JP2002332293A - 免疫系の調節 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 ＤＨＥＡ投与で認められる望ましくない副作
用を引き起こすことなく免疫系の防御調節を増進させる
薬剤が、感染に対する宿主耐性の特に有利な改善を提供
すること。次に、免疫系の防御調節は、化学療法剤の低
投与量の使用で効果が得られ得、広範囲の防御を伴った
即効性の応答を提供すること。 【解決手段】 本発明は、アンドロステンジオール（Ａ
ＥＤ）およびアンドロステントリオール（ＡＥＴ）を投
与することにより、免疫応答の調節、ストレス影響の改
善、および、化学療法または放射線被照射の好ましくな
い影響の回避のための改良方法を提供する。免疫応答調
節の改良方法は、感染症および免疫疾患（例えば、糖尿
病および慢性疲労症候群（現在では両疾患とも免疫応答
関連症候群と考えられている））の治療に使用され得
る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、アンドロステンジ
オール（ＡＥＤ）およびアンドロステントリオール（Ａ
ＥＴ）を投与することにより、免疫応答の調節、ストレ
ス影響の改善、および、化学療法または放射線被照射の
好ましくない影響の回避のための改良方法を提供する。
免疫応答調節の改良された方法は、感染症および免疫疾
患（例えば、糖尿病および慢性疲労症候群（現在では両
疾患とも免疫応答関連症候群と考えられている））の治
療に使用され得る。

【０００２】

【従来の技術】（発明の背景）脊椎動物での、病原体に
対する宿主予防法の開発には、液性免疫応答および／ま
たは細胞性免疫応答の動員に関連する、選択的な宿主免
疫応答が要求される。いくつかの因子は、長期間の免疫
抑制または免疫系の「負方向の調節（ｄｏｗｎ−ｒｅｇ
ｕｌａｔｉｏｎ）」を引き起こすことにより、身体防御
応答能力に有害な影響をおよぼす。その結果は攻撃から
身体防御ができなくなるので、実際には、「負方向の調
節」よりは免疫系の「悪性調節（ｍａｌ−ｒｅｇｕｌａ
ｔｉｏｎ）」または「逆調節（ｄｅｒｅｇｕｌａｔｉｏ
ｎ）」と呼ばれる方が適切である。免疫抑制は、宿主中
で病原体が増殖する好機を提供する。何が免疫に重要な
損傷をもたらすかは問題ではない。結果的に適切な免疫
応答を引き起こすことができないので、同様の影響がも
たらされる。免疫抑制の多くの異なる原因には、ウイル
ス、細菌、真菌、酵母菌および寄生虫の感染、化学療
法、放射線照射、厳しいストレス、慢性疲労症候群、糖
尿病、およびある種のステロイド療法がある。

【０００３】薬理学的に適切な投与量で、副腎皮質起源
のステロイドホルモンを投与されている患者が感染症の
発生の増加を示すことは、長年知られている。Ａ．Ｓ．
Ｆａｕｃｉ， ｉｍｍｕｎｏｌｏ． ｒｅｖ． ６
５， １３３−１５５ （１９８２）；および、Ｊ．
Ｅ． ＰａｒｉｌｌｏおよびＡ．Ｓ． Ｆａｕｃｉ，
Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏ
ｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ １９， １
７９−２０１ （１９７９）。３−β−ヒドロキシアン
ドロスト−５−エン−１７−オンまたはデヒドロイソ−
アンドロステロン（以下、ＤＨＥＡと呼ぶ）としても知
られているデヒドロエピアンドロステロンは、哺乳類に
認められる量的に主要な副腎皮質ステロイドホルモンの
１つである、１７−ケトステロイドである。Ｍ．Ｅ．
Ｗｉｎｄｈｏｌｚ， Ｔｈｅ Ｍｅｒｃｋ Ｉｎｄｅ
ｘ， 第９版 （１９７６）； Ｋ． Ｄｉｅｍおよび
Ｃ． Ｌｅｎｔｎｅｒ， Ｇｅｉｇｙ Ｓｃｉｅｎｔｉ
ｆｉｃ Ｔａｂｌｅｓ （１９７５）。（ＤＨＥＡは、
生殖腺ステロイド合成での中間体として作用するようで
あるが、ＤＨＥＡの主要な生理学的機能は、完全には理
解されていない。しかし、このホルモンのレベルは、２
０代で低下しはじめ、初老以降ではもとのレベルの５％
にまでなる）。

【０００４】臨床的に、ＤＨＥＡは、乾癬、通風、高脂
肪血症の患者を治療するために、全身投与および／また
は局所投与され、そして、冠状動脈血栓症後の（ｐｏｓ
ｔ−ｃｏｒｏｎａｒｙ）患者に投与されてきた。Ｗ．
Ｒｅｇｅｌｓｏｎら、ＮｅｗＹｏｒｋ Ａｃａｄｅｍｙ
ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ５１８， ２６０−２７３
（１９８８）。哺乳類では、ＤＨＥＡが体重最適化お
よび抗発癌性効果を有することが示された。

【０００５】ヨーロッパで臨床的に、ＤＨＥＡは、閉経
期症状の逆転のための薬剤としてエストロゲンと組み合
わせて使用され、さらに、躁欝病、精神分裂病、および
アルツハイマー病の治療に使用された。さらに、ＤＨＥ
Ａは、進行した癌および多発性硬化症の治療に、臨床的
に４０ ｍｇ／ｋｇ／日で使用された。（Ｒｅｇｅｌｓ
ｏｎ、前出）。穏和なアンドロゲン効果、多毛症、およ
び、リビドの増大が、副作用として観察された。これら
の副作用は、投与量のモニターおよび／または類似体の
使用により克服され得る。

【０００６】米国特許第５，０７７，２８４号「免疫応
答を改善するためのデヒドロエピアンドロステロンの使
用」には、感染に対する宿主応答を改善するための、Ｄ
ＨＥＡの皮下または経口投与が記載されている。米国特
許第４，９７８，５３２号には、ＤＨＥＡ送達のための
パッチ法の使用が記載されている。

【０００７】現在では、ＤＨＥＡは、哺乳類の免疫応答
を増大するより効能のある薬剤に、最終的に導く代謝経
路における前駆体であることが開示されている。それ
は、ＤＨＥＡが二相性化合物として作用する：それは、
アンドロステンジオール（５−アンドロステン ３β，
１７βジオールであり、以後βＡＥＤと呼ぶ）またはア
ンドロステントリオール（５ アンドロステン ３β，
７β，１７βトリオールであり、以後βＡＥＴと呼ぶ）
に転換されると免疫調製薬として作用するが、インビト
ロでは、βＡＥＤおよび／またはβＡＥＴへの転換の前
に、細胞増殖に対してある種のリンホトキシンおよび抑
制効果を有する。従って現在では、ＤＨＥＡの投与は、
そのＤＨＥＡがより活性な代謝物へと部分転換する結果
として、優れた免疫増強特性を示すと理解されている。

【０００８】ＤＨＥＡ投与で認められる望ましくない副
作用を引き起こすことなく免疫系の防御調節を増進させ
る薬剤は、感染に対する宿主耐性の特に有利な改善を提
供する。次に、免疫系の防御調節は、化学療法剤の低投
与量の使用で効果が得られ得、広範囲の防御を伴った即
効性の応答を提供する。

【０００９】

【発明が解決しようとする課題】ＤＨＥＡ投与で認めら
れる望ましくない副作用を引き起こすことなく免疫系の
防御調節を増進させる薬剤が、感染に対する宿主耐性の
特に有利な改善を提供すること。次に、免疫系の防御調
節は、化学療法剤の低投与量の使用で効果が得られ得、
広範囲の防御を伴った即効性の応答を提供すること。

【００１０】

【課題を解決するための手段】本発明は、アンドロステ
ンジオール（ＡＥＤ）およびアンドロステントリオール
（ＡＥＴ）を投与することにより、免疫応答の調節、ス
トレス影響の改善、および、化学療法または放射線被照
射の好ましくない影響の回避のための改良方法を提供す
る。免疫応答調節の改良方法は、感染症および免疫疾患
（例えば、糖尿病および慢性疲労症候群（現在では両疾
患とも免疫応答関連症候群と考えられている））の治療
に使用され得る。

【００１１】本願発明において、活性薬剤として、５−
アンドロステン３β，１７βジオール（βＡＥＤ）、５
−アンドロステン３β，７β，１７βトリオール（βＡ
ＥＴ）または５−アンドロステン３β，７β，１７βト
リオール（αＡＥＴ）、または下式の化合物のうちの少
なくとも１種を薬学的に受容可能なキャリア中に含有す
る組成物：

【００１２】

【化１】 ここで、Ｒ_１は、Ｈ、２〜８個の炭素のアルケニル、１
〜８個の炭素のアルキル、１〜４個の炭素のフェニルア
ルキル、フェニル、またはＣＯＲ_２であり得、ここで、
Ｒ_２は、Ｈ、１〜８個の炭素のアルキル、２〜８個の炭
素のアルケニル、フェニルアルキル（ここで、該アルキ
ルは、１〜４個の炭素を有する）（ベンジルを含む）、
またはフェニルであり、どのフェニル部分も、ヒドロキ
シ、１〜４個の炭素のカルボキシ、ハロ、１〜４個の炭
素のアルコキシ、１〜４個の炭素のアルキル、または２
〜４個の炭素のアルケニルから選択される、３つまでの
置換を有し得、そして、どのアルキルも直鎖、分枝鎖で
あり得るか、または、該アルキルは、全体または部分的
に環状化され得る組成物が提供される。

【００１３】本願発明の１つの局面において、この組成
物の活性薬剤がβＡＥＤまたはβＡＥＴである。本願発
明の別の局面において、この組成物はグリコールを含有
する。

【００１４】本願発明の１つの局面において、この組成
物の活性薬剤が、支持体に結合されており、好ましく
は、この組成物がパッチである。

【００１５】本願発明の１つの局面において、この組成
物は密封容器中に存在する。本願発明の別の局面におい
て、この組成物はカプセル形態の経口投与用の組成物で
ある。

【００１６】本願発明の１つの局面において、この組成
物は移植に適用される。

【００１７】さらに本願発明において、上記の組成物の
有効量を投与することにより、哺乳類における化学療法
または放射線療法での好ましくない影響を予防または改
善するための方法が提供される。

【００１８】本願発明の特定の局面において、使用され
る活性薬剤がβＡＥＴおよび／またはβＡＥＤである。
さらなる局面において、この活性薬剤が、パッチまたは
インプラントにより投与される。

【００１９】本願発明において、上記の組成物を、免疫
の正方向への調節量を投与することにより、脊椎動物の
免疫応答を増強する方法が提供される。１つの局面にお
いてこの組成物が、皮下、皮内、または局所塗布により
投与される。特定の局面においてこの組成物がクモ膜下
腔内に投与されか、パッチとして投与されるか、鼻腔内
投与されるか、膣壁に接触する組成物になるような様式
で投与されるか、口から投与される。さらなる局面にお
いて、上記の組成物が、コンドーム用潤滑剤として投与
される。特定の局面においては、上記の組成物は、ワセ
リンを含有する。

【００２０】本願発明において、ＡＥＤまたはＡＥＴの
付着阻害量に細胞を曝すことにより、該細胞が他の細胞
に付着するのを阻害する方法が提供される。また、本願
発明において、ＡＥＤまたはＡＥＴのリンパ球増殖促進
量を増殖培地に添加することにより、インビトロでのリ
ンパ球増殖を増大させる方法が提供される。さらに、本
願発明において： （１）リンパ球を被験体から取り出して分離する、工
程； （２）ＡＥＤまたはＡＥＤを含有する培地で、工程
（１）で得たリンパ球を増殖する、工程；および、 （３）該リンパ球を該増殖培地から分離し、該リンパ球
を、工程１でそれらを取り出した該被験体に投与する、
工程。 により、被験体において、自己起源のリンパ球を増加さ
せる方法が提供される。

【００２１】本願発明において、脊椎動物の免疫応答を
増強する方法であって、βＡＥＤ、αＡＥＴ、βＡＥ
Ｔ、または下式の化合物を、該脊椎動物の食物または水
中に入れて投与することによる、方法：

【００２２】

【化２】 ここで、Ｒ_１は、Ｈ、２〜８個の炭素のアルケニル、１
〜８個の炭素のアルキル、１〜４個の炭素のフェニルア
ルキル、フェニル、またはＣＯＲ_２であり得、ここで、
Ｒ_２は、Ｈ、１〜８個の炭素のアルキル、２〜８個の炭
素のアルケニル、フェニルアルキル（ここで、該アルキ
ルは、１〜４個の炭素を有する）（ベンジルを含む）、
またはフェニルであり、どのフェニル部分も、ヒドロキ
シ、１〜４個の炭素のカルボキシ、ハロ、１〜４個の炭
素のアルコキシ、１〜４個の炭素のアルキル、または２
〜４個の炭素のアルケニルから選択される、３つまでの
置換を有し得、そして、どのアルキルも直鎖、分枝鎖で
あり得るか、または、該アルキルは、全体または部分的
に環状化され得る、方法が提供される。

【００２３】ある局面において、対象となる脊椎動物
が、慢性疲労症候群のヒト、または慢性酵母菌感染にか
かっているヒトである。

【００２４】

【発明の実施の形態】（発明の開示）本発明は、感染に
対する免疫系の防御応答を増強するために有用な化合物
および組成物を提供する。本発明の医薬組成物はまた、
しばしば免疫抑制を伴う他の合併症の治療にも有用であ
る。防御免疫応答の増強はまた、本明細書中では免疫応
答の正方向の調節（ｕｐ−ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ）また
は調節と呼ばれ得る。

【００２５】本発明は、ＡＥＴのαおよびβ両立体異性
体の合成方法を提供する。両異性体とも、体内に存在す
る。しかし、異性体の活性は変わるので、分離異性体を
調製する方法が提供されることは重要である。現在で
は、βＡＥＴが免疫応答の調節における活性薬剤である
ことが知られている。しかし、αＡＥＴは、過剰である
とき、おそらくβＡＥＴと平衡状態にある。しかし、応
答間隔の遅れが何であるかは現在知られていないので、
βＡＥＴは治療に使用される異性体である組成物であ
る。

【００２６】βＡＥＤおよびβＡＥＴ、および保護類似
体を使用すると、ＤＨＥＡの使用から生じるある種の副
作用が回避される。βＡＥＤおよびβＡＥＴを用いるこ
とにより、前駆体ＤＨＥＡが投与されたときに生じる多
くのアンドロゲン副作用が回避される。βＡＥＤおよび
βＡＥＴを用いると、速効で制御的な免疫応答が増強さ
れ得る。さらに下記の表１の情報に示されるように、β
ＡＥＤは、その防御がＤＨＥＡによりもたらされた防御
とは定量的および定性的に異なるので、ウイルス攻撃に
対する防御特性に関してＤＨＥＡより予想外に優れてい
る。βＡＥＤ、および、ＡＥＴのαおよびβ異性体は以
下の通りである。

【００２７】

【化３】 医薬組成物に加えて、本発明は、βＡＥＤおよびβＡＥ
Ｔの類似体および誘導体を包含する。後に合成法の例示
で示されているように、いくつかの置換化合物が、βＡ
ＥＤおよびβＡＥＴ調製の開始物質または中間体として
有用である。βＡＥＤは、市販品から入手可能であり、
他のステロイド生成用の原料物質として使用されてい
る。（米国特許第２，５２１，５８６号を参照のこ
と）。試験に使用される生成物は、Ｓｉｇｍａから入手
した。βＡＥＤおよびβＡＥＴはまた、加水分解で得ら
れたβＡＥＤまたはβＡＥＴにおいて、保護基で置換さ
れ得る。従って、アシル化およびアルキル化誘導体が、
βＡＥＤおよびβＡＥＴの前駆体として有用である。以
下の式のような化合物：

【００２８】

【化４】 ここで、Ｒ_１は、Ｈ、２〜８個の炭素のアルケニル、１
〜８個の炭素のアルキル、１〜４個の炭素のフェニルア
ルキル、フェニル、またはＣＯＲ_２であり得、ここで、
Ｒ_２は、Ｈ、１〜８個の炭素のアルキル、２〜８個の炭
素のアルケニル、フェニルアルキル（ここで、該アルキ
ルは、１〜４個の炭素を有する）（ベンジルを含む）、
またはフェニルである。どのフェニル部分も、ヒドロキ
シ、１〜４個の炭素のカルボキシ、ハロ、１〜４個の炭
素のアルコキシ、１〜４個の炭素のアルキル、または２
〜４個の炭素のアルケニルから選択される、３つまでの
置換を有し得、そして、どのアルキルも、直鎖、分枝鎖
であり得るか、または、このアルキルは、全体または部
分的に環状化され得る。

【００２９】実施例のモデルとして使用された急性ウイ
ルス感染は、その広範囲に及ぶ効果およびモデルの厳し
さのために、防御を示すのに選択された。コクサッキー
ウイルス（Ｃｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓ）Ｂ４は、マ
ウスを死に至らせる。ヒトでは、コクサッキーウイルス
は、上気道感染症、咽頭炎、出血性結膜炎、髄膜炎、発
疹、脳炎、肝炎、乳児下痢、麻痺、心膜炎、および心筋
炎のような多様な病状を引き起こす。現在では、このグ
ループのウイルスはまた、若年型糖尿病の発症において
ある役割を有すると考えられている。

【００３０】本明細書に教示されているようなβＡＥＤ
およびβＡＥＴ、および保護類似体の使用により、ヒト
を含む脊椎動物に、感染または免疫抑制作用に曝された
ことに起因する病的状態に対する高レベルの防御が提供
される。臨床医薬では、βＡＥＤおよびβＡＥＴでの治
療は、病原生物に曝された患者の病的状態を減退させ得
る。これらの薬剤は、特に感染に感受性であることが知
られる患者において、予防用に効果的に使用され得る。
手術または化学療法を受けている患者、または、火傷、
再生不良性貧血または再生不能性貧血、または肝炎を患
っている患者は、このようなβＡＥＤおよび／またはβ
ＡＥＴの予防的投与で利益を得る感受性の患者である。
また、免疫抑制の原因には、ウイルス、細菌、真菌、酵
母菌および寄生虫感染、化学療法、放射線照射、厳しい
ストレス、慢性疲労症候群、および、ある種のステロイ
ド療法がある。本発明の組成物は、特にヒト免疫不全ウ
イルス（ＨＩＶ）および肝炎のような、身体の免疫応答
を破壊するウイルスが原因となる感染症患者を治療する
のに有用である。

【００３１】βＡＥＤおよびβＡＥＴの両方ともが、Ｄ
ＭＳＯのような親油性キャリアを用いて、最も効果的に
処方される。実施例で使用された動物への皮下投与で
は、活性薬剤を１：１ ＤＭＳＯ／エタノールに溶解
し、次に、動物への皮下投与用に希釈した。組成物を口
から投与する場合には、０．４％ ＡＥＤを含有する組
成物を供給するように食物に添加した。皮膚に塗布する
場合には、ＡＥＤは、例えば、ＤＭＳＯおよびアルコー
ルを含有するキャリア物質に溶解され、次にパッチに適
用され得る。このような場合には、溶液中のＡＥＤは、
パッチの支持材に組成物を適用する前に、グリセロール
のような別のキャリアに添加され得る。膣または肛門投
与には、ＡＥＤは、坐剤、浣腸剤により、またはクリー
ムなどの塗布より投与され得る。本発明の組成物は、活
性薬剤が外胚葉起源の組織と接触するようないずれもの
様式により投与され得る。このような方法には、皮下ま
たは皮内注射、または局所塗布が含まれる。局所塗布の
一方法は、活性薬剤を浸潤させた皮膚パッチの使用であ
る。この送達方法は、非侵襲的であり、非熟練者によっ
ても容易に投与されるので、好都合である。本発明の組
成物はまた、輸送中のストレスから生じる病的状態を防
ぐための動物用医薬としても使用され得る。βＡＥＤお
よびβＡＥＴの投与は、感染症の流行およびヒトが消費
する食物中への感染微生物の導入を予防するための方法
として有効であり得る。βＡＥＤおよびβＡＥＴは、皮
下注射、食物または飲物中に入れること、皮膚塗布用パ
ッチ、または吸入により投与され得る。特に健康面での
関心には、卵を介する感染の流行がある。卵はしばしば
親の雌鳥での発育中に感染する。本発明の活性薬剤を含
有する組成物は、卵の細菌感染を予防するために、飼料
または飲料水に添加され得る。

【００３２】パッチが動物または鳥類に使用される場合
には、皮膚が直接パッチに露出されなければならない。
パッチが使用されるときには、皮膚を露出するために、
鳥類または動物の毛を引き抜くか、または剃る必要があ
り得る。

【００３３】他の投与の好ましい方法には、頬、舌下、
鼻腔内、または気管内経路が含まれる。この目的のため
にはスプレーが有用であり得る。鼻腔内投与には、活性
薬剤は吸引される粉末として送達され得る。シクロデキ
ストリン封入複合体のような封入複合体は、口腔咽頭粘
膜および鼻腔粘膜への投与に適した組成物である。

【００３４】βＡＥＤおよびβＡＥＴはまた、免疫応答
を増強するためのワクチンとともに与えられ得る。これ
らの薬剤は、ワクチンを含有する組成物中またはワクチ
ンとは別の組成物中のいずれかで投与され得る。

【００３５】本発明の化合物はまた、経口または肛門経
路により腸粘膜に投与され得る。坐剤、持続性浣腸剤
（ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ ｅｎｅｍａ）として用いられる
溶液、および、クリームまたはゼリーが、肛門投与での
使用に適したキャリアである。

【００３６】本発明の化合物は、クリーム、ゼリー、坐
剤、または潅注液により、膣粘膜に適用され得る。感染
生物に曝された部位での免疫応答を増強するために、本
化合物は、予防用膣調製物に添加され得るか、またはコ
ンドームの潤滑剤として使用され得る。

【００３７】本発明の組成物の投与は、脳炎および髄膜
炎に対する予防手段として非常に有効であることを証明
した。本発明の組成物は、脊椎レベルでまたは大槽中の
いずれかでクモ膜下腔内に投与され得る。

【００３８】本発明の活性薬剤は、眼適用に適合した、
ドロップ、クリーム、または、ゲル溶液または懸濁液の
形態の組成物により、眼経路で投与され得る。

【００３９】βＡＥＤおよびβＡＥＴは、体細胞の付着
特性を阻害する。抗付着特性をもたらす目的には、本発
明の活性薬剤は、手術中に上皮組織に直接送達され得
る。このような使用の例は、感染症、子宮内膜症、およ
び、腸および卵巣の悪性腫瘍のような症状（そこでは、
外来細胞または粒子が、腹膜内層の正常細胞に付着する
ことが問題である）における、本発明の活性薬剤を含有
する組成物の網への適用に関連する。本発明の組成物
は、例えば、ミストまたはスプレーとして投与され得
る。

【００４０】ＤＨＥＡがβＡＥＤ、およびＡＥＴの両異
性体に転換されることが、インビボにおいて示された。
次に、βＡＥＤおよびβＡＥＴは、免疫応答の調節因子
（レギュレーター）として作用する。皮膚では、ＤＨＥ
ＡのＡＥＤ、そして次のＡＥＴへの転換は、ＤＨＥＡの
代謝経路の１つであると考えられる。ヒトの副腎皮質お
よび肝臓は、ＤＨＥＡの７α−ヒドロキシル化のみを形
成し、７β−ヒドロキル化は形成し得ないが、ヒトの皮
膚は、７β−ＯＨ ＤＨＥＡを形成し、ＡＥＤの７βヒ
ドロキシル化を行ってβＡＥＴを得る酵素的機構を有す
る。以下の表は、ＤＨＥＡの代謝経路を示す。

【００４１】

【化５】 ＤＨＥＡ（ａ）は、免疫増強活性を有することが知られ
ている。しかし、デヒドロエピアンドロステロン硫酸
「（ｂ）」は、免疫系において増強効果を有さないこと
が認められた。５アンドロステン−３β，１１β，１７
β−トリオールおよび５アンドロステン−３β，１６
β，１７β−トリオールはともに、免疫抑制効果を有す
る。テストステロン「（ｉ）」は、宿主免疫応答におい
て効果を有することが知られているが、この効果は、致
死的な感染症の予防には至らない。テストステロンおよ
び他の性ホルモンの免疫応答に対する定量的および定性
的効果は、異なる性質および範囲のものである。

【００４２】

【実施例】（実施例１）アンドロステンジオール（５
アンドロステン−３β、１７β、ジオール、βＡＥＤ）
を使用した結果、ウイルス感染および細菌感染に対して
著しいおよびかなりの抵抗性であった。用量曲線実験
は、次のように処理した：βＡＥＤおよびＤＨＥＡを、
１回の持続用量として８．３ｍｇのＡＥＤまたは２５ｍ
ｇのＤＨＥＡを、ＳＷＲ＼ＪおよびＣ５７ＢＬ＼６Ｊ近
親交配マウスに投与した。次いで、活性薬剤の防御値を
測定するために、マウスに種々の量のコクサッキーウイ
ルスＢ４（ＣＢ４）を感染させた。βＡＥＤは、コクサ
ッキーウイルスＢ４に対して５０％防御用量を与え、そ
れはＤＨＥＡにより与えられる防御より１００倍大き
い。さらに、ＥＤ５０における相違に比べて、アンドロ
ステンジオールで達成されるウイルス性の致死に対する
防御の程度もまたＤＨＥＡ注射で得られる程度より大き
い。βＡＥＤによりもたらされたウイルスに誘導される
致死に対する防御の増加は、ＤＨＥＡにより得られた防
御とは統計学的に有意に異なる（Ｐ＜０．０５）。

【００４３】

【表１】 これらの結果から分かるように、βＡＥＤは、致死をさ
けることにおいてＤＨＥＡ前駆体より著しく効果が高
い。有効量のβＡＥＤは、ＤＨＥＡで効果を得るために
必要な用量の１／３未満であり、致死からの防御を達成
するのに効果的である。ウイルスを介する致死からの同
様の防御がまた、近親交配したＣ５７ＢＬ／６Ｊ（ｂ）
系統でも観察された。２つの近親交配マウス系統（ＳＷ
Ｒ／ＪおよびＣ５７ＢＬ／６Ｊ）は、その主要組織適合
性ハプロタイプが異なり、それぞれｑおよびｂである。
この結果は、異なる組織適合性の系統において、βＡＥ
Ｄを用いて達成される免疫応答の正方向の調節が、第１
７染色体上の主要組織適合遺伝子と無関係であり得るこ
とを示す。

【００４４】最近の報告で、皮膚は特有の免疫機能を有
し得ることが示されている。Ｊ．Ｗ． Ｓｔｒｅｉｌｅ
ｉｎおよびＲ．Ｅ． Ｔｉｇｅｌａｒ、Ｐｈｏｔｏｉｍ
ｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｐａｒｒｉｓｈら編 （Ｐｌｅｎｕ
ｍ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９８
３）９５−１３０ページ。実際に、皮膚は皮膚免疫細胞
群をマウス系統のＴｈｙ−１＋樹枝状表皮細胞中に含む
ことが知られており、それはＩＬ−１に類似の表皮の胸
腺細胞活性化因子を産生する表皮のランゲルハンス細胞
およびケラチノサイトを含む。

【００４５】（実施例２）８ｍｇのβＡＥＤを含む組成
物を、異系交配したＩＣＲマウスに皮下投与した。次い
で、致死量のＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａ
ｌｉｓ Ｘ１５１５．ＯＧ１ＲＦ株を感染させた。βＡ
ＥＤを与えた動物は、細菌のみを感染させた動物におけ
る致死率の５７％から、感染させ、そして１回の皮下
（ＳＣ）投与量のβＡＥＤで処置した動物における致死
率０％まで致死率を減少したことから明らかであるよう
に、病的状態に対する著しい抵抗性を示した。さらに、
一定の閾値の用量を越えるβＡＥＤは、脾臓および胸腺
においてかなりのリンパ球の増殖をもたらすが、それは
感染動物においてのみである。ウイルスに曝されず、１
頭あたり８ｍｇのβＡＥＤを投与しても増殖を引き起こ
さなかった。ウイルス感染のみの近親交配のＳＷＲ／Ｊ
マウス、およびβＡＥＤ処置のみまたはβＡＥＤ処置お
よびウイルス感染で処置した動物の臓器の組織病理学試
験により、βＡＥＤはウイルス誘導性の心筋症および膵
疾患からの防御に効果があることが判明した。下記の表
２に示されたデータに、βＡＥＤは、宿主のＩＣＲ近親
交配系統（現在、Ｈｏｌｌａｎｄ Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄ
ｏｗｌｅｙ Ｃｏｍｐａｎｙにより供給されるＩｎｓ
ｔ， ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｃｈ系統）を、
Ｓ．ｆａｅｃａｌｉｓから、しかしＤＨＥＡが同じ効果
に必要とする用量の１／３の用量で、防御することが示
される。

【００４６】

【表２】 防御は、２４時間以内に死ぬ極めて急性の感染において
達せられた（処置群での０／７に対して未処置群では４
／７であった）。マウスには、細菌Ｓ．ｆａｅｃａｌｉ
ｓ Ｘ１５１５．ＯＧ１ＲＦ単離株を含む致死量のプラ
スミドを感染させた。

【００４７】（実施例３）単層の膀胱腫瘍細胞を含むウ
エルを、アッセイに使用する前に一晩、βＡＥＤまたは
ＤＨＥＡのいずれかの５０μモル溶液でカバーする。結
果を下の表３に示す。

【００４８】

【表３】 表３に示すように、ＤＨＥＡおよびβＡＥＤは共にヒト
膀胱腫瘍細胞への細菌の付着を阻害する。βＡＥＤおよ
びＡＥＴは、膜流動性、または細胞への付着および／ま
たは浸透に影響する構成成分のいずれかに、効果を有す
ると考えられている。膀胱腫瘍細胞（ＥＪ６）を、膜流
動性におけるＡＥＤの効果を測定するために膜プローブ
として蛍光プローブ１−４、トリメチルアンモニオ−フ
ェニル−６ １，３，５ヘキサトリエン（ＴＭＡ−ＤＰ
Ｈ）を使用してフローサイトメトリーで分析した。

【００４９】（結果） Ａ． サンプル１および２は標準の組織培養液中で増殖
させたコントロール細胞を示す。 Ｂ． サンプル３または４は５０μＭ ＡＥＤ入りの上
記のコントロール培養液で増殖させた細胞を示す。

【００５０】 サンプルＡ１． ０．１２１２５６ サンプルＡ２． ０．１２０５４８ コントロールの平均 ０．１２０９０２ ＡＥＤ ５０ μＭ ３． ０．１３５１５１ ＡＥＤ ５０ μＭ ４． ０．１４２４５３ 試験の平均 ０．１３８８０２ コントロールとβＡＥＤ処理細胞との間の０．０１７８
９９の差は有意であり、βＡＥＤが細胞膜の付着におい
て有意の変化を引き起こすことが証明される。それは、
細胞膜の硬度の増加（流動性の減少）が付着に影響する
ことであり得る。

【００５１】（実施例４）細胞培養液に４Ｘ１０７のＨ
ｅｌａ細胞を接種した。ＤＨＥＡを５０μＭの濃度まで
加え、βＡＥＤを５０μＭの濃度まで加えた。ＤＨＥＡ
に曝した細胞培養では、細胞数が２倍の減少を示した。
βＡＥＤに曝した細胞培養（コントロール）およびキャ
リアーのみに曝した培養は生存細胞数に２倍の増加を示
したまたは変化を示さなかった。これらの観察で、βＡ
ＥＤは細胞応答の初期でＤＨＥＡの有害な効果を有さな
いことが示唆される。ＤＨＥＡおよびβＡＥＤのいずれ
もインビトロでウイルス感染粒子数に影響を有しない。

【００５２】（実施例５）マウスに８ｍｇのβＡＥＤま
たは２５ｍｇのＤＨＥＡを皮下注射した。次いで、マウ
スにコクサッキーウイルスＢ４、１０５粒子を感染させ
た。７日後にマウスを屠殺した。脾臓のリンパ球を取り
出し、コンカナバリンＡ、５μｇ／ｍｌでインビトロで
刺激した。刺激を３Ｈ−チミジン取り込み法で測定し
た。βＡＥＤは脾臓のリンパ球の増殖に大きな効果を有
し、６．６倍大きい増殖が明示された。データはまた、
初期のステロイドＤＨＥＡの継続投与の結果、免疫系を
いくらか抑制することを示唆する。

【００５３】上記の結果は、ＤＨＥＡ処置において観察
される免疫の正方向の調節を上回る初期の免疫抑制また
は毒性が回避されるため、感染への免疫応答を増大させ
るためにはＤＨＥＡよりもβＡＥＤまたはβＡＥＴを使
用する方が有利であることを明らかに示唆する。従っ
て、ＤＨＥＡよりむしろβＡＥＤまたはβＡＥＴでの治
療が、感染生物への免疫応答を改善するためには好まし
い。

【００５４】ＤＨＥＡとＡＥＤとの間の構造におけるた
だ一つの変化は、１７位のケト基のβ水酸基への還元で
ある。７位の水素をβ水酸基で置換したＡＥＴは、皮膚
の代謝経路により生成される。言い換えれば、βＡＥＴ
は皮膚におけるＤＨＥＡの代謝経路の下流産物である。
βＡＥＴは、免疫の正方向の調節、および、ストレス、
化学療法、および放射線照射の好ましくない効果からの
防御をもたらす最も有効な化合物であると考えられる。

【００５５】（調製の方法＃１）本発明の重要な局面
は、医薬として使用する立体特異的な（ｓｔｅｒｉｏ−
ｓｐｅｃｉｆｉｃ）βＡＥＴの調製である。合成は、開
始物質として７−オキソ−３β，１７βアセトキシ−ア
ンドロスト−５−エンを用いて行った。

【００５６】（３β，７β，１７β−トリヒドロキシア
ンドロスト−５−エン（Ｉ）および３β，７α，１７β
−トリヒドロキシアンドロスト−５−エン（ＩＩ）の合
成：）氷酢酸中での３β，１７β−ジアセトキシアンド
ロスト−５−エンの酸化クロム酸化で、３β，１７β−
ジアセトキシアンドロスト−５エン−７−オン（ＩＩ
Ｉ）［（Ｉ）または（ＩＩ）の中間体］を生じる。

【００５７】イソプロパノール中での（ＩＩＩ）のアル
ミニウムイソプロポキシド還元で（Ｉ）が生じる。テト
ラヒドロフラン中での（ＩＩＩ）のリチウムトリ（第２
級ブチル）ボロヒドリド還元で、（ＩＩ）が生じる。

【００５８】（３β，１７β−ジアセトキシアンドロス
ト−５−エン−７−オン（ＩＩＩ）の調製）４００ｍｌ
の氷酢酸中の３７．４ｇ（０．１ｍｏｌ）の３β，１７
β−ジアセトキシアンドロスト−５−エン（Ｓｔｅｒａ
ｌｏｉｄｓ Ａ７８５０）を、２０ｍｌのＨ２０および
２０ｍｌの氷酢酸に溶解した３０．０６ｇ（０．３ｍｏ
ｌ）の酸化クロム（ＶＩ）（Ａｌｄｒｉｃｈ ２３，２
６５−３）と反応させた。ＣｒＯ３溶液を３β，１７β
−ジアセトキシアンドロスト−５−エン溶液に滴下して
加え、４時間５５℃の温度に維持した。いずれの未反応
ＣｒＯ３をも分解するために、反応混合物にメタノール
を加え、続いて塩の水溶液およびエーテルを加えた。エ
ーテルを蒸発させて７．８ｇ（２０％収量）の粗ＩＩＩ
を生じた（詳細は、実験書＃１、１０−１６ページにあ
る）。９５％ＥｔＯＨからの結晶化で、（ＩＩＩ）融点
２１４−２１５℃、ＤＳＣピーク１９１−２２４℃、２
２０℃で最高、（文献１）融点２１８−２１９℃、（文
献２）融点２２４−２２５℃（メタノール由来）を生じ
た。

【００５９】順相ｔｌｃ：ＥｔＯＡＣ−シクロヘキサン
−ＥｔＯＨ（４５：４５：１０）、Ｒｆ＝０．８６。Ｉ
Ｒバンド（ｃｍ −１：１７３７、１６６６（文献２、
１７２８、１６６８）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣ１３）、
（ｄ）、ｐｐｍ： ０．８１（ｓ，３Ｈ）、１．２５
（ｓ，３Ｈ）、２．０２（ｓ，６Ｈ）、２．２５（ｍ，
Ｈ Ｃ−４における）、２．５（ｍ，Ｈ Ｃ−８におけ
る）、４．６（ｔ，ＨＣ−１７における）、４．７
（ｍ，Ｈ Ｃ−３における）、５．７２（ｓ，１Ｈ）；
（文献２、０．８０（ｓ，３Ｈ）、１．２０（ｓ，３
Ｈ）、２．０３（ｓ，６Ｈ）、４．６２（ｍ，１Ｈ）、
５．７１（ｇ，１Ｈ）。）逆相 ｌｃ／ｍｓ（高速原子
衝撃検出）でｍ／ｚ ３８９（Ｍ＋ＨＪ’ 主ｌｃピー
ク中のイオンを検出した（文献２ ｍ／ｚ ３８８
（Ｍ）。実験的Ｃ−１３ ｎｍｒ、（ｄ）、ｐｐｍによ
る帰属（ＣＤＣ１３）は：

【００６０】

【化６】 （３β，７β，１７β−トリヒドロキシアンドロスト−
５−エン（Ｉ）の調製）３β，１７β−ジアセトキシア
ンドロスト−５−エン−７−オンをイソプロパノール中
でのアルミニウムイソプロポキシドによって還元し、３
β，７β，７β−トリヒドロキシアンドロスト−５−エ
ンを得た。

【００６１】（３β，７α，１７β−トリヒドロキシア
ンドロスト−５−エン（ＩＩ）の調製）テトラヒドロフ
ラン中のリチウムトリ（第２級ブチル）ボロヒドリド
（Ａｌｄｒｉｃｈ Ｌ−Ｓｅｌｅｃｔｒｉｄｅ）５．１
ｍｌ（５．１ｍｍｏｌ）を、窒素下で新たに蒸留した１
５ｍｌのテトラヒドロフランの中の、４９９ｍｇ（１．
２８ｍｍｏｌ）の３β，１７β−ジアセトキシアンドロ
スト−５−エン−７−オンにすばやく加え、氷浴の温度
で１．５時間撹拌した。１５ｍｌメタノール中の０．９
ｇのＫＯＨを加え、反応混合物を０．５時間還流し、次
いで３７．５ｍｌの１０％ＮａＣｌ溶液を加えた。冷凍
庫（−２０℃）で冷却後、結晶を生じ、濾過し、１２
３．６ｍｇ（１９％）（ＩＩ）、融点２３９−４５℃を
得た。メタノールからの結晶は、（ＩＩ）、融点２４
９．５−２５３℃を生じた。１Ｈ ｎｍｒ（ＣＤ（Ｏ
Ｄ）３）、（ｄ）、ｐｐｍ：０．７５（ｓ，３Ｈ）、
１．０１（ｓ，３Ｈ）、３．１（ｍ，１Ｈ）、３．６
（ｔ，１Ｈ）、３．７（ｄ，１Ｈ）、５．５０（ｄ，１
Ｈ）。

【００６２】実験的Ｃ−１３ ｎｍｒ、（ｄ）、ｐｐｍ
による帰属（ＣＤ（ＯＤ）３）は：

【００６３】

【化７】 （考察）立体化学は、コレスト−５−エン−３β、７β
−ジオールおよびコレスト−５−エン−３β、７α−ジ
オールプロトンｎｍｒ（文献３）と比較して、３β、７
β、１７β−トリヒドロキシアンドロスト−５エン
（Ｉ）および３Ｂ、７α、１７β−トリヒドロキシアン
ドロスト−５−エン（ＩＩ）に帰属した。（ＩＩ）を作
製するための（ＩＩＩ）のＬ−Ｓｅｌｅｃｔｒｉｄｅ還
元は、７α−ヒドロキシコレステロールの調製に関する
Ｍｏｒｉｓａｋｉにより与えられた条件と同じ反応条件
を用いて行った４。構造異性体（Ｉ）および（ＩＩ）に
関する炭素−１３共鳴を示す。（多重度（ｐｐｍ））

【００６４】

【化８】 （参考文献） １．Ａｄｏｌｆ Ｂｕｔｅｎａｎｄｔら、Ｂｅｒ． ７
１Ｂ、１３１６−２２（１９３８）。 ２．Ａｎｔｈｏｎｙ Ｊ． Ｐｅａｒｓｏｎら、Ｊ．Ｃ
ｈｅｍ．Ｓｏｃ． Ｐｅｒｋｉｎ Ｔｒａｎｓ． Ｉ、
２６７−２７３（１９８５）。 ３．Ｌｅｌａｎｄ Ｌ． Ｓｍｉｔｈら、Ｊ．Ｏｒｇ．
Ｃｈｅｍ．、３８巻、Ｎｏ．１、１１９−１２３（１９
７３）。 ４．Ｍａｓａｏ Ｍｏｒｉｓａｋｉら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈ
ａｒｍ．Ｂｕｌｌ．３５（５）１８４７−１８５２、
（１９８７）。

【００６５】（調製の方法＃２）ＡＥＴのαおよびβ異
性体を調製する第二の方法が開発されている。そのプロ
セスは、開始物質として３β，１７βジアセトキシアン
ドロスト−５−エン、市販の試薬（Ｓｔｅｒｅｌｏｉｄ
ｓ Ａ７８５０）を用いる。この化合物を、Ｐｅａｒｓ
ｏｎにより記載されたようにヘキサ六カルボニルクロム
（Ｃｒ（Ｃｏ）６）で酸化して、３β，１７β−ジアセ
トキシアンドロスト−５−エン−７−オンを形成させ
た。（Ｐｅａｒｓｏｎら、Ｊ． Ｃｈｅｍ Ｓｏｃ．
Ｐｅｒｋｉｎ． Ｔｒａｎｓ． １、１９８５、２６
７）。次いで、形成されたエノン（ｅｎｏｎｅ）をトリ
イソブチルアルミニウム（ＴＩＢＡ）で還元し、用いた
溶媒に応じて、アセチル化７α−ヒドロキシ（３ａ）生
成物または７β−ヒドロキシ（３ｂ）生成物を得た。

【００６６】（３β，７α，１７β−トリヒドロキシア
ンドロスト−５−エンの調製）３β，１７β−ジアセト
キシアンドロスト−５−エン−７−オン（０．４９９１
ｇ、１．２８５ｍｍｏｌ）の溶液およびテトラヒドロフ
ラン（２０ｍＬ、ＭｇＳＯ４上で乾燥）を窒素環境下で
混合した。ＴＩＢＡ（２ｍＬ、２ｍｍｏｌ、１Ｍトルエ
ン中）をシリンジで滴下して加えた。溶液を約７時間、
室温で撹拌した。酢酸エチル（１．４ｍＬ）、メタノー
ル（１０ｍＬ）を加えて、および最後に１０ｍＬの５０
％酢酸を加えて反応を停止した。この溶液を１００ｍＬ
の水に加え、酢酸エチルで抽出した（５０ｍＬで３
回）。有機溶媒層を合わせて、次いで飽和炭酸水素ナト
リウム溶液（５０ｍＬ）、飽和塩化ナトリウム溶液（５
０ｍＬで２回）、および水（５０ｍＬ）で洗浄した。次
いで、有機溶媒層を硫酸マグネシウム上で乾燥して、溶
媒をロータリーエバポレーターで除去し、９６％を越え
る粗生成物を得た。１Ｈ ＮＭＲは、粗生成物が３β，
１７β−ジアセトキシアンドロスト−５−エン−７−オ
ン（開始物質）を６５％および３β，１７β−ジアセト
キシ−７α−ヒドロキシアンドロスト−５−エンを３５
％含むことを示唆した。

【００６７】（３β，７β，１７β−トリヒドロキシア
ンドロスト−５−エンの調製）３β，１７βジアセトキ
シアンドロスト−５−エン−７−オン（０．９５８１
ｇ、２．４６６ｍｍｏｌ）の溶液およびペンタン（３０
ｍＬ、ＭｇＳＯ４上で乾燥）を、窒素環境下で混合し
た。次いで、ＴＩＢＡ（９．５ｍＬ、９．５ｍｍｏｌ、
１Ｍトルエン中）をシリンジで滴下して加えた。溶液を
約１時間室温で撹拌した。蒸留した塩酸（約５ｍＬ）を
加えて反応を停止した。この溶液を水（１００ｍＬ）に
加えて、酢酸エチルで抽出した（５０ｍＬで３回）。有
機溶媒層を合わせて、次いで飽和炭酸水素ナトリウム溶
液（５０ｍｌ）、飽和塩化ナトリウム溶液（５０ｍＬで
２回）および水（５０ｍＬ）で数回洗浄した。有機溶媒
層を硫酸マグネシウム上で乾燥し、溶媒をロータリーエ
バポレーターで除去し、８６％の粗生成物を得た。１Ｈ
ＮＭＲは、粗生成物が、３β，１７β−ジアセトキシ
−７−β−ヒドロキシアンドロスト−５−エン−７−オ
ン（８６％）および３β，１７β−ジアセトキシ−７−
α−ヒドロキシアンドロスト−５−エンを含むことを示
唆する。

【００６８】上記の両方の場合において、最終生成物を
調製の方法＃１に従って還元した。

【００６９】βＡＥＤおよびβＡＥＴを含む本発明の組
成物は、いかなる治療条件でも有用である。免疫応答に
関連する症状は現在、糖尿病、慢性疲労症候群、ストレ
ス、化学療法、および放射線照射に曝すことを含んでい
る。免疫応答の異常を伴う多くのこれらの症状のさらに
憂鬱な結果の１つは、脱毛症を含む。本発明の化合物
は、化学療法および放射線照射の影響を含むそのような
免疫応答の異常の結果の脱毛症の治療に有効である。脱
毛症において、αＡＥＴは治療での使用に、かなりの利
益がある。βＡＥＤおよびβＡＥＴの両方の組成物は、
これらの症状において生じる免疫抑制の他の好ましくな
い影響を解決するのに有用である。

【００７０】（実施例６）ＳＷＲ／Ｊ近親交配マウスに
１回持続用量の０．５、２．０、４．０、および８．０
ｍｇ／匹のβＡＥＤを注射し、次いで１０７ＰＦＵのコ
クサッキーウイルスＢ４を感染させた。結果を以下に示
す： ＡＥＤ投与量（ｍｇ／匹） 累積生存率（％） ０ １７ ０．５ ８３ ２ １００ ４ １００ ８ １００。

【００７１】これらの結果に基づいて、１０７ＰＦＵの
ＣＢ４での感染からの５０％防御を達成するのに必要な
βＡＥＤの理論用量（推定）は、０．２５ｍｇ／匹であ
る。

【００７２】実施例で、βＡＥＤは、コクサッキーウイ
ルスＢ４からの防御に関して５０倍から１００倍、ＤＨ
ＥＡより効力が高いことを示す。

【００７３】（実施例７）感染動物における心臓および
膵臓の病理学上のβＡＥＤ効果を評価する試みで、３群
の近親交配ＳＷＲ／Ｊマウスを比較した。研究した群
は、ウイルスのみに感染させた動物、βＡＥＤのみで処
置した動物、およびウイルスに感染させβＡＥＤで処置
した動物を含んだ。比較により以下のことが判明した： 心臓 膵臓 ＡＥＤ 特になし 特になし ウイルス 事実上の 心筋のカルシウム沈着 重篤な壊死 を伴う限局性の （膵疾患） 多発性壊死 ＡＥＤプラス 誘導性心筋症 ウイルス誘導性 ウイルス の形跡はない 膵疾患の形跡はない。

【００７４】これらの結果は、１回の持続用量として
８．０ｍｇ／マウスで投与されたβＡＥＤが、心臓組織
をウイルスに誘導される心筋症から防御し、また膵臓を
ウイルスに誘導されるこの器官の壊死から防御したこと
を示す。これらの結果は、βＡＥＤがウイルスに誘導さ
れる心臓血管の疾患および膵臓の疾患、特に心筋症およ
び膵疾患からの防御において効果的に用いられ得ること
を示す。以前には、これらの器官をウイルスに誘導され
る損傷から防御する有効な薬剤はなかった。

【００７５】（実施例８）βＡＥＤ、αＡＥＴ、および
βＡＥＴの効果を、マウスにコクサッキーウイルスＢ
４、５．０Ｘ１０７ｐｆｕ／匹を感染させて比較した。
次のデータは、ウイルス感染後指定した日での全累積致
死率（ｎ／６）を示す。

【００７６】 累積致死率 処置群 （感染後日数） ２ ４ ６ ８ １０ １２ １４ １６ ウイルスのみ ０ １ ６ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ βＡＥＤ ０．５ｍｇ／ウイルス ０ ０ １ １ ６ ＊ ＊ ＊ αＡＥＴ ０．５ｍｇ／ウイルス ０ １ ４ ４ ４ ４ ４ ４ βＡＥＴ ０．５ｍｇ／ウイルス ０ ０ １ １ ２ ２ ４ ４。

【００７７】αＡＥＴはウイルスから２匹を防御するこ
とを明らかにしたが、初期の致死率は、少なくとも早期
には、αＡＥＴ由来の防御がほとんどまたは全くないこ
とを示唆する。他の研究により、βＡＥＤまたはβＡＥ
Ｔのいずれかによるより、αＡＥＴによるほうがずっと
防御が少なかったことが示唆される。明らかに、βＡＥ
Ｔは初期のおよび長期の防御の両方に最も効果のある薬
剤である。αＡＥＴによる防御には限界があることは明
らかである。従って、この異性体は免疫応答を増強する
効果に関して、βＡＥＴほど有用ではない。

【００７８】免疫系の調節を提供する活性薬剤としての
βＡＥＤまたはβＡＥＴの使用は、ウイルス、細菌、お
よび他の感染に対して、宿主の免疫応答を効果的に調節
する事を可能にする。他に抗ウイルス化学療法が存在し
ない、ウイルスに誘導された心臓感染または膵臓感染の
場合に、βＡＥＤおよびβＡＥＴは予防的な防御因子と
しての価値を有する。βＡＥＤおよびβＡＥＴの防御的
な価値は、外科的手術をうける患者またはシュードモナ
ス属のような耐性株の微生物が重大な恐れを示す損傷を
患っている患者に対して特に重要である。そのような患
者の例は、内臓手術をうける患者または腹部の銃創を患
っている患者である。リューマチ熱のような症状の病歴
を有する患者はまた、βＡＥＤまたはβＡＥＴの予防的
な使用から利益を受ける。特有の場合における投与の形
態は、防御が求められる感染原因および微生物の標的組
織に依存する。持続性投与としての皮下投与は、上記の
データによって示されるような全身の感染に対して効果
的である。一方、組成物を、特有の組織における感染に
あった場合に体を支えるために与える場合は、この組成
物は、最も影響を受けた組織に活性薬剤を投与するのに
好都合であり得る。

【００７９】示された場合に用いられるキャリアーは、
投与形態に依存する。ＡＥＤおよびＡＥＴの両方とも、
親油性化合物である。それらは、ＤＨＥＡよりは水に溶
解性である。親油性ステロイド用の溶媒は当該分野で既
知であり、これらの化合物についてキャリアーとして用
いられる。そのようなキャリアーの例は、ポリプロピレ
ングリコール、ポリエチレングリコールのようなグリコ
ール、およびシクロデキストリン、特に本来無定形のシ
クロデキストリンである。考えられる他の賦形剤は、水
中油型エマルジョンを調製するためのポリオキシエチレ
ンソルビタンの脂肪酸エステル（Ｔｗｅｅｎ）またはソ
ルビタンの脂肪酸エステル（Ｓｐａｎ）を含む。

【００８０】（実施例９）経口投与用のＡＥＤの処方の
カプセルを、１５ｍｇのβＡＥＤ、１５０ｍｇの澱粉、
および５ｍｇのステアリン酸マグネシウムを含ませて調
製する。カプセルを、毎日または日に２回投与して、１
日の用量を１５ｍｇ／日に達成した。

【００８１】実験室では、βＡＥＤを０．４％の比率で
動物の食餌に加えた。βＡＥＤを含む食餌で飼育した動
物に実施例１の教示に従って注射することでコクサッキ
ーウイルスＢ４に曝した場合、コントロールの動物は全
て死んだが、βＡＥＤで飼育した動物は生き残った。

【００８２】（実施例１０）皮膚または粘膜に投与する
ための調製物は、次のように調製し得る： 成分 ｗ／ｗ（％） ＡＥＤ ０．５％ モノステアリン酸グリセリル ３．０％ プロピレングリコール １３．０％ ワセリン ８３．５％。

【００８３】βＡＥＤまたはβＡＥＴまたはその類似体
を経口投与した場合、活性薬剤が破壊および上位胃腸管
での吸収から保護されれば、活性薬剤はより効果的に利
用され得る。活性薬剤は、腸管粘膜に曝した期間が増加
する場合、最も効果的である。従って、腸内で徐放性の
効果のある処方で活性薬剤を含むカプセルの使用は、ク
ローン病および大腸炎のような腸障害の治療に適する。
大腸の炎症の治療に対する持続浣腸剤の使用もまた適切
である。持続浣腸剤としての投与の処方は次のように処
方され得る： （実施例１１） 成分 ｗ／ｗ（％） βＡＥＴ ４％ プロピレングリコール ９６％。

【００８４】活性薬剤を口腔の粘膜に投与する場合、咽
頭カタルおよび鼻腔に使用するために、バッカル錠また
はスプレーとして投与し得る。

【００８５】組成物はまた、吸入を介して、気管支に投
与し得た。この投与法は、肺感染症の患者の治療、ある
いは黒色肺病またはしばしば日和見感染により合併され
る気腫のような他の肺の症状の治療において特に有用で
ある。組成物は、気管へのエアロゾルにより投与され得
たか、または呼吸治療において使用される他の薬剤と共
にミストで投与され得た。

【００８６】ＡＥＤおよびＡＥＴの皮膚への投与は、支
持体が活性薬剤を浸透させてあるパッチを用いるか、ま
たは徐放性の活性薬剤をもたらすインプラントを用いて
行われ得る。

【００８７】βＡＥＤまたはβＡＥＴの投与のためのパ
ッチは、薬物を含む粘着性のパッチとして処方され得
る。例えば、パッチは、活性薬剤を含む圧感受性のシリ
コーン粘着マトリックスが非浸透性の裏装で覆われ得る
円盤状物であり得る。この円盤状物は粘着物中に活性薬
剤を含み得るか、または活性薬剤を保持するポリウレタ
ンフォームまたはガーゼのような材質の支持体をその場
所に結合し得るかのいずれかである。使用前に、活性薬
剤を含む物質はパッチを守るためにカバーされる。

【００８８】（実施例１２）非浸透性の裏装と保護カバ
ー層との間にはさまれた粘着性マトリックスのトリラミ
ネートで構成されるパッチを次のように調製した：シク
ロヘキサン（５０％ ｗ／ｖ）中の圧感受性シリコーン
粘着組成物ＢＩＯＰＳＡＴＭ Ｑ７−２９２０（Ｄｏｗ
Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃｏｒｐ．， Ｍｉｄｌａｎｄ，
Ｍｉｃｈｉｇａｎ， Ｕ．Ｓ．Ａ．）に、十分なβＡＥ
Ｄを加え、０．５％のβＡＥＤ組成物を得る。粘着物を
ポリエステルフィルムに添付して連続層を提供し、約２
ｍｇ／ｃｍ２の活性薬剤を提供する。次いで粘着物を含
むフィルムを１０ｃｍ２のパッチにする。パッチを保護
層でカバーし、パッチの適用前に取り除く。パッチは、
浸透強化物（例えば、シクロデキストリン、ブチル化ヒ
ドロキシアニソール、またはブチル化ヒドロキシトルエ
ン）を含有して調製し得る。しかし、本発明の活性薬剤
は表皮組織への適用に有効であることが思い出される。
パッチを薄いまたは擦りむいた皮膚に適用する場合、浸
透強化物を加える必要はほとんどない。

【００８９】本発明の組成物は、放射線療法または化学
療法の間、または、環境の災難または治療の結果のいず
れで被照射が起こる場合でも放射線照射に曝した後に、
予防的に投与され得る。他の事例は、これらの免疫の正
方向の調節因子の使用が適切である場合、火傷、再生不
良性貧血および再生不能性貧血、糖尿病、および初老間
で流行している流行病における治療にある。それらの使
用はまた、心筋疾患および膵疾患に関係のあるデータに
より示されたように、危険な感染生物に曝した影響を避
けるまたは軽減するのに有益である。そのような使用は
特に、ＨＩＶ感染のような免疫系を標的にする微生物に
曝された群において示唆された。ある事例では、本明細
書中で教示される組成物はまた、過敏反応を中和するブ
ロック抗体の生成における免疫調整薬として使用され得
る。

【００９０】上記に示したように、内臓の手術、または
他の「ひどい」外科手術を行う予定にある被験体は、β
ＡＥＤまたはβＡＥＴを予防的に投与され得る。侵襲性
歯科手術または口腔内手術前に本明細書中で教示された
ような組成物を使用することが考えられる。

【００９１】表に示し、上記に考察したように、本発明
の組成物は細菌の組織への付着を避けるために使用され
得る。組成物の投与による細胞の細胞への付着の防止は
また、血栓症の防止に適用される。本発明の組成物は、
血栓症の形成の防止が必要な場合、血管への遅延性点滴
として投与され得る。そのような使用の例は、動脈への
点滴の結果の血栓崩壊または脳血栓症の防止である。膀
胱への点滴もまた尿路感染の防止または治療に有効であ
る。βＡＥＤまたはβＡＥＴの投与は、感染性病巣の形
成の防止の手段として用いられ得る。

【００９２】βＡＥＤおよびβＡＥＴは両方とも、紫外
線変質（ｄｅｐｒａｖａｔｉｏｎ）の影響を克服するの
に有効である。従って、光線変質（通常、季節性適応障
害という）に関する抑制の影響を克服するために、この
組成物の投与が適切である。

【００９３】βＡＥＤおよびβＡＥＴは、免疫原への応
答を増大させるためにワクチン接種での付加物として用
いられ得る。これら薬剤は、ワクチンへの応答を増大さ
せるだけでなく、体が特異抗体の増加に応答する前に、
疾患に対して防御する能力もまた増大させる。そのよう
な使用は、免疫応答の阻害が、例えば悪性疾患、ＡＩＤ
Ｓ、または農薬に曝されるような環境因子に冒された被
験体における場合と同様に複雑な因子であり得る事例に
おいて特に適する。もちろん、ワクチンへの付加物とし
ての使用は、ヒト以外の脊椎動物に適用できることが理
解される。それは、ペット、酪農動物、肉の生産用の動
物、魚および鶏のワクチン接種を含む。

【００９４】鶏は特に拘束された条件で生存している場
合に、感染症にかかる傾向がある。コクシジウム症、サ
ルモネラ感染症、ウイルス感染症（白血病および肉腫
（レトロウイルスにより起こる）のような悪性疾患を生
じるものを含む）は、現在の商業的な条件下で成長した
鶏の間で特に一般的である。本発明の活性薬剤は、外胚
葉起源の組織と薬剤とが接触に至るいかなる方法によっ
ても与えられ得る。

【００９５】ヒトでのコクサッキーウイルスの影響は、
既に知られている。そのような影響を避ける価値は、特
に子供においては明らかである。水痘帯状ヘルペスのよ
うな他のウイルスの影響は、初老において衰弱させる疾
患の重要な原因と考えられる。さらに、感受性のある大
人での水痘はしばしば重い疾患を引き起こす。子供で
は、水痘は、子供が免疫抑制治療をうけているか、また
は一般的に免疫不全である場合に、死を引き起こし得
る。βＡＥＤおよびβＡＥＴは、感染に曝された感受性
患者の予防処置に有用である。最終的に、ＨＳＶ感染か
らの胎児および新生児の防御が、本発明の大変重要な適
用である。βＡＥＤおよびβＡＥＴは、新生児の防御の
手段としてＨＳＶ感染女性への第三の三ヶ月間の間に投
与され得る。

【００９６】インビトロにおいて、これらの化合物はリ
ンパ球の増殖を誘導するための市販仕様で使用され得
る。βＡＥＤおよびβＡＥＴを用いると、組織培養での
そのような増殖産物の生成が増大する。臨床的仕様で
は、βＡＥＤおよびβＡＥＴは、感染と戦う患者の能力
を効果的に増強するために与えられ得る。患者リンパ球
を引き出し、βＡＥＤまたはβＡＥＴを含む培地中にイ
ンビトロで再生して、リンパ球の増殖を増加させ得る。
次いで応答に対してそのように感作させたリンパ球を患
者に再導入し得た。悪性疾患または他の細胞性疾患のよ
うな場合に、機能不全細胞は、増殖培地中で増殖する前
に既知の方法により不活性化され得る。

【００９７】本発明の組成物はまた、病原生物による感
染の結果から動物を防御するために予防的に使用され得
る。売買するための船積みのストレス下で、動物はしば
しば、普通は重傷ではないが出荷所への途中で動物に大
きな体重の減少を引き起こし得る感染に感受性になる。
そのような減少は、本明細書に開示したβＡＥＤおよび
βＡＥＴおよび類似体の投与により避けられ得る。活性
薬剤は、パッチ、注射により、または食餌中に与えられ
得る。外胚葉起源の組織へ曝す期間を延ばす場合に上記
活性薬剤が最も効果的であるので、活性薬剤をＧＩ管を
通して投与する場合に、組成物は腸粘膜への活性薬剤の
露出期間を延ばすように、そして上部ＧＩ管における破
壊から薬剤を守るように改変される。従って、腸での徐
放性効果のあるカプセルの使用が適する。カプセルは、
動物に投与するためにえさ中に入れられ得る。大腸の感
染を治療するために、活性薬剤は持続浣腸剤により与え
られ得る。

【００９８】βＡＥＤおよびβＡＥＴは口腔、咽頭、お
よび鼻腔の粘膜へ、錠剤、ロゼンジによる投与、口腔−
咽頭腔中で使用するスプレーとしてまたは鼻のスプレー
としての投与により投与され得る。

【００９９】皮膚への投与は、パッチを用いて行われ
得、これは皮膚へ適用されるべき支持体に活性薬剤をし
み込ませている。宿主が哺乳類または鳥の場合、パッチ
を適用する領域を剃るかまたは毛を除く必要があり得
る。

【０１００】投与の好ましい方法は、持続投与としての
皮下注射による。皮下注射は容易に行われ、効果はかな
り長期に続くので、その方法は特に哺乳類への活性薬剤
の投与に適する。

【０１０１】βＡＥＤおよびβＡＥＴは既に体内に天然
成分として存在する。それらは、安全であると知られて
いるレベルで重篤な毒性の問題を示さない；それらは化
学的にきわめて安定であることが明らかである。

【０１０２】使用される用量は、宿主の大きさおよび状
態に依存する。本明細書中に示された試験データは小動
物において得られた。大きな成体哺乳動物では、０．２
ｍｇ／ｄａから３０ｍｇ／ｄａのＡＥＤの毎日の用量が
好ましい用量である。ＡＥＴに関しては、好ましい用量
は通常０．００１ｍｇ／ｄａから２０ｍｇ／ｄａの範囲
であり、さらに好ましい用量では０．００１ｍｇ／ｄａ
から１ｍｇ／ｄａである。しかし、用量は投与経路に依
存して変化する。皮下、吸入、およびくも膜下内投与
は、活性薬剤の用量が低いことを必要とする方法であ
る。

【０１０３】もちろん、保護基を有するβＡＥＤおよび
βＡＥＴの類似体は、標的組織へのβＡＥＤまたはβＡ
ＥＴの送達の手段として宿主に投与され得る。アシル化
は、化合物を保護する好ましい方法である。ここでＲ１
がＣＯＲ２であるアシル化化合物もまたβＡＥＤおよび
βＡＥＴを調製するための開始物質としての使用に適す
る化合物である。

【０１０４】活性薬剤、βＡＥＤおよびβＡＥＴは、他
の活性薬剤と共同で与えられ得る。他の活性成分は同時
に与えられ得るか、またはβＡＥＤまたはβＡＥＴを含
む組成物中に取り込まれ得る。βＡＥＤおよびβＡＥＴ
は、正方向の調節の防御免疫応答によりこれらの薬剤の
活性を強めるために、抗生物質、抗ウイルス薬、抗真菌
薬、駆虫薬のような抗感染薬とともに与えられ得る。抗
ウイルス薬は、例えばジデオキシイノシン、ＡＺＴ、ア
シクロビルなどを含む。ＡＥＤおよびＡＥＴと組合せら
れ得る他の活性薬剤は、エピネフィリンのような抗アレ
ルギー薬剤を含む。

【０１０５】最後に、βＡＥＤおよびβＡＥＴを含む医
薬組成物は、免疫抑制治療により悪化する感染を患った
被験体においてウイルス感染と戦うために使用するの
に、特に価値がある。組織移植した患者での主な合併症
の１つは、通常は重篤な症状を引き起こさないウイルス
での日和見感染である。本発明の組成物は、免疫応答の
急性防御調節を引き起こすので、これを用いることによ
り、医療チームは、抵抗できない感染を避けるために免
疫応答を調節する一方、移植拒絶を避けるために「シー
ソー」治療に患者を置き得る。

【０１０６】

【発明の効果】ＤＨＥＡ投与で認められる望ましくない
副作用を引き起こすことなく免疫系の防御調節を増進さ
せる薬剤は、感染に対する宿主耐性の特に有利な改善を
提供する。次に、免疫系の防御調節は、化学療法剤の低
投与量の使用で効果が得られ得、広範囲の防御を伴った
即効性の応答を提供する。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ５−アンドロステン３β，７β，１７β
   トリオールの実質的に立体特異的な生成のための方法で
   あって、３β，１７β−ジアセトキシアンドロスト−５
   −エン−７−オンをイソプロパノール中でアルミニウム
   イソプロポシキドで還元する工程を包含する、方法。
2. 【請求項２】５−アンドロステン３β，７β，１７βト
   リオールの実質的に立体特異的な生成のための方法であ
   って、３β，１７β−ジアセトキシアンドロスト−５−
   エン−７−オンをペンタン中でトリイソブチルアルミニ
   ウムで還元して３β，１７β−ジアセトキシ−７β−ヒ
   ドロキシアンドロスト−５−エンを生成し、続けてアセ
   トキシ基を除去する工程を包含する、方法。