JP2001505664A

JP2001505664A - 細菌感染症の診断のための呼吸試験

Info

Publication number: JP2001505664A
Application number: JP52541598A
Authority: JP
Inventors: キャッツマン，ダニエル，イー．
Original assignee: オリディオンメディカル，リミテッド
Priority date: 1996-12-02
Filing date: 1997-12-01
Publication date: 2001-04-24
Also published as: EP0999782A1; AU5406198A; EP0999782A4; US5944670A; WO1998024362A1

Abstract

(57)【要約】対象における、例えばＣｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅのようなＣｈｌａｍｙｄｉａ種の診断用の呼吸試験を開示する。対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ種のこの診断方法は次のように行われる。最初に、好ましくは適当に標識された基質の安全な有効量を対象に投与する。第二に、対象の呼気を分析して、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ菌からの酵素が基質を切断するときに生成される切断生成物（単数又は複数種類）の濃度を検出する。切断生成物（単数又は複数種類）の存在は対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ種の陽性診断を示す。呼吸試験キットも開示する。このような呼吸試験キットは対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ種を診断する方法の少なくとも１つを行うために必要なアイテム（単数又は複数）を包含する。例えば、このような呼吸試験キットは対象に投与するべき基質を包含することができる。

Description

【発明の詳細な説明】細菌感染症の診断のための呼吸試験発明の分野と背景本発明は細菌感染症の診断のための呼吸試験に関し、より詳しくは、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種による感染症の診断のための呼吸試験に関する。Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種はヒトにおける多くの異なる感染症の原因となる細菌である。Ｃｈｌａｍｙｄｉａｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓは性行為によって伝播される疾患である。最近、Ｃｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅは冠状心疾患、特に、動脈を閉塞して、心筋梗塞を招く恐れのある罹病組織であるアテロームの発症に関連づけられている。このような関与の証拠は増大しつつあり、冠状心疾患を有する患者から採取した冠状組織のサンプル中のＣｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅからのＤＮＡの検出を包含する（Ｐ．Ｂｒｏｗｎによる“ＣａｎｙｏｕＣａｔｃｈａＨｅａｒｔＡｔｔａｃｋ？”，ＮｅｗＳｃｉｅｎｔｉｓｔ，１９９６年６月，３８〜４２頁に記載）。その上、急性心筋梗塞を有する患者の高い割合は急性Ｃｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ感染症をも有した（Ｆ．Ｂｌａｓｉ等，“ＡＰｏｓｓｉｂｌｅＲｏｌｅｆｏｒＣｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅＩｎｆｅｃｔｉｏｎｉｎＡｃｕｔｅＭｙｏｃａｒｄｉａｌＩｎｆａｒｃｔｉｏｎＯｎｓｅｔ”、第３回ヨーロッパＣｈｌａｍｙｄｉａ会議（オーストリア、ヴィエンナにおいて１９９６年９月１１〜１４日開催）からの要約集２２０頁）。これら及びその他の結果は、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種による感染症の診断への関心を引き起こしている。Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種、特にＣｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅのライフサイクルは、これらの細菌を検出することの困難さを高めている。重要なことには、これらの細菌はかれらのライフサイクルに２つの部分を有する。１つの部分では、これらの細菌は宿主細胞に入り、細胞内細網体(intracellular retic ular body)として生活する。第２部分では、細菌は宿主細胞を出て、細胞外基本小体(extracellula relementary body)として生活する。したがって、細菌は、宿主の免疫系に到達しがたい宿主細胞内に“潜む”ことができ、次に宿主の他の組織を感染させるために宿主細胞を出ることができる。宿主細胞中への細菌の侵入はこの宿主細胞膜の結合性(integrity)における変化を必要とするので、個々の宿主細胞のこのような感染は宿主組織の病変を惹起する可能性がある。したがって、このような感染はＣｈｌａｍｙｄｉａ種を検出されがたくするのみでなく、例えば冠状動脈のような宿主組織の損傷を直接生じる可能性もある。明らかに、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種の迅速で、精確な、非侵襲性検出方法が必要である。残念ながら、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種、特にＣｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅによる感染症を診断するために現在利用可能な方法は侵襲性であり、実行が困難であり、“リアルタイム”でのＣｈｌａｍｙｄｉａ活性を測定することができない。即ち、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ活性が起こる時間とこのような活性が試験によって測定される時間との間にかなりの遅延が存在する。例えば、ＫｕｏへのＰＣＴ特許第９２２２８１９号（以下では、“Ｋｕｏ”と呼ぶ）は生物学的サンプル中のＣｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅに関連した第１マーカーを検出し、同じサンプル中の動脈肉芽腫に関連した第２マーカーを検出する方法を開示している。Ｃｈｌａｍｙｄｉａマーカーは、血清又は組織サンプル中のＣｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅからの脂質の濃度を包含する。このような方法は、両方ともが生物学的有害物質である、血清又は組織サンプルを必要とするという欠点を有する。その上、この試験は２マーカーを検査するので、２種類の別々の測定を必要とする。これらの測定のうちのある一定の測定はｉｎｖｉｖｏでリアルタイムにおいてなされるのではなく、ｉｎｖｉｔｒｏで静的サンプルにおいてなされる。したがって、このようなマーカーの濃度は必ずしも対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ菌の実際の(actual)活性に比例するとは限らず、さらに重要なことには、活性が起こる時間と測定がなされる時間との間にかなりの遅延が生じなければならない。このようなマーカーの例は、Ｃｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅに対して生じた抗体と、Ｃｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅから放出された脂質を包含する。これらの種類のマーカーの欠点は、これらのマーカーがこの細菌の現時の活性を表さないことである。例えば、抗体の存在は現時の感染、又は既に生じて、消散した感染を示すことができる。したがって、存在する場合の細菌の現在の活性レベルを測定することは困難である。ｉｎｖｉｖｏで測定されるとして述べられているようなマーカーは他の欠点を有する。例えば、この開示はカテーテルから心臓に供給される、Ｃｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅに対する放射性標識された抗体を挙げている。この方法は非常に侵襲性であり、抗体は細菌がライフサイクルの細胞内部分にあるときに細菌に結合することができるとは限らないので、この方法では細菌レベルは容易に測定されない。その上、このような方法はリアルタイムにあるときの細菌自体の活性レベルを直接測定することもできない。ＳａｉｋｋｕへのＰＣＴ特許第９００００６１号は、血液、尿、又は心臓からの組織バイオプシーのサンプルを用いることによるｉｎｖｉｔｒｏでのＣｈｌａｍｙｄｉａの存在の検出方法を開示している。組織バイオプシーを得ることは、明らかに侵襲性であるので、不利である。尿サンプルを用いることさえも、生物学的有害物質の可能性がある体液の取り扱いを必要とするので、ある程度不利である。その上、この方法はＣｈｌａｍｙｄｉａ抗原を検出するために抗体を用いるか、或いは、細菌自体の活性を測定するのではなくＣｈｌａｍｙｄｉａに対する抗体のレベルを測定する。このような方法は間接的であるのみでなく、対象においてＣｈｌａｍｙｄｉａ活性が起こる時間と、測定がなされる時間との間の遅延をも生じる。さらに、抗体の存在はＣｈｌａｍｙｄｉａ種による感染が過去の何らかの時点で生じたことのみを示し、このような感染が現在生じていることを示さない。その上、ｉｎｖｉｖｏ測定方法について記載されていない。したがって、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種を診断するための現在利用可能な方法の全てが不利である。しかし、胃腸管内のＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉによる感染を検出するための迅速でかつ非侵襲性方法が述べられている。これらの方法は、対象に基質(substrate)を投与し、次に対象の呼気(exhaled breath)を、胃腸管内のＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉの存在を示す加水分解生成物（単数又は複数種類）の存在に関して分析することを含む。例えば、Ｍａｒｓｈａｌｌへの米国特許第４，８３０，０１０号（以下では、“Ｍａｒｓｈａｌｌ”と呼ぶ）は、対象にアイソトープ標識された(isotopically-labelled)尿素を経口投与することによるＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉの検出方法を述べている。Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉは、尿素を加水分解して二酸化炭素とアンモニアとを生成する酵素ウレアーゼを多量に産生する。これらの加水分解生成物の一方又は両方がアイソトープ・ラベルを有することができる。次に、少なくとも一方のアイソトープ標識生成物が対象によって吐出され、対象の呼気中で適当な測定手段によって検出されることができる。したがって、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉを診断するための呼吸試験は迅速で、実行しやすく、かつ比較的非侵襲性である。残念ながら、このような呼吸試験はＣｈｌａｍｙｄｉａ種の診断のために現在利用可能ではない。したがって、比較的非侵襲性であり、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ菌の活性を相対的に殆ど遅延なく測定することができる、対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ種を検出するための呼吸試験を有することが必要であると広く認識されており、非常に有利であると考えられる。発明の概要本発明によると、対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ種の診断方法であって、（ａ）Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種の酵素によって切断されて切断生成物を形成することができる基質を対象に投与する工程と；（ｂ）切断生成物の濃度が対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ種の活性を示す濃度になるための適当な時間後に、対象の呼気を分析する工程とを含む上記方法を提供する。好ましくは、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種はＣｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａｐｓｉｔｔａｃｉ及びＣｈｌａｍｙｄｉａｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓから成る群から選択される。最も好ましくは、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種はＣｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅである。さらに、対象の呼気を赤外分光計によって分析することが好ましい。基質をアイソトープ標識することが好ましい。さらに、切断生成物が二酸化炭素であることが好ましく、炭素−１３アイソトープ標識された二酸化炭素であることが最も好ましい。以下で説明する本発明の好ましい実施態様における他の態様(feature)によると、対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ種を診断するための呼吸試験キットであって、対象に投与するための基質を含み、該基質がＣｈｌａｍｙｄｉａ種の酵素によって切断されて、対象の呼気中に存在する切断生成物を形成することができる上記キットを提供する。好ましい実施態様の説明本発明は、対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ種の存在を検出するために用いることができる呼吸試験の発明である。詳しくは、本発明は、対象に基質を投与し、次に対象の呼気中の切断生成物（単数又は複数種類）の濃度を検出することによって、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種の存在を診断するために用いることができる。切断生成物（単数又は複数種類）の濃度は対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ種の活性レベルを示すので、このレベルを用いて、対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ種を診断することができる。以下では、“Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種”なる用語を、非限定的にＣｈｌａｍｙｄｉａｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａｐｓｉｔｔａｃｉ及びＣｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅを包含するＣｈｌａｍｙｄｉａ属に属するような細菌として定義する。実施例１対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ種の診断方法対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ種のこの診断方法は次のように行われる。最初に、好ましくは適当に標識された基質の安全な有効量を対象に投与する。第二に、適当な時間後に、対象の呼気を分析して、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ菌からの酵素が基質を切断するときに生成される切断生成物（単数又は複数種類）の濃度を検出する。“切断(cleaves)”とは、酵素が非限定的に加水分解を含めた化学プロセスによって基質の少なくとも１つの化学結合を破断して、複数の生成物を形成することができることを意味する。このようにして形成された生成物が“切断生成物”である。切断生成物（単数又は複数種類）の濃度は対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ種の活性レベルを示すので、これを用いてＣｈｌａｍｙｄｉａ種の診断を決定することができる。陽性の診断は、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種が対象に存在して、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種による対象の感染を構成することを示す。このような診断方法は“呼吸試験”と呼ばれることもできる。以下では、“対象(subject)”なる用語は、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種のこの診断方法を適用することができるヒト又はより下級な動物を意味する。 “適当な時間”なる用語は、切断生成物（単数又は複数種類）が形成されて、対象の呼吸に吐出されるまでに要される時間の長さを意味する。したがって、この必要な時間は多くのイベント(event)が生ずることを可能にする。第一に、基質は対象によって吸収されなければならない。次に、基質は、対象中に存在することができる、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種又は、例えば酵素のような、その一部に接近可能でなければならない。次に、基質はＣｈｌａｍｙｄｉａ種の酵素によって切断されて、切断生成物（単数又は複数種類）を形成しなければならない。最後に、切断生成物（単数又は複数種類）は対象の呼吸に吐出されなければならない。 “基質の安全な有効量”なる用語は、例えば中毒(toxicity)、刺激状態、アレルギー又は過敏症反応のような、不都合な副作用の不利なレベルを生じることなく、検出可能なレベルの切断生成物（単数又は複数種類）を生成するために充分である基質量を意味する。任意のこのような副作用レベルは許容される危険／利益比率(risk/benefit ratio)に対応するべきである。基質の、したがって切断生成物（単数又は複数種類）の適当なラベルの例は、適当な測定機器によって検出可能であるが、対象に対して実質的に有害又は毒性ではないようなラベルであり、非限定的に、炭素−１３若しくは炭素−１４、酸素−１８又は窒素−１５のアイソトープ標識を包含する。アイソトープは、特定の質量を有する、例えば炭素のような、元素の形態である。例えば、炭素−１２は１２原子質量単位の質量を有する。“アイソトープ標識(isotope-labelling) ”なる用語は、これらの元素の各々の天然に多量に存在する(more abundant)アイソトープが少量存在する(less abundant)アイソトープによって少なくとも部分的に置換されていることを意味する。例えば、天然に多量に存在する炭素−１２は少量存在する炭素−１３によって少なくとも部分的に置換されることができ、少量存在するアイソトープは天然に多量に存在するアイソトープから区別されることができるので、炭素−１３はこのラベルを有する切断生成物（単数又は複数種類）をより容易に検出させることができる。その上、例えば炭素−１３のようなある一定のアイソトープの利点は、それらが安定であり、例えば炭素−１４のようなアイソトープとは異なって、放射性ではないことである。それ故、例えば炭素−１３のような、安定な非放射性アイソトープをラベルとして用いることが好ましい。 “投与する(administered)”なる用語は、グッドメディカルプラクティス (good medical practice)に従った方法を用いて、基質を対象に導入することを意味する。基質は、当該技術分野において周知である、多くの方法で対象に投与されることができる。例えば、投与を局所的に（眼に、膣に、直腸に、鼻内にを包含する）、経口的に、吸入によって、又は非経口的に（例えば、点滴によって又は腹腔内、皮下若しくは筋肉内注射によって）行うことができる。経口的、局所的に又は吸入によって投与を行うことが、これらの方法は比較的非侵襲性であるので、最も好ましい。局所投与用製剤は、非限定的に、ローション、軟膏、ゲル、クリーム、座薬、ドロップ、液体、スプレー(spray)、及び粉末を包含しうる。慣用的な薬剤学的キャリヤー、水性、粉末若しくは油性基剤、増粘剤等が必要である又は望ましい。経口投与用組成物は、粉末若しくは顆粒、水中若しくは非水性媒質中の懸濁液若しくは溶液、サシェ(sachet)、カプセル又は錠剤を包含する。増粘剤、希釈剤、フレーバー剤(flavoring)、分散助剤、乳化剤又は結合剤が望ましいと考えられる。非経口投与用製剤は、非限定的に、緩衝剤を含有することもできる無菌水溶液、希釈剤及び他の適当な添加剤を包含することができる。標識基質を対象に投与した後に、対象の呼気を分析して、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種の存在を示す切断生成物（単数又は複数種類）を検出する。切断生成物（単数又は複数種類）は、対象の呼気のガスサンプルを測定機器によって分析することによって検出される。このようなガスサンプルは、非限定的に、対象に測定機器に連結した管中に吐出させる又は息を吹き込ませることを含めた、多くの方法で得ることができる。切断生成物（単数又は複数種類）を検出するために用いられる測定機器の種類は、ラベルの種類に依存する。例えば、炭素−１３アイソトープ標識された基質を用いる場合に、炭素−１３アイソトープ標識された切断生成物（単数又は複数種類）は、炭素−１３アイソトープに敏感である、質量分光計又はガス分析計を非限定的に含めた測定機器を用いることによって、検出することができる。次に、炭素−１３アイソトープ標識された切断生成物（単数又は複数種類）の濃度の、炭素−１２切断生成物（単数又は複数種類）の濃度に対する比率を算出する。炭素−１２は天然により多量に存在するアイソトープであるので、炭素−１２は非標識分子中により多量に存在する。したがって、炭素−１３／炭素−１２のより高い比率は、より高い濃度の炭素−１３アイソトープ標識切断生成物（単数又は複数種類）を意味し、このことは対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ種の存在を決定的に示す。切断生成物の少なくとも１種類が炭素−１３アイソトープ標識二酸化炭素であることが好ましい。炭素−１３アイソトープ標識二酸化炭素に対して使用可能である測定機器の例は、非限定的に、赤外分光計を包含する。これらの赤外分光計は当該技術分野に周知であり、迅速かつ精確であるという利点を有する。このような赤外分光計の例は、本明細書に援用される米国特許第５，０６３，２７５号に開示されている。或いは、切断生成物の少なくとも１種類が窒素−１５アイソトープ標識されたアンモニアであることが好ましい。もちろん、炭素−１３アイソトープ標識二酸化炭素と窒素−１５アイソトープ標識アンモニアの両方が、基質が両ラベルを有する限り、存在することができる。アンモニアと二酸化炭素の両方が、対象の呼気中に存在する分子であるという利点を有する。基質自体がＣｈｌａｍｙｄｉａ種の酵素によって切断可能でなければならない。“切断可能な基質”とは、酵素によって切断されて、“切断生成物”と呼ばれる、複数の生成物を形成する基質である。このような酵素の１例はＫ．Ｈ．ＶａｌｋｏｎｅｎとＰ．Ｓａｉｋｋｕによって述べられている［第３回ヨーロッパＣｈｌａｍｙｄｉａ会議（オーストリア、ヴィエンナにおいて１９９６年９月１１〜１４日開催）からの要約集４１頁］。この酵素は、Ｃｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ中に存在する、Ｋ７として知られたシステインプロテイナーゼである。“システインプロテイナーゼ”なる用語は、Ｋ７がタンパク質をシステインアミノ酸残基において切断することを意味する。Ｋ７がＣｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅがこの細菌のライフサイクルの細胞内部分中に宿主細胞に入ることを可能にするプロテイナーゼでありうるので、Ｋ７はＣｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅの病原性に関与すると考えられる。したがって、Ｋ７酵素の活性レベルはＣｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅの病原性を示すことさえ考えられる。Ｋ７酵素はゼラチン及びカゼインを切断することが特に実証されており、ゼラチン及びカゼインの両方が食品中に用いられる天然生成タンパク質であるので、実質的に非毒性である。しかし、この酵素のための適当な基質が必ずしもポリペプチドである必要はない。実際に、対象による吸収とＣｈｌａｍｙｄｉａ種への提示との容易さのために、非ポリペプチド基質がよりいっそう好都合でありうる。このような基質の１例はＬ−ロイシンｐ−ニトロアニリドである［第３回ヨーロッパＣｈｌａｍｙｄｉａ会議（オーストリア、ヴィエンナにおいて１９９６年９月１１〜１４日開催）において発表された、Ｋ．Ｈ．Ｖａｌｋｏｎｅｎとｐ．Ｓａｉｋｋｕのポスター（poster）］。このような基質は好ましくは、例えば、炭素−１３アイソトープ標識される又は窒素−１５アイソトープ標識されるロイシン分子を合成し、次にこれらの標識分子からＬ−ロイシンｐ−ニトロアニリドを製造することによってアイソトープ標識することもできる。基質のさらに必要な１つの特徴は、基質の切断生成物の少なくとも１種類が対象の呼気中に存在しなければならないことである。呼気中に存在する分子の例は、非限定的に、アンモニアと二酸化炭素を包含する。それ故、切断生成物の少なくとも１種類がアンモニア又は二酸化炭素であることが好ましい。Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種に関するこのような呼吸試験は多くの利点を有する。第一に、対象の呼気を分析することは、測定機器が切断生成物（単数又は複数種類）の存在を検出することができるように、対象が単に息を吹き込む又は空気を吐出しさえすればよいので、固有に非侵襲性である。第二に、切断生成物（単数又は複数種類）はＣｈｌａｍｙｄｉａ菌内の酵素の実際の活性を表すので、このような切断生成物（単数又は複数種類）の濃度は対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ菌の実際の活性を表す。第三に、対象の呼気をリアルタイムで分析することができる：即ち、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ活性が起こる時間とこのような活性が測定される時間との間に遅延は相対的に殆ど存在しない。したがって、このような呼吸試験は既に知られたＣｈｌａｍｙｄｉａ試験を凌駕して多くの利点を有する。実施例２Ｃｈｌａｍｙｄｉａを診断するための呼吸試験キット上記実施例１で述べたように、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種は呼吸試験を用いることによって対象において診断することができる。対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ種を診断するための呼吸試験キットは、実施例１に述べた方法の少なくとも１つを行うために必要なアイテム（単数又は複数）を包含する。例えば、このような呼吸試験キットは対象に投与すべき基質を包含することができる。このような基質は、非限定的に、上記実施例１で述べたような基質を包含する。もう一つの実施例として、呼吸試験キットは、基質の他に、基質を対象に投与するためのデバイスを包含することができる。例えば、基質を吸入すべきである場合には、このようなデバイスは喘息を有する患者に薬剤を投与するために用いられる種類の吸入デバイスであることができる。或いは、基質を経口投与すべきである場合には、このようなデバイスは例えば、経口投与用の計量シリンジ(met ered-dose syringe)であることができる。本発明を限られた数の実施態様に関して説明したが、本発明の多くの変更、改変及び他の応用がなされうることは理解されよう。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ

Claims

【特許請求の範囲】 1. 対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ種の診断方法であって、（ａ）Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種の酵素によって切断されて切断生成物を形成することができる基質を対象に投与する工程と；（ｂ）切断生成物の濃度が対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ種の活性を示す濃度になるための適当な時間後に、対象の呼気を分析する工程とを含む上記方法。 2.前記Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種がＣｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａｐｓｉｔｔａｃｉ及びＣｈｌａｍｙｄｉａｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓから成る群から選択される、請求項１記載の方法。 3. 前記Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種がＣｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅである、請求項２記載の方法。 4. 対象の前記呼気を赤外分光計と質量分析計とから成る群から選択される測定機器によって分析する、請求項１記載の方法。 5. 前記基質がアイソトープ標識される、請求項１記載の方法。 6. 前記切断生成物が二酸化炭素である、請求項５記載の方法。 7. 前記二酸化炭素が炭素−１３アイソトープ標識される、請求項６記載の方法。 8. 前記切断生成物がアンモニアである、請求項５記載の方法。 9. アンモニアが窒素−１５アイソトープ標識される、請求項８記載の方法。 10．対象におけるＣｈｌａｍｙｄｉａ種を診断するための呼吸試験キットであって、対象に投与するための基質を含み、前記基質がＣｈｌａｍｙｄｉａ種の酵素によって切断されて、対象の呼気中に存在する切断生成物を形成することができる上記キット。 11．前記Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種がＣｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａｐｓｉｔｔａｃｉ及びＣｈｌａｍｙｄｉａｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓから成る群から選択される、請求項１０記載の呼吸試験キット。 12．前記Ｃｈｌａｍｙｄｉａ種がＣｈｌａｍｙｄｉａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅである、請求項１１記載の呼吸試験キット。 13．前記基質がアイソトープ標識される、請求項１１記載の呼吸試験キット。