JP2001181632A - Antioxidant - Google Patents

Antioxidant

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JP2001181632A
JP2001181632A JP2000312312A JP2000312312A JP2001181632A JP 2001181632 A JP2001181632 A JP 2001181632A JP 2000312312 A JP2000312312 A JP 2000312312A JP 2000312312 A JP2000312312 A JP 2000312312A JP 2001181632 A JP2001181632 A JP 2001181632A
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JP
Japan
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antioxidant
extract
water
vivo
olive
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Pending
Application number
JP2000312312A
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Japanese (ja)
Inventor
Noriyasu Kuno
憲康 久野
Miho Matsumoto
美保 松本
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Nisshin Oil Mills Ltd
Original Assignee
Nisshin Oil Mills Ltd
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Publication date
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To obtain an antioxidant having strong anti-oxidizing effect, high safety to the human body and a wide use. SOLUTION: This antioxidant comprises an extract of an olive plant (except leaf, hereinafter the same) as an active ingredient. The extract can be obtained by extracting an olive plant and/or a product obtained in an olive oil production process with water and/or an organic solvent. Further, the extract is concentrated and/or fractioned/purified to improve the effect. Especially, the extract has an anti-oxidizing effect such as preservation stability improving effect and anti-oxidizing effect in vivo such as prevention of various diseases and anti-aging effect.

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【0001】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は、オリーブ(Ole
a europaea L.)植物から得られる抽出物
を含有する抗酸化剤に関し、抗酸化効果、特には製品の
保存安定性の向上効果等の優れた酸化防止効果や、各種
疾病予防効果や抗老化効果等の優れた生体内抗酸化効果
を有する抗酸化剤に関するものである。
The present invention relates to an olive (Ole).
a europaea L .; ) With respect to antioxidants containing extracts obtained from plants, they have excellent antioxidant effects, especially excellent antioxidant effects such as improving storage stability of products, and various disease preventing effects and antiaging effects. The present invention relates to an antioxidant having an antioxidant effect in a living body.

【0002】[0002]

【従来の技術】油脂、とりわけ不飽和脂肪酸を含む油脂
は酸化されやすく、品質劣化、栄養性・機能性低下の大
きな原因となる。不飽和脂肪酸の中でもリノール酸、リ
ノレン酸およびアラキドン酸は必須脂肪酸として栄養素
として重要な役割を果たしている。また近年、EPA,
DHAなど高度不飽和脂肪酸の生理活性に注目され、こ
れらを含む多くの飲食物などが上市されている。しかし
これらの不飽和脂肪酸は極めて酸化安定性に欠けるた
め、抗酸化剤の添加が必要となるが、長期間保存に有効
な抗酸化剤は今のところ無いのが現状である。
2. Description of the Related Art Fats and oils, particularly fats and oils containing unsaturated fatty acids, are easily oxidized, and are the major causes of deterioration in quality and nutritional and functional properties. Among unsaturated fatty acids, linoleic acid, linolenic acid and arachidonic acid play an important role as essential fatty acids as nutrients. In recent years, EPA,
Attention has been paid to the physiological activities of polyunsaturated fatty acids such as DHA, and many foods and drinks containing these have been put on the market. However, since these unsaturated fatty acids have extremely low oxidative stability, it is necessary to add an antioxidant. However, at present, there is no antioxidant effective for long-term storage.

【0003】生物は、酸素を利用することによって生存
に必要なエネルギーを効率的に得ている。しかしなが
ら、このようなエネルギー代謝のうち酸素が水に変換さ
れる過程で、中間体として活性酸素種が生じる。一般に
この活性酸素種としては、マクロファージの刺激などに
よって放出されるスーパーオキシド、放射線の被爆など
によって生成されるヒドロキシラジカルなどが知られて
いる。これらの活性酸素種は過度の放射線や紫外線の照
射、化学物質やタバコの摂取等の外的誘因と虚血再還
流、炎症、ストレス、老化等の内的要因が原因となって
生成される。このようにして生体内で過剰に生成された
活性酸素種は、一般に化学的反応性が高く、生体内で隣
接する脂質や核酸、蛋白質等の成分と容易に反応し、さ
まざまな疾病に繋がる酸化的障害をもたらす。活性酸素
種の一種であるスーパーオキシドは、さまざまな疾病と
深い関わりがあることが明らかにされており、例えば動
脈中のLDLは、スーパーオキシドによって酸化されて
泡沫細胞を形成し、動脈硬化の原因を発生する。また放
射線の照射によりもたらされるヒドロキシラジカルの産
生は、発癌などの深刻な障害を生体に与える。(Hal
liwell B. and Gutteridge
M.C.、 Biochem.J. 219、1-1
4、(1984))。
[0003] Living organisms efficiently obtain the energy necessary for survival by utilizing oxygen. However, in the process of converting oxygen into water in such energy metabolism, reactive oxygen species are generated as an intermediate. In general, as the reactive oxygen species, superoxide released by stimulation of macrophages and the like, and hydroxyl radical generated by radiation exposure and the like are known. These reactive oxygen species are generated due to external triggers such as excessive radiation or ultraviolet irradiation, intake of chemical substances and tobacco, and internal factors such as ischemia reperfusion, inflammation, stress, and aging. Reactive oxygen species generated in excess in the living body in this way generally have high chemical reactivity, easily react with neighboring components such as lipids, nucleic acids, and proteins in the living body, resulting in oxidation that leads to various diseases. Cause disability. Superoxide, a type of reactive oxygen species, has been shown to be closely related to various diseases. For example, LDL in arteries is oxidized by superoxide to form foam cells, which are the causes of arteriosclerosis. Occurs. In addition, the production of hydroxyl radicals caused by irradiation with radiation causes serious obstacles such as carcinogenesis to living organisms. (Hal
liwell B. and Gutteridge
M. C. Biochem. J. 219, 1-1
4, (1984)).

【0004】このような活性酸素種の生体に対する毒性
が明らかになるにつれ、これらを効率的に消去する活性
を有する活性酸素種消去物質等の抗酸化剤は、生体内ま
たは食品や医薬品、農薬等に含まれる成分の酸化的劣化
の防御剤として有用であり、食品産業、特に水産加工
品、健康食品、栄養食品のほか、医薬品・農薬分野や化
粧品分野において実利的な利用が期待されているもので
ある。
[0004] As the toxicity of such active oxygen species to living organisms becomes apparent, antioxidants such as active oxygen species eliminating substances having the activity of efficiently eliminating them are used in vivo or in foods, pharmaceuticals, agricultural chemicals and the like. Is useful as a protective agent against the oxidative degradation of components contained in foodstuffs, and is expected to have practical use in the food industry, especially processed fishery products, health foods, nutritional foods, as well as in the fields of pharmaceuticals, agricultural chemicals, and cosmetics It is.

【0005】近年、抗酸化剤に限らず、化学合成品から
なる食品添加物の安全性の問題に対する消費者の意識も
高まっており、例えば、BHA(ブチルヒドロキシルア
ニソール)やBHT(ブチルヒドロキシトルエン)等の
化学合成抗酸化剤は、その使用が避けられる傾向にあ
る。また、他の抗酸化剤も、植物油由来のトコフェロー
ル類など油溶性(非水溶性)のものが多く、実際の使用
に際しては制約を受けることが多い。
[0005] In recent years, consumers are becoming more conscious of the safety issues of food additives made of chemically synthesized products, not limited to antioxidants, such as BHA (butylhydroxyanisole) and BHT (butylhydroxytoluene). And the like, the use of chemically synthesized antioxidants tends to be avoided. Many other antioxidants are oil-soluble (water-insoluble) such as tocopherols derived from vegetable oils, and are often restricted in actual use.

【0006】このような中、これまでさまざまな抗酸化
剤が、主に天然物由来の原料から抽出され、その応用が
検討されている。例えばスーパーオキシド消去活性を有
するものとして酵素蛋白であるスーパーオキシドジスム
ターゼ(SOD)等が、ヒドロキシラジカル消去活性を
有するものとしてマンニトール、トリプトファン、ギ酸
等が挙げられている(例えば、大柳善彦「SODと活性
酸素種調節剤-その薬理的作用と臨床応用」、第224
〜228頁、日本医学館、1989年)。
[0006] Under such circumstances, various antioxidants have been extracted mainly from raw materials derived from natural products, and their applications have been studied. For example, superoxide dismutase (SOD), which is an enzyme protein, having superoxide scavenging activity, and mannitol, tryptophan, formic acid, etc., having hydroxyl radical scavenging activity are mentioned (for example, Yoshihiko Oyanagi, "SOD and activity"). Oxygen Species Regulator-Its Pharmacological Action and Clinical Application ", 224
228 pages, The Japan Medical Museum, 1989).

【0007】しかしながら、SODは酵素タンパクであ
るため、熱などに対する安定性が乏しく、また経口投与
した場合、投与した酵素のほとんどは消化・排泄されて
しまい、その実効力は極めて低かった。また、ヒドロキ
シラジカルを効率的に消去できる実用的なヒドロキシラ
ジカル消去剤は現在のところ少ない。従って、これら抗
酸化剤を工業的に多量に、かつ安定に入手することは困
難なのが現状である。また、通常、前述のSODはスー
パーオキシドに対してのみ消去効果を有し、ヒドロキシ
ラジカルに対しては全く効果がない。同様にマンニトー
ルはスーパーオキシドを消去することができない。
However, since SOD is an enzyme protein, it has poor stability against heat and the like, and when administered orally, most of the administered enzyme is digested and excreted, and its effectiveness is extremely low. At present, there are few practical hydroxyl radical scavengers capable of efficiently scavenging hydroxy radicals. Therefore, at present, it is difficult to industrially obtain these antioxidants in large quantities and stably. Usually, the above-mentioned SOD has an erasing effect only on superoxide and has no effect on hydroxy radicals. Similarly, mannitol cannot scavenge superoxide.

【0008】消費者からの要望が強い、天然物由来で抗
酸化効果を有する原料としては、例えば、ゴマ種子中の
水溶性の抗酸化成分として、ゴマ脱脂粕等から得られる
水溶性抽出物が抗酸化活性を有することが知られている
(特公昭61−26342号公報等)。また、この脱脂
粕抽出物にはリグナン配糖体類が含まれることがよく知
られており、そのリグナン配糖体類が強力なヒドロキシ
ラジカル消去活性を有することが知られている(特開平
8−208685号公報等)。しかし、このゴマ種子等
に含まれるリグナン配糖体はスーパーオキシドに対する
消去活性は強いものとはいえない。
As a raw material having a strong antioxidant effect derived from natural products, which is strongly demanded by consumers, for example, as a water-soluble antioxidant component in sesame seeds, a water-soluble extract obtained from sesame defatted lees or the like is used. It is known that it has antioxidant activity (JP-B-61-26342). It is well known that this defatted lees extract contains lignan glycosides, and it is known that the lignan glycosides have strong hydroxy radical scavenging activity (Japanese Patent Application Laid-Open No. -208686, etc.). However, lignan glycosides contained in sesame seeds and the like cannot be said to have a strong scavenging activity against superoxide.

【0009】このような中、1種類の活性酸素種に対す
る消去活性だけでなく、スーパーオキシドとヒドロキシ
ラジカルなど、複数種類の活性酸素種に対する強力な消
去活性を有する、天然物由来の有効成分の安定供給が望
まれているにも関わらず、これまで工業的に実用化され
た例は少ない。しかも、両活性を有する有効成分の供給
はほとんど無いといってよく、これらの安定的な供給が
期待されている。
[0009] In such a situation, it is necessary to stabilize an active ingredient derived from a natural product having not only an erasing activity for one kind of active oxygen species but also a strong erasing activity for plural kinds of active oxygen species such as superoxide and hydroxyl radical. Despite the desire for supply, there have been few examples that have been commercialized industrially. Moreover, it can be said that there is almost no supply of active ingredients having both activities, and stable supply of these is expected.

【0010】一方、古来から食経験豊かな植物の一つに
モクセイ科、オリーブ属のオリーブ植物がある。オリー
ブは古くから栽培されてきた植物で、現在では地中海沿
岸が代表的な栽培地域である。用途としては、特にオリ
ーブ油として重宝されており、欧州はもちろん、日本や
米国を初めとする世界各国で用いられている。オリーブ
油は様々な効果を有することが知られており、古来から
経験的に薬用あるいは化粧用としても用いられてきた。
また、オリーブの実はそのまま食用にも用いられ、場合
によっては、保存食として塩蔵されたりしている。この
ことから、オリーブは、安定的に入手可能で、また人体
にとって安全性の高い植物材料であるといえる。しかし
ながら、オリーブ油を搾油した際に残るオリーブ油粕
は、肥料や燃料用として用いられているに過ぎなかっ
た。
[0010] On the other hand, one of the plants with a rich dietary experience since ancient times is the olive family belonging to the Oleaceae family and the olives. Olives have been cultivated since ancient times, and the Mediterranean coast is now a typical growing area. It is especially useful as olive oil, and is used not only in Europe, but also in Japan, the United States, and other countries around the world. Olive oil is known to have various effects, and has been used empirically as a medicinal or cosmetic agent since ancient times.
Olive fruits are also used for food as they are, and are sometimes salted as preserved foods. From this, it can be said that olives are stably available and highly safe plant materials for the human body. However, olive oil cake remaining after squeezing olive oil has only been used for fertilizer and fuel.

【0011】近年、オリーブ油に関しては、比較的酸化
されにくい植物油であることが知られており、その中に
含まれる微量成分のポリフェノール類が注目され、その
生理的作用等について多くの研究がなされている(例え
ば、International Olive Oil
Council、New Food Industr
y、Vol.34、No.4、28−52、199
2)。しかしながら、オリーブに関してはオリーブ油以
外についてはあまり知られていないのが現状である。特
に、オリーブ植物中の抽出成分が強い活性酸素除去機能
を有することは、これまで、全く知られていなかった。
In recent years, olive oil is known to be a vegetable oil that is relatively hard to oxidize, and polyphenols, which are trace components contained therein, have been attracting attention, and many studies have been made on its physiological effects and the like. (For example, International Olive Oil
Council, New Food Industry
y, Vol. 34, no. 4, 28-52, 199
2). However, there is currently little known about olives other than olive oil. In particular, it has never been known that an extractive component in an olive plant has a strong active oxygen removing function.

【0012】[0012]

【発明が解決しようとする課題】本発明は、抗酸化効
果、特には製品の保存安定性の向上効果等の優れた酸化
防止効果と、各種疾病に対する予防効果や抗老化効果等
の優れた生体内抗酸化効果を有し、かつ、安定で、人体
に対する安全性が高く、用途の広い、新規の天然の抽出
物を有効成分とする抗酸化剤を提供することを目的と
し、特に酸化防止剤および生体内抗酸化剤を提供するこ
とを目的とする。
The present invention provides an excellent antioxidant effect, especially an excellent antioxidant effect such as an effect of improving the storage stability of a product, and an excellent antioxidant effect such as an effect of preventing various diseases and an antiaging effect. It has an antioxidant effect in the body, is stable, has high safety to the human body, is versatile, and aims to provide an antioxidant containing a novel natural extract as an active ingredient, particularly an antioxidant. And an in vivo antioxidant.

【0013】[0013]

【解決しようとする手段】本発明者らは、前記目的を達
成するため鋭意検討した結果、オリーブ植物から得られ
る抽出物が、抗酸化効果、特には製品の保存安定性向上
効果等の優れた酸化防止効果と、各種疾病予防効果や抗
老化効果等の優れた生体内抗酸化効果を有することを見
いだし、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明
は、オリーブ植物(葉を除く。以下同じ。)から得られ
る抽出物を有効成分として含有する抗酸化剤に関する。
該抽出物はオリーブ植物および/またはオリーブ油製造
工程で得られる生成物を水および/または有機溶媒で抽
出処理して得ることができ、更に該抽出物を濃縮処理お
よび/または分画・精製処理することで、該抽出物が有
する活性酸素除去機能が強化される。また、オリーブ油
製造工程中で生じる生成物としては、圧搾残査、抽出残
査、圧搾油、抽出油、脱ガム油滓、脱酸油滓、ダーク
油、廃脱色剤、脱臭スカム、搾油ジュース、排水、廃濾
過材から選ばれる1種または2種以上が挙げられ、本発
明は、これらから得られる抽出物を含有する抗酸化剤に
関する。本発明の抗酸化剤は、水に対して易溶性である
ため、上記抽出処理は水または含水有機溶媒で抽出する
ことが好ましい。また、濃縮や分画・精製処理は水溶解
成分を濃縮等していくことで該抽出物が有する活性酸素
除去機能を強化することができ、本発明の抗酸化剤の抗
酸化効果、特には製品の保存安定性の向上効果等の優れ
た酸化防止効果や、各種疾病予防効果や抗老化効果等の
優れた生体内抗酸化効果を向上させることができる。ま
た、本発明は、同様にオリーブ植物(葉を除く)から得
られる抽出物を含有する酸化防止剤に関し、また、生体
内抗酸化剤に関する。酸化防止剤は特に保存安定性向上
効果を得ることが期待され、生体内抗酸化剤としては特
に各種疾病予防効果や抗老化効果を得ることが期待され
る。これらの抗酸化剤、酸化防止剤または生体内抗酸化
剤は、水に易溶性であり、例えば一部または全部を水や
含水有機溶媒に溶解した液状の状態にすることでも好適
にその効果を発揮させることでき、また、好適に使用す
ることができる。該抗酸化剤、酸化防止剤または生体内
抗酸化剤は、各種製品に配合することで製品の酸化防止
効果を向上させること等ができるとともに、生体内抗酸
化効果を有する飲食物等を製造することもできる。ま
た、該抗酸化剤、酸化防止剤または生体内抗酸化剤を単
独または飲食物等に含有する状態で内服させることで、
生体内抗酸化効果を得ることができる。本発明の抗酸化
剤、酸化防止剤または生体内抗酸化剤は、その効果を得
るために内服等の直接的な使用をしても良く、また、各
種製品の原料として配合しても良い。例えば、飲食物や
皮膚外用剤等に好適に配合することができる。また、本
発明は、オリーブから得られる抽出物を抗酸化剤として
使用する方法に関し、特にオリーブから得られる抽出物
を酸化防止剤として使用する方法に関し、オリーブから
得られる抽出物を生体内抗酸化剤として使用する方法に
関する。
Means for Solving the Problems The present inventors have conducted intensive studies in order to achieve the above object, and as a result, it has been found that extracts obtained from olive plants have an excellent antioxidant effect, particularly an effect of improving the storage stability of products. The present inventors have found that they have an antioxidant effect and have excellent in vivo antioxidant effects such as various disease prevention effects and antiaging effects, and have completed the present invention. That is, the present invention relates to an antioxidant containing an extract obtained from an olive plant (excluding leaves; the same applies hereinafter) as an active ingredient.
The extract can be obtained by extracting a product obtained in an olive plant and / or olive oil production process with water and / or an organic solvent, and further subjecting the extract to a concentration treatment and / or a fractionation / purification treatment. This enhances the active oxygen removal function of the extract. Also, as the products generated in the olive oil production process, pressed residue, extracted residue, pressed oil, extracted oil, degummed soap, deacidified soap, dark oil, waste decolorizing agent, deodorized scum, pressed juice, The present invention relates to an antioxidant containing an extract obtained from one or more selected from drainage and waste filter media. Since the antioxidant of the present invention is easily soluble in water, it is preferable that the above-mentioned extraction treatment is performed with water or a water-containing organic solvent. In addition, the concentration, fractionation and purification treatment can enhance the active oxygen removing function of the extract by concentrating the water-soluble component, etc., and the antioxidant effect of the antioxidant of the present invention, particularly An excellent antioxidant effect, such as an effect of improving the storage stability of the product, and an excellent antioxidant effect in vivo, such as an effect of preventing various diseases and an antiaging effect, can be achieved. The present invention also relates to an antioxidant containing an extract similarly obtained from olive plants (excluding leaves), and to an antioxidant in vivo. Antioxidants are expected to have a storage stability improving effect, and antioxidants in vivo are expected to have various disease prevention effects and antiaging effects. These antioxidants, antioxidants or in vivo antioxidants are easily soluble in water, and their effects can be suitably achieved by, for example, dissolving a part or the whole in water or a water-containing organic solvent in a liquid state. It can be exerted and can be suitably used. The antioxidant, antioxidant or in vivo antioxidant can be used in various products to improve the antioxidant effect of the product, and to produce foods and beverages having an antioxidant effect in vivo. You can also. In addition, by taking the antioxidant, antioxidant or in vivo antioxidant alone or in a state of being contained in food and drink,
An in vivo antioxidant effect can be obtained. The antioxidant, antioxidant or in vivo antioxidant of the present invention may be used directly for internal use or the like in order to obtain its effect, or may be blended as a raw material for various products. For example, it can be suitably blended in foods and drinks, skin external preparations and the like. The present invention also relates to a method of using an extract obtained from olives as an antioxidant, and more particularly to a method of using an extract obtained from olives as an antioxidant. It relates to a method for use as an agent.

【0014】[0014]

【実施の形態】以下に、本発明について詳細に説明す
る。本発明は、オリーブ植物、主に実または種子、さら
に、果皮、種皮、茎、芽等から、また、これらの乾燥
物、粉砕物、脱脂されたものから得られる抽出物を有効
成分とする抗酸化剤に関する。本発明の抗酸化剤で用い
る抽出物は、スーパーオキシド消去活性、ヒドロキシラ
ジカル消去活性等の強い活性酸素除去機能等を有するこ
とから、該抽出物を有効成分とする抗酸化剤を使用する
ことで、製品の保存安定性が向上する等の酸化防止効果
が得られ、また、各種の疾病を予防する効果や抗老化効
果等の生体内抗酸化効果も得られる。本抽出物の含有量
は特に制限されず、その抗酸化剤の求める効果の強さに
応じて好適な量の抽出物を含有させることができる。本
発明の抗酸化剤に用いる抽出物は、オリーブ植物から得
られるが、特にオリーブ植物の実および/または種子か
ら好適に得ることができ、また、脱脂されたオリーブ植
物の実および/または種子から得られる抽出物は余計な
油分等を除去する必要がないため好ましい。また、オリ
ーブ植物にはオリーブ油の製造工程において生じる生成
物、例えば圧搾残査、抽出残査、圧搾油、抽出油、脱ガ
ム油滓、脱酸油滓、ダーク油、廃脱色剤、脱臭スカム、
搾油ジュース、排水、廃濾過材を含むものとする。例え
ば、圧搾残査や抽出残査等の搾油粕はもちろん、油滓や
通常は廃棄しているオリーブ油の搾油工程中で生じる排
水からも該抽出物を得ることができる。オリーブの有効
活用の面からも好ましいといえる。ここで、上記オリー
ブ植物等から水および/または有機溶媒で抽出すること
で得られる抽出物を含有する抗酸化剤に関し、好ましく
は前記有機溶媒が親水性有機溶媒であり、さらには前記
親水性有機溶媒がアルコールである場合が好ましい。本
発明によれば強い活性酸素除去機能を有する抽出物を含
有することで、優れた抗酸化効果を有する抗酸化剤を得
ることができ、さらに、その抽出物の単位原料あたりの
収率も高い。例えばゴマを用いた場合に比べて1〜10
倍の収率で得ることができる。この双方のことから、本
抽出物は、活性酸素除去機能の強さに単位原料あたりの
収率を乗じた活性酸素除去機能収量指数について、他の
天然原料を用いた場合に比べて、大幅に高い値が得られ
る。スーパーオキシド消去活性に関していえば、単位原
料から得られる抽出物のスーパーオキシド消去活性収量
指数が100以上、おおよそ100〜3250程度であ
り、例えば、ゴマと比較した場合、1〜650倍という
高い値である。従って、強い活性酸素除去機能を有する
抽出物を収率良く得ることができ、すなわち、本発明の
優れた抗酸化効果を有する抗酸化剤を低い生産コストで
得ることができる。さらに、本抽出物は濃縮処理および
/または分画・精製処理されたものが好ましい。この濃
縮、分画・精製処理等により、本抽出物の活性酸素除去
機能が向上することで、本発明の抗酸化剤で2次的に得
られる抗酸化効果、特に酸化防止効果や生体内抗酸化効
果を強化することができる。濃縮処理としては、水およ
び/または有機溶媒に対する溶解性を利用した可溶分回
収処理および/または不溶分回収処理、水−疎水性有機
溶媒での液々分配処理、再結晶処理、再沈殿処理、冷却
により生じた析出物を回収する処理等を行うことがで
き、分画・精製処理としては、再結晶、再沈殿、順相お
よび/または逆相クロマトグラフィーによる精製、脱色
処理、脱臭処理等を行うことができる。例えば、水への
溶解性を利用する方法によって濃縮等することにより本
抽出物の活性酸素除去機能を向上させることができ、ま
た、脱色・脱臭等の処理をして無色、無臭にすることに
より用途、使用性を向上させることもできる。また、該
抽出物を含有する本発明の抗酸化剤においても、抗酸化
効果が強くなり、用途、使用性が向上するため好まし
い。これらの抗酸化剤、酸化防止剤または生体内抗酸化
剤は、上述の様に本抽出物は水に易溶性であるため、例
えば一部または全部を水や含水有機溶媒に溶解した液状
の状態にすることができ、かつ、好適にその効果を発揮
させることできる。液状の状態においても好適に効果を
発揮し、かつ、使用し易いというメリットが生じる。該
抗酸化剤、酸化防止剤または生体内抗酸化剤は、各種製
品に配合することで製品の保存安定性を向上させること
等ができるとともに、生体内抗酸化効果を有する飲食物
等を製造することもできる。また、該抗酸化剤、酸化防
止剤または生体内抗酸化剤を単独または飲食物等に含有
する状態で内服させることで、生体内抗酸化効果を得る
ことができる。また、本発明は、オリーブから得られる
抽出物を抗酸化剤として使用することができ、特にオリ
ーブから得られる抽出物を酸化防止剤として使用するこ
と、オリーブから得られる抽出物を生体内抗酸化剤とし
て使用することができる。本発明の抗酸化剤、酸化防止
剤または生体内抗酸化剤は、その効果を得るために内服
等の直接的な使用をしても良く、各種製品の原料として
配合しても良い。例えば、飲食物、皮膚外用剤、医薬
品、飼料等の保存安定性を向上させる抗酸化剤としても
使用でき、また、飲食物に配合した場合には、保存安定
性に優れた、天然成分を含有する生活習慣病等に有効な
飲食物を製造することができる。配合量は特に制限され
ず、その飲食物に応じて好適な量の抽出物を配合するこ
とができる。ここで、本発明の抗酸化剤等は、オリーブ
という植物由来のものであるので、人体への安全性に優
れ、かつ、一般的な植物であるので安定的な供給が可能
であるので好ましい。
DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS Hereinafter, the present invention will be described in detail. The present invention relates to an antioxidant comprising, as an active ingredient, an extract obtained from an olive plant, mainly a fruit or a seed, a pericarp, a seed coat, a stem, a bud, and the like, and a dried product, a crushed product, and a defatted product thereof. Oxidant. Since the extract used in the antioxidant of the present invention has a strong active oxygen removing function such as superoxide scavenging activity and hydroxy radical scavenging activity, it is possible to use an antioxidant containing the extract as an active ingredient. In addition, an antioxidant effect such as improvement in storage stability of the product is obtained, and an antioxidant effect in vivo such as an effect of preventing various diseases and an antiaging effect is also obtained. The content of the present extract is not particularly limited, and an appropriate amount of the extract can be contained according to the strength of the effect required by the antioxidant. The extract used for the antioxidant of the present invention is obtained from olive plants, and can be particularly preferably obtained from olive plant fruits and / or seeds, and can be obtained from defatted olive plant fruits and / or seeds. The resulting extract is preferable because it is not necessary to remove unnecessary oil and the like. Also, olive plants produce products in the process of producing olive oil, such as pressed residue, extracted residue, pressed oil, extracted oil, degummed oil residue, deoxidized oil residue, dark oil, waste decolorizer, deodorized scum,
Includes oiled juices, wastewater, and waste filter media. For example, the extract can be obtained not only from oil residue such as a pressing residue or an extraction residue, but also from waste water generated in the oil pressing step of olive oil or olive oil which is usually discarded. It can be said that it is preferable from the viewpoint of effective use of olives. Here, with respect to an antioxidant containing an extract obtained by extracting the above olive plant or the like with water and / or an organic solvent, preferably, the organic solvent is a hydrophilic organic solvent, and further, the hydrophilic organic solvent is used. Preferably, the solvent is an alcohol. According to the present invention, by containing an extract having a strong active oxygen removing function, an antioxidant having an excellent antioxidant effect can be obtained, and the yield of the extract per unit material is also high. . For example, 1 to 10 compared to when using sesame
It can be obtained with double the yield. From both of these facts, the present extract has a significantly higher active oxygen scavenging function yield index, which is obtained by multiplying the strength of the active oxygen scavenging function by the yield per unit material, as compared with the case of using other natural materials. High values are obtained. As for the superoxide scavenging activity, the extract obtained from the unit raw material has a superoxide scavenging activity yield index of 100 or more, approximately 100 to 3250, and for example, a high value of 1 to 650 times as compared with sesame. is there. Therefore, an extract having a strong active oxygen removing function can be obtained with good yield, that is, the antioxidant having an excellent antioxidant effect of the present invention can be obtained at low production cost. Further, the present extract is preferably subjected to concentration treatment and / or fractionation / purification treatment. The concentration, fractionation, purification, and the like improve the active oxygen removal function of the present extract, and thus the antioxidant effect obtained by the antioxidant of the present invention, particularly the antioxidant effect and the antioxidant effect in vivo. Oxidation effect can be enhanced. As the concentration treatment, a soluble component recovery process and / or an insoluble component recovery process utilizing solubility in water and / or an organic solvent, a liquid-liquid distribution process with a water-hydrophobic organic solvent, a recrystallization process, and a reprecipitation process , A process of collecting a precipitate generated by cooling, etc., can be performed. Examples of fractionation and purification include recrystallization, reprecipitation, purification by normal phase and / or reverse phase chromatography, decolorization, deodorization, etc. It can be performed. For example, it is possible to improve the active oxygen removal function of the present extract by concentrating by a method utilizing solubility in water, and by performing a treatment such as decolorization and deodorization to make it colorless and odorless. Applications and usability can be improved. In addition, the antioxidant of the present invention containing the extract is also preferable since the antioxidant effect is enhanced, and the use and usability are improved. Since these extracts are easily soluble in water as described above, these antioxidants, antioxidants or in vivo antioxidants are in a liquid state in which a part or all of them is dissolved in water or a water-containing organic solvent. And the effect can be suitably exerted. There is an advantage that the effect is suitably exerted even in a liquid state, and that it is easy to use. The antioxidant, antioxidant or in vivo antioxidant can be added to various products to improve the storage stability of the product, etc., and produce foods and the like having an in vivo antioxidant effect. You can also. Also, by ingesting the antioxidant, antioxidant or in vivo antioxidant alone or in a state of being contained in food or drink, an in vivo antioxidant effect can be obtained. In addition, the present invention can use an extract obtained from olives as an antioxidant, in particular, using an extract obtained from olives as an antioxidant, and using an extract obtained from olives in vivo as an antioxidant. It can be used as an agent. The antioxidant, antioxidant or in-vivo antioxidant of the present invention may be used directly for internal use or the like to obtain its effect, or may be blended as a raw material for various products. For example, it can be used as an antioxidant to improve the storage stability of foods and drinks, skin external preparations, pharmaceuticals, feeds, etc., and when added to foods and drinks, contains natural ingredients with excellent storage stability It is possible to produce foods and drinks that are effective for lifestyle-related diseases. The blending amount is not particularly limited, and a suitable amount of extract can be blended according to the food or drink. Here, the antioxidant and the like of the present invention are preferable because they are derived from a plant called olive, which is excellent in safety to the human body, and can be stably supplied because it is a general plant.

【0015】本発明の原料として用いるオリーブ植物
(Olea europaea L.)は、国産、欧州
産などの産地、食用あるいは搾油用を問わず使用でき
る。本発明の抗酸化剤で用いる抽出物は、天然植物であ
るオリーブ植物の、主に実または種子から得ることがで
き、さらに、その果皮、茎、芽から得ることができる。
また、これらの乾燥物、粉砕物、脱脂物からも好適に得
ることができる。また、上記オリーブ植物の果実やその
脱脂物等に、添水する等により加水した場合、蒸気によ
り蒸す等の加湿処理を行った場合、これらオリーブ植物
の果実やその脱脂物等が適度に膨潤するので、抽出効率
が良くなり好ましい。
The olive plant (Olea europaea L.) used as a raw material of the present invention can be used irrespective of the place of origin such as domestic and European origins, edible or oiled. The extract used in the antioxidant of the present invention can be obtained mainly from fruits or seeds of an olive plant, which is a natural plant, and can be obtained from its peel, stem and bud.
Moreover, it can also be suitably obtained from these dried, pulverized and degreased products. Further, when the fruits of the above olive plants and their defatted products are added with water, etc., when humidification treatment such as steaming is performed, the fruits of these olive plants and their defatted products swell appropriately. The extraction efficiency is improved, which is preferable.

【0016】特に、オリーブ植物の脱脂物からは、抽出
物が非常に高い収率で得られ、かつ、得られた抽出物か
ら油分を除去する必要がないため好ましい。また、オリ
ーブ植物または当該脱脂物に含まれる脂質成分をペンタ
ン、ヘキサン、ヘプタン等の炭化水素、酢酸エチルエス
テル等の低級脂肪酸アルキルエステル、ジエチルエーテ
ル等の公知の非水溶性の有機溶媒の1種又は2種以上で
抽出除去し、更に必要に応じてこの洗浄処理を繰り返し
た脱脂物も利用できる。
[0016] In particular, an extract is obtained from a defatted olive plant in a very high yield, and it is not necessary to remove oil from the obtained extract. Further, the lipid component contained in the olive plant or the defatted product is a hydrocarbon such as pentane, hexane, heptane, a lower fatty acid alkyl ester such as ethyl acetate, one of known water-insoluble organic solvents such as diethyl ether or A defatted material obtained by extracting and removing with two or more kinds and further repeating this washing treatment as necessary can be used.

【0017】オリーブ植物から水および/または有機溶
媒で抽出することにより、本発明の抗酸化剤で用いる抽
出物を得ることができる。
The extract used for the antioxidant of the present invention can be obtained by extracting an olive plant with water and / or an organic solvent.

【0018】オリーブ植物から本発明の抗酸化剤で用い
る抽出物を得るために用いる有機溶媒としては、親水性
有機溶媒、疎水性有機溶媒のいずれでもよい。具体的に
は、親水性有機溶媒として、メチルアルコール、エチル
アルコール、グリセリン、プロピレングリコール、1,
3−ブチレングリコール等のアルコール、アセトン、テ
トラヒドロフラン、アセトニトリル、1,4−ジオキサ
ン、ピリジン、ジメチルスルホキシド、N,N−ジメチ
ルホルムアミド、酢酸等の公知の有機溶媒が挙げられ、
疎水性有機溶媒として、ヘキサン、シクロヘキサン、四
塩化炭素、クロロホルム、ジクロロメタン、1,2−ジ
クロロエタン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、ベンゼ
ン、トルエン等の公知の有機溶媒が挙げられる。また、
これらの有機溶媒は1種または2種以上を組み合わせて
使用することができる。
The organic solvent used for obtaining the extract used as the antioxidant of the present invention from olive plants may be either a hydrophilic organic solvent or a hydrophobic organic solvent. Specifically, as the hydrophilic organic solvent, methyl alcohol, ethyl alcohol, glycerin, propylene glycol, 1,
Known organic solvents such as alcohols such as 3-butylene glycol, acetone, tetrahydrofuran, acetonitrile, 1,4-dioxane, pyridine, dimethyl sulfoxide, N, N-dimethylformamide, and acetic acid;
Examples of the hydrophobic organic solvent include known organic solvents such as hexane, cyclohexane, carbon tetrachloride, chloroform, dichloromethane, 1,2-dichloroethane, diethyl ether, ethyl acetate, benzene, and toluene. Also,
These organic solvents can be used alone or in combination of two or more.

【0019】工業的には、例えば植物組織への浸透性、
抽出効率等からは、水および/または親水性有機溶媒を
用いることが好ましく、また含水親水性有機溶媒を用い
ることが好ましい。具体的にはメチルアルコール、エチ
ルアルコール、グリセリン、プロピレングリコール、
1,3−ブチレングリコール等のアルコール、アセト
ン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル等の有機溶媒
およびこれらの含水溶媒が挙げられる。これらの中から
選ばれる、1種または2種以上により、オリーブ植物か
ら、本発明の抗酸化剤で用いる抽出物を得ることができ
る。
Industrially, for example, permeability into plant tissue,
From the viewpoint of extraction efficiency and the like, it is preferable to use water and / or a hydrophilic organic solvent, and it is preferable to use a water-containing hydrophilic organic solvent. Specifically, methyl alcohol, ethyl alcohol, glycerin, propylene glycol,
Examples include alcohols such as 1,3-butylene glycol, organic solvents such as acetone, tetrahydrofuran, and acetonitrile, and hydrated solvents thereof. With one or more selected from these, an extract used in the antioxidant of the present invention can be obtained from olive plants.

【0020】抽出成分の溶解性についての特性を利用す
ると、活性酸素除去機能を有する抽出物を得るには、水
および/または親水性有機溶媒、好ましくは含水親水性
有機溶媒、さらに好ましくは含水率の高い含水親水性有
機溶媒を用いた抽出が好ましい。
Taking advantage of the characteristics of the solubility of the extracted components, water and / or a hydrophilic organic solvent, preferably a water-containing hydrophilic organic solvent, more preferably a water content Extraction using a water-containing hydrophilic organic solvent having a high water content is preferred.

【0021】抽出条件は、特に限定されないが、例え
ば、温度は5℃〜95℃、好ましくは10℃〜90℃、
さらに好ましくは15℃〜85℃で、常温でも好適に抽
出すことができる。温度が高いほうが、抽出効率が高く
なる傾向はある。圧力は、常圧でも、加圧でも、吸引等
による減圧でも好適にすることができる。また、抽出効
率を向上させるため、振とう抽出や、攪拌機等のついた
抽出機でも抽出することができる。抽出時間は、他の抽
出条件によるが、数分〜数時間であり、長時間なほど十
分な抽出がなされるが、生産設備、収率等の生産条件に
よって適宜決めれば良い。また、抽出に使用する溶媒
は、原料に対し1〜100倍量(「質量/質量」。以下
同様。)、好ましくは1〜20倍量を使用することがで
きる。
The extraction conditions are not particularly limited. For example, the temperature is 5 ° C. to 95 ° C., preferably 10 ° C. to 90 ° C.
More preferably, it can be extracted at a temperature of 15 ° C to 85 ° C at room temperature. The higher the temperature, the higher the extraction efficiency tends to be. The pressure may be normal pressure, increased pressure, or reduced pressure by suction or the like. Further, in order to improve the extraction efficiency, the extraction can be performed by shaking extraction or an extractor equipped with a stirrer or the like. Although the extraction time depends on other extraction conditions, it is several minutes to several hours, and the longer the time, the more sufficient extraction is performed. However, the extraction time may be appropriately determined according to production conditions such as production equipment and yield. The solvent used for the extraction may be used in an amount of 1 to 100 times (“mass / mass”; the same applies hereinafter), preferably 1 to 20 times the amount of the raw material.

【0022】得られる抽出物の収率およびその後の回収
方法を考慮すると、水および/または親水性有機溶媒を
用いることが好ましく、また含水親水性有機溶媒を用い
ることが好ましい。また含水親水性有機溶媒での抽出処
理する場合には、親水性有機溶媒含量が10質量%〜9
5質量%である含水親水性有機溶媒で抽出することが好
ましく、さらには親水性有機溶媒含量が20質量%〜9
5質量%の含水親水性有機溶媒を使用することが好まし
く、最も好ましくは親水性有機溶媒含量が30質量%〜
95質量%に調製された含水親水性有機溶媒であること
が好ましい。
In consideration of the yield of the obtained extract and the subsequent recovery method, it is preferable to use water and / or a hydrophilic organic solvent, and it is preferable to use a water-containing hydrophilic organic solvent. In the case of performing an extraction treatment with a water-containing hydrophilic organic solvent, the content of the hydrophilic organic solvent is 10% by mass to 9% by mass.
Extraction with a water-containing hydrophilic organic solvent of 5% by mass is preferable, and the content of the hydrophilic organic solvent is preferably 20% by mass to 9% by mass.
It is preferable to use 5% by mass of a water-containing hydrophilic organic solvent, and most preferably, the content of the hydrophilic organic solvent is 30% by mass or less.
It is preferably a water-containing hydrophilic organic solvent adjusted to 95% by mass.

【0023】また、得られる抽出物が有する活性酸素除
去機能の強さをも考慮に入れた場合、含水親水性有機溶
媒での抽出において、親水性有機溶媒含量が10質量%
以上である含水親水性有機溶媒で抽出することが好まし
く、さらには親水性有機溶媒含量が40質量%以上の含
水親水性有機溶媒を使用することが好ましく、最も好ま
しくは親水性有機溶媒含量が40質量%〜80質量%に
調製された含水親水性有機溶媒であることが好ましい。
When the strength of the active oxygen removing function of the obtained extract is also taken into consideration, the content of the hydrophilic organic solvent in the extraction with a water-containing hydrophilic organic solvent is 10% by mass.
It is preferable to extract with the above-mentioned hydrated hydrophilic organic solvent, more preferably to use a hydrated hydrophilic organic solvent having a hydrophilic organic solvent content of 40% by mass or more, and most preferably to use a hydrophilic organic solvent content of 40% by mass or more. It is preferably a water-containing hydrophilic organic solvent adjusted to be from 80% by mass to 80% by mass.

【0024】また、飲食物等への使用、皮膚への塗布を
含む人体への使用における安全性等を考えれば、特に、
水および/またはアルコールのいずれかにより抽出する
ことが好ましい。
In view of safety in use to foods and drinks, and use in humans including application to skin, etc.,
It is preferred to extract with either water and / or alcohol.

【0025】得られる抽出物の収率およびその後の回収
の面からは、水および/またはアルコールを用いること
が好ましく、また含水アルコールを用いることが好まし
い。また含水アルコールでの抽出処理する場合には、ア
ルコール含量が10質量%〜95質量%である含水アル
コールで抽出することが好ましく、さらにはアルコール
含量が20質量%〜95質量%の含水アルコールを使用
することが好ましく、最も好ましくはアルコール含量が
30質量%〜95質量%に調製された含水アルコールで
あることが好ましい。
From the viewpoint of the yield of the obtained extract and subsequent recovery, it is preferable to use water and / or alcohol, and it is preferable to use aqueous alcohol. In the case of the extraction treatment with hydroalcohol, it is preferable to extract with hydroalcohol having an alcohol content of 10% by mass to 95% by mass, and further use hydrous alcohol having an alcohol content of 20% by mass to 95% by mass. It is preferable that the alcohol content is 30% by mass to 95% by mass.

【0026】また、得られる抽出物が有する活性酸素除
去機能の強さをも考慮に入れた場合、アルコール含量が
10質量%以上である含水アルコールで抽出することが
好ましい。さらにはアルコール含量が40質量%以上の
含水アルコールを使用することが好ましく、最も好まし
くはアルコール含量が40質量%〜80質量%に調節さ
れた含水アルコールが好ましい。
When the strength of the active oxygen removing function of the obtained extract is also taken into consideration, it is preferable to extract with a hydrous alcohol having an alcohol content of 10% by mass or more. Further, it is preferable to use a hydrated alcohol having an alcohol content of 40% by mass or more, and most preferably a hydrated alcohol having an alcohol content adjusted to 40% by mass to 80% by mass.

【0027】ここで、本発明で使用するアルコールは、
メチルアルコール、エチルアルコール、1−プロパノー
ル、1−ブタノール等の1級アルコール、2−プロパノ
ール、2−ブタノール等の2級アルコール、2−メチル
−2−プロパノール等の3級アルコールさらにエチレン
グリコール、プロピレングリコール、1,3−ブチレン
グリコール等の液状多価アルコール等の公知の溶媒が挙
げられ、これらの溶媒は1種または2種以上を組み合わ
せて使用することができる。
Here, the alcohol used in the present invention is:
Primary alcohols such as methyl alcohol, ethyl alcohol, 1-propanol and 1-butanol; secondary alcohols such as 2-propanol and 2-butanol; tertiary alcohols such as 2-methyl-2-propanol; and ethylene glycol and propylene glycol And known solvents such as liquid polyhydric alcohols such as 1,3-butylene glycol. These solvents can be used alone or in combination of two or more.

【0028】工業的には、生産コストの面、および、蒸
留による溶媒除去等のハンドリングの面から見ても、特
に低級アルコールを使用することが好ましい。ここで、
低級アルコールとは、炭素数が1〜4である公知のアル
コール、例えば、前述の1、2、3級、もしくは、液状
多価のアルコール等があげられ、これらの1種または2
種以上を組み合わせて使用することができる。
Industrially, it is particularly preferable to use a lower alcohol in view of production cost and handling such as removal of a solvent by distillation. here,
The lower alcohol includes known alcohols having 1 to 4 carbon atoms, for example, the above-mentioned primary, secondary, tertiary or liquid polyhydric alcohols.
More than one species can be used in combination.

【0029】その他、オリーブ油の製造工程において生
じる生成物、例えば圧搾残査、抽出残査、圧搾油、抽出
油、脱ガム油滓、脱酸油滓、ダーク油、廃脱色剤、脱臭
スカム、搾油ジュース、排水、廃濾過材もオリーブ植物
に含まれ、これらからも活性酸素除去機能を有する本抽
出物が得られる。オリーブの有効活用の面からも好まし
い該抽出物の製造方法である。ここで、オリーブ油の搾
油工程で生じる排水からも活性酸素除去機能を有する抽
出物を得ることができる。特に、オリーブ油を搾油する
に際し、オリーブ実を圧搾すると油分と水分を含んだジ
ュースと呼ばれるものが得られ、これから水分を除去
し、オリーブ油を得るが、この水相部分を回収すること
で好適に本抽出物が得られる。
Other products generated in the process of producing olive oil, for example, pressed residue, extracted residue, pressed oil, extracted oil, degummed oil residue, deoxidized oil residue, dark oil, waste decolorizing agent, deodorized scum, pressed oil Juice, wastewater, and waste filter media are also included in olive plants, from which the present extract having an active oxygen removing function can be obtained. It is a preferable method for producing the extract from the viewpoint of effective utilization of olives. Here, an extract having an active oxygen removing function can be obtained from wastewater generated in the olive oil pressing step. In particular, when olive oil is squeezed, squeezing the olive fruits yields what is called a juice containing oil and water, from which water is removed and olive oil is obtained. An extract is obtained.

【0030】このように、水および/または有機溶媒を
用いた抽出により、活性酸素除去機能を有する抽出液を
製造できる。また、本抽出物の水可溶性等の成分は、活
性酸素除去機能が強く、これを含有する抗酸化剤もより
強力な抗酸化効果を有する。
As described above, an extract having an active oxygen removing function can be produced by extraction using water and / or an organic solvent. In addition, components such as water solubility of the present extract have a strong active oxygen removing function, and an antioxidant containing the same also has a stronger antioxidant effect.

【0031】このようにして得られた抽出液から、溶
媒、水分を除去することで、乾固状の本発明の抗酸化剤
に用いる抽出物を得ることができる。溶媒、水分の除去
は減圧蒸留、減圧・真空乾燥、凍結乾燥、スプレードラ
イ等の公知の方法で行うことができる。もちろん、溶
媒、水分を含んだままでも良く、また、溶媒のみ除去し
て水溶液状のものを得ることもできる。さらに、溶媒、
水分除去の程度を調整することで該抽出物の濃度が調整
された、つまり、活性酸素除去機能の強さが調整された
水溶液を調製することもできる。また、難水溶性成分を
含有したままでも、それらを除去した水溶液としても良
い。
By removing the solvent and water from the thus obtained extract, a dry extract used as the antioxidant of the present invention can be obtained. The removal of the solvent and water can be performed by a known method such as vacuum distillation, vacuum / vacuum drying, freeze drying, spray drying and the like. Needless to say, the solvent and water may be contained, or the aqueous solution may be obtained by removing only the solvent. In addition, the solvent,
It is also possible to prepare an aqueous solution in which the concentration of the extract is adjusted by adjusting the degree of water removal, that is, the strength of the active oxygen removing function is adjusted. Further, even with the poorly water-soluble components contained therein, an aqueous solution from which they have been removed may be used.

【0032】また、本発明の製造方法によれば、原料単
位あたり、活性酸素除去機能を有する抽出物を他の天然
原料に比べても高い収率で、例えばゴマを用いた場合に
比べて1〜10倍の収率で得ることができる。
Further, according to the production method of the present invention, an extract having an active oxygen removing function can be obtained in a higher yield per unit of raw material than in the case of using sesame, for example, in a higher yield than other natural raw materials. It can be obtained in 10 to 10 times the yield.

【0033】また、脱脂物からの抽出物は、トリグリセ
ライド、ステロール、トコフェロール等の油溶性成分は
含有していないので、これらを除去、精製する必要がな
いため、好ましい。
The extract from the defatted product is preferable because it does not contain oil-soluble components such as triglyceride, sterol, and tocopherol, and it is not necessary to remove and purify these components.

【0034】また、オリーブ油の製造工程において生じ
る生成物、例えば圧搾残査、抽出残査、圧搾油、抽出
油、脱ガム油滓、脱酸油滓、ダーク油、廃脱色剤、脱臭
スカム、搾油ジュース、排水、廃濾過材からも活性酸素
除去機能を有する抽出物が得られるので、オリーブの極
めて優れた有効利用方法であり、生産コストの面から見
ても優れた方法といえる。
Also, products generated in the process of producing olive oil, such as pressed residue, extracted residue, pressed oil, extracted oil, degummed oil residue, deoxidized oil residue, dark oil, waste decolorizing agent, deodorized scum, and oil pressed Since an extract having an active oxygen removing function can be obtained from juice, wastewater, and waste filter material, it is an extremely effective method for effectively using olives, and also an excellent method from the viewpoint of production cost.

【0035】これらの抽出物はそのまま用いても良い
が、必要によりさらに濃縮処理および/または分画・精
製処理したものを用いることができる。
These extracts may be used as they are, but, if necessary, may be used after further concentration and / or fractionation / purification.

【0036】濃縮処理については、特に限定されない
が、例えば濃縮処理が、水および/または有機溶媒に対
する溶解性を利用した可溶分回収処理および/または不
溶分回収処理、水−疎水性有機溶媒での液々分配処理、
再結晶処理、再沈殿処理、冷却により生じた析出物を回
収する処理から選ばれる1種または2種以上の処理によ
り、好適に濃縮処理することができる。
The concentration treatment is not particularly limited. For example, the concentration treatment may be a treatment for recovering soluble and / or insoluble components utilizing solubility in water and / or an organic solvent, or a treatment for recovering insoluble components using a water-hydrophobic organic solvent. Liquid-liquid distribution processing,
The concentration treatment can be suitably performed by one or more treatments selected from a recrystallization treatment, a reprecipitation treatment, and a treatment for collecting a precipitate generated by cooling.

【0037】例えば、水への溶解性を利用した濃縮方法
を用いることによって、水に容易に溶ける成分、つまり
水可溶性等の成分と、水に溶解しにくいおよび/または
水に溶解しない成分、つまり難水溶性等の成分に分離す
ることができる。ここで、水可溶性等の成分の濃縮物
は、難水溶性等の成分に比べ、活性酸素除去機能が高い
ことが見出された。
For example, by using a concentration method utilizing solubility in water, a component that is easily soluble in water, that is, a component that is soluble in water, and a component that is hardly soluble in water and / or a component that is not soluble in water, that is, It can be separated into components having poor water solubility. Here, it has been found that a concentrate of a component such as water-soluble has a higher active oxygen removing function than a component having poor water-solubility or the like.

【0038】また、濃縮方法の一つとして、オリーブ植
物より得られた抽出液から、溶媒除去する過程におい
て、濃縮物を容易に得ることができる。すなわち、溶媒
のみを除去した水溶液において、水可溶分と水不溶分を
ろ過処理、遠心処理、デカンテーション処理等により分
離し、水可溶分を脱水・乾燥させることで、強い活性酸
素除去機能を有する水可溶性等の濃縮物を得ることがで
きる。このように、非常に簡単な方法で濃縮物を得られ
ることから、効率面でも非常に優れた濃縮方法であると
いえる。
As one of the concentration methods, a concentrate can be easily obtained in the process of removing the solvent from the extract obtained from olive plants. That is, in the aqueous solution from which only the solvent has been removed, a water-soluble component and a water-insoluble component are separated by filtration, centrifugation, decantation, and the like, and the water-soluble component is dehydrated and dried. And a water-soluble concentrate having the following formula: As described above, since a concentrate can be obtained by a very simple method, it can be said that this is a very excellent concentration method in terms of efficiency.

【0039】また、オリーブ植物から抽出し乾固した抽
出物に水を添加・攪拌することで、水に溶解しにくい成
分および/または水に溶解しない成分、つまり難水溶性
等の成分と水に容易に溶ける成分に分けることで、大幅
に濃縮することができる。オリーブ植物からの抽出物に
含まれる水可溶性等の濃縮物は、該抽出物全体や、抽出
物中の難水溶性等の成分と比べても、活性酸素除去機能
が大幅に優れていることが確認された。
Further, by adding and stirring water to the extract extracted and dried from the olive plant, a component that is hardly soluble in water and / or a component that does not dissolve in water, that is, a component having poor water solubility and the like, is mixed with water. Separation into readily soluble components allows for significant concentration. Concentrates such as water-soluble substances contained in extracts from olive plants have a significantly superior active oxygen removing function, even when compared with the whole extract or components such as poor water solubility in the extracts. confirmed.

【0040】このように、濃縮物はオリーブ植物からの
抽出物を水に添加・攪拌した後、可溶分と不要分を分別
することで簡易に得ることができる。また、水の量や温
度を調整することで、得られる上記の水可溶性等の成分
の成分の量と活性酸素除去機能の強さを調整することが
できる。
As described above, the concentrate can be easily obtained by adding an extract from an olive plant to water and stirring the resulting mixture, and then separating a soluble component from an unnecessary component. In addition, by adjusting the amount and temperature of water, it is possible to adjust the amount of the obtained components such as water solubility and the strength of the active oxygen removing function.

【0041】また、本抽出物は、必要に応じて、一般的
な溶剤の組合せによる液−液分配により濃縮することが
できる。溶剤の組合せは一概に規定し難いが、例えば、
水−疎水性有機溶媒の組合せが挙げられ、疎水性有機溶
媒としては、ヘキサン、四塩化炭素、クロロホルム、ジ
クロロメタン、1,2−ジクロロエタン、ジエチルエー
テル、酢酸エチル、n−ブタノール、ベンゼン、トルエ
ン等の公知の有機溶媒が挙げられる。この液−液分配に
おいて、水相の水を除去することによって、活性酸素除
去機能を有する本抽出物を得ることができる。
The extract can be concentrated, if necessary, by liquid-liquid distribution using a common solvent combination. Solvent combinations are generally difficult to define, for example,
Examples of water-hydrophobic organic solvents include hydrophobic organic solvents such as hexane, carbon tetrachloride, chloroform, dichloromethane, 1,2-dichloroethane, diethyl ether, ethyl acetate, n-butanol, benzene, and toluene. Known organic solvents can be used. In this liquid-liquid distribution, by removing water in the aqueous phase, the present extract having an active oxygen removing function can be obtained.

【0042】さらに、本抽出物、該抽出物を濃縮処理し
たものは、分画・精製処理することができる。これによ
り上記濃縮以上に濃縮することができる。分画・精製処
理することの利点としては、活性酸素除去機能を非常に
向上させることができることに加え、不純物を除去する
ことができること等が挙げられる。すなわち、該分画・
精製処理した場合、本発明の抗酸化剤に余計な色をつけ
ることなく好適に配合することができる等のメリットが
あり、好ましい。
Further, the present extract and the extract obtained by concentrating the extract can be subjected to fractionation and purification. Thereby, it is possible to concentrate more than the above concentration. Advantages of the fractionation / purification treatment include not only that the active oxygen removing function can be greatly improved, but also that impurities can be removed. That is, the fraction
The purification treatment is preferable because it has the advantage that the antioxidant of the present invention can be suitably blended without adding an extra color.

【0043】分画・精製処理の方法については特に制限
されないが、例えば、順相および/または逆相クロマト
グラフィーによる精製、再結晶、再沈殿、脱色処理、脱
臭処理から選ばれる1種または2種以上の処理により好
適に分画・精製処理することができる。特にクロマトグ
ラフィーの中でも液体クロマトグラフィーを利用する方
法は、本発明の抗酸化剤に用いる抽出物、濃縮物を分解
することなく、収率良く分画・精製出来るので、好まし
い。液体クロマトグラフィーとしては、具体的に、順相
液体クロマトグラフィー、逆相液体クロマトグラフィ
ー、薄層クロマトグラフィー、ペーパークロマトグラフ
ィー、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)等が挙
げられるが、本抽出物や濃縮物を分画・精製処理する際
には、いずれの方法でも用いることができる。とりわ
け、分離能、処理量、工程数等を考慮に入れると、順相
液体クロマトグラフィー、逆相液体クロマトグラフィ
ー、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)が好まし
い。
The method of fractionation / purification is not particularly limited. For example, one or two selected from purification by normal phase and / or reverse phase chromatography, recrystallization, reprecipitation, decolorization, and deodorization By the above processing, fractionation and purification can be suitably performed. In particular, among the chromatography methods, the method using liquid chromatography is preferable because the extract and concentrate used for the antioxidant of the present invention can be fractionated and purified in good yield without decomposing. Specific examples of liquid chromatography include normal-phase liquid chromatography, reverse-phase liquid chromatography, thin-layer chromatography, paper chromatography, and high-performance liquid chromatography (HPLC). Can be used in any fractionation and purification treatment. In particular, normal phase liquid chromatography, reverse phase liquid chromatography, and high performance liquid chromatography (HPLC) are preferable in consideration of the separation ability, the throughput, the number of steps, and the like.

【0044】ここで、順相液体クロマトグラフィーと
は、例えば以下のような方法を指す。すなわち、例えば
シリカゲルを固定相、ヘキサン−酢酸エチル混液、クロ
ロホルム−メタノール混液等を移動相としたカラムを作
成し、オリーブ植物からの抽出物あるいはその濃縮物を
負荷率0.1〜5%(wt(質量)/v(体積))で供
し、単一移動相による連続的溶出法あるいは溶媒極性を
順次増加させる段階的溶出法により、所定の画分を溶出
させる方法である。逆相液体クロマトグラフィーとは、
例えば以下のような方法を指す。すなわち、例えばオク
タデシルシランを結合させたシリカ(ODS)を固定
相、水−メタノール混液、水−アセトニトリル混液、水
−アセトン混液等を移動相としたカラムを作成し、オリ
ーブ植物からの抽出物あるいはその濃縮物を負荷率0.
1〜5%(wt(質量)/v(体積))で供し、単一溶
媒による連続的溶出法あるいは溶媒極性を順次低下させ
る段階的溶出法により、所定の画分を溶出させる方法で
ある。高速液体クロマトグラフィー(HPLC)とは、
原理的には、上記順相液体クロマトグラフィーあるいは
逆相液体クロマトグラフィーと同様のものであり、より
迅速かつ高分離能での分画・精製を行うためのものであ
る。上記手法を1種または2種以上組合わせることで、
非常に濃縮でき、かつ、不純物が除去された状態で得る
ことができるため好ましい。さらに、上記手法を1種ま
たは2種以上組合わせることで、本抽出物が有する活性
酸素除去機能を得るための濃度を調整することができ、
必要に応じた機能の強さ、特性等を設計することもでき
る。
Here, normal phase liquid chromatography refers to the following method, for example. That is, for example, a column was prepared using silica gel as a stationary phase, a hexane-ethyl acetate mixed solution, a chloroform-methanol mixed solution, or the like as a mobile phase, and an extract from an olive plant or a concentrate thereof was loaded at a load rate of 0.1 to 5% (wt. (Mass) / v (volume)), and a predetermined fraction is eluted by a continuous elution method using a single mobile phase or a stepwise elution method in which the solvent polarity is gradually increased. What is reverse phase liquid chromatography?
For example, it refers to the following method. That is, for example, a column is prepared using silica (ODS) to which octadecylsilane is bonded as a stationary phase, a water-methanol mixture, a water-acetonitrile mixture, a water-acetone mixture, or the like as a mobile phase. Load the concentrate at 0.
This is a method in which a predetermined fraction is applied at 1 to 5% (wt (mass) / v (volume)) and a predetermined fraction is eluted by a continuous elution method using a single solvent or a stepwise elution method in which the polarity of the solvent is gradually reduced. What is high performance liquid chromatography (HPLC)?
In principle, it is the same as the normal phase liquid chromatography or the reverse phase liquid chromatography described above, and is used for fractionation and purification with higher speed and higher resolution. By combining one or more of the above methods,
It is preferable because it can be very concentrated and can be obtained with impurities removed. Furthermore, by combining one or more of the above methods, the concentration for obtaining the active oxygen removing function of the present extract can be adjusted,
The strength, characteristics, etc. of the function can be designed as needed.

【0045】濃縮処理は繰返し濃縮処理しても良く、異
なる濃縮処理を組合わせても良い。同様に、分画・精製
処理も繰返し分画・精製処理しても良く、異なる分画・
精製処理を組合わせても良い。更に、濃縮処理を行った
後に分画・精製処理しても良く、分画・精製処理を行っ
た後に分画・精製処理しても良く、濃縮処理した後に分
画・精製処理を行い更に濃縮処理することもできる。当
然、前述の組み合わせ以外の組み合わせでも良い。
The concentration treatment may be repeated concentration treatment, or different concentration treatments may be combined. Similarly, the fractionation / purification treatment may be repeated fractionation / purification treatment, and different fractionation / purification treatments may be performed.
Purification treatments may be combined. Furthermore, fractionation / purification treatment may be performed after concentration treatment, fractionation / purification treatment may be performed after fractionation / purification treatment, and fractionation / purification treatment may be performed after concentration treatment, followed by further concentration. It can also be processed. Of course, a combination other than the above-mentioned combination may be used.

【0046】また、オリーブ植物から得られる抽出物か
ら、濃縮処理したもの、さらに分画・精製処理したもの
を、脱色および/または脱臭処理した場合、不要な成分
が除去され、かつ、無色〜淡色および/または無臭〜無
臭に近い状態になるので、色や、香りによる、使用の制
限を受けないため、幅広い用途が確保できるため好まし
い。脱色方法としては、活性炭処理や白土処理等があげ
られ、脱臭方法としては、同様に活性炭処理、白土処理
があげられ、さらに超臨界抽出、水蒸気蒸留等が挙げら
れる。
When an extract obtained from an olive plant is subjected to a concentration treatment and a further fractionation / purification treatment to be decolorized and / or deodorized, unnecessary components are removed, and the colorless to pale color is obtained. And / or odorless to almost odorless, so that use is not restricted by color or fragrance, and a wide range of applications can be ensured. Examples of the decolorization method include activated carbon treatment and clay treatment. Examples of the deodorization method include activated carbon treatment and clay treatment, and further include supercritical extraction and steam distillation.

【0047】また、オリーブ油の製造工程において生じ
る生成物、例えば圧搾残査、抽出残査、圧搾油、抽出
油、脱ガム油滓、脱酸油滓、ダーク油、廃脱色剤、脱臭
スカム、搾油ジュース、排水、廃濾過材からも活性酸素
除去機能を有する抽出物が得られるが、同様にして濃
縮、分画精製を行うこことができる。
Also, products generated in the process of producing olive oil, such as pressed residue, extracted residue, pressed oil, extracted oil, degummed oil residue, deoxidized oil residue, dark oil, waste decolorizing agent, deodorized scum, and oil pressed An extract having a function of removing active oxygen can be obtained from juice, wastewater, and waste filter material, but can be concentrated and fractionated and purified in the same manner.

【0048】濃縮および/または分画・精製の組合せは
特に制限されないが、本発明の抗酸化剤に用いる抽出物
は、水に対して易溶性であるため、上記抽出処理は水ま
たは含水有機溶媒で抽出することが好ましく、また、濃
縮や分画・精製処理は水可溶成分を濃縮等していくこと
で本抽出物が有する活性酸素除去機能を向上させること
ができる。抽出処理と濃縮処理および/または精製処理
の組み合わせは特に制限はされないが、例えば、オリー
ブ植物を水および/または親水性有機溶媒で抽出処理し
た後、得られた抽出液について、親水性有機溶媒の一部
または全部を除去し、水可溶分を回収することで濃縮す
る。ろ過や遠心分離等によって回収することができる
が、この回収効率の向上のため、必要に応じ水溶液に対
して水を添加・攪拌等の処理を行うことができる。ま
た、オリーブ植物から得られる抽出液の水および/また
は親水性有機溶媒を除去した乾固状態の抽出物について
も、上記同様に水を添加・攪拌等の処理を行い、ろ過等
によりその水可溶分を回収することで濃縮処理すること
ができる。これらの濃縮物を順相および/または逆相ク
ロマトグラフィーおよび/または再結晶にて分画・精製
処理することができる。
The combination of concentration and / or fractionation / purification is not particularly limited, but the extract used for the antioxidant of the present invention is easily soluble in water. In the concentration, fractionation and purification treatments, the active oxygen removal function of the present extract can be improved by concentrating water-soluble components. The combination of the extraction treatment, the concentration treatment and / or the purification treatment is not particularly limited. For example, after an olive plant is subjected to an extraction treatment with water and / or a hydrophilic organic solvent, the obtained extract is treated with a hydrophilic organic solvent. Part or all is removed, and the water-soluble matter is recovered to concentrate. Although it can be collected by filtration, centrifugation, or the like, in order to improve the collection efficiency, it is possible to add water to the aqueous solution and perform agitation or the like as needed. In addition, the extract in the dry state obtained by removing the water and / or the hydrophilic organic solvent from the extract obtained from the olive plant is subjected to treatment such as addition of water and stirring in the same manner as described above, and the water is removed by filtration or the like. The concentration treatment can be performed by recovering the dissolved component. These concentrates can be fractionated and purified by normal phase and / or reverse phase chromatography and / or recrystallization.

【0049】得られた抽出物、該抽出物を濃縮処理およ
び/または精製処理したものは単独でも、これらを2種
類以上組み合わせても使用することもできる。これによ
り、活性酸素除去機能の強さの特性等を設計することが
でき、さらに好適な活性酸素除去機能を有する抽出物と
して使用することができる。さらに、他の抗酸化剤を配
合して使用することができ、これにより、効果の強さ等
の詳細な設計が可能であり、また、他の機能物質との相
乗効果により大幅な機能強化も期待できる。
The obtained extract and the extract obtained by subjecting the extract to a concentration treatment and / or a purification treatment can be used alone or in combination of two or more kinds. Thereby, the characteristics of the strength of the active oxygen removing function can be designed, and it can be used as an extract having a more suitable active oxygen removing function. In addition, other antioxidants can be blended and used, which enables detailed design such as the strength of the effect, and also has a significant functional enhancement due to the synergistic effect with other functional substances. Can be expected.

【0050】本発明の抗酸化剤に用いる抽出物の活性酸
素除去機能を有する成分は、特に水系の製品に好適に配
合することができる。本抽出物は水に容易に溶解する成
分が抗酸化効果を有するため、水系の製品に好適に使用
することができる。一般的な抗酸化剤は例えば植物油由
来のトコフェロール類等、油溶性(非水溶性)のものが
多く、実際の使用に際しては制約を受けることも多い中
で、本抽出物の活性酸素除去機能を有する成分は水溶性
である(水溶性成分を含んでいる)ので応用範囲が非常
に広く、本抽出物を使用した抗酸化剤は、汎用性の高い
抗酸化剤と言える。本発明の抗酸化剤は、水系、あるい
は、乳化系等、幅広い範囲の飲食物において好適に使用
することができ、これを均一に溶解、ないしは分散させ
て含有させることができる。
The component having an active oxygen removing function of the extract used as the antioxidant of the present invention can be suitably blended particularly with an aqueous product. This extract can be suitably used for water-based products because the components that are easily dissolved in water have an antioxidant effect. Many common antioxidants are oil-soluble (water-insoluble) such as, for example, tocopherols derived from vegetable oils, and are often restricted in actual use. Since the component has water solubility (contains a water soluble component), its application range is very wide, and the antioxidant using this extract can be said to be a highly versatile antioxidant. The antioxidant of the present invention can be suitably used in a wide range of foods and drinks such as an aqueous system or an emulsified system, and can be uniformly dissolved or dispersed and contained.

【0051】また、本発明の抗酸化剤の油系への使用
は、特に単なる抽出物段階では、油に溶解しにくい成
分、油に溶解しない成分が比較的多く含まれていること
等の理由から、油脂等への好適な利用は、不溶分を除去
する等の精製を行った抽出物を配合するか、また、水お
よび乳化剤を配合することで乳化物として利用すること
が好ましい。
In addition, the use of the antioxidant of the present invention in an oil system is particularly attributable to the fact that components which are difficult to dissolve in oil and components which do not dissolve in oil are contained in a relatively large amount, especially in the mere extraction stage. Therefore, it is preferable to use an oil or fat or the like as an emulsified product by blending an extract that has been subjected to purification, such as removal of insoluble components, or by blending water and an emulsifier.

【0052】上述の通り、本発明の抗酸化剤に用いる抽
出物は活性酸素除去機能を有する。活性酸素除去機能と
は、生体内または食品や医薬品、農薬等において、活性
酸素種の生成を抑制、捕捉、消去、不均化、分解等する
機能を示す。より具体的には、例えば、活性酸素種生成
の原因となる金属イオンのキレート化および不活性化に
よる活性酸素生成抑制、生成した活性酸素種の消去ある
いは分解、酵素等による不均化、ラジカルの捕捉または
安定化によるラジカル連鎖反応の抑制および遮断等が挙
げられる。ここで、活性酸素種とは、主にスーパーオキ
シド、ヒドロキシラジカル、パーヒドロキシラジカル、
過酸化水素、一重項酸素等を示し、さらには、脂質、蛋
白質、炭水化物、核酸等の過酸化物およびこれらから派
生するフリーラジカルをも含むものとする。これらの活
性酸素種は、食品や生体内における脂質、蛋白質、炭水
化物、核酸等の様々な成分を強力に酸化し、本来の成分
とは異なる成分に変換または分解してしまう。したがっ
てこの機能は、生体内または皮膚外用剤等に含まれる成
分の酸化的劣化の防御剤として有用である。本抽出物
は、これらの中でも、特に、高いスーパーオキシド消去
活性およびヒドロキシラジカル消去活性を有する。
As described above, the extract used for the antioxidant of the present invention has a function of removing active oxygen. The active oxygen removing function refers to a function of suppressing, capturing, eliminating, disproportioning, decomposing, etc., the generation of active oxygen species in a living body or in foods, pharmaceuticals, agricultural chemicals and the like. More specifically, for example, suppression of active oxygen generation by chelation and inactivation of metal ions that cause generation of active oxygen species, elimination or decomposition of generated active oxygen species, disproportionation by enzymes, etc., radical Suppression and blocking of the radical chain reaction by trapping or stabilization, and the like. Here, the active oxygen species mainly include superoxide, hydroxy radical, perhydroxy radical,
The term refers to hydrogen peroxide, singlet oxygen, and the like, and further includes peroxides such as lipids, proteins, carbohydrates, and nucleic acids, and free radicals derived therefrom. These reactive oxygen species strongly oxidize various components such as lipids, proteins, carbohydrates, and nucleic acids in foods and living bodies, and convert or decompose them into components different from the original components. Therefore, this function is useful as a protective agent against oxidative deterioration of components contained in the in vivo or external preparation for skin and the like. The extract has high superoxide scavenging activity and hydroxy radical scavenging activity, among others.

【0053】スーパーオキシド消去活性とは、酸素分子
の1電子還元により生成するスーパーオキシドを不均
化、無効にする活性である。スーパーオキシドは、例え
ば生体内においては、白血球やミトコンドリア等で生成
され、酸素を利用した生命活動においてその生成を免れ
ることは出来ないものである。また、スーパーオキシド
は、その反応性は比較的低く、鉄や一酸化窒素などの限
られたものとしか反応しないが、過酸化水素の生成源に
なるなど他の活性酸素種の生成につながり、生体成分に
酸化傷害を引き起こす作用を有するため、生成後すぐに
消去されるべき重要な活性酸素種である。スーパーオキ
シドジスムターゼ(SOD)はスーパーオキシド消去効
果を有し、原核生物ですら保有している生体内酵素であ
るが、より積極的に生体成分を保護するためにはスーパ
ーオキシド消去活性を有する物質を生体に適用すること
が望ましい。しかし、例えばこのSODは酵素蛋白であ
り安定性が乏しく、経口投与した場合では、殆どが排泄
されてしまうため実効力は極めて低い。すなわち、本抽
出物は、摂取することで安定的にそのスーパーオキシド
消去活性を享受できるものであるので、より効果的に生
体成分を保護することで、健康な体を保つことあるいは
肌を美しいものにすること等に大きく寄与するものであ
る。
The superoxide scavenging activity is an activity that disproportionates and invalidates superoxide generated by one-electron reduction of oxygen molecules. Superoxide is produced, for example, in leukocytes, mitochondria, and the like in a living body, and is inevitable in the life activity utilizing oxygen. In addition, superoxide has relatively low reactivity and reacts only with limited substances such as iron and nitric oxide, but leads to generation of other active oxygen species such as a source of hydrogen peroxide, It is an important reactive oxygen species that has the effect of causing oxidative damage to biological components and should be eliminated immediately after its production. Superoxide dismutase (SOD) has a superoxide scavenging effect and is an in vivo enzyme possessed even by prokaryotes. To protect biological components more aggressively, a substance having superoxide scavenging activity must be used. It is desirable to apply to living bodies. However, for example, this SOD is an enzyme protein and has poor stability, and when administered orally, most of it is excreted, so that its effective power is extremely low. In other words, this extract can enjoy its superoxide elimination activity stably when ingested, so that it protects the biological components more effectively to maintain a healthy body or to make the skin beautiful It greatly contributes to the above.

【0054】本抽出物は抽出物レベルでありながら、強
いスーパーオキシド活性機能を有する合成の抗酸化剤で
あるBHAを上回る強力なスーパーオキシド消去活性を
しており、スーパーオキシド消去剤、脂質過酸化防止剤
としての利用の他、生体内における酸化防止剤(生体内
抗酸化剤)としても利用することができる。
Although the present extract is at the extract level, it has a strong superoxide scavenging activity exceeding BHA which is a synthetic antioxidant having a strong superoxide activity function. In addition to use as an antioxidant, it can also be used as an antioxidant in vivo (antioxidant in vivo).

【0055】ヒドロキシラジカル消去活性とは、種々の
要因により生成したヒドロキシラジカルを捕捉、安定化
させる活性である。ヒドロキシラジカルは、例えば酸素
を利用した生命活動においては、その生成を免れること
は出来ず、種々の活性酸素種の中でも非常に反応性に富
む化学種であり、あらゆる生体成分を酸化損傷させ得る
最も毒性の高い活性酸素種である。このヒドロキシラジ
カルの生成経路の一つとしては、生体内に存在する鉄イ
オンが過酸化水素やスーパーオキシドに関与するフェン
トン反応等が挙げられるが、生体内にはヒドロキシラジ
カルに対する有効な除去機構が存在しないため、ヒドロ
キシラジカル消去活性を有する物質の摂取は必要不可欠
である。このヒドロキシラジカルの除去剤としては、マ
ンニトールやトリプトファン、ギ酸等がある。しかしな
がら、これらのものの中には、単一品でありながらかな
りの高濃度添加を要するものが多い。すなわち、該抽出
物を含有する抗酸化剤は、摂取することでそのヒドロキ
シラジカル消去活性を享受できるものであり、効果的に
生体成分を保護することで健康な体を保つことあるいは
肌を美しいものにすること等に大きく寄与するものであ
る。
The hydroxy radical scavenging activity is an activity of capturing and stabilizing a hydroxy radical generated by various factors. Hydroxy radicals, for example, cannot be spared in the life activity utilizing oxygen, and are extremely reactive chemical species among various reactive oxygen species. It is a highly toxic reactive oxygen species. One of the pathways for the generation of this hydroxyl radical is the Fenton reaction in which iron ions present in the living body are involved in hydrogen peroxide and superoxide, but there is an effective removal mechanism for hydroxy radicals in the living body. Therefore, ingestion of a substance having a hydroxy radical scavenging activity is indispensable. Examples of the hydroxy radical removing agent include mannitol, tryptophan, and formic acid. However, many of these require a very high concentration even though they are single products. That is, the antioxidant containing the extract can enjoy its hydroxy radical scavenging activity when ingested, and can effectively protect biological components to maintain a healthy body or to make the skin beautiful. It greatly contributes to the above.

【0056】本抽出物は、抽出物レベルとしては、かな
り少量でヒドロキシラジカルを消去(例えば、リノール
酸の過酸化を抑制)することが可能であり、通常のヒド
ロキシラジカルの除去剤と比べても非常に有効であると
いえる。ヒドロキシラジカル消去剤、脂質過酸化防止剤
として使用でき、生体内における酸化防止剤(生体内抗
酸化剤)、脂質等の酸化を受け易い成分を含有する飲食
物、化粧料、医薬品、飼料等のあらゆる製品の保存安定
性を向上させる抗酸化剤としても使用できる。
The present extract is capable of eliminating hydroxy radicals (for example, suppressing peroxidation of linoleic acid) with a considerably small amount at the extract level, and can be used as compared with a conventional remover of hydroxy radicals. It can be said that it is very effective. It can be used as a hydroxy radical scavenger and a lipid peroxidant, such as foods and drinks, cosmetics, pharmaceuticals, feeds, etc., which contain antioxidants in vivo (antioxidants in vivo), and components susceptible to oxidation such as lipids. It can also be used as an antioxidant to improve the storage stability of any product.

【0057】しかも、前述のSODはスーパーオキシド
に対してのみ消去効果を示し、ヒドロキシラジカルに対
しては全く消去活性が無く、また、同様にマンニトール
はスーパーオキシドを消去出来ない。これに対して、本
抽出物はこの両者に対して、消去効果を示す。すなわ
ち、本抽出物は、強いスーパーオキシド消去活性、およ
び、強いヒドロキシラジカル消去活性という両方の活性
酸素除去機能を有するので、極めて汎用性が高いといえ
る。また、効果の面からは、スーパーオキシド消去活
性、ヒドロキシラジカル消去活性の両方の活性酸素除去
機能を有することから、生体内抗酸化効果を有するもの
として優れており、併せて、ヒドロキシラジカル消去活
性による脂質過酸化防止効果から皮膚外用剤の他、飲食
物、化粧料、医薬品、飼料等の保存安定性向上効果を有
するものとして優れている。
Furthermore, the above-mentioned SOD has an erasing effect only on superoxide, has no erasing activity on hydroxy radicals, and mannitol similarly cannot erasure superoxide. On the other hand, the present extract shows an elimination effect on both. That is, the present extract has extremely high versatility because it has both active oxygen removing functions of strong superoxide scavenging activity and strong hydroxyl radical scavenging activity. In addition, in terms of effect, it has both an active oxygen removing function of a superoxide scavenging activity and a hydroxy radical scavenging activity, so it is excellent as having an in vivo antioxidant effect. Because of its lipid peroxidation preventing effect, it is excellent as an agent for improving the storage stability of foods and drinks, cosmetics, pharmaceuticals, feeds, and the like in addition to skin external preparations.

【0058】他の天然抗酸化物と活性酸素除去機能を比
較すると、例えば比較的活性酸素除去機能が強いとされ
るゴマ粕由来の抽出物のスーパーオキシド消去活性は5
〜10unit/(mg/mL)であるのに対し、本抽
出物はスーパーオキシド消去活性が20〜65unit
/(mg/mL)であり、ゴマ粕由来抽出物の2〜13
倍という、非常に高い効果を有する。
When comparing the active oxygen removing function with other natural antioxidants, for example, the extract derived from sesame meal, which is considered to have a relatively strong active oxygen removing function, has a superoxide scavenging activity of 5%.
This extract has a superoxide scavenging activity of 20 to 65 units / (mg / mL).
/ (Mg / mL), 2 to 13 of the extract from sesame meal
It has a very high effect of double.

【0059】ここで、本方法は、活性酸素除去機能の強
い抽出物を得ることができ、さらに、その単位原料あた
りの収率も高い。この双方のことから、活性酸素除去機
能の強さに、単位原料あたりの収率を乗じた活性酸素除
去機能収量指数<式1>について、他の天然原料を用い
た場合に比べて、大幅に高い値が得られる。つまり、単
位原料あたりに得られる活性酸素除去機能の総量が大き
いということである。よって、本抽出物を生産し、使用
することで、活性酸素除去機能が強い製品はもちろん、
他の天然の抗酸化剤等と置き換えた場合、単位原料から
得られる活性酸素除去機能の総量が大きいためより多く
の製品をつくることができる、ということであり、この
ことは、コスト面からのメリットも期待できるというこ
とである。また、この活性酸素除去機能収量指数を参考
とすることで、好適な生産条件を決めることもできる。
In this method, an extract having a strong active oxygen removing function can be obtained, and the yield per unit raw material is high. From both of these facts, the active oxygen removal function yield index <Equation 1>, which is obtained by multiplying the strength of the active oxygen removal function by the yield per unit raw material, is significantly higher than the case where other natural raw materials are used. High values are obtained. That is, the total amount of the active oxygen removing function obtained per unit raw material is large. Therefore, by producing and using this extract, not only products with strong active oxygen removal function,
When replaced by other natural antioxidants, etc., the total amount of active oxygen removal function obtained from unit raw materials is large, so that more products can be made, which means that cost reduction The benefits can be expected. Also, by referring to the active oxygen removal function yield index, suitable production conditions can be determined.

【0060】[0060]

【数1】<式1> 活性酸素除去機能収量指数=活性酸
素除去機能の強度×単位原料あたりの収率(%)
<Equation 1> Active oxygen removal function yield index = Strength of active oxygen removal function × Yield per unit raw material (%)

【0061】スーパーオキシド消去活性に関していえ
ば、単位原料から得られる抽出物のスーパーオキシド消
去活性収量指数<式2>がおおよそ100〜3250で
ある。例えば、ゴマと比較した場合、スーパーオキシド
消去活性収量指数が5〜100であるので、ゴマの場合
の1〜650倍という高い値である。つまり、同じ単位
原料あたりで1〜650倍の活性酸素除去機能が得られ
るということである。
As for the superoxide scavenging activity, the extract obtained from the unit raw material has a superoxide scavenging activity yield index (formula 2) of about 100 to 3250. For example, when compared with sesame, the superoxide scavenging activity yield index is 5 to 100, which is a high value of 1 to 650 times that of sesame. That is, the active oxygen removing function can be obtained 1 to 650 times per unit raw material.

【0062】[0062]

【数2】<式2> スーパーオキシド消去活性収量指数
=スーパーオキシド消去活性(unit/(mg/m
L))×単位原料あたりの収率(%)
<Equation 2> Superoxide scavenging activity yield index = superoxide scavenging activity (unit / (mg / m
L)) × Yield per unit raw material (%)

【0063】本発明の抗酸化剤に用いる抽出物は、スー
パーオキシド消去活性、ヒドロキシラジカル消去活性等
の活性酸素除去機能を有するが、該抗酸化剤を人体やそ
の他飲食物、医薬品、肥料、飼料や皮膚外用剤に使用す
ることで、様々な2次的な効果を得ることができる。今
までにも述べているが、例えば、抗酸化効果、特には製
品の保存安定性の向上効果等の優れた酸化防止効果や、
各種疾病予防効果や抗老化効果等の優れた生体内抗酸化
効果がを得ることができる。
The extract used as the antioxidant of the present invention has a function of removing active oxygen such as superoxide scavenging activity and hydroxy radical scavenging activity, but the antioxidant is used in humans and other foods and drinks, pharmaceuticals, fertilizers and feeds. And various external effects can be obtained by using it for skin and external preparations. As mentioned before, for example, an antioxidant effect, especially an excellent antioxidant effect such as an effect of improving the storage stability of the product,
Excellent in vivo antioxidant effects such as various disease prevention effects and anti-aging effects can be obtained.

【0064】抗酸化効果とは、食品や生体内における脂
質、蛋白質、炭水化物、核酸等の様々な成分が酸化さ
れ、本来の成分とは異なる成分に変換または分解されて
しまうことを抑制あるいは防止する効果である。したが
ってこの効果は、生体内または食品や医薬品、農薬等に
含まれる成分の酸化的劣化の防御の点で有用であり、食
品産業、特に水産加工品、健康食品、栄養食品のほか、
医薬品・農薬分野や化粧品分野において実利的な利用が
期待されるものである。具体的には飲食物、医薬品、肥
料、飼料や皮膚外用剤等の製品の保存性向上効果等の酸
化防止効果、各種疾病防止効果や抗老化効果等の生体内
抗酸化効果等を得ることができる。
The antioxidant effect refers to suppressing or preventing various components such as lipids, proteins, carbohydrates, and nucleic acids in a food or a living body from being oxidized and converted or decomposed into components different from the original components. The effect is. Therefore, this effect is useful in terms of protection against oxidative degradation of components in vivo or contained in foods, pharmaceuticals, agricultural chemicals, etc., and in addition to the food industry, especially fishery products, health foods, nutritional foods,
It is expected to be used practically in the fields of pharmaceuticals / pesticides and cosmetics. Specifically, it is possible to obtain an antioxidant effect such as an effect of improving the preservability of products such as foods and drinks, pharmaceuticals, fertilizers, feeds and external preparations for skin, an antioxidant effect in vivo such as an effect of preventing various diseases and an antiaging effect. it can.

【0065】酸化防止効果とは、飲食物、皮膚外用剤、
医薬品、飼料等に含有される酸化され易い成分、特に不
飽和脂肪酸を含む脂質等の酸化劣化を防止する効果を示
す。飲食物、皮膚外用剤、医薬品、飼料等に含有される
成分の酸化劣化は、その品質劣化、栄養性・機能性低下
等の保存安定性上の問題の大きな原因となる。したがっ
て、各種成分の酸化を抑えることができれば、飲食物、
皮膚外用剤、医薬品、飼料等の品質を安定化および保持
することが可能である。この点において、本抽出物は、
活性酸素除去機能を有するため、各種成分の酸化を最小
限に抑えることが期待でき、非常に好ましい。すなわ
ち、該抽出物を含有する抗酸化剤は、飲食物、皮膚外用
剤、医薬品、飼料等に含有される成分の酸化を防止する
ことで、その保存安定性向上、品質向上、栄養性・機能
性保持等に大きく寄与するものである。
The antioxidant effects include foods and drinks, skin external preparations,
It has an effect of preventing oxidative deterioration of easily oxidizable components contained in pharmaceuticals, feeds, and the like, especially lipids containing unsaturated fatty acids. Oxidative degradation of components contained in foods and drinks, skin external preparations, pharmaceuticals, feeds, and the like is a major cause of storage stability problems such as deterioration of quality, nutritional and functional deterioration. Therefore, if the oxidation of various components can be suppressed,
It is possible to stabilize and maintain the quality of skin external preparations, pharmaceuticals, feeds and the like. In this regard, the extract is
Since it has an active oxygen removing function, it can be expected to minimize the oxidation of various components, which is very preferable. That is, the antioxidant containing the extract prevents the oxidation of components contained in foods and drinks, skin external preparations, pharmaceuticals, feeds, and the like, thereby improving storage stability, improving quality, and improving nutritional properties and functions. It greatly contributes to maintaining the properties.

【0066】本発明の抗酸化剤は、実際に該抗酸化剤を
含有する飲食物や化粧品を作成した場合、該抗酸化剤を
含有していない同等品と比べて、明らかな酸化防止効果
を有している。このため本発明の抗酸化剤は酸化防止剤
として使用することができる。すなわち、例えば、クッ
キーを作製し、60℃、暗所で18日間保存した後、常
法に則って保存後のクッキーから油分を抽出し、そのP
OVを測定比較すると、本発明の抗酸化剤は、明らかに
クッキーの主に油脂の酸化を防止しており、高い酸化防
止効果を有することが分かる。また同時に、本発明の抗
酸化剤の酸化防止効果は、実際に該抗酸化剤を含有する
飲食物や化粧品を作成した場合、該抗酸化剤を含有して
いない同等品と比べて、明らかに保存安定性が向上して
いることからも明らかである。すなわち、例えば、クッ
キーを作製し、60℃、暗所で18日間保存した後に試
食した結果では、該抗酸化剤を含有していないクッキー
はかなりの酸化劣化臭を有していたのに対し、本発明の
抗酸化剤を配合したクッキーは明らかに良好な風味を保
持することから、該抗酸化剤の酸化防止効果により保存
安定性が向上していることが分かる。本発明の抗酸化剤
を酸化防止剤として各種製品に使用することで、該製品
について保存安定性向上効果等を得ることができる。
The antioxidant of the present invention has a clear antioxidant effect when foods and drinks and cosmetics containing the antioxidant are actually prepared, as compared with the equivalent products not containing the antioxidant. Have. Therefore, the antioxidant of the present invention can be used as an antioxidant. That is, for example, after preparing a cookie and storing it in a dark place at 60 ° C. for 18 days, oil is extracted from the stored cookie in accordance with a conventional method,
When the OV is measured and compared, it can be seen that the antioxidant of the present invention clearly prevents the oxidation of mainly fats and oils of cookies and has a high antioxidant effect. At the same time, the antioxidant effect of the antioxidant of the present invention, when actually making foods and drinks and cosmetics containing the antioxidant, compared to the equivalent product without the antioxidant, clearly It is clear from the improved storage stability. That is, for example, a cookie made and stored at 60 ° C. in a dark place for 18 days before tasting showed that the cookie not containing the antioxidant had a considerable oxidatively degraded odor, The cookie containing the antioxidant of the present invention clearly retains a good flavor, indicating that the antioxidant effect of the antioxidant has improved storage stability. By using the antioxidant of the present invention as an antioxidant in various products, the effect of improving the storage stability of the product can be obtained.

【0067】また、生体内抗酸化効果とは、生体内にお
いてその生成を免れることができない活性酸素種を除去
することで、生命活動において重要な生体成分を保護す
る効果を示す。一般に、生体内で発生した活性酸素種
は、脂質、蛋白質、糖質、核酸等の生命活動において重
要な生体成分、特には不飽和脂肪酸を含有する脂質類を
強力に酸化し、本来の成分とは異なる成分に変換または
分解してしまう。さらに、この様な現象が体内に蓄積す
ることが様々な疾病や老化現象の原因となることが知ら
れているが、これに対して生体内抗酸化効果を有するも
のの適用が、これら疾病や老化の予防や改善につながる
ことも明らかになってきている。したがって、本発明の
抗酸化剤は、本抽出物が有する活性酸素除去機能により
得られる生体内抗酸化効果により、生体成分を保護する
ものであり、ひいては、活性酸素種等が引き起こす様々
な疾病や老化現象を予防および改善できるような、各種
疾病予防効果および/または抗老化効果を有するもので
ある。
The in vivo antioxidant effect has an effect of protecting biological components important in life by removing active oxygen species that cannot be avoided in the living body. In general, reactive oxygen species generated in a living body strongly oxidize vital biological components such as lipids, proteins, carbohydrates, and nucleic acids, particularly lipids containing unsaturated fatty acids, and become active components. Is converted or decomposed into different components. Furthermore, it is known that the accumulation of such phenomena in the body causes various diseases and aging phenomena, but the application of those having an antioxidant effect in vivo has been applied to these diseases and aging. It has also become clear that it can lead to prevention and improvement. Therefore, the antioxidant of the present invention protects biological components by the in vivo antioxidant effect obtained by the active oxygen removing function of the present extract, and thus various diseases caused by active oxygen species and the like. It has various disease prevention effects and / or anti-aging effects that can prevent and improve the aging phenomenon.

【0068】本発明の抗酸化剤の生体内抗酸化効果は、
例えば、動物試験によって検討することができる。その
試験とはすなわち、ラットを用いて、該抗酸化剤を含有
する飼料を与えた場合と、通常の餌組成である飼料を与
えた場合とで、生体内抗酸化力に如何なる差が生じるか
を検討するものである。この結果は人間に対しても同様
の傾向を示す。生体内抗酸化力とは、具体的には例え
ば、ラットの肝臓そのものの抗酸化力を測定すればよ
い。この試験において、該抗酸化剤を含有する飼料を与
えた場合は、通常の餌組成である飼料を与えた場合に比
べて、有意に生体内抗酸化力が向上している。すなわ
ち、本発明の抗酸化剤は、明らかに生体内抗酸化効果を
有することが分かる。また同様にして、該抗酸化剤の投
与量を増減した場合には、投与量依存的に生体内抗酸化
力が変動する。すなわちこれは、該抗酸化剤の投与量と
生体内抗酸化効果がほぼ比例関係にあることを示してお
り、該抗酸化剤の生体内抗酸化効果はその投与量に依存
的であるといえる。このことは、本発明の抗酸化剤を各
種用途に展開した場合に、その使用量に応じた生体内抗
酸化効果を得られるということなので、その使用の目
的、手段等に応じて適宜使用量を決められるというメリ
ットがあり、大変好ましい。
The in vivo antioxidant effect of the antioxidant of the present invention is as follows:
For example, it can be examined by animal tests. That is, the difference between the in vivo antioxidant power of a rat fed a diet containing the antioxidant and the feed of a normal diet composition using a rat. Is to be considered. This result shows a similar tendency for humans. Specifically, the in vivo antioxidant power may be, for example, the antioxidant power of the rat liver itself. In this test, when the feed containing the antioxidant was given, the antioxidant power in the living body was significantly improved as compared with the case where the feed having the usual feed composition was given. That is, it is clear that the antioxidant of the present invention clearly has an antioxidant effect in vivo. Similarly, when the dose of the antioxidant is increased or decreased, the in vivo antioxidant power fluctuates in a dose-dependent manner. That is, this shows that the dose of the antioxidant and the antioxidant effect in vivo are almost proportional, and it can be said that the antioxidant effect in vivo of the antioxidant is dependent on the dose. . This means that when the antioxidant of the present invention is developed for various uses, it is possible to obtain an antioxidant effect in a living body according to the amount of the antioxidant used. It is very preferable because it has the merit that it can be determined.

【0069】また、本発明の抗酸化剤の生体内抗酸化効
果は、人に摂取させた試験によって評価することができ
る。例えば、本抽出物をそのまま、または、該抽出物が
配合された錠剤、散剤、カプセル等、その他様々な剤形
に調製された本発明の抗酸化剤を人が経口摂取した場合
と、本抽出物が無配合のものを経口摂取した場合との比
較において、いかなる差が生じるかを評価するものであ
る。この場合の生体内抗酸化力とは、具体的には例え
ば、試験期間中、一定期間毎(例えば10日毎)に被験
者の血液を採取し、遠心分離等により血清を調製し、そ
の血清中の過酸化脂質(PCOOH)量を測定すればよ
い。この試験において、本発明の抗酸化剤を人が経口摂
取した場合は、試験開始から経日的に過酸化脂質量が減
少し、30日後には過酸化脂質生成量を大幅に抑制す
る。一方、本抽出物が無配合のものを経口摂取した場合
には、このような過酸化脂質生成を抑制する効果は全く
見られないことから、本発明の抗酸化剤を摂取した場合
には、有意に生体内抗酸化力が向上していることが分か
る。すなわち、本発明の抗酸化剤は、人体に対しても明
らかに生体内抗酸化効果を有することが分かる。更に
は、本発明の抗酸化剤、特に生体内抗酸化剤として使用
される場合において、各種疾病防止効果および/または
抗老化効果を発揮する。
The in vivo antioxidant effect of the antioxidant of the present invention can be evaluated by a test ingested by humans. For example, the present extract may be used as it is, or a tablet, powder, capsule or the like containing the extract may be used in various other dosage forms. The purpose of the present invention is to evaluate what difference is produced in comparison with the case where a substance is not orally ingested. In this case, the in vivo antioxidant activity is, specifically, for example, a test subject's blood is collected at regular intervals (for example, every 10 days) during the test period, and serum is prepared by centrifugation or the like. What is necessary is just to measure the amount of lipid peroxide (PCOOH). In this test, when a person orally ingests the antioxidant of the present invention, the amount of lipid peroxide decreases day by day from the start of the test, and the amount of lipid peroxide production is significantly suppressed after 30 days. On the other hand, when this extract is orally ingested without blending, since such an effect of suppressing lipid peroxide production is not seen at all, when ingesting the antioxidant of the present invention, It can be seen that the in vivo antioxidant power is significantly improved. That is, it is understood that the antioxidant of the present invention clearly has an in vivo antioxidant effect on the human body. Furthermore, when used as the antioxidant of the present invention, particularly in vivo, it exerts various disease preventing effects and / or antiaging effects.

【0070】本抽出物の原料であるオリーブは、安定的
に入手することができる植物原料である。天然由来であ
り、食品・食用として広く用いられているオリーブを原
料として得られる抽出物であることから、人体にとって
安全性の高い抽出物であるといえる。
Olive, which is a raw material of the present extract, is a plant raw material that can be stably obtained. Since it is an extract obtained from olives, which are naturally derived and widely used as food and food, it can be said that the extract is highly safe for the human body.

【0071】本発明によれば、活性酸素除去機能を有す
るオリーブ抽出物を含有する抗酸化剤を得ることができ
る。さらに、該抽出物を濃縮、分画・精製処理すること
で活性酸素除去機能を向上させた該抽出物を得ることが
できるため、濃縮条件等を調整することにより、求める
強さの機能を有する該抽出物を得ることができ、該抽出
物を含有することで求める強さの抗酸化効果を有する抗
酸化剤を得ることができる。また、該抗酸化剤は、飲食
物、皮膚外用剤等の様々な用途に利用することができ
る。さらに、オリーブ植物から容易に得ることができ、
また、オリーブ油の製造工程中に発生する通常は廃棄さ
れている生成物からも好適に得ることができることか
ら、コスト面からみても、資源の有効活用という面から
みても好ましい。
According to the present invention, an antioxidant containing an olive extract having an active oxygen removing function can be obtained. Furthermore, since the extract having an enhanced active oxygen removing function can be obtained by concentrating, fractionating and purifying the extract, the extract has the function of the desired strength by adjusting the concentration conditions and the like. The extract can be obtained, and an antioxidant having an antioxidant effect of the required strength can be obtained by containing the extract. In addition, the antioxidant can be used for various uses such as foods and drinks and external preparations for skin. In addition, it can be easily obtained from olive plants,
In addition, since it can be suitably obtained from the normally discarded product generated during the production process of olive oil, it is preferable from the viewpoint of cost and the effective utilization of resources.

【0072】本発明の抗酸化剤は一般的な方法により製
剤化できる。有効成分として含有されるオリーブ植物か
ら得られる抽出物は、粗抽出物でも濃縮および/または
分画・精製されたものでも良いが、特に水溶性成分を濃
縮および/または分画・精製した抽出物を用いることが
好ましい。オリーブ植物から得られる抽出物に関し、水
溶性成分の画分等が活性酸素除去機能が強いため、該水
溶性成分を濃縮等した抽出物を用いることが好ましい。
The antioxidant of the present invention can be formulated by a general method. The extract obtained from the olive plant contained as an active ingredient may be a crude extract or a concentrated and / or fractionated / purified extract, and particularly an extract obtained by concentrating and / or fractionating / purifying a water-soluble component. It is preferable to use With respect to the extract obtained from olive plants, it is preferable to use an extract obtained by concentrating the water-soluble component since the fraction of the water-soluble component has a strong active oxygen removing function.

【0073】また、本発明の抗酸化剤の形態としては、
散剤、カプセル剤(硬カプセル剤、軟カプセル剤な
ど)、顆粒剤(コーティングした物、丸剤、トローチ
剤、液剤、またはこれらの製剤学的に許容され得る徐放
化製剤など)などが挙げられる。
The form of the antioxidant of the present invention includes
Powders, capsules (hard capsules, soft capsules, etc.), granules (coated, pills, troches, liquids, or pharmaceutically acceptable sustained-release preparations thereof) and the like. .

【0074】これらの製剤は公知の製剤学的製法に準
じ、製剤として薬理学的に許容され得る基剤、担体、賦
形剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤等と共に用いてもよい
These preparations may be used together with pharmacologically acceptable bases, carriers, excipients, disintegrants, lubricants, coloring agents, etc. according to known pharmaceutical preparation methods.

【0075】これらの製剤に用いる担体や賦形剤として
は、例えば乳糖、ブドウ糖、白糖、マンニトール、馬鈴
薯デンプン、トウモロコシデンプン、炭酸カルシウム、
リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、結晶セルロース、
カンゾウ末、ゲンチアナ末などが挙げられる。
The carriers and excipients used in these preparations include, for example, lactose, glucose, sucrose, mannitol, potato starch, corn starch, calcium carbonate,
Calcium phosphate, calcium sulfate, crystalline cellulose,
Licorice powder, gentian powder and the like.

【0076】これらの製剤に用いる結合剤としては、例
えばデンプン、トラガントゴム、ゼラチン、シロップ、
ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニ
ルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース、メチル
セルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセル
ロースなどが挙げられる。
The binder used in these preparations includes, for example, starch, tragacanth, gelatin, syrup,
Examples include polyvinyl alcohol, polyvinyl ether, polyvinyl pyrrolidone, hydroxypropyl cellulose, methyl cellulose, ethyl cellulose, carboxymethyl cellulose, and the like.

【0077】これらの製剤に用いる崩壊剤としては例え
ばデンプン、寒天、ゼラチン末、カルボキシメチルセル
ロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシ
ウム、結晶セルロース、炭酸カルシウム、炭酸水素ナト
リウム、アルギン酸ナトリウムなどが挙げられる。
The disintegrants used in these preparations include, for example, starch, agar, gelatin powder, sodium carboxymethylcellulose, calcium carboxymethylcellulose, crystalline cellulose, calcium carbonate, sodium hydrogencarbonate, sodium alginate and the like.

【0078】これらの製剤に用いる滑沢剤としては例え
ばステアリン酸マグネシウム、タルク、水素添加植物
油、マクロゴールなどが挙げられる。
Examples of the lubricant used in these preparations include magnesium stearate, talc, hydrogenated vegetable oil, macrogol and the like.

【0079】これらの製剤に用いる着色剤としては医薬
品に添加することが許容されているものを、それぞれ用
いることができる。
As the coloring agents used in these preparations, those permitted to be added to pharmaceuticals can be used.

【0080】また、注射剤を調製する場合は、必要に応
じて、pH調節剤、緩衝剤、安定化剤、可溶化剤などを添
加して、常法により各注射剤とする。
When preparing injections, if necessary, a pH adjuster, a buffer, a stabilizer, a solubilizing agent and the like are added, and each injection is prepared by a conventional method.

【0081】錠剤、顆粒剤を調製する場合は、必要に応
じて、白糖、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロー
ス、精製セラック、ゼラチン、グリセリン、ソルビトー
ル、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロー
ス、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニル
ピロリドン、フタル酸セルロースアセテート、ヒドロキ
シプロピルメチルセルロースフタレート、メチルメタク
リレート、メタアクリル酸重合体などで被膜しても良い
し、2つ以上の層で被膜しても良い。さらにエチルセル
ロースやゼラチンのような物質のカプセルでも良い。
When preparing tablets and granules, sucrose, gelatin, hydroxypropylcellulose, purified shellac, gelatin, glycerin, sorbitol, ethylcellulose, hydroxypropylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, polyvinylpyrrolidone, phthalic acid It may be coated with cellulose acetate, hydroxypropyl methylcellulose phthalate, methyl methacrylate, methacrylic acid polymer, or the like, or may be coated with two or more layers. Further, capsules made of a substance such as ethyl cellulose or gelatin may be used.

【0082】外用剤の形態としては、経皮投与用または
口腔内あるいは経鼻などの経粘膜投与用の固体、半固
体、半固体状、または液状の製剤が挙げられる。液状製
剤としては、例えば製剤学的に許容される乳剤あるいは
ローション剤などの乳濁剤、外用チンキ剤、経粘膜投与
用液剤などが挙げられる。この製剤は通常用いられる希
釈剤としては、例えばエタノール、油分、乳化剤などを
含む。半固体製剤としては、例えば油性軟膏、親水性軟
膏などの軟膏剤が挙げられる。この製剤は通常用いられ
る基剤あるいは担体として、例えば、水、ワセリン、ポ
リエチレングリコール、油分、界面活性剤などを含む。
半固体あるいは固体製剤としては、例えば硬膏(ゴム
膏、プラスターなど)、フィルム剤、テープ剤、あるい
はパップ剤などの経皮投与用または経粘膜(口腔内、経
鼻)投与用の貼付剤などが挙げられる。この製剤は通常
用いられる基剤あるいは担体として、例えば天然ゴム、
ブタジエンゴム、SBR、SISなどの合成ゴムなどの
ゴム系高分子、ゼラチン、カオリン、酸化亜鉛などの泥
状化剤、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリ
アクリル酸ナトリウムなどの親水性高分子、アクリル樹
脂、流動パラフィンなどの粘着付与剤、水、その他の油
分、界面活性剤を含む。これらの製剤は、さらに安定化
剤、溶解補助剤、経皮吸収促進剤のような補助剤、ある
いは芳香剤、防腐剤などの添加剤などを用いても良い。
Examples of the form of the external preparation include solid, semi-solid, semi-solid or liquid preparations for transdermal administration or transmucosal administration such as intraoral or intranasal administration. Examples of the liquid preparation include pharmaceutically acceptable emulsions or emulsions such as lotions, tinctures for external use, and liquid preparations for transmucosal administration. This preparation contains, for example, ethanol, oils, emulsifiers and the like as commonly used diluents. Examples of semisolid preparations include ointments such as oily ointments and hydrophilic ointments. This preparation contains, for example, water, petrolatum, polyethylene glycol, oil, surfactant and the like as a commonly used base or carrier.
Examples of semi-solid or solid preparations include patches for transdermal administration such as plasters (rubber plaster, plaster, etc.), films, tapes, and cataplasms or for transmucosal (intraoral, nasal) administration. No. This formulation is usually used as a base or carrier, for example, natural rubber,
Rubber-based polymers such as butadiene rubber, synthetic rubber such as SBR and SIS, mud-forming agents such as gelatin, kaolin, and zinc oxide; hydrophilic polymers such as sodium carboxymethylcellulose and sodium polyacrylate; acrylic resins; liquid paraffin And tackifiers, water, other oils, and surfactants. These preparations may further use adjuvants such as stabilizers, solubilizers, and transdermal absorption enhancers, or additives such as fragrances and preservatives.

【0083】本発明の抗酸化剤は本抽出物を有効成分と
して含有する。有効成分とは目的とする機能が発揮され
れる程度に該抽出物を含むことを示す。その含量は、特
に制限されないが、目的とする機能の度合い、使用態
様、使用量、該抽出物の濃縮や分画・精製度合い等によ
り適宜調整することができ、例えば0.01〜100質
量%、好ましくは0.1〜99.9質量%、更に好まし
くは0.5〜99.5質量%である。本抽出物はオリー
ブ植物および/またはオリーブ油製造工程で得られる生
成物を水および/または有機溶媒で抽出処理して得るこ
とができ、更に該抽出物を濃縮処理および/または分画
・精製処理することで、効果が強化された活性酸素除去
剤を得ることができる。該活性酸素除去剤は、人体やそ
の他飲食物、医薬品、肥料、飼料や皮膚外用剤に使用す
ることができる。また、経口等により内服することも、
皮膚等に塗布することもできる。
The antioxidant of the present invention contains the present extract as an active ingredient. The active ingredient indicates that the extract is contained to such an extent that the intended function is exhibited. Although the content is not particularly limited, it can be appropriately adjusted depending on the degree of the intended function, the mode of use, the amount of use, the degree of concentration, fractionation and purification of the extract, for example, 0.01 to 100% by mass. , Preferably 0.1 to 99.9% by mass, more preferably 0.5 to 99.5% by mass. This extract can be obtained by extracting the product obtained in the olive plant and / or olive oil production process with water and / or an organic solvent, and further subjecting the extract to a concentration treatment and / or a fractionation / purification treatment. This makes it possible to obtain an active oxygen remover with enhanced effects. The active oxygen remover can be used for humans and other foods and drinks, pharmaceuticals, fertilizers, feeds and external preparations for skin. In addition, it may be taken orally, etc.
It can also be applied to the skin and the like.

【0084】本発明の抗酸化剤は、常法にしたがって経
口、非経口の製品に配合することができ、飲食物、皮膚
外用剤、医薬品、医薬部外品、飼料、餌料、農薬等の様
々な分野で利用することができる。例えば、飲食物に配
合した場合には、生体内抗酸化効果および酸化防止効果
を有する飲食物を提供することができる。この飲食物は
例えば、風味劣化・変色抑制等の酸化防止効果が期待で
き、かつ、生活習慣病予防等の効果が期待できる。生活
習慣病予防等の効果からは、健康食品、栄養食品等とし
て用いられることも期待できる。さらには、該抽出物の
濃縮等の条件を調整することで、これを含有する飲食物
を継続的に摂取することにより、更なる効果を発揮する
機能的な飲食物を提供することができる。その他、家
畜、魚類の飼料、餌料に利用することができ、特に魚類
の餌料は水分を必須とするものが多く放置すると酸化劣
化し易いものがあり、また、水中投下するので水と接し
いたみ易いが、これらを改善した餌料等を提供すること
ができる。また、併せて、一部には飼育の困難な鑑賞用
や養殖等の魚類も存在するが、本発明の抗酸化剤を用い
た餌料等は生体内抗酸化効果等の効果を有することか
ら、これらの育成・生存率の向上に寄与する餌料等を提
供することができる。
The antioxidant of the present invention can be incorporated into oral and parenteral products according to ordinary methods, and can be used in various forms such as food and drink, external preparations for skin, pharmaceuticals, quasi-drugs, feed, feed, agricultural chemicals and the like. It can be used in various fields. For example, when incorporated in foods and drinks, foods and drinks having in vivo antioxidant and antioxidant effects can be provided. The food and drink can be expected to have an antioxidant effect such as suppression of flavor deterioration and discoloration, and an effect of preventing lifestyle-related diseases. From the effects of preventing lifestyle-related diseases, it can be expected to be used as health foods, nutritional foods and the like. Furthermore, by adjusting conditions such as concentration of the extract, a food or drink containing the extract can be provided to provide a functional food or drink that exerts a further effect by continuously ingesting the food or drink. In addition, it can be used for livestock, fish feed and feed, especially fish feed that requires a lot of water and is susceptible to oxidative deterioration when left unattended. However, it is possible to provide a feed or the like in which these are improved. In addition, there are some fish for appreciating or farming that are difficult to breed, but feeds using the antioxidant of the present invention have effects such as in vivo antioxidant effects. It is possible to provide a feed or the like that contributes to the improvement of these breeding and survival rates.

【0085】本発明の抗酸化剤を人体やその他飲食物、
医薬品、肥料、飼料や皮膚外用剤に使用することによ
り、抗酸化効果、特には製品の保存安定性の向上効果等
の優れた酸化防止効果や、各種疾病予防効果や抗老化効
果等の優れた生体内抗酸化効果がを得ることができる。
さらに、オリーブ植物から容易に得ることができ、ま
た、オリーブ油の製造工程中に発生する通常は廃棄され
ている生成物からも好適に得ることができることから、
コスト面からみても、資源の有効活用という面からみて
も好ましい。
The antioxidant of the present invention may be used in humans and other foods and drinks,
Used in pharmaceuticals, fertilizers, feeds and skin external preparations, it has excellent antioxidant effects, especially excellent antioxidant effects such as improving storage stability of products, and various disease prevention effects and antiaging effects. An in vivo antioxidant effect can be obtained.
Furthermore, since it can be easily obtained from olive plants, and can be suitably obtained from normally discarded products generated during the process of producing olive oil,
It is preferable from the viewpoint of cost and the effective utilization of resources.

【0086】[0086]

【実施例】次に、実施例を挙げ、本発明をさらに説明す
るが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではな
い。
EXAMPLES Next, the present invention will be further described with reference to examples, but the present invention is not limited to these examples.

【0087】実施例1〜17、比較例1において各種抽
出物を製造した。また、収率については下記の<式3>
で求めた。
Various extracts were produced in Examples 1 to 17 and Comparative Example 1. The yield is shown in the following <Equation 3>.
I asked for it.

【0088】[0088]

【数3】<式3> 抽出物の収率=本抽出物の質量(注
1)÷抽出前の原料の質量(注2) 注1:凍結乾燥により乾燥させた後、質量(g)を測定 注2:本抽出物を、溶剤等で抽出する直前の果実、粕、
種子の質量(g)を測定
<Equation 3> Yield of the extract = mass of the extract (Note 1) 質量 mass of the raw material before extraction (Note 2) Note 1: After drying by freeze-drying, the mass (g) Measurement Note 2: The extract, fruit, lees, immediately before extraction with a solvent, etc.
Measure the mass (g) of seed

【0089】実施例1 国産のオリーブ(Olea europaea L.)
の乾燥果実(種子を含む)1kgを破砕し、3Lのヘキ
サンを加え3時間抽出した。これを4度繰り返した脱脂
果実について、種子を除去した後、粉砕し、再度5倍量
のヘキサンで3時間抽出することで、完全に油分を除去
した脱脂粕229gを得た。この脱脂粕に10倍量のエ
タノール含量が60質量%の含水エタノール水溶液を加
え、室温で激しく攪拌しながら3時間抽出した。全量を
ろ過後、ろ液を濃縮乾固して抽出物112.7gを得
た。得られた抽出物に関し、スーパーオキシド消去活性
およびヒドロキシラジカル消去活性の評価を行った。そ
の結果を表1および表2に示す。
Example 1 Domestic olives (Olea europaea L.)
1 kg of dried fruit (including seeds) was crushed, and 3 L of hexane was added to extract for 3 hours. After the seeds were removed from the defatted fruit obtained by repeating this procedure four times, the seeds were removed, pulverized, and extracted again with 5 times the amount of hexane for 3 hours to obtain 229 g of defatted cake from which oil was completely removed. To this defatted lees, a 10-fold amount of an aqueous ethanol solution containing 60% by mass of ethanol was added, and the mixture was extracted at room temperature with vigorous stirring for 3 hours. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated to dryness to obtain 112.7 g of an extract. The obtained extract was evaluated for superoxide scavenging activity and hydroxy radical scavenging activity. The results are shown in Tables 1 and 2.

【0090】実施例2 実施例1と同様の方法により得た脱脂粕に、10倍量の
エタノール含量が80質量%の含水エタノール水溶液を
加え、同様に室温で激しく攪拌しながら3時間抽出し
た。全量をろ過後、ろ液を濃縮乾固して抽出物79.7
gを得た。得られた抽出物に関し、スーパーオキシド消
去活性の評価を行った結果を表1に示す。
Example 2 To a defatted cake obtained in the same manner as in Example 1 was added a 10-fold amount of a water-containing aqueous ethanol solution having an ethanol content of 80% by mass, followed by extraction at room temperature with vigorous stirring for 3 hours. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated to dryness to obtain an extract of 79.7.
g was obtained. Table 1 shows the results of evaluating the superoxide scavenging activity of the obtained extract.

【0091】実施例3 実施例1と同様の方法により得た脱脂粕に、10倍量の
エタノール含量が70質量%の含水エタノール水溶液を
加え、同様に室温で激しく攪拌しながら3時間抽出し
た。全量をろ過後、ろ液を濃縮乾固して抽出物97.8
gを得た。得られた抽出物に関し、スーパーオキシド消
去活性の評価を行った結果を表1に示す。
Example 3 To a defatted cake obtained in the same manner as in Example 1 was added a 10-fold amount of a water-containing ethanol aqueous solution having an ethanol content of 70% by mass, followed by extraction at room temperature for 3 hours with vigorous stirring. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated to dryness and the extract was 97.8.
g was obtained. Table 1 shows the results of evaluating the superoxide scavenging activity of the obtained extract.

【0092】実施例4 実施例1と同様の方法により得た脱脂粕に、10倍量の
エタノール含量が50質量%の含水エタノール水溶液を
加え、同様に室温で激しく攪拌しながら3時間抽出し
た。全量をろ過後、ろ液を濃縮乾固して抽出物111.
1gを得た。得られた抽出物に関し、スーパーオキシド
消去活性の評価を行った結果を表1に示す。
Example 4 To a defatted cake obtained in the same manner as in Example 1 was added a 10-fold amount of an aqueous ethanol solution containing 50% by mass of ethanol, followed by extraction at room temperature with vigorous stirring for 3 hours. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated to dryness to obtain an extract.
1 g was obtained. Table 1 shows the results of evaluating the superoxide scavenging activity of the obtained extract.

【0093】実施例5 実施例1と同様の方法により得た脱脂粕に、10倍量の
エタノール含量が40質量%の含水エタノール水溶液を
加え、同様に室温で激しく攪拌しながら3時間抽出し
た。全量をろ過後、ろ液を濃縮乾固して抽出物112.
9gを得た。得られた抽出物に関し、スーパーオキシド
消去活性の評価を行った結果を表1に示す。
Example 5 To a defatted lees obtained in the same manner as in Example 1, a 10-fold aqueous ethanol solution containing 40% by mass of ethanol was added, and extraction was carried out at room temperature for 3 hours with vigorous stirring. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated to dryness to extract 112.1.
9 g were obtained. Table 1 shows the results of evaluating the superoxide scavenging activity of the obtained extract.

【0094】実施例6 実施例1と同様の方法により得た脱脂粕に、10倍量の
エタノール含量が20質量%の含水エタノール水溶液を
加え、同様に室温で激しく攪拌しながら3時間抽出し
た。全量をろ過後、ろ液を濃縮乾固して抽出物110.
6gを得た。得られた抽出物に関し、スーパーオキシド
消去活性の評価を行った結果を表1に示す。
Example 6 To a defatted lees obtained in the same manner as in Example 1, a 10-fold amount of an aqueous ethanol solution containing 20% by mass of ethanol was added, and the mixture was extracted at room temperature for 3 hours with vigorous stirring. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated to dryness to extract 110.
6 g were obtained. Table 1 shows the results of evaluating the superoxide scavenging activity of the obtained extract.

【0095】実施例7 実施例1と同様の方法により得た脱脂粕に、10倍量の
無水エタノールを加え、同様に室温で激しく攪拌しなが
ら3時間抽出した。全量をろ過後、ろ液を濃縮乾固して
抽出物13.5gを得た。得られた抽出物に関し、スー
パーオキシド消去活性の評価を行った結果を表1に示
す。
Example 7 A 10-fold amount of absolute ethanol was added to the defatted lees obtained in the same manner as in Example 1, and the mixture was similarly extracted at room temperature with vigorous stirring for 3 hours. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated to dryness to obtain 13.5 g of an extract. Table 1 shows the results of evaluating the superoxide scavenging activity of the obtained extract.

【0096】実施例8 実施例1と同様の方法により得た脱脂粕に、10倍量の
水を加え、同様に室温で激しく攪拌しながら3時間抽出
した。全量をろ過後、ろ液を濃縮乾固して抽出物11
8.2gを得た。得られた抽出物に関し、スーパーオキ
シド消去活性の評価を行った結果を表1に示す。
Example 8 A 10-fold amount of water was added to the defatted cake obtained in the same manner as in Example 1, and the mixture was extracted at room temperature for 3 hours with vigorous stirring. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated to dryness to extract 11
8.2 g were obtained. Table 1 shows the results of evaluating the superoxide scavenging activity of the obtained extract.

【0097】実施例9 実施例1と同様の方法により得た脱脂粕に、10倍量の
アセトン含量が60質量%の含水アセトンを加え、同様
に室温で激しく攪拌しながら3時間抽出した。全量をろ
過後、ろ液を濃縮乾固して抽出物51.5gを得た。得
られた抽出物に関し、スーパーオキシド消去活性の評価
を行った結果を表1に示す。
Example 9 To a defatted cake obtained in the same manner as in Example 1 was added a 10-fold amount of hydrated acetone having an acetone content of 60% by mass, and the mixture was extracted at room temperature for 3 hours with vigorous stirring. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated to dryness to obtain 51.5 g of an extract. Table 1 shows the results of evaluating the superoxide scavenging activity of the obtained extract.

【0098】実施例10 実施例1と同様の方法により得た脱脂粕に、10倍量の
THF含量が60質量%の含水THFを加え、同様に室
温で激しく攪拌しながら3時間抽出した。全量をろ過
後、ろ液を濃縮乾固して抽出物54.3gを得た。得ら
れた抽出物に関し、スーパーオキシド消去活性の評価を
行った結果を表1に示す。
Example 10 To a defatted cake obtained in the same manner as in Example 1 was added 10 times the amount of aqueous THF having a THF content of 60% by mass, followed by extraction at room temperature with vigorous stirring for 3 hours. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated to dryness to obtain 54.3 g of an extract. Table 1 shows the results of evaluating the superoxide scavenging activity of the obtained extract.

【0099】実施例11 実施例1と同様の方法により得た脱脂粕に、10倍量の
AN含量が60質量%の含水ANを加え、同様に室温で
激しく攪拌しながら3時間抽出した。全量をろ過後、ろ
液を濃縮乾固して抽出物49.6gを得た。得られた抽
出物に関し、スーパーオキシド消去活性の評価を行った
結果を表1に示す。
Example 11 To the defatted lees obtained in the same manner as in Example 1, a 10-fold amount of water-containing AN having an AN content of 60% by mass was added, and the mixture was similarly extracted at room temperature with vigorous stirring for 3 hours. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated to dryness to obtain 49.6 g of an extract. Table 1 shows the results of evaluating the superoxide scavenging activity of the obtained extract.

【0100】実施例12 種子を除去したオリーブの乾燥果実1kgを破砕し、そ
の破砕した果実に、20倍量のエタノール含量が60質
量%の含水エタノール水溶液を加え、同様に室温で激し
く攪拌しながら3時間抽出した。全量をろ過後、ろ液を
濃縮乾固して抽出物238.5g抽出物にヘキサン1.
5L、水1.5Lを加えてよく攪拌した後、分液された
水相を濃縮乾固して、分配抽出物126.4gを得た。
得られた抽出物に関し、スーパーオキシド消去活性の評
価を行った結果を表1に示す。
Example 12 1 kg of a dried olive fruit from which seeds were removed was crushed, and a 20-fold aqueous ethanol solution containing 60% by mass of ethanol was added to the crushed fruit, and the mixture was similarly vigorously stirred at room temperature. Extracted for 3 hours. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated to dryness, and 238.5 g of the extract was added with 1. 1 g of hexane.
After 5 L and 1.5 L of water were added and stirred well, the separated aqueous phase was concentrated to dryness to obtain 126.4 g of a partitioned extract.
Table 1 shows the results of evaluating the superoxide scavenging activity of the obtained extract.

【0101】実施例13 オリーブの種子500gを破砕し、その破砕した種子に
10倍量のエタノール含量が60質量%の含水エタノー
ル水溶液を加え、同様に室温で激しく攪拌しながら3時
間抽出した。全量をろ過後、ろ液を濃縮乾固して抽出物
42.0gを得た。得られた抽出物に関し、スーパーオ
キシド消去活性の評価を行った結果を表1に示す。
Example 13 500 g of olive seeds were crushed, and a 10-fold amount of an aqueous ethanol solution containing 60% by mass of ethanol was added to the crushed seeds, followed by extraction at room temperature with vigorous stirring for 3 hours. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated to dryness to obtain 42.0 g of an extract. Table 1 shows the results of evaluating the superoxide scavenging activity of the obtained extract.

【0102】実施例14 イタリア産のオリーブ(Olea europaea
L.)を搾油し、得られた圧搾残査1kgに、3Lのヘ
キサンを加え3時間抽出した。これを4度繰り返した脱
脂残査(884g)について、種子および夾雑物をフル
イで適当に除去して、脱脂粕196gを得た。この脱脂
粕に10倍量のエタノール含量が60質量%の含水エタ
ノール水溶液を加え、室温で激しく攪拌しながら3時間
抽出した。全量をろ過後、ろ液を濃縮乾固して抽出物1
9.2gを得た。得られた抽出物に関し、スーパーオキ
シド消去活性の評価を行った結果を表1に示す。
Example 14 Olives from Italy (Olea europaea)
L. ) Was squeezed, 3 L of hexane was added to 1 kg of the obtained pressing residue, and the mixture was extracted for 3 hours. The defatted residue (884 g) obtained by repeating this process four times was appropriately removed with a sieve to remove seeds and contaminants to obtain 196 g of defatted cake. To this defatted lees, a 10-fold amount of an aqueous ethanol solution containing 60% by mass of ethanol was added, and the mixture was extracted at room temperature with vigorous stirring for 3 hours. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated to dryness to extract 1
9.2 g were obtained. Table 1 shows the results of evaluating the superoxide scavenging activity of the obtained extract.

【0103】実施例15 実施例14と同様の方法により得た脱脂粕に、10倍量
のエタノール含量が70質量%の含水エタノール水溶液
を加え、室温で激しく攪拌しながら3時間抽出した。全
量をろ過後、ろ液を濃縮乾固して抽出物17.4gを得
た。得られた抽出物に関し、スーパーオキシド消去活性
の評価を行った結果を表1に示す。
Example 15 To a defatted cake obtained in the same manner as in Example 14 was added a 10-fold aqueous ethanol solution containing 70% by mass of ethanol, followed by extraction at room temperature for 3 hours with vigorous stirring. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated to dryness to obtain 17.4 g of an extract. Table 1 shows the results of evaluating the superoxide scavenging activity of the obtained extract.

【0104】実施例16 イタリア産のオリーブ(Olea europaea
L.)を搾油し、得られた圧搾残査1kgに、3Lのヘ
キサンを加え3時間抽出した。これを4度繰り返した脱
脂残査884gについて、種子等を除去すること無く、
これを粉砕し、粉砕脱脂残査873gを得た。この粉砕
脱脂残査に10倍量のエタノール含量が60質量%の含
水エタノール水溶液を加え、室温で激しく攪拌しながら
3時間抽出した。全量をろ過後、ろ液を濃縮乾固して抽
出物39.5gを得た。得られた抽出物に関し、スーパ
ーオキシド消去活性の評価を行った結果を表1に示す。
Example 16 Olives from Italy (Olea europaea)
L. ) Was squeezed, 3 L of hexane was added to 1 kg of the obtained pressing residue, and the mixture was extracted for 3 hours. About 884 g of the defatted residue obtained by repeating this four times, without removing seeds and the like,
This was pulverized to obtain 873 g of a pulverized degreasing residue. To this pulverized and defatted residue, a 10-fold amount of an aqueous ethanol solution having an ethanol content of 60% by mass was added, and the mixture was extracted at room temperature with vigorous stirring for 3 hours. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated to dryness to obtain 39.5 g of an extract. Table 1 shows the results of evaluating the superoxide scavenging activity of the obtained extract.

【0105】実施例17 実施例16と同様にして得た粉砕脱脂残査に、10倍量
のエタノール含量が60質量%の含水エタノール水溶液
を加え、室温で激しく攪拌しながら3時間抽出した。全
量をろ過後、得られたろ液を完全に脱エタノールして得
られた抽出物の水層部分に、水不溶分回収の効率を上げ
ることを目的として、総量が830gになるように水を
加え、室温で1時間、激しく攪拌した。全量を遠心分離
で処理して沈殿分を除去した後、デカンテーションによ
り回収した上澄みを乾燥して濃縮物22.9gを得た。
濃縮して得られた抽出物に関し、スーパーオキシド消去
活性の評価を行った結果を表1に示す。
Example 17 To a pulverized defatted residue obtained in the same manner as in Example 16 was added a 10-fold aqueous ethanol solution containing 60% by mass of ethanol, followed by extraction at room temperature for 3 hours with vigorous stirring. After filtering the whole amount, water was added to the aqueous layer portion of the extract obtained by completely removing ethanol from the obtained filtrate so that the total amount became 830 g for the purpose of increasing the efficiency of water-insoluble content recovery. And stirred vigorously at room temperature for 1 hour. After the whole amount was treated by centrifugation to remove the precipitate, the supernatant collected by decantation was dried to obtain 22.9 g of a concentrate.
Table 1 shows the results of evaluating the superoxide scavenging activity of the extract obtained by concentration.

【0106】比較例1 乾燥ゴマ種子1kgを破砕し、3Lのヘキサンを加え3
時間抽出した。これを4度繰り返したゴマ脱脂粕52
6.4gを得た。このゴマ脱脂粕に10倍量のエタノー
ル含量が60質量%の含水エタノール水溶液を加え、室
温で激しく攪拌しながら3時間抽出した。全量をろ過
後、ろ液を濃縮乾固して抽出物58.2gを得た。この
ゴマ種子から得られた抽出物に関し、スーパーオキシド
消去活性およびヒドロキシラジカル消去活性の評価を行
った。その結果を表1および表2に示す。
Comparative Example 1 1 kg of dried sesame seeds was crushed, and 3 L of hexane was added thereto.
Time extracted. This is repeated four times, sesame defatted lees 52
6.4 g were obtained. To this sesame defatted lees, a 10-fold amount of an aqueous ethanol solution having an ethanol content of 60% by mass was added, and the mixture was extracted at room temperature with vigorous stirring for 3 hours. After filtering the whole amount, the filtrate was concentrated to dryness to obtain 58.2 g of an extract. The extract obtained from the sesame seed was evaluated for superoxide scavenging activity and hydroxy radical scavenging activity. The results are shown in Tables 1 and 2.

【0107】比較例2として、合成のスーパーオキシド
消去活性を有する合成の抗酸化剤であるBHAに関し、
スーパーオキシド消去活性の評価を行った。結果を表1
に示す。
As Comparative Example 2, a synthetic antioxidant BHA having a synthetic superoxide scavenging activity was used.
Superoxide scavenging activity was evaluated. Table 1 shows the results
Shown in

【0108】以下に、活性酸素除去機能に関して、スー
パーオキシド消去活性、ヒドロキシラジカル消去活性に
ついての評価方法および評価結果を示す。
The evaluation methods and results of the superoxide elimination activity and the hydroxy radical elimination activity regarding the active oxygen removing function are described below.

【0109】<スーパーオキシド消去活性の評価方法>
スーパーオキシド消去活性の評価は、金田尚志、上田伸
夫編集、「過酸化脂質実験法」、第136−154頁、
医歯薬出版(株)1993年発刊に記載されている方法
に従い、以下のように測定した。炭酸水素ナトリウム緩
衝液(pH10.2)1.2mLに1mg/mLのED
TA溶液50μL、1.5mg/mLウシ血清アルブミ
ン(BSA)溶液50μL、0.6mg/mLニトロブ
ルーテトラゾリウム(NBT)溶液50μL、0.5m
g/mLキサンチン溶液50μL、および、オリーブ抽
出物を所定の濃度で溶解させた「試料溶液」0.1mL
を加え混和した後、25℃にて10分放置する。これに
0.1unit/mLキサンチンオキシダーゼ(XO
D)溶液50μLを加え撹拌し、25℃にて20分間放
置した。1mg/mL塩化銅溶液50μLを加え酵素反
応を停止させた後、560nmの吸光度値(A)を測定
し、「試料溶液」の代わりに同量の「緩衝液」を加えた
物を対照溶液として同様に吸光度値(B)を測定した。
また、塩化銅溶液と、「試料溶液」または「緩衝液」の
添加順を逆にしたものを、それぞれ試薬ブランクとして
同様に吸光度を測定し、それぞれの値をa、bとした。
一方、比較用の抗酸化剤としては、市販の抗酸化剤であ
るブチルヒドロキシアニソール(BHA)を用いた。B
HAについては上記の測定方法を、以下の点を変更して
吸光度値(A)測定した。すなわち、炭酸ナトリウム緩
衝液(pH10.2)は1.25mLの添加量、メタノ
ールを用いて所定の濃度で溶解した「BHA溶液」は5
0μLの添加量とし、また、XOD溶液は0.2uni
t/mLの濃度で調製したものを用いた。「BHA溶
液」の代わりに同量の「メタノール」を添加したものを
対照溶液として、吸光度値(B)を測定した。また、塩
化銅溶液と「BHA溶液」または「メタノール」の添加
順を逆にしたものを、それぞれ試薬ブランクとして同様
に吸光度値を測定し、それぞれの値をa、bとした。そ
して、以下の<式4>からスーパーオキシドの消去活性
を算出した。ここで、式中の(C)は測定溶液系中の試
料濃度を示しており、スーパーオキシドが消去されるこ
とにより吸光度値が0.1減少する活性を1単位(1u
nit)と定義した。この活性値が高いほどスーパーオ
キシド消去作用が強いことを示している。
<Evaluation method of superoxide elimination activity>
Evaluation of superoxide scavenging activity was conducted by Naoshi Kaneda and Nobuo Ueda, "Lipid peroxide experimental method", pp. 136-154,
According to the method described in 1993 published by Medical and Dental Medicine Co., Ltd., it was measured as follows. 1 mg / mL ED in 1.2 mL of sodium bicarbonate buffer (pH 10.2)
TA solution 50 μL, 1.5 mg / mL bovine serum albumin (BSA) solution 50 μL, 0.6 mg / mL nitro blue tetrazolium (NBT) solution 50 μL, 0.5 m
g / mL xanthine solution 50 μL, and 0.1 mL of “sample solution” in which the olive extract is dissolved at a predetermined concentration
, And left to stand at 25 ° C for 10 minutes. Add 0.1 unit / mL xanthine oxidase (XO
D) 50 μL of the solution was added, stirred, and left at 25 ° C. for 20 minutes. After stopping the enzymatic reaction by adding 50 μL of a 1 mg / mL copper chloride solution, the absorbance value (A) at 560 nm was measured, and a solution obtained by adding the same amount of “buffer” instead of “sample solution” was used as a control solution. Similarly, the absorbance value (B) was measured.
In addition, the absorbance was similarly measured using the copper chloride solution and the “sample solution” or “buffer solution” in which the order of addition was reversed as a reagent blank, and the respective values were defined as a and b.
On the other hand, as a comparative antioxidant, butylhydroxyanisole (BHA) which is a commercially available antioxidant was used. B
For HA, the absorbance value (A) was measured using the above measurement method with the following changes. That is, the sodium carbonate buffer (pH 10.2) was added in an amount of 1.25 mL, and the “BHA solution” dissolved at a predetermined concentration using methanol was 5 mL.
0 μL, and the XOD solution was 0.2 unit.
The one prepared at a concentration of t / mL was used. The absorbance value (B) was measured using a control solution containing the same amount of “methanol” instead of the “BHA solution”. In addition, the absorbance values of the copper chloride solution and the “BHA solution” or “methanol” in which the order of addition was reversed were similarly measured as a reagent blank, and the respective values were defined as a and b. Then, the scavenging activity of superoxide was calculated from the following <Equation 4>. Here, (C) in the formula indicates the sample concentration in the measurement solution system, and the activity of decreasing the absorbance value by 0.1 due to elimination of superoxide is represented by 1 unit (1 u).
nit). The higher the activity value, the stronger the superoxide scavenging action.

【0110】[0110]

【数4】<式4> スーパーオキシド消去活性(uni
t/(mg/mL))={(B−b)−(A−a)}/
(C×0.1)
<Equation 4> Superoxide erasing activity (uni)
t / (mg / mL)) = {(B−b) − (A−a)} /
(C × 0.1)

【0111】また、スーパーオキシド消去活性収量指数
を前記の<式2>により算出した。
The superoxide scavenging activity yield index was calculated by the above <Equation 2>.

【0112】[0112]

【表1】 [Table 1]

【0113】表1から、本抽出物は、非常に強いスーパ
ーオキシド消去活性を有することがわかる。特に、水、
無水アルコール、含水アルコールを用いて抽出した場
合、本抽出物は天然の抽出物であるにもかかわらず、代
表的な合成抗酸化物質であるBHAと比較しても、同等
〜2倍程度の消去活性を示している。単なる抽出物の段
階でも、非常に強いスーパーオキシド消去活性を有する
ことがわかる。さらに、本抽出物は収率が高いことか
ら、スーパーオキシド消去活性収量指数は更に高いもの
となっている。この指数から見ても分かる通り、同じ条
件の天然原料から、より多くの、強い活性酸素除去機能
を有する抽出物を得ることができることがわかる。
Table 1 shows that the present extract has a very strong superoxide scavenging activity. In particular, water,
When extracted using anhydrous alcohol or hydrous alcohol, this extract is a natural extract, but has an erasure equivalent to about 2 times as much as BHA, which is a typical synthetic antioxidant. It shows activity. It can be seen that even a mere extract stage has a very strong superoxide scavenging activity. Furthermore, since the extract has a high yield, the superoxide scavenging activity yield index is even higher. As can be seen from this index, it can be seen that more extracts having a strong active oxygen removing function can be obtained from natural raw materials under the same conditions.

【0114】<ヒドロキシラジカル消去活性の評価方法
>ヒドロキシラジカル消去活性は以下のように測定し
た。本実施例で用いた反応系はフェントン反応にてヒド
ロキシラジカルを発生させ、そのヒドロキシラジカルと
脂肪酸との反応により生じるマロンジアルデヒド(MD
A)をチオバルビツール酸と反応させたときに生成する
チオバルビツール酸−MDAアダクトを測定する方法に
基づいている。すなわち所定の濃度で溶解させた測定対
象物を、リノール酸溶液(2mg/mL)およびドデシ
ル硫酸ナトリウム(SDS,2mg/mL)を含む30
mMのTris塩酸緩衝液(pH7.4)0.46mL
で溶解し、2.5mM過酸化水素溶液0.02mLおよ
び2.5mM塩化鉄(II)溶液0.02mLを加え、5
h、37℃で加温した。本抽出物、濃縮物および精製物
を含まず同様に反応したものを対照とした。加温後、1
0mg/mLブチルヒドロキシルトルエン(BHT)エ
タノール溶液0.01mLを加えた。TBA12mgお
よびSDS16.2mgを蒸留水2.3mLに溶解し、
これに20%(v/v)酢酸緩衝液(pH4.0)1.
5mLおよび前記反応液0.2mLを加え、95℃で1
時間加温した。放冷後、(532nm)における吸光度
を測定した。各試料を含む反応液の吸光度をD、対照の
吸光度をEとし、そのヒドロキシラジカル消去率を以下
の<式5>から算出した。ヒドロキシラジカル消去率が
高い方がヒドロキシラジカル消去作用が強いことを示し
ている。
<Evaluation method of hydroxy radical scavenging activity> The hydroxyl radical scavenging activity was measured as follows. The reaction system used in this example generates a hydroxyl radical by the Fenton reaction, and malondialdehyde (MD) generated by a reaction between the hydroxyl radical and a fatty acid.
It is based on a method for measuring the thiobarbituric acid-MDA adduct formed when A) is reacted with thiobarbituric acid. That is, a measurement target dissolved at a predetermined concentration is converted to a solution containing a linoleic acid solution (2 mg / mL) and sodium dodecyl sulfate (SDS, 2 mg / mL).
0.46 mL of mM Tris-HCl buffer (pH 7.4)
, And 0.02 mL of a 2.5 mM hydrogen peroxide solution and 0.02 mL of a 2.5 mM iron (II) chloride solution were added.
h, heated at 37 ° C. The same reaction without the extract, concentrate and purified product was used as a control. After heating, 1
0.01 mL of a 0 mg / mL butylhydroxyl toluene (BHT) ethanol solution was added. Dissolve 12 mg of TBA and 16.2 mg of SDS in 2.3 mL of distilled water,
To this, 20% (v / v) acetate buffer (pH 4.0) was added.
Add 5 mL and 0.2 mL of the above reaction solution, and add
Warmed for hours. After cooling, the absorbance at (532 nm) was measured. The absorbance of the reaction solution containing each sample was D, and the absorbance of the control was E, and the hydroxy radical scavenging rate was calculated from the following <Equation 5>. The higher the hydroxyl radical scavenging rate, the stronger the hydroxyl radical scavenging action.

【0115】[0115]

【数5】<式5> ヒドロキシラジカル消去率(%)=
{1−(E−D)/E}×100
<Equation 5> Hydroxy radical scavenging rate (%) =
{1- (ED) / E} × 100

【0116】上記ヒドロキシラジカル消去率(%)が5
0%となる測定対象物の濃度を比較し、ヒドロキシラジ
カル消去活性の強さを比較する。
When the hydroxy radical scavenging rate (%) is 5
The concentration of the measurement object at 0% is compared, and the strength of the hydroxy radical scavenging activity is compared.

【0117】[0117]

【表2】 [Table 2]

【0118】表2から、本抽出物はヒドロキシラジカル
消去活性に関しても、ヒドロキシラジカル消去活性が強
いとされているゴマ種子からの抽出物と比較して、同程
度の消去活性を示している。また、このゴマ種子からの
抽出物のスーパーオキシド消去活性と本抽出物のスーパ
ーオキシド消去活性を比較すると、約8倍〜9倍であ
る。このように本抽出物は、強いスーパーオキシド消去
活性とヒドロキシラジカル消去活性の両方を併せ持つ優
れた活性酸素除去機能を有する抽出物であることがわか
る。
From Table 2, it can be seen that the present extract also has the same level of hydroxyl radical scavenging activity as the extract from sesame seeds, which is considered to have strong hydroxy radical scavenging activity. Further, comparing the superoxide scavenging activity of the extract from the sesame seed with the superoxide scavenging activity of the present extract is about 8 to 9 times. Thus, it can be seen that the present extract is an extract having both excellent superoxide scavenging activity and hydroxy radical scavenging activity and an excellent active oxygen removing function.

【0119】次に、本抽出物を、実際に製品や動物、ヒ
トに適用した場合の効果について、得られる抗酸化効果
の評価方法および評価結果を示す。
Next, the method of evaluating the obtained antioxidant effect and the results of evaluation when the present extract is actually applied to products, animals and humans will be described.

【0120】まず、抗酸化効果については、実際の食品
に配合した時の酸化防止効果と、実際に動物に摂取させ
た時の生体内抗酸化効果について評価方法および評価結
果を示す。
First, regarding the antioxidant effect, evaluation methods and evaluation results are shown for the antioxidant effect when blended in actual foods and the in vivo antioxidant effect when actually taken by animals.

【0121】実施例18 クッキーを用いた酸化防止効
果の評価 下記配合にて原料を混合し、1個あたり10gになるよ
うに分割し、180℃で15分焼き、クッキーを製造し
た。なお、対照には、本抽出物を配合せずにせずに製造
した。
Example 18 Evaluation of Antioxidant Effect Using Cookies Ingredients were mixed in the following composition, divided into 10 g pieces, and baked at 180 ° C. for 15 minutes to produce cookies. The control was produced without adding the present extract.

【0122】作製直後のクッキーの一定質量について、
常法に則って、ヘキサンにて脂質を抽出しヘキサンを溜
去した後、その脂質のPOVを測定したところ、対照の
クッキーのPOVは2.1、本抽出物を配合したクッキ
ーのPOVは2.3であった。これらのクッキーを60
℃、暗所で18日間保存後、同様にしてPOVの測定を
行なったところ、対照のクッキーのPOVは31.7に
まで上昇していたのに対し、本抽出物を配合したクッキ
ーのPOVは7.5であった。また、同様にして得られ
たクッキーを、60℃、暗所で18日間保存後、試食し
た。その結果、対照のクッキーはかなりの酸化劣化臭を
有していたのに対し、本抽出物を配合したクッキーは、
保存後も良好な風味を有していた。
For a constant mass of the cookie immediately after making,
After extracting lipid with hexane and distilling off hexane in accordance with a conventional method, the POV of the lipid was measured. The POV of the control cookie was 2.1, and the POV of the cookie containing the extract was 2. 0.3. 60 of these cookies
After storage in a dark place at 18 ° C. for 18 days, POV was measured in the same manner. The POV of the control cookie was increased to 31.7, whereas the POV of the cookie containing the present extract was 7.5. The cookies obtained in the same manner were preserved in a dark place at 60 ° C. for 18 days and then tasted. As a result, the control cookie had a considerable oxidative deterioration smell, whereas the cookie containing the extract was
Even after storage, it had a good flavor.

【0123】この結果から、本抽出物は酸化防止効果を
有し、製品等の保存安定性を向上させる効果を有するこ
とがわかった。
From these results, it was found that the present extract has an antioxidant effect and an effect of improving the storage stability of products and the like.

【0124】各実施例で得られたオリーブ抽出物を、実
際に動物に摂取させた時の生体内抗酸化効果について、
その評価方法および評価結果を示す。
The in vivo antioxidant effect of the olive extract obtained in each Example when actually ingested by an animal was examined.
The evaluation method and the evaluation result will be described.

【0125】実施例19 ラットを用いた生体内抗酸化
効果の評価 6週齢のウィスター系雄ラット(日本エスエルシー)7
匹を1試験区とし、各試験区用の粉末精製飼料を、4週
間水とともに自由摂取させた。各試験区用飼料は、下表
3の飼料組成の通りに作製した。飼料成分の酸化劣化を
防ぐために、飼料は2日に1回交換した。試験食投与4
週間目の午前9時より絶食させ、午後2時より各ラット
の肝臓を採取した。肝臓中の抗酸化能を下記AOA法を
用いて測定し、検体の各オリーブ抽出物の生体内抗酸化
作用を評価した。
Example 19 Evaluation of In Vivo Antioxidant Effect Using Rats 6-week-old Wistar male rats (Japan SLC) 7
The animals were set as one test plot, and the powdered purified feed for each test plot was freely taken with water for 4 weeks. Each test group feed was prepared according to the feed composition shown in Table 3 below. The feed was changed once every two days to prevent oxidative degradation of the feed components. Test meal administration 4
The animals were fasted at 9 am in the week and the livers of each rat were collected at 2 pm. The antioxidant activity in the liver was measured using the following AOA method, and the in vivo antioxidant activity of each olive extract of the specimen was evaluated.

【0126】[0126]

【表3】 ※;トコフェロールを除いたもの。[Table 3] *: Excluding tocopherol.

【0127】<AOA法(脂質過酸化抑制率の測定法)
>基質として、牛の脳のリン酸緩衝液の摩砕物を用意す
る。これに、後述する方法で採取した肝臓の摩砕物を添
加し、37℃で1時間保持して、脂質の酸化を進行させ
る。この反応液の除タンパク上清にTBA(チオバルビ
ツール酸)溶液を添加して攪拌し、95℃で、15分間
保持する。この反応液の吸光度を分光光度計により測定
する。吸光度の値の大小と、過酸化脂質濃度の大小は相
関している。検体(各オリーブ抽出物)添加群での吸光
度と、対照群の吸光度とを比較し、検体(各オリーブ抽
出物)の脂質過酸化抑制率(%)を求める。
<AOA Method (Measurement Method of Lipid Peroxidation Inhibition Rate)
> Prepare a ground buffer of bovine brain phosphate buffer as a substrate. To this is added a triturated liver sample collected by the method described below, and the mixture is kept at 37 ° C. for 1 hour to promote lipid oxidation. A TBA (thiobarbituric acid) solution is added to the deproteinized supernatant of the reaction solution, stirred, and kept at 95 ° C. for 15 minutes. The absorbance of the reaction solution is measured with a spectrophotometer. The magnitude of the absorbance value and the magnitude of the lipid peroxide concentration are correlated. The absorbance of the sample (each olive extract) -added group is compared with the absorbance of the control group, and the lipid peroxidation inhibition rate (%) of the sample (each olive extract) is determined.

【0128】上記方法にて、生体内抗酸化効果を評価し
た。この結果を表4に示す。
The antioxidant effect in vivo was evaluated by the above method. Table 4 shows the results.

【0129】[0129]

【表4】 肝臓脂質過酸化抑制率 [Table 4] Liver lipid peroxidation inhibition rate

【0130】表4から、本抽出物は、経口摂取により、
生体内においてその抗酸化効果を発揮し、生体内酸化の
結果生じる過酸化脂質の生成を抑制することが確認され
た。また、この効果は含量依存的であることから、求め
る効果に応じて、含量を増減すればよいことも分かっ
た。
From Table 4, it can be seen that this extract was ingested
It was confirmed that it exerts its antioxidant effect in vivo and suppresses the production of lipid peroxide resulting from oxidation in vivo. In addition, since this effect is content-dependent, it was found that the content should be increased or decreased according to the desired effect.

【0131】 実施例20 錠剤(抗酸化剤の製造例−1) (1)実施例17の抽出物 10.0mg (2)乳糖 94.0mg (3)トウモロコシデンプン 34.0mg (4)結晶セルロース 20.0mg (5)ステアリン酸マグネシウム 1.0mg 上記配合比率にて、まず、(1)〜(4)までをよく混
合した後、(5)を加えてさらに混合した。この混合物
を打錠して錠剤を得た。
Example 20 Tablet (Production Example 1 of Antioxidant) (1) Extract of Example 17 10.0 mg (2) Lactose 94.0 mg (3) Corn Starch 34.0 mg (4) Crystalline cellulose 20 1.0 mg (5) Magnesium stearate 1.0 mg At the above mixing ratio, (1) to (4) were mixed well, and then (5) was added and further mixed. The mixture was tableted to give tablets.

【0132】 実施例21 散剤(抗酸化剤の製造例−2) (1)実施例17の抽出物 10.0mg (2)乳糖 981.0mg (3)ヒドロキシプロピルセルロース 4.0mg (4)軟質無水ケイ酸 5.0mg 上記配合比率にて、まず、(1)(2)をよく混合した
後、(3)を加えて造粒する。これを乾燥後に製粒し、
(4)を加えてさらによく混合して、散剤を得た。
Example 21 Powder (Production Example 2 of Antioxidant) (1) Extract of Example 17 10.0 mg (2) Lactose 981.0 mg (3) Hydroxypropylcellulose 4.0 mg (4) Soft anhydrous 5.0 mg of silicic acid At the above mixing ratio, (1) and (2) are mixed well, and then (3) is added and granulated. This is granulated after drying,
(4) was added and mixed well to obtain a powder.

【0133】 実施例22 カプセル剤(抗酸化剤の製造例−3) (1)実施例17の抽出物 10.0mg (2)乳糖 70.0mg (3)トウモロコシデンプン 38.0mg (4)ステアリン酸マグネシウム 2.0mg (5)カプセル 260.0mg 上記配合比率にて、まず、(1)〜(4)をよく混合し
て得た混合末を、(5)に充填してカプセル剤を得た。
Example 22 Capsule (Production Example 3 of Antioxidant) (1) Extract of Example 17 10.0 mg (2) Lactose 70.0 mg (3) Maize starch 38.0 mg (4) Stearic acid Magnesium 2.0 mg (5) Capsules 260.0 mg At the above mixing ratio, first, a mixed powder obtained by thoroughly mixing (1) to (4) was filled in (5) to obtain a capsule.

【0134】実施例20で得られた錠剤を、実際に人が
摂取した際の生体内抗酸化効果について、過酸化脂質生
成抑制効果の評価方法と評価基準を以下に示す。
The evaluation method and evaluation criteria for the lipid peroxides-suppressing effect on the in vivo antioxidant effect when the tablet obtained in Example 20 was actually taken by a human are shown below.

【0135】実施例23 人体に対する生体内抗酸化効
果の評価 実施例20で得られた錠剤を人に用いた際の生体内抗酸
化効果の評価を、健康な30代男性30人を対象にブラ
インドで行った。すなわち、30代男性30人を、試験
前の血中過酸化脂質濃度の平均が均等になるように15
人ずつの2区に分け、それぞれを試験食区および対照食
区とし、試験食区の人には実施例17のオリーブ抽出物
を配合した錠剤を、また、対照区の人には実施例17の
錠剤でオリーブ抽出物を配合していない錠剤を、毎食
(朝、昼、晩)と同時に摂取させた。試験は30日間行
い、10日毎に血液を採取した。血液からは遠心分離に
よって血清を調製し、測定まで−80℃で保管した。下
記方法にて、血清中過酸化脂質(PCOOH)量を測定
し、得られた結果から、実施例20で得られた錠剤の生
体内抗酸化効果について評価した。
Example 23 Evaluation of in vivo antioxidant effect on human body Evaluation of in vivo antioxidant effect when the tablet obtained in Example 20 was used for humans was evaluated by blindly examining 30 healthy males in their 30s. I went in. That is, 30 males in their thirties were examined for 15 times so that the average blood lipid peroxide concentration before the test became equal.
The test group and the control group were divided into two groups, each of which had a tablet containing the olive extract of Example 17 for the test group, and Example 17 for the control group. Tablets containing no olive extract were taken at the same time as each meal (morning, noon, evening). The test was performed for 30 days, and blood was collected every 10 days. Serum was prepared from blood by centrifugation and stored at -80 ° C until measurement. The amount of lipid peroxide (PCOOH) in the serum was measured by the following method, and the in vivo antioxidant effect of the tablet obtained in Example 20 was evaluated from the obtained results.

【0136】<過酸化脂質(PCOOH)の測定法>血
清中のPCOOH量の測定は、大島らの方法に準じて行
った(Lipids,31,1091,1996)。す
なわち、血清に、20ppmBHTを含むクロロホルム
−メタノール(2/1(v/v))溶液およびNBD−
PCクロロホルム溶液を添加し、これをよく振とうした
後、遠心分離してクロロホルム層を回収した。溶媒を溜
去した後、HPLCに用いる移動相(クロロホルム:メ
タノール:水=9:50:1)に再溶解したものを、ジ
フェニルピレニルホスフィン(DPPP)を反応試薬と
したポストカラムHPLCに供した。
<Method of Measuring Lipid Peroxide (PCOOH)> The amount of PCOOH in serum was measured according to the method of Oshima et al. (Lipids, 31, 1091, 1996). That is, a solution of chloroform-methanol (2/1 (v / v)) containing 20 ppm BHT and NBD-
A chloroform solution of PC was added, the mixture was shaken well, and then centrifuged to collect a chloroform layer. After distilling off the solvent, the solution dissolved in a mobile phase (chloroform: methanol: water = 9: 50: 1) used for HPLC was subjected to post-column HPLC using diphenylpyrenylphosphine (DPPP) as a reaction reagent. .

【0137】上記の評価試験にて、人における生体内抗
酸化効果を評価した。各区における血清中過酸化脂質
(PCOOH)量の経時変化の結果について、表5に示
す。
In the above-mentioned evaluation test, the antioxidant effect in a human body was evaluated. Table 5 shows the results of the change over time in the amount of lipid peroxide (PCOOH) in serum in each section.

【0138】[0138]

【表5】 血清中過酸化脂質(PCOOH)量の経時変
[Table 5] Time course of serum lipid peroxide (PCOOH) level

【0139】表5から、本発明のオリーブ抽出物を含有
する抗酸化剤は、人が摂取した場合、生体内においてそ
の抗酸化効果を発揮し、生体内抗酸化剤として作用し、
生体内酸化の結果生じる過酸化脂質の生成を大幅に抑制
することが確認された。
From Table 5, it can be seen that the antioxidant containing the olive extract of the present invention exerts its antioxidant effect in vivo when ingested by humans and acts as an antioxidant in vivo.
It was confirmed that the production of lipid peroxide resulting from oxidation in vivo was significantly suppressed.

【0140】[0140]

【発明の効果】本発明によれば、オリーブ植物等から活
性酸素除去機能を有する抽出物を含有する、優れた抗酸
化効果を有する抗酸化剤を得ることができる。本発明に
よれば、強力なスーパーオキシド消去またはヒドロキシ
ラジカル消去等の活性酸素除去機能を有する天然の抽出
物を含有する抗酸化剤を、安定的に提供することができ
る。本発明の抗酸化剤は微量で強い抗酸化効果を有して
おり、該抗酸化剤を人体やその他飲食物、医薬品、肥
料、飼料や皮膚外用剤等に使用することにより、抗酸化
効果、特には製品の保存安定性の向上効果等の優れた酸
化防止効果や、各種疾病予防効果や抗老化効果等の優れ
た生体内抗酸化効果を得ることができる。また、本発明
によれば、本発明の抗酸化剤に用いる該抽出物を、収率
よく得ることができるため、単位原料あたりに得ること
ができる効果の総量(総指数)が非常に多い。さらに、
オリーブ植物から容易に得ることができ、また、オリー
ブ油の製造工程中に発生する通常は廃棄されている生成
物からも好適に得ることができることから、安定的な供
給面やコスト面からみても、資源の有効活用という面か
らみても好ましい。
According to the present invention, an antioxidant having an excellent antioxidant effect and containing an extract having an active oxygen removing function from olive plants and the like can be obtained. According to the present invention, it is possible to stably provide an antioxidant containing a natural extract having a function of removing active oxygen such as strong superoxide elimination or hydroxy radical elimination. The antioxidant of the present invention has a strong antioxidant effect in a trace amount, by using the antioxidant in the human body and other foods and drinks, pharmaceuticals, fertilizers, feed and external preparations for skin, etc., the antioxidant effect, In particular, an excellent antioxidant effect such as an effect of improving the storage stability of the product, and an excellent antioxidant effect in vivo such as an effect of preventing various diseases and an effect of antiaging can be obtained. Further, according to the present invention, since the extract used for the antioxidant of the present invention can be obtained with a high yield, the total amount (total index) of the effects that can be obtained per unit raw material is very large. further,
It can be easily obtained from olive plants, and can also be suitably obtained from normally discarded products generated during the process of producing olive oil.From the viewpoint of stable supply and cost, It is preferable from the viewpoint of effective use of resources.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 FI テーマコート゛(参考) A61P 39/06 A61P 39/06 ──────────────────────────────────────────────────続 き Continued on the front page (51) Int.Cl. 7 Identification symbol FI theme coat ゛ (Reference) A61P 39/06 A61P 39/06

Claims (19)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項1】 オリーブ植物(葉を除く。以下同じ。)
から得られる抽出物を有効成分とする抗酸化剤。
1. Olive plant (excluding leaves; the same applies hereinafter)
An antioxidant comprising, as an active ingredient, an extract obtained from the above.
【請求項2】 抽出物がオリーブ植物および/またはオ
リーブ油製造工程で得られる生成物を、水および/また
は有機溶媒で抽出処理して得られたものである請求項1
に記載の抗酸化剤。
2. The extract according to claim 1, wherein the extract is obtained by extracting a product obtained in an olive plant and / or olive oil production process with water and / or an organic solvent.
An antioxidant according to the above.
【請求項3】 抽出物が、更に濃縮処理および/または
分画・精製処理されたものである請求項2に記載の抗酸
化剤。
3. The antioxidant according to claim 2, wherein the extract is further subjected to a concentration treatment and / or a fractionation / purification treatment.
【請求項4】 オリーブ植物から得られる抽出物を有効
成分とする酸化防止剤。
4. An antioxidant comprising an extract obtained from an olive plant as an active ingredient.
【請求項5】 保存安定性向上効果を有する請求項4に
記載の酸化防止剤。
5. The antioxidant according to claim 4, which has an effect of improving storage stability.
【請求項6】 抽出物がオリーブ植物および/またはオ
リーブ油製造工程で得られる生成物を、水および/また
は有機溶媒で抽出処理して得られたものである請求項4
または5に記載の酸化防止剤。
6. An extract obtained by subjecting a product obtained in an olive plant and / or olive oil production process to an extraction treatment with water and / or an organic solvent.
Or the antioxidant according to 5.
【請求項7】 抽出物が、更に濃縮処理および/または
分画・精製処理されたものである請求項6に記載の酸化
防止剤。
7. The antioxidant according to claim 6, wherein the extract has been further subjected to a concentration treatment and / or a fractionation / purification treatment.
【請求項8】 オリーブ植物から得られる抽出物を有効
成分とする生体内抗酸化剤。
8. An in vivo antioxidant comprising an extract obtained from an olive plant as an active ingredient.
【請求項9】 各種疾病予防効果および/または抗老化
効果を有する請求項8に記載の生体内抗酸化剤。
9. The in vivo antioxidant according to claim 8, which has various disease preventing effects and / or anti-aging effects.
【請求項10】 抽出物がオリーブ植物および/または
オリーブ油製造工程で得られる生成物を、水および/ま
たは有機溶媒で抽出処理して得られたものである請求項
8または9に記載の生体内抗酸化剤。
10. The in vivo organism according to claim 8, wherein the extract is obtained by extracting a product obtained in an olive plant and / or olive oil production process with water and / or an organic solvent. Antioxidants.
【請求項11】 抽出物が、更に濃縮処理および/また
は分画・精製処理されたものである請求項10に記載の
生体内抗酸化剤。
11. The antioxidant in vivo according to claim 10, wherein the extract has been further subjected to concentration treatment and / or fractionation / purification treatment.
【請求項12】 水に対して易溶性である請求項1〜1
1のいずれか1項に記載の抗酸化剤、酸化防止剤または
生体内抗酸化剤。
12. The composition according to claim 1, which is easily soluble in water.
The antioxidant, antioxidant or in vivo antioxidant according to any one of claims 1 to 7.
【請求項13】 水または含水親水性有機溶媒に、一部
または全部が溶解した状態にあることを特徴とする請求
項1〜11のいずれか1項に記載の抗酸化剤、酸化防止
剤または生体内抗酸化剤。
13. The antioxidant, the antioxidant or the antioxidant according to any one of claims 1 to 11, wherein a part or the whole thereof is dissolved in water or a water-containing hydrophilic organic solvent. In vivo antioxidants.
【請求項14】 請求項1〜13のいずれか1項に記載
の抗酸化剤、酸化防止剤または生体内抗酸化剤を各種製
品に配合することを特徴とする、該抗酸化剤、酸化防止
剤または生体内抗酸化剤の使用方法。
14. An antioxidant, an antioxidant, or an antioxidant, wherein the antioxidant, the antioxidant, or the in vivo antioxidant according to any one of claims 1 to 13 is blended in various products. To use an antioxidant or in vivo antioxidant.
【請求項15】 前記製品が飲食物である請求項14に
記載の使用方法。
15. The use according to claim 14, wherein the product is a food or drink.
【請求項16】 請求項1〜13のいずれか1項に記載
の抗酸化剤、酸化防止剤または生体内抗酸化剤を内服さ
せることを特徴とする、該抗酸化剤、酸化防止剤または
生体内抗酸化剤の使用方法。
16. An antioxidant, an antioxidant, or a bioactive agent, which is characterized in that the antioxidant, the antioxidant, or the in vivo antioxidant according to any one of claims 1 to 13 is taken therein. How to use antioxidants in the body.
【請求項17】 オリーブから得られる抽出物を抗酸化
剤として使用する方法。
17. Use of an extract obtained from olives as an antioxidant.
【請求項18】 オリーブから得られる抽出物を酸化防
止剤として使用する方法。
18. Use of an extract obtained from olives as an antioxidant.
【請求項19】 オリーブから得られる抽出物を生体内
抗酸化剤として使用する方法。
19. A method for using an extract obtained from olives as an in vivo antioxidant.
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