JP2001523694A - リポタンパク質酸化の阻害 - Google Patents

リポタンパク質酸化の阻害

Info

Publication number
JP2001523694A
JP2001523694A JP2000521788A JP2000521788A JP2001523694A JP 2001523694 A JP2001523694 A JP 2001523694A JP 2000521788 A JP2000521788 A JP 2000521788A JP 2000521788 A JP2000521788 A JP 2000521788A JP 2001523694 A JP2001523694 A JP 2001523694A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
oxidation
ldl
atorvastatin
hydroxylated
metabolites
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Abandoned
Application number
JP2000521788A
Other languages
English (en)
Other versions
JP2001523694A5 (ja
Inventor
マイクル・アヴィラム
チャールズ・ラリー・ビスゲイアー
ロジャー・スコフィールド・ニュートン
マイラ・ローゼンブラート
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Warner Lambert Co LLC
Original Assignee
Warner Lambert Co LLC
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Warner Lambert Co LLC filed Critical Warner Lambert Co LLC
Publication of JP2001523694A publication Critical patent/JP2001523694A/ja
Publication of JP2001523694A5 publication Critical patent/JP2001523694A5/ja
Abandoned legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A61K31/405—Indole-alkanecarboxylic acids; Derivatives thereof, e.g. tryptophan, indomethacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/04—Chelating agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

(57)【要約】 コレステロール低下剤のヒドロキシル化された誘導体は、リポタンパク質の酸化を阻害し、そのためアテローム発生および結果として生ずる心臓発作を含む血管系疾患の進行を予防するために有用である。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の分野】
本発明は、リポタンパク質の酸化を阻害し、それによってアテローム発生を遅
らせるかまたは停止させる方法に関する。この方法は、公知のコレステロール低
下剤のヒドロキシル化誘導体の使用を必要とする。
【０００２】
【発明の背景】
アテローム性動脈硬化性心臓血管病および関連する状態および高脂血症に関連
する疾患事象は、心身障害および死亡の主原因である。健康な哺乳動物ならびに
すでに高脂血症の状態を経験している個体の両方において特定の形のコレステロ
ールを低下させることは、心臓発作、血管系疾患、およびその他のアテローム性
動脈硬化状態に関連する疾患を劇的に減少させることができることは、現在十分
に認められている。
【０００３】 高脂血症は、コレステロール、トリグリセリド、およびリン脂質のような血清
脂質の異常な増加を特徴とする状態である。これらの脂質は、血漿中の溶液とし
て自由に循環しないが、タンパク質に結合して、リポタンパク質と呼ばれる高分
子複合体として運搬される。その密度に基づいてリポタンパク質は五つに分類さ
れる。すなわち、キロミクロン、超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）、低密度
リポタンパク質（ＬＤＬ）、中間密度リポタンパク質（ＩＤＬ）、および高密度
リポタンパク質（ＨＤＬ）である。
【０００４】 高脂血症の一つの形は、高水準のＬＤＬコレステロールの存在を特徴とする高
コレステロール血症である。高コレステロール血症に対する初期治療はしばしば
、適当な運動と対にして、食事を脂肪およびコレステロールの低い食事に変更す
ることであり、続いて、ＬＤＬ−低下目標が食事および運動だけによっては達成
されないときは薬物治療を行う。ＬＤＬは通常、“悪玉”コレステロールとして
知られており、一方ＨＤＬは、“善玉”コレステロールである。高レベルのＬＤ
Ｌコレステロールを低下させることは望ましいけれども、ＨＤＬコレステロール
のレベルを増加させることもまた望ましい。一般に、増加したレベルのＨＤＬは
、冠状動脈性心臓病（ＣＨＤ）に対するより低い危険性と関連することがわかっ
ている。
【０００５】 ＬＤＬコレステロールは悪玉として認められ、ほとんどのコレステロール低下
剤は、ＬＤＬ形の血漿濃度を低下させることによって作用するけれども、アテロ
ーム発生の初期段階においてはもう一つのキープロセスがあり、これは、ＬＤＬ
の酸化である。ＶＬＤＬおよびＨＤＬの酸化も起こり、これもまたアテローム発
生に寄与する。酸化は、増加した細胞内カルシウム、低下したエネルギー生成、
サイトカインの活性化、膜損傷を起こし、これらすべては結果的に、アポトーシ
ス、ネクローシス、そして最後に細胞死に至る。
【０００６】 酸化は典型的には、反応性基がＬＤＬ粒子上の多不飽和脂肪酸から水素原子を
取り去るときに始まる。脂質ペルオキシ基およびアルコキシ基が形成され、これ
が次に隣接する脂肪酸の酸化を開始することができ、その結果脂質の過酸化の成
長反応（propogation）が起こる。これらの酸化された形のリポタンパク質は、 天然のリポタンパク質よりも迅速にマクロファージによって吸収され、この結果
、マクロファージのコレステロール蓄積、そしてそれに続く泡沫細胞形成および
、組織マクロファージおよび内皮細胞の運動性の阻害を起こす。この事象のカス
ケードの結果、血管機能不全および、アテローム性動脈硬化症病変の形成および
活性化が起こる。
【０００７】 我々はこの度、通常使用されるコレステロール低下剤の特定のヒドロキシ−置
換された誘導体がリポタンパク質のための有効な抗酸化剤であることを発見した
。さらに、これらの化合物は、遊離基捕捉および金属イオンキレート化のために
有用であり、この遊離基捕捉および金属イオンキレート化もまたそれによってリ
ポタンパク質が酸化されるメカニズムである。
【０００８】
【発明の要約】
本発明は、抗酸化剤有効量のヒドロキシル化されたコレステロール低下剤を投
与することより成る、哺乳動物におけるリポタンパク質の酸化を阻害する方法を
提供する。本発明はまた、遊離基捕捉量のヒドロキシル化されたコレステロール
低下剤を投与することより成る、哺乳動物における遊離基を捕捉する方法をも提
供する。本発明はまた、有効量のヒドロキシル化されたコレステロール低下剤を
投与することより成る、リポタンパク質による金属イオンキレート化を阻害する
方法をも提供する。
【０００９】 好ましい態様においては、これらの方法は、ヒドロキシル化された形のスタチ
ン（statin）、特にアトルバスタチン（atorvastatin）を使用して実施するが、
これらの化合物は、参照によって本明細書中に組み込まれるものとする米国特許
第５,３８５,９２９号に記載されている。
【００１０】 もう一つの好ましい態様においては、これらの方法は、ヒドロキシル化ジェム
フィブロジル（gemfibrozil）、例えば式
【化１】 の化合物を使用して実施される。
【００１１】 もう一つの態様においては、ヒドロキシル化フルバスタチン（fluvastatin） 、例えば式
【化２】 の化合物が使用される。
【００１２】 もう一つの態様においては、ヒドロキシル化セリバスタチン（cerivastatin）
、特に式
【化３】 の化合物が使用される。
【００１３】 もう一つの好ましい態様においては、ロバスタチン（lovastatin）のヒドロキ
シル化誘導体、例えば式
【化４】 の化合物が使用される。
【００１４】 以下に添付の図面について簡単に説明する。 図１は、アトルバスタチンおよびそのヒドロキシル化された代謝産物の構造式
を示す。 図２は、ジェムフィブロジルおよびそのヒドロキシル化された代謝産物の構造
式を示す。
【００１５】 図３は、銅イオン酸化系（Ａ）、ＡＡＰＨ酸化系（Ｂ）およびＪ−７７４Ａ. １マクロファージ酸化系（Ｃ）におけるＬＤＬ酸化に関するアトルバスタチンお
よびそのヒドロキシル化された代謝産物の効果を示す。ＬＤＬ（１００μｇタン
パク質／mL）を三つのすべての酸化系において、薬物またはその代謝産物の濃度
を増大させながら、系ＡおよびＢにおいては３７℃で４時間、そして細胞（Ｃ）
については２０時間、インキュベートした。このインキュベーションの終わりに
、ＬＤＬ酸化をＴＢＡＲＳ検定によって測定した。マクロファージを介したＬＤ
Ｌの酸化は、細胞の存在において得た値から細胞の不在において得た値を引くこ
とによって計算した。結果は、平均値±標準偏差（ＳＤ）（ｎ＝３）として示す
。
【００１６】 図４は、銅イオン酸化系（Ａ）およびＡＡＰＨ酸化系（Ｂ）におけるＶＬＤＬ
酸化に関するアトルバスタチンおよびそのヒドロキシル化された代謝産物の効果
を示す。ＶＬＤＬ（１００μｇタンパク質／mL）を、１０μＭのアトルバスタチ
ンまたはその代謝産物とともに３７℃で４時間インキュベートした。このインキ
ュベーションの終わりに、ＶＬＤＬ酸化をＴＢＡＲＳ検定によって測定した。結
果は、平均値±ＳＤ（ｎ＝３）として示す。
【００１７】 図５は、アトルバスタチンおよびそのヒドロキシル化された代謝産物の遊離基
捕捉活性（Ａ）および銅イオンキレート化能力（Ｂ）を示す。Ａ：アトルバスタ
チンまたはそのヒドロキシル化された代謝産物（２０μＭ）を１mM ＤＰＰＨと ともにインキュベートして、５１７nmでの吸収の動力学的測定を実施した。同様
の型の三つの異なる研究のうちから代表的な実験を示す。ビタミンＥ（２０μＭ
）を遊離基捕捉剤に対する正の対照として使用した。Ｂ：ＬＤＬ（１００μｇタ
ンパク質／mL）を、アトルバスタチンまたはその代謝産物（１０μＭ）とともに
、そしてＣｕＳＯ4の濃度を増大させながら、３７℃で４時間インキュベートし 、その後ＴＢＡＲＳ検定によってリポタンパク質酸化の分析を行った。結果は、
平均値±ＳＤ（ｎ＝３）として示す。
【００１８】 図６は、銅イオン酸化系（Ａ）、ＡＡＰＨ酸化系（Ｂ）およびＪ−７７４Ａ. １マクロファージ酸化系（Ｃ）におけるＬＤＬ酸化に関するジェムフィブロジル
およびジェムフィブロジル代謝産物濃度の効果を示す。ＬＤＬ（１００μｇタン
パク質／mL）を三つのすべての酸化系において、薬物またはその代謝産物の濃度
を増大させながら、系ＡおよびＢにおいては３７℃で４時間、そして細胞（Ｃ）
については２０時間インキュベートした。このインキュベーションの終わりに、
ＬＤＬ酸化をＴＢＡＲＳ検定によって測定した。マクロファージを介したＬＤＬ
の酸化は、細胞の存在において得た値から細胞の不在において得た値を引くこと
によって計算した。結果は、平均値±ＳＤ（ｎ＝３）として示す。
【００１９】 図７は、銅イオン酸化系（Ａ）およびＡＡＰＨ酸化系（Ｂ）におけるＶＬＤＬ
酸化に関するジェムフィブロジルおよびその代謝産物の効果を示す。ＶＬＤＬ（
１００μｇタンパク質／mL）を、４μＭのジェムフィブロジルまたはその代謝産
物とともに３７℃で４時間インキュベートした。このインキュベーションの終わ
りに、ＶＬＤＬ酸化をＴＢＡＲＳ検定によって測定した。結果は、平均値±ＳＤ
（ｎ＝３）として示す。
【００２０】 図８は、アトルバスタチン、ジェムフィブロジルまたはこれらの代謝産物の不
在または存在における銅イオン（１０μＭ ＣｕＳＯ4）に誘発されたリポタンパ
ク質酸化後のＶＬＤＬのリポタンパク質電気泳動を示す。 図９は、ジェムフィブロジルおよびその代謝産物の遊離基捕捉活性（Ａ）およ
び銅イオンキレート化能力（Ｂ）を示す。Ａ：ジェムフィブロジルまたはその代
謝産物（２０μＭ）を１mM ＤＰＰＨとともにインキュベートして、５１７nmで の吸収の動力学的測定を実施した。同様の型の三つの異なる研究のうちから代表
的な実験を示す。同じ濃度のビタミンＥ（Ｖｉｔ Ｅ）を対照遊離基捕捉剤とし て使用した。Ｂ：ＬＤＬ（１００μｇタンパク質／mL）を、ジェムフィブロジル
またはその代謝産物（３μＭ）とともに、そしてＣｕＳＯ4の濃度を増大させな がら、３７℃で４時間インキュベートし、その後ＴＢＡＲＳ検定によってリポタ
ンパク質酸化の分析を行った。結果は、平均値±ＳＤ（ｎ＝３）として示す。
【００２１】 図１０は、ＬＤＬ酸化に関するジェムフィブロジルの代謝産物Ｉおよびアトル
バスタチンのオルト−ヒドロキシ代謝産物の組み合わせ効果を示す。ＬＤＬ（１
００μｇタンパク質／mL）を１０μＭ ＣｕＳＯ4とともに、単独で（対照）また
は、ジェムフィブロジル代謝産物Ｉ（３μＭ）またはアトルバスタチンオルト−
ヒドロキシ代謝産物（４μＭ）単独、または組み合わせ物の存在において、３７
℃で４時間インキュベートした。その後リポタンパク質酸化をＴＢＡＲＳ検定に
よって測定した。*ｐ＜０.０１（対対照）およびｐ＜０.０１（対代謝産物Ｉ） 、＃Ｐ＜０.０１（対オルト−ヒドロキシ）。結果は、平均値±ＳＤ(ｎ＝３）と
して示す。
【００２２】 図１１は、多不飽和脂肪酸に富む膜調製物におけるアトルバスタチンパラ−ヒ
ドロキシ代謝産物の用量−依存抗酸化剤効果を示す。 図１２は、アトルバスタチンパラ−ヒドロキシ代謝産物、ビタミンＥおよびプ
ロブコールの比較抗酸化剤効力を示す。 図１３は、高い膜コレステロールが高められたアテローム性動脈硬化症様条件
下でのアトルバスタチンパラ−ヒドロキシ代謝産物およびビタミンＥの抗酸化剤
効力を示す。
【００２３】
【発明の詳述】
用語“ヒドロキシル化されたコレステロール低下剤”は、親構造上に置換され
た少なくとも１個のヒドロキシ基を有していて抗酸化剤活性を有する、哺乳動物
においてＬＤＬコレステロールを低下させるのに有効であるいずれかの化合物を
意味する。例としては、ヒドロキシル化されたスタチン類がある。このスタチン
類は、アトルバスタチン、フルバスタチン、およびセリバスタチンのような公知
のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤である。ヒドロキシル化されたスタチン類
は、少なくとも１個のヒドロキシ置換基を有する親スタチン化合物であって、例
としては、図１に示すとおりのオルト−ヒドロキシアトルバスタチンおよびパラ
−ヒドロキシアトルバスタチンである。その他のヒドロキシル化されたコレステ
ロール低下剤は、図２に示すとおりのヒドロキシル化ジェムフィブロジル（代謝
産物Ｉ）のようなヒドロキシ置換されたフィブレート類（fibrates）である。本
発明の方法で使用すべきヒドロキシル化化合物は好ましくは、フェニル環に結合
したヒドロキシ基を有する化合物である。
【００２４】 高脂血症患者における増大したアテローム性動脈硬化症の危険性は、彼らの血
漿リポタンパク質の増強された被酸化性の結果として起こってくる。アトルバス
タチンのような３−ヒドロキシ−３−メチル−グルタリル補酵素Ａ（ＨＭＧ−Ｃ
ｏＡ）レダクターゼ阻害剤、およびトリグリセリド低下薬ベザフィブレート（be
zafibrate）を包含するコレステロール低下薬治療は、高脂血症患者から単離さ れる低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）の酸化に対する増強された感受性を低下さ
せるけれども、この抗酸化効果は、これらの薬剤を使用して試験管内では得るこ
とができなかった。下記の実験は、酸化（例えば脂質過酸化）に対するＬＤＬ、
ＶＬＤＬ、およびＨＤＬの感受性に関するアトルバスタチンおよびジェムフィブ
ロジル、ならびに特定のヒドロキシル化された代謝産物の効果を確立する。銅イ
オン（１０μＭ ＣｕＳＯ4）、遊離基発生剤系２,２′−アゾビス（２−アミジ
ノプロパン）塩酸塩（５mM ＡＡＰＨ）、またはＪ−７７４Ａ.１マクロファージ
−様細胞系のいずれかによって誘発された脂質過酸化は、もとの形のアトルバス
タチンまたはジェムフィブロジルによって阻害されなかったが、濃度に依存して
、薬理学的濃度のアトルバスタチンのオルト−ヒドロキシおよびパラ−ヒドロキ
シ代謝産物、ならびにジェムフィブロジルのパラ−ヒドロキシ代謝産物（代謝産
物Ｉ）によって事実上阻害された（５７％−９７％）。アトルバスタチンのオル
ト−ヒドロキシ代謝産物およびジェムフィブロジルの代謝産物Ｉを組み合わせて
使用すると、ＬＤＬ被酸化性に関する付加的な阻害効果が見られた。上に概略を
示した酸化系における酸化に対するＶＬＤＬおよびＨＤＬの感受性について、上
記の代謝産物の同様の阻害効果（３７％−９６％）が得られた。ＬＤＬ、ＶＬＤ
Ｌ、およびＨＤＬ酸化に関するこれらの代謝産物の阻害効果は、それらの遊離基
捕捉活性、ならびに（主にジェムフィブロジル代謝産物Ｉについては）それらの
金属イオンキレート化能力に関係づけることができた。さらに、ＨＤＬ酸化の阻
害は、ＨＤＬ−関連パラオキソナーゼ（paraoxonase）活性の保存と関連してい た。このデータは、アトルバスタチンのヒドロキシ代謝産物、およびジェムフィ
ブロジルの代謝産物Ｉが有力な抗酸化力を有して、結果としてＬＤＬ、ＶＬＤＬ
、およびＨＤＬを酸化から保護することを立証している。こうしてヒドロキシル
化されたコレステロール低下剤は、それらの抗酸化剤特性によってリポタンパク
質のアテローム発生力を低下させるために有用である。
【００２５】 ＬＤＬ酸化は、初期のアテローム発生におけるキープロセスであり、このため
ＬＤＬ酸化の阻害は抗アテローム発生性である。ＶＬＤＬおよびＨＤＬ酸化もま
た、酸化ストレス中に起こり、これもアテローム発生に寄与する。抗酸化剤は、
環境的ならびに遺伝的に誘導される。例えば、リポタンパク質と関連するビタミ
ンＥ、カロチノイド、またはポリフェノール性フラボノイドのような食事性抗酸
化剤は、これらを酸化から保護する。さらに、ＨＤＬ−関連パラオキソナーゼの
ような遺伝的因子もまた、酸化ストレスの損傷からこのリポタンパク質を保護す
る。高コレステロール血症患者に由来するＬＤＬの酸化に対する増強された感受
性は、コレステロール低下治療によって有意に低下させられる。その結果、脂質
低下治療は、その血漿ＶＬＤＬ、ＬＤＬ、およびＨＤＬ水準に関する効果のため
ばかりでなく、それがアテローム発生性の酸化されたリポタンパク質の形成を減
少させることができるので、有用であると考えることができる。
【００２６】 ＬＤＬ酸化の生体外（ex vivo）阻害は、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤 ロバスタチン、シンバスタチン（simvastatin）、プラバスタチン（pravastatin
）、またはフルバスタチンの高コレステロール血症患者への投与後に示された。
ＬＤＬ被酸化性に関するこれらの薬剤の阻害効果は、新しく合成されたＬＤＬよ
りもより酸化されやすい血漿“老化（aged）ＬＤＬ”の増大した除去の結果とし
て起こることが示唆された。この効果は、肝臓細胞におけるＬＤＬ受容体活性の
スタチンに誘発された刺激および肝臓ＶＬＤＬおよびＬＤＬ産生の阻害に対する
二次的なものである。薬物治療中に肝臓で産生される親スタチンの代謝産物もま
た、機械的に包含される。肝臓Ｐ４５０薬物代謝系活性は、通常はヒドロキシル
化によって、もとのスタチン構造を変えることに関係する。事実、フルバスタチ
ンを除く上記のスタチンはすべて、治療された高コレステロール血症患者におい
て観察される血中薬物レベルに匹敵する濃度で試験したとき、試験管内ＬＤＬ酸
化に対して直接的な抗酸化剤効果を示さなかった。新規なＨＭＧ−ＣｏＡ−レダ
クターゼの阻害剤であるアトルバスタチンは、血漿の総コレステロールレベルお
よびＬＤＬコレステロールレベルの両方を低下させるための最も有効なスタチン
である。この化合物はまた、すべてのリポタンパク質分画に対する有意のトリグ
リセリド低下性をも有する。アトルバスタチン治療は、ＬＤＬ受容体活性を増大
させ、リポタンパク質を含むアポリポタンパク質Ｂ−１００の直接的な産生を阻
害する。親薬物およびその代謝産物は両者とも、１４ないし３６時間という比較
的長い循環半減期を有する。フィブレート（fibrate）薬剤もまた、酸化に対す るリポタンパク質の感受性に影響を及ぼすことができ；例えばベザフィブレート
はこのような能力を有する。フィブリル酸（fibric acid）誘導体は、リポタン パク質リパーゼの活性化、およびアポＣ−III合成の減少に対して二次的に、ト リグリセリドに富むリポタンパク質の異化作用を促進する脂質調節性薬物である
。もう一つのフィブレートであるジェムフィブロジルは、血漿トリグリセリドを
減少させるばかりでなく、ヒトにおいて血漿ＨＤＬ濃度を増大させ、そして雄の
カニクイザルにおいて血漿リポタンパク質（ａ）レベルを低下させることも示さ
れた。ヒトにおいては、ジェムフィブロジルは代謝されてジェムフィブロジルア
シルグルクロニドとなり、これらの代謝産物は、治療後に志願者の血漿および尿
中に見出される。ジェムフィブロジルで治療した齧歯動物の血漿中に見出される
ジェムフィブロジルのパラ−ヒドロキシ代謝産物（代謝産物Ｉ）のレベルは、治
療したヒトのそれよりもはるかに高く、おそらく用量および代謝の差異を反映し
ている。我々はこの度、酸化に対するＬＤＬ、ＶＬＤＬ、およびＨＤＬの感受性
に関するアトルバスタチンおよびジェムフィブロジル、ならびに特定のヒドロキ
シル化された代謝産物（単独および組み合わせで）の効果を示した。結果は、個
々の薬物代謝産物（但し親薬物ではない）の血漿リポタンパク質酸化に関する阻
害効果、および組み合わせたときの相加的な効果を明確に証明している。データ
は、ヒドロキシル化誘導体がリポタンパク質の酸化を予防してそれによってそれ
らのアテローム発生能力を低下させるために有用であることを立証している。 以下の詳細な実施例は、種々のヒドロキシル化されたコレステロール低下剤の
抗酸化剤活性を証明する。
【００２７】 実施例１ 物質：アトルバスタチンおよびそのオルト−ヒドロキシおよびパラ−ヒドロキ
シ代謝産物（図１）、ならびにジェムフィブロジルおよびその代謝産物Ｉ（図２
）は、先行技術の方法によって合成した。２,２′−アゾビス（２−アミジノプ ロパン）塩酸塩（ＡＡＰＨ）は、ワコー・ケミカル・インダストリーズ社（Wako
Chemical Industries, Ltd.）（大阪、日本）から購入した。１,１−ジフェニ ル−２−ピクリル−ヒドラジル（ＤＰＰＨ）は、シグマ（Sigma）（セントルイ ス、ミズーリ）から購入した。
【００２８】 リポタンパク質：血清ＶＬＤＬ、ＬＤＬ、およびＨＤＬは、絶食した正常な脂
血状態の志願者から単離した。リポタンパク質は、不連続密度勾配超遠心分離に
よって調製した。これらのリポタンパク質をその適当な密度（各々１.００６ｇ ／mL、１.０６３ｇ／mL、および１.２１０ｇ／mL）で洗浄して、４℃で１５０mM
ＮａＣｌ（ｐＨ７.４）に対して透析した。このリポタンパク質を次に、濾過（
０.４５μＭ）によって滅菌し、窒素下、暗所で４℃に保ち、２週間以内に使用 した。酸化研究の前に、これらのリポタンパク質を窒素下４℃でＰＢＳ、ＥＤＴ
Ａを含まない溶液、ｐＨ７.４に対して透析した。このリポタンパク質は、リム ルスのアメボサイト溶解産物検定（Limulus Amebocyte Lysate assay）［アソシ
エーテッド・オブ・ケープコド社（Associated of Cape Cod，Inc）；ウッズホ ール、マサチューセッツ、米国］によって分析したとき、リポポリサッカリド（
ＬＰＳ）汚染されていないことがわかった。リポタンパク質のタンパク質含量は
、標準的な方法によって決定した。
【００２９】 リポタンパク質酸化：リポタンパク質（１００μｇタンパク質／mL）を１０μ
Ｍ ＣｕＳＯ4または５mM ＡＡＰＨとともに３７℃で４時間インキュベートした
。ＡＡＰＨは、熱分解して定速度で水溶性のペルオキシ基を発生させる水溶性ア
ゾ化合物である。酸化は、１０μＭのブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）の
添加および４℃での冷蔵によって停止させた。リポタンパク質酸化度は、標準曲
線としてマロンジアルデヒド（ＭＤＡ）を使用するチオバルビツール酸反応物質
（ＴＢＡＲＳ）検定によって測定した。さらに、リポタンパク質酸化はまた、脂
質過酸化物をそれらがヨウ化物をヨウ素（これは、３６５nmで測光法によって測
定することができる）に変換する能力によって分析する、脂質過酸化試験によっ
ても決定した。ＬＤＬ酸化の動態は、２３４nmでの吸収の増加として共役ジエン
の形成を測定することによって連続的に監視した。
【００３０】 マクロファージによるＬＤＬ酸化：Ｊ−７７４Ａ.１ネズミのマクロファージ −様細胞系は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（American Typ
e Culture Collection）（ロックヴィル、メリーランド）から購入した。このマ
クロファージを、５％加熱不活性化ウシ胎児血清（ＦＣＳ）を追加したダルベッ
コ改良イーグル培地（Dulbecco's Modified Eagles Medium）（ＤＭＥＭ）中で 成長させた。リポタンパク質酸化研究のために、細胞（１×１０6／３５mm皿） を２μＭのＣｕＳＯ4の存在においてＲＰＭＩ培地（フェノールレッドを含まな い）中でＬＤＬ（１００μｇタンパク質／mL）とともに、インキュベーター中、
３７℃で２０時間インキュベートした。対照ＬＤＬもまた、同一条件下で細胞を
含まない系中でインキュベートした。インキュベーション期間の終わりに、ＬＤ
Ｌ酸化度を培地中で（１０００×ｇで１０分間遠心分離後に）ＴＢＡＲＳ検定に
よって測定した。細胞を介したＬＤＬの酸化は、細胞を用いて得た値から細胞を
含まない系で得た値を引くことによって計算した。
【００３１】 リポタンパク質電気泳動：リポタンパク質（１００μｇタンパク質／mL）を、
薬剤を使用しないかまたは使用してインキュベートし、続いて１０μＭのＣｕＳ
Ｏ4の存在において酸化した。次に、これらのリポタンパク質の電気泳動を、１ ％アガロース上でヒドラゲル−リポ（Hydragel-Lipo）キット（セビア、フラン ス）を使用して実施した。
【００３２】 遊離基捕捉能力：薬剤の遊離基捕捉能力は、１,１−ジフェニル−２−ピクリ ル−ヒドラジル（ＤＰＰＨ）検定によって分析した。各薬剤（２０μＭ）を３mL
の０.１ナノモルＤＰＰＨ／Ｌ（エタノール中）と混合した。その後、５１７nm での光学密度の変化の時間的推移を動力学的に監視した。
【００３３】 パラオキソナーゼ活性測定：パラオキソンの加水分解の速度を、２５℃で４１
２nmでのｐ−ニトロフェノールの形成を測定することによって評価した。基本検
定混合物は、５０mMグリシン／ＮａＯＨ ｐＨ１０.５中に１.０mMパラオキソン および１.０mM ＣａＣｌ2を含んでいた。１単位のパラオキソン活性は、毎分１ ナノモルのｐ−ニトロフェノールを生成する。
【００３４】 統計的分析：二つの平均値を比較する際にはスチューデントのｔ−検定を使用
し、一方、二つ以上のグループを比較するときは分散分析（ＡＮＯＶＡ）を使用
した。データは、平均値±標準偏差（ＳＤ）として示す。
【００３５】 結 果 酸化に対するリポタンパク質の感受性に関するアトルバスタチンおよびそのヒ
ドロキシ代謝産物の効果、ならびにジェムフィブロジルおよびそのヒドロキシ代
謝産物の効果は、金属イオンを含む系（１０μＭ ＣｕＳＯ4）、遊離基を発生さ
せる能力を有する系（５mM ＡＡＰＨ）、および生物学的酸化に似せた系（Ｊ− ７７４Ａ.１マクロファージ−様細胞系）を包含するいくつかの酸化系で検討し た。
【００３６】 アトルバスタチンとリポタンパク質酸化：ＬＤＬ酸化は、オルト−ヒドロキシ
およびパラ−ヒドロキシアトルバスタチン代謝産物によって阻害されたが、検討
したすべての酸化系においてアトルバスタチンによっては酸化されなかった。こ
れらの阻害効果は、濃度依存性である（図３）。１０μＭでは、オルト−ヒドロ
キシおよびパラ−ヒドロキシ代謝産物の両者は、ＴＢＡＲＳ検定によって測定さ
れるＬＤＬ酸化を、ＣｕＳＯ4系では各々７３％および６０％（図３(Ａ)）；Ａ ＡＰＨ系では各々４４％および３４％（図３(Ｂ)）；そしてマクロファージ系で
は各々５０％および４６％（図３(Ｃ)）；阻害した。検討したすべての濃度およ
びすべての酸化系で、オルト−ヒドロキシ代謝産物は、パラ−ヒドロキシ代謝産
物よりも優れたＬＤＬ酸化阻害剤であった（図３）。両方のアトルバスタチン代
謝産物のより有力な阻害効果は、遊離基発生系によって誘発されるもの（図３( Ｂ)）に比較して、金属イオン酸化系（図３(Ａ)）で得られた。ＬＤＬ酸化をリ ポタンパク質−関連過酸化物の分析によって決定したとき、同様の結果を他の酸
化系において得た。アトルバスタチンのオルト−ヒドロキシおよびパラ−ヒドロ
キシ代謝産物は、ＬＤＬ−関連過酸化物含量を、ＣｕＳＯ4系では対照ＬＤＬの ７１０±５１から各々１９２±１５および２８４±１３ナノモル／mgＬＤＬタン
パク質まで、そしてＡＡＰＨ系では対照ＬＤＬの９９０±８９から各々５５４±
３２および６２４±３８ナノモル／mgＬＤＬタンパク質まで、低下させた。さら
に、銅イオン（１０μＭ ＣｕＳＯ4）に誘発されたＬＤＬ酸化中の２３４nmでの
共役ジエン形成の動力学的分析は、ＬＤＬ酸化の開始のために必要な遅延時間が
、対照またはアトルバスタチン−処理したＬＤＬのいずれかについて５０±７分
（ｎ＝３）であり、一方ＬＤＬ共役ジエン形成は、両方のアトルバスタチン代謝
産物について１８０±２５分（ｎ＝３）後に始まるにすぎなかったことを示した
。
【００３７】 ＶＬＤＬ酸化に関するアトルバスタチンおよびその代謝産物の効果は、図４に
報告する。銅イオン酸化系では、オルト−ヒドロキシおよびパラ−ヒドロキシ代
謝産物（１０μＭ）は、リポタンパク質酸化を各々７９％および３７％阻害し（
図４(Ａ)）、一方アトルバスタチン自体は、効果を有していなかった。ＡＡＰＨ
酸化系では、これらの代謝産物の阻害効果は、各々４３％および１６％にすぎず
（図４(Ｂ)）、そしてここでもアトルバスタチン自体は、効果を有していなかっ
た。同様の結果は、ＶＬＤＬ酸化を過酸化物形成によって分析したとき見られた
。アトルバスタチンのオルト−ヒドロキシおよびパラ−ヒドロキシ代謝産物は、
ＶＬＤＬ−関連過酸化物含量を、ＣｕＳＯ4系では対照ＶＬＤＬの１８１８±３ ３３から各々２４２±２２および１０８８±３１０ナノモル／mgＶＬＤＬタンパ
ク質まで、そしてＡＡＰＨ系では対照ＶＬＤＬの２１６９±３２９から各々１２
２８±２１０および１８１９±２２８ナノモル／mgＶＬＤＬタンパク質まで、低
下させた。同様に、同様のインキュベーション条件下でのＣｕＳＯ4の存在にお けるＨＤＬ酸化は、オルト−ヒドロキシ代謝産物がＨＤＬ酸化を完全に阻害し、
一方パラ−ヒドロキシ代謝産物がリポタンパク質酸化を約５０％阻害したことを
示した（表１）。ＨＤＬ酸化に関するこれらの代謝産物の阻害効果は、各々５４
％および２７％のパラオキソナーゼの保護と関連していた。ＨＤＬ−関連パラオ
キソナーゼの高められた活性が、加えた親薬物なしに酸化されたＨＤＬにおける
パラオキソナーゼ活性と比較して、認められた（表１）。
【００３８】
【表１】
【００３９】 リポタンパク質酸化に関するアトルバスタチン代謝産物の阻害効果はまた、遊
離基捕捉活性および金属イオンキレート化能力にも関係している。ＤＰＰＨ検定
においては、アトルバスタチンの両代謝産物（２０μＭ）によるがアトルバスタ
チンにはよらない５１７nmでの吸収の時間に依存する減少（図５(Ａ)）が観察さ
れた。３００秒のインキュベーション後に、オルト−ヒドロキシおよびパラ−ヒ
ドロキシ代謝産物は、５１７nmでの吸収を各々３７％および２８％減少させた。
比較として、９５％の５１７nmでの吸収の減少を２０μＭの遊離基捕捉剤抗酸化
剤、ビタミンＥによって得た（図５Ａ）。これらの結果は、アトルバスタチン代
謝産物が実質的な遊離基捕捉能力を有することを立証する。
【００４０】 銅イオンのキレート化によってＬＤＬ酸化の阻害剤として作用するアトルバス
タチン代謝産物の能力は、過剰濃度の銅イオンがＬＤＬ酸化に関するこれらの代
謝産物の阻害効果を克服することができるかどうかを決定するために、ＣｕＳＯ 4 の濃度を増大させながら３７℃で２時間までＬＤＬインキュベーションを行う ことによって試験した（図５(Ｂ)）。増大する濃度の銅イオンをインキュベーシ
ョン系に添加すると、対照ＬＤＬと比較して、代謝産物が存在するときはＬＤＬ
酸化に少量の増加のみが起こり（図５(Ｂ)）、これらの代謝産物が金属イオンの
キレート化によってＬＤＬ酸化を阻害するための最小の能力しか有していないこ
とを示した。
【００４１】 実施例２ ジェムフィブロジルとリポタンパク質酸化 ジェムフィブロジルおよびその代謝産物の一つ（代謝産物Ｉ）のＬＤＬ酸化に
関する効果を決定するために上記の実験を実施したが、この実験は、アトルバス
タチン（図３〜５）について示したものと同様である。ＬＤＬ酸化は、研究した
酸化系のすべてにおいて、代謝産物Ｉによって阻害されたが、ジェムフィブロジ
ル自体によっては阻害されなかった。この代謝産物Ｉの阻害効果は、濃度依存性
であった（図６）。４μＭの低濃度で、ジェムフィブロジル代謝産物Ｉは、ＴＢ
ＡＲＳ検定によって測定されるＬＤＬ酸化を、ＣｕＳＯ4酸化系で９６％（図６(
Ａ)）、ＡＡＰＨ酸化系で２６％（図６(Ｂ)）、そしてＪ−７７４Ａ.１マクロフ
ァージを介する酸化系で９９％（図６(Ｃ)）阻害した。同様の結果が、ＬＤＬ酸
化を形成された過酸化物の量によって分析したとき見られた。ジェムフィブロジ
ル代謝産物Ｉは、ＬＤＬ−関連過酸化物を、ＣｕＳＯ4系では７１０±５７から ２８±７ナノモル／mgＬＤＬタンパク質まで、そしてＡＡＰＨ系では９１７±７
８から７０３±３８ナノモル／mgＬＤＬタンパク質まで、減少させた。さらに、
ＬＤＬ酸化の開始のために必要な時間（共役ジエン形成の動力学的分析によって
測定した）は、ＬＤＬ単独またはジェムフィブロジルの存在におけるＬＤＬにつ
いて６０±９分の遅延時間を示した。対照的に、ジェムフィブロジル代謝産物Ｉ
を用いた２４０分のインキュベーション後でさえＬＤＬにおける共役ジエン形成
は、観察されなかった。
【００４２】 ＶＬＤＬ酸化に関するジェムフィブロジルおよびその代謝産物の効果の分析も
また、ジェムフィブロジルではなく代謝産物Ｉ（４μＭ）の、ＣｕＳＯ4酸化系 でのＶＬＤＬ酸化の９６％阻害（図７(Ａ)）およびＡＡＰＨ酸化系での９１％阻
害（図７(Ｂ)）という非常に有力な阻害効果を示した。 アトルバスタチンおよびその代謝産物を用いるかまたはジェムフィブロジルお
よびその代謝産物の存在におけるその酸化後のＶＬＤＬのリポタンパク質電気泳
動は、アトルバスタチンオルト−ヒドロキシ代謝産物およびジェムフィブロジル
代謝産物Ｉの、リポタンパク質の電気泳動での移動を減少させる能力を明確に証
明した（図８）。同じ結果がＬＤＬおよびＨＤＬに対して得られた。
【００４３】 １０μＭ ＣｕＳＯ4の存在においてＨＤＬを酸化すると、ジェムフィブロジル
の代謝産物Ｉは、ＨＤＬ−関連パラオキソナーゼ活性の初期水準を保つ（表２）
パラオキソナーゼ活性の保護を伴って、実質的にリポタンパク質酸化を阻害した
（表２）。ジェムフィブロジル自体は効果を有さなかった。 リポタンパク質酸化は、１０μＭの薬剤の不在（対照）または存在において、
１０μＭのＣｕＳＯ4を用いて３７℃で４時間実施した。銅イオンを用いるその インキュベーション前のＨＤＬパラオキソナーゼ活性は、５０±３ナノモル／mg
ＨＤＬタンパク質／分であった。結果は、平均値＋ＳＤ（ｎ＝３）として示す。
【００４４】
【表２】
【００４５】 ジェムフィブロジル代謝産物Ｉによるリポタンパク質酸化の阻害の原因となる
メカニズムを分析すると、この代謝産物の遊離基捕捉能力（図９(Ａ)）および銅
イオンキレート化能力（図９(Ｂ)）の両方が示された。ＤＰＰＨ検定を使用する
と、ジェムフィブロジル自体ではなく代謝産物Ｉ（２０μＭ）のみが時間に依存
する５１７nmの吸収における減少を示し、３００秒のインキュベーション後に光
学密度の８６％までの減少を示した（図９(Ａ)）。ジェムフィブロジル代謝産物
Ｉの存在における３７℃で２時間の、増大する濃度のＣｕＳＯ4を用いるＬＤＬ インキュベーションは、２０μＭのＣｕＳＯ4を使用すると、代謝産物Ｉの阻害 効果は完全に妨げられて（図９(Ｂ)）、このＬＤＬ酸化系においては、代謝産物
Ｉによる銅イオンのキレート化がリポタンパク質酸化の阻害に役割を演じること
を示すことを表した。
【００４６】 実施例３ アトルバスタチンとジェムフィブロジルとの間の相互作用 上記の一般手順を繰り返して、組み合わせた有力な代謝産物（ジェムフィブロ
ジル代謝産物Ｉおよびアトルバスタチンオルト−ヒドロキシ代謝産物）の試験管
内添加がＬＤＬ酸化に関していずれかの薬剤単独よりも大きな阻害効果を生じる
かどうかを決定した。低濃度のジェムフィブロジルの代謝産物Ｉ（３μＭ）また
はアトルバスタチンのオルト−ヒドロキシ代謝産物（４μＭ）を使用すると、対
照ＬＤＬと比較して、各々、銅イオンに誘発されたＬＤＬ酸化に関するこれらの
薬物の各々の４０％または４３％阻害効果のみが観察された（図１０）。しかし
ながら、上記の濃度のこれらの代謝産物の組み合わせ物を使用すると、ＬＤＬ酸
化について８８％という有意の相加的阻害効果が観察された（図１０）。
【００４７】 実施例４ アトルバスタチンパラ−ヒドロキシ代謝産物、および公知の抗酸化剤であるビ
タミンＥおよびプロブコールを、多不飽和脂肪酸に富む膜小胞において評価した
。脂質過酸化実験のために、５００μＬの膜小胞を、濃度１.０mgＤＬＰＣ／mL にジリノレオイルホスファチジルコリン（ＤＬＰＣ）濃度を高めた。濃厚化小胞
は、ＨＥＰＥＳ緩衝剤［Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ′−（２
−エタンスルホン酸）］（０.５mM ＨＥＰＥＳ、１５４.０mM ＮａＣｌ、ｐＨ７
.３）中で新しく調製した。緩衝液は、抗酸化剤を加えずに（対照として）、そ して（１）種々の濃度のアトルバスタチンパラ−ヒドロキシ代謝産物；（２）ビ
タミンＥ；および（３）プロブコール｛これは、４,４′−［（１−メチルエチ リデン）ビス（チオ）］ビス［２,６−ビス（１,１−ジメチルエチル）−フェノ
ール］である｝；を加えて製造した。膜小胞溶液を直ちに３７℃で振盪している
水浴中に入れた。インキュベーション期間（０〜７２時間）中に、１００μＬの
アリコート試料を取り除いて、５.０mMのエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ） ２５μＬおよび３５.０mMのブチル化ヒドロキシトルエン２０μＬを添加するこ とによって過酸化反応を停止させた。各試料における脂質過酸化度は、ＣＨＯＤ
−ヨウ化物〔メルク（Merk）、ダームスタット、ドイツ連邦共和国、メルク・カ
タログ（Merk Cat.）第14106号〕として公知の呈色試薬を使用して、血清リポタ
ンパク質中の脂質過酸化物についての分光光度検定によって測定した。呈色試薬
は下記の組成を有する： リン酸カリウム、ｐＨ６.２ ０.２Ｍ ヨウ化カリウム ０.１２Ｍ ナトリウムアジド ０.１５μＭ ポリエチレングリコールモノ[ｐ−(1,1′,3,3′− テトラメチル−ブチル−フェニル］エーテル ２ｇ／Ｌ 塩化アルキルベンジルジメチルアンモニウム ０.１ｇ／Ｌ モリブデン酸アンモニウム １０μＭ
【００４８】 形成された三ヨウ化物の濃度は、式（Ｌ＝リポタンパク質） ＬＯＯＨ＋２Ｈ+＋２Ｉ- → ＬＯＨ＋Ｈ2Ｏ＋Ｉ2 Ｉ2＋Ｉ- → Ｉ3 - に従って分光光度計によって測定した。
【００４９】 取り除いた膜小胞のアリコートの各々に、１.０mLのＣＨＯＤ呈色試薬を加え て、この試料を光の不在において４時間インキュベートした。溶液の吸収を３６
５nm（ε＝２.４×１０4Ｍ-1cm-1）で測定した。脂質過酸化物形成は、三重反復
試験で測定し、値は、平均値±ＳＤとして表した。異なる実験条件からの結果の
間の差異の有意性を両側スチューデントｔ−検定を使用して検定した。
【００５０】 アトルバスタチンパラ−ヒドロキシ代謝産物の抗酸化剤活性を種々の投与濃度
について図１１に示す。その結果は、パラ−ヒドロキシ化合物が用量に依存する
抗酸化剤活性を有し、１０.０μＭでは脂質過酸化の８０％阻害を引き起こすこ とを立証している。１０.０μＭのような低濃度でさえ、パラ−ヒドロキシ化合 物は、高レベル（＞１０2μＭ）の脂質過酸化を阻害した。
【００５１】 図１２に示す結果は、アトルバスタチンパラ−ヒドロキシ代謝産物が他の公知
の抗酸化剤、特にビタミンＥおよびプロブコールよりも有意に活性であることを
立証する。 アトルバスタチンパラ−ヒドロキシ代謝産物の抗酸化剤活性は、膜コレステロ
ールが高められたアテローム性動脈硬化症−様条件下で増大し、そしてこのこと
は、図１３に示されている。
【００５２】 前記の実験は、例えばアトルバスタチンのようなＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ
阻害剤、およびフィブリル酸（fibric acid）誘導体、例えばジェムフィブリジ ルの代謝産物が、いくつかの酸化系においてリポタンパク質酸化を有意に阻害し
たことを立証する。ＬＤＬ酸化は、それがマクロファージコレステロール蓄積お
よび泡沫細胞形成、ならびに細胞毒性、血栓症、および炎症に寄与するので、ア
テローム発生における重要な事象である。このため、ＬＤＬ酸化の阻害は、アテ
ローム性動脈硬化症のプロセスの減衰に寄与する。同じように広範囲にわたって
研究してはいないけれども、ＶＬＤＬおよびＨＤＬ酸化もまた、酸化ストレス下
で起こり、そしてまたアテローム性動脈硬化症の発生を促進する。ＶＬＤＬにお
いては、脂質過酸化は主に、コアトリグリセリド多不飽和脂肪酸の酸化を包含し
、一方ＨＤＬにおいては、表面リン脂質脂肪酸が酸化に感受性の主要基質である
。
【００５３】 高コレステロール血症患者および高トリグリセリド血症患者においては、高い
血中コレステロールおよびトリグリセリド濃度は、アテローム性動脈硬化症に対
する危険因子である。増大した危険性は、酸化に対するリポタンパク質の高めら
れた感受性による。いくつかの脂質低下薬は、高コレステロール血症患者におい
て酸化に対するＬＤＬの高められた傾向を低下させることが示された。このＬＤ
Ｌ酸化に関する阻害効果は、より酸化変形しやすい“老化ＬＤＬ”の（主に肝臓
での、薬物に誘発された増大したＬＤＬ受容体活性による）増大した除去の結果
として生ずることができた。さらに、この酸化に対する保護効果は、抗酸化性を
有する生体内で形成される薬物代謝産物の結果として生ずることができる。しか
しながら、フルバスタチンを除いて、検討した脂質低下薬の親形のいずれも、薬
理学的濃度で試験管内で試験したときＬＤＬ酸化に関して直接的な阻害効果を示
さなかった。上記のデータは、親薬物のアトルバスタチンおよびジェムフィブリ
ジルは、高濃度で使用するときでさえ、試験管内でＬＤＬ、ＶＬＤＬ、またはＨ
ＤＬの被酸化性に影響を及ぼさないことを立証している。しかしながら、低薬理
学的濃度の特定のヒドロキシル化された代謝産物は、金属イオン−依存性系およ
び−非依存性系の両方において、ＬＤＬ、ＶＬＤＬ、およびＨＤＬ酸化に関して
非常に有力な阻害効果を誘発する。リポタンパク質被酸化性に関するこの薬物代
謝産物の阻害効果は、ＡＡＰＨ系と比較して、ＣｕＳＯ4系においてより著しい ことがわかり、そしてこの現象は、遊離基の捕捉および銅イオンの結合の両方に
関する代謝産物の効果と関連づけることができる。ジェムフィブリジル代謝産物
Ｉおよびアトルバスタチンのヒドロキシ代謝産物は両者とも、有力な遊離基捕捉
剤であることが示された。
【００５４】 アトルバスタチンオルト−ヒドロキシ代謝産物と比較して、ジェムフィブリジ
ル代謝産物Ｉは、ＣｕＳＯ4酸化系においてより良好な金属イオンキレート化剤 として作用した。増大した銅イオン濃度は、ＬＤＬ酸化に関して、ジェムフィブ
リジル代謝産物Ｉの阻害効果を完全に無効としたが、アトルバスタチン代謝産物
のそれは無効とはしなかった。ヒドロキシル基が分子のカルボキサミド部分に結
合しているアトルバスタチンヒドロキシ代謝産物の分子構造は、これらの代謝産
物が電子供与体として、そしてこのために有力な抗酸化剤として、作用すること
を可能にする（図１）。アミノ基に対してオルト位のヒドロキシル基（ヒドロキ
シル基はパラ位にはない）は、比較的安定なペルオキシル基の遷移状態を形成す
ることができて、このため有力な抗酸化剤として作用するので、オルト−ヒドロ
キシ代謝産物はアトルバスタチンのパラ−ヒドロキシ代謝産物よりも有力な抗酸
化剤である。同様に、ジェムフィブリジル代謝産物Ｉにおいては（ジェムフィブ
リジルにおいてではない）、芳香環上のヒドロキシル基は、事実上この化合物の
抗酸化性に寄与することができる（図２）。
【００５５】 酸化ストレス下では、リポタンパク質の酸化は、反応性酸素種の作用を包含し
、そして遷移金属イオンがアテローム性動脈硬化の病変の領域に存在することが
公知であるので、上記の実験で使用した酸化モデルは、生体内環境の典型である
。 ＬＤＬ酸化に関するアトルバスタチンおよびジェムフィブロジル代謝産物の両
者の阻害効果はまた、ＶＬＤＬおよびＨＤＬに対しても示された。阻害のパター
ンは、すべての検討された酸化系において同様であった。これらの結果は、代謝
産物が通常のメカニズム、すなわち遊離基捕捉および金属イオンキレート化によ
ってリポタンパク質酸化に関するそれらの阻害効果を出すことを立証している。
ある研究では、家族性の組み合わせ（familial combined）高脂血症を持つ両親 においては、ジェムフィブロジル治療は、ＬＤＬ被酸化性に有意に影響を及ぼさ
なかった。しかしながら、この観察は、ＬＤＬ酸化に関して抗酸化効果を働かせ
るにはあまりにも低い薬物代謝産物濃度、または試料収集の時間、の結果として
生じることができた。さらに、薬物代謝産物は、血漿の非−リポタンパク質成分
（例えばアルブミン）と会合することができるか、または細胞または介在する区
画内に隔離されることができた。こうして、治療を受けたヒトまたは実験動物か
ら単離したリポタンパク質の酸化能力の生体外（ex vivo）試験は、生体内リポ タンパク質の環境を必ずしも反映しない。
【００５６】 上に示したデータは、ヒドロキシル化されたコレステロール低下剤が遊離基を
捕捉することおよびリポタンパク質の金属イオンキレート化を減少させることに
よってリポタンパク質の酸化を阻害することを立証している。従って、本発明は
、リポタンパク質酸化を阻害する方法、ならびにリポタンパク質の金属イオンキ
レート化を阻害する方法、および遊離基を捕捉する方法を提供する。リポタンパ
ク質の金属イオンキレート化を阻害するため、および遊離基を捕捉するために必
要なヒドロキシル化されたコレステロール低下剤の量は、すべて本明細書中では
“抗酸化剤量”と称する。
【００５７】 ヒドロキシル化されたコレステロール低下剤は、抗酸化剤量、すなわちリポタ
ンパク質酸化の阻害を引き起こすのに有効な量で投与される。このような抗酸化
剤有効量は、約１ないし約１００mg／kgである。このような量の活性薬剤は、リ
ポタンパク質酸化を阻害するために１日に１ないし約４回投与される。
【００５８】 ヒドロキシル化された化合物は、好都合な経口または非経口投与用に製剤化さ
れ、炭酸カルシウム、カンデリラロウ、ヒドロキシプロピルセルロース、ラクト
ース、ステアリン酸マグネシウム、微結晶性セルロース、ポリエチレングリコー
ル、タルク、および二酸化チタンのような通常の賦形剤およびキャリヤーと組み
合わせられる。経口投与用には、これらの配合物は、加圧して錠剤にするか、ま
たはゼラチンカプセル中に封入することができる。典型的な錠剤は、活性成分を
約１０mgないし約８０mg含有する。本化合物はさらに、例えば浸透ポンプ技術な
らびに経皮性皮膚用パッチを使用して、徐放性剤形として製剤化することができ
る。非経口投与用には、本化合物は典型的には、好都合な静脈内投与用、または
注射用に等張生理食塩水に溶解させる。
【図面の簡単な説明】
【図１】 アトルバスタチンおよびそのヒドロキシル化された代謝産物の構造式を示す。
【図２】 ジェムフィブロジルおよびそのヒドロキシル化された代謝産物の構造式を示す
。
【図３】 銅イオン酸化系（Ａ）、ＡＡＰＨ酸化系（Ｂ）およびＪ−７７４Ａ.１マクロ ファージ酸化系（Ｃ）におけるＬＤＬ酸化に関するアトルバスタチンおよびその
ヒドロキシル化された代謝産物の効果を示す。
【図４】 銅イオン酸化系（Ａ）およびＡＡＰＨ酸化系（Ｂ）におけるＶＬＤＬ酸化に関
するアトルバスタチンおよびそのヒドロキシル化された代謝産物の効果を示す。
【図５】 アトルバスタチンおよびそのヒドロキシル化された代謝産物の遊離基捕捉活性
（Ａ）および銅イオンキレート化能力（Ｂ）を示す。
【図６】 銅イオン酸化系（Ａ）、ＡＡＰＨ酸化系（Ｂ）およびＪ−７７４Ａ.１マクロ ファージ酸化系（Ｃ）におけるＬＤＬ酸化に関するジェムフィブロジルおよびジ
ェムフィブロジル代謝産物濃度の効果を示す。
【図７】 銅イオン酸化系（Ａ）およびＡＡＰＨ酸化系（Ｂ）におけるＶＬＤＬ酸化に関
するジェムフィブロジルおよびその代謝産物の効果を示す。
【図８】 アトルバスタチン、ジェムフィブロジル、またはこれらの代謝産物の不在また
は存在における銅イオン（１０μＭ ＣｕＳＯ4）に誘発されたリポタンパク質酸
化後のＶＬＤＬのリポタンパク質電気泳動を示す。
【図９】 ジェムフィブロジルおよびその代謝産物の遊離基捕捉活性（Ａ）および銅イオ
ンキレート化能力（Ｂ）を示す。
【図１０】 ＬＤＬ酸化に関するジェムフィブロジルの代謝産物Ｉおよびアトルバスタチン
のオルト−ヒドロキシ代謝産物の組み合わせ効果を示す。
【図１１】 多不飽和脂肪酸に富む膜調製物におけるアトルバスタチンパラ−ヒドロキシ代
謝産物の用量−依存抗酸化剤効果を示す。
【図１２】 アトルバスタチンパラ−ヒドロキシ代謝産物、ビタミンＥおよびプロブコール
の比較抗酸化剤効力を示す。
【図１３】 高い膜コレステロールのアテローム性動脈硬化症様条件下でのアトルバスタチ
ンパラ−ヒドロキシ代謝産物およびビタミンＥの抗酸化剤効力を示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 9/10 Ａ６１Ｐ 9/10 43/00 １１１ 43/00 １１１ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ) ，ＡＬ，ＡＵ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＣＡ，ＣＮ， ＣＵ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＥ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，Ｉ Ｓ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ， ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，Ｕ Ｚ，ＶＮ，ＹＵ (72)発明者 ロジャー・スコフィールド・ニュートン アメリカ合衆国ミシガン州48105．アンア ーバー．バーズタウントレイル1425 (72)発明者 マイラ・ローゼンブラート イスラエル国31096ハイファ．ラムバム・ メディカルセンター．リピッドリサーチ Ｆターム(参考） 4C084 AA17 ZA452 ZC332 ZC412 4C086 AA01 AA02 BC05 BC13 MA03 MA04 NA14 ZA45 ZC33 ZC41 4C206 AA01 AA02 DA28 MA03 MA04 NA14 ZA45 ZC33 ZC41

Claims (7)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 抗酸化剤有効量のヒドロキシル化されたコレステロール低下
    剤を投与することから成る哺乳動物におけるリポタンパク質の酸化を阻害する方
    法。
  2. 【請求項２】 ヒドロキシル化ジェムフィブロジル（gemfibrozil）、ヒド ロキシル化アトルバスタチン（atorvastatin）、またはヒドロキシル化フルバス
    タチン（fluvastatin）を使用する請求項１に記載の方法。
  3. 【請求項３】 オルト−またはパラ−ヒドロキシル化アトルバスタチンを使
    用する請求項２に記載の方法。
  4. 【請求項４】 遊離基捕捉量のヒドロキシル化されたコレステロール低下剤
    を投与することから成る哺乳動物における遊離基を捕捉する方法。
  5. 【請求項５】 ヒドロキシル化されたコレステロール低下剤がオルト−また
    はパラ−ヒドロキシル化アトルバスタチン、ヒドロキシル化ジェムフィブロジル
    、またはヒドロキシル化フルバスタチンである、請求項４に記載の方法。
  6. 【請求項６】 金属イオンキレート化阻害量のヒドロキシル化されたコレス
    テロール低下剤を投与することから成る哺乳動物におけるリポタンパク質の金属
    イオンキレート化を阻害する方法。
  7. 【請求項７】 ヒドロキシル化されたコレステロール低下剤がオルト−また
    はパラ−ヒドロキシル化アトルバスタチン、ヒドロキシル化ジェムフィブロジル
    、またはヒドロキシル化フルバスタチンである、請求項６に記載の方法。
JP2000521788A 1997-11-25 1998-11-04 リポタンパク質酸化の阻害 Abandoned JP2001523694A (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US6688897P 1997-11-25 1997-11-25
US60/066,888 1997-11-25
PCT/US1998/023483 WO1999026583A2 (en) 1997-11-25 1998-11-04 Inhibtion of lipoprotein oxidation

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2001523694A true JP2001523694A (ja) 2001-11-27
JP2001523694A5 JP2001523694A5 (ja) 2006-01-05

Family

ID=22072341

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2000521788A Abandoned JP2001523694A (ja) 1997-11-25 1998-11-04 リポタンパク質酸化の阻害

Country Status (23)

Country Link
US (1) US6362236B1 (ja)
EP (1) EP1047421A2 (ja)
JP (1) JP2001523694A (ja)
KR (3) KR100586754B1 (ja)
CN (1) CN1160068C (ja)
AR (1) AR015487A1 (ja)
AU (1) AU759376B2 (ja)
BR (1) BR9815039A (ja)
CA (1) CA2303864A1 (ja)
CO (1) CO4970835A1 (ja)
HK (1) HK1033095A1 (ja)
HU (1) HUP0004396A3 (ja)
IL (1) IL135154A (ja)
IS (1) IS5413A (ja)
NO (1) NO20002639L (ja)
NZ (1) NZ503598A (ja)
PE (1) PE134199A1 (ja)
PL (1) PL341397A1 (ja)
TR (1) TR200001522T2 (ja)
TW (1) TW552137B (ja)
UY (1) UY25268A1 (ja)
WO (1) WO1999026583A2 (ja)
ZA (1) ZA9810743B (ja)

Families Citing this family (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030040505A1 (en) * 2000-03-31 2003-02-27 The Regents Of The University Of California Synthetic phospholipids to ameliorate atherosclerosis and other inflammatory conditions
US7250304B2 (en) * 2000-03-31 2007-07-31 The Regents Of The University Of California Functional assay of high-density lipoprotein
US20030114497A1 (en) * 2001-07-31 2003-06-19 Laman Alani Pharmaceutical compositions of amlodipine and atorvastatin
CA2513660C (en) 2003-01-23 2012-05-08 Esperion Therapeutics, Inc. Hydroxyl compounds and compositions for cholesterol management and related uses
US20060194981A1 (en) * 2005-02-26 2006-08-31 Jass Paul A Process for preparation of probucol derivatives
WO2006104399A1 (en) * 2005-03-26 2006-10-05 Protemix Corporation Limited Copper antagonist compositions
US20110236476A1 (en) 2008-09-02 2011-09-29 Amarin Corporation Plc. Pharmaceutical composition comprising eicosapentaenoic acid and nicotinic acid and methods of using same
NZ627238A (en) 2009-04-29 2016-02-26 Amarin Pharmaceuticals Ie Ltd Stable pharmaceutical composition comprising ethyl eicosapentaenoate
NZ624963A (en) 2009-04-29 2016-07-29 Amarin Pharmaceuticals Ie Ltd Pharmaceutical compositions comprising epa and a cardiovascular agent and methods of using the same
MY172372A (en) 2009-06-15 2019-11-21 Amarin Pharmaceuticals Ie Ltd Compositions and methods for lowering triglycerides
WO2011038122A1 (en) 2009-09-23 2011-03-31 Amarin Corporation Plc Pharmaceutical composition comprising omega-3 fatty acid and hydroxy-derivative of a statin and methods of using same
US11712429B2 (en) 2010-11-29 2023-08-01 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Low eructation composition and methods for treating and/or preventing cardiovascular disease in a subject with fish allergy/hypersensitivity
NZ744990A (en) 2010-11-29 2019-10-25 Amarin Pharmaceuticals Ie Ltd Low eructation composition and methods for treating and/or preventing cardiovascular disease in a subject with fish allergy/hypersensitivity
US11291643B2 (en) 2011-11-07 2022-04-05 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Methods of treating hypertriglyceridemia
US20130131170A1 (en) 2011-11-07 2013-05-23 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Methods of treating hypertriglyceridemia
EP2800469B1 (en) 2012-01-06 2021-08-25 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Compositions and methods for lowering levels of high-sensitivity (hs-crp) in a subject
EP2866801A4 (en) 2012-06-29 2016-02-10 Amarin Pharmaceuticals Ie Ltd METHODS OF REDUCING THE RISK OF A CARDIOVASCULAR EVENT IN A SUBJECT SUBJECTED TO STATIN TREATMENT
WO2014074552A2 (en) 2012-11-06 2014-05-15 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Compositions and methods for lowering triglycerides without raising ldl-c levels in a subject on concomitant statin therapy
US9814733B2 (en) 2012-12-31 2017-11-14 A,arin Pharmaceuticals Ireland Limited Compositions comprising EPA and obeticholic acid and methods of use thereof
US20140187633A1 (en) 2012-12-31 2014-07-03 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Methods of treating or preventing nonalcoholic steatohepatitis and/or primary biliary cirrhosis
US9452151B2 (en) 2013-02-06 2016-09-27 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Methods of reducing apolipoprotein C-III
US9624492B2 (en) 2013-02-13 2017-04-18 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Compositions comprising eicosapentaenoic acid and mipomersen and methods of use thereof
US9662307B2 (en) 2013-02-19 2017-05-30 The Regents Of The University Of Colorado Compositions comprising eicosapentaenoic acid and a hydroxyl compound and methods of use thereof
US9283201B2 (en) 2013-03-14 2016-03-15 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Compositions and methods for treating or preventing obesity in a subject in need thereof
US20140271841A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Pharmaceutical composition comprising eicosapentaenoic acid and derivatives thereof and a statin
US10966968B2 (en) 2013-06-06 2021-04-06 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Co-administration of rosiglitazone and eicosapentaenoic acid or a derivative thereof
US20150065572A1 (en) 2013-09-04 2015-03-05 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Methods of treating or preventing prostate cancer
US9585859B2 (en) 2013-10-10 2017-03-07 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Compositions and methods for lowering triglycerides without raising LDL-C levels in a subject on concomitant statin therapy
US10561631B2 (en) 2014-06-11 2020-02-18 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Methods of reducing RLP-C
WO2015195662A1 (en) 2014-06-16 2015-12-23 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Methods of reducing or preventing oxidation of small dense ldl or membrane polyunsaturated fatty acids
KR101665180B1 (ko) 2014-07-01 2016-10-14 순천향대학교 산학협력단 아포지단백질 a-i 돌연변이체 g59v를 포함하는 항산화성 펩타이드 및 이를 포함하는 항산화 조성물
CN107530307A (zh) 2015-03-13 2018-01-02 艾斯柏伦治疗公司 包含etc1002和依泽替米贝的固定剂量组合和制剂以及治疗心血管疾病或降低心血管疾病风险的方法
MA41793A (fr) 2015-03-16 2018-01-23 Esperion Therapeutics Inc Associations de doses fixes comprenant du etc1002 et une ou plusieurs statines permettant de traiter ou de réduire un risque cardiovasculaire
US10406130B2 (en) 2016-03-15 2019-09-10 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Methods of reducing or preventing oxidation of small dense LDL or membrane polyunsaturated fatty acids
WO2018213663A1 (en) 2017-05-19 2018-11-22 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Compositions and methods for lowering triglycerides in a subject having reduced kidney function
US11058661B2 (en) 2018-03-02 2021-07-13 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Compositions and methods for lowering triglycerides in a subject on concomitant statin therapy and having hsCRP levels of at least about 2 mg/L
KR102296068B1 (ko) 2018-09-24 2021-09-02 애머린 파마슈티칼스 아일랜드 리미티드 대상체에서 심혈관 사건의 위험도를 감소시키는 방법
CA3144371A1 (en) 2019-06-21 2020-12-24 Esperion Therapeutics, Inc. Methods of making bempedoic acid and compositions of the same

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5385929A (en) * 1994-05-04 1995-01-31 Warner-Lambert Company [(Hydroxyphenylamino) carbonyl] pyrroles

Also Published As

Publication number Publication date
PE134199A1 (es) 2000-01-20
WO1999026583A3 (en) 1999-12-09
ZA9810743B (en) 1999-05-31
US6362236B1 (en) 2002-03-26
KR20050086975A (ko) 2005-08-30
CO4970835A1 (es) 2000-11-07
HUP0004396A3 (en) 2003-04-28
NO20002639D0 (no) 2000-05-23
IS5413A (is) 2000-03-24
TW552137B (en) 2003-09-11
UY25268A1 (es) 1999-07-19
EP1047421A2 (en) 2000-11-02
HK1033095A1 (en) 2001-08-17
CN1279605A (zh) 2001-01-10
WO1999026583A2 (en) 1999-06-03
AU759376B2 (en) 2003-04-10
IL135154A0 (en) 2001-05-20
HUP0004396A2 (hu) 2001-06-28
KR100586754B1 (ko) 2006-06-08
NZ503598A (en) 2002-06-28
KR20050113288A (ko) 2005-12-01
CA2303864A1 (en) 1999-06-03
IL135154A (en) 2005-05-17
KR20010032401A (ko) 2001-04-16
AU1518899A (en) 1999-06-15
AR015487A1 (es) 2001-05-02
BR9815039A (pt) 2001-03-20
CN1160068C (zh) 2004-08-04
TR200001522T2 (tr) 2000-12-21
PL341397A1 (en) 2001-04-09
NO20002639L (no) 2000-05-23
KR100539644B1 (ko) 2005-12-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2001523694A (ja) リポタンパク質酸化の阻害
Hussein et al. Reduced susceptibility of low density lipoprotein (LDL) to lipid peroxidation after fluvastatin therapy is associated with the hypocholesterolemic effect of the drug and its binding to the LDL
Aviram et al. Atorvastatin and gemfibrozil metabolites, but not the parent drugs, are potent antioxidants against lipoprotein oxidation
US5591773A (en) Inhibition of cataract formation, diseases resulting from oxidative stress, and HIV replication by caffeic acid esters
US7776881B2 (en) Hyperlipemia therapeutic agent
EP0724877B1 (fr) Association de fénofibrate et de vitamine E, utilisation en thérapeutique
Paiva-Martins et al. Activity and location of olive oil phenolic antioxidants in liposomes
Orhan et al. In vitro effects of NSAIDS and paracetamolon oxidative stress-related parameters of human erythrocytes
KR20060129082A (ko) 부작용을 최소화하면서 과지질혈증 및 과콜레스테롤혈증과연관된 질환 또는 질병의 치료 방법
JPH07215862A (ja) 不完全な組織修復を抑制するための医薬組成物
Wu et al. L-α-aminoadipic acid as a regulator of kynurenic acid production in the hippocampus: a microdialysis study in freely moving rats
NZ529243A (en) Use of polymethoxylated flavones for treating insulin resistance
Noa et al. A comparative study of policosanol vs lovastatin on intimal thickening in rabbit cuffed carotid artery
US20020090404A1 (en) Components of canola for treating hyperlipidemia
EP0543855A1 (en) Use of aryl hydroxyurea compounds for the treatment of atherosclerosis
HOLMES Drugs affecting lipid synthesis
KR100846641B1 (ko) 동맥경화 억제 방법 및 조성물
MXPA00003200A (en) Inhibtion of lipoprotein oxidation
KR20020024581A (ko) 암로디핀과 아톨바스타틴의 시너지효과
US4473574A (en) Prophylaxis of arterial disease
Breugnot et al. S 12340: a potent inhibitor of the oxidative modification of low-density lipoprotein in vitro and ex vivo in WHHL rabbits.
Ohmori et al. Effects of a novel antihyperlipidemic agent, S-2E, on the blood lipid abnormalities in homozygous WHHL rabbits
Kamal et al. Comparison between morning and evening single dose administration of simvastatin on endothelium-dependent relaxation and superoxide dismutase enzyme level as an antioxident marker in cholesterol-fed rabbits
MXPA01010694A (en) Synergistic effects of amlodipine and atorvastatin

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20051025

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20051025

A762 Written abandonment of application

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A762

Effective date: 20080219