JP2002513399A - 医学治療に有用なテルベンゾイミダゾール（トポイソメラーゼインヒビター） - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、医学的な治療（例えば、真菌性の感染またはガンの治療）に使用するための、式（Ｉ） （式中、Ａｒはアリール、または窒素−、イオウ−または酸素−を含むヘテロ芳香族基であり；ＸはＨ、ＣＮ、ＣＨＯ、ＯＨＮアセチル、ＣＦ₃、Ｏ（Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル）、ＮＯ₂、ＮＨ₂、ハロゲン、またはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり；各Ｙは、個別にＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルまたはアラルキルであり；Ｙ’はフェニルまたはメトキシフェニルであり；ｎは０または１であり；各Ｚは、個別にＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル、ハロゲンまたはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルである）のトポイソメラーゼ毒またはその薬剤学的に許容可能な塩を提供する。本発明はまた、式（Ｉ）の化合物、式（Ｉ）の化合物を含む薬剤組成物、および少なくとも１の式（Ｉ）の化合物を投与することにより真菌感染またはガンを治療することを含む、治療的方法をも提供する。

Description

【発明の詳細な説明】 医学治療に有用なテルベンゾイミダゾール（トポイソメラーゼインヒビター） 発明の背景 本発明は、アメリカ合衆国の国立衛生研究所のグラントＣＡ３９９６２の後援 により、なされたものである。アメリカ合衆国政府は、本発明において所定の権 利を有する。 ＤＮＡトポイソメラーゼ（topoisomerase）は、ＤＮＡ鎖の協奏的な切断およ び再結合を触媒することによって、ＤＮＡのトポロジカルな状態を制御し修飾す る核酵素である。例えば、D'Arpaら、Biochim，Biophys.，Acta，９８９、１６ ３（１９８９）を参照。トポイソメラーゼII酵素は、ＤＮＡ中での二本鎖の切断 によって、ＤＮＡのトポロジカルな状態を変える。ＤＮＡトポイソメラーゼの切 断／再結合の反応を阻害することによって、多くの薬剤が、これらの酵素を正味 のＤＮＡ切断酵素に変換して、効率的な細胞死滅を生じることが示されてきた。 L.F.Liu、Topoisomerases中：Topoisomerase targeting drugs，Adv．in Pharma col．，２９Ｂ（１９９４）；L．K.Wangら、Chem．Res．Toxicol.，６、８１３ （１９９３）を参照。このように、哺乳類のトポイソメラーゼIIは、ガン化学療 法剤の開発のための有効な薬理学的ターゲットを代表している（A．Y．Chenら、 Annu．Rev．Pharmacol．Toxicol.，３４、１９１（１９９４））。使用中の臨床 の薬剤中でトポイソメラーゼIIインヒビターとして認められているものは、エト ポシド（etoposide；ＶＰ−１６）、テニポシド（teniposide；ＶＭ−２６）、 ミトキサントロン（mitoxantrone）、ｍ−ＡＭＳＡ、アドリアマイシン（ドクソ ルビシン；doxorubicin）、エリプチシン（ellipticine）、およびダウノマイシ ン（daunomycin）である。 トポイソメラーゼIIインヒビターとの比較において、トポイソメラーゼＩイン ヒビターは、相対的にごく少数しか知られていない。カンプトセシン（camptoth ecin）は、最も大規模に研究された哺乳類トポイソメラーゼＩインヒビターを代 表する。R．C．Galloら、J．Natl．Cancer Inst.，４６、７８９（１９７１）、 およびB．C．Giovanellaら、Cancer Res.，５１、３０５２（１９９１）を参照 。カンプトセシンのトポイソメラーゼＩの切断／再結合反応の阻害は、トポイソ メラーゼＩが開裂された状態で可逆的にトラップされている、開裂可能な複合体 と呼ばれる共有結合的な中間体の蓄積をもたらす（Y.-H．Hsiangら、J.Biol.Che m.，２６０、１４８７３（１９８５）；S．E．Porterら、Nucl．Acids Res.，１ ７、８５２１（１９８９）；C．Jaxelら、J．Biol．Chem.，２６６，２０４１８ （１９９１））。カンプトセシンに見られる有力な抗新生物活性の広域スペクト ルは、哺乳類トポイソメラーゼＩの効力を有効に減殺できる他の薬剤を見出すた めの更なる努力を促進してきた。 最近、ヘキスト３３３４２（１）、 すなわち、２’−（４−エトキシフェニル）−５−（４−メチル−１−ピペラジ ニル）−２，５’−ビ−１Ｈ−ベンゾイミダールが、トポイソメラーゼＩのイン ヒビターであることが示された。 ＤＮＡの小さい溝に結合するこの薬剤は、ＤＮＡおよびトポイソメラーゼＩに 由来する可逆的な開裂可能な複合体をトラップして、限られた数の高度に特異的 な一本鎖ＤＮＡの切断を生じる。例えば、A．Y．Chenら、Cancer Res.，５３、 １３３２（１９９３）、およびA．Chenら、ＰＮＡＳ、９０、８１３１（１９９ ３）を参照。ヘキスト３３３４２の抗癌剤としての限界は、ＭＤＲ１を過剰に発 現する（overexpress）腫瘍セルラインに対して有効でないという、以前に報告 された観察である。ＫＢ３−１の細胞は、ＩＣ₅₀が約９ｎＭとヘキスト３３３４ ２に対して非常に感受性であることが知られているが、この化合物は、ＭＤＲ１ を過剰に発現することが知られているＫＢ Ｖ−Ｉ細胞に対しては、約１３０倍 も少ない細胞毒性しか示さない。最近、哺乳類のトポイソメラーゼＩインヒビタ ーとしてのそれらの効力および関連する細胞毒性に伴う構造活性相関を更に研究 するために、このビスベンゾイミダゾールのいくつかのアナログが合成された。 例えば、Q．Sunら；Biorg．and Med．Chem．Lett．４、２８７１（１９９４）は 、式（２）のビス−ベンゾイミダールの製法を開示した： （式中、ｎは０、１、２、または３である）。しかしながら、これらの化合物は 、ヘキスト３３３４２より約１桁程度弱い細胞毒性しか示さないことが見出され た。 より最近、Q．Sunらは、アブストラクト２６８８、ＡＡＣＲの第 ８６回年次ミーティングScientific Proceedings（トロント、ＣＡ、１９９５年 ３月１８〜２２日）で、トリスベンゾイミダゾール誘導体、５−（２−ピリジル ）−２−［２’−ベンゾイミダゾール−５”−イル ベンゾイミダゾール−５’ −イル］ベンゾイミダゾールが、ヒトのトポイソメラーゼＩのインヒビターとし て、ヘキスト３３３４２と類似した効力を有することを明らかにした。 真菌性の感染は、最近２０年でますます重要になり、移植レシピエント、ガン 、および、ＡＩＤＳ患者等の免疫抑制された（immunocompromised）患者におい て、高い死亡率を引き起こしている。増大する患者数、および現在の抗真菌性の 化学療法における既存の問題は、日和見感染のこのますます重要なクラスの治療 のための、より有効で安全な抗真菌性の薬剤の需要を生んだ。サッカロミセスセ レビセエエ（Saccharomyces cerevisiae）およびカンジダアルビカンス（Candid a albicans）の研究に基づき、核の真菌性トポイソメラーゼＩが、抗真菌性薬剤 のための分子ターゲットとして有望である（J．M．Fostelら、Antimicrob．Agen ts Chemother.,３９、５８６（１９９５）；J．M．Fostelら、Antimicrob．Agen ts Chemother.,３６、２１３１（１９９２）を参照）。Ｓ．セレビセエエにおけ る研究は、カンプトセシンのための殺真菌性のターゲットとして、トポイソメラ ーゼＩを確立した（J．Nitissら、ＰＮＡＳ ＵＳＡ、８５、７５０１（１９８ ８））。Ｃ．アルビカンスにおける研究は、アミノカテコールＡ−３２５３に対 するヒトおよびカンジダのトポイソメラーゼの感受性における差違を示した（上 記で引用したJ.M．Fostel（１９９５））。 アスペルギルスフミガーツス（Aspergillus fumigatus）およびＡ．ニガー（n iger）は、生命を危うくする全身性の２つの重要なヒト病原体である。これらの 日和見感染を有する患者の治療のため の、より有効な抗真菌性の薬剤に対する緊急のニーズがある。 発明の概要 本発明は、一般式（Ｉ） （式中、Ａｒはアリールまたは窒素−、イオウ−または酸素を含有するヘテロ芳 香族の基であり；ＸはＨ、ＣＮ、ＣＨＯ、ＯＨ、アセチル、ＣＦ₃、Ｏ（Ｃ₁〜Ｃ₄ アルキル）、ＮＯ₂、ＮＨ₂、ハロゲン、またはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであ り；各Ｙは、個別にＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルまたはアラルキルであり；Ｙ’は 、Ｈ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル、フェニル、またはメトキシフェニルであり；各Ｚ は、個別にＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル、ハロゲンまたはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキ ルであり；ｎは０または１である）の化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩 の、抗真菌に有効な量を、真菌性感染、特に全身性の真菌性感染で苦しむ哺乳類 に対して投与することを含む、真菌性感染の治療のための療法を提供する。 好ましくは、Ａｒは、フェニル等の（Ｃ₆〜Ｃ₁₂）アリール、または１〜３個 のＮ、Ｓまたは非過酸化物性のＯを含み、各Ｎは非置換であるか、またはＨ、（ Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルまたはべンジルで置換された５〜１２員のヘテロアリール基 、最も好ましくは５〜６員のヘテロアリール基である。Ａｒは、示されているよ うに、ベン ゾ環の４、５、６または、７位を、好ましくは５位を占めることができ、Ｘは、 Ａｒ上の任意の利用できる位置を占めることができる。ＹがＨであるとき、４， ７位と５、６位とは等価である。１つの態様によれば、Ａｒはフェニルであり、 ＸはＣｌまたはＢｒであって、好ましくはそのパラ位を占める。描かれたように 、Ｚはベンゾ部分の任意の位置を占めることができる。Ｚは、好ましくはＨ、ハ ロゲン、ＣＨ₃またはＣＦ₃である。 他の態様によれば、ｎは０であり、Ｘはハロゲン、例えばＦ、Ｂｒ、Ｃｌまた はＩ、好ましくはＣｌまたはＢｒであり、および好ましくはベンゾ部分の５−位 を占める。Ｙは好ましくはＨまたはＣＨ₃である。Ｙ’は、好ましくはＨ、ＣＨ₃ 、エチルまたは４−メトキシフェニルである。 ニチジン（nitidine）およびコラリン（coralyne）を含む、ヒトのトポイソメ ラーゼＩの多くの既知のインヒビターは、真菌性トポイソメラーゼＩに対して無 効であるが、式（Ｉ）の化合物は、アスペルギルストポイソメラーゼＩの存在下 におけるＤＮＡ開裂を促進するそれらの能力によって示されるように、真菌性ト ポイソメラーゼＩのインヒビターである。以下に開示されるように、ニチジンお よびコラリン等の最も有力なヒトのトポイソメラーゼＩ毒に対して、および、よ り有力でないモノ−ベンゾイミダゾール ヒトトポイソメラーゼＩ毒に対して、 アスペルギルス酵素が完全に耐性であることが意外にも見出された。ヒトまたは 酵母のトポイソメラーゼＩを発現している酵母を用いる研究は、これらの化合物 への酵母トポイソメラーゼＩの同様な耐性を示唆した。それらの薬剤感受性にお いて、真菌性の酵素は、それらのヒトの対応する物と比べて実質的に異なるよう に見える。 更に、式（Ｉ）の化合物は、カンプトセシン感受性およびカンプ トセシン耐性の腫瘍細胞、およびＰ−グリコプロテインの発現による多薬剤耐性 を示している腫瘍セルラインを含む哺乳類の腫瘍細胞に対しても細胞毒性を示す 。したがって、本発明は、哺乳類（すなわちヒト）に対して、式（Ｉ）の化合物 、またはその薬剤学的に許容可能な塩の制癌的な有効量を投与することを含む、 ガンの治療のための療法を提供する。 本発明はまた、式（Ｉ）の新しい化合物を提供する。例えば、本発明は式（Ｉ ）： （式中、Ａｒは（Ｃ₆〜Ｃ₁₂）アリールまたは１〜３個のＮ、Ｓまたは非過酸化 物性のＯを含み、各Ｎは非置換であるか、またはＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルまた はベンジルで置換された（５〜１２員）ヘテロアリール基であり；Ｘは、Ｈ、Ｃ Ｎ、ＣＨＯ、ＯＨ、アセチル、ＣＦ₃、Ｏ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル、ＮＯ₂、ＮＨ₂ 、ハロゲンまたはハロ−（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり；個々のＹは、Ｈ、（Ｃ₁ 〜Ｃ₄）アルキルまたはアラルキルであり；Ｙ’はフェニルまたはメトキシフェ ニルであり；各Ｚは、個別にＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル）、ハロゲン、またはハ ロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり；ｎは０またはＩである） 化合物、またはその薬剤学的に許容可能な塩を提供する。好ましい化合物は、Ｙ ’がメトキシフェニルである式（Ｉ）の化合物である。他の好ましい化合物は、 ｎが１である式（Ｉ）の化合物である。 他の好ましい化合物は、ＸがＣＮ、ＣＨＯ、ＯＨ、アセチル、ＣＦ₃、Ｏ（Ｃ₁〜 Ｃ₄）アルキル、ＮＯ₂、ＮＨ₂、ハロゲン、またはハロ−（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル であり、ｎが０である式（Ｉ）の化合物である。更に他の好ましい化合物は、少 なく１つのＺがハロゲンまたはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり、ｎが０である 式（Ｉ）の化合物である。 本発明はまた、式（Ｉ）の化合物、またはその薬剤学的に許容可能な塩の１つ 以上を、薬剤学的に許容可能なビヒクルと組み合わせにおいて含む、全身または 局所的な投与の両方に適した薬剤組成物を提供する。 本発明はまた、医学的治療（すなわち、真菌性感染またはガンの治療）におけ る使用のための式（Ｉ）の化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩のみならず 、真菌性感染を治療するための、またはガンを治療するための薬剤を製造するた めの、式（Ｉ）の化合物、またはその薬剤学的に許容可能な塩の使用をも提供す る。 図面の簡単な説明 図１は、化合物１０〜１６の合成の概略図である。 図２は、本発明の化合物を製造するために用いる中間体４〜８の製法の概略図 である。 図３は、中間体９の製法の概略図である。 図４は、化合物ＪＳＫＩＶ−６８、−３７および−４７の合成の概略図である 。 図５は、中間体ＪＳＫＩＶ−４４の製法の概略図である。 図６は、中心のベンゾイミダール部分上で修飾されたアナログの製法の概略図 である。 図７は、ＺおよびＹ’が上記で定義されたように末端のベンゾイ ミダール部分上で修飾されたアナログの製法の概略図である。 図８は、ヒトおよびアスペルギルスのトポイソメラーゼＩに対する、種々の薬 剤の活性を要約したものである。ヒト（Ｈ列）およびアスペルギルス（Ａ列）そ れぞれに対する種々の薬剤の毒活性が、「＋」（活性）または「−」（不活性） によって定性的に示される。ＤＭ／II／３３は、アスペルギルストポイソメラー ゼＩに対して非常に弱い活性を示すのみであり、「＊」によって示す。 発明の詳細な説明 本発明の化合物に有用なアリール基（Ａｒ）は、（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリール、好 ましくは（Ｃ₆〜Ｃ₁₄）アリール、例えば芳香族環を含む系であって、その系は 、合計で６〜１２の炭素原子を含むものである。このように、ここで用いられる ように、用語「アリール」は、モノ−またはビス−（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルで置換 されたアリール、例えばトリルおよびキシリル；ベンジルまたはフェネチル等の ａｒ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル；およびアルカラルキル（alkaralkyl）を含む。好ま しくは、アリールはフェニル、ベンジル、またはナフチルである。 ヘテロ芳香族環は、Ｎ、Ｓまたは非過酸化物性のＯ等の３個までのヘテロ原子 、および１２個までの環原子を含む芳香族環を含む。 代表的な芳香族環は、チオフェン、ベンゾチオフェン、ナフトチオフェン、トリ アンスレン（trianthrene）、フラン、ベンゾフラン、イソベンゾフラン、ピラ ン、クロメン（choromene）、キサンテン、フェノキサチイン（phenoxathiin） 、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、トリアゾール、 テトラゾール、ピラジン、トリアジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン 、イソインドール、インドール、インダゾール、プリン、キノリジ ン、イソキノリン、キノリン、フタラジン、ナフチリジン、キノキサリン、キナ ゾリン、シンノリン、プテリジン、カルバゾール、カルボリン、フェナントリジ ン、アクリジン、フェナントロリン、フェナジン、イソチアゾール、フェノチア ジン、オキサゾール、イソオキサゾール、フラザン、フェノキサジン等を含む。 好ましいヘテロ芳香族環は、ベンゾ環（例えば、好ましい２−、３−または４− ピリジル置換基）等の、芳香族環に縮合されていても、または縮合されていなく てもよい、５−または６−員のヘテロ芳香族環を有する。 用語「アルキル」は、直鎖または分岐のアルキルのみならず、シクロアルキル および（シクロアルキル）アルキル、例えば、メチル、エチル、ｉ−プロピル、 シクロプロピルまたはシクロプロピルメチルを含む。 メトキシフェニルは、２−、３−または４−メトキシフェニルを含む。 薬剤学的に許容可能な塩は、塩基性のＮＨと、有機または無機の酸との酸付加 塩、例えば塩酸塩、炭酸塩、硫酸塩、重炭酸塩、酢酸塩、リン酸塩、酒石酸塩、 クエン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、プロピオン酸塩、等を含む。 置換トリスベンゾイミダゾールの代表的な製法は、図１中に概説される。商業 的に入手可能であったフェニレンジアミンを除いて、適切に置換されたフェニレ ンジアミンは、それぞれのｏ−ニトロアニリン誘導体の接触水素化によって合成 された。これらのフェニレンジアミンは、M.P.Singhら、Chem．Res．Toxicol., ５、５９７（１９９２）、およびV.Bathiniら、Synth．Comm.,２０、９５５（１ ９９０）の一般的な方法論を使用して、次いで、５−ホルミル−２−（ベンゾイ ミダゾ−５’−イル）ベンゾイミダール、９と一緒 にニトロベンゼン中で１５０℃で加熱することにより、カップリングされて、４ ３〜９６％の範囲の収率で種々のトリスベンゾイミダゾール１０〜１６を与える 。 図１中で概説される必要なニトロアニリンは、商業的に入手可能であった３を 例外として、４−ブロモ−２−ニトロアニリン、１７から合成された。化合物１ ７ は、２，４，４，６−テトラブロモ−２，５−シクロヘキサジエノンを臭素化 剤として用いて、ｏ−ニトロアニリンから良好な収率９４％で製造された。G.J. Foxら、Org．Syn.，５５、２０（１９７３）。アリルトリブチル錫およびフェニ ルトリブチル錫は、商業的に入手可能であり、ピリジルトリブチル錫の誘導体は 、塩化トリブチル錫および２−、３−および４−ブロモピリジンからそれぞれ製 造された。D．Petersら、Heterocyclic Chem.,２７、２１６５（１９９０）を参 照。これらのトリブチル錫誘導体は、次いで、図２中で概説されるように、M．I waoら、Heterocycles３６、１４８３（１９９３）の方法論にしたがって、ＤＭ Ｆ中で触媒としてＰｄＣｌ₂（ＰＰｈ₃）₂を用いて４−ブロモ−２ニトロアニリ ンとカップリングされ、それぞれ化合物４、５、６、７、および８を与えた。こ の方法論は、３−、４−、５−または、６−アリールおよびヘテロアリール置換 の２−ニトロアニリンを、対応するブロモニトロアニリンから製造するために一 般に適用することができる。 ５−ホルミル−２−（ベンゾイミダゾ−５’−イル）ベンゾイミダール、９の 製造は、図３中で概説するように達成された。５−ベンゾイミダゾールカルボン 酸の５−ヒドロキシメチルベンゾイミダゾールへの還元は、ＬｉＡｌＨ₄を用い て達成された。結果として生ずる粗製のベンジル型（benzylic）アルコールの、 テトラプロピルアンモニウムパールテネート（ＴＰＡＰ）およびＮ−メチルモル ホリン Ｎ−オキシドによる酸化は、２工程で、所望の５−ホルミルベンゾイミ ダゾールを３２％の全収率で与えた。A.Cherifら、J.Med.Chem.，３５，３２０８ （１９９２）を参照。５−ホルミルベンゾイミダゾールの４−シアノ−１，２− フェニレンジアミンとのカップリングは、５−シアノ−２（ベンゾイミダゾール −５’−イル）ベンゾイミダゾール、１９を与え、それは、水性ギ酸の存在下で Ｎｉ−Ａｌ触媒で処理されて５−ホルミル−２−（ベンゾイミダゾール−５’− イル）ベンゾイミダゾール、９を６５％の収率で与えた（J.R.Pipierら、J．Med .Chem.，３１，２１６４（１９８８））。 本発明の化合物は、薬剤組成物として製剤化して、全身性のまたは局所的な真 菌性感染で苦しめられた哺乳類宿主（免疫抑制されたヒト患者、等）に対して、 投与の選ばれたルートに適している種々の形で、すなわち経口または非経口、静 脈内、筋肉内、局所的、または皮下のルートで投与することができる。 このように、本発明の化合物は不活性な希釈剤または同化が可能な食用のキャ リア等の薬剤学的に許容可能なビヒクルと組合せて、全身的に、例えば、経口で 投与することができる。それらは、硬いまたは軟らかいシェルのゼラチンカプセ ルに封入することができ、錠剤に圧縮することができ、または直接その患者の食 餌の食品に組み入れることができる。治療的な経口投与のために、活性な化合物 は、１つ以上の賦形剤と組み合わせて経口摂取が可能な錠剤、バッカル錠剤、ト ローチ、カプセル、エリキシル、懸濁（suspension）系、シロップ、ウェハース 等の形で用いることができる。このような組成物および製剤は、少くとも０．１ ％の活性化合物を含むべきである。組成物および製剤のパーセンテージは、もち ろん変えることができ、与えられたユニット投与形の重量の約２〜約６０％の間 で適宜変化させることができる。このような治療的に有用な組成物中の活性化合 物の量は、有効な投与量レベルが得られるようなものである。 錠剤、トローチ、ピル、カプセル等は、以下のものをも含むことができる：ト ラガカントガム、アカシア、トウモロコシデンプン、またはゼラチン等の結合剤 ；二カルシウムリン酸塩等の賦形剤；トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプ ン、アルギン酸等の崩壊剤；ステアリン酸マグネシウム等の滑剤；および、シュ ークロース、ラクトースまたはサッカリン等の甘味料、または、ハッカ、ヒメコ ウジの油またはチェリー香味料等の香味料を加えることができる。ユニット投与 形がカプセルである場合、それは上記のタイプの材料に加えて、植物油、ポリエ チレングリコール等の液体キャリアをも含むことができる。種々の他の材料はコ ーテングとして、または固体ユニット投与形の物理的な形を他の方法で修飾する ために存在することができる。例えば、錠剤、ピル、またはカプセルは、ゼラチ ン、ワックス、シェラック、または糖等でコートしてもよい。シロップまたはエ リキシルは、活性化合物、甘味料としてのシュークロース、保存剤としてのメチ ルおよびプロピルパラベン、色素、およびチェリーまたはオレンジフレーバー等 の香味料を含むことができる。もちろん、任意のユニット投与形を製造する際に 用いられる任意の材料は、使用された量において実質的に無毒で、および薬剤学 的に許容可能であるべきである。加えて、活性な化合物は、持続（sustained） 放出的な製剤およびデバイスに組み込むことができる。 活性化合物は、注入または注射によって、静脈内に、または、腹膜内に投与す ることもできる。活性化合物またはその塩の溶液は、水中で、所望により無毒な 界面活性剤と混合して製造することがで きる。また、分散（dispersion）系は、グリセリン、液体ポリエチレングリコー ル、トリアセチン、それらの混合物中で、および油中で製造することができる。 貯蔵および使用の通常の条件の下で、これらの製剤は微生物の成長を防くための 保存剤を含む。 注射または注入使用に適した薬剤学的な投与形は、注射可能または注入可能な 無菌の溶液または分散液（所望によりリポソーム中にカプセル化された）の即座 の製剤化に適合するように、活性成分を含む無菌溶液または分散液、または無菌 粉末を含むことができる。全ての場合に、最終的な投与形は、製造と貯蔵の条件 の下で無菌で、流動性で、安定でなければならない。液体キャリアまたはビヒク ルは、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセリン、プロピレン グリコール、および液体ポリエチレングリコール等）、植物油、無毒なグリセリ ルエステル、およびそれらの適当な混合物等を含む、溶媒または液体の分散媒体 であることができる。適当な流動性は、例えばリポソームの形成によって、分散 液の場合には必要な粒径を維持することによって、または界面活性剤の使用によ って維持することができる。微生物作用の防止は、種々の抗菌性および抗真菌性 の薬剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメ ロサール等によって得ることができる。多くの場合、等浸透圧の薬剤、例えば糖 、緩衝液または塩化ナトリウムを含むことが好ましいであろう。注射可能な組成 物の吸収の延長は、その組成物中での吸収遅延剤、例えば、モノステアリン酸ア ルミニウムおよびゼラチン等の使用によって得ることができる。 無菌の注射可能な溶液は、適当な溶剤中で活性化合物の必要な量を、必要に応 じて、上記に列挙した他の成分とともに取り込み、次いで濾過滅菌することによ って製造する。注射可能な無菌の溶液の製剤のための無菌粉末の場合、好ましい 製剤の方法は、真空乾燥お よび凍結乾燥技術であり、それらは、以前の無菌濾過において存在した任意の追 加的な成分プラス活性成分の粉末を与える。 局所的な投与のために、本発明の化合物は、それらが液体であるときには、純 粋な形で投与することができる。しかしながら、それは、固体または液体である ことができる皮膚科的に許容可能なキャリアと組み合わせて、組成物または製剤 として、それらを皮膚に投与することが望ましい。 有用な固体のキャリアは、タルク、クレー、微晶質セルロース、シリカ、アル ミナ等の細分された固体を含む。有用な液体のキャリアは、水、アルコールまた はグリコール、または水−アルコール／グリコールのブレンドであり、その中で 、本発明の化合物は、所望により無毒な界面活性剤を助剤として、有効なレベル で溶解または分散されることができる。香味剤および追加的な抗菌物質等のアジ ュバントは、与えられた使用における性質を最適化するために加えることができ る。結果として生じる液体組成物は、吸収剤パッドから塗布する、包帯および他 の手当用品を含浸するために用いる、またはポンプ型またはエーロゾル噴霧器を 用いて患部領域にスプレーすることができる。液体組成物は、点眼液（eyedrops ）、マウスウオッシュ、灌注、等として用いることができる。抗菌物質で予め飽 和された拭きとり剤は、Anderson（米国特許第４，８９６，７６８号）によって 開示されている。 合成のポリマー、脂肪酸、脂肪酸塩およびエステル、脂肪アルコール、変性セ ルロース、変性無機材料等の増粘剤は、液体キャリアとともに用いて、ユーザの 皮膚に直接適用するための、塗布可能なペースト、ゲル、軟膏、石鹸等を形成す るために用いることもできる。 皮膚に式（Ｉ）の化合物を到達させるために使用可能な有用な皮 膚科用組成物は、Jacquetら、（米国第４，６０８，３９２号）、Geria（米国特 許第４，９９２，４７８号）、Smithら、（米国特許第４，５５９，１５７号） 、およびWorztman（米国特許第４，８２０，５０８号）に開示されている。 Ｉの化合物の有用な投与量は、それらのインビトロ活性および動物モデルにお けるインビボ活性と、カンプトセシン（例えばB.C.Giovanellaら、Cancer Res., ５１、３０５２（１９９１）を参照）または、ヘキスト３３３４２（A.Y.Chenら 、Cancer Res.，５３、１３３２（１９９３）を参照）の等価の投与のそれらと を比較することにより、決定することができる。マウスおよび他の動物における 有効な投与量の、ヒトへの外挿の方法は、当該技術において公知である。例えば 、米国特許第４，９３８，９４９号を参照。 一般に、ローション等の液体組成物中における式（Ｉ）の化合物（群）の濃度 は、約０．１〜２５ｗｔ．％、好ましくは約０．５〜１０ｗｔ．％である。ゲル または粉末等の半固体または固体の組成物における濃度は、約０．１〜５ｗｔ． ％、好ましくは約０．５〜２．５ｗｔ．％である。注射、注入液または経口摂取 のための一回の投与量は、一般に、５０〜１５００ｍｇの間で変化し、成人に対 して約０．５〜５０ｍｇ／ｋｇのレベルを与えるために、毎日１〜３回投与する ことができる。 本発明のテルベンゾイミダゾール（terbenzimidazole）は、全身性の真菌性の 感染または「深在の（deep）真菌性症」を治療するために特に有用である。この ような感染は、コクシジオイデス症（coccidiomycosis）、黒色分芽菌症（chrom oblastomycosis）、クリプトコックス症（cryptococcosis）、全身性のモニリア 症（moniliasis）、ヒストプラスマ症（histoplasmosis）、アスペルギルス症（ aspergillosis）、ロドトルラ症（rhodotorulosis）、スポロト リクム症（sporotrichosis）、パラコクシジオイデス症（paracoccidiodosis） 、藻菌症（phycomycosis）、ブラストミセス症（blastomycosis）、およびガン ジダ症（candidiasis）を含む。感受性の菌は、ガンジタ（モニリア；monilia） アルビカンスを含み、それは呼吸器、胃腸内、および女性生殖路内の粘膜の正常 細菌叢のメンバーである。これらおよび他の場所において、それは優勢になる場 合があり、病的な症状を伴う場合がある。それは衰弱した、または免疫抑制され た患者において、時々、全身性の進行性の病気をもたらす。ガンジダは、静脈内 に導入された（管材料、針、過栄養、麻酔剤耽溺、等）際には、血流感染、血栓 性静脈炎、心内膜炎、または目および他の器官の感染を生じる場合がある。他の 酵母（例えば、トルロプシス(torulopsis)glabrata）は、同様の状況の下で病原 的になり得る。 本発明の化合物は、クリプトコックス(cryptococcus)neoformansの感染に対し ても使用可能である。その真菌は、土壌において自由に生息しており、しばしば ハト大便中において見出される。ヒトにおいて、それは主要な肺の感染を引き起 こす可能性があり、その後に、時折致命的な髄膜炎が続く。 ブラストミセス（Blastomyces;Ajellomyces）デルマチチジス(dermatitidis) 感染も、抑制される可能性がある。この真菌は、慢性肉芽腫症、北米ブラストミ セス症を引き起こし、皮膚または肺臓に限られている場合もあり、または、その 体中に広く散在することもある。本発明の化合物は、ブラストミセスbrasiliens is、南および中米ブラストミセス症（パラコクシジオイデス肉芽腫）を引き起こ す子嚢菌に対して、または通常は気道を通して生じ、臨床的な肺炎および顔面突 出病をもたらす可能性のあるＨ．capsulatumの感染の治療に使用可能である。 発熱、倦怠、咳、疼痛（aches）、痛み（pain）、および、発汗を伴い、コク シジオイデス肉芽腫と呼ばれている高度に致命的な形に進行する可能性があるイ ンフルエンザ類似の病気であるコクシジイデオ(Coccidioideo)immitis感染も、 治療できる可能性がある。その化合物は、ゲオトリクム症（気管支、肺、粘膜の 感染）をもたらす擬似酵母菌ゲオトリクムcandidumに対して、および、動物およ びヒトにおいて皮膚、リンパ管および他の組織の慢性の肉芽種性の感染であるス ポロトリクム症を引き起こす真菌であるスポロスリックス(Sporothrix)（スポロ トリクム）schenckiiに対しても有効である。本発明の化合物は、リゾプスｓｐ ．pr ムコールｓｐ．によって引き起こされるクロモブラストミコーシス、マズ ラミコーシスおよび藻菌症にも使用可能である。 本発明の化合物は、アスペルギルス種に対して特に有効である。アスペルギル スフミガーツスおよび他のアスペルギルスｓｐ．は、交代する宿主において全身 性の真菌性感染の頻繁な原因となる。白血病またはリンパ腫、免疫抑制された人 （特にAIDS患者、または臓器移植を経験している患者）、および集中的なコルチ コステロイド治療を受けている人は、特にアスペルギルス症に感受性である。進 入門は気道であり、および、アスペルギルス症の大部分の場合において、肺の発 現、主に壊死性の気管支肺炎、出血性肺梗塞、肉芽種（アスペルギローム）が起 こる。 本発明の化合物は、ヒトおよび家庭ペット、農場動物および動物園動物等の動 物の皮膚上で真菌（酵母を含む）の成長を抑制するためにも有用である。このよ うなグラム陽性の微生物は、ヒト尋常性座瘡を引き起こす主要な病原体であるプ ロピオニバクテリウム(Propionibacerium)acnesを含む。頭部白癬、陰股部白癬 （ジョッキー掻痒症）、体幹白癬（白癬）、足部白癬（水虫）、および爪白癬を 含む動物およびヒトの真菌性の皮膚感染も、治療することができる。このような 皮膚糸状菌症に関連する真菌は、T.mentagrophytes、M.audevinii、T.rubrum、E .floccasum、およびM.pelineumを含む。 本発明の化合物は、体腔の膜の感染に相関した真菌に対しても有効である。こ のような感染は、口腔ガンジタ症、腟炎および爪囲炎を含む。R.T.Yousefら、My kosen、２１、１９０（１９７８）、およびＨ．Gershon、J．Pharm．Sci．、６ ８、８２（１９７９）を参照。本発明の化合物は、セッケン、シャンプー、脱臭 剤、および皮膚軟化ローション等の化粧および皮膚清浄化用の組成物においても 用いることができ、それらは脱臭剤として、すなわち皮膚上で臭いを引き起こし ているバクテリアをコントロールするために、作用できる。本発明の化合物は、 シャンプー、リンス、および他のヘアケア製品において、ピチロスポルン(Pityr osporum)ovaleを抑制する（免疫抑制された患者におけるフケ、皮膚病変）ため にも使用可能である。 本発明のアナローグは、Burkitt腫瘍、慢性のリンパ球性白血病、多発性骨髄 腫、扁平上皮細胞および大細胞（large cell）未分化癌腫、肺の腺癌、ユーイン グの肉腫、非ホジキンリンパ腫、胸腫瘍、大腸腫瘍、胃腫瘍、燕麦型細胞の気管 支原性癌腫、頸部の扁平上皮細胞癌腫、卵巣腫瘍、膀胱腫瘍、睾丸腫瘍、子宮内 膜腫瘍、悪性黒色腫、および、急性リンパ球性白血病、前立腺の癌腫を含む（し かしこれらには限定されない）トポイソメラーゼＩインヒビターに感受性の公知 のガンを治療するために使用可能である。本発明の化合物は、単独の薬剤として 、または、一般にこれらのガンを治療するために使用されている他の抗新生物性 の薬剤と組合せて投与することができる。 以下の例を参照しつつ本発明を更に詳細に説明する。例において、融点はトー マス−フーバーのユニメルト（unimelt）型キャピラリ融点装置により測定した 。赤外スペクトルのデータ（ＩＲ）は、Perkin-Elmer １６００のフーリエ変換 分光光度計上で得たものであり、ｃｍ^-1において報告する。プロトン（¹Ｈ Ｎ ＭＲ）および炭素（¹³Ｃ ＮＭＲ）核磁気共鳴は、Varianジェミニ２００フーリ エ変換分光記録計上で記録した。ＮＭＲスペクトル（２００ ＭＨｚの¹Ｈ、お よび５０ＭＨｚの¹³Ｃ）は、ＣＤＣｌ₃（特に断らない限り）中で記録したもの であり、化学シフトは、テトラメチルシラン（ＴＭＳ）から低磁場側へのδ単位 において報告する。結合定数は、ヘルツで報告する。質量スペクトルは、ネブラ スカ−リンカーン大学化学科内のミッドウェスト マススペクトルセンターから 得られた。燃焼分析は、Atlantic Microlab社（Norcross、ＧＡ）によって実行 され、±０．４％の範囲内であった。ＴＨＦは、使用に先立ち、新たにナトリウ ムおよびベンゾフェノンから蒸留した。アリルトリブチル錫およびフェニルトリ ブチル錫は、Aldrich Chemical Companyから購入した。 例を通じて、アスペルギルスnidulans株Ｒ２１（pabaA １、ｙＡ２）を用いた 。ビベンゾイミダゾール ヘキスト色素３３３４２（Ｈｏ３３３４２）、カンプ トセシン、およびベレニル（berenil）は、Sigma Chemical Co.から購入した。 モノベンゾイミダゾール（ＱＳ／II／９、４８、５０、５１および５９Ａ）、テ ルベンゾイミダゾール（１１および１３）、およびプロトベルベリン（protober berine；コラリン、ＤＭ／II／３３）およびニチジンは、以下に記載するように 、およびＱ．Sunら、Biorg & Med.Chem．Lett.,４，２８７１（１９９４）、お よびJ．Med.Chem.，３８、３６３８（１９９５）；キムら、Biorg & Med.Chem． Lett.,４，６２（１９ ９６）；J．Med.Chem.，３９、９９２（１９９６）；D.Makheyら、Med.Chem.Res .,５、１（１９９５）；Biorg & Med.Chem．Lett.,４、７８１（１９９６）によ り合成した（構造については図８を参照）。全ての薬剤は、ジメチルスルホキシ ド（Sigma Chemical Co.）中に、１、５、または１０ｍｇ／ｍｌの濃度で、およ び−２０℃でアリコートで凍らせて保存した。例１ ＰｄＣｌ₂（ＰＰｈ₃）₂により触媒された４−ブロモ−２−ニトロアニリ ン（１３）と錫化合物とのカップリング反応のための一般的な手順 （Ａ） ４−フェニル−２−ニトロアニリン（５） ４−ブロモ−２−ニトロアニリン１７（１．０ｇ、４．６７ミリモル）、トリ ブチルフェニル錫（２．２ｇ、６．０７ミリモル）、ビス（トリフェニルホスフ ィン）パラジウム（II）塩化物（１６４ｍｇ、０．２３４ミリモル）およびリフ ェニルホスフィン（６１３ｍｇ，２．３４ミリモル）のＤＭＦ（１５ｍｌ）中の 溶液を、Ｎ₂下で１２０℃で一晩加熱した。溶液を室温に冷却した後、反応混合 物を直接にシリカゲル上でクロマトグラフィーにかけ、２〜５％のＥｔＯＡｃ／ ヘキサンで溶離して、黄色の固体として７５２ｍｇ（７５％）の５を得た：ｍｐ １６９〜１７１℃；ＩＲ（ＣＨＣｌ₃）３５１７、３３９８、３０２２、１６ ３５、１５２５、１２５０；¹Ｈ ＮＭＲ δ ８．３８（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝２． ２）、７．６６（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．７，２．２）、７．５９〜７．５４（２ Ｈ、ｍ）、７．４９〜７．３４（３Ｈ、ｍ）、６．９０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．８ ）、６．１３（ＮＨ、ブロード（ｂｒｓ））；¹³ＣＮＭＲ ６ １４４．２、１ ３９．３、１３５．０、１３０．９、１２９．５、１２７．８、１２６．８．１ ２４．４．１１９．８、１１２．８；分析Ｃ₁₂Ｈ₁₀Ｎ₂Ｏ₂としての計算値；Ｃ、 ６７ ．２８；Ｈ、４．７０；Ｎ、１３．０８。測定値；Ｃ、６７．３８；Ｈ、４．７ ６；Ｎ、１３．０１。 （Ｂ） ４−アリル２−ニトロアニリン（４） ４−ブロモ−２−ニトロアニリン１７（１．７０ｇ、７．８４ミリモル）およ びアリルトリブチル錫（３．３８ｇ、１０．２ミリモル）から、５に対して上述 したようにして、黄色の固体として９６％の収率で得た：ｍｐ２９〜３１℃；Ｉ Ｒ（ＫＢｒ）₃４９０、３３７４、１６３８、１５１８、１３４１、１２５３；¹ Ｈ ＮＭＲ δ ７．９０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝２．０）、７．１９（１Ｈ、ｄｄ、 Ｊ＝８．５，２．０）、６．７７（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８，５）、６．０５（ＮＨ、 ブロード）、６．００〜５．８０（１Ｈ、ｍ）、５．１１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１ ．４，１．４）、５．０４（１Ｈ、ｄｄｄ、Ｊ＝６．６，３．０，１．５）、３ ．２８（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝６．６）；¹³Ｃ ＮＭＲ δ １４３．８１、１３７． １３、１２９．３４、１２５．５９、１１９．４９、１１６．９５、３９．１８ ；ＨＲＭＳ（ＥＩ）Ｃ₉Ｈ₁₀Ｎ₂Ｏ₂としての計算値１７８．０７４２、測定値１ ７８．０７４６。 （Ｃ） ４−（２’−ピリジル）−２−ニトロアニリン（６） ４−ブロモ−２−ニトロアニリン１７（５９７ｍｇ、２．７５ミリモル）およ び２−トリブチルスタニルピリジン（１．０１ｇ、２．７５ミリモル）から、５ に対して上述したものと同様にして、黄色の固体として５２％の収率で得た；ｍ ｐ １４６〜１４８℃；ＩＲ（ＣＨＣｌ₃）３５１６、３３９７、３０２０、１ ６３４、１５７４、１３４１，．１２５０；¹Ｈ ＮＭＲ δ ８．７４（１Ｈ 、ｄ、Ｊ＝２．２）、８．６３（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝４．９，１．５）、８．１３ （１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．８，２．１）、７．７８〜７．６６（２Ｈ、ｍ）、７． ２０（１Ｈ、ｄｄｄ、Ｊ＝４．８，４． ７，１．９）、６．９２（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．８）、６．３７（ＮＨ、ブロード ）；¹³Ｃ ＮＭＲ δ １５５．６、１５０．１、１４５．６、１３７．４．１ ３４．５、１２９．１、１２４．７、１２２．４、１１９．８、１１９．７；分 析．Ｃ₁₁Ｈ₉Ｎ₃Ｏ₂としての計算値；Ｃ、６１．３９；Ｈ、４．２１；Ｎ、１９ ．５３。測定値；Ｃ、６１．２９；Ｈ、４．２３；Ｎ、１９．４３。 （Ｄ） ４−（３’−ピリジル）−２−ニトロアニリン（７） ４−ブロモ−２−ニトロアニリン１７（１．４２ｇ、６．５３ミリモル）、お よび３−トリブチルスタニルピリジン（３．６０ｇ、９．７９ミリモル）から、５ に対して上述したものと同様にして、黄色固体として３２％の収率で得た；ｍ ｐ１７７〜１７９℃；ＩＲ（ＣＨＣｌ₃）３５１５、３３９９、３０５２、２９ ８３、１６３８、１５２４、１３４１、１２５９；¹Ｈ ＮＭＲ δ ８．６８ （１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１．７）８．４２（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝４．８、１．５）、８． ２２（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝２．２）７．７４（１Ｈ、ｄｄｄ、Ｊ＝７．９、２．４、 １．６）、７．５０（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．７、２．２）７．２３（１Ｈ、ｄｄ ｄ、Ｊ＝８．０、４．８、０．８）、６．９２（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．８）６．５ ６（ＮＨ、ブロード）；¹³Ｃ ＮＭＲ ６ １４８．７、１４７．８、１４５． ４、１３５．０、１３４．４、１３３．８、１２６．５、１２４．４、１２４． ０、１２０．４；分析．Ｃ₁₁Ｈ₉Ｎ₃Ｏ₂としての計算値；Ｃ、６１．３９；Ｈ、 ４．２１；Ｎ、１９．５３。測定値；Ｃ、６１．２８；Ｈ、４．１６；Ｎ、１９ ．４０。 （Ｅ） ４−（４’−ピリジル）−２−ニトロアニリン（８） ４−ブロモ−２−ニトロアニリン１７（１６５ｍｇ、０．７６ミリモル）およ び、４−トリブチルスタニルピリジン（２８０ｍｇ、０．７６ミリモル）から５ に対して上述したものと同様に、黄色の 固体として２５％の収率で得た；ｍｐ ２３０〜２３２℃；ＩＲ（ＣＨＣｌ₃） ３５１８、３３９８、３０３２、１６３６、１５２８、１３４４；¹Ｈ ＮＭＲ （ＣＤ₃ＯＤ）δ ８．５５（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝６．３）、８．５２（１Ｈ、ｄ、 Ｊ＝２．３）、７．８４（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．９、２．３）、７．７１（２Ｈ 、ｄ、Ｊ＝６．４）、７．１３（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．９）；¹³ＣＮＭＲ（ＣＤ₃ ＯＤ）δ １４９．４、１３３．４、１２４．０、１２０．７、１２０．０；Ｈ ＲＭＳ（ＥＩ）Ｃ₁₁Ｈ₉Ｎ₃Ｏ₂としての計算値２１５．０６９５、測定値２１５ ．０６９８。例２ ５−ホルミル−２−（ベンゾイミダゾール−５’−イル）ベンゾイミダゾ ール（９） ５−シアノ−２−（ベンゾイミダゾール−５’−イル）ベンゾイミダゾール１ ９ （１４８ｍｇ、０．５７ミリモル）、Ｎｉ−Ａｌ触媒（５００ｍｇ）、ギ酸（ ７ｍＬ）、および水（３ｍＬ）の混合物を、Ｎ₂の下で４時間加熱還流した。熱 い反応混合物を、直ちにセライト（celite）の栓を通して濾過し、蒸発させて、 黄色の固体を得た。次いで、黄色の固体を熱水（５ｍＬ）に溶解し、２Ｎ Ｎａ ＯＨによってｐＨ₉に中和した。沈殿した固体を吸引濾過によって集め、シリカ ゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（１５％ ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ）によ って更に精製して、１４２ｍｇ（９５％）の９を白い固体として得た。ｍｐ＞２ ７５℃；ＩＲ（ＫＢｒ）３１０６、２８３５、１６８５、１６１８、１４３２、 １２９３；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ）δ １０．０１（１Ｈ、s）、８．３９（ １Ｈ、ｓ）、８．３５（１Ｈ．ｓ）、８．１３（１Ｈ、ｓ）、８．０６（１Ｈ、 ｄｄ、Ｊ＝８．６、１．６）、７．８３（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．４、１．４）、 ７．７７（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．５）、７．７１（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．３）；ＨＲ ＭＳ（ＦＡＢ）Ｃ₁₅Ｈ₁₁ Ｎ₄Ｏとしての計算値２６３．０９３３、測定値２６３．０９３２。例３ ５−置換のトリスベンゾイミダゾール製造のための一般的な手順 （Ａ） ２−［２’−（ベンゾイミダゾール−５”−イル）ベンゾイミダゾー ル］ベンゾイミダール（１０） ５−ホルミル−２−（ベンゾイミダゾール−５’−イル）ベンゾイミダール９ （１２１ｍｇ、０．４６ミリモル）、およびフェニレンジアミン（６０ｍｇ、０ ．５５ミリモル）のニトロベンゼン（８ｍｌ）中の混合物を、Ｎ₂の下で１５０ ℃で一晩加熱した。混合物を室温に冷却し、シリカゲル上でクロマトグラフィー （０〜２０％ ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡＣ）にかけ、１０の１５５ｍｇ（９６％）を 固体として得た；ｍｐ＞２７５℃；ＩＲ（ＫＢｒ）３４００、３１５７、１６３ ０、１５４２、１４３８、１２９４；¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆＋３滴のＣＦ₃ ＣＯＯＨ）δ ９．７１（１Ｈ、ｓ）、８．７５（１Ｈ、ｓ）、８．６５（１ Ｈ、ｄ、Ｊ＝１．１）、８．４８（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．７、１．５）、８．２ １（１Ｈ、ｄｄ．Ｊ＝８．６、１．６）、８．１４（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．８）、 ８．０８（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．７）、７．９０（２Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝６．２、３． １）、７．６１（２Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝６．１、３．１）：¹³Ｃ ＮＭＲ （ＤＭＳ Ｏ−ｄ₆＋３滴のＣＦ₃ＣＯＯＨ）δ １５４．４、１４９．８． １３３．２、 １３２．０、１３１．７、１２６．２、１２５．５、１２５．４、１２３．９、 １２３．６、１１６．３、１１５．９、１１４．２３、１１４．１７、１１４． １３；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）Ｃ₂₁Ｈ₁₅Ｎ₆としての計算値３５１．１３５８、測定 値３５１．１３６７。 （Ｂ） ５−シアノ−２−［２’−（ベンゾイミダゾール−５” −イル）ベンゾイミダゾール−５’−イル］ベンゾイミダゾール（１１） ３（７０ｍｇ、０．４３ミリモル）の水素化を、１０％のＰｄ−Ｃ（３０ｍｇ ）をＥｔＯＡｃ（１０ｍｌ）中で用いて、４０ｐｓｉのＨ₂で室温、１時間で達 成した。反応混合物を濾過して、真空中で濃縮して固体を得た。この固体および９ （８７ｍｇ、０．３３ミリモル）のニトロベンゼン（５ｍｌ）中の溶液を、１ ５０℃でＮ₂の下で一晩加熱した。混合物を室温に冷却し、直接シリカゲル（０ 〜１０％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ）上でクロマトグラフィーにかけて、１１の１０ ７ｍｇ（８６％）を固体として得た；ｍｐ＞２８０℃；ＩＲ（ＫＢｒ）３４１６ 、３１４８、２２２２、１６２６、１５５３、１４４１、１２９２；¹Ｈ ＮＭ Ｒ（ＤＭＳＯ−ｄ₆＋３滴のＣＦ₃ＣＯＯＨ；δ ８．５０（１Ｈ、ｓ）、８．４ ６（１Ｈ、ｓ）、８．４０（１Ｈ、ｓ）、８．１８〜８．１１（３Ｈ、ｍ）、７ ．８１〜７．７５（３Ｈ、ｍ）、７．６２（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．３．１．５） ；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）Ｃ₂₂Ｈ₁₃Ｎ₇としての計算値３７６．１３１０、測定値３ ７６．１３０９。 （Ｃ） ５−プロピル２−［２’−（ベンゾイミダゾール−５”−イル）ベン ゾイミダゾール５’−イル］ベンゾイミダゾール（１２） ４−アリル２−ニトロアニリン４（３１２ｍｇ、１．７５ミリモル）、および ５−ホルミル−２−（ベンゾイミダゾール−５’−イル）ベンゾイミダール９（ １２１ｍｇ、０．４６ミリモル）から、11に対して上述したようにして、収率７ ９％で製造した。固体。ｍｐ＞２７０℃；ＩＲ（ＫＢｒ）３４２１，３０６８、 ２９５７、１４３４；¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆＋３滴のＣＦ₃ＣＯＯＨ）； δ ９．６６（１Ｈ、ｓ）、８．７３（１Ｈ、ｓ）、８．５ ９（１Ｈ、ｓ）、８．４８（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．７、１．５）、８．１３（１ Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．７、１．４）、８．１１（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．７）、８．０ ２（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．５）、７．７９（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．４）、７．６６（ １Ｈ、ｓ）、７．４５（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．５、１．３）、２．８０（２Ｈ、 ｔ、Ｊ＝７．０）、１．７０（２Ｈ、ｍ）、０．９６（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．２） ；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆＋３滴のＣＦ₃ＣＯＯＨ）δ１５３．８４、１４ ９．７４、１４１．６４、１４１．０１．１３９．３７、１３３．１０、１３２ ．２６、１３１．９９、１３０．３４、１２７．０８、１２６．２６、１２５． １４、１４１．６４、１４１．０１．１３９．３７、１３３．１０、１３２．２ ６、１３１．９９、１３０．３４、１２７．０８、１２６．２６、１２５．１４ 、１２２．９１、１１７．５２、１１６．３２、１１６．０６、１１５．７６、 １１３．７８、１１２．９９、３７．４５、２４．７３、１３．７４。 （Ｄ） ５−フェニル−２−［２’−（ベンゾイミダゾール−５”−イル）ベ ンゾイミダゾール−５’−イル］ベンゾイミダゾール（１３） ４−フェニル−２−ニトロアニリン５（２４７ｍｇ、１．１５ミリモル）、お よび５−ホルミル−２−（ベンゾイミダゾール−５’−イル）ベンゾイミダール９ （２０１ｍｇ、０．７７ミリモル）から、１１に対して上述したようにして収 率８９％で製造した。固体。ｍｐ ２６２〜１６４℃（分解）；ＩＲ（ＫＢｒ） ３４０２、３１０４、１６２７、１５５２、１４４２、１２９０；¹Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ₆＋３滴のＣＦ₃ＣＯＯＨ）δ ９．６６（１Ｈ、ｓ）、８．７４ （１Ｈ、ｓ）、８．６５（１Ｈ、ｓ）、８．５０（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．８、１ ．１）、８．２１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ ＝８．７、１．４）、８．１２（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．８）、８．０６（１Ｈ、ｓ ）、８．０５（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．４）、７．９７（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．７）、 ７．８９（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．７、１．５）、７．８０（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝７． ０）、７．６１〜７．４７（３Ｈ、ｍ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）、Ｃ₂Ｈ₁₉Ｎ₆とし ての計算値４２７．１６７Ｌ測定値４２７．１６６６。 （Ｅ） ５−（２−ピリジル）−２−［２’−（ベンゾイミダゾール−５”− イル）ベンゾイミダゾール−５’−イル］ベンゾイミダゾール（１４） ４−（２’−ピリジル）−２−ニトロアニリン６ （１１０ｍｇ、０．５０ミ リモル）、および５−ホルミル−２−（ベンゾイミダゾール−５’−イル）ベン ゾイミダール９（５１ｍｇ、０．２５ミリモル）から、１１に対して上述したよ うにして収率８４％で製造した。固体。ｍｐ＞２７５℃；ＩＲ（ＫＢｒ）３４１ １、３１５７、１６３０、１５９３、１４３２；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ）δ ８．５９（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝４．８）、８．３５（１Ｈ、ｓ）、８．３１〜８．２ ５（２Ｈ、ｍ）、８．１０（１Ｈ、ｓ）、８．０４〜７．９４（２Ｈ、ｍ）、７ ．８５〜７．７７（３Ｈ、ｍ）、７．７２（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．６）、７．６８ （１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．７）、７．６４（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．７）、７．３０（１ Ｈ、ｍ）ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）、Ｃ₂₆Ｈ₁₈Ｎ₇としての計算値４２８．１６２４、 測定値４２８．１６１１。 （Ｆ） ５−（３−ピリジル）−２−［２’−（ベンゾイミダゾール−５”− イル）ベンゾイミダゾール−５’−イル］ベンゾイミダゾール（１５） ４−^-（３’−ピリジル）−２−ニトロアニリン７（１８３ｍｇ、０．８５ミ リモル）、および５−ホルミル−２−（ベンゾイミダゾ ール−５’−イル）ベンゾイミダール９から、１１に対して上述したようにして 、４６％の収率で製造した。固体。ｍｐ＞２７５℃；ＩＲ（ＫＢｒ）３４００、 ３０７０、２８３６、１４３８、１２８９；₁Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ）δ ８． ８３（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１．６）、８．４９（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝４．９、１．５） 、８．３８（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１．１）、８．３１（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１．１）、８ ．２９（１Ｈ、ｓ）、８．１１（１Ｈ、ｄｄｄ、Ｊ＝８．０、２．３、１．６） 、８．０５（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．５、１．６）、８．００（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝ ８．５、１．６）、７．８１（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１．１）、７．７７〜７．６８（ ３Ｈ、ｍ）、７．５５〜７．４７（２Ｈ、ｍ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）Ｃ₂₆Ｈ₁₈Ｎ₇ としての計算値４２８．１６２４、測定値４２８．１６１２。 （Ｇ） ５−（４−ピリジル）−２［２’−（ベンゾイミダゾール−５”−イ ル）ベンゾイミダゾール−５’−イル］ベンゾイミダゾール（１６） ４−（４’−ピリジル）−２−ニトロアニリン８（３５ｍｇ、０．１６のミリ モル）、および５−ホルミル−２−（ベンゾイミダゾール−５’−イル）ベンゾ イミダール９（５０ｍｇ、０．１９ミリモル）から、１１に対して上述したもの と同様にして収率４３％で製造した。固体。ｍｐ＞２８０℃；ＩＲ（ＫＢｒ）３ ４１１、３１１８、１６００、１５５２、１４３９、１２９０；¹Ｈ ＮＭＲ（ ＣＤ₃ＯＤ）δ ８．５１（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝６．２）、８．３３（１Ｈ、ｄ．Ｊ ＝１．１）、８．２７（１Ｈ、ｓ）、８．２５（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１．１）、８． ０１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．６、１．７）、７．９６（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．９ 、２．０）、７．８７（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１．０）、７．７４〜７．５６（６Ｈ、 ｍ）；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）Ｃ₂₆Ｈ₁₈Ｎ₇としての計算値４２８．１６２ ４、測定値４２８．１６２５。例４ ４−ブロモ−２−ニトロアニリン（１７） ２−ニトロアニリン（５ｇ、３６．２ミリモル）のＣＨ₂Ｃｌ₂（１００ｍｌ） 中の溶液を−１０℃に冷却し、９０％の２，４，４，６−テトラブロモ−２，５ −シクロヘキサジエノン（１９．８ｇ、４３．５ミリモル）によって５回に分け て処理した。混合物を−１０℃−０℃で１時間攪拌した。室温に暖めた後に、反 応混合物を２Ｎ ＮａＯＨ（６０ｍｌ）および食塩水（brine、５０ｍｌ）によ って洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥して、蒸発させた。シリカゲル（５％ＥｔＯＡ ｃ／ヘキサン）上のフラッシュクロマトグラフィーにより、７．４０ｇ（９４％ ）の１７を黄色の固体として得た。ｍｐ １０９〜１１０（文献値ｍｐｌ１２〜 １１３℃）；¹ＨＮＭＲ δ ８．２７（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝２．３）、７．４３（ １Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．９、２．４）、６．７３（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．８）、６． ０９（ＮＨ、ブロード）。例５ ５−ホルミルベンゾイミダゾール（１８） ５−ベンゾイミダゾールカルボン酸(１．５７ｇ、９．７ミリモル）の乾燥Ｔ ＨＦ（５０ｍｌ）中の懸濁液をＮ₂の下で−７８℃に冷却し、ＬｉＡＬＨ₄（７３ ６ｍｇ、１９４ミリモル）で処理した。添加の後、混合物をゆっくりと室温まで 暖め、室温（r.t.）で一晩攪拌した。混合物をＭｅＯＨとＨ₂Ｏによって注意深 くクエンチして、１０％のＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃで溶離する短いシリカゲルカラ ムを通過させた。溶離液を濃縮し８７６ｍｇの粗製アルコールを固体として得た 。粗製アルコール（８７６ｍｇ）を、ＤＭＦ（３ｍｌ）、ＴＨＦ（１０ｍｌ）、 およびＣＨ₂Ｃｌ₂（４０ｍｌ）の混合物中に溶解した。４−メチルモルホリン Ｎ−オキシド（２．２５ｇ、１９．２ミリモル）、４Å（オングストローム）の モレキュ ラーシーブ、およびＴＰＡＰ（１６９ｍｇ、０．４８ミリモル）を続けて粗製の アルコール溶液に加えた。混合物を室温で一晩攪拌し、１０％のＭｅＯＨ／Ｅｔ ＯＡｃで溶離するシリカゲルのパッドにより濾過した。溶離液を濃縮して、０〜 １０％のＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃで溶離するシリカゲル上のフラッシュクロマトグ ラフィーで更に精製して、４５２ｍｇ（３２％、２工程）の１７を白い固体とし て得た。ｍｐ１６４〜１６６℃；ＩＲ（ＫＢｒ）３０８７、２８１８、１６９０ 、１２９２；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ）δ ９．９５（１Ｈ、ｓ）、８．３４（ １Ｈ、ｓ）、８．０８（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１．５）、７．７４（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝ ８．４、１．５）、７．６３（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．４）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ₃ ＯＤ）δ １９４．２、１４６．０、１４３．０、１３９．８、１３３．６、１ ２４．９、１２０．７、１１６．６；分析Ｃ₈Ｈ₆Ｎ₂Ｏとしての計算値；Ｃ、６ ５．７５；Ｈ、４．１４；Ｎ、１９．１７；測定値；Ｃ、６５．６０；Ｈ、４． １７；Ｎ、１９．０８。例６ ５−シアノ−２−（ベンゾイミダゾール−５’−イル）ベンゾイミダゾー ル（１９） ５−ホルミルベンゾイミダゾール１８（２１１ｍｇ、ｌ．４４ミリモル）、お よび４−シアノ−１，２−フェニレンジアミン（２３０ｍｇ、１．７３ミリモル ）のニトロベンゼン（１０ｍｌ）中の混合物を、Ｎ₂の下で１５０℃で一晩加熱 した。混合物を室温に冷却し、０〜１５％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃで溶離するシリ カゲル上のクロマトグラフィーに直接かけ、２４４ｍｇ（６５％）の１８を固体 として得た。ｍｐ＞２７０℃；ＩＲ（ＫＢｒ）３１１０、２８２６、２２２４、 １６２７、１４２６、１２９４；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ）δ ８．４１（１Ｈ 、ｓ）、８．３３（１Ｈ、ｓ）、８．０７（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．６、１．５） 、７．９８（１Ｈ、ｓ ）、７．７８（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．４）、７．７３（１Ｈ、ｄ、Ｊ=8．4)、７． ５６（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．４、１．5)；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆＋３滴 のＣＦ₃ＣＯＯＨ）δ １５３．４、１４０．４、１３８．３、１３２．９、１ ３１．６、１２７．０、１２５．８、１２５．３、１２０．８、１１９．８、１ １６．０、１１５．８、１１３．９、10５．５；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）Ｃ₁₅Ｈ₁₀Ｎ₅ としての計算値２６０．０９３６、測定値２６０．０９３５。例７ （Ａ） ５−ブロモ−２−［２’−（ベンゾイミダゾール−５”−イル）ベン ゾイミダゾール−５’−イル］ベンゾイミダール（ＪＳＫ ＩＶ−３７） ニトロベンゼン（５ｍＬ）中の５−ホルミル−２−（ベンゾイミダゾール−５ ’−イル）ベンゾイミダゾール（１１８．８ｍｇ、０．４５ミリモル）および５ −ブロモフェニレンジアミン（１６９．６ｍｇ、０．９０ミリモル）の混合物を 、１５０℃でＮ₂の下で一晩加熱した。混合物を室温に冷却し、０〜１０％メタ ノール／酢酸エチルを用いてクロマトグラフィーにかけ、１２７．３ｍｇ（６６ ％）の茶色がかった黄色の固体を得た。ｍｐ＞２８０℃；ＩＲ（ＫＢｒ）３１０ １、１６２６、１５４７、１４４０；¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ ７．３ ４（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．０、２．０）、７．５７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝９．０）、 ７．７１〜７．８０（ｍ、３Ｈ）、８．０４〜８．１８（ｍ、２Ｈ）、８．３９ （ｓ、２Ｈ）、８．５０（ｓ、１Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆＋３滴の ＣＦ₃ＣＯＯＨ）δ １１４．１ １１５．８、１１６．２、１１６．４、１１ ７．０、１１８．６、１２３．５、１２５．３、１２６．２、１２８．７、１２ ８．９、１３１．８、１３２．０ 、１３２．３、１３３．１、１３４．４、１３８．３、１４０．６、１５１．１ 、１５３．４。 （Ｂ） ５−クロロ−２−［２’−（ベンゾイミダゾール−５”−イル）ベン ゾイミダゾール−５’−イル］ベンゾイミダゾール（ＪＳＫ ＩＶ−６８） ニトロベンゼン（５ｍＬ）中の５−ホルミル−２−（ベンゾイミダゾール−５ ’−イル）ベンゾイミダール（１６０ｍｇ、０．６ミリモル）および５−クロロ フェニレンジアミン（１７４ｍｇ、１．２２ミリモル）の混合物を、１５０℃で Ｎ₂の下で一晩加熱した。混合物を室温に冷却し、０〜１０％メタノール／酢酸 エチルを用いるクロマトグラフィーにかけて、１６７ｍｇ（７１％）の茶色がか った黄色の固体を得た。ｍｐ＞２８０℃；ＩＲ（ＫＢｒ）３１０３、２８２６、 １４２７、１２９３；¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ ７．２４（ｄｄ、１Ｈ 、Ｊ＝８．５、２．０）、７．６０〜７．８１（ｍ、４Ｈ）、８．０７〜８．１ ７（ｍ、２Ｈ）、８．４０（ｓ、２Ｈ）、８．５０（ｓ、１Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ₆＋３滴のＣＦ₃ＣＯＯＨ）δ １１４．３、１１４．４、１１５ ．３、１１５．５、１１５．６、１１６．２、１１８．５、１２３．１、１２５ ．４、１２５．５、１２５．６、１２９．４、１３２．４、１３２．９、１３３ ．０、１３５．２、１３８．９、１４０．９、１５１．８、１５３．５。 （Ｃ） ５−（ｐ−クロロフェニル）−２−［２’−（ベンゾイミダゾール− ５”−イル）ベンゾイミダゾール−５’−イル］−ベンゾイミダール（ＪＳＫ ＩＶ−４７） ニトロベンゼン（５ｍＬ）中で、５−ホルミル−２−（ベンゾイミダゾール− ５’−イル）ベンゾイミダゾール（９９ｍｇ、０．３８ミリモル）および５−（ ｐ−クロロフェニル）フェニレンジアミ ン（１５４ｍｇ、０．７１ミリモル）の混合物を、Ｎ₂の下で１５０℃で一晩加 熱した。混合物を室温に冷却し、０〜１０％メタノール／酢酸エチルを用いるク ロマトグラフィーにかけて８５ｍｇ（４９％）の茶色がかった黄色の固体を得た 。ｍｐ＞２８０℃；ＩＲ（ＫＢｒ）３０４６、２８２０、１４２６、１２８２；¹ Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆＋３滴のＣＦ₃ＣＯＯＨ）δ ７．５６（ｄ、２Ｈ 、Ｊ＝８．５）、７．８２（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝８．５）、７．８８−８．２１（ｍ 、６Ｈ）、８．４８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．８）、８．６３（ｓ、１Ｈ）、８．７ ２（ｓ、１Ｈ）、９．６９（ｓ、１Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆＋３滴 のＣＦ₃ＣＯＯＨ）δ １１１．８、１１３．８、１１４．７、１１５．８．１ １６．１、１１７．７、１２３．０、１２４．１、１２５．２、１２５．３、１ ２９．２、１２９．３、１３１．９、１３２．１、１３３．０、１３３．１、１ ３７．２、１３８、５、１３９．３、１４１．６、１５０．８．１５３．８。 （Ｄ） ４−ブロモフェニレンジアミン（ＪＳＫ ＩＶ−３５） 無水エタノール（２０ｍＬ）中の２−ニトロ−４−ブロモアニリン（３４０ｍ ｇ、１．５７ミリモル）へ、ＳｎＣｌ₂（１．５０ｇ、７．９１ミリモル）を加 え、一晩還流した。次いで、反応混合物を２Ｎ ＮａＯＨでｐＨ １１まで塩基 性にし、エーテルで抽出して、２７５ｍｇ（９４％）の生成物を得た。この生成 物を、更に精製することなくＪＳＫ ＩＶ−３７の合成に用いた。 （Ｅ） ４−クロロフェニレンジアミン（ＪＳＫ ＩＶ−６７） 無水のエタノール（２０ｍＬ）中で、２−ニトロ−５−クロロアニリン（３０ ４ｍｇ、１．７６ミリモル）にＳｎＣｌ₂（１．６８ｇ、８．８６ミリモル）を 加え、一晩還流した。次いで、反応混合物を２Ｎ ＮａＯＨでｐＨ １１まで塩 基性にし、エーテルで抽出 して、２５０ｍｇ（定量的な収率）の生成物を得た。この生成物を、更に精製す ることなくＪＳＫ ＩＶ−６８の合成に用いた。 （Ｆ） p −クロロトリブチルフェニル錫（ＪＳＫ ＩＶ−４２） ４−ブロモクロロベンゼン（３．２ｇ、１６．６２ミリモル）を乾燥ＴＨＦ（ ２０ｍＬ）中に溶解した。反応温度をアセトン／ドライアイス浴で−７８℃まで 低下させたた後、ｎ−ＢｕＬｉ（１５．５８ｍＬ、１．６Ｍ、１．５当量）をゆ っくり加え、−７８℃で３０分間攪拌した。トリブチル錫クロリド（６．７７ｍ Ｌ、１．５当量）を加え、その反応を室温に戻しつつ、一晩攪拌した。反応フラ スコを空気中で開放にして１時間攪拌することにより、反応混合物をクエンチし 、その後、ＴＨＦを回転式蒸発により除去した（rotavaporated off）。混合物 を、１００％のヘキサンで溶離する速いシリカゲルカラムを通した後、生成物を 油状物（７．３５ｇ、９７％）として得た。 （Ｇ） ２−ニトロ−５−（ｐ−クロロフェニル）アニリン（ＪＳＫ ＩＶ− ４４） ＤＭＦ（１８ｍＬ）中のＪＳＫ ＩＶ−４２（２．０２ｇ、５．０４ミリモル ）および２−ニトロ−４−ブロモアニリン（７３０ｍｇ、３．３６ミリモル）に 、Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₂Ｃｌ₂（１１７．９ｍｇ、０．１７ミリモル）およびＰＰｈ₃ （４４０．２ｍｇ、１．７０ミリモル）を加え、１２０℃で一晩加熱した。ＤＭ Ｆを回転式蒸発により除去し、その混合物を５〜１０％の酢酸エチル／ヘキサン で溶離するシリカゲルカラムにより分離して、２７０ｍｇ（３２％）の赤っぽい 固体を得た。 （Ｈ） ４−（ｐ−クロロフェニル）フェニレンジアミン（ＪＳＫ ＩＶ−４ ６） ＪＳＫ ＩＶ−４４（１９０ｍｇ、０．７７ミリモル）を酢酸エ チル（１００ｍＬ）中に溶解し、１０％のＰｄ−Ｃ（４０ｍｇ）を加えた後、水 素化（４５ｐｓｉ）によって還元した。生成物（定量的な収率）を、更に精製す ることなくＪＳＫ ＩＶ−４７において用いた。例８ バイオアッセイ Ａ．トポイソメラーゼ−Ｉにより媒介されるＤＮＡ切断アッセイ 以前にB．D．Halliganらにより、J．Biol．Chem.，２６０、２４７５（１９８ ５）で報告されたように、ＤＮＡトポイソメラーゼＩを仔ウシ胸腺から精製した 。 プラスミドＹＥｐＧも、アルカリ溶解（alkali lysis）法により精製し、その 後、T.Mariatisら、Molecular Clonings，A Laboratory Manual、Cold Spring H arbor Labs,ＮＹ（１９８２）１４９〜１８５頁に記載されたように、フェノー ル除蛋白、およびＣｓＣｌ／エチジウム等密度遠心分離した。プラスミドの末端 ラベル化は、以前にL.F.Liuら、J．Biol.Chem.,２５８、１５３６５（１９８３ ）に記載されたようにして達成した。切断アッセイは、以前に、A.Y.Chenら、Ca ncer Res.,５３、１３３２（１９９３）に報告されたようにして行った。ヒトの トポイソメラーゼＩは、Ｔ７発現系を用いる組換え型の結合蛋白（fusion prote in）として単離した。 Ｂ．細胞毒性アッセイ 細胞毒性は、F．Denizotら、J．Immunol．Methods,８９、２７１（１９８６） ；J.Carmichaelら、Cancer Res.,４７、９３６（１９８７）；およびT.J.Mosman nら、J．Immunol．Methods,６５、５５（１９８３）の手順にしたがって、ＭＴ Ｔ−マイクロタイタープレート テトラゾリニウム細胞毒性アッセイ（ＭＴＡ） により測定した。ヒトのリンパ芽球 ＲＰＭＩ ８４０２およびそのカンプトセ シン耐性の変異セルラインＣＰＴ−Ｋ５は、Toshiwo Andoh博 士（愛知ガンセンター Research Institute、名古屋、日本）から得た。例えば 、T.Andohら、Adv．Pharmacol.,２９Ｂ、９３（１９９４）を参照。細胞毒性ア ッセイは、９６−ウェルのマイクロタイタープレートを用いて行った。細胞は、 ５％ＣＯ₂中、３７℃でサスペンションで成長させ、１０％の熱不活性化したウ シ胎児血清、Ｌ−グルタミン（２ｍＭ）、ペニシリン（１００Ｕ／ｍｌ）、およ びストレプトマイシン（０．１ｍｇ／ｍｌ）を補充したＲＰＭＩ培地において規 則的な（regular）継代により維持した。ＩＣ₅₀の測定のために、濃度を変えた 薬剤濃度に細胞を連続的に晒し、４日目の終わりにＭＴＴアッセイを行った。薬 剤感受性のヒトの類表皮癌腫 ＫＢ３−１セルライン（S.Aliyamaら、Somatic C ell Mol．Genet.，１１、１１７（１９８５）および、そのビンブラスチン（vin blastine）選択された多薬剤耐性の変異ＫＢＶ−１細胞（D.W.Shenら、Science 、３２、６４３（１９８６））は、Michael Gottesmann博士（National Cancer Institute、ベセスダ、ＭＬ）から得た。これらの細胞は、５％のＣＯ₂中で単層 培養として成長させ、１０％の熱不活性化したウシ胎児血清を補ったダルベッコ 最小必須培地中での規則的な継代により維持した。ＫＢＶ−１細胞は、１μｇ／ ｍｌのビンブラスチンの存在下で成長させた以外は、同様に維持した。 Ｃ．結果 表１に示すように、化合物１０〜１６およびハロ−アナログのＪＳＫＩＶ−３ ７、４７および６８の、トポイソメラーゼＩのインヒビターとしてのヘキスト３ ３３４２（１）との比較により、これらのトリスベンゾイミダゾールのいくつか は、同様の、または、より大き効力を有することが証明された。 表 １ トポイソメラーゼＩによって媒介されたビス−およびトリスベンゾイミダゾー ルのＤＮＡ切断および細胞毒性 ａ）ＩＣ₅₀は、４日間の連続の薬剤暴露の後に計算した。Ｎ．Ｄ．＝測定され ない。 ｂ）トポイソメラーゼＩ切断価は、ＲＥＣ（相対有効濃度）、すなわち、その 価を任意的に１（仔ウシ胸腺トポイソメラーゼＩの存在下でプラスミドＤＮＡ上 で同じ切断をもたらすことが可能なもの）と仮定したヘキスト３３３４２に対す る、相対濃度として報告する。切断は、最も強いヘキスト特異性バンドの強さか ら計算する。 ｃ）細胞毒性の表示は、アッセイされた最も高い投与量より実質的に大きいＩ Ｃ₅₀価を表すとは考えられなかった。１０および１１は、ヘキスト３３３４２で観察されたように、トポイソメラー ゼＩの阻害において類似した効力を示したが、これらの化合物の両方は、ヒトの リンパ芽球セルラインＲＰＭ８４０２にに対して重要な細胞毒性を示さなかった 。しかしながら、これは純粋な化合物がターゲット細胞を透過することができな いことによる可能性があり、これは、リポソーム等の適当なキャリアの選択によ って克服することができる。５−フェニル置換のトリスベンゾイミダゾール、１ ３ は、トポイソメラーゼＩインヒビターとしてヘキスト３３３４２の約１／２く らい効力があった。１０および１１に対比して、しかしながら、それはヒトのリ ンパ芽球セルライン（ＲＰＭ８４０２細胞）に対して、重要な細胞毒性を有した 。ヘキスト３３３４２で観察されたように、１３はカンプトセシン耐性のＣＰＴ −Ｋ５細胞に対しても有効だった。耐性に対する薬剤感受性のセルラインのＩＣ₅₀ 値として表したヘキスト３３３４２および１３の相対的な耐性は、A.Y.Chenら 、Cancer Res.,５３、１３３２（１９９３）によって報告されたカンプトセシン の相対的耐性の２５００倍と比較して、約３０倍である。同様の効果は、他の１ 対のセルラインにおいても観察された；１３は、カンプトセシン耐性として選択 され、変異したカンプトセシン耐性のトポイソメラーゼを含むことが知られてい るＡ２７８０の変異株ＣＰＴ−２０００において０．０３μｇの／ｍｌのＩＣ₅₀ に対して、ヒトの卵巣腫瘍セルラインＡ２７８０において００１５μｇ／ｍｌの ＩＣ₅₀を有する。５−ｎ−プロピル トリスベンゾイミダゾール誘導体、１２は 、１０、１１または１３に比べてトポイソメラーゼ Ｉインヒビターとして遙か に弱い活性しか有しなかった。そのトポイソメラーゼインヒビターとしての弱い 活性は、その弱い細胞毒性と相関していた。これらの化合物のいくつかの活性は 、組換え型ヒトトポイソメラーゼＩを用 いても評価した。これらのアナログのいくつかは、仔ウシ胸腺から分離したトポ イソメラーゼＩで観察されたそれと比較して、ヒトのトポイソメラーゼＩの存在 下で同様のＤＮＡ切断を誘発した。 ヘキスト３３３４２および１３の細胞毒性の活性は、ＫＢ ３−１およびＫＢ Ｖ−Ｉ細胞に対しても評価した。これらのセルライン両者間の主要な違いは、 ヒトＭＤＲＩ（Ｐ−グリコプロテイン）が発現される程度である。最近の研究で は、生理的なｐＨでカチオン性である抗新生物性の薬剤は、ＭＤＲ１の基質の役 目をより多く果たす可能性があり、したがって、Ｐ−グリコプロテインを過剰に 発現した細胞に対して、より有効性が低い可能性がある。ヘキスト３３３４２が 生理的なｐＨで広くプロトン化したという事実を考慮して、A．Y．Chenら、Adv. Pharmacol.，２４５、２９Ｂ（１９９４）によって報告されたような、ＫＢ Ｖ −Ｉ細胞と比較したＫＢ３−Ｉに対してＩＣ₅₀が約２桁の大きさで違うことは、 驚くべきことではない。ヘキスト３３３４２に対比して、これら２つのセルライ ンにおいて観察された１３のＩＣ₅₀価の違いは殆どない。このように、１３はヒ トのＭＤＲ１に対する基質でないように見える。このデータは、これらのトリス ベンゾイミダゾール誘導体が、ヘキスト３３３４２、またはpibenzimol、（ヘキ スト３３２５８）、２’−（４−ヒドロキシフェニル）−５−（４−メチル−１ −ピペラジニル）−２，５’−ビ−１Ｈ−ベンゾイミダゾールと比較して、重要 な化学療法剤としての利点を有する可能性があることを示している。 これらのデータは、これらのトリスベンゾイミダゾールの５−Ａｒ置換基の置 換が、トポイソメラーゼＩインヒビターとして活性で、および腫瘍細胞への細胞 毒性を示す誘導体を与える可能性があることを示す。２−、３−または４−いず れかのピリジル基で５位を 置換したトリスベンゾイミダゾール、１４〜１６は、表１に要約されたように、 トポイソメラーゼＩインヒビターおよび細胞毒性としてそれらの効力が評価され た。１３に類似のこれらのアナログは、トポイソメラーゼＩインヒビターとして の活性を有する。３−および４−ピリジルのアナログ（１５および１６）は、２ −ピリジル誘導体１４に比べて、トポイソメラーゼＩインヒビターおよび細胞毒 性な薬剤としての、いくぶんより活性でもある。１３で観察されたように、これ らのピリジル置換のトリベンゾイミダゾールは、ＭＤＲ１を過剰に発現するＫＢ Ｖ−Ｉ細胞に対してと同様に、ＫＢ ３−Ｉ細胞に対しての細胞毒性を有する 。ヘキスト３３３４２と比較したこれらのヘテロアリール置換のトリスベンゾイ ミダゾールの主要な利点は、ＭＤＲ１を発現するセルラインに対する、それらの 効能である。例９ アスペルギルスnidulansからのトポイソメラーゼＩの部分精製 ２リットルのＹＧ培地（０．５％酵母エキスおよび２％グルコース）に、約５ ×１０¹⁸分生胞子／ｍｌを接種した。３７℃で１６時間成長させた後、菌体を集 め、緩衝液−Ｉ（５０ｍＭ トリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．７、１ｍＭ ＥＤＴＡ、 １ｍＭ ＥＧＴＡ、１０％ グリセリン、１ｍＭ フェニルメチルスルホニル フロリドおよび１ｍＭ ２−メルカプトエタノール）で洗浄し、液体窒素で急速 に冷却した。凍った菌体（約２０グラム）を、粉末へ摩砕し、緩衝液−Ｉの３０ ０ｍｌ中に再懸濁した。細胞破片（debris）を除去するために、溶菌液を１０Ｋ ｒｐｍでSorvall ＨＢ３ローター中で１５分間遠心した。上澄を、ポリエチレン グリコールおよび１Ｍ ＮａＣｌ中で６％（ｖ／ｖ）にした。氷上で穏やかに１ 時間攪拌した後、核酸を除去するために、溶液を１４ＫｒｐｍでSorvall ＨＢ ３ローター中で３０分間遠心した。 精製における以降の工程は、以前に組換え型のヒトのＤＮＡトポイソメラーゼ Ｉの精製に対して記述されたもの（B.Gattoら、Cancer Res.,５６、２７９５（ １９９６）と同様であった。手短に言えば、ヒドロキシアパタイト Bio−ゲル ＨＴＰ（Bio-Radラボラトリーズ、リッチモンド、ＣＡ）カラム上で、上清を直 接にクロマトグラフィーにかけた。緩和活性を含む画分をプールし、希釈し、次 いでBioRex７０カラム（Bio-Radラボラトリーズ、リッチモンド、ＣＡ）上へロ ードした。カラムを、０．２〜１Ｍ ＫＣｌの直線勾配で展開した。ピーク画分 をプールし、３０ｍＭのリン酸カリウム、５０％（ｖ／ｖ）グリセリン、０．５ ｍＭのＥＤＴＡ、および１ｍＭのＤＴＴに対して、４℃で一晩透析した。組換え 型ヒトのトポイソメラーゼＩは、以前にGattoら、Cancer Res.,５６、２７９５ （１９９６）に記述されたように、エシェリキア・コリＢＬ２Ｉ（ＤＥ３）harb oring ＰＥＴ１Ｂから精製した。例１０ ＤＮＡからトポイソメラーゼＩへの³²Ｐ放射性の共有結合性の転移 このリン酸塩の転移方法は、以前にT.C.Roweら、J．Biol．Chem.，２５９、９ １７７（１９８４）によって記述された手順の変形であった。要約すれば、１０ ｍＭ トリス−ＨＣｌ、ｐＨ ７．５、１ｍＭ ＭｇＣｌ₂、０．５ｍＭ ジチ オスレイトール、３０μｇ／ｍｌウシ血清アルブミン、示された濃度の薬物（カ ンプトセシンまたはヘキスト３３３４２）、ランダムプライマー法（ランダムプ ライムされたラベル化キット、ベーリンガー マンハイム）により³²ＰｄＡＴＰ でラベルされた５０ｎｇのＹＥｐＧ ＤＮＡ、および３００ユニットのヒトまた はアスペルギルスのトポイソメラーゼＩを含む１００μｌの反応混合物を、３７ ℃で１０分間インキュベー トした。ＮａＯＨを０．１８Ｍまで、ＥＤＴＡを２．５ｍＭまで加えることによ って、反応を終了させた。トリス−ＨＣｌの予め検定された量を加えて反応を中 和した後、９μｌの０．１ＭのＣａＣｌ₂、および７．５μｌの２０％ＳＤＳを 加え、Ｈ₂Ｏで体積を３００μｌに調整した。 Ｂａｌ３１ヌクレアーゼ（ニューイングランド、BioLabs）の５単位を加え、 試料を２５℃で１時間消化させた。フェノールの１体積での抽出によって、反応 を終了させた。フェノール相をセーブし、等体積の１０ｍＭのトリス−ＨＣｌ、 ｐＨ８．０、１ｍＭ ＥＤＴＡで１回逆抽出した。次いで、１０体積の氷冷した アセトンを加え、１０分間氷の上に配置することによって、タンパク質−オリゴ ヌクレオチド複合体をフェノール相から沈殿させた。ペレットをＳＤＳ試料緩衝 液中に溶解させて、ＳＤＳ−ＰＡＧＥにより分析した。ゲル乾燥およびオートラ ジオグラフィーを、Hsiangら、J．Biol．Chem.，２６０、１４８７３（１９８５ ）に記述されたように行った。例１１ トポイソメラーゼＩ緩和アッセイ 緩和アッセイを、L．F．Liuら、PNAS USA、７８、３４８７（１９８１）によ って記述されたように行った。要約すれば、各反応混合物（２０μｌ）は、リラ ックスした超コイルのＹＥｐＧ ＤＮＡ（各々１５０ｎｇ）、および種々の程度 に希釈したアスペルギルスまたはヒトのトポイソメラーゼの混合物を含んでいた 。２３または３７℃で１５分でのインキュベーションに続き、予め暖めた停止液 （５％のサルコシル（sarkosyl）、２５％のシュークロース、５０ｍＭのＥＤＴ Ａ、および、０．０５ｍｇ／ｍｌのブロムフェノールブルー）の５μｌを添加し て、反応を停止させた。次いで、ＤＮＡ試料を、ＴＰＥ（９０ｍＭ トリスーリ ン酸塩、２ｍＭのＥＤ ＴＡ、ｐＨ８．０）電気泳動溶液中で１％アガロースゲルを用いることによって 分析した。例１２ トポイソメラーゼＩ切断アッセイ Y.-H.Hsiangら、J．Biol．Chem.，２６０、１４８７３（１９８５）によって 記述されたように、ＤＮＡトポイソメラーゼＩ切断アッセイを行った。ＹＥｐＧ ＤＮＡを、ＢａｍＨＩで直鎖化し（linearlized）、次いで、Klenowポリメラ ーゼおよびα［−³²Ｐ]ｄＣＴＰで３’−末端をラベルした。フェノール抽出お よびエタノール沈降に続いて、ラベルされたＤＮＡを、１０ｍＭトリス、ｐＨ８ ．０、および、１ｍＭ ＥＤＴＡ中に再懸濁した。ＤＮＡ切断アッセイは、４０ ｍＭ トリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．８、１００ｍＭ ＫＣｌ、１０ｍＭ ＭｇＣｌ₂ 、０．５ｍＭジチオスレイトール、３０μｇ／ｍｌウシ血清アルブミン、２０ ｎｇのラベル化ＹＥｐＧ ＤＮＡ、および種々の程度に希釈されたアスペルギル スおよびヒトのトポイソメラーゼＩを含む反応混合物（２０μｌ）中で行った。 ２３℃で１５分間インキュベーションした後、ＳＤＳ（終濃度１％）およびプロ テイナーゼＫ（終濃度２００μｇ／ｍｌ）の添加によって、反応を終了させた。 プロテイナーゼＫ処理を、３７℃で更に１時間続けた。終了した反応を、アルカ リ変性し、次いでロード（アルカリ性ローディング）するか、または中性ローデ ィング緩衝液に直接にロード（中性ローディング）することにより、中性のＴＰ Ｅ電気泳動溶液中で１％のアガロースゲル上へロードした。上記に引用したHsia ngらによって記述されように、ゲル乾燥およびオートラジオグラフィーを行った 。例１３ 酵母の細胞毒性アッセイ トポイソメラーゼＩに特異的なインビボ細胞毒性アッセイは、A.M.Knabら、J ．Biol．Chem.,２６８、２２３２２（１９９３）を修 正して行った。この系において、種々のトポイソメラーゼＩ遺伝子またはシング ルコピー酵母プラスミドベクター（ＹＣｐＧＡＬ１、上記に引用したＫｎａｂら ）中にクローンしたｃＤＮＡは、Ｓ．cerevisiaeのＪＮ₂−１３４株中のＧＡＬ １プロモーターのコントロール下で発現する（ＭＡＴ、rad52::Leu2，trp1，ade 2-1，his7，ura3-52，ise1，top 1-1，and leu2;M.A.Bjornstiら、Cancer Res., 49、６３１８（１９８９）。ベクター中のトポイソメラーゼＩ遺伝子またはｃＤ ＮＡ構造物（constructs）は、それぞれ野性型の酵母トポイソメラーゼＩ遺伝子 （ＹＣｐＧＡＬ−ＳｃＴＯＰ１；Kim & Wang、need cite、（１９８９）、活性 サイトのチロシン−７２７がフェニルアラニンに変異している非機能性のトポイ ソメラーゼＩ遺伝子（ＹＣｐＧＡＬ１−ＳｃｔｏｐｌＹ７２７；A.M.Knabら、J ．Biol．Chem.,２６８、２２３２２（１９９３）、および野生型のヒトトポイソ メラーゼＩのｃＤＮＡ（ＹＣｐ−ＧＡＬ−ｈＴＯＰ１；M.A.Bjornstiら、Cancer Res.,４９、６３１８（１９８９））である。 薬剤の細胞毒性およびポソメラーゼＩ特異性を定性的にテストするために、指 定したプラスミドを含む酵母細胞を、ウラシル、２％ガラクトースおよびテスト すべき薬剤を補ったドロップアウト培地中で成長させた。トポソメラーゼＩ機能 が遮断されている場合に酵母は生き残る可能性があり、トポ−Ｉ毒は、機能的ト ポソメラーゼＩを有する細胞のみを殺すことは確立されている。このように種々 の薬剤の存在下で各々のテスト株の相対的成長の程度と、コントロールプレート （薬剤なし）との比較により、（ａ）その薬剤は酵母に対していくらかの細胞毒 性を有するかどうか；（ｂ）その細胞毒性はトポソメラーゼＩに特異的かどうか ；および、（ｃ）ヒトトポソメラーゼＩと比較して、酵母に対する薬剤の特異性 の差はあるか どうか、が示される。例１４ アスペルギルスnidulansからのトポソメラーゼＩのキャラクタリゼーシ ョン プラスミド緩和活性は、精製中のアスペルギルストポソメラーゼＩをモニター するために用いた。アスペルギルス細胞抽出物中の緩和活性は、E.coliからの組 換え型ヒトＤＮＡトポソイソメラーゼＩの精製に対して設計された手順により精 製した（B.Gattoら、（Cancer Res.,５６、２７９５（１９９６））。いくつか の証拠により、部分的に精製したアスペルギルス酵素は、酵母を含む他の真核生 物中で確認され特徴づけられたメジャーな核トポソメラーゼであることが示唆さ れる。第１に、精製された酵素は、非常に活性であり、アスペルギルス細胞抽出 物中でメジャーなＤＮＡ緩和活性を発現する。２リットルの培養から、３０，０ ００のユニットのトポソメラーゼＩ緩和活性が得られた。ヒトのトポソメラーゼ Ｉと同様に、アスペルギルス酵素は、プラスミドＤＮＡを完全にリラックスさせ て、Ｍｇ（II）もエネルギー補因子のどちらも必要としない。第２に、精製した アスペルギルス酵素は、全ての真核核のＤＮＡトポソメラーゼよって共有される 性質、ネガ型およびポジ型の超コイルＤＮＡの双方をリラックスさせた。第３に 、アスペルギルス酵素は、ヒトの核トポソメラーゼＩを阻害（毒）することが知 られているカンプトセシンおよびヘキスト３３３４２（Ｈｏ３３３４２）による 阻害に感受性である。 カンプトセシンおよびヘキスト３３３４２に対するアスペルギルス酵素の感受 性は、その酵素の近似の低減された分子量を決定するために設計されたリン酸塩 −転移実験によって、最初に示された。この実験において、³²Ｐ−ラベルされた ＤＮＡは、アスペルギルストポソメラーゼＩと反応して、共有結合性のタンパク 質−ＤＮＡ複 合体を形成した。共有結合性のトポソメラーゼＩ−ＤＮＡの複合体は、Ｂａｌ３ １で消化されて、トポソメラーゼＩに共有結合的にリンクされているラベルされ たオリゴヌクレオチドのサイズを低減した。 このリン酸塩−転移方法を用いて、アスペルギルストポソメラーゼＩは、１０ ５ｋＤａのタンパク質であって、組換え型ヒトトポソメラーゼＩ（１００ｋＤａ ）より僅かに大きいことが確認された。約７５ｋＤａのより低いバンド位置は、 １００ｋＤａのヒトトポソメラーゼＩのタンパク質分解生成物であることが知ら れている。残りのオリゴヌクレオチドのトポソメラーゼＩの移動度に対する効果 は、みかけ上は（apparently）無視出来る。興味あることに、１０５ｋＤａのア スペルギルストポソメラーゼＩの増強されたラベル化によって証明されたように 、カンプトセシン（１００ｍＭ）、およびＨｏ３３３４２（１ｍＭ）の両方とも 、リン酸塩転移を刺激した。 Ｈｏ３３３４２のより高い濃度群では、リン酸塩転移は次第に抑制された。カ ンプトセシンおよびＨｏ３３３４２のこの効果は、以下で論ずる。例１５ カンプトセシンおよびＨｏ３３３４２は、アスペルギルストポソメラー ゼＩの有力なインヒビターである リン酸塩−転移実験により、カンプトセシンおよびＨｏ３３３４２の両方は、 中毒（poisoning）機構によりアスペルギルストポソメラーゼＩを阻害できるこ とが示唆された。この可能性をテストするため、種々のの薬剤の存在下でのＤＮ Ａ切断反応中で、アスペルギルストポソメラーゼＩを用いた。カンプトセシン（ ＣＰＴ）およびＨｏ３３３４２（ＨＯＥ）の両方とも、アスペルギルストポソメ ラーゼＩの有力なインヒビターである。カンプトセシンおよびＨｏ ３３３４２のそれぞれ１．０および０．１ｍｇ／ｍｌという低い濃度で、大規模 なＤＮＡ切断が観察された。 興味あることに、ヒトＤＮＡトポソメラーゼＩの非常に有力なインヒビターで あることが知られているニチジンおよびコラリンは、如何なる有意な程度にもア スペルギルストポソメラーゼＩを阻害しなかった。他の有力なヒトＤＮＡトポソ メラーゼＩのインヒビターであるＤＭ／Ｉ１／３３は、アスペルギルストポソメ ラーゼＩに対して非常に弱いインヒビターであるだけだった。ヒトトポソメラー ゼＩに対して不活性であるBerenilは、アスペルギルストポソメラーゼＩに対し ても不活性だった。 これらの結果は、ヒトおよびアスペルギルストポソメラーゼＩが、種々の酵素 インヒビターへの感受性に関して実質的に異なることを示している。Ｈｏ３３３ ４２の最も高い濃度（１０ｍｇ／ｍｌ）で、トポソメラーゼＩにより媒介される ＤＮＡ切断が劇的に阻害されることに注意するのにも興味がある。インヒビター のより高い濃度でのこの切断−インヒビター効果は、多くのインターカレーター およびＤＮＡのマイナーな溝結合性のリガンドの多くについて以前に記述されて おり（A.Y.Chenら、ＰＮＡＳ ＵＳＡ、９０、８１３１（１９９３））、および 、ＤＮＡ鋳型に対する酵素結合の阻害に帰せられている（K.M.Teweyら、Science 、２２６、４６６（１９８５））。したがって、リン酸転移に関するアスペルギ ルストポソメラーゼ ＩへのＨｏ３３３４２の効果は、同様に説明できる。例１６ アスペルギルストポソメラーゼＩのビ−およびテル−ベンゾイミダール への選択的な感受性 以前の研究は、多くのモノ−、ビ−およびテル−ベンゾイミダゾールを哺乳類 のＤＮＡトポソメラーゼＩの有効なインヒビター（毒）と確認して来た。アスペ ルギルストポソメラーゼＩが、これらの ベンゾイミダールの阻害的な効果に対しても感受性かどうか調べるために、切断 アッセイを用いて多くの化合物をスクリーニングした。アスペルギルストポソメ ラーゼＩ（６０ユニット／反応）は、ともにテルベンゾイミダゾールである１３ および１１の両方によって強く阻害（毒）された。ＱＳ／II／５０、ＱＳ／II／ ５１、ＱＳ／II/５９Ａ、ＱＳ／II／９を含むモノ−ベンゾイミダールのどれも 、アスペルギルストポソメラーゼＩに対する如何なる阻害的効果も示さなかった 。以前の研究は、ＱＳ／II／５０以外の全てのこれらのモノベンゾイミダゾール が、哺乳類ＤＮＡトポソメラーゼＩのインヒビター（毒）であることを確立した 。ビ−（Ｈｏ３３３４２、およびｎが３である化合物２）、およびテル−（例え ば、１３および１１）に対するアスペルギルストポソメラーゼＩの選択的な感受 性、しかしながら、モノ−ベンゾイミダゾール（例えば、ＱＳ／II／９）ではこ れが無いことは、更に、そのヒトおよびアスペルギルス酵素の間の薬剤感受性の 違いを示す。例１７ ヒトおよびアスペルギルスのトポソメラーゼＩの間の切断特異性におけ る差違 ヒトおよびアスペルギルストポソメラーゼＩの間での薬剤感受性の違いに加え て、切断特異性の追加的な違いを、ヒトおよびアスペルギルストポソメラーゼＩ の間で観察した。ヒト（ラベルされたｈＴＯＰ１、１５０ユニット／反応）およ びアスペルギルス（ラベルされたＡｎＴＯＰ１、６０ユニット／反応）酵素の切 断パターンは、ビベンゾイミダゾール Ｈｏ３３３４２（ＨＯＥ）の存在下で劇 的に異なった。ＨＯＥの存在下でアスペルギルストポソメラーゼＩによって示さ れた切断部位のより大きな数および大きい範囲は、理解されない。より明白では ないが、ヒトおよびアスペルギルス酵素の切断パターンは、カンプトセシン（Ｃ ＰＴ）の存在下でも異なっ ていた。 アスペルギルストポソメラーゼＩ酵素製剤中での不純物トポソメラーゼIIが切 断パターンに寄与するかもしれないとという可能性を除外するために、試料の部 分を二本鎖切断の可能性のために分析した。アルカリ性よりはむしろ中性ローデ ィングによってＤＮＡ試料を分析した際に、二本鎖ＤＮＡ切断は、観察されなか った。アスペルギルストポソメラーゼＩが、ヒトの酵素よりもＣＰＴに対する感 受性がより低いことは、この実験から明白である。 ヒト（１５０ユニット／反応）およびアスペルギルス（６０ユニット／反応） 酵素の間の切断特異性における違いは、テルベンゾイミダゾール（１３および１ １ ）を０．１、１．０および１０μｇ／ｍｌで用いた際にも明白であった。加え て、アスペルギルス酵素は、ヒト酵素に比べて、１３に対して実質的により感受 性に見られた。例１８ 酵母およびアスペルギルストポソメラーゼＩ酵素は、同様の薬剤感受性 ／耐性を示す 全く同じ条件の下でヒトおよび酵母のトポソメラーゼＩを発現している酵母to p １欠失株を、ヒトおよび酵母の酵素の異なる薬剤感受性を評価するために用い た（S.Nitissら、ＰＮＡＳ ＵＳＡ、８５、７５０１（１９８８）；B.Gattoら 、Cancer Res.,５６、２７９５（１９９６）。酵母トポソメラーゼＩを発現して いる酵母細胞はカンプトセシン感受性であるが、それらは、ヒトのトポソメラー ゼＩを発現している酵母細胞に比べて、少くとも１０倍カンプトセシンに耐性で ある。ニチジン、ＤＭ／II／３３およびＱＳ／II／９は、ヒトのトポソメラーゼ Ｉを発現している酵母細胞に対して高度に細胞毒性を示すが、機能性または非機 能性のいずれかの酵母トポソメラーゼＩを発現している酵母細胞に対しては細胞 毒性を示さな い。これらの結果は、酵母およびアスペルギルストポソメラーゼＩが、ヒトのト ポソメラーゼＩに対する毒性を示す同じ薬剤（すなわち、ニチジン、プロトベル ベリン ＤＭ−II−３３、およびモノ−ベンゾイミダール、ＱＳ−II−９）に対 して耐性であることを示している。 このように、ヒトのトポソメラーゼＩと同様に、アスペルギルストポソメラー ゼＩは、カンプトセシン、ビベンゾイミダゾールＨｏ３３３４２、および１１お よび１３の毒活性に対して感受性である。カンプトセシンは、アスペルギルスに 対してはヒトの酵素より活性でないように見えるが、テルベンゾイミダゾール１ １ は、アスペルギルスに対してヒトの酵素より活性なように見える。アスペルギ ルストポソメラーゼＩに対するテルベンゾイミダゾールの有効性は、１１および１３ に限定されず、式Ｉ（式中、ｎ＝１、Ｘ＝Ｈ、Ａｒ＝５−フェニル、Ｙ＝Ｈ およびＹ’＝エチルまたは４−メトキシフェニルである）のテルベンゾイミダゾ ール、および化合物１３の４−フェニル−異性体も、インビトロで真菌性の酵素 に対して有効である。テルベンゾイミダゾールに対するアスペルギルストポソメ ラーゼＩの一般的により高い感受性は、理解されない。しかしながら切断のより 高い程度、および切断のよりゆるい配列特異性から判断されるように、アスペル ギルストポソメラーゼＩは、これらのＤＮＡ結合性のリガンドの阻害的な効果に 対して、より感受性が低いと論ずることができるであろう。換言すれば、アスペ ルギルストポソメラーゼＩは、ヒト酵素より高い親和性でＤＮＡと結合すること ができ、したがってこれらのＤＮＡ結合性のリガンドの阻害的な効果に対して、 より感受性が低い。 本発明は、種々の特定の、および好ましい態様および技術に関して記述された 。しかしながら、本発明の精神および範囲内にあるま まで、多くの変形および修正が可能であると理解されるべきである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 43/00 １１１ Ａ６１Ｐ 43/00 １１１ Ｃ０７Ｄ 401/14 Ｃ０７Ｄ 401/14 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，Ｍ Ｗ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ， ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，Ｅ Ｓ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＵ，ＩＤ ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ， ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，Ｍ Ｇ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ， ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，Ｖ Ｎ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者 リウ，リロイ フォング アメリカ合衆国，ニュージャージー 08807，ブリッジウォーター，フェアーエ イカーズ ドライブ ５ (72)発明者 ソン，クン 中華人民共和国，ツェジアン 311200，シ ャオ シャン，レミアン ロード 201, アパートメント 22

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．医学的治療に使用するための、式（Ｉ） （式中、Ａｒは（Ｃ₆〜Ｃ₁₂）アリール、または１〜３個のＮ、Ｓまたは非過酸 化物性のＯを含み、Ｎが非置換またはＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル、またはベンジ ルで置換されている（５員〜１２員）のヘテロアリールであり；ＸはＨ、ＣＮ、 ＣＨＯ、ＯＨ、アセチル、ＣＦ₃、Ｏ（Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル）、ＮＯ₂、ＮＨ₂、ハ ロゲン、またはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり；各Ｙは、個別にＨ、（Ｃ₁〜 Ｃ₄）アルキルまたはアラルキルであり；Ｙ’は、フェニルまたはメトキシフェ ニルであり；各Ｚは、個別にＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル、ハロゲンまたはハロ（ Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり；およびｎは０または１である） の化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩。 ２．Ｙ’がメトキシフェニルである請求項１。 ３．ｎが１である請求項１。 ４．ＸがＣＮ、ＣＨＯ、ＯＨ、アセチル、ＣＦ₃、Ｏ（Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル）、 ＮＯ₂、ＮＨ₂、ハロゲン、またはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり；ｎが０であ る請求項１。 ５．少なくとも１つのＺがハロゲンまたはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）ア ルキルであり；ｎが０である請求項１。 ６．医学的治療が真菌感染の治療である請求項１、２、３、４または５。 ７．医学的治療がガンの治療である請求項１、２、３、４または５。 ８．真菌感染を治療するための薬剤を製造するための、式（Ｉ）（式中、Ａｒは（Ｃ₆〜Ｃ₁₂）アリール、または１〜３個のＮ、Ｓまたは非過酸 化物性のＯを含み、Ｎが非置換またはＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル、またはベンジ ルで置換されている（５員〜１２員）のヘテロアリールであり；ＸはＨ、ＣＮ、 ＣＨＯ、ＯＨ、アセチル、ＣＦ₃、Ｏ（Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル）、ＮＯ₂、ＮＨ₂、ハ ロゲン、またはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり；各Ｙは、個別にＨ、（Ｃ₁〜 Ｃ₄）アルキルまたはアラルキルであり；Ｙ’は、フェニルまたはメトキシフェ ニルであり；各Ｚは、個別にＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル、ハロゲンまたはハロ（ Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり；およびｎは０または１である） の化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩の使用。 ９．Ｙ’がメトキシフェニルである請求項８。 １０．ｎが１である請求項８。 １１．ＸがＣＮ、ＣＨＯ、ＯＨ、アセチル、ＣＦ₃、Ｏ（Ｃ₁〜 Ｃ₄アルキル）、ＮＯ₂、ＮＨ₂、ハロゲン、またはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルで あり；ｎが０である請求項８。 １２．少なくとも１つのＺがハロゲンまたはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり ；ｎが０である請求項８。 １３．ガンを治療するための薬剤を製造するための、式（Ｉ）（式中、Ａｒは（Ｃ₆〜Ｃ₁₂）アリール、または１〜３個のＮ、Ｓまたは非過酸 化物性のＯを含み、Ｎが非置換またはＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル、またはベンジ ルで置換されている（５員〜１２員）のヘテロアリールであり；ＸはＨ、ＣＮ、 ＣＨＯ、ＯＨ、アセチル、ＣＦ₃、Ｏ（Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル）、ＮＯ₂、ＮＨ₂、ハ ロゲン、またはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり；各Ｙは、個別にＨ、（Ｃ₁〜 Ｃ₄）アルキルまたはアラルキルであり；Ｙ’はフェニルまたはメトキシフェニ ルであり；各Ｚは、個別にＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル、ハロゲンまたはハロ（Ｃ₁ 〜Ｃ₄）アルキルであり；およびｎは０または１である） の化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩の使用。 １４．Ｙ’がメトキシフェニルである請求項１３。 １５．ｎが１である請求項１３。 １６．ＸがＣＮ、ＣＨＯ、ＯＨ、アセチル、ＣＦ₃、Ｏ（Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル） 、ＮＯ₂、ＮＨ₂、ハロゲン、またはハロ（Ｃ₁〜 Ｃ₄）アルキルであり；ｎが０である請求項１３。 １７．少なくとも１つのＺがハロゲンまたはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり ；ｎが０である請求項１３。 １８．式（Ｉ）（式中、Ａｒは（Ｃ₆〜Ｃ₁₂）アリール、または１〜３個のＮ、Ｓまたは非過酸 化物性のＯを含み、Ｎが非置換またはＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル、またはベンジ ルで置換されている（５員〜１２員）のヘテロアリールであり；ＸはＨ、ＣＮ、 ＣＨＯ、ＯＨ、アセチル、ＣＦ₃、Ｏ（Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル）、ＮＯ₂、ＮＨ₂、ハ ロゲン、またはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり；各Ｙは、個別にＨ、（Ｃ₁〜 Ｃ₄）アルキルまたはアラルキルであり；Ｙ’はメトキシフェニルであり；各Ｚ は、個別にＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル、ハロゲンまたはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキ ルであり；およびｎは０または１である） の化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩。 １９．式（Ｉ） （式中、Ａｒは（Ｃ₆〜Ｃ₁₂）アリール、または１〜３個のＮ、Ｓまたは非過酸 化物性のＯを含み、Ｎが非置換またはＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル、またはベンジ ルで置換されている（５員〜１２員）のヘテロアリールであり；ＸはＨ、ＣＮ、 ＣＨＯ、ＯＨ、アセチル、ＣＦ₃、Ｏ（Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル）、ＮＯ₂、ＮＨ₂、ハ ロゲン、またはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり；各Ｙは、個別にＨ、（Ｃ₁〜 Ｃ₄）アルキルまたはアラルキルであり；Ｙ’はフェニルであり；各Ｚは、個別 にＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル、ハロゲンまたはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり ；およびｎは１である） の化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩。 ２０．式（Ｉ） （式中、ＸはＣＮ、ＣＨＯ、ＯＨ、アセチル、ＣＦ₃、Ｏ（Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル） 、ＮＯ₂、ＮＨ₂、ハロゲン、またはハロ（Ｃ₁〜 Ｃ₄）アルキルであり；各Ｙは、個別にＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルまたはアラル キルであり；Ｙ’はフェニルであり；各Ｚは、個別にＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル 、ハロゲンまたはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり；およびｎは０である） の化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩。 ２１．式（Ｉ） （式中、ＸはＣＮ、ＣＨＯ、ＯＨ、アセチル、ＣＦ₃、Ｏ（Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル） 、ＮＯ₂、ＮＨ₂、ハロゲン、またはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり；各Ｙは、 個別にＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルまたはアラルキルであり；Ｙ’はフェニルであ り；各Ｚは、少なくとも１つのＺがハロゲンまたはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルで あるという条件下で、個別にＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル、ハロゲンまたはハロ（ Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり；およびｎは０である） の化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩。 ２２．ｎが１である請求項１８の化合物。 ２３．Ａｒが５−位にある請求項１９または２２の化合物。 ２４．Ａｒがフェニルである請求項１９または２２の化合物。 ２５．Ａｒが２−ピリジルである請求項１９または２２の化合物 ２６．Ｘがハロゲンである請求項１８、１９、２０、２１または２２の化合物 。 ２７．ＸがＣｌである請求項２６の化合物。 ２８．Ｘ−Ａｒがｐ−クロロフェニルである請求項２４の化合物。 ２９．個々のＹがＨであり；個々のＺがＨである請求項２８の化合物る。 ３０．ｎが０である請求項１８の化合物。 ３１．ＸがＣｌである請求項３０の化合物。 ３２．ＸがＢｒである請求項３０の化合物。 ３３．Ｙ’が４−メトキシフェニルであり；個々のＹがＨであり；個々のＺが Ｈである請求項３１または３２の化合物。 ３４．少なく１つのＺがハロゲンまたはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルである請求 項１８、１９または２０の化合物。 ３５．少なくとも１つのＺがＦまたはＣＦ₃である請求項３４の化合物。 ３６．Ａｒがベンゾである請求項１９または２２の化合物。 ３７．Ａｒが４，５−ベンゾである請求項３６の化合物。 ３８．Ａｒが５，６−ベンゾである請求項３６の化合物。 ３９．請求項１８、１９、２０、２１または２２の化合物と、薬剤学的に許容 可能なキャリアとを含む薬剤組成物。 ４０．式（Ｉ） （式中、Ａｒは（Ｃ₆〜Ｃ₁₂）アリール、または１〜３個のＮ、Ｓまたは非過酸 化物性のＯを含み、Ｎが非置換またはＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル、またはベンジ ルで置換されている（５員〜１２員）のヘテロアリールであり；ＸはＨ、ＣＮ、 ＣＨＯ、ＯＨ、アセチル、ＣＦ₃、Ｏ（Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル）、ＮＯ₂、ＮＨ₂、ハ ロゲン、またはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり；各Ｙは、個別にＨ、（Ｃ₁〜 Ｃ₄）アルキルまたはアラルキルであり；Ｙ’はフェニルまたはメトキシフェニ ルであり；各Ｚは、個別にＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル、ハロゲンまたはハロ（Ｃ₁ 〜Ｃ₄）アルキルであり；およびｎは０または１である） の化合物、またはその薬剤学的に許容可能な塩の有効量を、このような治療が必 要な哺乳類に投与することにより真菌感染を治療することを含む、治療の方法。 ４１．請求項１８、１９、２０、２１または２２の化合物の有効量を、このよ うな治療が必要な哺乳類に投与することにより真菌感染を治療することを含む、 治療の方法。 ４２．哺乳類がヒトである請求項４０の方法。 ４３．真菌性感染が全身性の感染である請求項４０の方法。 ４４．前記化合物が薬剤学的に許容可能なビヒクルと組み合わせて投与される 請求項４０の方法。 ４５．式（Ｉ）（式中、Ａｒは（Ｃ₆〜Ｃ₁₂）アリール、または１〜３個のＮ、Ｓまたは非過酸 化物性のＯを含み、Ｎが非置換またはＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル、またはベンジ ルで置換されている（５員〜１２員）のヘテロアリールであり；ＸはＨ、ＣＮ、 ＣＨＯ、ＯＨ、アセチル、ＣＦ₃、Ｏ（Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル）、ＮＯ₂、ＮＨ₂、ハ ロゲン、またはハロ（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルであり；各Ｙは、個別にＨ、（Ｃ₁〜 Ｃ₄）アルキルまたはアラルキルであり；Ｙ’はフェニルまたはメトキシフェニ ルであり；各Ｚは、個別にＨ、（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキル、ハロゲンまたはハロ（Ｃ₁ 〜Ｃ₄）アルキルであり；およびｎは０または１である） の化合物、またはその薬剤学的に許容可能な塩の有効量を、このような治療が必 要な哺乳類に投与することによりガンを治療することを含む、治療の方法。 ４６．請求項１８、１９、２０、２１または２２の化合物の有効量を、このよ うな治療が必要な哺乳類に投与することにより真菌感染を治療することを含む、 治療の方法。 ４７．哺乳類がヒトである請求項４５の方法。 ４８．前記化合物が薬剤学的に許容可能なビヒクルと組み合わせて投与される 請求項４５の方法。