JP2002090361A - 凝固因子欠乏血漿およびその製造方法 - Google Patents
凝固因子欠乏血漿およびその製造方法Info
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- JP2002090361A JP2002090361A JP2000286307A JP2000286307A JP2002090361A JP 2002090361 A JP2002090361 A JP 2002090361A JP 2000286307 A JP2000286307 A JP 2000286307A JP 2000286307 A JP2000286307 A JP 2000286307A JP 2002090361 A JP2002090361 A JP 2002090361A
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Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【課題】先天的欠乏症の患者血漿を用いることなく、
又、免疫吸着法とは異なる手法を用いる迅速、効率良い
凝固因子欠乏血漿の製造方法の提供。更に原料血漿その
ものが失活していない凝固因子欠乏血漿、凝固因子測定
用凝固因子欠乏血漿もしくは精度管理用血漿、又はこれ
らの血漿を含む測定試薬キットの提供。 【解決手段】ヒト又は動物の血漿に、特定の凝固因子を
吸着する機能を有する合成ポリマーを混合することによ
り、該特定の凝固因子が吸着除去された凝固因子欠乏血
漿、凝固因子測定用血漿もしくは精度管理用血漿が製造
される。上記特定の血漿凝固因子が凝固第Ｖ因子及び／
又は凝固第ＶＩＩＩ因子である。又、合成ポリマーを、
血漿容量の０．５〜５０Ｗ／Ｖ％で用いることを特徴と
する。
又、免疫吸着法とは異なる手法を用いる迅速、効率良い
凝固因子欠乏血漿の製造方法の提供。更に原料血漿その
ものが失活していない凝固因子欠乏血漿、凝固因子測定
用凝固因子欠乏血漿もしくは精度管理用血漿、又はこれ
らの血漿を含む測定試薬キットの提供。 【解決手段】ヒト又は動物の血漿に、特定の凝固因子を
吸着する機能を有する合成ポリマーを混合することによ
り、該特定の凝固因子が吸着除去された凝固因子欠乏血
漿、凝固因子測定用血漿もしくは精度管理用血漿が製造
される。上記特定の血漿凝固因子が凝固第Ｖ因子及び／
又は凝固第ＶＩＩＩ因子である。又、合成ポリマーを、
血漿容量の０．５〜５０Ｗ／Ｖ％で用いることを特徴と
する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、臨床検査診断薬の
分野でとりわけ血液凝固因子測定用の凝固因子欠乏血漿
の製造方法、血液凝固検査用精度管理用血漿の製造方法
および血液凝固因子測定試薬に利用される。
分野でとりわけ血液凝固因子測定用の凝固因子欠乏血漿
の製造方法、血液凝固検査用精度管理用血漿の製造方法
および血液凝固因子測定試薬に利用される。
【０００２】
【従来の技術】血液凝固検査は先天的または後天的な血
液凝固異常を検査するため、広く行なわれている。先天
的な凝固異常として有名な血友病は、血液凝固第ＶＩＩ
Ｉ因子または第ＩＸ因子の欠乏によって起こる疾患であ
る。
液凝固異常を検査するため、広く行なわれている。先天
的な凝固異常として有名な血友病は、血液凝固第ＶＩＩ
Ｉ因子または第ＩＸ因子の欠乏によって起こる疾患であ
る。
【０００３】血液凝固異常の原因を検査するためにはそ
れぞれの血液凝固因子（以下、単に「凝固因子」とい
う。）を測定する必要がある。凝固因子の測定は各凝固
因子欠乏血漿に被検血漿を加えて、凝固時間を測定する
ことにより行なわれている。該凝固因子測定に用いる凝
固因子欠乏血漿は、先天的欠乏症のヒトまたは動物の血
漿を用いるか、或いは各凝固因子に対する抗体を用いた
人工的な免疫吸着法で製造され提供されている。
れぞれの血液凝固因子（以下、単に「凝固因子」とい
う。）を測定する必要がある。凝固因子の測定は各凝固
因子欠乏血漿に被検血漿を加えて、凝固時間を測定する
ことにより行なわれている。該凝固因子測定に用いる凝
固因子欠乏血漿は、先天的欠乏症のヒトまたは動物の血
漿を用いるか、或いは各凝固因子に対する抗体を用いた
人工的な免疫吸着法で製造され提供されている。
【０００４】この、凝固因子欠乏血漿の取得にあたり、
先天的欠乏症の患者から血漿を入手することは患者に大
きな負担を強いることになるという問題がある。この問
題を解決するために考え出されたのが免疫吸着法である
が、免疫吸着法に使用する抗体の調製が非常に困難であ
ったり、大量の抗体を用いて長時間の処理によって調製
されるため、欠乏血漿の製造に多大な費用を要し、更に
原料血漿そのものが失活するといった問題があった。ま
た因子によっては吸着効率が悪く、欠乏度の高い欠乏血
漿が製造できないといった問題もあった。特に第Ｖ因子
または第ＶＩＩＩ因子欠乏血漿を製造するのは困難であ
った。
先天的欠乏症の患者から血漿を入手することは患者に大
きな負担を強いることになるという問題がある。この問
題を解決するために考え出されたのが免疫吸着法である
が、免疫吸着法に使用する抗体の調製が非常に困難であ
ったり、大量の抗体を用いて長時間の処理によって調製
されるため、欠乏血漿の製造に多大な費用を要し、更に
原料血漿そのものが失活するといった問題があった。ま
た因子によっては吸着効率が悪く、欠乏度の高い欠乏血
漿が製造できないといった問題もあった。特に第Ｖ因子
または第ＶＩＩＩ因子欠乏血漿を製造するのは困難であ
った。
【０００５】
【解決しようとする課題】本発明の課題は、先天的欠乏
症の患者血漿を用いることなく、また、免疫吸着法とは
異なる手法を用いることにより、迅速に効率良く凝固因
子欠乏血漿を製造する方法を提供することである。本発
明のさらなる課題は、原料血漿そのものが失活していな
い凝固因子欠乏血漿、凝固因子測定用凝固因子欠乏血漿
もしくは精度管理用血漿、またはこれらの血漿を含む測
定試薬キットを提供することである。
症の患者血漿を用いることなく、また、免疫吸着法とは
異なる手法を用いることにより、迅速に効率良く凝固因
子欠乏血漿を製造する方法を提供することである。本発
明のさらなる課題は、原料血漿そのものが失活していな
い凝固因子欠乏血漿、凝固因子測定用凝固因子欠乏血漿
もしくは精度管理用血漿、またはこれらの血漿を含む測
定試薬キットを提供することである。
【０００６】
【解決する手段】本発明者らは鋭意研究を重ねた結果、
ヒトまたは動物の血漿に、特定の凝固因子を吸着する機
能を有する合成ポリマーを混合することにより、該特定
の凝固因子が効率よく吸着除去されることを見出した。
さらに、かかる手段により得られた凝固因子欠乏血漿を
用いることにより、凝固因子測定用凝固因子欠乏血漿も
しくは精度管理用血漿を簡単に製造できることを見出
し、本発明を完成させるに至った。
ヒトまたは動物の血漿に、特定の凝固因子を吸着する機
能を有する合成ポリマーを混合することにより、該特定
の凝固因子が効率よく吸着除去されることを見出した。
さらに、かかる手段により得られた凝固因子欠乏血漿を
用いることにより、凝固因子測定用凝固因子欠乏血漿も
しくは精度管理用血漿を簡単に製造できることを見出
し、本発明を完成させるに至った。
【０００７】すなわち、本発明は、１．ヒトまたは動物
血漿中の特定の凝固因子を除去する方法において、該特
定の凝固因子を吸着する機能を有する合成ポリマーを用
いることを特徴とする凝固因子欠乏血漿の製造方法、
２．合成ポリマーが、少なくとも疎水性結合、イオン結
合、水素結合またはＶａｎ ｄｅｒ Ｗｅａｌｓ力のい
ずれかの結合能により該特定の凝固因子を吸着させる機
能を有することを特徴とする前項１に記載の凝固因子欠
乏血漿の製造方法、３．合成ポリマーを、血漿容量の
０．５〜５０Ｗ／Ｖ％で用いることを特徴とする前項１
または前項２に記載の凝固因子欠乏血漿の製造方法、
４．特定の凝固因子が凝固第Ｖ因子及び／または凝固第
ＶＩＩＩ因子であることを特徴とする前項１から３のい
ずれか１項に記載の凝固因子欠乏血漿の製造方法、５．
前項１から４のいずれか１項に記載の方法によって製造
されることを特徴とする凝固因子測定用凝固因子欠乏血
漿または凝固検査の精度管理用血漿、６．前項１から４
のいずれか１項に記載の方法によって製造された凝固因
子測定用凝固因子欠乏血漿または凝固検査の精度管理用
血漿、７．前項５または６に記載の凝固因子測定用凝固
因子欠乏血漿を用いることを特徴とする凝固因子測定方
法、８．前項６または７に記載の凝固因子測定用凝固因
子欠乏血漿および／または凝固検査の精度管理用血漿を
含むことを特徴とする凝固因子測定キット、からなる。
血漿中の特定の凝固因子を除去する方法において、該特
定の凝固因子を吸着する機能を有する合成ポリマーを用
いることを特徴とする凝固因子欠乏血漿の製造方法、
２．合成ポリマーが、少なくとも疎水性結合、イオン結
合、水素結合またはＶａｎ ｄｅｒ Ｗｅａｌｓ力のい
ずれかの結合能により該特定の凝固因子を吸着させる機
能を有することを特徴とする前項１に記載の凝固因子欠
乏血漿の製造方法、３．合成ポリマーを、血漿容量の
０．５〜５０Ｗ／Ｖ％で用いることを特徴とする前項１
または前項２に記載の凝固因子欠乏血漿の製造方法、
４．特定の凝固因子が凝固第Ｖ因子及び／または凝固第
ＶＩＩＩ因子であることを特徴とする前項１から３のい
ずれか１項に記載の凝固因子欠乏血漿の製造方法、５．
前項１から４のいずれか１項に記載の方法によって製造
されることを特徴とする凝固因子測定用凝固因子欠乏血
漿または凝固検査の精度管理用血漿、６．前項１から４
のいずれか１項に記載の方法によって製造された凝固因
子測定用凝固因子欠乏血漿または凝固検査の精度管理用
血漿、７．前項５または６に記載の凝固因子測定用凝固
因子欠乏血漿を用いることを特徴とする凝固因子測定方
法、８．前項６または７に記載の凝固因子測定用凝固因
子欠乏血漿および／または凝固検査の精度管理用血漿を
含むことを特徴とする凝固因子測定キット、からなる。
【０００８】
【発明の実施の形態】本発明における特定の凝固因子と
は、例えば凝固第Ｖ因子および／または凝固第ＶＩＩＩ
因子をいう。原料血漿の活性は、正常人の血漿の凝固因
子活性を１００％として、その相対活性で表される。
は、例えば凝固第Ｖ因子および／または凝固第ＶＩＩＩ
因子をいう。原料血漿の活性は、正常人の血漿の凝固因
子活性を１００％として、その相対活性で表される。
【０００９】本発明において、動物血漿中の特定の凝固
因子を吸着する機能を有する合成ポリマーとは、該凝固
因子を吸着する性質を有するものであればよく、特に限
定されないが、好ましくは該凝固因子との関係において
合成ポリマーの構造により少なくとも疎水性結合、イオ
ン結合、水素結合またはＶａｎ ｄｅｒ Ｗｅａｌｓ力
のいずれか１または２以上の結合能により該凝固因子を
吸着する機能を有するポリマーをいい、より好ましくは
主として疎水性結合により該凝固因子を吸着する機能を
有するポリマーをいう。
因子を吸着する機能を有する合成ポリマーとは、該凝固
因子を吸着する性質を有するものであればよく、特に限
定されないが、好ましくは該凝固因子との関係において
合成ポリマーの構造により少なくとも疎水性結合、イオ
ン結合、水素結合またはＶａｎ ｄｅｒ Ｗｅａｌｓ力
のいずれか１または２以上の結合能により該凝固因子を
吸着する機能を有するポリマーをいい、より好ましくは
主として疎水性結合により該凝固因子を吸着する機能を
有するポリマーをいう。
【００１０】ヒトまたは動物血漿中の特定の凝固因子を
吸着除去するための合成ポリマーとして、ポリスチレ
ン、ポリジビニルベンゼン、ジビニルベンゼン−スチレ
ン共重合体またはポリアクリル、およびこれらのポリマ
ーの少なくとも一部に置換基を有しているものが例示さ
れる。
吸着除去するための合成ポリマーとして、ポリスチレ
ン、ポリジビニルベンゼン、ジビニルベンゼン−スチレ
ン共重合体またはポリアクリル、およびこれらのポリマ
ーの少なくとも一部に置換基を有しているものが例示さ
れる。
【００１１】上記合成ポリマーの例として、ポリスチレ
ンラテックス、ポリスチレン−ジビニルベンゼン共重合
体ラテックス、ダイアイオンHPシリーズ（HP10,HP20,H
P,21,HP30,HP40,HP50）、ダイアイオンSP800シリーズ
（SP800,SP825,SP850,SP875）、ダイアイオンSP200シリ
ーズ（SP205,SP206,SP207）、ダイアイオンHPM１G及びH
P2MG、アンバーライトXADシリーズ（XAD-2,XAD-4,XAD-1
6,XAD-2000,XAD-7HP）、ムロキレート、ダウエックスA-
1、アンバーライトCGシリーズ（CG50、CG120、CG400）
アンバーライトIRCシリーズ（IRC50,IRC76）ダイヤイオ
ンCRシリーズ（CR10、CR11、CR20,CRB02）および合成高
分子吸着マット等が挙げられる。
ンラテックス、ポリスチレン−ジビニルベンゼン共重合
体ラテックス、ダイアイオンHPシリーズ（HP10,HP20,H
P,21,HP30,HP40,HP50）、ダイアイオンSP800シリーズ
（SP800,SP825,SP850,SP875）、ダイアイオンSP200シリ
ーズ（SP205,SP206,SP207）、ダイアイオンHPM１G及びH
P2MG、アンバーライトXADシリーズ（XAD-2,XAD-4,XAD-1
6,XAD-2000,XAD-7HP）、ムロキレート、ダウエックスA-
1、アンバーライトCGシリーズ（CG50、CG120、CG400）
アンバーライトIRCシリーズ（IRC50,IRC76）ダイヤイオ
ンCRシリーズ（CR10、CR11、CR20,CRB02）および合成高
分子吸着マット等が挙げられる。
【００１２】本発明において、ヒトまたは動物血漿中の
特定の凝固因子を吸着除去するための合成ポリマーは、
全血漿量に対し、好ましくは０．５〜５０Ｗ／Ｖ％、よ
り好ましくは５〜２０Ｗ／Ｖ％で用いられる。
特定の凝固因子を吸着除去するための合成ポリマーは、
全血漿量に対し、好ましくは０．５〜５０Ｗ／Ｖ％、よ
り好ましくは５〜２０Ｗ／Ｖ％で用いられる。
【００１３】本発明によって製造される凝固因子欠乏血
漿は、上記に例示されたポリマーから選ばれた１または
２種類以上の合成ポリマーをヒトまたは動物血漿に混合
し、該合成ポリマーに該凝固因子を吸着させたのち、ろ
過または遠心除去等の方法で該合成ポリマーを除去する
ことにより得られる。
漿は、上記に例示されたポリマーから選ばれた１または
２種類以上の合成ポリマーをヒトまたは動物血漿に混合
し、該合成ポリマーに該凝固因子を吸着させたのち、ろ
過または遠心除去等の方法で該合成ポリマーを除去する
ことにより得られる。
【００１４】本発明における凝固因子欠乏血漿とは、ヒ
トまたは動物血漿中の特定の凝固因子の残存率が、吸着
前の該凝固因子に対して５％以下、好ましくは１％以
下、より好ましくは、０．５％以下となるまで除去され
た血漿をいう。より具体的には凝固第Ｖ因子および／ま
たは凝固第ＶＩＩＩ因子の残存率が吸着前の各凝固因子
に対し５％以下、好ましくは１％以下より好ましくは、
０．５％以下となるまで除去された血漿をいう。凝固第
Ｖ因子欠乏血漿または、凝固第Ｖ因子および凝固第ＶＩ
ＩＩ因子欠乏血漿は凝固第Ｖ因子の測定に重要であり、
凝固第ＶＩＩＩ因子欠乏血漿は凝固第ＶＩＩＩ因子の測
定に重要である。
トまたは動物血漿中の特定の凝固因子の残存率が、吸着
前の該凝固因子に対して５％以下、好ましくは１％以
下、より好ましくは、０．５％以下となるまで除去され
た血漿をいう。より具体的には凝固第Ｖ因子および／ま
たは凝固第ＶＩＩＩ因子の残存率が吸着前の各凝固因子
に対し５％以下、好ましくは１％以下より好ましくは、
０．５％以下となるまで除去された血漿をいう。凝固第
Ｖ因子欠乏血漿または、凝固第Ｖ因子および凝固第ＶＩ
ＩＩ因子欠乏血漿は凝固第Ｖ因子の測定に重要であり、
凝固第ＶＩＩＩ因子欠乏血漿は凝固第ＶＩＩＩ因子の測
定に重要である。
【００１５】さらに、本発明は上記凝固因子欠乏血漿に
よる凝固因子測定用試薬または凝固検査の精度管理用血
漿をも含む。また、本発明はかかる凝固因子測定用試薬
および／または凝固検査の精度管理用血漿を含む凝固因
子測定用キットにも及ぶ。
よる凝固因子測定用試薬または凝固検査の精度管理用血
漿をも含む。また、本発明はかかる凝固因子測定用試薬
および／または凝固検査の精度管理用血漿を含む凝固因
子測定用キットにも及ぶ。
【００１６】本発明をより具体的に説明するために、以
下の実施態様を例に詳細に説明する。健常人から抗凝固
剤として３．８％クエン酸を用いて採血された正常ヒト
プール血漿に合成ポリマーであるアンバーライトXAD-2
を血漿容量の０．５〜５０Ｗ／Ｖ％、より好適には５〜
２０Ｗ／Ｖ％を加え、室温で３０分から３時間撹拌す
る。この操作により、凝固第Ｖ因子及び第ＶＩＩＩ因子
の欠乏した血漿が調製できる。投入するアンバーライト
XAD-2の量と処理時間を調整することにより欠乏度を任
意に製造することが可能である。より高い欠乏度を求め
る場合には、上記の操作を複数回繰り返すことも可能で
ある。
下の実施態様を例に詳細に説明する。健常人から抗凝固
剤として３．８％クエン酸を用いて採血された正常ヒト
プール血漿に合成ポリマーであるアンバーライトXAD-2
を血漿容量の０．５〜５０Ｗ／Ｖ％、より好適には５〜
２０Ｗ／Ｖ％を加え、室温で３０分から３時間撹拌す
る。この操作により、凝固第Ｖ因子及び第ＶＩＩＩ因子
の欠乏した血漿が調製できる。投入するアンバーライト
XAD-2の量と処理時間を調整することにより欠乏度を任
意に製造することが可能である。より高い欠乏度を求め
る場合には、上記の操作を複数回繰り返すことも可能で
ある。
【００１７】このようにして製造した血漿を凝固因子測
定用試薬としての第Ｖ因子欠乏血漿として用いる場合に
は、調製した血漿をそのまま用いることも可能である
が、さらに適宜緩衝液、安定化剤等を加えて凍結乾燥
し、第Ｖ因子欠乏血漿として保存して用いることもでき
る。
定用試薬としての第Ｖ因子欠乏血漿として用いる場合に
は、調製した血漿をそのまま用いることも可能である
が、さらに適宜緩衝液、安定化剤等を加えて凍結乾燥
し、第Ｖ因子欠乏血漿として保存して用いることもでき
る。
【００１８】本発明により製造した第Ｖ因子欠乏血漿を
用いて被検検体の第Ｖ因子活性を測定するには、第Ｖ因
子欠乏血漿および５〜１０倍に生理食塩水または緩衝液
で希釈した被検検体を等量混合したものに、プロトンビ
ン時間測定試薬（例えば、市販品トロンボチェックＰ
Ｔ、国際試薬株式会社製）を加え、凝固時間を測定する
ことにより行なう。またプロトロンビン時間測定試薬で
はなく活性化部分トロンボプラスチン時間測定試薬（例
えば、市販品トロンボチェック ＡＰＴＴ、国際試薬株
式会社製）を用いて凝固時間を測定するためには、別途
調製、精製したヒトまたは動物由来の凝固第ＶＩＩＩ因
子の適当量を本発明により製造した血漿に加えて第Ｖ因
子欠乏血漿として利用することも可能である。
用いて被検検体の第Ｖ因子活性を測定するには、第Ｖ因
子欠乏血漿および５〜１０倍に生理食塩水または緩衝液
で希釈した被検検体を等量混合したものに、プロトンビ
ン時間測定試薬（例えば、市販品トロンボチェックＰ
Ｔ、国際試薬株式会社製）を加え、凝固時間を測定する
ことにより行なう。またプロトロンビン時間測定試薬で
はなく活性化部分トロンボプラスチン時間測定試薬（例
えば、市販品トロンボチェック ＡＰＴＴ、国際試薬株
式会社製）を用いて凝固時間を測定するためには、別途
調製、精製したヒトまたは動物由来の凝固第ＶＩＩＩ因
子の適当量を本発明により製造した血漿に加えて第Ｖ因
子欠乏血漿として利用することも可能である。
【００１９】本発明により調製した血漿を凝固因子測定
用試薬としての第ＶＩＩＩ因子欠乏血漿として用いる場
合には、製造した血漿に、ヒトまたは動物由来の精製第
Ｖ因子を適量添加することにより製造できる。製造した
第ＶＩＩＩ因子欠乏血漿はそのまま用いるか、或いは適
宜緩衝液、安定化剤等を加えて凍結乾燥し、第ＶＩＩＩ
因子欠乏血漿として保存して用いることもできる。
用試薬としての第ＶＩＩＩ因子欠乏血漿として用いる場
合には、製造した血漿に、ヒトまたは動物由来の精製第
Ｖ因子を適量添加することにより製造できる。製造した
第ＶＩＩＩ因子欠乏血漿はそのまま用いるか、或いは適
宜緩衝液、安定化剤等を加えて凍結乾燥し、第ＶＩＩＩ
因子欠乏血漿として保存して用いることもできる。
【００２０】本発明により製造した第ＶＩＩＩ因子欠乏
血漿を用いて被検検体の第ＶＩＩＩ因子活性を測定する
には、第ＶＩＩＩ因子欠乏血漿と５〜１０倍に生理食塩
水または緩衝液で希釈した被検検体を等量混合したもの
に、活性化部分トロンボプラスチン時間測定試薬（例え
ば、市販品トロンボチェックＡＰＴＴ、国際試薬株式会
社製）を加え、所定時間放置後、２０ｍＭ塩化カルシウ
ム液を加えて凝固時間を測定することにより行なう。
血漿を用いて被検検体の第ＶＩＩＩ因子活性を測定する
には、第ＶＩＩＩ因子欠乏血漿と５〜１０倍に生理食塩
水または緩衝液で希釈した被検検体を等量混合したもの
に、活性化部分トロンボプラスチン時間測定試薬（例え
ば、市販品トロンボチェックＡＰＴＴ、国際試薬株式会
社製）を加え、所定時間放置後、２０ｍＭ塩化カルシウ
ム液を加えて凝固時間を測定することにより行なう。
【００２１】本発明により製造した血漿を精度管理用血
漿として用いる場合には、製造した血漿と正常血漿を適
当に混合し、所定の凝固時間を示す精度管理用血漿とし
て製造する。製造した血漿は、適宜緩衝液、安定化剤等
を加えて凍結乾燥し精度管理用血漿として凝固検査の精
度管理に用いることができる。
漿として用いる場合には、製造した血漿と正常血漿を適
当に混合し、所定の凝固時間を示す精度管理用血漿とし
て製造する。製造した血漿は、適宜緩衝液、安定化剤等
を加えて凍結乾燥し精度管理用血漿として凝固検査の精
度管理に用いることができる。
【００２２】本発明により製造された凝固因子欠乏血漿
または精度管理用血漿を用いて凝固因子測定キットを構
成することもできる。
または精度管理用血漿を用いて凝固因子測定キットを構
成することもできる。
【００２３】本発明を実施するために用いる合成ポリマ
ーはポリスチレン、ポリジビニルベンゼン、ジビニルベ
ンゼン−スチレン共重合体またはポリアクリル（これら
のポリマーの少なくとも一部に置換基または官能基を有
していることもある）等の骨格を有する合成ポリマー或
いは合成樹脂が例示される。より具体的には、例えば、
ポリスチレンラテックス、ポリスチレン−ジビニルベン
ゼン共重合体ラテックス、さらにはイオン交換樹脂、キ
レート樹脂、或いは合成吸着剤に分類される、ダイアイ
オンHPシリーズ（HP10,HP20,HP,21,HP30,HP40,HP50）、
ダイアイオンSP800シリーズ（SP800,SP825,SP850,SP87
5）、ダイアイオンSP200シリーズ（SP205,SP206,SP20
7）、ダイアイオンHPM１G及びHP2MG、アンバーライトXA
Dシリーズ（XAD-2,XAD-4,XAD-16,XAD-2000,XAD-7HP）、
ムロキレート、ダウエックスA-1、アンバーライトCGシ
リーズ（CG50、CG120、CG400）アンバーライトIRCシリ
ーズ（IRC50,IRC76）ダイヤイオンCRシリーズ（CR10、C
R11、CR20,CRB02）および合成高分子吸着マット等が例
示される。本発明を実施するために、例示された合成ポ
リマーの中から選択して、その１種または２種以上を組
み合わせて用いることができる。
ーはポリスチレン、ポリジビニルベンゼン、ジビニルベ
ンゼン−スチレン共重合体またはポリアクリル（これら
のポリマーの少なくとも一部に置換基または官能基を有
していることもある）等の骨格を有する合成ポリマー或
いは合成樹脂が例示される。より具体的には、例えば、
ポリスチレンラテックス、ポリスチレン−ジビニルベン
ゼン共重合体ラテックス、さらにはイオン交換樹脂、キ
レート樹脂、或いは合成吸着剤に分類される、ダイアイ
オンHPシリーズ（HP10,HP20,HP,21,HP30,HP40,HP50）、
ダイアイオンSP800シリーズ（SP800,SP825,SP850,SP87
5）、ダイアイオンSP200シリーズ（SP205,SP206,SP20
7）、ダイアイオンHPM１G及びHP2MG、アンバーライトXA
Dシリーズ（XAD-2,XAD-4,XAD-16,XAD-2000,XAD-7HP）、
ムロキレート、ダウエックスA-1、アンバーライトCGシ
リーズ（CG50、CG120、CG400）アンバーライトIRCシリ
ーズ（IRC50,IRC76）ダイヤイオンCRシリーズ（CR10、C
R11、CR20,CRB02）および合成高分子吸着マット等が例
示される。本発明を実施するために、例示された合成ポ
リマーの中から選択して、その１種または２種以上を組
み合わせて用いることができる。
【００２４】上記の合成ポリマー或いは合成樹脂の処理
血漿に対する投入量と処理時間及び処理回数は、目標と
する因子の欠乏度に応じて適宜設定することができる。
血漿に対する投入量と処理時間及び処理回数は、目標と
する因子の欠乏度に応じて適宜設定することができる。
【００２５】
【実施例】以下に実施例をあげて本発明を更に説明する
が、本発明は実施例に限定されるものではない。
が、本発明は実施例に限定されるものではない。
【００２６】
【実施例１】正常ヒトプール血漿１００ｍＬに１０ｇの
合成ポリマーであるアンバーライトXAD−２樹脂を混和
した。室温で１時間ゆっくりと混合した後、樹脂をろ過
で取り除き、血漿の各凝固因子を測定した。樹脂を添加
しない正常ヒトプール血漿を同様に操作し対照とした。
その結果を表１に示した。
合成ポリマーであるアンバーライトXAD−２樹脂を混和
した。室温で１時間ゆっくりと混合した後、樹脂をろ過
で取り除き、血漿の各凝固因子を測定した。樹脂を添加
しない正常ヒトプール血漿を同様に操作し対照とした。
その結果を表１に示した。
【００２７】
【表１】
【００２８】以上の結果、アンバーライトXAD-2で血漿
を処理することにより凝固第Ｖ因子と第ＶＩＩＩ因子が
特異的に吸着除去されることが判り、本発明の効果が確
かめられた。
を処理することにより凝固第Ｖ因子と第ＶＩＩＩ因子が
特異的に吸着除去されることが判り、本発明の効果が確
かめられた。
【００２９】
【実施例２】実施例１で製造した吸着処理血漿を用い
て、凝固第Ｖ因子欠乏血漿として第Ｖ因子の測定を試み
た。対照として、市販の免疫吸着法で調製された凝固第
Ｖ因子欠乏血漿（商品名、データーファイ・ファクター
Ｖ、 デードベーリング社製）を用い、本発明の方法と
対照で測定された検体の第Ｖ因子活性を比較した。
て、凝固第Ｖ因子欠乏血漿として第Ｖ因子の測定を試み
た。対照として、市販の免疫吸着法で調製された凝固第
Ｖ因子欠乏血漿（商品名、データーファイ・ファクター
Ｖ、 デードベーリング社製）を用い、本発明の方法と
対照で測定された検体の第Ｖ因子活性を比較した。
【００３０】測定試薬は市販のプロトロンビン時間測定
試薬（商品名、トロンボチェックＰＴ、国際試薬株式会
社製）を用い、凝固自動測定機器コアグレックス７００
（島津製作所製）で測定した。１０例の検体の測定結果
を表２に示した。
試薬（商品名、トロンボチェックＰＴ、国際試薬株式会
社製）を用い、凝固自動測定機器コアグレックス７００
（島津製作所製）で測定した。１０例の検体の測定結果
を表２に示した。
【００３１】
【表２】
【００３２】以上のように、本発明による第Ｖ因子欠乏
血漿と市販の免疫吸着法との測定値の比較において、ほ
ぼ同等の測定値が得られたことから、本発明の方法によ
り調製された第Ｖ因子欠乏血漿は第Ｖ因子測定に有用で
あることが判り、本発明の有用性が確かめられた。
血漿と市販の免疫吸着法との測定値の比較において、ほ
ぼ同等の測定値が得られたことから、本発明の方法によ
り調製された第Ｖ因子欠乏血漿は第Ｖ因子測定に有用で
あることが判り、本発明の有用性が確かめられた。
【００３３】
【実施例３】実施例１で製造した吸着処理血漿を用い
て、凝固第ＶＩＩＩ因子欠乏血漿を製造した。予め、牛
血漿より公知の方法により、牛第Ｖ因子を単離精製した
牛第Ｖ因子標品を準備しておき、製造した吸着処理血漿
に第Ｖ因子活性が約８０〜１００％となるように牛第Ｖ
因子標品を添加し、凝固第ＶＩＩＩ因子欠乏血漿を製造
し、第ＶＩＩＩ因子の測定を試みた。対照として、市販
の免疫吸着法で製造された凝固第ＶＩＩＩ因子欠乏血漿
（商品名、データーファイ・ファクターＶＩＩＩ、 デ
ードベーリング社製）を用い、本発明の方法と対照で測
定された検体の第ＶＩＩＩ因子活性を比較した。測定試
薬は市販の活性化部分トロンボプラスチン時間測定試薬
（商品名、トロンボチェックＡＰＴＴ、国際試薬株式会
社製）を用い、凝固自動測定機器コアグレックス７００
（島津製作所製）で測定した。１０例の検体の測定結果
を表３に示した。
て、凝固第ＶＩＩＩ因子欠乏血漿を製造した。予め、牛
血漿より公知の方法により、牛第Ｖ因子を単離精製した
牛第Ｖ因子標品を準備しておき、製造した吸着処理血漿
に第Ｖ因子活性が約８０〜１００％となるように牛第Ｖ
因子標品を添加し、凝固第ＶＩＩＩ因子欠乏血漿を製造
し、第ＶＩＩＩ因子の測定を試みた。対照として、市販
の免疫吸着法で製造された凝固第ＶＩＩＩ因子欠乏血漿
（商品名、データーファイ・ファクターＶＩＩＩ、 デ
ードベーリング社製）を用い、本発明の方法と対照で測
定された検体の第ＶＩＩＩ因子活性を比較した。測定試
薬は市販の活性化部分トロンボプラスチン時間測定試薬
（商品名、トロンボチェックＡＰＴＴ、国際試薬株式会
社製）を用い、凝固自動測定機器コアグレックス７００
（島津製作所製）で測定した。１０例の検体の測定結果
を表３に示した。
【００３４】
【表３】
【００３５】以上のように、本発明による第ＶＩＩＩ因
子欠乏血漿と市販の免疫吸着法との測定値の比較におい
て、ほぼ同等の測定値が得られたことから、本発明の方
法により製造された第ＶＩＩＩ因子欠乏血漿は第ＶＩＩ
Ｉ因子測定に有用であることが判り、本発明の有用性が
確かめられた。
子欠乏血漿と市販の免疫吸着法との測定値の比較におい
て、ほぼ同等の測定値が得られたことから、本発明の方
法により製造された第ＶＩＩＩ因子欠乏血漿は第ＶＩＩ
Ｉ因子測定に有用であることが判り、本発明の有用性が
確かめられた。
【００３６】
【実施例４】実施例１で製造した吸着処理血漿に正常プ
ール血漿を３ｖ／ｖ％及び７ｖ／ｖ％を加えそれぞれ精
度管理用血漿ＩＩＩ及び精度管理用血漿ＩＩとし、安定
化剤を加えて凍結乾燥処理し精度管理用血漿を製造し
た。その精度管理用血漿のプロトロンビン時間（Ｐ
Ｔ）、活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）
を測定し精度管理用血漿としての有用性を確かめた。そ
の結果を表４に示した。
ール血漿を３ｖ／ｖ％及び７ｖ／ｖ％を加えそれぞれ精
度管理用血漿ＩＩＩ及び精度管理用血漿ＩＩとし、安定
化剤を加えて凍結乾燥処理し精度管理用血漿を製造し
た。その精度管理用血漿のプロトロンビン時間（Ｐ
Ｔ）、活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）
を測定し精度管理用血漿としての有用性を確かめた。そ
の結果を表４に示した。
【００３７】
【表４】
【００３８】以上の結果、正常プール血漿に比べて精度
管理用血漿では凝固時間が延長しており、異常値域の精
度管理用血漿として有用であることがわかった。さら
に、正常血書の添加割合を変化させることにより、凝固
時間を任意に設定できるため、目標の凝固時間を示す精
度管理用血漿を人工的に製造することも可能である。し
たがって本発明は精度管理用血漿の製造にも有用である
ことが判った。
管理用血漿では凝固時間が延長しており、異常値域の精
度管理用血漿として有用であることがわかった。さら
に、正常血書の添加割合を変化させることにより、凝固
時間を任意に設定できるため、目標の凝固時間を示す精
度管理用血漿を人工的に製造することも可能である。し
たがって本発明は精度管理用血漿の製造にも有用である
ことが判った。
【００３９】
【発明の効果】本発明により、先天的欠乏症の患者血漿
を用いることなく、また、免疫吸着法とは異なる手法を
用いることにより、迅速に効率良く凝固因子欠乏血漿の
製造方法が提供される。さらに原料血漿そのものが失活
していない凝固因子欠乏血漿、凝固因子測定用凝固因子
欠乏血漿もしくは精度管理用血漿、またはこれらの血漿
を含む測定試薬キットが提供される。
を用いることなく、また、免疫吸着法とは異なる手法を
用いることにより、迅速に効率良く凝固因子欠乏血漿の
製造方法が提供される。さらに原料血漿そのものが失活
していない凝固因子欠乏血漿、凝固因子測定用凝固因子
欠乏血漿もしくは精度管理用血漿、またはこれらの血漿
を含む測定試薬キットが提供される。
フロントページの続き Ｆターム(参考） 2G045 AA11 BA13 BB11 CA25 CA26 4D017 AA11 BA20 CA13 CA17 CB05 EB03 4G066 AC14B AC17B AE04B AE10B AE20B CA20 CA54 DA12
Claims (8)
- 【請求項１】 ヒトまたは動物血漿中の特定の血液凝固
因子を除去する方法において、該特定の血液凝固因子を
吸着する機能を有する合成ポリマーを用いることを特徴
とする血液凝固因子欠乏血漿の製造方法。 - 【請求項２】合成ポリマーが、少なくとも疎水性結合、
イオン結合、水素結合またはＶａｎ ｄｅｒ Ｗｅａｌ
ｓ力のいずれかの結合能により該特定の血液凝固因子を
吸着させる機能を有することを特徴とする請求項１に記
載の血液凝固因子欠乏血漿の製造方法。 - 【請求項３】合成ポリマーを、血漿容量の０．５〜５０
Ｗ／Ｖ％で用いることを特徴とする請求項１または請求
項２に記載の血液凝固因子欠乏血漿の製造方法。 - 【請求項４】特定の血液凝固因子が凝固第Ｖ因子及び／
または凝固第ＶＩＩＩ因子であることを特徴とする請求
項１から３のいずれか１に記載の血液凝固因子欠乏血漿
の製造方法。 - 【請求項５】請求項１から４のいずれか１に記載の方法
によって製造されることを特徴とする血液凝固因子測定
用凝固因子欠乏血漿また血液は凝固検査の精度管理用血
漿。 - 【請求項６】請求項１から４のいずれか１に記載の方法
によって製造された血液凝固因子測定用凝固因子欠乏血
漿または血液凝固検査の精度管理用血漿。 - 【請求項７】請求項５または６に記載の血液凝固因子測
定用凝固因子欠乏血漿を用いることを特徴とする血液凝
固因子測定方法。 - 【請求項８】請求項６または７に記載の血液凝固因子測
定用凝固因子欠乏血漿および／または血液凝固検査の精
度管理用血漿を含むことを特徴とする血液凝固因子測定
キット。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000286307A JP4509341B2 (ja) | 2000-09-21 | 2000-09-21 | 凝固因子欠乏血漿およびその製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000286307A JP4509341B2 (ja) | 2000-09-21 | 2000-09-21 | 凝固因子欠乏血漿およびその製造方法 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2002090361A true JP2002090361A (ja) | 2002-03-27 |
| JP2002090361A5 JP2002090361A5 (ja) | 2007-10-11 |
| JP4509341B2 JP4509341B2 (ja) | 2010-07-21 |
Family
ID=18770246
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2000286307A Expired - Lifetime JP4509341B2 (ja) | 2000-09-21 | 2000-09-21 | 凝固因子欠乏血漿およびその製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4509341B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20210315932A1 (en) * | 2017-04-26 | 2021-10-14 | Alkahest, Inc. | Dosing Regimen for Treatment of Cognitive and Motor Impairments with Blood Plasma and Blood Plasma Products |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH03189559A (ja) * | 1989-12-20 | 1991-08-19 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | 血液凝固第８因子欠乏血漿及びその製造方法 |
| JPH05262664A (ja) * | 1991-11-12 | 1993-10-12 | Asahi Chem Ind Co Ltd | 血液凝固第ｖｉｉｉ因子の吸着材 |
| JPH0674955A (ja) * | 1992-08-27 | 1994-03-18 | Tosoh Corp | 血液凝固因子活性測定法 |
-
2000
- 2000-09-21 JP JP2000286307A patent/JP4509341B2/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH03189559A (ja) * | 1989-12-20 | 1991-08-19 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | 血液凝固第８因子欠乏血漿及びその製造方法 |
| JPH05262664A (ja) * | 1991-11-12 | 1993-10-12 | Asahi Chem Ind Co Ltd | 血液凝固第ｖｉｉｉ因子の吸着材 |
| JPH0674955A (ja) * | 1992-08-27 | 1994-03-18 | Tosoh Corp | 血液凝固因子活性測定法 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20210315932A1 (en) * | 2017-04-26 | 2021-10-14 | Alkahest, Inc. | Dosing Regimen for Treatment of Cognitive and Motor Impairments with Blood Plasma and Blood Plasma Products |
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP4509341B2 (ja) | 2010-07-21 |
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