JP2003344391A - 血小板停滞率測定用具およびその測定方法 - Google Patents
血小板停滞率測定用具およびその測定方法Info
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- JP2003344391A JP2003344391A JP2002153534A JP2002153534A JP2003344391A JP 2003344391 A JP2003344391 A JP 2003344391A JP 2002153534 A JP2002153534 A JP 2002153534A JP 2002153534 A JP2002153534 A JP 2002153534A JP 2003344391 A JP2003344391 A JP 2003344391A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 安価な血小板停滞率測定用具およびその測定
方法を提供することを目的とするものである。 【解決手段】 一端に試料血液の試料導入部２と、他端
に試料血液の試料導出部３とを備える無底円筒チューブ
１内に、直径が１２０〜２２０μｍの球形ビーズに凝集
惹起物（Ｉ型コラーゲン或いはＡＤＰ又はｖＷＦ）をコ
ーティングしたコートビーズ４を充填した血小板停滞率
測定用具１０である。
方法を提供することを目的とするものである。 【解決手段】 一端に試料血液の試料導入部２と、他端
に試料血液の試料導出部３とを備える無底円筒チューブ
１内に、直径が１２０〜２２０μｍの球形ビーズに凝集
惹起物（Ｉ型コラーゲン或いはＡＤＰ又はｖＷＦ）をコ
ーティングしたコートビーズ４を充填した血小板停滞率
測定用具１０である。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、血小板停滞率を測
定する血小板停滞率測定用具およびその測定方法に関す
るものである。
定する血小板停滞率測定用具およびその測定方法に関す
るものである。
【０００２】
【従来の技術】血小板停滞率の測定は、心筋梗塞，脳梗
塞等の病的血栓症の予防や治療を行う上で重要である。
従来、これらを測定する血小板凝集能の測定には、ＰＲ
Ｐ（多血漿板血漿）を作製して３７℃に設定した恒温槽
で加温し、血小板凝集能促進（惹起）物質を添加して、
血小板凝集の濁度変化を透過光で見ることにより、この
濁度の曲線を凝集曲線として解析し凝集能を判定する測
定方法がある。この他の凝集能の測定には、レーザー光
線を利用した光学的手段による凝集能測定装置がある。
塞等の病的血栓症の予防や治療を行う上で重要である。
従来、これらを測定する血小板凝集能の測定には、ＰＲ
Ｐ（多血漿板血漿）を作製して３７℃に設定した恒温槽
で加温し、血小板凝集能促進（惹起）物質を添加して、
血小板凝集の濁度変化を透過光で見ることにより、この
濁度の曲線を凝集曲線として解析し凝集能を判定する測
定方法がある。この他の凝集能の測定には、レーザー光
線を利用した光学的手段による凝集能測定装置がある。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】従来の血小板凝集能測
定方法であるＰＲＰ法（光電比色方法，光透過法）は、
採血後、ＰＲＰの調整の差異やＰＲＰに赤血球、白血球
等の混入があった場合、測定結果にバラツキが発生する
等の欠点があり、しかも操作が煩雑であったり、測定に
時間を要する等の問題があった。また、従来例のレーザ
ー光線を利用した光学的測定装置は装置の導入にあた
り、高額な投資を行わねばならず、広く使用できる程の
簡便性を有していない問題があった。
定方法であるＰＲＰ法（光電比色方法，光透過法）は、
採血後、ＰＲＰの調整の差異やＰＲＰに赤血球、白血球
等の混入があった場合、測定結果にバラツキが発生する
等の欠点があり、しかも操作が煩雑であったり、測定に
時間を要する等の問題があった。また、従来例のレーザ
ー光線を利用した光学的測定装置は装置の導入にあた
り、高額な投資を行わねばならず、広く使用できる程の
簡便性を有していない問題があった。
【０００４】また、血小板機能検査では、ｉｎ ｖｉｖ
ｏで発生するズリ応力（シェアストレス）の再現が重要
な問題で、現在用いられている凝集計では、この現象を
反映していないので、必ずしも臨床症状を適格に捉えて
いるとは考えられない。
ｏで発生するズリ応力（シェアストレス）の再現が重要
な問題で、現在用いられている凝集計では、この現象を
反映していないので、必ずしも臨床症状を適格に捉えて
いるとは考えられない。
【０００５】因みに、停滞率は血管が破綻した際に、血
小板が血漿タンパク質であるｖＷＦ因子（ｖｏｎ ｗｉ
ｌｌｅｂｒａｎｄ因子：フォンウィルブランド因子）を
介して、血管内皮下組織に結合する反応であって、粘着
した血小板はＡＤＰ（Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ５−ｄｉｐ
ｈｏｓｐｈａｔｅ ｓｏｄｌｕｍ ｓａｌｔ：アデノシ
ン−５′−二燐酸）を放出して凝集する。このように停
滞率は止血反応初期の状態を知る血小板反応の働きであ
る。それに対して、凝集能は止血機構に関与する働きで
あり、血小板が凝集して、さらにフィブリノーゲンとい
うタンパク質に血小板が作用し、フェブリンという糸状
の繊維素を生成し、この繊維素に赤血球が絡み着いて止
血する働きである。このような異なった働きに対して、
その働きを客観的に捕らえることができる測定具が医療
の現場で望まれていた。
小板が血漿タンパク質であるｖＷＦ因子（ｖｏｎ ｗｉ
ｌｌｅｂｒａｎｄ因子：フォンウィルブランド因子）を
介して、血管内皮下組織に結合する反応であって、粘着
した血小板はＡＤＰ（Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ５−ｄｉｐ
ｈｏｓｐｈａｔｅ ｓｏｄｌｕｍ ｓａｌｔ：アデノシ
ン−５′−二燐酸）を放出して凝集する。このように停
滞率は止血反応初期の状態を知る血小板反応の働きであ
る。それに対して、凝集能は止血機構に関与する働きで
あり、血小板が凝集して、さらにフィブリノーゲンとい
うタンパク質に血小板が作用し、フェブリンという糸状
の繊維素を生成し、この繊維素に赤血球が絡み着いて止
血する働きである。このような異なった働きに対して、
その働きを客観的に捕らえることができる測定具が医療
の現場で望まれていた。
【０００６】本発明は、上記のような課題に鑑みてなさ
れたものであって、安価な血小板停滞率測定用具および
その測定方法を提供することを目的とするものである。
れたものであって、安価な血小板停滞率測定用具および
その測定方法を提供することを目的とするものである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明は、上記課題を達
成するために、請求項１の発明は、一端に試料血液の導
入部と、他端に試料血液の導出部とを備えるチューブ内
に、直径が１２０〜２２０μｍの球形ビーズに凝集惹起
物をコーティングしたコートビーズを充填したことを特
徴とする血小板停滞率測定用具である。
成するために、請求項１の発明は、一端に試料血液の導
入部と、他端に試料血液の導出部とを備えるチューブ内
に、直径が１２０〜２２０μｍの球形ビーズに凝集惹起
物をコーティングしたコートビーズを充填したことを特
徴とする血小板停滞率測定用具である。
【０００８】請求項１の発明では、球形ビーズの表面に
凝集惹起物をコーティングしたコートビーズをチューブ
内に充填し、チューブの両端部には、一端に試料血液の
導入部と他端に試料血液の導出部とが設けたものであ
る。球形ビーズの直径は、１２０〜２２０μｍの範囲と
したものを用いる。１２０μｍ未満では試料血液の通過
に支障を与え、２２０μｍを超える直径のビーズでは、
高ズリ応力が十分に働かなくなり、停滞率を計測するの
に好ましくない。従って、停滞率を計測には、球形ビー
ズの直径が１２０〜２２０μｍの範囲が好ましく、これ
らの範囲で直径が分布するビーズであればよい。また、
球形ビーズの材質は、生体における血小板の機能を考え
るとプラスチックが好ましい。
凝集惹起物をコーティングしたコートビーズをチューブ
内に充填し、チューブの両端部には、一端に試料血液の
導入部と他端に試料血液の導出部とが設けたものであ
る。球形ビーズの直径は、１２０〜２２０μｍの範囲と
したものを用いる。１２０μｍ未満では試料血液の通過
に支障を与え、２２０μｍを超える直径のビーズでは、
高ズリ応力が十分に働かなくなり、停滞率を計測するの
に好ましくない。従って、停滞率を計測には、球形ビー
ズの直径が１２０〜２２０μｍの範囲が好ましく、これ
らの範囲で直径が分布するビーズであればよい。また、
球形ビーズの材質は、生体における血小板の機能を考え
るとプラスチックが好ましい。
【０００９】また、請求項２の発明は、前記凝集惹起物
がＩ型コラーゲン、ＡＤＰ、ｖＷＦ等の物質の何れかで
あることを特徴とする請求項１に記載の血小板停滞率測
定用具である。
がＩ型コラーゲン、ＡＤＰ、ｖＷＦ等の物質の何れかで
あることを特徴とする請求項１に記載の血小板停滞率測
定用具である。
【００１０】請求項２の発明では、ビーズの表面にコー
トされる凝集惹起物が、Ｉ型コラーゲン、ＡＤＰ、ｖＷ
Ｆの何れかの物質である。Ｉ型コラーゲンとしては豚皮
等のコラーゲンが使用される。無論、皮膚、骨、腱など
組織から溶出したものであってもよい。ｖＷＦ因子は、
血小板が粘着する作用を有し、ＡＤＰは血小板の凝集を
促進させる作用がある。また、試料血液の流速を上げる
と、シア（ズリ応力）が強くなり、ＧＰＩｂ−ｖＷＦ因
子依存性の血小板活性化がより強く出せ、全血を用い
て、シアによる血小板活性化を定量的に測定することが
できる。
トされる凝集惹起物が、Ｉ型コラーゲン、ＡＤＰ、ｖＷ
Ｆの何れかの物質である。Ｉ型コラーゲンとしては豚皮
等のコラーゲンが使用される。無論、皮膚、骨、腱など
組織から溶出したものであってもよい。ｖＷＦ因子は、
血小板が粘着する作用を有し、ＡＤＰは血小板の凝集を
促進させる作用がある。また、試料血液の流速を上げる
と、シア（ズリ応力）が強くなり、ＧＰＩｂ−ｖＷＦ因
子依存性の血小板活性化がより強く出せ、全血を用い
て、シアによる血小板活性化を定量的に測定することが
できる。
【００１１】また、請求項３の発明は、前記血小板停滞
率測定用具が、該用具を保温する載置部と、採血管を保
温し、かつ試料血液を採取した採血管を保温する挿入保
持部とを有する恒温槽を付帯することを特徴とする請求
項１又は２に記載の血小板停滞率測定用具である。
率測定用具が、該用具を保温する載置部と、採血管を保
温し、かつ試料血液を採取した採血管を保温する挿入保
持部とを有する恒温槽を付帯することを特徴とする請求
項１又は２に記載の血小板停滞率測定用具である。
【００１２】請求項３の発明では、血小板停滞率の測定
において、検出精度を高めるのに生体と同一の条件に近
似した状態で血小板の機能の測定が行われることが重要
であり、血小板停滞率測定用具には恒温槽（ドライバ
ス）が付帯している。血小板停滞率測定用具と採血管
（採血後の採血管）は、恒温槽で略３７℃に保温された
後、試料血液が血小板停滞率測定用具のチューブ内に供
給して、凝集能の測定が行われる。このように、生体で
血栓が発生するのと略同じ疑似環境をチューブ内に再現
して検査を行うことができので、試料血液の血小板停滞
率の測定精度を高めることができる作用を有する。
において、検出精度を高めるのに生体と同一の条件に近
似した状態で血小板の機能の測定が行われることが重要
であり、血小板停滞率測定用具には恒温槽（ドライバ
ス）が付帯している。血小板停滞率測定用具と採血管
（採血後の採血管）は、恒温槽で略３７℃に保温された
後、試料血液が血小板停滞率測定用具のチューブ内に供
給して、凝集能の測定が行われる。このように、生体で
血栓が発生するのと略同じ疑似環境をチューブ内に再現
して検査を行うことができので、試料血液の血小板停滞
率の測定精度を高めることができる作用を有する。
【００１３】また、請求項４の発明は、直径１２０〜２
２０μｍの球形ビーズに凝集惹起物をコーティングした
コートビーズをチューブ内に充填した血小板停滞率測定
用具及び試料血液をクエン酸ナトリウムに加えた採血管
を、恒温槽で３７℃前後に保温し、該チューブ内に押し
出し法によって、クエン酸ナトリウムを加えた該試料血
液を、ズリ応力が生じる速い流速で該コートビーズに接
触させ、該試料血液のコートビーズ接触前と接触後の血
小板数から血小板停滞率を測定することを特徴とする血
小板停滞率測定用方法である。
２０μｍの球形ビーズに凝集惹起物をコーティングした
コートビーズをチューブ内に充填した血小板停滞率測定
用具及び試料血液をクエン酸ナトリウムに加えた採血管
を、恒温槽で３７℃前後に保温し、該チューブ内に押し
出し法によって、クエン酸ナトリウムを加えた該試料血
液を、ズリ応力が生じる速い流速で該コートビーズに接
触させ、該試料血液のコートビーズ接触前と接触後の血
小板数から血小板停滞率を測定することを特徴とする血
小板停滞率測定用方法である。
【００１４】請求項４の発明では、測定時、恒温槽で血
小板停滞率測定用具と採血管とが３７℃の温度で保温さ
れている。採血管には、クエン酸ナトリウム（濃度が例
えば３．２％若しくは３．８％）を使用し、この採血管
内に試料血液が注入される。採血管は、一時恒温槽に載
置されて保温管理される。血小板停滞率測定用具は、試
料血液注入用シリンジポンプに装着されて、試料血液は
押し出し法によって、血小板停滞率測定用具のチューブ
内に高ズリ応力を生じる速い速度でコートビーズに接触
させて通過させる。血小板停滞率測定用具のチューブに
は、直径が１２０〜２２０μｍの球形ビーズに凝集惹起
物をコーティングしたコートビーズが充填されており、
試料血液を高ズリ応力を生じる速い速度で該コートビー
ズに接触させるようにして、コートビーズに血小板を凝
集させて、試料血液のビーズ接触前と接触後の血小板数
から血小板凝集率を算出して血小板の停滞率を測定す
る。
小板停滞率測定用具と採血管とが３７℃の温度で保温さ
れている。採血管には、クエン酸ナトリウム（濃度が例
えば３．２％若しくは３．８％）を使用し、この採血管
内に試料血液が注入される。採血管は、一時恒温槽に載
置されて保温管理される。血小板停滞率測定用具は、試
料血液注入用シリンジポンプに装着されて、試料血液は
押し出し法によって、血小板停滞率測定用具のチューブ
内に高ズリ応力を生じる速い速度でコートビーズに接触
させて通過させる。血小板停滞率測定用具のチューブに
は、直径が１２０〜２２０μｍの球形ビーズに凝集惹起
物をコーティングしたコートビーズが充填されており、
試料血液を高ズリ応力を生じる速い速度で該コートビー
ズに接触させるようにして、コートビーズに血小板を凝
集させて、試料血液のビーズ接触前と接触後の血小板数
から血小板凝集率を算出して血小板の停滞率を測定す
る。
【００１５】また、請求項５の発明は、前記凝集惹起物
がＩ型コラーゲン、ＡＤＰ、ｖＷＦ等の物質の何れかで
あることを特徴とする請求項４に記載の血小板停滞率測
定方法であり、上記に説明した通りである。
がＩ型コラーゲン、ＡＤＰ、ｖＷＦ等の物質の何れかで
あることを特徴とする請求項４に記載の血小板停滞率測
定方法であり、上記に説明した通りである。
【００１６】
【発明の実施の形態】以下、本発明の実施形態につい
て、図面を参照して説明する。なお、図１は、本発明の
血小板停滞率測定用具の実施形態を示す断面図である。
図２は、血小板停滞率測定用具に付帯する恒温槽の概略
斜視図である。
て、図面を参照して説明する。なお、図１は、本発明の
血小板停滞率測定用具の実施形態を示す断面図である。
図２は、血小板停滞率測定用具に付帯する恒温槽の概略
斜視図である。
【００１７】本発明の血小板停滞率測定用具では、血小
板が血管壁と血流によって生じるズリ応力（ｓｈｅａｒ
ｓｔｒｅｓｓ）の程度により異なった反応を示し、血
小板に凝集が生じる程度のズリ応力をかけることによっ
て、ＧＰＩｂ−ｖＷＦ依存性の血小板活性化を定量的に
測定できる測定具を提供するとともに、その測定方法を
提案するものである。
板が血管壁と血流によって生じるズリ応力（ｓｈｅａｒ
ｓｔｒｅｓｓ）の程度により異なった反応を示し、血
小板に凝集が生じる程度のズリ応力をかけることによっ
て、ＧＰＩｂ−ｖＷＦ依存性の血小板活性化を定量的に
測定できる測定具を提供するとともに、その測定方法を
提案するものである。
【００１８】図１は、本実施形態の血小板停滞率測定用
具１０を示し、無底円筒チューブ１が設けられ、無底円
筒チューブ１の一端に試料血液注入用シリンダ（図示せ
ず）を挿入する試料導入部２が設けられ、他端に試料導
出部３が設けられている。無底円筒チューブ１内にはコ
ートビーズ４が充填されている。無底円筒チューブ１
は、例えば、医療用ポリ塩化ビニル樹脂等のプラスチッ
クで構成され、その内径が２ｍｍで、外形が４ｍｍであ
り、試料導入部２と試料導出部３との間の長さＬは、１
４０ｍｍである。
具１０を示し、無底円筒チューブ１が設けられ、無底円
筒チューブ１の一端に試料血液注入用シリンダ（図示せ
ず）を挿入する試料導入部２が設けられ、他端に試料導
出部３が設けられている。無底円筒チューブ１内にはコ
ートビーズ４が充填されている。無底円筒チューブ１
は、例えば、医療用ポリ塩化ビニル樹脂等のプラスチッ
クで構成され、その内径が２ｍｍで、外形が４ｍｍであ
り、試料導入部２と試料導出部３との間の長さＬは、１
４０ｍｍである。
【００１９】試料導入部２は、無底円筒チューブ１の一
端に栓体中間部材５が装着され、栓本体６で封止される
構造であり、栓体中間部材５には、図示しない試料血液
注入用シリンダの先端部が挿入される。栓体中間部材５
には、貫通穴５ａと中空円錐部５ｂとが設けられ、その
先端部周囲にはフランジ部５ｃが設けられる。栓本体６
は中空円錐部５ｂに挿入されて無底円筒チューブ１の一
端部が封止される。栓本体６は、円筒部６ａ、連結部６
ｂ、栓本体６ｃ、取手６ｄから構成され、円筒部６ａが
栓体中間部材５に嵌合し、円筒部６ａに接続した連結部
６ｂが栓本体６ｃに接続され、栓本体６ｃに取手６ｄが
設けられている。
端に栓体中間部材５が装着され、栓本体６で封止される
構造であり、栓体中間部材５には、図示しない試料血液
注入用シリンダの先端部が挿入される。栓体中間部材５
には、貫通穴５ａと中空円錐部５ｂとが設けられ、その
先端部周囲にはフランジ部５ｃが設けられる。栓本体６
は中空円錐部５ｂに挿入されて無底円筒チューブ１の一
端部が封止される。栓本体６は、円筒部６ａ、連結部６
ｂ、栓本体６ｃ、取手６ｄから構成され、円筒部６ａが
栓体中間部材５に嵌合し、円筒部６ａに接続した連結部
６ｂが栓本体６ｃに接続され、栓本体６ｃに取手６ｄが
設けられている。
【００２０】また、試料導出部３には、無底円筒チュー
ブ１の他端に栓体中間部材７が装着され、栓体中間部材
７に貫通穴７ａが設けられ、この貫通穴７ａに栓部材８
の突出部を挿入することにより、無底円筒チューブ１の
端部を封止し得るようになされている。
ブ１の他端に栓体中間部材７が装着され、栓体中間部材
７に貫通穴７ａが設けられ、この貫通穴７ａに栓部材８
の突出部を挿入することにより、無底円筒チューブ１の
端部を封止し得るようになされている。
【００２１】コートビーズ４は、球形プラスチックビー
ズを使用し、その直径は１２０〜２２０μｍである。こ
の球形ビーズは、凝集惹起物として豚皮Ｉ型コラーゲン
懸濁液に投入されて撹拌混合した後、この混合物を遠心
分離機にかけて固液分離し、その表面に膜厚が約７５０
Åのコラーゲンの薄膜をコーティングして、コラーゲン
ビーズを形成する。或いは、凝集惹起物として豚皮Ｉ型
コラーゲン以外に、ＡＤＰ（Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ５−
ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｓｏｄｌｕｍ ｓａｌｔ：ア
デノシン−５′−二燐酸）液を用いる。このＡＤＰ液
に、球形プラスチックビーズを投入してコーティングす
る。または、球形プラスチックビーズに、ｖＷＦ（ｖｏ
ｎ ｗｉｌｌｅｂｒａｎｄ：フォンウィルブランド）を
コーティングする。このように球形ビーズ表面に、Ｉ型
コラーゲン或いは、ＡＤＰ又はｖＷＦをコーティングし
たコートビーズが用いられる。
ズを使用し、その直径は１２０〜２２０μｍである。こ
の球形ビーズは、凝集惹起物として豚皮Ｉ型コラーゲン
懸濁液に投入されて撹拌混合した後、この混合物を遠心
分離機にかけて固液分離し、その表面に膜厚が約７５０
Åのコラーゲンの薄膜をコーティングして、コラーゲン
ビーズを形成する。或いは、凝集惹起物として豚皮Ｉ型
コラーゲン以外に、ＡＤＰ（Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ５−
ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｓｏｄｌｕｍ ｓａｌｔ：ア
デノシン−５′−二燐酸）液を用いる。このＡＤＰ液
に、球形プラスチックビーズを投入してコーティングす
る。または、球形プラスチックビーズに、ｖＷＦ（ｖｏ
ｎ ｗｉｌｌｅｂｒａｎｄ：フォンウィルブランド）を
コーティングする。このように球形ビーズ表面に、Ｉ型
コラーゲン或いは、ＡＤＰ又はｖＷＦをコーティングし
たコートビーズが用いられる。
【００２２】血小板停滞率測定用具１０は、先ず、無底
円筒チューブ１内の一端部にコートビーズ４の漏出防止
用の多孔シート（ポリ塩化ビニル樹脂による網状シート
等）９を当てて栓体中間部材７を挿入する。多孔シート
９は、この表面に凝集反応が生じない材質を選択する。
続いて、無底円筒チューブ１内にコートビーズ４を０．
１ｇ充填した後、無底円筒チューブ１の他端部に栓本体
６ｃが設けられた栓体中間部材５を挿入し、概ね、コー
トビーズ４が充填された部分の長さＬが１４０ｍｍとし
た血小板停滞率測定用具を形成する。通常、コートビー
ズ４が充填された無底円筒チューブ１は、栓体中間部材
７を栓部材８で、栓体中間部材５を栓本体６ｃでそれぞ
れ封止されている。
円筒チューブ１内の一端部にコートビーズ４の漏出防止
用の多孔シート（ポリ塩化ビニル樹脂による網状シート
等）９を当てて栓体中間部材７を挿入する。多孔シート
９は、この表面に凝集反応が生じない材質を選択する。
続いて、無底円筒チューブ１内にコートビーズ４を０．
１ｇ充填した後、無底円筒チューブ１の他端部に栓本体
６ｃが設けられた栓体中間部材５を挿入し、概ね、コー
トビーズ４が充填された部分の長さＬが１４０ｍｍとし
た血小板停滞率測定用具を形成する。通常、コートビー
ズ４が充填された無底円筒チューブ１は、栓体中間部材
７を栓部材８で、栓体中間部材５を栓本体６ｃでそれぞ
れ封止されている。
【００２３】本実施形態の血小板停滞率測定用具１０
は、図２に示す恒温槽２０を付帯している。恒温槽２０
は、恒温槽本体１１にその蓋体１２が丁番１５で開閉自
在に設けられている。恒温槽本体１１には、温度を略３
７℃（３５〜３８℃，好ましくは３７℃）に設定する保
温機構が備えられ、採血管Ａを直立に保持して保温する
挿入保持部１３が数ヶ所設けられ、かつ血小板停滞率測
定用具１０を保温する挿入保持部１３と同数の溝状の載
置部１４が設けられている。また、蓋体１２内面部に
は、保温性を良好なものとするために、発泡樹脂体によ
る断熱材を貼設又は介装するとよい。
は、図２に示す恒温槽２０を付帯している。恒温槽２０
は、恒温槽本体１１にその蓋体１２が丁番１５で開閉自
在に設けられている。恒温槽本体１１には、温度を略３
７℃（３５〜３８℃，好ましくは３７℃）に設定する保
温機構が備えられ、採血管Ａを直立に保持して保温する
挿入保持部１３が数ヶ所設けられ、かつ血小板停滞率測
定用具１０を保温する挿入保持部１３と同数の溝状の載
置部１４が設けられている。また、蓋体１２内面部に
は、保温性を良好なものとするために、発泡樹脂体によ
る断熱材を貼設又は介装するとよい。
【００２４】血小板停滞率測定用具１０は、恒温槽２０
の載置部１４に載置されて保温されている。採血管Ａ
は、挿入保持部１３に挿入されて保温され、試料血液Ｂ
を採取した採血管Ａも挿入保持部１３に挿入保持され
る。なお、図２の恒温槽２０では、挿入保持部１３と載
置部１４とが５本の採血管Ａと血小板停滞率測定用具１
０とを載置し得るように構成されているが、本実施形態
に限定することなく、それ以上の本数を載置し得るよう
にしてもよいことは明らかである。
の載置部１４に載置されて保温されている。採血管Ａ
は、挿入保持部１３に挿入されて保温され、試料血液Ｂ
を採取した採血管Ａも挿入保持部１３に挿入保持され
る。なお、図２の恒温槽２０では、挿入保持部１３と載
置部１４とが５本の採血管Ａと血小板停滞率測定用具１
０とを載置し得るように構成されているが、本実施形態
に限定することなく、それ以上の本数を載置し得るよう
にしてもよいことは明らかである。
【００２５】次に、図１，図２を参照して、血小板停滞
率測定用具と恒温槽とを利用した血小板停滞率測定方法
について説明する。本測定方法の原理は、微細なコート
ビーズの径と血液の流速とを実験的に求めて、血小板に
ズリ応力を与えて、ＧＰＩｂ−ｖＷＦ依存性の血小板活
性を定量的に測定することができるようにした血小板停
滞率測定用具による血小板停滞率測定（検出）方法であ
る。
率測定用具と恒温槽とを利用した血小板停滞率測定方法
について説明する。本測定方法の原理は、微細なコート
ビーズの径と血液の流速とを実験的に求めて、血小板に
ズリ応力を与えて、ＧＰＩｂ−ｖＷＦ依存性の血小板活
性を定量的に測定することができるようにした血小板停
滞率測定用具による血小板停滞率測定（検出）方法であ
る。
【００２６】先ず、血小板停滞率測定用具１０と採血管
Ａとは恒温槽２０に載置して、３７℃に保温する。採血
管Ａには、既に抗凝固剤が注入されており、抗凝固剤と
しては３．２％若しくは３．８％のクエン酸ナトリウム
が用いられる。他の抗凝固剤として、ＥＤＴＡ／ヘパリ
ン等を用いてもよい。試料血液Ｂは、２．５ｍｌを採取
して、クエン酸ナトリウム１に対して９の容積比で、採
血管Ａ内に注入して、恒温槽２０で３７℃に保温して保
管する。
Ａとは恒温槽２０に載置して、３７℃に保温する。採血
管Ａには、既に抗凝固剤が注入されており、抗凝固剤と
しては３．２％若しくは３．８％のクエン酸ナトリウム
が用いられる。他の抗凝固剤として、ＥＤＴＡ／ヘパリ
ン等を用いてもよい。試料血液Ｂは、２．５ｍｌを採取
して、クエン酸ナトリウム１に対して９の容積比で、採
血管Ａ内に注入して、恒温槽２０で３７℃に保温して保
管する。
【００２７】恒温槽２０から所定温度に保温された血小
板停滞率測定具１０を取り出して、血小板停滞率測定具
１０の試料導入口２の中空円錐部５ｂに、図示しない試
料血液注入用シリンダの先端部を挿入して、血小板停滞
率測定具１０を垂直に保持する。続いて、試料血液Ｂ
は、押し出し法によって、血小板停滞率測定具１０のチ
ューブ内のコートビーズ４を、２０〜６０秒の範囲で通
過するように注入する。例えば、試料血液の流速では、
試料血液１ｍｌ当たり、１２０〜１５０ｍｍ／ｓｅｃの
範囲で、血液の流速が一定となるように注入する。な
お、注入速度は、２０秒以下となると、ズリ応力が発生
し難くなり、血小板凝集が不十分となり好ましくない。
また、注入速度を６０秒以上とすることは物理的にも困
難があり、好ましくない。試料血液Ｂの通過速度は、好
ましくは４０秒とする。
板停滞率測定具１０を取り出して、血小板停滞率測定具
１０の試料導入口２の中空円錐部５ｂに、図示しない試
料血液注入用シリンダの先端部を挿入して、血小板停滞
率測定具１０を垂直に保持する。続いて、試料血液Ｂ
は、押し出し法によって、血小板停滞率測定具１０のチ
ューブ内のコートビーズ４を、２０〜６０秒の範囲で通
過するように注入する。例えば、試料血液の流速では、
試料血液１ｍｌ当たり、１２０〜１５０ｍｍ／ｓｅｃの
範囲で、血液の流速が一定となるように注入する。な
お、注入速度は、２０秒以下となると、ズリ応力が発生
し難くなり、血小板凝集が不十分となり好ましくない。
また、注入速度を６０秒以上とすることは物理的にも困
難があり、好ましくない。試料血液Ｂの通過速度は、好
ましくは４０秒とする。
【００２８】凝集率の算出は、先ずクエン酸ナトリウム
に混合した試料血液中の血小板の数を計測して計測数Ａ
を求める。続いて、クエン酸ナトリウムに混合した試料
血液を血小板停滞率測定具１０を通過させて、通過した
試料血液中の血小板の数を計測して計測数Ｂを求める。
停滞率Ｃは、（Ａ−Ｂ）／Ａ×１００＝Ｃ（％）の算出
式から求めることができる。試料血液の停滞率Ｃは、上
記算出式から検出することができる。
に混合した試料血液中の血小板の数を計測して計測数Ａ
を求める。続いて、クエン酸ナトリウムに混合した試料
血液を血小板停滞率測定具１０を通過させて、通過した
試料血液中の血小板の数を計測して計測数Ｂを求める。
停滞率Ｃは、（Ａ−Ｂ）／Ａ×１００＝Ｃ（％）の算出
式から求めることができる。試料血液の停滞率Ｃは、上
記算出式から検出することができる。
【００２９】なお、血栓は血管壁と流速によって生じる
ズリ応力の程度により異なった反応を示し、大動脈や静
脈のような低ズリ応力下では、主としてＧＰＩａ／ＩＩ
Ｉａの活性化により、フィブリノーゲンを介した血小板
凝集を生じる。一方、細小動脈や動脈硬化病変のような
高ズリ応力下では、ｖＷＦ因子を介したＧＰＩｂとコラ
ーゲンとの結合が粘着の初期反応として重要である。ｖ
ＷＦ因子は、血管損傷により露出した血管内皮組織上に
結合し、血液中の血小板膜ＧＰＩｂを認識して結合す
る。この結合は、ｖＷＦ−ＧＰＩｂ結合からのシグナル
伝達の蓄積により血小板膜ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａの活性
化が起こり、この場合はフィブリノーゲンよりむしろｖ
ＷＦのＣｌドメインとの不可逆的結合を生じ、活性化血
小板の凝集塊を形成する。本発明の血小板停滞率測定具
は、高ズリ応力時の血小板凝集を良く反映したものであ
り、高ズリ応力下での血小板凝集の検査法に好適であ
る。
ズリ応力の程度により異なった反応を示し、大動脈や静
脈のような低ズリ応力下では、主としてＧＰＩａ／ＩＩ
Ｉａの活性化により、フィブリノーゲンを介した血小板
凝集を生じる。一方、細小動脈や動脈硬化病変のような
高ズリ応力下では、ｖＷＦ因子を介したＧＰＩｂとコラ
ーゲンとの結合が粘着の初期反応として重要である。ｖ
ＷＦ因子は、血管損傷により露出した血管内皮組織上に
結合し、血液中の血小板膜ＧＰＩｂを認識して結合す
る。この結合は、ｖＷＦ−ＧＰＩｂ結合からのシグナル
伝達の蓄積により血小板膜ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａの活性
化が起こり、この場合はフィブリノーゲンよりむしろｖ
ＷＦのＣｌドメインとの不可逆的結合を生じ、活性化血
小板の凝集塊を形成する。本発明の血小板停滞率測定具
は、高ズリ応力時の血小板凝集を良く反映したものであ
り、高ズリ応力下での血小板凝集の検査法に好適であ
る。
【００３０】
【発明の効果】上述のように、本発明によれば、血小板
が血管壁と血流によって生じるズリ応力の程度により異
なる反応を示すことを積極的に利用して、ＧＰＩｂ−ｖ
ＷＦ依存性の血小板活性化を定量的に測定ができる血小
板停滞率測定具を提供することができる利点がある。
が血管壁と血流によって生じるズリ応力の程度により異
なる反応を示すことを積極的に利用して、ＧＰＩｂ−ｖ
ＷＦ依存性の血小板活性化を定量的に測定ができる血小
板停滞率測定具を提供することができる利点がある。
【００３１】また、本発明によれば、血小板停滞率測定
具と恒温槽とにより、血小板粘着凝集機能の測定が可能
であり、開業医等でも容易に使用し得るものであり、早
期血栓症患者等の診断に利用することができる利点があ
る。さらに、安価であるため血栓性疾患に多く投与され
ている各種抗血小板剤の薬効判断に利用することが可能
である。このような広い範囲で簡便に利用することがで
き、しかも測定方法が簡便であるとともに、恒温槽を利
用して検査が行われるので、検査精度の高い血小板停滞
率測定具を提供することができる。
具と恒温槽とにより、血小板粘着凝集機能の測定が可能
であり、開業医等でも容易に使用し得るものであり、早
期血栓症患者等の診断に利用することができる利点があ
る。さらに、安価であるため血栓性疾患に多く投与され
ている各種抗血小板剤の薬効判断に利用することが可能
である。このような広い範囲で簡便に利用することがで
き、しかも測定方法が簡便であるとともに、恒温槽を利
用して検査が行われるので、検査精度の高い血小板停滞
率測定具を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の血小板停滞率測定用具の実施形態を示
す断面図である。
す断面図である。
【図２】
本発明の血小板停滞率測定用具に付帯
する恒温槽の概略斜視図である。
本発明の血小板停滞率測定用具に付帯
する恒温槽の概略斜視図である。
１ 無底円筒チューブ
２ 試料導入部
３ 試料導出部
４ コートビーズ
５，７ 栓体中間部材
６，８ 栓本体
９ 多孔シート
１０ 血小板停滞率測定用具
１１ 恒温槽本体
１２ 蓋体
１３ 挿入保持部
１４ 載置部
１５ 丁番
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
Ｆターム(参考） 2G045 AA02 CA24 GC30 JA01
4B029 AA07 AA12 BB11 CC01 FA15
4B063 QA20 QQ03 QR41 QR48 QS39
QX01
Claims (5)
- 【請求項１】 一端に試料血液の導入部と、他端に試料
血液の導出部とを備えるチューブ内に、直径が１２０〜
２２０μｍの球形ビーズに凝集惹起物をコーティングし
たコートビーズを充填したことを特徴とする血小板停滞
率測定用具。 - 【請求項２】 前記凝集惹起物がＩ型コラーゲン、ＡＤ
Ｐ、ｖＷＦ等の物質の何れかであることを特徴とする請
求項１に記載の血小板停滞率測定用具。 - 【請求項３】 前記血小板停滞率測定用具が、該用具を
保温する載置部と、採血管を保温し、かつ試料血液を採
取した採血管を保温する挿入保持部とを有する恒温槽を
付帯することを特徴とする請求項１又は２に記載の血小
板停滞率測定用具。 - 【請求項４】 直径１２０〜２２０μｍの球形ビーズに
凝集惹起物をコーティングしたコートビーズをチューブ
内に充填した血小板停滞率測定用具及び試料血液をクエ
ン酸ナトリウムに加えた採血管を、恒温槽で３７℃前後
に保温し、該チューブ内に押し出し法によって、クエン
酸ナトリウムを加えた該試料血液を、ズリ応力が生じる
速い流速で該コートビーズに接触させ、該試料血液のコ
ートビーズ接触前と接触後の血小板数から血小板停滞率
を測定することを特徴とする血小板停滞率測定用方法。 - 【請求項５】 前記凝集惹起物がＩ型コラーゲン、ＡＤ
Ｐ、ｖＷＦ等の物質の何れかであることを特徴とする請
求項４に記載の血小板停滞率測定方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2002153534A JP2003344391A (ja) | 2002-05-28 | 2002-05-28 | 血小板停滞率測定用具およびその測定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2002153534A JP2003344391A (ja) | 2002-05-28 | 2002-05-28 | 血小板停滞率測定用具およびその測定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2003344391A true JP2003344391A (ja) | 2003-12-03 |
Family
ID=29770549
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2002153534A Pending JP2003344391A (ja) | 2002-05-28 | 2002-05-28 | 血小板停滞率測定用具およびその測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2003344391A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007298511A (ja) * | 2006-04-28 | 2007-11-15 | Dade Behring Marburg Gmbh | 血小板機能の流動状態下での測定方法および装置 |
| US20150010995A1 (en) * | 2011-08-10 | 2015-01-08 | Korea University Research And Business Foundation | Microchip-based apparatus for examining platelet composite functions |
-
2002
- 2002-05-28 JP JP2002153534A patent/JP2003344391A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007298511A (ja) * | 2006-04-28 | 2007-11-15 | Dade Behring Marburg Gmbh | 血小板機能の流動状態下での測定方法および装置 |
| US20150010995A1 (en) * | 2011-08-10 | 2015-01-08 | Korea University Research And Business Foundation | Microchip-based apparatus for examining platelet composite functions |
| US9239325B2 (en) * | 2011-08-10 | 2016-01-19 | Korea University Research And Business Foundation | Microchip-based apparatus for examining platelet composite functions |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20041026 |
|
| A521 | Written amendment |
Effective date: 20041215 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20050322 |