JP2001524501A5 - - Google Patents

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【特許請求の範囲】
【請求項１】 約１０から１５容量％のユーカリ油、１０から１５容量％のカユプチ油、１５から２５容量％の丁子油、２.５から７.５容量％の界面活性剤および４０から６０容量％の水を含む、ニューキャッスル病、ウマ・ヘルペスウイルス感染および／またはサルモネラ・コレラエスイス(Salmonella choleraesuis)感染の抑制に使用するのに適した、抗微生物組成物。
【請求項２】 組成物が１２.５容量％のユーカリ油、１２.５容量％のカユプチ油、２０容量％の丁子油、５容量％の界面活性剤および５０容量％の水を含む、請求項１記載の組成物。
【請求項３】 該界面活性剤がアニオン性界面活性剤である、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】 該アニオン性界面活性剤がアルキルアリールスルホネ−ト、アルカンスルホネート、アルコールおよびアルコールエーテルスルホネート、ポリエーテルカルボキシレート、オレフィンスルホネート、α−スルホモノカルボン酸エステルおよびリン含有アニオン界面活性剤からなる群から選択される、請求項３記載の組成物。
【請求項５】 該界面活性剤がナトリウム−２−エチルヘキシルスルホスクシネートを含む、請求項４記載の組成物。
【請求項６】 適用前に更に希釈する、請求項１から５のいずれかに記載の組成物。
【請求項７】 １部組成物対２００部水まで希釈される、請求項６記載の組成物。
【請求項８】 局所におけるニューキャッスル病の病原体の存在、ウマ・ヘルペスウイルスの存在および／またはサルモネラ・コレラエスイス(Salmonella choleraesuis)の存在の抑制に適した医薬の製造における、請求項１から７のいずれかに記載の組成物の使用。
【請求項９】 非ヒト局所におけるニューキャッスル病の病原体、ウマ・ヘルペスウイルスの存在および／またはサルモネラ・コレラエスイス(Salmonella choleraesuis)感染の抑制に適した方法であって、請求項１から７のいずれかに記載の組成物をこれに適用することを含む、方法。
【請求項１０】 請求項１から７のいずれかに記載の組成物を含む、医薬組成物。

本発明の組成物は、また有利なことに例えば、ニューキャッスル病のような飼鳥類の疾病およびまたウマ・ヘルペスウイルスに対して特に有効であることが示されている。本発明にしたがったウマ・ヘルペスウイルスに対する組成物の有効な希釈は、約１部対約２００部水までであり得る。

(実施例)
実施例１
ユーカリ油 １２.５％
カユプチ油 １２.５％
丁子油 ２０％
界面活性剤 ５％
水 ５０％
を(容量で)含む殺菌剤を製造し、下記に概説するように、BS6734:1986にしたがった一般的な規則に関するその抗細菌活性を試験した。本組成物は、１部殺菌剤対４０部水の希釈で、下記のようなディジーズ・オブ・アニマルズ(認可された殺菌剤)規則１９７８の下での試験に通過した：
(ａ)有効な濃度の殺菌剤は、酵母生物混合物に添加したとき、細菌数の少なくとも１０^４の減少をもたらすものであり、以下の方法により有効濃度が決定される。
(ｂ)試験を、サルモネラ・コレラエスイス(Salmonella choleraesuis)(NCTC^＊ 10653、NCIB# 10383)を使用して行った。試験生物の貯蔵培養は、凍結乾燥アンプルとしてまたは、“BS 6734:1986, Determination of the Antimicrobial Efficacy of Disinfectants for Veterinary and Agricultural Use”にしたがって調製した栄養寒天傾斜培養(Oxoid Blood Agar Base)上に貯蔵された。試験培養を、１０mlのOxoid Nutirent Broth No 2に接種し、３７±１℃で２４時間±２時間インキュベートして調製した。２４時間培養物は、使用直前にインキュベーターから出さなければならない。

酵母懸濁液(５％乾燥重量)を、BS 6734:1986にしたがって調製した。懸濁液を４±０.５℃で貯蔵し、使用前に６週間加齢させた。４mlのサルモネラ・コレラエスイス(S. choleraesuis)試験懸濁液を９６mlの酵母懸濁液に添加した。得られた酵母／生物懸濁液の５×２.５ml量を試験する各殺菌剤に関して、１５mm×１５０mm Pyrex試験管に分配し、４℃に冷却する。

４８時間後、試験管を調べ、増殖の存在または非存在を記録した。最終推奨使用希釈は、５本の接種試験管の内３本またはそれ以下の試験管が増殖を示すものである。

試験混合物を４℃±０.５℃で、３０分保持し、この時間の終りに、５％不活化ウマ血清中で希釈した。更なる希釈を、有胚卵におけるウイルスの力価測定のために製造した。試験する殺菌剤は、ウイルス力価を少なくとも１０^４減少させなければならない。

試験は、(ａ)毒性試験および(ｂ)ウイルス試験を含み、９日齢の有胚卵を使用した。
(ａ)毒性試験(試験殺菌剤が、試験に使用した最低濃度、即ち、４００分の１で有胚卵に毒性であるかを決定する)。
試験法
ｉ)実施例１の殺菌組成物を、ＷＨＯ硬水を使用して調製した。
ii)２.５mlの殺菌剤を、B.S. 808:1938で指示されるように調製した当量の５％乾燥重量の酵母懸濁液に添加した。
iii)激しい混合の後、試験混合物を４℃±０.５℃に３０分保ち、一定間隔で振盪させた。
iv)次いで、試験混合物を更に、滅菌蒸留水を使用して調製した５％不活化(５６℃で３０分)ウマ血清で２００分の１に希釈した。
(ｖ)０.２mlのこの希釈物を、次いで各々１０個の有胚卵の尿膜腔に接種した。１０個のコントロール卵に、当量の硬水で希釈した酵母懸濁液を同様に摂取した。
(vi)全ての卵を毎日７日間試験し、殺菌剤はこの期間の最後に卵が生存し続けている場合無毒性であるとみなす。

１希釈段階当り７個の卵を使用し、各卵の尿膜腔に０.２mlを接種し、３７.５℃でインキュベートした有胚卵における力価測定を行った。
力価： 希釈せず 力価：１０^−４希釈
１０^−１希釈 １０^−５希釈
１０^−２希釈 １０^−６希釈

実施例３
殺菌組成物を実施例１と同じ成分を有するように調製し、ウマ・ヘルペスウイルスに対する有効性を試験した。
使用した試験法は、Evans, Stuart and Roberts (Br vet J 1977, 133, 356)によりDisinfection of Animal Virusesに提供されているものを使用し、Animal Health Trust (AHT)にしたがって行った。

試験に使用したウイルス： EHV 1(AB4アボルトジェニック(abortogenic)／
麻痺性株)
試験に使用した細胞： RK13試験管培養。培地を吸収中保持した。細胞を
リン酸緩衝化食塩水(PBS)で供給前に洗浄した。
使用した希釈： 殺菌剤を、酵母溶液中に希釈したウイルスの添加
の前に、硬水で１／２５、１／５０、１／１００
、１／２００および１／４００に希釈した。
結果： ウイルスコントロール＝４.５０^＊／０.１ml当り
１／２５の殺菌剤＝＜０.７５／０.１ml当り
(細胞に対する正味の殺菌毒性)
１／５０の殺菌剤＝＜０.５０／０.１ml当り
(細胞に対する正味の殺菌毒性)
１／１００の殺菌剤＝＜０.５０／０.１ml当り
(細胞に対する正味の殺菌毒性)
１／２００の殺菌剤＝＜０.５０／０.１ml当り
(試験管の底に細胞の小さな表層)
１／４００の殺菌剤＝１.７５／０.１ml当り
^＊TCID 50に対する対数
結論： 上記集団における解釈に基づいて、この殺菌剤は
、１／２００の希釈まで有効であった。これは、
酵母中のウイルスへの添加の前の殺菌剤の実際の
希釈である。