JP2001518052A

JP2001518052A - 長期治療のための獣医用経口フルオロキノロン抗菌組成物及び治療方法

Info

Publication number: JP2001518052A
Application number: JP50057397A
Authority: JP
Inventors: ダニエルソン，ダグラス，ダブリュー．; ニコルス，エリック; ハズバンド，ブレント
Original assignee: アメリカンサイアナミドカンパニー
Priority date: 1995-06-06
Filing date: 1996-05-22
Publication date: 2001-10-09
Also published as: EP0831783A4; WO1996039123A1; EP0831783A1; US6136338A; US6024979A; CA2222950A1

Abstract

(57)【要約】本発明はフルオロキノロン抗菌剤または医薬として許容されるその塩を含む獣医用経口組成物のための調製物、及び反芻動物における微生物感染を治療する方法に関する。本発明の獣医用組成物を反芻動物（例えばウシまたはフィードロット子牛）に経口投与すると、フルオロキノロンは容易に且つ十分に第一胃から吸収されて血流に入り、抗菌剤の予期しえない長さに延長された治療的血中レベルを提供する。

Description

【発明の詳細な説明】発明の名称長期治療のための獣医用経口フルオロキノロン抗菌組成物及び治療方法発明の背景発明の属する技術分野本発明は、フルオロキノロン抗菌剤であるジフロキサシン又は医薬として許容しうるその塩を含む獣医用経口組成物に関する。反芻動物（例えば牛又はフィードロット子牛）に経口投与した場合、本獣医用組成物は驚くべきことに（１）第一胃から循環血液へのフルオロキノロンの吸収を容易且つ増大し（２）治療的血中抗菌剤レベルの持続時間を予想外に延長する。背景に関する議論経口投与された抗菌剤は反芻動物の胃腸管からは容易に吸収されないものと一般に信じられている。通常、この薬剤の吸収性は低く血液レベルと治療効果の関係は疑問視されている。通常、経口投与された抗菌剤の血中レベルは、非経口投与された場合に比べかなり低い。フルオロキノロンは反芻動物成体の第一胃中で生体内分解されるため、吸収される活性成分が少ないと信じられている。本発明者らは、経口投与されたジフロキサシンが反芻動物の血液中によく吸収され、同用量を非経口投与された場合とほぼ同レベルで長期間にわたり驚異的にその効果を持続することを発見した。これらは、予想外で有益な効果である。発明の概要従って、本発明の目的は、同量を非経口投与した場合の血中濃度とほほ等しい血中フルオロキノロン抗菌剤濃度をもたらす新規な獣医用組成物を提供することである。更に本発明は、反芻動物又は前反芻期反芻動物（授乳期の非反芻動物を含む）の第一胃の血流中における効果的な抗菌剤濃度を長期にわたって維持する新規な獣医用組成物を提供することを目的とする。更に本発明は、反芻動物の微生物感染を治療するための簡易且つ効果的な方法を提供することを目的とする。これら及びその他の目的は、ジフロキサシン又は医薬的に許容しうるその塩の有効量を医薬的に許容しうる経口投与可能な担体中に含む獣医用経口組成物、及び投与を必要としている反芻動物に本発明獣医用組成物を経口投与するステップを含む反芻動物の微生物感染治療方法によって達成されるものであって、これらは以下に記載する好ましい実施例の詳細な説明から明らかになるであろう。図面の簡単な説明本発明の更に完全な理解及びそれに付随する多くの利点は、添付図面を参照しつつ以下の詳細な説明を検討することにより理解が進めば、容易に達成されるであろう。図１は、ジフロキサシン（体重１ｋｇ当たり５ｍｇ）の（カプセルによる）経口投与後及び（懸濁液による）強制胃管飼養後の反芻家畜における平均血漿ジフロキサシン濃度を示したグラフである。図２は、本発明による２種の獣医用経口ボーラス（丸薬）（それぞれ５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ）の経時的（時間）ジフロキサシン濃度（μｇ／ｍＬ）を示したグラフである。図３は、ジフロキサシン・ボーラス（丸薬）の投与（５ｍｇ／ｋｇ又は１０ｍｇ／ｋｇ）後の反芻家畜における平均血漿ジフロキサシン濃度を時間の関数として示したグラフであり、ヘモフィルス・ソムナス、パスツレラ・ムルトシダ及びパスツレラ・ヘモリチカに対するＭＩＣ₉₀レベルを参考のため併せて記載する。図４は、本発明による２種の獣医用経口組成物（それぞれ５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ）の経時的（時間）ジフロキサシン濃度（μｇ／ｍＬ）を示したグラフであり、ヘモフィルス・ソムナス、パスツレラ・ムルトシダ及びパスツレラ・ヘモリチカに対するＭＩＣ₉₀レベルを参考のため併せて記載する。好ましい実施態様の詳細な説明本発明は、フルオロキノロン（好ましくはジフロキサシン）又は医薬として許容しうるその塩を含有する獣医用経口組成物に関する。本発明においては、治療的血中抗菌剤レベルの持続を延長する獣医用組成物は、微生物（細菌）感染を効果的に治療するのに十分な時間にわたり効果的なフルオロキノロン濃度または医薬的に許容しうるその塩の濃度をもたらすように調製されている。ある好ましい実施例では、本発明獣医用組成物は、反芻動物体内のフルオロキノロン（または医薬的に許容しうるその塩の）濃度が、一種又は多種のバクテリアに関し少なくとも２４時間（更に好ましくは４８時間）にわたりＭＩＣ₉₀レベルを越える濃度を提供し、これによって投与回数を１日１回以下に減らすことができる。本発明はまた、反芻動物の細菌感染治療の方法に関するものであり、本発明組成物の有効量をこれを必要としている反芻動物に経口投与することを特徴とする方法、又はこのような投与で基本的に構成される方法、又はこのような投与で構成される方法を提供する。本発明においては、「非反芻動物」又は「前反芻期」反芻動物とは、まだ授乳中又は粗質物を殆ど若しくは全く消化しない動物（例えは、ミルクを与えられている子牛）を想定している。第一胃はミルクを消化するようには作られていないので、非反芻動物又は授乳期の動物はミルクを第一胃を迂回して直接胃に送ることかできる。反芻動物の第一胃は、草、粗質物又は濃厚飼料（例えば干草、アルファルファ、トウモロコシ等）を動物に与えた結果として機能がひきだされる。第一胃機能の発達は、特定の動物の生理的発達等の他の要因に依存している。然し通常は、粗質物又は濃厚飼料を３月〜８月齢の授乳期動物に与えることは、第一胃の通常の生理的機能（即ち繊維性物質の消化機能）を開始させる結果につながる。本発明においては、「〜から基本的に構成される」という語句は（ａ）本組成物の性質に重大な影響を及ぼさないような本組成物中への１以上の添加成分及び／又は（ｂ）本発明方法の有益な効果に重大な影響を及ぼさないような本方法中への１以上の付加ステップがあることを意味する。ジフロキサシン、医薬的に許容しうるその塩、及びこれらを含む医薬組成物等のフルオロキノロン抗菌剤並びに細菌感染治療の一般的方法は、米国特許第４７３００００号及び同第５１４５８５３号で開示されており、その全部を本明細書の一部を構成するものとしてここに引用する。これらの抗菌剤及び塩は、スタフィロコッカス、ラクトバチルス、ストレプトコッカス、サルチナ、エシェリキア、エンテロバクター、クレブシエラ、シュードモナス、アシネトバクター、プロテウス、シトロバクター、ナイセリア、バチルス、バクテロイデス、ペプトコッカス、クロストリジウム、サルモネラ、シゲラ、セラチア、ヘモフィルス、パスツレラ、ブルセラその他のグラム陽性又はグラム陰性病原微生物に対する活性を含む広い抗菌活性スペクトルを有する。医薬的に許容しうる塩は、例えば、フルオロキノロンを、塩酸、硫酸、硫酸水素ナトリウム、リン酸、ホウ酸、硝酸等の鉱酸；メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ラウリルスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸等のアルキル酸又はアリールスルホン酸；又は酢酸、プロピオン酸、吉草酸、シュウ酸、マレイン酸、コハク酸、フマル酸、安息香酸、酒石酸、クエン酸、乳酸、オレイン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ラウリン酸、グルコヘプトン酸等のカルボン酸又は脂肪酸と反応させて得られる塩が挙げられる。医薬的に許容しうるフルオロキノロンの塩の「遊離塩基等価重量」とは、等重量の遊離塩基フルオロキノロンを発生させる塩の相当する重量を指す。例えば、ジフロキサシン塩酸塩１．０９ｇを含む組成物は、「遊離塩基等価重量」１．００ｇのジフロキサシンを提供する。また本発明獣医用組成物は、医薬的に許容しうる経口投与可能な担体を含む。担体は、反芻動物に経口投与でき且つ反芻動物に消化されうる場合に「経口投与可能」とする。経口投与可能な担体は、反芻動物が消化可能で目的又は必要に応じて殺菌可能な、公知の固形又は液体の担体、賦形剤及び／又は稀釈剤を含む。経口投与用の固体投与形態は、カプセル、錠剤、丸薬、粉末、顆粒、発泡性顆粒、ジェル、ペースト、トローチ及び香錠を含む。このような固体投与形態においては、活性成分を、セルロース、シリカ、しょ糖、ラクトース、澱粉、又は変性澱粉等の公知の不活性稀釈剤の一以上と混合する。また、このような固体投与形態は、通常の方法としては不活性稀釈剤以外の添加物質例えば、ステアリン酸マグネシウム等の公知の潤滑剤を含む。またカプセル、錠剤及び丸薬の場合には、その薬剤は公知の緩衝剤を含む。錠剤及び丸薬は、更に公知の腸溶被覆を施して調製できる。経口投与用液体投与形態は、水等の公知の不活性稀釈液を含む医薬的に許容しうる乳液、溶液、懸濁液、シロップ及びエリキシルを含む。このような不活性稀釈液の他に、本組成物は湿潤剤、乳化剤、懸濁剤、甘味剤、香味剤及ひ芳香剤等のアジュバンドも含みうる。好ましい形態においては、本発明獣医用組成物は、ボーラスの形態であってもよい。獣医用薬品の分野では、「ボーラス」は通常（例えは５ｇ以上の）大型の丸剤を指す。本発明による適用方法では、「ボーラス」とは固形の嚥下し易い医薬調製品を指し、経口投与可能で治療的血中抗菌剤レベルが長期間持続する性質を有するものである。好ましい形態においては、本ボーラスは充分量のフルオロキノロン（より好ましくはジフロキサシン）又は医薬的に許容しうるその塩を含有し、該ボーラスを投与された反芻動物に効果的な抗菌作用をもたらす。従って、本発明ボーラスは好ましくは（例えば前反芻期反芻動物又は非反芻動物への投与では）１００ｍｇ以上の、より好ましくは（例えは反芻期反芻動物への投与では）１０００ｍｇ以上の、更に好ましくは１５００ｍｇのフルオロキノロン（好ましくはジフロキサシン）又は医薬的に許容しうるその塩の遊離塩基等価重量を含有する。実際的な観点から本発明ボーラスは、例えば最高１００００ｍｇのジフロキサシン（好ましくは多くて５０００ｍｇ）又は医薬的に許容しうるその塩の遊離塩基等価重量を含有する。例えば、体重２５０ｋｇの動物に対しては、好ましい製剤は以下の重量の成分を含有する。成分一ボーラス中の量好ましい量ジフロキサシン塩酸塩 1000-5000mg 1700mg 結合剤 1000-10,000mg 3000mg 崩壊剤 100-1000mg 400mg 潤滑剤 50-500mg 200mg 滑沢剤 100-1000mg 200mg 増量剤 10,000-21,000mg 全量を23.0gとする量投与効果の異なる組成物を調製するにあたっては、本発明組成物の性質に影響を及ぼすことなく成分重量比を変更できる。本発明は本発明組成物の単回投与に限定されないが、本発明方法は、本発明組成物の効果的な量をこれを必要とする反芻動物に単回で経口投与することから構成されることが好ましい。しかし、本発明方法は、細菌感染治療に十分な時間にわたり反芻動物体内で有効血中レベルを維持するため、本発明組成物を反芻動物に必要に応じて経口投与することから構成される又は基本的に構成されるものとすることができる。本発明組成物が投与される反芻動物の例としては、Ｂｏｓ（ウシ）、Ｏｖｉｓ（ヒツジ）、Ｃａｒｐｒａ（ヤギ）、Ｌａｍａ（ラマ）、Ｂｉｓｏｎ（ヤギュウ）等の属が挙げられ、好ましくはウシ属である。特に好ましい反芻動物としては、Ｂｏｓｔａｕｒｕｓ（ウシ）、Ｂｏｓｇａｕｒｕｓ（ガウア）、Ｂｏｓｊａｖａｎｉｃｕｓ（バンテン）、Ｂｏｓｍｕｔｕｓｇｒｕｎｎｉｅｓ（ノヤク）、Ｂｏｓｐｒｉｍｉｇｅｎｉｕｓ（オーロックス）、Ｃａｐｒａｈｉｒｃｕｓ（ヤギ）、Ｏｖｉｓａｍｍｏｎ（アルガリ）、Ｏｖｉｓａｒｉｅｓ（ヒツジ）、Ｏｖｉｓｍｕｓｉｍｏｎ（ムフロン）、Ｏａｖｉｓｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ（アジアムフロン）、Ｌａｍａｇｕａｎｉｃｏ（グアナコ）、Ｂｉｓｏｎｂｉｓｏｎ（アメリカバイソン）等の種が挙げられ、最も好ましくはＢｏｓｔａｕｒｕｓ（ウシ種）である。ある実施態様では、本発明方法は、本発明組成物を必要としている反芻動物に「ボーリング・ガン」を用いて投与することを含む。ボーリング・ガンは、チューリップ型の装置で陥没部一箇所、ベル型先端とその反対側先端にプランジャーを備えている。本発明組成物をボーリング・ガンのベル型先端に設置し、そのボーリング・ガンのベル型先端を反芻動物の喉内または更にその奥に挿入した後、プランジャーを押し下げて本発明組成物を反芻動物の喉又は食道に発射する。飼料又は第二の活性成分（例えばビタミン、必須アミノ酸等の栄養剤；第二の抗菌剤、抗ウィルス剤その他の抗菌剤等の第二の医薬活性化合物）等のその他の物質を、本発明組成物と共に投与しうる。「食餌」とは、反芻動物に食餌する目的で販売され、反芻動物が消化可能で商業的に入手可能な製品を指し、反芻動物に食餌するため反８３動物の飼育場所（例えは農場）で生長し及び／又は調製される干草、草類、濃厚飼料等を含む。従って、本発明方法は更に飼料又は第二の活性成分をこれを必要とする反芻動物に同時投与することを包含するか、又はこのような同時投与から構成されるか、又はこのような同時投与から基本的に構成される。第一胃が機能している動物に投与されると、塩酸ジフロキサシンは顕著に吸収される。通常第一胃内には大量の内容物（例えば牛では５０ガロンにのぼる）が存在することを考慮すると、第一胃から薬物が吸収されることは驚くべきことである。機能している第一胃の内容物はほとんどセルロース系であり、化学的又は物理的に薬品と結合しうる。また第一胃微生物相は、経口投与された薬品を不活性化し、これと結合し又は化学的に変質させうる。従って、経口用組成物（特に固形状組成物、更にはボーラス）に調製することによって薬品の吸収が予想外に向上しうる。本発明がもたらしたもう一つの驚くべき結果としては、本発明組成物が反芻動物及び非反芻動物において示した性質である「抗菌剤の治療的血中レベルの長い持続時間」が挙げられる。本発明組成物は、かなり長時間（好ましくは反芻期反芻動物では４８時間以上、非反芻動物又は前反芻期反芻動物では７２時間以上）にわたってフルオロキノロン抗菌剤の有効量を提供しうる。本発明以前に本発明者らが知っていた結果から予想されなかったことは、フルオロキノロン抗菌剤の有効濃度が反芻動物及び非反芻動物の血流中で本発明組成物によって維持される持続時間の長さである。本発明の他の特徴は、以下の典型的実施例の説明の過程で明らかになるであろう。これらの実施例は、本発明の説明のために示すものであり、本発明を限定するものではない。実験１実験１では、固形状組成物を二つの異なる技術によって反芻去勢牛に投与し、フルオロキノロン抗菌剤（ジフロキサシン）の血漿中濃度を時間の関数として調べた。材料と方法試験計画−薬物動態試験材料（１）ジフロキサシンＨＣｌ経口用懸濁物；遊離塩基ジフロキサシンの濃度＝５０ｍｇ／ｍｌ（２）ジフロキサシン・カプセル；遊離塩基ジフロキサシンの濃度＝９１．６４％試験動物１２〜１８月齢の去勢牛１０頭（平均体重約２５０〜３００ｋｇ）をまず用意し、８頭の去勢牛について調べた。それまで去勢牛には、ジフロキサシンの効果の試験に障害となりそうな薬品や生物製剤を投与しなかった。いかなる併用薬物も試験中に投与しなかった。去勢牛を一つの囲いに入れ、自由給餌を開始した。水は自由に与えた。去勢牛は試験開始７日前に慣らした。試験開始前に各去勢牛に関し身体検査を行い、臨床的に顕在性の又は無症状の病気に罹っていないことを確かめた。去勢牛を試験期間中、毎日観察した。試験物の投与経口用ジフロキザシン懸濁物を、標準的技術を用いた強制胃管により５ｍｇ塩基活性／ｋｇ投与した。ジフロキサシン・カプセルは標準的技術を用いて５ｍｇ塩基活性／ｋｇ投与した。開始時点の体重を計り、この体重を基に投与量を決めた。投与時にゼラチン・カプセルを調製した。血液のサンプリング各血液サンプル約１０ｍｌを、右又は左の頚静脈への静脈穿刺によりＥＤＴＡ含有ガラス製真空チューブに収集した。血液サンプルを、注射後０、０．０８３、０．２５、０．５、０．７５、１、２、４、６、８、１０、１２、２４、４８、７２時間後に採取した。収集後血液サンプルを氷冷した。血液サンプルを、収集後１時間以内に１０分間遠心分離（１５００ｘＧ）に付した。血漿はピペットで一対のバイアルに移し、密封後分析時まで−２０℃以下で保存した。薬物動態分析最適区画モデル及びそのモデルに依存する薬物動態パラメーターＡ₁、Ａ₂、見掛けのＫ₁及び見掛けのＫ₂の初期推定値（バゴット（Ｂａｇｇｏｔ）、「家畜における薬品処理の原則(Principles of Drug Disposition in Domestic Animals) 」W.B．Saunders Co.，Philadelphia(1977)）の決定は、ＲＳＴＲＩＰ（フォックス（Ｆｏｘ）ら、RSTRIP，MicroMath，Inc．(1986)）を用いて行った。最適区画モデルの決定に用いられた手続きでは、偏差の二乗の合計を計算する作業を行った。Ｆを最小とするパラメーター集合を最適推定値として選んだ。用いた区画モデルは、次式で表される。Ｃ_pｔ＝Ａ_lｅ^-K _l ^t＋Ａ₂ｅ^-K ₂ ^t 式中、Ａ₁とＡ₂は０時間における血漿中薬品濃度を、Ｋ₁は見掛けの吸収速度定数を、Ｋ₂は見掛けの排泄速度定数を表す。各半減期はｔ_1/2＝０．６９３／速度定数の関係から計算した。半減期の信頼区間はバルトスジンスキー（Ｂａｒｔｏｓｚｙｎｓｋｙ）らの記述（「半減期に関する最適信頼区間の構築(Constructio n of best confidence intervals for half-lives)」Journal of Veterinary Ph armacology and Therapeutics，13，1-6(1990)）に沿って計算した。また血漿中濃度−時間のデータは、統計的モーメント（ギバルディー（Ｇｉｂａｌｄｉ）ら、Pharmacokinetics，Marcel Dekker Inc.，New York (1982)）を用いて分析した。システムモーメント平均滞留時間（ＭＲＴ）は、式ＭＲＴ＝ＡＵＭＣ／ＡＵＣから決定した。この式中ＡＵＭＣは時間と対時間血漿中濃度との積を０から無限大までプロットした曲線の下方の面積を、ＡＵＣは０から無限大までの対時間濃度曲線の下方の面積を表す。ＡＵＣとＡＵＭＣは、ダン（Ｄｕｎｎｅ）らが記載した方法（「非区画パラメーターの評価：技術ノート(Estimatio n of noncompartmental parameters:a technical note)」、Journal of Pharmac okinetics and Biopharmaceuticals，17，131-137(1989)）を用いて計算した。安定状態における平均血漿ジフロキサシン濃度（Ｃ_SS.AV）は、次の関係式から推定した。Ｃ_SS.AV＝ＡＵＣ／投与間隔これらの計算では、投与間隔は２４時間と仮定した。最大血漿ジフロキサシン濃度（Ｃ_max）、２４時間後の血漿濃度（Ｃ₂₄）と最大血漿濃度を与える時間（ｔ_max）は、投与後の時間毎の４回の独立した観察によって得たジフロキサシン濃度−時間曲線の平均値より決定した。通常の統計手法は全てスネデコー（Ｓｎｅｄｅｃｏｒ）らによって記載（「統計的方法(Statistical Methods)」Iowa St ate University Press，Ames，Iowa(1982)）されている。結果及び議論全てのサンプリング期間における、経口カプセル投与又は懸濁液を用いた強制胃管投与でジフロキサシンを投与（体重１ｋｇ当たりジフロキサシン５ｍｇ）した後の、反芻動物における平均血漿ジフロキサシン濃度を表１に示す。これらの測定値を図１にグラフ化する。これらのデータから計算された平均血漿薬物動態パラメータを表２にまとめる。ジフロキサシン懸濁液の単回経口投与（体重１ｋｇ当たりジフロキサシン５ｍｇ）後の反芻動物におけるジフロキサシン吸収は急速であった。ピーク時の平均血漿中濃度は０．９６８μｇ／ｍＬで、投与４．６６７時間後に到達した。強制胃管投与後のＡＵＣは２５．３６２μｇ・ｈ／ｍＬであった。排泄半減期は１８．７７２時間後であった。２４時間間隔投与について計算された安定状態濃度は０．９４２μｇ／ｍＬであった。ジフロキサシンカプセルの単回経口投与（体重１ｋｇ当たりジフロキサシン５ｍｇ）後の反芻動物におけるジフロキサシン吸収は懸濁液程急速ではなく、ピーク時の平均血漿濃度は０．５２５μｇ／ｍＬで、投与後８時間で到達した。強制胃管投与後のＡＵＣは２０．７９７μｇ・ｈ／ｍＬであった。排泄半減期は２１．６３６時間後であった。２４時間間隔投与について計算された安定状態濃度は０．７６４μｇ／ｍＬであった。いずれのジフロキサシン調製物投与後においても、副作用は観察されなかった。区画モデルは次式で表される：Ｃ_pｔ＝Ａ_lｅ^-K _l ^t＋Ａ₂ｅ^-K ₂ ^t 式中、Ａ₁とＡ₂は０時間における血漿中薬品濃度を、Ｋ₁は見掛けの吸収速度定数を、Ｋ₂は見掛けの排泄速度定数を表す。ｔ(¹/₂)₁は見掛けの吸収半減期、ｔ(¹/₂)₂は見掛けの排泄半減期を表す。非区画モデルは、投与後の１４時点の各時点における４個の独立したサンプリングユニットの観察およびその平均値計算に基づいている。Ｃ_maxは観察された最大血漿濃度、Ｃ₂₄は２４時間後の血漿薬物濃度、Ｃ_SS.AVは２４時間毎の薬物投与における安定状態での投与間隔中の平均血漿中薬物濃度、ｔ_maxは観察された血漿中薬物濃度のピーク時間、ＭＲＴは平均滞留時間、ＡＵＣ（０−ｔ）は０〜ｔ時間後までの対時間組織中濃度曲線の下方面積を表す。ＡＵＣ（０−∞）は０〜無限大時間後までの対時間組織中濃度曲線の下方面積を表す。ＡＵＭＣは時間と対時間血漿中濃度の積を結んだ０から無限大までの曲線の下方面積を指す。この実験の結果は、フルオロキノロン抗菌剤又は医薬的に許容しうるその塩（特にジフロキサシン又はその塩酸塩）の固形状組成物（特にカプセルとボーラス）が、反芻期の反芻動物に経口投与された場合に、驚く程の吸収力と治療的血中抗菌剤レベルの持続時間を延長することを証明した。実験２フィードロット家畜におけるジフロキサシン経口投与用ボーラスの薬物動態及び組織内滞留逓減概略実験２では、反芻去勢牛におけるジフロキサシンボーラス単回投与（体重１ｋｇ当たり遊離塩基等価重量５又は１０ｍｇ）後の血漿中薬物動態と細胞内滞留逓減を測定した。安全性ジフロキサシン・ＨＣｌボーラス経口投与後においては、何ら副作用は観察されなかった。試験材料Ｔ１及びＴ２：ジフロキサシン・ＨＣｌボーラス、１１３４．０ｍｇ塩基等価重量／ボーラス（５ｍｇ／ｋｇ）；Ｔ３及びＴ４：ジフロキサシン・ＨＣｌボーラス、２２６８．０ｍｇ塩基等価重量／ボーラス（１０ｍｇ／ｋｇ）試験計画試験動物４〜８月齢の反芻去勢牛１２頭（平均体重２２７ｋｇ）を試験した。それまで去勢牛には、ジフロキサシンの効果の試験に障害となりそうな薬品や生物製剤を投与しなかった。いかなる併用薬物も試験中に投与しなかった。去勢牛は試験開始７日前に試験環境に慣らした。試験開始前に各去勢牛に関し身体検査を行い、臨床的に顕在する、又は無症状の病気に罹っていないことを確かめた。去勢牛を個別の囲いに入れ、自由に干草を食べれるような食餌を開始した。水は自由に与えた。去勢牛を試験期間中、毎日観察した。全去勢牛を、試験終了時に屠殺した。試験薬投与１２頭の去勢牛を無作為に治療に割当てた。試験開始０日後、ジフロキサシンボーラスを体重１ｋｇ当たり塩基等価重量５．０ｍｇ（Ｔ１とＴ２）及び１０．０ｍｇ（Ｔ３とＴ４）経口投与した。動物の体重に基づき必要レベルの正確な用量にするため、必要に応じてボーラスを削減した。血液のサンプリング実験１と同じ方法で同量の血液サンプルを採集したが、時間は試験薬投与後０、０．５、１、２、４、８、１２、２４、４８、７２、９６、１２０、１４４、１６８、１９２、２１６、２４０、２６４、２８８、３１２、３３６、５０４及び６７２時間とした。収集後血液サンプルを実験１と同じ方法で処理及び静置した。スケジュール日作業内容 −７家畜受け取り０全家畜に経口投与０〜１４、２１、２８家畜へ食餌開始０〜２８毎日の観察開始薬物動態の結果と議論実験１と同様に薬物動態分析を行った。表３に示すのは、去勢牛におけるジフロキサシンボーラス（体重１ｋｇ当たり塩基等価重量５．０ｍｇ及び１０．０ｍｇ）単回経口投与後のジフロキサシン平均血漿濃度である。これらの測定値を図２にグラフ化する。これらのデータから計算された平均血漿薬物動態パラメータを表４にまとめる。ジフロキサシンＨＣｌを５ｍｇ塩基等価重量／ｋｇ体重経口投与後、ジフロキサシンの吸収は急速で且つ持続的であった。ピーク時の平均血漿中濃度は０．６８２μｇ／ｍＬで、投与後１７．３時間で到達した。経口投与後のＡＵＣ（０− ｔ）は２４．３７８μｇ・ｈ／ｍＬであった。見掛けの排泄半減期は１７．２１０時間後にあった。２４時間間隔投与について計算された安定状態濃度は１．０６４μｇ／ｍＬであった。ジフロキサシンＨＣｌを１０ｍｇ塩基等価重量／ｋｇ体重経口投与後、ジフロキサシンの吸収は急速で且つ持続的であった。ピーク時の平均血漿濃度は１．１６６μｇ／ｍＬで、投与１０．０時間後に到達した。経口投与後のＡＵＣ（０− ｔ）は３０．８４８μｇ・ｈ／ｍＬであった。見掛けの排泄半減期は１４．１７０時間後にあった。２４時間間隔投与について計算された安定状態濃度は１．２９７μｇ／ｍＬであった。この実験の結果は、フルオロキノロン抗菌剤又は医薬的に許容しうるその塩（特にジフロキサシン又はその塩酸塩）の固形状組成物（特にボーラス）が、反芻期の反芻動物に経口投与された場合に、驚く程の吸収力と治療的血中抗菌剤レベルの持続時間を延長することを証明した。実験３フィードロット家畜におけるジフロキサシン経口ボーラスの薬物動態概略実験３では、反芻去勢牛におけるジフロキサシンボーラス単回投与（体重１ｋｇ当たり遊離塩基等価重量５又は１０ｍｇ）後の血漿中薬物動態を測定した。検査物Ｔ１：ジフロキサシン・ＨＣｌボーラス、１２７７．０ｍｇ塩基等価重量／ボーラス（５ｍｇ／ｋｇ）；Ｔ２：ジフロキサシン・ＨＣｌボーラス、２５１８．０ｍｇ塩基等価重量／ボーラス（１０ｍｇ／ｋｇ）試験計画試験動物５〜９月齢の反芻去勢牛１２頭（平均体重約２１２ｋｇ）を試験した。それまで去勢牛には、ジフロキサシンの効果の試験に障害となりそうな薬品や生物製剤を投与しなかった。いかなる併用薬物も試験中に投与しなかった。去勢牛は試験開始７日前に試験環境にならした。試験開始前に各去勢牛に関し身体検査を行い、臨床的に顕在性の又は無症状の病気に罹っていないことを確かめた。去勢牛を一頭当たり２７６．６平方フィートの約２．３フィートの小屋に入れた。去勢牛に、水と基礎飼料を自由給餌した。去勢牛の第一胃は充分機能していた。去勢牛を試験期間中、毎日観察した。試験薬投与１２頭の去勢牛を無作為に治療に割り当てた。試験開始０日後、ジフロキサシンボーラスを体重１ｋｇ当たり塩基等価重量５．０ｍｇ（Ｔ１）及び１０．０ｍｇ（Ｔ２）経口投与した。動物の体重に基づき任意レベルの正確な用量にするため、必要に応じでボーラスを削減した。血液のサンプリング実験１と同じ方法で同量の血液サンプルを採取したが、時間は試験薬投与後０、１、２、４、６、９、１１、１３、１５、１８、２０、２４、３６、４８、７２、１２０及び１６８時間とした。採取後血液サンプルを実験１と同じ方法で処理及び保存した。家畜の血漿サンプルを、蛋白質沈澱法及び限外濾過法に付した後、蛍光検出法による高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）にかけて、ジフロキサシンに関する分析を行った。血漿に内部標準（Ａ−５６６８１．１塩酸塩、アボット（Ａｂｂｏｔｔ）研究所）を加えた。その後、大量の塩基を添加し、さらに少量の酸を加えた。遠心分離で蛋白質を沈澱させた後、上清を限外濾過膜上に置き再度遠心分離にかけた。限外濾過液を液体クロマトグラフに注入した。スケジュール日作業内容 −７選択する家畜（約１５頭）の可能性試験；身体検査；去勢牛決定 −７〜０家畜順化 −１体重測定、身体検査；投与薬準備；ボーラス及び去勢牛の重量測定；動物を無作為抽出０全家畜に経口投与０〜７家畜へ食餌開始薬物動態の結果と議論実験１と同様に薬物動態分析を行った。去勢牛におけるジフロキサシンボーラス（体重１ｋｇ当たり塩基等価重量５．０ｍｇ及び１０．０ｍｇ）単回経口投与後のジフロキサシン平均血漿濃度を表５に示す。これらの測定値を図３にグラフ化する。これらのデータから計算された血漿中平均薬物動態パラメータを表６にまとめる。ジフロキサシンＦＣｌを５ｍｇ塩基等価重量／ｋｇ体重経口投与後、ジフロキサシンの吸収は急速で且つ持続的であったので、高い血漿ジフロキサシン濃度が長く維持された。ピーク時の平均血漿濃度は０．３５μｇ／ｍＬで、投与後１１時間で到達した。経口投与後のＡＵＣ_(0-168h)（０〜１６８時間における血漿中ジフロキサンシ濃度曲線下面積）は１３．８９μｇ・ｈ／ｍＬであった。見掛けの排泄半減期は２１．４４時間後にあった。２４時間間隔投与について計算された安定状態濃度は０．５７８μｇ／ｍＬであった。ジフロキサシンＨＣｌを１０ｍｇ塩基等価重量／ｋｇ体重経口投与後、ジフロキサシンの吸収は急速で且つ持続的であった。ピーク時の平均血漿中濃度は０．７７μｇ／ｍＬで、投与約１１時間後に到達した。経口投与後のＡＵＣ_(0-168h) は２８．７１μｇ・ｈ／ｍＬであった。見掛けの排泄半減期は約１９．３９時間後にあった。２４時間間隔投与について計算された安定状態濃度は１．１９６μ ｇ／ｍＬであった。区画モデルは上記実験１で示した等式で表され、非区画モデルは投与後の１７時点の各時点における６個の試料ユニットの観察およびその平均値計算に基づいている。表６においては、「ＡＵＣ」は０〜１６８時間までの台形公式を用いて計算され、Ｃ_maxは観察されたＣ_maxである。「半減期」は、指数ストリッピング及びパラメータ推定用ソフトウェアＲＳＴＲＩＰ II（ＭＩＣＲＯＭＡＴＨ^TM製、Scientific Software，Salt Lake City，Utah）を用いて計算した。この実験の結果は、フルオロキノロン抗菌剤又は医薬的に許容しうるその塩（特にジフロキサシン又はその塩酸塩）の固形状組成物（特にボーラス）が、反芻期の反芻動物に経口投与された場合に、驚く程の吸収力と治療的血中抗菌剤レベルの持続時間を延長することを証明した。実験４非反芻子牛肉用子牛におけるジフロキサシン経口ボーラスの薬物動態概略実験４では、非反芻、新生児「子牛肉用」子牛におけるジフロキサシンボーラス単回投与（体重１ｋｇ当たり遊離塩基等価重量５又は１０ｍｇ）後の血漿中薬学的動態を測定した。試験材料Ｔ１：ジフロキサシン・ＨＣｌボーラス、２２６．８ｍｇ塩基等価重量／ボーラス（５ｍｇ／ｋｇ）；Ｔ２：ジフロキサシン・ＨＣｌボーラス、４５３．６ｍｇ塩基等価重量／ボーラス（１０ｍｇ／ｋｇ）試験計画試験動物３週齢〜１月齢の子牛肉用子牛６頭（平均体重約５１．２ｋｇ）を試験した。それまで動物には、ジフロキサシンの効果の試験に障害となりそうな薬品や生物剤を投与しなかった。いかなる併用薬物も試験中に投与しなかった。子牛は試験開始７日前に試験環境にならした。試験開始前に各子牛に関し身体検査を行い、臨床的に顕在性の又は無症状の病気に罹っていないことを確かめた。子牛を一頭当たり約４８平方フィートの小屋に別々に入れた。子牛に、水を自由給餌し、商業用代替ミルクをラベル指示書きに従って与えた。子牛の第一胃はまだ機能していなかった。試験期間中は毎日子牛を観察した。試験薬投与６頭の子牛を無作為に治療に割り当てた。試験開始０日後、ジフロキサシンボーラスを体重１ｋｇ当たり塩基等価重量５．０ｍｇ（Ｔ１）及び１０．０ｍｇ（Ｔ２）経口投与した。動物の体重に基づき任意レベルの正確な用量にするため、必要に応じてボーラスを削減した。血液のサンプリング実験１と同じ方法で同量の血液サンプルを採集したが、時間は試験薬投与後０、１、４、７、１０、１２、１５、１８、２１、２４及び３６時間並びに２、３、４、５、６、７及び１４日とした。収集後血液サンプルを実験１と同じ方法で処理及び保存した。実験３と同様に、ジフロキサシンに関し子牛の血漿サンプルを分析し、実験３と同様に薬物動態分析を行った。ジフロキサシンボーラス経口投与後の平均血漿中ジフロキサシン濃度を図３にグラフ化する。同グラフには参照用に、バクテリアであるヘモフィルス・ソムナス（０．２５μｇ／ｍＬ）、パスツレラ・ムルトシダ及びパスツレラ・ヘモリチカ（各０．１２μｇ／ｍＬ）のＭＩＣ₉₀レベルを示す。スケジュール日作業内容 −１４子牛確保、ワクチン注射、身体検査及び牛決定；受動伝達状態測定 −７子牛体重測定及び無作為抽出 −１子牛体重測定、身体検査０全子牛経口投与０〜１４サンプル収集及び毎日の観察開始薬物動態の結果と議論実験１と同様に薬物動態分析を行った。子牛におけるジフロキサシンボーラス（体重１ｋｇ当たり塩基等価重量５ｍｇ及び１０ｍｇ）単回経口投与後のジフロキサシン平均血漿濃度を表７に示す。これらの測定値を図４にグラフ化する。これらのデータから計算した平均血漿中薬物動態パラメータを表８にまとめる。ジフロキサシンＨＣｌを５ｍｇ塩基等価重量／ｋｇ体重経口投与後、ジフロキサシンの吸収は急速で且つ持続的であり、高い血漿ジフロキサシン濃度が長く維持された。ピーク時の平均血漿中濃度は０．９２μｇ／ｍＬで、投与後約１５．３３時間で到達した。経口投与後のＡＵＣ_(0-168h)（０〜１６８時間後の対時間血漿中ジフロキサシン濃度曲線の下方面積）は６２．３０μｇ・ｈ／ｍＬであった。見掛けの排泄半減期は３６．０９間後であった。２４時間間隔投与について計算された安定状態濃度は２．５９６μｇ／ｍＬであった。ジフロキサシンＨＣｌを１０ｍｇ塩基等価重量／ｋｇ体重経口投与後、ジフロキサシンの吸収は急速で且つ持続的であり、高い血漿ジフロキサシン濃度が長く維持された。ピーク時の平均血漿中濃度は２．０３μｇ／ｍＬで、投与後約１６．３３時間後に到達した。経口投与後のＡＵＣ_(0-168h)は１０６．３２μｇ・ｈ／ｍＬであった。見掛けの排泄半減期は約２４．３６時間後にあった。２４時間間隔投与について計算された安定状態濃度は４．４３μｇ／ｍＬであった。区画モデルは上記実験１で示した等式で表され、非区画モデルは投与後の１８時点の各時点における３個の独立した試料ユニットの観察およびその平均値計算に基づいている。表８においては、「ＡＵＣ」、Ｃ_max及び「半減期」は実験３に記述した通りである。Ｃ_max／ＭＩＣ₉₀及びＡＵＣ／ＭＩＣ₉₀の比及び平均値は、各試験動物につき上記バクテリア毎に表７に示す。この実験の結果は、フルオロキノロン抗菌剤又は医薬的に許容しうるその塩（特にジフロキサシン又はその塩酸塩）の固形状組成物（特にボーラス）が、前反芻期又は非反芻期の反芻動物に経口投与された場合に、驚く程の吸収力と治療的血中抗菌剤レベルの持続時間を延長することを証明した。上記の技術を鑑みれば、本発明に関する多数の修正及び変更が可能であることは明らかである。従って、本明細書記載の特許請求項の範囲内で、本明細書に具体的に記載された以外の様態で本発明が実施できることが理解されよう。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者ニコルス，エリックアメリカ合衆国 55120−1149 ミネソタ州，メンドータハイツ，ノースランドドライブ 1201，ソルヴェイアニマルヘルス，インク．内 (72)発明者ハズバンド，ブレントアメリカ合衆国 55120−1149 ミネソタ州，メンドータハイツ，ノースランドドライブ 1201，ソルヴェイアニマルヘルス，インク．内

Claims

【特許請求の範囲】１．フルオロキノロン又は医薬として許容しうるその塩の反芻期反芻動物又は前反芻期反芻動物の微生物感染治療に有効な量、及び医薬的として許容しうると共に経口投与可能な不活性担体を含有することを特徴とする獣医用組成物。２．カプセル、錠剤、丸薬、粉末、顆粒、発泡性顆粒、ジェル、ペースト、トローチ及び香錠からなる群から選択される固形投薬形態である請求項１記載の獣医用組成物。３．経口ボーラスの形態である請求項１記載の獣医用組成物。４．フルオロキノロンがジフロキサシンである請求項１記載の獣医用組成物。５．細菌感染を効果的に治療するのに十分な時間にわたりフルオロキノロンまたは医薬的に許容しうるその塩が治療的に有効な抗菌剤血中濃度をもたらすように調製されたものである請求項１記載の獣医用組成物。６．時間が２４時間以上である請求項５記載の獣医用組成物。７．時間が４８時間以上である請求項５記載の獣医用組成物。８．フルオロキノロン又は医薬的に許容しうる塩の遊離塩基等価重量を１ｇ以上含有する請求項１記載の獣医用組成物。９．フルオロキノロン又は医薬的に許容しうる塩の遊離塩基等価重量を１．５ｇ以上含有する請求項１記載の獣医用組成物。１０．獣医用組成物が乳液、溶液、懸濁液、シロップ及びエリキシルからなる群から選択される液体投与形態である請求項１記載の獣医用組成物。１１．請求項１記載の獣医用組成物をこれを必要とする反芻動物に経口投与することを特徴とする反芻期反芻動物又は前反芻期反芻動物の微生物感染治療方法。１２．微生物感染を効果的に治療するのに十分な時間にわたり反芻動物体内の有効血中レベルを維持する抗菌血中濃度をもたらすよう必要に応じて獣医用組成物を経口投与することから基本的に構成される請求項１１記載の方法。１３．更に、反芻動物に第二の活性剤を同時投与することから基本的に構成されるものである、請求項１２記載の方法。１４．反芻動物がＢｏｓ（ウシ属）、Ｏｖｉｓ（ヒツジ属）、Ｃａｐｒａ（ヤギ属）、Ｌａｍａ（ラマ属）及びＢｉｓｏｎ（ヤギュウ属）から選ばれる属に属する請求項１１記載の方法。１５．反芻動物がＢｏｓ（ウシ属）に属する請求項１４記載の方法。１６．反芻動物かＢｏｓｔａｕｒｕｓ（ウシ種）に属する請求項１５記載の方法。１７．微生物感染がスタフィロコッカス、ラクトバテルス、ストレプトコッカス、サルチナ、エシェリキア、エンテロバクター、クレブシエラ、シュードモナス、アシネトバクター、プロテウス、シトロバクター、ナイセリア、バチルス、バクテロイデス、ペプトコッカス、クロストリジウム、サルモネラ、シゲラ、セラチア、ヘモフィルス、パスツレラ、ブルセラその他のグラム陽性又はグラム陰性病原微生物のうち一以上によって感染したものである請求項１１記載の方法。１８．フルオロキノロンがジフロキサシンである請求項１１記載の方法。１９．反芻動物に前記獣医用組成物を１日１回以下経口投与することから構成される請求項１１記載の方法。２０．請求項５記載の獣医用組成物をこれを必要とする反芻期反芻動物又は前反芻期反芻動物に経口投与することから構成される反芻期反芻動物又は前反芻期反芻動物の微生物感染治療方法。２１．獣医用組成物がカプセル、錠剤、丸薬、粉末、顆粒、発泡性顆粒、ジェル、ペースト、トローチ及び香錠からなる群から選択される固体投与形態である請求項２０記載の方法。２２．獣医用組成物が経口ボーラスの形態である請求項２０記載の方法。