JP2002537274A

JP2002537274A - 固定化した標識配合物および方法

Info

Publication number: JP2002537274A
Application number: JP2000599428A
Authority: JP
Inventors: ポラック，アルフレッド; ロウ，デビッド; ルー，リンダ・ファン・リン; ゾーンバック，ジョン; ポロック，キャサリーン・ミッシェル
Original assignee: ブラッコインターナショナルベスローテンフエンノートシャップ
Priority date: 1999-02-17
Filing date: 1999-08-03
Publication date: 2002-11-05
Also published as: WO2000048639A1; DE69922052T2; EP1154803A1; DE69922052D1; CA2362860A1; EP1154803B1; AU5142899A; US7320784B1; ATE282435T1

Abstract

(57)【要約】本発明は、コンジュゲートを金属で標識するための方法および配合物であって、コンジュゲートを支持体表面に結合させる工程；錯生成金属を支持体に導入する工程；および支持体から離脱した金属−コンジュゲート錯体を採集する工程を含む方法を含む。金属は錯体生成に際し支持体からのコンジュゲートの開裂を触媒し、非標識コンジュゲートを実質的に含まない溶液が得られる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】発明の分野本発明は、金属−配位子錯体の生成に有用な配合物および方法に関する。これ
らの金属標識薬剤は放射線療法に、また医療診断における造影剤として有用であ
る。

【０００２】背景診断用造影技術は、体内で部位選択的に結合または局在化して診断対象の画像
を解像する補助となる配合物を利用する。診断用造影剤は、生体受容体のターゲ
ティングおよび造影に有効である。これらの診断用造影剤には、放射性核種金属
、たとえばテクネチウムおよびレニウムが含有される。これらの放射性核種金属
は、人体の目的領域に局在化するターゲティング分子、たとえばタンパク質、ペ
プチドおよび抗体を標識するために用いられる。これらの薬剤の局在化をガンマ
カメラ分析により検出する。ターゲティング剤として、タンパク質およびペプチ
ドは診断精度に必要な組織特異性を提供できる。

【０００３】金属原子によるこれらの診断薬の標識は、それらの化学構造のため困難である
。一般的な標識法は、過剰の配位子の溶液中で金属錯体を形成するものであり、
これにより一般に高濃度の非標識配位子が生じる。たとえばテクネチウム標識反
応では１０００以上の非標識配位子につき約１個の標識配位子が得られる。多く
の放射性診断薬について、限定された数の結合部位、すなわち受容体があり、こ
れらに対して標識診断薬と非標識診断薬の両方が競合する。このため結合部位に
対して過剰の非標識配位子が標識配位子と競合するので、貧弱な造影となる。そ
の結果、許容できる画像を得るためには大量の薬剤を投与する必要がある。患者
に大量の薬剤を投与すると、不都合な作用が生じる可能性がある。ターゲティン
グ分子が特定の部位に結合または局在化すると、しばしば生理学的変化を引き起
こす。たとえばターゲティング分子は、受容体に結合して受容体活性をアゴナイ
ズまたはアンタゴナイズするペプチドであってもよい。非標識ペプチドでも受容
体活性をアゴナイズまたはアンタゴナイズする生理学的作用は生じるであろうが
、金属標識ペプチドがもつ利点は得られないであろう。

【０００４】現在、投与前に溶液中の標識薬剤の濃度を高めるために高速液体クロマトグラ
フィー（ＨＰＬＣ）が用いられている。この分離工程は濃度は高めるが、付加的
な時間および経費を必要とする。このためこの方法は臨床用としては実用的でな
い。

【０００５】生物学的ターゲティング分子を放射性核種金属で標識する方法はＵＳＰ５，７
８９，５５５に記載されている。この方法は、生物学的ターゲティング分子のキ
レート形成性部分を金属開裂性マレイミドリンカーにより固体支持体に共有結合
させる工程を伴う。放射性核種金属を導入すると、それは生物学的ターゲティン
グ分子のキレート形成性部分とキレート化する。その結果、生物学的ターゲティ
ング分子は支持体から離脱し、標識された生物学的ターゲティング分子が得られ
る。この方法で、高い標識分子対非標識分子比（比放射能）が得られる。しかし
リンカーの使用は、リンカーを支持体に結合させる余分な工程を必要とする。し
たがってリンカーが必要であることはこの方法の欠点である。

【０００６】多くの標識法が遊離チオールの形成を必要とする。チオールは互いに反応して
ジスルフィドを形成する傾向がある。表面に結合する生成物を減らすジスルフィ
ド形成を避けるためには余分な注意が必要であり、放射性標識前に余分な精製が
必要となる。

【０００７】多くの金属キレート化剤がキレート化機能に関与する硫黄原子を含有する。硫
黄原子は一般に保護基の使用により非反応性にされる。そのひとつはアセトアミ
ドメチルである。硫黄はアセトアミドメチル基で保護される。遊離チオールを得
るためには硫黄保護基を除去しなければならない。アセトアミドメチル保護基は
酢酸水銀の使用により硫黄から除去される。酢酸水銀が硫黄に配位すると、硫黄
はわずかに正の電荷をもち、キレート化剤を離脱しやすい基にする。過剰の酢酸
水銀は硫化水素との反応により除去される。酢酸水銀はかなり有毒である。した
がって硫黄を酢酸水銀で脱保護する必要があるのは不利である。

【０００８】ＵＳＰ５，７８９，５５５に記載される標識法は、多数の粒子からなる有機固
体支持体を利用する。これらの粒子は、結合していない標識された生物学的ター
ゲティング分子をのちに除去するために濾過するのが困難な可能性がある。ある
種の放射性核種金属はβ粒子を放射するので、これらの支持体は放射線分解しや
すい。そのほか、これらの支持体は化学的にも堅牢性でない。このため固体支持
体を殺菌することができない。殺菌はきわめて高い温度で実施されるからである
。

【０００９】したがって、リンカー基を必要とせずに１工程で標識できる、放射線核種金属
で生物学的ターゲティング分子を標識するための固体支持体が求められている。
高い化学的堅牢性、低い放射線分解性をもち、容易に殺菌および標識され、十分
に確立さた装填特性をもつ、放射性核種金属で生物学的ターゲティング分子を標
識するための固体支持体が求められている。さらに、保護されたチオール基を直
接に結合して結合チオールを形成し、このためジスルフィドの形成が避けられる
固体支持体が求められている。

【００１０】さらに、水銀の代わりに表面を使用し、このため硫黄原子の脱保護のために酢
酸水銀を使用する必要またはのちに除去する必要のない、改良された方法が求め
られている。幾つかの合成工程および反応溶液中の水銀の存在が避けられる系が
求められている。

【００１１】発明の概要本発明は、高い比放射能をもつ金属標識された造影剤および放射性医薬配合物
の調製方法を含む。本発明は、支持体表面（好ましくは金）にこの表面に結合す
る分子基を介して結合したペプチド（たとえばジメチルグリシルセリニルシステ
イニルグリシン）または他の有機分子を標識することを含む。表面結合性分子は
、好ましくはシステイン（このシステインは最終的には金属キレートの一部とな
るであろう）の硫黄基である。ペプチドを金属（好ましくは放射性同位体、たと
えば^99mＴｃ）で標識する際、キレート化剤への（したがってシステインの硫黄
への）金属の錯化により金−システイン結合が弱くなり、その結果、金属錯化ペ
プチドが表面から離脱して溶液中へ移動する。錯化していないペプチドは金表面
に残留する。表面からのこの選択的開裂の結果、キャリヤーを添加しなくても放
射性標識ペプチドが生成し、高い比放射能の配合物が得られる。

【００１２】本発明の１態様によれば、硫黄をまず酢酸水銀で脱保護して遊離チオールを生
成させる。次いでこの脱保護ペプチドを金に添加する。しかし金表面でも結合チ
オールをｉｎｓｉｔｕ形成させることができる。したがって本発明の他の態様
によれば、結合チオールをｉｎｓｉｔｕ生成するための新規方法を用いる。こ
の方法により、酢酸水銀を用いる必要なしに、保護された硫黄基を脱保護できる
。

【００１３】高い比放射能をもつ放射性医薬を製造するためのこの方法は、ポリマー支持方
式の採用より優れた下記の利点をもたらす：・金属支持体表面の化学的堅牢性が高い・酢酸水銀の存在が除かれれる・遊離チオールを扱う必要性が避けられる・余分な合成工程が除かれる・結合チオールがｉｎｓｉｔｕ生成する・金属支持体表面の放射線分解が少なくなる・殺菌しやすい・ＨＳ−キレート化剤−ターゲティング分子が結合しやすい・装填特性が十分に特定される（表面積を変更しうるため）。

【００１４】本発明は、錯生成金属イオン標識薬剤を生成するのに有用な配合物であって、
金属支持体表面、ならびに支持体表面に離脱可能な状態で結合したコンジュゲー
トを含み、コンジュゲートが錯生成金属イオンに配位することができ、これによ
り支持体表面からコンジュゲートが離脱する配合物を含む。好ましい別態様にお
いて、コンジュゲートは配位子およびターゲティング分子を含み、配位子が（ａ）システインアミノ酸残基、システインアミノ酸残基誘導体、有機分子に
結合したチオールまたはチオエーテル基、リン含有アミノ酸残基誘導体、および
リン含有有機分子よりなる群から選択される表面結合基；これらにおいてアミノ
酸残基、アミノ酸残基誘導体または有機分子は支持体表面に離脱可能な状態で結
合できる；ならびに（ｂ）錯生成金属イオンに配位しうる少なくとも１つのアクセサリー基を含み、コンジュゲートが錯生成金属イオンに配位することができ、これによ
り支持体表面からコンジュゲートが離脱する。

【００１５】他の態様において本発明は、錯生成金属イオン標識した診断薬または放射線療
法薬の生成方法であって、（ａ）請求項１〜１８のいずれか１項に記載の配合物
を調製し；（ｂ）この配合物と錯生成金属イオンを接触させて、錯生成金属イオ
ンと薬剤の間に配位結合を形成させ、これにより錯生成金属標識薬剤を支持体表
面から離脱させる工程を含む方法を含む。

【００１６】本発明の１変法は、錯生成金属イオン標識した診断薬または放射線療法薬の生
成方法であって、コンジュゲートを金属支持体表面から錯生成金属イオンへキレ
ート交換させ、これによりコンジュゲートを金属支持体表面から離脱させる工程
を含む方法を含む。本発明は、錯生成金属イオン標識ペプチドの生成方法であっ
て、（ａ）下記のものを含むペプチド、ポリペプチド、ペプチド模倣体またはポ
リペプチド模倣体を、前記の残基または誘導体の硫黄原子またはリン原子により
金属支持体表面に結合させ：（ｉ）システインアミノ酸残基、システインアミノ
酸残基誘導体またはリン含有アミノ酸残基誘導体、および（ｉｉ）錯生成金属イ
オンに配位しうる少なくとも１つのアクセサリー基；そして（ｂ）ペプチド、ポ
リペプチドまたは模倣体を錯生成金属で標識してこれにより金属錯生成したペプ
チド、ポリペプチドまたは模倣体を支持体表面から離脱させることを含む方法を
も含む。本発明の他の態様は、錯生成金属イオン標識薬剤の調製方法であって、
（ａ）下記のものを含む有機分子を硫黄原子またはリン原子により支持体表面に
結合させ：（ｉ）硫黄原子またはリン原子、および（ｉｉ）錯生成金属イオンに
配位しうる少なくとも１つのアクセサリー基；そして（ｂ）薬剤を錯生成金属で
標識してこれにより金属錯体コンジュゲートを支持体表面から離脱させることを
含む方法に関する。

【００１７】本発明は、本発明方法により調製した錯生成金属イオン標識薬剤、ならびにそ
の薬剤を含有する組成物および医薬組成物をも含む。本発明は、テクネチウム金
属標識薬剤を含む組成物であって、９９ｍ−テクネチウムによる１０，０００Ｃ
ｉ／ｍｍｏｌより大きな比放射能、および１８８−レニウムによる３，０００Ｃ
ｉ／ｍｍｏｌより大きな比放射能を含む組成物をも含む。放射線療法または造影
のための医薬組成物であって、キャリヤーおよび錯生成金属イオン標識薬剤を含
み、薬剤がＨＰＬＣを用いずに調製された組成物も含まれる。

【００１８】本発明の他の態様は、錯生成金属イオン標識薬剤を調製するためのキットを含
む。このキットは、金属支持体表面、コンジュゲートおよび予め定めた量の錯生
成金属イオンを含む。コンジュゲートは支持体表面に離脱可能な状態で結合する
ことができ、かつ錯生成金属イオンに配位することができ、これによりコンジュ
ゲートが金属支持体表面から離脱する。

【００１９】本発明は、哺乳動物において疾病、障害もしくは異常な身体状態の存在を検出
し、またはその程度を評価する方法をも含む。この方法は、（ａ）有効量の錯生
成金属イオン標識薬剤の生成に有用な配合物を投与し；そして（ｂ）疾病、障害
もしくは異常な身体状態の存在を検出し、またはその程度を評価する工程を含む
。他の態様は、哺乳動物における疾病、障害または異常な身体状態の放射線療法
のための方法であって、有効量の錯生成金属イオン標識薬剤の生成に有用な配合
物を投与する工程を含む。

【００２０】本発明は、錯生成金属標識薬剤を調製するための支持体表面の製造方法であっ
て、適切な厚さの金属を、約１〜１０，０００ｃｍ²の適切な表面積をもつ粒子
、スポンジもしくはふるい、繊維、または表面の形で、無機系またはポリマー系
支持材上に電気金属めっきもしくは無電解金属めっきまたは蒸着することを含む
方法をも含む。

【００２１】発明の詳細な記述本発明は、コンジュゲートを支持体表面に結合させ、そしてこの固体支持体か
ら金属へコンジュゲートをキレート交換することにより、金属−配位子錯体の生
成プロセスを簡単にする。好ましい態様において、キレート交換は金からテクネ
チウムへ行われる。支持体表面は、好ましくは金、または金に類似する、金属開
裂性コンジュゲートへの結合特性をもつ元素（金は好ましくはＡｕ（ＩＩＩ））
を含有し、これにより金属標識放射線療法薬または造影剤を形成することができ
る。金に類似する特性をもつ金属には、銀および銅が含まれる。好ましくは支持
体表面は少なくとも５０％が金属、少なくとも９０％が金属、最も好ましくは実
質的に純粋な金属（すなわち少なくとも９９．９％が金属）である。支持体表面
は好ましくは固体であるが、半固体であってもよい（たとえば軟質プラスチック
または樹脂などの半固体上に金を蒸着させてもよい）。金属を支持体表面に導入
する工程により、金属−支持体表面錯体が形成されるだけでなく、結果的にこれ
らの錯体が支持体から離脱して、錯化していないコンジュゲートを実質的に含ま
ない形で採集される。これらのプロセスを図１（ａ）および１（ｂ）に示す。分
子を金に結合させるための材料および方法を記載した報文には下記のものが含ま
れる：Ｂａｉｎｅｔａｌ．，”溶液から金上への有機チオールの自然組立て
による単層フィルムの形成”，ＡｍｅｒｉｃａｎＣｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉ
ｅｔｙ，１１１，３２１−３３５（１９８９）；Ｌａｉｂｉｎｉｓｅｔａｌ
．，”コイン状金属表面、Ｃｕ、Ａｇ、Ａｕ上におけるｎ−アルカンチオールの
自己組立て単層の構造および湿潤性の比較”，ＡｍｅｒｉｃａｎＣｈｅｍｉｃ
ａｌＳｏｃｉｅｔｙ，１１３，７１５２−７１６７（１９９１）；Ｓａｓａｋ
ｉｅｔａｌ．，”システイン−金相互作用による機能性タンパク質の二次元
配置：金支持体上のタンパク質単層の酵素活性および特性解明”，Ｂｉｏｐｈｙ
ｓｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌ，Ｖｏｌ．７２，１８４２−１８４８（１９９７）
；Ｂａｉｎｅｔａｌ．，”金に吸着されたアルカンチオール単層の湿潤性と
構造の相関性”，ＡｍｅｒｉｃａｎＣｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔｙ，１１
０，３６６５−３６６６（１９８８）；これらの全体を参考として援用する。

【００２２】本発明によれば、金表面への結合により結合チオールのｉｎｓｉｔｕ形成も
可能となる。保護された硫黄原子が金表面に結合すると、図２に示すように保護
基が離脱する。

【００２３】配合物の態様本発明の１態様によれば、実質的に非標識造影剤を含まない金属標識造影剤を
生成させるのに有用な配合物が提供される。これらの配合物は、金属支持体表面
、およびこの支持体表面に離脱可能な状態で結合したコンジュゲートを含有する
。コンジュゲートは錯生成金属イオンと錯化することができ、これによりコンジ
ュゲートは支持体表面から離脱（キレート交換）する。コンジュゲートは、好ま
しくは配位子およびターゲティング分子を含有する。コンジュゲートは、好まし
くはペプチド、ポリペプチド、ペプチドもしくはポリペプチド模倣体（好ましく
は誘導体）、または有機分子である。本発明の対応するペプチドまたはポリペプ
チド化合物と同一または類似の目的とする生物学的活性をもち、ただし溶解度、
安定性、ならびに／あるいは加水分解またはタンパク質分解されやすさに関して
より好ましい活性をもつペプチド模倣体を構築する多様な技術があることは、当
業者に認識される。たとえばＭｏｒｇａｎａｎｄＧａｉｎｏｒ，Ａｎｎ．Ｒ
ｅｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２４：２４３−２５２（１９８９）参照。有機分子
は、好ましくは約６００ダルトン未満、より好ましくは約５００ダルトン未満の
分子量を有する有機低分子である。配位子はペプチド、ペプチド模倣体または有
機低分子であってもよい。配位子は好ましくは下記のものを含む：（ａ）システ
インアミノ酸残基、システインアミノ酸残基誘導体、有機分子に結合したチオー
ルまたはチオエーテル基、リン含有アミノ酸残基誘導体、およびリン含有有機分
子よりなる群から選択される表面結合基；これらにおいてアミノ酸残基、アミノ
酸残基誘導体または有機分子は支持体表面に離脱可能な状態で結合できる；なら
びに（ｂ）錯生成金属イオンに配位しうる少なくとも１つのアクセサリー基。本
発明の変法においては、１以上のアクセサリー基がターゲティング分子中にあっ
てもよい。コンジュゲートは錯生成金属イオンに配位することができ、これによ
り支持体表面からコンジュゲートが離脱する。コンジュゲートは、好ましくはボ
ムベシン（ｂｏｍｂｅｓｉｎ）７〜１４フラグメント、ＱＷＡＶＧＨＬＭ、ＴＫ
ＰＰＲ、ＲＧＤＳ、シクロプロピルカルボニル−ｎＬｅ−Ｌ−Ｆ−Ｗ−Ｅ−Ｋ（
ＧＣＳＤＭＧ）−Ｇ、抗体（好ましくはモノクローナル抗体またはポリクローナ
ル抗体）、抗体フラグメント、または受容体もしくははトランスポーターをター
ゲティングする有機低分子を含む。

【００２４】前記配合物はリンカー、好ましくはターゲティング分子とコンジュゲートを結
合する生物学的に不活性な有機残基を含有してもよい。適切なリンカーは、３〜
１００原子のアルキル、ポリエーテル、芳香族またはポリ芳香族化合物である。

【００２５】これらの配合物は実質的に非標識薬剤を含まないので、きわめて高い比放射能
をもつ組成物（好ましくは造影剤組成物または放射線療法用医薬組成物）を生成
するのに有用である。

【００２６】配位子の定義 ”配位子”という用語は、少なくとも１つの表面結合基を含む化合物を表す。
表面結合基は、支持体表面に離脱可能な状態で結合する硫黄またはリン原子（ま
たは類似の結合特性をもつ原子）を含む。好ましい態様においてこの原子は、金
に結合してスルフィドとなることができる硫黄である。配位子は、特定の錯生成
金属と配位結合を形成することができこれによって安定な金属−配位子錯体を形
成する、少なくとも１つのアクセサリー基、好ましくは少なくとも３つのアクセ
サリー基をも含む。配位子は、好ましくは下記よりなる群から選択される３つの
アクセサリー基を含む：（ａ）アミノ酸残基に含まれる窒素原子、酸素原子もし
くは硫黄原子、（ｂ）アミノ酸残基誘導体に含まれる窒素原子、酸素原子、セレ
ン原子、リン原子もしくは硫黄原子、または（ｃ）有機分子に含まれる窒素原子
、酸素原子、セレン原子、リン原子もしくは硫黄原子、または（ｄ）（ａ）〜（
ｃ）のうち１以上の組合わせ；これらの原子は金属配位活性をもつ。

【００２７】配位子が１つのアクセサリー基および表面結合基を含む場合、配位子は”キレ
ート化剤（ｃｈｅｌａｔｏｒ）”と呼ぶことができる。２以上のアクセサリー基
および表面結合基を含む配位子（多座配位子と呼ぶ）は、一般に一座配位子の場
合より安定な金属−配位子錯体を形成するので好ましい。放射性核種に結合する
多くの配位子が４個の窒素および硫黄金属配位原子の組み合わせ（すなわちＮ₃
ＳおよびＮ₂Ｓ₂）を含有する四座配位子であるが、それらは他の金属配位原子、
たとえば酸素、リンおよびセレンを含んでもよい（たとえば図１（ａ）参照）。
本発明の好ましい配位子は、表面結合原子硫黄および少なくとも３個の窒素原子
を含む分子を包含する（たとえば図１（ｂ）参照）。配位子には、好ましくは四
座Ｎ_xＳ_4-x配位子、四座Ｎ_xＳ_4-x配位子誘導体、ポリアミノポリスルフィドおよ
びポリアミノポリスルフィド誘導体よりなる群から選択されるペプチドが含まれ
る。

【００２８】放射線療法および診断用造影のためには、インビボでの金属錯体の安定性がき
わめて高く、このため実質量で配位子から金属が離脱して組織に蓄積しないこと
が特に望ましい。本発明は、ＰＣＴ／ＣＡ９４／００３９５に記載のＮ₃Ｓキレ
ート化剤、およびＰＣＴ／ＣＡ９４／００４７９に記載のＮ₂Ｓ₂キレート化剤な
ど、多様な配位子に適用できる。好ましい配位子は、金属への結合のためのペン
ダントスルフヒドリル基を含むペプチドまたはその誘導体である。適切なペプチ
ド系キレート化剤はＷＯ９３１７７１９に記載されるもの、すなわちターゲティ
ング分子、特に同様にペプチド系のターゲティング分子に結合しやすいものであ
る。１態様において、本発明は固有のターゲティング特性をもつ標識配位子に適
用される。放射線診断用造影に利用できるそのような配位子の１つは、メルカプ
ト−アセチル−グリシル−グリシル−グリシン（ＭＡＧ３）である。これは腎組
織に局在化し、本発明方法により標識して腎臓の造影剤または放射線療法薬を調
製することができる。ＭＡＧ３は、３個の配位性窒素原子および１個の配位性硫
黄原子をもつＮ₃Ｓクラスの配位子である。

【００２９】ターゲティング分子本発明の配合物に用いるのに適したターゲティング分子は、インビボで造影部
位、たとえば特定の臓器、組織または細胞タイプに選択的に局在化させることが
できる化合物である。適切なターゲティング分子には、ポリペプチド、ペプチド
、核酸分子、オリゴヌクレオチド、糖類、オリゴ糖類、ステロイド、環状ペプチ
ド、ペプチドまたはポリペプチド模倣体、酵素基質、阻害薬および有機低分子が
含まれる。好ましいターゲティング分子には、ポリペプチドおよびペプチド、特
に特定の病理に特徴的な細胞表面受容体に特異的に結合できるものが含まれる。
ターゲティング分子は、好ましくはアゴニスト活性またはアンタゴニスト活性を
もつ分子である。ターゲティング分子は、好ましくはボムベシン７〜１４フラグ
メント、ＱＷＡＶＧＨＬＭ、ＴＫＰＰＲ、ＲＧＤＳ、および受容体またはトラン
スポーターをターゲティングする有機低分子よりなる群から選択される分子が含
まれる。受容体またはトランスポーターは、好ましくはドーパミン受容体または
トランスポーター、セロトニン受容体またはトランスポーター、シグマ受容体、
ＧＡＢＡ受容体、ニコチン受容体、コリン作動性受容体、ノルエピネフリン受容
体またはトランスポーター、グルコーストランスポーター、およびオピオイド受
容体である。他の好ましいターゲティング分子は、細胞表面受容体に結合する３
個以上のアミノ酸残基を含むペプチド、ポリペプチドまたは誘導体、たとえばＰ
ＣＴ／ＣＡ９４／００３９５に記載のものである。好ましくは、ターゲティング
分子は約３〜１０００、３〜５００、３〜１００、３〜５０個のアミノ酸残基、
より好ましくは３〜１０または３〜６個のアミノ酸残基を含むペプチドである。
炭素原子約６〜５００、６〜２５０、６〜１００個、より好ましくは炭素原子約
６〜５０、または６〜２５個の有機低分子も有用なターゲティング分子である。
１態様において、ターゲティング分子は細胞表面受容体に結合する走化性ペプチ
ド、特にアミノ酸配列シクロプロピルカルボニル−ｎＬｅ−Ｌ−Ｆ−Ｗ−Ｅ−Ｋ
（ＧＣＳＤＭＧ）−Ｇを含む走化性ペプチドである。

【００３０】本発明の具体的な方法態様においては、ターゲティング分子自体が金属結合部
位、たとえばペンダントスルフヒドリル基を含まないことが望ましい。ターゲテ
ィング分子がシステイン残基中にみられるペンダントスルフヒドリル基などの金
属結合部位を備えている、この方法で標識した配位子−ターゲティング分子コン
ジュゲートは、１）その局在化活性の一部または全部を失う可能性があり、また
２）インビボで金属を離脱させ、これによりバックグラウンドノイズを高め、画
像を隠蔽する可能性がある。

【００３１】ペプチド系の配位子および／またはターゲティング分子は市販されており、あ
るいは固相法または組換えＤＮＡ法により新たに合成できる。固相ペプチド合成
には一般に自動合成装置および固相として適した支持体を用い、固相に目的ペプ
チドのＣ末端アミノ酸を結合させる。次いで適切に保護された形の次の目的アミ
ノ酸を通常ＦＭＯＣ系またはＢＯＣ系化学プロトコルにより合成が完了するまで
順に結合させることによって、ペプチドをＮ末端方向へ延長する。次いで、通常
は支持体からのペプチドの開裂と同時に保護基をペプチドから開裂させ、次いで
ペプチドを単離する。一般的な精製法には、溶剤としてのアセトニトリルおよび
イオン対合剤としてのトリフルオロ酢酸を用いる逆相ＨＰＬＣが含まれる。方法
は多数の刊行物に記載されている。ＳｔｅｗａｒｔａｎｄＹｏｕｎｇ，ＳｏｌｉｄＰｈａｓｅＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ，第２版（および後
続版），１９８４，ＰｉｅｒｃｅＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｍｐａｎｙ，イリノ
イ州ロックフォードが参照され、その全体を参考として援用する。あるいはペプ
チドを小ブロックとして溶液中または固相上で合成し、その後ライゲートさせて
目的配列を得ることもできる。遺伝子コードされないアミノ酸を含むペプチドは
、製造のために合成法を必要とする。

【００３２】支持体 ”支持体表面”という用語は、標識溶液中で不溶性かつ不活性である任意の支
持体を表す。これは金属支持体表面であり、金、銀もしくは銅、または標識薬剤
の調製に際して金属錯生成のために硫黄またはリンを離脱可能な状態で結合およ
び配位しうる金属で作製またはコーティングされる。金属でコーティングしうる
適切な化合物には、無機ケイ酸ガラス、アルキルアミノ官能化した制御多孔ガラ
ス、シリカまたはアルミナビーズ、および有機ポリスチレン、ポリアクリルアミ
ドまたは糖ポリマー、たとえばＳｅｐｈａｄｅｘおよびアガロースが含まれる。
支持体表面は、粉末、固体金属片、チューブに入れたボール、または容器内面の
コーティングとして供給されてもよい。金属−配位子錯体の生成のために、金属
支持体は錯体溶液の通過、採集および濾過を容易に行えるカラム内にあってもよ
い。

【００３３】本発明は、錯生成金属標識薬剤を調製するための支持体表面の製造方法であっ
て、適切な厚さの金属を、約１〜１０，０００ｃｍ²の適切な表面積をもつ粒子
、スポンジもしくはふるい、繊維、または表面の形で、好ましくは無機系または
ポリマー系支持材上に電気金属めっきもしくは無電解金属めっきまたは蒸着する
ことを含む方法も含む。金属支持体表面の金属の厚さは、好ましくは約１０ｎｍ
より大きい。

【００３４】金属 ”錯生成金属”という用語は、配位子の金属配位原子と安定な配位結合を形成
しうる状態にある任意の金属原子を表す。錯生成金属には、遷移金属、ランタニ
ド金属およびアクチニド金属が含まれる。放射線療法剤または造影剤の調製に有
用な錯生成金属は、好ましくはＴｃ、Ｒｅ、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｚｎ、Ｃ
ｄ、Ｍｏ、Ｗ、Ｃｕ、Ａｇ、Ａｕ、Ｔｉ、Ｈｇ、ＣｒおよびＲｈの金属（または
その放射性同位体）である。

【００３５】ＭＲＩのためには、錯生成金属は常磁性金属原子、たとえば二価および三価の
クロム、マンガン、鉄、コバルト、ニッケル、銅、サマリウムであってもよい。
より好ましいＭＲＩ用錯生成金属は、強い磁気モーメントを示すもの、たとえば
マンガンである。

【００３６】これらの錯生成金属のハライド塩、特にクロリド塩、または酸化物は、目的配
位子と錯生成しうる形であり、本発明に適する。放射性核種で標識した造影剤は
、β−放射性物質、たとえばレニウム−１８６および−１８８；ならびにγ−放
射性物質、たとえばテクネチウム−９９ｍを含めた錯生成金属同位体を用いる。
放射線診断用造影に最も好ましい錯生成金属は、６時間というその有利な半減期
およびモリブデン−９９発生装置から安価に製造できることにより、テクネチウ
ム−９９ｍである。テクネチウムおよびレニウム標識は、当技術分野で確立して
いる方法により行うことができる。いずれの錯生成金属も水溶液中において、オ
キソ、ジオキソまたはニトリドの形、たとえばペルテクネテート（ｐｅｒｔｅｃ
ｈｎｅｔａｔｅ）（^99mＴｃＯ₄ ^-）またはペルレネート（ｐｅｒｒｈｅｎａｔｅ
）の形で、適切な還元剤、たとえば塩化スズ（ＩＩ）と共に配位子に導入できる
。テクネチウムを電気化学的還元により還元することもできる。あるいは、放射
線診断薬はキレート交換反応により形成することもできる。これによれば、弱い
金属錯体、たとえばテクネチウム−グルコネート、ヘプタグルコネート、タルト
レートまたはシトレートの形の錯生成金属を用いて目的とする標識配位子を得る
ことができる。キレート交換反応は、テクネチウムの弱い錯体から配位子との錯
体への変換を促進するために、一般にたとえば沸騰熱水浴中で加熱される。

【００３７】方法の態様本発明方法によれば、配位子−ターゲティング分子コンジュゲートを錯生成金
属で標識して、非標識コンジュゲートを実質的に含まない溶液を得ることができ
る。錯生成金属標識コンジュゲートである診断薬または放射線療法薬を調製する
方法は、コンジュゲートを金属支持体表面から錯生成金属イオンへキレート交換
し、これによりコンジュゲートを支持体表面から離脱させることを含む。一般に
この方法は、コンジュゲートが金属開裂性−表面結合基を介して支持体表面に結
合した配合物を得る工程；錯生成金属を支持体に導入する工程；および支持体か
ら離脱した標識コンジュゲートを採集する工程を含む。この方法で、錯生成金属
は配位子の表面結合基およびアクセサリー基（１以上）と配位結合を形成し、こ
れにより配位子原子と支持体の間の結合を開裂する。その結果、標識コンジュゲ
ートのみが支持体から離脱する。錯生成金属標識薬剤は、９９ｍ−テクネチウム
による＞約１０，０００Ｃｉ／ｍｍｏｌ、および１８８−レニウムによる＞約３
，０００Ｃｉ／ｍｍｏｌという、きわめて高い比放射能をもつ。

【００３８】好ましい１態様において、錯生成金属標識したコンジュゲート診断薬または放
射線療法薬の調製方法は、（ａ）本明細書に記載の適切な配合物を調製し；（ｂ
）この配合物と錯生成金属イオンを接触させて、錯生成金属イオンと薬剤の間に
配位結合を形成させ、これにより錯生成金属標識薬剤を支持体表面から離脱させ
ることを含む。好ましくは、この方法は、こうして離脱した錯生成金属標識薬剤
を採集することを含む。

【００３９】他の態様においては、結合チオールのｉｎｓｉｔｕ形成のために金表面を用
いる。これにより、その後のキット形成に不都合な数工程が除かれる。これらの
工程は確実に殺菌するのを困難にする。

【００４０】錯生成金属イオン標識薬剤（たとえばペプチドまたはポリペプチド）を調製す
るための好ましい方法は、（ａ）下記のものを含むペプチド、ポリペプチド、ペ
プチド模倣体またはポリペプチド模倣体を、前記の残基または誘導体の硫黄原子
またはリン原子により金属支持体表面に結合させ：（ｉ）システインアミノ酸残
基、システインアミノ酸残基誘導体またはリン含有アミノ酸残基誘導体、および
（ｉｉ）錯生成金属イオンに配位しうる少なくとも１つのアクセサリー基；そし
て（ｂ）ペプチド、ポリペプチドまたは模倣体を錯生成金属で標識してこれによ
り金属錯生成したペプチド、ポリペプチドまたは模倣体を支持体表面から離脱さ
せることを含む。ペプチド、ポリペプチド、ペプチド模倣体またはポリペプチド
模倣体は、好ましくは約３〜５０アミノ酸残基またはアミノ酸残基誘導体である
。

【００４１】錯生成金属イオン標識した有機分子を調製するための好ましい方法は、（ａ）
下記のものを含む有機分子を、硫黄基またはリン原子により支持体表面に結合さ
せ：（ｉ）硫黄原子またはリン原子、および（ｉｉ）錯生成金属イオンに配位し
うる少なくとも１つのアクセサリー基；そして（ｂ）薬剤を錯生成金属で標識し
てこれにより金属錯体コンジュゲートを支持体表面から離脱させることを含む。
有機分子は、好ましくは約６〜１００個の炭素原子を含む。

【００４２】好ましい支持体表面は前記のものであり、金、銀、銅、および金属イオン標識
薬剤生成のために硫黄またはリンを離脱可能な状態で結合しうる金属が含まれる
。錯生成金属は、好ましくはＴｃ、Ｒｅ、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｚｎ、Ｃｄ
、Ｍｏ、Ｗ、Ｃｕ、Ａｇ、Ａｕ、Ｔｉ、Ｈｇ、ＣｒおよびＲｈの群からの金属ま
たは放射性同位体の形の金属である。

【００４３】本発明は、本発明方法により調製した錯生成金属イオン標識薬剤製品をも含む
。医薬組成物本発明は、本発明方法により調製した薬剤を含有する組成物、好ましくは放射
線療法または造影用の医薬組成物をも含む。本発明の薬剤および組成物は、好ま
しくはＨＰＬＣを用いずに調製される。本発明は、９９ｍ−テクネチウム金属標
識薬剤（好ましくは金支持体表面で調製）を含む薬剤（本発明方法または他の任
意の方法で調製）を含有する組成物であって、９９ｍ−テクネチウムによる約１
０，０００Ｃｉ／ｍｍｏｌより大きな比放射能、または１８８−レニウムによる
約３，０００Ｃｉ／ｍｍｏｌより大きな比放射能を含む組成物を提供する。薬剤
は、好ましくはペプチド、たとえばジメチルグリシルセリニルシステイニルグリ
シン、もしくはポリペプチド、またはその模倣体（好ましくは誘導体）である。
医薬組成物は既知の方法で配合できる。

【００４４】本発明は、哺乳動物において疾病、障害もしくは異常な身体状態の存在を検出
し、またはその程度を評価する方法であって、（ａ）本発明の薬剤または組成物
を投与し；そして（ｂ）疾病、障害もしくは異常な身体状態の存在を検出し、ま
たはその程度を評価することを含む方法を含む。疾病、障害もしくは異常な身体
状態の存在または程度は、陽電子放射断層撮影法、核磁気共鳴造影法、シンチグ
ラフィー、単光子放射コンピューター断層撮影法、潅流造影剤心エコー検査法、
超高速Ｘ線コンピューター断層撮影法およびディジタルサブトラクション血管撮
影法よりなる群から選択される方法で検出または評価される。好ましくは、薬剤
は^99mＴｃ金属を含み、受容体に結合し、その方法は単光子放射コンピューター
断層撮影法である。造影のための適切な方法および材料は下記に記載されている
：ＨａｎｄｂｏｏｋｏｆＮｕｃｌｅａｒＭｅｄｉｃｉｎｅ，第２版，１９
９３，ＭｏｓｂｙＰｒｅｓｓ，ＦｒｅｄｅｒｉｃＩ．Ｄａｔｚ；Ｆｕｎｄａ
ｍｅｎｔａｌｓｏｆＮｕｃｌｅａｒＰｈａｒｍａｃｙ，第３版，１９９２
，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，ＧｏｐａｌＢ．Ｓａｈａ；Ｐｒｉｎｃｉ
ｐｌｅｓａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅｏｆＮｕｃｌｅａｒＭｅｄｉｃｉｎ
ｅ，第２版，１９９５，ＭｏｓｂｙＰｒｅｓｓ，ＰａｕｌＪ．Ｅａｒｌｙ
ａｎｄＤ．ＢｒｕｃｅＳｏｄｅｅ；これらの全体を参考として援用する。

【００４５】本発明は、哺乳動物における疾病、障害または異常な身体状態の放射線療法の
ための方法であって、本発明の薬剤または組成物を投与することを含む方法をも
含む。放射線療法の実施方法は、たとえばＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓａｎｄＰｒ
ａｃｔｉｃｅｏｆＮｕｃｌｅａｒＭｅｄｉｃｉｎｅ，第２版，Ｐ．Ｊ．Ｅ
ａｒｌｙａｎｄＤ．Ｂ．Ｓｏｄｅｅ，３２章に記載されている；この全体を
参考として援用する。

【００４６】医薬組成物は、癌性、神経性、炎症性、感染性および変性性の疾病を含めた疾
病、障害または異常な身体状態において、疾病の処置および画像の提供のために
用いられる。他の疾病、障害および異常な身体状態は当業者に自明であり、なら
びに／あるいは本発明または本明細書に引用した参考文献から明らかであろう。

【００４７】疾病、障害または異常な身体状態をもつ患者の造影または処置のために用いら
れる医薬組成物は、好ましくは本発明薬剤および許容できるビヒクルまたは賦形
剤を含有する（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃ
ｉｅｎｃｅｓ，第１８版（１９９０，ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏｍ
ｐａｎｙ）および後続版）。ビヒクルには、食塩水およびＤ５Ｗ（５％デキスト
ロースおよび水）が含まれる。賦形剤には、添加剤、たとえば緩衝剤、可溶化剤
、沈殿防止剤、乳化剤、粘度調節剤、乳糖充填剤、酸化防止剤、保存剤が含まれ
る。組成物はさらに還元剤、増量剤またはｐＨ安定剤を含有してもよい。ペプチ
ドを非経口投与その他の投与のために安定化するのに好ましい賦形剤がある。錯
生成金属標識薬剤は、好ましくは静脈内非経口経路により投与される。賦形剤に
は、好ましくは血清アルブミン、グルタミン酸またはアスパラギン酸、リン脂質
および脂肪酸が含まれる。非経口（注射）投与が好ましい。患者に投与できる医
薬的に許容できる組成物の調製方法は当技術分野で既知である。

【００４８】本発明の医薬組成物は、ヒトまたは動物（好ましくは哺乳動物）に投与できる
。投与量は、各患者の状態、薬物の適応症、薬物の物理的および化学的安定性、
毒性、目的とする効果、および選択した投与経路に依存する（ＲｏｂｅｒｔＲ
ａｋｅｌ編，Ｃｏｎｎ’ｓＣｕｒｒｅｎｔＴｈｅｒａｐｙ（１９９５，Ｗ．
Ｂ．ＳａｕｎｄｅｒｓＣｏｍｐａｎｙ，米国））。好ましくは、哺乳動物に投
与する錯生成金属標識薬剤の投与量は約０．０１〜１，０００ｍｃｇ／ｋｇ／分
、より好ましくは約０．０１〜５０ｍｃｇ／ｋｇ／分である。

【００４９】キット本発明は、錯生成金属イオン標識薬剤を調製するためのキットをも含む。キッ
トは、好ましくは金属支持体表面、コンジュゲート、および予め定めた量の錯生
成金属イオンを含み、コンジュゲートは支持体表面に離脱可能な状態で結合する
ことができ、かつ錯生成金属イオンに配位することができ、これによりコンジュ
ゲートが金属支持体表面から離脱する。適切な支持体表面、コンジュゲートおよ
び錯生成金属イオンは本明細書に記載され、または本明細書を見ることにより当
業者に明らかである。キットは、好ましくは配位子およびターゲティング分子を
含むコンジュゲートを含む。配位子は、好ましくは下記のものを含む：（ａ）シ
ステインアミノ酸残基、システインアミノ酸残基誘導体、有機チオールまたはチ
オエーテル含有分子、リン含有アミノ酸残基誘導体、およびリン含有脂肪族分子
よりなる群から選択される表面結合基；これらにおいてアミノ酸残基、アミノ酸
残基誘導体または脂肪族分子は支持体表面に離脱可能な状態で結合できる；なら
びに（ｂ）少なくとも１つのアクセサリー基。コンジュゲートは錯生成金属に配
位することができ、これにより支持体表面からコンジュゲートが離脱する。好ま
しいターゲティング分子は本明細書に記載されている。ポリペプチド、ペプチド
または他の薬剤を凍結乾燥できる。放射性同位体金属の半減期はきわめて短い場
合が多いので、それらをキットに用いないことが有利である。

【００５０】支持体表面は、好ましくは金、銀、銅、および金属錯生成のために硫黄または
リンを離脱可能な状態で結合しうる金属よりなる群から選択される金属を含む。
錯生成金属は、好ましくはＴｃ、Ｒｅ、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｚｎ、Ｃｄ、
Ｍｏ、Ｗ、Ｃｕ、Ａｇ、Ａｕ、Ｔｉ、Ｈｇ、ＣｒおよびＲｈの１種類以上の金属
および放射性同位体金属の形のものである。

【００５１】本発明の好ましい態様は下記の実施例に記載される。これらは本発明の範囲を
限定するためのものではない。実施例１：ジメチルグリシルセリニルシステイニルグリシンの調製ジメチルグリシルセリニルシステイニル（アセトアミドメチル）グリシン（Ｒ
Ｐ４１４）（５０ｍｇ）および酢酸水銀（７５ｍｇ）の、３０％酢酸（２ｍＬ）
中における溶液を、室温で３時間撹拌した。蒸留水（２ｍＬ）を添加し、Ｈ₂Ｓ
ガスを溶液に３分間、徐々に吹き込むと、黒色沈殿（硫化水銀）が生じた。この
溶液を０．２ミクロンのフィルターで濾過し、さらに２ｍＬの蒸留水で希釈し、
凍結乾燥した。

【００５２】実施例２：金表面に結合したジメチルグリシルセリニルシステイニルグリシン
（ＲＰ４１４−ＳＨ）の調製寸法１×５ｃｍの金箔片（厚さ５０ミクロン）をらせん状に巻き、試験管に入
れた。このらせんに２０％硝酸溶液を添加し、全体を穏やかに２時間撹拌した。
硝酸を除去し、箔を蒸留水で洗浄した（４ｍＬで５回、各３０分間）。最終部分
の水を除去し、箔をｐＨ７のリン酸緩衝食塩水（０．０１Ｍ）に１．５時間浸漬
した。次いでチオール添加直前にリン酸を除去した。

【００５３】実施例１に従って調製したジメチルグリシルセリニルシステイニルグリシン（
ＲＰ４１４−ＳＨ）（約５０ｍｇ）の、リン酸緩衝食塩水（３ｍＬ）中における
溶液を、ＫＨＣＯ₃／Ｋ₂ＣＯ₃緩衝液でｐＨ７に調整した。この溶液を前記で調
製した箔に添加し、反応混合物を室温でアルゴン雰囲気下に穏やかに２０時間撹
拌した。溶媒をデカント除去し、箔を連続部分（２ｍＬ）のリン酸緩衝液食塩水
（３０分ずつ５回）で、穏やかに撹拌しながら洗浄した。吸着していないＲＰ４
１４−ＳＨがすべて除去されたことを確認するために、最終アリコートをＨＰＬ
Ｃ分析用に保存した。最終アリコートをデカント除去し、装置をアルゴンでパー
ジし、９９ｍ−Ｔｃ標識の用意をした。金表面に吸着したペプチドＲＰ４１４−
ＳＨをＲＰ８９５と表示する。

【００５４】金表面の放射性標識法・１．０ｍＬの食塩水を前記で調製したＲＰ８９５に添加した・１００μＬのグルコン酸スズ（ＩＩ）を添加した（グルコン酸スズ（ＩＩ）
は、２０μＬの２０ｍｇ／ｍＬ塩化スズ（ＩＩ）を１．０ｍＬの１３ｍｇ／ｍＬ
グルコン酸ナトリウムに添加することにより調製された）・食塩水２００μＬ中の約１０ｍＣｉのＴｃ−９９ｍペルテクネテートを反応
に添加した・次いで反応器を激しく振とうした・反応を室温で１時間行わせた・次いで反応物を６０℃で３０分間インキュベートした全反応体積は１．３ｍＬであり、ｐＨ５．０の無色透明な溶液が得られた。

【００５５】５００μＬの試料を、逆相Ｃ−１８カラムおよび０から７０％アセトニトリル
ｗ／０．１％ＴＦＡの段階勾配法を２５分間にわたって用いる高速液体クロマト
グラフィーにより分析した。試料をラジオメトリーおよびＵＶ検出器の両方で分
析した（最終反応物のラジオメトリーについては図３、ＵＶについては図４を参
照）。

【００５６】実施例３：金フレーク上のＲＰ４１４（ＲＰ９０２）の放射性標識法ＲＰ４１４を装填した金フレーク１５〜８３０ｍｇを１．０ｍＬの食塩水に浸
漬し、次いで０．１ｍＬのグルコン酸スズ（ＩＩ）および０．１ｍＬのＴｃ−９
９ｍナトリウムペルテクネテート（過テクネチン酸ナトリウム）（約１０ｍＣｉ
）を添加した。小型スターラーを入れた反応物を激しく振とうし、ホットプレー
ト／スターラーに乗せ、６０〜７０℃で１時間インキュベートした。反応混合物
のアリコートを取り出し、ａｃｒｏｄｉｓｃ低タンパク質結合性０．２μｍメン
ブランフィルターで濾過した。次いで、濾過した反応物を逆相Ｃ１８カラムなら
びに水およびアセトニトリル両方中の０．１％ＴＦＡの段階勾配を用いるＨＰＬ
Ｃにより分析した。試料をラジオメトリーおよびＵＶ検出器の両方で分析した。

【００５７】実施例４：固体支持体上のジメチルグリシン−セリン−システイン−グリシン
の調製ＲＰ４１４（ジメチルグリシン−セリン−システイン（Ａｃｍ）−グリシン）
５０ｍｇを３０％酢酸に溶解し、酢酸水銀（７５ｍｇ）を添加した。混合物を室
温で３．５時間撹拌し、硫化水素ガスを溶液に吹き込むと、黒色沈殿が生じた。
沈殿を濾過により除去し、濾液から溶媒を減圧下で除去した。

【００５８】金粉末（平均粒径２ミクロン）（７５ｍｇ）を蒸留水中１滴のメタノールで湿
潤させ、溶液を除去した。次いで粉末を２０％硝酸に懸濁し、５０Ｃで１．５時
間振とうし、沈降後、上清を除去した。次いで粉末を蒸留水で洗浄した（５ｍＬ
で４回、各３０分間）し、次いでリン酸緩衝食塩水（２ｍＬ）で洗浄した。食塩
水の除去後、リン酸緩衝食塩水（２ｍＬ）中の脱保護ＲＰ４１４溶液を添加し、
混合物を室温でアルゴン下に２０時間振とうした。上清を除去し、金粉末を連続
部分のリン酸緩衝液食塩水（４ｍＬで５回）で洗浄した。

【００５９】実施例５：金フレーク／球へのＲＰ５２７−ＳＨの結合（ＲＰ９０４）金粉末（１．５〜３．０ミクロンの粒子、約１００ｍｇ）をブンゼンバーナー
で火炎処理した。金にメタノールを添加し、激しく撹拌して金を破壊し、粉末に
した。この懸濁液を遠心分離し、溶液をデカントした。

【００６０】ＲＰ５２７（ジメチルグリシン−ｓｅｒ−ｃｙｓ（Ａｃｍ）−ｇｌｙ−βａｌ
ａ−ｇｌｎ−ｔｒｐ−ａｌａ−ｖａｌ−ｇｌｙ−ｈｉｓ−ｌｅｕ−ｍｅｔ−ＮＨ ₂ ）（約１０ｍｇ，１当量）を３０％酢酸（４ｍＬ）に溶解し、次いで酢酸水銀
（２．２ｍｇ）を添加した。反応物を室温に３時間放置し、次いで硫化水素を２
分間吹き込んだ。得られた混合物を遠心分離し、硫化水銀のペレットから溶液を
デカントした。溶媒を真空除去した。次いでＲＰ５２７−ＳＨ（約１０ｍｇ）を
エタノール：０．０１ＰＢＳの１：１溶液に溶解し、バキュテイナー（ｖａｃ
ｕｔａｉｎｅｒ）内の金粉末に激しく撹拌しながら添加した（磁気撹拌バーを添
加）。この溶液をアルゴンで１０分間フラッシュし、アルゴン下で室温に２４時
間放置した。反応混合物を遠心分離し、上清を除去した。粉末をエタノール：０
．１％トリフルオロ酢酸水溶液の１：１混合物で洗浄し（４ｍＬで５回）、洗浄
溶液添加毎に遠心分離した。最終アリコートをデカント除去し、金を真空乾燥し
た。これを、Ｔｃ−９９ｍ標識のための準備としてアルゴンでパージし、−２０
℃で保存した。

【００６１】金フレーク上のＲＰ５２７（ジメチルグリシン−ｓｅｒ−ｃｙｓ（Ａｃｍ）
−ｇｌｙ−βａｌａ−ｇｌｎ−ｔｒｐ−ａｌａ−ｖａｌ−ｇｌｙ−ｈｉｓ−ｌｅ
ｕ−ｍｅｔ−ＮＨ₂）（ＲＰ９０４）の放射性標識法ＲＰ５２７を装填した金フレーク１００ｍｇを１．０ｍＬの食塩水に浸漬し、
次いで０．１ｍＬのグルコン酸スズ（ＩＩ）および０．１ｍＬのＴｃ−９９ｍナ
トリウムペルテクネテート（約１０ｍＣｉ）を添加した。小型スターラーを入れ
た反応物を激しく振とうし、ホットプレート／スターラーに乗せ、７０〜７５℃
で１時間インキュベートした。反応混合物のアリコートを取り出し、ａｃｒｏｄ
ｉｓｃ低タンパク質結合性０．２μｍメンブランフィルターで濾過した。次いで
、濾過した反応物を逆相Ｃ１８カラムならびに水およびアセトニトリル両方中の
０．１％ＴＦＡの段階勾配を用いるＨＰＬＣにより分析した。試料をラジオメト
リーおよびＵＶ検出器の両方で分析した。

【００６２】実施例６：金箔に結合したＲＰ４１４（ｄｍＧ−Ｓ−Ｃ（Ａｃｍ）−Ｇ）（Ｒ
Ｐ８９５）の調製金箔片（厚さ５０ミクロン、１ｃｍ×５ｃｍ）をアコーディオン形に折りたた
み、次いで円筒形にした。２０％硝酸の溶液（４ｍＬ）を金箔に添加し、４０℃
に２時間加熱した。硝酸を除去し、箔を蒸留水で数分間洗浄した（４ｍＬで５回
）。ＲＰ４１４（約５０ｍｇ）を３０％酢酸（４ｍＬ）に溶解し、真空管（ｖａ
ｃｔｕｂｅ）内の金に添加した。溶液をアルゴンでフラッシュし、アルゴン下
で室温に２４時間放置した。上清を除去し、箔を蒸留水で数分間洗浄した（４ｍ
Ｌで５回）。最終アリコートをデカント除去し、Ｔｃ−９９ｍ標識のための準備
として真空管をアルゴンでパージした。

【００６３】金箔に結合したＲＰ１２８（ｄｍＧ−Ｓ−Ｃ（Ａｃｍ）−Ｇ−Ｔ−Ｋ−Ｐ−Ｐ
−Ｒ）（ＲＰ９０５）を用いて実験を繰り返した。実施例７：ＲＰ８９５のキット配合物の調製金箔片（厚さ５０ミクロン、１ｃｍ×５ｃｍ）を実施例１に概説したものと同
じ方法で調製および洗浄した。ＲＰ４１４（約５０ｍｇ）を実施例１に概説した
ものと同じ方法で金に装填した。洗浄した後、グルコン酸スズ（ＩＩ）（１００
μＬ）、塩化スズ（ＩＩ）（２０μＬ，２０ｍｇ／ｍＬ）およびグルコン酸ナト
リウム（１ｍＬ，１３ｍｇ／ｍＬ）からなる標識溶液を添加し、凍結し、凍結乾
燥した。

【００６４】実施例８：金粉末に結合したＲＰ４１４（ＲＰ９０２）の調製金粉末（１．５〜３．０ミクロンの粒子、約７５ｍｇ）を水中５％メタノール
で湿潤させた。この懸濁液を遠心分離し、溶液をデカントした。金粉末を水（４
ｍＬ）で洗浄し、遠心分離した。水をデカントし、２０％硝酸を金に添加した。
懸濁液を４０℃に２時間加熱した。懸濁液を遠心分離し、硝酸をデカントした。
粉末を蒸留水で洗浄し（４ｍＬで５回）、水の添加毎に遠心分離した。ＲＰ４１
４（約５０ｍｇ）を３０％酢酸（４ｍＬ）に溶解し、真空管内の金粉末に激しく
撹拌しながら添加した（磁気撹拌バーを添加）。この溶液をアルゴンでフラッシ
ュし、アルゴン下で室温に２４時間放置した。上清を除去し、粉末を蒸留水で洗
浄し（４ｍＬで５回）、水の添加毎に遠心分離した。最終アリコートをデカント
除去し、真空管をＴｃ−９９ｍ標識のための準備としてアルゴンでパージした。

【００６５】実施例８ａ：ＲＰ９０２およびＲＰ９０４を実施例８の記載に従って調製した。ただしそれ
らを金粉末に装填する溶液を１：１エタノール：３０％酢酸に替えた。最終試
料をＴｃ−９９ｍ標識のための準備として凍結乾燥した。

【００６６】実施例８ｂ：金粉末（約７５ｍｇ）に、１：１エタノール：０．０１ＭＰＢＳ中の脱保
護ＲＰ４１４を装填した。以後の反応を実施例８の方法に従って実施した。この
反応を脱保護ＲＰ５２７について繰り返した。

【００６７】実施例９：金粉末上のＲＰ４１４（ＲＰ９０２）の漸増標識大バッチの金粉末（１．５〜３．０ミクロンの粒子、約２ｇ）を実施例３の記
載に従って洗浄し、ＲＰ４１４を装填した。金粉末上のＲＰ４１４量の増加に伴
う標識効率を調べるために、Ｔｃ−９９ｍ標識するための漸増量を調製した。ア
ミノ酸分析をこのバッチのＲＰ９０２について実施した。

【００６８】Ｔｃ−９９ｍ標識に用いたＲＰ９０２の量７．８５ｍｇ、１７．９ｍｇ、３４．４ｍｇ、７８．８ｍｇ、１５１．３ｍｇ
および３０８．６ｍｇ。

【００６９】実施例１０：金化合物をＴｃ−９９ｍペルテクネテートで放射性標識する方法グルコン酸スズ（ＩＩ）の調製：０．０２ｍＬの２０ｍｇ／ｍＬ塩化スズ（ＩＩ）を１．０ｍＬの１３ｍｇ／ｍ
Ｌグルコン酸ナトリウムに添加し、十分に振とうした。

【００７０】１．金箔上のＲＰ１２８（ＲＰ９０５）の放射性標識法ＲＰ９０５片をガラスバキュテイナー中で１．５ｍＬの食塩水に浸漬した。調
製したばかりの０．１ｍＬのグルコン酸スズ（ＩＩ）および０．１ｍＬのＴｃ−
９９ｍペルテクネテート（約１０ｍＣｉ）を添加した。反応器を激しく振とうし
、室温に１時間放置した。最終反応体積は１．７ｍＬ、無色透明、ｐＨ４．５〜
５．５であった。アリコートの反応物を、逆相Ｃ−１８カラムおよび０から７０
％アセトニトリルｗ／０．１％ＴＦＡの段階勾配法を用いるＨＰＬＣにより２５
分間にわたって分析した。試料をラジオメトリーおよびＵＶ検出器の両方で分析
した。

【００７１】同じ方法を金箔上のＲＰ４１４（ＲＰ８９５）について繰り返した。２．金箔上のＲＰ５２７（ＲＰ９００）の放射性標識法ＲＰ９００片をガラスバキュテイナー中で１．０ｍＬの食塩水に浸漬し、次い
で０．１ｍＬのグルコン酸スズ（ＩＩ）および１．０ｍＬのＴｃ−９９ｍペルテ
クネテート（約１０ｍＣｉ）を添加した。次に、反応器を激しく振とうし、５５
℃で１時間のインキュベーションのために水浴に入れた。最終反応溶液は無色透
明、ｐＨ４．５〜５．０であった。アリコートの反応物を、逆相Ｃ−１８カラム
および０から７０％アセトニトリルｗ／０．１％ＴＦＡの段階勾配法を用いるＨ
ＰＬＣにより２５分間にわたって分析した。試料をラジオメトリーおよびＵＶ検
出器（波長＝２１４ｎｍ）の両方で分析した。

【００７２】３．金箔上のＲＰ４１４（ＲＰ９０２）の放射性標識法７５ｍｇの金粉末に、０．５ｍＬの食塩水に浸漬したＲＰ４１４を装填し、次
いで０．１ｍＬのグルコン酸スズ（ＩＩ）および０．１ｍＬのＴｃ−９９ｍペル
テクネテート（約１０ｍＣｉ）を添加した。反応器を激しく振とうし、５５〜６
０℃の油浴中で１時間撹拌した。反応物を水浴から取り出す際に、容器の底に沈
降した粉末を乱さないように注意した。次いでこの部分を０．２μのａｃｒｏｄ
ｉｓｃフィルターで濾過して、ｐＨ４．５〜５．０の透明な溶液を得た。アリコ
ートの反応物を、逆相Ｃ−１８カラムおよび０から７０％アセトニトリルｗ／０
．１％ＴＦＡの段階勾配法を用いるＨＰＬＣにより２５分間にわたって分析した
。試料をラジオメトリーおよびＵＶ検出器（波長＝２１４ｎｍ）の両方で分析し
た。

【００７３】同じ方法をＲＰ５２７に用いた。ただしインキュベーションの温度および時間
を１００℃で３５分間に変更した。本発明を好ましい態様に関して特に詳述した；しかし本発明の精神および範囲
から離れることなく変更をなしうることは当業者により理解されるであろう。た
とえば本発明をペプチドについて述べる場合、ポリペプチドおよびタンパク質を
しばしば使用できることは明らかである。

【００７４】刊行物、特許および特許出願をすべて、その全体を参考として援用するとそれ
ぞれの刊行物、特許および特許出願について具体的かつ個々に述べたと同じ程度
に引用する。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１ａは、金属支持体表面から錯生成金属（ＣＦＭ）へのコンジュゲート（表
面結合基（ＳＢＧ）および３つのアクセサリー基（ＡＧ）を含有）のキレート交
換を示す模式図である。図１ｂは、金表面からテクネチウムへのコンジュゲートのキレート交換を示す
模式図である。

【図２】金表面へのチオール結合のｉｎｓｉｔｕ生成を示す模式図である。

【図３】Ｔｃ−９９ｍＲＰ８９５（１）のラジオメトリートレースである（ＲＰ４１
４の標識）。

【図４】Ｔｃ−９９ｍＲＰ８９５（１）の紫外線トレースである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 33/34 Ａ６１Ｋ 33/38 33/38 Ａ６１Ｐ 25/00 Ａ６１Ｐ 25/00 29/00 29/00 31/00 31/00 35/00 35/00 Ａ６１Ｋ 49/02 ＢＣＡ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者ルー，リンダ・ファン・リンカナダ国オンタリオエム１ダブリュー・２エックス３，スカーボーロ，ファウンデイル・クレセント 63 (72)発明者ゾーンバック，ジョンカナダ国オンタリオエム４ブイ・１イー８，トロント，ポプラー・プレインズ・クレセント６ (72)発明者ポロック，キャサリーン・ミッシェルカナダ国オンタリオエム８ブイ・２アール２，トロント，ステーション・ロード 59，アパートメント・シーＦターム(参考） 4C085 HH03 JJ02 KA11 KA29 KA36 KB02 KB08 KB09 KB10 KB82 LL13 LL18 LL20 4C086 AA01 HA01 HA03 HA06 HA08 HA09 HA10 HA11 HA28 MA01 MA02 MA04 MA17 MA66 NA14 ZA02 ZB11 ZB26 ZB31

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】金属イオン標識造影剤を調製するための組成物であって、・金属支持体表面：ならびに・金属イオン結合性部分および生物学的ターゲティング部分を含有するコンジ
ュゲート；金属イオン結合性部分は金属支持体表面に結合するための硫黄原子ま
たはリン原子を含むを含み、金属イオン結合性部分はこの金属イオン結合性部分が支持体に結合し
た際に金属イオンに配位することができ、これにより支持体表面から標識コンジ
ュゲートが離脱する組成物。
【請求項２】金属イオン結合性部分が硫黄保護基に結合した硫黄原子を含み
、金属支持体表面がこの保護された硫黄原子に結合可能であり、これにより硫黄
保護基が硫黄原子から離脱して金属イオン結合性部分とのチオール結合が形成さ
れる、請求項１に記載の配合物。
【請求項３】金属支持体表面が金である、請求項２に記載の配合物。
【請求項４】金属支持体表面が金属イオン標識薬剤を形成するための硫黄ま
たはリンを離脱可能な状態で結合しうる金属を含む、請求項１に記載の配合物。
【請求項５】支持体表面が金、銀および銅よりなる群から選択される金属を
含む、請求項１に記載の配合物。
【請求項６】コンジュゲートが配位子およびターゲティング分子を含み、配
位子が（ａ）システインアミノ酸残基、システインアミノ酸残基誘導体、有機分子に
結合したチオールまたはチオエーテル基、リン含有アミノ酸残基誘導体、および
リン含有有機分子よりなる群から選択される表面結合基；これらにおいてアミノ
酸残基、アミノ酸残基誘導体または有機分子は支持体表面に離脱可能な状態で結
合できる；ならびに（ｂ）錯生成金属イオンに配位しうる少なくとも１つのアクセサリー基を含み、コンジュゲートが錯生成金属イオンに配位することができ、これによ
り支持体表面からコンジュゲートが離脱する、請求項１に記載の配合物。
【請求項７】硫黄またはリンに離脱可能な状態で配位しうる金属支持体表面
ならびに支持体表面に離脱可能な状態で結合したコンジュゲートを含み、コンジ
ュゲートが配位子およびターゲティング分子を含む、錯生成金属イオン標識薬剤
を調製するのに有用な配合物であって、配位子が（ａ）システインアミノ酸残基、システインアミノ酸残基誘導体、有機分子に
結合したチオールまたはチオエーテル基、リン含有アミノ酸残基誘導体、および
リン含有有機分子よりなる群から選択される表面結合基；これらにおいてアミノ
酸残基、アミノ酸残基誘導体または有機分子は支持体表面に離脱可能な状態で結
合できる；ならびに（ｂ）錯生成金属イオンに配位しうる少なくとも１つのアクセサリー基を含み、コンジュゲートが錯生成金属イオンに配位することができ、これによ
り支持体表面から標識コンジュゲートが離脱する配合物。
【請求項８】配位子が、ペプチド、ペプチド模倣体、ポリペプチド、ポリペ
プチド模倣体、または有機低分子を含む、請求項７に記載の配合物。
【請求項９】ターゲティング分子が、ポリペプチド、ペプチド、核酸分子、
オリゴヌクレオチド、糖類、オリゴ糖類、ステロイド、環状ペプチド、ペプチド
またはポリペプチド模倣体、酵素基質、阻害薬および有機低分子よりなる群から
選択される、アゴニスト活性またはアンタゴニスト活性をもつ分子を含む、請求
項７または８に記載の配合物。
【請求項１０】ターゲティング分子が、ペプチド、ポリペプチド、ペプチド
もしくはポリペプチド模倣体、または有機低分子を含む、請求項７〜９のいずれ
か１項に記載の配合物。
【請求項１１】コンジュゲートが、ペプチド、ポリペプチド、ペプチドもし
くはポリペプチド模倣体、または有機低分子を含む、請求項１〜１０のいずれか
１項に記載の配合物。
【請求項１２】配位子が、四座Ｎ_xＳ_4-x配位子、四座Ｎ_xＳ_4-x配位子誘導体
、ポリアミノポリスルフィドおよびポリアミノポリスルフィド誘導体よりなる群
から選択されるペプチドを含む、請求項７〜１１のいずれか１項に記載の配合物
。
【請求項１３】ターゲティング分子が、ボムベシン７〜１４フラグメント、
ＱＷＡＶＧＨＬＭ、ＴＫＰＰＲ、ＲＧＤＳ、および受容体またはトランスポータ
ーをターゲティングする有機低分子よりなる群から選択される分子を含む、請求
項１〜１２のいずれか１項に記載の配合物。
【請求項１４】コンジュゲートが、ボムベシン７〜１４フラグメント、ＱＷ
ＡＶＧＨＬＭ、ＴＫＰＰＲ、ＲＧＤＳ、および受容体またはトランスポーターを
ターゲティングする有機低分子よりなる群から選択されるペプチド配列を含む、
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の配合物。
【請求項１５】受容体またはトランスポーターが、ドーパミン受容体または
トランスポーター、セロトニン受容体またはトランスポーター、シグマ受容体、
ＧＡＢＡ受容体、ニコチン受容体、コリン作動性受容体、ノルエピネフリン受容
体またはトランスポーター、グルコーストランスポーター、およびオピオイド受
容体よりなる群から選択される、請求項１３または１４に記載の配合物。
【請求項１６】配位子が、（ａ）アミノ酸残基に含まれる窒素原子、酸素原
子もしくは硫黄原子、（ｂ）アミノ酸残基誘導体に含まれる窒素原子、酸素原子
、セレン原子、リン原子もしくは硫黄原子、または（ｃ）有機分子に含まれる窒
素原子、酸素原子、セレン原子、リン原子もしくは硫黄原子、または（ｄ）（ａ
）〜（ｃ）のうち１以上の組合わせ、これらにおいて残基、誘導体及び／又は分
子は金属配位活性を有する、よりなる群から選択される３つのアクセサリー基を
含む、請求項７〜１５のいずれか１項に記載の配合物。
【請求項１７】金属支持体表面が金、銀および銅よりなる群から選択される
金属を含む、請求項１６に記載の配合物。
【請求項１８】錯生成金属がＴｃ、Ｒｅ、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｚｎ、
Ｃｄ、Ｍｏ、Ｗ、Ｃｕ、Ａｇ、Ａｕ、Ｔｉ、Ｈｇ、ＣｒおよびＲｈよりなる金属
および放射性同位体金属の群から選択される、請求項１〜１７のいずれか１項に
記載の配合物。
【請求項１９】錯生成金属がＴｃ、ＣｕおよびＲｅよりなる金属および放射
性同位体金属の群から選択される、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の配合
物。
【請求項２０】錯生成金属イオン標識した診断薬または放射線療法薬の調製
方法であって、（ａ）請求項１〜１９のいずれか１項に記載の配合物を調製し；
（ｂ）この配合物と錯生成金属イオンを接触させて、錯生成金属イオンと薬剤の
間に配位結合を形成させ、これにより錯生成金属標識薬剤を支持体表面から離脱
させる工程を含む方法。
【請求項２１】さらに、こうして離脱した錯生成金属標識薬剤を採集するこ
とを含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】錯生成金属イオン標識した診断薬または放射線療法薬の生成
方法であって、コンジュゲートを金属支持体表面から錯生成金属イオンへキレー
ト交換させ、これによりコンジュゲートを金属支持体表面から離脱させる工程を
含む方法。
【請求項２３】錯生成金属イオン標識ペプチドの調製方法であって、（ａ）
下記のものを含むペプチド、ポリペプチド、ペプチド模倣体またはポリペプチド
模倣体を、前記の残基または誘導体の硫黄原子またはリン原子により金属支持体
表面に結合させ：（ｉ）システインアミノ酸残基、システインアミノ酸残基誘導
体またはリン含有アミノ酸残基誘導体、および（ｉｉ）錯生成金属イオンに配位
しうる少なくとも１つのアクセサリー基；そして（ｂ）ペプチド、ポリペプチド
または模倣体を錯生成金属で標識してこれにより金属錯生成したペプチド、ポリ
ペプチドまたは模倣体を支持体表面から離脱させることを含む方法。
【請求項２４】ペプチド、ポリペプチド、ペプチド模倣体またはポリペプチ
ド模倣体が約３〜５０アミノ酸残基またはアミノ酸残基誘導体である、請求項３
４に記載の方法。
【請求項２５】錯生成金属イオン標識薬剤の調製方法であって、（ａ）下記
のもの含む有機分子を、硫黄原子またはリン原子により支持体表面に結合させ：
（ｉ）硫黄原子またはリン原子、および（ｉｉ）錯生成金属イオンに配位しうる
少なくとも１つのアクセサリー基；そして（ｂ）薬剤を錯生成金属で標識してこ
れにより金属錯体コンジュゲートを支持体表面から離脱させることを含む方法。
【請求項２６】ペプチド、ポリペプチド、ペプチド模倣体またはポリペプチ
ド模倣体が約３〜５０アミノ酸残基またはアミノ酸残基誘導体である、請求項２
５に記載の方法。
【請求項２７】支持体表面が金、銀、銅、および金属錯生成のために硫黄ま
たはリンを離脱可能な状態で結合しうる金属よりなる群から選択される金属を含
み；錯生成金属がＴｃ、Ｒｅ、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｚｎ、Ｃｄ、Ｍｏ、Ｗ
、Ｃｕ、Ａｇ、Ａｕ、Ｔｉ、Ｈｇ、ＣｒおよびＲｈよりなる金属および放射性同
位体金属の群から選択される、請求項２２〜２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】錯生成金属イオン標識薬剤の調製方法であって、（ａ）金属
イオン結合性部分および生物学的ターゲティング部分を含有するコンジュゲート
を調製し、この金属イオン結合性部分は金属支持体表面に結合するための硫黄原
子を含み、この硫黄原子は硫黄原子保護基で保護されており、（ｂ）保護された
硫黄原子と金属支持体表面を接触させると硫黄原子は金属表面とのチオール結合
を形成し、これにより硫黄保護基が離脱し、そして（ｃ）金属イオン結合性部分
と錯生成金属イオンを接触させて、錯生成金属イオンと金属イオン結合性部分の
間に配位結合を形成させ、これにより錯生成金属標識薬剤を支持体表面から離脱
させる工程を含む方法。
【請求項２９】金属支持体表面が金である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】請求項２０〜２９のいずれか１項に記載の方法により調製さ
れた錯生成金属イオン標識薬剤。
【請求項３１】請求項３０に記載の薬剤およびキャリヤーを含む、放射線療
法または造影用の組成物。
【請求項３２】さらに、還元剤、増量剤およびｐＨ安定剤よりなる群から選
択される薬剤を含む、請求項３１に記載の組成物。
【請求項３３】請求項３０に記載の薬剤および医薬として適したキャリヤー
を含む、放射線療法または造影のための医療用組成物。
【請求項３４】錯生成金属イオン標識薬剤を調製するためのキットであって
、金属支持体表面、コンジュゲートおよび予め定めた量の錯生成金属イオンを含
み、コンジュゲートは支持体表面に離脱可能な状態で結合することができ、かつ
錯生成金属イオンに配位することができ、これによりコンジュゲートが金属支持
体表面から離脱するキット。
【請求項３５】コンジュゲートが硫黄保護基に結合した硫黄原子を含み、金
属支持体表面がこの保護された硫黄原子に結合可能であり、これにより硫黄保護
基が硫黄原子から離脱してコンジュゲートとのチオール結合を形成する、請求項
３４に記載のキット。
【請求項３６】コンジュゲートが配位子およびターゲティング分子を含み、
配位子が（ａ）システインアミノ酸残基、システインアミノ酸残基誘導体、有機チオー
ルまたはチオエーテル含有分子、リン含有アミノ酸残基誘導体、およびリン含有
脂肪族分子よりなる群から選択される表面結合基；これらにおいてアミノ酸残基
、アミノ酸残基誘導体または脂肪族分子は支持体表面に離脱可能な状態で結合で
きる；ならびに（ｂ）少なくとも１つのアクセサリー基を含み、コンジュゲートが錯生成金属に配位することができ、これにより支持
体表面からコンジュゲートが離脱する、請求項３５に記載のキット。
【請求項３７】支持体表面が金、銀、銅、および金属錯生成のために硫黄ま
たはリンを離脱可能な状態で結合しうる金属よりなる群から選択される金属を含
み；錯生成金属がＴｃ、Ｒｅ、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｚｎ、Ｃｄ、Ｍｏ、Ｗ
、Ｃｕ、Ａｇ、Ａｕ、Ｔｉ、Ｈｇ、ＣｒおよびＲｈよりなる金属および放射性同
位体金属の群から選択される、請求項３４または３５に記載のキット。
【請求項３８】さらに、還元剤、増量剤およびｐＨ安定剤よりなる群から選
択される薬剤を含む、請求項３４または３５に記載のキット。
【請求項３９】哺乳動物において疾病、障害もしくは異常な身体状態の存在
を検出し、またはその程度を評価する方法であって、（ａ）有効量の請求項３０
〜３２のいずれか１項に記載の薬剤または組成物を投与し；そして（ｂ）疾病、
障害もしくは異常な身体状態の存在を検出し、またはその程度を評価することを
含む方法。
【請求項４０】哺乳動物における疾病、障害または異常な身体状態の放射線
療法のための方法であって、有効量の請求項３０〜３２のいずれか１項に記載の
薬剤または組成物を投与することを含む方法。
【請求項４１】錯生成金属標識造影剤を静脈内経路で投与することを含む、
請求項３９または４０に記載の方法。
【請求項４２】哺乳動物に投与する錯生成金属標識薬剤の量が約０．０１〜
１，０００ｍｃｇ／ｋｇ／分である、請求項３９〜４１のいずれか１項に記載の
方法。
【請求項４３】哺乳動物に投与する錯生成金属標識薬剤の量が約０．０１〜
５０ｍｃｇ／ｋｇ／分である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】哺乳動物がヒトである、請求項３９〜４３のいずれか１項に
記載の方法。
【請求項４５】疾病、障害または異常な身体状態が、癌性、神経性、炎症性
、感染性および変性性の疾病、障害および異常な身体状態よりなる群から選択さ
れる、有効量の請求項３９〜４４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４６】疾病、障害もしくは異常な身体状態の存在または程度を陽電
子放射断層撮影法、核磁気共鳴造影法、シンチグラフィー、単光子放射コンピュ
ーター断層撮影法、潅流造影剤心エコー検査法、超高速Ｘ線コンピューター断層
撮影法およびディジタルサブトラクション血管撮影法よりなる群から選択される
方法で検出または評価する、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】薬剤が^99mＴｃ金属を含み、薬剤が受容体に結合し、かつ方
法が単光子放射コンピューター断層撮影法である、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】テクネチウム金属標識薬剤を含む組成物であって、９９ｍ−
テクネチウムによる１０，０００Ｃｉ／ｍｍｏｌより大きな比放射能、および１
８８−レニウムによる３，０００Ｃｉ／ｍｍｏｌより大きな比放射能を含む組成
物。
【請求項４９】薬剤がペプチドもしくはポリペプチド、またはその模倣体で
ある、請求項４８に記載の組成物。
【請求項５０】ペプチドがジメチルグリシルセリニルシステイニルグリシン
である、請求項４９に記載の組成物。
【請求項５１】錯生成金属標識薬剤を調製するための支持体表面の製造方法
であって、適切な厚さの金属を、約１〜１０，０００ｃｍ²の適切な表面積をも
つ粒子、スポンジもしくはふるい、繊維、または表面の形で、無機系またはポリ
マー系支持材上に電気金属めっきもしくは無電解金属めっきまたは蒸着すること
を含む方法。
【請求項５２】金属支持体表面の金属の厚さが約１０ｎｍより大きい、請求
項５１に記載の方法。
【請求項５３】放射線療法または造影のための医薬組成物であって、キャリ
ヤーおよび錯生成金属イオン標識薬剤を含み、薬剤がＨＰＬＣを用いずに調製さ
れた組成物。