JP2002539185A - 核内受容体アリール化化合物 - Google Patents

核内受容体アリール化化合物

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ジェフリー、エドムンド、コブ
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Abstract

(57)【要約】 本発明は、式（IA）または（IB）の新規な核内受容体リガンドを開示する。これらの化合物は、核内受容体でシステインをアリール化するのに有用である。 【化１】

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の背景】発明の分野 本発明は、核内受容体に結合してアリール化する化合物に関する。もう一つの
態様において、本発明は特定の疾患または疾病を特定の核内受容体と関連づける
方法に関する。
【０００２】背景技術 核内受容体は、小型の親油性ホルボールによって活性化されまたは失活するス
テロイド／レチノイド受容体スーパーファミリーに属する転写因子である。例え
ば、Mangelsdorf, D.J. et al., Cell, (1995), 83, 835-839を参照されたい。
ぺルオキシソーム増殖因子活性化受容体（PPAR）は、核内受容体スーパーファミ
リーのオーファンメンバーである。例えば、Willson, T.M. and Wahli, W., Cur r. Opin. Chem. Biol. , (1997), Vol. 1, pp 235-241を参照されたい。
【０００３】 PPAR-α、PPAR-γおよびPPAR-δと呼ばれる三種類の哺乳類PPARが同定されて
いる。PPARは、レチノイドX受容体とのヘテロ二量体としてのDNA応答要素に結合
することによってターゲット遺伝子の発現を調節する。これらのDNA応答要素（P
PRE）は、脂質代謝およびエネルギーバランスに関与するタンパク質をコードす
る多数の遺伝子の調節領域で同定されている。脂質代謝および保管の調節におけ
るPPARの生物学的役割が、最近概説されている。例えば、Spiegelman, B.M., Di abetes , (1998), Vol. 47, pp 507-514; Schoonjans, K., Martin, G., Staels,
B., and Auwerx, J., Curr. Opin. Lipidol., (1997), Vol. 8, pp 159-166;お
よびBrun, R.P., Kim, J.B. Hu, E., and Spiegelman, B.M., Curr. Opin. Lipi dol. , (1997), Vol. 8, pp 212-218を参照されたい。
【０００４】 必須の食物用脂肪酸およびそれらのエイコサン様代謝物は、PPAR受容体の天然
に存在するホルモンである。これらのホルモンは、PPAR-γ受容体を活性化する
ことによって脂肪細胞化(adipogenesis)を促進することができる。例えば、Klie
wer, S.A., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, (1997), Vol. 94, pp 4318-
4323、およびKliewer, S.A., et al., Cell, (1995), Vol. 83, pp 813-819を参
照されたい。内在性PPAR-γホルモンの脂肪細胞化作用を阻害する分子は、脂肪
蓄積または脂質貯蔵の増加によって引起される疾患の治療に用いることができる
。例えば、Tontonoz, P., Hu, E., and Spiegelman, B.M., Curr. Opin. Genet. Dev. , (1995), Vol. 5, pp 571-576を参照されたい。これらの疾患の例は、肥
満、骨粗鬆症および挫瘡である。
【０００５】 簡単に説明すれば、一つの態様において、本発明は、下式IAまたはIBの化合物
を開示する。
【化３】 （上記式中、 Ｘはハロゲンであり、 Ｒ１はＨまたは−ＯＣＨ３であり、 Ｒ２は分子量が５００ダルトン未満の疎水性有機基であり、 Ｒ３はＨ、Ｃ１〜６アルキル、または必要に応じてＣ１〜３アルキル、Ｃ１〜 ３ アルコキシ、およびハロゲンから選択される１または２個の基で置換されたフ
ェニルである）。 好ましくは、本発明の化合物は核内受容体のリガンド結合ドメインに結合し、受
容体のシステイン残基をアリール化することができる。
【０００６】 好ましくは、ＸはＣｌ、ＦまたはＢｒである。最も好ましくは、ＸはＣｌであ
る。
【０００７】 好ましくは、Ｒ２は
【化４】 または−Ｃ１〜３アルケニル−アダマンチルであって、Ｒ４およびＲ５は独立し
て水素またはハロゲンである。最も好ましくは、Ｒ４およびＲ５は、両方ともＨ
であるか、両方ともクロロであるか、または一方がＨであり且つ一方がヨードで
ある。
【０００８】 好ましくは、Ｒ３は水素、一置換または未置換フェニル、またはＣ１〜３アル
キルである。最も好ましくは、Ｒ３はＨである。
【０００９】 もう一つの態様においては、本発明は、上記受容体のリガンド結合ドメイン内
のシステイン残基をアリール化することによって核内受容体の活性を阻害する方
法を開示する。
【００１０】 もう一つの態様においては、本発明は、特定の疾患または疾病を特定の核内受
容体、例えば、PPAR-γと関連づける方法を開示する。ここで「関連づける」と
は、特定の疾患または疾病を特定の核内受容体を活性化または失活する化合物を
投与することによって治療することができることを意味する。
【００１１】 もう一つの態様においては、本発明は、本発明の方法を用いて核内受容体性の
疾患または疾病と関連づけた特定の核内受容体を活性化または失活する化合物を
投与することによる上記疾患または疾病の治療法を提供する。
【００１２】 本発明の好ましい化合物は、核内受容体のリガンド結合ドメインに結合して、
この受容体のシステイン残基をアリール化することができる。周知の手法を用い
て、式IAまたはIBの化合物を調製し、特定の受容体に対する結合について試験し
、受容体のアリール化について分析することができる。例えば、式IAまたはIBの
化合物のライブラリーを調製することができる。次に、このライブラリーを、結
合分析を用いてスクリーニングし、特定の核内受容体、例えばPPAR-γに親和性
を示すライブラリーの構成要素を同定することができる。次いで、適当な見かけ
のｐＫｉ、例えば見かけのｐＫｉ＞５、好ましくは＞７と結合する化合物がアリ
ール化化合物の良好な候補となる。核内受容体リガンド結合ドメイン内のシステ
イン残基のアリール化は、標準的生化学的手法、例えば質量スペクトル分析によ
って実証することができる。結合してアリール化することが示されている化合物
を、他の核内受容体、例えばRXRについての結合分析を用いて選択性についてス
クリーニングすることができる。一般に、リガンド結合ドメインにおけるシステ
インのアリール化は、核内受容体の機能活性を遮断する。この予想される遮断は
、細胞ベースでのレポーターアッセイを用いて確認することができた。
【００１３】 核内受容体に結合して細胞系、細胞培養、組織または全動物体におけるその機
能活性を遮断するアリール化化合物を用いて、核内受容体を哺乳類疾患と関連づ
けることができる。例えば、PPAR-γ活性を遮断するアリール化化合物は、脂肪
生成を阻害し、その結果PPAR-γが脂肪生成において役割を担っていることを示
唆している。幾つかの核内受容体は特定の疾患または疾病と関連づけられている
が、この受容体を活性化または失活する化合物によって治療または予防すること
ができる一層多くの疾患または疾病がある可能性がある。幾つかの核内受容体は
、有用性が知られていないものがある。本発明の関連づける方法を用いることに
よって、新たな疾患−受容体の関連を見いだすことができる。これらの新規な関
連を見いだしたならば、受容体を活性化または失活する化合物を求めることによ
ってこれらの疾患に対する新規薬剤を見いだすことができる。従って、本発明は
、薬剤発見の新規な方法、従ってヒト疾患および疾病の予防および治療のための
新規な薬剤を提供する。
【００１４】 本発明の適当な化合物としては、 Ｎ−フェニル−２−５−ニトロ−ベンズアミド、 Ｎ−（２，４−ジクロロフェニル）−２−クロロ−５−ニトロ−ベンズアミド、
Ｎ−（４−ヨードフェニル）−２−クロロ−５−ニトロ−ベンズアミド、 Ｎ−フェニル−５−クロロ−３−メトキシ−２−ニトロ−ベンズアミド、 Ｎ−フェニル−２−フルオロ−５−ニトロ−ベンズアミド、 Ｎ−（１−トリシクロ［３．３．１．１３．７］デス−１−イルエチル）−２−
クロロ−５−ニトロ−ベンズアミド、および Ｎ−（２−エトキシフェニル）−Ｎ−（６−ブロモ−１Ｈ−ベンズ［ｄｅ］イソ
キノリン−１，３（２Ｈ）−ジオキソ−エト−２−イル）−２−クロロ−５−ニ
トロ−ベンズアミド が挙げられる。
【００１５】 本発明の特に好ましい化合物は、Ｎ−フェニル−２−５−ニトロ−ベンズアミ
ドである。
【００１６】 当業者であれば、本明細書における治療という表現は予防並びに確定した疾患
または症状の治療にまで敷衍されることを理解されるであろう。
【００１７】 本明細書で用いられる「アルキル」、「アルケニル」、および類似の用語およ
びこれらの用語を含む用語としては、特に断らない限り直鎖および分岐鎖アルキ
ル鎖が挙げられる。
【００１８】 本発明の化合物は、添付の実施例によって示されるように標準的有機化学によ
って調製することができる。下記の例は、本発明の幾つかの具体的化合物の合成
を例示し、一般的方法を示す目的で記載される。従って、下記の例の節は、本明
細書で考察される発明の範囲を制限しようとするものではない。
【００１９】
【実施例】例１：Ｎ−フェニル−２−クロロ−５−ニトロ−ベンズアミド 窒素雰囲気下で０℃に保持した塩化＝２−クロロ−５−ニトロ−ベンゾイル（
５．０３g，２２．９ミリモル）とトリエチルアミン（３．５１ml，２５．１ミ
リモル）とをＣＨ２Ｃｌ２中で攪拌溶解したものに、アニリン（２．１９ml，２
４．０ミリモル）を滴加した。生成する溶液を０℃で５分間攪拌した後、室温で
１５分間攪拌した。次に、この溶液をＥｔＯＡｃ（３００ml）で希釈し、１．０
Ｍ ＨＣｌ、水、１．０Ｍ ＮａＨＣＯ３、および塩水（それぞれ１００ml）で
順次洗浄した。次に、有機溶液をＭｇＳＯ４上で乾燥し、ロータリーエバポレー
ターで濃縮し、淡黄色固形生成物（５．３２g）を得て、これをＥｔＯＡｃから
再結晶し、標記化合物を白色固形生成物（３．３４g，５３％）として得た。融
点１５５〜１５６℃；１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００MHz）δ８．６３（ｄ，
１Ｈ，Ｊ＝２．７），８．２８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．７，８．９），７．８１
（ｂｒｓ，１Ｈ），７．６８〜７．６３（ｍ，３Ｈ），７．４２（ｔ，２Ｈ，Ｊ
＝７．９），７．２３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．５）；ＭＳ（ＥＳ−）ｍ／ｅ２７５
．１（Ｍ−Ｈ）−； 分析 Ｃ１３Ｈ９Ｃｌ１Ｎ２Ｏ３に対する計算値：Ｃ，５６．４３；Ｈ，３．２８；Ｎ
，１０．１３； 実測値：Ｃ，５６．３３；Ｈ，３．３０；Ｎ，１０．０３。
【００２０】例２〜５ 例１の調製と同様の方法で、下記の例を調製した。 例２：Ｎ−（２，４−ジクロロフェニル）−２−クロロ−５−ニトロ−ベンズ
アミド、 例３：Ｎ−（４−ヨードフェニル）−２−クロロ−５−ニトロ−ベンズアミド
、 例４：Ｎ−フェニル−５−クロロ−３−メトキシ−２−ニトロ−ベンズアミド
、 例５：Ｎ−フェニル−２−フルオロ−５−ニトロ−ベンズアミド
【００２１】結合分析 試験化合物を、Nichols, J.S., Parks, D.J., Consler, T.G., and Blanchard
, S.G., Anal. Biochem., Vol. 257, pp. 112-119、およびVol. 263, p 126 (19
98)に記載のシンチレーション近似分析法（SPA）によってヒトPPAR-γ受容体リ
ガンド結合ドメインへの結合について分析した。上記の例１〜５のそれぞれは、
この結合分析では見かけｐＫｉ＞７であった。
【００２２】 PPAR-αおよびPPAR-δリガンド結合ドメインへの結合は、それぞれPPAR-αお
よびPPAR-δについて以前に報告された放射性リガンド[３Ｈ]-GW2331 (Kliewer,
S.A. et al., and Lehmann, J.M., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1997) Vol.
94, pp. 4318-4323)および[３Ｈ]-GW2433 (Brown, P.J., Smith-oliver, T.A.,
Charifson, P.S., Tomkinson, N.C.O., Fivush, A.M., Sternbach, D.D., Wade,
L.E., Orband-Miller, L., Parks, D.J., Blanchard, S.G., Kliewer, S.A., L
ehmann, J.A., and Willson, T.M., Chemistry and Biology (1997) Vol. 4, pp
. 909-918)を用いて同様の方法で測定した。
【００２３】 PPAR-γおよびPPAR-αSPAに用いた緩衝液は、５０mM ＫＣｌ、２mM ＥＤＴ
Ａ、５mM ＣＨＡＰＳ、０．１mg/ml ＢＳＡ、１０mM ＤＴＴ、および５０mM
Tris（２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−１，３−プロパンジオール）pH８（
緩衝液Ａ）であった。PPAR-δSPAについては、TrisをＨＥＰＥＳ（Ｎ−［２−ヒ
ドロキシエチル］ピペラジン−Ｎ′−［２−エタンスルホン酸］）で置換し、pH
は７であった（緩衝液Ｂ）。
【００２４】 PPARγ、PPARαおよびPPARδについて標準的シンチレーション近似分析法を用
いて例１の化合物の見かけの結合親和性を分析したところ、この化合物はPPARγ
の選択的リガンドであることを示した。このPPARγに対する結合と比較して、こ
の化合物は約１０倍および約６００倍低い親和性でPPARαおよびPPARδに結合し
た。それぞれPPARγ、PPARαおよびPPARδへの結合については見かけのｐＫｉ８
．４８±０．２７（Ki＝３．３nM；ｎ＝１０）、７．４９±０．１７（Ki＝３２
nM；ｎ＝９）、５．６９±０．１７（Ki＝２０００nM；ｎ＝３）が観察された。
【００２５】細胞ベースでのレポーターアッセイ CV-1細胞を、１０％ウシ胎児血清および２mMグルタミンを補足したDME高グル
コース培地(Irvine Scientific)に保持した。細胞を、採取の３日前に木炭スト
リッピングした１０％ウシ胎児血清を補足したD-MEM/F-12培地（Gibco）に分割
した。細胞を９６穴プレートに２４，０００個／ウェルの密度で播種し、５％Ｃ
Ｏ２および３７℃で一晩インキュベーションした。細胞を、２ng PSG5GAL4-ヒト
PPAR-γ、８ng UAS-tk-SPAＰ、２５ngβ-gal、４５ng pBluescriptの量のＤＮＡ
／ウェルを用いてLipofectamineプロトコール(Gibco)に基づいて６〜２０時間ト
ランスフェクションした。Lehmann, J.M. et al., J. Biol. Chem., (1995), Vo
l. 270, pp. 12953-12956、およびBrown, P.J. et al., Chem. Biol., (1997),
Vol. 4, pp. 909-918を参照されたい。細胞を、５％ＣＯ２および３７℃で一晩
インキュベーションした。試験化合物を、ＤＭＳＯに可溶化して１０mMとした。
次に、試験化合物を、1e-５M〜1e-１０Mまで１０％の脱脂して木炭ストリッピン
グした子ウシ血清(Sigma)を６０℃で３０分間熱不活性化したもの、２mMグルタ
ミン、およびPen-Strepを補足したD-MEM/F-12培地(Gibco)に1e-５M〜1e-１０Mま
で連続希釈した。試験化合物を希釈したこの培地は、１００nMロジグリタゾンも
含んでいた。これらの試験化合物の希釈液を、トランスフェクション培地を吸引
した後にトランスフェクション細胞プレートに１００μl／ウェルずつ加えた。
ＤＭＳＯコントロールおよび１μMのロジグリタゾンコントロールを、それぞれ
の細胞プレートに加えた。細胞を、５％ＣＯ２および３７℃で一晩インキュベー
ションした。細胞を、０．５％Triton X-100 ２５μlでリーシスした。それぞれ
の母プレートから、２個の娘プレートを作成した。一方の娘プレートには２００
μl／ウェルのSPAP基質(Sigma 104)を入れ、他方の娘プレートには２００μl／
ウェルのβ−gal基質(Sigma N-1127)を入れた。展開した後、細胞プレートを４
０５nMで読取った。SPAPデータをβ−galに対して規格化し、トランス活性化の 最大阻害％を１μMロジグリタゾンの正のコントロールに対して計算した。上記 の例１〜５のそれぞれは、このPPAR-γ細胞ベースのレポーター遺伝子アッセイ では１００nMロジグリタゾンによるトランス活性化の阻害率は＞５０％であった 。
【００２６】PPAR-γ結合の遮断 SPAビーズに固定したPPAR-γ（緩衝液Ａ）を、例１の化合物（下記のグラフで
黒四角）またはロジグリタゾン（下記のグラフで黒マル）１μMとともに１時間
インキュベーションした（この実験では、緩衝液Ａを用いた）。この前処理リガ
ンドを、遠心分離の後に新鮮な緩衝液にビーズを再分散する２連続段階によって
取り出した。結合の再生は、洗浄したビーズ懸濁液の分量に[３Ｈ]−ロジグリタ
ゾンを加えた後、シンチレーション近似分析法によって経時的な放射性リガンド
結合の再生を観察することによって評価した。ストレプトアビジンをコーティン
グしたSPAビーズに固定したビオチン化受容体を、ビヒクル、１μMの例１の化合
物、またはロジグリタゾンに暴露した。１時間インキュベーションした後、前処
理リガンドを固定受容体から取り出して、放射性リガンドを加えた。経時的な結
合の再生をSPAによって評価した。PPARγをこの方法で例１の化合物で処理し、
受容体に対する[３Ｈ]−ロジグリタゾン結合の持続的阻害を観察した。前処理化
合物を除去した後２４時間までの時間に結合活性の再生はほとんど見られず、阻
害が不可逆的であることを示唆していた。対照的に、インキュベーションにおい
て例１の化合物の代わりに未標識ロジグリタゾンを用いた平行実験では、受容体
の結合活性が完全に再生した。この再生は速やかであり、前処理リガンドの希釈
から５分後には最大値に達した。これらの結果を、下記のグラフにまとめる。
【００２７】
【００２８】 PPAR SPAの標準的条件は、アッセイ緩衝液中の還元剤ジチオトレイトール（Ｄ
ＤＴ）１０mMを包含した。ＤＴＴの目的は二倍であった。第一に、実験は、還元
剤の存在下で最大リガンド結合が観察され、受容体をヨードアセタミドのような
システイン改質試薬で処理することにより放射性リガンド結合が阻害されること
を示していた。従って、ＤＴＴ還元剤を加えて、リガンド結合を増加させた。
【００２９】 アッセイ緩衝液にＤＴＴを用いる第二の理由は、非特異的タンパク質改質試薬
のスカベンジャーとして作用することであった。ＤＴＴの濃度は、分析（〜５nM
）における受容体タンパク質の濃度より６オーダーを上回る大きさであったので
、非特異的受容体改質の可能性は起こらないと思われた。
【００３０】 PPAR-γリガンド結合ドメイン（LBD）のＸ線結晶構造は、LBDの単一のシステ
イン残基はヘリックス３に配置されており、リガンド結合部位の一部を確定する
。R.T. Nolte et al., Nature, Vol. 395, pp. 137-143 (1998)を参照されたい
。下記のＵＶ−可視吸収の研究およびLC−質量スペクトル研究は、このシステイ
ンに対する化合物の効果を検討する目的でデザインされている。
【００３１】ＵＶ−可視吸収 ジニトロフルオロベンゼンのようなハロゲン化ニトロアリールによるタンパク
質中の反応性残基の共有改質により、３３０〜３６０nmの吸収が増加する。Mean
s and Feeney, 「タンパク質の化学改質(Chemical Modification of Proteins)
」，７章，１１８〜１２３頁（Holden-day, １９７１年）を参照されたい。下記
の実験では、受容体タンパク質および例１の化合物のスペクトル（緩衝液Ａ中）
を別々に得た。 バックグラウンドを差し引いて、二つのスペクトルを加え合わ
せ、未反応試料の複合スペクトルを得た（それぞれのパネルで低い方の曲線）。
次に、例１の化合物を受容体試料に加え、処理した受容体のスペクトルを得た（
上方の曲線）。下記に示すように、５μMのPPARγLBDを５μM（１当量）の例１
の化合物で処理すると、３５０nmに中心のある吸光度が増加し、タンパク質の共
有改質と一致した。吸光度変化は速やかであり、最大増加は、試料を混合し、ス
ペクトルの記録を開始するのに要する時間に起こった。
【００３２】 ＰＰＡＲγ および 例１の化合物
【００３３】 PPAR-γで観察された結果とは対照的に、下記に示すように、未関連エストロ
ゲンと受容体βのLBD１０μＭを例１の化合物１０μＭで処理したときには、吸
光度の変化は見られなかった。
【００３４】 エストロゲン受容体 および 例１の化合物
【００３５】LC−質量スペクトル 例１の化合物による処理がPPARγの共有改質を生じることを直接立証するため
、受容体の試料を化合物に暴露し、高圧液体クロマトグラフィー−電気スプレー
イオン化質量スペクトル分析法を行った。第二の未処理の受容体試料は、コント
ロールとして用いた。処理した試料は、例１の化合物からＨＣｌを差し引いた分
子量に相当するコントロールと比較して分子量の増加を示した。改質PPARγの試
料を、タンパク質分解酵素Glu-cにより消化した。質量スペクトル分析法を用い
る生成ペプチドのシークエンシングにより、Cysが改質の部位として確認された
。
【００３６】脂肪細胞分化（脂肪形成）分析法 継代が２２以下のC3H10T1/2クローン８ネズミ繊維芽細胞(American Type Cult
ure Collection)を、１０％ウシ胎児血清、および１００単位／mlのペニシリン
Ｇおよび１００μg/mlのストレプトマイシンを補足したダルベッコー（Dulbecoo
）改質イーグル培地(Life Technologies, Inc.)に保持した。９６穴マイクロタ
イタープレート中で継代して１日後に（１２．５×１０３個／cm２）、細胞を１
５０nMロジグリタゾンに１μMインスリンおよび１μMの９−シス−レチン酸（Si
gma, セントルイス, ミズーリ）を加えたもので処理した。ビヒクル、または試
験化合物であって、DMSOに可溶化して１０mMとした後、1e-５M〜1e-１０Mまで培
地で連続希釈したものを加えた。７日後、細胞を０．０１％ジギトニン（Sigma,
セントルイス, ミズーリ）中でリーシスし、脂質生成活性をグリセロール−ト
リグリセリド（GPO-Trinder）キット（337-B，Sigma, セントルイス, ミズーリ
）を用いて総トリグリセリドを測定することによって決定した。混合物を３７℃
２時間インキュベーションし、吸光度を５５０nmで読取った。脂質生合成の最大
阻害％を、ビヒクルで処理した細胞に対して計算した。例１は、この脂質細胞分
化分析法において１５０nMロジグリタゾンによって誘導される脂質生合成の阻害
率は＞５０％であった。
【００３７】 下記の二つの例を調製し、それぞれCARおよびLXRへの結合およびアリール化に
有用である。
【００３８】例６： Ｎ−（１−トリシクロ［３．３．１．１３，７］デス−１−イルエチル ）−２−クロロ−５−ニトロ−ベンズアミド 標記化合物を調製し、CARへの結合およびアリール化に用いる。CARについての
情報については、例えば、Forman, B.M. et al., Nature (1998), 395, 612-615
を参照されたい。
【００３９】例７： Ｎ−（２−エトキシフェニル）−Ｎ−（６−ブロモ−１Ｈ−ベンズ［de ］イソキノリン−１，３（２Ｈ）−ジオキソ−エト−２−イル）−２−クロロ− ５−ニトロ−ベンズアミド 標記化合物を調製し、LXRへの結合およびアリール化に用いる。LXRについての
情報については、例えば、Peet, D.J. et al., Curr. Opin. Genet. Dev., (199
8), 8, 571-575を参照されたい。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 19/10 Ａ６１Ｐ 19/10 43/00 １１１ 43/00 １１１ Ｃ０７Ｃ 235/56 Ｃ０７Ｃ 235/56 Ｃ０７Ｄ 221/14 Ｃ０７Ｄ 221/14 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ， ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｒ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ， ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，Ｋ Ｒ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ， ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，Ｓ Ｉ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 スティーブン、ジェラード、ブランチャー ド アメリカ合衆国ノースカロライナ州、リサ ーチ、トライアングル、パーク、ピー．オ ー．ボックス、13398、ファイブ、ムーア、 ドライブ、グラクソスミスクライン内 (72)発明者 ジェフリー、エドムンド、コブ アメリカ合衆国ノースカロライナ州、リサ ーチ、トライアングル、パーク、ピー．オ ー．ボックス、13398、ファイブ、ムーア、 ドライブ、グラクソスミスクライン内 (72)発明者 ジョン、ローレン、コリンズ アメリカ合衆国ノースカロライナ州、リサ ーチ、トライアングル、パーク、ピー．オ ー．ボックス、13398、ファイブ、ムーア、 ドライブ、グラクソスミスクライン内 (72)発明者 ティモシー、マーク、ウィルソン アメリカ合衆国ノースカロライナ州、リサ ーチ、トライアングル、パーク、ピー．オ ー．ボックス、13398、ファイブ、ムーア、 ドライブ、グラクソスミスクライン内 Ｆターム(参考） 4C034 CG02 CG07 CG13 4C086 AA01 AA02 AA03 BC30 MA01 MA04 NA14 ZA70 ZA89 ZA97 ZC42 4C206 AA01 AA02 AA03 GA07 GA23 GA31 MA01 MA04 NA14 ZA70 ZA89 ZA97 ZC42 4H006 AA01 AA03 AB20 BJ50 BM30 BM71 BM72 BM74 BP30 BU26 BV74

Claims (18)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 下式IAまたはIBの化合物。 【化１】 （上記式中、 Ｘはハロゲンであり、 Ｒ１はＨまたは−ＯＣＨ３であり、 Ｒ２は分子量が５００ダルトン未満の疎水性有機基であり、 Ｒ３はＨ、Ｃ１〜６アルキル、または必要に応じてＣ１〜３アルキル、Ｃ１〜 ３ アルコキシ、およびハロゲンから選択される１または２個の基で置換されたフ
    ェニルである）。
  2. 【請求項２】 ＸがＣｌ、ＦまたはＢｒである、請求項１に記載の化合物。
  3. 【請求項３】 Ｒ２が 【化２】 （上記式中、 Ｒ５およびＲ４は、独立して水素またはハロゲンである）、または −Ｃ１〜３アルケニル−アダマンチルである、請求項１に記載の化合物。
  4. 【請求項４】 Ｒ５およびＲ４がいずれもＨであるか、いずれもクロロであるか、または一方
    がＨであり、一方がヨードである、請求項３に記載の化合物。
  5. 【請求項５】 Ｒ３が水素、一置換または未置換フェニル、またはＣ１〜３アルキルである、
    請求項１に記載の化合物。
  6. 【請求項６】 Ｒ３がＨである、請求項１に記載の化合物。
  7. 【請求項７】 Ｎ−フェニル−２−クロロ−５−ニトロ−ベンズアミド、 Ｎ−（２，４−ジクロロフェニル）−２−クロロ−5−ニトロ−ベンズアミド、 Ｎ−（４−ヨードフェニル）−２−クロロ−５−ニトロ−ベンズアミド、 Ｎ−フェニル−２−クロロ−４−メトキシ−５−ニトロ−ベンズアミド、 Ｎ−フェニル−２−フルオロ−５−ニトロ−ベンズアミド、 Ｎ−（１−トリシクロ［３．３．１．１３，７］デス−１−イルエチル）−２−
    クロロ−５−ニトロ−ベンズアミド、および Ｎ−（２−エトキシフェニル）−Ｎ−（６−ブロモ−１Ｈ−ベンズ［de］イソキ
    ノリン−１，３（２Ｈ）−ジオキソ−エト−２−イル）−２−クロロ−５−ニト
    ロ−ベンズアミド からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
  8. 【請求項８】 Ｎ−フェニル−２−クロロ−5−ニトロ−ベンズアミドである、請求項１に記
    載の化合物。
  9. 【請求項９】 特定の疾患または疾病を特定の核内受容体と関連づける方法であって、該受容
    体中のシステインをアリール化する段階を含んでなる、方法。
  10. 【請求項１０】 システインが前記受容体のリガンド結合ドメイン内にある、請求項９に記載の
    方法。
  11. 【請求項１１】 前記アリール化が請求項１に記載の化合物を前記核内受容体に結合することを
    含んでなる、請求項９に記載の方法。
  12. 【請求項１２】 前記受容体がPPARγ、LXRまたはCARである、請求項９に記載の方法。
  13. 【請求項１３】 前記受容体のリガンド結合ドメイン内にあるシステイン残基をアリール化する
    段階を含んでなる、核内受容体の活性を阻害する方法。
  14. 【請求項１４】 前記のアリール化の段階が請求項１に記載の化合物を前記リガンド結合ドメイ
    ンに結合させることを含んでなる、請求項１３に記載の方法。
  15. 【請求項１５】 前記受容体がPPARγ、LXRまたはCARである、請求項１４に記載の方法。
  16. 【請求項１６】 請求項９に記載の方法によって特定の核内受容体と関連づけた特定の疾患また
    は疾病の予防または治療法であって、前記受容体を活性化しまたは不活性化する
    化合物の治療上有効量を投与することを含んでなる、方法。
  17. 【請求項１７】 請求項９に記載の方法によって特定の核内受容体と関連づけた特定の疾患また
    は疾病の治療用の医薬品を製造するための、特定の核内受容体を活性化しまたは
    不活性化する化合物の使用。
  18. 【請求項１８】 前記受容体がPPARγ、LXRまたはCARである、請求項１６に記載の方法または請
    求項１７に記載の使用。
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