JP2001516360A - 診断及び治療用医薬として使用されるヒドロキシメチルホスフィン化合物及びその製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 少なくとも一つの官能性化ヒドロキシアルキルホスフィン供与体基及び一つ以上の硫黄又は窒素供与体及びリガンドと結合した金属からなる、診断又は治療用医薬として用いられる化合物、及びその化合物の製造方法。

Description

【発明の詳細な説明】 診断及び治療用医薬として使用されるヒドロキシメチルホスフィン化合物 及びその製造方法 〔技術分野〕 本発明は、医薬品に関し、特に診断及び治療用薬品として用いられる放射性医 薬品に関する。詳しくは、本発明は、外部からの還元剤を必要とする、又は必要 としない両方の金属化合物と安定な錯体を形成する多座配位子を用いた、診断又 は治療用放射性医薬品として用いられる化合物及びその化合物の合成方法に関す る。 本発明に関連して行われた研究は、エネルギー省からの補助金により一部補助 されたものである（ＤＯＥ−ＤＥＦＧ０２８９ＥＲ６０８７５）。政府は本発明 に対し或る権利を有する。 〔背景技術〕 放射性核種は、好ましい物理的性質、汎用性、及び低コストの^99mＴｃのため 、患者のシンチグラフ撮影研究のための診断用放射性医薬品を配合するための最 も魅力的な候補物質に依然としてなっている〔ジュリソン(Jurisson)その他、１ ９９３〕。Ｔｃの化学的類似体であるＲｅは、二つの放射性同位元素（即ち、^{18 6} Ｒｅ及び¹⁸⁸Ｒｅ；^186/188Ｒｅ）を有し、それらは新規な診断用放射性医薬品 を配合するための最も魅力的なβ線放射性核種の中に入る物理的及び製造特性を 有する〔ボルカート(Volkert)その他、１９９１；トロートナー(Troutner)、１ ９８７〕。Ｔｃ及びＲｅの化学的性質は屡々同じになるので（必ずしもそうとは 限らないが）、対応する^186/188Ｒｅキレートと同じ構造的及び物理化学的性質 を有する^99mＴｃとキレートを形成することができる二官能性キレート剤（ＢＦ ＣＡ）を合成するための基礎として、多くのリガンド系を用いることができる。 新規な^99mＴｃ及び^186/188Ｒｅ放射性医薬品の設計で精巧な分子プローブを開 発することにより、将来、患者の診断及び処置に進歩をもたらすであろう。 多くの重要な単光子放射型コンピューター断層撮影（ＳＰＥＣＴ）用放射性医薬 品が、人の病気を診断するための特別な手段として効果的に使われているが、多 くの新規な部位指向性合成誘導体（例えば、免疫学的に誘導された分子、受容体 結合性分子等）の開発を促進することにより、診断及び治療の両方の分野に対し 更に技術的進歩を与える多くの手掛かりが得られるであろう。 効果的な部位特異性治療又は診断用放射性医薬品を開発する場合、多くの重要 な因子を考慮しなければならない。金属放射性核種（例えば、Ｒｅ−１８８又は Ｔｃ−９９ｍ）は、二官能性キレート剤と相互作用して、１：１の金属対リガン ド化学量論性を有する大きな比活性度の生体内安定錯体を形成することが必須で ある。これらの厳格な必要条件のため、ほんの僅かなリガンド主構造体(backbon e)しか選択することができず、従って、新規な二官能性キレート剤を設計及び開 発することが必要である。最も重要なこととして、放射能を持たないレニウムを 用いた新規なリガンド系の配位化学を詳細に理解することが、トレーサーレベル でこれらの反応をＲｅ−１８８を用いて二官能性キレート剤に標識を付けること に、後で拡張するために重要なことである。 高度に選択性の放射線標識付けされた薬品キャリヤーの設計で遭遇する多くの 問題を解決しなければならない（例えば、目標部位へ効果的な薬品を送る問題、 生体代謝、標的組織に対し相対的な非標的組織からの放射能除去率等の問題）。 部位指向性分子に結合又は融合された^99mＴｃ−及び^186/188Ｒｅ−キレート部分 の物理化学的特性は、最終的薬品生成物の効果性の固有の決定因子として決定的 な役割を果たすであろう。更に、放射性医薬品の慣用的配合に適合する条件下で 最終的生成物に標識付けする^99mＴｃ又は^186/188Ｒｅの能力も必須の考慮すべき ことがらである。 効果的な放射性医薬品を製造するため生物分子に^99mＴｃ又は^186/188Ｒｅを標 識付けすることは、多くの取り組むべき課題を与えている。生体外及び生体内で 大きな安定性を有する^99mＴｃ及び（又は）^186/188Ｒｅ標識付け薬品を製造する ことが必要である。生体内又は生体外で測定可能な解離を示さないか、又は最小 限の解離しか示さない^99mＴｃ又はＲｅキレートを形成する幾つかの異なったリ ガンド骨格が開発されている。これら のキレートによって、放射性医薬品に拘わる科学者は、或る範囲の物理化学的特 性を有する^99mＴｃ−キレートを選択することができるようになってきた。 しかし、大きな放射性化学的純度（ＲＣＰ）を持って大きな収率で^99mＴｃ（ 又はＲｅ）生成物を形成するためには、通常、慣用的医薬品製造で用いられてい る配合工程中に多量の過剰リガンドが存在することを必要とする。残念ながら、 放射線標識付けされた部位指向性合成誘導体を開発するために必要な大きな比活 性度（即ち、ＧＢｑ／μモル又はＣｉ／μモル）のため、これらのキレート系の 多くを使用することができず、そのため僅かなリガンド主構造体しか選択できな い厳しい制約を受けている。 生物分子標的指向剤(targeting agent)にキレート部分が既に付加されている 〔パーカー(Parker)、１９９０〕か、又は融合されている〔リスター・ジェーム ス(Lister-James)その他、１９９４；ナイト(Knight)その他、１９９４〕場合、 予め形成された^99mＴｃ又は^186/188Ｒｅ二官能性キレート（ＢＦＣ）又は放射性 金属による後共役(post-conjugation)キレート化を用いて、大きな比活性度(sp ．Act)の放射線標識付け薬品を製造することができる。Sp．Actの最大化は、放 射線標識付けされていない分子から放射線標識付けされたものを分離することに より達成することができるが、実際上、少量のキレートを必要とするキレート化 系を用いることが一層好ましい。日常の患者介護用のためＦＤＡ認可^99mＴｃ／^{1 86/188} Ｒｅ放射性医薬品として最終的に用いられる生成物を形成する場合には、 殆どの^99mＴｃ−「インスタントキット(instant kit)」の場合のように、薬品生 成物を形成するための工程数を最小、理想的には１工程に維持することが最も望 ましい。 高収率で安定な^99mＴｃキレートを少量のキレート剤を用いて製造するのに有 効であることが示されている僅かなリガンド系の一つは、アミド・チオール系の リガンドである〔フリッツバーグ(Fritzberg)その他、１９８８；ラオ(Rao)その 他、１９９２；及びチアネリ(Chianelli)その他、１９９４〕。一般にこれらの 型の多座配位子リガンドは、少なくとも四つの供与体原子、及び２〜３のアミド 供与体基と組合された一つ又は二つのチオール供与体基を有する。ＢＦＣＡを合 成するのに幾つかのＮ₂Ｓ₂又はＮ₃Ｓアミド・チオール骨格が用いられてきて おり、それらにはジアミド・ジチオール（ＤＡＤＳ）リガンド（フリッツバーグ その他、１９８８）、モノアミンモノアミド（ＭＡＭＡ）リガンド〔ラオその他 、１９９２；グスタブソン(Gustavson)その他、１９９１］、及びメルカプトア セチルグリシルグリシルグリシン(ＭＡＧ₃)リガンド（チアネリその他、１９９ ４）が含まれる。アミド・チオールリガンドは^99mＴｃ及び^186/188Ｒｅのための 効果的なＢＦＣＡになるが、それらの物理的化学的性質の範囲は限定されており 、慣用的標識付けのための条件を実際に利用できるまで減少させることは困難で あり、外部からの還元剤〔例えば、Ｓｎ（II）〕が^99mＴｃ又は^186/188Ｒｅで標 識付けする間通常存在し、それが部位指向性部分の不可逆的変化を起こし、生体 内の特異的局在化を減少させるか又は失わせることがある。 ^99mTc標識付けのために同じく用いられてきた他のリガンド系には、Ｎ₂Ｓ₂・ アミン・チオールリガンド、プロピリンアミンオキシム（ＰｎＡＯ）誘導体及び ヒドラジノニコチンアミド（ＨＹＮＩＣ）系が含まれる。前者の二つの誘導体は 中性親油性^99mＴｃキレートを形成し、それは、或る点では有利であるが、生体 内に高度の非特異性結合をもたらし、非標的組織からの除去が不充分である〔ム ナ(Muna)その他、１９９４；ノッホ(Noch)その他、１９９４〕。ＨＹＮＩＣ系は 、^99mＴｃと共に明確に定められる生成物を形成しない〔アブラムズ(Abrams)そ の他、１９９０ａ；アブラムズその他、１９９０ｂ〕。これらの系は全て通常^{99 m} Ｔｃとキレートを形成し、外部からの還元剤を必要とする。 三価ホスフィン供与体基を有するリガンド主構造体は、高いＲＣＰで安定な^{99 m} Ｔｃ及び^186/188Ｒｅキレートを形成するのに効果的であることが示されている 。ホスフィンは^99mＴｃ（又はＲｅ）とキレートを形成するのみならず、それら は過テクネチウム酸塩及び過レニウム酸塩の両方を一層低い酸化状態へ還元する ことができ、従って、外部還元剤〔例えば、Ｓｎ（II）〕の存在を必ずしも必要 としない。 ジホスフィンリガンドは、^99mＴｃ放射性医薬品、特に^99mＴｃ標識心筋潅流剤 として用いられるものの開発に排他的に用いられてきた〔ドイチュ（Deutsch） 、１９９３；ノウオトニック(Nowotnik)及びナン(Nunn)、１９９２；ケリー(Kel ly)その他、１９９３〕。残念ながらこれらのキレートの殆どはアル キルホスフィン供与体基を用いており、それらホスフィンはＯ₂を含有する水溶 液中で急速に酸化され（燐酸化物になる）、薬品の製造及び最終生成物の最終的 慣用的形成のためには厳密な条件を必要とする。これらの理由から、アルキルホ スフィン供与体基を有するリガンドは、新規な薬品の設計に対しては限定された 融通性しかもたず、局部指向性放射性医薬を製造するのに用いられる殆どのホス フィン系ＢＦＣＡを製造するための合理的基礎を形成するものではない。 芳香族ホスフィンもＴｃ及びＲｅと共に用いられることが報告されているが、 得られるキレートの親油性が高いため、生体内用途のためのＢＦＣＡとしてそれ らが用いられる可能性は最も低い。 水溶液に対する良好な溶解度をもち、Ｏ₂によって酸化されず、然も、^99mＴｃ Ｏ₄ ^-又は^186/188ＲｅＯ₄ ^-を還元することができ、且つ（又は）還元Ｔｃ又はＲ ｅを強くキレートすることができる、ホスフィン供与体基を有する小さなリガン ド系は、新規な放射性医薬品又は新規なＢＦＣＡを配合するのに広範な適用性を 持つであろう。 ホスフィンの、初めの方の遷移金属（例えば、テクネチウム又はレニウム）と 結合する能力は、ｐ^III中心上の孤立電子対及び金属中心上の空軌道を使ったσ 燐・金属相互作用によって影響を受けるのみならず、金属中心上の非結合ｄπ電 子対から燐の空３ｄπ軌道への協同π逆供与の明確な可能性によっても影響を受 ける。σ及びπ結合は、互いに補強し合って強力な燐・金属結合を生じ、それら 結合は生体内条件下でさえも屡々安定である。〔グリーンウッド(Greenwood)及 びアーンショー(Earnshaw)、１９９３；メイヤー(Mayer)及びカスカ(Kaska)、１ ９９４〕。従って、官能性化ホスフィンは、核医学で用いられるリガンドの重要 な種類を構成する。例えば、生体内心臓造影剤として現在用いられているＴｃ− ９９ｍを用いた放射性医薬、テトラホスミン(Tetrafosmin)及びテクネカード(Te chnecard)は、夫々(ＥｔＯ(ＣＨ₂)₂)₂Ｐ(ＣＨ₂)₂Ｐ((ＣＨ₂)₂ＯＥｔ)及びＰ(Ｃ Ｈ₂ＣＨ₂ＯＣＨ₃)₃型のビスキレート性及びモノキレート性ホスフィンから誘導 される〔ヒグレイ(Higley)その他、１９９３；ジャイン(Jain)その他、１９９３ ；デロシュ(DeRosch)その他、１９９２；マルミオン（Marmion）その他、１９９ ５〕。ＤＭＰＥ類〔ここでＤＭＰＥは、１，２−ビス （ジメチルホスフィノ）エタンを表す〕のビスキレート性ホスフィンは、生体内 で安定なＴｃ−９９m錯体を生成することができるが〔ドイチュ(Deutsch)その他 、１９８１；ドイチュ、１９９３；グラボン(Glavon)その他、１９８２；バンデ ルヘイデン(Vanderheyden)その他、１９８４；バンデルハイデン（Vanderhyden ）その他、１９８５〕、ＤＭＰＥ及び関連するアルキルホスフィンの固有の酸化 不安定性のため、Ｔｃ−９９ｍ（又はＲｅ１８６／１８８）標識生物分子の開発 で二官能性キレート剤（ＢＦＣＡ）を製造するためのリガンド主構造体の修正に 関してそれらを使用することには限界がある。一方、アリールホスフィンは通常 余りにも大きいか、又は高度に帯電しており（例えば、スルホン化アリールホス フィン）、従って、核医学用途で用いるＢＦＣＡの設計では不適切である〔コー ニルズ(Cornils)及びウィーバス(Wiebus)、１９９５〕。ドイチュその他、本出 願人、及び何人かの他の人による研究は、テクネチウム（又はレニウム）は、ホ スフィンと生体内で安定な反応不活性結合を形成することを示している〔デロシ ュ(DeRosch)その他、１９９２；バンドリ(Bandoli)その他、１９８４；バンデル ヘイデン(Vanderheyden)その他、１９８５；バンデルヘイデンその他、１９８４ ；リブソン(Libson)その他、１９８３；イチムラ(Ichimura)その他、１９８４〕 。従って、ホスフィンリガンドの設計の新たな開発は、新規な効果的な性能を持 つ放射性医薬品の発見に役立つであろう。特に、１：１の金属対リガンド化学量 論性を有するＴｃ−９９ｍ又はＲｅ−１８８錯体の形成を与える結果になる官能 性化ホスフィン骨格の合成は、ひと転移の腫瘍特異性診断又は治療で用いられる 特異性生物分子（例えば、ペプチド又はプロティン）の標識付けにより製造され る放射性医薬品の設計及び開発に関連して重要になる。診断用又は治療用放射性 医薬を設計するこの方法で、二官能性キレート剤（リガンド）が、生物分子の活 性部位（例えば、受容体結合のために必要なアミノ酸配列）から離れた点に結合 されることが重要である。次に、生物分子／リガンド錯体をＴｃ−９９ｍ又はＲ ｅ−１８８で放射線標識付けすることは、第１図に示したように、受容体の特異 性を崩壊することなく、金属中心とリガンドの特異供与体原子との強い共有結合 相互作用により行うことができる。簡単なアリール又はアルキル官能性化ホスフ ィン〔例えば、ＰＰｈ₃又は (Ｈ₃Ｃ)₂ＰＣＨ₂ＣＨ₂Ｐ(ＣＨ₃)₂〕は、生体内で安定な強い金属・燐結合を生ず る。しかし、それらは生物分子標識放射性医薬品の設計に用いるのには適さない 。なぜなら、これらのリガンドの配位化学性は、大抵は一つの金属中心当たり一 つより多くのリガンドとの錯体を生ずるからである。(Ｈ₃Ｃ)₂ＰＣＨ₂ＣＨ₂Ｐ( ＣＨ₃)₂（ＤＭＰＥ）及び他の関連するアルキル燐酸塩の化学的修正は、一つの 金属中心当たり一つのリガンドを持つ錯体を形成することに対し種々の困難を与 える。更に、それらの酸化不安定性及び自然燃焼性のため、リガンド修正反応に より二官能性キレート剤を開発することにそれらを使用することには限界がある 。幾つかのグループはテクネチウム及びレニウムと、硫黄／窒素及びホスフィン 含有リガンドとの配位化学を研究している〔アーチャー(Archer)その他、１９９ ５；レフォスコ(Refosco)その他、１９９３；チサト(Tisato)その他、１９９５ 〕。しかし、嵩高いアリール置換基がホスフィンに存在すると、水溶液に対する それらの溶解度が屡々低くなり、二官能性キレート剤のためには不適切なものに なる。 他の二官能性キレート系の殆どは、外部還元剤（例えば、Ｓｎ²⁺）の存在、又 は^99mＴｃＯ₄ ^-又は^186/188ＲｅＯ₄ ^-を一層低い金属酸化状態（例えば、^99mＴｃ −グルコヘプトン酸塩）へ予め還元することを必要とする。各ホスフィンＰ−原 子に結合された低分子量側鎖を有する水溶性ホスフィン基は、リガンド設計に融 通性を与え、慣用的^99mＴｃ−放射性医薬品製造のために用いられる条件下で^99m ＴｃＯ₄ ^-（又は^186/188ＲｅＯ₄ ^-）に対する還元剤、及びＴｃ又はＲｅの還元型 に対する効果的な錯化剤の両方として用いることができる。 本出願人は、空気が吹き込まれた水溶液の中で安定であり、極めて安定な^99m Ｔｃ及び¹⁸⁸Ｒｅキレートを形成する官能性化ヒドロキシアルキルホスフィンを 含む一連の多座配位子リガンドを用いる。^99mＴｃ又は^186/188Ｒｅを還元又はキ レートするために設計された従来法のアルキルホスフィン系リガンドとは異なっ て、ヒドロキシアルキルホスフィン基は、水溶液に溶解した時、酸素の存在に対 し敏感ではない。良好な酸化安定性を有する他の水溶性ホスフィンリガンドも、 還元剤として用いられてきているが、これらのリガンド中のホスフィン供与体Ｐ −原子に結合された側鎖は嵩張っており、且つ（又は）高度に帯電 したホスフィンを生じ、そのことが放射性医薬品の開発に当たりそれらの利用性 を低くしている〔パスクアリン(Pasqualine)その他、１９９４〕。 殆どの他の二官能性キレート系は、外部還元剤〔例えば、Ｓｎ（II）又はＮａ ＢＨ₄)の存在を必要とするか、又は^99mＴｃＯ₄ ^-（又は^186/188ＲｅＯ₄ ^-）を、＋ ７酸化状態から一層容易にキレートされる一層低い酸化状態（例えば、^99mＴｃ −ＧＨ）へ還元するために予め還元することを必要とする。 本発明の一つ以上のヒドロキシアルキルホスフィン供与体基を有するリガンド は、外部還元剤を必要としないが、他の還元剤又は^99mＴｃ−シントン（synthon ）と一緒に用いた場合、そのリガンドは配位基として用いることができる。これ らのホスフィン含有リガンドを用いて生成して得られた^99mＴｃ及びＲｅ錯体は 、同様に人間の血清を含めた水溶液中で優れた生体内安定性を示す。 〔発明の開示及び利点〕 本発明によれば、診断又は治療用医薬品として用いるための化合物が与えられ 、その化合物は、リガンド及びそのリガンドと結合した金属を含み、前記リガン ドは少なくとも一つのヒドロキシアルキルホスフィン供与体基及び一つ以上の硫 黄又は窒素供与体を有し、金属を還元することができ、それによって化合物の形 成を促進する。 本発明は、更に次の反応を含む、診断及び（又は）治療用医薬品として用いら れる多座配位子化合物を製造する方法を与える： 式中、Ｍは遷移金属であり、Ｍ^Rは還元状態の遷移金属であり、Ｘは(ＣＨＲ)_n（ ここで、ｎ＝０、１、２、又は３であり、Ｒは水素、カルボキシル、又は芳香 る）、又はＳであり、Ｙは、式Ｐ(Ａ−ＯＨ)_n（ここで、ｎ＝１、２、又は３で あり、Ａは、−ＣＨ₂、−Ｃ₂Ｈ₄、又はｉ−又はｎ−Ｃ₃Ｈ₆−である）のヒドロ キシアルキルホスフィンである。 本発明は、更に式： 〔式中、Ｍは遷移金属であり、Ｍ^Rは還元状態の遷移金属であり、Ｘは(ＣＨＲ)_n （ここで、ｎ＝０、１、２、又は３であり、Ｒは水素、カルボキシル、 メチルである）、又はＳであり、Ｙは、式Ｐ(Ａ−ＯＨ)_n（ここで、ｎ＝１、２ 、又は３であり、Ａは、−ＣＨ₂、−Ｃ₂Ｈ₄、又はｉ−又はｎ−Ｃ₃Ｈ₆−である ）のヒドロキシアルキルホスフィンである。〕 の化合物を効果的な量投与する工程を含む放射線造影法を与える。 本発明は、構造： 〔式中、Ｘは(ＣＨＲ)_n（ここで、ｎ＝０、１、２、又は３であり、Ｒは水素、 Ｒ’は水素又はメチルである）又はＳであり、Ｙは、式Ｐ(Ａ−ＯＨ)_n（ここで 、ｎ＝１、２、又は３であり、Ａは、−ＣＨ₂、−Ｃ₂Ｈ₄、又はｉ−又はｎ−Ｃ₃ Ｈ₆−である）のヒドロキシアルキルホスフィンである。〕 を有する治療及び診断用放射性医薬品を構成するのに用いるための多座配位子リ ガンドも与える。 本発明は、未配位ヒドロキシアルキルホスフィン基とアミンとを反応させて未 配位基を除去し、それによって実質的に純粋な化合物を生成させる工程を含む、 金属原子を配位したヒドロキシアルキルホスフィン基から未配位ヒドロキシアル キルホスフィン基を分離する方法も与える。 〔図面の簡単な説明〕 本発明の他の利点は、次の詳細な説明を参照し、図面と関連させて考慮するこ とにより本発明が一層よく理解されるに従って容易に認められるであろう。 第１図は、生物活性分子を放射線標識付けする代表的モデルの工程図である。 第２図は、本発明に従い、一般式Ｐ₂Ｓ₂のジチオ−ビスホスファン（化合物１ 及び２）を合成するための合成方式を例示する図である。 第３図は、本発明に従いレニウム錯体（化合物３）を合成するための合成方式 を例示する図である。 第４図は、本発明に従い、一般式Ｐ₂Ｎ₂のジアミドジホスフィン（化合物４） を合成するための合成方式を例示し、更に本発明に従い、Ｐ₂Ｎ₂多座配位子ホス フィンを製造するために対応するホスフィンへ燐酸化物（又は硫化物）を還元す るために用いられる合成方式を例示する図である。 第５ａ図〜第５ｃ図は、（ａ）錯体８、（ｂ）錯体９、及び（ｃ）錯体１０の ＨＰＬＣ分析を表すグラフである。 第６図は、１．０Ｍのシステイン溶液中に入れた錯体１０の２４時間の期間に 亙る安定性プロファイル(profile)を例示するグラフである。 第７図は、５０％確率エリプソイド(ellipsoid)を示す錯体８のＯＲＴＥＰ図 である。 第８図は、５０％確率エリプソイドを示す錯体９のＯＲＴＥＰ図である。 第９図は、５０％確率エリプソイドを示す錯体１０のＯＲＴＥＰ図である。 第１０図は、本発明に従い、一般式Ｐ₂Ｓ₂のジチオ−ジホスフィンを合成する ための合成方式を例示する図である。 第１１図は、Ｒｅ（Ｖ）の周りに八面体配位を有する二金属錯体、化合物８及 び９、を与えるための位置−及び立体−選択性合成のための合成方式を例示する 図である。 第１２図は、Ｒｅ（Ｖ）の八面体配位一金属錯体を有する二金属錯体、化合物 １０、を与えるための位置−及び立体−選択性合成のための合成方式を例示する 図である。 第１３図は、本発明に従い、レニウム錯体を合成するための合成方式を例示す る図である。 第１４図は、本発明に従い、テクネチウム錯体を合成するための合成方式を例 示する図である。 第１５図は、ジチオ−ビス（ヒドロキシメチル）ホスフィンリガンド１１及び １２を例示する図である。 第１６ａ図〜第１６ｂ図は、Ｐ₂Ｓ₂錯体、（ａ）^99mＴｃ−１１及び（ｂ）^99m Ｔｃ−１２のＨＰＬＣクロマトグラムを表すグラフである。 第１７ａ図〜第１７ｂ図は、ＨＰＬＣクロマトグラムを表すグラフである。 〔好ましい態様についての詳細な説明〕 一般に、本発明は、診断又は治療用医薬として用いられる化合物を与える。そ れら化合物は、ＭＲＩコントラスト剤を含めた他の医薬用途に用いることもでき る。本発明の新規な化合物は、診断及び治療用放射性医薬品として用いることが できる標識付けされた分子を与える。 それら化合物は、少なくとも一つのリガンドで錯化された遷移金属を含み、そ の金属は一つ以上のヒドロキシアルキルホスフィン（ＨＭＰ）供与体基に配位さ れて含まれている。生体外及び（又は）生体内での大きな安定性を有する種々の 遷移金属との錯体を形成するのに用いられる１〜６個のヒドロキシアルキルホス フィン供与体単位を有するのが典型的であるホスフィンを主体にしたリガンド系 が与えられる。本発明は、生体内及び（又は）生体外で、通気した水溶液内で大 きな安定性を有する種々の遷移金属との錯体を形成するのに用いられるヒドロキ シアルキルホスフィンを主体にしたリガンド系を与える。 本発明の化合物を製造するための化合物及び方法は、一般に次の式：〔式中、Ｍは遷移金属であり、Ｍ^Rは還元状態の遷移金属であり、Ｘは(ＣＨＲ)_n （ここで、ｎ＝０、１、２、又は３であり、Ｒは水素、カルボキシル、 チルである）、又はＳであり、Ｙは、式Ｐ(Ａ−ＯＨ)_n（ここで、ｎ＝１、２、 又は３であり、Ａは、−ＣＨ₂、−Ｃ₂Ｈ₄、又はｉ−又はｎ−Ｃ₃Ｈ₆−である） のヒドロキシアルキルホスフィンである。〕 を特徴とする。本発明の好ましい態様として、Ａはメチルである。 リガンドは、一般に^186/188Ｒｅ、¹⁰⁵Ｒｈ、及び^99mＴｃを含む群からの遷移 金属で錯化されている。これらの錯体は、１：１に等しいか又はそれより大きな リガンド対金属比を有し、その形成により得られるキレートは小さく、非常に明 確なものである。これらの特定の組合せにより、下に記載するように、容易に入 手できる化学的形態の放射性核種と共に特に用いられる錯体を、１工程の高収率 の反応で形成することができる。 例えば、^99mＴｃＯ₄ ^-、ＲｅＯ₄ ^-キレート又は¹⁰⁵Ｒｈ塩化物を用いることがで きる。これらの種類のヒドロキシアルキルホスフィンリガンドは、¹⁸⁶Ｒｅ、¹⁸⁸ Ｒｅ、¹⁰⁹Ｐｄ、¹⁰⁵Ｒｈ等のような、又は診断用としては^99mＴｃ放射性医薬品 の場合のような、γ及びβ放射性アイソトープを含めた放射性アイソトープを有 する種々の遷移金属と極めて安定なキレートを形成することが決定されている。 特に、本発明は、夫々診断用又は治療用放射性医薬として用いるための多座配 位子^99mＴｃ−又は^186/188Ｒｅ−標識分子（キレート）を配合する方法を与える 。この技術で用いられるリガンドには、^99mＴｃ又は^186/188Ｒｅの還元及び（又 は）^99mＴｃ、^186/188Ｒｅ、又は¹⁰⁵Ｒｈの配位で用いることができる一つ以上 のヒドロキシアルキルホスフィン供与体基が含まれる。リガンドのヒドロキシア ルキルホスフィン基（単数又は複数）は、水溶液に対し可溶性であり、Ｏ₂によ る最小限の酸化しか示さないか又はほとんど酸化は示さない。即ち、本発明は、 Ｏ₂酸素の存在下で酸化に対し敏感ではなく、生体外及び生体内で大きな安定性 を有する^99mＴｃ又は^186/188Ｒｅとの錯体を高収率で形成するのに用いられる、 空気に対し安定で、水溶性の、小さなホスフィン系リガンドを与える。^99mＴｃ 又は^186/188Ｒｅ反応物は、（^99mＴｃＯ₄ ^-又は^186/188ＲｅＯ₄ ^-を含めた）酸化 物の形になっていてもよく、同様にそれら金属の他の形になっていてもよい。 本発明に従って製造されるキレートは、水溶液、血清及び他の体液中で安定で あることが判明している。このことは、安定なキレートを形成しないため、放射 性核種常磁性金属の局在化の制御が本来失われている従来法の薬剤の問題点を解 決するのに必須である。更に、本発明に従って製造される化合物は、下で論ずる ように、局在化の特異性を与え、放射性核種の物理的半減期を増大し、改良され た薬物速度論、及び骨髄、腎臓、消化管、肝臓等のような正常な組織に対する腫 瘍のような標的組織に対する選択性の増大を与えるように化学的に変性すること ができる。 本発明に従って製造される化合物は、中性水溶液中で安定であるのみならず、 酸性及び塩基性水性媒体中でも安定であることが判明している。この場合も、こ のことは、異なったｐＨを有する体の領域中に化合物を局在化させること及び口 径投与のような異なった投与経路によっても安定であることに関し、必須である 。 本発明に従って製造されるリガンドは、多座配位子（リガンド１分子当たり一 つより多い供与体原子）である。 一般的種類のヒドロキシアルキルホスフィン含有リガンドには、二座配位子・ ビスヒドロキシアルキルホスフィンリガンド、及び金属一つ当たり一つ以上のヒ ドロキシアルキルホスフィン基を有する多座配位子（即ち、キレート原子又は基 の数が３以上である）が含まれる。これらのリガンドは、本発明の安定で水溶性 の^99mＴｃ、^186/188Ｒｅ、及び¹⁰⁵Ｒｈを形成するのに用いられる。 放射性医薬品を製造するための^99mＴｃキレートを形成するためにヒドロキシ メチルホスフィンリガンドを単独で用いることの外に、ヒドロキシアルキルホス フィンリガンドは、^99mＴｃ、^186/188Ｒｅ、及び¹⁰⁵Ｒｈをキレートするために 用いられる他のリガンドと組合せて用いることもできる。 例えば、単座配位子ホスフィンリガンドであるトリス（３−メトキシ−１−プ ロピル）ホスフィンは、^99mＴｃを錯化するために１，２−ビス（ジヒドロ−２ ，２，５，５−テトラメチル−３−フラノン−４−メチレンアミノ）エタンと組 合せて用い、（^99mＴｃ−Ｑ１２）親油性陽イオン性（＋１）錯体を形成する。 この錯体は、心筋潅流放射性医薬品として用いられるものと評価されている〔マ ルミオン(Marmion)その他、１９９４）〕。この錯体では、単座配位子ホスフィ ンリガンドは、金属に対しトランス位置で結合している〔ドイチュ(Deutsch)、 １９９３；マルミオンその他、１９９４〕。このホスフィンリガンドのどちらの 側鎖でも^99mＴｃキレートの親油性を増大し、それにより心筋摂取が改良される 。本発明に記載したヒドロキシアルキルホスフィンリガンドは、同様なやり方で 用いることができる。従来法の単座配位子ホスフィンリガンドとは対照的に、ヒ ドロキシアルキルホスフィンリガンドは錯体の水溶性を増大し、腎臓を経て尿へ の排出を向上する。 本発明による製造で用いられる二座配位子ヒドロキシアルキルホスフィンリガ ンドは、次の式： 〔式中、Ｘは(ＣＨＲ)_n（ここで、ｎ＝０、１、２、又は３であり、Ｒは水素、 Ｒ’は水素又はメチルである）、又はＳであり、Ｙは、式Ｐ(Ａ−ＯＨ)_n（ここ で、ｎ＝１、２、又は３であり、Ａは、−ＣＨ₂、−Ｃ₂Ｈ₄、又はｉ−又はｎ− Ｃ₃Ｈ₆−である）のヒドロキシアルキルホスフィンである。〕 を特徴とする。 Ｘ及び（又は）Ｅの官能性を用いて、最終^99mＴｃ-又は^186/188Ｒｅ−キレー トの化学的特性（例えば、極性、電荷等）を変え、或はキレートを生体選択性標 的指向部分（例えば、ＭＡｂ、受容体剤）に結合することができ、Ｒは、Ｈ、ア ルキル基（Ｃ₁〜Ｃ₄）、芳香族基からなる群から選択することができ、且つ（又 は）−ＯＨ、−ＮＨ₂、−ＣＯＯＨ、−ＳＨのような官能基、及びＢＦＣＡの未 錯化リガンド又は「予め形成された」^99mＴｃ又は^186/188Ｒｅ錯体を生物分子標 的指向構造体に共役させるために用いられる他の基を含んでいてもよい。 キレートを、ペプチド、蛋白質、及び抗体のような生物分子に共役させるため に用いられる方法は、前に記述した官能基の活性化（例えば、活性されたエステ ル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ベンジルイソチオシアネート、アルキルハ ロゲン化物、シクロヘキシルジイミン等へ）を含んでいてもよい〔メアレス(Mea res)その他、１９８８；パーカー(Parker)、１９９０；ウィルバール(Wilbur)、 １９９２〕。 ^99mＴｃ（及び^186/188ＲｅＯ₄ ^-）の形成は、過剰のホスフィンリガンド、外部 還元剤、例えば、Ｓｎ（II）によるか、又はキレート交換により、^99m ＴｃＯ₄ ^-を還元することにより行うことができる。 本発明の態様として、多座配位子ヒドロキシアルキルホスフィン系リガンドを 用い、外部還元剤（例えば、Ｓｎ⁺²）を用い、又は外部還元剤を用いずに還元し た後、弱い供与体キレート〔例えば、^99mＴｃ（Ｖ）−グルコヘプトネート、^{186 /188} Ｒｅ（ｖ）−クエン酸塩、^99mＴｃ−Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₃〕とのキレート交換に より水性系中で^99mＴｃ又は^186/188Ｒｅ錯体を形成することができる。この方法 は、１に等しいか又はそれより多くの（≧１）ヒドロキシアルキルホスフィン供 与体基（単数又は複数）を有するリガンド骨格を用いている。 そのような態様の一つとして、多座配位子リガンド主構造体上のヒドロキシア ルキルホスフィンは、分子のホスフィン官能性が^99mＴｃＯ₄ ^-又は^186/188ＲｅＯ₄ ^- を還元し、他の分子内ホスフィン又は他の供与体原子（例えば、−Ｎ、−Ｏ、 −Ｐ、又は−Ｓ原子）が相互作用して還元された放射性金属と安定なキレートを 形成するように用いる。 ＢＦＣＡを形成するのに用いられるヒドロキシアルキルホスフィン含有リガン ドの殆どは多座配位子（即ち、３以上の供与体原子）であり、一般に還元された （即ち、酸化状態＜＋７）^99mＴｃ、^186/188Ｒｅ、及び¹⁰⁵Ｒｈと１：１のリガ ンド対金属錯体を形成する。 低い配位数のヒドロキシアルキルホスフィンリガンドは、１：１より大きな金 属対リガンド比を有する^99mＴｃ又は^186/188Ｒｅキレートを形成することができ 、それらも放射性医薬品の形成に用いることができる。 一般に、多座配位子ホスフィン系リガンドは、本発明の好ましい態様である。 なぜなら、それらは^99mＴｃ又は^186/188Ｒｅと１：１金属対リガンド比の錯体を 形成することができるからである。１：１金属対リガンド比の錯体を形成するこ とができることにより、明確に規定された診断又は治療用放射性医薬品の必須成 分を形成する^99mＴｃ又は^186/188Ｒｅキレートを形成することができる。 ヒドロキシアルキルホスフィン系リガンドは有利である。なぜなら、それらは 中性ｐＨ範囲内で通気した水性媒体中で化合物を^99mＴｃ又は^186/188Ｒｅで標識 付けすることができるからである。更に、ヒドロキシアルキルホスフィン系リガ ンドは、単に^99mＴｃＯ₄ ^-又は^186/188ＲｅＯ₄ ^-とリガンドを混合することにより 、極めて安定なキレートの形成を促進するからである。このことは、一般に放射 性医薬品が最大アイソトープ活性度を与えるためにそれらを投与する直前に調製 することができるので有利である。このことは、Ｏ₂の存在下で、外部からの還 元剤（例えば、Ｓｎ⁺²）を入れずに広いｐＨ範囲に亙って行うことができる。こ れらの性質によりヒドロキシアルキルホスフィン系リガンドは、人の患者で日常 用いられる新規で独特の^99mＴｃ又は^186/188Ｒｅ商業的薬品生成物の形成に対し 特に有用で万能性のあるものになる。 第４図に関し、本発明によるリガンドを合成するための合成方式が示されてい る。 本発明に従って用いられる多座配位子リガンドは、極めて多種類の式によって 特徴付けることができる。或る種のリガンドは、ホスフィン基だけが^99mＴｃ又 は^186/188Ｒｅを配位するための供与体の組として用いられるリガンド骨格を有 する。他の種類では、金属を配位するのに用いられる他の供与体原子（例えば、 Ｓ、Ｎ、Ｐ、又はＯ）又は基（例えば、アミン、アミド、チオール、カルボキシ ル、又はヒドロキシル）と共にヒドロキシアルキルホスフィン基（単数又は複数 ）を含むリガンド主構造体を用いている。 キレート基は、ヒドロキシメチルホスフィンＰ−原子である二つの供与体原子 及びＰ−原子以外の原子である二つの供与体原子を含むことができ、次の式を有 する： 式中、Ｍは遷移金属であり、Ｍ^Rは還元状態の遷移金属であり、Ｘは(ＣＨＲ)_n（ ここで、ｎ＝０、１、２、又は３であり、Ｒは水素、カルボキシル、又は芳香 る）、又はＳであり、Ｙは、式Ｐ(Ａ−ＯＨ)_n（ここで、ｎ＝１、２、又は３で あり、Ａは、−ＣＨ₂、−Ｃ₂Ｈ₄、又はｉ−又はｎ−Ｃ₃Ｈ₆−である）のヒドロ キシアルキルホスフィンである。本発明の好ましい態様では、Ａはメチルである 。 本出願人は、類型：〔(ＨＯＨ₂Ｃ)₂ＰＣＨ₂ＣＨ₂Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂（ＨＭＰＥ） 及び(ＨＯＨ₂Ｃ)₂ＰＣ₆Ｈ₄Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂（ＨＭＰＢ）］の新規な種類のキレー ト性ビスホスフィンが空気中及び水溶液中でも酸化に対し安定であることを発見 し、ここに例示する。 これらのリガンドも、数多くの初めの方の遷移金属〔Ｒｅ（Ｖ）及び９９ｍＴ ｃ（Ｖ）〕及び後の方の遷移金属〔Ｒｈ（Ｉ）、Ｐｄ（II）、Ｐｔ（II）、Ａｇ （Ｉ）、及びＡｕ（Ｉ）〕と水溶性（反応論的に不活性）錯体を生ずる〔バーニ ング(Berning)その他、１９９６；バーニングその他、投稿中；バーニングその 他、投稿中；バーニングその他、１９９５；エリス(Ellis)その他、１９９２； ハリソン(Harrison)その他、１９８９；ホイエ(Hoye)その他、１９９３；レディ ー(Reddy)その他、１９９５；レディーその他、１９９６；レディーその他、１ ９９６〕。Ｔｃ−９９ｍを有するＴＨＰ、ＨＭＰＢ、及びＨＭＰＥの詳細な放射 線化学研究は、ヒドロキシメチル官能性ホスフィン（ＨＭＰ）が、生体内安定性 が高い^99mＴｃ−錯体を生ずるのみならず、それら錯体が非標的組織から効果的 に排除され、尿中へ排泄される程度は大きいことを示している（バーニングその 他、１９９６；バーニングその他、１９９５）。しかし、ＨＭＰＢ及びＨＭＰＥ と種々のＲｅ（Ｖ）前駆物質との反応についての合成及びＸ線結晶学的研究を含 めた我々の詳細な研究では、これらのリガンドが第１３図の方式１で概略示した ように、１つのＲｅ（Ｖ）中心に二つのリガンドが配位した錯体を形成する強い 性質を有することを示している〔レディー(Reddy)その他、１９９６〕。生物分 子に標識付けするのに用いられる効果的な二官能性キレート剤（ＢＦＣＡ）を開 発するために、金属対リガンド比は１：１であることが必須である。ＨＭＰＢ及 びＨＭＰＥリガンドは、ＢＦＣＡに対しては不適切であるが、もし新しいリガン ドをそれらの主構造体内に−Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂基を組み込んで設計するならば、核 医学で有用な示唆を与えることができる。従って、ＨＭＰ基をジチオエーテル骨 格に付与する可能性（第１図）を探究し、硫黄とＰ^IIIの芯を一緒にした連結特 性が、１：１の金属対リガンド比を有する金属錯体を与えることができるように した〔スミスその他、投稿中；スミスその他、発表のため提出されている〕。こ の新規な種類のリガンドとテクネチウム−９９ｍの生体外及び生体内放射線化学 的研究をここに記述する。得られた錯体の化学的性質を既知のレニウム（Ｖ）類 似体のものと比較する。 ＨＭＰＥ及びＨＭＰＢから誘導されたＴｃ−９９ｍ錯体の生体外／生体内の大 きな安定性と一緒になったこれらの性質は、（ヒドロキシメチル）ホスフィン系 リガンドの更に一層のリガンド修正のための展望を与えている。本出願人は、こ こに（ａ）ジチオ−ビスホスフィン主構造体、〔(ＨＯＨ₂Ｃ)₂Ｐ(ＣＨ₂)₂Ｓ(Ｃ Ｈ₂)₃Ｓ(ＣＨ₂)₂Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂（１）、(ＨＯＨ₂Ｃ)₂ＰＣＨ₂ＣＨ₂Ｓ(ＣＨ₂)₄ ＳＣＨ₂ＣＨ₂Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂（４）、及び(ＨＯＨ₂Ｃ)₂ＰＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂Ｓ(Ｃ Ｈ₂)₃ＳＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂〕（７）、に基づく新規な一連の水溶性 リガンドの合成、（ｂ）これらのリガンドのＲｅ（Ｖ）との配位化学、及びリガ ンド、(ＨＯＨ₂Ｃ)₂Ｐ(ＣＨ₂)₂Ｓ(ＣＨ₂)₃Ｓ(ＣＨ₂)₂Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂（１１）及 び(ＨＯＨ₂Ｃ)₂Ｐ(ＣＨ₂)₃Ｓ(ＣＨ₂)₃Ｓ(ＣＨ₂)Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂（１２）の^99mＴ ｃとの配位化学で、１：１の金属対リガンド比を有する錯体を生成させるのにリ ガンド鎖の大きさが重要であることを示す配位化学、及び（ｃ）［ＲｅＯ₂(ＨＯ Ｈ₂Ｃ)₂Ｐ（ＣＨ₂)₂Ｓ(ＣＨ₂)₃Ｓ(ＣＨ₂)₂Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂］₂Ｃｌ₂（８）、［Ｒ ｅＯ₂(ＨＯＨ₂Ｃ)₂Ｐ(ＣＨ₂)₂Ｓ(ＣＨ₂)₄Ｓ(ＣＨ₂)₂Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂］₂Ｃｌ₂（ ９）、及び［ＲｅＯ₂(ＨＯＨ₂Ｃ)₂Ｐ(ＣＨ₂)₃Ｓ(ＣＨ₂)₃Ｓ(ＣＨ₂)₃Ｐ(ＣＨ₂Ｏ Ｈ)₂］Ｃｌ（１０）のＸ線結晶構造を記述する。ジチオビスホスフィンリガンド から誘導された新規な水溶性Ｒｅ（Ｖ）錯体の反応不活性を示す生体外研究を下 に記述する。 本発明に従って製造されたヒドロキシアルキルホスフィン供与体基を有する化 合物は、部位特異性生物分子により化学的に変性させるか、又はそれと結合し、 局部組織の特異性、改良された薬物速度、及び骨髄、腎臓、消化管、及び肝臓を 含めた（それらに限定されるものではない）清浄な組織に対する腫瘍のような標 的組織の選択性の増大を生じさせることができる。 リガンドを、特定の標的器官での特定の放射性核種とのキレート形成及び局部 化を行えるように特別に構成するのに、非常に変性し易いものとして上記式は本 発明を特徴付けている。 例えば、このリガンドは、蛋白質又は抗体に対し共役することができ、モノク ローナル抗体を結合するのに前に用いられていた側鎖を用いることができる。例 えば、共役反応はベンジルイソチオシアネート、ブロモアセトアミド、活性化エ ステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、開裂可能なエステル結合、及びアルデ ヒドのような反応性基を含むことができる。従って、単一のモノクローナル抗体 又は幾つかのモノクローナル抗体を金属・リガンド錯体に添加して、リガンド金 属錯体を特定の表面抗原又は標的組織に結合する特異性を与えることができる。 上で論じたように、キレートを一層極性で親水性にするため、他の側鎖修正を 行うことができる。例えば、カルボキシル又はヒドロキシル基のような帯電基を 、ホスフィン基に付加した種々のＲ基に付加することができる。帯電／極性基を 与える化合物中へのこの付加的小さな変化は、得られるキレートの親水特性を増 大する。これは、血液及び非標的組織から一層速く選択的な排除を生ずる。この 修正は、現在治療のために用いられている共役した放射性標識モノクローナル抗 体の異化作用に続く、血液、肝臓、腎臓及び脾臓のような非標的組織から放射能 を効果的に一掃するのを促進するために極めて望ましい。 別法として、キレートの疎水性は、ホスフィン基に付加した側鎖のアルキル鎖 の長さを変えることにより少しずつ変えることができる。例えば、ホスフィン部 分のアルキル基は、例えばメチル、エチル、及びｎ−又はｉ−プロピルを用いて 誘導することができる。このことは、或るキレートの場合、特に^99mＴｃで標識 付けされたキレートの場合、そのキレートの疎水性の増大が、脳、心臓及び肺の 中のような、選択的組織中での標的摂取に主要な役割を演ずるので望ましい。キ レート主構造体にアルキル基を付加することにより、キレートの脂質溶解度が増 大する。もし得られたキレートが中性ならば、脳、心臓、又は肺の影像剤を開発 することができる。 ホスフィン部分に付加したＲ及びＲ’基のアルキル鎖の長さを変えるための別 のやり方は、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ₂、−ＣＯＯＨ、活性化エステル、Ｎ−ヒ ドロキシスクシンイミド、ベンジルイソチオシアネート、アルキルハロゲン化物 、又はシクロヘキシルジイミドのような他の官能基を付加することである。アル キル側鎖の代わりにエーテル置換を用いると親油性が増大するが、血液及び他の 非標的組織からキレートを除去する速度も向上する。 上述の修正は、全て本発明によって作られた化合物の融通性を例示するもので あり、更にそれら化合物の結合、除去、及び吸収を変えるためそれら化合物を変 性し、それら化合物を特定の器官標的化、投与量、及び代謝に適合するように構 成することができることを例示している。 本発明に従って製造された化合物は、当分野でよく知られている方法により、 癌、感染症、神経障害、心臓病のような病気、更に核医学実験室で現在評価され ている種々の病気を含めた病気の放射線影像又は治療処置のための放射性医薬品 として用いることができる。⁹⁹Ｔｃは、全ての診断用影像研究に用いることがで きるが、¹⁰⁵Ｒｈ及び^186/188Ｒｅは、主に癌の処置のための治療用としてのみ用 いることができる。 本発明に従って製造される化合物は、個々の患者の臨床状態、投与の部位及び 方法、投与のスケジュール、及び医師に知られている他の因子を考慮に入れて、 良い医療法に従って投与及び服用される。ここでの目的にとって「効果的な量」 は、当分野で知られているような考察によりそのように決定される。 本発明の方法では、金属・ヒドロキシアルキル含有化合物（錯体）を種々の方 法で投与することができる。それら化合物は化合物そのものとして、又は医薬的 に許容出来る塩として投与することができ、医薬的に許容出来るキャリヤーと組 合せて又は単独で投与することができることに注意すべきである。化合物は、経 口的に、又は静脈内、腹腔内、鼻孔内及び皮下投与を含めた非経口的に投与する ことができる。化合物の接種も有効である。処置される患者は、温血動物、特に 人を含めた哺乳類である。 金属・ヒドロキシアルキルホスフィン含有化合物を非経口的に投与する場合、 注入に適した医薬配合物には、無菌水溶液又は分散物及び無菌注射溶液又は分散 物に再構成するための無菌粉末が含まれる。キャリヤーは溶媒又は分散用媒体に することができ、それらには例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グ リセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコール等）、それら の適当な混合物、及び植物油が含まれる。 更に、抗菌性保存剤、酸化防止剤、キレート剤、及び緩衝剤を含めた組成物の 安定性、無菌性、及び等張性を向上させる種々の添加剤を添加してもよい。細菌 作用の予防は、種々の殺菌剤及び抗真菌薬、例えば、パラベン(paraben)、クロ ロブタノール、フェノール、ソルビン酸等により確実に行うことができる。多く の場合、等張剤、例えば砂糖、塩化ナトリウム等を含有させることが望ましい。 しかし、本発明により、使用する賦形剤(vehicle)、希釈剤、又は添加剤はそ れら化合物と相容性を持たなければならない。 無菌注射溶液は、本発明の実施で用いられる化合物を、希望に従い、種々の他 の成分と一緒に必要な量の適当な溶媒中で配合することにより調製することがで きる。 金属・ヒドロキシアルキルホスフィン含有化合物の薬理学的配合物は、種々の 賦形剤、助剤、添加剤、及び希釈剤のようなどのような相容性のあるキャリヤー でも、それらを含んだ注射配合物として患者に投与することができる。或は本発 明で用いられる化合物は、遅延放出皮下移植の形、又は重合体マトリックス、リ ポソーム、及び微小球のような標的指向送出系の形で、患者に非経口的に投与す ることができる。本発明で用いるのに適した移植は、移植した後ゆっくり溶解す るペレットの形、又は当業者によく知られている生体相容性送出モジュールの形 を取ることができる。そのようなよく知られた投与形態及びモジュールは、活性 成分が数日から数週間の期間に亙ってゆっくり放出されるように設計されている 。 本発明の化合物は、個々の患者の臨床状態、投与の部位及び方法、投与のスケ ジュール、患者の年齢、性別、体重、及び医師に知られている他の因子を考慮に 入れて、良好な医療の実施に従って投与及び服用される。ここでの目的にとって 医薬的に「効果的な量」とは、このように当分野で知られているような考察によ り決定される。その量は、生存率の向上、回復速度の向上、又は症状の改善又は 除去、及び当業者によって適当な判定尺度として選択されるような他の適応症（ それらに限定されるものではない）を含めた改善を達成するのに有効でなければ ならない。 本発明では、それら化合物は種々の方法で投与することができる。それら化合 物は化合物そのものとして、又は医薬的に許容出来る塩として投与することがで き、医薬的に許容出来るキャリヤー、希釈剤、助剤、及び賦形剤と組合せた活性 成分として、又は単独で投与することができることに注意すべきである。化合物 は、経口的に、又は静脈内、動脈内、筋肉内、腹腔内、及び鼻孔内投与、その外 クモ膜下及び注入法を含めた非経口的に投与することができる。化合物の移植も 有効である。処置される患者は、温血動物、特に人を含めた哺乳類である。 本発明の化合物を非経口的に投与する場合、それら化合物は、単位投与量の注 射剤形態（溶液、懸濁物、エマルジョン）として配合する。注射に適した医薬配 合物には、無菌水溶液又は分散物及び無菌注射溶液又は分散物に再構成するため の無菌粉末が含まれる。キャリヤーは溶媒又は分散用媒体にすることができ、そ れらには例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピ レングリコール、液体ポリエチレングリコール等）、それらの適当な混合物、及 び植物油が含まれる。 適当な流動性は、例えば、レシチンのような被覆を用いること、分散物の場合 には必要な粒径を維持すること、及び表面活性剤を使用することにより維持する ことができる。綿実油、胡麻油、オリーブ油、大豆油、コーン油、ヒマワリ油、 又はピーナッツ油、及びミリスチン酸イソプロピルのようなエステルと言った非 水性賦形剤を、化合物組成物のための溶媒系として用いてもよい。更に、抗菌性 保存剤、酸化防止剤、キレート剤、及び緩衝剤を含めた組成物の安定性、無菌性 、及び等張性を向上させる種々の添加剤を添加してもよい。細菌作用の予防は、 種種の殺菌剤及び抗真菌薬、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール 、ソルビン酸等により確実に行うことができる。多くの場合、等張剤、例えば砂 糖、塩化ナトリウム等を含有させることが望ましい。注射医薬形態の長期間の吸 収は、吸収遅延剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンを使用 することによりもたらすことができる。しかし、本発明により、使用する賦形剤 、希釈剤、又は添加剤はそれら化合物と相容性を持たなければならない。 無菌注射溶液は、本発明の実施で用いられる化合物を、希望に従い、種々の他 の成分と一緒に必要な量の適当な溶媒中に配合することにより調製することがで きる。 本発明の化合物の薬理学的配合物は、種々の賦形剤、助剤、添加剤、及び希釈 剤のようなどのような相容性のあるキャリヤーでも、それらを含んだ注射配合物 として患者に投与することができる。或は本発明で用いられる化合物は、遅延放 出皮下移植の形、又はモノクローナル抗体、ベクター媒介送出、イオン泳動、重 合体マトリックス、リポソーム、及び微小球のような標的指向送出機構の形で、 患者に非経口的に投与することができる。本発明で有用な放出機構の例には、米 国特許第５，２２５，１８２号、米国特許第５，１６９，３８３号、米国特許第 ５，１６７，６１６号、米国特許第４，９５９，２１７号、米国特許第４，４８ ７，６０３号、米国特許第４，４８６，１９４号、米国特許第４，４４７，２３ ３号、米国特許第４，４４７，２２４号、米国特許第４，４３９，１９６号、及 び米国特許第４，４７５，１９６号明細書に記載のものが含まれる。他の多くの そのような移植、送出システム、及びモジュールは、当業者によく知られている 。 本発明で用いられる本発明の化合物の薬理学的配合物は、患者に経口投与する ことができる。化合物を錠剤、懸濁物、溶液、エマルジョン、カプセル、粉末、 シロップ等として投与するような慣用的方法を用いることができる。化合物を経 口又は静脈内で送り、生物学的活性を維持する既知の方法も好ましい。 ＣＮＳ内の送出については、血液・脳関門を通る薬理学的配合物を投与するこ とができる〔ベッツ(Betz)その他、１９９４；ブレム(Brem)その他、１９９３〕 。そのような配合物は、本発明が脳輸送ベクターに結合されてその関門を通る輸 送を可能にするキメラペプチドを生成させるため、今度入手できるようになった 方法を利用することができる〔パードリッジ(Pardridge)その他、１９９２；パ ードリッジ、１９９２；パードリッジその他、１９９３〕。 一つの態様として、それら化合物は血液レベルの化合物を適当なレベルへ運ぶ ため静脈注射により最初投与することができる。次に患者の血液レベルを経口投 与方式によって維持するが、患者の状態及び上で述べたような条件により、他の 方式の投与を用いることができる。投与すべき化合物の量は、処置される患者に よって異なり、１日当たり体重について約１００ｎｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ の範囲にあり、好ましくは１日当たり１０μｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇである。 本発明で用いられるよく知られた移植組織及びモジュールの例には、薬を制御 された速度で放出するための移植可能なマイクロ注入ポンプを記載した米国特許 第４，４８７，６０３号；皮膚を通して薬を投与するための治療装置を記載した 米国特許第４，４８６，１９４号；正確な注入速度で薬を送るための投薬注入ポ ンプを記載した米国特許第４，４４７，２３３号：連続的薬品送出のための移植 可能な流量可変注入装置を記載した米国特許第４，４４７，２２４号；多室区画 を有する浸透圧薬品送出装置を記載した米国特許第４，４３９，１９６号；及び 浸透圧薬品送出装置を記載した米国特許第４，４７５，１９６号に記載されたも のが含まれる。これらの特許は参考のためここに入れてある。多くの他のそのよ うな移植組織送出装置及びモジュールも当業者に知られている。 本発明による種々のＨＭＰ系多座配位子ホスフィン及びその合成方法は、第２ 図〜第４図に例示されている。 ^99mＴｃ（及び^186/188ＲｅＯ₄ ^-）の形成は、過剰のホスフィンリガンド、外部 からの還元剤、例えば、Ｓｎ（II）による^99mＴｃＯ₄ ^-の還元により、或は供与 体^99mＴｃ又は^186/188Ｒｅシンソン(synthon)からのキレート交換により行うこ とができる。 本発明の更に別の態様として、多座配位子ヒドロキシアルキルホスフィン系リ ガンドを用いて、外部還元剤（例えば、Ｓｎ⁺²）による還元に続き、或は外部還 元剤を用いずに、弱い供与体キレート〔例えば、^99mＴｃ（Ｖ）グルコヘプトン 酸塩、^186/188Ｒｅ（ｖ）クエン酸塩〕からのキレート交換により水性系中で^99m Ｔｃ又は^186/188Ｒｅ錯体を形成することができる。この方法は、１に等しいか 又はそれより多くのヒドロキシアルキルホスフィン供与体基（単数又は複数）を 有するリガンド骨格を用いている。そのような態様の一つとして、多座配位子リ ガンド主構造体上のヒドロキシアルキルホスフィン供与体基を用い、分子のホス フィン官能性が^99mＴｃＯ₄ ^-又は^186/188ＲｅＯ₄ ^-を還元し、他の分子内ホスフィ ン又は他の供与体原子（例えば、−Ｎ、−Ｏ、−Ｐ、又は−Ｓ原子）が相互作用 して還元された放射性金属と安定なキレートを形成するようにする。 ＢＦＣＡを形成するのに用いられるヒドロキシアルキルホスフィン含有リガン ドの殆どは、多座配位子（即ち、３以上の供与体原子）であり、第３図に示した ように、一般に還元された（即ち、酸化状態＜＋７）^99mＴｃ及び^186/188 Ｒｅとの１：１リガンド対金属錯体を形成する。 本発明は、非配位ヒドロキシアルキルホスフィン基とアミンとを反応させて非 配位基を除去し、それによって実質的にヒドロキシアルキルホスフィン・金属化 合物を生成させることにより、金属原子が配位したヒドロキシアルキルホスフィ ン基から非配位ヒドロキシアルキルホスフィン基を分離するための方法も与える 。 一般に、この方法は、^99mＴｃ−（又は^186/188Ｒｅ）錯体とＨＭＰ基含有リガ ンドとの錯体のような、金属・ヒドロキシメチルホスフィン（ＨＭＰ）錯体の分 離も可能にする。即ち、この方法は、リガンド主構造体上のＨＭＰ基の全てがリ ガンドからの金属に配位している錯体を、金属と錯化していない非配位ＨＭＰ基 から分離することを可能にしている。この方法は、ＨＭＰ基を有する過剰の非錯 化リガンドを、これらのリガンドと錯化した^99mＴｃ（又は^186/188Ｒｅ）を含有 する溶液から簡単に且つ迅速に除去し、放射性医薬品を含む^99mＴｃ（又は^{186/1 88} Ｒｅ）生成物及び大きな比活性度を得ることができるようにしている。この分 離ができるようになったのは、金属、即ち^99mＴｃ（又は^186/188Ｒｅ）に配位し ていないＨＭＰ基がアミンと効果的に反応するのに対し、金属に配位したＨＭＰ 基がアミンと反応しないと言う発見によるものである。 この技術を利用することは、^99mＴｃ（又は^186/188Ｒｅ）標識付けされた薬剤 を、過剰の非錯化ＨＭＰ含有分子を除去した後、人の患者に投与することができ るような慣用的放射性医薬品製造に適用するのに非常に適している。 本発明の好ましい態様として、非配位ＨＭＰを除去するために用いられる好ま しい基には、アミン官能基（即ち、第一級又は第二級アミン）が含まれ、それら は標準分離カラム又は床材料、即ち、樹脂又は他の固体マトリックスのような固 体表面に付着することができる。樹脂又は他の固体マトリックスに結合させたア ミンを用いることにより、金属に配位していない一つ以上のＨＭＰ基を含むどの ような非錯化リガンドでも簡単な操作で分離することができる。例えば、^99mＴ ｃ（又は^186/188Ｒｅ）標識化合物又は放射性医薬品を、無菌水溶液、例えば、 ０．９％ＮａＣｌのような溶液中で、金属を配位するＨＭＰ基含有リガンド主構 造体の付加により形成し、次にその溶液を、過剰のアミン基が表面に結合された 固体支持体の入った殺菌カラムに通過させる。溶液がそのカラムを通過する間に 、非錯化ＨＭＰ基を有する化合物はカラムに共有結合するのに対し、ＨＭＰ基が 金属に配位したＨＭＰ含有化合物は、全てカラムを通過して溶出液に入る。この 方法の利用を、単座配位子ＨＭＰリガンド、トリス（ヒドロキシメチ ル）ホスフィン（ＴＨＰ）についての下の実施例の所で例示する。 〔実施例〕 合成リガンド 例１ ジチオ−ビスホスファンリガンド１及び２（第２図） 本発明に従って製造されたジチオ−ビスホスファンリガンドは、次の式を特徴 とする： Ｘ Ｓ Ｓ Ｐ Ｐ ＨＯ ＨＯ ＯＨ ＯＨ Ｘ＝−(ＣＨ₂)₃−、 １；Ｃ₆Ｈ₄、２ 式中、Ｘは−ＣＯＯＨ、−ＮＣＳで官能性化された脂肪族又は芳香族基、又は生 物分子に結合させるためのスクシンイミド官能基を導入するように更に変性する ことができる。 第２図に示したような式１及び２のジチオ−ビスホスファンは、下に概略述べ るような方法により製造した： (ＥｔＯ)₂（Ｏ）ＰＣＨ₂ＣＨ₂Ｓ(ＣＨ₂)₃ＳＣＨ₂ＣＨ₂Ｐ（Ｏ）(ＯＥｔ)₂の合 成： 鉱油中に６０％のＮａＨを入れた試料（９５ｍＭ）を、２口丸底フラスコに入 れ、無水(dry)ヘキサン（２０ｍｌ）を入れた。この溶液を１０分間撹拌し、然 る後、ヘキサン・鉱油層を完全に除去した。次にフラスコに無水(dry)テトラヒ ドロフラン（１００ｍｌ）を入れ、次にＨＳ(ＣＨ₂)₃ＳＨ（４６ｍＭ）を一定に 撹拌しながら滴下した。得られた溶液を０℃に冷却し、ＢｒＣＨ₂ＣＨ₂Ｐ(Ｏ)( ＯＣ₂Ｈ₅)₂（９５ｍＭ）を、３０分間に亙り一定に撹拌しながら滴下した。過剰 のＮａＨを５０ｍｌの脱イオン水を添加することによりクエンチした。溶液を酢 酸エチルにより（５０ｍｌで３回）抽出し、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄した 。有機層を無水硫酸ナトリウムにより乾燥した。濾過により溶媒を真空除去し、 微量のジエチルビニルホスホネートと共に９０％の収率で化合物５を得 た。それらの化合物を９０：１０の酢酸エチル対ヘキサン溶媒混合物を用いてシ リカゲルカラム（２０ｃｍ、６０メッシュ）により分離した。真空中で溶媒を除 去することにより、８８％の全収率で、粘稠な黄緑色の油として化合物５を得た 。高解像力ＦＡＢ／ＭＳ分析。Ｃ₁₅Ｈ₃₄Ｏ₆Ｐ₂Ｓ₂についての計算値：４３６． １２７２；実測値：［Ｍ＋Ｈ⁺］、ｍ／ｚ＝４３７．１３５０。 Ｈ₂ＰＣＨ₂ＣＨ₂Ｓ(ＣＨ₂)₃ＳＣＨ₂ＣＨ₂ＰＨ₂の合成： 化合物５（１８ｍＭ）を７５ｍｌの無水(dry)ジエチルエーテル中に入れ、０ ℃に冷却した。１．０Ｍの水素化アルミニウムリチウムのエーテル溶液（４５ｍ Ｍ、４５ｍｌ）をこの溶液に一定に撹拌しながらゆっくり滴下した。６Ｎの塩酸 水溶液（５０ｍｌ）を溶液に滴下し、残りのＬｉＡｌＨ₄をクエンチした。エー テル層をキャンテレーション(cantellation)により分離し、溶媒を真空除去し、 無色の粘稠な油として定量的な収率で化合物７を得た。(１)(Ｐ₂Ｓ₂)の合成： ホルムアルデヒド水溶液（７８ｍＭ）を酸素を含まないエタノール５０ｍｌ中 に入れ、窒素ガスで２時間２５℃でパージした。化合物７（１８ｍＭ）を次に溶 液へ、２５℃で一定に撹拌しながら注射器により滴下した。³¹Ｐ ＮＭＲ分光分 析により監視して、反応は１２時間で完了した。溶媒を真空除去し、無色の粘稠 な油として定量的に近い収率で化合物１を得た。高解像力ＦＡＢ／ＭＳ分析。Ｃ₁₁ Ｈ₂₆Ｏ₄Ｐ₂Ｓ₂についての計算値：３４８．０７４８；実測値：［Ｍ＋Ｈ⁺］、 ｍ／ｚ＝３４９．０８２６。分析、Ｃ₁₁Ｈ₂₆Ｏ₄Ｐ₂Ｓ₂についての計算値：Ｃ、 ３７．９２；Ｈ、７．５３；実測値：Ｃ、３７．１２；Ｈ、６．７６。 Ｃ₆Ｈ₄｛１，２−ＳＣＨ₂ＣＨ₂Ｐ(Ｏ)(ＯＥｔ)｝₂の合成 鉱油中に６０％のＮａＨを入れた試料（３２ｍＭ）を、２口丸底フラスコに入 れ、無水ヘキサン（２０ｍｌ）を入れた。この溶液を１０分間撹拌し、然る後、 ヘキサン・鉱油層を完全に除去した。次にフラスコに無水テトラヒドロフラン（ １００ｍｌ）を導入し、次に１，２−ＨＳ（Ｃ₆Ｈ₄）ＳＨ（１４ｍＭ）を一定に 撹拌しながら滴下した。得られた溶液を０℃に冷却し、ＢｒＣＨ₂ＣＨ₂Ｐ(Ｏ)( ＯＣ₂Ｈ₅)₂（３０ｍＭ）を、３０分間に亙り一定に撹拌しながら滴下した。過剰 のＮａＨを５０ｍｌの脱イオン水を添加することによりクエンチした。溶液を酢 酸エチルにより（５０ｍｌで３回）抽出し、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄した 。有機層を無水硫酸ナトリウムにより乾燥した。濾過により溶媒を真空除去し、 微量のジエチルビニルホスホネートと共に９４％の収率で化合物６を得た。それ らの化合物を９０：１０の酢酸エチル対ヘキサン溶媒混合物を用いてシリカゲル カラム（２０ｃｍ、６０メッシュ）により分離した。真空中で溶媒を除 去することにより、９１％の全収率で、粘稠な黄緑色の油として化合物６を得た 。高解像力ＦＡＢ／ＭＳ分析。Ｃ₁₈Ｈ₃₂Ｏ₆Ｐ₂Ｓ₂についての計算値：４７０． １１１５；実測値：［Ｍ＋Ｈ⁺]、ｍ／ｚ＝４７１．１１１９。 Ｃ₆Ｈ₄｛１，２−ＳＣＨ₂ＣＨ₂ＰＨ₂｝₂の合成 化合物６（１２ｍＭ）を７５ｍｌの無水ジエチルエーテル中に入れ、０℃に冷 却した。１．０Ｍの水素化アルミニウムリチウムのエーテル溶液（３１ｍＭ、３ １ｍｌ）をこの溶液に一定に撹拌しながらゆっくり滴下した。６Ｎの塩酸水溶液 （５０ｍｌ）を溶液に滴下し、残りのＬｉＡｌＨ₄をクエンチした。エーテル層 をキャンテレーションにより分離し、溶媒を真空除去して無色の粘稠な油として 定量的な収率で化合物８を得た。 Ｃ₆Ｈ₄｛１，２−ＳＣＨ₂ＣＨ₂Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂｝（２）の合成 ホルムアルデヒド水溶液（５３ｍＭ）を、酸素を含まないエタノール５０ｍｌ 中に入れ、窒素ガスで２時間２５℃でパージした。化合物８（１２ｍＭ）を次に 溶液へ、２５℃で一定に撹拌しながら注射器により滴下した。³¹Ｐ ＮＭＲ分光 分析により監視して、反応は３０時間で完了した。溶媒を真空除去し、無色の粘 稠な油として定量的に近い収率で化合物２を得た。高解像力ＦＡＢ／ＭＳ分析。 Ｃ₁₄Ｈ₂₄Ｏ₄Ｐ₂Ｓ₂についての計算値：３８２．０５９１；実測値：［Ｍ＋Ｈ⁺］ 、ｍ／ｚ＝３８３．０６５１。分析、Ｃ₁₄Ｈ₂₄Ｏ₄Ｐ₂Ｓ₂についての計算値：Ｃ 、４３．９７；Ｈ、６．３３；実測値：Ｃ、４４．２３；Ｈ、５．８０。 リガンド（１）と^99mＴｃキレートを、^99mＴｃＯ₄ ^-（０．５〜５ｍＣｉ）を含 有する０．９％ＮａＣｌ（１Ｎ、塩水）０．１ｍｌを、１ｍｇ／ｍｌのＰ₂Ｓ₂を 含有する１Ｎの塩水０．４ｍｌと混合し、室温（ＲＴ）で３０分間インキュベー ト(incubate)した。^99mＴｃ生成物は親水性であり、電気泳動分析により陽イオ ン性であることが判明した。ＨＰＬＣ分析を、勾配を用いて溶離する逆転相ＰＲ Ｐ−１カラムを用いて行なった。溶媒Ａ＝ｐＨ７の０．０１Ｍの燐酸ナトリウム 、１００％。溶媒Ｂ＝ＭｅＣＮ、１００％。勾配プロファイルは、注入後（Ｐ． Ｉ．）２分間Ａ１００％で、次にＰ．Ｉ．２分〜７分までＢが０の点からＢ１０ ０％まで直線的勾配をとり、次に更に６分間（即ち、Ｐ．Ｉ．１５分まで）Ｂ１ ００％を維持した。二つのピーク、即ち一つは１．３分の保持時間の所（^99mＴ ｃＯ₄ ^-と同じもの）及び６．５７分の所の他方のものが観察された。ＨＰＬＣ及 び電気泳動分析により、^99mＴｃキレートは単一の物質であり、９５％より大き な収率で形成されたことを示していた。この^99mＴｃキレートは、表２に示した ように、４〜１１の範囲のｐＨの水溶液中で安定であり、３７℃で７．４〜７． ８の範囲のｐＨで２４時間以上安定であることが判明した。 麻酔ラット〔Ｎａ−ペントバービタル５０ｍｇ／ｋｇで腹腔内麻酔したスプラ グ・ダウリー(Sprague-Dawley)ラット〕に^99mＴｃ−Ｐ₂Ｓ₂を注射（静脈内注射 ）後２分及び３０分の時の^99mＴｃ−Ｐ₂Ｓ₂生体分布は（表５参照）、排除され る経路が主に腎臓による尿中への排泄であることを示していた。胃の中に見出さ れた^99mＴｃ放射能の量は最小であったため（表３参照）、キレートが生体内解 離して^99mＴｃＯ₄ ^-を形成したか否かの証拠は明らかではない。これらのデータ ーは、ジチオ−ヒドロキシアルキルホスフィンが、生体外（ｐＨ４〜１ １）及び生体内で優れた安定性を有する^99mＴｃ−キレート（一種又は多種）を 形成することができる証拠を与えている。更に、^99mＴｃキレートが、単に^99mＴ ｃＯ₄ ^-とリガンド１（又は２）とを塩水中で混合することにより形成された事実 は、このホスフィンリガンドが^99mＴｃを過テクネチウム酸塩の＋７酸化状態か ら、過剰に存在する他のＰ₂Ｓ₂分子をキレートすることができる一層低い酸化状 態へ還元することができることの証拠である。 例２ 多座配位子ジアミド−ビスホスフィン （第４図の化合物４）： ジアミド−ビスホスフィン化合物４を、下に記載するような４段階の合成方法 を用いて合成した。 Ｐ₂Ｎ₂リガンドの合成実験の詳細： ジエチル−（２−Ｎ，Ｎ−ジベンジルアミノエチル）ホスホネートの製造： 凝縮器を取付けた１口ＲＢフラスコ中のジエチル２−ブロモエチルホスホネー ト（５０ｇ、０．２モル）に、ジベンジルアミン（４００ｍｌ）を、室温で撹拌 しながら添加した。混合物を１００℃に加熱した。１時間の間、反応混合物を固 化し、２４時間加熱を続けた。反応フラスコにジクロロメタン（３００ｍｌ）を 添加し、臭化ジベンジルアンモニウムを濾過し、ジクロロメタンで（５０ｍｌで ３回）完全に洗浄した。一緒にした濾液を回転蒸発器で濃縮した。純粋なホスホ ネート（５５．４ｇ、７５％）が、減圧（１８０℃、０．１ｍｍＨｇ）で蒸留す ることにより得られた。 ³¹Ｐ ＮＭＲ ：δ３２．２４ （２−Ｎ，Ｎ−ジベンジルアミノエチル）ビス（ヒドロキシメチル）ホスフィ ンオキシドの製造： 還流凝縮器を取付けた２５０ｍｌのＲＢフラスコ中に、無水(dry)エーテル（ １００ｍｌ）中に入れたホスホネート（７．２４ｇ、２０ｍＭ）を入れた。溶液 を０℃に冷却し、ＬＡＨ（３０ｍｌ、エーテル中１．０Ｍ、３０ｍＭ）を、Ｎ₂ 雰囲気中で撹拌しながら、注射器により滴下した。室温で２時間撹拌した後、Ｎ ａ₂ＳＯ₄の飽和溶液（１５ｍｌ）を０℃で添加し、過剰のＬＡＨを分解した。エ ーテル層をカニューレにより別の５００ｍｌＲＢフラスコへ移した。室温で減圧 下でエーテルを除去した。残留物を脱気したエーテル（５０ｍｌ）中に溶解し、 エーテル（７５ｍｌ）中に入れた３７％ホルムアルデヒド（５ｇ、６１ｍＭ）溶 液に添加した。混合物を４時間撹拌し、３０％過酸化水素（１ｍｌ）を添加した 。混合物を更に３０分間撹拌した。室温で減圧下で溶媒を除去し、粗製物を１０ ％メタノール・ジクロロメタン混合物で溶離することによりシリカゲルカラムで 精製し、７５％の収率で５．０１ｇを得た。 ³¹Ｐ ＮＭＲ ：５１．５２ 質量 ：計算値：３３３．３６；実測値３３３．１ （２−Ｎ，Ｎ−ジベンジルアミノエチル）ビス（ヒドロキシメチル）ホスフィ ンオキシドの保護： ビスヒドロキシ化合物（２ｇ、５．９９ｍＭ）、４−ジメチルアミノピリジン （７５０ｍｇ、６．１ｍＭ）及びトリエチルアミン（１．９ｇ、１８．７ｍＭ） をジクロロメタン（５０ｍｌ）中に入れた混合物に、０℃でＮ₂中で、塩化ｔ− ブチルジメチルシリル（２．８ｇ、１８．５７ｍＭ）を添加し、室温で一晩撹拌 した。反応混合物をジクロロメタン（１００ｍｌ）で希釈し、水（２０ｍｌ）、 塩水（２０ｍｌ）で洗浄し、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した。溶媒を除去し、粗製物 をシリカゲルカラムに導入した。カラムを３０％酢酸エチル・ヘキサン混合物で 溶離し、９７％の収率でシリル化化合物（３．２８ｇ）を得た。 ³¹Ｐ ＮＭＲ ：４８．２５ 質量 ：計算値：５６１．８９；実測値：５６１．３ （２−アミノエチル）ビス（ヒドロキシメチル）ホスフィンオキシドの製造： ジベンジル化化合物（３ｇ）をエタノール（２５ｍｌ）中で、２日間Ｐｄ／Ｃ 上で水素化した。溶媒を減圧除去し、そのままビスアミドの製造に用いた。 ³¹Ｐ ＮＭＲ ：４８．７８ 質量 ：計算値：３８１．６４；実測値３８１．２ ジアミド−ジホスフィンの製造： 二塩化フタロイル（１．５ｇ、７．３８ｍＭ）及びトリエチルアミン（２．３ ｇ、２２．７２ｍＭ）を無水(dry)ジクロロメタン中に入れた混合物に、Ｎ₂中で 水素化化合物（６．４ｇ、１６．７６ｍＭ）を添加した。混合物を室温で一晩 撹拌した。ジクロロメタンで希釈し、水及び塩水で洗浄した。無水Ｎａ₂ＳＯ₄で 乾燥し、溶媒を減圧除去した。粗製生成物を２％メタノール・ジクロロメタン混 合物で溶離することにより、シリカゲルカラムで精製し、４６％の収率でビスア ミド（３．１ｇ）を得た。 ³¹Ｐ ＮＭＲ ：４９．４８ 質量 ：計算値：８９３．３８；実測値８９２．４ トリクロロシラン（３ｍｌ）をＮ₂中でビスアミド（２５０ｍｇ、０．２７ｍ Ｍ）に添加した。混合物を２時間撹拌し、反応の進行を³¹Ｐ ＮＭＲにより監視 した。反応が完了した後、過剰のトリクロロシランをＮ₂ガス流を送ることによ り除去した。残留物を水に懸濁し、溶解しない固体をフィルターで除いた。濾液 を濃縮し、粗製ホスホニウム塩（１００ｍｇ）を得た。 ³¹Ｐ ＮＭＲ ：δ２９．５ 例３ Ｎ₂Ｐ₂リガンド４の^99mＴｃ−キレートを、二つの異なった方法により製造し た：（ｉ）ＴｃＯ₄ ^-（０．５〜５ｍＣｉ）を含有する１Ｎ塩水０．１ｍｌと、化 合物４を１ｍｇ／ｍｌ含有する１Ｎ塩水０．４ｍｌとを単に混合する方法；（ii ）^99mＴｃ−グルコヘプトン酸塩（又は^99mＴｃクエン酸塩）を化合物４に対する 錯化剤として用いたリガンド交換反応による方法。水の中に入れたリガンド溶液 （１ｍｇ／ｍｌ）０．５ｍｌと、^99mＴｃ−グルコヘプトン酸塩 （^99mＴｃ−クエン酸塩）の水溶液０．５ｍｌとを混合することにより、中性（ ｐＨ６〜７）で^99mＴｃ−Ｎ₂Ｐ₂錯体を形成した。^99mＴｃ−クエン酸塩交換反応 について異なった時間間隔での^99mＴｃ−Ｎ₂Ｐ₂錯化収率を表４に要約する。 Ｎ₂Ｐ₂リガンド４の水溶液に^99mＴｃＯ₄ ^-を直接添加することにより生成した^{9 9m} ｃＴＣＮ₂Ｐ₂錯体の収率も高かった（〜９５〜９８％）。生成物を電気泳動及 びＨＰＬＣにより分析した。ＨＰＬＣ分析は、前に述べた勾配溶離系を用いた逆 相（ＰＲＰ−１カラム）クロマトグラフィーにより行なった。^99mＴｃクエン酸 塩及び^99mＴｃ−グルコヘプトン酸塩交換標識付け反応の両方により形成された^{9 9m} Ｔｃ−キレート、及びＮ₂Ｐ₂化合物４に^99mＴｃＯ₄ ^-を直接添加することによ り形成されたものは、６．３〜６．４５の同様な保持時間を示した。このことは 、交換標識付け及び直接標識付け反応で、特異性化学物質が形成されることを示 している。この錯体の予想される構造は、第３図のレニウム類似体として描かれ ている。 麻酔ラット（Ｎａ−ペントバービタル５０ｍｇ／ｋｇで腹腔内麻酔にかけたス プラグ・ダウリーラット）についての注射（静脈注射）後、２分及び３０分での^99m Ｔｃ−Ｎ₂Ｐ₂の生体内分布は、それらが除去される経路が主に腎臓による尿 への排泄であることを示している。胃の中に見出される^99mＴｃ放射能の量は最 小であるので（表５参照）、キレートが生体内で解離して^99mＴｃＯ₄ ^-を形成す る証拠はないことが明らかである。これらのデーターは、ジアミド−ヒドロキシ アルキルホスフィンが^99mＴｃ−キレート（単数又は複数）を形成し、それらが 生体外（ｐＨ４〜１１）及び生体内で極めて安定であることの証拠を与えている 。更に、^99mＴｃキレートが単に塩水中でＮ₂Ｓ₂リガンド４と^99mＴｃＯ₄ ^-とを混 合することにより形成されると言う事実は、このホスフィンリガンドが過テクネ チウム酸塩での＋７酸化状態から、過剰に存在する他のＮ₂Ｐ₂分子をキレートす ることができる一層低い酸化状態へ９９^mＴＣを還元することができることの証 拠である。 例４ レニウムとの錯体の形成： Ｐ₂Ｓ₂リガンド１の錯体を、次の手順を用いて第３図に描いた方法により製造 した： 化合物１（１．７５ｍＭ）の水溶液（１０ｍｌ）を、２５℃でＲｅＯ₂（ｐｙ ）₄Ｃｌ（１．７５ｍＭ）の水溶液（５０ｍｌ）に、一定に撹拌しながら滴下し た。反応混合物を〜８０℃で３０分間加熱し、その結果反応の色は明るいオレン ジから明るい褐色に変化した。得られた反応混合物は、³¹Ｐ ＮＭＲにより８０ ％の純度であった。反応混合物を真空中で濃縮し、少量のＤＭＳＯ中に再び溶解 した。次に少量のアセトニトリルを用いて、³¹Ｐ ＮＭＲにより観察して、生成 物を排他的に沈澱させた。褐色の沈澱物をエーテル（５ｍｌで３回）洗浄し、脱 イオン水で再び溶解し、室温でゆっくり蒸発させて褐色の粘稠な油として化合物 ３を得た。低解像力ＦＡＡ／ＭＳ分析。 Ｃ₁₁Ｈ₂₆Ｏ₆Ｐ₂Ｓ₂Ｒｅについての計算値：５６７．０２０４；実測値：［Ｍ＋ Ｈ⁺］、ｍ／ｚ＝５６７．０２０４。分析、 Ｃ₁₁Ｈ₂₆Ｏ₆Ｐ₂Ｓ₂ＲｅＣｌについての計算値：Ｃ、２１．９３；Ｈ、４．３５ ；実測値：Ｃ、２２．６５；Ｈ、４．２４。 例５ ＴＨＰを１ｍｇ／ｍｌ含有するｐＨ７〜７．４の０．９％ＮａＣｌ水溶液を調 製した。その溶液１ｍｌに、マリンクロット・メディカル・インターナショナル (Mallinckrodt Medical International)により供給されている⁹⁹Ｍｏ／^99mＴｃ 発生器からの^99mＴｃＯ₄ ^-を添加した。⁹⁹Ｍｏ／^99mＴｃ放射性核種発生器からの 直接溶離物０．１ｍｌ中に入っている１ｍＣｉ^99mＴｃＯ₄ ^-を用いて、マリンク ロットメディカル社(Mallinckrodt Medical，lnc.)により供給 されている人用の^99mＴｃ−放射性医薬品を配合した。室温で１時間インキュベ ートした後、^99mＴｃ−ＴＨＰ錯体〔即ち、^99mＴｃＯ₂(ＴＨＰ)₄ ⁺〕が９５％よ り大きな収率で形成された。次にこの溶液を、５００ｍｇの吸収剤の入ったアミ ノプロピル−ウォターズ．セプ．パック．バック（Ｗａｔｅｒｓ−Ｓｅｐ−Ｐａ ｋ−Ｖａｃ）を通過させ、次にそのカラムを８ｍｌの０．９％ＮａＣｌ水溶液で ５回洗浄した。このセプ．パックを通して溶離した非錯化ＴＨＰの分率は、³¹Ｐ ＮＭＲによって決定した。溶離物中に見出された^99mＴｃ−ＴＨＰの分率は、 放射線分析により決定した。ブランクとして、６０〜２００ミスト(mist)シリカ ゲル５００ｍｇを入れたカラムに、１ｍｇ／ｍｌのＴＨＰ溶液を通過させた。こ の研究の結果を表１に示す。錯化されていないＴＨＰの９９％より多くのものが 、恐らくＮＨ₂−基に共有結合したために、カラムに付着したことが示されてい る。³¹Ｐ ＮＭＲの感度が比較的低いので、溶離物中の非配位ＴＨＰリガンドの 量又は濃度はその検出限界になっていた。従って、１％よりかなり低いＴＨＰが 溶離された可能性はあった。ブランクでは、同じ溶液をシリカゲルカラムに通過 させた場合、９９％より多くのＴＨＰが溶離物中に見出された。 ^99mＴｃ（又は^186/188Ｒｅ）放射線医薬品の配合で、遥かに低い濃度のリガン ドを用いることを認識することは重要である。それらの場合、固体マトリックス に結合する（ＮＨ₂基による）非錯化ＴＨＰ（又はＨＭＰ）官能基の分率は最大 になるであろう。このことは、これらの溶媒中のＨＭＰ基の数に対するカラム上 の−ＮＨ₂基の数の比は、ＴＨＰを用いて行なったこれらのモデル研究の場合よ りも放射線医薬品配合物中では遥かに高くなるからである。 例６ 実験： 標準シュレンク(Schlenk)法により純粋窒素中で全ての反応を行なった。溶媒 を標準法により精製し、使用する前に窒素中で蒸留した。前に記述したように( ＨＯＨ₂Ｃ)₂Ｐ(ＣＨ₂)₂Ｓ(ＣＨ₂)₃Ｓ(ＣＨ₂)₂Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂（１）を合成し、 更に精製することなく用いた。文献の手順に従って、［ＲｅＯ₂(Ｃ₅Ｈ₅Ｎ)₄］Ｃ ｌを調製し、更に精製することなく用いた〔ベアード(Beard)その他、１９６５ 〕。１０モル過剰のＢｒ(ＣＨ₂)₃Ｂｒ中で Ｐ(ＯＥｔ)₃を１時間還流することによりＢｒ(ＣＨ₂)₃ＰＯ(ＯＣ₂Ｈ₅)₂を合成し 、次に真空蒸留により精製した。溶媒としてＤ₂Ｏ及びＣＤＣｌ₃を用いて、核磁 気共鳴スペクトルをブルッカー(Bruker)ＡＲＸ−３００分光光度計に記録した。¹ Ｈ及び¹³ｃの化学的移行を、内部標準ＳｉＭｅ₄からのダウンフィールド(downf ield)、ｐｐｍで報告する。外部標準として８５％のＨ₃ＰＯ₄を用いて³¹Ｐ Ｎ ＭＲ（１２１．５ＭＨｚ）スペクトルを記録し、明確な化学的移行はその標準の ダウンフィールドに位置していた。ニューヨーク、ホワイテスボロ(Whitesboro) のオネイダ・リサーチ・サービシズ社(Oneida Research Services，Inc.)により 元素分析を行なった。生物医学及び生物有機質量分光分析のため、ミズーリ州セ ントルイスのワシントン・ユニバーシティー・リソース(Washington University Resource)により質量スペクトル分析を行なった。 (ＥｔＯ)₂（Ｏ）ＰＣＨ₂ＣＨ₂Ｓ(ＣＨ₂)₄ＳＣＨ₂ＣＨ₂Ｐ（Ｏ）(ＯＥｔ)₂（２ ）の合成： 鉱油（１８８ｍＭ）中に６０％のＮａＨを入れた試料を、二口丸底フラスコ中 に入れ、無水ヘキサン（２０ｍｌ）を導入した。この溶液を１０分間撹拌し、然 る後、ヘキサン・鉱油層を注射器により除去した。フラスコに無水テトラヒドロ フラン（１００ｍｌ）を入れ、次にＨＳ(ＣＨ₂)₄ＳＨ（８２ｍＭ）を一定に撹拌 しながら滴下した。得られた溶液を０℃に冷却し、ＢｒＣＨ₂ＣＨ₂Ｐ(Ｏ)(ＯＣ₂ Ｈ₅)₂（１６４ｍＭ）を一定に撹拌しながら３０分間に亙って滴下した。過剰の ＮａＨを、５０ｍｌの脱イオン水を添加することによりクエンチした。溶液を酢 酸エチル（５０ｍｌで３回）抽出し、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄した。有機 層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過により、溶媒を真空中で除去し、微量 のビニルホスホン酸ジエチルと共に９０％の収率で化合物２を得た。その化合物 を、９０：１０の酢酸エチル対ヘキサン溶媒混合物を用いてシリカゲルカラム（ ２０ｃｍ、６０メッシュ）で分離した。溶媒を真空中で除去することにより、９ ２％（３６ｇ）の全収率で、粘稠な黄緑色油として化合物２を得た。低解像力Ｆ ＡＢ／ＭＳ分析。Ｃ₁₆Ｈ₃₆Ｏ₆Ｐ₂Ｓ₂についての計算値：４５０．１４２８；実 測値：［Ｍ＋Ｈ⁺］、ｍ／ｚ＝４５１．２。 Ｈ₂ＰＣＨ₂ＣＨ₂Ｓ(ＣＨ₂)₄ＳＣＨ₂ＣＨ₂ＰＨ₂（３）の合成： 化合物２（３１ｍＭ）を７５ｍｌの無水ジエチルエーテル中に入れ、０℃に冷 却した。１．０Ｍの水素化アルミニウムリチウムのエーテル溶液（７８ｍＭ、７ ８ｍｌ）をこの溶液に一定に撹拌しながらゆっくり滴下した。６Ｎの塩酸水溶液 （５０ｍｌ）を溶液に滴下し、残りのＬｉＡｌＨ₄をクエンチした。エーテル層 をカニューレ(cannula)により分離し、溶媒を真空除去して無色の粘稠な油とし て９２％（７．８ｇ）の収率で化合物３を得た。 (ＨＯＨ₂Ｃ)₂ＰＣＨ₂ＣＨ₂Ｓ(ＣＨ₂)₄ＳＣＨ₂ＣＨ₂Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂（４）の合 成： ホルムアルデヒド水溶液（１２４ｍＭ）を、酸素を含まないエタノール５０ｍ ｌ中に入れ、窒素ガスで２時間２5℃でパージした。化合物３（２９ｍＭ）をそ の溶液へ、２５℃で一定に撹拌しながら注射器により滴下した。³¹Ｐ ＮＭ Ｒ分光分析により監視して、反応は１時間で完了した。溶媒を真空除去し、無色 の粘稠な油として９３％（１０．５ｇ）の収率で化合物４を得た。低解像力ＦＡ Ｂ／ＭＳ分析。Ｃ₁₂Ｈ₂₈Ｏ₄Ｐ₂Ｓ₂についての計算値：３６２．１；実測値：［ Ｍ＋Ｈ⁺］、ｍ／ｚ＝３９５．１。³¹Ｐ ＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ）：δ−２５．５（ｓ） 。特徴を調べる目的で、ヒドロキシメチルホスフィン化合物４を、３ＮＨＣｌを 添加することにより対応する塩化ホスホニウム塩へ転化した。反応混合物を真空 中で濃縮し、ウォーターズ・セプ・パック３５ｃｃ（１０ｇ）Ｃ１８カートリッ ジに入れた。純粋なホスホニウム塩を透明で粘稠な油として分離した。 (ＥｔＯ)₂（Ｏ）ＰＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂Ｓ(ＣＨ₂)₃ＳＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂Ｐ(Ｏ)(ＯＥ ｔ)₂ （５）の合成： 鉱油中に６０％のＮａＨを入れた試料（１８４ｍＭ）を、二口丸底フラスコ中 に入れ、無水ヘキサン（２０ｍｌ）を導入した。この溶液を１０分間撹拌し、然 る後、ヘキサン・鉱油層を注射器により除去した。フラスコに無水テトラヒドロ フラン（１００ｍｌ）を入れ、次にＨＳ（ＣＨ₂）₃ＳＨ（９２ｍＭ）を一定に撹 拌しながら滴下した。得られた溶液を０℃に冷却し、ＢｒＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂Ｐ(Ｏ )(ＯＣ₂Ｈ₅)₂（１８４ｍＭ）を、一定に撹拌しながら３０分間に亙って滴下した 。過剰のＮａＨを、５０ｍｌの脱イオン水を添加することによりクエンチした。 溶液を酢酸エチル（５０ｍｌで３回）抽出し、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し た。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。最終生成物を９０：１０酢酸エチ ル対ヘキサン溶媒混合物を用いてシリカゲルカラム（２０ｃｍ、６０メッシュ） で精製した。溶媒を真空中で除去することにより、８８％（３８ｇ）の全 収率で、粘稠な黄緑色油として化合物５を得た。低解像力ＦＡＢ/ＭS分析。 Ｃ₁₇Ｈ₃₈Ｏ₆Ｐ₂Ｓ₂についての計算値：４６４．２；実測値：［Ｍ＋Ｍ⁺］、ｍ／ ｚ＝４６５．２。 ³¹Ｐ ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)：δ３１．８（ｓ）。 Ｈ₂ＰＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂Ｓ(ＣＨ₂)₃ＳＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂ＰＨ₂（６）の合成： 化合物５（３２ｍＭ）を７５ｍｌの無水ジエチルエーテル中に入れ、０℃に冷 却した。１．０Ｍの水素化アルミニウムリチウムのエーテル溶液（８０ｍＭ、８ ０ｍｌ）をこの溶液に一定に撹拌しながらゆっくり滴下した。６Ｎの塩酸水溶液 （５０ｍｌ）をその溶液に滴下し、残りのＬｉＡｌＨ₄をクエンチした。エーテ ル層をカニューレにより分離し、溶媒を真空除去して無色の粘稠な油として９４ ％（７．８ｇ）の収率で化合物６を得た。 (ＨＯＨ₂Ｃ)₂ＰＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂Ｓ(ＣＨ₂)₃ＳＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂ （７）の合成： ホルムアルデヒド水溶液（１３１ｍＭ）を、酸素を含まないエタノール５０ｍ ｌ中に入れ、窒素ガスで２時間２５℃でパージした。化合物６（３０ｍＭ）をそ の溶液へ、２５℃で一定に撹拌しながら注射器により滴下した。³¹Ｐ ＮＭＲ分 光分析により監視して、反応は１時間で完了した。溶媒を真空除去し、無色の粘 稠な油として９５％（１０．９ｇ）の収率で化合物７を得た。低解像力ＦＡＢ／ ＭＳ分析。Ｃ₁₃Ｈ₃₀Ｏ₄Ｐ₂Ｓ₂についての計算値：３７６．１；実測値：［Ｍ＋ Ｈ⁺］、ｍ／ｚ＝４０９．１。³¹Ｐ ＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ）：δ−２５．６（ｓ）。特 徴を調べる目的で、ヒドロキシメチルホスフィン化合物７を、３ＮＨＣｌを添加 することにより対応する塩化ホスホニウム塩へ転化した。反応混合物を真空中で 濃縮し、ウォーターズ・セプ・パック３５ｃｃ（１０ｇ）Ｃ１８カートリッジに 入れた。純粋なホスホニウム塩を透明で粘稠な油として分離した。 ［ＲｅＯ₂(ＨＯＨ₂Ｃ)₂Ｐ(ＣＨ₂)₂Ｓ(ＣＨ₂)₃Ｓ(ＣＨ₂)₂Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂］₂Ｃ ｌ₂＝（８）の合成： (ＨＯＨ₂Ｃ)₂Ｐ(ＣＨ₂)₂Ｓ(ＣＨ₂)₃Ｓ(ＣＨ₂)₂Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂（１．８ｍＭ） の水溶液（１０ｍｌ）を、ＲｅＯ₂(Ｃ₅Ｈ₅Ｎ)₄Ｃｌ（１．７ｍＭ）の水溶液（５ ０ｍｌ）へ一定に撹拌しながら２５℃で滴下した。反応混合物を〜８ ０℃に３０分間加熱し、その結果反応の色は明るいオレンジから明るい褐色に変 化した。反応混合物を真空中で濃縮し、ウォーターズ・セプ・パック・バック３ ５ｃｃ（１０ｇ）Ｃ１８カートリッジに入れた。純粋な反応生成物を緑色の微結 晶質固体として分離した。生成物をメタノール／ジエチルエーテル（４：１）中 で再構成し、室温でゆっくり蒸発させ、緑色の結晶質固体として８４％（１．７ ２ｇ）の収率で化合物８を得た。分析。Ｃ₂₂Ｈ₅₂Ｏ₁₂Ｐ₄Ｓ₄Ｒｅ₂Ｃｌ₂について の計算値：Ｃ、２１．９３；Ｈ、４．３５。実測値：Ｃ、２２．６５；Ｈ、４． ２４。 ［ＲｅＯ₂(ＨＯＨ₂Ｃ)₂Ｐ(ＣＨ₂)₂Ｓ(ＣＨ₂)₄Ｓ(ＣＨ₂)₂Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂］₂( ＲｅＯ₄ ^-)₂（９）の合成： (ＨＯＨ₂Ｃ)₂Ｐ(ＣＨ₂)₂Ｓ(ＣＨ₂)₄Ｓ(ＣＨ₂)₂Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂（１．３２ｍＭ ）の固体試料を、ＲｅＯ₂(Ｃ₅Ｈ₅Ｎ)₄Ｃｌ（１．２ｍＭ）の水溶液（５０ｍｌ） へ一定に撹拌しながら２５℃で添加した。反応混合物を〜８０℃に３０分間加熱 し、その結果反応の色は明るいオレンジから明るい褐色に変化した。反応混合物 を真空中で濃縮し、ウォーターズ・セプ・パック・バック３５ｃｃ（１０ｇ）Ｃ １８カートリッジに入れた。純粋な反応生成物を緑色の微結晶質固体として分離 した。生成物を水／メタノール（４：１）中で再構成し、室温でゆっくり蒸発さ せ、緑色の微結晶質固体として４０％（０．８ｇ）の収率で化合物９を得た。分 析。Ｃ₂₄Ｈ₅₆Ｏ₂₀Ｐ₄Ｓ₄Ｒｅ₄についての計算値：Ｃ、１７．３５；Ｈ、３．４ ０。実測値：Ｃ、１７．３４；Ｈ、３．３１。 ［ＲｅＯ₂(ＨＯＨ₂Ｃ)₂Ｐ(ＣＨ₂)₃Ｓ(ＣＨ₂)₃Ｓ(ＣＨ₂)₃Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂］Ｃ ｌ（１０）の合成： (ＨＯＨ₂Ｃ)₂Ｐ(ＣＨ₂)₂Ｓ(ＣＨ₂)₄Ｓ(ＣＨ₂)₂Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂(１．０６ｍＭ ）の水溶液（１０ｍｌ）を、ＲｅＯ₂(Ｃ₅Ｈ₅Ｎ)₄Ｃｌ（０．９２６ｍＭ）の水溶 液（５０ｍｌ）へ一定に撹拌しながら２５℃で滴下した。反応混合物を〜８０℃ に３０分間加熱し、その結果反応の色は明るいオレンジから明るい褐色に変化し た。反応混合物を真空中で濃縮し、ウォーターズ・セプ・パック・バック３５ｃ ｃ（１０ｇ）Ｃ１８カートリッジに入れた。純粋な反応生成物を緑色の微結晶質 固体として分離した。生成物をメタノール／ジエチルエーテル（４：１）中で再 構成し、室温でゆっくり蒸発させ、緑色の微結晶質固体として８０％（０．４７ ｇ）の収率で化合物１０を得た。分析。 Ｃ₁₃Ｈ₃₀Ｏ₆Ｐ₂Ｓ₂ＲｅＣｌについての計算値：Ｃ、２４．７６；Ｈ、４．８０ 。実測値：Ｃ、２４．７７；Ｈ、４．７３。 錯体８、９、及び１０のＨＰＬＣ分析： 錯体８、９、及び１０の全てを脱イオン水に溶解し、０．２２μｍカメオ(Cam eo)注射器フィルターに通して予め濾過した。分析用ＰＲＰ−１カラム〔ハ ミルトン(Hamilton)ポリ（スチレン−ジビニルベンゼン）、１００Ａ〕を用いて 高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分析を行なった。移動相は、０．１％ のトリフルオロ酢酸を含む水に相当する溶媒Ａ及び０．１％のトリフルオロ酢酸 を含むアセトニトリルに相当する溶媒Ｂを用いた勾配系からなっていた。移動相 は２分間１００％Ａで出発し、次に２〜７分間で０％Ｂから１００％Ｂへ直線的 勾配を持っていた。勾配は更に２分間１００％Ｂに維持され、然る後、カラム平 衡のため２０分間で０％Ｂへ変化させた。移動相の流量は１．５ｍｌ／分であっ た。積分機のチャート速度は０．５ｃｍ／分であった。予め３８０ｎｍに設定し たインライン・ウォーターズ４８６同調可能な吸光度検出機を用いて検出を行な った。 Ｘ線データー収集及び処理： 錯体８、９、及び１０について収集した結晶データー及びそれらデーターの詳 細を表６〜１２に列挙する。Ｘ線回折に適した錯体８、９、及び１０の透明な黄 緑色結晶は、実験の項目の所に記載したような適当な溶媒系からゆっくり蒸発さ せることにより得た。強度データーは、オメガ走査方式を用いてシーメンス・ス マート(Siemens SMART)ＣＤＤ装置で収集した。吸光度についてはブレッシング( Blessing)の方法に基づくプログラムＳＡＤＡＢＳを用いてデータ一を補正した （ブレッシング、１９９５）。結晶の分解は１％より少なく。補正は不必要に見 えた。構造は、ＳＨＥＬＸＳ−８６を用いた直接法により解決し、ＳＨＥＬＸＬ −９３を用いてＦ²について完全マトリックス最小二乗法により修正(refine)し た〔シェルドリック(Sheldrick)、１９９０；シェルドリック、１９９３〕。 化合物８については、格子水酸素原子を除き、全ての非水素原子を異方性を考 慮して修正した。エチレン系水素原子は、計算した位置に置き、それらの熱的パ ラメーターはそれらの親原子のものの１．２倍の値に定めた。ヒドロキシル水素 原子は差フーリエ合成図中に配置し、１．０±０〜０．０２Åに束縛されたそれ らのＯ−Ｈ距離及び独立の等方性熱的パラメーターを用いて修正した。水の水素 原子は同様に配置し、１．０±０．０２Åに束縛したＯ−Ｈ距離及び１．６２± ０．０２Åに束縛したＨ−Ｈ距離を用いて修正した（水素の熱的パラメーターは 、それらの親酸素原子のそれの１．２倍の値に定めた）。 化合物９については、過レニウム酸塩酸素原子を除き、全て非水素原子を異方 性を考慮して修正した。エチレン系及びヒドロキシル水素原子は、それらの熱的 パラメーターをそれらの親原子のものの１．２倍の値に定め、計算した位置に配 置した。ヒドロキシル水素原子は、ヒドロキシル部分を堅固な基として形を定め 、計算した水素位置で電子密度を最大にすることにより配置した。過レニウム酸 陰イオンの両方の酸素原子は不定とし、Ｒｅ−Ｏ距離は１．７１（２）Åに限定 した〔オルペン(Orpen)その他、１９８９〕。更に、過レニウム酸塩のＯ−Ｏ距 離は、全て２．７９（２）Åに限定し、陰イオンに四面体の幾何学的形態を与え 、酸素原子には共通の等方熱的パラメーターを指定した。 化合物１０については、全ての非水素原子を異方的に修正し、Ｃ−Ｈ水素原子 を計算した位置に配置した。リガンドに属するヒドロキシル水素原子は、異なっ た差電子密度合成図中に配置し、それらのＯ−Ｈ距離を１．０±０．０１Åに限 定して修正した。計算した位置に配置した水素原子については、全ての等方熱的 パラメーターをそれらの親原子のものの１．２倍の値に定めた。メタノール系ヒ ドロキシル水素原子は位置を定めず、従って、構造修正から除外した。データー 収集、構造解析、及び修正に関する他の関連する詳細な点は、表６〜１２に与え てある。 錯体８、９、及び１０の生体外安定性の研究： 錯体８、９及び１０の適当な大きさの試料を１０ｍｌの脱イオン水に溶解して 、〜０．０１Ｍの溶液濃度を与えた。これらの溶液に、同じく水の中に入れた１ ．０Ｍのシステイン溶液１５ｍｌを添加した。それら溶液を室温で一晩撹拌した 。可能なリガンド移行反応の進行を、２４時間の研究期間に亙り、種々の時点で³¹ Ｐ ＮＭＲ分光分析により監視した。 結果及び考察： チオエーテル官能性ビスホスフィン１、４、及び７の合成を、第１０図の方式 １に示したように、二段階法で達成した。化合物１は前に記述したように合成し 、更に精製することなく用いた。チオエーテル官能性ビスホスホネート、(Ｅｔ Ｏ)₂（Ｏ）ＰＣＨ₂ＣＨ₂Ｓ(ＣＨ₂)₄ＳＣＨ₂ＣＨ₂Ｐ(Ｏ)(ＯＥｔ)₂（２）、及び( ＥｔＯ)₂（Ｏ）ＰＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂Ｓ(ＣＨ₂)₃ＳＣＨ₂ＣＨ₂ ＣＨ₂Ｐ(Ｏ)(ＯＥｔ)₂（５）は、ジチオール、ＨＳ(ＣＨ₂)₄ＳＨ及びＨＳ(ＣＨ₂ )₃ＳＨと、適当なホスホネート前駆物質、ＢｒＣＨ₂ＣＨ₂Ｐ（Ｏ）(ＯＥｔ)₂及 びＢｒＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂Ｐ(Ｏ)(ＯＥｔ)₂とを、新しく蒸留したＴＨＦ中でＮａＨ の存在下で反応させることにより製造した。水素化ホスフィン、Ｈ₂ＰＣＨ₂ＣＨ₂ Ｓ(ＣＨ₂)₄ＳＣＨ₂ＣＨ₂ＰＨ₂（３）及びＨ₂ＰＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂Ｓ(ＣＨ₂)₃ＳＣ Ｈ₂ＣＨ₂ＣＨ₂ＰＨ₂（６）は、ビスホスホネート２及び５を、水素化アルミニウ ムリチウムを用いてジエチルエーテル中で還元することにより製造した。ヒドロ キシメチルホスフィンリガンド４及び７は、酸素を含まないエタノール中でホル ムアルデヒド水溶液の存在下で２及び５のＰ−Ｈ結合をホルミル化することによ り製造した。 新しい化合物２〜７は、¹Ｈ、¹³Ｃ、及び³¹Ｐ ＮＭＲ分光分析により特徴付 けた。特徴付ける目的で、化合物４及び７は、式１に示したように、過剰のホル ムアルデヒド及び３ＮのＨＣｌの存在下で対応するホスホニウム塩に転化した。 式１： (ＨＯＨ₂Ｃ)₂Ｐ(ＣＨ₂)_XＳ(ＣＨ₂)_X1Ｓ(ＣＨ₂)_XＰ(ＣＨ₂ＯＨ)₂＋２ＣＨ₂Ｏ＋ ２ＨＣｌ→［(ＨＯＨ₂Ｃ)₃Ｐ(ＣＨ₂)_XＳ(ＣＨ₂)_X1Ｓ(ＣＨ₂)_XＰ(ＣＨ₂ＯＨ)₃］ Ｃｌ₂ Ｘ＝２、３；Ｘ１＝３、４ 水素化ビスホスフィン３及び６を除く化合物の全てについて分子イオンを同定 するためＦＡＢ質量分光分析を用いた。［Ｍ＋Ｈ⁺］、Ｌｍ／ｚ＝４５１．２及 び［Ｍ＋Ｈ⁺］、Ｌｍ／ｚ＝４６５．２での親イオンを、ビスホスホネート化合 物２及び５について夫々観察した。化合物２及び５は、³¹Ｐ ＮＭＲスペクトル で２９．４及び３１．８の所で一重項信号として共鳴した。チオエーテル官能性 水素化ビスホスフィン３及び６のそれらの対応するビスホスホネート２及び５か らの形成は、³¹Ｐ ＮＭＲ分光分析により監視した。水素化ホスフィン３及び６ は、夫々−１３６．８及び−１３７．５ｐｐｍで³¹Ｐ ＮＭＲスペクトル中の一 重項信号として共鳴した。新規なヒドロキシメチルホスフィンリガンド４及び７ は、夫々ホスフィン酸化物に対応して、［Ｍ＋Ｈ⁺］、ｍ／ｚ＝３９５．１及び ［Ｍ＋Ｈ⁺］、ｍ／ｚ＝４０９．１で親イオンを示していた。ジチオ−ビスホ スフィンリガンドの各々は、夫々−２５．５及び−２５．６ｐｐｍで³¹Ｐ ＮＭ Ｒスペクトル中で一重項信号として共鳴した。 リガンド１、４及び７の水溶解度は、水性媒体中のそれらの配位化学の発展を 必要とした。化合物１は、水中で［ＲｅＯ₂(Ｃ₅Ｈ₅Ｎ)₄］Ｃｌとの相互作用で、 還流する水中でジカチオン性錯体、［ＲｅＯ₂(ＨＯＨ₂Ｃ)₂Ｐ(ＣＨ₂)₂Ｓ(ＣＨ₂)₃ Ｓ(ＣＨ₂)₂Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂］₂Ｃｌ₂（８）を、第３図に示したように、８４％ の収率で生成した。全反応時間は〜３０分であった。錯体８の化学的構造は、元 素分析と同様¹Ｈ、¹³Ｃ、及び³¹Ｐ ＮＭＲ分光分析により証明した。化合物８ は、³¹Ｐ ＮＭＲスペクトル中で３８．６ｐｐｍで一重項信号として共鳴した。 化合物４は、水中で［ＲｅＯ₂(Ｃ₅Ｈ₅Ｎ)₄］Ｃｌとの相互作用で、還流する水 中でジカチオン性錯体、［ＲｅＯ₂(ＨＯＨ₂Ｃ)₂Ｐ(ＣＨ₂)₂Ｓ(ＣＨ₂)₄Ｓ(ＣＨ₂)₂ Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂］₂Ｃｌ₂（９）を、第３図に示したように、４０％の収率で生 成した。全反応時間は〜３０分であった。錯体９の化学的構造は、元素分析と同 様¹Ｈ、¹³Ｃ、及び³¹Ｐ ＮＭＲ分光分析により証明した。化合物９は、³¹Ｐ ＮＭＲスペクトル中で３７．５ｐｐｍで一重項信号として共鳴した。 化合物７は、水中で［ＲｅＯ₂(Ｃ₅Ｈ₅Ｎ)₄］Ｃｌとの相互作用で、還流する水 中でカチオン性錯体、［ＲｅＯ₂(ＨＯＨ₂Ｃ)₂Ｐ(ＣＨ₂)₃Ｓ(ＣＨ₂)₃Ｓ(ＣＨ₂)₃ Ｐ(ＣＨ₂ＯＨ)₂］Ｃｌ（１０）を、８０％の収率で生成した。全反応時間は〜３ ０分であった。錯体１０の化学的構造は、¹Ｈ、¹³Ｃ、及び³¹ＰＮＭＲ分光分析 及び元素分析により確認した。化合物１０は、³¹Ｐ ＮＭＲスペクトル中で−８ ．６ｐｐｍで共鳴した。 錯体８、９、及び１０の全てをＨＰＬＣにより分析し、それら錯体の純度を更 に決定した。錯体の各々は単一の物質として溶離し、第５ａ図〜第５ｃ図に示し たように〜９８％純度を示した。 化合物８、９及び１０のＸ線結晶学的研究： 化合物８のＸ線結晶学的分析により、本出願人は更にこの化合物の分子組成を 決定することができた。化合物８のメタノール／ジエルエーテル（４：１）溶液 をゆっくり蒸発させることにより、Ｘ線結晶学的分析に適した単結晶を生成した 。化合物８のＯＲＴＥＰ図を第７図に示す。選択した結合の距離及び結合角度を 表７に列挙する。単位胞は、夫々一つの結晶水を含む四つの独立の分子からなっ ている。異常な内部又は相互分子作用は存在しない。レニウム中心の周りの幾何 学的形態は八面体である。その構造は、二つの独立した配位リガンドとの二金属 錯体を表している。その構造によって表されているように、各リガンドの一つの 燐及び一つの硫黄はキレート状態で金属中心に配位しているのに対し、同じリガ ンドの他の燐及び硫黄は、夫々二つの五員ＰＣＨ₂ＣＨ₂ＳＲｅ（Ｖ）メタロ環を 経てシス配置で他の金属中心に配位している。ジオキソレニウム中心の二つの酸 素原子は、本質的に互いにトランスの位置にある。Ｒｅ１−Ｐ１及びＲｅ１−Ｐ ４の距離は、夫々、２．４１１０（９）及び２．４０５２（１０）Åである。Ｒ ｅ２−Ｐ２及びＲｅ２−Ｐ３の距離は、夫々、２．３９６２（１０）及び２．４ ００４（９）Åである。Ｒｅ１−Ｓ１及びＲｅ１−Ｓ４の距離は、夫々、２．５ ３３７（９）及び２．５５４３（１０）Åである。Ｒｅ２−Ｓ２及びＲｅ２−Ｓ ３の距離は、夫々、２．５３４３（９）及び２．５８０４（１０）Åである。平 均Ｐ−Ｒｅ−Ｐ結合角度は１００．０１°である。平均Ｓ−Ｒｅ−Ｓ結合角度は ９５．９３°である。四つのＰ−Ｒｅ−Ｓ結合角度の平均は８２．０９°である 。 化合物９の溶液から水／メタノール（４：１）をゆっくり蒸発させることによ り、Ｘ線結晶学的研究に適した高品質結晶を得た。化合物９のＯＲＴＥＰ図を第 ８図に示す。選択した結合の距離及び結合角度を表８に列挙する。単位胞は、二 つの独立した分子からなっている。異常な内部又は相互分子作用は存在しない。 レニウム中心の周りの幾何学的形態は八面体である。錯体８の場合と同様に、錯 体９の構造は、二つの独立した配位リガンドとの二金属錯体を表している。しか し、錯体９の対イオンは変形した過レニウム酸陰イオンである。金属中心の周り の幾何学的八面体構造は、四つのＰＣＨ₂ＣＨ₂ＳＲｅ（Ｖ）五員メタロ環を有す る二金属Ｒｅ（Ｖ）錯体を生ずるシス配置で二つの異なったリガンドからのＰ^{II I} 及びＳの１組みの配位によって更に定められている。ジオキソレニウム中心の 二つの酸素原子は、本質的に互いにトランスの位置にある。Ｒｅ１ａ−Ｐ１ ａ及びＲｅ１ａ−Ｐ２ａの距離は、夫々、２．４１４及び２．４１０Åである。 Ｒｅ１ｂ−Ｐ１ｂ及びＲｅ１ｂ−Ｐ２ｂの距離は、夫々、２．４０５及び２．４ ２１Åである。Ｒｅ１ａ−Ｓ１ａ及びＲｅ１ａ−Ｓ２ａの距離は、夫々、２．５ １５及び２．５３６Åである。Ｒｅ１ｂ−Ｓ１ｂ及びＲｅ１ｂ−Ｓ２ｂの距離は 、夫々、２．５３８及び２．５１０Åである。平均Ｐ−Ｒｅ−Ｐ結合角度は１０ １．１７°である。平均Ｓ−Ｒｅ−Ｓ結合角度は９５．１１°である。四つのＰ −Ｒｅ−Ｓ結合角度の平均は夫々８２．２０°である。 化合物１０の分子構造も、Ｘ線結晶学的分析により確認した。化合物１０のＯ ＲＴＥＰ図を第９図に示し、選択した結合の距離及び結合角度を表９に列挙する 。単位胞は、夫々一つの結晶化メタノールを含む四つの独立した分子からなって いる。異常な内部又は相互分子作用は存在しない。その構造によって表されてい るように、化合物１０は、一金属・一連結錯体である。レニウム中心の周りの幾 何学的形態は八面体で、金属は、二つの六員メタロ環を生ずるようにシス配置に なっているＰ^III及びＳを通って懸垂している。その構造によって表されている ように、ジオキソレニウム中心の二つの酸素原子は、本質的に互いにトランスの 位置にある。Ｒｅ−Ｐ１及びＲｅ−Ｐ２の距離は、夫々、２．４２４８（１０） 及び２．４１７６Åである。Ｒｅ−Ｓ１及びＲｅ−Ｓ２の距離は、夫々、２．５ ５０３（１０）及び２．５３２３（１０）Åである。Ｐ−Ｒｅ−Ｐ結合角度は１ ００．８４°（３）である。Ｓ−Ｒｅ−Ｓ結合角度は８８．１０°（４）である 。Ｐ１−Ｒｅ−Ｓ１及びＰ２−Ｒｅ−Ｓ２の結合角度は、夫々８４．０７°（３ ）及び８７．０２°（４）である。 ２３２、２４２（化合物８及び９）及び３３３（化合物１０）ジチオビホスフ ィン主構造体から誘導されたレニウム（Ｖ）錯体中の環の確認： 化合物８〜１０の三つの構造の全てにおいて、慣用的「椅子形」、「船形」及 び「エンベロープ形」と言う用語を用いて環状配座を記述することは、環を構成 する原子間の結合距離に大きな差があることにより幾らか誤解を招くであろう。 化合物８、９、及び１０の各環については、環のＳ、Ｒｅ、及びＰ原子を通る平 面がらの炭素原子のずれを計算した〔ナルデリ(Nardelli)、１９８３〕。この平 面は、Ｓ−Ｃ、Ｃ−Ｃ及びＰ−Ｃ結合の束縛が環の変形を与えながら、金属中心 の周りに硫黄及び燐原子が平面に近い配位をしているため、各環にとって堅固な 基準になると考えることができる。 錯体８では、四つの独特な五員環、Ｒｅ１−Ｐ１−Ｃ３−Ｃ４−Ｓ１、Ｒｅ１ −Ｐ４−Ｃ２０−Ｃ１９−Ｓ４、Ｒｅ２−Ｐ３−Ｃ１４−Ｃ１５−Ｓ３、及びＲ ｅ２−Ｐ２−Ｃ９−Ｃ８−Ｓ２は、夫々Ｃ３−Ｃ４、Ｃ１９−Ｃ２０、Ｃ８−Ｃ ９、及びＣ１４−Ｃ１５から誘導されたフラップを有するエンベロープ形として 記述することができる。四つの環の各々は、非対称的単位の同じ分子中に存在す る。 ２４２Ｓ₂Ｐ₂Ｒｅ錯体９の構造は、四つの独特な五員環を有し、二つは夫々半 分子で、非対称的単位を構成する。錯体９中の環の確認は、本質的に錯体８につ いて記述したものと同様であり、但しＲｅ１ｂ−Ｐ２ｂ−Ｃ８ｂ−Ｃ７ｂ−Ｓ２ ｂからなる環４は、捩れたエンベロープ（従って、フラップはない）として記述 するのが最もよいであろう。 錯体１０の三つの六員環、Ｒｅ１−Ｐ１−Ｃ１−Ｃ２−Ｃ３、Ｒｅ１−Ｓ１− Ｃ４−Ｃ５−Ｃ６−Ｓ２、及びＲｅ１−Ｓ２−Ｃ７−Ｃ８−Ｃ９−Ｐ２は、夫々 歪んだ椅子形、ひどく捩れた椅子形、及び歪んだ椅子形である。 化合物８、９、及び１０の錯体の生体外安定性の研究： レニウムＳ₂Ｐ₂錯体８、９、及び１０の生体外安定性を決定するため、各々の 溶液を２５℃でシステイン水溶液中でインキュベートした。典型的には化合物８ 〜１０（〜０．０１Ｍ）を１Ｍのシステイン溶液と相互作用させた。異なった時 間間隔でとった各試料部分の³¹Ｐ ＮＭＲ分光分析データーは、観察し得るリガ ンド交換又は錯体分解は示していなかった。第６図に示したように、２４時間の 期間に亙る錯体１０の³¹Ｐ ＮＭＲスペクトルは、この種のＲｅ（Ｖ）水溶性錯 体の異常な反応不活性を示していた。 結論： 第１１図及び第１２図の方式２及び３に記述した反応は、夫々、Ｒｅ（Ｖ）の 周りの八面体配位を有する二金属錯体（例えば、化合物８及び９）及びＲｅ（Ｖ ）の八面体配位一金属錯体（例えば、化合物１０）を夫々与える位置選択性及び 立体選択性であることを認識することは重要である。化合物８又は９の型の 二金属錯体は、３３３Ｓ₂Ｐ₂リガンド７と［ＲｅＯ₂(Ｃ₅Ｈ₅Ｎ)］₄Ｃｌとの反応 （第１２図の方式３）で、過剰のリガンドの存在下でさえもその痕跡が観察され なかったと言うことは、六員環メタロ環による一金属Ｒｅ（Ｖ）錯体１０を形成 する強い反応傾向を示している。しかし、それとは全く対照的に、２３２及び２ ４２Ｓ₂Ｐ₂リガンド１及び４と［ＲｅＯ₂(Ｃ₅Ｈ₅Ｎ)］₄Ｃｌとの反応は、第１１ 図の方式２に記載したように、化合物１０の型の一金属錯体の痕跡を持たない特 異的化学物質として二金属錯体８及び９を生成していた。これらの観察は、Ｒｅ （Ｖ）との全体的配位化学について、リガンド鎖の長さ、特にＰ^III及びＳ中心 を分離するアルカン鎖の大きさが重要であることを意味している。 Ｐ₂Ｓ₂リガンド７と^99mＴｃＯ₄ ^-及び^99mＴｃクエン酸塩との反応についての予 備的研究は、対応する^99mＴｃ錯体を〜９８％の収率で形成することを示してい た。スプラグ・ダウリー・ラットによるこの錯体の生体分布研究は、その大きな 生体内安定性を示し、体から効果的に除去されることを示していた。膀胱から排 泄された尿試料の液体クロマトグラフによる研究は、錯体の分解の欠如と同様、 生体内安定性を示していた。 活性部位（例えば、−ＣＯＯＨ又は−ＮＣＳ）で官能性化したＳ₂Ｐ₂リガンド は、それらのリガンド及びそれらの¹⁸⁸Ｒｅ／^99mＴｃ錯体は特定の生物分子に導 入することができるが、癌の診断及び治療に用いられる生物分子標識放射線医薬 品の設計及び開発に用いることができる。 例７ 材料及び方法 第１５図に示したような、(ＨＯＨ₂Ｃ)₂Ｐ(ＣＨ₂)₂Ｓ(ＣＨ₂)₃Ｓ(ＣＨ₂)₂Ｐ( ＣＨ₂ＯＨ)₂（１１）及び(ＨＯＨ₂Ｃ)₂Ｐ(ＣＨ₂)₃Ｓ(ＣＨ₂)₃Ｓ(ＣＨ₂)Ｐ(ＣＨ₂ ＯＨ)₂（１２）を、前に報告したように合成し、更に精製することなく使用した 。マリンクロット・メディカル社(Mallinckrodt Medical，Inc.)により与えられ た⁹⁹Ｍｏ／^99mＴｃ発生機からテクネチウム−９９ｍを溶離した。標識付けした 化合物の薄層クロマトグラフ（ＴＬＣ）分析を、フィシャー・サイエンティフィ ック(Fisher Scientific)から購入したセレクト・サイエンティフィック(Select o Scientific)可撓性ＴＬＣ板（シリカゲル６０ Å、２．５×７．５ｃｍ）で行なった。ＴＬＣ板上の放射能分布をバイオスキャ ン(BIOSCAN)システム２００影像走査機を用いて定量的に測定した。標識付けし た化合物のＨＰＬＣ分析を、ウォーターズ４８６同調可能吸光度検出機及び７４ ６積分機を具えたウォーターズ６００Ｅ装置で行なった。ＨＰＬＣクロマトグラ フ溶媒は、フィシャー・サイエンティフィックから購入し、更に精製することな く用いた。全ての他の化学薬品は、アルドリッヒ・ケミカル社(Aldrich Chemica l Co.)から購入し、更に生成することなく用いた。 実験 １１及び１２のＴｃ−９９ｍによる標識付け： Ａ．直接標識付け法：１１及び１２のＴｃ−９９ｍ錯体を、５００μｌのリガ ンド（０．１〜５ｍｇ／ｍｌ）を５００μｌの^99mＴｃＯ₄ ^-（１０〜２０ｍＣｉ ）へ等張食塩水中で添加することにより調製した（第１４図の方式２）。それら 溶液を旋回させ、７０℃で正常ｐＨ（〜７．０−７．４）で１０分間インキュベ ートした。それら溶液を約３０分間室温で放置し、然る後、更に分析を行なった 。 Ｂ．キレート交換標識付け法：０．１Ｍクエン酸ナトリウム１ｍｌを^99mＴｃ Ｏ₄ ^-１ｍｌに室温で添加することにより^99mＴｃ−クエン酸塩を調製した（第１ ４図の方式２）。この溶液に１０μｌの飽和酒石酸第一錫を添加した。得られた^99m Ｔｃ−クエン酸塩錯体を、約１５分間室温でインキュベートし、然る後更に 使用した。１１及び１２の標識交換したＴｃ−９９ｍ錯体を、５００μｌのリガ ンド（０．２〜０．０１ｍｇ／ｍｌ）を５００μｌの^99mＴｃ−クエン酸塩に添 加することにより調製した。得られた錯体を室温で約３０分間インキュベートし 、然る後、更に分析した。 Ｔｃ−９９ｍ標識ジチオ−ビスホスフィン１１及び１２のＨＰＬＣ分析： 全ての試料を、０．２２μｍカメオ注射器フィルターに通して予め濾過した。 分析用ＰＲＰ−１カラム（ハミルトン、５μｍ）を用いて高性能液体クロマトグ ラフィー（ＨＰＬＣ）分析を行なった。移動相は、０．１％のトリフルオロ酢酸 を含む水に相当する溶媒Ａ及び０．１％のトリフルオロ酢酸を含むアセトニトリ ルに相当する溶媒Ｂを用いた勾配系からなっていた。移動相は０〜２分間１００ ％Ａで出発し、次に２〜７分間で０％Ｂから１００％Ｂへ直線的勾配を持ってい た。勾配は更に２分問１００％Ｂに維持され、然る後、カラム平衡のため２０分 の時間で０％Ｂへ変化させた。移動相の流量は１．５ｍｌ／分であった。積分機 のチャート速度は０．５ｃｍ／分であった。検出は、^99mＴｃ−錯体のためのイ ンラインＮａＩ検出機を用いて放射線分析により行なった。 Ｔｃ−９９ｍ標識ジチオ−ビスホスフィン１１及び１２のｐＨ研究： 上記^99mＴｃ−Ｓ₂Ｐ₂錯体のｐＨを、０．１ＭのＮａＯＨ又は０．１ＭのＨＣ ｌを用いて種々のレベルに調節した。ｐＨ３、５、７、及び９で^99mＴｃ−Ｓ₂Ｐ₂ 錯体の安定性を、錯化後、種々の時間点（０．５、１、３、５、及び２４時間 ）で錯体の各々の収率を監視することにより決定した。５μｌの錯体をシリカゲ ル帯の先端近くに付着させ、０．９％塩水、酢酸エチル、及びアセトンで展開し た。バイオスキャン・システム２００影像走査機を用いて１分間各帯を計数する ことにより、帯上の放射能移動のＲ_f及び定量の決定を行なった。^99mＴｃＯ₄ ^-は 、１規定塩水及びアセトン中で約１のＲ_f値及び酢酸エチル中で０のＲ_f値を持っ ていた。^99mＴｃ−Ｓ₂Ｐ₂錯体は、三つの溶媒の各々の中で０のＲ_f値を持ってい た。続くＨＰＬＣによる各錯体の分析により、^99mＴｃＯ₂が存在しないことが証 明された。^99mＴｃ−Ｓ₂Ｐ₂錯体のクロロホルム・塩水分配係数を、^99mＴｃ−Ｓ₂ Ｐ₂を含有するｐＨ＝７の１ｍｌの１規定塩水と１ｍｌのクロロホルムとの混合 物を１分間旋回させることにより決定した。各相の５０μｌ（Ｎ＝５）をＮａＩ 筒計数管で計数した。 Ｔｃ−９９ｍ標識ジチオ−ビスホスフィン１１及び１２の生体内研究： １１及び１２のテクネチウム−９９ｍ錯体の生体内分布研究を、ナトリウムペ ントバービタル（５０ｍｇ／ｋｇ ＩＰ）で麻酔をかけたスプラグ・ダウリー（ １５０〜２５０ｇ）ラットで決定した。カニューレ挿入右頸静脈により５０μｌ の１規定１Ｎの塩水中に５〜１０μＣｉ（１８５〜３７０ｋＢｑ）の錯体をラッ トに注射した。注射後（ｐ．ｉ．）、３０分、１時間、及び２時間で、動物から 組織及び器官を切り取った。次にそれら組織及び器官を秤量し、ＮａＩ筒計数管 で計数し、各器官又は組織の注入投与量％（％ＩＤ）及び％ＩＤ／ｇを計算した 。全血液中の％ＩＤを、全体重の６．５％が全血液体積であると仮定して推 定した。 錯体の各々の生体内安定性を決定するために尿分析を行なった。この研究では 、１１及び１２のテクネチウム−９９ｍ錯体の約５０μＣｉ（１８５０ｋＢｑ） を、前のように麻酔をかけたスプラグ・ダウリー・ラットに注射した。動物は２ 時間ｐ．ｉ．で犠牲になった。各動物の膀胱を取り出し、尿の試料を分析のため 得た。尿試料のＨＰＬＣ分析を行い、投与した錯体をＨＰＬＣクロマトグラムと 比較した。 結果： １１及び１２のテクネチウム−９９ｍ錯体を、０．１〜５ｍｇ／ｍｌの１１及 び１２と過テクネチウム酸塩とを単に混合することにより、又は^99mＴｃ−クエ ン酸塩と１１及び１２とのキレート交換（第１４図の方式２）により高収率（９ ５％より大きい）で生成させた。全ての反応を中性ｐＨで行なった。^99mＴｃ− Ｐ₂Ｓ₂錯体は、２５℃で約１．５時間で形成された。直接標識付け法を用いて１ １の温度依存性の研究により、錯化に最適な温度は〜７０℃であることが証明さ れた。１１及び１２の全ての他の直接標識付け法を、この温度で行なった。全て の金属交換研究を、室温で行なった。得られた錯体をＴＬＣ及びＨＰＬＣにより 分析した。ｐＨ安定性プロファイル（表１３及び１４参照）は、錯体の各々がｐ Ｈの広い範囲に亙って１Ｎ塩水中で２４時間まで安定であることを示している。 第１６ａ図〜第１６ｂ図に関し、１１（ａ）及び１１（ｂ）のテクネチウム− ９９ｍ錯体についてのＨＰＬＣクロマトグラムが示されている。クロマトグラム の各々は、夫々６．３９及び６．３４分の保持時間で単一の物質を示している。 キレート交換反応のクロマトグラムは、同様な物質が０．０１ｍｇ／ｍｌ（〜２ ．５×１０^-5Ｍ）位に低いリガンド濃度で得られることを示している。各錯体に ついてのピーク溶離物の収集及び計数により、カラムに加えた放射能の９５％よ り多くのものが単一物質として出てきたことを示していた。同様な条件下で過テ クネチウム酸塩及び^99mＴｃ−クエン酸塩が、夫々１．３４及び０．９３分の保 持時間で溶離した。１１及び１２の^99mＴｃ−錯体のクロロホルム・塩水分配係 数は、夫々０．０００１±０．０００１より小さかった。このことは、形成され た錯体が極めて親水性の性質をもつことを示していた。 麻酔にかけたラットで行なった生体分布研究は、１１及び１２のテクネチウム −９９ｍ錯体の両方が、注射後２時間以内で肝胆管(hepatobiliary)及び腎臓・ 尿経路を経て血液流から効果的に排除されることを示していた（即ち、２時間ｐ ．ｉ．で全血液中に残留する^99mＴｃ−１１については１．２０±０．２３％Ｉ Ｄ及び^99mＴｃ−１２については０．９８±０．２６％ＩＤ）。しかし、二つの リガンド系の間の顕著な差が観察されている。１１の錯体については放射能の大 部分が尿の中に排出された（即ち、２時間ｐ．ｉ．で６８．７２±２．５４％Ｉ Ｄ）。^99mＴｃ−１１錯体の約２０％が、注射後２時間以内で肝胆管経路を経て 排除された（表１５参照）。 しかし、肝胆管系は、表１６に示したように、^99mＴｃ−１２錯体については 主要な排泄経路である。１２の錯体については放射能の大部分は胆汁を経て小腸 へ排泄された。^99mＴｃ−１２の約２５％が、注射後２時間で尿の中に見出され た。第１７ａ図〜第１７ｂ図に関して、尿中へ排泄された^99mＴｃ放射能を収集 し、ＨＰＬＣ分析にかけてその錯体の生体内安定性を評価した。収集した試料（ ａ）注入錯体（ｂ）との放射線クロマトグラムに顕著な差はなかった。 考察 本出願人は、最初及び後の方の遷移金属、Ｐｄ、ｐｔ、及びＲｅによるジチオ ビス（ヒドロキシメチル）ホスフィンの配位化学について総合し、報告してきた 。初期の研究では、ペプチド又はモノクローナル抗体のような生物分子の標識化 のための二官能性キレート剤として、ジチオビス（ヒドロキシメチル）ホスフィ ンの潜在的な利用性を示した。例えば、金属中心一つ当たり一つのリガンドを有 する遷移金属錯体を、リガンド１１及び１２の各々について得た。レニウム錯体 については、リガンド１１及び１２の興味ある配位化学を観察した。リガンド１ １は、還流条件下で［ＲｅＯ₂(Ｃ₅Ｈ₅Ｎ)₄］（Ｃｌ）と反応させると、二つのリ ガンド及び二つの金属中心を有する二核錯体を生じた。堅い五員環の形成は、プ ロパン架橋の「包囲(wrapping around)」が単核錯体を形成させない。それとは 全く対照的に、リガンド１２は、同じＲｅ（Ｖ）前駆物質と反応すると、ジオキ ソ単核物質を生成した。実際、配位化学でのその対照性は、１２の脂肪族主構造 体中の付加的炭素によるものであるに違いない。これらの炭素の存在は、金属中 心の周りにリガンドを「包囲」させるのみならず、三つの六員環の形成により安 定性を増大することができる。レニウム錯体は、全て２４時間を越える時間でリ ガンドを対象とした研究（例えば、１．０Ｍのシステイン）に対する³¹ Ｐ Ｎ ＭＲにより安定であることが示されている。全ての錯体は、³¹Ｐ、¹³Ｃ、¹Ｈ、 ＩＲ、及びＦＡＢ質量分光分析により特徴付けられている。これらの錯体の分子 構造は、更にＣ、Ｈ分析及びＸ線結晶学的分析により確認されている。 トレーサーレベルでリガンド１１及び１２を有するテクネチウムの化学性を特 徴付けるため、^99mＴｃ−１１及び^99mＴｃ−１２の化学的研究及び生体内研究の 両方を行なった。これらの研究は、単一の親水性物質が、過テクネチウム酸塩と リガンド１１及び１２とを０．１ｍｇ／ｍｌ（〜３×１０^-4Ｍ）のような低い濃 度で単に混合することにより得られている。リガンド１１及び１２は、^99mＴｃ( VII)Ｏ₄ ^-の存在下で形式上二つの電子還元剤として働くものと推定されている。 Ｔｃ(VII)からＴｃ（Ｖ）への還元で、過剰の存在するＰ^III中心は、それらの対 応するホスフィン酸化物(Ｐ^V)へ酸化される〔クラーク(Clark)及びポドビールス キー(Podbielski)、１９８７〕。^99mＴｃＯ₄ ^-の飽和酒石酸第一錫による還元で 、９５％を越える収率が、０．０１ｍｇ／ｍｌ（２．５×１０^-5Ｍ）のような低 いリガンド濃度で得られている。 特定の生物分子化合物を標識付けするために、直接標識付けの激しい条件は適 切ではない。例えば、強力な加熱又は第一錫イオンの存在は、問題の生物分子に 損傷を与えることがある〔フナトウィッチ(Hnatowich)、１９９０；ローデス(Rh odes)その他、１９９３〕。リガンド交換（即ち、^99mＴｃ−クエン酸塩とのキレ ート交換）は、そのような標識付け法のための別の方法である。従って、リガン ド１１及び１２の^99mＴｃ−クエン酸塩による標識付けが研究された。ＨＰＬＣ によって示されているように直接標識付けにより生成したものと同様な生成物が 、０．０１ｍｇ／ｍｌ（２．５×１０^-5Ｍ）のような低いリガンド濃度で得られ ている。^99mＴｃ−１１及び^99mＴｃ−１２のクロマトグラフ特性は、赤道面にジ オキソ芯及びＰ及びＳ供与体原子を含むＲｅ（Ｖ）のものと同様な化学構造が得 られることの証拠を与えている。 ^99mＴｃ−１１及び^99mＴｃ−１２の薬物速度論的研究は、それら錯体の各 各が血液の流れから効果的に除去されることを示している。^99mＴｃ−１１が除 去される主たる経路は、腎臓から尿へ行くもので（６８．７±２．５％）、約２ ０％ＩＤが肝胆管経路を通って除去される（表１５参照）。これとは対照的に、^99m Ｔｃ−１２の主な除去経路は、肝胆管系によるものであり（６２．８７±３ ．３％）、約２５．６４±１．１３％ＩＤが尿中へ除去されている。除去経路に 顕著な差があることは、リガンドの主構造体中に含まれる脂肪族ＣＨ₂の数が１ １と１２では異なっている事実によって説明することができる。ＳとＰの供与体 原子の間に付加的ＣＨ₂結合を含むリガンド１２は、^99mＴｃ−錯体に付加的疎水 性を加えることになり、これがその排除を主に肝胆管系によるものにしている。 血液及び他の非標的器官からの効果的な除去は、明らかにヒドロキシメチル部分 によって^99mＴｃ−錯体に付与された極性及び可溶性の程度を反映している。胃 の中のＴｃ−９９ｍ放射能の蓄積が最小であることにより証明されているように 、錯体の生体内の分解は、例えあったとしても極めて僅かである。生体内の安定 性は、更に膀胱から抽出された錯体の化学的変化が欠如していることによっても 示されている。そのような安定性は、恐らくリガンドの「巨大環式」性によるも のである。 結論 これらの結果は、硫黄及び（ヒドロキシメチル）ホスフィン供与体をリガンド 主構造体中へ組み込むことが、生体外及び生体内安定性が高い^99mＴｃ錯体を生 成するのに役立っていることを示している。これらの錯体が強力な加熱及び広い ｐＨ条件でさえも分解しないことは注目すべきことである。１１及び１２のホス フィン供与体原子にヒドロキシメチル基が存在することは、恐らく^99mＴｃ−１ １及び^99mＴｃ−１２が血液及び非標的組織から効果的に排除される原因になっ ている。更に、この実施例で示されているように、非特異的生体内摂取が欠如し ていることは、種々の放射性核種に対するキレート部分として、大きな脂肪族水 溶性ホスフィンリガンドを使用できるその有用性を示している。 本願全体に亙って、種々の刊行物を引用又は番号により言及してきた。番号に よって言及した刊行物についての完全な引用を下に列挙する。これらの刊行物の 全体的な開示は、本発明に関与する技術状態を一層充分に記述するために本願中 に参考のため入れてある。 本発明を例示的方法で記述してきたが、用いられてきた技術用語は限定する意 味をもつものではなく、言葉の表現性によるものであることを理解されたい。 本発明の多くの修正及び変更が上記教示を考慮して可能であることは明らかで ある。従って、特別に記載したもの以外に、請求の範囲内で本発明を実施するこ とができるものであることを理解すべきである。 表１ ＴＨＰ^a及び^99mＴｃ−ＴＨＰ錯体のアミン系カラム^b を通る溶離プロファイル ａ．ＴＨＰは、トリス（ヒドロキシメチル）ホスフィンの頭字語である。 ｂ．５００ｍｇの吸収剤の入ったウォーターズ・スペク・パック・バック・ア ミノプロピルカラム。 ｃ．５００ｍｇの吸収剤の入ったシリカゲル（６０〜２００メッシュ）カラム ｄ．ＴＨＰの収率は、³¹Ｐ ＮＭＲにより決定した。 ｅ．５回（８ｍｌ）洗浄後の溶離％。 表２ Ｔｃ−９９ｍＳ₂Ｐ₂の安定性の研究 ＴｃＯ₄ ^-（０．１ｍｌ）をリガンド（０．１ｍｌ）に添加し、水で希釈して上に 記載した最終リガンド濃度を与えた。 表３ Ｔｃ−Ｓ₂Ｐ₂錯体の生体分布データ 表４ ^99mＴｃ−Ｎ₂Ｐ₂の^99mＴｃ−クエン酸塩とのリガンド交換による錯化 ^99mＴｃ-Ｎ₂Ｐ₂錯体は、０．５ｍｌのリガンドと０．５ｍｌの^99mＴｃ−クエ ン酸塩（１０〜２０ｍＣｉ）を混合し、上で示したような最終的リガンド濃度を 与えることにより中性ｐＨ（ｐＨ＝６〜７）で形成した。 表５ ^99mＴｃ−Ｎ₂Ｐ錯体の生体分布データ 表６ 錯体８、９、及び１０についての結晶データ Ｒ₁因子定義：Ｒ₁＝Σ‖Ｆ_o｜−｜Ｆ_c‖／Σ｜Ｆ_o｜。 ＳＨＥＬＸＬ−９３ｗ Ｒ₂因子定義：ｗＲ₂＝［Σｗ(Ｆ_o ²−Ｆ_c ²)²／Σｗ(Ｆ_o ²)²］^1/2。 加重式：ｗ＝１／［σ２(Ｆ_o)²＋(ｎｐ)²＋０．００ｐ］、ｐ＝（ｍａｘ(Ｆ_o ²) ＋２Ｆ_c ²）／３。 表７ ８についての選択された結合距離（Å）及び角度（°）表８ ９についての選択された結合距離（Å）及び角度（°） 表９ １０についての選択された結合距離（Å）及び角度（゜） 表１０ ８についての原子配位（×１０⁴）及び等価アイソトープ変位パラメ ーター（Ų×１０³） 表１０ （続き） Ｕ_eqは、直交Ｕ_ijテンソルのトレースの1/3として定義されている。 表１１ ９についての原子配位（×１０⁴）及び等価アイソトープ変位パラメ ーター（Ų×１０³） 表１１ （続き）Ｕ_eqは、直交Ｕ_ijテンソルのトレースの1/3として定義されている。 表１２ １０についての原子配位（×１０⁴）及び等価アイソトープ変位パラ メーター（Ų×１０³）Ｕ_eqは、直交Ｕ_ijテンソルのトレースの1/3として定義されている。 表１３ １Ｎ−塩水中、種々のｐＨ値で錯化した後、種々の時間で決定した ^99mＴｃ−１１の放射線化学的純度（ＲＣＰ）。^{a a}１Ｎ塩水中でのｐＨ値３〜９での安定性研究は、室温でインキュベートする ことにより行った（Ｎ＝４）。 表１４ １Ｎ−塩水中、種々のｐＨ値で錯化した後、種々の時間で決定した^{99 m} Ｔｃ−１２の放射線化学的純度（ＲＣＰ）。^{a a}１Ｎ塩水中でのｐＨ値３〜９での安定性研究は、室温でインキュベートする ことにより行った（Ｎ＝４）。 表１５ 静脈内投与後、時間の関数としてラット中の ^99mＴｃ−１１の生体分布 ^a値は、注入投与量％／器官（％ＩＤ／器官）の平均±ＳＤ（ｎ＝５）を表す。 スプラグ・ダウリー・ラットの体重は、１８０〜２５０ｇの範囲であった。^b 全血液体積は、体重の６．５％であると推定した。 表１６ 静脈内投与後、時間の関数としてラット中の ^99mＴｃ−１２の生体分布 ^a値は、注入投与量％／器官（％ＩＤ／器官）の平均±ＳＤ（ｎ＝５）を表す。 スプラグ・ダウリー・ラットの体重は、１８０〜２５０ｇの範囲であった。^b 全血液体積は、体重の６．５％であると推定した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 35/00 Ｃ０７Ｆ 7/00 Ｚ // Ｃ０７Ｆ 7/00 Ｃ０７Ｍ 5:00 Ｃ０７Ｍ 5:00 Ａ６１Ｋ 49/02 Ａ 43/00 (72)発明者 バーニング，ダグラス，イー. アメリカ合衆国 ミズーリ，コロンビア, バルボア レーン 3416，アパートメント ナンバー56 (72)発明者 スミス，シー．ジェフリー アメリカ合衆国 ミズーリ，コロンビア, ビー．バルボア レーン 3405 (72)発明者 ボルカート，ウィン，エイ. アメリカ合衆国 ミズーリ，コロンビア, ガーデン ドライブ 2203 (72)発明者 ケトリング，アラン，アール. アメリカ合衆国 ミズーリ，コロンビア, ルート エヌ．12150

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 1. 金属と結合して、金属・リガンド錯体を形成する、少なくとも一つのヒド ロキシアルキルホスフィン供与体基及び少なくとも一つの硫黄又は窒素供与体を 有するリガンドを含む、診断又は治療用医薬として用いられる化合物。 2. リガンドが遷移金属と錯化している、請求項１に記載の化合物。 3. 金属が、γ及びβ放射性アイソトープを含む群から選択された金属アイソ トープであり、化合物が、酸素、血清及び他の体液を含む水溶液中で安定である 、請求項１に記載の化合物。 4. 金属アイソトープが、¹⁸⁶Ｒｅ、¹⁸⁸Ｒｅ、及び^99mＴｃを含む群から選択 された放射性核種であり、化合物が、酸素、血清及び他の体液を含む水溶液中で 安定である、請求項３に記載の化合物。 5. 化合物が、錯体に結合した生物分子を含む、請求項１に記載の化合物。 6. 生物分子がペプチドである、請求項５に記載の化合物。 7. ペプチドが、少なくとも一つの−ＮＨ₂、−ＮＨ、又は−ＳＨ基により錯 体に共有結合している、請求項６に記載の化合物。 8. 化合物が、式： 〔式中、Ｍ^Rは還元状態の遷移金属であり、Ｘは(ＣＨＲ)_n（ここで、ｎ＝０、１ 、２、又は３であり、Ｒは水素、カルボキシル、又は芳香族である）であり、 Ｙは、式Ｐ(Ａ−ＯＨ)_n（ここで、ｎ＝１、２、又は３であり、Ａは、−ＣＨ₂、 −Ｃ₂Ｈ₄、又はｉ−又はｎ−Ｃ₃Ｈ₆−である）のヒドロキシアルキルホスフィ ンである。〕 を有する、請求項１に記載の化合物。 9. リガンド対金属の比が、１：１に等しいか又はそれより大きい、請求項１ に記載の化合物。 10．式： 〔式中、Ｍ^Rは還元状の遷移金属であり、Ｘは(ＣＨＲ)_n(ここで、ｎ＝０、１、 ２、又は３であり、Ｒは水素、カルボキシル、又は芳香族である）であり、 Ｙは、式Ｐ(Ａ−ＯＨ)_n（ここで、ｎ＝１、２、又は３であり、Ａは、−ＣＨ₂、 −Ｃ₂Ｈ₄、又はｉ−又はｎ−Ｃ₃Ｈ₆−である）のヒドロキシアルキルホスフィン である。〕 の化合物を効果的な量投与し、前記化合物の存在を検出する工程からなる、放射 線造影法。 11．リガンドが遷移金属と錯化している、請求項１０に記載の方法。 12．金属が、γ及びβ放射性アイソトープを含む群から選択された金属アイソ トープであり、化合物が、酸素、血清及び他の体液を含む水溶液中で安定である 、請求項１０に記載の方法。 13．金属アイソトープが¹⁸⁶Ｒｅ、¹⁸⁸Ｒｅ、及び^99mＴｃを含む群から選択さ れた放射性核種であり、化合物が、酸素、血清及び他の体液を含む水溶液中で安 定である、請求項１２に記載の方法。 14．化合物が、錯体に結合した生物分子を含む、請求項１０に記載の方法。 15．生物分子がペプチドである、請求項１４に記載の方法。 16．ペプチドを、少なくとも一つの−ＮＨ₂基により錯体に共有結合させる工 程を含む、請求項１５に記載の方法。 17．リガンド対金属の比が、１：１に等しいか又はそれより大きい、請求項１ ０に記載の方法。 18．次の反応： 〔式中、Ｍは遷移金属であり、Ｍ^Rは還元状態の遷移金属であり、Ｘは(ＣＨＲ)_n （ここで、ｎ＝０、１、２、又は３であり、Ｒは水素、カルボキシル、 チル、である）、又はＳであり、Ｙは、式Ｐ(Ａ−ＯＨ)_n（ここで、ｎ＝１、２ 、又は３であり、Ａは、−ＣＨ₂、−Ｃ₂Ｈ₄、又はｉ−又はｎ−Ｃ₃Ｈ₆−である ）のヒドロキシアルキルホスフィンである。〕 を含む多座配位子リガンド・金属錯体の製造方法。 19．遷移金属が、γ及びβ放射性アイソトープを含む群から選択された金属ア イソトープであり、化合物が、酸素、血清及び他の体液を含む水溶液中で安定で ある、請求項１８に記載の方法。 20．金属アイソトープが¹⁸⁶Ｒｅ、¹⁸⁸Ｒｅ、及び^99mＴｃを含む群から選択さ れた放射性核種であり、化合物が、酸素、血清及び他の体液を含む水溶液中で安 定である、請求項１８に記載の方法。 21．錯体に生物分子を結合する工程を更に含む、請求項１８に記載の方法。 22．生物分子がペプチドである、請求項２１に記載の方法。 23．ペプチドを、少なくとも一つの−ＮＨ₂基により錯体に共有結合させる工 程を含む、請求項１８に記載の方法。 24．蛋白質又は抗体を錯体に結合する工程を更に含む、請求項１８に記載の方 法。 25．非配位ヒドロキシアルキルホスフィン基とアミンとを反応させ、前記非配 位基を除去し、それによって実質的に純粋な化合物を生成させる工程を更に含む 、請求項１８に記載の方法。 26．アミン基が固体支持体に固定されている。請求項２５に記載の方法。 27．固定支持体が分離カラムを含む、請求項２６に記載の方法。 28．反応工程が、遊離アミン基が固定したカラムに反応混合物を通すこととし て更に定義される、請求項２７に記載の方法。 29．構造： 〔式中、Ｘは(ＣＨＲ)_n（ここで、ｎ＝０、１、２、又は３であり、Ｒは水素、 Ｒ’は水素又はメチル、又はＳである）であり、Ｙは、式Ｐ(Ａ−ＯＨ)_n（ここ で、ｎ＝１、２、又は３であり、Ａは、−ＣＨ₂、−Ｃ₂Ｈ₄、又はｉ−又はｎ− Ｃ₃Ｈ₆−である）のヒドロキシアルキルホスフィンである。〕 を有する、治療及び診断用放射性医薬を構成するのに用いられる多座配位子リガ ンド。 30．Ａが−ＣＨ₂ある、請求項２９に記載の化合物。 31．非配位ヒドロキシアルキルホスフィン基を、金属原子を配位したヒドロキ シアルキルホスフィン基から分離する方法において、非配位ヒドロキシアルキル ホスフィン基をアミンと反応させ、前記非配位基を除去し、それにより実質的に 純粋な化合物を生成させる工程からなる、分離方法。 32．アミン基が固体支持体に固定されている、請求項３１に記載の方法。 33．固体支持体が分離カラムを含む、請求項３２に記載の方法。 34．反応工程が、遊離アミン基が結合されたカラムを通って反応混合物を通す こととして更に定義される、請求項３３に記載の方法。