JP2001292794A - ＩＦＮ−γ産生誘導能の測定方法 - Google Patents
ＩＦＮ−γ産生誘導能の測定方法Info
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 本発明の目的は、ＩＦＮ−γ産生誘導能を測
定する方法を提供することである。 【解決手段】 抗原提示を受けたＴ細胞をＩＬ−２共存
下に培養し、ＩＦＮ−γ産生量を定量することからな
る、抗原物質のＩＦＮ−γ産生誘導能の測定方法。
定する方法を提供することである。 【解決手段】 抗原提示を受けたＴ細胞をＩＬ−２共存
下に培養し、ＩＦＮ−γ産生量を定量することからな
る、抗原物質のＩＦＮ−γ産生誘導能の測定方法。
Description
【０００１】本発明は、抗原物質のＩＦＮ−γ産生誘導
能の測定方法に関する。さらに詳しくは、ＩＬ−２を使
用することにより、感度良くＩＦＮ−γ産生誘導能を測
定する方法に関する。あるいは、ＩＬ−２を有効成分と
する、抗原提示を受けたＴ細胞の免疫機能の促進剤およ
びＩＬ−２を有効成分とする、癌免疫療法剤の併用治療
剤に関する。
能の測定方法に関する。さらに詳しくは、ＩＬ−２を使
用することにより、感度良くＩＦＮ−γ産生誘導能を測
定する方法に関する。あるいは、ＩＬ−２を有効成分と
する、抗原提示を受けたＴ細胞の免疫機能の促進剤およ
びＩＬ−２を有効成分とする、癌免疫療法剤の併用治療
剤に関する。
【０００２】細菌菌体成分などの抗原物質のＩＦＮ−γ
産生誘導能は、従来、脾細胞または末梢血単核球を抗原
物質でｉｎ ｖｉｔｒｏ刺激し、一定時間培養後の培養
上清中のＩＦＮ−γを測定することによって評価されて
いた。しかし、脾細胞を抗原物質で刺激すると、ナチュ
ラルキラー（ＮＫ）細胞が多量のＩＦＮ−γを産生する
ことがあり、抗原物質を取り込んだ樹状細胞によって活
性化されたＴ細胞によるＩＦＮ−γの産生と区別できな
いことがあった。そこで、ＮＫ細胞によるＩＦＮ−γ産
生とは区別し、活性化されたＴ細胞が産生するＩＦＮ−
γを測定する方法が望まれた。
産生誘導能は、従来、脾細胞または末梢血単核球を抗原
物質でｉｎ ｖｉｔｒｏ刺激し、一定時間培養後の培養
上清中のＩＦＮ−γを測定することによって評価されて
いた。しかし、脾細胞を抗原物質で刺激すると、ナチュ
ラルキラー（ＮＫ）細胞が多量のＩＦＮ−γを産生する
ことがあり、抗原物質を取り込んだ樹状細胞によって活
性化されたＴ細胞によるＩＦＮ−γの産生と区別できな
いことがあった。そこで、ＮＫ細胞によるＩＦＮ−γ産
生とは区別し、活性化されたＴ細胞が産生するＩＦＮ−
γを測定する方法が望まれた。
【０００３】本発明の目的は、抗原物質のＩＦＮ−γ産
生誘導能の測定方法、およびＩＦＮ−γ産生誘導物質の
スクリーニング方法を提供することである。さらに本発
明の目的は、ＩＬ−２を有効成分とする、抗原提示を受
けたＴ細胞の免疫機能の促進剤を提供することである。
生誘導能の測定方法、およびＩＦＮ−γ産生誘導物質の
スクリーニング方法を提供することである。さらに本発
明の目的は、ＩＬ−２を有効成分とする、抗原提示を受
けたＴ細胞の免疫機能の促進剤を提供することである。
【０００４】本発明者は、細菌菌体成分が皮内投与され
た場合、所属リンパ節中に含まれるＴ細胞によるＩＦＮ
−γ産生が誘導されることを見出した。また、この細菌
菌体成分が有するＩＦＮ−γ産生誘導はＩＬ−２存在下
でさらに増幅されることを見出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明の要旨は、以下のとおりである。 （１） 抗原提示を受けたＴ細胞をＩＬ−２共存下に培
養し、ＩＦＮ−γ産生量を定量することからなる、抗原
物質のＩＦＮ−γ産生誘導能の測定方法。 （２） 抗原提示を受けたＴ細胞が実験動物から得られ
ることを特徴とする、上記（１）記載の測定方法。 （３） 実験動物がマウスまたはラットである、上記
（２）の測定方法。 （４） 抗原提示を受けたＴ細胞が、樹状細胞から抗原
提示を受けたＴ細胞である、上記（１）〜（３）いずれ
か記載の測定方法。 （５） 樹状細胞がランゲルハンス細胞であり、Ｔ細胞
がリンパ節由来である、上記（４）記載の測定方法。 （６） 以下の順の行程からなる、上記（２）、（４）
または（５）いずれか記載の測定方法。 （ａ）抗原物質を実験動物に複数回皮内投与する （ｂ）投与部位の所属リンパ節を摘出する （ｃ）摘出した所属リンパ節からＴ細胞を含む細胞懸濁
液を調製し、ＩＬ−２を含む培地中で培養する （ｄ）培養上清中のＩＦＮ−γ量を定量する （７） 抗原物質が細菌菌体成分である、上記（１）〜
（６）いずれか記載の測定方法。 （８） 細菌菌体成分がＢＣＧ−ＣＷＳである、上記
（７）記載の測定方法。 （９） ＩＬ−２の濃度が１ｕｎｉｔ／ｍｌ以上であ
る、（１）〜（８）いずれか記載の測定方法。 （１０） 被検物質由来抗原の提示を受けたＴ細胞をＩ
Ｌ−２共存下に培養し、ＩＦＮ−γ産生を確認すること
からなる、ＩＦＮ−γ産生誘導物質のスクリーニング方
法。 （１１） 被検物質由来抗原の提示を受けたＴ細胞が実
験動物由来である、上記（１０）記載のスクリーニング
方法。 （１２） 実験動物がマウスまたはラットである、上記
（１１）記載のスクリーニング方法。 （１３） 被検物質由来抗原の提示を受けたＴ細胞が、
被検物質を取り込んだ樹状細胞から抗原提示を受けたＴ
細胞である、上記（９）〜（１２）いずれか記載のスク
リーニング方法。 （１４） 樹状細胞がランゲルハンス細胞であり、Ｔ細
胞がリンパ節由来である、上記（１３）記載のスクリー
ニング方法。 （１５） 以下の順の行程からなる、上記（１１）、
（１３）または（１４）いずれか記載のスクリーニング
方法。 （ａ）被検物質を実験動物に複数回皮内投与する （ｂ）投与部位の所属リンパ節を摘出する （ｃ）摘出した所属リンパ節からＴ細胞を含む細胞懸濁
液を調製し、ＩＬ−２を含む培地中で培養する （ｄ）培養上清中のＩＦＮ−γ量を定量する （１６） ＩＬ−２の濃度が１ｕｎｉｔ／ｍｌ以上であ
る、上記（１０）〜（１５）いずれか記載の測定方法。 （１７） ＩＬ−２を有効成分とする、抗原提示を受け
たＴ細胞の免疫機能の促進剤。 （１８） 抗原提示を受けたＴ細胞が、樹状細胞から抗
原提示を受けたＴ細胞である、上記（１７）記載の促進
剤。 （１９） 免疫機能がＩＦＮ−γを産生することであ
る、上記（１７）または（１８）記載の促進剤。 （２０） ＩＬ−２を有効成分とする、癌免疫療法剤と
の併用治療剤。
た場合、所属リンパ節中に含まれるＴ細胞によるＩＦＮ
−γ産生が誘導されることを見出した。また、この細菌
菌体成分が有するＩＦＮ−γ産生誘導はＩＬ−２存在下
でさらに増幅されることを見出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明の要旨は、以下のとおりである。 （１） 抗原提示を受けたＴ細胞をＩＬ−２共存下に培
養し、ＩＦＮ−γ産生量を定量することからなる、抗原
物質のＩＦＮ−γ産生誘導能の測定方法。 （２） 抗原提示を受けたＴ細胞が実験動物から得られ
ることを特徴とする、上記（１）記載の測定方法。 （３） 実験動物がマウスまたはラットである、上記
（２）の測定方法。 （４） 抗原提示を受けたＴ細胞が、樹状細胞から抗原
提示を受けたＴ細胞である、上記（１）〜（３）いずれ
か記載の測定方法。 （５） 樹状細胞がランゲルハンス細胞であり、Ｔ細胞
がリンパ節由来である、上記（４）記載の測定方法。 （６） 以下の順の行程からなる、上記（２）、（４）
または（５）いずれか記載の測定方法。 （ａ）抗原物質を実験動物に複数回皮内投与する （ｂ）投与部位の所属リンパ節を摘出する （ｃ）摘出した所属リンパ節からＴ細胞を含む細胞懸濁
液を調製し、ＩＬ−２を含む培地中で培養する （ｄ）培養上清中のＩＦＮ−γ量を定量する （７） 抗原物質が細菌菌体成分である、上記（１）〜
（６）いずれか記載の測定方法。 （８） 細菌菌体成分がＢＣＧ−ＣＷＳである、上記
（７）記載の測定方法。 （９） ＩＬ−２の濃度が１ｕｎｉｔ／ｍｌ以上であ
る、（１）〜（８）いずれか記載の測定方法。 （１０） 被検物質由来抗原の提示を受けたＴ細胞をＩ
Ｌ−２共存下に培養し、ＩＦＮ−γ産生を確認すること
からなる、ＩＦＮ−γ産生誘導物質のスクリーニング方
法。 （１１） 被検物質由来抗原の提示を受けたＴ細胞が実
験動物由来である、上記（１０）記載のスクリーニング
方法。 （１２） 実験動物がマウスまたはラットである、上記
（１１）記載のスクリーニング方法。 （１３） 被検物質由来抗原の提示を受けたＴ細胞が、
被検物質を取り込んだ樹状細胞から抗原提示を受けたＴ
細胞である、上記（９）〜（１２）いずれか記載のスク
リーニング方法。 （１４） 樹状細胞がランゲルハンス細胞であり、Ｔ細
胞がリンパ節由来である、上記（１３）記載のスクリー
ニング方法。 （１５） 以下の順の行程からなる、上記（１１）、
（１３）または（１４）いずれか記載のスクリーニング
方法。 （ａ）被検物質を実験動物に複数回皮内投与する （ｂ）投与部位の所属リンパ節を摘出する （ｃ）摘出した所属リンパ節からＴ細胞を含む細胞懸濁
液を調製し、ＩＬ−２を含む培地中で培養する （ｄ）培養上清中のＩＦＮ−γ量を定量する （１６） ＩＬ−２の濃度が１ｕｎｉｔ／ｍｌ以上であ
る、上記（１０）〜（１５）いずれか記載の測定方法。 （１７） ＩＬ−２を有効成分とする、抗原提示を受け
たＴ細胞の免疫機能の促進剤。 （１８） 抗原提示を受けたＴ細胞が、樹状細胞から抗
原提示を受けたＴ細胞である、上記（１７）記載の促進
剤。 （１９） 免疫機能がＩＦＮ−γを産生することであ
る、上記（１７）または（１８）記載の促進剤。 （２０） ＩＬ−２を有効成分とする、癌免疫療法剤と
の併用治療剤。
【０００５】本発明の第１の態様は、抗原提示を受けた
Ｔ細胞をＩＬ−２共存下に培養し、ＩＦＮ−γ産生量を
定量することからなる、抗原物質のＩＦＮ−γ産生誘導
能の測定方法である。抗原提示を受けたＴ細胞として
は、樹状細胞から抗原提示を受けたＴ細胞が挙げられ
る。樹状細胞から抗原提示を受けたＴ細胞とは、抗原物
質を取り込んだ、抗原提示細胞である樹状細胞から抗原
提示を受け、活性化されたＴ細胞をいう。該Ｔ細胞は、
実験動物から得ることができる。例えば、抗原物質を実
験動物に複数回皮内投与し、抗原を皮膚に存在する樹状
細胞であるランゲルハンス細胞に摂取させる。その後、
ランゲルハンス細胞は所属リンパ節に移動し、Ｔ細胞に
抗原提示を行うので、所属リンパ節を摘出し、活性化さ
れたＴ細胞を含む細胞懸濁液を調製することができる。
実験動物としては、具体的には、マウス、ラット等が挙
げられる。実験動物に皮内投与する部位としては、足蹠
および腹側部が挙げられる。活性化されたＴ細胞を含む
細胞懸濁液は、一定時間ＩＬ−２の存在下で培養し、培
養液中のＩＦＮ−γを定量する。ＩＬ−２は、使用され
る実験動物由来であることが好ましい。
Ｔ細胞をＩＬ−２共存下に培養し、ＩＦＮ−γ産生量を
定量することからなる、抗原物質のＩＦＮ−γ産生誘導
能の測定方法である。抗原提示を受けたＴ細胞として
は、樹状細胞から抗原提示を受けたＴ細胞が挙げられ
る。樹状細胞から抗原提示を受けたＴ細胞とは、抗原物
質を取り込んだ、抗原提示細胞である樹状細胞から抗原
提示を受け、活性化されたＴ細胞をいう。該Ｔ細胞は、
実験動物から得ることができる。例えば、抗原物質を実
験動物に複数回皮内投与し、抗原を皮膚に存在する樹状
細胞であるランゲルハンス細胞に摂取させる。その後、
ランゲルハンス細胞は所属リンパ節に移動し、Ｔ細胞に
抗原提示を行うので、所属リンパ節を摘出し、活性化さ
れたＴ細胞を含む細胞懸濁液を調製することができる。
実験動物としては、具体的には、マウス、ラット等が挙
げられる。実験動物に皮内投与する部位としては、足蹠
および腹側部が挙げられる。活性化されたＴ細胞を含む
細胞懸濁液は、一定時間ＩＬ−２の存在下で培養し、培
養液中のＩＦＮ−γを定量する。ＩＬ−２は、使用され
る実験動物由来であることが好ましい。
【０００６】本発明方法によって測定されるＩＦＮ−γ
の産生はＴ細胞が抗原物質により活性化されたことによ
る。以下にその理由を述べる。抗原物質としてミコバク
テリウム カルメッテ ゲラン細胞壁骨格（ＢＣＧ−ＣＷ
Ｓ）をマウス皮内に１回投与し、12時間後に摘出した所
属リンパ節細胞のＩＦＮ−γ産生はＩＬ−２存在下で認
められなかった。ＢＣＧ−ＣＷＳをマウス皮内に複数回
（day 0, 3, 6またはday 0, 7等）投与して初めて、最
終投与直後（約12時間後）に所属リンパ節細胞のＩＬ−
２存在下におけるＩＦＮ−γ産生を検出することができ
た。一般に特異免疫は繰り返し感作することで再度感作
した後の反応（サイトカイン産生等）が迅速化、増幅化
される。それに対し非特異免疫（ＮＫ細胞等による）は
以前の感作に関係なく、常に迅速に反応し、その強さは
感作歴によらない。この知見をもとに上記結果を解釈す
ると、本発明方法ではＮＫ細胞によるＩＦＮ−γ産生は
検出されず（単回投与では検出されなかったことか
ら）、複数回投与で見られるＩＦＮ−γ産生は特異免疫
反応、つまりＴ細胞によると考えられる。
の産生はＴ細胞が抗原物質により活性化されたことによ
る。以下にその理由を述べる。抗原物質としてミコバク
テリウム カルメッテ ゲラン細胞壁骨格（ＢＣＧ−ＣＷ
Ｓ）をマウス皮内に１回投与し、12時間後に摘出した所
属リンパ節細胞のＩＦＮ−γ産生はＩＬ−２存在下で認
められなかった。ＢＣＧ−ＣＷＳをマウス皮内に複数回
（day 0, 3, 6またはday 0, 7等）投与して初めて、最
終投与直後（約12時間後）に所属リンパ節細胞のＩＬ−
２存在下におけるＩＦＮ−γ産生を検出することができ
た。一般に特異免疫は繰り返し感作することで再度感作
した後の反応（サイトカイン産生等）が迅速化、増幅化
される。それに対し非特異免疫（ＮＫ細胞等による）は
以前の感作に関係なく、常に迅速に反応し、その強さは
感作歴によらない。この知見をもとに上記結果を解釈す
ると、本発明方法ではＮＫ細胞によるＩＦＮ−γ産生は
検出されず（単回投与では検出されなかったことか
ら）、複数回投与で見られるＩＦＮ−γ産生は特異免疫
反応、つまりＴ細胞によると考えられる。
【０００７】抗原物質としては、抗原性を有する物質で
あれば、特に限定はない。好適なものとして、例えば、
細菌菌体成分、植物性蛋白多糖体、ペプチド、醗酵産物
等が挙げられる。細菌菌体成分としては、ミコバクテリ
ウム カルメッテ ゲラン細胞壁骨格（ＢＣＧ−ＣＷ
Ｓ）、ノカルディア ルブラ細胞壁骨格（Ｎ−ＣＷ
Ｓ）、ＯＫ４３２、ＢＣＧ菌等が挙げられる。以下、抗
原物質が細菌菌体成分の場合を例にとり、リンパ節摘出
までの行程につき説明する。細菌菌体成分は、臨床にて
投与される状態と同じ状態で実験動物に皮内投与され
る。例えば、ＢＣＧ−ＣＷＳの場合には、スクワラン等
の油状物質を加えて被覆した後、水等を加えて乳化した
水中油型エマルションとして投与するのが好ましい。細
菌菌体成分の投与用量は、特に制限はないが、臨床にて
用いられる投与用量が好ましい。例えばＢＣＧ−ＣＷＳ
の場合には、３μｇ／回〜１００μｇ／回であり、好ま
しくは３０μｇ／回〜１００μｇ／回である。細菌菌体
成分は、複数回、例えば２回から４回を２日目から４日
目毎に投与される。好ましいのは、３日目毎に３回投与
するスケジュールである。最終投与後、約１２〜約１５
時間で所属リンパ節を摘出する。他の抗原物質を投与す
る場合の投与スケジュールも同様である。所属リンパ節
とは、投与部位を支配するリンパ節である。例えば、投
与部位が前足足蹠である場合、上腕リンパ節または腋窩
リンパ節が所属リンパ節となる。
あれば、特に限定はない。好適なものとして、例えば、
細菌菌体成分、植物性蛋白多糖体、ペプチド、醗酵産物
等が挙げられる。細菌菌体成分としては、ミコバクテリ
ウム カルメッテ ゲラン細胞壁骨格（ＢＣＧ−ＣＷ
Ｓ）、ノカルディア ルブラ細胞壁骨格（Ｎ−ＣＷ
Ｓ）、ＯＫ４３２、ＢＣＧ菌等が挙げられる。以下、抗
原物質が細菌菌体成分の場合を例にとり、リンパ節摘出
までの行程につき説明する。細菌菌体成分は、臨床にて
投与される状態と同じ状態で実験動物に皮内投与され
る。例えば、ＢＣＧ−ＣＷＳの場合には、スクワラン等
の油状物質を加えて被覆した後、水等を加えて乳化した
水中油型エマルションとして投与するのが好ましい。細
菌菌体成分の投与用量は、特に制限はないが、臨床にて
用いられる投与用量が好ましい。例えばＢＣＧ−ＣＷＳ
の場合には、３μｇ／回〜１００μｇ／回であり、好ま
しくは３０μｇ／回〜１００μｇ／回である。細菌菌体
成分は、複数回、例えば２回から４回を２日目から４日
目毎に投与される。好ましいのは、３日目毎に３回投与
するスケジュールである。最終投与後、約１２〜約１５
時間で所属リンパ節を摘出する。他の抗原物質を投与す
る場合の投与スケジュールも同様である。所属リンパ節
とは、投与部位を支配するリンパ節である。例えば、投
与部位が前足足蹠である場合、上腕リンパ節または腋窩
リンパ節が所属リンパ節となる。
【０００８】摘出したリンパ節から細胞懸濁液を調製す
る方法を以下に説明する。リンパ節摘出時から無菌的に
操作を行う。リンパ節を等張化緩衝液（例えば、ハンク
ス液等）に浸し、すりガラス等を用いてホモジナイズす
る。ホモジナイズ後、７０μｍのメッシュを通して組織
残渣を除去する。得られた細胞懸濁液を遠心する（例え
ば、２００ｘｇ、５分）。遠心後、上清を廃棄し、得ら
れた細胞のペレットを培養液に懸濁する。培養液として
は、１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）を含むＲＰＭＩ１６
４０培地が挙げられる。本培養液には、ＩＬ−２を添加
しておく。ＩＬ−２の濃度は、ＩＦＮ−γの産生量が検
出限界以上になる濃度であればよく、例えば、１ｕｎｉ
ｔ／ｍｌ以上であり、好ましくは３ｕｎｉｔ ／ｍｌ〜
１００ｕｎｉｔ ／ｍｌであり、さらに好ましくは１０
ｕｎｉｔ／ｍｌ〜１００ｕｎｉｔ／ｍｌである。ｕｎｉ
ｔは、国際単位を示す。細胞懸濁液を培養プレート、例
えば９６穴組織培養用プレートに播種し、３７℃、５％
二酸化炭素下で培養する。培養時間は、約２４時間〜約
４８時間であり、約４８時間が好ましい。培養終了後、
培養上清中のＩＦＮ−γ量を測定する。測定方法として
は、抗ＩＦＮ−γ抗体を用いるＥＬＩＳＡが挙げられ
る。ＥＬＩＳＡの検出感度は５ｐｇ／ｍｌ程度であるこ
とが好ましく、このようなＥＬＩＳＡのキットは市販さ
れている。
る方法を以下に説明する。リンパ節摘出時から無菌的に
操作を行う。リンパ節を等張化緩衝液（例えば、ハンク
ス液等）に浸し、すりガラス等を用いてホモジナイズす
る。ホモジナイズ後、７０μｍのメッシュを通して組織
残渣を除去する。得られた細胞懸濁液を遠心する（例え
ば、２００ｘｇ、５分）。遠心後、上清を廃棄し、得ら
れた細胞のペレットを培養液に懸濁する。培養液として
は、１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）を含むＲＰＭＩ１６
４０培地が挙げられる。本培養液には、ＩＬ−２を添加
しておく。ＩＬ−２の濃度は、ＩＦＮ−γの産生量が検
出限界以上になる濃度であればよく、例えば、１ｕｎｉ
ｔ／ｍｌ以上であり、好ましくは３ｕｎｉｔ ／ｍｌ〜
１００ｕｎｉｔ ／ｍｌであり、さらに好ましくは１０
ｕｎｉｔ／ｍｌ〜１００ｕｎｉｔ／ｍｌである。ｕｎｉ
ｔは、国際単位を示す。細胞懸濁液を培養プレート、例
えば９６穴組織培養用プレートに播種し、３７℃、５％
二酸化炭素下で培養する。培養時間は、約２４時間〜約
４８時間であり、約４８時間が好ましい。培養終了後、
培養上清中のＩＦＮ−γ量を測定する。測定方法として
は、抗ＩＦＮ−γ抗体を用いるＥＬＩＳＡが挙げられ
る。ＥＬＩＳＡの検出感度は５ｐｇ／ｍｌ程度であるこ
とが好ましく、このようなＥＬＩＳＡのキットは市販さ
れている。
【０００９】本発明の測定方法において、抗原物質を皮
内投与された実験動物から調製した所属リンパ節細胞懸
濁液の培養液にＩＬ−２を添加することが重要である。
ＩＬ−２無添加の場合、産生されるＩＦＮ−γ量は、Ｅ
ＬＩＳＡによる検出限界付近であるため、適切な測定が
行われない。ＩＬ−２を添加すると、産生されるＩＦＮ
−γ量は、添加されるＩＬ−２量に依存して増加した。
したがって、測定を実施するためには、一定量のＩＬ−
２を使用する。なお、抗原物質が皮内投与されていない
実験動物から調製したリンパ節細胞懸濁液では、ＩＦＮ
−γ量は検出限界以下であり、ＩＬ−２を添加してもＩ
ＦＮ−γは検出されなかった。
内投与された実験動物から調製した所属リンパ節細胞懸
濁液の培養液にＩＬ−２を添加することが重要である。
ＩＬ−２無添加の場合、産生されるＩＦＮ−γ量は、Ｅ
ＬＩＳＡによる検出限界付近であるため、適切な測定が
行われない。ＩＬ−２を添加すると、産生されるＩＦＮ
−γ量は、添加されるＩＬ−２量に依存して増加した。
したがって、測定を実施するためには、一定量のＩＬ−
２を使用する。なお、抗原物質が皮内投与されていない
実験動物から調製したリンパ節細胞懸濁液では、ＩＦＮ
−γ量は検出限界以下であり、ＩＬ−２を添加してもＩ
ＦＮ−γは検出されなかった。
【００１０】本発明の第２の態様は、被検物質由来抗原
の提示を受けたＴ細胞をＩＬ−２共存下に培養し、ＩＦ
Ｎ−γ産生を確認することからなる、ＩＦＮ−γ産生誘
導物質のスクリーニング方法である。被検物質由来抗原
の提示を受けたＴ細胞としては、被検物質を取り込んだ
樹状細胞から抗原提示を受けたＴ細胞が挙げられる。被
検物質を取り込んだ樹状細胞から抗原提示を受けたＴ細
胞の調製方法、Ｔ細胞を含む細胞懸濁液をＩＬ−２共存
下に培養する方法、培溶液中のＩＦＮ−γの測定方法
は、前記の第１の態様と同様である。被検物質として
は、特に限定はなく、細菌菌体成分、植物性蛋白多糖
体、ペプチド、醗酵産物等が挙げられる。
の提示を受けたＴ細胞をＩＬ−２共存下に培養し、ＩＦ
Ｎ−γ産生を確認することからなる、ＩＦＮ−γ産生誘
導物質のスクリーニング方法である。被検物質由来抗原
の提示を受けたＴ細胞としては、被検物質を取り込んだ
樹状細胞から抗原提示を受けたＴ細胞が挙げられる。被
検物質を取り込んだ樹状細胞から抗原提示を受けたＴ細
胞の調製方法、Ｔ細胞を含む細胞懸濁液をＩＬ−２共存
下に培養する方法、培溶液中のＩＦＮ−γの測定方法
は、前記の第１の態様と同様である。被検物質として
は、特に限定はなく、細菌菌体成分、植物性蛋白多糖
体、ペプチド、醗酵産物等が挙げられる。
【００１１】本発明の第３の態様は、ＩＬ−２を有効成
分とする、抗原提示を受けたＴ細胞の免疫機能の促進剤
である。抗原提示を受けたＴ細胞としては、樹状細胞か
ら抗原提示を受けたＴ細胞が挙げられる。Ｔ細胞の免疫
機能としては、例えばサイトカイン産生、特にＩＦＮ−
γ産生が挙げられる。樹状細胞から抗原提示を受けたＴ
細胞の培溶液中にＩＬ−２を共存させると、ＩＬ−２用
量依存的に、ＩＦＮ−γの産生が増加する。用いるＩＬ
−２は、Ｔ細胞起源と同種起源が好ましい。
分とする、抗原提示を受けたＴ細胞の免疫機能の促進剤
である。抗原提示を受けたＴ細胞としては、樹状細胞か
ら抗原提示を受けたＴ細胞が挙げられる。Ｔ細胞の免疫
機能としては、例えばサイトカイン産生、特にＩＦＮ−
γ産生が挙げられる。樹状細胞から抗原提示を受けたＴ
細胞の培溶液中にＩＬ−２を共存させると、ＩＬ−２用
量依存的に、ＩＦＮ−γの産生が増加する。用いるＩＬ
−２は、Ｔ細胞起源と同種起源が好ましい。
【００１２】本発明の第４の態様は、ＩＬ−２を有効成
分とする、癌免疫療法剤との併用治療剤である。本発明
の併用治療剤の有効成分としてのＩＬ−２は、ＩＬ−２
様活性、すなわちＴ細胞を継代維持する作用を有する物
質であればいずれでもよい。好ましくは、ヒトＩＬ−２
が挙げられる。本発明の併用治療剤は、有効成分として
ＩＬ−２を含有していればよく、公知のいかなる製剤学
的製造方法によっても製造することができる。本発明の
併用治療剤の有効成分であるＩＬ−２は、薬剤として一
般的に用いられる適当な担体または媒体、さらには必要
に応じて賦形剤、着色剤、乳化剤、懸濁剤、界面活性
剤、溶解補助剤、安定化剤、または保存剤等と適宜組み
合わせて、生体に効果的に投与するのに適した注射剤、
経鼻吸収剤、経皮吸収剤、経口剤等の医薬用製剤に調製
することができる。製剤として注射剤が好ましい。本発
明の併用治療剤は、例えばＩＬ−２タンパク質量として
１日約０．００１〜１００μｇ／ｋｇを１日に１回〜６
回に分けて動脈内注射、静脈内注射、筋肉内注射、皮下
注射等の方法によって投与することができる。本発明の
併用治療剤と併用される癌免疫療法剤として、例えば、
細菌菌体成分、癌ワクチン、植物性蛋白多糖体等が挙げ
られる。細菌菌体成分としては、ミコバクテリウム カ
ルメッテ ゲラン細胞壁骨格（ＢＣＧ−ＣＷＳ）、ノカ
ルディアルブラ細胞壁骨格（Ｎ−ＣＷＳ）、ＯＫ４３
２、ＢＣＧ菌等が挙げられる。
分とする、癌免疫療法剤との併用治療剤である。本発明
の併用治療剤の有効成分としてのＩＬ−２は、ＩＬ−２
様活性、すなわちＴ細胞を継代維持する作用を有する物
質であればいずれでもよい。好ましくは、ヒトＩＬ−２
が挙げられる。本発明の併用治療剤は、有効成分として
ＩＬ−２を含有していればよく、公知のいかなる製剤学
的製造方法によっても製造することができる。本発明の
併用治療剤の有効成分であるＩＬ−２は、薬剤として一
般的に用いられる適当な担体または媒体、さらには必要
に応じて賦形剤、着色剤、乳化剤、懸濁剤、界面活性
剤、溶解補助剤、安定化剤、または保存剤等と適宜組み
合わせて、生体に効果的に投与するのに適した注射剤、
経鼻吸収剤、経皮吸収剤、経口剤等の医薬用製剤に調製
することができる。製剤として注射剤が好ましい。本発
明の併用治療剤は、例えばＩＬ−２タンパク質量として
１日約０．００１〜１００μｇ／ｋｇを１日に１回〜６
回に分けて動脈内注射、静脈内注射、筋肉内注射、皮下
注射等の方法によって投与することができる。本発明の
併用治療剤と併用される癌免疫療法剤として、例えば、
細菌菌体成分、癌ワクチン、植物性蛋白多糖体等が挙げ
られる。細菌菌体成分としては、ミコバクテリウム カ
ルメッテ ゲラン細胞壁骨格（ＢＣＧ−ＣＷＳ）、ノカ
ルディアルブラ細胞壁骨格（Ｎ−ＣＷＳ）、ＯＫ４３
２、ＢＣＧ菌等が挙げられる。
【００１３】
【実施例】実施例１ ＩＬ−２濃度の影響 ミコバクテリウム カルメッテ ゲラン（ＢＣＧ）の細胞
壁骨格（ＣＷＳ）を文献記載の方法（Ｔｈｏｍａｓ
Ｊ． Ｍｅｙｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃ
ａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ． ５２：１０３−１１１，１９
７４）に基づいて調製した。ＢＣＧ−ＣＷＳ ２ｍｇを
ポッター型ホモジナイザーに取り、９．６μｌのスクワ
ランを加えて１２００ｒｐｍにて１分間ホモジナイズし
た後、２ｍｌの０．２％Ｔｗｅｅｎ８０を含んだ生理食
塩水を加えて３０００ｒｐｍにて８分間ホモジナイズし
て乳化したものを調製した。このＢＣＧ−ＣＷＳの水中
油型エマルションを含む液５０μｌを、８週齢雌性のＣ
５７ＢＬ／６Ｎマウス（日本チャールスリバーより購
入）の前足蹠に３日目毎に３回投与し、最終投与１２時
間後に所属リンパ節である上腕および腋窩リンパ節を摘
出した。リンパ節をすりガラスを用いてハンクス溶液中
でホモジナイズし、７０μｍメッシュを通して組織残渣
を除去して細胞懸濁液を調製した。遠心分離（２００ｘ
ｇ、５分）にて細胞を沈殿画分に回収し、１０％のウシ
胎児血清を含むＲＰＭＩ１６４０培地に懸濁した。血球
計算盤を用いて細胞濃度を求め、２．５ Ｘ １０６ｃ
ｅｌｌｓ／ｍｌに調製し、マウスＩＬ−２を０，１，
３，１０，３０，１００，３００ｕｎｉｔ／ｍｌになる
ように添加した。９６穴組織培養用プレートにウェルあ
たり０．２ｍｌずつ播種し、４８時間、３７℃、５％二
酸化炭素存在下で培養した。また、ＢＣＧ−ＣＷＳ無投
与のマウスから、上記と同様にして細胞懸濁液を調製
し、培養した。培養上清中のＩＦＮ−γ濃度をマウスＩ
ＦＮ−γ ＥＬＩＳＡキット（ジェンザイム社）を用い
て測定した。その結果、表１の値を得た。
壁骨格（ＣＷＳ）を文献記載の方法（Ｔｈｏｍａｓ
Ｊ． Ｍｅｙｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃ
ａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ． ５２：１０３−１１１，１９
７４）に基づいて調製した。ＢＣＧ−ＣＷＳ ２ｍｇを
ポッター型ホモジナイザーに取り、９．６μｌのスクワ
ランを加えて１２００ｒｐｍにて１分間ホモジナイズし
た後、２ｍｌの０．２％Ｔｗｅｅｎ８０を含んだ生理食
塩水を加えて３０００ｒｐｍにて８分間ホモジナイズし
て乳化したものを調製した。このＢＣＧ−ＣＷＳの水中
油型エマルションを含む液５０μｌを、８週齢雌性のＣ
５７ＢＬ／６Ｎマウス（日本チャールスリバーより購
入）の前足蹠に３日目毎に３回投与し、最終投与１２時
間後に所属リンパ節である上腕および腋窩リンパ節を摘
出した。リンパ節をすりガラスを用いてハンクス溶液中
でホモジナイズし、７０μｍメッシュを通して組織残渣
を除去して細胞懸濁液を調製した。遠心分離（２００ｘ
ｇ、５分）にて細胞を沈殿画分に回収し、１０％のウシ
胎児血清を含むＲＰＭＩ１６４０培地に懸濁した。血球
計算盤を用いて細胞濃度を求め、２．５ Ｘ １０６ｃ
ｅｌｌｓ／ｍｌに調製し、マウスＩＬ−２を０，１，
３，１０，３０，１００，３００ｕｎｉｔ／ｍｌになる
ように添加した。９６穴組織培養用プレートにウェルあ
たり０．２ｍｌずつ播種し、４８時間、３７℃、５％二
酸化炭素存在下で培養した。また、ＢＣＧ−ＣＷＳ無投
与のマウスから、上記と同様にして細胞懸濁液を調製
し、培養した。培養上清中のＩＦＮ−γ濃度をマウスＩ
ＦＮ−γ ＥＬＩＳＡキット（ジェンザイム社）を用い
て測定した。その結果、表１の値を得た。
【００１４】
【表１】
【００１５】実施例２ ＢＣＧ−ＣＷＳのＩＦＮ−γ誘導能の測定 ミコバクテリウム カルメッテ ゲラン（ＢＣＧ）の細胞
壁骨格（ＣＷＳ）を文献記載の方法（Ｔｈｏｍａｓ
Ｊ． Ｍｅｙｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃ
ａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ． ５２：１０３−１１１，１９
７４）に基づいて調製した。ＢＣＧ−ＣＷＳ ２ｍｇを
ポッター型ホモジナイザーに取り、９．６μｌのスクワ
ランを加えて１２００ｒｐｍにて１分間ホモジナイズし
た後、２ｍｌの０．２％ Ｔｗｅｅｎ８０を含んだ生理
食塩水を加えて３０００ｒｐｍにて８分間ホモジナイズ
して乳化し、水中油型エマルションを調製した。このＢ
ＣＧ−ＣＷＳの水中油型エマルションを含む液５０μｌ
を、８週齢雌性のＣ５７ＢＬ／６Ｎマウス（日本チャー
ルスリバーより購入）３匹の前足蹠に３日目毎に３回投
与した。最終投与後１２時間後に所属リンパ節である上
腕および腋窩リンパ節を摘出した。以下、リンパ節細胞
は個体毎に調製した。摘出したリンパ節をすりガラスを
用いてハンクス溶液中でホモジナイズした。ホモジナイ
ズ後、７０μｍメッシュを通して組織残渣を除去して細
胞懸濁液を調製した。遠心分離後（２００ｘｇ、５
分）、細胞を沈殿画分として回収した。本細胞を、１０
％のウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ１６４０培地に懸濁し
た。血球計算盤を用いて細胞濃度を求め、２．５ Ｘ
１０６ｃｅｌｌｓ／ｍｌに調製し、マウスＩＬ−２を１
０ｕｎｉｔ／ｍｌになるように添加した。細胞懸濁液を
９６穴組織培養用プレートにウェルあたり０．２ｍｌず
つ播種し、３７℃ ５％二酸化炭素存在下で４８時間培
養した。培養上清中のＩＦＮ−γ濃度をマウスＩＦＮ−
γ ＥＬＩＳＡキット（ジェンザイム社）を用いて測定
した。その結果、表２の値を得た。
壁骨格（ＣＷＳ）を文献記載の方法（Ｔｈｏｍａｓ
Ｊ． Ｍｅｙｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃ
ａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ． ５２：１０３−１１１，１９
７４）に基づいて調製した。ＢＣＧ−ＣＷＳ ２ｍｇを
ポッター型ホモジナイザーに取り、９．６μｌのスクワ
ランを加えて１２００ｒｐｍにて１分間ホモジナイズし
た後、２ｍｌの０．２％ Ｔｗｅｅｎ８０を含んだ生理
食塩水を加えて３０００ｒｐｍにて８分間ホモジナイズ
して乳化し、水中油型エマルションを調製した。このＢ
ＣＧ−ＣＷＳの水中油型エマルションを含む液５０μｌ
を、８週齢雌性のＣ５７ＢＬ／６Ｎマウス（日本チャー
ルスリバーより購入）３匹の前足蹠に３日目毎に３回投
与した。最終投与後１２時間後に所属リンパ節である上
腕および腋窩リンパ節を摘出した。以下、リンパ節細胞
は個体毎に調製した。摘出したリンパ節をすりガラスを
用いてハンクス溶液中でホモジナイズした。ホモジナイ
ズ後、７０μｍメッシュを通して組織残渣を除去して細
胞懸濁液を調製した。遠心分離後（２００ｘｇ、５
分）、細胞を沈殿画分として回収した。本細胞を、１０
％のウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ１６４０培地に懸濁し
た。血球計算盤を用いて細胞濃度を求め、２．５ Ｘ
１０６ｃｅｌｌｓ／ｍｌに調製し、マウスＩＬ−２を１
０ｕｎｉｔ／ｍｌになるように添加した。細胞懸濁液を
９６穴組織培養用プレートにウェルあたり０．２ｍｌず
つ播種し、３７℃ ５％二酸化炭素存在下で４８時間培
養した。培養上清中のＩＦＮ−γ濃度をマウスＩＦＮ−
γ ＥＬＩＳＡキット（ジェンザイム社）を用いて測定
した。その結果、表２の値を得た。
【００１６】
【表２】
【００１７】実施例３ ＩＦＮ−γ産生誘導物質のスクリーニング 被検物質を含む液５０μｌを、８週齢雌性のＣ５７ＢＬ
／６Ｎマウス（日本チャールスリバーより購入）の前足
蹠に３日目毎に３回投与する。最終投与後１２時間後に
所属リンパ節である上腕および腋窩リンパ節を摘出す
る。また、被検物質を投与していないマウスから上腕お
よび腋窩リンパ節を摘出する。それぞれ、摘出したリン
パ節をすりガラスを用いてハンクス溶液中でホモジナイ
ズする。ホモジナイズ後、７０μｍメッシュを通して組
織残渣を除去して細胞懸濁液を調製する。遠心分離後
（２００ｘｇ、５分）、細胞を沈殿画分として回収す
る。本細胞を、１０％のウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ１
６４０培地に懸濁する。血球計算盤を用いて細胞濃度を
求め、２．５ Ｘ １０６ｃｅｌｌｓ／ｍｌに調製し、
マウスＩＬ−２を１０ｕｎｉｔ／ｍｌになるように添加
する。細胞懸濁液を９６穴組織培養用プレートにウェル
あたり０．２ｍｌずつ播種し、３７℃ ５％二酸化炭素
存在下で４８時間培養する。培養上清中のＩＦＮ−γ濃
度をマウスＩＦＮ−γ ＥＬＩＳＡキット（ジェンザイ
ム社）を用いて測定する。被検物質を投与した場合のＩ
ＦＮ−γ量と被検物質を投与しない場合のＩＦＮ−γ量
を比較し、投与によってＩＦＮ−γ量の増強が認められ
る物質を陽性物質とする。
／６Ｎマウス（日本チャールスリバーより購入）の前足
蹠に３日目毎に３回投与する。最終投与後１２時間後に
所属リンパ節である上腕および腋窩リンパ節を摘出す
る。また、被検物質を投与していないマウスから上腕お
よび腋窩リンパ節を摘出する。それぞれ、摘出したリン
パ節をすりガラスを用いてハンクス溶液中でホモジナイ
ズする。ホモジナイズ後、７０μｍメッシュを通して組
織残渣を除去して細胞懸濁液を調製する。遠心分離後
（２００ｘｇ、５分）、細胞を沈殿画分として回収す
る。本細胞を、１０％のウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ１
６４０培地に懸濁する。血球計算盤を用いて細胞濃度を
求め、２．５ Ｘ １０６ｃｅｌｌｓ／ｍｌに調製し、
マウスＩＬ−２を１０ｕｎｉｔ／ｍｌになるように添加
する。細胞懸濁液を９６穴組織培養用プレートにウェル
あたり０．２ｍｌずつ播種し、３７℃ ５％二酸化炭素
存在下で４８時間培養する。培養上清中のＩＦＮ−γ濃
度をマウスＩＦＮ−γ ＥＬＩＳＡキット（ジェンザイ
ム社）を用いて測定する。被検物質を投与した場合のＩ
ＦＮ−γ量と被検物質を投与しない場合のＩＦＮ−γ量
を比較し、投与によってＩＦＮ−γ量の増強が認められ
る物質を陽性物質とする。
【００１８】実施例４ 抗腫瘍作用におけるＩＬ−２の併用効果 マウス肺癌株３ＬＬをＣ５７ＢＬ／６Ｎマウス（雌性、
８週齢：日本チャールス・リバーより購入）の腹側部皮
内に３ x１０５個移植する（day 0）。一群８匹とし、d
ay 1, 4, 7にＢＣＧ−ＣＷＳを移植部位に投与して腫瘍
の増殖抑制で抗腫瘍効果を評価する。投与量は1回につ
きマウスあたり100, 30, 10μｇとする（３用量）。こ
のとき、day 1からday 12まで連日１日に2回ヒト組換え
型インターロイキン２（ｈｒＩＬ−２）を腹腔内に投与
する。ヒト組換え型インターロイキン２は武田薬品
（株）から購入できる。投与量は1回あたり10,000〜20,
000ｕｎｉｔとする。本実験でｈｒＩＬ−２のみの群、
ＢＣＧ−ＣＷＳのみの群を設け、両者の併用効果を評価
することができる。
８週齢：日本チャールス・リバーより購入）の腹側部皮
内に３ x１０５個移植する（day 0）。一群８匹とし、d
ay 1, 4, 7にＢＣＧ−ＣＷＳを移植部位に投与して腫瘍
の増殖抑制で抗腫瘍効果を評価する。投与量は1回につ
きマウスあたり100, 30, 10μｇとする（３用量）。こ
のとき、day 1からday 12まで連日１日に2回ヒト組換え
型インターロイキン２（ｈｒＩＬ−２）を腹腔内に投与
する。ヒト組換え型インターロイキン２は武田薬品
（株）から購入できる。投与量は1回あたり10,000〜20,
000ｕｎｉｔとする。本実験でｈｒＩＬ−２のみの群、
ＢＣＧ−ＣＷＳのみの群を設け、両者の併用効果を評価
することができる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ１２Ｒ 1:91） Ａ６１Ｋ 37/66 Ｃ (72)発明者 柏▲崎▼ 安男 大阪市此花区春日出中３丁目１番98号 住 友製薬株式会社内 (72)発明者 藤井 哲也 大阪市此花区春日出中３丁目１番98号 住 友製薬株式会社内 (72)発明者 福島 晃久 大阪市此花区春日出中３丁目１番98号 住 友製薬株式会社内 Ｆターム(参考） 4B063 QA01 QA08 QA18 QQ02 QQ08 QQ79 QR48 QR69 QR72 QR77 QS20 4C084 AA02 DA14 DA24 NA14 ZB092 ZB262 ZC412
Claims (20)
- 【請求項１】 抗原提示を受けたＴ細胞をＩＬ−２共存
下に培養し、ＩＦＮ−γ産生量を定量することからな
る、抗原物質のＩＦＮ−γ産生誘導能の測定方法。 - 【請求項２】 抗原提示を受けたＴ細胞が実験動物から
得られることを特徴とする、請求項１記載の測定方法。 - 【請求項３】 実験動物がマウスまたはラットである請
求項２記載の測定方法。 - 【請求項４】 抗原提示を受けたＴ細胞が、樹状細胞か
ら抗原提示を受けたＴ細胞である、請求項１〜３いずれ
か記載の測定方法。 - 【請求項５】 樹状細胞がランゲルハンス細胞であり、
Ｔ細胞がリンパ節由来である、請求項４記載の測定方
法。 - 【請求項６】 以下の順の行程からなる請求項２、４ま
たは５いずれか記載の測定方法。 （ａ）抗原物質を実験動物に複数回皮内投与する （ｂ）投与部位の所属リンパ節を摘出する （ｃ）摘出した所属リンパ節からＴ細胞を含む細胞懸濁
液を調製し、ＩＬ−２を含む培地中で培養する （ｄ）培養上清中のＩＦＮ−γ量を定量する - 【請求項７】 抗原物質が細菌菌体成分である、請求項
１〜６いずれか記載の測定方法。 - 【請求項８】 細菌菌体成分がＢＣＧ−ＣＷＳである、
請求項７記載の測定方法。 - 【請求項９】 ＩＬ−２の濃度が１ｕｎｉｔ／ｍｌ以上
である、請求項１〜８いずれか記載の測定方法。 - 【請求項１０】 被検物質由来抗原の提示を受けたＴ細
胞をＩＬ−２共存下に培養し、ＩＦＮ−γ産生を確認す
ることからなる、ＩＦＮ−γ産生誘導物質のスクリーニ
ング方法。 - 【請求項１１】 被検物質由来抗原の提示を受けたＴ細
胞が実験動物由来である、請求項１０記載のスクリーニ
ング方法。 - 【請求項１２】 実験動物がマウスまたはラットである
請求項１１記載のスクリーニング方法。 - 【請求項１３】 被検物質由来抗原の提示を受けたＴ細
胞が、被検物質を取り込んだ樹状細胞から抗原提示を受
けたＴ細胞である、請求項１０〜１２いずれか記載のス
クリーニング方法。 - 【請求項１４】 樹状細胞がランゲルハンス細胞であ
り、Ｔ細胞がリンパ節由来である、請求項１３記載のス
クリーニング方法。 - 【請求項１５】 以下の順の行程からなる請求項１１、
１３または１４いずれか記載のスクリーニング方法。 （ａ）被検物質を実験動物に複数回皮内投与する （ｂ）投与部位の所属リンパ節を摘出する （ｃ）摘出した所属リンパ節からＴ細胞を含む細胞懸濁
液を調製し、ＩＬ−２を含む培地中で培養する （ｄ）培養上清中のＩＦＮ−γ量を定量する - 【請求項１６】 ＩＬ−２の濃度が１ｕｎｉｔ／ｍｌ以
上である、請求項１０〜１５いずれか記載のスクリーニ
ング方法。 - 【請求項１７】 ＩＬ−２を有効成分とする、抗原提示
を受けたＴ細胞の免疫機能の促進剤。 - 【請求項１８】 抗原提示を受けたＴ細胞が、樹状細胞
から抗原提示を受けたＴ細胞である、請求項１７記載の
促進剤。 - 【請求項１９】 免疫機能がＩＦＮ−γを産生すること
である、請求項１７または１８記載の促進剤。 - 【請求項２０】 ＩＬ−２を有効成分とする、癌免疫療
法剤との併用治療剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000111671A JP2001292794A (ja) | 2000-04-13 | 2000-04-13 | ＩＦＮ−γ産生誘導能の測定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000111671A JP2001292794A (ja) | 2000-04-13 | 2000-04-13 | ＩＦＮ−γ産生誘導能の測定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2001292794A true JP2001292794A (ja) | 2001-10-23 |
Family
ID=18623963
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2000111671A Pending JP2001292794A (ja) | 2000-04-13 | 2000-04-13 | ＩＦＮ−γ産生誘導能の測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2001292794A (ja) |
-
2000
- 2000-04-13 JP JP2000111671A patent/JP2001292794A/ja active Pending
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