JP2002544210A - 炎症で仲介される感染症に対する抗炎症性治療方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 炎症で併介される粘膜感染症の進行を阻害する方法を提供する。その方法には有効量の抗炎症薬を投与することが含まれている。また粘膜感染症の活性化と進行を予防し、阻害する組成物および製品も提供する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】

本発明は、レトロウィルス感染症を治療するための抗炎症薬の使用に関する。
具体的に述べると本発明はＨＩＶ感染症の治療法に関する。

【０００２】

【従来の技術と発明が解決しようとする課題】

ＨＩＶの感染サイクルは、このウィルスが標的細胞に侵入することによって始
まる。ヒトＣＤ４は、ＨＩＶが認識するＴ細胞の一次受容体であると考えられて
いる。ＨＩＶエンベロープの糖タンパク質（ｅｎｖ）がＣＤ４受容体に結合する
と、ウィルスと細胞膜の融合が起り、その結果、ウィルスが宿主中に侵入しやす
くなる。ＨＩＶ感染宿主細胞の表面のｅｎｖが最終的に発現すると、この細胞は
未感染のＣＤ４陽性細胞と融合できるようになり前記ウィルスをまきちらす。し
かし、ＨＩＶはその外の細胞、例えば単球細胞、Ｂ細胞および樹枝状細胞にも侵
入することができ、これらの細胞はＣＤ４を発現できないがウィルスの貯槽とし
て働く。サイトカイン類はＨＩＶの複製に作用することが知られている。親炎症
性（pro-inflammatory）サイトカイン類はＨＩＶの複製を促進するが（Fauci、N
ature、３８４巻、５２９〜５３４頁、１９９６年）、βケモカイン類はＣＣＲ
５を利用する絶対ウィルスの複製を阻害し（Mooreら、J. Virol.７０巻５５１〜
５６２頁１９９６年）そしてＣＸＣＲ４を利用するウィルス分離株の複製を促進
する（Doleiら、AIDS１２巻１８３〜１９０頁１９９８年）。

【０００３】 ＣＤ４、Ｔ細胞受容体およびＭＨＣクラスＩＩのような分子が仲介する、生体
内でのヘルパーＴ細胞とＢ細胞の物理的接触は、胸腺依存体液性免疫が発生する
のに不可欠である。ＣＤ４０とＣＤ４０リガンドの相互作用は免疫の発生と維持
のために重要である。ＣＤ４０は、４５ｋＤａの膜貫通糖タンパク質であり、そ
してその細胞内ドメインにおいて、神経成長因子受容体、ＴＮＦ受容体類、Ｆａ
ｓ、ＣＤ１７およびＣＤ３０と相同の表面分子のファミリーのメンバーである（
Armitageら、Nature３５７巻８０〜８２頁１９９２年）。ＣＤ４０は、未熟Ｂリ
ンパ球と成熟Ｂリンパ球上に確認されており、抗体によって架橋されると、単球
、樹状細胞、胸腺上皮性細網細胞上に、Ｂ細胞の増殖を誘発する（Vallら、Eur.
J. Immunol.１９巻１４６４〜１４６７頁１９８９年）。ＣＤ４０は、抗原提示
細胞（ＡＰＣ）上で、抗原特異的Ｔ細胞の活性化を促進する共刺激受容体として
働く（Clarkら、Adv. Immunol.６３巻４３〜６８頁１９９６年に概説されている
）。ＣＤ４０に対するリガンドは、ｇｐ３９、ＣＤ４０リガンドまたはＣＤ４０
Ｌと呼ばれているが、分子として特性が決定されており（Armitageらの１９９２
年の前掲論文）、そして活性化ＣＤ４＋Ｔｈ細胞上に発現されることが発見され
ている（Spriggsら、Ｔ. Exp. Med.１７６巻１５４３〜１５５０ページ１９９２
年）。ｇｐ３９タンパク質を発現する細胞は、Ｂ細胞の増殖を刺激することがで
き、そして他の刺激シグナルによって抗体の増殖を誘発できる（Armitageら１９
９２年の前掲論文）。ＣＤ４０がＣＤ４０Ｌと結合すると、ＣＤ８０とＣＤ８６
の発現および親炎症性サイトカイン類の分泌が促進される。

【０００４】 正常な腸管は、低レベルの軽い炎症を特徴としており、この炎症は、局所で分
泌されるケモカイン類とサイトカイン類の構成レベルによって起こる[J. Walsh
編「Gut Peptides」８５１頁、１９９４年（Raven Press, Ltd. 米国ニューヨー
ク）のShanahanとAntonの論文；Schreiberら、Gastroenterology １０１巻１０
２０頁１９９１年；MacDermottら、Inflammatory Bowel Diseases ４巻５４頁１
９９８年；Luster, N. Engl. J. Med.３３８巻４３６頁１９９８年]。健常人の
場合、胃腸リンパ球が、末梢血液のリンパ球と、機能と表現型が異なっているこ
とが分かっている（Allisonら、Gastroenterology ９９巻４２１頁１９９０年；
Jarryら、Eur. J. Immunol. ２０巻１０９７頁１９９０年；McGowanら、Neuro-i
mmunomodulation ４巻７０頁１９９７年）。事実上、すべての粘膜ＣＤ４＋リン
パ球は活性化マーカーを発現しそしてＣＤ４５ＲＯ＋メモリサブセットのリンパ
球である（Schieferdeckerら、J. Virol.１４９巻２８１６頁１９９２年）。Ｈ
ＩＶ−１に感染している状態で、腸管Ｔリンパ球の各種表現型の異常が、ＣＤ４
＋リンパ球の欠失と関連していることが多いと報告されている（Schniederら、c
lin. Exp. Immunol.９５巻４３０頁１９９４年）。

【０００５】 有効なワクチンがないので、ＨＩＶに感染する個体の数が実質的に増大するで
あろう。さらに、有効な治療法がないのでＨＩＶに感染したほとんどの個体は、
後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）にかかり、免疫系の劣化またはウィルスの直
接の病原作用が原因で起こる日和見感染症と悪性腫瘍によって死亡する。疾病の
進行を遅らせるいくつかの抗ＨＩＶ薬が現在利用できるとはいえ、より有効な治
療法と薬物の組合せに対していぜんとして差し迫った要望がある。

【０００６】

【課題を解決するための手段】

本発明は、レトロウィルス類、例えばヒト免疫不全ウィルス類（ＨＩＶ）が、
静的なまたは進行性の免疫不全状態であるという以前の見解とは対照的に、炎症
状態を刺激するという発見に基づいている。このような炎症状態は、感染した炎
症細胞を活性化してウィルス粒子を産生させるのみならず、ＨＬＤが感染するた
めに利用する、炎症を起こしている受容体の部位に追加の炎症細胞を補充するこ
とによって、ＨＩＶに対して日和見の利点を提供する。

【０００７】 一実施態様で、本発明は、粘膜組織に、抗炎症薬単独または抗ウィルス薬を組
み合わせた抗炎症薬の阻害有効量を接触させることによって、粘膜組織の炎症が
仲介する感染を阻害する方法を提供する。炎症が仲介する感染はレトロウィルス
などのウィルス［例えばヒト免疫不全ウィルス（ＨＩＶ）１型、ＨＩＶ２型およ
びシミアン免疫不全ウィルス（ＳＩＶ）からなる群から選択される免疫不全ウィ
ルスなどのレンチウィルス］によって起こる。粘膜組織の、抗炎症薬単独または
抗ウィルス薬と組み合わせた抗炎症薬との接触は、生体内、生体外または半ビボ
で行うことができる。その粘膜組織は一般に哺乳類の粘膜組織であり好ましくは
ヒトの粘膜組織である。このような粘膜組織の例としては、少数の例を挙げるな
らば、尿生殖器の組織（例えば膣の組織）、胃腸の組織、下部消化管の組織、お
よび鼻−喉頭組織がある。抗炎症薬は、例えば局所投与、静脈投与、経口投与ま
たは非経口投与それぞれによって局所または全身に投与することができる。抗炎
症薬は、抗ウィルス薬と組み合わせて使用する場合、抗ウィルス薬を投与する前
、抗ウィルス薬を投与するのと同時にまたは抗ウィルス薬を投与した後に投与す
ることができる。その抗炎症薬は、例えば炎症細胞の補充を減らし、ケモカイン
類の産生を減らし、親炎症性ケモカイン類の産生を減らすかまたはケモカイン受
容体もしくはサイトカイン受容体とそのリガンドとの相互作用を阻害する抗炎症
薬でよい。これらの抗炎症薬は、単独もしくは組合せで投与してもよく、そして
単独もしくは組み合わせた他の抗ウィルス化合物とともに投与してもよい。

【０００８】 別の実施態様で、本発明は、レトロウィルスに感染した細胞を、ウィルスの活
性化を阻害する量の抗炎症薬単独または抗ウィルス薬を組み合わせた抗炎症薬に
接触させることによって、レトロウィルスの活性化を阻害する方法を提供する。
親炎症性メディエーターの自己分泌と傍分泌の作用によって炎症細胞が活性化す
ると、炎症部位における炎症細胞の転写の調節に変化が起こる。このようなプロ
セスを通じて炎症細胞が活性化すると、次に、レトロウィルスの潜伏感染が活性
化される。このようなレトロウィルスとしては、免疫不全ウィルスＨＩＶ１型、
ＨＩＶ２型およびシミアン免疫不全ウィルス（ＳＩＶ）などのレンチウィルスが
ある。細胞と、抗炎症薬単独または抗ウィルス薬と組み合わせた抗炎症薬との接
触は、生体内、生体外または半ビボで行うことができる。抗炎症薬は、抗ウィル
ス薬と組み合わせて使用する場合、抗ウィルス薬を接触させる前、抗ウィルス薬
を接触させるのと同時にまたは抗ウィルス薬を接触させた後に接触させてもよい
。その細胞は粘膜細胞であり、一般に哺乳類の粘膜細胞であり、ヒトの粘膜細胞
が好ましい。このような粘膜細胞の例としては、少数の例を挙げると、尿生殖器
組織（例えば膣組織）、胃腸組織、下部消化管の組織、口腔・頬側組織および鼻
−喉頭組織由来の細胞がある。

【０００９】 さらに別の実施態様で、本発明は、被検者を、有効量の抗炎症薬単独または抗
ウィルス薬を組み合わせた抗炎症薬と接触させることによって、炎症が仲介する
被検者の粘膜感染を阻害する方法を提供する。炎症仲介感染は、ウィルスまたは
他の病原体によって起こる。そのウィルスは、レトロウィルスであり例えば免疫
不全ウィルスＨＩＶ１型、ＨＩＶ２型およびシミアン免疫不全ウィルス（ＳＩＶ
）などのレンチウィルスがある。前記接触は、生体内で行われる場合、例えば、
局所投与、静脈投与、経口投与また非経口投与それぞれによって、抗炎症薬を局
部または全身に投与することによって行われる。抗炎症薬は、抗ウィルス薬と組
み合わせて使用する場合、抗ウィルス薬を投与する前、抗ウィルス薬と同時にま
たは抗ウィルス薬を投与した後に投与してもよい。被検者は、一般に哺乳類であ
り、好ましくはヒトである。

【００１０】 別の実施態様で、本発明は、炎症仲介粘膜感染症にかかっているかまたはかか
っている危険性がある被検者を、有効量の抗炎症薬単独または抗ウィルス薬を組
み合わせた抗炎症薬と接触させて炎症仲介粘膜感染症が他の被検者に伝染するの
を阻害することによって、炎症仲介粘膜感染症にかかっているかまたはかかって
いる危険性がある被検者から他の被検者へ炎症仲介粘膜感染症が伝染するのを阻
害する方法を提供する。その炎症仲介粘膜感染症はウィルスまたは他の病原体に
よって起こる。そのウィルスは、レトロウィルスであり、例えば免疫不全ウィル
スＨＩＶ１型、ＨＩＶ２型およびシミアン免疫不全ウィルス（ＳＩＶ）などのレ
ンチウィルスである。炎症仲介粘膜感染症にかかっているまたはかかっている危
険性がある被検者に対する前記接触が生体内で行われる場合、その接触は、例え
ば局所投与、静脈内投与、経口投与または非経口投与それぞれによって、抗炎症
薬を局部または全身に投与することによって行われる。抗炎症薬は、抗ウィルス
薬と組み合わせて使用される場合、抗ウィルス薬を投与する前、抗ウィルス薬と
同時にまたは抗ウィルス薬を投与した後に投与してもよい。炎症仲介粘膜感染症
にかかっているかまたはかかっている危険性がある被検者は一般に哺乳類であり
好ましくはヒトである。

【００１１】 さらに別の実施態様で、本発明は、有効量の抗炎症薬単独または抗ウィルス薬
を組み合わせた抗炎症薬を、被検者に接触させることによって、被検者の免疫仲
介感染症の進行を阻害する方法を提供する。その炎症仲介粘膜感染症は、ウィル
スもしくは他の病原体によって起こるか、またはウィルスもしくは他の病原体に
よる感染に関連している。そのウィルスはレトロウィルスであり、例えば免疫不
全ウィルスＨＩＶ１型、ＨＩＶ２型およびシミアン免疫不全ウィルス（ＳＩＶ）
などのレンチウィルスである。前記接触が生体内で行われる場合、その接触は、
例えば局所投与、静脈投与、経口投与または非経口投与それぞれによって、抗炎
症薬を局部または全身に投与することによって行われる。抗炎症薬は、抗ウィル
ス薬と組み合わせて使用される場合、抗ウィルス薬を投与する前、抗ウィルス薬
と同時にまたは抗ウィルス薬を投与した後に投与してもよい。被検者は一般に哺
乳類であり、好ましくはヒトである。

【００１２】 追加の実施態様で、本発明は、特定の組織、例えば尿生殖器、胃腸または他の
粘膜組織などに存在する炎症細胞の数を減らすことによってＨＩＶの複製、活性
化または発達を阻害する、予防有効量の抗炎症薬単独または抗ウィルス薬と組み
合わせた抗炎症薬を、ＨＩＶ感染症にかかる危険性がある被検者に投与すること
によって、被検者がヒト免疫不全ウィルスに感染するのを防止するかまたは感染
する確率を低くする方法を提供する。

【００１３】 さらに別の実施態様で、本発明は、特定の組織、例えば尿生殖器、胃腸または
他の粘膜組織などに存在する炎症細胞の数を減らすことによってＨＩＶの複製、
活性化または発達を阻害する、有効量の抗炎症薬単独または抗ウィルス薬と組み
合わせた抗炎症薬を感染した被検者に投与して、前記感染した被検者から別の被
検者にＨＩＶが伝染するのを防止するかまたは伝染する確率を低下させることに
よって、ヒト免疫不全ウィルスがＨＩＶに感染している被検者から別の被検者に
伝染するのを防止するかまたは伝染する確率を低下させる方法を提供する。

【００１４】 また、粘膜組織に送達されるように設計された医薬として許容できる担体中に
、治療上有効な量の抗炎症薬の少なくとも一回の投与量を含有する医薬組成物で
あって、その投与量が免疫不全ウィルスの発達、感染または伝染を阻害するかま
たはそれらの確率を低下させるのに有効な量である医薬組成物が提供される。

【００１５】 別の実施態様で、本発明は、少なくとも一種の抗炎症薬および免疫不全ウィル
ス感染症を阻害する際の前記抗炎症薬の使用法についての説明書を含む製品を提
供する。製品としては、少なくとも一種の抗炎症薬単独または抗ウィルス薬と組
み合わせた抗炎症薬を含んでいてもよい。製品としては、例えばコンドーム、避
妊用スポンジ、ペッサリー（diaphragm）、子宮頸キャップ、膣リング、坐剤お
よび浣腸剤がある。使用説明書（例えば、免疫不全ウィルス感染症を予防する場
合、またはある被検者から他の被検者に免疫不全ウィルスが伝染するのを予防ま
たは阻止する場合の使用説明書）が、製品に添付されている。

【００１６】 本発明の一つ以上の実施態様の詳細を、以下の添付図面と説明で述べる。本発
明の他の特徴、目的および利点は以下の説明と図面および特許請求の範囲から分
かるであろう。

【００１７】

【発明の実施の形態】

本明細書および本願の特許請求の範囲に使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」
および「ｔｈｅ」は、特にことわらない限り、複数を含むことに留意しなければな
らない。したがって、例えば「ａ ｃｅｌｌ」はこのような細胞の複数を含む。

【００１８】 本願に使用される技術用語と科学用語はすべて、特にことわらない限り、本発
明が属する技術分野の当業技術者が通常理解しているのと同じ意味をもっている
。本願に記載しているのと類似しているかまたは均等の方法、装置および材料は
、本発明の実施または試験に使用できるが、以下には、好ましい方法、装置およ
び材料を説明する。

【００１９】 本願に挙げたすべての刊行物は、これら刊行物に記載されていて、本願で説明
する発明と関連して使用できる細胞系、抗体および方法を記載し開示するため、
全体を本願に援用するものである。意味が矛盾する場合は、本明細書の方が優先
する。上記諸刊行物は、その本文を通じて、本願の出願日より以前のその開示事
項を専ら提供するものである。本発明の発明者らが先行発明のせいで前の日付に
することができないという自白とみなされるものは本願にはなにもない。

【００２０】 用語「阻害する」または「阻害している」は、測定可能な量で表される活性、
機能または特性を低下すること、例えば少なくとも３０％以上低下させることを
意味する。阻害される複数の異なる活性がある場合（例えば、細胞の補充、親炎
症性メディエーターの産生、細胞もしくはウィルスの活性化、ウィルスの複製ま
たはウィルスの発達／増殖の防止）、単一の活性を低下させれば、（他の活性が
あってもなくても）、この定義の範囲内に入るのに十分である。さらに単一の薬
剤または複数の薬剤が活性を阻害するために投与される場合、単一活性の単一薬
剤による低下または単一活性の薬剤の複数の組合せによる低下は、上記定義の範
囲内に入れるの十分である。用語「炎症阻害量」は、炎症反応または炎症の症状
を調節、阻害または抑制するのに必要な抗炎症薬の量を意味する。

【００２１】 用語「活性化」は、本願で使用する場合、ウィルスに関して使用する時、ウィ
ルス粒子の数もしくはウィルス量が全身もしくは局部で増大すること、またはウ
ィルスのタンパク質もしくは核酸の細胞内での合成が増大することを意味する。
上記増大は、一般に、感染した細胞の転写状態が変化して、細胞によるウィルス
の産生が増大することによって誘発される。また、上記増大は、転写状態のこの
ような変化とは独立して起こることもある。感染細胞の転写状態の変化は、細胞
の増殖、分化または可動性（走化性）を調節するサイトカン類、ケモカイン類な
どの分子で誘発される。また、感染細胞の転写状態の変化は、ウィルスもしくは
他の病原体（細菌、真菌、マイコバクテリアなど）の感染によって誘発されるか
または免疫調節抗原（例えばＬＰＳ）に暴露することによって誘発されることも
ある。ウィルスの量の増大を一般にもたらす活性化は、次いでウィルスに感染し
た細胞の数の増大をもたらし、これは「ウィルスの拡散」と呼称されている。

【００２２】 用語「炎症で仲介された」は、本願で使用される場合、感染、疾患、障害また
は症状に関して使用される時、被検者の炎症反応に応答して、進行もしくは拡散
するかまたは加速もしくは悪化する感染、疾患、障害もしくは症状を意味する。
ＨＩＶなどのレトロウィルスの感染の例の場合、その進行は例えば、感染した細
胞およびウィルスが存在する炎症部位に移動する標的（未感染）細胞が増大する
ことによって起こる。補充された細胞は、ウィルス感染に対する新しい標的を提
供し、その結果、ウィルスが拡散し、次いで感染が進行する。炎症に仲介される
状態としては、感染細胞（例えば潜伏状態の細胞）が、免疫調節分子などのシグ
ナリング分子（例えば、炎症反応を増大する、親炎症性サイトカインなどの分子
）によって暴露されると、細胞の転写状態を調節して、細胞によるウィルスの産
生を刺激または増大する状態がある。

【００２３】 用語「粘膜組織」は、本願で使用される場合、粘膜細胞がその中に認められる
組織を意味し、いくつかの例を挙げると、例えば胃腸組織（例えば、胃、小腸、
大腸、直腸）、尿−生殖器組織（例えば膣組織、陰茎組織、尿道）、鼻−喉頭組
織（例えば鼻組織、喉頭組織）、口（頬面組織）がある。その外の粘膜組織は、
当業技術者であれば分かっており容易に確認できる。

【００２４】 本発明の発明者らは、レトロウィルス感染症（例えば、ＨＩＶ感染症などの免疫
不全ウィルス感染症）が、被検者の組織（例えば粘膜組織）に存在する炎症症状
であるということを発見したのである。大部分の研究報告が、粘膜中のリンパ球
減少すなわち「消炎」の状態が、感染被検者の血液中に徐々に見られる前記状態
と並行して起こると強調している。健康な未感染の個体の粘膜細胞は、多数のＣ
Ｄ４＋Ｔ細胞（活性化ＣＤ４＋Ｔ細胞、メモリＣＤ４＋Ｔ細胞、コレセプター発
現ＣＤ４＋Ｔ細胞）で占められているので、これらの組織を通じて感染する可能
性は高い。粘膜免疫細胞（大部分がＣＤ８＋Ｔリンパ球とマクロファージのよう
である）は、感染に対する一般的な反応で、追加のＴリンパ球と粘膜感染部位に
補充しようとして、親炎症性のケモカイン類とサイトカインを増大したレベルで
分泌する。この高められた反応すなわち「炎症反応」は、感染を制限しようとし
てかりたてられるが、感染に対する潜在的な標的の数を有意に増大する働きをし
て、ウィルスを拡散させる。したがって、本発明は、広範囲のレトロウィルス感
染症、レトロウィルスに関連する疾患と障害の治療方法であって、多種類の抗炎
症薬だけまたは多種類の抗ウィルス薬を組み合わせた抗炎症薬を使用し、被検者
の炎症組織への追加の感受性細胞の補充を防止または阻害して、サイトカインな
どの親炎症性メディテーターによる活性化などの炎症機構を通じてなされる炎症
細胞の活性化を、これらの経路を阻害しおよび粘膜組織に暴露された他の被検者
（未感染かまたは感染している）への伝染を防ぐことによって防止する治療方法
に関する。本発明の方法を使用して治療できるレトロウィルス感染症としては、
多種類のレトロウィルスで起こるレトロウィルスによる障害がある。

【００２５】 例えばＳＩＶに感染したマカク（macaque）の場合、胃腸管が、初期のＣＤ４
＋リンパ球喪失とウィルスの複製が起こる主要部位であるので、ＳＩＶ感染症は
本来、粘膜免疫系の疾患であると示唆されている〔Veazeyら、Science ２８０巻
４２７頁１９９８年；R.H.Heatley編「Gastrointestinaland Hepatic Immunolog
y」におけるMacDonaldとSpencerの報告（Cabridge University Press、１９９４
年）〕。ヒトのＨＩＶ感染症も、粘膜免疫系を冒し、感染症ウィルス粒子が粘膜
試料から直接発見されており、in situの試験結果は、粘膜固有層（lamina prop
ria）のＴリンパ球が、感染する最初の細胞に含まれていることを示した（Kotel
erら、Am.J.Pathol. １３９巻８２３頁１９９１年；Heiseら、J.Infect.Dis. １
６９巻１１１６頁１９９４年；Heiseら、Am.J.Pathol. １４２巻１７５９頁１９
９３年；Smit Mc Brideら、J.Virol. ７２巻６６４６頁１９９８年；Claytonら
、Gastroenterology １０３巻９１９頁１９９２年；Ellakayら、Am.J.Clen.Path
ol. ８７巻３５６頁１９８７年；Jarryら、Histopathology １６巻１３３頁１９
９０年；Lancerら、Am.J.Pathol. １５３巻４８１頁１９９８年）。さらに、直
腸S状結腸の粘膜ライニングが、肛門挿入性交中にウィルスが導入される主要部
位である（Pattersonら、Am.J.Pathol. １５３巻４８１頁１９９８年）。

【００２６】炎症 炎症は、サイトカイン類、プロスタグランジン類、ロイコトリエン類、ケモカ
イン類、粘着分子類（例えばＬＦＡ−１）などを含む、当業技術者に知られてい
る親炎症性メディエーターによって起こる個々のおよび関連している多数のカス
ケードまたは反応から起こる。例えば、ケモカインの受容体は、ウィルスがＣＤ
４＋細胞に侵入できるようにする重要な役割を演じる。これら受容体に対するリ
ガンドはケモカインと呼ばれているが、これも重要である。これらのケモカイン
類は、親炎症性サイトカインとともに、細胞の主要な刺激物質であるのみならず
、炎症カスケードの増幅にも別の役割を演じている。これらの可溶性炎症性メデ
ィエーターは主としてＣＤ８＋Ｔ細胞から生成される。これらメディエーターは
、一旦生成されると、傍分泌および自己分泌の方式で作用して、その細胞の近く
の細胞をさらに活性化して追加のＴ細胞を炎症部位に補充する。これら追加のリ
ンパ球は、それ自体活性化されて、増幅する炎症のカスケードに寄与している。

【００２７】 炎症によって、リンパ球とマクロファージ（ＣＤ４＋細胞）が刺激される。Ｈ
ＩＶが宿主にしているこれらの炎症細胞は、刺激されると、多量のＨＩＶウィル
スを産生するように誘発される。ＨＩＶに感染していない健康な被検者でも、腸
は、その表面に接触する潜在病原体の浴から内部環境を保護するために必要な低
レベルの生理的炎症の状態を維持している。したがって、この浸潤エクスプレス
（infiltrate express）を構成しているリンパ球とマクロファージの大部分が刺
激される。ＨＩＶの主要標的は刺激されたＣＤ４＋細胞であり、その中で最も有
効にＨＩＶウイルスが複製する。この種の細胞は、胃腸の粘膜に充満している。
ウィルスの複製が増大すると、ＨＩＶはその粘膜全体にわたって一層大きく広が
り、粘膜のＨＩＶウィルス量が高くなる。抗ＨＩＶ治療法の主な目的は、ＨＩＶ
が複製してＣＤ４＋細胞中に拡散して、ＨＩＶがＣＤ４＋細胞をついには破壊し
てしまうＨＩＶの性能を低下させることである。ＨＩＶの複製を有効に低下させ
ると、抗ウィルス薬剤に対する耐性をもたらす、ＨＩＶの遺伝物質の突然変異を
起こすＨＩＶの能力も低下する。用語「免疫抑制活性」は、本願で使用する場合
、Ｂ細胞とＴ細胞が反応して炎症部位に補充されるかまたは活性化される能力を
阻害または低下させることを意味する。ＮＳＡＩＤ（非ステロイド性抗炎症薬）
はプロスタグランジン類（ＰＧ）の合成を阻害することが明らかになっている。
ＰＧは細胞分裂抑制剤である。

【００２８】 炎症細胞を活性化する他のシグナルとしては、粘着受容体例えばＬＦＡ−１（
ＣＤ１７ａおよびＣＤ１８）の、その対抗受容体（counter receptor）のうちの
一つ例えばＩＣＡＭ−１（ＣＤ５４）との結合がある（Stauntonら、cell ６１
巻２４３〜２５４頁１９９０年）。第二シグナルが遮断されると、抗原特異的Ｔ
細胞はアポトーシスによって死ぬかまたは細胞アレルギーの状態になる。ＬＦＡ
−１とＩＣＡＭ−１に対するモノクローナル抗体による上記相互作用の遮断によ
って、心臓の同種移植を受けているマウスの生存期間が増大する（Isobeら、Sci
ence ２５５巻１１２５〜１１２７頁１９９２年）。

【００２９】 胃腸粘膜はこのリンパ組織の一要素であり、そしてＨＩＶが前記粘膜を、疾患
の前段階で冒すことを示唆する証拠が増えている。胃腸管は、大部分の患者の伝
染経路であるのみならず最大のリンパ系器官である。上記のように、胃腸粘膜は
低レベルの生理的炎症の状態を特徴とし、そして、そのリンパ球の大部分が活性
化されている。胃腸粘膜中に存在する親炎症性サイトカイン類の自然の濃度が高
いので、この部位でのＨＩＶの複製が促進されるようであり、その結果、粘膜の
ＨＩＶウィルス量が高くなり、かつ新しい標的胃腸ＣＤ４＋細胞の感染が持続す
る。

【００３０】 本発明の発明者らは、大部分の胃腸ＣＤ４＋Ｔ細胞が、ＨＩＶが進入するのに
必要なケモカイン受容体を発現することを発見したのである。胃腸粘膜のリンパ
球の大多数はＣＣＲ５とＣＸＣＲ４の両者を発現する。ＣＣＲ５の場合、粘膜の
単核細胞（ＭＭＣ）は、細胞当りで比べると血液由来の単球より高いレベルの上
記受容体を発現するようである。本発明の発明者らは、前記粘膜細胞が生体外で
、末梢血液の細胞よりＨＩＶに罹患しやすいことを発見したのである。

【００３１】 ＨＩＶの核酸は、ＨＩＶに感染した個体の大部分の粘膜に見つけることができ
、Kotlerらは、ｇａｇ特異的プライマーを使用するＰＣＲによって、Kotlerらが
試験した２０名の患者の７０％にＨＩＶ ＤＮＡを検出した。本発明の発明者ら
は、血漿のウィルス量を検出できない患者でさえ、その粘膜にウィルスを複製し
ていることを発見したのである。マカクが腸管経由で感染していようと、または
非経口経由で感染していようと、高いＳＩＶウィルス量が胃腸粘膜に見られるが
、このことは、胃腸粘膜が、ＨＩＶに対する高い個有の感受性を有していること
を示唆している。感染後、これらのマカクは、胃腸粘膜のＣＤ４＋細胞が、早期
に（７〜２１日以内）大きく失われることを示す。活発なＨＩＶ活性のこの徴候
は他のリンパ部位に反映されない。ヒトの場合、粘膜ＣＤ４＋細胞の喪失は、慢
性感染症の早期無症候相中と、臨床ＡＩＤＳが始まった後の両方に、結腸と十二
指腸に発見されている。

【００３２】 本発明の発明者らは、レトロウィルス感染症、例えば免疫不全ウィルス類より
具体的に述べるとＨＩＶと関連する感染症は、炎症の状態と関連していることを
発見した。その炎症は、細胞炎症、可溶性両者の炎症である。ウィルスに感染し
易い多種類の組織（例えば粘膜組織）には炎症が存在している。ＨＩＶ感染症に
関連する炎症プロプスおよびケモカイン類とケモカイン受容体類（ＨＩＶに対す
るコレセプターとして機能する）の役割を立証すれば、免疫不全に関連するウィ
ルス例えばＨＩＶ−１／２が起こすこのようなレトロウィルス感染症を治療する
新規な治療法が提供される。

【００３３】 粘膜炎症の領域に見られる炎症細胞は、大部分がＣＤ−４陽性Ｔリンパ球の活
性化されたメモリ表現型であり、ＨＩＶにとって不可欠のコレセプターを高いレ
ベルで発現するのでＨＩＶにとって好ましい標的細胞である。ケモカインレセプ
ターを含むこれらコレセプターは、βケモカイン類に対する受容体として機能す
る内因性炎症免疫反応の正常部分である。これらケモカインとそれらの受容体は
、活性化されると、粘膜部位に循環する炎症細胞の大きな補充を刺激して、細胞
の可溶性炎症をもたらす。炎症が存在することによって促進される粘膜組織の感
染症を、抗炎症薬を投与することによって阻害することは、かような粘膜組織の
疾患の活性化、進行および拡散を減らす有効な方法になる。

【００３４】 したがって、抗炎症薬を使用することは、レトロウィルス感染症で起こる炎症
反応を、軽減、制御または減少させる有用な方法を提示している。炎症は通常、
限定されないが、当業技術者が知っているプロスタグランジン類、ロイコトリエ
ン類、サイトカイン類、ケモカイン類などを含む親炎症性メディエーターを通じ
て炎症細胞の補充と活性をもたらすので、このような補充と活性化を減らすと、
ＨＩＶ感染のために利用できるＣＤ４陽性細胞の利用可能な数が減少する。

【００３５】 したがって、本発明に有用な抗炎症薬としては、炎症細胞の補充を減らし、炎
症カスケードの永続化を促進するケモカイン類および親炎症性サイトカイン類の
産生を減らす薬剤、ならびにケモカインまたはサイトカインの受容体を（例えば
ケモカイン受容体とそのリガンドの相互作用を阻害することによって）阻害して
炎症メッセージの伝播を防止する薬剤がある。このような薬剤としては、先に述
べた抗体、すなわちタンパク質分子に結合してその生物活性を阻害する「抗炎症
抗体」がある。このような抗体としては、サイトカイン類、サイトカイン受容体
類、ケモカイン類、ケモカイン受容体類と相互に作用するように設計されて、被
検者（例えばヒト）に、炎症反応を減らすかまたは阻害するように設計されるか
または提供される抗体がある。

【００３６】 また、本発明は、免疫不全の複製に応答して、レトロウィルスおよび免疫不全
ウィルスの複製またはサイトカインの分泌を遮断する各種の医薬組織物を意図す
るものである。本発明の組織物は、本発明の抗体、単離されたペプチド、核酸配
列などの抗炎症薬または医薬を、担体、賦形剤および添加剤または助剤を使って
、被検者に対して投与するのに適切な形態（例えば医薬として許容できる担体）
にすることによって製造することができる。使用されることが多い担体または助
剤としては、炭酸マグネシウム、二酸化チタン、ラクトース、マンニトールおよ
びその外の糖類、タルク、乳タンパク質、ゼラチン、デンプン、ビタミン類、セ
ルロースとその誘導体、動物油と植物油、ポリエチレングリコール類ならびに溶
媒類例えば滅菌水、アルコール類、グリセリンおよび多価アルコール類がある。
静脈注射用賦形剤としては流体および栄養素補充剤がある。保存剤としては、抗
菌薬、抗酸化薬、キレート化薬および不活性気体がある。その外の医薬として許
容できる担体としては、塩類、保存剤類、緩衝剤などを含む非毒性補助剤の水溶
液があり、これについては例えば「Remington's Pharmaceutical Sciences」１
５版１９７５年、１４０５〜１４１２頁、１４６１〜１４８７頁、イーストン所
在のMack Publishing Co.；および「The National Pormularly」１４版１９７５
年、ＸＩＶ、ワシントン所在のAmerican Pharmaceutical Associationに記載さ
れている。なおこれら文献の内容は本願に援用するものである。本発明の医薬組
成物の各種成分のｐＨと正確な濃度は、当該技術分野の日常的な技能によって調
節される（「Goodman and Gilman's The Phormacological Basis for Therapeut
ics」７版参照）。このような医薬組成物は一種以上の抗炎症薬と一種以上の抗
ウィルス薬を組み合わせて含有していてもよい。

【００３７】 別の実施態様で、本発明は、免疫不全ウィルスに応答して、免疫不全ウィルス
の複製もしくは拡散またはサイトカイン類の分泌を遮断または阻害する方法に関
する。この方法は、本発明の化合物および医薬として許容可能な担体を含有する
医薬品組成物の治療上有効な投与量を、被検者に投与する方法である。本発明の
医薬組成物の「投与」は、当業技術者に知られているいずれかの方法で達成でき
る。用語「被検者」は哺乳類、好ましくはヒトを意味する。

【００３８】 本発明の医薬組成物は、投与ユニット（dose unit）に製造して投与すること
が好ましい。固形投与ユニットは錠剤、カプセル剤および坐剤である。患者を治
療する場合、化合物の活性、投与方式、障害の性質と重篤度、および患者の年齢
および体重によって、一日当たりの投与量を変えることが必要である。しかし特
定の環境下では、一日当り投与量を上下してもよい。一日当りの投与量の投与は
、個々の投与ユニットまたは別のいくつもの小さい投与ユニットの形態で一度に
投与することおよび細分された投与量を、指定の時間間隔をおいて複数回投与す
ることによって実施できる。

【００３９】 投与量は、不要な交差反応、アナフィラキシー反応などの有害な副作用を起こ
すほど多量であってはならない。一般に、投与量は、患者の年齢、症状、性別お
よび疾患と感染の程度によって変わり、当業技術者が決定できる。投与量は、ど
んな禁忌の場合でも、個々の医師が調節することができ、かつ不適当な試験に訴
えることなく容易に確かめることができる。いずれにしろ、治療の有効性は、例
えば、免疫不全ウィルスに感染した患者の炎症部位（例えば粘膜組織）における
ＨＩＶのＲＮＡもしくはＤＮＡウィルスの負荷量を監視することによって、また
は炎症メディエーター類、サイトカイン類、ケモカイン類および／またはＣＤ４
＋細胞の測定を含む他の方法によって確認することができる。組織中の、ＣＤ４
＋細胞の相対数の減少もしくは安定化、およびサイトカイン類；親炎症メディエ
ーターもしくはケモカイン類のレベルは、その個体または組織の炎症のレベルと
相関関係があるはずである。

【００４０】 本発明の医薬組成物は、一般に、局所に、静脈内に、経口でもしくは非経口で
または移植体として投与される。直腸および膣への投与は、これらの部位が一般
に、粘膜組織の最初に接触して炎症を起こす部位であるからより有効であること
は明らかである。このような部位は感染または伝染を防止または阻害するために
接触させることができる。適切な固形または液体の医薬の製剤は例えば顆粒剤、
散剤、錠剤、コーティング錠剤、（マイクロ）カプセル剤、坐剤、シロップ剤、
乳剤、懸湯剤、クリーム剤、ゲル剤、エアゾール剤、アンプル形態の点滴剤（dr
ops）もしくは注射用水剤、および活性化合物を遅延放出する製剤であり、そし
てその製剤の賦形剤および添加剤および／または助剤、例えば崩壊剤、結合剤、
コーティング剤、膨潤剤、潤滑剤、着香剤、甘味剤または安定剤は、上記のよう
に習慣的に使用される。本発明の医薬組成物は、各種の薬物伝達システムに使用
するのに適している（現在の薬物伝達方法の概説についてはLanger、Science ２
４９巻１５２７〜１５３３頁１９９０参照。なおこの文献は本願に援用するもの
である）。

【００４１】 本発明の医薬組成物は、局所にまたは全身的に投与できる。用語「治療上有効
な投与量」は、疾患との合併症の症状を予防し、治癒させるかまたは少なくとも
部分的に抑制するかもしくは軽減するのに必要な本発明の化合物の量を意味する
。この用途に対し有効な量は、勿論、被検者の疾患または感染の重篤度および体
重と全身状態によって決まる。一般に生体外で使用される投与量は、その医薬品
組成物の系内投与を行うのに有用な量の有用な指標を提供するので、動物モデル
を使用して特定の障害を治療するのに有効な投与量を決定することができる。各
種の考察事項が、例えばGilmanら編「Goodman and Gilman's the Pharmacologic
al Bases of Therepeutics」８版、Pergamon Press、１９９０年、およびReming
ton's Pharmaceutical Sciences、１７版、ペンシルベニア州イーストン所在のM
ack Publishing Co. １９９０年に記載されている。これら文献は各々、本願に
援用するものである。投与量の有効性は、炎症部位で（例えば粘膜組織で）免疫
不全ウィルスに感染した患者のＨＩＶのＲＮＡもしくはＤＮＡまたはウィルス負
荷量のレベルを測定することによって、その感染に関連する一つ以上の症状を軽
減することによって、または当業技術者にとって周知の方法を使って、炎症メデ
ィエーター類、サイトカイン類、ケモカイン類および／またはＣＤ４＋細胞の量
を測定することを含む他の手段によって監視することができる。

【００４２】 本発明の免疫療法としては、免疫不全ウィルスに感染する危険がある宿主に対
する予防方法がある。例えば、その方法は、ＨＩＶに感染する危険があるヒトに
対して有用である。抗炎症薬の「予防上有効」な量は、例えば、ＨＩＶの複製、
活性化または発達を、炎症反応を軽減し、阻止しまたは防止することによって阻
害できる量を意味する。ＨＩＶの伝染は、少なくとも三つの公知の経路、すなわ
ち性的接触、血液（または血液製剤）の輸液および胎盤経由の経路である。血液
を通じての感染としては静脈注射による薬物使用者間の伝染がある。ＨＩＶとの
接触は、血清反応反転によって確認されるような症候的な感染を必ずしももたら
さないから、すべてのヒトは、潜在的に危険性があるので、本発明の治療法によ
る予防治療を受けさせるよう考慮しなければならない。

【００４３】 予防活動または伝染予防のため本発明に有用な抗炎症組成物としては、抗炎症
薬でコートまたは潤滑にされたコンドーム；使用すると破裂して抗炎症薬を放出
するカプセルを有するコンドーム；抗炎症薬でコートまたは潤滑にされたペッサ
リー（diaphragm）、子宮頚キャップ、避妊用スポンジおよび避妊リングを含む
膣用製品；抗炎症薬も含有する膣圧注液、クリーム剤、ゲル潤滑剤、生薬、フォ
ーム剤または殺精子ゲル剤；および性交中に接触した粘膜組織に、抗炎症薬を局
所送達するための、当業技術者に知られている他の組成物や製品がある。このよ
うな製品は、被検者が他の被検者によって感染するのを予防または阻害するのに
有用であり、または、感染した被検者から他の被検者へ伝染するのを防止または
阻害するのに有用である。

【００４４】 本願に記載され本発明の方法に有用な組成物は、免疫不全ウィルスに感染する
前の患者に（すなわち予防のため）投与するか、または下記の段階、すなわち続
いて伝染するのを防止するため初期感染後または感染後のいずれかに投与しても
よい。例えばＨＩＶの感染は下記の経路のいずれかで起こる。

【００４５】 （１）感染した個体の約１５％は、ＨＩＶと接触してから６週間以内に、熱、発
疹、および肥大したリンパ節と髄膜炎を特徴とする急性疾患にかかる。この急性
感染症に続いて、これらの個体は無症候性になる。 （２）ＨＩＶに感染した残りの個体は、何年間も症候性ではない。 （３）何人かの個体に、頚部、鼠蹊部および腋窩における膨潤したリンパ節を特
徴とする持続性全身性リンパ節腫（ＰＧＬ）が発生する。ＰＧＬを有する個体の
５〜１０％が無症候性状態に戻る。 （４）これらの個体のいずれかはＡＩＤＳ関連症候群（ＡＲＣ）を発症し、ＡＲ
Ｃが見られる患者は無症候状態に戻らない。 （５）ＡＲＣとＰＧＬを有する個体および無症候性の個体は、結局（数ヶ月〜数
年後に）、容赦なく死をもたらすＡＩＤＳを発症する。

【００４６】抗炎症薬類 用語「抗炎症薬」は、例えば炎症細胞の補充を減少させ、ケモカインの産生を
減少させ、親炎症性ケモカインの産生を減少させ、親炎症性サイトカインの産生
を減少させ、またはケモカインもしくはサイトカインとその受容体との相互作用
を阻害することによって、炎症反応を減少させ、防止しまたは調節することがで
きる薬剤を意味する。このような薬剤としては例えば、抗炎症性抗体類（例えば
抗サイトカイン抗体、抗受容体抗体）、ペプチド類（例えば炎症メディエーター
類、ＩＬ−１などのサイトカイン類のアゴニストもしくはアンタゴニスト、ＩＬ
−１受容体などの受容体アゴニスト類、または可溶性ＴＮＦ受容体類）、核酸類
（例えば抗炎症性ペプチド類、リボザイム類およびアンチセンス分子類をコード
する核酸類）、ステロイド類（例えばプレドニゾン）、非ステロイド系抗炎症薬
（例えばアスピリン）、５−ＡＳＡ製品、通常使用される抗炎症薬ならびにその
組合せがある。

【００４７】 本発明に有用な抗炎症性抗体の例としては、ケモカイン類およびその受容体類
の抗体、例えば抗インターロイキン受容体；抗サイトカイン抗体類[例えば抗Ｔ
ＮＦ抗体類、例えばCentocorが製造するＲＥＭＩＣＡＤＥ（登録商標）など]；
抗ケモカイン抗体類（例えば、Olsonら、J. of Viol. ７３（５）巻４１４５〜
４１５５頁１９９９年参照。なお、この文献の開示事項は本願に援用するもので
ある）；抗ケモカイン受容体抗体類（例えば抗ＣＣＲＳ受容体抗体類または抗Ｃ
ＸＣＲ４受容体抗体類）およびその組合せがある。その外の抗体としては、親炎
症性メディエーターを産生する酵素経路の酵素に対する抗体、例えば米国特許第
５，７６７，２４９号に開示されているような１型ホスホリパーゼＡ２に対する
抗体がある。なお、この特許の開示事項は本願に援用するものである。

【００４８】 本発明に有用な抗炎症性核酸の例としては、抗炎症性ペプチド；親炎症性ポリ
ペプチド類（例えばサイトカイン類またはケモカイン類）をコードするＲＮＡを
開裂するリボザイム；親炎症性メディエーター類例えばサイトカイン類、サイト
カイン受容体類、ケモカイン類、ケモカイン受容体類、本願に開示されている他
の炎症性ペプチドもしくは受容体とその組合せまたは当業技術者が容易に確認で
きるメディエーター類をコードする核酸配列とハイブリッドを形成できるアンチ
センス分子類をコードする核酸類がある。

【００４９】 抗炎症性ペプチドの例としては、例えばＬＦＡ接着分子アンタゴニスト、サイ
トカイン受容体アンタゴニスト、転写因子、可溶性ＴＮＦ−α受容体ポリペプチ
ドがある。その外の抗炎症性ペプチドとしては、例えば、ＮＦ−kappaＢなどの
転写因子（Schottelius AJら、Int J Colorectal Dis １４(１）巻１８-２８頁
１９９９年２月）、血小板因子４に対するペプチド（米国特許第５，７７６，８
９２号、この特許は本願に援用するものである）および米国特許第５，７６６，
５９３号（この特許の開示事項は本願に援用するものである）に開示されている
ようなＣＤ１４に基づいたペプチドがある。

【００５０】 抗炎症性サイトカイン類の例としては、例えば、サイトカイン類と転写因子類
がある。抗炎症性サイトカイン類としては、例えば、ＩＬ−１３（Walson ML、A
m J Rcepir Cell Mol Biol. ２０（５）巻１００７〜１０１２頁１９９９年）、
ＩＬ−４とＩＬ−１０（Jarvelaonen HAら、Hepatology ２９（５）巻１５０３
〜１５１０頁１９９９年）ＩＬ−１６（Klimiuk PAら、J Immunol. １６２（７
）巻４２９３〜４２９９頁１９９９年４月）および当業技術者に知られている他
の抗炎症性サイトカイン類がある。

【００５１】 本発明に有用な抗炎症薬の例としては、広範囲のステロイド、非ステロイドお
よびサリチル酸塩（salicylate）の水溶性および水不溶性の薬物およびそれらの
酸付加塩または金属塩由来の薬剤がある。有機塩および無機塩の両者は、その抗
炎症薬がその薬物の価値を維持するならば、使用することができる。これらの抗
炎症薬は、徐放型または持続性作用型で投与できる、広範囲の治療薬および治療
薬の混合物から選択することができる。

【００５２】 非ステロイドの抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）としては、化学構造が異なる多種類の
化合物がある。これらの化合物は、全部とはいかないまでも大部分が通常の作用
機構を共有していると考えられ、ほとんどすべてが弱有機酸である。この大グル
ープの化合物は、二つの主要グループすなわちカルボン酸類（Ｒ−ＣＯＯＨ）と
エノール酸類（Ｒ−ＣＯＨ）に分割することができる。さらに化学構造に基づい
た細分割を行うことができる。エノール酸類の主なグループは、ピラゾロン類例
えばフェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、ジピロンおよびイソピリン、な
らびにキシカム類（Ｘｉｃａｍ）（ピロキシカムとミロキシカムを含む）である
。カルボン酸のサブグループには、サリチレート類、例えばアセチルサリチル酸
（アスピリン）；プロピオン酸類、例えばイブプロフェンとナプロキセン；アン
トラニル酸類、例えばメクロフェナム酸；フェニル酢酸類例えばアセトアミノフ
ェン；アミノニコチン酸類、例えばフルニキシン（flunixin）；ならびにインド
リン類、例えばインドメタシンが含まれている。

【００５３】 作用機構が知られているこれらＮＳＡＩＤは、大部分が、シクロオキシゲナー
ゼとリポキシゲナーゼの経路を抑圧することによって、アラキドン酸の代謝物の
生成を阻害して、これら代謝物によって仲介される炎症を低下させることが見出
されている。シクロオキシゲナーゼは、アラキドン酸を環式エンドペルオキシド
類のＰＧＧ２とＰＧＨ２（ＰＧとして知られている）に変換する。これらの化合
物は、別の特異的酸素の作用によって、炎症メディエーターのファミリーの異な
るメンバーのエイコサノイド類（ＰＧＥ２およびＰＧＩ２を含む）に変換される
。しかし、シクロオキシゲナーゼ類の構造は組織によって異なるのでＮＳＡＩＤ
はこれら酵素各々と結合する性能が異なり、このことは効能（potency）および
種の応答（species response）に差があることを説明している。

【００５４】 非ステロイドの抗炎症薬の限定されない具体例としては以下の薬物があり、そ
の商標名、一般名、標準投与量および化学構造をあわせて示す。すなわち、イブ
プロフェン〔例えばＭＯＴＲＩＮ（登録商標）、３００,４００,６００および８
００ｍｇ、ＡＤＶＩＬ（登録商標）２００mg〕（±）−２−（ｐ−イソブチルフ
ェニル）プロピオン酸；トルメチン〔ＴＯＬＥＣＴＩＮ（登録商標）〕Ｓ−（ｐ
−トルオイル）−１−メチルピロール−２−酢酸；ナプロキセン〔例えばＡＬＥ
ＶＥ（登録商標）、ＡＮＡＰＲＥＸ（登録商標）、またはＮＡＰＲＯＳＹＮ（登
録商標）〕、２５０,３７５および５００ｍｇ、６−メトキシ−α−メチル−２
−ナフタレン酢酸（＋）；フルルビプロフェン〔ＡＮＳＡＩＤ（登録商標）〕、
５０および１００ｍｇ、２−フルオロ−α−メチル−〔１,１'−ビフェニル〕−
４−酢酸（±）；スリンダク〔ＣＬＩＮＯＲＮ（登録商標）〕、１５０および２
５０mg、５−フルオロ−２−メチル−１−〔〔ｐ−（メチルスルフィニル）フェ
ニル〕−メチレン〕−１Ｈ−インデン−３−酢酸；ジフルニサル〔ＦＬＯＶＡＣ
ＩＬ（登録商標）〕、２５０および２´，４´−ジフルオロ−４−ヒドロキシ〔
１，１´−ビフェニル〕−３−カルボン酸；ピロキシカム〔ＦＥＬＤＥＮＥ（登
録商標）、４−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ−２−ピリジニル−２Ｈ−１，２−
ベンゾチアジン−３−カルボキサミド１，１−ジオキシド；インドメタシン〔Ｉ
ＮＤＯＣＩＮ（登録商標）〕、２５および５０mg、１−（４−クロロベンゾイル
）−５−メトキシ−２−メチル−１Ｈ−インドール−３−酢酸；エトドラク〔Ｕ
ＬＴＲＡＤＯＬ（登録商標）〕、１，８−ジエチル−１，３，４，９−テトラヒ
ドロピラノ−〔３，４−ｂ〕インドール−１−酢酸；メクロフェナム酸ナトリウ
ム〔ＭＥＣＬＯＭＥＮ（登録商標）〕、５０および１００mg、Ｎ−（２，６−ジ
クロロ−Ｍ−トリル）アントラニル酸ナトリウム塩−水和物；フェノプロフェン
およびフェノプロフェンカルシウム〔ＮＡＬＦＯＮ（登録商標）＝水和物として
〕、２００および３００mg、アリール酢酸の誘導体、α−メチル−３−フェノキ
シベンゼン酢酸；ケトプロフェン〔ＯＲＵＤＩＳ（登録商標）〕、２５、５０お
よび７５mg、２−（３−ベンゾイルフェニル）−プロピオン酸；メクロファナム
酸ナトリウム；メフェナム酸〔ＢＯＮＡＢＯＬ(登録商標)〕、Ｎ−（２，３−キ
シリル）アントラニル酸；ナプメトン；ケトロラクトロメタミン；ジクロフェナ
クナトリウム〔ＰＲＯＰＨＥＮＡＴＩＮ（登録商標）〕、２−〔（２，６−ジク
ロロフェニル）アミノ〕ベンゼン酢酸モノナトリウム塩；ブロフェナクナトリウ
ム；フェニルブタゾン〔ＢＵＴＡＺＯＬＩＤＩＮ（登録商標）〕、１００mg、４
−ブチル−１，２−ジフェニル−３，５−ピラゾリジンジオン；他のＣＯＸ−２
阻害剤、例えばセロコキシブ、メロキシカム、ニメスリド（nimesulide）および
ロフェコキシブ（rofecoxib）；スプロフェン；フェンブロフェン；フルプロフ
ェン；Ｍｉｄｏｌ−ＰＭＳ、アセトアミノフェン、５００mg；Ｔｙｌｅｎｏｌ
Ｅｘｔｒａ Ｓｔｒｅｎｇｔｈ、アセトアミノフェン、５００mg；サリドマイド
；オキサプロジン；サリチレート含有化合物とメマツヨイグサ油（約７２％のリ
ノール酸と約９％のγ−リノレン酸を含有）、その単独異性体とその混合物であ
る。

【００５５】 サリチレートの抗炎症薬の限定されない具体例としては以下の薬物がある。す
なわち次サリチル酸ビスマス；サルサラート；サリチル酸とサリチル酸誘導体、
例えばチオサリチル酸ナトリウム、サリチル酸コリン、サリチル酸マグネシウム
、ジフルニサル、イブプロフェン、ナプロキセン、スリンダク、ジフルニサル、
サリチルサリチル酸、コリンマグネシウムトリサリチレート、アセチルサリチル
酸、サルサラート、サリチル酸ナトリウムおよびその組合せ；５−アミノサリチ
ル酸（５−ＡＳＡ）および５−ＡＳＡを含有する製品または化合物、例えば経口
メサラミン〔ＡＳＡＣＯＬ（登録商標）、Procter&Gamble Pharmaceuticals製造
；ＰＥＮＴＡＳＡ（登録商標）、Roberts Pharmaceuticals製造〕、メサラミン
の直腸浣腸もしくはフォーム剤もしくは坐剤、スルファサラジン、パルサラジド
、イプサラシドおよびオルサラジン〔ＤＥＰＥＮＴＵＭ（登録商標）、Pharmaci
a Upjohn製造〕、およびその混合物である。

【００５６】 ステロイドの抗炎症薬としては、グルココルチコイド類がある。ステロイドの
抗炎症薬の限定されない具体例としては以下の薬物がある。すなわちフルニソリ
ド、トリアムシノリン、トリアムシノリンアセトニド、ジプロピオン酸ベクロメ
タゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、ヒドロコルチゾン、コルチゾン、デキサ
メタゾン、ブデソニド（budesonide）、プレドニゾン、メチルプレドニゾロン、
プレドニゾロン、これら化合物のエステル類およびその組合せである。抗炎症薬
の他の非限定の例としてはサリドマイド（celgene製造）がある。

【００５７】レトロウィルス類 レトロウィルスは、ウィルスのゲノムがＲＮＡであるＲＮＡウィルスである。
宿主細胞がレトロウィルスに感染すると、そのゲノムＲＮＡが、感染した細胞の
染色体内に非常に効率的に組み込まれるＤＮＡ中間体中に逆転写される。前記組
み込まれるＤＮＡ中間体はプロウィルスと呼称されている。レトロウィルス科（
family Retroviridae）のウィルスは、エンベロ−プで囲まれた一本鎖ＲＮＡウ
ィルスであり、一般に、哺乳類、例えば、ウシ類、サル類、ヒツジおよび人類な
どに感染する。レトロウィルスは、その増殖が、そのとき感染した細胞のゲノム
に組み込まれるＲＮＡのＤＮＡコピーの合成で行われるという点で、ＲＮＡウィ
ルス中で独特のウィルスである。

【００５８】 レトロウィルス科のファミリーは、三つのグループすなわちスプマウィルス類
（すなわち泡沫ウィルス類）例えばヒト泡沫ウィルス（ＨＦＶ）；レンチウィル
ス類例えばヒツジのビスナウィルス；およびオンコウィルス類（このグループ内
のすべてのウィルスが発癌性であるというわけではないが）で構成されている。
用語「レンチウィルス」は、通常の意味で、逆転写酵素を含有するウィルスの属
を述べるのに使用される。これらレンチウィルスとしては、ヒト免疫不全ウィル
ス（ＨＩＶ）１型と２型（ＨＩＶ−１とＨＩＶ−２）およびシミアン免疫不全ウ
ィルス（ＳＩＶ）を含む「免疫不全ウィルス類」がある。ヒト免疫不全ウィルス
に感染した個体の大部分は、有効な治療法がないので、後天性免疫不全症候群（
ＡＩＤＳ）を発症して、免疫系の荒廃またはそのウィルスの直接の作用で起こる
日和見感染症と悪性腫瘍で死亡する。オンコウィルス類はさらに、ウィルスが成
熟中に、電子顕微鏡下で見られる粒子の形態に基づいてグループＡ，Ｂ，Ｃおよ
びＤに細分される。Ａ型粒子は、感染した細胞の細胞質に見られるＢ型およびＤ
型のウィルスの未成熟粒子である。これらの粒子は感染性ではない。Ｂ型粒子は
、細胞質内のＡ型粒子を膜で覆う（enveloping）ことによって、形質膜から成熟
ビオリンとして出芽する。前記Ｂ型粒子は、前記形質膜に約７５ｍｍのドーナツ
型コアを有し、そのコアから長い糖タンパク質のスパイクが突出している。出芽
後、Ｂ型粒子ウィルスは、偏心的に位置している電子密度の高いコアを含有して
いる。原型のＢ型ウィルスはマウス乳癌ウィルス（ＭＭＴＶ）である。Ｃ型ウィ
ルスに感染した細胞中に、細胞質内粒子は全くみとめられない。かわりに、成熟
粒子が、それ自体閉じて形質膜によって囲まれている三日月Ｃ型の縮合体を通じ
て細胞表面から直接出芽する。エンベローブの糖タンパク質のスパイクは、均一
に電子密度が高いコアにそって見える。出芽は表面形質膜から生じるかまたは細
胞内液胞中に直接生じる。Ｃ型ウィルスは、最も一般的に研究されており、多種
類のトリおよびネズミの白血病ウィルスが含まれている。ウシ白血病ウィルス（
ＢＬＶ）とヒトＴ細胞白血病ウィルスのＩ型とＩＩ型（ＨＴＬＶ−Ｉ／ＩＩ）は
、細胞表面からのそれらの出芽の形態のため、同様にＣ型粒子として分類される
。しかし、これらウィルスは、正六角形であり、ネズミ白血病ウィルス（ＭＬＶ
）などの原型Ｃ型ウィルスより複雑なゲノム構造を有している。Ｄ型粒子は、感
染した細胞の細胞質内のリング状構造体（細胞表面から出芽する）として現れる
点でＢ型粒子に似ているが、そのビリオンは短い表面糖タンパク質スパイクを取
り込んでいる。またその電子密度の高いコアは粒子内に偏心して位置している。
マソンファイザーサルウイルス（Mason Pfizer monkey virus: ＭＰＭＶ）は原
型のＤ型ウィルスである。

【００５９】 レトロウィルス類は、これらウィルスがその遺伝物質を複製する方式によって
定義される。複製中、そのＲＮＡはＤＮＡに変換される。細胞に感染した後、Ｄ
ＮＡの二本鎖分子が、ウィルス粒子中に保持されている二つのＲＮＡ分子から、
逆転写として知られている分子プロセスによって生成する。そのＤＮＡ型は、宿
主細胞ゲノム中に、プロウィルスとして共有結合的に組みこまれるようになり、
そのプロウィルスから、ウィルスＲＮＡが、細胞因子（cellular factor）およ
び／またはウィルス因子（viral factor）の助けによって発現される。発現され
たウィルスＲＮＡは粒子中に詰めこまれ、次いで感染性ビリオンとして放出され
る。

【００６０】 レトロウィルス粒子は二つの同一のＲＮＡ分子で構成されている。各ゲノムは
、ポジティブセンスの一本鎖ＲＮＡ分子であり、その分子は５’末端がキャップ
され、３′末端はポリアデニル化される。その二倍体のウィルス粒子は、ｇａｇ
タンパク質の「コア」構造内で、ｇａｇタンパク質、ウィルス酵素（ｐｏｌ遺伝
子の産物）および宿主とＲＮＡ分子と複合した二つのＲＮＡ鎖を含有している。
このキャプシドを囲んで保護するのは、宿主細胞膜由来でウィルスのエンベロー
プタンパク質を含有する脂質二重層である。そのｅｎｖタンパク質は、ウィルス
に対する細胞受容体に結合し、次いで粒子は一般に、受容体依存性エンドサイト
ーシスおよび／または膜融合によって宿主細胞に入る。

【００６１】 外側エンベロープが脱離された後、そのウィルスＲＮＡは逆転写によってＤＮ
Ａ中にコピーされる。これはｐｏｌ領域によってコードされた逆転写酵素で触媒
され、そしてＤＮＡ合成用のプライマーとしてビリオン中に詰めこまれた宿主細
胞ｔＲＮＡを使用する。この方式で、ＲＮＡゲノムはＤＮＡゲノムに変換される
。

【００６２】 逆転写によって産生された二本鎖線状ＤＮＡは、宿主細胞のゲノム中に組みこ
まれる前に核内で、円形にならなければならないかまたは円形にならなくてもよ
い。プロウィルスはここで、両末端に、ロングターミナルリピート（ＬＴＲ）と
して知られている二つの同一のリピートをもっている。これら二つの結合したＬ
ＴＲ配列間の結合部はｐｏｌ産物のインテグラーゼタンパク質が認識する部位を
産生し、そのインテグラーゼタンパク質は組込みを触媒し、その結果、プロウィ
ルスは、前記ＬＴＲの両末端からの宿主ＤＮＡの二つの塩基対（bp）に常に結合
している。転位性遺伝因子の組込みパターンを思わせる細胞配列の重複が両ＬＴ
Ｒの末端に見られる。組込みは、標的細胞のゲノム内に、ほぼ無作為に起こると
考えられる。

【００６３】 転写、ＲＮＡスプライシグおよび組み込まれたウィルスＤＮＡの翻訳は、宿主
細胞のタンパク質によって仲介される。さまざまにスプライスされた転写産物が
生成される。ヒトのレトロウィルスＨＩＶ−１／２およびＨＴＬＶ−Ｉ／ＩＩの
ウィルスタンパク質も遺伝子発現を調節するため利用される。細胞因子とウィル
ス因子間の相互作用は、ウィルスの潜伏およびウィルス遺伝子が発現される一時
的配列を制御するのに重要である。

【００６４】 レトロウィルスは水平方向と垂直方向に伝染することができる。レトロウィル
スが効率的な感染性伝染を行うには、ウィルスエンベロープのタンパク質を特異
的に認識する受容体が標的細胞上で発現する必要があるが、ウィルスは低い効率
で、受容体とは無関係の非特異的進入経路を利用できる。さらに、その標的細胞
型は、ウィルスが結合して浸透した（ウィルスの核酸が細胞に入った）後の複製
サイクルの全段階をサポートできなければならない。垂直方向の伝染は、ウィル
スのゲノムが宿主の生殖系列に組み込まれるようになった時に起こる。そのとき
、プロウィルスが、あたかも細胞遺伝子のように世代から世代へと伝染する。し
たがって、潜伏状態であることが多いが、宿主が適当な薬物に暴露されると活性
化されるようになる内因性プロウィルスが樹立されるようになる。本発明の組成
物と方法に使用される抗ウィルス薬はウィルスの生活環のあらゆる段階を標的に
することができる。

【００６５】 オンコウィルス類（ＲＮＡ腫瘍ウィルス類と呼ばれることが多い）は、２グル
ープの病原体、すなわち、急激に腫瘍化させるレトロウィルスとゆっくり腫瘍化
させるレトロウィルスに細分されている。

【００６６】 急激に腫瘍化させるレトロウィルスは培養細胞を腫瘍化して、感受性動物に迅
速に疾患を起こす。これらのウィルスは、通常、発癌遺伝子（v-onc）をそのウ
ィルスゲノム中に保有し、その発癌遺伝子は、そのウィルスが腫瘍を形成する直
接の原因であり、各タイプのウィルスによって異なっている。これらウィルスの
発癌遺伝子は、ウィルスが獲得した細胞遺伝子から、恐らく、ウィルス粒子内に
細胞ＲＮＡが封入されているため、誘導される。逆転写中のウィルスＲＮＡと細
胞ＲＮＡ間のその後の組換えによって、細胞配列がウィルスゲノム中へ取り込ま
れ、この新規なユニットが宿主細胞ＤＮＡに送達される。その形質導入された遺
伝子は、細胞の増殖と分化を制御する中枢の役割を正常にもっている場合、それ
がウィルスゲノム中への取込みによって受けるコーディング配列および／または
発現の制御の変化によって、発癌性になる。このような細胞性プロトオンコジー
ン（cellular proto-oncogene）（c-onc）は、新規な、ウィルスが決定する転写
の制御（定量的なおよび時間的な制御の両者）下に置くことおよび／または前記
コーディング配列に対して決定的な突然変異を維持することによって、発癌性に
なる。しかし、細胞が完全に腫瘍化するには、標的細胞内の他の遺伝的変化と後
成的変化と相まって、v-oncの発現が通常必要である。

【００６７】 前記ゆっくり腫瘍化させるレトロウィルスは、一般に、「古典的な」発癌遺伝
子を含有していない。腫瘍化の機構は、むしろ、プロウィルスを、細胞のプロト
オンコジーンのコーディング領域の近傍または中に挿入すること（挿入突然変異
誘発と呼ばれている）であると考えられる。ウィルスＬＴＲ内の強力なプロモー
ターとエンハンサーの配列は、前記プロトオンコジーンから数キロ塩基対までの
までの距離から転写作用を発揮することができる。細胞遺伝子の発現の正常な調
節が妨害され、そして過剰発現または不適当な時限の発現が腫瘍化に寄与する。

【００６８】 ＨＴＬＶ−Ｉは、ゆっくり腫瘍化させるウィルスであり、成人のＴ細胞白血病
（ＡＴＬ）の原因となっているが、ウィルスがコードしている調節タンパク質、
特にp４０tax（細胞のプロトオンコジーンの発現を活性化（transactivate）す
る）を伴う異なる経路によってＴ細胞の腫瘍化を恐らく促進する。ＨＩＶ−１と
２も、一般住民よりＡＩＤＳ患者にはるかに頻繁に現れる各種の悪性腫瘍（例え
ばカポジ肉腫）を、直接におよび間接に促進する。しかし、他の感染症または治
療（例えば臓器の移植）の結果として免疫抑制されている多くの患者にもまた高
い比率で腫瘍が発生するので、悪性腫瘍化の場合のＨＩＶの直接の役割は不明の
ままである。

【００６９】 前記Ｄ型ウィルスは、病因として悪性腫瘍に関連していないが、ＭＰＭＶは、
アカゲザルの乳癌と初期に関連していた。Ｄ型ウィルスは、サル霊長類に免疫抑
制を起こすが、その機構はまだ分かっていない。また免役抑制は、レンチウィル
ス類（例えばＨＩＶとＳＩＶ）およびネコ白血病ウィルス（ＦｅｌＶ）の変異株
による感染症の特徴でもある。ＨＩＶおよびＦｅｌＶに感染した場合、多量の組
みこまれていないプロウィルスのＤＮＡが観察されたが、このことは疾患の発生
に関連している。

【００７０】 ＨＩＶ−１／２およびヒツジのビスナウィルスを含むレンチウィルス類は、免
役抑制と神経障害をもたらすゆっくり進行する疾患に関連している。ＨＩＶは、
後天性免役不全症候群（ＡＩＤＳ）を引き起こす広く知られた作因である。

【００７１】 抗炎症薬（抗体、ペプチド、ペプチドミメティック、化学組成物など）単独ま
たは抗ウィルス薬（抗体、ペプチド、ウィルスタンパク質／酵素阻害剤など）を
組み合わせて含有する本発明の医薬組成物と方法はすべて、免疫不全ウィルス（
例えばＨＩＶ）が関連する障害にかかわっているかもしくはかかっている危険性
がある被検者、またはＨＩＶが関連する障害を伝染させるかもしくは伝染させる
危険性がある被検者を治療するのに有用である。ＡＩＤＳとＡＲＣはこのような
障害の独特の例である。ＨＩＶに関連する障害は、同性愛の男性、静脈注射によ
る薬物使用者、血液また血液製剤を投与されている者、および中央アフリカとカ
リブ海からの特定の住民を含む「危険性」があるグループに主として認められる
。その症候群は、すべての「危険性」があるグループの個体の異性の配偶者や冒
されている母親の乳児にも認められている。

【００７２】 レトロウィルス類は、貧血、神経障害、免疫抑制および悪性腫瘍を含む広範囲
の疾患に関連している。例えばＨＴＬＶ−１は、病状がいくつかの点で多発性硬
化症に似ている熱帯性けい性麻痺に関連している。

【００７３】抗ウィルス薬類 用語「抗ウィルス薬」は、本願で使用する場合、ウィルス感染の初期ステップ
、例えば細胞表面の受容体を通じてまたは細胞表面の受容体とは無関係のウィル
スの細胞への融合、これに続くウィルス核酸の細胞への侵入（「侵入阻害剤」）、
ウィルス核酸の逆転写（「逆転写酵素阻害剤」）、逆転写されたウィルス核酸の
細胞ゲノム中への組込み（「インテグラーゼ阻害剤」）、プロウィルス核酸の転
写または複製、成熟ウィルスタンパク質類の翻訳または生成、感染性ウィルス粒
子の生成／組立てなどを阻害し、減らし、防止し；成熟ビリオンの細胞からの出
芽もしくは放出を減らし；およびウィルスの融合もしくは感染、複製、成熟また
は細胞からの出芽もしくは放出と関連する酵素の活性もしくは量を減らす；こと
によってウィルス生活環のあらゆるステップもしくは段階におけるウィルスの感
染または産生を阻害し、減らし、防止しもしくは調節できる薬剤を意味する。

【００７４】 抗ウィルス薬の例としては、ポリペプチド類または機能性擬似体（functional
mimetic）があり、例えば、ウィルスを捕捉する可溶性細胞表面受容体ペプチド
、その細胞表面受容体に対するリガンド、その細胞表面受容体もしくはウィルス
粒子に結合して、ウィルスと細胞上に存在する細胞表面受容体との間の結合を防
止する抗体もしくは抗体フラグメントがある。抗ウィルス薬が標的として特にひ
きつけられるウィルスタンパク質としてはエンベロープポリペプチドｇｐ１２０
またはｇｐ４１である。抗ウィルス薬が標的として特にひきつけられる細胞表面
受容体としてはＸ４受容体とＲ５受容体がある。

【００７５】 用語「機能性擬似体」は、化学的または構造的に修飾されているが、未修飾分
子の一つ以上の活性（すなわち機能）または増大した活性を有する分子を意味す
る。したがって、抗ウィルス薬の機能性擬似体の場合、その擬似体は、抗ウィル
ス薬の一つ以上の抗ウィルス活性を保持している。特別のタイプの機能性擬似体
は、その擬似体がまねようとしているペプチドの三次元構造をまねしている化合
物であるポリペプチドまたはペプチドの擬似体（「ペプチド擬似体」）である。
ペプチド擬似体の設計は、三次元コンピュータモデリング法を利用して行うこと
ができ、かつ治療用途を拡大する追加の特性が得られるように行われる。例えば
、アンチセンス分子は、生体内でのそのアンチセンス分子のヌクレアーゼによる
消化を阻害するため、非天然のヌクレオチドで設計するかまたは化学的に修飾す
ることができる。

【００７６】 抗ウィルス薬の追加例は、ウィルスの生活環にとって重要な細胞酵素またはウ
ィルス酵素、例えばウィルスプロテアーゼ、逆転写酵素またはインテグラーゼを
阻害する抗ウィルス薬である。抗ウィルス薬の特別の例としては、例えば、ウィ
ルス融合阻害剤例えばＴ２０とＴ２０類似体（Trimeris, Inc.）；侵入阻害剤；
インテグラーセ阻害剤；プロテアーゼ阻害剤（例えば、サクイナビル、リトナビ
ル、インディナビル、ネルフィナビル、アンプレナビル）；ヌクレオシド逆転写
酵素阻害剤［例えば、ジドブジン（ＡＺＴ）、スタブジン（ｄ４Ｔ）、ラルニグ
ジン（３ＴＣ）、ジダノシン（ＤＤＩ）、ザルシタビン（ｄｄＣ）、アバカビル
］；非ヌクレオチド逆転写酵素阻害剤（例えば、ネビラビン、デラビルジン、エ
ファビレンツ）；感染性ウィルスへのウィルスの成熟［例えば、「ジンクフィン
ガーインジエクター（zinc finger injector）」、すなわち個有のウィルスα核
キャプシドタンパク質の組立てを阻害して感染性ウィルス粒子の生成を防止する
阻害剤の一つのクラス］；およびその混合物がある。細胞からのウィルスの出芽
または放出は、ウィルスの成熟またはウィルスタンパク質の成熟を阻害する薬剤
で阻害することができる。

【００７７】粘膜炎症の制御 高度に能動的な（highly active）抗レトロウィルス治療法（ＨＡＡＲＴ）を
使用すると、大多数のＨＩＶ感染患者は、その余命が長くなった。あいにく、血
漿のウィルス量が、検出できないレベルまで低下するにもかかわらず、多数の試
験結果が、リンパ器官内でＨＩＶが連続的に複製することを示した。試験結果は
、血漿ウィルス量が検出できない患者の８８％が、その胃腸粘膜中に定量可能な
ＨＩＶ核酸を有していることを示した。

【００７８】 したがって、ＨＡＡＲＴは血漿中のウィルス量を検出できないレベルまで減ら
すことができるとはいえ、大多数の患者は、治療が中止されると、おそらく、ウ
ィルスの貯槽が血流から離れて存在しているため、血漿ウィルス血症（plasma v
iremia）がリバウンドして強まる。このウィルスの貯槽は、身体のリンパ球の大
部分が存在している（９８％）リンパ組織内に発見されている。胃腸の粘膜は、
身体のリンパ球の多くの部分（４０〜６５％）を含有しているので、おそらくＨ
ＩＶの最大の貯層であるから、抗ＨＩＶ治療法の主要標的である。ＨＩＶ疾患の
粘膜は炎症状態が増大しているとすると、本発明の一つの焦点が、粘膜の炎症を
減らす方法を提供する。粘膜のコンパートメント中の親炎症性のサイトカイン類
とケモカイン類のレベルを減らす治療法は増大した複製とおそらくウィルスの耐
性突然変異の発生を防止する。その上に、可溶性炎症が減ると、ＨＩＶが感染し
ている粘膜中への新しいＣＤ４＋細胞の補充が減少して、身体のリンパ球プール
間のＨＩＶの横方向の拡散を防止または阻害する。

【００７９】有効な抗炎症薬の確認 当業技術者にとって公知の多数の技法を使用して、粘膜細胞、組織および被検
者のレトロウィルス感染症の活性化または進行を阻害し、治療しまたは減らす性
能に対する抗炎症薬の作用を、生体内のみならず生体外で評価できる。このよう
な技法は、広範囲の抗炎症薬と粘膜感染症に利用できる。例えば、下記の技法を
利用して、当業技術者は、被検者の粘膜組織のＨＩＶ感染症と粘膜組織に対する
抗炎症薬の作用を評価できるであろう。例示することだけを目的として、サリド
マイドとＳ-ＡＳＡを含有する複合剤または製剤の作用を評価する方法の概略を
以下に述べるが、これら実施例は例示を目的とするものであって、本発明の範囲
を限定するものではない。メサラミン（Asacol）を使用して細胞内でのＨＩＶの
複製を阻害するのを示すデータも説明する。

【００８０】サリドマイド サリドマイドは強力な抗炎症薬である。サリドマイドは、その免役調節作用の
多くを、そのＴＮＦα産生を下方調節する（down-regulate）性能に負っている
が、炎症カスケードにおいて多数の部位に作用するようである。他の推定また炎
症機構は、Ｔ細胞の増殖を低下させ、リンパ球の活性化レベルを下方に調節し、
リンパ球の走化性を阻害しおよび親炎症性サイトカン類のレベルを変更する役割
を含んでいる。サリドマイドは、ＨＩＶの複製を全身的にかつ胃腸の粘膜内で減
らすことによって、ＨＩＶ治療法の有利な成分であることが分かっている。この
ことについて、サリドマイドは、血漿ウィルス量が検出できない患者に、ＨＡＡ
ＲＴに対する添加物として使用できる。

【００８１】 サリドマイドによる治療によって、治療された被検者のＨＩＶＲＮＡ負荷量の
組織レベルが低いことによって証明されるように、ＨＩＶが複製するのに好都合
なリンパ環境内でＨＩＶが複製する性能が低下する。

【００８２】 ＨＩＶの細胞への感染力に対するサリドマイドの作用の試験を生体外で実施す
る。中位〜重篤の活動性クローン病（結腸炎）を持ち、サリドマイドによる治療
を開始した患者は、非特異的炎症反応を感染作用から区別するのを助ける目的で
、区別され補充されるであろう。これら被検者からの粘膜細胞と血球を用いて、
生体外で感染力を低下させるサドマイドの性能を評価する。

【００８３】 炎症の状態は、ＨＩＶに感染していると増大し、かつ親炎症性のサイトカイン
類とケモカイン類のレベルの高いことが特徴である。これらの可溶性メディエー
ターは、ケモカインを含有するＣＤ４＋細胞を粘膜に化学的に誘引する重要な役
割を演じる。ＨＩＶのこれらの標的は、粘膜の環境内で、ＨＩＶの複製を促進す
る可溶性メディエーターによってさらに活性化される。粘膜の炎症状態をさらに
定義するため、多種の親炎症性のサイトカイン類（ＴＮＦα、ＩＬ−１、ＩＬ−
６、γ―ＩＦＮ）およびケモカイン類（ＭＩＰ１ａ、ＭＩＰ１ｂ、ＲＡＮＴＥＳ
）が測定される。

【００８４】 血漿ウィルス量は陰性であるが粘膜ウィルス量が陽性のＨＩＶ血清陽性の患者
は回復する（recruit）。これらの被検者は、疾患が安定しており、ＣＤ４細胞
の計数値は２５０を超えかつ著しい粘膜炎症または胃腸の症状がない。これらの
被検者を、ベースライン内視鏡で評価して調べる。標準化レベル（３０ｃｍ）か
らの内視鏡生検試料を、これらの患者から得た。粘膜の生検試料を使用して、粘
膜単核細胞（ＭＭＣ）の単離、ＲＮアーゼ保護アッセイ（Rnase protection ass
ay:ＲＰＡ）、ＨＩＶのＲＮＡおよびプロウィルスのＤＮＡのＰＣＲ、および定
量的画像分析（ＱＩＡ）を行う。ＭＭＣを、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ８、ＨＬＡ
−ＤＲ、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＸＣＲ４、ＣＣＲ５、ＬＦＡ−１およびＩＣＡＭ−１
について、フローサイトメトリーで測定するため染色する。

【００８５】 フローサイトメトリーを、粘膜から単離したＭＭＣおよび血液から単離したＰ
ＢＭＣについて実施して、これらコンパートメント中のリンパ球集団の組成をベ
ースラインで測定する。これらリンパ球の活性化状態とメモリ状態が、ケモカイ
ンの受容体類および接着マーカー類の発現とともに分かる。これらのベースライ
ンパラメータを、サリドマイドで治療した後、再び分析する。

【００８６】 β−ケモカイン類とサイトカイン類は、Multi-probe RPA（Riboquant、Pharmi
ngen）を使用して定量される。この高感度の特異的検定法は、凍結された生検試
料から抽出したＲＮＡ由来のケモカインとサイトカインのｍＲＮＡの定量を行う
ことができる。個々のｍＲＮＡ種の量を、ハウスキーピング遺伝子としてのＧＡ
ＤＰＨと比較する。ケモカイン類とサイトカイン類は、ＲＰＡによって定量でき
なくても、刺激培養されたＭＭＣの上澄み液中のものをＥＬＩＳＡ法で測定でき
る。

【００８７】 ＱＩＡは、パラフィンで埋包した組織を、免疫組織化学的に染色する方法を利
用して、生検試料中の、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ３８、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ４５Ｒ
Ｏ、ＣＸＣＲ４およびＣＣＲ５を有するリンパ球の数と解剖的位置を正確に測定
する。さらに、ＱＩＡは、生検試料中のどの細胞がサイトカイン類とβ−ケモカ
イン類を産生しているか、およびこれら因子の組織濃度を測定することができる
。ＨＩＶ血清陽性生検試料に基づいて、ｐ２４の組織レベルが測定できる。コン
ピュータによる画像分析器および専用ソフトウェアが、染色された細胞の全組織
領域、ケモカイン類、サイトカイン類およびｐ２４のレベルを評価するのに利用
できる。

【００８８】 試験結果は、粘膜のＨＩＶに対する反応が、組織のケモカインとサイトカイン
のレベルを増大させることを特徴としていることを裏づけている。その結果これ
は、粘膜の炎症浸潤をゆるやかに増大する。ケモカイン類とサイトカイン類を調
べることによって、細胞インデックスを単に検査することで監視される「可溶性
」炎症が確認される。

【００８９】 強力な免疫調節薬であるサリドマイドで治療すると、ＨＩＶに感染した患者の
粘膜炎症が減少する。これは、ＨＩＶが、最大のリンパ器官である粘膜内で複製
する能力の低下として現われるようである。サリドマイドによって、粘膜中およ
び恐らくは全身で複製が低下すると、抗ウィルス薬耐性ＨＩＶ突然変異体の出現
が防止されてＨＡＡＲＴの長期間の効力が改善される。ＨＡＡＲＴ療法の付随物
として、サリドマイドは、このウィルスに感染した世界中の何百万人もの患者の
余命をさらに改善することができる。

【００９０】 血漿中にＨＩＶが検出できずかつベースライン生検を受けた被検者を、一日当
り２００ｇの投与量のサリドマイドを経口投与する治療法で１６週間治療する。
これらの被検者に、治療を開始してから４週間目と１６週間目に、反復内視鏡生
検と反復瀉血を行って、ＰＢＭＣを獲得し、そして先に記載したのと同じ生物分
子実験を実施する。さらに、各時点における一つの生検試料を利用して患者粘膜
のウィルス量を分析し、かつ各時点で、瀉血によって得た血漿と、Ｒｏｃｈｅ超
高感度検定法（検出レベル＝４０コピー数のＨＩＶＲＮＡ）で分析する。ＲＴ−
ＰＣＲとＤＮＡ−ＰＣＲを実施して、ベースラインと治療後の粘膜および血漿の
ウィルス量の間の変化を分析する。統計的評価を行う場合、効力のソリタリーイ
ンデックス（solitary index）は、血漿のウィルス量が付随して増加しない粘膜
のＨＩＶウィルス量の減少量である。

【００９１】 さらに、結腸炎にかかっているクローン病の患者から、サリドマイドによる治
療の前後に分離したＭＭＣとＰＢＭＣの、Ｍ−トロピック（tropic）およびＴ−
トロピックのＨＩＶに対する生体外での感受性に対するサリドマイドによる治療
の効果を検査する。この試験によって、他の炎症粘膜疾患から得たリンパ球にＨ
ＩＶが感染する性能に対するサリドマイドの作用を生体外で評価することができ
る。このデータは、ケモカインの発現および活性化のレベルに関するフローサイ
トメトリーの測定結果と、粘膜のウィルス量との間の一層良好な相関関係を示し
ている。感染力の検定を行うため、ベースライン、およびサリドマイドで治療を
始めてから４週間目と１６週間目に得たＭＭＣとＰＢＭＣを、既知の力価のＭ−
トロピックＨＩＶ_ＳＸおよびＴ−トロピックＨＩＶＮＬ４−３とともに培養する
。上澄み液を収集して、ＥＬＩＳＡ法で、ｐ２４を、０ｈｒ、３６ｈｒ、３日お
よび７日の時点で定量する。治療の前後におけるＩＢＤ患者から得たＭＭＣの感
受性の変化を分析するため一対Ｔ検定法を実施する。

【００９２】 サリドマイドでＨＩＶの患者を治療すると、胃腸粘膜の炎症環境が変化して、
可溶性炎症メディエーター（すなわち、親炎症性サイトカイン類、ケモカイン類
）が減少し、その結果、ＨＩＶが感染できる免疫細胞の補充が減少する。サリド
マイド治療法によって炎症が低下すると、生体外での感染試験におけるＰＢＭＣ
およびＭＭＣ内でのｐ２４の産生に影響を与える。サリドマイドの主な利点は、
粘膜中の可溶性炎症メディエーターが減少したために、ウィルスの標的としての
追加のコレセプター含有ＣＤ４＋Ｔ細胞の補充が減少することによる利点がある
と予想されるが、接着分子の発現が減少することも役割を演ずる可能性がある。

【００９３】５-ＡＳＡの複合剤または製剤 メサラミン（例えばアサコール）は、経口で摂取するか、または局所療法に利
用可能な浣腸剤、泡洗剤または坐剤で利用する粘膜の抗炎症薬である。メサラミ
ンは、胃腸粘膜内でのＨＩＶの複製を減らすことによるＨＩＶ治療法の有利な成
分である。メサラミンによる粘膜の炎症を最小限にする作用力は、粘膜コンパー
トメント中の親炎症性のサイトカイン類とケモカイン類の濃度を減らし、したが
ってＨＩＶの追加の細胞標的の補充と活性化を低下させることによって治療の面
で有利である。複製しているＨＩＶの濃度と活性を低下させることによって、メ
サラミンは、通常使用される抗ウィルス薬に対するＨＩＶの耐性の発生を遅らせ
ることもできる。したがってメサラミンは上記治療法の強力で局所で活性の添加
剤であり、ＨＩＶを有する被検者内での増殖／拡散を阻害し、ならびに、感染す
る危険性がある被検者のＨＩＶ感染を阻害しまたは防止し、かつＨＩＶに感染し
た被検者から他の被検者（感染していないかまたは感染している被検者）への伝
染を阻害または防止することができる。

【００９４】 臨床検査、内視鏡検査および組織学的検査に基づいて中位の活動性の感染症に
かかっていることが分かっているが、メサラミンまたは他の５-ＡＳＡ薬剤の投
与を４週間受けなかった被検者と、免疫調節薬またはステロイド剤類の投与（経
口または局所）を３ヶ月間受けなかった被検者を検査する。結腸炎にかかってい
ない対照の患者は、結腸炎の患者と年齢が一致しており、そしてその結腸炎に属
する症状がなくかつ炎症の内視鏡による証拠がない。結腸炎の被検者を、治療を
開始する１週間前および治療を開始した日に実施する２ベースラインの鏡評価法
で調べる。結腸炎なしの対照の患者も、１週間の間隔をおいて２回内視鏡検査を
受ける。潰瘍性結腸炎の患者および結腸炎にかかっていない対照の患者由来の粘
膜試料の可溶性の細胞炎症状態を比較する。

【００９５】 標準化レベル（３０ｃｍ）からの１５個の内視鏡生検試料（３．３ｍｍＯＤ）
を各患者から得た。これら生検試料のうち１２個を、ＭＭＣを分離するのに使用
し、１個をＲＰＡに使用し、そして２個をＱＩＡに使用する。フローサイトメト
リー用のＭＭＣは、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ３８、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ
４５ＲＯ、ＣＣＲ５およびＣＸＣＲ４が染色される。

【００９６】 ＩＬ−２含有培地内でＭＭＣとＰＢＭＣを培養した後に得た上澄み液中のβケ
モカイン類とサイトカイン類を、ＥＬＩＳＡ法で定量する。６ウェルプレート中
の１ｍｌ培地内に１００万個の細胞を使用する。１８ｈｒ培養した後、２００ｍ
ｌの培地を取り出して、ＲＡＮＴＥＳ、ＭＩＰ−１ａ、ＭＩＰ−１ｂ、ＩＬ−１
ｂ、ＩＬ−１２、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを測定する。必要に応じて、核酸
を、液体窒素で凍結させた生検試料から抽出して、これらのサイトカインとケモ
カインの種のｍＲＮＡのレベルを、Multi-probe RPA（Riboquant、Pharmingen）
を利用して測定する。個々のｍＲＮＡの種の量を、ハウスキーピング遺伝子とし
てのＧＡＤＰＨと比較する。

【００９７】 ＱＩＡは、新鮮な凍結されているかまたはパラフィンに埋包されている組織の
免疫組織化学的染色を利用して、生検試料中の、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ３８、Ｈ
ＬＡ−ＤＲ、ＣＤ４５ＲＤおよびＣＣＲ５を含有するリンパ球の数と解剖位置を
正確に測定する。さらに、ＱＩＡは、生検試料中のどの細胞がサイトカイン類と
βケモカイン類を産生しているか、これら因子の組織濃度、および推測によって
、近傍の細胞のケモカイン受容体の発現に対するこれらリガンドの作用を測定で
きる。コンピュータによる画像分析器と専用のソフトウェアが、染色された細胞
、ケモカイン類とサイトカイン類について全組織面積を評価するのに利用できる
（％面積として表現される）。

【００９８】 重症度が中位の潰瘍性結腸炎は、ケモカイン類とサイトカイン類の「可溶性炎
症」のレベルが高いことがすでに知られているが細胞の炎症が増大していること
が特徴である。潰瘍性結腸炎の粘膜は、可溶性の細胞炎症が、結腸炎でない対照
より有意に大きいことが特徴である。可溶性の細胞炎症メディエーターを減らす
メサラミンの性能を検査する。メサラミンで治療すると、サイトカインとケモカ
インのレベルが低下し、ＣＣＲ含有ＣＤ４＋細胞の補充と、ＨＩＶの粘膜リンパ
球間の横方向の拡散を最小限にし；βケモカインの分泌の減少をメサラミンが誘
発すると、ウィルスのコレセプターを遮断することができるリガンドの量が減少
してＨＩＶが拡散するのに好都合になり；メサラミンは親炎症性サイトカイン類
を優先的に阻害してＴ細胞の補充を抑制するが、ケモカイン受容体の遮断（bloc
kade）を有意に損なうことはない。これは、ＨＩＶに感染した患者を治療したと
きの最も有利な成果であろう。この可能な成果を、中程度に活動性の炎症性腸疾
患（ＩＢＤ）が見られる患者を、メサラミンで１６週間治療し、粘膜リンパ球の
サブセット、ケモカイン受容体類の発現および粘膜のサイトカインとβケモカイ
ンのレベルそれぞれの変化を検査することによって検査する。

【００９９】 中程度に活動性の潰瘍性結腸炎が見られ、ベースラインの生検を二回受けたこ
とがある被検者を、１日当り４．８ｇの投与量のメサラミンで１６週間治療する
。４週間の治療を受けた後、および１６週間の治療を完了後再び、上記被検者は
反復内視鏡生検を受けて、治療後の試料について試験を繰り返す。これらの試験
には、リンパ球サブセットとケモカイン受容体の発現を定量するフローサイトメ
トリー、βケモカインｍＲＮＡを定量するＲＰＡ、およびin situ分析を行うＱ
ＩＡを実施することが含まれる。患者は、メサラミンについて、またはこれら患
者の担当医師の臨床上の指示どおりに連続して管理される。

【０１００】 ＩＢＤ患者をメサラミンで治療すると、胃腸粘膜の炎症環境が変化して、可溶
性の細胞炎症メディエーターが減少する。

【０１０１】 活性化されたＣＤ４＋すなわちケモカイン受容体含有細胞がＨＩＶに感染する
と、ＨＩＶの複製が増大する。胃腸粘膜の特徴である炎症性環境は、激しいＨＩ
Ｖの複製を誘発するようである。メサラミンによる治療は、炎症を減らすことに
よって、炎症を起こしている胃腸粘膜中で複製するＨＩＶの性能を下方に調節す
る。

【０１０２】 粘膜の単核細胞内でのＨＩＶの複製に対する、メサラミンによる治療の効果を
検査するため、未治療の潰瘍性結腸炎の患者由来のＭＭＣおよびＰＢＭＣの、Ｍ
−トロピックおよびＴ−トロピックのＨＩＶ感染に対する感受性を、メサラミン
の投与なしおよびメサラミンの段階的投与量で培養して検査する。類似の感染力
の試験を、患者がメサラミンの治療を受けてから４週間後と１６週間後の患者の
細胞に実施する。

【０１０３】 感染力を検定する場合、ベースラインの時点で得たＭＭＣとＰＢＭＣを、既知
の粘膜組織の濃度に基づいて、段階的であるが生理的濃度のメサラミンの存在下
と非存在下で、既知の力価のＭ−トロピックＨＩＶＳＸとＴ−トロピックＨＩＶ
ＮＬ４−３とともに培養する。培養上澄み液中のＨＩＶタンパク質ｐ２４の産生
量を測定することによって、これらの試料各々におけるＨＩＶの複製を比較する
。治療を開始してから４週間後と１６週間後の患者由来のＭＭＣとＰＢＭＣを、
メサラミンを添加せずにＭ−トロピックＨＩＶおよびＴ−トロピックＨＩＶとと
もに培養する。これらの試料から集めたｐ２４の結果を、ベースラインの試料と
比較する。これらの各試験で、上澄み液を０ｈｒ、３６ｈｒ、３日および７日の
時点で集めて、これら細胞のＨＩＶに対する感受性の変化を分析する。

【０１０４】 ＭＭＣは、我々がすでに示したように、活性化されたＣＣＲ５＋表現型である
ため、ＰＭＢＣよりＨＩＶに対する感受性が高い。ＩＢＤの粘膜の炎症が増大す
ると、ＭＭＣに対するＨＩＶの感染がさらに容易になる。メサラミンによる治療
で炎症が低下すると、ＭＭＣの場合、ＰＢＭＣよりもｐ２４の産生量に大きく影
響する。

【０１０５】 ＨＩＶの粘膜環境は、親炎症性のサイトカイン類およびケモカイン類の濃度が
高いことによって証明されるように炎症性である。メサラミンは、これらの可溶
性メディエーターを有意に減少させ、その減少の間に、ＨＩＶが感染する細胞標
的の粘膜中への移行とその細胞標的の活性化が低下する。

【０１０６】 〔実施例〕 ＨＩＶ−１が利用できる多数のコレセプターの中で、ＣＣＲ５とＣＸＣＲ４は
重要な役割を演じ、ＣＣＲ５−トロピックウィルスが初期感染中、優勢であり、
ＣＸＣＲ４−トロピックウィルスが重症に対してより優勢になり、そしてＣＣＲ
５のヘテロ接合度が長い生存に寄与している。粘膜ＣＤ４＋Ｔリンパ球上でのＣ
ＣＲ５の差次的発現が、Ｍ−トロピックウィルスの優先的伝染に寄与する。粘膜
上でのコレセプターの発現を、循環リンパ球に対して比較するため、粘膜の単核
細胞（ＭＭＣ）を、直腸Ｓ状部の内視鏡生検試料から分離し、そして無刺激の血
試料の瀉血試料を、ＨＩＶ−１が血清陰性の健康な個体から得た。我々は、ＣＤ
４＋細胞上のコレセプターの発現をフローサイトメトリーで定量した。

【０１０７】 刊行された研究結果と一致して、血液中のすべてのＣＤ４＋リンパ球の中央値
２３％〔四分位数（ｉ・ｑ・）範囲１８％〜３０％〕がＣＣＲ５を発現した。図
１に示すように、腸のＣＤ４＋リンパ球の中央値７１％（ｉ・ｑ・範囲５０％〜
８７％）がＣＣＲ５を発現した。血液の場合の２．８倍の百分率である。（ｐ＝
０．０３）。また粘膜のＣＤ４＋リンパ球も、ＣＣＲ５を発現する血液のＣＤ４
＋リンパ球より細胞当り有意に多いＣＣＲ５受容体を発現して、コンパートメン
トの差をさらに広げた。図２に示すように、ＣＤ４＋粘膜リンパ球当りＣＣＲ５
受容体の中央値は、６，９４６分子（ｉ・ｑ・範囲６，３０６〜１０，４１６）
であり、ＣＤ４＋血液リンパ球当りのＣＣＲ５受容体が約３，８４１（ｉ・ｑ・
範囲３，２５９〜４，４４１）であるのに比べて約２．２倍である（ｐ＝０．０
３）。全体から見て、このことは、ＣＤ＋４リンパ球上発現された、ウィルスが
アクセスするために潜在的に利用可能なＣＣＲ５受容体全体は、腸の方が血液の
場合の６．２倍であることを示している。これらの知見は、粘膜のＣＤ４＋リン
パ球が、血液のＣＤ４＋リンパ球よりＭ−トロピックＨＩＶ−１にはるかに感染
しやすいことを示唆している。

【０１０８】 血液と腸の両方のＣＤ４＋リンパ球上のＣＣＲ５の発現のほぼすべて（９７％
）は、メモリＣＤ４５ＲＯ＋表現型の細胞上で行われる。刊行された試験と一致
して、我々は、腸ＣＤ４＋リンパ球中のＣＤ４５ＲＯ＋メモリ細胞の比率（中央
値９５％、ｉ・ｑ・範囲９０〜９７％）が、血液の場合（中央値４６％、ｉ・ｑ
・範囲３８〜５３％）と比べて増大していることを見出した。

【０１０９】 大部分の末梢Ｔ細胞ＣＸＣＲ４が、ナイーブＣＤ４５ＲＯ−Ｔ細胞上に発現さ
れるがメモリＣＤ４ＲＯ＋Ｔ細胞上には発現されないことはすでに報告されてい
る。したがって、最初に予想されるように、高レベルのＣＣＲ５の発現およびＭ
ＭＣの優勢なＣＤ４５ＲＯ＋表現型は、少なくとも肛門受入れ性交中に、Ｍ−ト
ロピックウィルスが優先的に伝染することを説明する解剖学的な細胞の機構を提
供する。しかし、高レベルのＣＸＣＲ４を発現する細胞が、図３に示すように、
血液中（中央値８３％、ｉ・ｑ・範囲７５〜８７％）および腸の中（中央値６４
％、ｉ・ｑ・範囲５９〜７９％）の両者に見出された。またＣＸＲ４抗体による
染色（staining）の百分率（ｐ＝０．３）または相対蛍光強度は、二つのコンパ
ートメント間に有意差は全くなかった。３名のドナーから、メモリＣＤ４＋リン
パ球上のＣＸＣＲ４の発現を分析するのに十分な細胞量が得られ、血液メモリ細
胞（中央値６４％、ｉ・ｑ・範囲５７〜７３％）と腸メモリ細胞（中央値６２％
、ｉ・ｑ・範囲５７〜６５％）の両者の実質的フラクションが、検出可能なレベ
ルのＣＸＣＲ４を発現したことが確認された。血液メモリ（ＣＤＲ４５Ｒ＋）Ｃ
Ｄ４細胞上とナイーブ（ＣＤ４５ＲＯ−）ＣＤ４＋細胞上のＣＸＣＲ４発現の相
対蛍光強度を比較することによる推定値が、メモリＣＤ４＋細胞上のＣＸＣＲ４
発現のレベルは、ナイーブＣＤ４＋細胞上のレベルよりごくわずか低いことを示
している。我々の試験結果は、メモリＣＤ４５ＲＯ＋細胞が、ＣＣＲ５のみなら
ずＣＸＣＲ４も、感染しやすい最も適当なレベルで発現できることを示している
。

【０１１０】 ヒトの場合、ＨＩＶ−１が感染するとコレセプターの発現が高レベルであると
いう我々の知見は、ＣＸＣＲ４を発現する細胞の数が少ないことが直腸と結腸の
組織上で確認されたマカクの試験結果と大きく異なる。マカクの試験では、ＣＣ
Ｒ５を含有するＴ細胞とマクロファージはさらに一層少なかった。これらの差は
、種の差または組織の獲得法の差を反映している。我々の知見は、ＣＣＲ５とＣ
ＸＣＲ４の細胞表面での発現を維持することが見出された方法を使用して分離さ
れた生存可能な細胞に基づいている。

【０１１１】 粘膜単核細胞のＨＩＶ−１感染に対する感受性を評価するため、我々は、内視
鏡生検試料から分離したＭＭＣおよび健康でＨＩＶ−血清陰性のボランティア−
から分離したＰＢＭＣを、生体外でＨＩＶに感染させた。粘膜細胞のＨＩＶ実験
株（Ｍ−トロピックＨＩＶＳＸまたはＴ−トロピックＨＩＶＮＬ４−３）による
感染は、２０ＩＵのインターロイキン−２（ＩＬ−２）の存在下で行った（ＩＬ
−２は粘膜細胞の集団の生存度を維持するために必要であるというデータが報告
されているからである）。ＩＬ−２はＣＣＲ５を上方調節（upregulate）するこ
とが分かっているのでウィルスの複製を促進できるから、対照として、同じ患者
由来のＰＢＭＣと、ＩＬ−２ありおよびＩＬ−２なしの両方で感染させた。感染
は、１８ｈｒ、７２ｈｒおよび１３０ｈｒの時点における上澄み液中のｐ２４産
生量で定量し、１０^４個のＣＤ４＋リンパ球当り産生されたｐ２４のｐｇで表わ
した。粘膜の単核細胞は、代表的な実験で、２つの実験のうちの一つの実験下で
、図４に示すように、ＩＬ−２ありまたはなしのＰＢＭＣに比べて、培養中の激
しいウィルスの複製を保持することができた。ＩＬ−２なしで感染させたＰＢＭ
Ｃは、ＨＩＶＳＸまたはＨＩＶＮＬ４−３によるＨＩＶの複製を保持することが
できなかったＩＬ−２の存在下で同様に培養されたＰＢＭＣと比べると、粘膜細
胞は、Ｍ−トロピックＨＩＶとＴ−トロピックＨＩＶに対して、ＰＢＭＣより著
しく感受性が高かった。例えば、７５ｈｒの時点においては、ＭＭＣ培養物中の
Ｍ−トロピックＨＩＶＳＸの上澄み液のｐ２４のレベルは１６４ｐｇ／ｍｌ／１
０^４ＣＤ４＋リンパ球であったが、これに比してＰＢＭＣ培養物の場合５１ｐｇ
／ｍｌ／１０^４ＣＤ４＋リンパ球であった。Ｔ−トロピックＨＩＶＮＬ４−３の
場合、ウィルスの増殖は時間の経過とともに加速され、１３０ｈｒの時点で、Ｍ
ＭＣ培養物中の上澄み液のｐ２４のレベルは、ＰＢＭＣの培養物中にはレベルが
検出できないのに比べて、１１９４ｐｇ／ｍｌ／１０^４ＣＤ４＋リンパ球であっ
た。これらのデータは、粘膜ＣＤ４＋リンパ球のコレセプター表現型によって示
唆された、感染に対する高い易損性によって、ＭＭＣは、生体外で、機能的に、
ＨＩＶ−１のＭ−トロピック株とＴ−トロピック株の両者が感染可能になるとい
うことを示している。

【０１１２】 これらのデータは三つの興味深い問題点を挙げている。第一に、組織ベースに
免疫細胞は、腸の粘膜ライニングすなわち再生可能な組織源から、容易にかつ安
全に獲得し、分離することができる。ＨＩＶ−１の発生病地の研究は、存続と伝
染の両者の研究を行うため組織コンパートメントにますます集中しているから、
リンパ組織に容易にかつ安全にアクセスする技法が不可欠である。リンパ節およ
び扁桃の切除／吸引が最も一般的に報告されている方法である。これらの方法を
使用する研究は、ＨＩＶ−１の活性が血漿中のレベルが安定しているかまたは検
出できない場合に、リンパ組織中に残留しているという証拠を含む、啓発的で概
念を変える知見をすでに提供している。これらの組織源は、ＨＩＶ−１に感染中
に二次的に器質化されるリンパ構造中に起こるが、組織を獲得するため侵襲性外
科的サポートを必要とする生物学的事象を見せる。対照的に、腸粘膜のリンパ組
織は豊富であり、容易にアクセスすることができ、迅速に回復し、自己複製しか
つ直接目視できる。内視鏡生検は、安全、迅速で痛みがなく、そしてリンパ球を
含有する試料のリンパコンパートメントに１００％アクセスする。その生検試料
は、構造上の配向を保持しているので組織学的に検査することができ、または本
願で述べるようなフローサイトメトリーによる組織培養物の評価を行うため切り
離すことができる。

【０１１３】 これらの試験で挙げられる第二の興味深い問題点は、ＣＣＲ５の発現が、ヒト
粘膜ＣＤ４＋リンパ球に、末梢血球に比べて、全ＣＤ４＋リンパ球の百分率とし
ておよび細胞ベース当りの両方で、著しく増大しているということである。これ
らの粘膜Ｔ細胞は、血液由来のＣＤ４＋リンパ球より高いレベルのウィルス複製
を維持している（図４）。ＣＣＲ５は感染初期にＨＩＶ−１と最も関連が深いコ
レセプターであり、そして、胃腸管は、身体の主要リンパ器官であるのみならず
最も一般的な伝染部位であるから、検出されるＣＣＲ５の発現量は、伝染、一次
感染、進行中の局所拡散および治療に対して、重要な関連がある。ＣＣＲ５の血
液中の発現に基づいたＴ細胞のＭ−トロピックＨＩＶ−１に対する感染性のプロ
ジェクション（projection）は、疾患進行の劇的に異なる数学的モデリングをも
たらす。ＣＤ４が限定要因でない場合、７００〜２０００ＣＣＲ５受容体／細胞
という最小範囲が、感染に対する感受性が最大になるのに適当な範囲である。我
々の計算によると、血液Ｔ細胞上のＣＣＲ５受容体の数（中央値が約３０００／
細胞）が、生体外の感染性の上記範囲内に入る。粘膜のレベル（中央値が約７０
００受容体／細胞）は前記最小範囲をはるかに超えている。ＭＭＣ中のｂ−ケモ
カイン産生レベルおよび細胞活性化因子の存在を含む要因も、これらの細胞が複
製を支持する性能に影響を与える。ＴＮＦ−ａとＩＬ−２を含むサイトカイン類
は、腸の粘膜に高レベルで見出されており、この部位におけるウィルス複製の促
進にも寄与している。

【０１１４】 興味深い第三の問題点は、粘膜リンパ球の、ＨＩＶ−１のＣＣＲ５−トロピッ
ク株とＣＸＣＲ４−トロピック株に対する感染の感受性が、ＰＢＭＣと比べて高
いことである。ＩＬ−２存在下であるが細胞のさらなる刺激がない場合のＭＭＣ
培養物中のＨＩＶＮＬ４−３産生量のレベルが異常に高いことは、粘膜のＴ細胞
が、侵入するため主要なコレセプターのいずれかの使用するＨＩＶ−１の変異株
が複製するのに恵まれた環境を提供することを示唆している。ＣＤ４＋リンパ球
がＨＩＶ−１の伝染する粘膜の部位に豊富であり、かつこれらリンパ球が両タイ
プのウィルスに感染する感受性を有しているにもかかわらず、なぜ、ＣＣＲ５を
使用する変異体が優先的に伝染するのかという質問は依然として回答すべき重要
な質問である。我々の発見が、ＣＸＣＲ４をコレセプターとして使用するＨＩＶ
−１変異株が初期に伝染するが恐らく免疫学的機序によって除去されるかどうか
という質問を提起している。あるいは、ＣＸＣＲ４を利用する変異株は伝染部位
に保持されるが、ＣＣＲ５を利用するウィルスはＰＢＭＣに拡散することも可能
である。

【０１１５】 我々の試験の試験結果は、腸粘膜の組織生検試料を使用して、ＨＩＶ−１の伝
染と病理発生に影響を与える免疫学的決定因子とウィルス学的決定因子に関する
定量的情報を得ることができることを示している。胃腸粘膜、すなわち、性的に
暴露されて容易に外傷を受けるライニングの一次の持続性ＨＩＶ−１感染に対す
る潜在的な易損性は劇的である。この易損性には、活性化されたメモリＣＤ４＋
リンパ球が、この粘膜部位で支配的であることが含まれている。また我々の試験
結果は、ＣＣＲ５とＣＸＣＲ４の両者が、健康的なＨＩＶ−１血清陰性の個体の
胃腸管由来の粘膜ＣＤ４＋リンパ球上に高レベルで発現され、かつこれら粘膜細
胞は、生体外での感染に対する感受性が血液由来の細胞よりはるかに高いことを
示している。

【０１１６】 患者集団〔６名の健康な個体、男性３名と女性３名（平均年齢は４５歳で、２
４〜６８歳の範囲内である）〕をリンパ球表現型の試験を行うために集めた。２
名の追加の男性をウィルスの培養実験を行うために集めた（以下参照）。糞便中
の血液の履歴を調べるため、または常用のポリープスクリーニングのための選択
的内視鏡検査を行う前にインフォームド・コンセントを行った。どの被検者も、
下痢症状または腸炎の履歴または感染性障害は全くなかった。試験生検試料とし
て同じ領域で採取してヘマトキシリンとエオシンで染色した生検試料は、病変を
全く表わさず、かつ胃腸の外科病理学者が盲目方式（blinded fashion）で精査
をしたときすべて正常な外観であった。この試験は、UCLA Human Subjects Prot
ection Committee によって認可された。直腸Ｓ状部の結腸内３０ｃｍの部位を
、常用して、すべてのサンプリングは、外傷によるかまたは感染性の直腸炎が原
因で起こることがある混乱した炎症を避けて行った。粘膜単核細胞（ＭＭＣ）を
、各ドナー由来の４個の内視鏡生検試料から分離した。生検試料は、１５ｍｌの
組織培地（ＲＰＭＩ １６４０、Invine Scientific）中に３．３ＯＤの鉗子を使
用して集めた。これら生検試料は、分離するまで（約２０〜６０分間）、回転プ
ラットフォーム上で室温に維持し、次に１ｍＭのＥＤＴＡと５０ｍＭの２−メル
カプトエタノールを含有するリン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）が入っている１０×
３５ｍｍペトリ皿中に取り出し、次いで１８Ｇ針を使用して試料をそぎとった。
その破壊された組織を、振盪水浴内で３７°にて２０分間インキュベートした。
遠心分離した後、その組織試料を、コラゲナーゼとディスパーゼの混合物（Boeh
ringer Mannheim#269638；ＲＰＭＩ１ｍｌ当り０．１ｍｇ／ｍｌ）で、３７°に
て１ｈｒ消化した。順次ゲージを下げた一連の針をつけたシリンジを試料に通過
させてさらに破壊を行った。砕片を７０ミクロンの細胞ストレーナー（Falcon#2
350）を用いて除いた。得られた細胞を、１０％ウシ胎仔血清を含有するＲＰＭ
Ｉ中に再懸濁させた。単核細胞は、主として上皮細胞と白血球を含んでいるが血
算機を用いて肉眼で計数し、白血球であった単核細胞の比率を推定した。4個の
生検試料について、収量が平均１．３×１０^６±１．１×１０^６Ｓ．Ｄ．（ｎ＝
６）で、単核細胞の約２０％が白血球であった。トリパンブルーのエクスクルー
ジョン（exclusion）によって測定した生存度は＞９０％であった。ドナーから
血液はＥＤＴＡ中に集めて、全血染色法を利用して染色した。

【０１１７】 購入したモノクローナル抗体は、ＣＤ４−フルオレセインイソチオシアネート
とＣＤ４５−ペリジレクロロフィルタンパク質（ＢＤＩＳ）、ＣＤ８−アロフィ
コシアニン（Caltag）および抗−ＣＸＣＲ４−Ｒ−フィコエリトリン（ＰＥ；Ph
armingen）を含有していた。抗−ＣＣＲ５は、Leukosite（米国マサチューセッ
ツ州ケンブリッジ）のWaiter Newman博士から提供され、そしてＢＤＩＳのKenne
th Davis博士とNoel Warner博士がＰＥとの１：１コンジュゲートとして製造し
た。Cell Questoソフトウェアを使う分析によって、ＦＡＣＳ Caliburo（ＢＤＩ
Ｓ）で分析を行った。分離されたＭＭＣに対する初期ゲーティング（initial ga
ting）を、側方散乱（side scatter）とＣＤ４５蛍光を使用し続いて前方散乱と
側方散乱のゲーティングを使用して実施した。粘膜白血球の明確に定義された別
の集団がＣＤ４５brightとして確認され、初期の単核試料の集団の約１０〜５０
％であった。これらのうち、２０〜４０％はＣＤ４＋リンパ球でありそして２６
〜４１％はＣＤ８＋Ｔ細胞であった。

【０１１８】 ＣＤ４＋リンパ球当りのＣＣＲ分子の数を推定するため、測定されたＣＣＲ５
の相対蛍光強度（ＲＦＩ）に校正係数を、具体的に述べると４４を掛け算して、
我々のＦＡＣＳ Caliburに対して決定した。この校正係数は、ＲＦＩチャネル数
当たり検出されたＰＥの分子の数である。ＰＥとの１：１コンジュゲートとして
調整されたｍＡｂの場合、ＲＦＩチャネル数に前記校正係数を掛け算して、細胞
当り結合されたｍＡｂの数を推定することができる。ＣＸＣＲ４は１：１コンジ
ュゲートとして入手できなかったので、上記の計算はＣＸＣＲ４については実施
しなかった。

【０１１９】 前記腸の生検試料中に使用したコラゲナーゼ／ディスパーゼによる分離法が表
面抗原を分離も取り除きもしなかったことを保証するため、末梢血液の単核細胞
（ＰＢＭＣ）をFicoll-Hypaque分離法で分離し、次いで染色して、ＣＤ４５、Ｃ
Ｄ４、ＣＤ８、ＣＣＲ５およびＣＸＣＲ４の発現の百分率をフローサイトメトリ
ーで直接分析するか、または粘膜分離法（コラゲナーゼ／ディスパーゼによる処
理）で処理して次に染色して抗原について分析する、上方で分離されたＰＢＭＣ
と、粘膜分離酵素に暴露されたＰＢＭＣは試験された全抗体に対するクオドラン
トパーセンテージ（quadrant percentage）に認められる差を全く示さなかった
。したがって、ＣＣＲ５の発現がコラゲナーゼ／ディスパーゼによる処理で増大
しなかったので、腸由来の細胞上でのＣＣＲ５の比率と発現が、血液由来の細胞
と比べて増大したという結果は、分離方法が原因ではない。

【０１２０】 健康でＨＩＶ血清陰性のボランティア各々由来のＭＭＣを、４個の内視鏡粘膜
生検試料から、機械的破壊を行い、続いて、１０％のヒト血清を補充し、１０ｍ
ｇ／ｍｌのゲンタマイシン、ペニシリン、ストレプトマイシンおよびグルタミン
を含有するIscove ＤＭＥＭ倍地で３日間培養した後、分離した。インターロイ
キン−２（ＩＬ−２、Amgen）を、２０ＩＵ／ｍｌ添加した。合計１０^５個の粘
膜細胞とＰＢＭＣに５０ｍｇのＨＩＶＳＸまたはＨＩＶＮＬ４−３を３ｈｒ感染
させた後、１００μｌの培地中で、９６ウェルプレートにて平板培養を行った。
平板培養を行う前に、前記細胞を２回洗浄して、遊離のウィルスおよび付着した
ｐ２４を除いた。上澄み液３０μｌずつを、１８ｈｒ、３日（７２ｈｒ）および
５日（１３０ｈｒ）の各時点でサンプリングして、ｐ２４をELISA法法で測定し
た（Coulter）。ＣＤ４＋の百分率をフローサイトメトリーで測定して、その百
分率を使って培養物中のＣＤ４＋リンパ球の数を測定した。腸細胞上でのコレセ
プターの発現は、細胞の収量が十分でなかったので、これらのドナーについては
試験しなかった。

【０１２１】 機能、感染力および流量の試験を行うために、粘膜単核細胞の収量を増大しよ
うとして、代わりの分離法を行った。新たに集めた内視鏡生検試料を細切して、
１００×３００ｍｍペトリ皿内に入っている２０単位／ｍｌのＩＬ−２を補充し
たIscove培地１０ｍｌ中に直接入れ、５％ＣＯ_２雰囲気内で３７°にて３日間培
養する。細胞を７０μｍの細胞ストレーナーを通過させて収穫し、次いで全単核
細胞の収量を、血算機を利用し肉眼で計数する。ＣＤ４５＋、ＣＤ３＋、ＣＤ４
＋およびＣＤ８＋の諸細胞の収量をTru Countのビーズを使用して測定して、従
来のコラゲナーゼ／ディスパーゼのプロトコルを利用して分離した、同じ個体か
ら集められた生検試料からの収量と比較した。粘膜リンパ球の収量は６倍である
（図５）。

【０１２２】組織中のＨＩＶ−１の定量 直腸Ｓ状部の生検試料からＲＮＡを抽出すると、組織ＲＮＡの回収率は＞９５
％になる。我々はChen研究所が以前に報告した方法を改変し、組織ＲＮＡの定量
ＲＴＰＣＲ検定法および組織ＤＮＡの定量ＰＣＲ法を開発した。我々の最初の試
験結果は、ＨＩＶ−１ＲＮＡが、ＲＴＰＣＲによって、１０コピー数という低い
レベルまで定量できることを示している（図６）。

【０１２３】 試料は、凍結状態から直ちにホモジナイズし（Powergenは５組織ホモジナイザ
ーを使用）、Trizolで抽出して、ＲＮＡ含有相とＤＮＡ含有相に分離する。ＲＮ
ＡはRneasyカラムを使用してさらに抽出する。品質管理の試験を行ったところ、
ＲＮＡの分解が最小であり（アガロースゲル電気泳動法）かつＤＮＡ汚染が全く
ない（ＲＮＡ鋳型のＰＣＲ）ことが確認された。ＨＩＶ ＲＮＡのコピー数を、
非プライス／マルチプルスプライス ＨＩＶ ＲＮＡ（unspliced／multiply slic
ed HIV RNA）を捕獲するように設計されたＨＩＶ ＬＴＲ特異的プライマー６６
７／ＡＡ５５で改変したγＴＴＨ ＲＮＡ ＰＣＲキット（Perkin Elmar）を使用
して定量する。線形標準曲線を、６６７／ＡＡ５５のプライマーペアが認識する
１２７ｂｐの配列を使用して作成する。ＤＮＡは、エタノールで沈殿させ、０．
１Ｍクエン酸ナトリウム／１０％エタノール緩衝液で少なくとも２回洗浄して単
離した。ＨＩＶ ＤＮＡの場合、同じプライマーペアを使用してＰＣＲ増幅を行
う（６６７／ＡＡ５５）。線形標準曲線をβ−グロビンプライマーを使用して作
成する。

【０１２４】 我々の方法を標準化して、得られる収量に、ＨＩＶ ＲＮＡの生体内の量を最
も厳密に反映させるために、既知量のＨＩＶ ＬＴＲ ＲＮＡを、血清陰性生検試
料に、核酸を分離する前と後に添加した。線形標準曲線を、０．５μｇ／μｌの
Hela細胞全ＲＮＡで希釈した精製ＨＩＶ ＬＴＲ ＲＮＡを利用して作成し、次い
でＲＴ−ＰＣＲを先に記載したようにして実施した。前後にＬＴＲを補充した前
記試料間の差を定量して最小であることが分かった（回収率＞９５％）。

【０１２５】 回収率を定量的に評価するため、血清陰性試料に、既知量のルシフェラーゼＤ
ＮＡ（ヒトの相同性が不明のバクテリアの配列）を受け入れさせて組織ＤＮＡの
回収率（通常＞７５％）を定量し、そして既知量のＬＴＲ ＨＩＶ配列を受け入
れさせてＲＮＡの回収率（＞９５％）を定量する。

【０１２６】ＨＩＶ−ＲＮＡは、血漿ウィルス量が検出できない被検者由来の直腸Ｓ状部の生 検試料中に再現可能に検出される 一つの生検試料から得た試験結果の反復可能性を、同じ患者から同じ外周レベ
ル（circumferential level）（３０ｃｍ）で同時に得た別の生検試料と比較し
て例証する試みを行った。血漿ウィルス量が検出できない被検者の単一生検試料
（各々１０ｍｇ）を凍結し、ＲＮＡを抽出し次いで上記のようにＬＴＲ特異的プ
ライマー６６７／ＡＡ５５を使用して増幅した。各生検試料から平均して２５μ
ｇのＲＮＡが得られ、通常その１／１００を定量に使用した。図７に示す試験結
果は、直腸Ｓ状部の生検試料を使用して、高感度の検定法で定量したＲＮＡウィ
ルス負荷量（ＲＮＡ viral burden）の再現性を立証している。そのデータは、
血漿ウィルス量が検出できない被検者のベースラインＳ状結腸鏡検査中に得た二
つの生検試料由来の組織のＨＩＶ ＲＮＡウィルス量を示す。これらの個体は、
１年間以上、血漿ウィルス量が検出できないと報告してきた。同じ被検者の試料
間に、平均して＜０．２ｌｏｇ１０の差がある。これらのデータは、生検試料を
使用して組織のウィルス量を定量するときの再現性と、最小の試料間変動を示し
ている。等しく重要なことは、血漿のＨＩＶ ＲＮＡが検出できない被検者の組
織のＨＩＶ ＲＮＡの検出可能なレベル（通常１０^２〜１０^３／μｇ ＲＮＡ）を
立証することである。

【０１２７】ＨＩＶ−ＤＮＡは、血漿ウィルス量が検出できない被検者由来の直腸Ｓ状部の生 検試料に再現可能に検出される 血漿ウィルス量が検出できない別のグループの被検者のＨＩＶ ＤＮＡを、Ｌ
ＴＲ領域に対する特異的６６７／ＡＡ５５プライマーおよび内部線状標準に使用
されるｂ−グロビン特異的プライマーによって定量的ＰＣＲを利用して増幅した
。ｂ−グロビン特異的プライマーについては３回ずつ検定し、ＨＩＶプロウィル
スＤＮＡについては二回ずつ検定したときの定量結果を図８に示す。検出の下限
は３コピー数であるが、我々の下方のカットオフ点として、１０コピー数を使用
した。数値は、定量された実コピー数と、ｂ−グロビン依存性細胞の計数に基づ
いた計算コピー数を示す。これらの試験結果は、我々の技法が、血漿ウィルス量
を検出できない被検者の１０という低いプロウィルスＤＮＡのコピー数を検出で
きることを示している。

【０１２８】粘膜ＣＤ４Ｔ細胞上でのＣＣＲ５コレセプターの発現 粘膜単核細胞を分離しても、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＣＲ５およびＣＸＣＲ４の表
現型発現は変わらない。

【０１２９】 試料を、健康で血清陰性の対照被検者の血液（末梢血液の単核細胞：ＰＢＭＣ
）と腸粘膜（粘膜単核細胞：ＭＭＣ）から分離して、両コンパートメント内でＣ
ＣＲ５とＣＸＲ４のベースライン発現を行った。図９は我々の分離法が、関連す
る受容体（ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＣＲ５、ＣＸＣＲ４）を取り除いたりまたはそれ
ら受容体に表面発現を変えたりしないことを立証している。

【０１３０】 ＣＤ４Ｔ細胞上ＣＣＲ５の粘膜発現はＰＢＭＣと比べて大きく増大している。
分離された粘膜単核細胞と末梢血液単核細胞を、健康で血清陰性の対照被検者か
ら獲得し、測定して、ＣＣＲ５受容体を発現する各コンパートメントにおけるＣ
Ｄ４Ｔリンパ球の相対百分率を求めた。２０７ＣＣＲ５抗体を、フィコエリトリ
ンと１：１の比率でコンジュゲートさせ、使用するフローサイトメトリーの装置
は、４４フィコエリトリン分子／ＲＦＩチャネルを検出するように校正する（標
準化されたＣＤ４の発現と結合した抗体の数／細胞に基づいて）。したがって、
結合した抗ＣＣＲ５抗体の数／細胞は、抗体が受容体に一価結合していると想定
して、受容体の数／細胞に換算することができる。

【０１３１】 ＣＣＲ５を発現するＣＤ４＋細胞の百分率は、腸の場合（８７％）には、血液
の場合（１１％）と比べて有意に大きくなっている（ｐ＝０．００１９）（図１
０）。

【０１３２】 図１１は、ＨＩＶ感染に対する易損性がさらに高くなった場合、粘膜のＣＤ４
Ｔ細胞（受容体／細胞：平均８５００）が、血液のＣＤ４Ｔ細胞（受容体／細胞
：２７００）（ｐ＝０．００７）と比べて有意に多数の受容体を細胞当り発現す
ることを示している。

【０１３３】 粘膜のＣＤ４Ｔ細胞上でのＣＣＲ５の発現は、メモリサブセット上でのＣＣＲ
５の発現に極めて類似している。健康で血清陰性の同じ対照被検者由来の血液と
粘膜の試料を、メモリサブセットのインディケーターとして、ＣＤ４５ＲＯ抗体
で対比染色して、ＣＣＲ５の染色の相対分布を測定した。ＣＤ４＋蛍光でゲート
した（gate）した後、ＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＯ＋粘膜細胞の９１％がＣＣＲ５を発
現するのに比べて血液のマッチしたグループ（matched group）の２４％がＣＣ
Ｒ５を発現する（ｐ＝０．０１７）。

【０１３４】粘膜のＣＤ４Ｔ細胞上のＣＣＲ５の発現は、ＨＩＶに感染して炎症状態の試料の ＰＢＭＣに比べて増大したままである 健康で血清陰性の被検者の粘膜と血液のＣＤ４Ｔ細胞のＣＣＲ５発現の予備ベ
ースラインが確められているので、慢性ＨＩＶ感染症の状態のＣＤ４Ｔ細胞上で
の発現を評価して、ＣＣＲ５の発現が、粘膜において血液と比べて増大したまま
でＨＩＶが複製するのに好都合であるという仮説を試験した。炎症症状の対照被
検者は、ＨＩＶ感染症に直接関連がない変化を識別するために入れてある。炎症
症状の対照被検者は、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、具体的に述べると潰瘍性大腸炎
の十分に特徴ずけられた被検者であった。被検者は、５−ＡＳＡ抗炎症薬だけで
臨床的に寛解中（粘膜の炎症は保持されているが制御されている）であり、ステ
ロイド類または免疫抑制薬は全く使用しなかった。ＨＩＶに感染した個体は、以
下の血漿ウィルス量の範囲内（すなわち超高感度検定法で検定できない範囲：ｎ
＝２；２００〜２０００コピー／ｍｌの血漿ウィルス量の範囲：ｎ＝２；２０，
０００〜４０，０００コピー／ｍｌの血漿ウィルス量の範囲：ｎ＝４）で、末梢
ＣＤ４の計数値が２００〜７００細胞／ｍｍ^３であった。

【０１３５】 血清陰性の正常な対照被検者に見られる粘膜と血液のＣＤ４Ｔ細胞の間のＣＣ
Ｒ５発現の差は、炎症症状の対照被検者（ｐ＝０．０１２）およびＨＩＶに感染
した被検者（ｐ＝０．０４）に維持されていた（図１２）。我々の仮説と一致し
て、ＨＩＶに感染したＣＤ４Ｔ細胞上の粘膜のＣＣＲ５発現が、図１２に示すよ
うに正常な対照被検者に比べて減少していることを確認する有意性を示す傾向が
ある。

【０１３６】ＣＣＲ５を発現するＴ細胞のＣＤ４：ＣＤ８の比率は、ＨＩＶとＩＢＤの場合、 血液と腸の両方で低下する ＣＤ４Ｔ細胞上のＣＣＲ５受容体はＣＤ８＋Ｔ細胞上でも発現される。粘膜Ｃ
Ｄ４Ｔ細胞上のＣＣＲ５の発現が真に低下したのかどうかをさらに評価するため
、３種の臨床病状の両コンパートメント内のＣＤ４とＣＤ８のＴリンパ球間のＣ
ＣＲ５受容体の相対分布を評価した。図１３は、ＣＣＲ５を発現する細胞のＣＤ
４；ＣＤ８の比率が、劇的に下方に変化したことを示し、血液と腸の試料で、Ｉ
ＢＤの場合、約５０％そしてＨＩＶの場合、７０〜９０％低下している。このこ
とは、ＨＩＶの拡散を阻害するためのＣＣＲ５の保護的下方調節を表している。
炎症病状の対照被検者に類似の傾向があれば、表面発現を低下させる主な刺激は
炎症性環境に関連があるようである。試料は、ｂ−ケモカインのレベルが両方の
病状で高くなっているが、ＩＢＤの試料よりＨＩＶの試料の方が一層高くなるこ
とを確認するために処理されている。我々の仮説を支持して、これらの試験結果
は、相対的リンパ球減少症の組織学報告があるにもかかわらず、ＨＩＶの極めて
活性の粘膜の炎症状態（ケモカインの活性で定義される）を示唆している。

【０１３７】ＱＩＡを使用して行うβ―ケモカインの組織濃度の定量 ＨＩＶの感染が、有意な粘膜炎症反応を誘発するという我々の仮説をさらに評
価するため、カロリンスカ研究所（Karolinska Institute）のJan Andersson博
士とともに予備実験を行って、組織中のケモカインの濃度を定量した。内視鏡生
検試料を、フォイル上にすばやく並べてスナップ凍結させてドライアイスととも
にスウェーデンに送り、冷凍して切片（７μｍ厚）をつくり、抗体で定量的な免
疫組織学的染色を行って、ＲＡＮＴＥＳ、ＭＩＰ−１ａおよびＭＩＰ−１ｂを確
認した。ＣＤ４、ＣＤ８およびＣＣＲ５の抗体を使用して、定量画像分析（ＱＬ
Ａ）も行った。健康で血清陰性の対照被検者と、血漿ウィルス量を検出できない
ＨＩＶ感染被検者由来の試料を試験した。試験結果は、ペルオキシダーゼで標識
した抗体で陽性に染色された全組織面積測定値（total tissue area measure）
の百分率で表されている。健康な対照被検者のＲＡＮＴＥＳ、ＭＩＰ−１ａおよ
びＭＩＰ−１ｂの試験結果はそれぞれ２．０４％、１．３９％および１．６５％
であった。ＨＩＶに感染した被検者の試料の場合、それぞれの値は、１５．１％
、６．２％および１２．１％まで増大した。これらのケモカインは、追加の炎症
細胞を、すでに炎症を起こしている粘膜に補充する働きをする。ＨＩＶ感染によ
るこの劇的な増大は粘膜の炎症と関連していることを表１に示す。

【０１３８】

【表１】

【０１３９】粘膜単核細胞（ＭＭＣ）は、生体外でＰＢＭＣより有意に感染しやすい 初期の観察結果は、いくぶんコレセプターの発現が増大したため、粘膜細胞の
ＨＩＶ感染に対する易損性が増大したことを示した。同じ個体から分離したＭＭ
ＣとＰＢＭＣを使用し、Ｍ−トロピックＨＩＶＳＸとともに２ｈｒインキュベー
トし、洗浄し次に３から１０日間培養することによって、上記仮説を生体外で試
験した。上澄み液の一部分を推定の時点で集めて、感染の証拠としてｐ２４の産
生量を検定した。第一時点（３日目）でのｐ２４の産生量は、同時にインキュベ
ートしたＰＢＭＣに比べて著しく増大した（ＰＢＭＣの場合５５０ｎｇ ｐ２４
／ｍｌであるのにあるのに比べてＭＭＣの場４０００ｎｇ ｐ２４／ｍｌであっ
た）。図１４に要約したデータは、粘膜のＣＤ４Ｔ細胞上でのコレセプターの発
現が増大すると、ＨＩＶの感染力が増大するという仮説を支持している。

【０１４０】結腸中のＣＤ８＋細胞とＣＣＲ５細胞の分析 一般に、上皮内コンパートメント中の細胞は大部分、ＣＤ＋８細胞であるが、
リンパ球固有層の大部分はＣＤ４＋細胞である。結腸中のＣＤ８＋細胞の相対量
を測定するため、結腸粘膜の生検試料を、ＣＤ８＋細胞の存在について分析した
。図１５に示す試験結果は、ＨＩＶに感染した患者由来の生検試料のＣＤ８＋細
胞の染色度（黒／白画像では黒ずんでいる褐色細胞）が、ＨＩＶ陰性の生検試料
の同染色度より大きいことを示している（パネルＡとＢを比較せよ）。特に、固
有層中の細胞の大部分は、ＨＩＶに感染した患者の場合、ＣＤ４＋よりむしろＣ
Ｄ８＋細胞である。さらに、ＨＩＶ感染患者の結腸粘膜中のＣＤ４＋細胞の数は
著しく減少している。この場合、その生検試料を、顕微鏡で検査したならば、Ｃ
Ｄ８の細胞の増加がＨＩＶの誘発するＣＤ４細胞の殺細胞によって起こるＣＤ４
細胞の損失によって釣合がとれているため炎症状態であるというよりもむしろ正
常細胞の状態であるといえるであろう。このことが、粘膜の早期の観察によって
、ＨＩＶに冒された粘膜組織中の炎症を検出できなかった理由を説明しているよ
うである。ＣＤ８細胞に関連する実際の細胞炎症がある。

【０１４１】 ＨＩＶによって増大することがすでに報告されている先に考察したｂ−ケモカ
イン類は、ＣＣＲ５受容体を有する細胞を、粘膜に補充する（図１６）。ＣＣＲ
５レセプターは、ＨＩＶが利用してこれらの細胞に侵入する主要コレセプターで
ある。したがって、ＨＩＶは、少なくとも部分的に、親炎症性サイトカイン類を
産生することによってこの環境内に炎症を誘発して、感染に利用する標的細胞を
より多数補充することによってさらに増殖できることを保証している。

【０１４２】ＰＣＲ分析法を利用して行うβ−ケモカインの組織濃度の定量 ＨＩＶが粘膜の炎症性疾患であるので、抗炎症薬による治療に対して敏感であ
るというさらなる証拠を図１７Ａ〜１７Ｃに示す。そのデータは、正常で健康の
対照患者、その粘膜中に少量のウィルスを有するＨＩＶ患者、および粘膜中によ
り多量のＨＩＶを有する患者の粘膜生検試料中に存在する、親炎症性のサイトカ
イン類とケモカイン類（ｍＲＮＡ）、ＲＡＮＴＥＳ、ＩＦＮγおよびＴＮＦ（Ｒ
ＮＡ）の濃度を示す。これらの試験から明確に分かるように、その粘膜中にＨＩ
Ｖを有する患者は、健康な患者に比べて、より高いレベルの親炎症性ケモカイン
、ＲＡＮＴＥＳ、インターフェロン−γ（ＩＦＮγ）およびＴＮＦを含有してい
る。さらに、粘膜ウィルス量が一層高いＨＩＶ患者は、粘膜ウィルス量が低いＨ
ＩＶ患者と比べて、はるかに高いレベルのＲＡＮＴＥＳ、ＩＦＮγおよびＴＮＦ
を含有している。両症例の場合、これらＨＩＶ患者を健康な正常被検者と比較す
ると統計的に有意差がある（ＲＡＮＴＥＳ、両症例それぞれについてｐ＝０．０
００８および０．００１；ＩＦＮγ、両症例についてそれぞれｐ＝０．０００８
および０．００２；ならびにＴＦＮ、両症例についてそれぞれｐ＝０．００２お
よび０．０１）。

【０１４３】ＨＩＶ量は、ＣＤ４＋細胞の活性化とウィルスの子孫の産生量を増大する 図１７Ｄは、粘膜ウィルス量が増大するにつれて、粘膜内の活性化されるＣＤ
４＋細胞の百分率が増加する（ＨＬＡ−ＤＲの発現の増大で示される）ことを示
している。図１８に示してあるように、粘膜細胞は、一旦感染するとより多くの
ウィルスを産生する。このことは、Ｔ−トロピックレポータウィルス（Ｎｌｅｇ
ｆｐ）が細胞内で複製するときにこのウィルスによって緑色蛍光タンパク質の発
現が増大することによって示される。この試験結果は、ウィルスを産生する粘膜
細胞の百分率が血球の場合の３００倍であることを示している。

【０１４４】 したがって、これらの結果は、ＨＩＶが、ＣＤ４＋細胞の活性化、すなわちＨ
ＩＶが感染可能である的確な細胞型をもたらす親炎症性サイトカイン類のレベル
を増大することを立証している。次に、感染したＣＤ４＋細胞は、他のＣＤ４＋
細胞に感染するのに利用できる子孫ウィルスと、各種の親炎症性サイトカイン類
とケモカイン類の産生で補充されて感染を広げる細胞とを産生する。

【０１４５】抗炎症薬５−ＡＳＡは細胞内でのウィルスの複製を阻害する ５−ＡＳＡがＨＩＶの複製を阻害する性能を、生体外で評価するため、５−Ａ
ＳＡの段階的投与量（３、３０、３００、３０００μＭ）の存在下、１×１０^６ 個の活性化されたＰＢＭＣを使用して、ＨＩＶ感染の試験を行った。このＰＢＭ
Ｃは培地中に存在するケモカイン類とサイトカイン類とともにＣＤ４とＣＤ８の
細胞の不均一な集団を含有している。使用される５−ＡＳＡの投与量の範囲は、
１日当り経口投与される５−ＡＳＡ ４．８ｇで治療される患者の胃腸粘膜中に
見られる生理的範囲であると考えられる。Ｍ−トロピックＪＲＦＬまたはＴ−ト
ロピックＬＡ１のエンベロープで偽形化された複製不全（replication incompet
ent）ＨＩＶ ｐＮＬｌｕｃΔＢｇｌを感染に使用した。ルシフェラーゼの発現
を利用して、４日間培養した後のＨＩＶ複製の程度を評価した。薬剤で処理した
培養物を、薬物添加されなかった試料と比較した。細胞を７−ＡＡＤで染色する
ことによって、４日後の細胞死について、フローサイトメトリーで分析した。

【０１４６】 表２の試験結果は、５−ＡＳＡによる処理によってルシフェラーゼの発現が３
〜６７％阻害され、その阻害は最高の投与量で有意である（ｐ＜０．００５）（
Ｎ＝処理グループ当り７個の感染体）。細胞死は、観察された阻害の原因になっ
ていないようである（細胞死の％は、未処置の対照体＝７．８％、３０μＭの５
−ＳＡで処理したもの＝９．４％および３０００μＭ Ｓ−ＡＳＡで処理したも
の＝１３．３％）。

【０１４７】

【表２】

【０１４８】 図１９は、Ａｓａｃｏｌ（メサラミン）すなわち局所用抗炎症薬を使用すると
ＨＩＶの複製が阻害されることを示している。複製されるとルシフェラーゼを発
現するＨＩＶウィルスに感染しているが、対照として全く処置されていない細胞
培養物を使用すると、２種の最低投与量（３０μｇと３００μｇ）のＡｓｃａｌ
が、ＨＩＶの複製を約２０％阻害することができる。３０００μｇの投与量の場
合、抑制の程度は最高であるが、これは一部この投与量の薬物の細胞毒性が原因
になっている（３０μｇと３００μｇの投与量に対して細胞死は約３０％ｖｓ．
１３〜１５％；ＡＺＴは５μｇの投与量で約１６％の細胞死を起こす）。これら
の結果を、上記ウィルスがその遺伝物質（ＲＮＡ）をＤＮＡに逆転写し続いて細
胞のＤＮＡ中に組み込む性能を遮断するより有効な公知の直接的抗ウィルス薬Ａ
ＺＴと比較して示してある。Ａｓａｃｏｌの抗炎症活性は、ＨＩＶの複製を抑制
する場合、ＡＺＴほど強力ではないが、それでもその活性は統計的に有意である
。

【０１４９】 要約すると、上記データは、その最高投与量で予想される生理的濃度になる５
−ＡＳＡ（Ａｓａｃｏｌ）がＨＩＶの複製を阻害したということ、およびその阻
害活性は薬物が誘発する細胞毒性と関連がないようであるということを示してい
る。５−ＡＳＡの上記阻害活性は、少なくとも一部分は、その抗炎症活性が原因
のようである。したがって、これらの試験結果は、ＨＩＶを処置するために抗炎
症薬を使用する広い用途を示している。

【０１５０】 本発明の多数の実施態様を説明してきたが、本発明の精神と範囲を逸脱するこ
となく各種の変形を行えることが分かるであろう。

【図面の簡単な説明】

【図１】 血液および腸粘膜由来のＣＤ４＋リンパ球状でのＣＣＲ５受容体の発
現を示す図である。フローサイトメトリーの散乱プロット（scatter plot）（Ａ
、Ｂ）は、代表的な被検者内でＣＣＲ５および／またはＣＤ４を発現する細胞の
百分率を、血液（Ａ）と腸（Ｂ）について定量するリンパ球サブセットの分析結
果を示す図である。各プロットの上右側の象限に示す数字は、ＣＣＲ５を発現し
たその被検者のＣＤ４＋リンパ球の百分率を示す。（Ｃ）６名の被検者の個人の
データ点；各被験者の血液と腸から得たデータ。６名のすべての被検者の腸の試
料は、血液と比べＣＣＲ５＋ＣＤ４＋細胞の百分率が大きい（ｐ＝０．０３）；
差の範囲は２．０〜５．４倍である。

【図２】 血液および腸粘膜由来のＣＤ４＋リンパ球上の「ＣＣＲ５受容体の数
／細胞」を示す図である。フローサイトメトリーのヒストグラム（Ａ、Ｂ）は、
６名の被検者のうちの一名の血液（Ａ）と腸（Ｂ）について、ＣＤ４＋リンパ球
上のＣＣＲ５発現の定量結果を示す。ＣＣＲ５＋ＣＤ４＋の粘膜細胞の平均蛍光
インデックスの右方向へのシフトは、ＣＣＲ５受容体の数／ＣＤ４＋リンパ球が
増加したことを示している。ＡとＢのバーの上の数は、その個体の血液と腸の「
発現されるＣＣＲ５分子の数／ＣＣＲ５＋ＣＤ４＋リンパ球」を示す。（Ｃ）６
名の被検者すべての腸の試料は、血液と比べてＣＣＲ５の発現が高く（ｐ＝０．
０３）１．４〜３．５倍の範囲の差であった。各人の記号は図１に使用した記号
と同じである。

【図３】 血液および腸粘膜由来のＣＤ４＋リンパ球上のＣＸＣＲ４受容体の発
現を示す図である。フローサイトメトリーの散乱プロット（Ａ、Ｂ）は、代表的
被検者の血液（Ａ）と腸（Ｂ）について、ＣＸＣＲ４および／またはＣＤ４を発
現する細胞の百分率を定量するリンパ球サブセットの分析結果を示す図である。
各プロットの上方右側の象限に示す数は、ＣＸＣＲ４を発現したその被検者のＣ
Ｄ４＋リンパ球の百分率を示す。（Ｃ）６名の被検者の個人のデータ点。百分率
は、二つのコンパートメント間に差はない（ｐ＝０．３）。各人の記号は図１に
使用したのと同じである。

【図４】 ＨＩＶＳＸまたはＨＩＶＮＬ４−３に感染した後、ＭＭＣとＰＢＭＣ
が産生したｐ２４のピコグラムの数を示す図である。直線グラフは、Ｍ−トロピ
ックＨＩＶＳＸ（Ａ）またはＴ−トロピックＨＩＶＮＬ４−３（Ｂ）に３ｈｒ感
染させた後、１８ｈｒ、７２ｈｒおよび１３０ｈｒの時点でのｐ２４の産生量（
ｐ２４のピコグラム／１０^４個のＣＤ４＋リンパ球）を示す。２０ＩＵ／ｍＬの
ＩＬ−２の存在下（●）で培養したＭＣＣの由来の上澄み液は７２ｈｒ後と１３
０ｈｒ後に、２０ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２あり（〇）またはなし（図４中の黒塗り
逆三角形）で増殖させたＰＢＭＣ由来の上澄み液より高い濃度のｐ２４を含有し
ていた。

【図５】 粘膜単価細胞を分離するため３日間ＩＬ−２ありで培養したところ、
通常のコラゲナーゼ／ディズパーゼによる消化と比べてＣＤ４５＋、ＣＤ３＋、
ＣＤ４およびＣＤ８＋細胞の数が増加したことを示す図である。各方法によって
分離した単核細胞の集団は、それらのＴ細胞サブセットの構造に有意差はないよ
うである。

【図６】 組織生検試料は、増幅前処理を行うと５〜１０％のＲＮＡが失われる
ことを示す図である。血清陰性試料を、２５０コピー数の抽出前の標準ＬＴＲ配
列（左）および２５０コピー数の抽出後の平行試料（右）で「スパイクした」。
３２Ｐエミッションのディジタル化定量対、同じ量のＬＴＲＲＮＡを抽出前と抽
出後に添加することの間に５〜１０％の差を示した。標準は１０コピー数の検定
感度を示す。

【図７】 結腸の同じ外周レベル（３０ｃｍ）の異なる部位から得た試料間のイ
ンターナル・コンシステンシー（internal consistency）を示す図である。各試
料は二つずつ試験した。各個体から得た試料間に平均して０．２ｌｏｇのＳＤが
あった。すべての被検者は血漿ウィルス量を検出できなかった。

【図８】 直腸の生検試料中のＨＩＶの一つの定量測定結果を示す図である。Ｄ
ＮＡは、血漿のＨＩＶＲＮＡが検出できない被検者の二つの生検試料から抽出し
た。ＨＩＶＬＴＲの配列のｑＰＣＲを実施して、各被験者由来の二つの試料各々
から実際に検出されたコピー数を記録した（下側のパネル）（４名の異なる被検
者に「試料＃１〜４」という標識を付けた）。β−グロビンの定量と標準曲線を
、各被験者の２試料について３回実施した（一つの生検試料の結果だけが頂部パ
ネルに表示されている）。ＨＩＶＤＮＡのコピー数の計算数値は、２×１０^６β
グロビンコピー数（１×１０^６細胞）当りの数値で報告されている。

【図９】 分離工程によって、関連する受容体の発現が変化しないことを示す図
である。水平軸と垂直軸で特定された、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＣＲ５またはＣＸＣ
Ｒ４に対する抗体で直接染色された抹消血液単核細胞（ＰＢＭＣ）の流れ図（上
方パネル）。下方パネルは、粘膜単核細胞を得るため使用される分離工程にかけ
た後に、同じ個体のＰＢＭＣの平行染色を行った結果を示す。

【図１０】 ＣＣＲ５受容体が、血液に比べて、有意に多い百分率の粘膜ＣＤ４
＋Ｔ細胞上に発現されることを示す図である。健康で血清陰性の対照被検体（ｎ
＝６）由来の試料を、ＣＤ４とＣＣＲ５について染色した［粘膜試料の初期ゲー
ティング：ＣＤ４５対サイドスキャター（side scatter）］。上部の右側の象限
に示す数字は、ＣＣＲ５受容体を発現するＣＤ４Ｔ細胞の百分率を示す。

【図１１】 ＣＣＲ５受容体数／細胞が、図１０に示したのと同じ被検者の試料
において、粘膜ＣＤ４Ｔ細胞上で、血液ＣＤ４Ｔ細胞に比べて有意に増大するこ
とを示す図である。ヒストグラムは、粘膜試料の受容体数／細胞の増加に関連す
る平均チャネル蛍光（mean channel fluorescence）の著しい右側へのシフトを
示している。

【図１２】 正常な試料、炎症状態の試料およびＨＩＶに感染した試料において
、ＣＤ４＋Ｔ細胞上のＣＣＲ５の発現は、粘膜の方が血液と比べて増大している
ことを示す図である。血清陰性の健康な対照被検者（ｎ＝６）、炎症状態の対照
被検者（ｎ＝４）、およびＨＩＶに感染した被検者（ｎ＝８）由来のＣＤ４とＣ
ＣＲ５＋の二重染色された平均百分率を示している。Ｘ軸の被検者の種類の下側
に記載のＰ値は、臨床グループ内の血球と腸細胞間の有意性を示す。グラフの上
部のＰ値は、臨床グループ間の粘膜コンパートメント中の、ＣＣＲ５を発現する
ＣＤ４Ｔ細胞間の有意水準を示す。

【図１３】 （Ａ）血液と（Ｂ）腸におけるＣＣＲ５＋ＣＤ４：ＣＤ８比は、Ｉ
ＢＤとＨＩＶの場合、低下することを示す図である。左側のパネルは、健康で血
清陰性の対照被検者、血清陰性で炎症状態の対照被検者および安定したＨＩＶ感
染症の被検者由来の血液の相対ＣＣＲ５発現を示す。ＣＣＲ５発現ＣＤ４＋Ｔ細
胞／ＣＣＲ５発現ＣＤ８＋Ｔ細胞の変化比は下側の箱枠内に示してある。粘膜リ
ンパ球に対する類似の提示は（Ａ）に示してある。

【図１４】 ｐ２４（ＨＩＶ産生のインジケーター）の量は、粘膜単核細胞（Ｍ
ＭＣ）の方が抹消血液単核細胞（ＰＢＭＣ）より有意に高いことを示す図である
。

【図１５】 ＣＤ８＋細胞がＨＩＶ感染患者由来の結腸に増大していることを示
す図である。（Ａ）ＨＩＶ（−）結腸および（Ｂ）ＨＩＶ（＋）結腸由来の生検
試料。ＣＤ８＋細胞は褐色で表示される（黒白写真では黒ずんでいる）。

【図１６】 ＣＣＲ５＋細胞がＨＩＶに感染した患者の結腸に増大していること
を示す図である。（Ａ）ＨＩＶ（−）結腸および（Ｂ）ＨＩＶ（＋）結腸由来の
生検試料。ＣＣＲ５＋細胞は、褐色に染色されて表示される。（黒白写真では黒
ずんでいる）。

【図１７Ａ】 非感染被検者、粘膜ウィルス量が低いＨＩＶ（＋）被検者および
粘膜ウィルス量が高いＨＩＶ（＋）被検者のＲＡＮＴＥＳを示す図である。

【図１７Ｂ】 非感染被検者、粘膜ウィルス量が低いＨＩＶ（＋）被検者および
粘膜ウィルス量が高いＨＩＶ（＋）被検者のＩＦＮγを示す図である。

【図１７Ｃ】 非感染被検者、粘膜ウィルス量が低いＨＩＶ（＋）被検者および
粘膜ウィルス量が高いＨＩＶ（＋）被検者のＴＮＦの量を示す図である。

【図１７Ｄ】 ＨＩＶが親炎症性サイトカイン類の増大を誘発したために起こる
ＨＬＡ−ＤＲの増大で示されるＣＤ４細胞活性化の大きさを示す。ｙ軸は活性化
されたＣＤ４細胞の％を表し、そしてｘ軸はウィルス量を表す。

【図１８】 粘膜細胞（ＭＭＣ）が産生するウィルス（Ｎｌｅｇｆｐ）の量が、
血球（ＰＢＭＣ）のそれより大きいことを示す図であり、Ｎｌｅｇｆｐが細胞内
で複製されると緑色蛍光のタンパク質の発現が増大することによって表示される
。

【図１９】 ＨＩＶ複製に対するＡｓａｃｏｌ（メサラミン）の作用を示す図で
ある。ＨＩＶに感染した細胞を培養したものを、表示した量の５−ＡＳＡまたは
ＡＺＴで処理した。ＨＩＶ複製の量を示すルシフェラーゼの発現をルミノメータ
ーを使って定量した。示したデータは九つの別個の試験結果を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 9/06 Ａ６１Ｋ 31/192 ４Ｃ０９８ 9/107 31/472 ４Ｃ２０６ 9/12 31/4725 31/192 31/496 31/472 31/513 31/4725 31/536 31/496 31/5513 31/513 31/573 31/536 31/60 31/5513 31/603 31/573 31/7072 31/60 31/708 31/603 31/7088 31/7072 35/78 Ｃ 31/708 39/395 Ｄ 31/7088 48/00 35/78 Ａ６１Ｐ 1/04 38/00 11/02 39/395 15/02 48/00 31/04 Ａ６１Ｐ 1/04 31/12 11/02 31/18 15/02 43/00 31/04 １１１ 31/12 Ａ６１Ｋ 37/02 31/18 Ａ６１Ｆ 5/43 43/00 5/46 １１１ 5/47 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ， ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｒ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ， ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，Ｋ Ｚ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ， ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，Ｓ Ｋ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 ポールズ マイケル エー アメリカ合衆国 カリフォルニア州 90266 マンハッタン ビーチ モントレ ー コート ２ (72)発明者 ジョルジ ジャニス ヴィー アメリカ合衆国 カリフォルニア州 91367 ウッドランド ヒルズ ティアラ ストリート 23805 (72)発明者 エリオット ジュリー イー アメリカ合衆国 カリフォルニア州 90806 シグナル ヒル ナンバー 29 イースト ナインティーンス ストリート 2575 Ｆターム(参考） 4C076 AA01 AA09 AA16 AA27 CC04 CC35 4C084 AA02 AA20 MA02 MA52 MA55 MA65 ZB33 ZC55 4C085 AA13 BB11 BB17 BB31 CC22 4C086 AA01 AA02 BC30 BC50 BC90 DA10 DA17 EA17 EA18 GA07 GA08 MA09 MA52 MA55 MA60 MA65 NA05 ZB33 ZC55 ZC75 4C088 AB12 MA13 MA22 MA28 MA60 NA05 ZB33 ZC55 ZC75 4C098 EE11 EE23 EE28 4C206 AA01 AA02 FA33 JA19 MA02 MA04 MA33 MA41 MA48 MA72 MA75 MA80 MA85 NA05 ZB33 ZC55

Claims (129)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 レトロウィルスに感染した細胞を、ウィルスの活性化を阻害す
   る量の抗炎症薬と抗ウィルス薬に接触させることを含んでなるレトロウィルスの
   活性化を阻害する方法。
2. 【請求項２】 レトロウィルスがレンチウィルスである請求項１に記載の方法
   。
3. 【請求項３】 レンチウィルスが免疫不全ウィルスである請求項２に記載の方
   法。
4. 【請求項４】 免疫不全ウィルスが、ヒト免疫不全ウィルスＨＩＶ１型、ＨＩ
   Ｖ２型およびシミアン免疫不全ウィルス（ＳＩＶ）からなる群から選択される請
   求項３に記載の方法。
5. 【請求項５】 接触が生体内での接触である請求項１に記載の方法。
6. 【請求項６】 接触が生体外での接触である請求項１に記載の方法。
7. 【請求項７】 細胞が哺乳類の細胞である請求項１に記載の方法。
8. 【請求項８】 哺乳類の細胞がヒトの細胞である請求項７に記載の方法。
9. 【請求項９】 抗ウィルス薬が、ウィルスの融合もしくは細胞への侵入；ウィ
   ルスの逆転写もしくは核酸の複製、ウィルスの細胞ＤＮＡへの組込み；ウィルス
   の細胞からの出芽もしくは遊離；感染性ウィルスの産生；またはウィルスの融合
   もしくは感染、逆転写もしくは核酸の複製、ウィルスの細胞ＤＮＡへの組込み、
   ウィルスの細胞からの出芽もしくは遊離または感染性ウィルスの産生と関連があ
   る酵素を阻害する請求項１に記載の方法。
10. 【請求項１０】 抗ウィルス薬が、ポリペプチドまたは機能性擬似体である請
    求項１に記載の方法。
11. 【請求項１１】 ポリペプチドまたは機能性擬似体が、ウィルスまたは細胞表
    面受容体に結合する請求項１０に記載の方法。
12. 【請求項１２】 ポリペプチドが、リガンド、ウィルス受容体、抗体または抗
    体のフラグメントである請求項１０に記載の方法。
13. 【請求項１３】 酵素がプロテアーゼ、逆転写酵素またはインテグラーゼであ
    る請求項９に記載の方法。
14. 【請求項１４】 抗ウィルス薬が、プロテアーゼ阻害剤、ヌクレオシド逆転写
    酵素阻害剤、非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤、インテグラーゼ阻害剤およびこ
    れらの混合物からなる群から選択される請求項１に記載の方法。
15. 【請求項１５】 ヌクレオシド阻害剤がジドブシン（ＡＺＴ）、スタブシン（
    ｄ４Ｔ）、ラルニブジン（３ＴＣ）、ジダノシン（ＤＤＩ）、ザルシタビン（ｄ
    ｄＣ）、アバカビルおよびこれらの混合物である請求項１４に記載の方法。
16. 【請求項１６】 非ヌクレオシド阻害剤がネビラピン、デラビルジンおよびエ
    ファビレンツからなる群から選択される請求項１４に記載の方法。
17. 【請求項１７】 抗ウィルス薬がプロテアーゼ阻害剤である請求項１に記載の
    方法。
18. 【請求項１８】 プロテアーゼ阻害剤がサクイナビル、リトナビル、インジナ
    ビル、ネルフィナビルまたはアンプレナビルである請求項１７に記載の方法。
19. 【請求項１９】 抗炎症薬が、炎症細胞の補充を減らし、ケモカイン類の産生
    を減らし、新炎症性サイトカイン類の産生を減らし、またはケモカイン受容体と
    そのリガンドの相互作用を阻害する請求項１に記載の方法。
20. 【請求項２０】 抗炎症薬が、抗炎症抗体、抗炎症ペプチド、抗炎症サイトカ
    イン、抗炎症ケモカイン、抗炎症核酸、ステロイド、非ステロイド抗炎症薬、５
    −ＡＳＡ製品およびこれらの組合せからなる群から選択される請求項１に記載の
    方法。
21. 【請求項２１】 抗炎症抗体が、抗サイトカイン抗体、抗サイトカイン受容体
    抗体、抗ケモカイン抗体、抗ケモカイン受容体抗体、抗親炎症性ペプチド抗体お
    よびこれらの組合せからなる群から選択される請求項２０に記載の方法。
22. 【請求項２２】 抗炎症ペプチドが、ＬＦＡ接着分子アンタゴニスト、サイト
    カイン受容体アンタゴニスト、転写因子および可溶性ＴＮＦ−α受容体ポリペプ
    チドからなる群から選択される請求項２０に記載の方法。
23. 【請求項２３】 抗炎症サイトカインが、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３
    、ＩＬ−１６およびこれらの組合せからなる群から選択される請求項２０に記載
    の方法。
24. 【請求項２４】 抗炎症核酸が、リボザイム、抗炎症ペプチドをコードする核
    酸、アンチセンス核酸およびこれらの組合せからなる群から選択される請求項２
    ０に記載の方法。
25. 【請求項２５】 アンチセンス核酸が、サイトカイン受容体、炎症性サイトカ
    イン、ケモカイン受容体またはケモカインをコードする核酸とハイブリッドを形
    成する請求項２４に記載の方法。
26. 【請求項２６】 ステロイドがグルココルチコイドである請求項２０に記載の
    方法。
27. 【請求項２７】 ステロイドが、フルニソリド、トリアムシノリン、トリアム
    シノリンアセトニド、ベクロメタゾンジプロプリオネート、ベタメタゾンジプロ
    プリオネート、ヒドロコルチゾン、コルチゾン、デキサメタゾン、ブデゾニド、
    プレドニゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロンおよびこれらの組合せか
    らなる群から選択される請求項２０に記載の方法。
28. 【請求項２８】 非ステロイドの抗炎症薬が、サリチル酸、チオサリチル酸ナ
    トリウム、サリチル酸コリン、サリチル酸マグネシウム、ジフルニサル、イブプ
    ロフェン、ナプロキセン、スリンダク、ジフルニサル、サリチルサリチル酸、コ
    リンマグネシウムトリサリチレート、アセチルサリチル酸、サルサラート、サリ
    チル酸ナトリウムおよびこれらの組合せからなるサリチル酸誘導体の群から選択
    される請求項２０に記載の方法。
29. 【請求項２９】 非ステロイドの抗炎症薬が、フルルビプロフェン、フェノプ
    ロフェン、ナブルネトン、ケトプロフェン、ピロキシカム、インドメタシン、ト
    ルメチン、メクロファナム酸ナトリウム、メフェナム酸、エトドラク、ケトロラ
    ク、トロメタミン、ジクロフェナク、オキサプロジン、ブロムフェナクナトリウ
    ム、ロフェコキシブ、スプロフェン、フェンブプロフェン、フルプロフェン、サ
    リドマイド、メマツヨイグサ油、これらの単一異性体およびこれらの組合せから
    なる群から選択される請求項２０に記載の方法。
30. 【請求項３０】 ５−ＡＳＡ製品が、メサラミン、バルサラシド、イプサラシ
    ド、オルサラジン、スルファサラジンおよびこれらの混合物からなる群から選択
    される請求項２０に記載の方法。
31. 【請求項３１】 粘膜組織を、阻害有効量の抗炎症薬および抗ウィルス薬と接
    触させることを含んでなる、炎症が仲介する粘膜組織の感染症を阻害する方法。
32. 【請求項３２】 炎症が仲介する感染症がウィルスによって起こる請求項３１
    に記載の方法。
33. 【請求項３３】 ウィルスがレトロウィルスである請求項３２に記載の方法。
34. 【請求項３４】 レトロウィルスがレンチウィルスである請求項３３に記載の
    方法。
35. 【請求項３５】 レンチウィルスがレンチウィルスである請求項３４に記載の
    方法。
36. 【請求項３６】 免疫不全ウィルスが、ヒト免疫不全ウィルスＨＩＶ１型、Ｈ
    ＩＶ２型およびシミアン免疫不全ウィルス（ＳＩＶ）からなる群から選択される
    請求項３５に記載の方法。
37. 【請求項３７】 接触が生体内での接触である請求項３１に記載の方法。
38. 【請求項３８】 接触が生体外での接触である請求項３１に記載の方法。
39. 【請求項３９】 接触が半ビボでの接触である請求項３１に記載の方法。
40. 【請求項４０】 組織が哺乳類の組織である請求項３１に記載の方法。
41. 【請求項４１】 哺乳類の組織がヒトの組織である請求項４０に記載の方法。
42. 【請求項４２】 粘膜組織が膣の組織、胃腸の組織、鼻の組織または下部消化
    管の組織である請求項３１に記載の方法。
43. 【請求項４３】 接触が、抗ウィルス薬を、投与する前、投与するのと同時に
    または投与した後に、抗炎症薬を局部または全身に投与することによる接触であ
    る請求項３１に記載の方法。
44. 【請求項４４】 投与が、局所投与によって局部に接触させる投与である請求
    項４３に記載の方法。
45. 【請求項４５】 全身への投与が、静脈内、経口または非経口の投与による投
    与である請求項４３に記載の方法。
46. 【請求項４６】 抗ウィルス薬が、ウィルスの融合もしくは細胞への侵入；ウ
    ィルスの逆転写もしくは核酸の複製；ウィルスの細胞ＤＮＡへの組込み；ウィル
    スの細胞からの出芽もしくは遊離；感染性ウィルスの産生；または、ウィルスの
    融合もしくは感染、逆転写もしくは核酸の複製、ウィルスの細胞ＤＮＡへの組込
    み、ウィルスの細胞からの出芽もしくは遊離または感染性ウィルスの産生と関連
    がある酵素を阻害する請求項３１に記載の方法。
47. 【請求項４７】 抗ウィルス薬がポリペプチドまたは機能性擬似体である請求
    項３１に記載の方法。
48. 【請求項４８】 ポリペプチドまたは機能性擬似体がウィルスまたは細胞表面
    受容体に結合する請求項４７に記載の方法。
49. 【請求項４９】 ポリペプチドが、リガンド、ウィルス受容体、抗体または抗
    体のフラグメントである請求項４７に記載の方法。
50. 【請求項５０】 酵素が、プロテアーゼ、逆転写酵素またはインテグラーゼで
    ある請求項４６に記載の方法。
51. 【請求項５１】 抗ウィルス薬が、プロテアーゼ阻害剤、ヌクレオシド逆転写
    酵素阻害剤、非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤、インテグラーゼ阻害剤およびこ
    れらの混合物からなる群から選択される請求項３１に記載の方法。
52. 【請求項５２】 ヌクレオシド阻害剤が、ジドブジン（Ａ２Ｔ）、スタブジン
    （ｄ４Ｔ）、ラルニブジン（３ＴＣ）、ジダノシン（ＤＤＩ）、ザルシタビン（
    ｄｄＣ）、アバカビルおよびこれらの混合物である請求項５１に記載の方法。
53. 【請求項５３】 非ヌクレオシド阻害剤がネビラピン、デラビルジンまたはエ
    ファビレンツである請求項５１に記載の方法。
54. 【請求項５４】 抗ウィルス薬が、プロテアーゼ阻害剤、逆転写酵素阻害剤ま
    たはインテグラーゼ阻害剤である請求項３１に記載の方法。
55. 【請求項５５】 プロテアーゼ阻害剤が、サクイナビル、リトナビル、インジ
    ナビル、ネルフィナビル、またはアンプレナビルである請求項５４に記載の方法
    。
56. 【請求項５６】 抗炎症薬が、炎症細胞の補充を減らし、ケモカイン類の産生
    を減らし、親炎症性サイトカイン類の産生を減らし、またはケモカイン受容体と
    そのリガンドの相互作用を阻害する請求項３１に記載の方法。
57. 【請求項５７】 抗炎症薬が、抗炎症抗体、抗炎症ペプチド、抗炎症サイトカ
    イン、抗炎症ケモカイン、抗炎症核酸、ステロイド、非ステロイドの抗炎症薬、
    ５−ＡＳＡ製品類およびこれらの組合せからなる群から選択される請求項３１に
    記載の方法。
58. 【請求項５８】 抗炎症抗体が、抗サイトカイン抗体、抗サイトカイン受容体
    抗体、抗ケモカイン抗体、抗ケモカイン受容体抗体、抗親和性ペプチド抗体およ
    びこれらの組合せからなる群から選択される請求項５７に記載の方法。
59. 【請求項５９】 抗炎症ペプチドが、ＬＦＡ−１アンタゴニスト、サイトカイ
    ン受容体アンタゴニスト、転写因子および可溶性ＴＮＦ−α受容体からなる群か
    ら選択される請求項５７に記載の方法。
60. 【請求項６０】 抗炎症サイトカインが、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３
    、ＩＬ−１６およびこれらの組合せからなる群から選択される請求項５７に記載
    の方法。
61. 【請求項６１】 抗炎症核酸が、リボサイム、抗炎症ペプチドをコードする核
    酸、アンチセンス核酸およびこれらの組合せからなる群から選択される請求項５
    ７に記載の方法。
62. 【請求項６２】 アンチセンス核酸が、サイトカイン受容体、炎症性サイトカ
    イン、ケモカイン受容体またはケモカインをコードする核酸とハイブリッドを形
    成する請求項６１に記載の方法。
63. 【請求項６３】 ステロイドがグルココルチコイドである請求項５７に記載の
    方法。
64. 【請求項６４】 ステロイドがフルニソリド、トリアムシノリン、トリアムシ
    ノリンアセトニド、ベクロメタゾンジプロプリオネート、ベタメタゾンジプロプ
    リオネート、ヒドロコルチゾン、コルチゾン、デキサメタゾン、ブデゾニド、プ
    レドニゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロンおよびこれらの組合せから
    なる群から選択される請求項５７に記載の方法。
65. 【請求項６５】 非ステロイドの抗炎症薬が、サリチル酸、チオサリチル酸ナ
    トリウム、サリチル酸コリン、サリチル酸マグネシウム、ジフルニサル、イブプ
    ロフェン、ナプロキセン、スリンダク、ジフルニサル、サリチルサリチル酸、コ
    リンマグネシウムトリサリチレート、アセチルサリチル酸、サルサラート、サリ
    チル酸ナトリウムおよびこれらの組合せからなる群から選択される請求項５７に
    記載の方法。
66. 【請求項６６】 非ステロイドの抗炎症薬が、フルルビプロフェン、フェノプ
    ロフェン、ナブルネトン、ケトプロフェン、ピロキシカム、インドメタシン、ト
    ルメチン、メクロファナム酸ナトリウム、メフェナム酸、エトドラク、ケトロラ
    ク、トロメタミン、ジクロフェナク、オキサプロジン、ブロムフェナクナトリウ
    ム、ロフェコキシブ、スプロフェン、フェンブプロフェン、フルプロフェン、サ
    リドマイド、メマツヨイグサ油、これらの単一異性体およびこれらの組合せから
    なる群から選択される請求項５７に記載の方法。
67. 【請求項６７】 ５−ＡＳＡ製品が、メサラミン、バルサラジド、イプサラジ
    ド、オルサラジン、スルファサラジンおよびこれらの混合物からなる群から選択
    される請求項５７に記載の方法。
68. 【請求項６８】 炎症が仲介する粘膜感染症にかかる危険性がある被検者を、
    有効量の抗炎症薬と抗ウィルス薬とを接触させることを含んでなる、前記被検者
    が炎症の仲介する粘膜感染症にかかる確率を減らす方法。
69. 【請求項６９】 炎症が仲介する粘膜感染症がウィルスによって起こる請求項
    ６８に記載の方法。
70. 【請求項７０】 ウィルスがレトロウィルスである請求項６９に記載の方法。
71. 【請求項７１】 レトロウィルスがレンチウィルスである請求項７０に記載の
    方法。
72. 【請求項７２】 レンチウィルスが免疫不全ウィルスである請求項７１に記載
    の方法。
73. 【請求項７３】 免疫不全ウィルスが、ヒト免疫不全ウィルスＨＩＶ１型、Ｈ
    ＩＶ２型およびシミアン免疫不全ウィルス（ＳＩＶ）からなる群から選択される
    請求項７０に記載の方法。
74. 【請求項７４】 接触が生体内での接触である請求項６８に記載の方法。
75. 【請求項７５】 生体内での接触が、抗ウィルス薬を、投与する前、投与する
    のと同時にまたは投与した後に、抗炎症薬を局部または全身に投与することによ
    る接触である請求項６８に記載の方法。
76. 【請求項７６】 投与が、局所投与によって局部に接触させる投与である請求
    項７５に記載の方法。
77. 【請求項７７】 全身への接触が、静脈内、経口または非経口の投与による接
    触である請求項７５に記載の方法。
78. 【請求項７８】 被検者が哺乳類である請求項６８に記載の方法。
79. 【請求項７９】 哺乳類がヒトである請求項７８に記載の方法。
80. 【請求項８０】 抗ウィルス薬が、ウィルスの融合もしくは細胞への侵入；ウ
    ィルスの逆転写もしくは核酸の複製；ウィルスの細胞ＤＮＡへの組込み；ウィル
    スの細胞からの出芽もしくは遊離；感染性ウィルスの産生；またはウィルスの融
    合もしくは感染、逆転写もしくは核酸の複製、ウィルスの細胞ＤＮＡへの組込み
    、ウィルスの細胞からの出芽もしくは遊離または感染性ウィルスの産生と関連が
    ある酵素を阻害する請求項６８に記載の方法。
81. 【請求項８１】 抗ウィルス薬がポリペプチドまたは機能性擬似体である請求
    項６８に記載の方法。
82. 【請求項８２】 ポリペプチドまたは機能性擬似体がウィルスまたは細胞表面
    受容体に結合する請求項８１に記載の方法。
83. 【請求項８３】 ポリペプチドが、リガンド、ウィルス受容体、抗体または抗
    体のフラグメントである請求項８１に記載の方法。
84. 【請求項８４】 酵素がプロテアーゼ、逆転写酵素またはインテグラーゼであ
    る請求項８０に記載の方法。
85. 【請求項８５】 抗ウィルス薬が、プロテアーゼ阻害剤、ヌクレオシド逆転写
    酵素阻害剤、非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤、インテグラーゼ阻害剤およびこ
    れらの混合物からなる群から選択される請求項６８に記載の方法。
86. 【請求項８６】 ヌクレオシド阻害剤が、ジドブジン（ＡＺＴ）、スタブジン
    （ｄ４Ｔ）、ラルニブシン（３ＴＣ）、ジダノシン（ＤＤＩ）、ザルシタビン（
    ｄｄＣ）、アバカビルおよびこれらの混合物である請求項８５に記載の方法。
87. 【請求項８７】 非ヌクレオシド阻害剤がネビラビン、デラビルジン、または
    エファビレンツである請求項８５に記載の方法。
88. 【請求項８８】 抗ウィルス薬が、プロテアーゼ阻害剤、逆転写酵素阻害剤ま
    たはインテクグラーゼ阻害剤である請求項６８に記載の方法。
89. 【請求項８９】 プロテアーゼ阻害剤がサクイナビル、リトナビル、インジナ
    ビル、ネルフィナビルまたはアンプレナビルである請求項８８に記載の方法。
90. 【請求項９０】 抗炎症薬が、炎症細胞の補充を減らし、ケモカイン類の産生
    を減らし、親炎症性サイトカイン類の産生を減らし、またはケモカイン受容体と
    そのリガンドの相互作用を阻害する請求項６８に記載の方法。
91. 【請求項９１】 抗炎症薬が、抗炎症抗体、抗炎症ペプチド、抗炎症サイトカ
    イン、抗炎症ケモカイン、抗炎症核酸、ステロイド、非ステロイドの抗炎症薬、
    ５−ＡＳＡ製品およびこれらの組合せからなる群から選択される請求項６８に記
    載の方法。
92. 【請求項９２】 抗炎症抗体が、抗サイトカイン抗体、抗サイトカイン受容体
    抗体、抗ケモカイン抗体、抗ケモカイン受容体抗体、抗親炎症性ペプチド抗体お
    よびこれらの組合せからなる群から選択される請求項９１に記載の方法。
93. 【請求項９３】 抗炎症ペプチドが、ＬＦＡ−１アンタゴニスト、サイトカイ
    ン受容体アンタゴニスト、転写因子および可溶性ＴＮＦ−α受容体からなる群か
    ら選択される請求項９１に記載の方法。
94. 【請求項９４】 抗炎症サイトカインが、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３
    、ＩＬ−１６およびこれらの組合せからなる群から選択される請求項９１に記載
    の方法。
95. 【請求項９５】 抗炎症核酸が、リボザイム、抗炎症ペプチドをコードする核
    酸、アンチセンス核酸およびこれらの組合せからなる群から選択される請求項９
    １に記載の方法。
96. 【請求項９６】 アンチセンス核酸が、サイトカイン受容体、炎症サイトカイ
    ン、ケモカインまたはケモカイン受容体をコードする核酸とハイブリッドを形成
    する請求項９５に記載の方法。
97. 【請求項９７】 ステロイドが、フルニソリド、トリアムシノリン、トリアム
    シノリンアセトニド、ベクロメタゾンジプロプリオネート、ベタメタゾンジプロ
    プリオネート、ヒドロコルチゾン、コルチゾン、デキサメタゾン、ブデソニド、
    プレドニゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、およびこれらの組合せ
    からなる群から選択される請求項９１に記載の方法。
98. 【請求項９８】 非ステロイドの抗炎症薬が、サリチル酸、チオサリチル酸ナ
    トリウム、サリチル酸コリン、サリチル酸マグネシウム、ジフルニサル、イブプ
    ロフェン、ナプロキセン、スリンダク、ジフルニサル、サリチルサリチル酸、コ
    リンマグネシウムトリサリチレート、アセチルサリチル酸、サルサラート、サリ
    チル酸ナトリウムおよびこれらの組合せからなる群から選択される請求項９１に
    記載の方法。
99. 【請求項９９】 非ステロイドの抗炎症薬が、フルルビプロフェン、フェノプ
    ロフェン、ナブルネトン、ケトプロフェン、ピロキシカム、インドメタシン、ト
    ルメチン、メクロファナム酸ナトリウム、メフェナム酸、エトドラク、ケトロラ
    ク、トロメタミン、ジクロフェナク、オキサプロジン、ブロムフェナクナトリウ
    ム、ロフェコキシブ、スプロフェン、フェンブプロフェン、フルプロフェン、サ
    リドマイド、メマツヨイグサ油、これらの単一異性体およびこれらの組合せから
    なる群から選択される請求項９１に記載の方法。
100. 【請求項１００】 ５−ＡＳＡ製品が、メサラミン、バルサラジド、イプサラ
     ジド、オルサラジン、スルファサラジンおよびこれらの混合物からなる群から選
     択される請求項９１に記載の方法。
101. 【請求項１０１】 レトロウィルスに感染した細胞を、活性化を阻害する量の
     抗炎症薬と接触させることを含んでなり、その抗炎症薬が５−ＡＳＡまたはＡＳ
     Ａと異なる、レトロウィルスの活性化を阻害する方法。
102. 【請求項１０２】 抗炎症薬が、抗炎症体、抗炎症ペプチド、抗炎症サイトカ
     イン、抗炎症ケモカイン、抗炎症核酸、ステロイド、非ステロイド抗炎症薬およ
     びこれらの組合せからなる群から選択される請求項１０１に記載の方法。
103. 【請求項１０３】 粘膜組織を、阻害有効量の抗炎症薬と接触させることを含
     んでなり、その抗炎症薬が５−ＡＳＡまたはＡＳＡと異なる、炎症が仲介する粘
     膜組織の感染症を阻害する方法。
104. 【請求項１０４】 抗炎症薬が、抗炎症抗体、抗炎症ペプチド、抗炎症サイト
     カイン、抗炎症ケモカイン、抗炎症核酸、ステロイド、非ステロイドの抗炎症薬
     およびこれらの組合せからなる群から選択される請求項１０３に記載の方法。
105. 【請求項１０５】 炎症が仲介する粘膜感染症にかかっているかまたはかかる
     危険性がある被検者を、有効量の抗炎症薬と接触させることを含んでなり、その
     抗炎症薬が５−ＡＳＡまたはＡＳＡと異なる、前記被検者の炎症が仲介する粘膜
     感染症を阻害する方法。
106. 【請求項１０６】 抗炎症薬が、抗炎症抗体、抗炎症ペプチド、抗炎症サイト
     カイン、抗炎症ケモカイン、抗炎症核酸、ステロイド、非ステロイドの抗炎症薬
     およびこれらの組合せからなる群から選択される請求項１０５に記載の方法。
107. 【請求項１０７】 ＨＩＶウィルス感染症にかかっている被検者に、ＨＩＶウ
     ィルスの増大を阻害する抗炎症薬の治療上有効な量を投与することを含んでなる
     、ヒト免疫不全ウィルスを有する被検者のＨＩＶ関連障害が進行するのを阻害す
     る方法。
108. 【請求項１０８】 抗炎症薬が、ＡＳＡまたは５−ＡＳＡと異なる請求項１０
     ７に記載の方法。
109. 【請求項１０９】抗ウィルス薬を投与することをさらに含んでなる請求項１０
     ７に記載の方法。
110. 【請求項１１０】 ＨＩＶ感染症にかかる危険性があるまたはかかる危険性が
     ある被検者に、被検者がＨＩＶ感染症にかかるのを阻害するかまたはかかる確率
     を減らす抗炎症薬の予防に有効な量を投与することを含んでなる前記被検者が感
     染症にかかるのを防止するかまたはかかる確率を減らす方法。
111. 【請求項１１１】 抗炎症薬がＡＳＡまたは５−ＡＳＡと異なる請求項１１０
     に記載の方法。
112. 【請求項１１２】 抗炎症薬を投与する前、投与するのと同時に、または投与
     した後に、抗ウィルス薬を投与することをさらに含んでなる請求項１１０に記載
     の方法。
113. 【請求項１１３】 抗炎症薬を局所に投与する請求項１０７または１１０に記
     載の方法。
114. 【請求項１１４】 抗炎症薬を全身に投与する請求項１０７または１１０に記
     載の方法。
115. 【請求項１１５】 治療上有効量の抗炎症薬の少なくとも一回の投与量を、医
     薬として許容できる担体中に含有する医薬組成物であって、前記投与量が、免疫
     不全ウィルス感染症を阻害するかまたは免疫不全ウィルス感染症にかかる確率を
     減らす組成物。
116. 【請求項１１６】 抗ウィルス薬をさらに含有している請求項１１５に記載の
     医薬組成物。
117. 【請求項１１７】 医薬として許容できるゲル剤、クリーム剤、泡洗剤または
     坐剤をさらに含む請求項１１５に記載の医薬組成物。
118. 【請求項１１８】 少なくとも一種の抗炎症薬、および免疫不全ウィルス感染
     症を治療し、予防しまたはこの感染症にかかる確率を減らす際の前記抗炎症薬の
     使用説明書を含んでいる製品。
119. 【請求項１１９】 抗ウィルス薬をさらに含んでいる請求項１１８に記載の製
     品。
120. 【請求項１２０】 製品が、コンドーム、避妊用スポンジ、ペッサリー（diap
     hragm）、子宮頚キャップ、膣リング、坐剤および浣腸からなる群から選択され
     る請求項１１８に記載の製品。
121. 【請求項１２１】 ウィルスに感染した組織を、活性化を阻害するのに有効な
     量の抗炎症薬と接触させることを含んでなる、前記組織内のレトロウィルスの活
     性化を阻害する方法。
122. 【請求項１２２】 抗炎症薬がＡＳＡまたは５−ＡＳＡと異なる請求項１２１
     に記載の方法。
123. 【請求項１２３】 抗炎症薬を投与する前、投与するのと同時にまたは投与し
     た後、組織を抗ウィルス薬と接触させることをさらに含んでなる請求項１２１に
     記載の方法。
124. 【請求項１２４】 ウィルスに感染した被検者を、活性化を阻害する量の抗炎
     症薬と接触させることを含んでなる、前記被検者のレトロウィルスの活性化を阻
     害する方法。
125. 【請求項１２５】 抗炎症薬がＡＳＡまたは５−ＡＳＡと異なる請求項１２４
     に記載の方法。
126. 【請求項１２６】 抗炎症薬を投与する前、投与するのと同時にまたは投与し
     た後、被検者を抗ウィルス薬と接触させることをさらに含んでなる請求項１２４
     に記載の方法。
127. 【請求項１２７】 少なくとも一種の抗炎症薬、および免疫不全ウィルス感染
     症を予防する際の前記抗炎症薬の使用説明書を含んでいる製品。
128. 【請求項１２８】 抗ウィルス薬をさらに含んでいる請求項１２７に記載の製
     品。
129. 【請求項１２９】 製品が、コンドーム、避妊用スポンジ、ペッサリー（diap
     hragm）、子宮頚キャップ、膣リング、坐剤および浣腸からなる群から選択され
     る請求項１２７に記載の製品。