JP2002535342A - Compositions and devices for assaying leukocytes in urine - Google Patents
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Abstract
(57)【要約】 【化１】 チアゾールエステルが尿中の白血球を検定するのに適する。該チアゾールエステルは、白血球の存在を検定するための、組成物、デェバイス、方法における使用に適している。ひとつの実施態様において、チアゾールエステルは、式(I)の化合物またはその塩もしくは溶媒和塩である。式中、A は N-遮断アミノ酸残基またはN-遮断ペプチド鎖、好ましくは N-遮断アラニンまたは N-遮断ポリアラニンである。R1 は非置換または置換ヘテロアリール; 非置換または置換アリールで置換されたアルケニル; 非置換または置換ヘテロアリールで置換されたアルケニルである。例えば、R1 は チエニル、ピリジル、フリル、スチリル、ピロリル、インドリルであり得る。別の実施態様において、チアゾールエステルは置換基として非置換または置換の融合ヒドロカルビル環を含む。ひとつの実施態様においてヒドロカルビル環はナフチルを含む。別の実施態様において融合ヒドロカルビルはアントラニルを含む。 (57) [Summary] Thiazole esters are suitable for assaying leukocytes in urine. The thiazole esters are suitable for use in compositions, devices, and methods for assaying for the presence of leukocytes. In one embodiment, the thiazole ester is a compound of formula (I) or a salt or solvate thereof. Wherein A is an N-blocked amino acid residue or N-blocked peptide chain, preferably N-blocked alanine or N-blocked polyalanine. R 1 is unsubstituted or substituted heteroaryl; alkenyl substituted with unsubstituted or substituted aryl; alkenyl substituted with unsubstituted or substituted heteroaryl. For example, R 1 can be thienyl, pyridyl, furyl, styryl, pyrrolyl, indolyl. In another embodiment, the thiazole ester contains an unsubstituted or substituted fused hydrocarbyl ring as a substituent. In one embodiment, the hydrocarbyl ring comprises naphthyl. In another embodiment, the fused hydrocarbyl comprises anthranil.
Description
【０００１】 発明の分野 本発明は、白血球エステラーゼおよびプロテイナーゼの活性によって尿中の白
血球の存在を検定するのに有用な化合物、組成物、ディバイス（device)、方法
に一般的に関する。[0001] The present invention relates generally to compounds, compositions, devices, and methods useful for assaying the presence of leukocytes in urine by the activity of leukocyte esterases and proteinases.
【０００２】 発明の背景 ヒト尿中の白血球の存在は、腎または尿路の感染および機能不全に関係する。
即時の検定が患者の生理学的処置または診断のために非常に意味がある。BACKGROUND OF THE INVENTION [0002] The presence of leukocytes in human urine is associated with renal or urinary tract infection and dysfunction.
Immediate assays are very meaningful for physiological treatment or diagnosis of patients.
【０００３】 顕微鏡によって尿中の白血球を測定する基本的な方法が、かなり長い間ひろく
用いられてきた。しかし、この方法には、適当な機器を得て設置するのに時間と
費用がかかる。さらに、サンプルが分析までに長く置かれると、誤まって陰性の
結果になることがある。[0003] The basic method of measuring leukocytes in urine by microscopy has been widely used for quite some time. However, this method is time consuming and expensive to obtain and install the appropriate equipment. In addition, if the sample is left long before analysis, it can be falsely negative.
【０００４】 インディケーター・アッセイなどの他の方法の開発に研究がなされてきた。こ
の方法は白血球を、より容易に、簡便に、正確に検定するのに適している。典型
的なインディケーター・アッセイでは、白血球中に存在する１以上の酵素により
変性される特殊な化学的物質（例えば、基質）を用いて、可視性の色変化をおこ
すのに適した物質をつくる。[0004] Research has been devoted to the development of other methods, such as indicator assays. This method is suitable for easily, conveniently and accurately assaying leukocytes. In a typical indicator assay, a special chemical (eg, a substrate) that is denatured by one or more enzymes present in leukocytes is used to create a substance suitable for producing a visible color change. .
【０００５】 このような白血球アッセイのひとつが米国特許 3,087,794 に開示され、そこ
では、顆粒白血球中に含有されているペルオキシダーゼを使用する。このアッセ
イは過酸化水素および O-トリジンを付着した濾紙を含み、濾紙が白血球に接触
したときに色のついた酸化産物を示す。しかし、ペルオキシダーゼが危険でもあ
り、尿中の還元産物が実際の適用を難しくするので、このアッセイは望ましいと
はいえない。One such leukocyte assay is disclosed in US Pat. No. 3,087,794, which uses peroxidase contained in granular leukocytes. This assay includes a filter paper with hydrogen peroxide and O-tolidine attached, and shows a colored oxidation product when the filter paper contacts white blood cells. However, this assay is less than desirable because peroxidase is also dangerous and the reduction products in urine make practical application difficult.
【０００６】 白血球中のエステラーゼおよびプロテイナーゼの存在を確認するようにした他
の方法も開発されている。例えば、１つの方法は、エステラーゼによって無色の
酸部分およびアルコール部分に変性される基質としての無色または淡色のエステ
ル化合物を利用する。次いで、ジアゾニウムまたは酸化反応下で、アルコール部
分が第２の濃い色の産物に転換する。この方法は、基質ナフトール-AS-D クロロ
アセテートがクロロアセテートおよびナフトール-AS をつくる工程によってなさ
れる。ナフトール-AS 産物とジアゾニウム塩との反応が色のついたアゾ化合物を
形成する。[0006] Other methods have been developed to identify the presence of esterases and proteinases in leukocytes. For example, one method utilizes a colorless or pale ester compound as a substrate that is modified by esterases into a colorless acid moiety and an alcohol moiety. The alcohol moiety then converts to a second darker product under a diazonium or oxidation reaction. The method is performed by a process wherein the substrate naphthol-AS-D chloroacetate forms chloroacetate and naphthol-AS. The reaction of the naphthol-AS product with the diazonium salt forms a colored azo compound.
【０００７】 このアッセイでは肉眼で白血球の濃度を測定できる。しかし、ジアゾニウム塩
が尿中のウロビリノーゲンまたはビリルビンと反応するので、この方法の使用も
望ましいとはいえない。結果として、誤まった陰性判定を避けるために 500 細
胞/μ1 以上の白血球濃度がしばしば必要となる。[0007] In this assay, the concentration of leukocytes can be measured with the naked eye. However, the use of this method is less than desirable as diazonium salts react with urobilinogen or bilirubin in urine. As a result, leukocyte concentrations above 500 cells / μ1 are often required to avoid false negatives.
【０００８】 英国特許 1,128,371 は、他の可能な基質、すなわち無色のインドキシルまた
はチオインドキシルエステルを開示している。これらの基質はエステラーゼによ
りインドキシルまたはチオインドキシルに変性される。ついで着色のインジゴ
またはチオインジゴが空気中の酸素との反応または酸化剤によりつくられる。し
かし、これらの基質をもちいるアッセイも、感度がよくなく、白血球濃度 10,00
0 細胞/μ1 以下では検定できないので、望ましくない。[0008] GB 1,128,371 discloses another possible substrate, namely a colorless indoxyl or thioindoxyl ester. These substrates are modified by esterases to indoxyl or thioindoxyl. Then colored indigo
Alternatively, thioindigo is formed by reaction with oxygen in the air or by an oxidizing agent. However, assays using these substrates are also insensitive and have a leukocyte concentration of 10,00
It is not desirable because the assay cannot be performed at 0 cells / μ1 or less.
【０００９】 同様に、米国特許 4,278,763 は、インドキシル型基質に関し、インドキシル
またはチオインドキシルアミノ酸エステルを基質として用いる方法を開示してい
る。Similarly, US Pat. No. 4,278,763 relates to indoxyl-type substrates and discloses a method using indoxyl or thioindoxyl amino acid ester as a substrate.
【００１０】 ピロール誘導体を基質として使用する別のアッセイも開示されている。例えば
、米国特許 4,704,460 は、ピロール誘導体のアミノ酸エステルを基質として使
用する。この誘導体がジアゾニウム塩の存在で変性されると、サンプルの色が濃
い紫色に変化する。さらに、デカノールなどの求核的アルコールを添加すると、
反応速度が非常に促進されて、1O 細胞/μl 程度の低い濃度で 90 秒以内に白血
球の検定ができる。しかし、このアッセイも、これらの２つの基質の合成がひじ
ょうに難しいことから、望ましくない。Another assay using a pyrrole derivative as a substrate has also been disclosed. For example, US Pat. No. 4,704,460 uses amino acid esters of pyrrole derivatives as substrates. When this derivative is modified in the presence of the diazonium salt, the color of the sample changes to deep purple. In addition, when a nucleophilic alcohol such as decanol is added,
The reaction rate is greatly accelerated and leukocytes can be assayed within 90 seconds at concentrations as low as 10 cells / μl. However, this assay is also undesirable because the synthesis of these two substrates is very difficult.
【００１１】 上記のアッセイには特徴的にいくつもの欠点がある。欠点には、誤まった陰性
結果、ウロビリノーゲンまたはビリルビンの干渉、望ましくない基質の必要、な
どがある。このように、尿中の白血球を検定するための、新しい化合物およびそ
の化合物の使用法を解明することが期待されている。[0011] The above assays have a number of characteristic disadvantages. Disadvantages include false negative results, interference with urobilinogen or bilirubin, the need for undesired substrates, and the like. Thus, it is expected to elucidate new compounds and methods of using the compounds for assaying leukocytes in urine.
【００１２】 発明の要旨 本発明は、尿中の白血球を検定するのに適したチアゾール化合物、チアゾール
エステルを含有する組成物、尿中の白血球を検定するのに適した診断用ディバイ
ス、尿中の白血球を検定するためにチアゾールエステルまたはその組成物を使用
する方法を対象とする。SUMMARY OF THE INVENTION The present invention provides a thiazole compound suitable for assaying leukocytes in urine, a composition containing a thiazole ester, a diagnostic device suitable for assaying leukocytes in urine, The present invention is directed to a method of using a thiazole ester or a composition thereof to assay leukocytes.
【００１３】 ひとつの態様において、本発明は、新規のチアゾールエステルを対象とする。 本発明のひとつのチアゾールエステルは、下記式の化合物またはその塩もしく
は溶媒和塩である。In one aspect, the invention is directed to novel thiazole esters. One thiazole ester of the present invention is a compound of the following formula or a salt or solvate thereof.
【化４】 式中、A は N-遮断アミノ酸残基またはN-遮断ペプチド鎖、好ましくは N-遮断ア ラニンまたは N-遮断ポリアラニンである。 R1 は非置換または置換ヘテロアリール; 非置換または置換アリールで置換され
たアルケニル; 非置換または置換ヘテロアリールで置換されたアルケニルである
。例えば、R1 は チエニル、ピリジル、フリル、スチリル、ピロリル、インドリ
ルであり得る。Embedded image Wherein A is an N-blocked amino acid residue or N-blocked peptide chain, preferably N-blocked alanine or N-blocked polyalanine. R 1 is unsubstituted or substituted heteroaryl; alkenyl substituted with unsubstituted or substituted aryl; alkenyl substituted with unsubstituted or substituted heteroaryl. For example, R 1 can be thienyl, pyridyl, furyl, styryl, pyrrolyl, indolyl.
【００１４】 本発明の別ののチアゾールエステルは、下記式の化合物またはその塩もしくは
溶媒和塩である。Another thiazole ester of the present invention is a compound of the formula: or a salt or solvate thereof.
【化５】 式中、A は N-遮断アミノ酸残基またはN-遮断ペプチド鎖、好ましくは N-遮断ア
ラニンまたは N-遮断ポリアラニンである。 R２は非置換または置換の融合ヘテロカルビル鎖で、そのうちの少なくとも１つ
の鎖は芳香族である。例えば、R２はナフチルまたはアントラニルであり得る。Embedded image Wherein A is an N-blocked amino acid residue or N-blocked peptide chain, preferably N-blocked alanine or N-blocked polyalanine. R 2 is an unsubstituted or substituted fused heterocarbyl chain, at least one of which is aromatic. For example, R 2 can be naphthyl or anthranyl.
【００１５】 本発明の別のチアゾールエステルは、下記式の化合物またはその塩もしくは溶
媒和塩である。Another thiazole ester of the present invention is a compound of the following formula: or a salt or solvate thereof.
【化６】 式中、A は N-遮断アミノ酸残基またはN-遮断ペプチド鎖、好ましくは N-遮断ア
ラニンまたは N-遮断ポリアラニンである。 R３およびR４は、それぞれ独立的に、水素、非置換または置換アリール、非置換
または置換ヘテロアリール、非置換または置換アルキル、非置換または置換アル
ケニル、非置換または置換アルコキシ、アミノ、非置換または置換アシル、ハロ
、ニトロ、シアノ、-SO3H、ヒドロキシである。ただし、R３およびR４は両者同
時に水素ではない。Embedded image Wherein A is an N-blocked amino acid residue or N-blocked peptide chain, preferably N-blocked alanine or N-blocked polyalanine. R 3 and R 4 are each independently hydrogen, unsubstituted or substituted aryl, unsubstituted or substituted heteroaryl, unsubstituted or substituted alkyl, unsubstituted or substituted alkenyl, unsubstituted or substituted alkoxy, amino, unsubstituted or substituted acyl, halo, nitro, cyano, -SO 3 H, hydroxy. However, R 3 and R 4 are not both hydrogen at the same time.
【００１６】 別の態様において、本発明は、式 I、II、IIIのチアゾールエステルを含む組成
物を対象とする。この発明の組成物は、ジアゾニウム塩、例えば、塩化 2-メト
キシ-4-モルホリノベンゼンジアゾニウム・塩化亜鉛複塩を含み得る。In another aspect, the invention is directed to compositions comprising the thiazole esters of formulas I, II, III. The composition of the present invention may include a diazonium salt, for example, 2-methoxy-4-morpholinobenzenediazonium chloride / zinc chloride double salt.
【００１７】 さらに別の態様において、本発明は、発明の化合物および組成物を含む診断デ
ィバイスを対象とする。この診断ディバイスは、式 I、II、IIIのチアゾールエス
テルを有する基質を含有する。In yet another aspect, the invention is directed to diagnostic devices that include the compounds and compositions of the invention. The diagnostic device contains a substrate having a thiazole ester of Formulas I, II, III.
【００１８】 本発明の化合物、組成物、診断ディバイスは、尿中の白血球を検定するための
方法における使用に適している。尿中の白血球を検定するための方法は、本発明
のチアゾールエステルおよびジアゾニウム塩を尿サンプルと接触せしめることを
含む。The compounds, compositions and diagnostic devices of the present invention are suitable for use in a method for assaying leukocytes in urine. A method for assaying leukocytes in urine comprises contacting a thiazole ester and a diazonium salt of the present invention with a urine sample.
【００１９】 本発明のディバイスおよび方法での使用に適した化合物および組成物は、典型
的には薬学的に許容されるものである。 本発明の組成物、ディバイス、方法は、活性化塩を含まないことがある。[0019] Compounds and compositions suitable for use in the devices and methods of the present invention are typically pharmaceutically acceptable. The compositions, devices, and methods of the present invention may not include an activating salt.
【００２０】 発明の詳細な記述 本発明は、尿中の白血球を検定することを対象とする。白血球の存在の典型的
な検定は、白血球とともに存在する白血球エステラーゼおよび白血球プロテイア
ーゼとして既知の酵素の存在を検定することで行う。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION The present invention is directed to assaying leukocytes in urine. A typical assay for the presence of leukocytes is performed by assaying for the presence of enzymes known as leukocyte esterases and leukocyte proteases that are present with the leukocytes.
【００２１】 本発明の化合物はエステル官能基を含有するチアゾールエステルを含む。この
官能基は尿中の白血球に接触すると加水分解される。 本発明のチアゾールエス
テルのエステル加水分解が有用な診断法を提供する。チアゾリルがジアゾニウム
塩と反応して、アゾ色素をつくり得るからである。The compounds of the present invention include thiazole esters containing an ester function. This functional group is hydrolyzed upon contact with leukocytes in urine. Ester hydrolysis of the thiazole esters of the present invention provides a useful diagnostic method. This is because thiazolyl can react with a diazonium salt to form an azo dye.
【００２２】 本発明の化合物は、尿中の白血球を検定に使用できる組成物、診断ディバイス
、方法での使用に適したチアゾールエステルである。The compounds of the present invention are thiazole esters suitable for use in compositions, diagnostic devices, and methods that can be used to assay leukocytes in urine.
【００２３】 本発明の組成物および方法での使用に適したひとつのチアゾールエステルは、
下記式の化合物またはその塩もしくは溶媒和塩である。One thiazole ester suitable for use in the compositions and methods of the present invention is
A compound of the following formula: or a salt or solvate thereof.
【化７】 式中、A は N-遮断アミノ酸残基またはN-遮断ペプチド鎖、好ましくは N-遮断ア
ラニンまたは N-遮断ポリアラニン（例えば、アラニン-アラニン、アラニン-ア
ラニン-アラニンなど)であって、アミノ末端で既知の保護基、例えば、 ベンジ
ロキシカルボニル、t-ブトキシカルボニル、p-トルエンスルホニルで遮断されて
いる。R1 は非置換または置換ヘテロアリール; 非置換または置換アリールで置
換されたアルケニル; 非置換または置換ヘテロアリールで置換されたアルケニル
である。Embedded image Wherein A is an N-blocked amino acid residue or N-blocked peptide chain, preferably N-blocked alanine or N-blocked polyalanine (eg, alanine-alanine, alanine-alanine-alanine, etc.) Are protected with known protecting groups such as benzyloxycarbonyl, t-butoxycarbonyl, p-toluenesulfonyl. R 1 is unsubstituted or substituted heteroaryl; alkenyl substituted with unsubstituted or substituted aryl; alkenyl substituted with unsubstituted or substituted heteroaryl.
【００２４】 用語 "ヘテロアリール" は、窒素、酸素、リン、硫黄などの少なくとも１つの
ヘテロ元素を有するヘテロ環芳香族誘導体、例えば、フリル、ピロリル、チエニ
ル、オキサゾリル、ピリジル、イミダゾリル、チアゾリル、イソキサゾリル、ピ
ラゾリル、イソチアゾリルなどを含む。用語"ヘテロアリール" も、少なくとも
１つの環が芳香族である融合環、例えば、インドリル、プリニル、ベンゾフリル
、ベンゾチエニル、キノリル、4,5,6,7-テトラヒドロ-lH-インドリルなどを含む
。ヘテロシクロ環に融合したヒドロカルビル環、例えば、ベンゾチエニルやイン
ドリルの場合、融合環は、ヒドロカルビル環またはへテロサイクロ環を介してチ
アゾリルに結合し得る。ある実施態様において、ヘテロアリールは 5-員環を含
む。別の実施態様において、ヘテロアリールは 6-員環を含む。The term “heteroaryl” refers to heterocyclic aromatic derivatives having at least one hetero element such as nitrogen, oxygen, phosphorus, sulfur, for example, furyl, pyrrolyl, thienyl, oxazolyl, pyridyl, imidazolyl, thiazolyl, isoxazolyl, Includes pyrazolyl, isothiazolyl, and the like. The term "heteroaryl" also includes fused rings in which at least one ring is aromatic, for example, indolyl, prenyl, benzofuryl, benzothienyl, quinolyl, 4,5,6,7-tetrahydro-lH-indolyl and the like. In the case of a hydrocarbyl ring fused to a heterocyclo ring, such as benzothienyl or indolyl, the fused ring can be attached to the thiazolyl via a hydrocarbyl ring or a heterocyclo ring. In certain embodiments, the heteroaryl contains a 5-membered ring. In another embodiment, a heteroaryl contains a 6-membered ring.
【００２５】 該ヘテロアリール基は、環上で非置換または置換であり、例えば、アリール、
ヘテロアリール、アルキル、アルケニル、アルコキシ、アミノ、アシル、ハロ、
ニトロ、シアノ、-SO3H、ヒドロキシで置換されており、該置換基はさらにアリ
ール、ヘテロアリール、アルキル、アルケニル、アルコキシ、アミノ、アシル、
ハロ、ニトロ、シアノ、-SO3H、ヒドロキシで置換され得る。ある実施態様にお
いて、ヘテロアリールは、メチル、エチル、プロピル、ブチルなどのアルキルに
より置換されている。他の実施態様において、ヘテロアリールは、メトキシ、エ
トキシ、プロポキシ、ブトキシなどのアルコキシにより置換されている。さらに
別の実施態様において、ヘテロアリールは、アリールまたはヘテロアリールによ
り置換されている。The heteroaryl group is unsubstituted or substituted on the ring, for example, aryl,
Heteroaryl, alkyl, alkenyl, alkoxy, amino, acyl, halo,
Nitro, cyano, -SO 3 H, substituted with hydroxy, and the substituent is further aryl, heteroaryl, alkyl, alkenyl, alkoxy, amino, acyl,
Halo, nitro, cyano, -SO 3 H, can be substituted with hydroxy. In some embodiments, the heteroaryl is substituted with an alkyl such as methyl, ethyl, propyl, butyl, and the like. In another embodiment, the heteroaryl is substituted by an alkoxy such as methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy. In yet another embodiment, the heteroaryl is substituted by an aryl or a heteroaryl.
【００２６】 用語 "アリール" は、芳香族ヒドロカルビル、例えば、フェニルを含み、融合
芳香族環、例えば、ナフチル、アントリルなどを含む。The term “aryl” includes aromatic hydrocarbyls, such as phenyl, and includes fused aromatic rings, such as naphthyl, anthryl, and the like.
【００２７】 用語 "アルキル"は、1 〜 4 炭素原子を有する直鎖または分枝の飽和脂肪族鎖
、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル (1-メチルエチル)、ブチ
ル、t-ブチル (1,1-ジメチルエチル)などを含む。The term “alkyl” refers to a straight or branched saturated aliphatic chain having 1 to 4 carbon atoms, for example, methyl, ethyl, propyl, isopropyl (1-methylethyl), butyl, t-butyl (1 , 1-dimethylethyl) and the like.
【００２８】 用語 "アルケニル"は、2 〜 4 炭素原子を有する直鎖または分枝の飽和脂肪族
鎖、例えば、エテニル、1-プロペニル、2-プロペニル、1-ブテニル、2-メチル-1
-プロペニルなどを含む。The term “alkenyl” refers to a straight or branched saturated aliphatic chain having 2 to 4 carbon atoms, such as ethenyl, 1-propenyl, 2-propenyl, 1-butenyl, 2-methyl-1
-Including propenyl and the like.
【００２９】 上記のアルキルまたはアルケニル基は、その鎖中でヘテロ原子、 例えば、窒
素や酸素により選択的に遮断されて、アルキルアミノアルキルまたはアルコキシ
アルキル基、例えば、メチルアミノエチルやメトキシメチルなどを形成する。The above alkyl or alkenyl groups are selectively blocked by a heteroatom in the chain, such as nitrogen or oxygen, to form an alkylaminoalkyl or alkoxyalkyl group such as methylaminoethyl or methoxymethyl. I do.
【００３０】 用語 "アルコキシ" は、1 〜 4 炭素原子を有する直鎖または分枝の鎖を有し
、酸素原子と結合した上記定義のアルキル、例えば、メトキシ、エトキシ、プロ
ポキシ、イソプロポキシ(l-メチルエトキシ)、ブトキシ、t-ブトキシ(1,1-ジメ
チルエトキシ)などを含む。The term “alkoxy” refers to an alkyl as defined above having a straight or branched chain having from 1 to 4 carbon atoms and attached to an oxygen atom, for example methoxy, ethoxy, propoxy, isopropoxy (l- Methylethoxy), butoxy, t-butoxy (1,1-dimethylethoxy) and the like.
【００３１】 用語 "アミノ" は、各 R5 が独立的に水素またはアルキルである式 -N(R5)2
の置換基を含む。用語 "アルキル" は上記の定義に同じ。The term “amino” refers to a compound of the formula —N (R 5 ) 2 where each R 5 is independently hydrogen or alkyl.
Including a substituent. The term "alkyl" is as defined above.
【００３２】 用語 "非置換または置換アリールで置換されたアルケニル" または"非置換ま
たは置換ヘテロアリールで置換されたアルケニル"は、上記定義のアルケニルで
あって、各基がそれぞれ、非置換または置換アリールまたは非置換または置換ヘ
テロアリールで置換されている。用語 "アリール" および "ヘテロアリール" は
上記定義に同じ。適当な置換されたアルケニルの例は、スチリル、シナミル、フ
リルエテニル、ピリジルエテニル、チエニルプロペニルを含む。The term “alkenyl substituted with unsubstituted or substituted aryl” or “alkenyl substituted with unsubstituted or substituted heteroaryl” is alkenyl as defined above, wherein each group is an unsubstituted or substituted aryl, respectively. Or substituted with unsubstituted or substituted heteroaryl. The terms "aryl" and "heteroaryl" are as defined above. Examples of suitable substituted alkenyls include styryl, sinamyl, furylethenyl, pyridylethenyl, thienylpropenyl.
【００３３】 ある実施態様において、非置換または置換アリールで置換されたアルケニルは
、非置換または置換フェニルアリールで置換されたアルケニルである。このフェ
ニルは、ある実施態様において、アルコキシ、例えば、メトキシ、エトキシ、プ
ロポキシ、ブトキシなどで置換されている。別の実施態様において、非置換また
は置換ヘテロアリールで置換されたアルケニルは、窒素含有環, 酸素含有環また
は硫黄含有環である。[0033] In certain embodiments, alkenyl substituted with unsubstituted or substituted aryl is alkenyl substituted with unsubstituted or substituted phenylaryl. The phenyl is, in certain embodiments, substituted with alkoxy, for example, methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy and the like. In another embodiment, alkenyl substituted with unsubstituted or substituted heteroaryl is a nitrogen-containing ring, an oxygen-containing ring or a sulfur-containing ring.
【００３４】 本発明の組成物および方法における使用に適したチアゾールエステルの R1 の
例は、2-チエニル、4-ピリジル、2-フリル、β-スチリル、1,2-ジメチル-4-ピロ
リル、3-インドリルを含む。当業者は、本明細書を読んで、ヘテロ原子が環のい
くつかの位置のひとつにあり得ることを理解するであろう。Examples of thiazole esters R 1 suitable for use in the compositions and methods of the present invention include 2-thienyl, 4-pyridyl, 2-furyl, β-styryl, 1,2-dimethyl-4-pyrrolyl, 3-Including drills. Those skilled in the art, upon reading this specification, will appreciate that a heteroatom may be at one of several positions in the ring.
【００３５】 本発明の組成物および方法での使用に適した別のチアゾールエステルは、下記
式の化合物またはその塩もしくは溶媒和塩である。Another thiazole ester suitable for use in the compositions and methods of the present invention is a compound of the formula: or a salt or solvate thereof.
【化８】 式中、A は N-遮断アミノ酸残基またはN-遮断ペプチド鎖、好ましくは N-遮断ア
ラニンまたは N-遮断ポリアラニン（例えば、アラニン-アラニン、アラニン-ア
ラニン-アラニンなど)であって、アミノ末端で既知の保護基、例えば、 ベンジ
ロキシカルボニル、t-ブトキシカルボニル、p-トルエンスルホニルで遮断されて
いる。R２ は、少なくとも１つの環が芳香族である非置換または置換の融合ヒド
ロカルビル環である。Embedded image Wherein A is an N-blocked amino acid residue or N-blocked peptide chain, preferably N-blocked alanine or N-blocked polyalanine (eg, alanine-alanine, alanine-alanine-alanine, etc.) Are protected with known protecting groups such as benzyloxycarbonyl, t-butoxycarbonyl, p-toluenesulfonyl. R 2 is an unsubstituted or substituted fused hydrocarbyl ring in which at least one ring is aromatic.
【００３６】 融合ヒドロカルビル環は、環の間に共通の少なくとも１つの結合を保持する少
なくとも２つのヒドロカルビル環、例えば、ナフチル、アントリル、5,6,7,8-テ
トラヒドロナフチル、フェナントレニル、トリフェニレニル、1H-フルオレニル
などを含む。融合ヒドロカルビル環は、例えば、アリール、ヘテロアリール、ア
ルキル、アルケニル、アルコキシ、アミノ、アシル、ハロ、ニトロ、シアノ、-S
O3H、ヒドロキシで置換され得る。これらの置換基はさらに、アリール、ヘテロ
アリール、アルキル、アルケニル、アルコキシ,、アミノ、アシル、ハロ、ニト
ロ、シアノ、-SO3H、ヒドロキシで置換され得る。これらの置換基は上記の定義
に同じ。A fused hydrocarbyl ring has at least two hydrocarbyl rings that retain at least one bond in common between the rings, for example, naphthyl, anthryl, 5,6,7,8-tetrahydronaphthyl, phenanthrenyl, triphenylenyl, 1H- Including fluorenyl and the like. Fused hydrocarbyl rings include, for example, aryl, heteroaryl, alkyl, alkenyl, alkoxy, amino, acyl, halo, nitro, cyano, -S
O 3 H may be substituted with hydroxy. These substituents may further aryl, heteroaryl, alkyl, alkenyl, alkoxy ,, amino, acyl, halo, nitro, cyano, -SO 3 H, can be substituted with hydroxy. These substituents are as defined above.
【００３７】 ある実施態様において、融合ヒドロカルビル環は少なくとも l つの 5 員環を
含有する。別の実施態様において、融合ヒドロカルビル環は少なくとも l つの
6 員環を含有する。別のある実施態様において、融合ヒドロカルビル環は、少な
くとも 1 つの環がアルキル、例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチルで置
換されている。他の実施態様において、融合ヒドロカルビル環は、少なくとも 1
つの環がアルコキシ、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシで
置換されている。ある実施態様において、R2 は 1-ナフチルである。In one embodiment, the fused hydrocarbyl ring contains at least one 5-membered ring. In another embodiment, the fused hydrocarbyl ring has at least one
Contains a six-membered ring. In certain other embodiments, the fused hydrocarbyl ring has at least one ring substituted with an alkyl, eg, methyl, ethyl, propyl, butyl. In other embodiments, the fused hydrocarbyl ring has at least one
One ring is substituted with alkoxy, for example, methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy. In certain embodiments, R 2 is 1-naphthyl.
【００３８】 本発明の組成物および方法での使用に適した別のチアゾールエステルは、下記
式の化合物またはその塩もしくは溶媒和塩である。Another thiazole ester suitable for use in the compositions and methods of the present invention is a compound of the following formula: or a salt or solvate thereof.
【化９】 式中、A は N-遮断アミノ酸残基またはN-遮断ペプチド鎖、好ましくは N-遮断ア
ラニンまたは N-遮断ポリアラニン（例えば、アラニン-アラニン、アラニン-ア
ラニン-アラニンなど)であって、アミノ末端で既知の保護基、例えば、 ベンジ
ロキシカルボニル、t-ブトキシカルボニル、p-トルエンスルホニルで遮断されて
いる。R３ および R４は、それぞれ独立的に、水素、非置換または置換アリール
、非置換または置換ヘテロアリール、非置換または置換アルキル、非置換または
置換アルケニル、非置換または置換アルコキシ、アミノ、非置換または置換アシ
ル、ハロ、ニトロ、シアノ、-SO3H、ヒドロキシである。ただし、R３ および R
４は両者同時に水素ではない。Embedded imageWherein A is an N-blocked amino acid residue or N-blocked peptide chain, preferably an N-blocked amino acid residue.
Lanine or N-blocked polyalanine (eg, alanine-alanine, alanine-a
Lanine-alanine, etc.), which are known protecting groups at the amino terminus, such as benzyl
Blocked by roxycarbonyl, t-butoxycarbonyl, p-toluenesulfonyl
I have. R3 And R4Is independently hydrogen, unsubstituted or substituted aryl
Unsubstituted or substituted heteroaryl, unsubstituted or substituted alkyl, unsubstituted or
Substituted alkenyl, unsubstituted or substituted alkoxy, amino, unsubstituted or substituted acyl
Le, halo, nitro, cyano, -SOThreeH, hydroxy. Where R3 And R
4Are not hydrogen at the same time.
【００３９】 置換された R３ および R４ は、アリール、ヘテロアリ−ル、アルキル、アル
ケニル、アルコキシ、アミノ、アシル、ハロ、ニトロ、シアノ、-SO3H、ヒドロ
キシでさらに置換され得る。The substituted R 3 and R 4 can be further substituted with aryl, heteroaryl, alkyl, alkenyl, alkoxy, amino, acyl, halo, nitro, cyano, —SO 3 H, hydroxy.
【００４０】 用語 "アリール"、"ヘテロアリール"、 "アルキル"、"アルケニル"、"アルコ
キシ"、"アミノ"は、上記定義に同じ。The terms “aryl”, “heteroaryl”, “alkyl”, “alkenyl”, “alkoxy”, “amino” are as defined above.
【００４１】 ある実施態様において、R3 および R4 の少なくとも１つは、メトキシ、エト
キシ、プロポキシ、ブトキシであり、A は N-遮断アラニン残基である。別の実
施態様において、R3 は 水素であり、R4 はメトキシ、エトキシ、プロポキシ、
ブトキシである。例えば、メトキシはオルト位置で置換されており、式IIIの化
合物は下記であり得る。In certain embodiments, at least one of R 3 and R 4 is methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy, and A is an N-blocked alanine residue. In another embodiment, R 3 is hydrogen and R 4 is methoxy, ethoxy, propoxy,
Butoxy. For example, methoxy is substituted at the ortho position and the compound of formula III can be:
【化１０】 Embedded image
【００４２】 あるいは、メトキシはパラまたはメタ位置で置換されており、式IIIの化合物
は下記であり得る。Alternatively, the methoxy is substituted at the para or meta position and the compound of formula III can be
【化１１】 Embedded image
【００４３】 本発明の組成物は式Ｉ、II、IIIのチアゾールエステルを含む。該組成物は、
ジアゾニウム塩、例えば、塩化 2-メトキシモリホリノベンゼンジアゾニウム・
塩化亜鉛複塩を含み得る。The compositions of the present invention comprise a thiazole ester of Formulas I, II, III. The composition comprises:
Diazonium salts, such as 2-methoxymorpholinobenzenediazonium chloride
It may contain a zinc chloride double salt.
【００４４】 本発明の組成物は、促進作用を有する既知の塩が除かれ得る。促進作用を与え
る塩の例は、アルカリ金属またはアルカリ土類金属の１価または２価のカチオン
例えば、Li+、Na+、K+、Mg++およびその典型的なアニオンを含む。The composition of the present invention may be free of known salts having a promoting action. Examples of promoting salts include monovalent or divalent cations of alkali metals or alkaline earth metals, such as Li + , Na + , K + , Mg ++ and their typical anions.
【００４５】 尿中の白血球の検定に適した診断ディバイスは、本発明のチアゾールエステル
を保持するのに適する基質、例えば、濾紙、濾過膜、他の内部担体を含む。これ
らの基質は既知である。診断ディバイスは、１以上の式Ｉ、II、IIIのチアゾー
ルエステルを含む。この化合物は、例えば、誘導体を基質上に沈着することによ
り、基質と共に含まれる。Diagnostic devices suitable for the assay of leukocytes in urine include substrates suitable for retaining the thiazole esters of the invention, such as filter paper, filter membranes, and other internal carriers. These substrates are known. The diagnostic device comprises one or more thiazole esters of the formulas I, II, III. The compound is included with the substrate, for example, by depositing the derivative on the substrate.
【００４６】 一般的に、新規の診断ディバイスをつくるには、チアゾールエステル、促進剤
、ジアゾニウム塩を組み合す。本発明の組成物および方法における使用に適する
促進剤は、既知のものであり、例えば、オクタンジオールおよびデカノールを含
む。Generally, a new diagnostic device is created by combining a thiazole ester, an accelerator, and a diazonium salt. Accelerators suitable for use in the compositions and methods of the present invention are known and include, for example, octanediol and decanol.
【００４７】 本発明の組成物および方法における使用に適するジアゾニウム塩は、既知のも
のであり、色を生じる技術に使用される化合物を含む。例えば、塩化 1-ジアゾ-
8-ナフトール-3,6-ジスルホン酸・塩化亜鉛複塩；塩化 6-ジアゾ-1-ナフトール-
3-スルホン酸・塩化亜鉛複塩；塩化 2-メトキシ-4-モルホリノベンゼンジアゾニ
ウム・塩化亜鉛複塩である。好ましくは、本発明において使用されるジアゾニウ
ム塩は、ウロビリノーゲンおよび/またはビリルビンと相互作用を有さない。[0047] Suitable diazonium salts for use in the compositions and methods of the present invention are known and include compounds used in the art of producing color. For example, 1-diazo chloride
8-naphthol-3,6-disulfonic acid / zinc chloride double salt; 6-diazo-1-naphthol chloride
3-sulfonic acid / zinc chloride double salt; 2-methoxy-4-morpholinobenzenediazonium chloride / zinc chloride double salt. Preferably, the diazonium salt used in the present invention has no interaction with urobilinogen and / or bilirubin.
【００４８】 本発明のディバイスをつくる方法はこの分野で知られている。一般的に、ホウ
酸およびポリビニルピロリドンを含有する第１溶液を濾紙などの基質に付置する
。次いで、本発明のチアゾールエステルおよび塩化 2-メトキシ-4-モルホリノベ
ンゼンジアゾニウム・塩化亜鉛複塩などのジアゾニウム塩を基質に付置する。基
質に付置した両液は、上記したように、促進作用を有する既知の塩が除かれ得る
。[0048] Methods of making the devices of the present invention are known in the art. Generally, a first solution containing boric acid and polyvinylpyrrolidone is applied to a substrate such as filter paper. Next, the thiazole ester of the present invention and a diazonium salt such as 2-methoxy-4-morpholinobenzenediazonium chloride / zinc chloride double salt are placed on a substrate. As described above, the known solutions having a promoting action can be removed from both the liquids placed on the substrate.
【００４９】 本発明のチアゾールエステルをつくるために、チアゾロン誘導体およびアラニ
ンまたはポリアラニンの誘導体を出発物質として使用し得る。チアゾロンの合成
には、カルボキシメチルチオベンツイミデート・ハイドロブロマイドとピリジン
とを反応さす。To make the thiazole esters of the present invention, thiazolone derivatives and derivatives of alanine or polyalanine can be used as starting materials. In the synthesis of thiazolone, carboxymethylthiobenzimidate hydrobromide is reacted with pyridine.
【００５０】 下記の反応式に示すように、本発明のチアゾールエステルは、一般式（２）の
チアゾロン誘導体と一般式（３）の塩化アミノ酸との反応を含む。As shown in the following reaction formula, the thiazole ester of the present invention includes a reaction between a thiazolone derivative represented by the general formula (2) and an amino acid chloride represented by the general formula (3).
【化１２】 Embedded image
【００５１】 各出発物質を溶媒に溶かし、得た溶液を冷やし、緩やかに混合する。この反応
混合物を攪拌し、室温で数時間放置する。ついで、反応混合物を洗い、乾燥し、
濾過し、減圧で濃縮する。形成した固体をアセトンに溶かし、ヘキサンを加える
。得た半固体の不純物を除き、反応混合物を低温に約１時間放置する。ヘキサン
を残渣にさらに加え、混合物を 1O 時間冷却する。次いで、所望の産物を濾過し
、乾燥する。[0051] Each starting material is dissolved in a solvent and the resulting solution is cooled and mixed gently. The reaction mixture is stirred and left at room temperature for several hours. The reaction mixture is then washed, dried,
Filter and concentrate under reduced pressure. Dissolve the solid formed in acetone and add hexane. The resulting semi-solid impurities are removed and the reaction mixture is left at low temperature for about 1 hour. More hexane is added to the residue and the mixture is cooled for 10 hours. The desired product is then filtered and dried.
【００５２】 チアゾロン誘導体は高度に反応性となりやすく、再結晶中でも二量化または多
量化をもたらす。このことは収量を低下する。従って、本発明において、一般式
（２）のチアゾロンを精製することなしに、チアゾールエステル合成の最終産物
から純粋の物質を単離する。この合成方法は本発明の誘導体の収量を高める。[0052] Thiazolone derivatives tend to be highly reactive, leading to dimerization or multiplication during recrystallization. This reduces the yield. Therefore, in the present invention, a pure substance is isolated from a final product of thiazole ester synthesis without purifying the thiazolone of the general formula (2). This synthesis method increases the yield of the derivative of the present invention.
【００５３】 これに反し、上記したインドールまたはピロール誘導体はいくつかの認められ
た欠点がある。多くの副反応が中間体の製造過程で起きる。さらに、反応機構が
非常に複雑で、インドールおよびピロール誘導体の収量が低くなる。しかし、本
発明のチアゾールエステル合成法は、比較的短時間で一般的方法によりつくられ
る最終産物の量を多くする。さらに、本発明のチアゾールエステルを合成する方
法は比較的単純で一般的であり、大量生産にさらに実際的である。In contrast, the above-mentioned indole or pyrrole derivatives have some recognized disadvantages. Many side reactions occur during the preparation of intermediates. Furthermore, the reaction mechanism is very complicated and the yield of indole and pyrrole derivatives is low. However, the thiazole ester synthesis method of the present invention increases the amount of end product produced by a general method in a relatively short time. Furthermore, the method of synthesizing the thiazole esters of the present invention is relatively simple and general, and more practical for mass production.
【００５４】 本発明の方法は尿中の白血球の存在を検定することを含む。尿中の白血球の存
在を検定するには、尿サンプルを本発明のチアゾールエステルおよびジアゾニウ
ム塩に促進剤の存在下で接触せしめる。白血球が存在すると、チアゾリルと塩と
の反応が、紫色を有するアゾ染料をつくる。The method of the invention involves assaying for the presence of leukocytes in urine. To assay for the presence of leukocytes in urine, a urine sample is contacted with a thiazole ester and diazonium salt of the present invention in the presence of an accelerator. When leukocytes are present, the reaction of the thiazolyl with the salt produces an azo dye having a purple color.
【００５５】 典型的に、該方法は、尿サンプルを基質、例えば、濾紙に接触せしめることを
対象とする。この濾紙は、その上に付置されている、ホウ酸およびポリビニルピ
ロリドンを含有する第１溶液、および式Ｉ、II、IIIのチアゾールエステル；ジ
アゾニウム塩；促進剤を含有する第２溶液を有する。この方法は促進塩なしで実
施され得る。白血球を含有する尿サンプルが該基質に接触すると、紫色が基質上
に現れる。Typically, the method is directed to contacting a urine sample with a substrate, eg, filter paper. The filter paper has a first solution containing boric acid and polyvinylpyrrolidone and a second solution containing a thiazole ester of Formulas I, II, III; a diazonium salt; This method can be performed without a promoting salt. When a urine sample containing leukocytes contacts the substrate, a purple color appears on the substrate.
【００５６】 実施例 本発明は下記の実施例でさらに特徴が明確にされる。これらの実施例は本発明
の範囲を限定する意図を有しない。本発明の範囲は上記の記載による。本発明の
範囲内での変形は当業者に明らかである。EXAMPLES The present invention is further characterized by the following examples. These examples are not intended to limit the scope of the invention. The scope of the present invention is as described above. Variations within the scope of the invention will be apparent to those skilled in the art.
【００５７】 実施例１ N-(p-トルエンスルホニル)-アラニンExample 1 N- (p-toluenesulfonyl) -alanine
【化１３】 遮断 N-アラニンを含有する出発物質を合成するために、最初に N-(p-トルエ
ンスルホニル)アラニンを合成する。Embedded image To synthesize starting materials containing blocked N-alanine, N- (p-toluenesulfonyl) alanine is first synthesized.
【００５８】 50.0 g の塩化 p-トルエンスルホニルを 100 ml の 90 ℃トルエンに攪拌しな
がら加えた。塩化 p-トルエンスルホニルのトルエン溶液を、25.0 g の L-アラ
ニンを 500 m1 の 1N NaOHに溶かし 5 ℃に冷やした溶液に緩やかに加え、24 時
間攪拌した。得た水相を単離し、5 ℃以下に冷やし、濃塩酸を加えて、pH を 1.
5 とした。冷蔵庫に 3 から 4 時間放置した後、形成した白色結晶を濾過し、2
回水で洗い、次いで乾燥した。50.0 g of p-toluenesulfonyl chloride were added to 100 ml of 90 ° C. toluene with stirring. A toluene solution of p-toluenesulfonyl chloride was dissolved in 25.0 g of L-alanine in 500 ml of 1N NaOH and gently added to a solution cooled to 5 ° C, followed by stirring for 24 hours. The obtained aqueous phase was isolated, cooled to 5 ° C or lower, and concentrated hydrochloric acid was added to adjust the pH to 1.
And 5. After standing in the refrigerator for 3 to 4 hours, the white crystals formed are filtered and
Washed twice with water and then dried.
【００５９】 実施例２ 塩化 N-トシル-L-アラニンExample 2 N-Tosyl-L-alanine chloride
【化１４】 次いで、遮断された出発物質を、N-(p-トルエンスルホニル)-アラニンと塩化
オキサリルとの反応によりつくる。Embedded image The blocked starting material is then made by reacting N- (p-toluenesulfonyl) -alanine with oxalyl chloride.
【００６０】 30.0 g の N-(p-トルエンスルホニル)-アラニンおよび 6 または 7 滴の DMF(
ジメチルホルマミド)を 100 ml の ジクロロメタンに溶かし、5 ml の塩化オキ
サリルを滴下した。3 時間室温で攪拌した後、反応混合物を蒸発した残渣を 100
ml のジクロロメタンに溶かした。ジクロロメタンを再び蒸発せしめ、得た残渣
を 50 m1 のジクロロメタンに溶かし、100 m1 のヘキサンを加えた。冷蔵庫に一
夜放置した後、形成した結晶を濾過し、乾燥した。30.0 g of N- (p-toluenesulfonyl) -alanine and 6 or 7 drops of DMF (
(Dimethylformamide) was dissolved in 100 ml of dichloromethane, and 5 ml of oxalyl chloride was added dropwise. After stirring for 3 hours at room temperature, the reaction mixture was evaporated to a residue of 100
Dissolved in ml of dichloromethane. The dichloromethane was evaporated again, the residue obtained was dissolved in 50 ml dichloromethane and 100 ml hexane was added. After standing in the refrigerator overnight, the crystals formed were filtered and dried.
【００６１】 実施例３ 2-(4-チエニル)-4-チアゾールExample 3 2- (4-thienyl) -4-thiazole
【化１５】 10 g の 4-シアノピリジンおよび 50 g のメルカプト酢酸の、約 20 ml の エ
ーテルおよび 30 m1 のクロロホルムの溶液に塩酸ガスを 24 時間吹き込んだ。
反応中、30 mlのエーテルおよび 50 ml のクロロホルムを加えた。形成した結晶
産物を濾過し、1:1 のエーテルおよびクロロホルム溶媒系で洗い、乾燥した。Embedded image Hydrochloric acid gas was bubbled through a solution of 10 g of 4-cyanopyridine and 50 g of mercaptoacetic acid in about 20 ml of ether and 30 ml of chloroform for 24 hours.
During the reaction, 30 ml of ether and 50 ml of chloroform were added. The crystalline product formed was filtered, washed with a 1: 1 ether and chloroform solvent system and dried.
【００６２】 実施例４ 2-(2-チエニル)-4-チアゾールExample 4 2- (2-thienyl) -4-thiazole
【化１６】 10 g の 3-チオフェンカルボニトリルおよび 35 g のメルカプト酢酸の、約 5
0 ml の エーテル溶液に塩酸ガスを 24 時間吹き込んだ。形成した結晶産物を濾
過し、200ml のエーテルで洗い、乾燥した。Embedded image About 5 g of 10 g of 3-thiophenecarbonitrile and 35 g of mercaptoacetic acid
Hydrochloric acid gas was blown into the 0 ml ether solution for 24 hours. The crystalline product formed was filtered, washed with 200 ml of ether and dried.
【００６３】 実施例５ 2-(1-ナフチル)-4-チアゾールExample 5 2- (1-naphthyl) -4-thiazole
【化１７】 25 g の 1-ナフトニトリルおよび 25 g のメルカプト酢酸の、約 150 ml の
クロロホルム溶液に塩酸ガスを 24 時間吹き込んだ。形成した結晶産物を濾過し
、200ml のクロロホルムで洗い、乾燥した。Embedded image Approximately 150 ml of 25 g of 1-naphthonitrile and 25 g of mercaptoacetic acid
Hydrochloric acid gas was blown into the chloroform solution for 24 hours. The crystalline product formed was filtered, washed with 200 ml of chloroform and dried.
【００６４】 実施例６ 2-(1,2-ジメチル-4-ピロリル)-4-チアゾールExample 6 2- (1,2-dimethyl-4-pyrrolyl) -4-thiazole
【化１８】 5 g の 1,5-ジメチル-2-ピロールカルボニトリルおよび 5 g のメルカプト酢
酸の、約 50 ml の エーテル/クロロホルム(1:1)に塩酸ガスを 24 時間吹き込ん
だ。形成した結晶産物を濾過し、100 ml の エーテル/クロロホルム(1:1)で洗い
、乾燥した。Embedded image Hydrochloric acid gas was blown into about 50 ml of ether / chloroform (1: 1) of 5 g of 1,5-dimethyl-2-pyrrolecarbonitrile and 5 g of mercaptoacetic acid for 24 hours. The crystalline product formed was filtered, washed with 100 ml of ether / chloroform (1: 1) and dried.
【００６５】 実施例７ 2-(3-インドール)-4-チアゾールExample 7 2- (3-indole) -4-thiazole
【化１９】 5 g の 3-シアノカルボニトリルおよび 5 g のメルカプト酢酸の、約 50 ml
の エーテル/クロロホルム(1:1)に塩酸ガスを 24 時間吹き込んだ。形成した結
晶産物を濾過し、100 ml の エーテル/クロロホルム(1:1)で洗い、乾燥した。Embedded image About 50 ml of 5 g of 3-cyanocarbonitrile and 5 g of mercaptoacetic acid
Hydrochloric acid gas was blown into ether / chloroform (1: 1) for 24 hours. The crystalline product formed was filtered, washed with 100 ml of ether / chloroform (1: 1) and dried.
【００６６】 実施例８ 2-(2-フリル)-4-チアゾールExample 8 2- (2-furyl) -4-thiazole
【化２０】 5 g の 2-フロニトリルおよび 5 g のメルカプト酢酸の、約 50 ml の エーテ
ル/クロロホルム(1:1)に塩酸ガスを 24 時間吹き込んだ。形成した結晶産物を濾
過し、100 ml の エーテル/クロロホルム(1:1)で洗い、乾燥した。Embedded image Hydrochloric acid gas was blown into about 50 ml of ether / chloroform (1: 1) of 5 g of 2-furonitrile and 5 g of mercaptoacetic acid for 24 hours. The crystalline product formed was filtered, washed with 100 ml of ether / chloroform (1: 1) and dried.
【００６７】 実施例９ 2-(β-スチリル)-4-チアゾールExample 9 2- (β-styryl) -4-thiazole
【化２１】 25 g の シナモニトリルおよび 25 g のメルカプト酢酸の、約 150 ml の エ
ーテル/クロロホルム(1:1)に塩酸ガスを 24 時間吹き込んだ。形成した結晶産物
を濾過し、200 ml の エーテル/クロロホルム(1:1)で洗い、乾燥した。Embedded image Hydrochloric acid gas was blown into about 150 ml of ether / chloroform (1: 1) of 25 g of cinamonitrile and 25 g of mercaptoacetic acid for 24 hours. The crystalline product formed was filtered, washed with 200 ml of ether / chloroform (1: 1) and dried.
【００６８】 実施例１０ 2-(3-メトキシフェニル)-4-チアゾールExample 10 2- (3-methoxyphenyl) -4-thiazole
【化２２】 11 g の 3-メトキシベンゾニトリルおよび 10 g のメルカプト酢酸の、約 75
ml の エーテルに塩酸ガスを 24 時間吹き込んだ。形成した結晶産物を濾過し、
200 ml の エーテルで洗い、乾燥した。Embedded image About 75 g of 11 g of 3-methoxybenzonitrile and 10 g of mercaptoacetic acid
Hydrochloric acid gas was bubbled into ml of ether for 24 hours. Filtering the formed crystalline product,
Washed with 200 ml of ether and dried.
【００６９】 実施例１１ 2-(2-メトキシフェニル)-4-チアゾールExample 11 2- (2-methoxyphenyl) -4-thiazole
【化２３】 実施例１０の方法を用い、2-メトキシベンゾニトリルおよびメルカプト酢酸を
混合した。回収した産物を上記する。Embedded image Using the method of Example 10, 2-methoxybenzonitrile and mercaptoacetic acid were mixed. The recovered product is described above.
【００７０】 実施例１２ 2-(4-ピリジル)-4-(N-トシル-L-アラニルオキシ)チアゾールExample 12 2- (4-pyridyl) -4- (N-tosyl-L-alanyloxy) thiazole
【化２４】 5.0 g の 2-(4-ピリジル)-4-チアゾールを 100 ml のジクロロメタンと 10 ml
ピリジンとの溶液に溶かし、5 ℃に冷やした。15.0 g の塩化 N-トシル-L-アラ
ニンの 50 ml ジクロロメタン溶液を上記混合物に滴下した。反応溶液を室温で
攪拌して、反応を完結した。溶液を順次 1N 塩酸、水、飽和炭酸水素ナトリウム
液、飽和塩化ナトリウム液で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧で
濃縮した。形成した残渣を 100 ml のアセトンに溶解し、100 ml のヘキサンを
加えた。1 時間冷蔵庫に放置した後、暗色の半固体の粗製物を取りだし、残りの
溶媒を蒸発せしめた。形成した無定形の固体を最小の酢酸エチルに溶解し、得た
溶液をシリカカラムに通し、2:1 酢酸エチル/ヘキサン溶媒系で溶出した。所望
の産物を含有するフラクションを集め、溶媒を蒸発し、得た残渣を 20 ml のア
セトンに溶解し、50 ml のヘキサンを加えた。冷蔵庫に放置して、形成した産物
を濾過し乾燥した。Embedded image 5.0 g of 2- (4-pyridyl) -4-thiazole is added to 100 ml of dichloromethane and 10 ml
Dissolved in a solution with pyridine and cooled to 5 ° C. A solution of 15.0 g of N-tosyl-L-alanine chloride in 50 ml of dichloromethane was added dropwise to the above mixture. The reaction solution was stirred at room temperature to complete the reaction. The solution was washed sequentially with 1N hydrochloric acid, water, saturated sodium bicarbonate solution, saturated sodium chloride solution, dried over magnesium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue formed was dissolved in 100 ml of acetone and 100 ml of hexane was added. After standing in the refrigerator for 1 hour, the dark semi-solid crude was removed and the remaining solvent was evaporated. The amorphous solid formed was dissolved in minimal ethyl acetate and the resulting solution was passed through a silica column, eluting with a 2: 1 ethyl acetate / hexane solvent system. The fractions containing the desired product were collected, the solvent was evaporated, the residue obtained was dissolved in 20 ml of acetone and 50 ml of hexane were added. On standing in the refrigerator, the product formed was filtered and dried.
【００７１】 実施例１３ 2-(2-チエニル)-4-(N-トシル-L-アラニルオキシ)チアゾールExample 13 2- (2-thienyl) -4- (N-tosyl-L-alanyloxy) thiazole
【化２５】 5.0 g の 2-(3-チエニル)-4-チアゾールを 100 ml のジクロロメタンと 10 ml
のピリジンとの溶液に溶かし、5 ℃に冷やした。15.0 g の塩化 N-トシル-L-ア
ラニンの 50 ml ジクロロメタン溶液を上記混合物に滴下した。反応溶液を室温
で攪拌して、反応を完結した。溶液を順次 1N 塩酸、水、飽和炭酸水素ナトリウ
ム液、飽和塩化ナトリウム液で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧
で濃縮した。形成した残渣を 100 ml のアセトンに溶解し、100 ml のヘキサン
を加えた。1 時間冷蔵庫に放置した後、暗色の半固体の粗製物を取りだし、残り
の溶媒を蒸発せしめた。形成した無定形の固体を最小の酢酸エチルに溶解し、得
た溶液をシリカカラムに通し、2:1 酢酸エチル/ヘキサン溶媒系で溶出した。所
望の産物を含有するフラクションを集め、溶媒を蒸発せしめ、得た残渣を 20 ml
のアセトンに溶解し、50 ml のヘキサンを加えた。冷蔵庫に放置して、形成し
た産物を濾過し乾燥した。Embedded image 5.0 g of 2- (3-thienyl) -4-thiazole is added to 100 ml of dichloromethane and 10 ml
In pyridine and cooled to 5 ° C. A solution of 15.0 g of N-tosyl-L-alanine chloride in 50 ml of dichloromethane was added dropwise to the above mixture. The reaction solution was stirred at room temperature to complete the reaction. The solution was washed sequentially with 1N hydrochloric acid, water, saturated sodium bicarbonate solution, saturated sodium chloride solution, dried over magnesium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue formed was dissolved in 100 ml of acetone and 100 ml of hexane was added. After standing in the refrigerator for 1 hour, the dark semi-solid crude was removed and the remaining solvent was evaporated. The amorphous solid formed was dissolved in minimal ethyl acetate and the resulting solution was passed through a silica column, eluting with a 2: 1 ethyl acetate / hexane solvent system. The fractions containing the desired product are collected, the solvent is evaporated and the residue obtained is reduced to 20 ml.
Was dissolved in acetone, and 50 ml of hexane was added. On standing in the refrigerator, the product formed was filtered and dried.
【００７２】 産物をプロトン NMR 分析により同定した。産物のサンプルをアセトン-ｄ6(19
mg/0.7 ml)に溶解し、プロトン・スペクトルを、AMRI SOP INS-041 で、Bruker(
商標) 300 MHz NMR スペクトロメーター(Bruker-Physik AG,Germany)を用いて収
集した。The product was identified by proton NMR analysis. Samples of product acetone -d 6 (19
mg / 0.7 ml), and the proton spectrum was analyzed using AMRI SOP INS-041 by Bruker (
(Registered trademark) 300 MHz NMR spectrometer (Bruker-Physik AG, Germany).
【００７３】 産物のさらなる同定確認を赤外スペクトル分析によって行った。最初に 263 m
g の臭化カリウムを 1.7 mｇの産物と混合し、次いで Wig L Bug（商標)(Cresce
nt Denta1 Manufacturing Co.,Illinois)で砕いた。この混合物をディスクに圧
縮し、赤外スペクトルを 1000 IR スペクトロメータ、AMRI SOP INS-026 で収集
した。サンプルを 4000 から 400 cm-1で走査した。Further identification of the product was performed by infrared spectroscopy. First 263 m
g of potassium bromide is mixed with 1.7 mg of the product and then Wig L Bug ™ (Cresce
nt Denta1 Manufacturing Co., Illinois). The mixture was compressed to disk and infrared spectra were collected on a 1000 IR spectrometer, AMRI SOP INS-026. Samples were scanned from 4000 to 400 cm -1 .
【００７４】 実施例１４ 2-(1-ナフチル)-4-(N-トシル-L-アラニルオキシ)チアゾールExample 14 2- (1-Naphthyl) -4- (N-tosyl-L-alanyloxy) thiazole
【化２６】 5.0 g の 2-(1-ナフチル)-4-チアゾールを 100 ml のジクロロメタンと 10 ml
のピリジンとの溶液に溶かし、5 ℃に冷やした。15.0 g の塩化 N-トシル-L-ア
ラニンの 50 ml ジクロロメタン溶液を上記混合物に滴下した。反応溶液を室温
で攪拌して、反応を完結した。溶液を順次 1N 塩酸、水、飽和炭酸水素ナトリウ
ム液、飽和塩化ナトリウム液で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧
で濃縮した。形成した残渣を 100 ml のアセトンに溶解し、100 ml のヘキサン
を加えた。1 時間冷蔵庫に放置した後、暗色の半固体の粗製物を取りだし、残り
の溶媒を蒸発せしめた。形成した無定形の固体を最小の酢酸エチルに溶解し、得
た溶液をシリカカラムに通し、2:1 酢酸エチル/ヘキサン溶媒系で溶出した。所
望の産物を含有するフラクションを集め、溶媒を蒸発せしめ、得た残渣を 20 ml
のアセトンに溶解し、50 ml のヘキサンを加えた。冷蔵庫に放置して、形成し
た産物を濾過し乾燥した。Embedded image 5.0 g of 2- (1-naphthyl) -4-thiazole is added to 100 ml of dichloromethane and 10 ml
In pyridine and cooled to 5 ° C. A solution of 15.0 g of N-tosyl-L-alanine chloride in 50 ml of dichloromethane was added dropwise to the above mixture. The reaction solution was stirred at room temperature to complete the reaction. The solution was washed sequentially with 1N hydrochloric acid, water, saturated sodium bicarbonate solution, saturated sodium chloride solution, dried over magnesium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue formed was dissolved in 100 ml of acetone and 100 ml of hexane was added. After standing in the refrigerator for 1 hour, the dark semi-solid crude was removed and the remaining solvent was evaporated. The amorphous solid formed was dissolved in minimal ethyl acetate and the resulting solution was passed through a silica column, eluting with a 2: 1 ethyl acetate / hexane solvent system. The fractions containing the desired product are collected, the solvent is evaporated and the residue obtained is reduced to 20 ml.
Was dissolved in acetone, and 50 ml of hexane was added. On standing in the refrigerator, the product formed was filtered and dried.
【００７５】 実施例１３ 2-(1,2-ジメチル-4-ピロリル)-4-(N-トシル-L-アラニルオキシ)チ
アゾールExample 13 2- (1,2-Dimethyl-4-pyrrolyl) -4- (N-tosyl-L-alanyloxy) thiazole
【化２７】 5.0 g の 2-(1,2-ジメチル-4-ピロリル)-4-チアゾールを 100 ml のジクロロ
メタンと 10 ml のピリジンとの溶液に溶かし、5 ℃に冷やした。15.0 g の塩化
N-トシル-L-アラニンの 50 ml ジクロロメタン溶液を上記混合物に滴下した。
反応溶液を室温で攪拌して、反応を完結した。溶液を順次 1N 塩酸、水、飽和炭
酸水素ナトリウム液、飽和塩化ナトリウム液で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥し
、濾過し、減圧で濃縮した。形成した残渣を 100 ml のアセトンに溶解し、100
ml のヘキサンを加えた。1 時間冷蔵庫に放置した後、暗色の半固体の粗製物を
取りだし、残りの溶媒を蒸発せしめた。形成した無定形の固体を最小の酢酸エチ
ルに溶解し、得た溶液をシリカカラムに通し、2:1 酢酸エチル/ヘキサン溶媒系
で溶出した。所望の産物を含有するフラクションを集め、溶媒を蒸発せしめ、得
た残渣を 20 ml のアセトンに溶解し、50 ml のヘキサンを加えた。冷蔵庫に放
置して、形成した産物を濾過し乾燥した。Embedded image 5.0 g of 2- (1,2-dimethyl-4-pyrrolyl) -4-thiazole was dissolved in a solution of 100 ml of dichloromethane and 10 ml of pyridine and cooled to 5 ° C. 15.0 g of chloride
A solution of N-tosyl-L-alanine in 50 ml of dichloromethane was added dropwise to the above mixture.
The reaction solution was stirred at room temperature to complete the reaction. The solution was washed sequentially with 1N hydrochloric acid, water, saturated sodium bicarbonate solution, saturated sodium chloride solution, dried over magnesium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure. Dissolve the residue formed in 100 ml of acetone and add 100
ml of hexane was added. After standing in the refrigerator for 1 hour, the dark semi-solid crude was removed and the remaining solvent was evaporated. The amorphous solid formed was dissolved in minimal ethyl acetate and the resulting solution was passed through a silica column, eluting with a 2: 1 ethyl acetate / hexane solvent system. The fractions containing the desired product were collected, the solvent was evaporated, the residue obtained was dissolved in 20 ml of acetone and 50 ml of hexane were added. On standing in the refrigerator, the product formed was filtered and dried.
【００７６】 実施例１６ 2-(3-インドリル)-4-(N-トシル-L-アラニルオキシ)チアゾールExample 16 2- (3-Indolyl) -4- (N-tosyl-L-alanyloxy) thiazole
【化２８】 5.0 g の 2-(3-インドリル)-4-チアゾールを 100 ml のジクロロメタンと 10
ml のピリジンとの溶液に溶かし、5 ℃に冷やした。15.0 g の塩化 N-トシル-L-
アラニンの 50 ml ジクロロメタン溶液を上記混合物に滴下した。反応溶液を室
温で攪拌して、反応を完結した。溶液を順次 1N 塩酸、水、飽和炭酸水素ナトリ
ウム液、飽和塩化ナトリウム液で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減
圧で濃縮した。形成した残渣を 100 ml のアセトンに溶解し、100 ml のヘキサ
ンを加えた。1 時間冷蔵庫に放置した後、暗色の半固体の粗製物を取りだし、残
りの溶媒を蒸発せしめた。形成した無定形の固体を最小の酢酸エチルに溶解し、
得た溶液をシリカカラムに通し、2:1 酢酸エチル/ヘキサン溶媒系で溶出した。
所望の産物を含有するフラクションを集め、溶媒を蒸発せしめ、得た残渣を 20
ml のアセトンに溶解し、50 ml のヘキサンを加えた。冷蔵庫に放置して、形成
した産物を濾過し乾燥した。Embedded image 5.0 g of 2- (3-indolyl) -4-thiazole is added to 100 ml of dichloromethane.
Dissolved in a solution with ml of pyridine and cooled to 5 ° C. 15.0 g of N-tosyl-L-chloride
A 50 ml solution of alanine in dichloromethane was added dropwise to the above mixture. The reaction solution was stirred at room temperature to complete the reaction. The solution was washed sequentially with 1N hydrochloric acid, water, saturated sodium bicarbonate solution, saturated sodium chloride solution, dried over magnesium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue formed was dissolved in 100 ml of acetone and 100 ml of hexane was added. After standing in the refrigerator for 1 hour, the dark semi-solid crude was removed and the remaining solvent was evaporated. Dissolve the amorphous solid formed in a minimum of ethyl acetate,
The resulting solution was passed through a silica column and eluted with a 2: 1 ethyl acetate / hexane solvent system.
The fractions containing the desired product are collected, the solvent is evaporated and the residue obtained is collected.
Dissolved in ml of acetone and added 50 ml of hexane. On standing in the refrigerator, the product formed was filtered and dried.
【００７７】 実施例１７ 2-(2-フリル)-4-(N-トシル-L-アラニルオキシ)チアゾールExample 17 2- (2-furyl) -4- (N-tosyl-L-alanyloxy) thiazole
【化２９】 5.0 g の 2-(2-フリル)-4-チアゾールを 100 ml のジクロロメタンと 10 ml
のピリジンとの溶液に溶かし、5 ℃に冷やした。15.0 g の塩化 N-トシル-L-ア
ラニンの 50 ml ジクロロメタン溶液を上記混合物に滴下した。反応溶液を室温
で攪拌して、反応を完結した。溶液を順次 1N 塩酸、水、飽和炭酸水素ナトリウ
ム液、飽和塩化ナトリウム液で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧
で濃縮した。形成した残渣を 100 ml のアセトンに溶解し、100 ml のヘキサン
を加えた。1 時間冷蔵庫に放置した後、暗色の半固体の粗製物を取りだし、残り
の溶媒を蒸発せしめた。形成した無定形の固体を最小の酢酸エチルに溶解し、得
た溶液をシリカカラムに通し、2:1 酢酸エチル/ヘキサン溶媒系で溶出した。所
望の産物を含有するフラクションを集め、溶媒を蒸発せしめ、得た残渣を 20 ml
のアセトンに溶解し、50 ml のヘキサンを加えた。冷蔵庫に放置して、形成し
た産物を濾過し乾燥した。Embedded image 5.0 g of 2- (2-furyl) -4-thiazole in 100 ml of dichloromethane and 10 ml
In pyridine and cooled to 5 ° C. A solution of 15.0 g of N-tosyl-L-alanine chloride in 50 ml of dichloromethane was added dropwise to the above mixture. The reaction solution was stirred at room temperature to complete the reaction. The solution was washed sequentially with 1N hydrochloric acid, water, saturated sodium bicarbonate solution, saturated sodium chloride solution, dried over magnesium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue formed was dissolved in 100 ml of acetone and 100 ml of hexane was added. After standing in the refrigerator for 1 hour, the dark semi-solid crude was removed and the remaining solvent was evaporated. The amorphous solid formed was dissolved in minimal ethyl acetate and the resulting solution was passed through a silica column, eluting with a 2: 1 ethyl acetate / hexane solvent system. The fractions containing the desired product are collected, the solvent is evaporated and the residue obtained is reduced to 20 ml.
Was dissolved in acetone, and 50 ml of hexane was added. On standing in the refrigerator, the product formed was filtered and dried.
【００７８】 実施例１８ 2-(β-スチリル)-4-(N-トシル-L-アラニルオキシ)チアゾールExample 18 2- (β-styryl) -4- (N-tosyl-L-alanyloxy) thiazole
【化３０】 5.0 g の 2-(β-スチリル)-4-チアゾールを 100 ml のジクロロメタンと 10 m
l のピリジンとの溶液に溶かし、5 ℃に冷やした。15.0 g の塩化 N-トシル-L-
アラニンの 50 ml ジクロロメタン溶液を上記混合物に滴下した。反応溶液を室
温で攪拌して、反応を完結した。溶液を順次 1N 塩酸、水、飽和炭酸水素ナトリ
ウム液、飽和塩化ナトリウム液で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減
圧で濃縮した。形成した残渣を 100 ml のアセトンに溶解し、100 ml のヘキサ
ンを加えた。1 時間冷蔵庫に放置した後、暗色の半固体の粗製物を取りだし、残
りの溶媒を蒸発せしめた。形成した無定形の固体を最小の酢酸エチルに溶解し、
得た溶液をシリカカラムに通し、2:1 酢酸エチル/ヘキサン溶媒系で溶出した。
所望の産物を含有するフラクションを集め、溶媒を蒸発せしめ、得た残渣を 20
ml のアセトンに溶解し、50 ml のヘキサンを加えた。冷蔵庫に放置して、形成
した産物を濾過し乾燥した。Embedded image 5.0 g of 2- (β-styryl) -4-thiazole are added to 100 ml of dichloromethane and 10 m
dissolved in a solution of 1 in pyridine and cooled to 5 ° C. 15.0 g of N-tosyl-L-chloride
A 50 ml solution of alanine in dichloromethane was added dropwise to the above mixture. The reaction solution was stirred at room temperature to complete the reaction. The solution was washed sequentially with 1N hydrochloric acid, water, saturated sodium bicarbonate solution, saturated sodium chloride solution, dried over magnesium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue formed was dissolved in 100 ml of acetone and 100 ml of hexane was added. After standing in the refrigerator for 1 hour, the dark semi-solid crude was removed and the remaining solvent was evaporated. Dissolve the amorphous solid formed in a minimum of ethyl acetate,
The resulting solution was passed through a silica column and eluted with a 2: 1 ethyl acetate / hexane solvent system.
The fractions containing the desired product are collected, the solvent is evaporated and the residue obtained is collected.
Dissolved in ml of acetone and added 50 ml of hexane. On standing in the refrigerator, the product formed was filtered and dried.
【００７９】 実施例１９ 2-(3-メトキシフェニル)-4-(N-トシル-L-アラニルオキシ)チアゾー
ルExample 19 2- (3-methoxyphenyl) -4- (N-tosyl-L-alanyloxy) thiazole
【化３１】 5.0 g の 2-(3-メトキシフェニル)-4-チアゾールを 100 ml のジクロロメタン
と 10 ml のピリジンとの溶液に溶かし、5 ℃に冷やした。15.0 g の塩化 N-ト
シル-L-アラニンの 50 ml ジクロロメタン溶液を上記混合物に滴下した。反応溶
液を室温で攪拌して、反応を完結した。溶液を順次 1N 塩酸、水、飽和炭酸水素
ナトリウム液、飽和塩化ナトリウム液で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過
し、減圧で濃縮した。形成した残渣を 100 ml のアセトンに溶解し、100 ml の
ヘキサンを加えた。1 時間冷蔵庫に放置した後、暗色の半固体の粗製物を取りだ
し、残りの溶媒を蒸発せしめた。形成した無定形の固体を最小の酢酸エチルに溶
解し、得た溶液をシリカカラムに通し、2:1 酢酸エチル/ヘキサン溶媒系で溶出
した。所望の産物を含有するフラクションを集め、溶媒を蒸発せしめ、得た残渣
を 20 ml のアセトンに溶解し、50 ml のヘキサンを加えた。冷蔵庫に放置して
、形成した産物を濾過し乾燥した。Embedded image 5.0 g of 2- (3-methoxyphenyl) -4-thiazole was dissolved in a solution of 100 ml of dichloromethane and 10 ml of pyridine and cooled to 5 ° C. A solution of 15.0 g of N-tosyl-L-alanine chloride in 50 ml of dichloromethane was added dropwise to the above mixture. The reaction solution was stirred at room temperature to complete the reaction. The solution was washed sequentially with 1N hydrochloric acid, water, saturated sodium bicarbonate solution, saturated sodium chloride solution, dried over magnesium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue formed was dissolved in 100 ml of acetone and 100 ml of hexane was added. After standing in the refrigerator for 1 hour, the dark semi-solid crude was removed and the remaining solvent was evaporated. The amorphous solid formed was dissolved in minimal ethyl acetate and the resulting solution was passed through a silica column, eluting with a 2: 1 ethyl acetate / hexane solvent system. The fractions containing the desired product were collected, the solvent was evaporated, the residue obtained was dissolved in 20 ml of acetone and 50 ml of hexane were added. On standing in the refrigerator, the product formed was filtered and dried.
【００８０】 産物をプロトン NMR 分析により同定した。産物のサンプルをアセトン-ｄ6(15
mg/0.7 ml)に溶解し、プロトン・スペクトルを、AMRI SOP INS-041 で、Bruker(
商標) 300 MHz NMR スペクトロメーター(Bruker-Physik AG,Germany)を用いて収
集した。The product was identified by proton NMR analysis. Samples of product acetone -d 6 (15
mg / 0.7 ml), and the proton spectrum was analyzed using AMRI SOP INS-041 by Bruker (
(Registered trademark) 300 MHz NMR spectrometer (Bruker-Physik AG, Germany).
【００８１】 産物のさらなる同定確認を赤外スペクトル分析によって行った。最初に 204 m
g の臭化カリウムを 1.3 mｇの産物と混合し、次いで Wig L Bug（商標)(Cresce
nt Denta1 Manufacturing Co.,Illinois)で砕いた。この混合物をディスクに圧
縮し、赤外スペクトルを 1000 IR スペクトロメータ、AMRI SOP INS-026 で収集
した。サンプルを 4000 から 400 cm-1で走査した。Further identification of the product was performed by infrared spectroscopy. First 204 m
g of potassium bromide is mixed with 1.3 mg of product and then Wig L Bug ™ (Cresce
nt Denta1 Manufacturing Co., Illinois). The mixture was compressed to disk and infrared spectra were collected on a 1000 IR spectrometer, AMRI SOP INS-026. Samples were scanned from 4000 to 400 cm -1 .
【００８２】 実施例２０ 2-(2-メトキシフェニル)-4-(N-トシル-L-アラニルオキシ)チアゾー
ルExample 20 2- (2-methoxyphenyl) -4- (N-tosyl-L-alanyloxy) thiazole
【化３２】 5.0 g の 2-(2-メトキシフェニル)-4-チアゾールを 100 ml のジクロロメタン
と 10 ml のピリジンとの溶液に溶かし、5 ℃に冷やした。15.0 g の塩化 N-ト
シル-L-アラニンの 50 ml ジクロロメタン溶液を上記混合物に滴下した。反応溶
液を室温で攪拌して、反応を完結した。溶液を順次 1N 塩酸、水、飽和炭酸水素
ナトリウム液、飽和塩化ナトリウム液で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過
し、減圧で濃縮した。形成した残渣を 100 ml のアセトンに溶解し、100 ml の
ヘキサンを加えた。1 時間冷蔵庫に放置した後、暗色の半固体の粗製物を取りだ
し、残りの溶媒を蒸発せしめた。形成した無定形の固体を最小の酢酸エチルに溶
解し、得た溶液をシリカカラムに通し、2:1 酢酸エチル/ヘキサン溶媒系で溶出
した。所望の産物を含有するフラクションを集め、溶媒を蒸発せしめ、得た残渣
を 20 ml のアセトンに溶解し、50 ml のヘキサンを加えた。冷蔵庫に放置して
、形成した産物を濾過し乾燥した。Embedded image 5.0 g of 2- (2-methoxyphenyl) -4-thiazole was dissolved in a solution of 100 ml of dichloromethane and 10 ml of pyridine and cooled to 5 ° C. A solution of 15.0 g of N-tosyl-L-alanine chloride in 50 ml of dichloromethane was added dropwise to the above mixture. The reaction solution was stirred at room temperature to complete the reaction. The solution was washed sequentially with 1N hydrochloric acid, water, saturated sodium bicarbonate solution, saturated sodium chloride solution, dried over magnesium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue formed was dissolved in 100 ml of acetone and 100 ml of hexane was added. After standing in the refrigerator for 1 hour, the dark semi-solid crude was removed and the remaining solvent was evaporated. The amorphous solid formed was dissolved in minimal ethyl acetate and the resulting solution was passed through a silica column, eluting with a 2: 1 ethyl acetate / hexane solvent system. The fractions containing the desired product were collected, the solvent was evaporated, the residue obtained was dissolved in 20 ml of acetone and 50 ml of hexane were added. On standing in the refrigerator, the product formed was filtered and dried.
【００８３】 産物を２つのプロトン NMR 分析により同定した。第１の分析では、産物のサ
ンプルをアセトン-ｄ6(11 mg/0.7 ml)に溶解し、プロトン・スペクトルを、AMRI
SOP INS-041 で、Bruker(商標) 300 MHz NMR スペクトロメーター(Bruker-Phys
ik AG,Germany)を用いて収集した。第２の分析では、プロトン・スペクトルを、
Bruker(商標) 500 MHz NMR スペクトロメーター(Bruker-Physik AG,Germany)を
用いて収集した。The product was identified by two proton NMR analyses. In the first analysis, a sample of the product was dissolved in acetone-d 6 (11 mg / 0.7 ml) and the proton spectrum was analyzed by AMRI.
SOP INS-041, BrukerTM 300 MHz NMR Spectrometer (Bruker-Physics)
ik AG, Germany). In the second analysis, the proton spectrum was
Collected using a Bruker ™ 500 MHz NMR spectrometer (Bruker-Physik AG, Germany).
【００８４】 産物のさらなる同定確認を赤外スペクトル分析によって行った。最初に 235 m
g の臭化カリウムを 2.4 mｇの産物と混合し、次いで Wig L Bug（商標)(Cresce
nt Denta1 Manufacturing Co.,Illinois)で砕いた。この混合物をディスクに圧
縮し、赤外スペクトルを 1000 IR スペクトロメータ、AMRI SOP INS-026 で収集
した。サンプルを 4000 から 400 cm-1で走査した。Further identification of the product was performed by infrared spectroscopy. First 235 m
g of potassium bromide is mixed with 2.4 mg of the product and then Wig L Bug ™ (Cresce
nt Denta1 Manufacturing Co., Illinois). The mixture was compressed to disk and infrared spectra were collected on a 1000 IR spectrometer, AMRI SOP INS-026. Samples were scanned from 4000 to 400 cm -1 .
【００８５】 実施例２１ 白血球診断ディバイスの製造 尿中の白血球の存在を検定するために、本発明の化合物を含有する試験小片を
つくった。四角の小型試験紙をポリスチレン小片の端に接着し、次の２種の溶液
を順次沈着せしめ乾燥した。第１溶液 (l00 ml の水溶液)は 5% (w/v) ホウ酸(p
H 7.7) および 2 % (w/v) のポリビニルピロリドン(K-10) を含有する。沈着紙
を 60 ℃に 10 分間加熱して乾燥した。第２溶液(100 m1 のアセトン)は 0.06%
(w/v) の 2-(2-チエニル)-4-(N-トシル-L-アラニルオキシ)チアゾールまたは2-(
β-スチリル)-4-(N-トシル-L-アラニルオキシ)チアゾール、0.05 % (w/v)の塩化
2-メトキシ-4-モルホリノベンゼンジアゾニウム・塩化亜鉛複塩、1.0 % (w/v)
n-デカノールを含有する。沈着紙を 50 ℃に 5 分間加熱して乾燥した。Example 21 Preparation of a Leukocyte Diagnostic Device To test for the presence of leukocytes in urine, test strips containing compounds of the present invention were made. A small square test paper was adhered to the end of a small piece of polystyrene, and the following two solutions were sequentially deposited and dried. The first solution (100 ml of aqueous solution) is 5% (w / v) boric acid (p
H 7.7) and 2% (w / v) of polyvinylpyrrolidone (K-10). The deposited paper was dried by heating at 60 ° C. for 10 minutes. 0.06% for the second solution (100 ml acetone)
(w / v) 2- (2-thienyl) -4- (N-tosyl-L-alanyloxy) thiazole or 2- (
β-styryl) -4- (N-tosyl-L-alanyloxy) thiazole, 0.05% (w / v) chloride
2-methoxy-4-morpholinobenzenediazonium / zinc chloride double salt, 1.0% (w / v)
Contains n-decanol. The deposited paper was dried by heating at 50 ° C. for 5 minutes.
【００８６】 白血球アッセイ(すなわち、このアッセイは尿中の白血球の存在を正しく同定
するのに有用である)の適切な実施を、本実施例に挙げたチアゾールエステルの
いずれか１つを含有する診断ディバイスを用いて行った。[0086] Proper performance of the leukocyte assay (ie, this assay is useful for correctly identifying the presence of leukocytes in urine) is confirmed by the diagnosis containing any one of the thiazole esters listed in this example. This was performed using a device.
【００８７】 各アッセイは、試験小片（上記のように製造）を尿サンプルに接触せしめて行
った。尿サンプルが白血球を含有していると、試験小片は紫色を呈した。最初の
紫呈色は約 10 秒以内に現れ、徐々に反応完結まで暗色化した。反応は約 1 分
で終了した。反応完結による色の変化は、尿サンプル中に白血球が存在するかど
うかを同定するのに適しているのみでなく、存在する白血球の濃度を半定量的に
測定するのに適していた。Each assay was performed by contacting a test strip (produced as described above) with a urine sample. When the urine sample contained leukocytes, the test strips became purple. The first purple color appeared within about 10 seconds and gradually darkened to completion. The reaction was completed in about 1 minute. The color change due to the completion of the reaction was not only suitable for identifying the presence of leukocytes in the urine sample, but also for determining the concentration of leukocytes present semi-quantitatively.
【００８８】 実施例２２ 白血球診断ディバイスの製造 尿中の白血球の存在を検定するために、本発明の組成物を含有する試験小片を
つくった。四角の小型試験紙をポリスチレン小片の端に接着し、次の２種の溶液
を順次沈着せしめ乾燥した。第１溶液 (l00 ml の水溶液)は 5% (w/v) ホウ酸(p
H 7.7) および 2 % (w/v) のポリビニルピロリドン(K-10) を含有する。沈着紙
を 60 ℃に 10 分間加熱して乾燥した。第２溶液(100 m1 のアセトン)は 0.06%
(w/v) の 2-(4-ピリジル)-4-(N-トシル-L-アラニルオキシ)チアゾール；2-(1-ナ
フチル)-4-(N-トシル-L-アラニルオキシ)チアゾール；2-(1,2-ジメチル-4-ピロ
リル)-4-(N-トシル-L-アラニルオキシ)チアゾール；2-(2-フリル)-4-トシル-L-
アラニルオキシ)チアゾール；または 2-(3-インドリル)-4-(N-トシル-L-アラニ
ルオキシ)チアゾール、0.05 % (w/v)の塩化 2-メトキシ-4-モルホリノベンゼン
ジアゾニウム・塩化亜鉛複塩、1.0 % (w/v) n-デカノールを含有する。沈着紙を
50 ℃に 5 分間加熱して乾燥した。Example 22 Preparation of a Leukocyte Diagnostic Device To test for the presence of leukocytes in urine, test strips containing the composition of the present invention were made. A small square test paper was adhered to the end of a small piece of polystyrene, and the following two solutions were sequentially deposited and dried. The first solution (100 ml of aqueous solution) is 5% (w / v) boric acid (p
H 7.7) and 2% (w / v) of polyvinylpyrrolidone (K-10). The deposited paper was dried by heating at 60 ° C. for 10 minutes. 0.06% for the second solution (100 ml acetone)
(w / v) 2- (4-pyridyl) -4- (N-tosyl-L-alanyloxy) thiazole; 2- (1-naphthyl) -4- (N-tosyl-L-alanyloxy) thiazole; (1,2-dimethyl-4-pyrrolyl) -4- (N-tosyl-L-alanyloxy) thiazole; 2- (2-furyl) -4-tosyl-L-
Alanyloxy) thiazole; or 2- (3-indolyl) -4- (N-tosyl-L-alanyloxy) thiazole, 0.05% (w / v) 2-methoxy-4-morpholinobenzenediazonium chloride / zinc chloride double salt, Contains 1.0% (w / v) n-decanol. With deposited paper
Heated to 50 ° C for 5 minutes and dried.
【００８９】 各アッセイは、試験小片（上記のように製造）を尿サンプルに接触せしめて行
った。尿サンプルが白血球を含有していると、試験小片は紫色を呈した。最初の
紫呈色は約 10 秒以内に現れ、徐々に反応完結まで暗色化した。反応は約 1 分
で終了した。反応完結による色の変化は、尿サンプル中に白血球が存在するかど
うかを同定するのに適しているのみでなく、存在する白血球の濃度を半定量的に
測定するのに適していた。Each assay was performed by contacting a test strip (produced as described above) with a urine sample. When the urine sample contained leukocytes, the test strips became purple. The first purple color appeared within about 10 seconds and gradually darkened to completion. The reaction was completed in about 1 minute. The color change due to the completion of the reaction was not only suitable for identifying the presence of leukocytes in the urine sample, but also for determining the concentration of leukocytes present semi-quantitatively.
【００９０】 実施例２３ 白血球診断ディバイスの製造 尿中の白血球の存在を検定するために、本発明の化合物を含有する試験小片を
つくった。四角の小型試験紙をポリスチレン小片の端に接着し、次の２種の溶液
を順次沈着せしめ乾燥した。第１溶液 (l00 ml の水溶液)は 5% (w/v) ホウ酸(p
H 7.7) および 2 % (w/v) のポリビニルピロリドン(K-10) を含有する。沈着紙
を 60 ℃に 10 分間加熱して乾燥した。第２溶液(100 m1 のアセトン)は 0.06%
(w/v) の 2-(3-メトキシフェニル)-4-(N-トシル-L-アラニルオキシ)チアゾール
または 2-(2-メトキシフェニル)-4-(N-トシル-L-アラニルオキシ)チアゾール、0
.05 % (w/v)の塩化 2-メトキシ-4-モルホリノベンゼンジアゾニウム・塩化亜鉛f
複塩、1.0 % (w/v) n-デカノールを含有する。沈着紙を 50 ℃に 5 分間加熱し
て乾燥した。Example 23 Preparation of a Leukocyte Diagnostic Device To test for the presence of leukocytes in urine, test strips containing compounds of the present invention were prepared. A small square test paper was adhered to the end of a small piece of polystyrene, and the following two solutions were sequentially deposited and dried. The first solution (100 ml of aqueous solution) is 5% (w / v) boric acid (p
H 7.7) and 2% (w / v) of polyvinylpyrrolidone (K-10). The deposited paper was dried by heating at 60 ° C. for 10 minutes. 0.06% for the second solution (100 ml acetone)
(w / v) 2- (3-methoxyphenyl) -4- (N-tosyl-L-alanyloxy) thiazole or 2- (2-methoxyphenyl) -4- (N-tosyl-L-alanyloxy) thiazole, 0
.05% (w / v) 2-methoxy-4-morpholinobenzenediazonium chloride / zinc chloride f
Double salt, containing 1.0% (w / v) n-decanol. The deposited paper was dried by heating at 50 ° C. for 5 minutes.
【００９１】 白血球アッセイ(すなわち、このアッセイは尿中の白血球の存在を正しく同定
するのに有用である)の適切な実施を、本実施例に挙げたチアゾールエステルの
いずれか１つを含有する診断ディバイスを用いて行った。[0091] Proper performance of the leukocyte assay (ie, this assay is useful in correctly identifying the presence of leukocytes in urine) is confirmed by the diagnosis containing any one of the thiazole esters listed in this example. This was performed using a device.
【００９２】 各アッセイは、試験小片（上記のように製造）を尿サンプルに接触せしめて行
った。尿サンプルが白血球を含有していると、試験小片は紫色を呈した。最初の
紫呈色は約 10 秒以内に現れ、徐々に反応完結まで暗色化した。反応は約 1 分
で終了した。反応完結による色の変化は、尿サンプル中に白血球が存在するかど
うかを同定するのに適しているのみでなく、存在する白血球の濃度を半定量的に
測定するのに適していた。 上記の明細書、実施例、データは、本発明の多くの方法、化合物、組成物、デ
ィバイスについての製造および使用を完全に記述する。本発明の多くの実施態様
を本発明の精神および範囲を逸脱することなしに行い得るので、本発明は添付の
特許請求の範囲中に存在する。[0092] Each assay was performed by contacting a test strip (made as described above) with a urine sample. When the urine sample contained leukocytes, the test strips became purple. The first purple color appeared within about 10 seconds and gradually darkened to completion. The reaction was completed in about 1 minute. The color change due to the completion of the reaction was not only suitable for identifying the presence of leukocytes in the urine sample, but also for determining the concentration of leukocytes present semi-quantitatively. The above specification, examples and data provide a complete description of the manufacture and use of many methods, compounds, compositions and devices of the present invention. Since many embodiments of the invention can be made without departing from the spirit and scope of the invention, the invention resides in the claims hereinafter appended.
【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書[Procedural Amendment] Submission of translation of Article 34 Amendment
【提出日】平成１３年１月３０日（２００１．１．３０）[Submission date] January 30, 2001 (2001.1.130)
【手続補正１】[Procedure amendment 1]
【補正対象書類名】明細書[Document name to be amended] Statement
【補正対象項目名】特許請求の範囲[Correction target item name] Claims
【補正方法】変更[Correction method] Change
【補正の内容】[Contents of correction]
【特許請求の範囲】[Claims]
【化１】 式中、A は N-遮断アミノ酸残基またはN-遮断ペプチド鎖であり、 R1 は非置換または置換ヘテロアリール; 非置換または置換アリールで置換され
たアルケニル; 非置換または置換ヘテロアリールで置換されたアルケニルである
。Embedded image Wherein A is an N-blocked amino acid residue or an N-blocked peptide chain; R 1 is unsubstituted or substituted heteroaryl; alkenyl substituted with unsubstituted or substituted aryl; unsubstituted or substituted heteroaryl Alkenyl.
【化２】 式中、A は N-遮断アミノ酸残基またはN-遮断ペプチド鎖であり、 R２ が、少なくとも１つの環が芳香族である非置換または置換の融合ヒドロカル
ビル環である。Embedded image Wherein A is an N-blocked amino acid residue or an N-blocked peptide chain, and R 2 is an unsubstituted or substituted fused hydrocarbyl ring wherein at least one ring is aromatic.
【化３】 式中、A は N-遮断アミノ酸残基またはN-遮断ペプチド鎖であり、 R３およびR４は、それぞれ独立的に、水素、非置換または置換アリール、非置換
または置換ヘテロアリール、非置換または置換アルキル、非置換または置換アル
ケニル、非置換または置換アルコキシ、アミノ、非置換または置換アシル、ハロ
、ニトロ、シアノ、-SO3H、ヒドロキシである（ただし、R３およびR４は両者同
時に水素ではなく、化合物は促進塩なしの組成物において使用される）。Embedded image Wherein A is an N-blocked amino acid residue or an N-blocked peptide chain, and R 3 and R 4 are each independently hydrogen, unsubstituted or substituted aryl, unsubstituted or substituted heteroaryl, unsubstituted or Substituted alkyl, unsubstituted or substituted alkenyl, unsubstituted or substituted alkoxy, amino, unsubstituted or substituted acyl, halo, nitro, cyano, —SO 3 H, hydroxy (provided that R 3 and R 4 are both hydrogen Rather, the compounds are used in compositions without a promoting salt).
【手続補正２】[Procedure amendment 2]
【補正対象書類名】明細書[Document name to be amended] Statement
【補正対象項目名】００９２[Correction target item name] 0092
【補正方法】変更[Correction method] Change
【補正の内容】[Contents of correction]
【００９２】 各アッセイは、試験小片（上記のように製造）を尿サンプルに接触せしめて行
った。尿サンプルが白血球を含有していると、試験小片は紫色を呈した。最初の
紫呈色は約 10 秒以内に現れ、徐々に反応完結まで暗色化した。反応は約 1 分
で終了した。反応完結による色の変化は、尿サンプル中に白血球が存在するかど
うかを同定するのに適しているのみでなく、存在する白血球の濃度を半定量的に
測定するのに適していた。[0092] Each assay was performed by contacting a test strip (made as described above) with a urine sample. When the urine sample contained leukocytes, the test strips became purple. The first purple color appeared within about 10 seconds and gradually darkened to completion. The reaction was completed in about 1 minute. The color change due to the completion of the reaction was not only suitable for identifying the presence of leukocytes in the urine sample, but also for determining the concentration of leukocytes present semi-quantitatively.
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ１２Ｑ 1/37 Ｃ１２Ｑ 1/37 1/44 1/44 Ｇ０１Ｎ 33/493 Ｇ０１Ｎ 33/493 Ｂ (31)優先権主張番号 ０９／３６５，３２２ (32)優先日 平成11年７月30日(1999．7．30) (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (31)優先権主張番号 ０９／３６５，５９２ (32)優先日 平成11年７月30日(1999．7．30) (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ， ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｒ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ， ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，Ｋ Ｚ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ， ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，Ｓ Ｋ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ Ｆターム(参考） 2G045 AA03 AA16 CA11 CB03 DA20 FA11 FB01 FB11 FB17 GC12 4B029 AA07 BB11 BB16 CC01 FA01 4B063 QA01 QQ03 QQ08 QQ32 QQ36 QR41 QR50 QR58 QR84 QS28 QS36 QX01 4C033 AD11 AD16 AD17 4C063 CC62 CC75 CC92 DD04 DD06 DD12 DD62 ──────────────────────────────────────────────────続 き Continued on the front page (51) Int.Cl. 7 Identification symbol FI Theme coat ゛ (Reference) C12Q 1/37 C12Q 1/37 1/44 1/44 G01N 33/493 G01N 33/493 B (31) Priority Claim number 09 / 365,322 (32) Priority date July 30, 1999 (July 30, 1999) (33) Priority claim country United States (US) (31) Priority claim number 09 / 365,592 (32) Priority date July 30, 1999 (July 30, 1999) (33) Priority country United States (US) (81) Designated country EP (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES , FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE), OA (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GW, ML, MR, NE) , SN, TD, TG), AP (GH, G , KE, LS, MW, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZW), EA (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM), AE, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY, CA, CH, CN, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, EE, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR , HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, NO, NZ, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL, TJ, TM, TR, TT, TZ, UA, UG, UZ, VN, YU, ZA, ZW F term (reference) 2G045 AA03 AA16 CA11 CB03 DA20 FA11 FB01 FB11 FB17 GC12 4B029 AA07 BB11 BB16 CC01 FA01 4B0 63 QA01 QQ03 QQ08 QQ32 QQ36 QR41 QR50 QR58 QR84 QS28 QS36 QX01 4C033 AD11 AD16 AD17 4C063 CC62 CC75 CC92 DD04 DD06 DD12 DD62
Claims (32)
たアルケニル; 非置換または置換ヘテロアリールで置換されたアルケニルである
。1. A compound of the following formula or a salt or solvate thereof: Wherein A is an N-blocked amino acid residue or an N-blocked peptide chain; R 1 is unsubstituted or substituted heteroaryl; alkenyl substituted with unsubstituted or substituted aryl; unsubstituted or substituted heteroaryl Alkenyl.
、ハロ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシまたは-SO3H で置換されたヘテロアリール
である、請求項１の化合物。2. The compound of claim 1, wherein R 1 is alkyl, alkoxy, alkenyl, amino, acyl, halo, nitro, cyano, hydroxy or heteroaryl substituted with —SO 3 H.
または置換ヘテロアリールである、請求項１の化合物。3. The compound of claim 1, wherein R 1 is an unsubstituted or substituted heteroaryl selected from the group consisting of a 5-membered ring and a 6-membered ring.
から選ばれる非置換または置換ヘテロアリールである、請求項１の化合物。4. The compound of claim 1, wherein R 1 is an unsubstituted or substituted heteroaryl selected from the group consisting of a nitrogen-containing ring, an oxygen-containing ring and a sulfur-containing ring.
りなる群から選ばれるアルケニルであって、そのアルケニルが非置換もしくは置
換アリールまたは非置換もしくは置換ヘテロアリールで置換されている、請求項
１の化合物。5. The method of claim 1, wherein R 1 is alkenyl selected from the group consisting of ethenyl, propenyl, propenyl and butenyl, wherein the alkenyl is substituted with unsubstituted or substituted aryl or unsubstituted or substituted heteroaryl. Compound.
より置換されたアルケニルである、請求項１の化合物。6. The compound of claim 1, wherein R 1 is alkenyl substituted by aryl which is unsubstituted phenyl or substituted phenyl.
シル、ハロ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシまたは-SO3H で置換されている、請求
項６の化合物。7. The compound of claim 6, wherein the phenyl is substituted with an alkyl, alkenyl, alkoxy, amino, acyl, halo, nitro, cyano, hydroxy or —SO 3 H.
そのヘテロアリールがアルキル、アルコキシ、アルケニル、アミノ、アシル、ハ
ロ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシまたは-SO3H で置換されている、請求項１の化
合物。8. R 1 is alkenyl substituted with a substituted heteroaryl,
The heteroaryl is alkyl, alkoxy, alkenyl, amino, acyl, halo, nitro, cyano, substituted with hydroxy or -SO 3 H, The compound of claim 1.
アリールで置換されたアルケニルである、請求項１の化合物。9. The compound of claim 1, wherein R 1 is alkenyl substituted with a heteroaryl selected from the group consisting of a 5-membered ring and a 6-membered ring.
群から選ばれるヘテロアリールで置換されたアルケニルである、請求項１の化合
物。10. alkenyl substituted with a heteroaryl selected from the group R 1 is made of nitrogen-containing rings, oxygen-containing rings, and sulfur-containing ring compound of claim 1.
ールである、請求項１の化合物。11. The compound of claim 1, wherein R 1 is heteroaryl substituted with alkyl or alkoxy.
ビル環である。12. A compound of the following formula or a salt or solvate thereof: Wherein A is an N-blocked amino acid residue or an N-blocked peptide chain, and R 2 is an unsubstituted or substituted fused hydrocarbyl ring wherein at least one ring is aromatic.
ルよりなる群から選ばれる、請求項１２の化合物。13. The compound of claim 12, wherein R 2 is selected from the group consisting of naphthyl, tetrahydronaphthyl and anthranyl.
ル、アルコキシ、アルケニル、アミノ、アシル、ハロ、ニトロ、シアノ、ヒドロ
キシまたは-SO3H で置換されている、請求項１２の化合物。14. The compound of claim 12, wherein the fused hydrocarbyl ring is substituted on at least one ring with alkyl, alkoxy, alkenyl, amino, acyl, halo, nitro, cyano, hydroxy or -SO 3 H.
から選ばれる少なくとも１つの環を含有する、請求項１２の化合物。15. The compound of claim 12, wherein the fused hydrocarbyl ring contains at least one ring selected from the group consisting of a 5-membered ring and a 6-membered ring.
ルまたはアルコキシで置換されている、請求項１２の化合物。16. The compound of claim 12, wherein the fused hydrocarbyl ring is substituted on at least one ring with alkyl or alkoxy.
または置換ヘテロアリール、非置換または置換アルキル、非置換または置換アル
ケニル、非置換または置換アルコキシ、アミノ、非置換または置換アシル、ハロ
、ニトロ、シアノ、-SO3H、ヒドロキシである（ただし、R３およびR４は両者同
時に水素ではない）。17. A compound of the following formula or a salt or solvate thereof: Wherein A is an N-blocked amino acid residue or an N-blocked peptide chain, and R 3 and R 4 are each independently hydrogen, unsubstituted or substituted aryl, unsubstituted or substituted heteroaryl, unsubstituted or Substituted alkyl, unsubstituted or substituted alkenyl, unsubstituted or substituted alkoxy, amino, unsubstituted or substituted acyl, halo, nitro, cyano, —SO 3 H, hydroxy (provided that R 3 and R 4 are both hydrogen Absent).
プロポキシまたはブトキシよりなる群から選ばれる、請求項１７の化合物。18. At least one of R 3 and R 4 is methoxy, ethoxy,
18. The compound of claim 17, wherein the compound is selected from the group consisting of propoxy or butoxy.
またはブトキシである、請求項１８の化合物。19. The compound of claim 18, wherein R 3 is hydrogen and R 4 is methoxy, ethoxy, propoxy or butoxy.
請求項１９の化合物。20. The position of R 4 is meta or ortho to thiazolyl,
A compound according to claim 19.
請求項１−２１の化合物。21. A is N-blocked alanine or N-blocked polyalanine,
22. The compound of claim 1-21.
物。22. A composition comprising the compound of claim 1-21 and a diazonium salt.
ルホン酸・塩化亜鉛複塩；6-ジアゾ-1-ナフトール-3-スルホン酸・塩化複塩；塩
化 2-メトキシ-4-モルホリノベンゼンジアゾニウム・塩化亜鉛複塩よりなる群か
ら選ばれる、請求項２２の組成物。23. The diazonium salt is 1-diazo-8-naphthol-3,6-disulfonic acid chloride / double zinc chloride salt; 6-diazo-1-naphthol-3-sulfonic acid / double chloride salt; 2-methoxy chloride 23. The composition of claim 22, wherein the composition is selected from the group consisting of -4-morpholinobenzenediazonium / zinc chloride double salt.
中の白血球を検定するための診断デェバイス。25. A diagnostic device for assaying leukocytes in urine, comprising an internal carrier having the compound of claim 1-21 deposited thereon.
請求項２５のデェバイス。26. The internal support has a diazonium salt deposited thereon.
28. The device of claim 25.
ルホン酸・塩化亜鉛複塩；6-ジアゾ-1-ナフトール-3-スルホン酸・塩化複塩；塩
化 2-メトキシ-4-モルホリノベンゼンジアゾニウム・塩化亜鉛複塩よりなる群か
ら選ばれる、請求項２６のデェバイス。27. The diazonium salt is 1-diazo-8-naphthol-3,6-disulfonic acid chloride / double zinc chloride salt; 6-diazo-1-naphthol-3-sulfonic acid / double chloride salt; 2-methoxy chloride 27. The device of claim 26, wherein the device is selected from the group consisting of -4-morpholinobenzenediazonium / zinc chloride double salt.
。29. The device of claim 25, wherein the device does not include a promoting salt.
物に接触せしめることを含む、白血球の存在を検定するための方法。30. A method for assaying for the presence of leukocytes, comprising contacting a urine sample with a diazonium salt and a compound of claim 1-21.
ルホン酸・塩化亜鉛複塩；6-ジアゾ-1-ナフトール-3-スルホン酸・塩化複塩；塩
化 2-メトキシ-4-モルホリノベンゼンジアゾニウム・塩化亜鉛複塩よりなる群か
ら選ばれる、請求項３０の方法。31. The diazonium salt is 1-diazo-8-naphthol-3,6-disulfonic acid / double zinc chloride salt; 6-diazo-1-naphthol-3-sulfonic acid / double chloride salt; 2-methoxy chloride 31. The method of claim 30, wherein the method is selected from the group consisting of -4-morpholinobenzenediazonium / zinc chloride double salt.
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