JP2002522396A

JP2002522396A - 乾癬治療用プロテアーゼ阻害因子

Info

Publication number: JP2002522396A
Application number: JP2000563303A
Authority: JP
Inventors: ブン・クライブ・レイトン; シャープ・フィリップ・ジョン
Original assignee: バイオテック・オーストラリア・ピーティーワイ・リミテッド
Priority date: 1998-08-05
Filing date: 1999-08-05
Publication date: 2002-07-23
Also published as: CA2339485A1; CN1322138A; KR20010072278A; US6288025B1; IL141056A0; NO20010569L; EP1102599A1; AUPP508798A0; WO2000007620A1; NO20010569D0; EP1102599A4

Abstract

(57)【要約】【課題】プラスミノーゲン活性化因子／阻害因子系を調節し、且つ特にプラスミノーゲン活性化因子阻害因子を利用する乾癬を治療するための新規な方法及び組成物を開発する。【解決手段】ＰＡＩ−２等のウロキナーゼイン阻害因子の局所適用、又はＰＡＩ−２等のプロテアーゼ阻害因子と、他のセリンプロテアーゼ阻害因子との組み合わせ、及び／又はメタロプロテイナーゼの阻害因子、酸プロテアーゼの阻害因子及びチオールプロテアーゼの阻害因子等のプロテアーゼ阻害因子との組み合わせの局所適用により、乾癬を治療することができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】（技術分野及び背景技術）乾癬は、肥大、赤化及びスケーリング（scaling）皮膚の紅斑性プラークを特
徴とする慢性皮膚病である。乾癬は、人口の約２％が冒される。発症は、ほとん
どの場合、成人初期であるが、幼児期や老人にも発症することもある。この疾病
の症状は変化し、通常、緩解期と再発期が繰り返されることが特徴である。より
重症の場合、乾癬は、皮膚の最大９０％を冒し、生命を脅かすこともある。

【０００２】細胞レベルでは、乾癬は、Ｔリンパ球及び他の免疫系細胞の浸潤を伴う表皮ケ
ラチノサイトの過剰増殖を特徴としており、後者の場合は、自己免疫疾患の場合
と類似した炎症を生じる。ケラチノサイトが基底細胞層から角質層に移動する表
皮の転換時間は、通常１４日であり、その間、ケラチノサイトは、遺伝子発現に
おいて複雑な一連の変化を受け、細胞死−「末端分化」を生じる。乾癬患者の場
合、表皮の転換時間は、２日である。この場合、ケラチノサイトの増殖が著しく
増加し、続いて、比較的未成熟又は分化度が低い形態となる。

【０００３】現在では、乾癬については、長期療法はない。治療剤や治療法としては、コー
ルタール製剤（天然コールタール又は留出液アントラリン）、局所コルチコステ
ロイド、スケール（scale）を除去する機械的処置、及びメトトレキセート等の
代謝拮抗薬などがある。光感作薬であるソラレンと長波長紫外光（ＰＵＶＡ）と
の併用、及び合成レチノイドも使用される。軽度〜中度の場合には、治療に多少
効果があるが、より重度の場合には、難しく、局所療法又は紫外線光線療法に耐
性もつ傾向がある。さらに、従来から使用されている乾癬治療薬を全身に使用し
たり又は局所ステロイドを長期にわたって使用すると、望ましくない副作用を生
じたり又は乾癬が反動で悪化することがある。

【０００４】遺伝分析は、少なくともある種の形態の乾癬には、遺伝成分を含み、「乾癬感
受性遺伝子」を突き止めるのに鋭意努力がなされている。自己免疫疾患との類似
性、及び疾患した個人におけるＨＬＡ−１３、ＨＬＡ−１７、ＨＬＡ−Ｃｗ６及
びＨＬＡ−ＤＲｗ７の発生の増加から、免疫調節法、及びＴ細胞活性を減少させ
たり若しくは活性化Ｔ細胞プールを枯渇させたりする新規な薬剤の開発が注目さ
れた。しかしながら、研究は、乾癬プラークに存在する多様な臨床的変化及び細
胞変化を全て反映する動物モデルの不足により大幅に遅れている。

【０００５】この種の薬剤から生じる可能性のある副作用を回避できる免疫調節の別法とし
て、乾癬における異常ケラチノサイトの分化に着眼することが挙げられる。ケラ
チノサイトの成熟は、プロテイナーゼの産生と関連しており、プロテイナーゼは
周囲の細胞外マトリックスを分解して浅葉への細胞移動を可能とし、細胞を活性
化して直接的又はサイトカイン前駆体を活性化することにより間接的に分裂させ
ることができる。末端分化では、安定な角質層の形成には、このようなプロテイ
ナーゼの活性を抑えるべく調製することが必要であろう。プラスミノーゲン活性
化因子及びカテプシンＢ等の数種のプロテイナーゼは、正常皮膚に存在すること
が判明し、乾癬における細胞病態生理は、プロテイナーゼの過剰レベル及び未調
整レベルから生じる可能性がある。

【０００６】乾癬において、ウロキナーゼプラスミノーゲン活性化因子（ｕ−ＰＡ）の発現
と組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）の発現との両方で、異常が観察
された。最も著しい変化は、基底上表皮におけるｔ−ＰＡ発現が大きく増加する
ことである（Ｊｅｎｓｅｎ等、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．９０（６
）：７７７−７８２（１９８８）；Ｂａｉｒｄ等、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍ
ａｔｏｌ．９５（５）：５４８−５５２（１９９０年１１月））。オートヒスト
グラフィックフィブリンフィルムメソッド（autohistographic fibrin film met
hod）による局所（アントラリン、コルチコステロイド）治療及び全身（ＰＵＶ
Ａ）治療前後に、乾癬を患った患者４０人からのバイオプシー（biopsies）によ
り、ｕ−ＰＡの免疫反応性とｔ−ＰＡ免疫反応性の両方が、乾癬パッチに存在す
るが、正常皮膚及び治療した色つやの良い皮膚には存在しないことが分かった（
Ｌｏｔｔｉ等、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．２９（７）：５２８−５３０（
１９９０））。さらに、ｔ−ＰＡと同じ基底上領域にある乾癬表皮においてＰＡ
Ｉ−２が増加することは、ＰＡＩ−２が異常創傷治癒パターンを引き出す皮膚病
理において保護的役割を果たすことを示唆している（Ｌｙｏｎｓ−Ｇｉｏｒｄａ
ｎｏ等、“Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖ
ａｔｏｒｉｎｈｉｂｉｔｏｒｔｙｐｅ２ｉｎｎｏｒｍａｌａｎｄ
ｐｓｏｒｉａｔｉｃｅｐｉｄｅｒｍｉｓ（正常及び乾癬表皮における２型プラ
スミノーゲン活性化因子阻害因子の発現）、”Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
１０１（２）：１０５−１１２（１９９４年２月））。

【０００７】したがって、乾癬を治療するための新規な方法及び組成物が、非常に望まれて
いることが明らかである。特に、プラスミノーゲン活性化因子／阻害因子系を調
節し、且つ特にプラスミノーゲン活性化因子阻害因子を利用する乾癬を治療する
ための新規な方法及び組成物を開発することが望ましいであろう。

【０００８】（発明の開示）本発明は、乾癬治療用ウロキナーゼ阻害因子の使用に関する。すなわち、本発
明によれば、ウロキナーゼ阻害因子の効果的な量を、それを必要としている患者
に投与することを含む乾癬の治療方法であって、前記阻害因子を皮膚の疾患部位
に局所投与する、方法が提供される。本発明の一実施態様によれば、前記ウロキ
ナーゼ阻害因子は、ＰＡＩ−２と、プラスミノーゲン活性化阻害性を有するその
変異体と、ＰＡＩ−２の誘導体と、前記誘導体の変異体とからなる群から選択さ
れるものである。

【０００９】本発明の一態様によれば、前記誘導体は、ＰＡＩ−２の生化学的変更により得
たものであり、前記変更が、ポリエチレングリコールとの化学的結合と、リン酸
基の結合と、硫酸基の結合と、ペプチダーゼ処理と、糖鎖変更酵素による処理と
、糖結合酵素による処理とからなる群から選択されたものである。一実施態様に
よれば、前記変異体は、ＰＡＩ−２のアミノ末端からのアミノ酸残基の欠失又は
アミノ酸残基の付加により得たものである。別の実施態様によれば、前記変異体
は、ＰＡＩ−２のカルボキシ末端からのアミノ酸残基の欠失又はアミノ酸残基の
付加により得たものである。

【００１０】本発明の別の態様によれば、前記ウロキナーゼ阻害因子を、ゲル製剤として投
与する。一実施態様によれば、前記ゲルは、洗浄剤をさらに含むセルロースゲル
である。本発明の別の実施態様によれば、前記洗浄剤は、Ｔｗｅｅｎ８０である
。

【００１１】本発明の更に別の態様によれば、前記ＰＡＩ−２を、創傷１ｃｍ²当たり０．
１〜２０００μｇの範囲で投与する。本発明の更に別の態様によれば、前記ＰＡ
Ｉ−２を、１日当たり少なくとも１回、少なくとも５日間投与する。

【００１２】また、本発明によれば、ＰＡＩ−２と、少なくとも一種の他のセリンプロテア
ーゼ阻害因子とを含む治療剤の効果的な量を、それを必要としている患者に投与
することを含む乾癬の治療方法であって、前記治療剤を皮膚の疾患部位に局所投
与する、方法が提供される。一実施態様によれば、前記他のセリンプロテアーゼ
阻害因子が、ｕＰＡ阻害因子である。

【００１３】本発明の一態様によれば、前記治療剤が、チオールプロテアーゼ阻害因子と、
酸プロテアーゼ阻害因子と、メタロプロテイナーゼ阻害因子とからなる群から選
択されるプロテアーゼ阻害因子をさらに含むものである。一実施態様によれば、
これらのプロテアーゼ阻害因子が、ＰＡＩ−２と共投与されるものである。

【００１４】さらに、本発明は、洗浄剤を含有するゲルにＰＡＩ−２を含む医薬組成物に関
する。本発明の一態様によれば、前記医薬組成物が、ＰＡＩ−２と、少なくとも
一種の他のセリンプロテアーゼ阻害因子とを含む。本発明の別の態様によれば、
前記医薬組成物は、チオールプロテアーゼ阻害因子と、酸プロテアーゼ阻害因子
と、メタロプロテイナーゼ阻害因子とからなる群から選択されるプロテアーゼ阻
害因子をさらに含むものである。一実施態様によれば、前記洗浄剤は、Ｔｗｅｅ
ｎ８０である。別の実施態様によれば、前記ゲルは、セルロースゲルである。別
の実施態様によれば、前記ゲルは、凝集物の形成を減少させ、ＰＡＩ−２の安定
性を高めるとともに、浸透促進剤としての役割を果たすことができる少なくとも
一種のさらなる成分を含有する。好ましい実施態様によれば、このような成分は
、プロピレングリコールである。

【００１５】本発明の他の目的、特徴及び利点は、以下の詳細な説明から明らかとなろう。
しかしながら、本発明の特定の実施態様を示す以下の詳細な説明及び具体的実施
例は、説明の目的のみで示すものであり、本発明の精神及び範囲内にある種々の
変更及び修正は、この詳細な説明から当業者には明らかとなろう。

【００１６】（発明を実施するための最良の形態）本発明によれば、乾癬治療に有用なウロキナーゼ阻害因子を含む組成物が提供
される。好ましい実施態様によれば、この阻害因子は、局所剤として提供される
。また、本発明は、ウロキナーゼ阻害因子を別の乾癬治療用プロテアーゼ阻害因
子とともに含む組成物を包含する。さらに、本発明によれば、上記した組成物を
皮膚の疾患部に局所施用することを含む、乾癬治療方法が提供される。

【００１７】好ましい実施態様によれば、プラスミノーゲン活性化因子阻害因子２（ＰＡＩ
−２）は、局所剤である。ＰＡＩ−２の特性は、Ｋｒｕｉｔｈｏｆ等、“Ｂｉｏ
ｌｏｇｉｃａｌａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＡｓｐｅｃｔｓｏｆＰｌａｓ
ｍｉｎｏｇｅｎＡｃｔｉｖａｔｏｒＴｙｐｅＩＩ（ＩＩ型プラスミノーゲ
ン活性化因子の生物学的及び臨床的側面）、”Ｂｌｏｏｄ８６：４００７（１９
９５））に詳細に説明されている。簡単に述べれば、ＰＡＩ−２は、プラスミノ
ーゲン活性化因子（ＰＡ）系の成分である。ＰＡ系は、組織再モデリング、細胞
移動、創傷治癒及び脈管形成等の多種多様の生理学的プロセスにおける細胞外タ
ンパク質分解の調節を含む極めて多数の機能を有している。

【００１８】プラスミノーゲン活性化因子（ＰＡ）は、プラスミノーゲンを、フィブリンの
分解を招くだけでなく、細胞外マトリックスの分解及び転換の一因ともなる、トリプシン様セリンプロテアーゼであるプラスミンに転化するセリンプロテアー
ゼである。プラスミンは、炎症部位に局部的に形成され、血漿及び間質液中を循
環する不活性前駆体であるプラスミノーゲンのタンパク質分解を限定することで
修復することができる。プラスミノーゲンは、ウロキナーゼ型プラスミノーゲン
活性化因子（ｕ−ＰＡ）又は組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）に
より活性化される。これらの触媒反応は、一般的に形質膜（ｕ−ＰＡ）で生じる
か、フィブリン表面（ｔ−ＰＡ）上で生じる。これらの活性化酵素は、多様なサ
イトカイン及び成長因子に応答して広範囲の間葉細胞、上皮細胞及び上皮内細胞
により産生される。活性プラスミンは、細胞外マトリックスマクロ分子（コラー
ゲンを除く）及びフィブリンを含む広範囲の基質を分解することができる。プラ
スミンとその活性化プロテイナーゼの活性は、ＰＡＩ−２及びプラスミノーゲン
活性化因子阻害因子１（ＰＡＩ−１）を含む多数のプロテアーゼ阻害因子を介し
て細胞外調節される。

【００１９】本発明者等は、ＰＡＩ−２等のウロキナーゼ阻害因子に分類されるものから選
択された化合物を局所投与することにより、乾癬病変に関連した乾癬プラーク厚
さ、発赤及びスケーリング並びに紅斑が減少することを見いだした。本発明の好
ましい実施態様によれば、セリンプロテアーゼ阻害因子ＰＡＩ−２を使用する。
ＰＡＩ−２のアミノ酸配列と実質的に同じであり、且つプラスミノーゲン活性化
因子を阻害するＰＡＩ−２の変異体も、本発明の組成物に使用できる。すなわち
、「ＰＡＩ−２の変異体」は、ＰＡＩ−２アミノ酸配列の残基を、自然又は人工
的に欠失、付加又は置き換えたものであるが、ＰＡＩ−２の特徴的な阻害活性を
失わない程度の実質的にＰＡＩ−２アミノ酸配列を有するタンパク質である。当
該技術分野において周知のＰＡＩ−２活性のアッセイを、これに関する推定上の
変異体のスクリーニングに容易に適用できる。

【００２０】したがって、本発明では、活性が減少して、影響を受けたポリペプチドがこの
状況において治療に効果がないようにならない限りは、保存的、半保存的及び他
のアミノ酸置換体も考えられる。天然組換えＰＡＩ−２のＮ末端領域及びＣ末端
領域における配列は、産生条件に応じて異なる（アミノ酸残基数の増加又は減少
を生じる）。これらの変異は、明確に本発明の範囲内である。当業者には、ＰＡ
Ｉ−２の他の活性変異体も、ＰＡＩ−２の特徴的なプロテアーゼ阻害因子特性を
保持している限りは本発明に使用できることは分かるであろう。また、ＰＡＩ−
２の変異体及びそのような変異体の製造方法は、米国特許第５，７２８，５６４
号、第５，５５０，０４２号、第５，４８６，６０２号、第５，４４４，１５３
号及び第５，４０３，４８２号に記載されている。

【００２１】また、本発明によれば、ＰＡＩ−２又はＰＡＩ−２変異体を化学的又は生化学
的に変更することにより製造できる誘導体も、活性成分として好適である。この
ような誘導体の代表例は、（Ａ）ポリエチレングリコール又はその類似体を化学
的に結合すること、（Ｂ）リン酸基又は硫酸基を結合させること、（Ｃ）エンド
ペプチダーゼ等のペプチダーゼで処理すること、及び（Ｄ）糖鎖変更酵素又は糖
鎖結合酵素、例えば、シアリダーゼ、により処理することにより得られる化合物
である。この方法で調製される誘導体を、当該技術分野において周知の方法によ
りプロテアーゼ阻害因子活性についてのアッセイに附することができる（例えば
、Ｆｅｒｓｈｔ、ＥＮＺＹＭＥＳＴＲＵＣＴＵＲＥＡＮＤＭＥＣＨＡＮＩ
ＳＭ、第２版、Ｗ．Ｈ．ＦｒｅｅｍａｎａｎｄＣｏ．、１９８５、及びそこ
に記載の参考文献参照）。

【００２２】ＰＡＩ−２又はＰＡＩ−２変異体及びここに記載の誘導体（ここでは、まとめ
て「ＰＡＩ−２」と称する）等のプロテアーゼ阻害因子は、いずれかの好適な生
理学的に許容できるビヒクル（vehicle）、例えば、リン酸緩衝食塩（ＰＢＳ）
液に添加して、患者に局所投与できる。他のビヒクルは、当該技術分野において
周知であり、例えば、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’ＳＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ
ＳＣＩＥＮＣＥＳ、第１８版、ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇ社、ペンシル
バニア州Ｅａｓｔｏｎ（１９９０）に記載されている。

【００２３】プロテアーゼ阻害因子は、創傷に、必要に応じて、毎日、どちらかと言えば頻
繁に適用することができる。当業者には、個々の適用についての投与計画の最適
化は、例えば、上記したＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’Ｓに記載されているように、当該
技術分野において周知であることが分かるであろう。阻害因子の典型的な一日当
たりの適量は、皮膚上の疾患部位の１ｃｍ²当たり約２０μｇである。しかしな
がら、この量は、変更でき、０．１〜２０００μｇ／ｃｍ²の濃度で、有利に使
用できる。例えば、乾癬のより重症な場合では、５００μｇ／ｃｍ²の濃度で一
日当たり複数回、例えば、一日当たり２回、３回又は４回適用することが必要で
あると思われる。重症度がもっと低い場合、又はより高用量に十分反応する場合
には、用量を低下できる。例えば、プロテアーゼ阻害因子の用量は、順次、例え
ば、１００μｇ／ｃｍ²、１０μｇ／ｃｍ²、１μｇ／ｃｍ²又は０．１μｇ／ｃ
ｍ²に低下してよい。さらに、阻害因子の適用は、より少ない頻度、例えば、１
日当たり４〜１回おこなうことができる。ＰＡＩ−２は、全身性の毒性を有して
おらず、したがって、より高用量を必要に応じて使用できる。必要に応じて、Ｐ
ＡＩ−２の全身濃度を、ＥＬＩＳＡ試験を用いて測定でき、ＰＡＩ−２の適量を
、それに応じて調整できる。他の好適な阻害因子の毒性及び全身濃度は、当業者
に公知の方法により測定できる。

【００２４】患者への適用に使用されるビヒクル中の阻害因子濃度は、約１ｍｇ／ｍｌが有
利であるが、必要に応じて、より高濃度又はより低濃度で使用することができる
。例えば、約０．１ｍｇほどの低濃度、又はビヒクルへの阻害因子の溶解度限界
といった高濃度で使用することができる。

【００２５】阻害因子は、短期間適用してもよいし、長期間適用してもよい。ＰＢＳ等のビ
ヒクルは、阻害因子の短期間の適用に好適である。より長期の適用では、遅放出
ビヒクルの使用が好ましい。例えば、ゲル製剤を、阻害因子の効果的運搬に使用
できる。セルロース誘導体は、以前、ＥＧＦ、ＴＧＦ−α、ＰＤＧＦ及びＦＧＦ
等の一定のタンパク質を有するゲル製剤に適合すると記載された。しかしながら
、これらの製剤におけるタンパク質は、時間を経ると凝集しやすく、この適用に
は有害である。凝集したことは、ゲルが乳白色となるか、混濁することにより分
かり、活性タンパク質成分の活性が低下し、且つ凝集物のサイズが増加するため
にゲルからのタンパク質の放出速度が低下する。

【００２６】本発明者等は、この凝集の問題を、少量（０．０５％以下）の洗浄剤を阻害因
子／セルロースポリマーゲルに添加することにより解決した。これにより、透明
性が実質的に向上したゲルが得られる。このゲルの利点は、以下の実施例２に詳
細に示されている。Ｔｗｅｅｎ８０又はＧｅｎａｐｏｌＰＦ１０等の洗浄剤を、
用いることができる。また、当業者には、他の洗浄剤を用いても、良好な結果を
得ることができることが分かるであろう。

【００２７】予想外にも、本発明者等は、ゲルの凝集を減少させることに加えて、Ｔｗｅｅ
ｎ８０を０．０２％で使用すると、阻害因子／ナトロゾル（Ｎａｔｒｏｓｏｌ）
含有ゲルからの阻害因子の放出速度が増加することを見いだした。これらの実験
は、以下の実施例２に記載されている。さらに、本発明者等は、ゲルにプロピレ
ングリコールを１０％以下添加しても、凝集物の形成を減少させ且つゲル中のＰ
ＡＩ−２の安定性を高めることを見いだした。プロピレングリコールは、さらに
ＰＡＩ−２の皮膚への浸透を促進すると思われる。

【００２８】本発明の別の実施態様によれば、ＰＡＩ−２を、少なくとも一種の他のプロテ
アーゼ阻害因子とともに使用する。例えば、ＰＡＩ−２を、アミロライド等の別
のセリンプロテアーゼ阻害因子又はその誘導体とともに使用できる。

【００２９】さらに別の実施態様によれば、ＰＡＩ−２を、メタロプロテイナーゼ、酸プロ
テアーゼ及び／又はチオールプロテアーゼの少なくとも一種の阻害因子とともに
使用する。例えば、ＰＡＩ−２は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ペプ
スタチン及びＮ−エチルマレイミド（ＮＥＭ）の一つ以上とともに使用できる。

【００３０】さらに別の実施態様によれば、ＰＡＩ−２を、少なくとも一種の他のプロテア
ーゼ阻害因子と、メタロプロテイナーゼ、酸プロテアーゼ及び／又はチオールプ
ロテアーゼの少なくとも一種の他の阻害因子の組み合わせとともに使用する。

【００３１】セリン及びチオールプロテアーゼの阻害因子並びに酸プロテアーゼ及びメタロ
プロテアーゼの阻害因子が当該技術分野において周知であり、数多くのものが、
例えば、ＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒＭａｎｎｈｅｉｍ社（インディアナ州Ｉｎｄｉ
ａｎａｐｏｌｉｓ）、Ｐｒｏｍｅｇａ社（ウィスコンシン州Ｍａｄｉｓｏｎ）、
Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ社（カリフォルニア州ＬａＪｏｌｌａ）及びＬｉｆｅ
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社（メリーランド州Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ）から市販さ
れている。他の阻害因子が、酵素学についての周知の教科書、例えば、Ｆｅｒｓ
ｈｔ、ＥＮＺＹＭＥＳＴＲＵＣＴＵＲＥＡＮＤＭＥＣＨＡＮＩＳＭ、第２
版、Ｗ．Ｈ．ＦｒｅｅｍａｎａｎｄＣｏ．、１９８５、及びそこで引用され
ている参考文献に記載されている。

【００３２】他の阻害因子は、ＰＡＩ−２治療の前若しくは後又は治療と同時に適用できる
。また、阻害因子は、ＰＡＩ−２よりも適用頻度は、多くても、少なくてもよい
。特に、より迅速に分解される阻害因子は、より安定な阻害因子よりも頻繁に適
用してよい。逆に、より安定な阻害因子は、適用頻度がより少なくてよい。当業
者には、阻害因子の安定性についての容易なアッセイを使用して、阻害因子の投
与頻度を判断できることが明らかであろう。

【００３３】他の阻害因子を、ＰＡＩ−２と同じビヒクルに添加して適用するのが有利であ
るが、これは、効力の面を考慮すると必須ではない。特に、阻害因子を、上記し
たようなＰＡＩ−２に使用できるとの同じゲルビヒクルに添加して適用できる。
阻害因子をＰＡＩ−２と同じビヒクルに添加して適用しない場合には、例えば、
上記したＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’Ｓに記載されているようないずれかの薬学的に許
容されるビヒクルに添加して適用できる。

【００３４】（実施例）概略説明した本発明は、以下の実施例を参照することにより、より容易に理解
されるであろう。しかしながら、以下の実施例は、説明の目的のみに使用され、
本発明を限定するものではない。

【００３５】実施例１：乾癬治療のためのＰＡＩ−２ゲル（１ｍｇ／ｇ）の局所適用Ａ．基本的試験計画二重盲検プラシーボ制御ランダム試験をおこなって、軽度〜中度の乾癬の治療
にＰＡＩ−２ゲルを局所適用した場合の安全性、許容度及び効力を測定した。試
験には、男性１３人と女性９人（平均年齢４２歳、年齢範囲１８歳〜６４歳）の
合計２２人の患者を登録した。試験に参加した患者の疾病期間、平均で１７年（
疾病期間範囲３年〜３４年）であった。試験を開始した２２人の患者のうち、１
４人の患者は、試験を開始する前には試験病変についての治療はおこなわず、８
人の患者は、試験病変についての治療を中止しなければならなかった。

【００３６】乾癬プラークを、１４日間治療した。各腕について、一つの病変を、治療前（
０日目）に剥離し、治療開始７日後（７日目）に再び病変を剥離した。プラーク
を、接着性の包帯の適用及び除去を反復する（１０回）ことにより剥離した。試
験に登録した各患者は、４カ所の病変を治療（各腕について２カ所づつ）した。

【００３７】ＰＡＩ−２ゲル又はプラシーボゲルを、乾癬病変に毎晩適用した。包帯剤は、
使用しなかった。各腕についての病変を、０．５ｇ（２．５ｍＬシリンジに０．
５ｍＬ入れる）プラシーボゲル（１％ｗ／ｖナトロゾルゲル）で治療した。他の
腕についての病変は、プラシーボと同じ用量でＰＡＩ−２ゲル（１％ｗ／ｖナト
ロゾルゲルに１．０ｍｇ添加）で治療した。各ゲルを、各病変に適用し、穏やか
に擦った。

【００３８】ＰＡＩ−２ゲルは、ＰＡＩ−２（１ｍｇ／ｇ）を、セルロースの部分置換ポリ
（ヒドロキシエチル）エーテルである１％ナトロゾルのゲルに溶解することによ
り調製した。ＰＡＩ−２は、このゲルにおいて生物学的に活性のままであり、こ
のゲルから６時間で７５％放出する速度で放出される。

【００３９】ＰＡＩ−２自体は、例えば、米国特許第５，２９８，４００号（引用すること
により、本明細書に全て記載されたものとする）に記載の方法によりヒトＰＡＩ
−２をコードしているｃＤＮＡで形質転換した酵母細胞の発酵から得られる高度
に精製された組換えタンパク質として製造できる。ＰＡＩ−２の精製方法は、例
えば、米国特許第５，２０４，８０７号及び第５，４６２，８５７号に記載され
ている。

【００４０】Ｂ．安全性及び許容度本試験の一つの目的は、局所適用したＰＡＩ−２ゲルの安全性及び許容度を評価
することであった。試験に登録した２２人の患者のうち、１回目の診察後試験を
継続しなかった被験者一人を除く全ての患者を、安全性分析（ｎ＝２１）に含め
た。

【００４１】完全な血液学的及び生化学的スクリーンを、治療前、治療の終わり、及び試験
の終わりに実施した。全血球カウント、電解質、尿素、クレアチニン、肝機能及
び血糖を試験した。

【００４２】研究者により臨床的に有意であると判断された後治療検体検査を含む異常実験
値は、正常値又はベースライン値に戻るまで、適当な医学的管理で追跡検査すべ
きものとした。

【００４３】治療１週間目（７日目）、治療の終わり（１４日目）及び試験の終わり（２１
日目）に、不利な現象について監視した。研究者は、薬剤関連評価及び／又は臨
床的有意性とは無関係に、試験中に観察又は記録された全ての不利な現象を記録
した。

【００４４】不利な現象（ＡＥ）は、ベースラインで存在しなかったが試験中に生じたか、
ベースラインで存在していた場合には試験中に悪化したと思われる、いずれかの
症状、身体的徴候、症候群又は疾病として定義した。これは、この結果の推測さ
れる原因とは無関係であった。

【００４５】かなり不利な現象（ＳＡＥ）を、生命を脅かす致命的か、生命を脅かすと考え
られるか、入院を必要とするか入院を長引かせるか、永久能力障害、先天的異常
、癌又は過量を生じた、結果として定義した。

【００４６】不利な現象は、患者による自発的にか、研究者による一般的な質問に対する応
答でか、実験値の変化の結果として報告できた。

【００４７】全ての不利な現象を、記録した。期間、頻度（単一エピソード、間欠的、連続
的）、重症度（軽度、中度、重度−表１）、その原因の評価（根拠としての試験
の指標、共存する疾病、付随する投薬、試験投薬等）、試験投薬との関係（確実
、可能性大、可能性あり、ありそうもない、無関係−表２）並びに試験投薬の経
過への影響及びその結果を、記載した。

【００４８】試験の開始時、患者には、試験追跡中の不利な又は異常な現象／反応を報告す
るよう要請した。最後の診察以後に不利な現象が生じたかどうかを決定する際、
「最後の診察以後いかがでしたか」以外の暗示的な質問はしないものとした。

【００４９】治療の終わりまで持続している全ての不利な現象を、この現象が解決したか、
安定化するまで追跡した。

【００５０】

【表１】

【００５１】

【表２】

【００５２】２１人の患者は、安全分析については、合格であった。規定一日当たりの総用
量については、ＰＡＩ−２を１．０ｍｇ／ｍＬ含有するナトロゾルゲル１ｍｇを
、２カ所の病変に、各０．５ｍｇづつ適用して治療した。しかしながら、患者１
９人については、各腕について２つの注射器の代わりに一つの注射器を使用した
ので、治療の最初の週についてはＰＡＩ−２の一日当たりの規定用量の半分を適
用し、２人の患者については、一週間についてのみ一日当たりの規定用量を適用
した。１９人の患者のうち２人については、一度に１回分の余分の用量の投薬を
おこなった。

【００５３】合計６つの不利な現象が、試験中患者５人において報告された。一人の患者に
ついては、３回目の診察（１４日目）で軽度の血糖レベルの上昇が見られた。こ
の血糖レベルの上昇は、研究者の判断では、試験投薬に関係したものではないよ
うであった。患者４人において、合計５つの皮膚関連の不利な現象が、試験中に
報告された：ゲルの適用による冷感覚、わずかな刺痛、灼熱感及び軽い刺創、並
びに肘の痒み／疼痛／ひび割れ／出血。

【００５４】報告された不利な現象は、ひどくはなく、反復して生じ、重症度が軽度〜中度
であった。不利な現象のいずれも、何ら行動をとる必要のないものであった。皮
膚に関連する不利な現象（痒み／疼痛／ひび割れ／出血を除く）は、ある程度調
査対象物に関連していると考えられたが、これらの現象の分布は、試験薬剤とプ
ラシーボとの間で類似していた。

【００５５】報告された不利な現象には、重大なものはなかった。この試験では、報告され
た死亡はなかった。また、この試験についての報告では、他の有意の不利な現象
はなかった。

【００５６】血液学及び臨床化学における臨床的に有意な変化が、患者４人について報告さ
れた。臨床化学及び血液学の基準範囲以外の他の値は、臨床的に有意なものはな
かった。

【００５７】患者Ｎｏ．５は、ベースライン及び３回目の診察でＡＬＴ（ＳＧＰＴ）の高血
清レベル（それぞれ１２３Ｕ／Ｌ及び１１２Ｕ／Ｌ）を示し、ベースライン及び
３回目の診察でＧＧＴの高血清レベル（それぞれ６２Ｕ／Ｌ及び６３Ｕ／Ｌ）を
示した。試験開始１８ヶ月前及びベースラインで高肝機能（ＡＬＴ／ＧＧＴ）で
あることが確認され、且つ試験中に上昇する傾向が見られなかったので、これら
の変化は試験投薬に関連するものではないと結論できた。

【００５８】患者Ｎｏ．６は、ベースライン及び３回目の診察で、ＳＧＯＴ（６７Ｕ／Ｌ）
、ＳＧＰＴ（１２４Ｕ／Ｌ）及びＧＧＴ（２５７Ｕ／Ｌ）の高血清レベル（それ
ぞれ７１Ｕ／Ｌ、８９Ｕ／Ｌ及び２３７Ｕ／Ｌ）を示した。これらの変化は、試
験投薬と関連していないように思われた。

【００５９】患者Ｎｏ．８では、ベースラインで、ＷＢＣカウント（２．０ｘ１０⁹／Ｌ）
、好中球（０．９５ｘ１０⁹／Ｌ）及びリンパ球（０．８０ｘ１０⁹／Ｌ）が減少
した。

【００６０】患者Ｎｏ．１７では、血小板の血中レベルが、ベースライン（８２ｘ１０⁹／
Ｌ）、３回目の診察（８２ｘ１０⁹／Ｌ）及び４回目の診察（８５ｘ１０⁹／Ｌ）
で減少した。ＧＧＴの血清レベルが、ベースライン（２２７Ｕ／Ｌ）及び４回目
の診察（２０８Ｕ／Ｌ）で上昇した。血中グルコースレベル（ＢＧＬ）が、３回
目の診察（１１ｍｍｏｌ／Ｌ）及び４回目の診察（１０．９ｍｍｏｌ／Ｌ）の両
方で増加した。３回目の診察でのＢＧＬの変化は、ＡＥとして報告された。これ
は、試験投薬に関連しないものであると判断された。

【００６１】ＰＡＩ−２を、ＥＬＩＳＡ法を用いて、治療（１回目の診察）前に得られた血
液試料、治療の終わり（３回目の診察）及び試験の終わり（４回目の診察）に測
定して、全身性吸収が生じたかどうかを判定した。ＰＡＩ−２分析の検出下限は
８ｎｇ／ｍＬであり、定量限界（ＬＯＱ）は約５０ｎｇ／ｍＬであると推定され
た。反復分析間の合格変動係数（ＣＶ）は、１０％以下であった。

【００６２】血中ＰＡＩ−２レベルを、ＥＬＩＳＡ法を用いて測定して、全身性吸収が生じ
たかどうかを判定した。治療前に採取した血液試料の一部分を、−８０℃に保存
し、ＰＡＩ−２により誘起される可能性のある抗体の検出に使用するものとした
。一つの２０ｍＬ血液試料を、各患者から、治療前（１回目の診察）、治療の終
わり（３回目の診察）及び試験の終わり（４回目の診察）で採取した。血液試料
を、３つの別個の管に分割して、ＰＡＩ−２分析用、血液分析用、臨床化学スク
リーン用とした。

【００６３】血液試料において検出されたＰＡＩ−２レベルを、表３に示す。この表に示さ
れた結果は、両方の分析の結果を示したときに結果が互いに異なる場合のみ、異
なるアッセイからの分析結果を示す。

【００６４】治療前に得られた試料中のＰＡＩ−２レベルは、患者Ｎｏ．４を除く全ての患
者における検出限界未満（ＢＤＬ）であった。治療の終わり及び治療２週間後に
採取した血液試料の大部分は、２週間の治療後及び治療の終わりでのＰＡＩ−２
濃度が検出限界未満であった。しかしながら、検出限界を超える濃度は、有意な
レベルではなかった。２人の患者では、ＣＶが１０％を超えたために、分析に失
敗した。この試験で得られた全ての結果が、ＬＯＱ未満であった。

【００６５】

【表３】

【００６６】要するに、不利な現象の大部分は、試験の過程全体を通じて報告され、ある程
度調査対象物に関連していると考えられるけれども、試験薬剤とプラシーボとの
間の分布は類似していた。試験中に見られた血液上及び臨床化学上の臨床的に有
意な変化は、ベースラインで存在していたので、調査物とは関係ないものであっ
た。

【００６７】一部の試料においては、局所適用ＰＡＩ−２が吸収されたと思われる形跡があ
ったが、大部分の試料は、検出可能なＰＡＩ−２は存在しなかった。検出された
ＰＡＩ−２濃度は、有意なレベルではなく、全てＬＯＱ未満であり、ＰＡＩ−２
の吸収の可能性は、あるとしても最小であろうことを示している。

【００６８】したがって、実施した安全性の評価は、局所適用ＰＡＩ−２ゲルは、乾癬患者
には十分に許容できるものであったことを示唆している。

【００６９】Ｃ．効力本試験の別の目的は、ＰＡＩ−２ゲルによる乾癬の治療効力を評価することで
あった。この目的に沿って、各診察で、プラーク厚さの変化、発赤度の変化及び
スケーリングの変化を評価した。さらに、病変の写真を、治療前、治療の終わり
及び試験の終わりにとった。

【００７０】１．効力の測定及び変数ａ．プラーク厚さ治療プラークの厚さを、Ｈａｒｐｅｎｄｅｎカリパスを用いて同じヒトにより
、０日目、７日目、１４日目及び２８日目で測定した。プラークの厚さを、正常
皮膚の隣接部の厚さを乾癬病変の厚さから減じることにより算出した。正常皮膚
の同じ領域を、各評価に使用するものとした。

【００７１】プラーク厚さの評価は、０日目及び７日目に病変を剥離する前後に実施した。

【００７２】ｂ．発赤度及びスケーリング各診察時（０日目、７日目、１４日目及び２８日目）、発赤度を紅斑メータを
用いて測定し、カテゴリースケール［グレード０（なし）〜３（重度）］により
評価した。各病変のスケーリングを、各診察時、スケール［グレード０（なし）
、１（軽度）、２（中度）及び３（重度）］を用いて評価した。

【００７３】発赤度及びスケーリングの評価を、０日目及び７日目に病変を剥離する前後に
実施した。

【００７４】ｃ．写真による立証病変の写真を、治療前（０日目）、治療の終わり（１４日目）及び試験の終わ
り（２８日目）に、標準条件下で病院の医療撮影者により撮影した。病変の写真
を、０日目に病変を剥離する前後に撮影した。

【００７５】２．効力の評価２つの試験集団を、治療コードを解読する前に定義した：意図的治療（ＩＴＴ
）及びプロトコール通り（ＰＰ）。ＩＴＴ群は、安全性及び効力分析に使用し、
ＰＰ群は、０日目〜１４日目の効力分析に使用した。

【００７６】ＩＴＴ集団は、ある用量の試験投薬を受けた全ての被験者から構成され、治療
開始後、少なくとも一つの効力についての所見を記録した（ｎ＝２１）。一週間
の治療のみを受けた患者Ｎｏ．３及び患者Ｎｏ．８についての２回目の診察（７
日目）で得たデータを、１４日目と２８日目のＩＴＴ分析に回した。

【００７７】ＰＰ集団は、３回目（１４日目）の診察を終えた全ての被験者を含み、主要調
査者（ｎ＝１９）により測定したところ、プロトコルからの有意の逸脱はなかっ
た。

【００７８】プラーク厚さの変化及び発赤度／紅斑度及びスケーリングを、各診察時に評価
し、分析した。剥離病変及び未剥離病変について、能動処置とプラシーボ処置と
の間での比較、及び各処置群内での剥離と未剥離との間での比較をおこなった。
処置のサブ群の各々内の経時変化も、調査した。

【００７９】ａ．意図的治療（ＩＴＴ）分析結果（ｉ）プラーク厚さ０日目から１４日目及び２８日目のプラーク厚さの変化（単位：ｍｍ）を、表
４に示す。各処置の組み合わせについてのプラーク厚さの変化率（％）を、表５
に示す。

【００８０】能動薬剤で処置した未剥離病変プラーク厚さの減少が、０日目から１４日目で
２７．２４±４３．７％であった一例以外は、０日目から１４日目及び２８日目
の変化を分析したときにプラーク厚さの有意な減少はなかった（表５）。しかし
ながら、変化率（％）の変動が大きく、多少大きな負の変化率（％）を含み、プ
ラーク厚さのサイズが増加したことが分かった。

【００８１】

【表４】

【００８２】

【表５】

【００８３】（ｉｉ）発赤度０日目から１４日目及び０日目から２８日目における、０（なし）〜３（重度
）に格付スケールに従って評価した発赤スコアの変化を、表６に示す。プラシーボで処置した病変について０日目から２８日目での変化が未剥離で（−
０．０４８±０．７）あったのに対して剥離で（０．５２４±０．８１）であっ
たｐ値が有意に近い（ｐ＝０．０２２）一例を除いては、発赤スコア変化は有意
ではなかった。

【００８４】また、０日目から１４日目の変化を分析したとき、能動群における剥離病変の
発赤に有意の減少があり、対ｔ検定を用いたｐ値が０．０１６であった。０日目
から２８日目の変化を比較したところ、プラシーボ群において発赤に有意の減少
があり、ｐ値が０．００８であった（表６）。

【００８５】

【表６】

【００８６】（ｉｉｉ）紅斑紅斑メータを用いて、紅斑を測定した。０日目から１４日目及び０日目から２
８日目の紅斑の変化を、表７に示す。

【００８７】プラシーボ処置を能動処置と比較したときの、０日目から１４日目及び０日目
から２８日目での変化を比較したとき、有意の変化がなかった。しかしながら、
対ｔ検定を用いて各処置サブ群内のベースラインからの変化を分析した結果、有
意の減少があった（表７）。

【００８８】

【表７】

【００８９】（ｉｖ）スケール度０日目から１４日目及び０日目から２８日目における、０（なし）、１（軽度
）、２（中度）及び３（重度）の格付スケールに従って評価したスコアの変化を
、表８及び表９に示す。このパラメータについておこなったいずれの比較でも有意差がなかった。

【００９０】

【表８】

【００９１】

【表９】

【００９２】ｂ．プロトコル通り（ＰＰ）の場合の分析結果１９人の患者が、効力のＰＰ分析結果について評価可能であった。能動薬剤で処
置した未剥離病変のプラーク厚さの減少が２８．３６±４５．６％であったプラ
ーク厚さを除いて、実施したＰＰ分析結果のいずれにおいても有意差がなかった
（表１０）。

【００９３】

【表１０】

【００９４】３．統計的／分析結果２つの試料についてｔ検定を実施して、４つの因子（プラーク厚さ、発赤、紅斑
及びスケール度）について、０（なし）〜３（重度）の格付のスケールを用いて
（発赤及びスケール度については連続変数として）、それぞれ０日目から１４日
目及び０日目から２８日目について、処置サブ群間の変化を比較した。紅斑は、
紅斑メータを用いることにより測定した。各例において、１４日目の測定値及び
２８日目の測定値を、０日目から減じ（正の差は、経時的減少を示す）、以下の
群間で差を比較した：

【００９５】・未剥離、プラシーボ対能動・剥離、プラシーボ対能動・プラシーボ、未剥離対剥離・能動、未剥離対剥離

【００９６】各処置サブ群内の経時変化を調査するために対ｔ検定も実施し、ベースライン
からの変化がその特定のサブ群内でゼロであるという前提を試験した。

【００９７】プラーク厚さについての変化率（％）を、各期間について、０日目と１４日目
との間の差及び０日目と２８日目との間の差を、０日目の値で割った後、１００
を掛けることにより算出した。

【００９８】対での比較を、４つの処置サブ群内で実施した。したがって、結論は、そのサ
ブ群内のベースラインからの差についてのみ出すことができ、処置群間では出す
ことができない。

【００９９】４．効力についての結論以下の比較のいずれにおいても、０日目から１４日目及び０日目から２８日目
での変化を比較したときに、有意差がなかった：プロトコルに規定されたα＝０．０２（ワンサイド確率）レベルで測定した４つ
のパラメータ（すなわち、プラーク厚さ、発赤、紅斑及びスケール度）について
、未剥離、プラシーボ対能動剥離、プラシーボ対能動プラシーボ、未剥離対剥離能動、未剥離対剥離。

【０１００】しかしながら、ｐ値が有意に近接（ｐ＝０．０２２）した一例があった。これ
は、発赤についての、ＩＴＴ集団、０日目から２８日目、プラシーボ、未剥離（
−０．０４８±０．７）対剥離（０．５２４±０．８１）であった。

【０１０１】５．各処置群内の対比較プラーク厚さの減少が２５％を超えた例が一つあった。これは、未剥離、能動
サブ群、０日目から１４日目についてであった。ＩＴＴ集団では、減少率（％）
は、２７．２４±４３．７であり、プロトコル通り群では、２８．３６±４５．
６であった。これらの差は、それぞれｐ＝０．０１及びｐ＝０．０１４で群内で
の対ｔ検定を用いて試験したときに有意であった。しかしながら、変化率に大き
な変動があり、これには、例えば、ある場合に変化率が負に大きく変化しており
、プラーク厚さのサイズが増加したことを示している。

【０１０２】また、対ｔ検定を用いて各処置サブ群内でベースラインからの変化を分析した
ときに、発赤及び紅斑において有意の減少があった。これらの有意の変化は、全
てベースラインからの減少であり、且つ全てがＩＴＴ集団においてのものであっ
た。

【０１０３】Ｄ．考察及び総合的結論この試験において見られる血液学及び臨床化学上の臨床的に有意な変化は、試
験投薬に関連しているとは考えられなかった。このことは、全身性副作用は、存
在しないことはないとしても最小のようであることを示している。

【０１０４】適用による多数の皮膚反応が、この試験では記録された。ある程度は調査物に関
連していると考えられるが、この現象の大部分は、試験薬剤とプラシーボとの間
では同様に分布していた。

【０１０５】この試験で使用したのと同じバッチ及び同じ濃度でＰＡＩ−２を用いた健康な
志願者において従来実施したときでは、薬剤は、ＰＡＩ−２又は緩衝液に対して
いずれの陽性皮膚反応をも示さず十分に許容された。この知見を、本試験での皮
膚反応の分布がプラシーボと能動処置との間で類似していた事実と考え合わせる
と、ＰＡＩ−２ゲルの局所適用が十分に許容されるであろうことが分かる。しか
しながら、より大きな患者群での長期安全性試験を実施して、乾癬を患った患者
での皮膚反応の発生率を評価しなければならない。

【０１０６】処置の終わり及び処置２週間後に得られた試料の大部分には、検出可能な程度
のＰＡＩ−２が存在しなかったため、局所適用したＰＡＩ−２が吸収及び全身的
分布を示す決定的なデータがなかった。

【０１０７】乾癬病変を治癒させる際の局所適用ＰＡＩ−２ゲルの効力についてのデータを
、プラーク厚さ、発赤／紅斑及びスケーリングにおける変化の分析から得た。そ
の結果、未剥離病変のプラーク厚さの減少は、能動薬剤による２週間の処置後で
２５％超であった（表５及び表１０）。さらに、また、２週間の能動処置後、剥
離病変の発赤が有意に減少した。また、対ｔ検定を用いて各処置サブ群内のベー
スラインからの変化を分析したとき、発赤及び紅斑における有意な減少が認めら
れた（表６及び表７）。しかしながら、測定した４つのパラメータについて未剥
離病変と剥離病変を比較したところ、有意差はなかった。

【０１０８】但し、プラーク厚さの変化率（％）に大きな変動があった（表５）。これは、
部分的には、厚さ測定に使用した不正確な方法（Ｈａｒｐｅｎｄｅｎカリパス）
、測定値の偏差及びオペレータによる変動により生じた、プラーク厚さと皮膚厚
さとの間の結果の変動によるものであると説明できるであろう。

【０１０９】要するに、この試験で実施した安全性評価は、局所的に適用されたＰＡＩ−２
ゲルは、乾癬を患った患者に十分許容されたことを示唆している。効力に関する
データから、乾癬病変に局所適用されたＰＡＩ−２は、皮膚病理学的に保護的役
割を果たして創傷治癒を誘起し、且つ乾癬の治療に有利であることが分かる。

【０１１０】実施例２：ＰＡＩ−２含有ゲルの調製及びＰＡＩ−２放出の測定これらの実験では、ＰＡＩ−２含有ゲルを、２コンパートメント容器の上チャ
ンバーに入れた。下チャンバーには、緩衝液が入れられ、これらの２つのチャン
バーは、微孔性膜により分離した。下チャンバーにＰＡＩ−２が出てくることは
、ゲルからＰＡＩ−２が放出されたことを示す。これを、ＰＡＩ−２活性につい
てのアッセイによりモニターした。

【０１１１】下表は、新規なＰＡＩ−２ゲル製剤が向上した特性を有することを示している
。ゲルからのＰＡＩ−２の放出が増加することが、図１から分かる。

【０１１２】

【表１１】

【０１１３】方法：ポリマーを溶解して所望濃度とした後、滴定してｐＨ７．４〜７．７とした。
洗浄剤を０．０５％添加し、ＰＡＩ−２を１ｍｇ／ｍｌ添加した。アジ化ナトリ
ウム（０．０５％）を、防腐剤として使用した。

【０１１４】ここに記載の本発明は、本発明の精神又は必須の特徴から逸脱することなく、他
の具体的態様で実施することができる。したがって、上記した具体的実施態様は
、説明の目的のみで示したものであり、本発明の範囲はこれらに限定されない。
さらに、上記で引用した全ての刊行物の開示内容は、個々に引用して組み込むの
と同様に、引用することにより、明確に本明細書に全て記載されたものとする。

【図面の簡単な説明】

【図１】Ｔｗｅｅｎ８０の存在下でのセルロースゲルからのＰＡＩ−２の放出の増加を
示す。

【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書

【提出日】平成１２年１０月６日（２０００．１０．６）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】特許請求の範囲

【補正方法】変更

【補正内容】

【特許請求の範囲】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 47/48 Ａ６１Ｐ 17/06 Ａ６１Ｐ 17/06 Ａ６１Ｋ 37/64 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者シャープ・フィリップ・ジョンオーストラリア国ニュー・サウス・ウェールズ 2037、グリーブ、ダーガン・ストリート 26 Ｆターム(参考） 4C076 AA09 BB31 CC20 DD38 EE23 FF63 4C084 AA02 AA03 AA27 BA01 CA53 CA59 DC32 MA05 MA28 MA63 ZA89

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ウロキナーゼ阻害因子の効果的な量を、それを必要としている
患者に投与することを含む乾癬の治療方法であって、前記阻害因子を皮膚の疾患
部に局所投与する、方法。
【請求項２】前記ウロキナーゼ阻害因子が、ＰＡＩ−２と、プラスミノーゲ
ン活性化阻害性を有するその変異体と、ＰＡＩ−２の誘導体と、前記誘導体の変
異体とからなる群から選択されるものである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】前記セリンプロテアーゼ阻害因子を、ゲル製剤として投与する
、請求項１に記載の方法。
【請求項４】前記ゲルが、洗浄剤をさらに含むセルロースゲルである、請求
項３に記載の方法。
【請求項５】前記洗浄剤が、Ｔｗｅｅｎ８０である、請求項４に記載の方法
。
【請求項６】前記ゲルが、プロピレングリコールをさらに含むものである、
請求項４に記載の方法。
【請求項７】ＰＡＩ−２と、少なくとも一種の他のセリンプロテアーゼ阻害
因子とを含む治療剤の効果的な量を、それを必要としている患者に投与すること
を含む乾癬の治療方法であって、前記治療剤を皮膚の疾患部に局所投与する、方
法。
【請求項８】前記他のセリンプロテアーゼ阻害因子が、ｕＰＡ阻害因子であ
る、請求項７に記載の方法。
【請求項９】前記治療剤が、チオールプロテアーゼ阻害因子と、酸プロテア
ーゼ阻害因子と、メタロプロテイナーゼ阻害因子とからなる群から選択されるプ
ロテアーゼ阻害因子をさらに含むものである、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】前記プロテアーゼ阻害因子が、ＰＡＩ−２と共投与されるも
のである、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】洗浄剤を含有するゲルにＰＡＩ−２を含む医薬組成物。
【請求項１２】前記洗浄剤がＴｗｅｅｎ８０であり、前記ゲルがセルロース
ゲルである、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】ＰＡＩ−２と、少なくとも一種の他のセリンプロテアーゼ阻
害因子とを含む医薬組成物。
【請求項１４】チオールプロテアーゼ阻害因子と、酸プロテアーゼ阻害因子
と、メタロプロテイナーゼ阻害因子とからなる群から選択されるプロテアーゼ阻
害因子をさらに含むものである、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】前記組成物が、洗浄剤を含むセルロースゲルの形態である、
請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１６】前記ＰＡＩ−２を、創傷１ｃｍ²当たり０．１〜２０００μ
ｇの範囲で投与する、請求項２に記載の方法。
【請求項１７】前記ＰＡＩ−２を、１日当たり少なくとも１回、少なくとも
５日間投与する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】前記ＰＡＩ−２の誘導体が、ＰＡＩ−２の生化学的変更によ
り得たものであり、前記変更が、ポリエチレングリコールとの化学的結合と、リ
ン酸基の結合と、硫酸基の結合と、ペプチダーゼ処理と、糖鎖変更酵素による処
理と、糖結合酵素による処理とからなる群から選択されたものである、請求項２
に記載の方法。
【請求項１９】前記変異体が、ＰＡＩ−２のアミノ末端からのアミノ酸残基
の欠失又はアミノ酸残基の付加により得たものである、請求項２に記載の方法。
【請求項２０】前記変異体が、ＰＡＩ−２のカルボキシ末端からのアミノ酸
残基の欠失又はアミノ酸残基の付加により得たものである、請求項２に記載の方
法。