JP2002265497A - 生理活性ペプチドニューロメジンｕの高活性誘導体 - Google Patents
生理活性ペプチドニューロメジンｕの高活性誘導体Info
- Publication number
- JP2002265497A JP2002265497A JP2001069500A JP2001069500A JP2002265497A JP 2002265497 A JP2002265497 A JP 2002265497A JP 2001069500 A JP2001069500 A JP 2001069500A JP 2001069500 A JP2001069500 A JP 2001069500A JP 2002265497 A JP2002265497 A JP 2002265497A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- peptide
- neuromedin
- acceptable salt
- pharmacologically acceptable
- amino acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】本発明は、ニューロメジンＵ類の高活性新規ペ
プチド誘導体を提供することを目的とする。 【解決手段】次の式（１） 【化２５】 （式中、１位Ｘは疎水性性質を有する基：芳香族性アシ
ル基、環状脂肪族性アシル基を表す）で表されるアミノ
酸配列を有するペプチド誘導体又はそれらの薬理学的に
許容される塩類を提供する。本発明のペプチド誘導体は
生理活性ペプチドニューロメジンＵ様ラット子宮筋収縮
活性を有し、その活性発現様式はラット子宮筋上のニュ
ーロメジンＵレセプターと強固に結合していると考えら
れる。
プチド誘導体を提供することを目的とする。 【解決手段】次の式（１） 【化２５】 （式中、１位Ｘは疎水性性質を有する基：芳香族性アシ
ル基、環状脂肪族性アシル基を表す）で表されるアミノ
酸配列を有するペプチド誘導体又はそれらの薬理学的に
許容される塩類を提供する。本発明のペプチド誘導体は
生理活性ペプチドニューロメジンＵ様ラット子宮筋収縮
活性を有し、その活性発現様式はラット子宮筋上のニュ
ーロメジンＵレセプターと強固に結合していると考えら
れる。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明はペプチド誘導体に関
する。さらに詳しくは、本発明は生理活性ペプチドのニ
ューロメジンＵ様式の高活性ペプチド誘導体に関する。
する。さらに詳しくは、本発明は生理活性ペプチドのニ
ューロメジンＵ様式の高活性ペプチド誘導体に関する。
【０００２】
【従来の技術】ニューロメジンＵ(NMU)は1985年、南野
らにより摘出平滑筋組織の収縮を指標とした検索方法に
より、ブタ脊髄抽出物中より単離構造決定されたペプチ
ドで、８アミノ酸残基(p-NMU-8)と２５アミノ酸残基(p-
NMU-25)から構成される２分子形態として単離された。
らにより摘出平滑筋組織の収縮を指標とした検索方法に
より、ブタ脊髄抽出物中より単離構造決定されたペプチ
ドで、８アミノ酸残基(p-NMU-8)と２５アミノ酸残基(p-
NMU-25)から構成される２分子形態として単離された。
【化１２】 p-NMU-8 : H-Tyr-Phe-Leu-Phe-Arg-Pro-Arg-Asn-NH2
【化１３】p-NMU-25 : H-Phe-Lys-Val-Asp-Glu-Glu-Phe
-Gln-Gly-Pro-Ile-Val-Ser-Gln-Asn-Arg-Arg-Tyr-Phe-L
eu-Phe-Arg-Pro-Arg-Asn-NH2ニューロメジンＵはラット
子宮筋を特異的に収縮し、また、血圧上昇作用を有する
[南野ら，Biochem. Biophys. Res. Commun. 130巻, 107
8-1085頁]。ニューロメジンＵをラット脳室内に投与す
ると食欲が抑制され、ニューロメジンＵが摂食行動の中
枢制御にかかわっていることが示された[A.D.Howardら,
ネイチャー(Nature), 406巻, 70-75頁]。
-Gln-Gly-Pro-Ile-Val-Ser-Gln-Asn-Arg-Arg-Tyr-Phe-L
eu-Phe-Arg-Pro-Arg-Asn-NH2ニューロメジンＵはラット
子宮筋を特異的に収縮し、また、血圧上昇作用を有する
[南野ら，Biochem. Biophys. Res. Commun. 130巻, 107
8-1085頁]。ニューロメジンＵをラット脳室内に投与す
ると食欲が抑制され、ニューロメジンＵが摂食行動の中
枢制御にかかわっていることが示された[A.D.Howardら,
ネイチャー(Nature), 406巻, 70-75頁]。
【０００３】上記のニューロメジンＵは生体内に存在
し、子宮筋収縮作用を有していることから、分娩に関す
る内因性因子と推測される。また、中枢性摂食行動抑制
に関与していることから、脳内での神経伝達にかかわっ
ていることも推定される。
し、子宮筋収縮作用を有していることから、分娩に関す
る内因性因子と推測される。また、中枢性摂食行動抑制
に関与していることから、脳内での神経伝達にかかわっ
ていることも推定される。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】８アミノ酸残基(p-NMU
-8)と２５アミノ酸残基(p-NMU-25)とを比較すると２５
アミノ酸残基(p-NMU-25)の方がより高活性であるが、８
アミノ酸残基(p-NMU-8)にても２５アミノ酸残基(p-NMU-
25)と同等以上の高活性物質が得られれば、化学合成す
る上で１／３以下の合成材料、時間及び労力ですむ。更
に、本発明のニューロメジンＵ誘導体はp-NMU-8またはp-
NMU-25よりも微量によって高活性を示す誘導体であり、
研究用及び医薬品としての応用が期待される。本発明の
ニューロメジンＵ誘導体の生理作用は細胞膜上のニュー
ロメジンＵ受容体に強力に結合して発現されると考えら
れるため、各種組織細胞膜上のニューロメジンＵ受容体
の探索研究に役立つ。また、上記薬理作用にある分娩後
の子宮収縮と止血薬および腸管組織特異的な止血薬とし
て、役立つことが期待される。また、中枢性食欲抑制に
よる、過食症の治療薬、肥満防止効果に基づく２型糖尿
病の予防薬になる可能性があると考えられる。そこで本
発明は、ニューロメジンＵ類の高活性新規ペプチド誘導
体を提供することを目的とする。
-8)と２５アミノ酸残基(p-NMU-25)とを比較すると２５
アミノ酸残基(p-NMU-25)の方がより高活性であるが、８
アミノ酸残基(p-NMU-8)にても２５アミノ酸残基(p-NMU-
25)と同等以上の高活性物質が得られれば、化学合成す
る上で１／３以下の合成材料、時間及び労力ですむ。更
に、本発明のニューロメジンＵ誘導体はp-NMU-8またはp-
NMU-25よりも微量によって高活性を示す誘導体であり、
研究用及び医薬品としての応用が期待される。本発明の
ニューロメジンＵ誘導体の生理作用は細胞膜上のニュー
ロメジンＵ受容体に強力に結合して発現されると考えら
れるため、各種組織細胞膜上のニューロメジンＵ受容体
の探索研究に役立つ。また、上記薬理作用にある分娩後
の子宮収縮と止血薬および腸管組織特異的な止血薬とし
て、役立つことが期待される。また、中枢性食欲抑制に
よる、過食症の治療薬、肥満防止効果に基づく２型糖尿
病の予防薬になる可能性があると考えられる。そこで本
発明は、ニューロメジンＵ類の高活性新規ペプチド誘導
体を提供することを目的とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、ニューロ
メジンＵの構造と平滑筋収縮作用の相関研究を続け、活
性を上昇させるペプチド構造部位を特定し、その構造部
を修飾することによってニューロメジンＵより高活性な
平滑筋収縮作用を有する本発明のペプチド誘導体を完成
したものである。以下本発明に係る新規ペプチド誘導体
について述べる。
メジンＵの構造と平滑筋収縮作用の相関研究を続け、活
性を上昇させるペプチド構造部位を特定し、その構造部
を修飾することによってニューロメジンＵより高活性な
平滑筋収縮作用を有する本発明のペプチド誘導体を完成
したものである。以下本発明に係る新規ペプチド誘導体
について述べる。
【０００６】次の式（１）
【化１４】 （式中、１位Ｘは疎水性性質を有する基：芳香族性アシ
ル基、環状脂肪族性アシル基を表す）で表されるアミノ
酸配列を有するペプチド誘導体又はそれらの薬理学的に
許容される塩類を提供する。
ル基、環状脂肪族性アシル基を表す）で表されるアミノ
酸配列を有するペプチド誘導体又はそれらの薬理学的に
許容される塩類を提供する。
【０００７】本発明のペプチド誘導体の薬理学的に許容
される塩として塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩などの無機酸
付加塩類、クエン酸塩、リンゴ酸塩、シュウ酸塩、酢酸
塩などの有機酸塩類があげられる。
される塩として塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩などの無機酸
付加塩類、クエン酸塩、リンゴ酸塩、シュウ酸塩、酢酸
塩などの有機酸塩類があげられる。
【０００８】式（１）の３位 L-ロイシン残基は塩基性
アミノ酸残基、又は、芳香族性アミノ酸残基に置換して
も良く、塩基性アミノ酸残基としては、例えば、L-リジ
ン、L-アルギニン、L-ヒスチジン残基などがあげられ、
芳香族性アミノ酸残基としては例えば、L-トリプトファ
ン、L-フェニルグリシン、L-ホモフェニルアラニンなど
が上げられる。
アミノ酸残基、又は、芳香族性アミノ酸残基に置換して
も良く、塩基性アミノ酸残基としては、例えば、L-リジ
ン、L-アルギニン、L-ヒスチジン残基などがあげられ、
芳香族性アミノ酸残基としては例えば、L-トリプトファ
ン、L-フェニルグリシン、L-ホモフェニルアラニンなど
が上げられる。
【０００９】また、式（１）中のアミノ酸は、L-フェニ
ルアラニン、L-ロイシン、L-アルギニン、L-プロリン、
L-アスパラギン、等のL-アミノ酸残基である。
ルアラニン、L-ロイシン、L-アルギニン、L-プロリン、
L-アスパラギン、等のL-アミノ酸残基である。
【００１０】本発明の望ましいペプチド誘導体として上
記式（１）のＸを中心に以下説明するが、他のアミノ酸
残基については請求項１記載の発明と同様である。
記式（１）のＸを中心に以下説明するが、他のアミノ酸
残基については請求項１記載の発明と同様である。
【００１１】請求項２記載の発明は次の式（２）
【化１５】 で表される[１-Adamantaneacetyl1]-NMU-8からなるペプ
チド誘導体又はそれらの薬理学的に許容される塩類を提
供する。
チド誘導体又はそれらの薬理学的に許容される塩類を提
供する。
【００１２】請求項３記載の発明は次の式（３）
【化１６】 で表される[１-Adamantanecarbonyl1]-NMU-8からなるペ
プチド誘導体又はそれらの薬理学的に許容される塩類を
提供する。
プチド誘導体又はそれらの薬理学的に許容される塩類を
提供する。
【００１３】請求項４記載の発明は次の式（４）
【化１７】 で表される[3-Noradamantanecarbonyl1]-NMU-8からなる
ペプチド誘導体又はそれらの薬理学的に許容される塩類
を提供する。
ペプチド誘導体又はそれらの薬理学的に許容される塩類
を提供する。
【００１４】請求項５記載の発明は次の式（５）
【化１８】 で表される[2-Norbornaneacetyl1]-NMU-8からなるペプ
チド誘導体又はそれらの薬理学的に許容される塩類を提
供する。
チド誘導体又はそれらの薬理学的に許容される塩類を提
供する。
【００１５】請求項６記載の発明は次の式（６）
【化１９】 で表される[5-Norbornene-2-carbonyl1]-NMU-8からなる
誘導体又はそれらの薬理学的に許容される塩類を提供す
る。
誘導体又はそれらの薬理学的に許容される塩類を提供す
る。
【００１６】請求項７記載の発明は次の式（７）
【化２０】 で表される[１-Pyreneacetyl1]-NMU-8からなるペプチド
誘導体又はそれらの薬理学的に許容される塩類を提供す
る。
誘導体又はそれらの薬理学的に許容される塩類を提供す
る。
【００１７】請求項８記載の発明は次の式（８）
【化２１】 で表される[9-Fluorenylmethoxycarbonyl1]-NMU-8から
なるペプチド誘導体又はそれらの薬理学的に許容される
塩類を提供する。
なるペプチド誘導体又はそれらの薬理学的に許容される
塩類を提供する。
【００１８】請求項９記載の発明は次の式（９）
【化２２】 で表される[Indole-3-acetyl1]-NMU-8からなるペプチド
誘導体又はそれらの薬理学的に許容される塩類を提供す
る。
誘導体又はそれらの薬理学的に許容される塩類を提供す
る。
【００１９】請求項１０記載の発明は次の式（１０）
【化２３】 で表される[D-Tryptophan1]-NMU-8からなるペプチド誘
導体又はそれらの薬理学的に許容される塩類を提供す
る。
導体又はそれらの薬理学的に許容される塩類を提供す
る。
【００２０】請求項１１記載の発明は次の式（１１）
【化２４】 で表され[5-dimethylamino-1-naphthalenesulfonyl1]-N
MU-8からなるペプチド誘導体又はそれらの薬理学的に許
容される塩類を提供する。
MU-8からなるペプチド誘導体又はそれらの薬理学的に許
容される塩類を提供する。
【００２１】
【発明の実施の形態】本発明に係るペプチド誘導体は、
Boc strategy または Fmoc strategy に基づく固相法、
または液相法等の公知のペプチド合成方法により合成す
ることが出来る。以下、望ましい実施の形態例を説明す
る。
Boc strategy または Fmoc strategy に基づく固相法、
または液相法等の公知のペプチド合成方法により合成す
ることが出来る。以下、望ましい実施の形態例を説明す
る。
【００２２】まず、本発明に係るペプチド誘導体の合成
に使用した試薬類、溶媒等を記載するが、使用目的及び
作用が一致する限りこれに限定されるものではない。 アミノ酸誘導体：Boc-D-Trp-OHを除き、Boc-Asn-OH, Bo
c-Arg(Tos)-OH, Boc-Leu-OH, Boc-Phe-OH, Boc-Pro-OH,
Boc-His(Bom)-OH, Boc-Ile-OH, Boc-Lys(Cl-Z)-OH, Boc
-Trp-OH, Boc-Tyr(Cl2-Bzl)-OH, Boc-Val-OH, Boc-Phg-
OH, Boc-Hph-OHこれらは全てL-型アミノ酸であり、渡辺
化学及びペプチド研究所より購入し使用した。ここでBo
c = tert-butyloxycarbonyl，Bom = benzyloxymethyl，
Cl-Z = 2-chlorobenzyloxycarbonyl，Cl2-Bzl = 2,6-di
chlorobenzylをそれぞれ示す。
に使用した試薬類、溶媒等を記載するが、使用目的及び
作用が一致する限りこれに限定されるものではない。 アミノ酸誘導体：Boc-D-Trp-OHを除き、Boc-Asn-OH, Bo
c-Arg(Tos)-OH, Boc-Leu-OH, Boc-Phe-OH, Boc-Pro-OH,
Boc-His(Bom)-OH, Boc-Ile-OH, Boc-Lys(Cl-Z)-OH, Boc
-Trp-OH, Boc-Tyr(Cl2-Bzl)-OH, Boc-Val-OH, Boc-Phg-
OH, Boc-Hph-OHこれらは全てL-型アミノ酸であり、渡辺
化学及びペプチド研究所より購入し使用した。ここでBo
c = tert-butyloxycarbonyl，Bom = benzyloxymethyl，
Cl-Z = 2-chlorobenzyloxycarbonyl，Cl2-Bzl = 2,6-di
chlorobenzylをそれぞれ示す。
【００２３】原料カルボン酸：1-Adamantaneacetic aci
d, 1-Adamantanecarboxylic acid,3-Noradamantanecarb
oxylic acid, 2-Norbornaneacetic acid, 5-Norbornene
-2-carboxylic acid, 1-Pyreneacetic acid, 9-Fluoren
ylmethoxycarboxylic acid, Indole-3-acetic acid は
東京化成工業、和光純薬工業、Aldrich より購入し使用
した。
d, 1-Adamantanecarboxylic acid,3-Noradamantanecarb
oxylic acid, 2-Norbornaneacetic acid, 5-Norbornene
-2-carboxylic acid, 1-Pyreneacetic acid, 9-Fluoren
ylmethoxycarboxylic acid, Indole-3-acetic acid は
東京化成工業、和光純薬工業、Aldrich より購入し使用
した。
【００２４】ポリスチレン樹脂：ベンズヒドリルアミン
樹脂は渡辺化学及びペプチド研究所より購入し使用し
た。
樹脂は渡辺化学及びペプチド研究所より購入し使用し
た。
【００２５】溶媒：特級の NMP = N-methylpyrrolidon
e, TFA = trifluoroacetic acid 及び DMAA = N,N’-di
methylacetamide は渡辺化学より、DCM = dichlorometh
ane,TEA = triethylamine, DMF = N,N’-dimethylforma
mide, MeOH = methyl alcohol, EtOH = ethyl alcohol
及び BuOH = butyl alcohol は和光純薬工業より、その
他の溶媒は半井化学より購入した。
e, TFA = trifluoroacetic acid 及び DMAA = N,N’-di
methylacetamide は渡辺化学より、DCM = dichlorometh
ane,TEA = triethylamine, DMF = N,N’-dimethylforma
mide, MeOH = methyl alcohol, EtOH = ethyl alcohol
及び BuOH = butyl alcohol は和光純薬工業より、その
他の溶媒は半井化学より購入した。
【００２６】試薬：DCCD = N,N’-dicyclohexylcarbodi
imide HOBt = 1-hydroxybenzotriazole 試薬は渡辺化学
及びペプチド研究所より購入した。
imide HOBt = 1-hydroxybenzotriazole 試薬は渡辺化学
及びペプチド研究所より購入した。
【００２７】ペプチド固相合成機はベックマンシステム
990ペプチドシンセサイザー(Beckman system 990 pepti
de synthesizer) を使用した。比旋光度は DIP-370 型
デジタル旋光計（日本分光）で測定した。ペプチドの酸
分解物のアミノ酸分析は、ベックマンシステム7300ハイ
パフォーマンスアナライザー(Beckman system 7300 hig
h performance analyzer) を使用した。高速液体クロマ
トグラフィー(HPLC) 装置は、モデル590ポンプ、510ポ
ンプ(Waters) の２台からなるポンプをモデル680グラジ
ェントコントローラー(Waters)よって高圧混合で溶媒の
濃度勾配調整を行い、試料を注入するインジェクターと
してモデル U6K(Waters) を使用した。検出器として UV
8011(Tosoh) 用い、データー記録装置としてモデル730
を使用してデーター処理した。
990ペプチドシンセサイザー(Beckman system 990 pepti
de synthesizer) を使用した。比旋光度は DIP-370 型
デジタル旋光計（日本分光）で測定した。ペプチドの酸
分解物のアミノ酸分析は、ベックマンシステム7300ハイ
パフォーマンスアナライザー(Beckman system 7300 hig
h performance analyzer) を使用した。高速液体クロマ
トグラフィー(HPLC) 装置は、モデル590ポンプ、510ポ
ンプ(Waters) の２台からなるポンプをモデル680グラジ
ェントコントローラー(Waters)よって高圧混合で溶媒の
濃度勾配調整を行い、試料を注入するインジェクターと
してモデル U6K(Waters) を使用した。検出器として UV
8011(Tosoh) 用い、データー記録装置としてモデル730
を使用してデーター処理した。
【００２８】次に一般的な固相合成の手順を Boc strat
egy の場合で説明する。 １．Boc-アミノ酸-ベンズヒドリルアミン樹脂の合成 ベンズヒドリルアミン樹脂（HCl塩）(5g, 0.55meq/g)
を、DCM(25ml) 中で２時間攪拌後 10% TEA/DCM(30ml)
により中和した。さらに、DCM(25ml) で洗浄を繰り返し
た。Boc-アミノ酸-OH(3mmol)のDMF:DCM(5ml:15ml)溶
液、 DCCD(619mg, 3mmol)のDCM(5ml)溶液を加え、２時
間縮合反応させた。次いで、樹脂上の未反応アミノ基を
アセチル化反応で遮蔽し、Boc-アミノ酸樹脂とした。P2
O5存在下、減圧乾燥した。
egy の場合で説明する。 １．Boc-アミノ酸-ベンズヒドリルアミン樹脂の合成 ベンズヒドリルアミン樹脂（HCl塩）(5g, 0.55meq/g)
を、DCM(25ml) 中で２時間攪拌後 10% TEA/DCM(30ml)
により中和した。さらに、DCM(25ml) で洗浄を繰り返し
た。Boc-アミノ酸-OH(3mmol)のDMF:DCM(5ml:15ml)溶
液、 DCCD(619mg, 3mmol)のDCM(5ml)溶液を加え、２時
間縮合反応させた。次いで、樹脂上の未反応アミノ基を
アセチル化反応で遮蔽し、Boc-アミノ酸樹脂とした。P2
O5存在下、減圧乾燥した。
【００２９】２．固相樹脂上でのBoc-アミノ酸の縮合 （１） Boc-アミノ酸樹脂とDCMを攪拌し、膨潤させ
た。 （２） 33% TFA/DCM で Boc 基の除去を行った。 （３） 10% TEA/DCM で中和し、樹脂を平衡化させた。 （４） DCM (10ml) で攪拌し、残留する TEA を除去し
た。 （５） Boc-アミノ酸(0.4mmol, 2eq)及び HOBt(0.4mm
ol, 2eq)のDMF:DCM (1:2)溶液を加え、５分間攪拌して
樹脂と平衡化させた。 （６） DCCD(0.4mmol, 2eq)/DCM を加えて２時間攪拌
し、縮合反応を行った。 （７） DMFで攪拌し、続いて、DCM で攪拌し濾過、樹脂
を洗浄した。 （８） 未反応アミノ基のアセチル化反応：１）10% TE
A /DCM で攪拌後、樹脂を平衡化した。MeOH , DCM の順
で攪拌後濾過し、残留する TEA を除去した。 ２）DMF 存在下、無水酢酸(10eq) とpyridine (10eq)
を加えて ２０分間反応した。 （９） MeOH, DCM の順で、樹脂を洗浄した。
た。 （２） 33% TFA/DCM で Boc 基の除去を行った。 （３） 10% TEA/DCM で中和し、樹脂を平衡化させた。 （４） DCM (10ml) で攪拌し、残留する TEA を除去し
た。 （５） Boc-アミノ酸(0.4mmol, 2eq)及び HOBt(0.4mm
ol, 2eq)のDMF:DCM (1:2)溶液を加え、５分間攪拌して
樹脂と平衡化させた。 （６） DCCD(0.4mmol, 2eq)/DCM を加えて２時間攪拌
し、縮合反応を行った。 （７） DMFで攪拌し、続いて、DCM で攪拌し濾過、樹脂
を洗浄した。 （８） 未反応アミノ基のアセチル化反応：１）10% TE
A /DCM で攪拌後、樹脂を平衡化した。MeOH , DCM の順
で攪拌後濾過し、残留する TEA を除去した。 ２）DMF 存在下、無水酢酸(10eq) とpyridine (10eq)
を加えて ２０分間反応した。 （９） MeOH, DCM の順で、樹脂を洗浄した。
【００３０】３．固相樹脂上でのペプチド鎖の延長 出発原料樹脂上に、上記の Boc-アミノ酸の縮合反応を
繰り返してペプチド鎖を延長し、２位フェニルアラニン
残基をＮ−末端とするニューロメジンＵのＣ−末端部７
アミノ酸のペプチド樹脂を合成した。
繰り返してペプチド鎖を延長し、２位フェニルアラニン
残基をＮ−末端とするニューロメジンＵのＣ−末端部７
アミノ酸のペプチド樹脂を合成した。
【００３１】４．アミノ末端の各種アシル基の導入反応 各原料カルボン酸を２位フェニルアラニン残基のアミノ
基と縮合反応を行った。尚、縮合反応は上記の Boc-ア
ミノ酸の縮合反応で示したような公知の方法により合成
することが出来る。また、請求項１１記載の式（１１）
からなるペプチド誘導体ついては 5-dimethylamino-1-n
aphthalenesulfonyl chloride (ダンシルクロリド）を
アミノ基に作用させ目的誘導体とした。
基と縮合反応を行った。尚、縮合反応は上記の Boc-ア
ミノ酸の縮合反応で示したような公知の方法により合成
することが出来る。また、請求項１１記載の式（１１）
からなるペプチド誘導体ついては 5-dimethylamino-1-n
aphthalenesulfonyl chloride (ダンシルクロリド）を
アミノ基に作用させ目的誘導体とした。
【００３２】５．保護ペプチド樹脂の無水フッ化水素処
理 ペプチドの最終脱保護と樹脂からの切断を無水フッ化水
素(HF) により行った。乾燥保護ペプチド樹脂に anisol
e(0.5ml) を加え、HF(5ml) を添加し、−２０℃で３０
分間、−１０℃でさらに３０分間攪拌反応させた。つい
で HF を減圧下に留去した。残留物をエーテルで３回洗
浄した。残留物を 50% 酢酸(10ml)で抽出後、凍結乾燥し
粗ペプチドを得た。
理 ペプチドの最終脱保護と樹脂からの切断を無水フッ化水
素(HF) により行った。乾燥保護ペプチド樹脂に anisol
e(0.5ml) を加え、HF(5ml) を添加し、−２０℃で３０
分間、−１０℃でさらに３０分間攪拌反応させた。つい
で HF を減圧下に留去した。残留物をエーテルで３回洗
浄した。残留物を 50% 酢酸(10ml)で抽出後、凍結乾燥し
粗ペプチドを得た。
【００３３】６．逆相 HPLC による精製 逆相系 column (μ-Bondasphere 5μC18-100A, 19 x 15
0mm or YMC-Pack D-ODS-5, 120Å) を用いる HPLC によ
り、ペプチドの精製を行った。移動相としてA = 0.1% T
FA, B = 80% MeCN/0.1% TFA の溶媒を用い、A, B 両用
液の直線濃度勾配をかけ分離を行った。分取した溶出液
を凍結乾燥した。精製ペプチドは数倍モルの塩酸溶液を
添加して再度凍結乾燥した。
0mm or YMC-Pack D-ODS-5, 120Å) を用いる HPLC によ
り、ペプチドの精製を行った。移動相としてA = 0.1% T
FA, B = 80% MeCN/0.1% TFA の溶媒を用い、A, B 両用
液の直線濃度勾配をかけ分離を行った。分取した溶出液
を凍結乾燥した。精製ペプチドは数倍モルの塩酸溶液を
添加して再度凍結乾燥した。
【００３４】７．Toyopearl HW-40 によるゲル濾過 精製ペプチド HCl 塩を 25% MeCN/5mM HCl 溶液に溶か
し、Toyopearl HW-40 column (15 x 470mm) に添加し
た。同溶媒を溶出液として溶出させた。目的画分を集め
て凍結乾燥して最終精製品とした。目的画分の検索に用
いた HP-TLC の展開溶媒は以下の２種類を使用した。 n-BuOH:pyridine:AcOH:H2O (30:20:6:24) (Rf 1 ), n-BuOH:AcOH:AcOEt:H2O (1:1:1:1) (Rf 2 )。
し、Toyopearl HW-40 column (15 x 470mm) に添加し
た。同溶媒を溶出液として溶出させた。目的画分を集め
て凍結乾燥して最終精製品とした。目的画分の検索に用
いた HP-TLC の展開溶媒は以下の２種類を使用した。 n-BuOH:pyridine:AcOH:H2O (30:20:6:24) (Rf 1 ), n-BuOH:AcOH:AcOEt:H2O (1:1:1:1) (Rf 2 )。
【００３５】８．ペプチドの分析と構造確認 （１）アミノ酸分析：ペプチドを 6N HCl 蒸気法により
１３０℃、３時間酸加水分解した。酸分解物はアミノ酸
分析計で分析し、理論量のアミノ酸を確認した。 （２）FAB-MS(fast atom bomberdment mass spectromet
ry)分析：ペプチドを FAB-MS分析し、分子イオンピーク
を確認した。 以上のようにして得られた、本発明の新規ペプチド誘導
体またはその薬理学的に許容される塩は、ニューロメジ
ンＵ様薬理作用の高活性物質としての性質を有してい
た。
１３０℃、３時間酸加水分解した。酸分解物はアミノ酸
分析計で分析し、理論量のアミノ酸を確認した。 （２）FAB-MS(fast atom bomberdment mass spectromet
ry)分析：ペプチドを FAB-MS分析し、分子イオンピーク
を確認した。 以上のようにして得られた、本発明の新規ペプチド誘導
体またはその薬理学的に許容される塩は、ニューロメジ
ンＵ様薬理作用の高活性物質としての性質を有してい
た。
【００３６】
【発明の効果】本発明の新規ペプチド誘導体は、ニュー
ロメジンＵ様の薬理作用を呈する。そのため本発明の新
規なペプチド誘導体もしくはその塩は、子宮筋収縮作用
を有していることから、分娩に伴う子宮復古不全、弛緩
出血の改善、外科手術に伴う止血薬に用いることができ
る。また、中枢性摂食抑制に関与していることから、中
枢性制御による過食症改善、肥満抑制による糖尿病予防
に用いることができる。
ロメジンＵ様の薬理作用を呈する。そのため本発明の新
規なペプチド誘導体もしくはその塩は、子宮筋収縮作用
を有していることから、分娩に伴う子宮復古不全、弛緩
出血の改善、外科手術に伴う止血薬に用いることができ
る。また、中枢性摂食抑制に関与していることから、中
枢性制御による過食症改善、肥満抑制による糖尿病予防
に用いることができる。
【００３７】このペプチド誘導体を治療剤として用いる
場合には、注意深く精製を行ない細菌や発熱物質が存在
しないように注意しなければならない。
場合には、注意深く精製を行ない細菌や発熱物質が存在
しないように注意しなければならない。
【００３８】本明細書の配列表の配列番号は、以下の配
列を示す。 配列番号１：従来の技術の欄で示したブタ脊髄抽出物中
より単離構造決定された８アミノ酸残基（p-NMU-8) か
らなるペプチドのアミノ酸配列を示す。 配列番号２：従来の技術の欄で示したブタ脊髄抽出物中
より単離構造決定された２５アミノ酸残基（p-NMU-25)
からなるペプチドのアミノ酸配列を示す。
列を示す。 配列番号１：従来の技術の欄で示したブタ脊髄抽出物中
より単離構造決定された８アミノ酸残基（p-NMU-8) か
らなるペプチドのアミノ酸配列を示す。 配列番号２：従来の技術の欄で示したブタ脊髄抽出物中
より単離構造決定された２５アミノ酸残基（p-NMU-25)
からなるペプチドのアミノ酸配列を示す。
【００３９】
【配列表】 [Sequence Listing] <110>Tadashi Hashimoto,Naoki Sakura,Katsuro Kurosawa <120>Neuromedin U analog with potent biological activity <130>HU1-084 <160>2 <210>1<211>8<212>PRT<213>Pocine <400>1 Tyr Phe Leu Phe Arg Pro Arg Asn 1 5 <210>2<211>25<212>PRT<213>Pocine <400>2 Phe Lys Val Asp Glu Glu Phe Gln Gly Pro Ile Val Ser Gln Asn Arg 1 5 10 15 Arg Tyr Phe Leu Phe Arg Pro Arg Asn 20 25
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 15/04 Ａ６１Ｐ 43/00 １１１ 43/00 １１１ Ｃ０７Ｋ 14/47 // Ｃ０７Ｋ 14/47 Ａ６１Ｋ 37/02 (72)発明者 橋本 忠 石川県金沢市窪１丁目109 (72)発明者 佐倉 直樹 石川県金沢市西大桑町17−30 (72)発明者 黒澤 克郎 石川県金沢市山科１丁目６番56号 ライオ ンズマンション金沢山科 801号 Ｆターム(参考） 4C084 AA02 AA07 BA01 BA08 BA17 BA31 BA32 CA59 DC50 NA14 ZA532 ZA702 ZA852 ZC022 ZC352 4H045 AA10 AA30 BA14 BA50 CA40 EA21 EA23 FA33 FA44 FA52 FA58
Claims (11)
- 【請求項１】次の式（１） 【化１】 （式中、１位Ｘは疎水性性質を有する基：芳香族性アシ
ル基、環状脂肪族性アシル基を表す）で表されるアミノ
酸配列を有するペプチド誘導体又はそれらの薬理学的に
許容される塩類。 - 【請求項２】次の式（２） 【化２】 で表されるアミノ酸配列を有するペプチド誘導体又はそ
れらの薬理学的に許容される塩類。 - 【請求項３】次の式（３） 【化３】 で表されるアミノ酸配列を有するペプチド誘導体又はそ
れらの薬理学的に許容される塩類。 - 【請求項４】次の式（４） 【化４】 で表されるアミノ酸配列を有するペプチド誘導体又はそ
れらの薬理学的に許容される塩類。 - 【請求項５】次の式（５） 【化５】 で表されるアミノ酸配列を有するペプチド誘導体又はそ
れらの薬理学的に許容される塩類。 - 【請求項６】次の式（６） 【化６】 で表されるアミノ酸配列を有するペプチド誘導体又はそ
れらの薬理学的に許容される塩類。 - 【請求項７】次の式（７） 【化７】 で表されるアミノ酸配列を有するペプチド誘導体又はそ
れらの薬理学的に許容される塩類。 - 【請求項８】次の式（８） 【化８】 で表されるアミノ酸配列を有するペプチド誘導体又はそ
れらの薬理学的に許容される塩類。 - 【請求項９】次の式（９） 【化９】 で表されるアミノ酸配列を有するペプチド誘導体又はそ
れらの薬理学的に許容される塩類。 - 【請求項１０】次の式（１０） 【化１０】 で表されるアミノ酸配列を有するペプチド誘導体又はそ
れらの薬理学的に許容される塩類。 - 【請求項１１】次の式（１１） 【化１１】 で表されるアミノ酸配列を有するペプチド誘導体又はそ
れらの薬理学的に許容される塩類。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001069500A JP2002265497A (ja) | 2001-03-12 | 2001-03-12 | 生理活性ペプチドニューロメジンｕの高活性誘導体 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001069500A JP2002265497A (ja) | 2001-03-12 | 2001-03-12 | 生理活性ペプチドニューロメジンｕの高活性誘導体 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2002265497A true JP2002265497A (ja) | 2002-09-18 |
Family
ID=18927527
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2001069500A Pending JP2002265497A (ja) | 2001-03-12 | 2001-03-12 | 生理活性ペプチドニューロメジンｕの高活性誘導体 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2002265497A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007075439A2 (en) * | 2005-12-16 | 2007-07-05 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for treating obesity and related metabolic disorders |
| CN101448785A (zh) * | 2006-04-03 | 2009-06-03 | 矩阵实验室有限公司 | 新颖的二肽基肽酶iv抑制剂、它们的制备方法以及含有它们的药物组合物 |
| WO2012050227A1 (en) * | 2010-10-13 | 2012-04-19 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Peptide derivative |
-
2001
- 2001-03-12 JP JP2001069500A patent/JP2002265497A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007075439A2 (en) * | 2005-12-16 | 2007-07-05 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for treating obesity and related metabolic disorders |
| WO2007075439A3 (en) * | 2005-12-16 | 2007-12-06 | Amylin Pharmaceuticals Inc | Compositions and methods for treating obesity and related metabolic disorders |
| CN101448785A (zh) * | 2006-04-03 | 2009-06-03 | 矩阵实验室有限公司 | 新颖的二肽基肽酶iv抑制剂、它们的制备方法以及含有它们的药物组合物 |
| WO2012050227A1 (en) * | 2010-10-13 | 2012-04-19 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Peptide derivative |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102171244B (zh) | 糖依赖性胰岛素释放肽的类似物 | |
| DK2409988T3 (en) | Peptide fragments for inducing synthesis of extracellular matrix proteins | |
| EP2323678B1 (en) | Glucose-dependent insulinotropic polypeptide analogues | |
| KR101419332B1 (ko) | 포도당 의존적인 인슐린 분비 자극성 폴리펩타이드의 절단형 유사체 | |
| JPH0532696A (ja) | 副甲状腺ホルモン誘導体 | |
| SK15352000A3 (sk) | Spôsob výroby cyklických peptidov viazaných k polymérnemu nosiču | |
| JP2001527507A (ja) | 改良された環状ｃｒｆ拮抗剤 | |
| JP4229992B2 (ja) | 副甲状腺ホルモンおよび副甲状腺ホルモン関連ペプチドのアナログの合成方法 | |
| WO1991007978A1 (en) | Synthetic calcitonin peptides | |
| KR102520348B1 (ko) | 페길화 생활성 펩타이드 및 그의 용도 | |
| US5786335A (en) | Sulfhydryl containing peptides for treating vascular disease | |
| HASHIMOTO et al. | Structure-activity relationships of neuromedin U. II. Highly potent analogs substituted or modified at the N-terminus of neuromedin U-8 | |
| JP2002265497A (ja) | 生理活性ペプチドニューロメジンｕの高活性誘導体 | |
| ZA200302505B (en) | Urotensin-II agonists and antagonists. | |
| JPS60105697A (ja) | ペプチド及びその製造方法並びに該ペプチドを含有する医薬 | |
| JP3109835B2 (ja) | ペプシンの放出を抑制するためのペプチド | |
| WO1992019644A1 (en) | Vasorelaxant peptide | |
| JP2001270897A (ja) | 生理活性ペプチド | |
| JPH07118292A (ja) | 新規ペプチド及びその塩 |