JP2001509272A - Multi-well plate - Google Patents

Multi-well plate

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JP2001509272A
JP2001509272A JP53445498A JP53445498A JP2001509272A JP 2001509272 A JP2001509272 A JP 2001509272A JP 53445498 A JP53445498 A JP 53445498A JP 53445498 A JP53445498 A JP 53445498A JP 2001509272 A JP2001509272 A JP 2001509272A
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well
plate
wells
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assay plate
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エル アフレック,レット
ジェイ バーバウム,ジョナサン
メイサス,グレゴリー
ダブリュ ニーマン,アンドリュー
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Original Assignee
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Abstract

(57)【要約】 本出願は、マルチウェルアッセイプレート(10)を開示する。このプレートは、周囲縁(12)、格子網(14)、および128×192列のマトリクスで配列された1536の試料ウェル(18)と、16の対照ウェル(20)と、4つの校正ウェル(22)とを有する上側表面(16)を備える。プレート(10)は、射出成形され、相互に垂直の列で配列されたウェルのマトリクスを有する。プレート(10)は、プレート当たり1000より多い試料ウェルのウェル密度を有する。 (57) Abstract This application discloses a multiwell assay plate (10). This plate contains 1536 sample wells (18), 16 control wells (20), and 4 calibration wells (18) arranged in a perimeter (12), grid network (14), and a matrix of 128 × 192 rows. 22) having an upper surface (16). The plate (10) is injection molded and has a matrix of wells arranged in mutually perpendicular columns. Plate (10) has a well density of more than 1000 sample wells per plate.

Description

【発明の詳細な説明】 マルチウェルプレート 背景 長年に亘り、マルチウェル(multi-well)実験用プレートが、一つのウェルか ら96のウェルまでに亘る配置形状で製造されてきた。これらマルチウェルプレー トのウェルは、典型的に、様々な試験の実施、組織培養物の増殖、薬物のスクリ ーニング、または分析診断機能を果たすための反応容器として用いられる。業界 基準のマルチウェルプレートは、8×12のマトリクス(相互に垂直な8および12 ウェルの列)にある96ウェルで設計されている。さらに、96ウェルプレートの高 さ、長さおよび幅が標準化されている。この標準化により、特に96ウェルのフォ ーマットのために開発された一連の補助器具が発達した。この器具は、8、12、 または96ウェルの倍数の正確な容積の液体を一度に装填し、取り出す装置を備え ている。さらに、この器具は、個々のウェルに光を透過させ、個々のウェル内の 色の変化または化学発光を読み取るのに利用できる。このような器具のあるもの は、自動化されており、データを記録し、記録されたデータを分析および操作す る器具を備えている。最近、試料サイズがマイクロリットルの水準まで減少し、 プレート当たりの試験数がより多いことが要望されてきたので、同様に、プレー ト上のウェルの数も、例えば、384のウェルから1536のウェル以上まで増大した 。 発明の概要 したがって、本発明の目的は、1マイクロリットルの範囲にある試料サイズを 取り扱えるマルチウェルプレートを提供することにある。本発明のさらなる目的 は:標準の96ウェルプレートのウェル間隔に対して分数倍のウェル間隔で1536ウ ェルを有するマルチウェルプレートを提供する;追加の16の対照ウェルおよび4 つの校正ウェルを備えたプレートを備える;蒸発または長期の貯蔵を制御するた めに、感熱性または感圧性のフイルムで密封できるプレートを提供する;不透明 な側壁および透明な底部を有するマルチウェルプレートを提供する;貯蔵および 使用の容易さにおいて利点があるツーピースアセンブリのマルチウェルプレート を提供する;そして、本発明のマルチウェルプレートを製造する方法を提供する ことにある。 手短に言うと、本発明は改良されたマルチウェルアッセイプレートに関するも のである。好ましくは、そのプレートは、48行および32列で配列された1536ウェ ルのマトリクスを有する。このプレートは、射出成形により成形できる熱可塑性 材料から作成されている。このプレートの寸法は、96ウェルプレートの業界基準 に従い、プレートの底面積は、96ウェルプレートのものと実質的に同一である。 本発明のプレートはさらに、プレートの周囲に位置する16の対照ウェルおよび4 つの校正ウェルを有する。このプレートは、ワンピースの成形アセンブリとして 、またはツーピースの連結アセンブリを構成するウェルマトリクスプレートおよ びフレームとして製造しても差し支えない。 図面の簡単な説明 図1は、本発明のマルチウェルプレートの平面図である。 図2は、本発明の二つの連続したウェルの部分断面図である。 図3は、本発明のある実施の形態のウェルマトリクス挿入物の平面図である。 図4は、本発明のある実施の形態の支持フレームの平面図である。 図5は、図4の線分5−5に沿って取られた図4のフレームの側壁の断面図で ある。 図6は、支持フレームの側面図である。 図7は、本発明の成形工程に使用する金型および突出しピンの部分断面図であ る。 好ましい実施の形態の説明 図1には、本発明のワンピース型マルチウェル試験プレートが示されている。 このプレートは、周囲縁12、格子網14、および1536の試料ウェル18と、16の対照 ウェル20と、4つの校正ウェル22とを有する上側表面16を備えている。試料ウェ ル18は、好ましくは、ある行の中心線から次の行の中心線まで測定して、約0.08 9インチの間隔がおかれた48行で配列されている。各々の行は、32のウェルを含 んでいる。各々の行内の試料ウェルは同様に、好ましくは、その行のあるウェル の中心から次のウェルの中心まで測定して、約0.089インチの間隔がおかれてい る。 4行ごとと、各々の行の4ウェルごとに、格子線14がある。これらの格子線は、 好ましくは、プレートの表面から窪んだ溝であり、全体として見た場合、各々16 の試料ウェルを含有する96の格子にそのプレートを分割する。この格子網は、そ うしなければ識別するのが困難な個々のウェルと位置を同定するのに役立つ。プ レート10は、好ましくは、プレートの方向を明確に示す面取り角13を有する。 試料ウェルの最初の行の前と、試料ウェルの最後の行の後に、各々8つのウェ ルを有する対照ウェル20の行がある。最初の対照ウェルは、好ましくは、最も近 いウェルの行の2番目と3番目のウェルの間に、その最も近い行の中心線から約 0.089インチ離れて均等に配置されている。一定順序で連続した他の7つの対照 ウェルは各々、好ましくは、その前の対照ウェルから約0.356インチ離れて、最 も近い行の中心線から約0.089インチ離れて配置されている。既知の量の既知の 物質が対照ウェル内に保持されている。この対照は、試料ウェル18内に保持され た未知の物質との分析的比較に使用される。 校正ウェル22は、最初と最後の行の各々の端部に位置している。これらの校正 ウェルは、好ましくは、その行の次のウェルから約0.089インチ離れて配置され 、その行の中心線上に直接位置している。これら校正ウェルは、ある分析装置の 校正に使用すべき物質を保持してもよい。それらはまた、特定のアッセイに関し て、適切な位置合せを行うのに使用しても差し支えない。 合計で1556のウェル(1536の試料ウェル18、16の対照ウェル20、および4つの 校正ウェル22)およびプレート表面の周囲区域のマトリクスは、好ましくは、周 囲縁表面12から約0.010インチだけ隆起している。これにより、ウェルの周りを 平らな表面に維持しながら、プレートの周辺部すなわち縁12に座標の記号を配置 することができる。平らな表面は、感圧性または感熱性のフイルムでウェルを密 封するときに重要である。そのような密封により、化合物の蒸発および/または 長期貯蔵を制御することかできる。 本発明のワンピース型マルチウェルプレート10には、このプレートの反対の端 部に設けられた孔24およびスロット26がある。この孔24およびスロット26は、プ レート10を、例えば、分析装置または流体ディスペンサ上に正確に配置できるよ うにする位置合せ特徴である。つめ(図示せず)を用いて、プレートを器具に位 置合せするのに用いてもよい。補助装置に取り付けられた位置合せピンを用いて 、プレートを適所に保持してもよい。孔を通して配置されたピンはプレートを正 確に位置決めし、一方で、スロットを通るピンは、長さの許容差問題を許しなが ら平行を維持する。このスロットは、完成した部材にある程度の寸法的柔軟性を 与えるので重要である。これらの孔およびスロットの特徴は、実質的に同一であ る第一と第二のプレートの間での流体移送にも役立つ。スロット26および孔24は 、一つのプレートを、逆さにされた対の片方のプレートに位置合せする。第二の プレートは、第一のプレートのスロットが一方の端部で第二のプレートの孔に関 して整合し、第二のプレートからのスロットが反対の端部で第一のプレートの孔 に関して整合するように逆さにし、第一のプレート上に配置することができる。 逆さにされたプレート内に含まれるどのような液体試料も、表面張力のためにウ ェル内に留まる。次いで、ピンを、プレートの両端にある整合されたスロットと 孔に通して挿入して、実質的にそれらを互いに固定することができる。二つのプ レートの上側表面が接触し、個々のウェルは、一方のプレートの個々のウェル内 の液体が、遠心分離により、第二のプレートの個々のウェルに移送できるように 整合している。 流体の移送は、マルチウェルプレートの孔24およびスロット26に対応する、二 つの垂直ピンを有する標準的な96ウェル遠心分離装置を用い、これらのピンに第 一のプレートおよび逆さにされた第二のプレートを装填することにより実施する ことができる。これらのプレートは、二つ以上の側部にバネ付きクリップを用い て適所に留められ、遠心分離される。 別の連結されている実施の形態(図示せず)は、第一のプレートの表面に位置 し、第一のプレートのピンが第二のプレートの孔とかみ合い、第二のプレートの ピンが第一のプレートの孔とかみ合うように実質的に同一で逆さにされた第二の プレートの対応する孔とかみ合うことのできる整合ピンを有している。 図2は、本発明の二連続の試料ウェル18の断面図を示している。これらのウェ ルは、プレート10の表面16内の円筒凹部である。各々のウェルは、側壁28および 底部30を有している。プレート表面でのウェルの直径は、好ましくは、約0.059 インチである。ウェルの底部でのウェルの直径は、好ましくは、約0.047インチ であ る。各々のウェル18は、好ましくは、約0.060インチの深さであるが、プレート の下に位置する検出器に、より近くその中に試料を位置させるために、それより 深くてもよい。試料を検出器に、より近く位置させることには、試験精度を向上 させ、隣接するウェル間のクロストークを最小にするという利点がある。 プレート10は、好ましくは、ポリスチレンまたはポリプロピレンのようなプラ スチックから作成される。ウェル18は、好ましくは、不透明な側壁28および透明 な底部30を有する。これら不透明な側壁は、ウェル間のクロストークを最小にす る。各々のウェルの透明な底部により、色、蛍光、または化学発光の試験を標準 化された器具によりウェルの下から行うことができる。ウェル底部は、好ましく は、そこを通しての光学試験を向上させるために平らであるが、丸まっていたり 、傾斜していたり、尖っていてもよい。 図3および4は、本発明の実施の形態であるツーピース構築物の個々の部材を 示している。図3は、マルチウェルプレートを形成するのに図4のフレーム34と 共に用いられるマトリクスウェル挿入物32を示している。ウェルマトリクス挿入 物32は、好ましくは、図1のワンピース構築物と同数の試料ウェル18、対照ウェ ル20、および校正ウェル22を含む。さらに、ウェル間の間隔は、ワンピース構築 物について以前に記載した間隔と実質的に同一である。スロット26および孔24は 、以前に記載したように、補助装置上での適切な位置決めを行い、プレート間の 液体移送を目的として、逆さにされた対の片方のプレートを収容するために、挿 入物の反対側に位置している。 本発明のような小容積(約2マイクロリットル)のウェルを有するアッセイプ レートを取り扱う場合、ウェルプレートの表面が平らのままであることが重要で ある。ウェルマトリクス挿入物32は、薄いために柔軟性である。このウェルマト リクス挿入物は、好ましくは、0.200インチ未満、好ましくは約0.100インチ未満 の厚さを有し、好ましくは、0.015インチ未満の平面度を有する。 図4−6は、ウェルマトリクス挿入物32を収容できるフレーム34を示している 。フレーム34は、四つの側壁36を備えた矩形構築物であり、中央部38を通して開 いている。このフレームの外寸(長さ、幅および高さ)は、業界基準の96ウェル プレートの外寸とほぼ同一である。少なくとも一つの側壁36が、そこを通してウ ェ ルマトリクス挿入物32を挿入できる開口部または挿入領域33を有している。ウェ ルマトリクス挿入物32は、このウェルマトリクス挿入物の頂面に位置する窪み40 の形態にある対向つめおよびフレーム34の上側トラックの下側部分にあるディン プル(図示せず)が挿入物およびフレームを互いに固定するまで、側壁36内のト ラック35上でフレーム34を通って摺動する。フレーム34およびウェルマトリクス 挿入物32は、ウェルマトリクス挿入物内のスロット42およびフレーム上の対応し て備え付けられた延長部44により互いにさらに固定される。挿入物32は、逆さに された状態でフレーム34中に挿入されてもよい。フレーム内の挿入物を逆さにし 、続いて、アセンブリ全体を光学リーダー上で逆さにすることにより、ウェルの 底部が光学リーダーに対してより近く位置することができる。ウェルマトリクス 挿入物32の面取りされた角46により、この挿入物およびフレームを物理的および 視覚的に方向付けることができる。ウェルマトリクス挿入物がフレーム内で適切 にかみ合っている場合、形成されたアッセイプレートは、業界基準を満たし、標 準的な96ウェルプレートに使用するために設計されたロボットを含む補助装置に 使用することができる。 本発明のツーピース構築物の実施の形態により、ウェルマトリクス挿入物をフ レームから取り外し、別々に貯蔵することができる。ウェルマトリクス挿入物を 取り外すことにより、ワンピースアセンブリまたは連結されたツーピースアセン ブリより、60-80%も貯蔵空間が減少する。 別の実施の形態は、逆さにできるウェルマトリクス挿入物およびフレームを有 するツーピースユニットからなる。この実施の形態において、フレームは、ウェ ルマトリクス挿入物がフレームの下側表面に取り付けられるように構築されてい る。このマトリクス挿入物内のウェルは、表面張力により液体試料を保持する。 次いで、逆さにされたプレートを共用装置内の光センサに整合させることができ る。通常マルチウェルプレートの下から作動し、色、蛍光、またはルミネッセン スをウェル底部の光学的に透明なプラスチックを通して読み取る光センサは、こ の実施の形態において、ウェルの開口部を通して各々のウェルの含有物を試験す ることができる。 さらに、本発明の組み立てられたツーピース型マトリクスプレートまたはワン ピース型マルチウェルプレートを逆さにし、光検出装置上に配置することができ る。表面張力により、いずれのウェル内にもいずれの試料液体が保持される。 本発明のマルチウェルプレートを形成する射出成形方法は、二段階の突出し工 程を含む。以前に開示し、図1に示したようなウェルマトリクスを含む、複数の ウェルを有するプレートが射出成形される。図7において、金型48の表面は、射 出されたプラスチックにより囲まれたときに、そのプラスチック内にウェルを形 成する複数の雄ウェルセクション50を備えている。これら雄ウェルセクション50 の壁が、成形されたプラスチック部材52が金型から確実に離形できるように、少 なくとも3度の内側傾斜を有している。金型それ自体は、その内部に、一連の突 出しピン54、56を有している。ウェルの一部は、第一群の突出しピン54の端部に 形成されている。そのようなピンは、好ましくは、ウェルを取り囲むほど十分に 大きく、次のウェルの縁に接していてもよいが、隣接するウェルのどの部分も含 まない。これにより、羽根状の縁のような金型内の悪いスチール条件を生じるこ となく、隣接するウェルの金型から形成したプラスチック部材52を持ち上げるの に十分に大きい突出しが与えられる。第二群の突出しピン56は、プレートの周辺 に位置し、ウェルとは全く接触しない。成形後、成形したプラスチック部材52を 金型48のコアから持ち上げるために、第一群の突出しピン54を延長させる。次に 、第一群のピン54から成形されたプラスチック部材52を持ち上げるために、金型 の周辺に位置する第二群の突出しピン56をさらに延長させる。この成形技術は、 ワンピース型マルチウェルプレートまたはウェルマトリクス挿入物のいずれを製 造するのにも使用することができる。ツーピース構築物のマルチウェルプレート に使用するフレームは、従来の射出成形技術により成形される。 本発明の好ましい実施の形態を開示してきたが、請求の範囲に定義された、本 発明の範囲から逸脱せずに、他の実施の形態も考えられる。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION Multi-well plate background For many years, multi-well laboratory plates have been manufactured in configurations ranging from one well to 96 wells. The wells of these multi-well plates are typically used as reaction vessels to perform various tests, grow tissue cultures, screen for drugs, or perform analytical diagnostic functions. Industry standard multi-well plates are designed with 96 wells in an 8 × 12 matrix (rows of 8 and 12 wells perpendicular to each other). In addition, the height, length and width of 96-well plates have been standardized. This standardization has led to a series of ancillary equipment developed specifically for 96-well formats. The device is equipped with a device to load and withdraw a precise volume of liquid at a time, which is a multiple of 8, 12, or 96 wells. In addition, the instrument can be used to transmit light through individual wells and read color changes or chemiluminescence within individual wells. Some of these instruments are automated and include instruments that record data and analyze and manipulate the recorded data. Recently, as sample sizes have decreased to the microliter level and there has been a desire for more tests per plate, the number of wells on the plate has also increased, e.g., from 384 wells to over 1536 wells. Increased. SUMMARY OF THE INVENTION Accordingly, it is an object of the present invention to provide a multi-well plate that can handle sample sizes in the 1 microliter range. A further object of the invention is to provide a multi-well plate having 1536 wells with fractional well spacing relative to the well spacing of a standard 96-well plate; provided with an additional 16 control wells and 4 calibration wells Comprising a plate; providing a plate that can be sealed with a heat- or pressure-sensitive film to control evaporation or long-term storage; providing a multi-well plate having opaque side walls and a transparent bottom; It is an object of the present invention to provide a two-piece assembly multi-well plate that has advantages in simplicity; and to provide a method for manufacturing the multi-well plate of the present invention. Briefly, the present invention is directed to an improved multiwell assay plate. Preferably, the plate has a matrix of 1536 wells arranged in 48 rows and 32 columns. This plate is made of a thermoplastic material that can be formed by injection molding. The dimensions of this plate are according to industry standards for 96-well plates, and the bottom area of the plate is substantially the same as that of the 96-well plate. The plate of the present invention further has 16 control wells and 4 calibration wells located around the plate. The plate can be manufactured as a one-piece molded assembly or as a well matrix plate and frame that make up a two-piece coupling assembly. BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIG. 1 is a plan view of a multiwell plate according to the present invention. FIG. 2 is a partial cross-sectional view of two consecutive wells of the present invention. FIG. 3 is a plan view of a well matrix insert according to one embodiment of the present invention. FIG. 4 is a plan view of a support frame according to an embodiment of the present invention. FIG. 5 is a cross-sectional view of the side wall of the frame of FIG. 4 taken along line 5-5 of FIG. FIG. 6 is a side view of the support frame. FIG. 7 is a partial sectional view of a mold and a protrusion pin used in the molding step of the present invention. DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS FIG. 1 shows a one-piece multi-well test plate of the present invention. The plate comprises a peripheral edge 12, a grid 14 and an upper surface 16 having 1536 sample wells 18, 16 control wells 20, and four calibration wells 22. The sample wells 18 are preferably arranged in 48 rows spaced about 0.089 inches apart, as measured from the centerline of one row to the centerline of the next row. Each row contains 32 wells. The sample wells in each row are also preferably spaced about 0.089 inches, measured from the center of one well in the row to the center of the next. There are grid lines 14 every four rows and every four wells in each row. These grid lines are preferably grooves recessed from the surface of the plate and, when viewed as a whole, divide the plate into 96 grids, each containing 16 sample wells. This grid helps to identify individual wells and locations that would otherwise be difficult to identify. The plate 10 preferably has a chamfer angle 13 that clearly indicates the direction of the plate. Before the first row of sample wells and after the last row of sample wells, there is a row of control wells 20, each having eight wells. The first control well is preferably evenly spaced between the second and third wells of the closest well row, approximately 0.089 inches from the center line of the closest row. Each of the other seven control wells in sequence are preferably located about 0.356 inches from the previous control well and about 0.089 inches from the centerline of the nearest row. A known amount of the known substance is retained in the control well. This control is used for analytical comparison with unknown substances retained in sample well 18. Calibration wells 22 are located at the ends of each of the first and last rows. These calibration wells are preferably located about 0.089 inches from the next well in the row and are directly on the centerline of the row. These calibration wells may hold substances to be used for calibration of certain analyzers. They can also be used to make proper alignments for particular assays. The matrix of 1556 total wells (1536 sample wells 18, 16 control wells 20, and 4 calibration wells 22) and the surrounding area of the plate surface is preferably raised about 0.010 inches from the peripheral edge surface 12 I have. This allows the placement of coordinate symbols on the periphery or edge 12 of the plate while maintaining a flat surface around the well. A flat surface is important when sealing the well with a pressure sensitive or heat sensitive film. Such a seal may control the evaporation and / or long term storage of the compound. The one-piece multi-well plate 10 of the present invention has holes 24 and slots 26 provided at opposite ends of the plate. The holes 24 and slots 26 are alignment features that allow the plate 10 to be accurately positioned, for example, on an analyzer or fluid dispenser. A pawl (not shown) may be used to align the plate with the instrument. The plate may be held in place using alignment pins attached to the auxiliary device. Pins placed through the holes accurately position the plate, while pins through the slots remain parallel while allowing for length tolerance issues. This slot is important because it gives the finished part some dimensional flexibility. These hole and slot features also facilitate fluid transfer between the first and second plates, which are substantially identical. Slots 26 and holes 24 align one plate with one plate of the inverted pair. The second plate has a slot in the first plate aligned at one end with a hole in the second plate and a slot from the second plate aligned at an opposite end with a hole in the first plate. Upside down and placed on the first plate. Any liquid sample contained in the inverted plate will remain in the well due to surface tension. The pins can then be inserted through the aligned slots and holes at both ends of the plate to substantially secure them together. The upper surfaces of the two plates are in contact and the individual wells are aligned so that the liquid in the individual wells of one plate can be transferred by centrifugation to the individual wells of the second plate. Fluid transfer was performed using a standard 96-well centrifuge with two vertical pins, corresponding to the holes 24 and slots 26 of the multi-well plate, with the first plate and the inverted second This can be carried out by loading a plate. These plates are snapped in place using spring loaded clips on two or more sides and centrifuged. Another articulated embodiment (not shown) is located on the surface of the first plate, where the pins of the first plate engage the holes in the second plate and the pins of the second plate It has alignment pins that can be mated with corresponding holes in a second plate that are substantially identical and inverted to mate with holes in one plate. FIG. 2 shows a cross-sectional view of a bicontinuous sample well 18 of the present invention. These wells are cylindrical recesses in surface 16 of plate 10. Each well has a side wall 28 and a bottom 30. The diameter of the well at the plate surface is preferably about 0.059 inches. The diameter of the well at the bottom of the well is preferably about 0.047 inches. Each well 18 is preferably about 0.060 inches deep, but may be deeper to place the sample therein closer to the detector located below the plate. Placing the sample closer to the detector has the advantage of improving test accuracy and minimizing crosstalk between adjacent wells. Plate 10 is preferably made from a plastic such as polystyrene or polypropylene. Well 18 preferably has opaque sidewalls 28 and a transparent bottom 30. These opaque sidewalls minimize crosstalk between wells. The transparent bottom of each well allows color, fluorescence, or chemiluminescence tests to be performed from below the well with standardized equipment. The well bottom is preferably flat to enhance optical testing therethrough, but may be rounded, beveled, or pointed. 3 and 4 show the individual components of a two-piece construction that is an embodiment of the present invention. FIG. 3 shows a matrix well insert 32 used with the frame 34 of FIG. 4 to form a multi-well plate. The well matrix insert 32 preferably includes as many sample wells 18, control wells 20, and calibration wells 22 as the one-piece construction of FIG. Further, the spacing between the wells is substantially the same as previously described for the one-piece construction. Slots 26 and holes 24 are inserted as described above for proper positioning on the auxiliary device and for receiving one inverted plate pair for the purpose of liquid transfer between the plates. It is located on the opposite side of the object. When handling assay plates with small volumes (about 2 microliters) of wells as in the present invention, it is important that the surface of the well plate remain flat. The well matrix insert 32 is flexible because it is thin. The well matrix insert preferably has a thickness of less than 0.200 inches, preferably less than about 0.100 inches, and preferably has a flatness of less than 0.015 inches. FIGS. 4-6 show a frame 34 that can accommodate the well matrix insert 32. The frame 34 is a rectangular construction with four side walls 36 and opens through a central part 38. The outer dimensions (length, width and height) of this frame are approximately the same as the outer dimensions of industry standard 96-well plates. At least one side wall 36 has an opening or insertion area 33 through which the well matrix insert 32 can be inserted. The well matrix insert 32 includes an opposing pawl in the form of a recess 40 located on the top surface of the well matrix insert and a dimple (not shown) in the lower portion of the upper track of the frame 34 which connects the insert and frame. Slide through frame 34 on tracks 35 in side walls 36 until they lock together. The frame 34 and the well matrix insert 32 are further secured to each other by slots 42 in the well matrix insert and correspondingly provided extensions 44 on the frame. Insert 32 may be inserted into frame 34 upside down. By inverting the insert in the frame and subsequently the entire assembly on the optical reader, the bottom of the well can be located closer to the optical reader. The chamfered corners 46 of the well matrix insert 32 allow the insert and frame to be physically and visually oriented. When the well matrix insert is properly engaged in the frame, the formed assay plate meets industry standards and should be used for auxiliary equipment, including robots designed for use with standard 96-well plates Can be. Embodiments of the two-piece construction of the present invention allow the well matrix insert to be removed from the frame and stored separately. Removing the well matrix insert reduces storage space by as much as 60-80% over one-piece or coupled two-piece assemblies. Another embodiment consists of a two-piece unit with a well matrix insert that can be inverted and a frame. In this embodiment, the frame is constructed such that the well matrix insert is attached to the lower surface of the frame. The wells in the matrix insert hold the liquid sample by surface tension. The inverted plate can then be aligned with the light sensor in the shared device. Optical sensors, which typically operate from below the multi-well plate and read color, fluorescence, or luminescence through an optically clear plastic at the bottom of the well, in this embodiment, disclose the contents of each well through the well openings. Can be tested. Further, the assembled two-piece matrix plate or one-piece multi-well plate of the present invention can be inverted and placed on a photodetector. The surface tension holds any sample liquid in any well. The injection molding method for forming the multi-well plate of the present invention includes a two-step extrusion process. A plate having a plurality of wells, including a well matrix as previously disclosed and shown in FIG. 1, is injection molded. In FIG. 7, the surface of the mold 48 includes a plurality of male well sections 50 that when surrounded by injected plastic form a well in the plastic. The walls of these male well sections 50 have an inner slope of at least 3 degrees to ensure that the molded plastic member 52 can be released from the mold. The mold itself has a series of projecting pins 54, 56 therein. A part of the well is formed at an end of the first group of projecting pins 54. Such a pin is preferably large enough to surround the well and may abut the edge of the next well, but does not include any portion of the adjacent well. This provides a protrusion that is large enough to lift the plastic member 52 formed from the mold in the adjacent well without creating bad steel conditions in the mold, such as winged edges. The second group of protruding pins 56 is located at the periphery of the plate and does not contact the well at all. After molding, the first set of projecting pins 54 is extended to lift the molded plastic member 52 from the core of the mold 48. Next, in order to lift the molded plastic member 52 from the first group of pins 54, the second group of projecting pins 56 located around the mold are further extended. This molding technique can be used to produce either a one-piece multi-well plate or a well matrix insert. The frame used for the multi-well plate of the two-piece construction is molded by conventional injection molding techniques. While a preferred embodiment of the invention has been disclosed, other embodiments are contemplated without departing from the scope of the invention, which is defined in the claims.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 メイサス,グレゴリー アメリカ合衆国 マサチューセッツ州 01742 コンコード ディアー グラス レイン 49 (72)発明者 ニーマン,アンドリュー ダブリュ アメリカ合衆国 マサチューセッツ州 01720 アクトン ヘイワード ロード 39────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of front page    (72) Inventor Meisus, Gregory             United States Massachusetts             01742 Concord Deer Glass             Rain 49 (72) Inventor Neiman, Andrew W.             United States Massachusetts             01720 Acton Hayward Road             39

Claims (1)

【特許請求の範囲】 1.マルチウェルアッセイプレートであって、 1000より多い試料ウェルを有するウェルマトリクスを備え、 該ウェルが傾斜した側壁および実質的に平らな底部を有し、 前記プレートが、業界基準の96ウェルプレートと実質的に同一の長さ、幅お よび高さの寸法を有し、 それによって、該プレートが射出成形技術を用いて形成されることを特徴と するマルチウェルアッセイプレート。 2.前記ウェルマトリクスが複数の対照ウェルを備えることを特徴とする請求の 範囲第1項記載のマルチウェルアッセイプレート。 3.前記ウェルマトリクスが複数の校正ウェルを備えることを特徴とする請求の 範囲第1項記載のマルチウェルアッセイプレート。 4.前記プレートの反対側に位置した、ピン、およびピンを収容する大きさの孔 を備えることを特徴とする請求の範囲第1項記載のマルチウェルアッセイプレ ート。 5.前記プレートの反対側にあるピン収容する大きさの、スロットおよび孔を備 えることを特徴とする請求の範囲第1項記載のマルチウェルアッセイプレート 。 6.前記ウェルマトリクスが、各々の列に32のウェルを有する48のウェルの列を 構成することを特徴とする請求の範囲第1項記載のマルチウェルアッセイマト リクス。 7.前記側壁が不透明であり、前記底部が透明であることを特徴とする請求の範 囲第1項記載のマルチウェルアッセイプレート。 8.一連の格子線を備え、それによって、該線が前記プレートを所定の格子に分 割することを特徴とする請求の範囲第1項記載のマルチウェルアッセイプレー ト。 9.前記ウェルが3マイクロリットル以下の容積を有することを特徴とする請求 の範囲第1項記載のマルチウェルアッセイプレート。 10.面取りされた角を備えることを特徴とする請求の範囲第1項記載のマルチウ ェルアッセイプレート。 11.整合つめを備えることを特徴とする請求の範囲第1項記載のマルチウェルア ッセイプレート。 12.ツーピースアセンブリ型マルチウェルアッセイプレートであって、 試料ウェルのマトリクスを有する、射出成形されたウェル挿入物を備え、 該マトリクスが1000より多いウェルを有し、 該ウェルが傾斜した側壁および実質的に平らな底部を有し、 該挿入物が延長縁領域を有し、 業界基準の96ウェルプレートと実質的に同一の寸法を有する矩形フレームユ ニットを備え、 該フレームが開放中央領域を定義する側壁を有し、 該フレームの該側壁の少なくとも一つが、そこを通って前記挿入物が進入で きる挿入領域を有し、 該フレームの該側壁が、前記挿入物の延長縁領域を収容できるトラックを有 し、 該フレームおよび該挿入物を互いに固定する手段を備えることを特徴とする マルチウェルアッセイプレート。 13.前記ウェル挿入物が複数の対照ウェルを備えることを特徴とする請求の範囲 第12項記載のマルチウェルアッセイプレート。 14.前記ウェル挿入物が複数の校正ウェルを備えることを特徴とする請求の範囲 第12項記載のマルチウェルアッセイプレート。 15.前記ウェル挿入物が、該ウェル挿入物の反対側に位置する、ピン、およびピ ンを収容する大きさの孔を備えることを特徴とする請求の範囲第12項記載のマ ルチウェルアッセイプレート。 16.前記マトリクスが、各々の列に32のウェルを有する48のウェルの列を構成す ることを特徴とする請求の範囲第12項記載のマルチウェルアッセイプレート。 17.前記ウェルの側壁が不透明であり、前記底部が透明であることを特徴とする 請求の範囲第12項記載のマルチウェルアッセイプレート。 18.前記ウェル挿入物が一連の格子線を備え、それによって、該線が前記ウェル 挿入物を所定の格子に分割することを特徴とする請求の範囲第12項記載のマル チウェルアッセイプレート。 19.前記ウェル挿入物が面取り角を有することを特徴とする請求の範囲第12項記 載のマルチウェルアッセイプレート。 20.前記固定手段が、前記ウェル挿入物の縁上および前記フレーム上につめを備 えることを特徴とする請求の範囲第12項記載のマルチウェルアッセイプレート 。 21.前記ウェル挿入物が0.2インチ未満の厚さを有することを特徴とする請求の 範囲第12項記載のマルチウェルアッセイプレート。 22.前記ウェル挿入物が0.015インチ未満の平面度を有することを特徴とする請 求の範囲第12項記載のマルチウェルアッセイプレート。 23.一方のマルチウェルプレートの含有物をもう一方の実質的に同一のマルチウ ェルプレートに移送する方法であって、 a) 所定のウェルマトリクスを有し、反対の端部にピンおよび孔を有する 第一のマルチウェルプレートを、液体試料を含有する第二の実質的に同一のマ ルチウェルプレート上で、該第一のプレートのピンが、第二のプレートの孔を 貫通し、該第二のプレートのピンが該第一のプレートの孔を貫通するように逆 さにし、それによって、前記試料が表面張力により前記第二のプレート内に保 持され、 b) 前記第二のプレートからの液体試料が前記第一のプレートに移送され るような様式で、連結されたプレートに遠心力を加え、 c) 該第一のプレートを該第二のプレートから分離する各工程を含むこと を特徴とする方法。 24.一方のマルチウェルプレートの含有物をもう一方の実質的に同一のマルチウ ェルプレートに移送する方法であって、 a) 所定のウェルマトリクスを有し、反対側にスロットおよび孔を有する 第一のマルチウェルプレートを、液体試料を含有する第二の実質的に同一のマ ルチウェルプレート上で、該第一のプレートのスロットが該第二のプレートの 孔と整合し、該第二のプレートのスロットが該第一のプレートの孔と整合し、 それによって、対向する孔−スロットの界面が形成されるように逆さにし、そ れによって、前記試料が表面張力により前記第二のプレート内に保持され、 b) 前記対向する孔−スロットの界面にピンを通し、 c) 前記第二のプレートからの液体試料が前記第一のプレートに移送され るような様式で、固定されたプレートに遠心力を加え、 d) 該第一のプレートを該第二のプレートから分離する各工程を含むこと を特徴とする方法。[Claims] 1. A multi-well assay plate,     With a well matrix with more than 1000 sample wells,     The well has sloping sidewalls and a substantially flat bottom,     The plate is substantially the same length, width and width as the industry standard 96-well plate   And dimensions of height,     Thereby, the plate is formed using an injection molding technique.   Multiwell assay plate. 2. The method of claim 11, wherein the well matrix comprises a plurality of control wells.   2. The multi-well assay plate according to claim 1, wherein 3. The well matrix comprises a plurality of calibration wells.   2. The multi-well assay plate according to claim 1, wherein 4. A pin and a hole sized to receive the pin located on the opposite side of the plate   The multi-well assay plate according to claim 1, further comprising:   To 5. Slots and holes sized to receive the pins on the opposite side of the plate   2. The multi-well assay plate according to claim 1, wherein   . 6. The well matrix has 48 well rows, with 32 wells in each row.   2. The multi-well assay mat according to claim 1, wherein   Rix. 7. Claim: The sidewall is opaque and the bottom is transparent.   2. The multi-well assay plate according to claim 1. 8. A series of grid lines, whereby the lines divide the plate into a predetermined grid.   2. The multi-well assay plate according to claim 1, wherein   G. 9. The method of claim 1, wherein the well has a volume of 3 microliters or less.   2. The multi-well assay plate according to claim 1, wherein Ten. 2. A multi-piece as claimed in claim 1, comprising chamfered corners.   Well assay plate. 11. 2. The multi-well as claimed in claim 1, further comprising a matching pawl.   Essay plate. 12. A two-piece assembly type multiwell assay plate,     Comprising an injection molded well insert having a matrix of sample wells;     The matrix has more than 1000 wells;     The well has sloping sidewalls and a substantially flat bottom,     The insert has an extended edge area;     Rectangular frame unit with dimensions substantially the same as industry standard 96-well plates   Equipped with a knit,     The frame has side walls defining an open central area;     At least one of the side walls of the frame is through which the insert enters.   Has an insertion area     The side wall of the frame has a track that can accommodate an extended edge area of the insert.   And     Characterized by comprising means for fixing the frame and the insert to each other   Multiwell assay plate. 13. The well insert comprises a plurality of control wells.   13. The multi-well assay plate according to paragraph 12. 14. The well insert comprises a plurality of calibration wells.   13. The multi-well assay plate according to paragraph 12. 15. A pin, and a pin, wherein the well insert is located on the opposite side of the well insert.   13. The machine according to claim 12, further comprising a hole sized to receive the   Multiwell assay plate. 16. The matrix comprises a row of 48 wells, with 32 wells in each row.   13. The multi-well assay plate according to claim 12, wherein: 17. Wherein the side wall of the well is opaque and the bottom is transparent   13. The multi-well assay plate according to claim 12, wherein: 18. The well insert comprises a series of grid lines, whereby the lines are   The insert according to claim 12, wherein the insert is divided into a predetermined grid.   Chiwell assay plate. 19. 13. The method according to claim 12, wherein the well insert has a chamfer angle.   Multi-well assay plate. 20. The securing means includes pawls on the edge of the well insert and on the frame.   13. The multi-well assay plate according to claim 12, wherein   . twenty one. The well insert has a thickness of less than 0.2 inches.   13. The multi-well assay plate according to claim 12, wherein twenty two. Wherein said well insert has a flatness of less than 0.015 inches.   13. The multi-well assay plate according to claim 12, wherein: twenty three. Combine the contents of one multiwell plate with another substantially identical multiwell   Transfer to the well plate,     a) with a given well matrix, with pins and holes at opposite ends   A first multi-well plate is filled with a second substantially identical matrix containing a liquid sample.   On a multi-well plate, the pins of the first plate make holes in the second plate   Penetrate and reverse so that the pins of the second plate pass through the holes of the first plate.   Thereby holding the sample in the second plate due to surface tension.   Carried,     b) the liquid sample from the second plate is transferred to the first plate   Apply centrifugal force to the connected plates in a manner that     c) including the steps of separating the first plate from the second plate   A method characterized by the following. twenty four. Combine the contents of one multiwell plate with another substantially identical multiwell   Transfer to the well plate,     a) Having a predetermined well matrix, with slots and holes on the opposite side   A first multi-well plate is filled with a second substantially identical matrix containing a liquid sample.   On a multiwell plate, the slot of the first plate is   The holes in the second plate align with the holes in the second plate;   It is turned upside down so that an opposing hole-slot interface is formed, and   Thereby, the sample is held in the second plate by surface tension,     b) passing a pin through the opposing hole-slot interface;     c) the liquid sample from the second plate is transferred to the first plate   Apply centrifugal force to the fixed plate in such a way that     d) including the steps of separating the first plate from the second plate.   A method characterized by the following.
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