１３２７５
【００３８】
【００３９】
【００４０】
表２で明らかなように、本発明のＭＥＫ抽出物は、大腸菌、黄色ブドウ球菌、緑膿菌のいずれに対しても、抽出残分に比べて、格段の菌の減少が観察された。また、表３で明らかなようにＭＥＫ抽出成分をさらに、ＴＬＣ分取したならば、より、黄色ブドウ球菌に対する有効成分は、ＦＲ１とＦＲ２に有効成分が集中していることが確認された。このことは、黄色ブドウ球菌の抗菌性成分は、ＦＲ１およびＦＲ２に集中し、ＭＥＫ抽出することにより、ＦＲ１およびＦＲ２に相当するクマザサの抗菌性成分が、効率よく濃縮されるということを示す。
【００４１】
【発明の効果】
本発明により、簡便かつ効果的に抗菌性及び抗ウイルス性のクマザサ抽出物を得る方法を提供することである。すなわち、クマザサ抽出液の多数の成分から、抗菌性あるいは抗ウイルス性成分を精製できる製造方法を提供できた。[0001]
TECHNICAL FIELD OF THE INVENTION
The present invention relates to a method and an extract for extracting an active ingredient from Kumazasa extract. The extract obtained in the present invention can be used as a material having antibacterial properties, antitumor properties, antiviral properties, and the like. In the present invention, fungi such as bacteria and fungi, and microorganisms such as viruses are referred to as bacteria.
[0002]
[Prior art]
It is generally known that bacteria that kill bacteria are organisms that increase by producing proteins that take in nutrients.When antibiotics are administered, bacteria are taken in with nutrients and are known to die due to their toxicity. Made to be easily captured. On the other hand, a virus is a protein shell and particles containing only genetic information in it, and it becomes inflamed because it continues to grow while destroying the cells of the animal. However, the virus has no effect because it does not take in antibiotics, and if you try to beat it with a strong drug, it will even kill cells. Vaccines aimed at prevention are effective against viral infections. Injecting a virus with reduced toxicity and creating immunity against the virus makes infection less likely. Therefore, the killing mechanism is clearly different between bacteria and viruses.
[0003]
On the other hand, it has been found that Kumazasa extract is effective for antibacterial and antitumor measures (see Patent Document 1). However, it was found that Kumazasa extract was effective in protecting both the bacterium and the virus. Thus, no other material is known that is effective in suppressing the growth of a wide range of microorganisms such as fungi and bacteria, and viruses and the like.
[0004]
However, it is presumed that Kumazasa extract contains a large amount of lignin and polysaccharides, and the components are complicated and not always clear. Further, the only way to adjust the concentration of Kumazasa extract is to adjust the water content of the aqueous solution containing Kumazasa extract.
[0005]
[Patent Document 1] WO99 / 62444 pamphlet.
[0006]
[Problems to be solved by the invention]
An object of the present invention is to provide a method for obtaining an effective Kumazasa extract simply and effectively. That is, an object of the present invention is to provide a production method capable of purifying an antibacterial or antiviral component from a large number of components of Kumazasa extract.
[0007]
[Means for Solving the Problems]
The present invention relates to a method for producing a kumazasa extract containing a kumazasa extract component, comprising a step of extracting kumazasa or a kumazasa extract component with a water-immiscible solvent.
[0008]
In addition, the present invention relates to the method for producing the above extract of Kumazasa, wherein the solvent is methyl ethyl ketone.
[0009]
The present invention also relates to a Kumazasa extract extracted by the above production method.
[0010]
The present invention also relates to the Kumazasa extract, which has an Rf value of 0.58 to 1.00 when developed by thin-layer chromatography using a 70% aqueous ethanol solution on silica gel having an activity II. About things.
[0011]
The present invention also relates to an antibacterial and antiviral material comprising the above Kumazasa extract.
[0012]
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION
The present invention is characterized in that Kumazasa or Kumazasa extract is extracted with a water-immiscible solvent.
[0013]
The water-immiscible solvent is a solvent that can be separated from water when the Kumazasa extract is contained in the presence of water, and is a solvent from which water can be removed by an extraction operation. Therefore, water, methanol, ethanol, and acetone are not included in the water-immiscible solvent. Specific examples of the water-immiscible solvent include hexane, cyclohexane, chloroform, toluene, ethyl acetate, butanol, methyl ethyl ketone, and methyl isobutyl ketone. Among them, methyl ethyl ketone (MEK) is particularly preferable in terms of yield and ease of handling. Used for
[0014]
When extracted with MEK, the resulting component has an Rf value of 0.58 to 1.00 when developed by thin-layer chromatography on silica gel having an activity II and 70% aqueous ethanol as described in Examples. It was found that the Kumazasa extract (FR1 and FR2) was efficiently extracted. It was also found that these compartments were rich in lignin, and were concentrated in components having antibacterial properties against Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa and the like.
[0015]
The activity of silica gel is described in Practical Thin Layer Chromatography (Second Edition) by Ikuo Suzuki, Yukio Saito, Masatake Toyoda, pages 10-12 of Hirokawa Shoten (published in 1990). Activity II corresponds to an air-conditioned laboratory operation using silica gel with a pore diameter of 6 nm.
[0016]
Kumazasa extract can be obtained as Kumazasa extract by immersing Kumazasa in an extraction solvent such as water or alcohol. It can also be obtained as a commercial product. The extraction method using water or alcohol is not particularly limited, and for example, a method described in Japanese Patent No. 3212278 can be used. What is extracted with the solvent may be not Kumazasa extracted component obtained by extracting Kumazasa with water but may be Kumazasa itself.
[0017]
The form of Kumazasa extract of the present invention may be in the form of a solution or a powder in which a shaping agent such as spray-drying, freeze-drying, or dextrin is added. Further, it may have undergone a selection step such as filtration, column purification, and solvent washing. Further, the extraction solution may be replaced with a solvent other than the extraction solvent such as water or alcohol, if necessary.
[0018]
When using Kumazasa extract as an antibacterial and antiviral liquid, it is preferable to use it at a higher concentration than conventionally used, and the solid content of Kumazasa extract contained in the liquid is 1 to 50% by weight. It is preferable to use them. Kumazasa extract has antibacterial and antiviral properties against various fungal viruses, for example, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Tetanus, Clostridium gas gangrene, Candida, Trichophyton , Lycopodium, pycnobacterium, Aspergillus, Cryptococcus, Coccidioides, Histoplasma,
It can be expected to exhibit antibacterial and antiviral properties against bacteria or viruses such as herpes virus and coronavirus.
[0019]
The Kumazasa extract of the present invention can be used in the form of powder or dissolved or dispersed in various solvents or water. Further, if necessary, other antibacterial materials, various additives, for example, humectants, colorants, viscosity modifiers, emulsifiers, dispersants, ultraviolet absorbers, antioxidants, fragrances, adsorbents and the like. It may be added.
[0020]
Other antibacterial agents include silver-based and copper-based inorganic and organic antibacterial agents.
[0021]
The humectant may be any material that is generally hygroscopic, and is not particularly limited. Representative examples include those having a hydroxyl group or a carboxylic acid group in the resin system, such as acrylic acid, glycols such as polyethylene glycol, aqueous urethane resin, polyvinyl alcohol resin, polyvinyl pyrrolidone, polyethylene oxide, Examples thereof include a polyester resin having a polyethylene glycol chain, a polyurethane resin having a polyethylene glycol chain, and a water-absorbing acrylic resin.
[0022]
The coloring agent is not particularly limited, but a coloring agent recognized as a food additive such as an edible coloring matter or chlorophyll is desirable.
[0023]
Examples of the viscosity modifier include known resins and waxes such as an acrylic resin, polyvinyl acetate and a saponified product thereof, polyester, and polyether. The use of a resin or the like can be expected to have the effect of blocking the supply of water, oxygen, and nutrients from the outside, which promotes the growth of bacteria, and the effect of suppressing the outflow of Kumazasa extract components from the base material.
[0024]
The emulsifier, dispersant, ultraviolet absorber, antioxidant, fragrance and the like are not particularly limited, but those having no problem on the human body or having little effect are desirable.
[0025]
Examples of the adsorbent include inorganic porous materials. As the inorganic porous material, there is no particular problem as long as it is basically an inorganic porous material.For example, activated carbon, silica, alumina, magnesia, mullite, montmorillonite , Bentonite, kaolin, zeolite, smectite, halloysite, kaolinite, diatomaceous earth, acid clay, and ceramics such as titanium oxide. Activated carbon has carbon. In the present invention, activated carbon is included in inorganic porous material. The amount of the inorganic porous material to be added is usually 1 to 100 parts by weight based on 100 parts by weight of the solid content of the extract of Kumazasa.
[0026]
Since the Kumazasa extract of the present invention has antibacterial and antiviral properties, it is used for applications requiring various antibacterial and antiviral properties. For example, it can be used for antibacterial and antiviral filters.
[0027]
Antibacterial and antiviral filters are prepared by applying a coating solution containing the extract of Kumazasa of the present invention and, if necessary, an additive to an air-permeable base material such as nonwoven fabric, cloth, paper, or porous plastic. Coated and impregnated.
[0028]
The nonwoven fabric used here is in the form of cloth, paper, or cotton, such as polyester, rayon, vinylon, polypropylene, nylon, acrylic, and aramid, and is prepared by a spunbond method or the like. It is something that can be done.
[0029]
The filter used in the present invention can be applied to a substrate by various coating methods such as brushing, dipping, roller, spraying, pouring, and a coating machine. Examples of the coating method include dip coating, comma coating, gravure coating, curtain coating, die coating, lip coating, microgravure coating, slot die coating, reverse coating, and kiss coating. It is also possible to use a method such as powder spraying.
[0030]
The coating amount, in solid kumazasa extract component, it is preferable to 0.1~150g applied per substrate 1 m 2. Particularly, 5 to 100 g is desirable. If the coating amount is too small, the disinfection effect is reduced.
[0031]
One form of antibacterial filter is a mask. The mask has a problem that bacteria and the like easily propagate when used for a long time. When the antibacterial and antiviral material of the present invention is used for a mask, the usual mask use form can be applied as it is, for example, a nonwoven fabric or cloth coated with the antibacterial and antiviral material of the present invention, paper, or porous. Method of using an antibacterial filter made of high-quality plastic or the like alone between a mask and a mouth, a method of putting this antibacterial and antiviral filter in a pocket with a mask and using it as a mask, There is a method of attaching an adhesive on one side and sticking it to the mask (inside bonding / outside bonding), etc., and the mask is further laminated with other non-woven fabric, cloth, net, sheet, gauze etc. It may be something.
[0032]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples. In addition,% shows weight%.
<Manufacture of Kumazasa extract>
The dried leaves of Kumazasa collected in September at the Teshio Mountains, Hokkaido, were placed in a pressurized hot water tank and treated at 125 ° C for 10 minutes. The hot water was cooled to 80 ° C with cooling water, and the extract and the water-containing solid content were screw-pressed. To make the water content about 50% by weight. Next, about 50% by mass of the water-containing solid content was placed in an autoclave, and subjected to pressurized hot water treatment with saturated steam at 180 ° C. for 10 minutes. The treated water-containing solids were again placed in a pressurized hot water extraction tank and treated at 110 ° C. for 5 minutes to extract the extract. The first extract and the second extract were combined, filtered with diatomaceous earth, concentrated under reduced pressure until the solid content became 50% by weight, and subjected to a flow sterilization treatment at 110 to 130 ° C. to obtain Kumazasa extract.
[0033]
<Production of Kumazasa extract of the present invention>
1 g of the above Kumazasa extract was diluted to 100 ml with distilled water. What was extracted twice with 100 ml of MEK in a separating funnel was concentrated and dried using a rotary evaporator to obtain 0.05 g. This sample was subjected to the following TLC fractionation and antibacterial tests.
<TLC (thin layer chromatography) fractionation>
Immediately before using a preparative thin-layer chromatography plate (silica gel 60F254, 20 cm × 20 cm × 0.5 mm) manufactured by MERCK, it was heated in an oven at 120 ° C. for 1 hour (activity II).
[0034]
1 g of the above Kumazasa extract was diluted with 1 g of distilled water and applied to a chromatoplate.
The developing operation was performed by a rising method using a 70% aqueous ethanol solution for 90 minutes.
According to the Rf value, it was fractionated into six as shown in Table 1.
[0035]
[0036]
<Antibacterial test>
A sample (concentration: 10,000 ppm) was brought into contact with a physiological saline solution having a substantially constant number of bacteria for 24 hours, and the number of bacteria was measured by a plate method. The results are shown in Tables 2 and 3.
[0037]
The test bacteria are as follows.
E. coli: Escherichia coli NBRC 3962
Staphylococcus aureus: Staphylococcus aureus IFO12732
Pseudomonas aeruginosa: Pseudomonas aeruginosa NBRC13275
[0038]
[0039]
[0040]
As is clear from Table 2, the MEK extract of the present invention showed a remarkable decrease in all bacteria against Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa as compared with the extraction residue. Further, as is clear from Table 3, when the MEK-extracted components were further subjected to TLC fractionation, it was confirmed that the active components against Staphylococcus aureus were more concentrated in FR1 and FR2. This indicates that the antibacterial component of Staphylococcus aureus concentrates on FR1 and FR2, and by extracting MEK, the antibacterial component of Kumazasa corresponding to FR1 and FR2 is efficiently concentrated.
[0041]
【The invention's effect】
An object of the present invention is to provide a method for easily and effectively obtaining an antibacterial and antiviral Kumazasa extract. That is, it was possible to provide a production method capable of purifying an antibacterial or antiviral component from many components of Kumazasa extract.
