JP2002541478A - レセプター‐リガンド及びアフィニティテストにおいて使用するための装置及び方法 - Google Patents
レセプター‐リガンド及びアフィニティテストにおいて使用するための装置及び方法Info
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Abstract
(57)【要約】
本発明は、レセプター‐リガンド及びアフィニティテストの実施において用いられる装置で、医学的診断、環境分析及び食料分析で利用できる蛍光又は酵素イムノアッセイに関する。本発明を用いると、種々のサンプルを容易に労力を要さずに分析できる。これを達成するために、光に対して少なくとも部分的に透明な材料から成る中空プランジャと中空シリンダーが用いられる。中空シリンダー内には一時的に封鎖可能な開口部が位置し、中空プランジャと中空シリンダーの対応する相対的動作でサンプルを中空シリンダー内に収容できる。中空プランジャの端面には中空プランジャの内側を気密性で液洩れしないディスクで封鎖された多孔性分離層を有する。このシーリングディスクは中空プランジャ内での移行動作が可能となるように形成されていて、中空プランジャとシーリングディスクの対応する相対動作の際に、調製されたサンプルが中空シリンダーから多孔性分離層とシーリングディスクの間の空間に到達する。続いてサンプルの例えば蛍光イムノアッセイ又は酵素イムノアッセイが行われる。
Description
【０００１】 本発明は、レセプター‐リカンドおよびアフィニティテスト（例えば、蛍光また
は酵素イムノアッセイ）を行うのに利用され得る方法と装置に関するもので、医
学的診断、環境および食品分析などに利用可能なものである。
は酵素イムノアッセイ）を行うのに利用され得る方法と装置に関するもので、医
学的診断、環境および食品分析などに利用可能なものである。
【０００２】 特に、従来このようなテストは、環境的な分析および食品分析において、いわゆ
るスクリーニング方法のために単に用いられてきたが、この際、個々のサンプル
に関して実際的な表明を行えなえず、はじめから分析の努力は付随的に低下せざ
るを得なかった。これまで、このようなテストにより得られた表明はいまだ公式
に認められていないし、従ってこれらが明白な証拠として採用され得ていない現
実がある。
るスクリーニング方法のために単に用いられてきたが、この際、個々のサンプル
に関して実際的な表明を行えなえず、はじめから分析の努力は付随的に低下せざ
るを得なかった。これまで、このようなテストにより得られた表明はいまだ公式
に認められていないし、従ってこれらが明白な証拠として採用され得ていない現
実がある。
【０００３】 このような定量的または半定量的なテストのための既知の方法をそれぞれ用いて
、いわゆる固相イムノアッセイは実行されている。上記のテスト、すなわちいわ
ゆるＣＡＰＥ社のダイオキシンアッセイでは、分析物に特異的な抗体を試験管の
壁に固定している。いわゆるコーニングシステムズ社のＢＴＥＸラピッドアッセ
イでは、抗体を磁性粒子に固定している。しかし、どちらの場合も、洗浄とピペ
ット操作のステップに時間を要するという欠点を有する一方で、これらの方法を
実際のテスト部位や地点で通例的に直接すぐ行うこともできずに、実験室におい
て比較的多大な骨折りを要しながら実行する必要があるという欠点も有する。
、いわゆる固相イムノアッセイは実行されている。上記のテスト、すなわちいわ
ゆるＣＡＰＥ社のダイオキシンアッセイでは、分析物に特異的な抗体を試験管の
壁に固定している。いわゆるコーニングシステムズ社のＢＴＥＸラピッドアッセ
イでは、抗体を磁性粒子に固定している。しかし、どちらの場合も、洗浄とピペ
ット操作のステップに時間を要するという欠点を有する一方で、これらの方法を
実際のテスト部位や地点で通例的に直接すぐ行うこともできずに、実験室におい
て比較的多大な骨折りを要しながら実行する必要があるという欠点も有する。
【０００４】 しかしながら、この局面は環境的な分析を行うにあたってまさに重要である。な
ぜなら、採取された複数のサンプル中の分析物は、軽作業で単純な機器操作でか
つエラーの少なさのもとで、かなり単純な方法で短時間でテストされる必要があ
るからである。
ぜなら、採取された複数のサンプル中の分析物は、軽作業で単純な機器操作でか
つエラーの少なさのもとで、かなり単純な方法で短時間でテストされる必要があ
るからである。
【０００５】 従って、本発明の課題は、非常に容易な方法かつ短時間の労力をかけるだけで、
異なるサンプルの調製と分析が行える方法を提案することにある。
異なるサンプルの調製と分析が行える方法を提案することにある。
【０００６】 この課題は、本発明の請求項１に示した特徴に基づいて解決することができる。
本発明のより好ましい態様および改善態様は、従属する請求項の中に含有する特
徴から生じるものである。
本発明のより好ましい態様および改善態様は、従属する請求項の中に含有する特
徴から生じるものである。
【０００７】 ここにおいて、蛍光イムノアッセイ又は酵素イムノアッセイの実施の際に採用さ
れ使用され得る本発明の装置は、本質的に３つの構成要素を含有する。このため
に、中空のプランジャが用いられ、中空のシリンダー内に誘導され、この中空シ
リンダーにはサンプルの取り込みのための開口部が備わるものであり、本発明に
よる装置は本質的に一般的なシリンジとして形成されている。中空プランジャの
内部には、種々の液体を密封可能なシーリングディスクが中空シリンダー内部に
対面する端面に備わり、このシーリングディスクは中空プランジャ内での移動動
作が可能となるように配置、案内されている。中空プランジャの前記の端面は、
分離層として多孔性を有する形態のもので、これを達成するためのものとして、
カラムクロマトグラフィで公知の一般的なフリットを用いてもよいし、また膜を
用いてもよい。
れ使用され得る本発明の装置は、本質的に３つの構成要素を含有する。このため
に、中空のプランジャが用いられ、中空のシリンダー内に誘導され、この中空シ
リンダーにはサンプルの取り込みのための開口部が備わるものであり、本発明に
よる装置は本質的に一般的なシリンジとして形成されている。中空プランジャの
内部には、種々の液体を密封可能なシーリングディスクが中空シリンダー内部に
対面する端面に備わり、このシーリングディスクは中空プランジャ内での移動動
作が可能となるように配置、案内されている。中空プランジャの前記の端面は、
分離層として多孔性を有する形態のもので、これを達成するためのものとして、
カラムクロマトグラフィで公知の一般的なフリットを用いてもよいし、また膜を
用いてもよい。
【０００８】 中空シリンダーの内壁と中空プランジャとの間に形成される、中空シリンダー内
の空間には、粒子が存在することができる。ここでは、多孔性分離層を通過でき
ない粒子サイズの粒子が選択される。
の空間には、粒子が存在することができる。ここでは、多孔性分離層を通過でき
ない粒子サイズの粒子が選択される。
【０００９】 中空シリンダーの端面として用いられるこの多孔性分離層、および開口部の入口
に備えられ得てサンプルを中空シリンダー内に通す別の多孔性分離層は、それぞ
れ有利な効果を導くように選択される。例えば、全血液サンプルの細胞成分に分
離の圧力をかけることができるし、このようにして得られた血漿を、追加的な調
製ステップなしでサンプルとして使用することができる。
に備えられ得てサンプルを中空シリンダー内に通す別の多孔性分離層は、それぞ
れ有利な効果を導くように選択される。例えば、全血液サンプルの細胞成分に分
離の圧力をかけることができるし、このようにして得られた血漿を、追加的な調
製ステップなしでサンプルとして使用することができる。
【００１０】 サンプリングおよびサンプル調製の間に、中空シリンダーに形成された前記開口
部が一時的に閉鎖可能であることが重要であり、このために開口部にスムーズに
付けられ開口部に対応して形成されたプラグが、必要に応じて挿入して密封でき
るようになっている。ここで別の形態として、逆止めバルブを用いて開口部の内
部や開口部上にそれぞれ備えることも可能である。
部が一時的に閉鎖可能であることが重要であり、このために開口部にスムーズに
付けられ開口部に対応して形成されたプラグが、必要に応じて挿入して密封でき
るようになっている。ここで別の形態として、逆止めバルブを用いて開口部の内
部や開口部上にそれぞれ備えることも可能である。
【００１１】 テストを実際に行うための準備としてのサンプリングは、中空シリンダーと中空
プランジャとの間の相対的動作によって、中空シリンダーの開口部を用いて行わ
れ、サンプルはこの開口部を通って粒子の存在可能な前記の空間に収容される。
この中空プランジャと中空シリンダーの対応する相対的動作は、この２つの部分
のうちの一方の部分を固定し、これに対するもう一方の部分を対応して動作させ
たり、両方の部分を動作させることによって実現できる。このとき、適当なエン
ドストッパーが、中空プランジャ及び／又は中空シリンダー、或いは相対的動作
を生じる操作ユニット（相当するロボット）に備わり、常に一定量のサンプルを
本発明の装置内に収容できるものが特に好ましい。
プランジャとの間の相対的動作によって、中空シリンダーの開口部を用いて行わ
れ、サンプルはこの開口部を通って粒子の存在可能な前記の空間に収容される。
この中空プランジャと中空シリンダーの対応する相対的動作は、この２つの部分
のうちの一方の部分を固定し、これに対するもう一方の部分を対応して動作させ
たり、両方の部分を動作させることによって実現できる。このとき、適当なエン
ドストッパーが、中空プランジャ及び／又は中空シリンダー、或いは相対的動作
を生じる操作ユニット（相当するロボット）に備わり、常に一定量のサンプルを
本発明の装置内に収容できるものが特に好ましい。
【００１２】 蛍光イムノアッセイを行うために、例えば抗原および抗体が粒子の位置する空間
に存在し、この際、対応する抗原および抗体のいずれかはおのおの適当な蛍光体
（フルオロフォア）または酵素により標識されている。
に存在し、この際、対応する抗原および抗体のいずれかはおのおの適当な蛍光体
（フルオロフォア）または酵素により標識されている。
【００１３】 本発明の装置内にサンプルを取り込む前に、抗原または抗体を中空プランジャ内
壁に可逆的に固定化したり、粒子表面上にそれぞれの他のパティシペントを可逆
的に固定化してもよい。ここで、サンプルが本発明の装置内に取り込まれると、
抗原と抗体のそれぞれがこのサンプルによって内壁から開放され、互いに結合す
る。
壁に可逆的に固定化したり、粒子表面上にそれぞれの他のパティシペントを可逆
的に固定化してもよい。ここで、サンプルが本発明の装置内に取り込まれると、
抗原と抗体のそれぞれがこのサンプルによって内壁から開放され、互いに結合す
る。
【００１４】 しかしながら、標識されない又は標識された生体成分の結合は、中空プランジャ
の端面に設けられた多孔性分離層上で行われてもよいし、ここで、結合が中空シ
リンダーの内壁、多孔性分離層および粒子の組み合わせで行われることも可能で
ある。更に、１サンプルの少なくとも２つの異なる分析物を用いてテストを実行
できるようにするために、異なるパティシペントがそれぞれ内壁、粒子および分
離層おのおのに結合するようにしてもよい。
の端面に設けられた多孔性分離層上で行われてもよいし、ここで、結合が中空シ
リンダーの内壁、多孔性分離層および粒子の組み合わせで行われることも可能で
ある。更に、１サンプルの少なくとも２つの異なる分析物を用いてテストを実行
できるようにするために、異なるパティシペントがそれぞれ内壁、粒子および分
離層おのおのに結合するようにしてもよい。
【００１５】 これに続き、中空シリンダーの開口部を封鎖した状態で、中空プランジャと中空
シリンダーの対向する相対的動作が行われ、この際同時に、サンプル量の一定量
が多孔性分離層を通過して中空プランジャ内へと到達する。そして、中空プラン
ジャ内に収容されたサンプル量はシーリングディスクにより密封され、一定量の
サンプルを内包する空間が多孔性分離層とシーリングディスクとの間に形成され
る。
シリンダーの対向する相対的動作が行われ、この際同時に、サンプル量の一定量
が多孔性分離層を通過して中空プランジャ内へと到達する。そして、中空プラン
ジャ内に収容されたサンプル量はシーリングディスクにより密封され、一定量の
サンプルを内包する空間が多孔性分離層とシーリングディスクとの間に形成され
る。
【００１６】 続いて、相応じて調製されたサンプルを含有する本発明の装置は、分析物に特異
的な定量方法において測定され得ることとなる。このために、用いた蛍光体に一
致する蛍光励起波長を少なくとも含む光を、多孔性分離層と中空プランジャ内の
シーリングディスクとの間の空間に用意されたサンプルに照射し、対応する光学
検出器で蛍光強度を測定する。ここでは既知の測定方法で行うことができる。例
えば単色光を発するレーザーが光源として用いることができる。さらにしかし、
適当なフィルタを用い、混合光を使用しても構わない。このようなフィルタを、
少なくとも拡散光の影響を減少させるために光学検出器の前方に配置することも
できる。
的な定量方法において測定され得ることとなる。このために、用いた蛍光体に一
致する蛍光励起波長を少なくとも含む光を、多孔性分離層と中空プランジャ内の
シーリングディスクとの間の空間に用意されたサンプルに照射し、対応する光学
検出器で蛍光強度を測定する。ここでは既知の測定方法で行うことができる。例
えば単色光を発するレーザーが光源として用いることができる。さらにしかし、
適当なフィルタを用い、混合光を使用しても構わない。このようなフィルタを、
少なくとも拡散光の影響を減少させるために光学検出器の前方に配置することも
できる。
【００１７】 光学的測定を、外部光の影響を除去するようにした密封ケース内で行うこともさ
らに好ましい。
らに好ましい。
【００１８】 このとき、中空シリンダーおよび中空プランジャが、使用する光が通過する材料
から全体として作成されてもよい。しかしあるいは、調製したサンプルに照射し
蛍光を検出するための適当な窓を単に設けたものでもよい。
から全体として作成されてもよい。しかしあるいは、調製したサンプルに照射し
蛍光を検出するための適当な窓を単に設けたものでもよい。
【００１９】 本発明を用いることで、種々のレセプター‐リガンド系（例えば、抗体‐抗原、
レクチン炭水化物、ＤＮＡ又はＲＮＡに相補的な核酸、ＤＮＡ又はＲＮＡプロテ
イン、ホルモンレセプター、酵素補因子、プロテインＧ及びプロテインＡ‐イム
ノグロブリン或いはアビジンビオチン）に関する種々の既知のアッセイフォーマ
ット（競合的、タイトレーション、置換およびサンドイッチアッセイなど）を実
施できる。そして、対応する分析物濃度は直接比例法、およびサンドイッチイム
ノアッセイに関して間接比例法に基づき算出される。本発明を用いると、高分子
の分析物を対象とした競合アッセイを行うこともできる。
レクチン炭水化物、ＤＮＡ又はＲＮＡに相補的な核酸、ＤＮＡ又はＲＮＡプロテ
イン、ホルモンレセプター、酵素補因子、プロテインＧ及びプロテインＡ‐イム
ノグロブリン或いはアビジンビオチン）に関する種々の既知のアッセイフォーマ
ット（競合的、タイトレーション、置換およびサンドイッチアッセイなど）を実
施できる。そして、対応する分析物濃度は直接比例法、およびサンドイッチイム
ノアッセイに関して間接比例法に基づき算出される。本発明を用いると、高分子
の分析物を対象とした競合アッセイを行うこともできる。
【００２０】 赤外線領域付近において励起され得る標識用の蛍光体を用いる場合、追加的な調
製ステップおよび調製処理手段なしで、体液を直接検査することが可能となる。
本発明の装置を酵素イムノアッセイのために用いる場合、蛍光体は標識物質とし
て酵素に置き換えられる。この場合、対応する酵素に対する特異的基質（場合に
より、サンプルの馴化のために相応しい緩衝物質）が、中空プランジャ内に収容
されたシーリングディスクの底面側に配置されることが好ましい。
製ステップおよび調製処理手段なしで、体液を直接検査することが可能となる。
本発明の装置を酵素イムノアッセイのために用いる場合、蛍光体は標識物質とし
て酵素に置き換えられる。この場合、対応する酵素に対する特異的基質（場合に
より、サンプルの馴化のために相応しい緩衝物質）が、中空プランジャ内に収容
されたシーリングディスクの底面側に配置されることが好ましい。
【００２１】 対応するサンプルが、蛍光イムノアッセイの実施で既に説明したように本発明に
従ってサンプルの中に取り込まれ、その後続いて多孔性分離層を通り、中空プラ
ンジャ内の多孔性分離層とシーリングディスクとの間の空間内にサンプルが部分
的に導かれると、時間をとらずに比色分析を実施することが可能となる。一方で
、色変化に対応して発生する典型的な波長の強度を時間分解的に測定することが
可能となる。
従ってサンプルの中に取り込まれ、その後続いて多孔性分離層を通り、中空プラ
ンジャ内の多孔性分離層とシーリングディスクとの間の空間内にサンプルが部分
的に導かれると、時間をとらずに比色分析を実施することが可能となる。一方で
、色変化に対応して発生する典型的な波長の強度を時間分解的に測定することが
可能となる。
【００２２】 本発明の装置を用いると、蛍光及び酵素イムノアッセイとして、種々のレセプタ
ー‐リガンド又はアフィニティテストをもそれぞれ行うことが可能となる。ここ
でも、一定量のサンプルは中空シリンダーと中空プランジャの間の相対的動作に
より、開口部を通ってこの相対的動作に対応して増加する中空シリンダー内の空
間に吸い上げられる。そして、サンプルの濃度に基づき、サンプルに含まれる分
析物の少なくとも１つが、レセプター‐リガンド系の各蛍光体及び酵素で標識さ
れたパティシペントを置換し得る。蛍光体及び酵素で標識されたこのパティシペ
ントはそれぞれ粒子及び／又は多孔性分離層に結合可能であり、このとき、共有
結合の他に吸着的又は親和的結合においてでも結合できる。
ー‐リガンド又はアフィニティテストをもそれぞれ行うことが可能となる。ここ
でも、一定量のサンプルは中空シリンダーと中空プランジャの間の相対的動作に
より、開口部を通ってこの相対的動作に対応して増加する中空シリンダー内の空
間に吸い上げられる。そして、サンプルの濃度に基づき、サンプルに含まれる分
析物の少なくとも１つが、レセプター‐リガンド系の各蛍光体及び酵素で標識さ
れたパティシペントを置換し得る。蛍光体及び酵素で標識されたこのパティシペ
ントはそれぞれ粒子及び／又は多孔性分離層に結合可能であり、このとき、共有
結合の他に吸着的又は親和的結合においてでも結合できる。
【００２３】 中空シリンダーの開口部が封鎖された後、中空シリンダーと中空プランジャとの
間の対向する相対的動作により、前述のように調製されたサンプルはここでも、
多孔性分離層を通過し、前記動作に従って拡大する中空シリンダー内の多孔性分
離層とシーリングディスクとの間の空間へと導かれ、その後蛍光及び比色的分析
による、対応する測定がそれぞれ実行され得る。
間の対向する相対的動作により、前述のように調製されたサンプルはここでも、
多孔性分離層を通過し、前記動作に従って拡大する中空シリンダー内の多孔性分
離層とシーリングディスクとの間の空間へと導かれ、その後蛍光及び比色的分析
による、対応する測定がそれぞれ実行され得る。
【００２４】 さらに、本発明の装置は、２つのチャンバーを含有する中空シリンダーを使用す
るようにして具現化することもできる。ここでは、各チャンバーに対応して設け
られた中空プランジャが挿入されていて、それぞれが前記中空シリンダーの各チ
ャンバーに対応して互いに独立して動作できるものが好ましい。この結果、少な
くとも１種の特定の分析物を、前記の中空シリンダーの各チャンバー内で分析で
きることとなる。
るようにして具現化することもできる。ここでは、各チャンバーに対応して設け
られた中空プランジャが挿入されていて、それぞれが前記中空シリンダーの各チ
ャンバーに対応して互いに独立して動作できるものが好ましい。この結果、少な
くとも１種の特定の分析物を、前記の中空シリンダーの各チャンバー内で分析で
きることとなる。
【００２５】 このような形態、ならびに単純構造の中空シリンダーと中空プランジャを含むも
ののどちらにおいても、多数の分析物を分析できるようにするために、複数の蛍
光体および酵素による標識がそれぞれ行われてもよい。複数の異なる蛍光体を用
いる際には、その発光および励起波長が互いに影響し合わないものを採用する必
要がある。 実施例による本発明の説明を以下に詳述する。
ののどちらにおいても、多数の分析物を分析できるようにするために、複数の蛍
光体および酵素による標識がそれぞれ行われてもよい。複数の異なる蛍光体を用
いる際には、その発光および励起波長が互いに影響し合わないものを採用する必
要がある。 実施例による本発明の説明を以下に詳述する。
【００２６】 図１において、本発明による装置の可能な態様が概略的に図示されている。この
図から、中空プランジャ２が中空シリンダー３内に案内される様子が示され、こ
の際、中空プランジャの外壁と中空シリンダーの内壁との間の隙間は、一方では
主に中身もれのエラーを排除するために、他方ではある程度の密封性を確保する
ために、比較的狭く設定されている。
図から、中空プランジャ２が中空シリンダー３内に案内される様子が示され、こ
の際、中空プランジャの外壁と中空シリンダーの内壁との間の隙間は、一方では
主に中身もれのエラーを排除するために、他方ではある程度の密封性を確保する
ために、比較的狭く設定されている。
【００２７】 中空シリンダー３の外側の端面には開口部８が設けられ、以下に説明するように
ここを通って装置内にサンプルが到達できることとなる。
ここを通って装置内にサンプルが到達できることとなる。
【００２８】 ここでは、中空プランジャ２は、中空シリンダー３の内側に向き合って位置する
この端面が、多孔性分離層５として形成されるように設計されている。この多孔
性分離層５は、プラスチック、プラスチックの混合物、ガラス、セラミック又は
金属から構成され得る。
この端面が、多孔性分離層５として形成されるように設計されている。この多孔
性分離層５は、プラスチック、プラスチックの混合物、ガラス、セラミック又は
金属から構成され得る。
【００２９】 サンプリングや測定を実施する前の状態では、中空プランジャ２内の多孔性分離
層５の上部に、多孔性分離層５の真上で支持されているシーリングディスク４が
備わる。このシーリングディスク４は液体に耐性を有する気密性の材料から構成
される。そして中空プランジャ２内部の長軸方向に沿った移行動作により移動可
能となるような大きさに形造られている。
層５の上部に、多孔性分離層５の真上で支持されているシーリングディスク４が
備わる。このシーリングディスク４は液体に耐性を有する気密性の材料から構成
される。そして中空プランジャ２内部の長軸方向に沿った移行動作により移動可
能となるような大きさに形造られている。
【００３０】 中空プランジャ２には、中空プランジャ内に気体を別々に導入し排出可能とする
ための圧力調整用の開口部１が少なくとも１つ存在する。
ための圧力調整用の開口部１が少なくとも１つ存在する。
【００３１】 この態様に関して、中空プランジャ3 内の中空プランジャ２の端面との間の空間
には、多孔性分離層５を通過できない粒子サイズから選択された粒子６が存在す
る。好ましくは、例えば架橋したポリマーなどが粒子の材料として用いられ得る
。
には、多孔性分離層５を通過できない粒子サイズから選択された粒子６が存在す
る。好ましくは、例えば架橋したポリマーなどが粒子の材料として用いられ得る
。
【００３２】 粒子６を中空シリンダー３内に確実に封入するために、フリット、フィルタ又は
膜などの別の多孔性分離層を用いて、前記の開口部８を閉鎖してもよく（図示し
ない形態）、これを通して各サンプルを容易に中空シリンダー３内に収納できる
。
膜などの別の多孔性分離層を用いて、前記の開口部８を閉鎖してもよく（図示し
ない形態）、これを通して各サンプルを容易に中空シリンダー３内に収納できる
。
【００３３】 図２では、多孔性分離層５の領域における中空プランジャ２の外側表面領域に、
周縁状シーリング部材１０が設けられていることを示す。これにより、サンプル
液が中空プランジャ２と中空シリンダー３との間のギャップに入り込むのを防ぎ
、かつシリンダー内にサンプルを吸い上げるのに必要な減圧を発生させ得ること
となる。
周縁状シーリング部材１０が設けられていることを示す。これにより、サンプル
液が中空プランジャ２と中空シリンダー３との間のギャップに入り込むのを防ぎ
、かつシリンダー内にサンプルを吸い上げるのに必要な減圧を発生させ得ること
となる。
【００３４】 加えて、中空プランジャ２のシーリング部材４の上部の空間にサンプル液が到達
するのを防ぐための周縁状のシーリング９を、シーリングディスク４に設けた様
子を図でより詳細に示した。
するのを防ぐための周縁状のシーリング９を、シーリングディスク４に設けた様
子を図でより詳細に示した。
【００３５】 中空プランジャ２の長軸方向に沿った移行動作の間にシーリングディスク４が傾
斜するのを防止する目的で、シーリングディスク４の厚さを、中空プランジャ２
内のフリー断面を考慮して適当に選択してもよい。
斜するのを防止する目的で、シーリングディスク４の厚さを、中空プランジャ２
内のフリー断面を考慮して適当に選択してもよい。
【００３６】 同様の効果を発揮させる目的で、ガイド部材（図示しない）がシーリングディス
ク４の上側に設けられてもよく、この部材同士を中空プランジャ２の内壁に放射
状にシンメトリックに配置し、シーリングディスク４の移行動作を好適に案内す
るようにしてもよい。
ク４の上側に設けられてもよく、この部材同士を中空プランジャ２の内壁に放射
状にシンメトリックに配置し、シーリングディスク４の移行動作を好適に案内す
るようにしてもよい。
【００３７】 図２において、分析物に特異的な抗体が多数の粒子６に結合する状態をさらに詳
細に説明する。図３ａに概略的に示すように、対応する抗原７は、詳述しない形
態で中空シリンダー３の内壁に可逆的に結合している。この形態において、本発
明の装置は、対応するサンプルを自在に獲得し調製することが可能となる。そし
て、抗体または抗原７のいずれかは、蛍光イムノアッセイを実行するために、対
応する適当な蛍光体で標識されるか、酵素イムノアッセイを実行するために、対
応する適当な酵素で標識されている。
細に説明する。図３ａに概略的に示すように、対応する抗原７は、詳述しない形
態で中空シリンダー３の内壁に可逆的に結合している。この形態において、本発
明の装置は、対応するサンプルを自在に獲得し調製することが可能となる。そし
て、抗体または抗原７のいずれかは、蛍光イムノアッセイを実行するために、対
応する適当な蛍光体で標識されるか、酵素イムノアッセイを実行するために、対
応する適当な酵素で標識されている。
【００３８】 図３ａで示すように、本発明における装置の開口部８を、対応するサンプルを含
む容器の中に浸し、中空プランジャ２を垂直方向（矢印に示す）に移動させて中
空シリンダー３内の空間１４の体積を拡張できて、シーリングディスク４により
液漏れしない気密性を有する密封状態を形成することで、前記のサンプルをこの
空間内に収納することが可能となる。
む容器の中に浸し、中空プランジャ２を垂直方向（矢印に示す）に移動させて中
空シリンダー３内の空間１４の体積を拡張できて、シーリングディスク４により
液漏れしない気密性を有する密封状態を形成することで、前記のサンプルをこの
空間内に収納することが可能となる。
【００３９】 これに続いて、図３ｂで概説するように、中空シリンダー３の内壁への抗原７の
結合が解かれ、この蛍光体でラベルされた抗原７がサンプル液の中を自由に動き
回ることができる。
結合が解かれ、この蛍光体でラベルされた抗原７がサンプル液の中を自由に動き
回ることができる。
【００４０】 説明の主な部分で既に述べてきたように、正確な一定量のサンプルが容器から本
発明の装置の内部に吸い上げられており、従ってここで示した実施例において、
中空プランジャ２が規定の予定された行路を維持して移動すると、空間１４の中
に一定量吸い上げることが可能となる。
発明の装置の内部に吸い上げられており、従ってここで示した実施例において、
中空プランジャ２が規定の予定された行路を維持して移動すると、空間１４の中
に一定量吸い上げることが可能となる。
【００４１】 続いて、中空シリンダー３の開口部８はプラグ１３によって封鎖され得て、分析
物に特異的に予定された時間の最後に、中空プランジャ２を単に動かすことによ
って、或いは中空プランジャ２と中空シリンダー３を対応する相対的動作で動か
すことによって最初の位置に戻される。この際、サンプル量の一部は多孔性分離
層５の通り抜けて中空プランジャ２内へ到達し、すなわち多孔性分離層５とシー
リングディスク４で囲まれた空間１１の内部に到達し、この中で密封されること
となる。
物に特異的に予定された時間の最後に、中空プランジャ２を単に動かすことによ
って、或いは中空プランジャ２と中空シリンダー３を対応する相対的動作で動か
すことによって最初の位置に戻される。この際、サンプル量の一部は多孔性分離
層５の通り抜けて中空プランジャ２内へ到達し、すなわち多孔性分離層５とシー
リングディスク４で囲まれた空間１１の内部に到達し、この中で密封されること
となる。
【００４２】 この形態における蛍光イムノアッセイの実際の測定を行う様子を、図３ｄで概略
的に図示した。
的に図示した。
【００４３】 この目的のために、空間１１内のサンプルに、一方向からの適切な光源の照射を
行い、蛍光を励起させる。蛍光の強度は、光源と反対位置に設置された光学検出
器１２を用いて測定され得て、対応する測定シグナルに基づいて分析物のそれぞ
れの質を判断することができる。本発明の装置内のサンプルは、プラグ１３とシ
ーリングディスク４により、さらに中空プランジャ２と中空シリンダー３の両方
により包括的に密封されているので、サンプルを内包するこの装置全体を、測定
に引き続いて難なく安全に処理することが可能となる。
行い、蛍光を励起させる。蛍光の強度は、光源と反対位置に設置された光学検出
器１２を用いて測定され得て、対応する測定シグナルに基づいて分析物のそれぞ
れの質を判断することができる。本発明の装置内のサンプルは、プラグ１３とシ
ーリングディスク４により、さらに中空プランジャ２と中空シリンダー３の両方
により包括的に密封されているので、サンプルを内包するこの装置全体を、測定
に引き続いて難なく安全に処理することが可能となる。
【００４４】 蛍光イムノアッセイを行うにあたって、内標準化（インターナルスタンダーダイ
ゼーション）をさらに実行できる。この目的のために、サンプルが開口部８を通
って中空シリンダー３内の空間１４に吸い上げられると（図３ｂ）、蛍光強度の
測定がまず最初に行われる。このために、使用した蛍光体の蛍光を励起可能な波
長を少なくとも有する光が照射され、この際の蛍光強度が適切な光学検出器によ
って測定される。
ゼーション）をさらに実行できる。この目的のために、サンプルが開口部８を通
って中空シリンダー３内の空間１４に吸い上げられると（図３ｂ）、蛍光強度の
測定がまず最初に行われる。このために、使用した蛍光体の蛍光を励起可能な波
長を少なくとも有する光が照射され、この際の蛍光強度が適切な光学検出器によ
って測定される。
【００４５】 続いて、このように測定された蛍光強度は、後に測定する蛍光強度とそれぞれ比
較され得て、そして／又は互いに関連づけされ得る。その結果、必要な測定の手
間をわずかに増やすだけで測定の精度を容易に高めることが可能となる。
較され得て、そして／又は互いに関連づけされ得る。その結果、必要な測定の手
間をわずかに増やすだけで測定の精度を容易に高めることが可能となる。
【００４６】 図４ａ及び４ｂにおいて、ロッド状部材１５を有するように改変された本発明の
装置の態様を示す。ここでは、中空プランジャ２の長軸に並行に調整されたロッ
ド状部材１５がシーリングディスク４に結合し、シーリングディスク４をこのロ
ッド状部材１５を用いた移行動作で強制的に移動できるようにしている。これを
達成する目的で、操作性を確実にするためにこのロッド状部材１５を中空プラン
ジャ２の外方に突出して設ける必要がある。
装置の態様を示す。ここでは、中空プランジャ２の長軸に並行に調整されたロッ
ド状部材１５がシーリングディスク４に結合し、シーリングディスク４をこのロ
ッド状部材１５を用いた移行動作で強制的に移動できるようにしている。これを
達成する目的で、操作性を確実にするためにこのロッド状部材１５を中空プラン
ジャ２の外方に突出して設ける必要がある。
【００４７】 図４ａにおいて、実際のサンプリングを行う前の全ての部材の最初のポジション
を図示する。次ぎに、繰り返し前述したように、サンプルは、中空シリンダー３
と中空プランジャ２の間の適切な相対的動作によって開かれた開口部８を通じて
空間１４内に到達する。この空間１４には、レセプター‐リガンド系の結合した
パティシペントを含有する粒子と、中空シリンダー３の壁に可逆的に結合した、
酵素標識されたレセプター‐リガンド系の他のパティシペントが存在する。ここ
で、サンプルに含まれる分析物は、前述した２つのパティシペントと結合し、い
わゆる「サンドイッチ」を形成する。適当なインキュベーション期間の後、余剰
の結合していない成分を含むサンプルは、中空シリンダー３と中空プランジャ２
の対向する相対的動作により、ロッド状部材１５に空間１４から開口部８に抜け
る圧力をかけて押し出される。この際シーリングディスク４は多孔性分離層５と
連続的に接触状態にあるので、液体は多孔性分離層５を通過できない。そして、
中空シリンダー３と中空プランジャ２の間の適切な相対的動作により、基質溶液
が開口部８を通って空間１４に収容される。レセプター‐リガンド系のパティシ
ペントの１つに結合した酵素は、無色の基質（例えば、パーオキシダーゼの場合
のテトラメチルベンジジン／Ｈ2 Ｏ2 又はアルカリホスファターゼの場合のｐ‐
アミノフェニルホスフェート）を有色物質に変化させる。適当なインキュベーシ
ョン期間後、この基質溶液は、開口部８が多孔性分離層５により閉鎖された状態
で、中空シリンダー３と中空プランジャ２の間の対向する相対的動作によって、
（この場合、自在に移動可能な）ロッド状部材１５を、シーリングディスク４か
ら引き離すことで形成される空間１１内に押し込まれる。この結果、酵素と基質
が互いに別の空間に分離されて酵素反応は停止し、空間１１内に含まれる基質の
溶液の吸収が、光度計を用いて測定される（最終生成物の測定）。このような過
程は特に化学ルミネセンスイムノアッセイまたは酵素イムノアッセイに適する。
を図示する。次ぎに、繰り返し前述したように、サンプルは、中空シリンダー３
と中空プランジャ２の間の適切な相対的動作によって開かれた開口部８を通じて
空間１４内に到達する。この空間１４には、レセプター‐リガンド系の結合した
パティシペントを含有する粒子と、中空シリンダー３の壁に可逆的に結合した、
酵素標識されたレセプター‐リガンド系の他のパティシペントが存在する。ここ
で、サンプルに含まれる分析物は、前述した２つのパティシペントと結合し、い
わゆる「サンドイッチ」を形成する。適当なインキュベーション期間の後、余剰
の結合していない成分を含むサンプルは、中空シリンダー３と中空プランジャ２
の対向する相対的動作により、ロッド状部材１５に空間１４から開口部８に抜け
る圧力をかけて押し出される。この際シーリングディスク４は多孔性分離層５と
連続的に接触状態にあるので、液体は多孔性分離層５を通過できない。そして、
中空シリンダー３と中空プランジャ２の間の適切な相対的動作により、基質溶液
が開口部８を通って空間１４に収容される。レセプター‐リガンド系のパティシ
ペントの１つに結合した酵素は、無色の基質（例えば、パーオキシダーゼの場合
のテトラメチルベンジジン／Ｈ2 Ｏ2 又はアルカリホスファターゼの場合のｐ‐
アミノフェニルホスフェート）を有色物質に変化させる。適当なインキュベーシ
ョン期間後、この基質溶液は、開口部８が多孔性分離層５により閉鎖された状態
で、中空シリンダー３と中空プランジャ２の間の対向する相対的動作によって、
（この場合、自在に移動可能な）ロッド状部材１５を、シーリングディスク４か
ら引き離すことで形成される空間１１内に押し込まれる。この結果、酵素と基質
が互いに別の空間に分離されて酵素反応は停止し、空間１１内に含まれる基質の
溶液の吸収が、光度計を用いて測定される（最終生成物の測定）。このような過
程は特に化学ルミネセンスイムノアッセイまたは酵素イムノアッセイに適する。
【００４８】 上述したステップの間で、洗浄ステップが挿入されてもかまわない。
【００４９】 しかしながら、酵素で標識した抗体（レセプター‐リガンド系のパティシペント
）は中空シリンダーの内壁に可逆的に結合した状態ではじめから存在しなくても
よく、粒子に結合したパティシペントを含有するサンプルをインキュベーション
し、サンプルを押し出した後で、装置内に別々に収容するような手順であっても
よい。インキュベーションが行われると、レセプター‐リガンド系は追加的な酵
素を含有する、抗体‐分析物‐抗体からなるサンドイッチ構造を構成し、粒子に
結合可能となる。
）は中空シリンダーの内壁に可逆的に結合した状態ではじめから存在しなくても
よく、粒子に結合したパティシペントを含有するサンプルをインキュベーション
し、サンプルを押し出した後で、装置内に別々に収容するような手順であっても
よい。インキュベーションが行われると、レセプター‐リガンド系は追加的な酵
素を含有する、抗体‐分析物‐抗体からなるサンドイッチ構造を構成し、粒子に
結合可能となる。
【００５０】 さらに、本形態の追加的な酵素を含有する、技術分野で公知の競合アッセイフォ
ーマット、およびタイトレーションアッセイをどちらもそれぞれ行うこともでき
る。
ーマット、およびタイトレーションアッセイをどちらもそれぞれ行うこともでき
る。
【図１】 サンプリングやサンプル調製実行前の、本発明における装置の具体的な態様を示
す概略構造図。
す概略構造図。
【図２】 図１に示した装置の部分拡大図。
【図３ａ】 図１および図２における装置内へのサンプルの取り込みを示す概略模式図。
【図３ｂ】 図１および図２における装置内へのサンプルの取り込みを示す概略模式図。
【図３ｃ】 サンプル容積の一部が中空プランジャ内へ移行することを示す図。
【図３ｄ】 蛍光イムノアッセイによる測定の様子を示す概略模式図。
【図４ａ】 本発明の装置においてロッド状部材を有する態様を示す図。
【図４ｂ】 本発明の装置においてロッド状部材を有する態様を示す図。
【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書
【提出日】平成１３年４月２８日（２００１．４．２８）
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００４】 しかしながら、この局面は環境的な分析を行うにあたってまさに重要である。な
ぜなら、採取された複数のサンプル中の分析物は、軽作業で単純な機器操作でか
つ少ない誤操作のもとで、かなり単純な方法で短時間でテストされる必要がある
からである。 このもとで、ＤＥ１９７４７５７２Ｃ１より、蛍光イムノアッセイを実施するた
めの装置および方法で、中空のシリンダー内に挿入され開口部を有するプランジ
ャの内部に写真測量用カメラが備えられ、プランジャとシリンダーの相対的動作
の間に、シリンダーに収容されたサンプルを光学的な導波管を通してサンプル採
集チャンバーへと導くものが知られている。 ＷＯ９８／１８５１８より、細胞を分離するための装置で、シリンジ状のシリン
ジ体とプランジャとを含むシリンジ自体が用いられ、シリンジ体内部のハンドル
バーによって往復動作が可能となるものが知られている。 さらに、ＵＳ５８４６７４５に、異なる物質を検出するための方法および装置で
あって、抗原、抗体および酵素をそれぞれ含有するサンプルのサンプル調製のた
めに、（例えば球体の）集合体を用いるものが記載されている。
ぜなら、採取された複数のサンプル中の分析物は、軽作業で単純な機器操作でか
つ少ない誤操作のもとで、かなり単純な方法で短時間でテストされる必要がある
からである。 このもとで、ＤＥ１９７４７５７２Ｃ１より、蛍光イムノアッセイを実施するた
めの装置および方法で、中空のシリンダー内に挿入され開口部を有するプランジ
ャの内部に写真測量用カメラが備えられ、プランジャとシリンダーの相対的動作
の間に、シリンダーに収容されたサンプルを光学的な導波管を通してサンプル採
集チャンバーへと導くものが知られている。 ＷＯ９８／１８５１８より、細胞を分離するための装置で、シリンジ状のシリン
ジ体とプランジャとを含むシリンジ自体が用いられ、シリンジ体内部のハンドル
バーによって往復動作が可能となるものが知られている。 さらに、ＵＳ５８４６７４５に、異なる物質を検出するための方法および装置で
あって、抗原、抗体および酵素をそれぞれ含有するサンプルのサンプル調製のた
めに、（例えば球体の）集合体を用いるものが記載されている。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 カテルカンプ，アンドレアス ドイツ連邦共和国、デー‐48149 ミュン ステル、ヴィルヘルムシュトラーセ 65 Ｆターム(参考） 2G043 CA04 DA02 EA01 GA07 GB21 2G059 AA02 BB04 BB11 BB12 CC12 CC16 DD03 DD12 DD13 EE01 EE07 EE13 FF04 FF12 HH02
Claims (20)
- 【請求項１】レセプター‐リガンド及びアフィニティテストの実施において使用
される装置であって、光に対して少なくとも部分的に透明な材料から作られた中
空プランジャ２が、同じく光に対して少なくとも部分的に透明な材料から作られ
た中空シリンダー３内に収容され案内され、この中空シリンダー３に一時的に封
鎖可能な開口部８が備えられ； 前記中空シリンダー３の内側に対面する前記中空プランジャ２の端面が多孔性分
離層５で構成され； 前記中空プランジャ２内での移行動作によって動作可能な、気密性を有し液洩れ
しないシーリングディスク４が、前記多孔性分離層５と並行に前記中空プランジ
ャ２内に備えられることを特徴とする装置。 - 【請求項２】前記中空シリンダー３内の、前記中空シリンダー３と前記中空プラ
ンジャ２との間の空間１４内に、多孔性分離層５を通過できない粒子サイズで選
択された粒子６が存在することを特徴とする請求項１に記載の装置。 - 【請求項３】前記中空シリンダー３の前記開口部８が、栓１３または逆止めバル
ブにより封鎖可能であることを特徴とする請求項１および２に記載の装置。 - 【請求項４】前記シーリングディスク４が、その外周を取り巻くシーリング９を
備えることを特徴とする請求項１又は２に記載の装置。 - 【請求項５】前記シーリングディスク４が、前記中空プランジャ２内における内
部巾に相応しく、前記中空プランジャ２内での移行動作中に傾斜することを防止
するような厚みを備えることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の
装置。 - 【請求項６】前記シーリングディスク４上に、前記中空プランジャ２内での移行
動作中に前記シーリングディスク４が傾斜するのを防止するガイド部材を備える
ことを特徴とする請求項１〜５のいずれか１項に記載の装置。 - 【請求項７】前記中空プランジャ２が、前記中空シリンダー３の内側に対面する
その端面の領域における外側表面領域上に、周縁状シーリング部材１０を備える
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の装置。 - 【請求項８】前記中空プランジャ２に、圧力調整用の開口部１が少なくとも１つ
設けられることを特徴とする請求項１〜７のいずれか１項に記載の装置。 - 【請求項９】前記粒子６がポリマーから構成されることを特徴とする請求項１〜
８のいずれか１項に記載の装置。 - 【請求項１０】レセプター‐リカンド系のパティシペントの１つが、前記粒子６
に結合することを特徴とする請求項１〜９のいずれか１項に記載の装置。 - 【請求項１１】多孔性のフリット５が、プラスチック、プラスチック混合物、ガ
ラス、セラミック又は金属から構成されることを特徴とする請求項１〜１０のい
ずれか１項に記載の装置。 - 【請求項１２】前記中空シリンダー３及び／又は前記中空プランジャ２に、行路
制限ストッパーを備えることを特徴とする請求項１〜１１のいずれか１項に記載
の装置。 - 【請求項１３】前記開口部８が、別のフリット、膜またはフィルターにより封鎖
されることを特徴とする請求項１〜１２のいずれか１項に記載の装置。 - 【請求項１４】前記シーリングディスク４が、前記中空プランジャ２の長軸に並
行に調整されたロッド状部材１５と連結することを特徴とする請求項１〜１３の
いずれか１項に記載の装置。 - 【請求項１５】レセプター‐リガンド又はアフィニティテストを実施するための
方法であって、 サンプルの一定量が、前記中空シリンダー３と前記中空プランジャ２の相互に相
対的な動作により、開口部８を通って、この相対的動作に従って増大する前記中
空シリンダー３内の空間１４内に引き込まれ、 前記中空シリンダー３の内壁および／又は前記多孔性分離層５上に可逆的に固定
化されたレセプター‐リガンド系の蛍光体で標識されたパティシペントの少なく
とも１つが、サンプル中に溶出するものであって； 各パティシペントは、サンプル中の分析物濃度に依存し、選択されたテストフォ
ーマットに従って、前記粒子６、及び／又は前記多孔性分離層５に結合したレセ
プター‐リガンド系の他のパティシペントと部分的に反応し、 前記中空シリンダー３の開口部８が封鎖された状態で、このように調製されたサ
ンプルの一部分は、前記中空シリンダー３と前記中空プランジャ２の対向する相
対動作によって、前記空間１４から前記多孔性分離層５を通って、対応するサン
プル量に従って増大する、前記中空プランジャ２内の前記多孔性分離層５と前記
シーリングディスク４との間の空間１１内へと到達し；そして 前記空間１１内のサンプルが、使用した前記蛍光体の蛍光を励起する波長光で外
部から照射され、検出器１２を用いた蛍光強度の測定が行われることを特徴とす
る方法。 - 【請求項１６】レセプター‐リガンド又はアフィニティテストを実施するための
方法であって、 サンプルの一定量が、前記中空シリンダー３と前記中空プランジャ２の相対的動
作により開口部８を通って、前記中空シリンダー３内のこの相対的動作に従って
増大する空間１４内に引き込まれ、 サンプルに含まれる少なくとも１つの分析物が、その濃度に依存して、他のパテ
ィシペントに対するその親和性に基づいて前記粒子６、及び／又は前記多孔性分
離層５に結合するレセプター‐リガンド系の蛍光体で標識されたパティシペント
を置換し； 前記中空シリンダー３の開口部８が封鎖された状態で、このように調製されたサ
ンプルの一部分は、前記中空シリンダー３と前記中空プランジャ２の対向する相
対動作によって、前記空間１４から前記多孔性分離層５を通って、対応するサン
プル量に従って増大する、前記中空プランジャ２内の前記多孔性分離層５と前記
シーリングディスク４との間の空間１１内へと到達し； 前記空間１１内のサンプルが、使用した前記蛍光体の蛍光を励起する波長光で外
部から照射され、検出器１２を用いた蛍光強度の測定が行われることを特徴とす
る方法。 - 【請求項１７】前記空間１４内に収容されたサンプルに、使用した蛍光体の蛍光
励起波長の光を外部から照射してこの蛍光強度を測定し、このように測定された
蛍光強度を、前記空間１１内で測定した感応されたサンプルを後に測定したとき
の蛍光強度と比較し、及び／又は関連づけることを特徴とする請求項１５または
１６に記載の方法。 - 【請求項１８】レセプター‐リガンド又はアフィニティテストを実施するための
方法であって、 サンプルの一定量が、前記中空シリンダー３と前記中空プランジャ２の相対的動
作により開口部８を通って、この相対的動作に従って増大する前記中空シリンダ
ー３内の空間１４内に引き込まれ、 前記中空シリンダー３の内壁および／又は前記多孔性分離層５上に可逆的に固定
化されたレセプター‐リガンド系の酵素で標識されたパティシペントの少なくと
も１つが、サンプル中に溶出するものであって； このパティシペントは、サンプル中の分析物の濃度に依存して、選択されたテス
トフォーマットに従って、前記粒子６、及び／又は前記多孔性分離層５に結合し
たレセプター‐リガンド系の他の各パティシペントと部分的に反応し、 前記中空シリンダー３の開口部８が封鎖された状態で、このように調製されたサ
ンプルの一部分は、前記中空シリンダー３と前記中空プランジャ２の対向する相
対動作によって、前記空間１４から前記多孔性分離層５を通って、各サンプル量
に従って増大する、前記中空プランジャ２内の前記多孔性分離層５と前記シーリ
ングディスク４との間の空間１１内へと到達し； その後、前記空間１１内のこのサンプルに対して時間分解比色測定を行うことを
特徴とする方法。 - 【請求項１９】レセプター‐リガンド又はアフィニティテストを実施するための
方法であって、 サンプルの一定量が、中空シリンダー３と中空プランジャ２の相対的動作により
開口部８を通って、前記中空シリンダー内のこの相対的動作に従って増大する空
間１４内に引き込まれ、 サンプルに含まれる少なくとも１つの分析物が、その濃度に依存して、その親和
性に基づき前記粒子６、及び／又は前記多孔性分離層５に結合したこの系の他の
パティシペントに結合したレセプター‐リガンド系の酵素標識されたパティシペ
ントを置換し； 前記中空シリンダー３の開口部８が封鎖された状態で、このように調製されたサ
ンプルの一部分は、前記中空シリンダー３と前記中空プランジャ２の対向する相
対動作によって、前記空間１４から前記多孔性分離層５を通って、各サンプル量
に従って増大する、前記中空プランジャ２内の前記多孔性分離層５と前記シーリ
ングディスク４との間の空間１１内へと到達し； その後、前記空間１１内のこのサンプルに対して時間分解比色測定を行うことを
特徴とする方法。 - 【請求項２０】ロッド状部材１５を、前記シーリングディスク４によりその片方
が封鎖された前記多孔性分離層５と共に動作させることによって、サンプルを前
記開口部８を通して前記空間１４から排出し； 続いて、前記中空シリンダー３と前記中空プランジャ２の相対的動作により、前
記開口部８を通して基質溶液を前記空間１４に収容し、酵素の結合したレセプタ
ー‐リガンド系の変換の後に、開口部８を封鎖した状態で、前記中空シリンダー
３と前記中空プランジャ２との対向する相対的動作により基質溶液に圧力をかけ
、前記多孔性分離層５を通して前記空間１１に収容し、前記基質溶液の変色を比
色分析法で測定することを特徴とする請求項１９に記載の方法。
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19916430A DE19916430C1 (de) | 1999-04-12 | 1999-04-12 | Vorrichtung zur Verwendung bei der Durchführung von Rezeptor-Ligand- und Affinitätstests |
| DE19916430.4 | 1999-04-12 | ||
| PCT/DE2000/001046 WO2000062061A1 (de) | 1999-04-12 | 2000-04-03 | Vorrichtung und verfahren zur verwendung bei der durchführung von rezeptor-ligand- und affinitätstests |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
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Family
ID=7904262
Family Applications (1)
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|---|---|---|---|
| JP2000611073A Pending JP2002541478A (ja) | 1999-04-12 | 2000-04-03 | レセプター‐リガンド及びアフィニティテストにおいて使用するための装置及び方法 |
Country Status (4)
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|---|---|
| EP (1) | EP1166114A1 (ja) |
| JP (1) | JP2002541478A (ja) |
| DE (1) | DE19916430C1 (ja) |
| WO (1) | WO2000062061A1 (ja) |
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| WO2016117701A1 (ja) * | 2015-01-22 | 2016-07-28 | Ｎｅｃソリューションイノベータ株式会社 | ターゲット分析用具およびターゲット分析方法 |
| JPWO2018016127A1 (ja) * | 2016-07-20 | 2019-05-09 | Ｎｅｃソリューションイノベータ株式会社 | ターゲット分析キットおよびターゲット分析方法 |
| KR102081509B1 (ko) * | 2018-08-24 | 2020-02-25 | 고려대학교 산학협력단 | 양방향 막 투과 이동 제어를 이용한 다공성막 기반 입자 분리 장치 |
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| GB2435510A (en) | 2006-02-23 | 2007-08-29 | Mologic Ltd | Enzyme detection product and methods |
| GB2435511A (en) | 2006-02-23 | 2007-08-29 | Mologic Ltd | Protease detection |
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-
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- 2000-04-03 WO PCT/DE2000/001046 patent/WO2000062061A1/de not_active Application Discontinuation
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