JP2004070307A - Maceration medium supply apparatus, fluorescent analytic inspecting device and incubation microscope - Google Patents

Maceration medium supply apparatus, fluorescent analytic inspecting device and incubation microscope Download PDF

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JP2004070307A
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JP2003166750A
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Inventor
Mitsuo Harada
原田 満雄
Original Assignee
Olympus Corp
オリンパス株式会社
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    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/12Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of temperature
    • C12M41/14Incubators; Climatic chambers
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/46Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of cellular or enzymatic activity or functionality, e.g. cell viability

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a maceration medium supply apparatus, a fluorescent analytic inspecting device, and an incubation microscope which can stably perform temperature control over a sample and have simple constitution, and are reduced in cost. <P>SOLUTION: The maceration medium 13 charged between an observation sample and a maceration objective 12, a temperature controller 26 which controls the maceration medium 13 at specified temperature, and a maceration medium supply part (22 to 25) which supplies the maceration medium 13 whose temperature is controlled by the temperature controller 26 to the maceration objective 12, are included. <P>COPYRIGHT: (C)2004,JPO

Description

【0001】 [0001]
【発明の属する技術分野】 BACKGROUND OF THE INVENTION
本発明は、液浸対物レンズに液浸媒質を供給する液浸媒質供給装置、蛍光分光検査装置及び培養顕微鏡に関する。 The present invention provides an immersion medium in immersion objective immersion medium supply apparatus, a fluorescence spectrophotometer inspection apparatus and the culture microscope.
【0002】 [0002]
【従来の技術】 BACKGROUND OF THE INVENTION
例えば、タンパク質などの生物標本の反応は、その温度変化に大きく影響されることが知られている。 For example, the reaction of the biological specimen, such as proteins are known to be greatly affected by the temperature change. そこで、このような標本を顕微鏡観察する場合には、標本温度を所定温度に保持するための種々の工夫がなされている。 Therefore, when such a specimen microscopic observation, various contrivances for maintaining the sample temperature to a predetermined temperature have been made.
【0003】 [0003]
特許文献1は、このような考えを実現した技術を開示しており、ステージに発熱部や電熱板を設け、これら発熱部や電熱板により、ステージ上に載置されたガラスシャーレ内の試料に熱を与えることにより、試料の温度を一定に保つようにしている。 Patent Document 1 discloses a technology that realizes this idea, the heating portion and the electrothermal board installed on a stage, the heat generating portion and the electrothermal board, in the sample in the glass petri dish placed on the stage by applying heat, and to keep the temperature of the sample constant.
【0004】 [0004]
また、特許文献2に開示されるように標本の周囲から対物レンズの周囲にかけて、適温に制御された水を供給するためのパイプを配置し、このパイプに所定温度の水を流すことにより、標本の温度を一定に制御するようにした技術や、特許文献3に開示されるように一部が発熱部で構成された載物台に載置される溶媒観察容器の保温箱に加熱手段を設け、溶媒観察容器内部の溶媒標本を適正な保温状態に制御するようにした技術も知られている。 Further, over the periphery of the objective lens from the periphery of the specimen as disclosed in Patent Document 2, a pipe for supplying the controlled water at an appropriate temperature place, by flowing water of a predetermined temperature in this pipe specimen technology and which was to be controlled at a constant temperature, the heating means heat insulating box of the solvent observation container part as disclosed in Patent Document 3 is placed on the workpiece stage constituted by the heat generating portion is provided for , it is also known techniques to control the solvent specimens internal solvent observation container in a proper insulation state.
【0005】 [0005]
一方、最近になって、特許文献4に開示されるように、蛍光顕微測光により、液体中の微小領域に浮遊する蛍光標識した生物分子の運動を捉えて、生物分子の反応を特定するような検査方法が考えられている。 On the other hand, recently, as disclosed in Patent Document 4, by fluorescence microscopic photometry, capture the movement of fluorescently labeled biomolecules floating in minute domains in a liquid, such as to identify the reaction of biological molecules inspection methods have been considered.
【0006】 [0006]
この方法には、検査用ウェルを多数配列したマイクロプレートと呼ばれる樹脂製の又は底面がカバーガラスでできた標本容器が用いられている。 The method, resin or bottom called microplate sequence number of test wells have been used specimen container made of cover glass. そして、このマイクロプレートのウェルに蛍光標識された標本を収容し、マイクロプレートリーダーにより蛍光標識された標本の蛍光を検出しながら、標本から放射される揺らぎ強度をモニターすることによって標本分析が行われる。 Then, to accommodate a fluorescent-labeled sample to the wells of the microplate, while detecting the fluorescence of a fluorescent-labeled sample by a microplate reader, the sample analysis is performed by monitoring the fluctuation intensity emitted from the specimen . この場合、マイクロプレートのウェル中の標本は、液中に、大小の分子が浮遊している状態になっている。 In this case, the sample in the microplate well, in the liquid, is in a state in which large and small molecules are floating. そして、この浮遊分子にマイクロプレート底面のカバーガラスを介して液浸対物レンズにより励起光を集光させ、励起された蛍光を分子分解能で検出し、演算により分子の性質が判定されている。 Then, by focusing the excitation light by the immersion objective lens through the cover glass of the microplate bottom in the floating molecules, to detect the excited fluorescence molecule resolution, properties of the molecule are determined by calculation.
【0007】 [0007]
【特許文献1】実開昭60−156521号公報【0008】 [Patent Document 1] Japanese Unexamined Utility Model Publication No. 60-156521 [0008]
【特許文献2】実開平7−36118号公報【0009】 JP Patent Document 2] real Hei 7-36118 [0009]
【特許文献3】実公平3−25598号公報【0010】 JP [Patent Document 3] real fair 3-25598 [0010]
【特許文献4】特表2001−502062号公報【0011】 JP [Patent Document 4] JP-T 2001-502062 [0011]
【発明が解決しようとする課題】 [Problems that the Invention is to Solve
本発明の目的は、標本の温度制御を安定して行うことができる、構成が簡単で、価格的にも安価な液浸媒質供給装置、蛍光分光検査装置及び培養顕微鏡を提供することである。 An object of the present invention can control the temperature of the specimen stable, structure is simple, cost manner to be inexpensive immersion medium supply device, it is to provide a fluorescence spectroscopic inspection device and tissue culture microscope.
【0012】 [0012]
【課題を解決するための手段】 In order to solve the problems]
本発明の第1の局面に係る液浸媒質供給装置は、観察標本と液浸対物レンズとの間に充填される液浸媒質と、前記液浸媒質を所定の温度に制御する温度制御器と、前記温度制御器により温度制御された前記液浸媒質を前記液浸対物レンズに供給する液浸媒質供給部とを具備することを特徴とする。 Immersion medium supply apparatus according to a first aspect of the present invention, the immersion medium is filled between the observation sample and the immersion objective lens, and a temperature controller for controlling the immersion medium to a predetermined temperature , characterized by comprising the said immersion medium which is temperature controlled the immersion supplied to the objective lens immersion medium supply section by the temperature controller.
【0013】 [0013]
本発明の第2の局面に係る蛍光分光検査装置は、液中に浮遊する蛍光標識された生物分子の標本からの光を集光する液浸対物レンズと、前記標本と前記液浸対物レンズとの間に充填される液浸媒質と、少なくとも液浸対物レンズの拡大像を検出する光検出器と蛍光照明とを備えた光学システムと、前記光検出器の出力から前記標本の運動を演算する演算部と、前記演算部による演算結果を表示するモニターと、前記液浸媒質を所定の温度に制御する温度制御器と、前記温度制御器により温度制御された前記液浸媒質を前記液浸媒質レンズに供給する液浸媒質供給部と、を具備することを特徴とする。 Fluorescence spectroscopy inspection apparatus according to a second aspect of the present invention, the immersion objective lens that collects light from a sample of fluorescence labeled biomolecules suspended in the liquid, and the specimen and the immersion objective lens and immersion medium filled between calculates an optical system including a light detector and fluorescence illumination for detecting a magnified image of at least the immersion objective lens, the movement of the specimen from the output of the photodetector a calculation unit, a monitor for displaying the calculation result by the arithmetic unit, and a temperature controller for controlling the immersion medium to a predetermined temperature, the said immersion medium which is temperature controlled by the temperature controller immersion medium and it supplies the lens immersion medium supply unit, characterized by including the.
【0014】 [0014]
本発明の第3の局面に係る培養顕微鏡は、観察標本を載置するステージと、前記ステージを支持する顕微鏡と、前記顕微鏡に支持された液浸対物レンズと、前記顕微鏡に収納された観察標本の拡大像を取込む撮像装置及び光学系と、を収納する培養器と、前記観察標本と前記液浸対物レンズとの間に充填される液浸媒質と、前記液浸媒質を所定の温度に制御する温度制御器と、前記温度制御器により温度制御された前記液浸媒質を前記液浸媒質レンズに供給する液浸媒質供給部と、前記培養器に温風を送り込む温風機と、を具備することを特徴とする。 Culture microscope according to the third aspect of the present invention includes: a stage for mounting an observation specimen and the microscope for supporting the stage, and the immersion objective lens supported by the microscopic observation specimen accommodated in the microscope a culture vessel for accommodating the enlarged image and the image pickup device and an optical system taking a, a, and the immersion medium is filled between the observation sample and the immersion objective lens, the immersion medium to a predetermined temperature comprising: a control temperature controller, said temperature controller by a temperature controlled the immersion medium said supplied to the immersion medium lens immersion medium supply unit, a fan heater for feeding hot air into the incubator, the characterized in that it.
【0015】 [0015]
【発明の実施の形態】 DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
以下、本発明の実施の形態を図面に従い説明する。 Hereinafter, an embodiment of the present invention in accordance with the accompanying drawings.
【0016】 [0016]
(第1の実施の形態) (First Embodiment)
図1は、本発明の液浸媒質供給装置が適用される検査装置の概略構成を示している。 Figure 1 shows a schematic configuration of an inspection apparatus immersion medium supply apparatus of the present invention is applied. 図1において、装置本体1内部には、倒立顕微鏡2が設けられている。 In Figure 1, inside the apparatus main body 1, an inverted microscope 2 is provided.
【0017】 [0017]
倒立顕微鏡2には、XYステージ3が設けられている。 The inverted microscope 2, XY stage 3 is provided. このXYステージ3上には標本4を入れる多数のウェル5aを有するマイクロプレート5が載置されている。 This on the XY stage 3 is microplate 5 having a number of wells 5a put samples 4 are placed.
【0018】 [0018]
マイクロプレート5は、樹脂製の標本容器であって、図3に示すように、標本4を入れるウェル5aが整然と多数個配列されている。 Microplate 5 is a specimen container made of resin, as shown in FIG. 3, wells 5a put samples 4 are orderly plurality sequences. また、マイクロプレート5の底面には、透明部材として、例えば厚さ0.17mm前後のカバーガラス5bが配置されている。 Further, the bottom surface of the microplate 5, as a transparent member, a thickness of 0.17mm around the cover glass 5b is disposed. これにより、マイクロプレート5の各ウェル5aは、図4に示すように、下面からの倒立観察に適するように底面にカバーガラス5bが接着されている構造をしている。 Thus, each well 5a of the micro plate 5, as shown in FIG. 4, the cover glass 5b to the bottom surface to suit the inverted observation from the lower surface is a structure that is bonded. なお、ウェル5aに入れられる標本4は、蛍光標識された生物分子がコロイド状になって液中を浮遊したものである。 Incidentally, the sample 4 to be taken into wells 5a is one in which the fluorescently labeled biomolecules were floating in the liquid becomes colloidal.
【0019】 [0019]
装置本体1の正面には、図2に示すようにマイクロプレート挿入窓1aが設けられている。 On the front of the apparatus main body 1, microplate insertion window 1a is provided as shown in FIG. マイクロプレート挿入窓1aは、装置本体1へのマイクロプレート5の出し入れを行うための窓である。 Microplate insertion window 1a is a window for performing the out of microplate 5 to the device body 1. マイクロプレート5をマイクロプレート挿入窓1aより装置本体1内部に挿入すると、XYステージ3上に載置され、この状態で自動的に標本検査を行うことができる。 Upon insertion of the microplate 5 into the apparatus main body 1 from the microplate insertion window 1a, it is placed on the XY stage 3, can be automatically specimens examined in this state.
【0020】 [0020]
波長の異なる励起用レーザ光源6、7からのレーザ光は、ハーフミラー8およびミラー9を介して、選択的に、または同時に、倒立顕微鏡2に導入される。 Laser light from different excitation laser light source 6 and 7 wavelengths through the half mirror 8 and a mirror 9, selectively or simultaneously introduced into the inverted microscope 2. そして、レーザ光は、コリメートレンズ10で平行光となってダイクロイックミラー11で反射され、対物レンズ12に導入される。 Then, the laser light as parallel light by the collimator lens 10 is reflected by the dichroic mirror 11, it is introduced into the objective lens 12.
【0021】 [0021]
この場合、対物レンズ12には、標本4の液中の数マイクロメートルの微小領域に集光できるように集光能力を高めた液浸対物レンズ(図示例では水浸対物レンズ)が使用されている(以下、水浸対物レンズ12として説明する。)。 In this case, the objective lens 12 is an immersion objective lens having an increased condensability to allow condensing the micro region of several micrometers in the liquid of the sample 4 (in the illustrated example water immersion objective) is used are (hereinafter, described as the water immersion objective 12.). また、水浸対物レンズ12は、図4に示すように、マイクロプレート5底面のカバーガラス5bに近接して配置されている。 The water-immersion objective lens 12, as shown in FIG. 4, are arranged in proximity to the cover glass 5b microplate 5 bottom. 水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの間には、液浸媒質(純水)13が充填されている。 Between water immersion objective 12 and the cover glass 5b is immersion medium (pure water) 13 is filled.
【0022】 [0022]
水浸対物レンズ12を透過された励起光は、液浸媒質13を通り、カバーガラス5bを通ってマイクロプレート5のウェル5a中に進み、標本4の液中の微小領域に集光される。 Excitation light transmitted through the objective lens 12 water immersion passes the immersion medium 13, the process proceeds in the wells 5a of the micro plate 5 through the cover glass 5b, is focused on the micro-region in the liquid of the sample 4. ここで、標本4の液中に浮遊する蛍光標識された生物分子が、励起光の集光された微小領域内に存在すると、その瞬間、蛍光を発する。 Here, when a fluorescent labeled biological molecule floating in the liquid of the sample 4 is present in very small regions which are condensed excitation light, that moment fluoresce.
【0023】 [0023]
この蛍光は、水浸対物レンズ12を通り、ダイクロイックミラー11を透過して、励起光バリアフィルタ14を通り、結像レンズ15により水浸対物レンズ12による蛍光の拡大像が形成され、反射ミラー16で折り返して、ピンホール17を通り光検出器18に到達する。 The fluorescence passes through the water immersion objective 12 passes through the dichroic mirror 11, passes through the excitation light barrier filter 14, enlarged image of the fluorescence by the water immersion objective 12 is formed by the imaging lens 15, reflecting mirror 16 folded in, to reach the pinhole 17 as photodetector 18.
【0024】 [0024]
この場合、標本4の液中に浮遊する蛍光標識された生物分子は、コロイド状の浮遊体であるから、ブラウン運動により振動し、微小領域を出たり入ったりしている。 In this case, biomolecules fluorescently labeled floating in the liquid sample 4, since a colloidal floating body vibrates by Brownian motion, and in and out of small area. これにより、光検出器18は、微小領域を出たり入ったりする生物分子の蛍光を検出することとなる。 Thus, the light detector 18, and thus to detect the fluorescence of biological molecules in and out a small area.
【0025】 [0025]
光検出器18には、演算装置19が接続されている。 The optical detector 18, computing device 19 is connected. この演算装置19は、光検出器18の検出信号の揺らぎを演算する。 The arithmetic unit 19 calculates the fluctuation of the detection signal of the photodetector 18.
【0026】 [0026]
演算装置19には、装置本体1に設けられた中央処理手段としてのパソコン20が接続されている。 The arithmetic unit 19, the personal computer 20 as a central processing unit provided in the apparatus main body 1 is connected. このパソコン20は、演算装置19で演算された揺らぎから生物分子の性質を分析し、この結果を表示部21に表示する。 The personal computer 20 analyzes the nature of the biomolecule from the computed fluctuation in arithmetic unit 19, and displays the result on the display unit 21.
【0027】 [0027]
一方、水浸対物レンズ12には、本発明の以下述べるような液浸媒質供給装置が設けられている。 On the other hand, the objective lens 12 water immersion, the following describes such immersion medium supply device is provided in the present invention.
【0028】 [0028]
この場合において、水浸対物レンズ12とマイクロプレート5底面のカバーガラス5bとの隙間には、液浸媒質(純水)13が充填されている。 In this case, the gap between the water immersion objective 12 and the micro plate 5 the bottom surface of the cover glass 5b is immersion medium (pure water) 13 is filled. この液浸媒質13は、液浸媒質供給源としての給水ボトル22中に用意されている。 The immersion medium 13 is prepared in water bottles 22 as immersion medium supply source. この給水ボトル22には、液浸媒質供給手段を構成する給水パイプ23a、給水ポンプ24、給水パイプ23b、23cおよび給液ノズル(ここでは給水ノズル25)が設けられている。 The water supply bottle 22, a water supply pipe 23a constituting the immersion medium supply means, the water supply pump 24, water supply pipes 23b, 23c and the liquid supply nozzles (water supply nozzle 25 in this case) is provided. 給水ボトル22中の液浸媒質13が給水パイプ23aを介して給水ポンプ24に送出される。 Immersion medium 13 in the water bottles 22 are delivered to the water supply pump 24 through the water supply pipe 23a. 液浸媒質13は、給水パイプ23b、23cを経由して給水ノズル25より水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの隙間に供給される。 Immersion medium 13, the water supply pipe 23b, is supplied to the gap between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b from the water supply nozzle 25 via 23c. この場合、図4に示すように、カバーガラス5bと水浸対物レンズ12先端との距離lは、例えば1mm以下と極めて小さい。 In this case, as shown in FIG. 4, the distance l between the objective lens 12 tip immersion cover glass 5b and water, for example below a very small 1 mm. このため、この間に供給された液浸媒質13は、表面張力によってその場に保持される。 Therefore, the immersion medium 13 that is supplied during this time is held in place by surface tension. 給水パイプ23bと23cとの間には、温度制御手段としての温度制御装置26が設けられている。 Between the water supply pipe 23b and 23c, the temperature control device 26 as a temperature control means. この温度制御装置26は、液浸媒質13の温度を加熱または冷却して所定温度に調節する。 The temperature controller 26 is adjusted to a predetermined temperature by heating or cooling the temperature of the immersion medium 13. 温度制御装置26で温度調整された液浸媒質13が給水ノズル25側に供給される。 Immersion medium 13, which is temperature adjusted by the temperature controller 26 is supplied to the water supply nozzle 25 side.
【0029】 [0029]
水浸対物レンズ12の先端部には、液受け部27が設けられている。 The tip portion of the water immersion objective 12, the liquid receiving portion 27 is provided. 液受け部27は、図4に示すように水浸対物レンズ12の周囲に沿って設けられ、水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの隙間に保持しきれない液浸媒質13を受け止めるようになっている。 Liquid receiver 27, as receiving the immersion medium 13 is not provided along the circumference of the water immersion objective 12, completely held in the gap between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b as shown in FIG. 4 going on. 液受け部27には、排水口27aが設けられている。 The liquid receiver 27, the drain port 27a is provided. 排水口27aには、液浸媒質排出手段を構成する排水パイプ28、排水ポンプ29および排水ボトル30が設けられ、液受け部27で受け止められた液浸媒質13を排水パイプ28を介して排水ポンプ29に送出し、排水ポンプ29により排水ボトル30に回収できるようになっている。 The drain port 27a, the drainage pipe 28 constituting the immersion medium discharge means, drain pump 29 and the drain bottle 30 is provided, the drain pump via the drain pipe 28 the immersion medium 13 that is received by the liquid receiving portion 27 sent to 29, so that can be recovered in the drain bottle 30 by the drain pump 29.
【0030】 [0030]
給水ポンプ24、温度制御装置26、排水ポンプ29には、制御装置32が接続されている。 Water supply pump 24, the temperature control device 26, the drain pump 29, the control device 32 is connected. 制御装置32は、パソコン20からの指示により、給水ポンプ24、温度制御装置26、排水ポンプ29の動作を制御する。 Controller 32, an instruction from the personal computer 20, the water supply pump 24, the temperature controller 26 controls the operation of the drain pump 29.
【0031】 [0031]
なお、給水ボトル22と排水ボトル30は、装置本体1内部に配置されるが、これらは装置本体1外部から簡単に交換したり、給水ボトル22への液浸媒質13の補給ができるような配置構成となっている。 Incidentally, water bottles 22 and drainage bottle 30 is disposed inside the apparatus body 1, or easily replaced from the apparatus main body 1 externally, arranged as may replenish the immersion medium 13 into the water bottles 22 and it has a configuration. 勿論、給水ボトル22と排水ボトル30を装置本体1の外部に配置すれば、さらに給水ボトル22および排水ボトル30の交換を始め、給水ボトル22への液浸媒質13の補給を簡単にできる。 Of course, by arranging the water supply bottle 22 drainage bottle 30 to the outside of the apparatus main body 1, further start the exchange of water bottles 22 and the drain bottle 30 can be easily replenished immersion medium 13 into the water bottle 22.
【0032】 [0032]
このような構成において、まず、多数のウェル5aに蛍光標識された標本4を収容したマイクロプレート5を用意する。 In such a configuration, first, a microplate 5 containing the fluorescent labeled specimen 4 into a number of wells 5a. そして、このマイクロプレート5をマイクロプレート挿入窓1aより装置本体1内部に挿入して、XYステージ3上に載置する。 Then, the microplate 5 is inserted into the apparatus main body 1 from the microplate insertion window 1a, placed on the XY stage 3.
【0033】 [0033]
この状態で、XYステージ3が移動され、最初のウェル5aが水浸対物レンズ12の光軸上に位置されると、給水ボトル22中に用意された液浸媒質13が、給水パイプ23aを介して給水ポンプ24に送られ、給水パイプ23b、23cを経由して給水ノズル25より水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの隙間に供給される。 In this state, the movement XY stage 3, when the first well 5a is positioned on the optical axis of the objective lens 12 water immersion, the immersion medium 13 that is provided in the water bottle 22, via the water supply pipe 23a water supply pump is sent to 24, the water supply pipe 23b, is supplied to the gap between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b from the water supply nozzle 25 via 23c Te. この場合、液浸媒質13は、表面張力によって、その場に保持される。 In this case, the immersion medium 13 by surface tension, is held in place.
【0034】 [0034]
この時、液浸媒質13は、温度制御装置26により所定の温度に制御されている。 In this case, the immersion medium 13 is controlled to a predetermined temperature by temperature controller 26. これにより、液浸媒質13がカバーガラス5bに接触すると、液浸媒質13とカバーガラス5bの間での熱交換と、さらにカバーガラス5bと標本4の間での熱交換により、標本4は、所定温度に制御される。 Thus, the immersion medium 13 is brought into contact with the cover glass 5b, the heat exchange between the immersion medium 13 and the cover glass 5b, by further heat exchange between the cover glass 5b and the sample 4, sample 4, It is controlled to a predetermined temperature. この場合、カバーガラス5bには、厚さが0.17mm前後のものが用いられ、熱容量を回りの物質に比べ小さくしているので、標本4との熱交換に障害にはならず、逆に熱伝導性が良好であるので熱交換を有利にできる。 In this case, the cover glass 5b, thickness is used those of about 0.17 mm, it is made smaller than the heat capacity around the material, not the failure to heat exchange with the specimen 4, conversely because thermal conductivity is good it can be advantageous heat exchange.
【0035】 [0035]
この状態で、上述した蛍光検出の実行により、標本4の液中に浮遊する生物分子の蛍光が光検出器18で検出され、演算装置19で演算した揺らぎに基づいてパソコン20により生物分子の性質が分析されて、表示部21に表示される。 In this state, by executing the fluorescence detection as described above, the fluorescence of biomolecules floating in the liquid of the sample 4 is detected by the photodetector 18, the nature of the biological molecule by the personal computer 20 based on the calculated fluctuation in the operation unit 19 There is analyzed and displayed on the display unit 21.
【0036】 [0036]
最初の標本4の検査が終了すると、XYステージ3が動いて、次のウェル5aが水浸対物レンズ12の光軸上に位置され、同様な蛍光検出が実行される。 When the inspection of the first specimen 4 is completed, move the XY stage 3, following the well 5a is positioned on the optical axis of the objective lens 12 water immersion, similar fluorescence detection is performed.
【0037】 [0037]
この場合、XYステージ3の移動とともに、水浸対物レンズ12に対してカバーガラス5bが移動すると、水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの間で保持しきれなくなった液浸媒質13が落下し、その液浸媒質13が水浸対物レンズ12の周囲に設けられた液受け部27で受け止められる。 In this case, with the movement of the XY stage 3, when the cover glass 5b to water immersion objective 12 is moved, the immersion medium 13 that is no longer completely retained between water immersion objective 12 and the cover glass 5b to fall , it is received by the liquid receiving part 27 in which the immersion medium 13 is provided around the objective lens 12 water immersion. そして、液浸媒質13は排水口27aより排水パイプ28に送られて、排水ポンプ29によって排水ボトル30に回収される。 The immersion medium 13 is sent to the drain pipe 28 from the discharge port 27a, it is collected in the drain bottle 30 by the drain pump 29. これと同時に、給水ノズル25より一定量の液浸媒質13が水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの隙間に補給される。 At the same time, a certain amount of the immersion medium 13 from the water supply nozzle 25 is supplied to the gap between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b.
【0038】 [0038]
なお、水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの間への液浸媒質13の補給は、一定時間ごとに所定量ずつ行うようにしてもよい。 Note that supply of the immersion medium 13 into between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b may be performed by a predetermined amount every predetermined time.
【0039】 [0039]
以下、同様にして、マイクロプレート5の全てのウェル5aについて、蛍光検出が実行され、その分析結果がパソコン20により表示部21に表示される。 Thereafter, in the same manner for all the wells 5a of the micro plate 5, fluorescence detection is performed, the analysis result is displayed on the display unit 21 by the personal computer 20.
【0040】 [0040]
従って、上記の実施の形態によれば、水浸対物レンズ12に用いられる液浸媒質13に着目し、水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの隙間に充填される液浸媒質13を予め所定の温度に調整して供給するようにしたので、マイクロプレート5のウェル5aに入れられた全ての標本4の温度を、液浸媒質13の予め調整された所定温度に制御することができる。 Therefore, according to the above embodiment, paying attention to the immersion medium 13 used in the water-immersion objective lens 12, the immersion medium 13 that is filled in the gap between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b previously given since then supplied to adjust the temperature, it is possible to control the temperature of all samples 4 placed in the wells 5a of the micro plate 5, the preconditioned predetermined temperature of the immersion medium 13. これにより、標本4の液体中での浮遊分子運動、つまり温度変化により、その運動量が変化するブラウン運動を常に一定に維持することができるので、マイクロプレート5の全てのウェル5a内の標本4に対して安定した蛍光検出を行うことができる。 Thus, the floating molecular movement in a liquid sample 4, the words change in temperature, since the Brownian motion in which the momentum changes can be always maintained constant, the specimen 4 in all wells 5a of the microplate 5 it is possible to perform a stable fluorescence detection for. つまり、生物標本の観察の場合には、適切な形態を観察できるようになり、分子運動を捉える蛍光測光において、安定したデータが得られ、正しい判定が可能となる。 That is, when the observation of biological specimens, will be able to observe a suitable form, in the fluorescence measurement to capture the molecular motion, stable data is obtained, it is possible to correct determination.
【0041】 [0041]
検査方法の例としては、蛍光相関分析法(Fluorescence Correlation spectroscopy)があり、蛍光強度の揺らぎを解析することで拡散強度に関する情報と分子の数に関する情報を得ることができる。 Examples of the inspection method, there is fluorescence correlation spectroscopy (Fluorescence Correlation spectroscopy), it is possible to obtain information about the number of information and molecules for diffusion intensity by analyzing the fluctuation of fluorescent intensity. この装置は、蛍光相関分光法などの蛍光分子検査装置に用いられる。 This device is used in a fluorescent molecule inspection device such as fluorescence correlation spectroscopy.
【0042】 [0042]
温度制御範囲は、純粋を使っているので、0〜100℃が最大範囲となり、温度の例を挙げると、海水を用いた海水生物では約25℃、動物たんぱく質などの生物細胞がそのまま生きたままの状態では37℃、DNAの場合は80℃の場合もある。 Since the temperature control range, are using pure, 0 to 100 ° C. is a maximum range, and examples of temperature, about 25 ° C. for seawater organisms using seawater, while the biological cells such as animal protein is intact living 37 ° C. in a state, in the case of DNA in some cases of 80 ° C.. 生物細胞が生きたままの状態の温度範囲は37℃±1℃以下が望ましい。 Temperature range remains alive biological cells is desirably 37 ° C. ± 1 ° C. or less. 温度の精度は、検査目的と対象物の温度感度によって適宜選択する。 Accuracy of the temperature is appropriately selected depending on the temperature sensitivity of the inspection object and the object.
【0043】 [0043]
また、水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの隙間へ供給される液浸媒質13の量を多く設定することにより、標本4の温度制御を安定して行うことができ、また、液浸媒質13の供給、排出を頻繁に繰り返すことにより、標本4の温度制御を簡単に変更することもできるので、精度のよい温度制御を行うこともできる。 Further, by setting larger amount of the immersion medium 13 supplied to the gap between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b, it is possible to control the temperature of the specimen 4 stably, also immersion medium 13 supply, by frequently repeating the discharge, so it is also possible to easily change the temperature control of the sample 4, it is also possible to perform accurate temperature control.
【0044】 [0044]
また、水浸対物レンズ12に用いられる液浸媒質13を利用して、この液浸媒質13の温度を制御する構成としているので、装置全体の構成を簡単にでき、価格的にも安価にできる。 Moreover, by utilizing the immersion medium 13 used in the objective lens 12 water immersion, since the configuration for controlling the temperature of the immersion medium 13 can be a structure of the entire apparatus easily, even of price can be less expensive .
【0045】 [0045]
なお、上述した実施の形態では、給水パイプ23bと23cとの間に温度制御装置26を配置したが、これに代えて、または同時に、給水ボトル22に近接させて、給水ボトル22全体を温度制御するボトル温度制御器31を設けるようにしてもよい。 In the embodiment described above, it was placed a temperature control device 26 between the water supply pipe 23b and 23c, instead of this, or simultaneously, in close proximity to the water bottle 22, a water supply bottle 22 overall temperature control it may be provided bottle temperature controller 31.
【0046】 [0046]
また、水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの隙間に保持される液浸媒質13の温度を常時検出するセンサS を設け、このセンサS の出力により温度制御装置26を制御して水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの間の液浸媒質13が常に一定温度になるように制御するようにしてもよい。 Furthermore, the sensor S T which always detects the temperature of the immersion medium 13 which is held in the gap between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b provided, by controlling the temperature controller 26 by the output of the sensor S T water immersion medium 13 between the objective lens 12 and the cover glass 5b immersion always may be controlled to be constant temperature.
【0047】 [0047]
さらに、上述した実施の形態では、給水ボトル22の液浸媒質13を水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの隙間に供給し、余分となった液浸媒質13を排水ボトル30に回収するようにしたが、水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの間に供給される液浸媒質13を循環させる構成としてもよい。 Furthermore, in the embodiment described above, so that the immersion medium 13 of water bottles 22 supplied to the gap between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b, recovering immersion medium 13 became superfluous drainage bottle 30 Although the the, the immersion medium 13 to be supplied between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b may be configured to circulate. この場合、液浸媒質13の循環により、異物などが液浸媒質13に混入する可能性があるので、フィルタなどを用いて、異物等を確実に除去する必要がある。 In this case, the circulation of the immersion medium 13, since the foreign matter is likely to be mixed into the immersion medium 13, such as by using a filter, it is necessary to reliably remove the foreign matter.
【0048】 [0048]
さらに、装置本体1内部の温度が外部温度より数度高いことに注目して、温度制御装置26に代えて熱交換器を設け、この熱交換器により液浸媒質13を装置内の温度と同じになるように制御して、水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの隙間に供給するようにしてもよい。 Moreover, by focusing on a temperature inside the apparatus main body 1 to be a few degrees higher than the outside temperature, a heat exchanger provided in place of the temperature control device 26, the same as the temperature in the apparatus the immersion medium 13 by the heat exchanger controlled to so as to, may be supplied to the gap between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b.
【0049】 [0049]
さらに、上述した実施の形態では、液浸媒質13に純水を使用した水浸方式の例を述べたが、オイルを使用した油浸方式についても同様に適用できる。 Furthermore, in the embodiment described above has dealt with the cases of water immersion method using a pure water as the immersion medium 13 can be similarly applied to oil immersion method using an oil.
【0050】 [0050]
なお、給水ノズル25は、液浸媒質13を水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの隙間に供給するが、この給水ノズル25は、水浸対物レンズ12の外側に着脱可能に保持されている。 Incidentally, the water supply nozzle 25 supplies the immersion medium 13 into the gap between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b is the water supply nozzle 25 is detachably held on the outside of the water immersion objective 12 . 給水ノズル25は、水浸対物レンズ12外枠に埋設しても良い。 Water nozzle 25 may be embedded in the water immersion objective 12 the outer frame. 給水ノズル25は倒立顕微鏡2で保持しても良く、又は水浸対物レンズ1212の先端周辺部に設置された液受け部27に保持しても良い。 Water nozzle 25 may be held in an inverted microscope 2, or the tip peripheral portion of the immersion objective lens 1212 may be held in the installed liquid receiver 27. また、給水ノズル25は、図では1つになっているが、例えば、3つ、5つなど複数にしても良い。 Also, the water supply nozzle 25 is has become one in the figure, for example, three may be a plurality, such as five.
【0051】 [0051]
(第1の実施の形態の変形例) (Modification of First Embodiment)
次に、本発明の第1の実施の形態の変形例を説明する。 Next, a modified example of the first embodiment of the present invention.
【0052】 [0052]
この変形例は、倒立型顕微鏡に本発明の第1の実施の形態に係る液浸媒質供給装置を適用した例を示している。 This modification shows an example of applying the immersion medium supply apparatus according to a first embodiment of the present invention in an inverted microscope.
【0053】 [0053]
図5は、第1の実施の形態の変形例の概略構成を示すものである。 Figure 5 shows a schematic configuration of a modification of the first embodiment.
【0054】 [0054]
図5において、顕微鏡本体41の前側固定部41aと後側固定部41b上には、ステージ42が配置されている。 In Figure 5, the front side fixing portion 41a and the rear fixing portion on 41b of the microscope body 41, the stage 42 is disposed.
【0055】 [0055]
ステージ42上にはシャーレ標本43が載置されている。 On the stage 42 is a petri dish specimen 43 is placed. このシャーレ標本43は、底面にカバーガラスを有するもので、シャーレ内には生物標本が入れられている。 The dish specimen 43 is one having the cover glass on the bottom, biological specimen is placed in the dish.
【0056】 [0056]
そして、図示しない落射照明光源からの光束が、水浸対物レンズ44を介してシャーレ標本43の底面(カバーガラス)側から生物標本に照射される。 Then, the light beam from the epi-illumination light source (not shown) is irradiated on the biological specimen from the bottom (cover glass) side of the petri dish specimen 43 through a water immersion objective lens 44. また、シャーレ標本43からの光は、水浸対物レンズ44を介して図示しないリレー光学系によってリレーされた後に観察鏡筒45に取り付けられた接眼レンズ46に入射して、目視観察される。 Further, the light from the dish specimen 43 is incident on the eyepiece 46 which is attached to the observation barrel 45 after being relayed by a relay optical system (not shown) through a water immersion objective lens 44, is visually observed.
【0057】 [0057]
この場合も、水浸対物レンズ44とシャーレ標本43底面のカバーガラスとの隙間には、液浸媒質(純水)47が充填されている。 Again, the gap between the water immersion objective 44 and the petri dish specimen 43 bottom surface of the cover glass, the immersion medium (pure water) 47 is filled. この液浸媒質47は、図1で述べたものと同様に、図示しない温度制御装置により所定の温度に制御されていて、給水パイプ48を介して給水ノズル49より水浸対物レンズ44とカバーガラスとの隙間に供給され、表面張力によってその場に保持される。 The immersion medium 47, similar to those described in FIG. 1, it is controlled to a predetermined temperature by a temperature control device (not shown), an objective lens 44 and the cover glass immersion water from the water supply nozzle 49 through the water supply pipe 48 is supplied to the gap between, it is held in place by surface tension. また、水浸対物レンズ44とカバーガラスとの間に保持しきれない液浸媒質47は、液受け部50を介して排水パイプ51より排出される。 Also, the immersion medium 47 that can not be retained between the water immersion objective 44 and the cover glass is discharged from the drain pipe 51 through the liquid receiving portion 50.
【0058】 [0058]
この場合、液浸媒質47の供給は、電動式であっても、手動ポンプを用いた手動式であってもよい。 In this case, the supply of the immersion medium 47 can be motorized or may be a manual using a hand pump.
【0059】 [0059]
なお、図5において、透過照明光源52と、コンデンサレンズ53も示されている。 In FIG. 5, a transmission illumination light source 52, is also shown condenser lens 53.
【0060】 [0060]
本変形例に拠れば、水浸対物レンズ44とシャーレ標本43底面のカバーガラスとの隙間に充填される液浸媒質47を予め所定の温度に調整して供給することができるので、シャーレ標本43、つまりシャーレに入れた生物標本の温度を液浸媒質47の予め調整された一定温度に制御することができ、質の高い生物標本の観察を行うことができる。 According to this modification, it is possible to supply preconditioned to a predetermined temperature immersion medium 47 is filled in the gap between the water immersion objective 44 and the petri dish specimen 43 the bottom surface of the cover glass, dish specimen 43 , i.e. it is possible to control the temperature of the biological specimen placed in a Petri dish on preconditioned constant temperature of the immersion medium 47, it is possible to observe the quality biological specimen.
【0061】 [0061]
(第2の実施の形態) (Second Embodiment)
次に、本発明の第2の実施の形態を説明する。 Next, a second embodiment of the present invention.
【0062】 [0062]
図6は、本発明の液浸媒質供給装置が適用される培養顕微鏡の概略構成を示している。 Figure 6 shows a schematic configuration of a culture microscope immersion medium supply apparatus of the present invention is applied. 図6において、第1の実施形態と同じ構成には、同じ符号を付している。 6, the same components as the first embodiment are denoted by the same reference numerals.
【0063】 [0063]
図6において、装置本体1内部には、倒立顕微鏡2が設けられている。 6, inside the apparatus main body 1, an inverted microscope 2 is provided. 倒立顕微鏡2には、ステージ受け2′を介してXYステージ3が設けられている。 The inverted microscope 2, XY stage 3 is provided via the stage receiver 2 '. このXYステージ3にはラックR XY 、ピニオンP XY及び駆動用のモータM XYが設けられている。 Rack R XY, the motor M XY pinion P XY and drive is provided in the XY stage 3. このXYステージ3上には標本4を入れる多数のウェル5aを有するマイクロプレート5が載置されている。 This on the XY stage 3 is microplate 5 having a number of wells 5a put samples 4 are placed.
【0064】 [0064]
マイクロプレート5は、樹脂製の標本容器であって、図3に示すように、標本4を入れるウェル5aが整然と多数個配列されている。 Microplate 5 is a specimen container made of resin, as shown in FIG. 3, wells 5a put samples 4 are orderly plurality sequences. また、マイクロプレート5の底面には、透明部材として、例えば厚さ0.17mm前後のカバーガラス5bが配置されている。 Further, the bottom surface of the microplate 5, as a transparent member, a thickness of 0.17mm around the cover glass 5b is disposed. これにより、マイクロプレート5の各ウェル5aは、図4に示すように、下面からの倒立観察に適するように底面にカバーガラス5bが接着されている構造をしている。 Thus, each well 5a of the micro plate 5, as shown in FIG. 4, the cover glass 5b to the bottom surface to suit the inverted observation from the lower surface is a structure that is bonded. なお、これらウェル5aに入れられる標本4は、蛍光標識された生物細胞が培養液中で生きたままの状態にしてある。 Incidentally, the sample 4 to be taken into these wells. 5a, are the remains fluorescently labeled biological cells alive in culture.
【0065】 [0065]
装置本体1の正面には、図2に示すようにマイクロプレート挿入窓1aが設けられている。 On the front of the apparatus main body 1, microplate insertion window 1a is provided as shown in FIG. マイクロプレート挿入窓1aは、装置本体1へのマイクロプレート5の出し入れを行うための窓である。 Microplate insertion window 1a is a window for performing the out of microplate 5 to the device body 1. マイクロプレート5をマイクロプレート挿入窓1aより装置本体1内部に挿入すると、XYステージ3上に載置され、この状態で自動的に標本検査を行うことができる。 Upon insertion of the microplate 5 into the apparatus main body 1 from the microplate insertion window 1a, it is placed on the XY stage 3, can be automatically specimens examined in this state.
【0066】 [0066]
光源6′からの照明光は、倒立顕微鏡2に導入される。 Illumination light from the light source 6 'is introduced into the inverted microscope 2. 照明光は、励起光エキサイタフィルタ14′、及びレンズ10′を通ってダイクロイックミラー11で反射され、対物レンズ12に導入される。 Illumination light, excitation light exciter filter 14 ', and the lens 10' through is reflected by the dichroic mirror 11, it is introduced into the objective lens 12.
【0067】 [0067]
この場合、対物レンズ12には、標本4の液中の生物細胞に集光できるように集光能力を高めた液浸対物レンズ(図示例では水浸対物レンズ)が使用されている(以下、水浸対物レンズ12として説明する。)。 In this case, the objective lens 12, the immersion objective lens having an increased condensability to allow the condenser to the biological cell in the liquid of the sample 4 (in the illustrated example water immersion objective) is used (hereinafter, is described as a water immersion objective lens 12.). また、水浸対物レンズ12は、図4に示すように、マイクロプレート5底面のカバーガラス5bに近接して配置されている。 The water-immersion objective lens 12, as shown in FIG. 4, are arranged in proximity to the cover glass 5b microplate 5 bottom. 水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの間には、液浸媒質(純水)13が充填されている。 Between water immersion objective 12 and the cover glass 5b is immersion medium (pure water) 13 is filled.
【0068】 [0068]
水浸対物レンズ12を透過された励起光は、液浸媒質13を通り、カバーガラス5bを通ってマイクロプレート5のウェル5a中に進み、標本4の液中の生物細胞に集光される。 Excitation light transmitted through the objective lens 12 water immersion passes the immersion medium 13, the process proceeds in the wells 5a of the micro plate 5 through the cover glass 5b, is focused on the biological cell in the liquid of the sample 4. ここで、標本4の液中の蛍光標識された生物細胞が、励起光の領域内に存在すると、蛍光を発する。 Here, when the biological cells fluorescently labeled in the liquid sample 4 is present in the region of the excitation light, it emits fluorescence.
【0069】 [0069]
この蛍光は、水浸対物レンズ12を通り、ダイクロイックミラー11を透過して、励起光バリアフィルタ14を通り、結像レンズ15により水浸対物レンズ12による蛍光の拡大像が形成され、反射ミラー16で折り返して、固体撮像素子(CCD)などの撮像素子18′に到達する。 The fluorescence passes through the water immersion objective 12 passes through the dichroic mirror 11, passes through the excitation light barrier filter 14, enlarged image of the fluorescence by the water immersion objective 12 is formed by the imaging lens 15, reflecting mirror 16 folded in, and reaches the image pickup device 18 ', such as the solid-state imaging device (CCD). 水浸対物レンズ12が倒立顕微鏡2との間で上下動するために、水浸対物レンズ12側にラックR が設けられており、倒立顕微鏡にピニオンP 及びモータM が設けられている。 For water immersion objective 12 moves up and down between the inverted microscope 2, the 12-side water immersion objective rack R Z is provided, the pinion P Z and the motor M Z is provided an inverted microscope .
【0070】 [0070]
この場合、標本4の液中の蛍光標識された生物細胞は、水浸対物レンズ12で拡大され、撮像素子18′で、生物細胞の蛍光像を撮像することとなる。 In this case, the fluorescent labeled biological cells in the liquid specimen 4 is enlarged by the water immersion objective 12, the imaging device 18 ', and imaging the fluorescence image of the biological cells.
【0071】 [0071]
撮像素子18′には、装置本体1に設けられた中央処理手段としてのパソコン20が接続されている。 The image pickup device 18 ', the personal computer 20 as a central processing unit provided in the apparatus main body 1 is connected. このパソコン20には、モニター等の表示部21とキーボードなどの入力装置33が接続されている。 The personal computer 20, an input device 33 such as a display 21 and a keyboard, such as a monitor is connected.
【0072】 [0072]
一方、水浸対物レンズ12には、本発明の以下述べるような液浸媒質供給装置が設けられている。 On the other hand, the objective lens 12 water immersion, the following describes such immersion medium supply device is provided in the present invention.
【0073】 [0073]
この場合において、水浸対物レンズ12とマイクロプレート5底面のカバーガラス5bとの隙間には、液浸媒質(純水)13が充填されている。 In this case, the gap between the water immersion objective 12 and the micro plate 5 the bottom surface of the cover glass 5b is immersion medium (pure water) 13 is filled. この液浸媒質13は、液浸媒質供給源としての給水ボトル22中に用意されている。 The immersion medium 13 is prepared in water bottles 22 as immersion medium supply source. この給水ボトル22には、液浸媒質供給手段を構成する給水パイプ23a、給水ポンプ24、給水パイプ23b、23cおよび給液ノズル(ここでは給水ノズル25)が設けられている。 The water supply bottle 22, a water supply pipe 23a constituting the immersion medium supply means, the water supply pump 24, water supply pipes 23b, 23c and the liquid supply nozzles (water supply nozzle 25 in this case) is provided. 給水ボトル22中の液浸媒質13が給水パイプ23aを介して給水ポンプ24に送出される。 Immersion medium 13 in the water bottles 22 are delivered to the water supply pump 24 through the water supply pipe 23a. 液浸媒質13は、給水パイプ23b、23cを経由して給水ノズル25より水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの隙間に供給される。 Immersion medium 13, the water supply pipe 23b, is supplied to the gap between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b from the water supply nozzle 25 via 23c. この場合、図4に示すように、カバーガラス5bと水浸対物レンズ12先端との距離lは、例えば1mm以下と極めて小さい。 In this case, as shown in FIG. 4, the distance l between the objective lens 12 tip immersion cover glass 5b and water, for example below a very small 1 mm. このため、この間に供給された液浸媒質13は、表面張力によってその場に保持される。 Therefore, the immersion medium 13 that is supplied during this time is held in place by surface tension. 給水パイプ23bと23cとの間には、温度制御手段としての温度制御装置26が設けられている。 Between the water supply pipe 23b and 23c, the temperature control device 26 as a temperature control means. この温度制御装置26は、液浸媒質13の温度を加熱または冷却して所定温度に調節する。 The temperature controller 26 is adjusted to a predetermined temperature by heating or cooling the temperature of the immersion medium 13. 温度制御装置26で温度調整された液浸媒質13が給水ノズル25側に供給される。 Immersion medium 13, which is temperature adjusted by the temperature controller 26 is supplied to the water supply nozzle 25 side.
【0074】 [0074]
水浸対物レンズ12の先端部には、液受け部27が設けられている。 The tip portion of the water immersion objective 12, the liquid receiving portion 27 is provided. 液受け部27は、図4に示すように水浸対物レンズ12の周囲に沿って設けられ、水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの隙間に保持しきれない液浸媒質13を受け止めるようになっている。 Liquid receiver 27, as receiving the immersion medium 13 is not provided along the circumference of the water immersion objective 12, completely held in the gap between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b as shown in FIG. 4 going on. 液受け部27には、排水口27aが設けられている。 The liquid receiver 27, the drain port 27a is provided. 排水口27aには、液浸媒質排出手段を構成する排水パイプ28、排水ポンプ29および排水ボトル30が設けられ、液受け部27で受け止められた液浸媒質13を排水パイプ28を介して排水ポンプ29に送出し、排水ポンプ29により排水ボトル30に回収できるようになっている。 The drain port 27a, the drainage pipe 28 constituting the immersion medium discharge means, drain pump 29 and the drain bottle 30 is provided, the drain pump via the drain pipe 28 the immersion medium 13 that is received by the liquid receiving portion 27 sent to 29, so that can be recovered in the drain bottle 30 by the drain pump 29.
【0075】 [0075]
給水ポンプ24、温度制御装置26、排水ポンプ29には、制御装置32が接続されている。 Water supply pump 24, the temperature control device 26, the drain pump 29, the control device 32 is connected. 制御装置32は、パソコン20からの指示により、給水ポンプ24、温度制御装置26、排水ポンプ29の動作を制御する。 Controller 32, an instruction from the personal computer 20, the water supply pump 24, the temperature controller 26 controls the operation of the drain pump 29. 更に、液浸媒質13に設けられ、水浸対物レンズ12に固定された熱電対型の媒質温度センサS が、制御装置32が接続されている。 Further, provided in the immersion medium 13, the medium temperature sensor S T thermocouple type fixed to the water immersion objective 12, the control device 32 is connected. この媒質温度センサS の温度を制御装置32にフィードバックすることにより、温度制御装置26の温度が制御される。 By feeding back the temperature of the medium temperature sensor S T to the controller 32, the temperature of the temperature control device 26 is controlled.
【0076】 [0076]
なお、給水ボトル22と排水ボトル30は、装置本体1内部に配置されるが、これらは装置本体1外部から簡単に交換したり、給水ボトル22への液浸媒質13の補給ができるような配置構成となっている。 Incidentally, water bottles 22 and drainage bottle 30 is disposed inside the apparatus body 1, or easily replaced from the apparatus main body 1 externally, arranged as may replenish the immersion medium 13 into the water bottles 22 and it has a configuration. 勿論、給水ボトル22と排水ボトル30を装置本体1の外部に配置すれば、さらに給水ボトル22および排水ボトル30の交換を始め、給水ボトル22への液浸媒質13の補給を簡単にできる。 Of course, by arranging the water supply bottle 22 drainage bottle 30 to the outside of the apparatus main body 1, further start the exchange of water bottles 22 and the drain bottle 30 can be easily replenished immersion medium 13 into the water bottle 22.
【0077】 [0077]
更に、装置本体1の外部に温風機34及び炭酸ガス(CO )供給装置、装置本体1の外部に加湿水37及びこれを加熱するヒータ36が設けられている。 Further, a heater 36 for heating the outside of the apparatus main body 1 fan heater 34 and carbon dioxide (CO 2) supply device, to the outside of the apparatus main body 1 humidifying water 37 and which are provided. この温風機34とヒータ36には制御装置32が接続されている。 Controller 32 is connected to the hot air machine 34 and the heater 36. 装置本体1内部に設けられた熱電対型の温湿度センサS THが、制御装置32に接続されている。 Temperature and humidity sensor S TH thermocouple type which is provided inside device main body 1 is connected to the controller 32.
【0078】 [0078]
このような構成において、まず、多数のウェル5aに蛍光標識された標本4を収容したマイクロプレート5を用意する。 In such a configuration, first, a microplate 5 containing the fluorescent labeled specimen 4 into a number of wells 5a. そして、このマイクロプレート5をマイクロプレート挿入窓1aより装置本体1内部に挿入して、XYステージ3上に載置する。 Then, the microplate 5 is inserted into the apparatus main body 1 from the microplate insertion window 1a, placed on the XY stage 3.
【0079】 [0079]
この状態で、XYステージ3が移動され、最初のウェル5aが水浸対物レンズ12の光軸上に位置されると、給水ボトル22中に用意された液浸媒質13が、給水パイプ23aを介して給水ポンプ24に送られ、給水パイプ23b、23cを経由して給水ノズル25より水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの隙間に供給される。 In this state, the movement XY stage 3, when the first well 5a is positioned on the optical axis of the objective lens 12 water immersion, the immersion medium 13 that is provided in the water bottle 22, via the water supply pipe 23a water supply pump is sent to 24, the water supply pipe 23b, is supplied to the gap between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b from the water supply nozzle 25 via 23c Te. この場合、液浸媒質13は、表面張力によって、その場に保持される。 In this case, the immersion medium 13 by surface tension, is held in place.
【0080】 [0080]
この時、液浸媒質13は、温度制御装置26により所定の温度に制御されている。 In this case, the immersion medium 13 is controlled to a predetermined temperature by temperature controller 26. これにより、液浸媒質13がカバーガラス5bに接触すると、液浸媒質13とカバーガラス5bの間での熱交換と、さらにカバーガラス5bと標本4の間での熱交換により、標本4は、所定温度に制御される。 Thus, the immersion medium 13 is brought into contact with the cover glass 5b, the heat exchange between the immersion medium 13 and the cover glass 5b, by further heat exchange between the cover glass 5b and the sample 4, sample 4, It is controlled to a predetermined temperature. この場合、カバーガラス5bには、厚さが0.17mm前後のものが用いられ、熱容量を回りの物質に比べ小さくしているので、標本4との熱交換に障害にはならず、逆に熱伝導性が良好であるので熱交換を有利にできる。 In this case, the cover glass 5b, thickness is used those of about 0.17 mm, it is made smaller than the heat capacity around the material, not the failure to heat exchange with the specimen 4, conversely because thermal conductivity is good it can be advantageous heat exchange.
【0081】 [0081]
炭酸ガス(CO )供給装置によって、標本4の液中のPH濃度が調整されている。 The carbon dioxide (CO 2) supply device, the PH concentration in the liquid of the sample 4 is adjusted. これは、CO を本体1の内部に供給すると、結果的に標本のPHを調整できるためである。 This is supplied to CO 2 in the body 1, in order to adjust the PH of the results in the specimen. ヒータ36によって加熱された加湿水37が湿度の飽和(100%)前で温湿度センサS THの値をフィードバックして制御され、標本4の乾燥を防いでいる。 Humidifying water 37 heated by the heater 36 is controlled by feeding back the value of the temperature and humidity sensor S TH before saturation humidity (100%), thereby preventing drying of the sample 4.
【0082】 [0082]
温風機34によって温湿度センサS THの値をフィードバックして制御され、倒立顕微鏡2、ステージ受け2′及びXYステージ3が液浸媒質13の温度と略同じに制御されている。 It is controlled by feeding back the value of the temperature and humidity sensor S TH by Yutakakazeki 34, inverted microscope 2, stage receiver 2 'and the XY stage 3 is substantially the same controlled temperature of the immersion medium 13. なお、生物細胞の一例では、温度は37℃を中心に±1℃の間で保たれる。 Note that in the example of the biological cells, the temperature is kept between ± 1 ° C. to about the 37 ° C..
【0083】 [0083]
この状態で、上述した蛍光観察の実行により、標本4の液中の生物細胞の蛍光が撮像素子18′で撮像され、パソコン20を介して生物細胞が表示部21に表示される。 In this state, by executing the above-mentioned fluorescence observation, fluorescence of biological cells in the liquid of the sample 4 by the imaging element 18 ', biological cells through the personal computer 20 is displayed on the display unit 21.
【0084】 [0084]
最初の標本4の検査が終了すると、XYステージ3が動いて、次のウェル5aが水浸対物レンズ12の光軸上に位置され、同様な蛍光観察が実行される。 When the inspection of the first specimen 4 is completed, move the XY stage 3, following the well 5a is positioned on the optical axis of the objective lens 12 water immersion, similar fluorescence observation is performed.
【0085】 [0085]
この場合、XYステージ3の移動とともに、水浸対物レンズ12に対してカバーガラス5bが移動すると、水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの間で保持しきれなくなった液浸媒質13が落下し、その液浸媒質13が水浸対物レンズ12の周囲に設けられた液受け部27で受け止められる。 In this case, with the movement of the XY stage 3, when the cover glass 5b to water immersion objective 12 is moved, the immersion medium 13 that is no longer completely retained between water immersion objective 12 and the cover glass 5b to fall , it is received by the liquid receiving part 27 in which the immersion medium 13 is provided around the objective lens 12 water immersion. そして、液浸媒質13は排水口27aより排水パイプ28に送られて、排水ポンプ29によって排水ボトル30に回収される。 The immersion medium 13 is sent to the drain pipe 28 from the discharge port 27a, it is collected in the drain bottle 30 by the drain pump 29. これと同時に、給水ノズル25より一定量の液浸媒質13が水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの隙間に補給される。 At the same time, a certain amount of the immersion medium 13 from the water supply nozzle 25 is supplied to the gap between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b.
【0086】 [0086]
以下、同様にして、マイクロプレート5の全てのウェル5aについて、蛍光観察が実行され、生物細胞がパソコン20により表示部21に表示される。 Thereafter, in the same manner for all the wells 5a of the micro plate 5, the fluorescence observation is performed, the biological cells are displayed on the display unit 21 by the personal computer 20.
【0087】 [0087]
なお、マイクロプレート5のXY移動及び焦点合わせは、入力装置33からの指示によって、パソコン20を介して制御装置32からXY移動の駆動用モータM XYや焦点合わせ用のモータM によって行われる。 Incidentally, XY movement and focusing of the microplate 5, by an instruction from the input device 33 is performed by the motor M Z for driving the motor M XY and focusing of the XY moving from the controller 32 via the computer 20. 入力装置33からの指示を制御装置32に直接送っても良い。 It may be sent directly to the controller 32 an instruction from the input device 33.
【0088】 [0088]
従って、上記の実施の形態によれば、水浸対物レンズ12に用いられる液浸媒質13に着目し、水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの隙間に充填される液浸媒質13を予め所定の温度に調整して供給するようにしたので、マイクロプレート5のウェル5aに入れられた全ての標本4の温度を、液浸媒質13の予め調整された所定温度に制御することができる。 Therefore, according to the above embodiment, paying attention to the immersion medium 13 used in the water-immersion objective lens 12, the immersion medium 13 that is filled in the gap between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b previously given since then supplied to adjust the temperature, it is possible to control the temperature of all samples 4 placed in the wells 5a of the micro plate 5, the preconditioned predetermined temperature of the immersion medium 13. また、液浸媒質13によって水浸対物レンズ12も所定の温度と略同じになるため、水浸対物レンズ12の影響が非常に少なくなる。 Further, since the objective lens 12 water immersion by immersion medium 13 becomes a predetermined temperature substantially the same, the influence of water immersion objective 12 is very small. 温風機34によっても倒立顕微鏡2及び標本4の温度が所定の温度に保たれ、水浸対物レンズ12も所定の温度と略同じになる。 Temperature of the inverted microscope 2 and the sample 4 by Yutakakazeki 34 is maintained at a predetermined temperature, the water immersion objective 12 is also at a predetermined temperature substantially the same.
【0089】 [0089]
これにより、標本4の液体中の生物細胞を常に一定の温度に維持することができるので、マイクロプレート5の全てのウェル5a内の標本4に対して安定した蛍光観察を行うことができる。 Thus, it is possible to maintain the biological cell in a liquid sample 4 always at a constant temperature, it is possible to perform a stable fluorescence observed for the specimen 4 in all wells 5a of the micro plate 5.
【0090】 [0090]
また、水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの隙間へ供給される液浸媒質13の量を多く設定することにより、標本4の温度制御を安定して行うことができ、また、液浸媒質13の供給、排出を頻繁に繰り返すことにより、標本4の温度制御を簡単に変更することもできるので、精度のよい温度制御を行うこともできる。 Further, by setting larger amount of the immersion medium 13 supplied to the gap between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b, it is possible to control the temperature of the specimen 4 stably, also immersion medium 13 supply, by frequently repeating the discharge, so it is also possible to easily change the temperature control of the sample 4, it is also possible to perform accurate temperature control.
【0091】 [0091]
なお、上述した実施の形態では、給水パイプ23bと23cとの間に温度制御装置26を配置したが、これに代えて、または同時に、給水ボトル22全体を温度制御するボトル温度制御器31を設けるようにしてもよい。 In the embodiment described above, it was placed a temperature control device 26 between the water supply pipe 23b and 23c, instead of this, or simultaneously, providing the bottle temperature controller 31 for temperature control the entire water bottle 22 it may be so.
【0092】 [0092]
さらに、上述した実施の形態では、給水ボトル22の液浸媒質13を水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの隙間に供給し、余分となった液浸媒質13を排水ボトル30に回収するようにしたが、水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの間に供給される液浸媒質13を循環させる構成としてもよい。 Furthermore, in the embodiment described above, so that the immersion medium 13 of water bottles 22 supplied to the gap between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b, recovering immersion medium 13 became superfluous drainage bottle 30 Although the the, the immersion medium 13 to be supplied between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b may be configured to circulate. この場合、液浸媒質13の循環により、異物などが液浸媒質13に混入する可能性があるので、フィルタなどを用いて、異物等を確実に除去する必要がある。 In this case, the circulation of the immersion medium 13, since the foreign matter is likely to be mixed into the immersion medium 13, such as by using a filter, it is necessary to reliably remove the foreign matter.
【0093】 [0093]
さらに、装置本体1内部の温度が外部温度より数度高いことに注目して、温度制御装置26に代えて熱交換器を設け、この熱交換器により液浸媒質13を装置内の温度と同じになるように制御して、水浸対物レンズ12とカバーガラス5bとの隙間に供給するようにしてもよい。 Moreover, by focusing on a temperature inside the apparatus main body 1 to be a few degrees higher than the outside temperature, a heat exchanger provided in place of the temperature control device 26, the same as the temperature in the apparatus the immersion medium 13 by the heat exchanger controlled to so as to, may be supplied to the gap between the water immersion objective 12 and the cover glass 5b.
【0094】 [0094]
さらに、上述した実施の形態では、液浸媒質13に純水を使用した水浸方式の例を述べたが、オイルを使用した油浸方式についても同様に適用できる。 Furthermore, in the embodiment described above has dealt with the cases of water immersion method using a pure water as the immersion medium 13 can be similarly applied to oil immersion method using an oil.
【0095】 [0095]
なお、上述した実施の形態では、倒立型顕微鏡の場合を述べたが、正立型顕微鏡についても同様に適用できる。 In the embodiment described above has dealt with the case of the inverted microscope, it can be similarly applied to an upright microscope. また、液浸媒質47に純水を使用した水浸方式の例を述べたが、オイルを使用した油浸方式についても同様に適用できる。 Although described an example of a water immersion method using pure water immersion medium 47 can be similarly applied to oil immersion method using an oil.
【0096】 [0096]
上記のように、本発明の実施の形態によれば、液浸対物レンズに供給される液浸媒質を利用することで、標本の温度制御を安定して行うことができる、構成が簡単で、価格的にも安価な液浸媒質供給装置、蛍光分光検査装置及び培養顕微鏡を提供できる。 As described above, according to the embodiment of the present invention, by utilizing an immersion medium supplied to the immersion objective lens, it is possible to control the temperature of the specimen stable construction is simple, of price to be inexpensive immersion medium supply device can provide a fluorescence spectrophotometer inspection device and tissue culture microscope.
【0097】 [0097]
本発明は、上記各実施の形態に限ることなく、その他、実施段階ではその要旨を逸脱しない範囲で種々の変形を実施し得ることが可能である。 The present invention is not limited to the above embodiments, other than can be embodied with may implement various modifications without departing from the scope of the invention. さらに、上記各実施形態には、種々の段階の発明が含まれており、開示される複数の構成要件における適宜な組合せにより種々の発明が抽出され得る。 Furthermore, the above embodiments include inventions of various stages, and various inventions can be extracted by appropriately combining a plurality of disclosed constituent elements.
【0098】 [0098]
また、例えば各実施形態に示される全構成要件から幾つかの構成要件が削除されても、発明が解決しようとする課題の欄で述べた課題が解決でき、発明の効果で述べられている効果が得られる場合には、この構成要件が削除された構成が発明として抽出され得る。 Moreover, even if some constituent features are deleted from all the components shown in the embodiments, the invention can be solved the problem mentioned in the description of the problem to be solved, are described in the effects of the invention effectively If the obtained, the configuration from which the constituent elements are deleted can be extracted as an invention.
【0099】 [0099]
上記の各実施の形態より、例えば、下記の発明が抽出できる。 From the above embodiments, for example, the following inventions can be extracted. なお、下記の発明は、それぞれ単独で適用しても良いし、適宜組み合わせて適用することもできる。 Incidentally, the following invention may be applied singly, may also be applied in combination.
【0100】 [0100]
本発明の第1の局面に係る液浸媒質供給装置は、観察標本と液浸対物レンズとの間に充填される液浸媒質と、前記液浸媒質を所定の温度に制御する温度制御器と、前記温度制御器により温度制御された前記液浸媒質を前記液浸対物レンズに供給する液浸媒質供給部とを具備することを特徴とする。 Immersion medium supply apparatus according to a first aspect of the present invention, the immersion medium is filled between the observation sample and the immersion objective lens, and a temperature controller for controlling the immersion medium to a predetermined temperature , characterized by comprising the said immersion medium which is temperature controlled the immersion supplied to the objective lens immersion medium supply section by the temperature controller. 液浸対物レンズと観察標本との間に充填される液浸媒質を予め所定の温度に調整して供給することにより、標本を所定の温度に制御することができる。 By supplying previously adjusted predetermined temperature immersion medium filled between the immersion objective lens and the observation specimen, it is possible to control the sample to a predetermined temperature. これにより、例えば、生物標本の観察の場合に、適切な形態を観察でき、分子運動を捉える蛍光測光において、安定したデータが得られ、正しい判定が可能となる。 Thus, for example, when the observation of biological specimens, can observe the correct form, in the fluorescence measurement to capture the molecular motion, stable data is obtained, it is possible to correct determination.
また、液浸対物レンズに用いられる液浸媒質を利用し、この液浸媒質の温度を制御する構成としているので、装置全体の構成を簡単にでき、価格的にも安価にできる。 Also, immersion using an immersion medium used in the objective lens, since the configuration for controlling the temperature of the immersion medium, can the configuration of the entire apparatus easily can be cheaper price basis.
【0101】 [0101]
第1の局面において、好ましい実施態様は以下の通りである。 In a first aspect, the preferred embodiments are as follows.
(1) 前記液浸媒質供給部は、液浸媒質供給源と前記液浸対物レンズに液浸媒質を供給する給液ノズルを有するとともに、前記温度制御器は液浸媒質供給源と給液ノズルの間に設けられること。 (1) the immersion medium supply unit which has a liquid supply nozzle for supplying immersion medium to said immersion objective lens and the immersion medium supply source, the temperature controller immersion medium supply source and the liquid supply nozzle It is provided between.
(2) 前記液浸媒質供給部の前記給水ノズルは少なくとも1つ以上であり、前記液浸対物レンズに着脱可能に保持されていること。 (2) the said water supply nozzle of the immersion medium supply unit is at least one or more, that is removably retained in the immersion objective lens.
(3) 前記給水ノズルは、前記液浸対物レンズの外枠に埋設されていること。 (3) the water supply nozzle, it is embedded in the outer frame of the immersion objective lens.
(4) 前記給水ノズルは、前記液浸対物レンズの先端周辺部に設置された液受け部に埋設されている。 (4) the water supply nozzle is embedded in the liquid receiving portion disposed at the tip peripheral portion of the immersion objective lens.
【0102】 [0102]
本発明の第2の局面に係る蛍光分光検査装置は、液中に浮遊する蛍光標識された生物分子の標本からの光を集光する液浸対物レンズと、前記標本と前記液浸対物レンズとの間に充填される液浸媒質と、少なくとも液浸対物レンズの拡大像を検出する光検出器と蛍光照明とを備えた光学システムと、前記光検出器の出力から前記標本の運動を演算する演算部と、前記演算部による演算結果を表示するモニターと、前記液浸媒質を所定の温度に制御する温度制御器と、前記温度制御器により温度制御された前記液浸媒質を前記液浸媒質レンズに供給する液浸媒質供給部とを具備することを特徴とする。 Fluorescence spectroscopy inspection apparatus according to a second aspect of the present invention, the immersion objective lens that collects light from a sample of fluorescence labeled biomolecules suspended in the liquid, and the specimen and the immersion objective lens and immersion medium filled between calculates an optical system including a light detector and fluorescence illumination for detecting a magnified image of at least the immersion objective lens, the movement of the specimen from the output of the photodetector a calculation unit, a monitor for displaying the calculation result by the arithmetic unit, and a temperature controller for controlling the immersion medium to a predetermined temperature, the said immersion medium which is temperature controlled by the temperature controller immersion medium characterized by comprising the immersion medium supply unit for supplying to the lens. ここで、前記演算部は蛍光相関分光法による演算を行うことが好ましい。 Here, the arithmetic unit is preferably subjected to a calculation by fluorescence correlation spectroscopy. 蛍光強度のゆらぎを解析することで、拡散速度に関する情報と分子の数に関する情報を得る際に、標本の温度を一定にしているため、標本の液体中での浮遊分子運動を一定に維持することができ、マイクロプレートの全てのウェル内の標本に対して安定した蛍光検出を行うことができる。 By analyzing the fluctuation of fluorescence intensity, in obtaining information about the number of information and molecules for diffusion rate, since the temperature of the specimen constant, maintaining the suspension molecular movement in a liquid sample to a constant it can be, it is possible to perform a stable fluorescence detected for samples in all wells of the microplate. 分子運動を捉える蛍光測定において、安定したデータが得られ、正しい判定が可能となる。 In the fluorescence measurement to capture the molecular motion, stable data is obtained, it is possible to correct determination.
【0103】 [0103]
第1及び第2の局面において、前記液浸媒質の温度を測定するセンサを更に具備することが好ましい。 In the first and second aspects, it is preferable to further comprise a sensor for measuring the temperature of the immersion medium. ここで、前記センサは液浸対物レンズの近傍に配置されることが好ましい。 Here, the sensor is preferably disposed in the vicinity of the immersion objective lens.
【0104】 [0104]
本発明の第3の局面に係る培養顕微鏡は、観察標本を載置するステージと、前記ステージを支持する顕微鏡と、前記顕微鏡に支持された液浸対物レンズと、前記顕微鏡に収納された観察標本の拡大像を取込む撮像装置及び光学系と、を収納する培養器と、前記観察標本と前記液浸対物レンズとの間に充填される液浸媒質と、前記液浸媒質を所定の温度に制御する温度制御器と、前記温度制御器により温度制御された前記液浸媒質を前記液浸媒質レンズに供給する液浸媒質供給部と、前記培養器に温風を送り込む温風機と、を具備することを特徴とする。 Culture microscope according to the third aspect of the present invention includes: a stage for mounting an observation specimen and the microscope for supporting the stage, and the immersion objective lens supported by the microscopic observation specimen accommodated in the microscope a culture vessel for accommodating the enlarged image and the image pickup device and an optical system taking a, a, and the immersion medium is filled between the observation sample and the immersion objective lens, the immersion medium to a predetermined temperature comprising: a control temperature controller, said temperature controller by a temperature controlled the immersion medium said supplied to the immersion medium lens immersion medium supply unit, a fan heater for feeding hot air into the incubator, the characterized in that it. ここで、前記液浸媒質の温度及び培養器内の湿度を測定するセンサを更に具備すること、更には、前記センサは液浸対物レンズの近傍に配置されることが好ましい。 Here, be provided with a sensor for measuring the humidity of the temperature and the incubator of the immersion medium further addition, the sensor is preferably disposed in the vicinity of the immersion objective lens. 液浸媒質で観察標本と液浸対物レンズとの間を所定の温度に保つことができ、温風機で培養装置内を所定の温度に保つことにより、顕微鏡及び液浸対物レンズが所定の温度になる。 Between the observation sample and the immersion objective lens in the immersion medium can be kept at a predetermined temperature, by keeping the the culture device to a predetermined temperature with hot air blower, a microscope and the immersion objective lens to a predetermined temperature Become. 液浸対物レンズが所定の温度になることで、液浸媒質を介した観察標本がより安定する。 By immersion objective lens becomes a predetermined temperature, the observation specimen through an immersion medium becomes more stable.
【0105】 [0105]
第1から第3の局面において、前記液浸媒質供給部より前記液浸対物レンズに供給される液浸媒質を排出する液浸媒質排出部をさらに具備することが好ましい。 In a third aspect the first, preferably further comprises an immersion medium discharge portion for discharging the immersion medium to be supplied to the immersion objective lens from the immersion medium supply unit.
さらに、上記実施の形態には、種々の段階の発明が含まれており、開示されている複数の構成要件における適宜な組み合わせにより種々の発明が抽出できる。 Furthermore, the embodiments include inventions of various stages, and various inventions can be extracted by appropriately combining a plurality of constituent requirements disclosed. 例えば、実施の形態に示されている全構成要件から幾つかの構成要件が削除されても、発明が解決しようとする課題の欄で述べた課題を解決でき、発明の効果の欄で述べられている効果が得られる場合には、この構成要件が削除された構成が発明として抽出できる。 For example, even if several elements are deleted from all the components shown in the embodiments, it can solve the problems mentioned in the description of the problem to be Solved by the Invention, described in the column of Effect of the Invention If you are effects are obtained, the configuration from which these constituent elements are deleted can be extracted as an invention. 例えば、実施の形態中に特に明示しなかったが、第2の実施の形態に記載したように、顕微鏡全体を箱状のもので覆うことによって内部の環境を調整する方法は、第1の実施の形態の蛍光測定装置にも適用可能である。 For example, although not specifically stated in the embodiment, as described in the second embodiment, a method of adjusting the internal environment by covering with those the entire microscope box-shaped, the first embodiment also the fluorescence measuring apparatus according to applicable.
【0106】 [0106]
【発明の効果】 【Effect of the invention】
本発明によれば、標本の温度制御を安定して行うことができる、構成が簡単で、価格的にも安価な液浸媒質供給装置、蛍光分光検査装置及び培養顕微鏡を提供できる。 According to the present invention, it is possible to control the temperature of the specimen stable, structure is simple, cost manner to be inexpensive immersion medium supply device can provide a fluorescence spectrophotometer inspection device and tissue culture microscope.
【図面の簡単な説明】 BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS
【図1】本発明の第1の実施の形態の概略構成を示す図。 FIG. 1 shows a schematic configuration of a first embodiment of the present invention.
【図2】第1の実施の形態の装置本体の外観を示す図。 FIG. 2 shows an appearance of the apparatus body of the first embodiment.
【図3】第1の実施の形態に用いられるマイクロプレートの概略構成を示す図。 FIG. 3 is a diagram showing the schematic configuration of a microplate used in the first embodiment.
【図4】第1の実施の形態の水浸対物レンズとマイクロプレートのカバーガラスの間の構成を拡大して示す図。 FIG. 4 is a diagram showing an enlarged configuration between the cover glass of the first embodiment of the immersion objective lens and the micro plate.
【図5】本発明の第1の実施の形態の変形例の概略構成を示す図。 5 is a diagram showing a schematic configuration of a modification of the first embodiment of the present invention.
【図6】本発明の第2の実施の形態の概略構成を示す図。 6 is a diagram showing a schematic configuration of a second embodiment of the present invention.
【符号の説明】 DESCRIPTION OF SYMBOLS
XY …ラックP XY …ピニオンM XY …駆動用モータR …ラックP …ピニオンM …モータS …温度センサS TH …温湿度センサ1…装置本体1a…マイクロプレート挿入窓2…倒立顕微鏡3…XYステージ4…標本5a…ウェル5…マイクロプレート5b…カバーガラス6.7…励起用レーザ光源6…光源8…ハーフミラー9…ミラー10…コリメートレンズ11…ダイクロイックミラー12…対物レンズ13…液浸媒質14…励起光バリアフィルタ15…結像レンズ16…反射ミラー17…ピンホール18…光検出器(撮像素子) R XY ... Rack P XY ... pinion M XY ... driving motor R Z ... Rack P Z ... pinion M Z ... motor S T ... temperature sensor S TH ... temperature and humidity sensor 1 ... apparatus body 1a ... microplate insertion window 2 ... Inverted microscope 3 ... XY stage 4 ... sample 5a ... well 5 ... microplate 5b ... cover glass 6.7 ... excitation laser light source 6 ... light source 8 ... half mirror 9 ... mirror 10 ... collimator lens 11 ... dichroic mirror 12 ... objective lens 13 ... immersion medium 14 ... excitation light barrier filter 15 ... imaging lens 16 ... reflecting mirror 17 ... pinhole 18 ... photodetector (imaging device)
19…演算装置20…パソコン21…表示部22…給水ボトル23a、23b、23c…給水パイプ24…給水ポンプ25…給水ノズル26…温度制御装置27a…排水口28…排水パイプ29…排水ポンプ30…排水ボトル31…ボトル温度制御器32…制御装置33…入力装置34…温風機36…ヒータ37…加湿水41…顕微鏡本体41a…前側固定部41b…後側固定部42…ステージ43…シャーレ標本44…水浸対物レンズ45…観察鏡筒46…接眼レンズ47…液浸媒質48…給水パイプ49…給水ノズル51…排水パイプ52…透過照明光源53…コンデンサレンズ 19 ... computing unit 20 ... PC 21 ... display unit 22 ... water bottles 23a, 23b, 23c ... Water pipes 24 ... Water pump 25 ... feed water nozzle 26 ... Temperature controller 27a ... drain outlet 28 ... drain pipe 29 ... drainage pump 30 ... drainage bottle 31 ... bottle temperature controller 32 ... controller 33 ... input device 34 ... Yutakakazeki 36 ... heater 37 ... humidifying water 41 ... microscope body 41a ... front stationary part 41b ... rear fixing part 42 ... stage 43 ... dish specimen 44 ... water immersion objective 45 ... observation lens barrel 46 ... eyepiece 47 ... immersion medium 48 ... feed water pipe 49 ... feed water nozzle 51 ... drain pipe 52 ... transmitting light source 53 ... condenser lens

Claims (3)

  1. 観察標本と液浸対物レンズとの間に充填される液浸媒質と、 And the immersion medium is filled between the observation sample and the immersion objective lens,
    前記液浸媒質を所定の温度に制御する温度制御器と、 A temperature controller for controlling the immersion medium to a predetermined temperature,
    前記温度制御器により温度制御された前記液浸媒質を前記液浸対物レンズに供給する液浸媒質供給部とを具備することを特徴とする液浸媒質供給装置。 Immersion medium supply apparatus characterized by comprising the said immersion medium which is temperature controlled the immersion supplied to the objective lens immersion medium supply section by the temperature controller.
  2. 液中に浮遊する蛍光標識された生物分子の標本からの光を集光する液浸対物レンズと、 And the immersion objective lens that collects light from a sample of fluorescence labeled biomolecules floating in the liquid,
    前記標本と前記液浸対物レンズとの間に充填される液浸媒質と、 And the immersion medium is filled between the specimen and the immersion objective lens,
    少なくとも液浸対物レンズの拡大像を検出する光検出器と蛍光照明とを備えた光学システムと、 An optical system including a light detector and fluorescence illumination for detecting a magnified image of at least the immersion objective lens,
    前記光検出器の出力から前記標本の運動を演算する演算部と、 A calculator for calculating the movement of the specimen from the output of the photodetector,
    前記演算部による演算結果を表示するモニターと、 A monitor for displaying the calculation result by the arithmetic unit,
    前記液浸媒質を所定の温度に制御する温度制御器と、 A temperature controller for controlling the immersion medium to a predetermined temperature,
    前記温度制御器により温度制御された前記液浸媒質を前記液浸媒質レンズに供給する液浸媒質供給部と、を具備することを特徴とする蛍光分光検査装置。 Fluorescence spectroscopy inspection apparatus characterized by comprising a immersion medium supply unit for supplying said immersion medium to said immersion medium lens a temperature controlled by the temperature controller.
  3. 観察標本を載置するステージと、前記ステージを支持する顕微鏡と、前記顕微鏡に支持された液浸対物レンズと、前記顕微鏡に収納された観察標本の拡大像を取込む撮像装置及び光学系と、を収納する培養器と、 A stage for placing the observation specimen, and the microscope for supporting the stage, and the immersion objective lens supported by the microscope, and the image pickup device and the optical system captures an enlarged image of the observation specimen accommodated in the microscope, and incubator that houses the,
    前記観察標本と前記液浸対物レンズとの間に充填される液浸媒質と、 And the immersion medium is filled between the observation sample and the immersion objective lens,
    前記液浸媒質を所定の温度に制御する温度制御器と、 A temperature controller for controlling the immersion medium to a predetermined temperature,
    前記温度制御器により温度制御された前記液浸媒質を前記液浸媒質レンズに供給する液浸媒質供給部と、 And the immersion medium supply unit for supplying said immersion medium which is temperature-controlled to the immersion medium lens by the temperature controller,
    前記培養器に温風を送り込む温風機と、を具備することを特徴とする培養顕微鏡。 Culture microscope characterized by comprising a fan heater for feeding hot air into the incubator.
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