JP2003524396A5

JP2003524396A5 -

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Publication number: JP2003524396A5
Application number: JP2000605724A
Authority: JP
Filing date: 2000-03-17
Publication date: 2007-04-05

Description

【特許請求の範囲】
【請求項１】不死の多能性細胞からなる単離された中枢神経系幹細胞株であって、該多能性細胞が、ＣｈＴｘ−であり、神経細胞またはグリア細胞へ分化する能力を有する、細胞株。
【請求項２】請求項１に記載の細胞株であって、ここで、前記中枢神経系由来の細胞株が、ヒト中枢神経系に由来する、細胞株。
【請求項３】請求項１に記載の単離された多能性細胞。
【請求項４】請求項３に記載の細胞であって、該細胞が、以下：ＴｎＴｘ−／ＣｈＴｘ−、ＴｎＴｘ＋／ＣｈＴｘ−、Ａ２Ｂ５−／ＴｎＴｘ−、Ａ２Ｂ５＋／ＴｎＴｘ−、Ａ２Ｂ５−／ＴｎＴｘ＋、Ａ２Ｂ５−／ＣｈＴｘ−、Ａ２Ｂ５＋／ＣｈＴｘ−、ＴｎＴｘ−／ＣｈＴｘ−／ネスチン＋、およびＴｎＴｘ−／ＣｈＴｘ−／ネスチン−からなる群より選択されるマーカーの組み合わせによって特徴付けられる、細胞。
【請求項５】請求項１に記載の細胞株から誘導される、単離された細胞または組織。
【請求項６】生物学的に活性なペプチドまたはタンパク質をコードする異種核酸配列をさらに含む、請求項３に記載の細胞。
【請求項７】請求項６に記載の細胞であって、ここで、前記生物学的に活性なペプチドまたはタンパク質が、疾患関連ペプチドまたはタンパク質である、細胞。
【請求項８】請求項６に記載の細胞であって、ここで、前記生物学的に活性なペプチドまたはタンパク質が、酵素、栄養因子、サイトカインまたは疾患関連抗原である、細胞。
【請求項９】請求項８に記載の細胞であって、ここで、前記生物学的に活性なペプチドまたはタンパク質が、チロシンヒドロキシラーゼ、ＧＴＰＣＨ１、ＡＡＤＣおよびＶＭＡＴ２からなる群より選択される酵素；ＧＤＮＦ、ＶＥＧＦ、ＢＤＮＦ、ＮＧＦ、ｂＦＧＦ、
【化１】

、ＣＮＴＦ、ＰＤＧＦ、ＢＭＰ、ＬＩＦ、ノイロチュリン、ペルセフィン、ノイブラスチン、ＮＴ４／５、ＮＴ３、ミッドカインからなる群より選択される栄養因子；ＩＬ−１０およびＩＬ−６からなる群より選択されるサイトカインである、細胞。
【請求項１０】請求項８に記載の細胞であって、ここで、前記核酸が、転写プロモーターに作動可能に連結される、細胞。
【請求項１１】請求項８に記載の細胞であって、ここで、前記核酸が、調節可能なプロモーター系に作動可能に連結される、細胞。
【請求項１２】請求項３に記載の多能性細胞を含む、単離されたかまたは精製された細胞集団。
【請求項１３】請求項１２に記載の細胞集団であって、ここで、該集団が、細胞のＮＧ１、ＮＧ２、およびＮＧ３集団からなる群より選択される、細胞集団。
【請求項１４】多能性細胞を同定する方法であって、該方法は、細胞サンプル中の、ＴｎＴｘに対する細胞由来の結合パートナー、ＣｈＴｘに対する細胞由来の結合パートナー、および必要に応じて、Ａ２Ｂ５抗体に対する細胞由来の結合パートナーの存在または非存在について測定する工程を包含し、該細胞サンプルは、多能性細胞を含むと考えられている、方法。
【請求項１５】請求項１４に記載の方法であって、ここで、前記多能性細胞が、胎児中枢神経系由来の細胞である、方法。
【請求項１６】請求項１４に記載の方法であって、ここで、該方法が、少なくとも１つの因子が前記細胞に結合する条件下で、前記サンプルを、該少なくとも１つの因子と混合する工程であって、該因子は、ＴｎＴｘに対する細胞由来の結合パートナー、ＣｈＴｘに対する細胞由来の結合パートナーおよびＡ２Ｂ５抗体に対する細胞由来の結合パートナーの少なくとも１つに特異的に結合する、工程、ならびに該結合を検出する工程であって、ここで、該結合が、前記多能性細胞の存在を示す工程、を包含する、方法。
【請求項１７】請求項１６に記載の方法であって、ここで、Ａ２Ｂ５結合パートナーを結合する前記因子が、Ａ２Ｂ５抗体またはそのフラグメントであり；ＣｈＴｘの結合パートナーを結合する該因子が、ＣｈＴｘ結合パートナー抗体もしくはそのフラグメントまたはＣｈＴｘもしくはそのフラグメントであり；そして、ＴｎＴｘの結合パートナーを結合する該因子が、ＴｎＴｘ結合パートナー抗体もしくはそのフラグメントまたはＴｎＴｘもしくはそのフラグメントである、方法。
【請求項１８】請求項１４に記載の方法であって、該方法が、前記サンプルをヒトネスチンに特異的に結合する因子と混合する工程、および該サンプル中で前記リガンドがネスチンに結合するか否かを検出する工程をさらに包含する、方法。
【請求項１９】請求項１４に記載の方法であって、ここで、前記リガンドが、検出可能な標識を含み、そして、必要に応じて、前記混合する工程が、該リガンドに結合するさらなる検出可能な成分の添加をさらに含む、方法。
【請求項２０】請求項１９に記載の方法であって、ここで、前記検出可能な標識が蛍光である、方法。
【請求項２１】請求項２０に記載の方法であって、ここで、前記細胞を蛍光活性化されたセルソーターを用いて分析する工程をさらに包含する、方法。
【請求項２２】請求項１４に記載の方法に従って同定された細胞を分離する工程を包含する、多能性細胞を精製する方法。
【請求項２３】細胞の集団に、多能性の胎児神経系由来細胞を富化する方法であって、該方法が、該集団を血清の存在下で培養し、続いて該集団を血清を含まない培地中で培養する工程を包含する、方法。
【請求項２４】前記集団がＳＶＧ細胞株から誘導される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】請求項２３に記載の方法によって産生される、細胞集団。
【請求項２６】請求項２３に記載の方法であって、ここで、前記集団が、クライシスを介して血清を含む培地中に継代される、方法。
【請求項２７】前記集団がＳＶＧ細胞株から誘導される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】請求項２６に記載の方法によって産生される、細胞集団。
【請求項２９】多能性の胎児神経系由来細胞を含む細胞集団に、該多能性細胞を富化する方法であって、該方法が、クライシスを介して血清を含む培地中に該集団を継代する工程であって、ここで、クライシスから出現する該集団は、該多能性細胞が富化される工程、を包含する、方法。
【請求項３０】前記集団がＳＶＧ細胞株から誘導される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】請求項２９に記載の方法によって産生される、細胞集団。
【請求項３２】哺乳動物への移植によって神経性症候群または神経性疾患を有する哺乳動物を処置するための組成物であって、該組成物が、治療的有効量の、請求項４に記載の少なくとも１つの細胞を含む、組成物。
【請求項３３】請求項３に記載の多能性細胞からなる、単離された細胞の塊。
【請求項３４】神経球の形態である、請求項３３に記載の塊。