JP2001510161A - 脂質をベースとする免疫制御組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 【解決手段】少なくとも約10%のホスファチジン酸を含むように濃縮された天然物由来の脂質調製物を含む免疫系を活性化するための薬学的組成物。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】

本発明は、免疫系を活性化するための組成物及び方法に関する。本発明の組成
物は、免疫系の活性が減少するストレス状況において免疫系を活性化するのに特
に有用である。ストレスによって引き起こされた免疫系の活性の減少の具体例は
、喫煙の場合である。

【０００２】 免疫系の活性が減少して、個体が日和見感染に罹りやすくなる臨床症状が数多
く存在する。傷害、リハビリテーション、薬物、アルコール、又は喫煙中毒から
生じるようなストレスは、免疫系の活性を分単位で減少せしめ得ることも知られ
ている。例えば、重い傷害に伴って起こる強力な感染症が報告されている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】

本発明の目的は、免疫系の活性を増大させて、免疫系をより活性なものにする
ための組成物であって、ストレスを受けた個体に対して特に有用な組成物を提供
することである。

【０００４】

【発明の実施の形態】

本発明に従って、驚くべきことに、ホスファチジン酸(phosphatidic acid；PA
)が濃縮された天然脂質調製物が免疫系を活性化できることが見出された。

【０００５】 免疫系の活性減少と関連していることが明らかとなったPAを濃縮した脂質調製
物の本活性を禁煙処置を受けている個体にテストした。

【０００６】 以下では、幾つかの用語が使用されるが、本発明の文脈におけるこれらの用語
及びそれらの意味は以下のとおりである。

【０００７】 PAを濃縮した脂質調製物(PA-E-LP)−組成物の総脂質含量のうち少なくとも10%
(w/w)のPA、好ましくは約20%〜75%の範囲にあるPAを含む脂質調製物（上記及び 下記の「%」という濃度の表記は、総組成物100重量単位に対するある成分の重量
単位数を表すものとする(w/w)）。

【０００８】 天然のPA-E-LP−天然の脂質調製物、例えば、植物由来、動物由来、又はそれ らの組み合わせのリン脂質調製物から得られたPA-E-EP。このような天然のリン 脂質調製物は、典型的には、大豆、卵黄、又は動物の血清から得られ得る。天然
のPA-E-EPは、典型的には酵素的なプロセスによって天然のリン脂質調製物から 調製される。天然のPA-E-EPでは、コレステロール、脂肪酸等のような他の脂肪 性物質（少量、例えば0.1-10%であるが）のリン脂質から主としてなるその他の 脂質も調製物中に含有し得る。

【０００９】 ストレスを受けた個体−不安、身体の傷害、薬物、アルコール、タバコの使用
の中止等のストレスを生じせしめる状況又は状態にさらされている個体。

【００１０】 本発明は、その一側面において、免疫系を活性化するための薬学的組成物であ
って、少なくとも約10%のPA、好ましくは少なくとも約20%のPA、最も望ましくは
約50%のPAを含むように濃縮された天然物由来の脂質調製物を含む薬学的組成物 を提供する。

【００１１】 典型的には、全脂質成分のうちPAの濃度は、75%を超えない。

【００１２】 本発明の組成物は、免疫系の活性の減少が関与するストレス関連症状において
、免疫系を活性化するのに特に有用である。このようなストレス症状の例は、様
々な傷害、薬物、アルコール、喫煙等の使用の中止である。本発明は、さらに、
免疫系の活性化を必要とする個体の免疫系を活性化する方法であって、有効量の
PA-E-LP、特に天然のPA-E-LPを個体に投与することを具備する方法を提供する。

【００１３】 さらに、本発明は、免疫系を活性化するための薬学的組成物を調製するための
前記PA-E-LPの使用、特に天然のPA-E-LPの使用を提供する。

【００１４】 「有効量」という用語は、所望の治療的効果を与えるのに十分な量の成分とし
て理解しなければならない。例えば、有効量の本発明の薬学的組成物を個体に投
与すれば、免疫系の活性化レベルが増加する。活性化のレベルは、例えば、γ-I
FNの血漿レベルによって測定することができ、このため、γ-IFNは有効量を決定
するための尺度になり得る。「免疫系の活性化」又は類似の用語は、病原体又は
病理的プロセスに反撃する免疫細胞活性のレベルの増加、それによって免疫細胞
のこのような活性を強化する様々なサイトカインの分泌又は産生レベルの増加等
を表すものと理解しなければならない。

【００１５】 本発明の薬学的組成物は、局所又は非経口投与用に調合してもよいが、典型的
には経口投与し得る。経口投与の場合、該組成物は、様々な着香料、食べられる
着色料等を含み得る。さらに、経口用の組成物は、例えば、腸溶ゼラチンカプセ
ル化中にカプセル化してもよい。該組成物は、組成物の所望の投与様式に基いて
選択し得る様々な薬学的に許容される担体、希釈剤、又は賦形剤を含んでもよい
。

【００１６】 非経口投与の場合、該組成物は、典型的には、静脈内(i.v.)投与されるであろ
う。このような非経口組成物は、例えば、大豆のマルチトリグリセリド(multi-t
riglyceride)、卵のリン脂質、本発明に従って調製されたPA、グリセロール、及
び蒸留水を含み得る。

【００１７】 局所組成物(topical composition)は、ゲル又は軟膏の形態であり得、このた め、このような物理的形態を該組成物に付与できるようにするために、それ自体
公知である様々な添加物を含み得る（例えば、ゲル化剤）。

【００１８】 天然のPA-E-LPは、好ましくは、酵素ホスホリパーゼDを含む合成物又は天然物
を用いた酵素的処置による天然のリン脂質調製物から得られる。天然のリン脂質
調製物は、植物由来、動物由来、又はそれらの組み合わせであり得る。本発明の
天然PA-E-LPを調製するのに有用な天然のリン脂質調製物の典型例は、大豆レシ チン、卵黄、及び動物血清から得たリン脂質である。ホスホリパーゼDの採取源 の例は、ピーナッツ、典型的には砕いたピーナッツ、又はそれから得たホスホリ
パーゼD画分である。ホスホリパーゼD又はホスホリパーゼD源は、少なくとも約1
0%、又は好ましくは約25%、最も好ましくは50%のリン脂質を加水分解してPA-E-L
Pを産するのに十分な量及び時間添加される。

【００１９】 ここで、随時添付の図面を参照しながら、以下の非限定的な例で本発明を説明
する。

【００２０】 例１：PA混合物の調製 (a)反応産物の調製 図１は、本発明によるPA混合物の調製法を図示している。図に示されているよ
うに、初発物質は、 １．ホスホリパーゼDの採取源として大粒の新鮮なピーナッツ150g ２．大豆リン脂質の採取源として粒状にした大豆レシチン150g ３．1000mLになるように水に加える 上記初発物質を肉混合機中で混合し、均一化した後、（それぞれ図に記載され
ている量の）乳酸カルシウム、ソルベート、ベンゾエート、アスコルビン酸、ク
エン酸、及び抗酸化剤を添加することによって、混合物のpHをpH5.3〜5.4に調整
した。続いて、36〜38℃で4時間連続的に混合しながら、該混合物を反応させた 後、図に記載されている量のクエン酸と等を添加することによって、もう一度pH
をpH3.9に調整した。続いて、該混合物を4℃で一晩保存する。

【００２１】 (b)脂質画分の分離 続いて、上記操作によって得られた反応混合物を図２に図示されている操作に
よってさらに分離される。図に示されているように、反応産物は、（図中分離I 、II、及びIIIと示されている）３つの主要な分離にかけられ、一般的に、各分 離においては、最終的に、分離された脂質相が採集され、フリーザー(-18℃)に 保存されるまで混合物の水相が底から除去される。

【００２２】 (c)容器を充填するための脂質組成物の調製 上記分離によって得られた脂質混合物は、幾つかのさらなる操作にかけられ、
該操作によって容器を充填するように調製される。図３に示されているように、
上記分離操作によって得られた脂質混合物は、まず融解された後、図３に記載さ
れているように熱処理、冷却処理、ホモゲナイゼーション処理、及び混合処理さ
れ、容器の充填に適した組成物を形成する。典型的には、容器のサイズは0.5Lで
あり、その後該容器は4℃で保存される。

【００２３】 (d)錠剤を含有するPAの調製 上記例2(a)〜2(c)に記載され、図１〜３に示されている方法によって得られた
PA混合物は、錠剤に加工してもよい。PA混合物を含む錠剤の調製方法は、図４に
示されている。図に示されているように、一般的に、上記プロセスによって得ら
れたリン脂質のペーストは、まず解凍された後加熱され、混合物のpHは、約9の 高pHに調製される。該混合物に酢酸亜鉛を添加すると、広い範囲にわたる沈澱物
が現れ、該沈澱物は洗浄及び乾燥後、錠剤中に調合される。

【００２４】 (e)PA形成のプロフィール PA形成のプロフィールは、図５に図示されている。図から明らかなように、約
24時間後に、は、80%を超える大豆リン脂質が加水分解され、PA濃縮された調製 物を産生する。 例２：PA-E-LP組成物が、禁煙処置を行っている個体のγインターフェロンレベ ルを増加させる効果 (a)研究デザイン 本研究にボランティアとして参加した、1日に20及び40本の煙草を喫煙してい る、35人の喫煙者を２つの群にランダムに割り振った。第一群は、16人の個体か
らなり、例１に従って調製され、50%のPAを含有するPA-E-LP組成物を１日12gの 用量（経口摂取）で与えた。第二群は、対照であり、プラセボ処置を施した。両
群の個体は、研究中喫煙を中断した。

【００２５】 禁煙前及び禁煙後に、両群の個体に対して、血漿中のγIFN濃度を測定した。 γIFNのレベルはQUANPIKINE^TM(R&D Systems Inc., USA)キットを用いることによ
って測定した。

【００２６】 (b)結果 処置前及び処置後の両群のγIFN濃度を下表１に示す。

【表１】

【００２７】 上記結果から、PA-E-LPを投与された群の血漿γ-IFN濃度は上昇するのに対し て、プラセボ群の血漿γ-IFNの濃度は処置前の濃度に比べて低下することが明ら
かであろう。

【００２８】 血漿γIFNレベルは、免疫系の活性化状態の指標であることを銘記しなければ ならない。

【図面の簡単な説明】

【図１】 本発明のPAが濃縮された混合物の調製を模式的に示した図。 図から明らかなように、初発物質（ピーナッツ、大豆レシチン、及び水）の比
率は、それぞれ1:1:7.5である。

【図２】 図１に示されている反応によって調製されたPA混合物の脂質相の分離を模式的
に示した図。

【図３】 容器を充填するのに適した形態で、図１及び図２の記載に従って調製された本
発明のPA混合物の調製を模式的に示した図。

【図４】 図１及び２の記載に従って調製されたPA混合物からの錠剤の調製を模式的に示
す図。

【図５】 大豆リン脂質の酵素的加水分解中のPA形成プロフィールを示す図（結果は、全
組成物の%として表されている）。

【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書

【提出日】平成１２年１月１４日（２０００．１．１４）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】特許請求の範囲

【補正方法】変更

【補正内容】

【特許請求の範囲】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ， ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，Ｌ Ｓ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ， ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，Ｅ Ｅ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＵ ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ， ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，Ｍ Ｄ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ， ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，Ｕ Ｚ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ Ｆターム(参考） 4C076 AA06 AA36 BB01 CC07 DD38 DD41 DD43 DD59 4C086 AA01 AA02 DA34 GA17 MA01 MA04 MA52 NA14 ZB09 ZC01 ZC39

Claims (17)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 免疫系を活性化するための薬学的組成物であって、少なくと
   も約10%のPAを含むように濃縮された天然物由来の脂質調製物を含む薬学的組成 物。
2. 【請求項２】 少なくとも約20%のPAを含む請求項１に記載の薬学的組成物 。
3. 【請求項３】 少なくとも約50%のPAを含む請求項１に記載の薬学的組成物 。
4. 【請求項４】 請求項１〜３の何れか1項に記載の薬学的組成物であって、 前記脂質調製物が天然の脂質源から得られたものである薬学的組成物。
5. 【請求項５】 ストレスを受けた個体の免疫系を活性化するための、請求項
   １〜４の何れか1項に記載の薬学的組成物。
6. 【請求項６】 薬物、アルコール、又は喫煙の使用を中止した結果ストレス
   を受けた個体の免疫系を活性化するための、請求項５に記載の薬学的組成物。
7. 【請求項７】 ストレスを受けた抗体の免疫系を活性化するための請求項１
   〜６の何れか1項に記載の薬学的組成物であって、前記活性化が被処置個体の血 漿中のγ-IFNレベルの増加をもたらす薬学的組成物。
8. 【請求項８】 経口投与用に調合された請求項１〜７の何れか1項に記載の 薬学的組成物。
9. 【請求項９】 PAが濃縮された有効量の脂質調製物を個体に投与することを
   具備する個体の免疫系を活性化する方法。
10. 【請求項１０】 前記脂質調製物が天然の脂質調製物から得られたものであ
    る請求項９に記載の方法。
11. 【請求項１１】 請求項８及び９に記載の方法であって、前記調製物が経口
    投与される方法。
12. 【請求項１２】 少なくとも約10%のPAを含むように濃縮された天然物由来 の脂質調製物の使用。
13. 【請求項１３】 前記脂質調製物が少なくとも約20%のPAを含む請求項１２ に記載の使用。
14. 【請求項１４】 前記脂質調製物が少なくとも約50%のPAを含む請求項１３ に記載の使用。
15. 【請求項１５】 前記脂質調製物が天然の脂質源から得られたものである請
    求項１２〜１４の何れか1項に記載の使用。
16. 【請求項１６】 ストレスを受けた個体の免疫系を活性化するための薬学的
    組成物を調製するための、請求項１２〜１５の何れか1項に記載の使用。
17. 【請求項１７】 前記個体が禁煙処置の結果ストレスを受けた個体である請
    求項１６の使用。