JP2001011037A - シクロアルカンカルボン酸アミド誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】システインプロテアーゼ阻害作用を有し、骨粗
鬆症、関節炎、リウマチ、アルツハイマー症等の予防ま
たは治療剤として有用なシクロアルカンカルボン酸アミ
ド誘導体を提供する。 【解決手段】 【化１】 〔Ｒ¹ はアルキルであり、Ｙはアルキレンであり、Ｒ²
はＯＨ，置換可アリール，アリールアルコキシ、Ｚは
Ｏ，ＮＨ， 【化２】 、Ｒ³ はＨ，アルキル，アリール，ピリジル，置換可ア
リールアルキル，ピリジルアルキル， 【化３】 （ｍは１〜６の整数である）、ｎは１〜３の整数であ
り、＊はＳ配置，Ｒ配置又はその混合物である〕で表さ
れる化合物。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、医薬品として有用
なシクロアルカンカルボン酸アミド誘導体またはその薬
理学的に許容される塩に関するものである。

【０００２】さらに詳しく述べれば、本発明は、システ
インプロテアーゼ阻害作用を有する、一般式

【０００３】

【化１０】

【０００４】〔式中のＲ¹ は低級アルキル基であり、Ｙ
は低級アルキレン基であり、Ｒ² は水酸基、置換基とし
て１〜３個のハロゲン原子、水酸基、低級アルキル基、
低級アルコキシ基、カルボキシ低級アルコキシ基または
低級アルコキシカルボニル低級アルコキシ基を有してい
てもよいアリール基またはアリール低級アルコキシ基で
あり、Ｚは酸素原子、イミノ基または式

【０００５】

【化１１】

【０００６】で表される基であり、Ｒ³ は水素原子、低
級アルキル基、アリール基、ピリジル基、置換基として
水酸基、低級アルキル基、低級アルコキシ基、カルボキ
シ低級アルコキシ基または低級アルコキシカルボニル低
級アルコキシ基を有していてもよいアリール低級アルキ
ル基、ピリジル低級アルキル基または式

【０００７】

【化１２】

【０００８】（式中のｍは１〜６の整数である）で表さ
れる基であり、ｎは１〜３の整数であり、＊が付された
炭素原子はＲ配置の炭素原子、Ｓ配置の炭素原子または
その混合物を示す〕で表されるシクロアルカンカルボン
酸アミド誘導体またはその薬理学的に許容される塩に関
するものである。

【０００９】

【従来の技術】システインプロテアーゼとしては、カテ
プシンＢ、Ｃ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｎ、Ｏ、Ｓおよびカルパイ
ンなどが知られており、種々の機能が確認されている。
例えば、喘息、リウマチなどの自己免疫疾患はカテプシ
ンＳ、Ｌが関与していることが示唆されている（Ｉｍｍ
ｕｎｉｔｙ，Ｖｏｌ．１０，ｐｐ．２０７−２１７（１
９９９）；Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｓｔ．，Ｖｏｌ．１０
１，ｐｐ．２３５１−２３６３（１９９８）；Ｓｃｉｅ
ｎｃｅ，Ｖｏｌ．２８０，ｐｐ．４５０−４５３（１９
９８））。骨破壊、骨コラーゲンの加水分解には、カテ
プシンＫやＬが関与していることが報告されている（Ｆ
ＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ，Ｎｏ．２６９，ｐｐ．１８９
−１９３（１９９０）；ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ，Ｎ
ｏ．３２１，ｐｐ．２４７−２５０（１９９３）；Ｂｉ
ｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｏｉｐｈｙｓｉｃａｌ
Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，
Ｎｏ．１２５，ｐｐ．４４１−４４７（１９８４）；Ｅ
ｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，Ｖｏｌ．３００，ｐ
ｐ．１３１−１３５（１９９６））。免疫応答の関与す
る疾患、虚血時の神経細胞の壊死には、カテプシンＢ、
Ｌまたはカルパインが関与していることが示唆されてい
る（Ｓｔｒｏｋｅ，Ｖｏｌ．２５，ｐｐ．２２６５−２
２７０（１９９４）；Ｅｘｐ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．，Ｖｏ
ｌ．３０，ｐｐ．２５７−２６２（１９９８）；Ｅｕ
ｒ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，Ｖｏｌ．１０，ｐｐ．１
７２３−１７３３（１９９８）；Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏ
ｌ．，Ｖｏｌ．１５５，ｐｐ．１８７−１９４（１９９
９））。アルツハイマー病患者の脳内での老人斑形成に
は、カテプシンＢやＬの関与が示唆されている（Ｇｌｉ
ａ，Ｖｏｌ．７，ｐｐ．１８３−１９１（１９９３）；
Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃ
ａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ
ｓ，Ｎｏ．１７７，ｐｐ．３７７−３８７（１９９
１））。ガン転移には、カテプシンＢやＬが関与してい
ることが示唆されている（Ｉｒ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｓｃ
ｉ．，Ｖｏｌ．１６７，ｐｐ．４−８（１９９８）；Ｉ
ｎｔ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｍａｒｋｅｒｓ，Ｖｏｌ．１３，
ｐｐ．１３９−１４４（１９８８））。

【００１０】また、最近、カテプシンＳとＫは同じパパ
インファミリーに属し、その一次構造に高い相同性があ
ることが報告されている（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．，
Ｖｏｌ．１１，ｐｐ．１００７−１０１３（１９９８
年）。更に、カテプシンＢ、Ｌ、Ｓ、Ｋ、パパインの構
造的、機能的相似性が報告されている（Ｂｉｏｌ．Ｃｈ
ｅｍ．，Ｖｏｌ．３７８，ｐｐ．１４１−１５０（１９
９７））。

【００１１】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、シス
テインプロテアーゼ阻害作用を有する新規な化合物を提
供することである。

【００１２】

【発明の実施の形態】本発明者らは、システインプロテ
アーゼ阻害作用を有する化合物を見出すべく鋭意検討し
た結果、前記一般式（Ｉ）で表されるシクロアルカンカ
ルボン酸アミド誘導体が、下記の如く優れたシステイン
プロテアーゼ阻害活性を発揮するという知見を得、本発
明を成すに至った。

【００１３】即ち、本発明は、一般式

【００１４】

【化１３】

【００１５】〔式中のＲ¹ は低級アルキル基であり、Ｙ
は低級アルキレン基であり、Ｒ² は水酸基、置換基とし
て１〜３個のハロゲン原子、水酸基、低級アルキル基、
低級アルコキシ基、カルボキシ低級アルコキシ基または
低級アルコキシカルボニル低級アルコキシ基を有してい
てもよいアリール基またはアリール低級アルコキシ基で
あり、Ｚは酸素原子、イミノ基または式

【００１６】

【化１４】

【００１７】で表される基であり、Ｒ³ は水素原子、低
級アルキル基、アリール基、ピリジル基、置換基として
水酸基、低級アルキル基、低級アルコキシ基、カルボキ
シ低級アルコキシ基または低級アルコキシカルボニル低
級アルコキシ基を有していてもよいアリール低級アルキ
ル基、ピリジル低級アルキル基または式

【００１８】

【化１５】

【００１９】（式中のｍは１〜６の整数である）で表さ
れる基であり、ｎは１〜３の整数であり、＊が付された
炭素原子はＲ配置の炭素原子、Ｓ配置の炭素原子または
その混合物を示す〕で表されるシクロアルカンカルボン
酸アミド誘導体またはその薬理学的に許容される塩に関
するものである。

【００２０】前記一般式（Ｉ）で表される化合物におい
て、低級アルキル基とは、メチル基、エチル基、プロピ
ル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅ
ｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソ
ペンチル基、ネオペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、
ヘキシル基等の炭素数１〜６の直鎖状または枝分かれ状
のアルキル基をいい、ピリジル基とは、２−ピリジル
基、３−ピリジル基または４−ピリジル基をいい、ピリ
ジル低級アルキル基とは、上記ピリジル基で置換された
上記低級アルキル基をいう。低級アルキレン基とは、メ
チレン基、エチレン基、トリメチレン基、プロピレン
基、テトラメチレン基、ペンタメチレン基、ヘキサメチ
レン基等の炭素数１〜６の直鎖状または枝分かれ状のア
ルキレン基をいう。低級アルコキシ基とは、メトキシ
基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブ
トキシ基、イソブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、ｔｅ
ｒｔ−ブトキシ基、ペンチルオキシ基、イソペンチルオ
キシ基、ネオペンチルオキシ基、ｔｅｒｔ−ペンチルオ
キシ基、ヘキシルオキシ基等の炭素数１〜６の直鎖状ま
たは枝分かれ状のアルコキシ基をいい、カルボキシ低級
アルコキシ基とは、カルボキシ基で置換された上記低級
アルコキシ基をいう。低級アルコキシカルボニル基と
は、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プ
ロポキシカルボニル基、イソプロポキシカルボニル基、
ブトキシカルボニル基、イソブトキシカルボニル基、ｓ
ｅｃ−ブトキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカル
ボニル基、ペンチルオキシカルボニル基、イソペンチル
オキシカルボニル基、ネオペンチルオキシカルボニル
基、ｔｅｒｔ−ペンチルオキシカルボニル基、ヘキシル
オキシカルボニル基等の炭素数２〜７の直鎖状または枝
分かれ状のアルコキシカルボニル基をいい、低級アルコ
キシカルボニル低級アルコキシ基とは、上記低級アルコ
キシカルボニル基で置換された上記低級アルコキシ基を
いう。アリール基とは、フェニル基、ナフチル基等の芳
香族炭化水素基をいい、アリール低級アルキル基とは、
上記アリール基で置換された上記低級アルキル基をい
い、アリール低級アルコキシ基とは、上記アリール基で
置換された上記低級アルコキシ基をいう。ハロゲン原子
とはフッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子
をいう。

【００２１】前記一般式（Ｉ）で表される本発明の化合
物は、例えば、以下の方法１に従い製造することができ
る。

【００２２】

【化１６】

【００２３】（式中のＲ¹ 、Ｒ² 、Ｒ³ 、Ｙ、Ｚ、ｎお
よび＊が付された炭素原子は前記と同じ意味をもつ）

【００２４】本発明の化合物は、前記一般式（ＩＩ）で
表されるα−ヒドロキシカルボン酸誘導体を各種溶媒
中、１，１，１−トリアセトキシ−１，１−ジヒドロ−
１，２−ベンズヨードオキソール−３（１Ｈ）−オン、
次亜塩素酸ナトリウム、重クロム酸ピリジニウム、クロ
ロクロム酸ピリジニウムなどの酸化剤の存在下に酸化さ
せることにより製造することができる。当該反応に用い
られる溶媒としては、例えば、塩化メチレン、水、アセ
トニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、それらの
混合溶媒などを挙げることができる。当該反応温度は通
常室温〜５０℃であり、当該反応時間は使用する原料物
質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常１時間〜
１日間である。

【００２５】前記一般式（Ｉ）で表される本発明の化合
物中、下記一般式（Ｉａ）で表される化合物は、以下の
方法２に従い製造することもできる。

【００２６】

【化１７】

【００２７】（式中のＲ⁶ は低級アルキル基であり、Ｒ
¹ 、Ｒ² 、Ｙ、ｎおよび＊が付された炭素原子は前記と
同じ意味をもつ）

【００２８】工程１ 前記一般式（Ｖ）で表される化合物は前記一般式（ＩＩ
Ｉ）で表されるアミノ酸誘導体と前記式（ＩＶ）で表さ
れるＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩とを、
不活性溶媒中、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン等
の塩基およびベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリ
ス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホス
フェート、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド、
１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカル
ボジイミド、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イ
ル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラ
フルオロボレート、ジフェニルホスホリルアジドなどの
縮合剤の存在下に反応させることにより製造することが
できる。当該反応に用いられる溶媒としては、例えば、
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、四塩化
炭素、ベンゼン、アセトニトリル、テトラヒドロフラ
ン、ジオキサン、それらの混合溶媒などを挙げることが
できる。当該反応温度は通常０〜５０℃であり、当該反
応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度などにより
異なるが、通常３０分〜３日間である。

【００２９】工程２ 前記一般式（ＶＩＩ）で表される化合物は、前記一般式
（Ｖ）で表される化合物と前記一般式（ＶＩ）で表され
るα−アルコキシビニルリチウムとを、各種溶媒中で反
応させることにより製造することができる。当該反応に
用いられる溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラ
ン、ジエチルエーテル、それらの混合溶媒などを挙げる
ことができる。当該反応温度は通常−７８〜０℃であ
り、当該反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度
などにより異なるが、通常１０分〜１時間である。

【００３０】工程３ 化合物（Ｉａ）は、前記一般式（ＶＩＩ）で表される化
合物を常法に従いオゾン分解することにより製造するこ
とができる。当該反応に用いられる溶媒としては、例え
ば、塩化メチレンなどを挙げることができる。当該反応
温度は通常−７８℃〜室温であり、当該反応時間は使用
する原料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通
常１０分〜３時間である。

【００３１】前記一般式（Ｉ）で表される本発明の化合
物中、下記一般式（Ｉｂ）で表される化合物は、以下の
方法３に従い製造することもできる。

【００３２】

【化１８】

【００３３】（式中のＲ¹ 、Ｒ² 、Ｒ⁶ 、Ｙ、ｎおよび
＊が付された炭素原子は前記と同じ意味をもつ）

【００３４】化合物（Ｉｂ）は、前記一般式（Ｉａ）で
表される本発明の化合物を各種溶媒中、水酸化ナトリウ
ム、水酸化カリウム、水酸化リチウムなどの塩基を用い
て常法に従い加水分解させることにより製造することが
できる。当該反応に用いられる溶媒としては、例えば、
水、エタノール、メタノール、ブタノール、それらの混
合溶媒などを挙げることができる。当該反応温度は通常
−２０〜１００℃であり、当該反応時間は使用する原料
物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常１〜１
２時間である。

【００３５】前記一般式（Ｉ）で表される本発明の化合
物中、下記一般式（Ｉｃ）で表される化合物は、以下の
方法４に従い製造することもできる。

【００３６】

【化１９】

【００３７】（式中のＷはイミノ基または式

【００３８】

【化２０】

【００３９】で表される基であり、Ｒ¹ 、Ｒ² 、Ｒ³ 、
Ｙ、ｎおよび＊が付された炭素原子は前記と同じ意味を
もつ）

【００４０】化合物（Ｉｃ）は、前記一般式（Ｉｂ）で
表される本発明の化合物と一般式（ＶＩＩＩ）で表され
るアミン誘導体とを、不活性溶媒中、Ｎ，Ｎ−ジイソプ
ロピルエチルアミンなどの塩基およびベンゾトリアゾー
ル−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニ
ウムヘキサフルオロホスフェート、１，３−ジシクロヘ
キシルカルボジイミド、１−（３−ジメチルアミノプロ
ピル）−３−エチルカルボジイミド、２−（１Ｈ−ベン
ゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラ
メチルウロニウムテトラフルオロボレート、ジフェニル
ホスホリルアジドなどの縮合剤の存在下にアミド化反応
させることにより製造することができる。当該反応に用
いられる溶媒としては、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホル
ムアミド、塩化メチレン、四塩化炭素、ベンゼン、アセ
トニトリル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、それら
の混合溶媒などを挙げることができる。当該反応温度は
通常０〜５０℃であり、当該反応時間は使用する原料物
質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常３０分〜
１日間である。

【００４１】前記一般式（Ｉ）で表される本発明の化合
物中、下記一般式（Ｉｄ）で表される化合物は、以下の
方法５に従い製造することもできる。

【００４２】

【化２１】

【００４３】（式中のＲ⁷ は低級アルキル基であり、Ｘ
はハロゲン原子であり、Ｒ¹ 、ｎおよび＊が付された炭
素原子は前記と同じ意味をもつ）

【００４４】工程１ 前記一般式（ＸＩ）で表される化合物は、前記一般式
（ＩＸ）で表されるα−ヒドロキシカルボン酸誘導体と
前記一般式（Ｘ）で表されるハロ酢酸エステル誘導体と
を、各種溶媒中、水素化ナトリウム等の塩基の存在下に
反応させることにより製造することができる。当該反応
に用いられる溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラ
ン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、それらの混合溶媒
などを挙げることができる。当該反応温度は通常０〜５
０℃であり、当該反応時間は使用する原料物質や溶媒、
反応温度などにより異なるが、通常３０分〜５時間であ
る。

【００４５】工程２ 前記一般式（ＸＩＩ）で表される化合物は、前記一般式
（ＸＩ）で表される化合物を各種溶媒中、１，１，１−
トリアセトキシ−１，１−ジヒドロ−１，２−ベンズヨ
ードオキソール−３（１Ｈ）−オン、次亜塩素酸ナトリ
ウム、重クロム酸ピリジニウム、クロロクロム酸ピリジ
ニウムなどの酸化剤の存在下に酸化させることにより製
造することができる。当該反応に用いられる溶媒として
は、例えば、塩化メチレン、水、アセトニトリル、Ｎ，
Ｎ−ジメチルホルムアミド、それらの混合溶媒などを挙
げることができる。当該反応温度は通常室温〜５０℃で
あり、当該反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温
度などにより異なるが、通常１時間〜１日間である。

【００４６】工程３ 化合物（Ｉｄ）は、前記一般式（ＸＩＩ）で表される化
合物を、各種溶媒中、常法に従い接触還元することによ
り製造することができる。当該反応に用いられる溶媒と
しては、例えば、メタノール、エタノール、酢酸、それ
らの混合溶媒などを挙げることができる。当該反応温度
は通常２０〜５０℃であり、当該反応時間は使用する原
料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常１〜
５時間である。

【００４７】前記一般式（Ｉ）で表される本発明の化合
物中、下記一般式（Ｉｅ）で表される化合物は、以下の
方法６に従い製造することもできる。

【００４８】

【化２２】

【００４９】（式中のＲ¹ 、Ｒ⁶ 、Ｘ、ｎおよび＊が付
された炭素原子は前記と同じ意味をもつ）

【００５０】工程１ 前記一般式（ＸＶ）で表される化合物は、前記一般式
（ＸＩＩＩ）で表されるα−ヒドロキシカルボン酸誘導
体と前記一般式（ＸＩＶ）で表されるハロ酢酸エステル
誘導体とを、各種溶媒中、水素化ナトリウムなどの塩基
の存在下に反応させることにより製造することができ
る。当該反応に用いられる溶媒としては、例えば、テト
ラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、それ
らの混合溶媒などを挙げることができる。当該反応温度
は通常０〜５０℃であり、当該反応時間は使用する原料
物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常３０分
〜５時間である。

【００５１】工程２ 前記一般式（ＸＶＩ）で表される化合物は、前記一般式
（ＸＶ）で表される化合物を各種溶媒中、１，１，１−
トリアセトキシ−１，１−ジヒドロ−１，２−ベンズヨ
ードオキソール−３（１Ｈ）−オン、次亜塩素酸ナトリ
ウム、重クロム酸ピリジニウム、クロロクロム酸ピリジ
ニウムなどの酸化剤の存在下に酸化させることにより製
造することができる。当該反応に用いられる溶媒として
は、例えば、塩化メチレン、水、アセトニトリル、Ｎ，
Ｎ−ジメチルホルムアミド、それらの混合溶媒などを挙
げることができる。当該反応温度は通常室温〜５０℃で
あり、当該反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温
度などにより異なるが、通常１時間〜１日間である。

【００５２】工程３ 化合物（Ｉｅ）は、前記一般式（ＸＶＩ）で表される化
合物を、各種溶媒中、常法に従い接触還元することによ
り製造することができる。当該反応に用いられる溶媒と
しては、例えば、メタノール、エタノール、酢酸、それ
らの混合溶媒などを挙げることができる。当該反応温度
は通常室温〜５０℃であり、当該反応時間は使用する原
料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通常１〜
５時間である。

【００５３】本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合
物中、光学活性体は、異性体混合物として得られた前記
一般式（Ｉ）で表される化合物をカラムクロマトグラフ
ィー等の方法により常法に従い分離することにより製造
することもできる。

【００５４】前記製造方法において出発原料として用い
られる前記一般式（ＩＩ）で表される化合物（前記一般
式（ＩＸ）および（ＸＩＩＩ）で表される化合物を含
む）は、例えば、以下の方法７に従い製造することがで
きる。

【００５５】

【化２３】

【００５６】（式中のＲ¹ 、Ｒ² 、Ｒ³ 、Ｗ、Ｙ、Ｚ、
ｎおよび＊が付された炭素原子は前記と同じ意味をも
つ）

【００５７】工程１ 前記一般式（ＸＩＸ）で表される化合物は、前記一般式
（ＸＶＩＩ）で表されるα−ヒドロキシカルボン酸誘導
体と前記一般式（ＶＩＩＩ）で表されるアミン誘導体と
を、不活性溶媒中、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミ
ンなどの塩基およびベンゾトリアゾール−１−イルオキ
シトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオ
ロホスフェート、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイ
ミド、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチ
ルカルボジイミド、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−
１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム
テトラフルオロボレート、ジフェニルホスホリルアジド
などの縮合剤の存在下にアミド化反応させた後、常法に
従い脱保護することにより製造することができる。アミ
ド化反応に用いられる溶媒としては、例えば、Ｎ，Ｎ−
ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、四塩化炭素、ベ
ンゼン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジオキ
サン、それらの混合溶媒などを挙げることができる。ア
ミド化における反応温度は通常０〜５０℃であり、反応
時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度などにより異
なるが、通常３０分〜１日間である。

【００５８】工程２ 化合物（ＩＩ）は、前記一般式（ＸＶＩＩＩ）または
（ＸＩＸ）で表される化合物と前記一般式（ＸＸ）で表
されるカルボン酸誘導体とを、不活性溶媒中、Ｎ，Ｎ−
ジイソプロピルエチルアミンなどの塩基およびベンゾト
リアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）
ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート、１，３−ジ
シクロヘキシルカルボジイミド、１−（３−ジメチルア
ミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド、２−（１
Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３
−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート、ジ
フェニルホスホリルアジドなどの縮合剤の存在下にアミ
ド化反応させることにより製造することができる。当該
反応に用いられる溶媒としては、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメ
チルホルムアミド、塩化メチレン、四塩化炭素、ベンゼ
ン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジオキサ
ン、それらの混合溶媒などを挙げることができる。当該
反応温度は通常０〜５０℃であり、当該反応時間は使用
する原料物質や溶媒、反応温度などにより異なるが、通
常３０分〜１日間である。

【００５９】前記製造方法において出発原料として用い
られる前記一般式（ＩＩＩ）で表される化合物は、例え
ば、以下の方法８に従い製造することができる。

【００６０】

【化２４】

【００６１】（式中のＲ¹ 、Ｒ² 、Ｒ⁶ 、Ｙ、ｎおよび
＊が付された炭素原子は前記と同じ意味をもつ）

【００６２】工程１ 前記一般式（ＸＸＩＩ）で表される化合物は、前記一般
式（ＸＸＩ）で表されるアミン誘導体と前記一般式（Ｘ
Ｘ）で表されるカルボン酸誘導体とを、不活性溶媒中、
Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンなどの塩基および
ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチル
アミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート、
１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド、１−（３−
ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミ
ド、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−
１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオ
ロボレート、ジフェニルホスホリルアジドなどの縮合剤
の存在下にアミド化反応させることにより製造すること
ができる。当該反応に用いられる溶媒としては、例え
ば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、四
塩化炭素、ベンゼン、アセトニトリル、テトラヒドロフ
ラン、ジオキサン、それらの混合溶媒などを挙げること
ができる。当該反応温度は通常０〜５０℃であり、当該
反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度などによ
り異なるが、通常３０分〜１日間である。

【００６３】工程２ 化合物（ＩＩＩ）は、前記一般式（ＸＸＩＩ）で表され
る化合物を、各種溶媒中、水酸化ナトリウム、水酸化カ
リウム、水酸化リチウムなどの塩基を用いて常法に従い
加水分解させることにより製造することができる。当該
反応に用いられる溶媒としては、例えば、水、エタノー
ル、メタノール、ブタノール、それらの混合溶媒などを
挙げることができる。当該反応温度は通常室温〜５０℃
であり、当該反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応
温度などにより異なるが、通常１〜１２時間である。

【００６４】前記製造方法において用いられる前記一般
式（Ｖ）で表される化合物は、例えば、以下の方法９に
従い製造することもできる。

【００６５】

【化２５】

【００６６】（式中のＲ¹ 、Ｒ² 、Ｙ、ｎおよび＊が付
された炭素原子は前記と同じ意味をもつ）

【００６７】工程１ 前記一般式（ＸＸＩＶ）で表される化合物は、前記一般
式（ＸＸＩＩＩ）で表されるカルボン酸誘導体と前記式
（ＩＶ）で表されるＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミ
ン塩酸塩とを、不活性溶媒中、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル
エチルアミンなどの塩基およびベンゾトリアゾール−１
−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘ
キサフルオロホスフェート、１，３−ジシクロヘキシル
カルボジイミド、１−（３−ジメチルアミノプロピル）
−３−エチルカルボジイミド、２−（１Ｈ−ベンゾトリ
アゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチル
ウロニウムテトラフルオロボレート、ジフェニルホスホ
リルアジドなどの縮合剤の存在下にアミド化反応させた
後、常法に従い脱保護することにより製造することがで
きる。アミド化反応に用いられる溶媒としては、例え
ば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、四
塩化炭素、ベンゼン、アセトニトリル、テトラヒドロフ
ラン、ジオキサン、それらの混合溶媒などを挙げること
ができる。アミド化における反応温度は通常０〜５０℃
であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度
などにより異なるが、通常３０分〜１日間である。

【００６８】工程２ 化合物（Ｖ）は、前記一般式（ＸＸＩＶ）で表される化
合物と前記一般式（ＸＸ）で表されるカルボン酸誘導体
とを、不活性溶媒中、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルア
ミンなどの塩基およびベンゾトリアゾール−１−イルオ
キシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフル
オロホスフェート、１，３−ジシクロヘキシルカルボジ
イミド、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エ
チルカルボジイミド、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール
−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウ
ムテトラフルオロボレート、ジフェニルホスホリルアジ
ドなどの縮合剤の存在下にアミド化反応させることによ
り製造することができる。当該反応に用いられる溶媒と
しては、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化
メチレン、四塩化炭素、ベンゼン、アセトニトリル、テ
トラヒドロフラン、ジオキサン、それらの混合溶媒など
を挙げることができる。当該反応温度は通常０〜５０℃
であり、当該反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応
温度などにより異なるが、通常３０分〜１日間である。

【００６９】前記製造方法において用いられる前記一般
式（ＸＸＩ）および（ＸＸＩＩＩ）で表される化合物
は、市販品を用いるか、文献記載の方法またはそれと類
似した方法に従い反応させることにより得ることができ
る（例えば、Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｈｅ
ｍ．，Ｖｏｌ．３４，ｐｐ．８３５−８４４（１９９
７））。

【００７０】前記製造方法において用いられる前記一般
式（ＸＶＩＩ）および（ＸＶＩＩＩ）で表される化合物
は、市販品を用いるか、または文献記載の方法またはそ
れと類似した方法に従い反応させた後、所望によりカラ
ムクロマトグラフィー等の方法により常法に従い分離す
ることにより得ることができる（例えば、Ｂｕｌｌ．Ｃ
ｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｊｐｎ．，Ｖｏｌ．６５，ｐｐ．３６
０−３６５（１９９２）；Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌ
ｅｔｔ．，Ｖｏｌ．３５，ｐｐ．２８４５−２８４８
（１９９４））。

【００７１】前記製造方法において用いられる前記一般
式（ＸＸ）で表される化合物は、市販品を用いるか、文
献記載の方法またはそれと類似した方法に従い反応させ
た後、所望によりカラムクロマトグラフィー等の方法に
より常法に従い分離することにより得ることができる
（例えば、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．３２，ｐ
ｐ．１４３６−１４４１（１９８９）；Ｔｅｔｒａｈｅ
ｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．，Ｖｏｌ．３８，ｐｐ．１８９９
−１９０２（１９９７）；Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，Ｖ
ｏｌ．４６，ｐｐ．３１２７−３１２８（１９８
１））。

【００７２】前記製造方法において得られる本発明の化
合物は、慣用の分離手段である分別再結晶法、クロマト
グラフィーを用いた精製法、溶媒抽出法等により単離精
製することができる。

【００７３】本発明の前記一般式（Ｉ）で表されるシク
ロアルカンカルボン酸アミド誘導体は、常法により、そ
の薬理学的に許容される塩とすることができる。このよ
うな塩としては、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫
酸、硝酸、リン酸などの鉱酸との酸付加塩、ギ酸、酢
酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トル
エンスルホン酸、プロピオン酸、クエン酸、コハク酸、
酒石酸、フマル酸、酪酸、シュウ酸、マロン酸、マレイ
ン酸、乳酸、リンゴ酸、炭酸、グルタミン酸、アスパラ
ギン酸等の有機酸との酸付加塩、モルホリン、ピペリジ
ン、リジンなどの有機塩基との塩、ナトリウム塩、カリ
ウム塩等の無機塩基との塩を挙げることができる。

【００７４】本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合
物には、水和物やエタノール等の医薬品として許容され
る溶媒との溶媒和物も含まれる。

【００７５】本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合
物には２つの幾何異性体が存在するが、本発明において
はシス体の化合物またはトランス体の化合物のいずれの
化合物を使用してもよい。これらの幾何異性体は、例え
ば、出発物質として所望の幾何異性体を用いて反応させ
ることにより製造することができる。

【００７６】本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合
物には最低２種類の光学異性体が存在するが、本発明に
おいてはいずれの光学異性体（光学活性体）を使用して
もよく、それらの光学異性体の混合物であっても構わな
い。

【００７７】本発明の化合物は、優れたカテプシンＳ阻
害作用、カテプシンＢ阻害作用、カテプシンＬ阻害作用
などを有しており、システインプロテアーゼ阻害剤とし
て有用な化合物である。それ故、本発明の化合物は、骨
粗鬆症、関節炎、リウマチ、アルツハイマー症、ベーチ
ェット症、喘息、血栓症の予防または治療剤、免疫抑制
剤、脳虚血時の障害、アポトーシス、ガン転移、神経細
胞死、白内障形成の抑制剤等として使用することができ
る。

【００７８】本発明の医薬品組成物を実際の治療に用い
る場合、用法に応じ種々の剤型のものが使用される。こ
のような剤型としては例えば、散剤、顆粒剤、細粒剤、
ドライシロップ剤、錠剤、カプセル剤、注射剤、液剤、
軟膏剤、坐剤、貼付剤などを挙げることができ、経口ま
たは非経口的に投与される。

【００７９】これらの医薬品組成物は、その剤型に応じ
調剤学上使用される手法により適当な賦形剤、崩壊剤、
結合剤、滑沢剤、希釈剤、緩衝剤、等張化剤、防腐剤、
湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、溶解補助剤などの
医薬品添加物と適宜混合または希釈・溶解し、常法に従
い調剤することにより製造することができる。

【００８０】本発明の医薬品組成物を実際の治療に用い
る場合、その有効成分である前記一般式（Ｉ）で表され
る化合物またはその薬理学的に許容される塩の投与量は
患者の年齢、性別、体重、疾患および治療の程度等によ
り適宜決定されるが、経口投与の場合成人１日当たり概
ね０．１〜１０００ｍｇの範囲で、非経口投与の場合
は、成人１日当たり概ね０．０１〜３００ｍｇの範囲
で、一回または数回に分けて適宜投与することができ
る。

【００８１】

【実施例】本発明の内容を以下の参考例、実施例および
試験例でさらに詳細に説明するが、本発明はその内容に
限定されるものではない。

【００８２】参考例１ （ＲＳ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−
３−（３，４−ジクロロフェニル）プロピオン酸 ２−アセチルアミノマロン酸ジエチル（５．００ｇ）、
ヨウ化カリウム（０．３８ｇ）のエタノール（４０．０
ｍｌ）溶液に、２０％ナトリウムエトキシドのエタノー
ル（９．５ｍｌ）溶液を加えた後、１，２−ジクロロ−
４−クロロメチルベンゼン（３．３５ｍｌ）のエタノー
ル（１０．０ｍｌ）溶液を加え、３．５時間加熱還流し
た。溶媒を減圧下留去し、残留物を酢酸エチル／ヘキサ
ンの混合溶媒で再結晶して２−アセチルアミノ−２−
（３，４−ジクロロベンジル）マロン酸ジエチル（４．
３９ｇ）を得た。２−アセチルアミノ−２−（３，４−
ジクロロベンジル）マロン酸ジエチル（４．３９ｇ）を
濃塩酸（１４０ｍｌ）に加え、終夜加熱還流した。冷却
後析出した結晶を濾取して（ＲＳ）−２−アミノ−３−
（３，４−ジクロロフェニル）プロピオン酸塩酸塩
（４．１０ｇ）を得た。（ＲＳ）−２−アミノ−３−
（３，４−ジクロロフェニル）プロピオン酸塩酸塩
（４．１０ｇ）及びジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネー
ト（５．１０ｇ）を２規定水酸化ナトリウム水溶液（２
０．０ｍｌ）に溶解し、室温にて１．５時間撹拌した。
反応混合物を２規定塩酸で中和し、酢酸エチルで抽出し
た。抽出液を飽和重曹水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫
酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧下留去し、（Ｒ
Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−
（３，４−ジクロロフェニル）プロピオン酸（３．３０
ｇ）を得た。

【００８３】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆ ）δｐｐ
ｍ：1.31 (9H, s), 2.82 (1H, m), 3.06 (1H, m), 4.08
(1H, m), 7.00 (1H, br), 7.24 (2H, d, J=8.2Hz), 7.
49 (1H, s), 7.52 (2H, d, J=8.2Hz)

【００８４】参考例２ （Ｓ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−（４−ヒド
ロキシフェニル）酪酸エチル塩酸塩 （Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３
−（４−ヒドロキシフェニル）プロピオン酸（３６．８
４ｇ）およびＮ−メチルモルホリン（３０．７ｍｌ）の
１，２−ジメトキシエタン（２００ｍｌ）溶液に、−３
０℃にてクロロギ酸イソブチル（３７．４ｍｌ）を加
え、同温にて３分間撹拌した。生じた沈殿物を濾去した
後、濾液に水素化ホウ素ナトリウム（１４．８ｇ）の水
（１００ｍｌ）溶液を−１０℃にて加え、同温にて２０
分間撹拌した。反応混合物を蒸留水に注ぎ、酢酸エチル
で抽出した。抽出液を１０％クエン酸、飽和食塩水で洗
浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧下
留去し、（Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルア
ミノ−３−（４−イソブトキシカルボニルオキシフェニ
ル）プロパノール（４６．０ｇ）を得た。（Ｓ）−２−
ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（４−イソ
ブトキシカルボニルオキシフェニル）プロパノール（４
６．０ｇ）およびトリエチルアミン（５１．０ｍｌ）を
ジメチルスルホキシド（８６ｍｌ）に溶解した後、氷冷
下三酸化イオウ−ピリジン錯体（５８．１ｇ）を加え、
室温下３０分間撹拌した。反応混合物を氷水に注ぎ、ジ
エチルエーテルで抽出した。抽出液を蒸留水、飽和食塩
水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を
減圧下留去し、（Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボ
ニルアミノ−３−（４−イソブトキシカルボニルオキシ
フェニル）ブチルアルデヒド（３０．３６ｇ）を得た。
（Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３
−（４−イソブトキシカルボニルオキシフェニル）ブチ
ルアルデヒド（３０．３６ｇ）およびシアン化ナトリウ
ム（１３．０１ｇ）を酢酸エチル（５００ｍｌ）と蒸留
水（１００ｍｌ）の混合液に溶解し、氷冷下２規定塩酸
（１３０ｍｌ）を３０分間かけて加え、室温下７時間撹
拌した。反応混合物に濃塩酸（７０ｍｌ）を加えた後、
減圧下酢酸エチルを留去した。残留物に濃塩酸（７０ｍ
ｌ）を加え、２４時間加熱還流した。冷後反応混合物を
２８％アンモニア水でｐＨ３に調整し、減圧下濃縮乾固
した。残留物に飽和塩化水素エタノール溶液を加え、８
０℃にて５時間加熱した。溶媒を減圧下留去した後、残
留物を水に溶解し、酢酸エチルで洗浄した。水層を飽和
重曹水で中和した後、酢酸エチルで抽出した。抽出液を
水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥
した。溶媒を減圧下留去し、残留物を４規定塩化水素酢
酸エチル溶液で処理して生じた塩を濾取した。得られた
塩をエタノール／酢酸エチルで再結晶して（Ｓ）−３−
アミノ−２−ヒドロキシ−４−（４−ヒドロキシフェニ
ル）酪酸エチル塩酸塩（０．８８７ｇ）を得た。

【００８５】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆ ）δｐｐ
ｍ：1.18 (3H, t, J=7.0Hz), 2.76 (1H, dd, J=9.9, 1
3.6Hz), 2.90 (1H, dd, J=5.2, 13.6Hz), 3.40-3.60 (1
H, m), 3.95-4.05 (1H, m), 4.06 (2H, q, J=7.0Hz),6.
50-6.65 (1H, m), 6.74 (2H, d, J=8.5Hz), 7.06 (2H,
d, J=8.5Hz), 8.03 (1H, br s), 8.05-8.15 (2H, m),
9.42 (1H, br s)

【００８６】参考例３ （Ｒ）−２−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキ
シルカルボニルアミノ）−３−フェニルプロピオン酸 Ｄ−フェニルアラニンエチルエステルトシル酸塩（１．
００ｇ）、トランス−４−イソプロピルシクロヘキサン
カルボン酸（０．４１２ｇ）、ベンゾトリアゾール−１
−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘ
キサフルオロホスフェート（１．０８ｇ）を塩化メチレ
ン（１０ｍｌ）に溶解し、室温下ジイソプロピルエチル
アミン（０．８６ｍｌ）を加え、同温にて終夜撹拌し
た。溶媒を減圧下留去し、残留物を蒸留水で処理し、酢
酸エチルで抽出した。抽出液を１規定塩酸、蒸留水、飽
和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。
減圧下溶媒を留去後、残留物をメタノールに溶解し、２
規定水酸化ナトリウム水溶液を加えて、室温下１．５時
間撹拌した。溶媒を減圧下留去後、残留物を１規定塩酸
で酸性に調整し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、
飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し
た。減圧下溶媒を留去し、（Ｒ）−２−（トランス−４
−イソプロピルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−３
−フェニルプロピオン酸（０．７２５ｇ）を得た。

【００８７】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
4 (6H, d, J=7.0Hz), 0.90-1.05 (3H, m), 1.30-1.45
(3H, m), 1.70-1.90 (4H, m), 3.12 (1H, dd, J=6.1, 1
3.6Hz), 3.23 (1H, dd, J=5.5, 13.6Hz), 4.83(1H, m),
6.03 (1H, m), 7.15 (2H, m), 7.20-7.30 (3H, m)

【００８８】参考例４ Ｄ−フェニルアラニンエチルエステルトシル酸塩の代わ
りに（Ｓ）−２−アミノ−４−ベンジルオキシ酪酸エチ
ル塩酸塩を用いて、参考例３と同様の方法により、以下
の化合物を得た。 （Ｓ）−４−ベンジルオキシ−２−（トランス−４−イ
ソプロピルシクロヘキシルカルボニルアミノ）酪酸

【００８９】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
3 (6H, d, J=7.1Hz), 0.86-0.92 (2H, m), 1.17-1.28
(2H, m), 1.38 (1H, m), 1.63-1.69 (2H, m), 1.77-1.8
4 (2H, m), 1.92 (1H, m), 2.12-2.22 (2H, m), 3.75
(1H, m), 3.88 (1H, m), 4.46-4.54 (3H, m), 7.29-7.3
9 (5H, m)

【００９０】参考例５ （Ｒ）−２−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキ
シルカルボニルアミノ）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−
３−フェニルプロピオン酸アミド （Ｒ）−２−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキ
シルカルボニルアミノ）−３−フェニルプロピオン酸
（０．７３５ｇ）、ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩
（０．２３５ｇ）、ベンゾトリアゾール−１−イルオキ
シトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオ
ロホスフェート（１．０６ｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホル
ムアミド（１０ｍｌ）に溶解し、氷冷下ジイソプロピル
エチルアミン（０．８０ｍｌ）を加え、室温下６時間撹
拌した。反応混合物を蒸留水に注ぎ、酢酸エチルで抽出
した。抽出液を１規定塩酸、蒸留水、飽和食塩水で洗浄
し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒を留
去し、（Ｒ）−２−（トランス−４−イソプロピルシク
ロヘキシルカルボニルアミノ）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メ
チル−３−フェニルプロピオン酸アミド（０．６７ｇ）
を得た。

【００９１】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
5 (6H, d, J=6.9Hz), 0.90-1.08 (3H, m), 1.31-1.42
(3H, m), 1.75 (2H, d, J=12.5Hz), 1.80-1.91 (2H,
m), 1.98 (1H, tt, J=3.5, 12.1Hz), 2.93 (1H,m), 3.1
2 (1H, m), 3.18 (3H, s), 3.70 (3H, s), 5.23 (1H,
m), 6.08 (1H,m),7.14 (1H, m), 7.22 (1H, m), 7.26-
7.29 (2H, m)

【００９２】参考例６ （Ｒ）−２−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキ
シルカルボニルアミノ）−３−フェニルプロピオン酸の
代わりに（Ｓ）−４−ベンジルオキシ−２−（トランス
−４−イソプロピルシクロヘキシルカルボニルアミノ）
酪酸を用いて、参考例５と同様の方法により、以下の化
合物を得た。 （Ｓ）−４−ベンジルオキシ−２−（トランス−４−イ
ソプロピルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−Ｎ−メ
トキシ−Ｎ−メチル酪酸アミド

【００９３】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
4 (6H, d, J=6.8Hz), 0.86-1.03 (3H, m), 1.28-1.43
(3H, m), 1.69-2.00 (6H, m), 2.10 (1H, m), 3.17 (3
H, s), 3.54-3.62 (2H, m), 3.78 (3H, s), 4.45 (1H,
d, J=11.4Hz), 4.50 (1H, d, J=11.4Hz), 5.04 (1H, b
r), 6.65 (1H, br), 7.27-7.39 (5H, m)

【００９４】参考例７ （ＲＳ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−
３−（３，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−メトキシ−Ｎ
−メチルプロピオン酸アミド （ＲＳ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−
３−（３，４−ジクロロフェニル）プロピオン酸（０．
３５ｇ）、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス
（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフ
ェート（０．５２１ｇ）およびジメチルヒドロキシルア
ミン塩酸塩（０．１１５ｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルム
アミド（１０．０ｍｌ）に溶解し、氷冷下トリエチルア
ミン（０．５０ｍｌ）を加え、室温下３．５時間撹拌し
た。反応混合物を１０％クエン酸水溶液に注ぎ、酢酸エ
チルで抽出した。抽出液を１規定塩酸、蒸留水、飽和食
塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧
下溶媒を留去し、（ＲＳ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカ
ルボニルアミノ−３−（３，４−ジクロロフェニル）−
Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルプロピオン酸アミド（０．３
９２ｇ）を得た。

【００９５】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：1.4
1 (9H, s), 2.82 (1H, dd, J=7.2, 13.5Hz), 3.02 (1H,
dd, J=5.7, 13.5Hz), 3.19 (3H, s), 3.72 (3H, s),
4.90 (1H, m), 5.23 (1H, d, J=7.9Hz), 7.01(1H, d, J
=8.1Hz), 7.26 (1H, s), 7.34 (1H, d, J=8.1Hz)

【００９６】参考例８ （ＲＳ）−２−（トランス−４−ｎ−ブチルシクロヘキ
シルカルボニルアミノ）−３−（３，４−ジクロロフェ
ニル）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルプロピオン酸アミド （ＲＳ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−
３−（３，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−メトキシ−Ｎ
−メチルプロピオン酸アミド（１．３３ｇ）に４規定塩
化水素酢酸エチル溶液（１５．０ｍｌ）を加え、室温下
２０分間撹拌した後、溶媒および過剰の塩化水素を減圧
下留去した。残留物（１．２７ｇ）、トランス−ｎ−ブ
チルシクロヘキサンカルボン酸（０．６２ｇ）、ベンゾ
トリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミ
ノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（１．４
９ｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０．０ｍ
ｌ）に溶解し、氷冷下トリエチルアミン（１．４２ｍ
ｌ）を加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物を１０％
クエン酸水溶液に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。抽出液
を水、飽和重曹水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグ
ネシウムで乾燥した。溶媒を減圧下留去し、残留物をシ
リカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶出溶
媒：ヘキサン／酢酸エチル＝３／１）で精製し、（Ｒ
Ｓ）−２−（トランス−４−ｎ−ブチルシクロヘキシル
カルボニルアミノ）−３−（３，４−ジクロロフェニ
ル）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルプロピオン酸アミド
（０．７５４ｇ）を得た。

【００９７】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
3-0.94 (5H, m), 1.14-1.29 (7H, m), 1.35-1.44 (2H,
m), 1.77-1.87 (4H,m), 2.01 (1H, m), 2.90 (1H, dd,
J=6.2, 13.7Hz), 3.06 (1H, dd, J=6.2, 13.7Hz), 3.19
(3H, s), 3.74 (3H, s), 5.19 (1H, m), 6.15 (1H, d,
J=7.8Hz), 6.95 (1H, m), 7.19 (1H, s), 7.33 (1H,
d, J=8.3Hz)

【００９８】実施例１ （Ｒ）−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキ
シルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル酪
酸エチル エチルビニルエーテル（１．８ｍｌ）をテトラヒドロフ
ラン（１０ｍｌ）に溶解し、アルゴン雰囲気下−７８℃
にてｔｅｒｔ−ブチルリチウム（１．４６Ｍ、１０ｍ
ｌ）を加え、０℃まで昇温した後、同温にて２０分間撹
拌した。再び−７８℃に冷却した後、反応混合物に
（Ｒ）−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキ
シルカルボニルアミノ）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−
２−オキソ−４−フェニル酪酸アミド（０．６７ｇ）の
テトラヒドロフラン（３．０ｍｌ）溶液を加え、同温に
て１５分間撹拌した。反応混合物を氷−塩化アンモニウ
ム水溶液に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和
食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減
圧下溶媒を留去し、白色結晶（０．６４ｇ）を得た後、
塩化メチレン（５０ｍｌ）に溶解し、−７８℃にてオゾ
ンガスを吹き込んだ。反応液が青色に着色した後、同温
にてピリジン（２．０ｍｌ）、ジメチルスルフィド
（２．０ｍｌ）を加え、同温にて５分間撹拌した。反応
混合物を水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。抽出液を１
規定塩酸、蒸留水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグ
ネシウムで乾燥した。溶媒を減圧下留去し、残留物をシ
リカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶出溶
媒：ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）で精製し、（Ｒ）
−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキシルカ
ルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル酪酸エチ
ル（０．３４ｇ）を得た。

【００９９】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
4 (6H, d, J=6.7Hz), 0.90-1.07 (3H, m), 1.26-1.43
(7H, m), 1.72-1.89 (4H, m), 2.00 (1H, m), 3.07 (1
H, m), 3.26 (1H, m), 4.11 (1H, m), 4.32 (1H, m),
5.38 (1H, m), 5.89 (1H, m), 7.09-7.13 (2H, m), 7.2
0-7.33 (3H, m)

【０１００】実施例２ （Ｒ）−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキ
シルカルボニルアミノ）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−
２−オキソ−４−フェニル酪酸アミドの代わりに（Ｓ）
−４−ベンジルオキシ−２−（トランス−４−イソプロ
ピルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−Ｎ−メトキシ
−Ｎ−メチル酪酸アミドを用いて、実施例１と同様の方
法により、以下の化合物を得た。 （Ｓ）−５−ベンジルオキシ−３−（トランス−４−イ
ソプロピルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−２−オ
キソ−４−フェニル吉草酸エチル

【０１０１】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
5 (6H, d, J=6.9Hz), 0.89-1.04 (3H, m), 1.28 (3H,
t, J=7.2Hz), 1.24-1.44 (3H, m), 1.73 (2H, d, J=12.
6Hz), 1.84 (2H, t, J=15.1Hz), 1.98 (1H, m), 2.21
(1H, m), 2.34 (1H, m), 3.45 (1H, td, J=2.8, 9.2H
z), 3.54 (1H, m),4.16-4.31 (2H, m), 4.38 (2H, s),
5.15 (1H, m), 6.61 (1H, d, J=5.6), 7.26-7.38 (5H,
m)

【０１０２】実施例３ （Ｒ）−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキ
シルカルボニルアミノ）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−
２−オキソ−４−フェニル酪酸アミドの代わりに（Ｒ
Ｓ）−２−（トランス−４−ｎ−ブチルシクロヘキシル
カルボニルアミノ）−３−（３，４−ジクロロフェニ
ル）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルプロピオン酸アミドを
用いて、実施例１と同様の方法により、以下の化合物を
得た。 （ＲＳ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシクロヘキ
シルカルボニルアミノ）−４−（３，４−ジクロロフェ
ニル）−２−オキソ酪酸エチル

【０１０３】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
4-0.94 (5H, m), 1.13-1.44 (9H, m), 1.38 (3H, t, J=
7.2Hz), 1.78-1.85 (4H, m), 2.04 (1H, m), 3.01 (1H,
dd, J=6.6, 14.2Hz), 3.27 (1H, dd, J=6.0,14.2Hz),
4.34 (2H, q, J=7.2Hz), 5.32 (1H, m), 5.94 (1H, d,
J=6.9Hz), 6.94 (1H, dd, J=2.0, 8.2Hz), 7.19 (1H,
d, J=2.0Hz), 7.36 (1H, d, J=8.2Hz)

【０１０４】実施例４ （ＲＳ）−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘ
キシルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル
酪酸 （Ｒ）−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキ
シルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル酪
酸エチル（０．３４ｇ）をメタノール（４．０ｍｌ）に
溶解し、２規定水酸化ナトリウム水溶液（０．６９ｍ
ｌ）を加え、室温下２時間撹拌した。溶媒を減圧下留去
後、残留物を蒸留水に溶解し、ジエチルエーテルで洗浄
した。水層を１規定塩酸でｐＨ１に調整し、酢酸エチル
で抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マ
グネシウムで乾燥した。溶媒を減圧下留去し、（ＲＳ）
−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキシルカ
ルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル酪酸
（０．１９ｇ）を得た。

【０１０５】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆ ）δｐｐ
ｍ：0.82 (6H, d, J=7.0Hz), 0.85-1.00 (3H, m), 1.13
-1.28 (2H, m), 1.35 (1H, m), 1.53-1.72 (4H, m), 2.
04 (1H, m), 2.35 (1H, m), 2.80 (1H, dd, J=6.1, 13.
6Hz), 3.10 (1H, dd, J=5.5, 13.6Hz), 4.82 (1H, m),
7.18-7.21 (3H, m), 7.25-7.30 (2H, m), 8.30 (1H, m)

【０１０６】実施例５ （Ｒ）−３−（トランス−４−イソプロピルヘキシルカ
ルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル酪酸エチ
ルの代わりに（Ｓ）−５−ベンジルオキシ−３−（トラ
ンス−４−イソプロピルシクロヘキシルカルボニルアミ
ノ）−２−オキソ−４−フェニル吉草酸エチルを用い
て、実施例４と同様の方法により、以下の化合物を得
た。 （ＲＳ）−５−ベンジルオキシ−３−（トランス−４−
イソプロピルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−２−
オキソ−４−フェニル吉草酸

【０１０７】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
5 (6H, d, J=6.8Hz), 0.86-0.98 (3H, m), 1.19-1.30
(2H, m), 1.39 (1H, m), 1.64-1.74 (2H, m), 1.77-1.8
6 (2H, m), 1.97 (1H, m), 2.19 (1H, m), 2.34 (1H,
m), 3.53-3.63 (2H, m), 4.39 (1H, d, J=11.3Hz), 4.4
5 (1H, d, J=11.3Hz), 5.05 (1H, m), 6.88 (1H, br),
7.28-7.39 (5H, m)

【０１０８】実施例６ （Ｒ）−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキ
シルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル酪
酸エチルの代わりに（ＲＳ）−３−（トランス−４−ｎ
−ブチルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−４−
（３，４−ジクロロフェニル）−２−オキソ酪酸エチル
を用いて、実施例４と同様の方法により、以下の化合物
を得た。 （ＲＳ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシクロヘキ
シルカルボニルアミノ）−４−（３，４−ジクロロフェ
ニル）−２−オキソ酪酸

【０１０９】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆ ）δｐｐ
ｍ：0.77-0.78 (5H, m), 1.09-1.29 (9H, m), 1.53-1.7
3 (4H, m), 2.01 (1H, m), 2.80 (1H, dd, J=10.0, 13.
9Hz), 3.12 (1H, dd, J=4.9, 13.9Hz), 4.78 (1H, m),
7.19 (1H, dd, J=2.0, 8.3Hz), 7.47 (1H, d, J=2.0H
z), 7.54 (1H, d, J=8.3Hz), 8.32 (1H, d, J=7.2Hz)

【０１１０】参考例９ （２Ｒ，３Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシク
ロヘキシルカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−
フェニル酪酸エチル （２Ｒ，３Ｓ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フ
ェニル酪酸エチル塩酸塩（０．１０ｇ）、トランス−４
−ｎ−ブチルシクロヘキサンカルボン酸（０．０７２
ｇ）およびベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス
（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフ
ェート（０．１８ｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
（１．０ｍｌ）に溶解し、氷冷下ジイソプロピルエチル
アミン（０．１３ｍｌ）を加え、室温下７時間撹拌し
た。反応混合物を蒸留水に注ぎ、酢酸エチルで抽出し
た。抽出液を１規定塩酸、蒸留水、飽和食塩水で洗浄
し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧下留
去し、（２Ｒ，３Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチ
ルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ
−４−フェニル酪酸エチル（０．１３５ｇ）を得た。

【０１１１】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
1-0.92 (5H, m), 1.11-1.47 (18H, m), 2.87-2.98 (2H,
m), 4.07-4.13 (2H,m), 4.59 (1H, m), 5.66 (1H, d,
J=9.6Hz), 7.21-7.32 (5H, m)

【０１１２】参考例１０ トランス−４−ｎ−ブチルシクロヘキサンカルボン酸の
代わりにトランス−４−イソプロピルシクロヘキサンカ
ルボン酸、さらに（２Ｒ，３Ｓ）−３−アミノ−２−ヒ
ドロキシ−４−フェニル酪酸エチル塩酸塩の代わりに
（２ＲＳ，３Ｓ）−３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−
（４−ヒドロキシフェニル）酪酸エチル塩酸塩を用い
て、参考例９と同様の方法により、以下の化合物を得
た。 （２ＲＳ，３Ｓ）−２−ヒドロキシ−４−（４−ヒドロ
キシフェニル）−３−（トランス−４−イソプロピルシ
クロヘキシルカルボニルアミノ）酪酸エチル

【０１１３】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.7
0-1.10 (9H, m), 1.15-1.45 (6H, m), 1.60-2.00 (5H,
m), 2.75-2.90 (2H,m), 4.05-4.25 (2H, m), 4.50-4.70
(1H, m), 5.70-5.85 (1H, m), 6.65-6.80 (2H, m), 7.
05-7.15 (2H, m)

【０１１４】参考例１１ （２ＲＳ，３Ｓ）−４−（４−エトキシカルボニルメト
キシフェニル）−２−ヒドロキシ−３−（トランス−４
−イソプロピルシクロヘキシルカルボニルアミノ）酪酸
エチル （２ＲＳ，３Ｓ）−２−ヒドロキシ−４−（４−ヒドロ
キシフェニル）−３−（トランス−４−イソプロピルシ
クロヘキシルカルボニルアミノ）酪酸エチル（０．０５
ｇ）および水素化ナトリウム（６０％）（０．００３
ｇ）のテトラヒドロフラン（２．５ｍｌ）溶液に、ブロ
モ酢酸エチル（０．０２２ｇ）を加え、室温下４０分間
撹拌した。反応混合物にエタノール及び１０％クエン酸
を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を無水硫酸マグ
ネシウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去し、残留物をシリ
カゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶出溶
媒：ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）で精製し、（２Ｒ
Ｓ，３Ｓ）−４−（４−エトキシカルボニルメトキシフ
ェニル）−２−ヒドロキシ−３−（トランス−４−イソ
プロピルシクロヘキシルカルボニルアミノ）酪酸エチル
（０．０２５ｇ）を得た。

【０１１５】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
3 (6H, d, J=6.8Hz), 0.88-1.06 (3H, m), 1.25 (3H,
t, J=7.1Hz), 1.30 (3H, t, J=7.1Hz), 1.22-1.42 (3H,
m), 1.73-1.82 (4H, m), 1.91 (1H, m), 2.83-2.89 (2
H, m), 3.27 (1H, m), 4.08 (1H, m), 4.17 (2H, q, J=
7.1Hz), 4.28 (2H, q, J=7.1Hz), 4.53 (1H, m), 4.60
(2H, s), 5.66 (1H, m), 6.86 (2H, d,J=8.6Hz), 7.21
(2H, d, J=8.6Hz)

【０１１６】実施例７ （Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシクロヘキシ
ルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル酪酸
エチル （２Ｒ，３Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシク
ロヘキシルカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−
フェニル酪酸エチル（０．１３５ｇ）を塩化メチレン
（１．０ｍｌ）に溶解し、１，１，１−トリアセトキシ
−１，１−ジヒドロ−１，２−ベンズヨードオキソール
−３（１Ｈ）−オン（０．２５ｇ）を加え、室温下８０
分間撹拌した。溶媒を減圧下留去し、残留物に酢酸エチ
ルを加え、飽和重曹水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸
マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧下留去し、（Ｓ）
−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシクロヘキシルカル
ボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル酪酸エチル
（０．１３ｇ）を得た。

【０１１７】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.7
8-0.96 (5H, m), 1.12-1.31 (8H, m), 1.30-1.42 (1H,
m), 1.36 (3H, t, J=7.0Hz), 1.75-1.84 (4H, m), 2.01
(1H, m), 3.07 (1H, dd, J=7.0, 14.3Hz), 3.26 (1H,
dd, J=5.9, 14.3Hz), 4.32 (2H, q, J=7.0Hz), 5.38 (1
H, m), 5.88 (1H, d, J=6.9Hz), 7.08-7.12 (2H, m),
7.22-7.32 (3H, m)

【０１１８】実施例８ （２Ｒ，３Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシク
ロヘキシルカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−
フェニル酪酸エチルの代わりに（２ＲＳ，３Ｓ）−４−
（４−エトキシカルボニルメトキシフェニル）−２−ヒ
ドロキシ−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘ
キシルカルボニルアミノ）酪酸エチルを用いて、実施例
７と同様の方法により、以下の化合物を得た。 （Ｓ）−４−（４−エトキシカルボニルメトキシフェニ
ル）―３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキシ
ルカルボニルアミノ）−２−オキソ酪酸エチル

【０１１９】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
4 (6H, d, J=6.9Hz), 0.91-1.08 (3H, m), 1.21-1.44
(3H, m), 1.30 (3H, t, J=7.2Hz), 1.37 (3H, t, J=7.2
Hz), 1.74-1.89 (4H, m), 2.00 (1H, m), 3.02(1H, dd,
J=6.7, 14.4Hz), 3.20 (1H, dd, J=6.0, 14.4Hz), 4.2
7 (2H, q, J=7.2Hz), 4.32 (2H, q, J=7.2Hz), 4.59 (2
H, s), 5.34 (1H, m), 5.88 (1H, d, J=7.2Hz), 6.83
(2H, d, J=8.7Hz), 7.01 (2H, d, J=8.7Hz)

【０１２０】実施例９ （ＲＳ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシクロヘキ
シルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル酪
酸 （Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシクロヘキシ
ルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル酪酸
エチル（０．１３ｇ）をメタノール（２．０ｍｌ）に溶
解し、２規定水酸化ナトリウム水溶液（０．１３ｍｌ）
を加え、室温下４０分間撹拌した。溶媒を減圧下留去
後、残留物を蒸留水に溶解し、ジエチルエーテルで洗浄
した。水層を１規定塩酸でｐＨ１に調整し、酢酸エチル
で抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マ
グネシウムで乾燥した。溶媒を減圧下留去し、（ＲＳ）
−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシクロヘキシルカル
ボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル酪酸（０．
０３６ｇ）を得た。

【０１２１】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.7
9-0.90 (5H, m), 1.11-1.38 (9H, m), 1.78-1.83 (4H,
m), 2.02 (1H, m), 3.05 (1H, dd, J=8.5, 14.1Hz), 3.
32 (1H, dd, J=5.2, 14.1Hz), 5.09 (1H, m),5.98 (1H,
m), 7.12-7.15 (2H, m), 7.20-7.35 (3H, m)

【０１２２】実施例１０ （Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシクロヘキシ
ルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル酪酸
エチルの代わりに（Ｓ）−４−（４−エトキシカルボニ
ルメトキシフェニル）―３−（トランス−４−イソプロ
ピルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−２−オキソ酪
酸エチルを用いて、実施例９と同様の方法により、以下
の化合物を得た。 （ＲＳ）−４−（４−カルボキシメトキシフェニル）―
３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキシルカル
ボニルアミノ）−２−オキソ酪酸

【０１２３】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆ ）δｐｐ
ｍ：0.82 (6H, d, J=6.9Hz), 0.83-0.99 (3H, m), 1.14
-1.41 (3H, m), 1.57-1.71 (4H, m), 2.03 (1H, m), 2.
74 (1H, m), 3.03 (1H, m), 4.61 (2H, s), 4.74 (1H,
m), 6.81 (2H, d, J=8.7Hz), 7.11 (2H, d, J=8.7Hz),
8.28 (1H, d, J=7.2Hz)

【０１２４】実施例１１ （ＲＳ）−５−ヒドロキシ−３−（トランス−４−イソ
プロピルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−２−オキ
ソ吉草酸 （ＲＳ）−５−ベンジルオキシ−３−（トランス−４−
イソプロピルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−２−
オキソ−４−フェニル吉草酸（０．０２５ｇ）のメタノ
ール（５．０ｍｌ）溶液に１０％パラジウム炭素を加
え、１気圧の水素雰囲気下室温で接触還元した。触媒を
濾去した後、濾液を減圧下濃縮し、（ＲＳ）−５−ヒド
ロキシ−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキ
シルカルボニルアミノ）−２−オキソ吉草酸（０．００
７ｍｇ）を得た。

【０１２５】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆ ）δｐｐ
ｍ：0.82-0.85 (6H, m), 0.90-1.01 (3H, m), 1.21-1.3
3 (2H, m), 1.38 (1H, m), 1.67-1.83 (5H, m), 2.08-
2.17 (2H, m), 3.74-3.95 (2H, m), 4.48 (1H, m), 7.3
7 (1H, d, J=8.5Hz)

【０１２６】実施例１２ （ＲＳ）−Ｎ−ベンジル−３−（トランス−４−イソプ
ロピルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−２−オキソ
−４−フェニル酪酸アミド （ＲＳ）−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘ
キシルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル
酪酸（０．０８ｇ）、ベンジルアミン（０．０２６
ｇ）、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジ
メチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェー
ト（０．１０５ｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
（０．５ｍｌ）に溶解し、氷冷下ジイソプロピルエチル
アミン（０．０６ｍｌ）を加え、室温下４時間撹拌し
た。反応混合物を氷−１規定塩酸に注ぎ、酢酸エチルで
抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグ
ネシウムで乾燥した。溶媒を減圧下留去し、白色結晶と
して（ＲＳ）−Ｎ−ベンジル−３−（トランス−４−イ
ソプロピルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−２−オ
キソ−４−フェニル酪酸アミド（０．０４３ｇ）を得
た。

【０１２７】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
4 (6H, d, J=7.0Hz), 0.90-1.08 (3H, m), 1.29-1.44
(3H, m), 1.75 (2H, d, J=11.4Hz), 1.83 (2H, t, J=1
2.0Hz), 1.98 (1H, t, J=12.0Hz), 3.16 (1H, dd, J=7.
4, 14.0Hz), 3.35 (1H, dd, J=5.5, 14.0Hz), 4.46-4.5
7 (2H, m), 5.48(1H, m), 5.96 (1H, d, J=7.4Hz), 7.0
6-7.09 (2H, m), 7.13 (1H, bs), 7.22-7.39 (8H, m)

【０１２８】実施例１３ ベンジルアミンの代わりに２−フェニルエチルアミンを
用いて、実施例１２と同様の方法により、以下の化合物
を得た。 （ＲＳ）−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘ
キシルカルボニルアミノ）−２−オキソ−Ｎ−フェネチ
ル−４−フェニル酪酸アミド

【０１２９】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
4 (6H, d, J=6.7Hz), 0.90-1.06 (3H, m), 1.29-1.43
(3H, m), 1.75 (2H, d, J=12.3Hz), 1.84 (2H, t, J=1
2.3Hz), 1.98 (1H, tt, J=3.6, 12.3Hz), 2.83-2.94 (2
H, m), 3.11 (1H, dd, J=7.0, 13.7Hz), 3.32 (1H, dd,
J=5.6, 13.7Hz), 3.54-3.67 (2H, m), 5.47 (1H, m),
5.94 (1H, m), 6.89 (1H, bs), 7.01-7.05 (2H, m), 7.
19-7.34 (8H, m)

【０１３０】実施例１４ ベンジルアミンの代わりにｎ−ブチルアミンを用いて、
実施例１２と同様の方法により、以下の化合物を得た。 （ＲＳ）−Ｎ−ｎ−ブチル−３−（トランス−４−イソ
プロピルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−２−オキ
ソ−４−フェニル酪酸アミド

【０１３１】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
4 (6H, d, J=7.1Hz), 0.92-1.05 (6H, m), 1.31-1.43
(4H, m), 1.52-1.58 (3H, m), 1.76 (2H, d, J=11.7H
z), 1.84 (2H, t, J=13.8Hz), 1.99 (1H, m), 3.15 (1
H, dd, J=7.4, 13.8Hz), 3.29-3.38 (3H, m), 5.46 (1
H, dd, J=7.4, 11.7Hz), 5.97 (1H, d, J=6.7Hz), 6.83
(1H, bs), 7.08-7.30 (3H, m), 7.20-7.30(3H, m)

【０１３２】実施例１５ ベンジルアミンの代わりに２−（４−ピリジル）エチル
アミンを用いて、実施例１２と同様の方法により、以下
の化合物を得た。 （ＲＳ）−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘ
キシルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル
−Ｎ−〔２−（４−ピリジル）エチル〕酪酸アミド

【０１３３】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ＋ＤＭＳＯ−ｄ
₆ ）δｐｐｍ：0.85 (6H, d, J=7.2Hz), 0.89-1.06 (3
H, m), 1.28-1.43 (4H, m), 1.71-1.88 (4H, m), 1.98
(1H, t, J=12.5Hz), 1.98 (1H, t, J=12.5Hz), 2.86-2.
91 (2H, m), 3.07 (1H, dd, J=7.4, 14.0Hz), 3.30 (1
H, dd, J=5.3, 14.0Hz), 3.60 (2H,dd, J=6.9, 14.0H
z), 5.40 (1H, dd, J=7.2, 12.6Hz), 6.22 (1H, d, J=
6.9Hz), 7.04-7.07 (2H, m), 7.16-7.17 (2H, m), 7.21
-7.29 (3H, m), 7.42 (1H, bs), 8.52-8.58 (2H, m)

【０１３４】実施例１６ ベンジルアミンの代わりに２−（４−ヒドロキシフェニ
ル）エチルアミンを用いて、実施例１２と同様の方法に
より、以下の化合物を得た。 （ＲＳ）−Ｎ−〔２−（４−ヒドロキシフェニル）エチ
ル〕−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキシ
ルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル酪酸
アミド

【０１３５】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
4 (6H, d, J=6.8Hz), 0.90-1.06 (3H, m), 1.29-1.43
(3H, m), 1.72-1.87 (4H, m), 1.98 (1H, m), 2.76-2.8
1 (2H, m), 3.02 (1H, m), 3.11 (1H, dd, J=7.0, 14.2
Hz), 3.32 (1H, dd, J=5.4, 14.2Hz), 3.46-3.59 (2H,
m), 5.46 (1H,m), 5.95 (1H, d, J=7.4Hz), 6.76-6.82
(2H, m), 6.88 (1H, m), 7.01-7.07 (2H, m), 7.19-7.2
8 (5H, m)

【０１３６】実施例１７ ベンジルアミンの代わりに４−（２−アミノエチル）フ
ェノキシ酢酸エチルを用いて、実施例１２と同様の方法
により、以下の化合物を得た。 （ＲＳ）−Ｎ−〔２−（４−エトキシカルボニルメトキ
シフェニル）エチル〕−３−（トランス−４−イソプロ
ピルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−２−オキソ−
４−フェニル酪酸アミド

【０１３７】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
4 (6H, d, J=6.8Hz), 0.91-1.06 (3H, m), 1.24-1.43
(3H, m), 1.30 (3H, t, J=7.2Hz), 1.73-1.86 (4H, m),
1.98 (1H, m), 2.78-2.84 (2H, m), 3.11 (1H, dd, J=
7.2, 14.1Hz), 3.32 (1H, dd, J=5.4, 14.1Hz), 3.51-
3.60 (m, 2H), 4.27 (2H, q, J=7.2Hz), 4.59 (2H, s),
5.47 (1H, m), 5.94 (1H, d, J=7.1Hz),6.87 (2H, d,
J=8.5Hz), 6.90 (1H, m), 7,13 (2H, d, J=8.5Hz), 7.1
9-7.27 (5H, m)

【０１３８】実施例１８ ベンジルアミンの代わりに４−（２−アミノエチル）フ
ェノキシ酢酸メチルを用いて、実施例１２と同様の方法
により、以下の化合物を得た。 （ＲＳ）−Ｎ−〔２−（４−メトキシカルボニルメトキ
シフェニル）エチル〕−３−（トランス−４−イソプロ
ピルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−２−オキソ−
４−フェニル酪酸アミド

【０１３９】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
4 (6H, d, J=6.8Hz), 0.91-1.05 (3H, m), 1.29-1.43
(3H, m), 1.70-1.86 (4H, m), 1.98 (1H, t, J=12.3H
z), 2.74-2.85 (2H, m), 3.11 (1H, m), 3.32 (1H, m),
3.48-3.61 (2H, m), 3.80 (3H, s), 4.62 (2H, s), 5.
44 (1H, m), 5.98(1H, m), 6.84-6.91 (3H, m), 7.02-
7.28 (7H, m)

【０１４０】実施例１９ ベンジルアミンの代わりに４−フェニルブチルアミンを
用いて、実施例１２と同様の方法により、以下の化合物
を得た。 （ＲＳ）−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘ
キシルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル
−Ｎ−（４−フェニルブチル）酪酸アミド

【０１４１】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
4 (6H, d, J=6.8Hz), 0.93-1.05 (3H, m), 1.30-1.42
(3H, m), 1.58-1.71 (4H, m), 1.74-1.77 (2H, m), 1.8
3 (2H, t, J=13.1Hz), 1.98 (1H, t, J=12.1Hz), 2.66
(2H, t, J=7.7Hz), 3.14 (1H, dd, J=7.2, 14.1Hz), 3.
32-3.37 (3H, m), 5.46 (1H, m), 5.96 (1H, d, J=6.9H
z), 6.82 (1H, m), 7.06 (2H, d, J=6.7Hz), 7.17-7.30
(8H, m)

【０１４２】実施例２０ ベンジルアミンの代わりに３−フェニルプロピルアミン
を用いて、実施例１２と同様の方法により、以下の化合
物を得た。 （ＲＳ）−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘ
キシルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル
−Ｎ−（４−フェニルプロピル）酪酸アミド

【０１４３】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
2 (6H, d, J=6.7Hz), 0.19-1.08 (3H, m), 1.32-1.42
(3H, m), 1.77 (2H, d, J=12.0Hz), 1.83 (2H, t, J=1
2.0Hz), 1.88-2.02 (7H, m), 2.65-2.69 (2H, m), 3.11
(1H, dd, J=7.0, 13.5Hz), 3.32-3.40 (3H, m), 5.53
(1H, m), 5.97 (1H, m), 6.85 (1H, bs), 7.08-7.10 (2
H, m), 7.21-7.33 (8H, m)

【０１４４】実施例２１ ベンジルアミンの代わりに１−（４−ピリジル）ピペラ
ジンを用いて、実施例１２と同様の方法により、以下の
化合物を得た。 （ＲＳ）−１−〔３−（トランス−４−イソプロピルシ
クロヘキシルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フ
ェニルブチリル〕−４−（４−ピリジル）ピペラジン

【０１４５】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
2 (6H, d, J=6.9Hz), 0.90-1.01 (3H, m), 1.21-1.30
(2H, m), 1.38 (1H, m), 1.70-1.80 (4H, m), 1.99 (1
H, t, J=12.3Hz), 3.09 (1H, dd, J=6.9, 13.2Hz), 3.2
9 (1H, dd, J=5.9, 13.2Hz), 3.66-3.80 (6H, m), 3.81
-3.90 (2H, m),4.65 (1H, m), 6.10 (1H, d, J=6.0Hz),
6.90-6.95 (2H, m), 7.20-7.35 (5H, m), 8.07-8.10
(2H, m)

【０１４６】実施例２２ （ＲＳ）−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘ
キシルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル
酪酸アミド （ＲＳ）−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘ
キシルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル
酪酸（０．０５ｇ）およびＮ−メチルモルホリン（０．
０２ｍｌ）を１，２−ジメトキシエタン（２．０ｍｌ）
に溶解し、クロロギ酸イソブチル（０．０２ｍｌ）を加
えた。生じた白色沈澱を濾別し、濾液にアンモニア水
（１．０ｍｌ）を加え、室温下２０分間撹拌した。反応
混合物に水を注ぎ、酢酸エチルで抽出した。抽出液を希
塩酸、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾
燥した。溶媒を減圧下留去し、（ＲＳ）−３−（トラン
ス−４−イソプロピルシクロヘキシルカルボニルアミ
ノ）−２−オキソ−４−フェニル酪酸アミド（０．０３
３ｇ）を得た。

【０１４７】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
3 (6H, d, J=6.8Hz), 0.86-1.03 (3H, m), 1.26-1.43
(3H, m), 1.74-1.89 (4H, m), 1.99 (1H, m), 3.13 (1
H, m), 3.34 (1H, m), 5.43 (1H, m), 5.49 (1H, m),
5.93 (1H, m), 6.74 (1H, m), 7.22-7.34 (5H, m)

【０１４８】実施例２３ （ＲＳ）−Ｎ−〔２−（４−カルボキシメトキシ）エチ
ル〕−〔３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキ
シルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル〕
酪酸アミド （ＲＳ）−Ｎ−〔２−（４−エトキシカルボニルメトキ
シ）エチル〕−〔３−（トランス−４−イソプロピルシ
クロヘキシルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フ
ェニル〕酪酸アミド（０．０５２ｇ）をメタノール
（１．０ｍｌ）に溶解し、２規定水酸化ナトリウム水溶
液（０．２０ｍｌ）を加え、室温下１０分間撹拌した。
反応混合物に１規定塩酸を加えｐＨ１に調整し、酢酸エ
チルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫
酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧下留去し、（Ｒ
Ｓ）−Ｎ−〔２−（４−カルボキシメトキシ）エチル〕
−〔３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキシル
カルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル〕酪酸
アミド（０．０４４ｇ）を得た。

【０１４９】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆ ）δｐｐ
ｍ：0.82 (6H, d, J=6.8Hz), 0.85-0.98 (3H, m), 1.13
-1.40 (3H, m), 1.55-1.78 (4H, m), 2.05 (1H, t, J=1
2.1Hz), 2.67-2.73 (2H, m), 3.05 (1H, dd, J=3.9,9.9
Hz), 3.21-3.40 (3H, m), 4.60 (2H, s), 4.62 (1H,
m), 5.11 (1H, ddd, J=3.9, 7.3, 9.9Hz), 6.82 (2H,
d, J=8.6Hz), 7.12 (2H, d, J=8.6Hz), 7.01-7.32 (6H,
m)

【０１５０】参考例１２ （２Ｓ，３Ｓ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルア
ミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニル−Ｎ−〔３−（３
−ピリジル）プロピル〕酪酸アミド （２Ｓ，３Ｓ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルア
ミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニル酪酸（１．０９
ｇ）、３−（３−ピリジル）プロピルアミン（０．５０
ｇ）およびベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス
（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフ
ェート（１．７１ｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
（１５ｍｌ）に溶解し、氷冷下ジイソプロピルエチルア
ミン（１．９ｍｌ）を加え、室温下５時間撹拌した。反
応混合物を氷−１規定塩酸に注ぎ、酢酸エチルで洗浄し
た。水層を２規定水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ１０に
調整し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で
洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧
下留去し、（２Ｓ，３Ｓ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカ
ルボニルアミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニル−Ｎ−
〔３−（３−ピリジル）プロピル〕酪酸アミド（０．９
４ｇ）を得た。

【０１５１】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：1.3
8 (9H, m), 1.82-1.90 (2H, m), 2.62-2.68 (2H, m),
2.93 (1H, m), 3.07 (1H, m), 3.30-3.35 (2H, m), 4.0
0 (1H, m), 4.28 (1H, bs), 4.91 (1H, m), 5.65 (1H,
bs), 7.03 (1H, bs), 7.20-7.32 (6H, m), 7.50 (1H,
m), 8.42-8.48 (2H, m)

【０１５２】参考例１３ ３−（３−ピリジル）プロピルアミンの代わりに３−フ
ェニルプロピルアミンを用いて、参考例１２と同様の方
法により、以下の化合物を得た。 （２Ｓ，３Ｓ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルア
ミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニル−Ｎ−（３−フェ
ニルプロピル）酪酸アミド

【０１５３】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：1.3
8 (9H, s), 1.82-1.90 (2H, m), 2.66 (2H, t, J=7.9H
z), 2.93 (1H, m), 3.06 (1H, m), 3.25-3.63 (2H, m),
3.99 (1H, m), 4.26 (1H, bs), 4.89 (1H, m), 5.56
(1H, m), 6.97 (1H, bs), 7.18-7.32 (10H, m)

【０１５４】参考例１４ ３−（３−ピリジル）プロピルアミンの代わりに２−
（４−ピリジル）エチルアミンを用いて、参考例１２と
同様の方法により、以下の化合物を得た。 （２Ｓ，３Ｓ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルア
ミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニル−Ｎ−〔２−（４
−ピリジル）エチル〕酪酸アミド

【０１５５】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：1.3
9 (9H, s), 2.82-2.89 (3H, m), 3.04 (1H, m), 3.54-
3.60 (2H, m), 3.98 (1H, m), 4.28 (1H, m), 4.86 (1
H, m), 5.64 (1H, m), 7.07 (1H, br), 7.14-7.32 (7H,
m), 8.52-8.54 (2H, m)

【０１５６】参考例１５ ３−（３−ピリジル）プロピルアミンの代わりに３−
（４−ピリジル）プロピルアミンを用いて、参考例１２
と同様の方法により、以下の化合物を得た。 （２Ｓ，３Ｓ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルア
ミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニル−Ｎ−〔３−（４
−ピリジル）プロピル〕酪酸アミド

【０１５７】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：1.3
4 (9H, s), 1.81-1.88 (2H, m), 2.57-2.69 (2H, m),
2.79-3.66 (2H, m), 3.28-3.33 (2H, m), 4.10 (1H,
m), 4.28 (1H, br), 5.09 (1H, m), 5.84 (1H, br), 7.
10-7.72 (8H, m), 8.47-8.49 (2H, m)

【０１５８】参考例１６ ３−（３−ピリジル）プロピルアミンの代わりに３−
（１，３−ジメチル−２，６−ジオキソ−１，２，３，
６−テトラヒドロプリン−９−イル）プロピルアミンを
用いて、参考例１２と同様の方法により、以下の化合物
を得た。 （２Ｓ，３Ｓ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルア
ミノ−Ｎ−〔３−（１，３−ジメチル−２，６−ジオキ
ソ−１，２，３，６−テトラヒドロプリン−９−イル）
プロピル〕−２−ヒドロキシ−４−フェニル酪酸アミド

【０１５９】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：1.3
6 (9H, s), 1.85 (1H, br), 2.03-2.17 (2H, m), 2.95
(1H, m), 3.05 (1H,m), 3.25-3.37 (2H, m), 3.40 (3H,
s), 3.59 (3H, s), 4.08 (1H, br), 4.29 (1H, br),
4.34 (2H, t, J=6.9Hz), 5.25 (1H, d, J=6.6Hz), 5.49
(1H, br), 7.19-7.30 (4H, m), 7.36 (1H, t, J=6.1H
z), 7.68 (1H, s)

【０１６０】参考例１７ （２Ｓ，３Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシク
ロヘキシルカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−
フェニル−Ｎ−〔３−（３−ピリジル）プロピル〕酪酸
アミド （２Ｓ，３Ｓ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルア
ミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニル−Ｎ−〔３−（３
−ピリジル）プロピル〕酪酸アミド（０．９４ｇ）をジ
オキサン（３．０ｍｌ）に溶解し、４規定塩化水素ジオ
キサン溶液（５．０ｍｌ）を加え、室温下２０分間撹拌
した。溶媒および過剰の塩化水素を減圧下留去した。残
留物（０．１５ｇ）、トランス−４−ｎ−ブチルシクロ
ヘキサンカルボン酸（０．０７５ｇ）およびベンゾトリ
アゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホ
スホニウムヘキサフルオロホスフェート（０．１７５
ｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．０ｍｌ）に
溶解し、氷冷下ジイソプロピルエチルアミン（０．３４
ｍｌ）を加え、室温下２．５時間撹拌した。反応混合物
を水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和
重曹水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで
乾燥した。溶媒を減圧下留去し、（２Ｓ，３Ｓ）−３−
（トランス−４−ｎ−ブチルシクロヘキシルカルボニル
アミノ）−２−ヒドロキシ−４−フェニル−Ｎ−〔３−
（３−ピリジル）プロピル〕酪酸アミド（０．１０ｇ）
を得た。

【０１６１】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
0-0.95 (5H, m), 1.09-1.52 (7H, m), 1.65-2.00 (7H,
m), 2.72-2.80 (2H,m), 3.02 (1H, m), 3.18 (1H, m),
3.21-3.33 (2H, m), 4.20 (1H, m), 4.25 (1H, m), 5.8
3 (1H, m), 7.15-7.30 (7H, m), 7.53 (1H, m), 8.43-
8.46 (2H, m)

【０１６２】参考例１８ （２Ｓ，３Ｓ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルア
ミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニル−Ｎ−〔３−（３
−ピリジル）プロピル〕酪酸アミドの代わりに（２Ｓ，
３Ｓ）−３−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−ヒド
ロキシ−４−フェニル−Ｎ−〔２−（４−ピリジル）エ
チル〕酪酸アミドを用いて、参考例１７と同様の方法に
より、以下の化合物を得た。 （２Ｓ，３Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシク
ロヘキシルカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−
フェニル−Ｎ−〔２−（４−ピリジル）エチル〕酪酸ア
ミド

【０１６３】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
2-0.89 (5H, m), 1.13-1.30 (9H, m), 1.65-1.93 (6H,
m), 2.82-2.97 (3H,m), 3.03 (1H, m), 3.47-3.63 (2H,
m), 4.14 (1H, br), 4.23 (1H, s), 5.75 (1H, m), 7.
15-7.32 (8H, m), 8.50-8.53 (2H, m)

【０１６４】参考例１９ （２Ｓ，３Ｓ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルア
ミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニル−Ｎ−〔３−（３
−ピリジル）プロピル〕酪酸アミドの代わりに（２Ｓ，
３Ｓ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２
−ヒドロキシ−４−フェニル−Ｎ−〔３−（４−ピリジ
ル）プロピル〕酪酸アミドを用いて、参考例１７と同様
の方法により、以下の化合物を得た。 （２Ｓ，３Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシク
ロヘキシルカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−
フェニル−Ｎ−〔３−（４−ピリジル）プロピル〕酪酸
アミド

【０１６５】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.7
8-0.90 (5H, m), 1.13-1.32 (9H, m), 1.66-1.77 (4H,
m), 1.84-1.96 (3H,m), 2.02 (1H, br), 2.64-2.68 (2
H, m), 3.01 (1H, m), 3.17 (1H, m), 3.23-3.38 (2H,
m), 4.20 (1H, m), 4.26 (1H, s), 5.81 (1H, m), 7.12
-7.31 (8H, m), 8.48-8.50 (2H, m)

【０１６６】参考例２０ （２Ｓ，３Ｓ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルア
ミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニル−Ｎ−〔３−（３
−ピリジル）プロピル〕酪酸アミドの代わりに（２Ｓ，
３Ｓ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−Ｎ
−〔３−（１，３−ジメチル−２，６−ジオキソ−１，
２，３，６−テトラヒドロプリン−９−イル）プロピ
ル〕−２−ヒドロキシ−４−フェニル酪酸アミドを用い
て、参考例１７と同様の方法により、以下の化合物を得
た。 （２Ｓ，３Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシク
ロヘキシルカルボニルアミノ）−Ｎ−〔３−（１，３−
ジメチル−２，６−ジオキソ−１，２，３，６−テトラ
ヒドロプリン−９−イル）プロピル〕−２−ヒドロキシ
−４−フェニル酪酸アミド

【０１６７】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.7
2-0.96 (5H, m), 1.10-1.47 (9H, m), 1.63-1.85 (4H,
m), 1.91-2.28 (4H,m), 3.01-3.11 (2H, m), 3.28-3.34
(2H, m), 3.40 (3H, s), 3.60 (3H, s), 4.28-4.36 (4
H, m), 6.28 (1H, m), 7.21-7.70 (7H, m)

【０１６８】参考例２１ （２Ｓ，３Ｓ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルア
ミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニル−Ｎ−〔３−（３
−ピリジル）プロピル〕酪酸アミドの代わりに（２Ｓ，
３Ｓ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２
−ヒドロキシ−４−フェニル−Ｎ−（３−フェニルプロ
ピル）酪酸アミド、さらにトランス−４−ｎ−プロピル
シクロヘキサンカルボン酸の代わりにトランス−４−イ
ソプロピルシクロヘキサンカルボン酸を用いて、参考例
１７と同様の方法により、以下の化合物を得た。 （２Ｓ，３Ｓ）−３−（トランス−４−イソプロピルシ
クロヘキシルカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４
−フェニル−Ｎ−（３−フェニルプロピル）酪酸アミド

【０１６９】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
3 (6H, d, J=6.9Hz), 0.85-0.91 (3H, m), 1.21-1.30
(2H, m), 1.38 (1H, m), 1.68-1.75 (4H, m), 1.81-1.9
0 (3H, m), 2.62-2.68 (2H, m), 3.03 (1H, m), 3.18
(1H, m), 3.28-3.31 (2H, m), 4.18-4.23 (2H, m), 5.7
5 (1H, m), 6.19(1H, m), 7.08 (1H, bs), 7.18-7.21
(10H, m)

【０１７０】参考例２２ トランス−４−ｎ−プロピルシクロヘキサンカルボン酸
の代わりにトランス−４−イソプロピルシクロヘキサン
カルボン酸を用いて、参考例１７と同様の方法により、
以下の化合物を得た。 （２Ｓ，３Ｓ）−３−（トランス−４−イソプロピルシ
クロヘキシルカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４
−フェニル−Ｎ−〔３−（３−ピリジル）プロピル〕酪
酸アミド

【０１７１】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
2 (6H, d, J=7.0Hz), 0.85-1.00 (3H, m), 1.21-1.30
(2H, m), 1.38 (1H, m), 1.70-1.75 (4H, m), 1.82-1.9
5 (3H, m), 2.62-2.68 (2H, m), 3.02 (1H, dd, J=7.1,
13.7Hz), 3.18 (1H, dd, J=5.9, 13.7Hz), 3.25-3.39
(2H, m), 4.20(1H, m), 4.25 (1H, s), 5.75 (1H, m),
6.26 (1H, m), 7.12 (1H, bs), 7.37 (1H, m), 8.44 (1
H, bs)

【０１７２】実施例２４ （Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシクロヘキシ
ルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル−Ｎ
−〔３−（３−ピリジル）プロピル〕酪酸アミド （２Ｓ，３Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシク
ロヘキシルカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−
フェニル−Ｎ−〔３−（３−ピリジル）プロピル〕酪酸
アミド（０．１０ｇ）を塩化メチレン（４．０ｍｌ）に
溶解し、１，１，１−トリアセトキシ−１，１−ジヒド
ロ−１，２−ベンズヨードオキソール−３（１Ｈ）−オ
ン（０．１９ｇ）を加え、室温下１時間撹拌した。溶媒
を減圧下留去し、残留物を酢酸エチルに溶解し、飽和重
曹水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾
燥した。溶媒を減圧下留去し、（Ｓ）−３−（トランス
−４−ｎ−ブチルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−
２−オキソ−４−フェニル−Ｎ−〔３−（３−ピリジ
ル）プロピル〕酪酸アミド（０．０８ｇ）得た。

【０１７３】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
0-0.91 (5H, m), 1.12-1.40 (7H, m), 1.72-1.84 (4H,
m), 1.78-2.05 (3H,m), 2.64-2.73 (2H, m), 3.11 (1H,
m), 3.32 (1H, m), 3.35-3.41 (2H, m), 5.44 (1H,
m), 5.94 (1H, m), 6.92 (1H, m), 7.08-7.10 (2H, m),
7.21-7.31 (4H, m), 7.52 (1H, m), 8.46-8.48 (2H,
m)

【０１７４】実施例２５ （２Ｓ，３Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシク
ロヘキシルカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−
フェニル−Ｎ−〔３−（３−ピリジル）プロピル〕酪酸
アミドの代わりに（２Ｓ，３Ｓ）−３−（トランス−４
−ｎ−ブチルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−２−
ヒドロキシ−４−フェニル−Ｎ−〔２−（４−ピリジ
ル）エチル〕酪酸アミドを用いて、実施例２４と同様の
方法により、以下の化合物を得た。 （Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシクロヘキシ
ルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル−Ｎ
−〔２−（４−ピリジル）エチル〕酪酸アミド

【０１７５】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
2-0.92 (5H, m), 1.16-1.40 (9H, m), 1.77-1.82 (4H,
m), 1.99 (1H, m), 2.87-2.92 (2H, m), 3.09 (1H, m),
3.32 (1H, m), 3.61-3.66 (2H, m), 5.43 (1H, m), 5.
92 (1H, m), 6.92 (1H, m), 7.03-7.29 (7H, m), 8.56
(2H, d, J=8.3Hz)

【０１７６】実施例２６ （２Ｓ，３Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシク
ロヘキシルカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−
フェニル−Ｎ−〔３−（３−ピリジル）プロピル〕酪酸
アミドの代わりに（２Ｓ，３Ｓ）−３−（トランス−４
−ｎ−ブチルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−２−
ヒドロキシ−４−フェニル−Ｎ−〔３−（４−ピリジ
ル）プロピル〕酪酸アミドを用いて、実施例２４と同様
の方法により、以下の化合物を得た。 （Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシクロヘキシ
ルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル−Ｎ
−〔３−（４−ピリジル）プロピル〕酪酸アミド

【０１７７】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
2-0.90 (5H, m), 1.14-1.39 (9H, m), 1.76-2.02 (7H,
m), 2.67 (2H, t, J=7.7Hz), 3.10 (1H, dd, J=7.6, 1
4.2Hz), 3.31-3.41 (3H, m), 5.42 (1H, m), 5.95 (1H,
d, J=6.5Hz), 6.92 (1H, m), 7.08-7.30 (7H, m), 8.5
1-8.52 (2H, m)

【０１７８】実施例２７ （２Ｓ，３Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシク
ロヘキシルカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−
フェニル−Ｎ−〔３−（３−ピリジル）プロピル〕酪酸
アミドの代わりに（２Ｓ，３Ｓ）−３−（トランス−４
−ｎ−ブチルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−Ｎ−
〔３−（１，３−ジメチル−２，６−ジオキソ−１，
２，３，６−テトラヒドロプリン−９−イル）プロピ
ル〕−２−ヒドロキシ−４−フェニル酪酸アミドを用い
て、実施例２４と同様の方法により、以下の化合物を得
た。 （Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシクロヘキシ
ルカルボニルアミノ）−Ｎ−〔３−（１，３−ジメチル
−２，６−ジオキソ−１，２，３，６−テトラヒドロプ
リン−９−イル）プロピル〕−２−オキソ−４−フェニ
ル酪酸アミド

【０１７９】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.7
5-0.91 (5H, m), 1.09-1.40 (9H, m), 1.57-1.81 (4H,
m), 1.99-2.21 (3H,m), 3.23-3.45 (4H, m), 3.42 (3H,
s), 3.60 (3H, s), 4.27-4.38 (2H, m), 5.44-5.61 (1
H, m), 5.94-6.14 (1H, m), 7.10-7.76 (7H, m)

【０１８０】実施例２８ （２Ｓ，３Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシク
ロヘキシルカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−
フェニル−Ｎ−〔３−（３−ピリジル）プロピル〕酪酸
アミドの代わりに（２Ｓ，３Ｓ）−３−（トランス−４
−イソプロピルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−２
−ヒドロキシ−４−フェニル−Ｎ−（３−フェニルプロ
ピル）酪酸アミドを用いて、実施例２４と同様の方法に
より、以下の化合物を得た。 （Ｓ）−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキ
シルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル−
Ｎ−（３−フェニルプロピル）酪酸アミド

【０１８１】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
2 (6H, d, J=6.7Hz), 0.19-1.08 (3H, m), 1.32-1.42
(3H, m), 1.77 (2H, d, J=12.0Hz), 1.83 (2H, t, J=1
2.0Hz), 1.88-2.02 (7H, m), 2.65-2.69 (2H, m), 3.11
(1H, dd, J=7.0, 13.5Hz), 3.32-3.40 (3H, m), 5.53
(1H, m), 5.97 (1H, m), 6.85 (1H, bs), 7.08-7.10 (2
H, m), 7.21-7.33 (8H, m)

【０１８２】実施例２９ （２Ｓ，３Ｓ）−３−（トランス−４−ｎ−ブチルシク
ロヘキシルカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシ−４−
フェニル−Ｎ−〔３−（３−ピリジル）プロピル〕酪酸
アミドの代わりに（２Ｓ，３Ｓ）−３−（トランス−４
−イソプロピルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−２
−ヒドロキシ−４−フェニル−Ｎ−〔３−（３−ピリジ
ル）プロピル〕酪酸アミドを用いて、実施例２４と同様
の方法により、以下の化合物を得た。 （Ｓ）−３−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキ
シルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル−
Ｎ−〔３−（３−ピリジル）プロピル〕酪酸アミド

【０１８３】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δｐｐｍ：0.8
3 (6H, d, J=6.9Hz), 0.92-1.05 (3H, m), 1.31-1.42
(3H, m), 1.74 (2H, d, J=12.1Hz), 1.84 (2H, t, J=1
2.1Hz), 1.95 (1H, m), 2.68-2.71 (2H, m), 3.13 (1H,
dd, J=7.0, 13.5Hz), 3.31-3.40 (3H, m), 5.45 (1H,
m), 5.95 (1H, m), 6.91 (1H, bs), 7.68-7.10 (2H,
m), 7.22-7.30 (4H, m), 7.54 (1H, m), 8.44-8.50 (2
H, m)

【０１８４】試験例１ カテプシンＬ阻害活性測定法 ヒトの肝臓に由来するカテプシンＬを用いて、Ｍｅｔｈ
ｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．８０，
ｐｐ．５３５−５４１（１９８１）記載の方法を一部改
変して、下記の通りカテプシンＬ阻害活性を測定した。

【０１８５】２．５ｍＭのＥＤＴＡ二ナトリウム塩を含
有し、１００ｍＭのリン酸一水素二ナトリウムおよび１
００ｍＭのリン酸二水素一カリウムからなる緩衝液（ｐ
Ｈ６．０）にジチオトレイトールを６ｍＭの濃度となる
ように加え、さらにヒト肝臓由来カテプシンＬ（カルビ
オケム社製）を加え、３００ｎｇ／ｍｌの酵素溶液を調
製した。一方、上記の緩衝液にカルボベンゾキシ−Ｌ−
フェニルアラニン−Ｌ−アルギニン−４−メチルクマリ
ン−７−アミド（ペプチド研製）を２０μＭの濃度とな
るように加え、基質溶液を調製した。また、ジメチルス
ルホキシドに溶解した測定検体の１０ｍＭ溶液を上記緩
衝液により段階希釈し測定検体溶液とした。９６ウエル
マイクロタイタープレート内で、測定検体溶液５０μ
ｌ、基質溶液５０μｌおよび酵素溶液５０μｌをこの順
番に混合し、室温で３０分間インキュベートした。反応
液に１００ｍＭのモノクロロ酢酸ナトリウム、３０ｍＭ
の酢酸ナトリウムおよび７０ｍＭの酢酸からなる反応停
止液（ｐＨ４．３）１００μｌを加えて反応を停止し
た。プロテアーゼにより遊離した７−アミノ−４−メチ
ルクマリンを含む反応液の蛍光強度をＳｐｅｃｔｒａＭ
ＡＸ ＧＥＭＩＮＩ９６ウエル蛍光プレートリーダー
（モレキュラーデバイス社製）を用いて励起波長３８３
ｎｍ、蛍光波長４６０ｎｍで測定し、次式によって阻害
率を求めた。尚、最初にマイクロウエル内に１００μｌ
の反応停止液を加えた上で反応に供した物を陰性対照、
測定検体溶液に代えて前記緩衝液５０μｌを加えた物を
陽性対照とした。

【０１８６】阻害率（％）＝〔１−（検体値−陰性対照
値）／（陽性対照値−陰性対照値）〕×１００

【０１８７】測定検体の各最終溶液内濃度における一連
のプロテアーゼ活性阻害値から、５０％阻害濃度をＧｒ
ａｐｈｐａｄ ＰＲＩＳＭ ｓｏｆｔｗａｒｅ（グラフ
パッドプリズム社製）を用いて計算した。その結果は以
下の表１の通りであった。

【０１８８】

【表１】

【０１８９】試験例２ カテプシンＢ阻害活性測定法 ２．５ｍＭのＥＤＴＡ二ナトリウム塩を含有し、１００
ｍＭのリン酸一水素二ナトリウムおよび１００ｍＭのリ
ン酸二水素一カリウムからなる緩衝液（ｐＨ６．０）に
ジチオトレイトールを６ｍＭの濃度となるように加え、
さらにヒト肝臓由来カテプシンＢ（カルビオケム社製）
を加え、０．０６ｕｎｉｔｓ／ｍｌの酵素溶液を調製し
た。一方、上記の緩衝液にカルボベンゾキシ−Ｌ−アル
ギニン−Ｌ−アルギニン−４−メチルクマリン−７−ア
ミド（ペプチド研製）を２０μＭの濃度となるように加
え、基質溶液を調製した。また、ジメチルスルホキシド
に溶解した測定検体の１０ｍＭ溶液を上記緩衝液により
段階希釈し測定検体溶液とした。９６ウエルマイクロタ
イタープレート内で、測定検体溶液５０μｌ、基質溶液
５０μｌおよび酵素溶液５０μｌをこの順番に混合し、
室温で３０分間インキュベートした。反応液に１００ｍ
Ｍのモノクロロ酢酸ナトリウム、３０ｍＭの酢酸ナトリ
ウムおよび７０ｍＭの酢酸からなる反応停止液（ｐＨ
４．３）１００μｌを加えて反応を停止した。プロテア
ーゼにより遊離した７−アミノ−４−メチルクマリンを
含む反応液の蛍光強度をＳｐｅｃｔｒａＭＡＸ ＧＥＭ
ＩＮＩ９６ウエル蛍光プレートリーダー（モレキュラー
デバイス社製）を用いて励起波長３８３ｎｍ、蛍光波長
４６０ｎｍで測定し、次式によって阻害率を求めた。
尚、最初にマイクロウエル内に１００μｌの反応停止液
を加えた上で反応に供した物を陰性対照、測定検体溶液
に代えて前記緩衝液５０μｌを加えた物を陽性対照とし
た。

【０１９０】阻害率（％）＝〔１−（検体値−陰性対照
値）／（陽性対照値−陰性対照値）〕×１００

【０１９１】測定検体の各最終溶液内濃度における一連
のプロテアーゼ活性阻害値から、５０％阻害濃度をＧｒ
ａｐｈｐａｄ ＰＲＩＳＭ ｓｏｆｔｗａｒｅ（グラフ
パッドプリズム社製）を用いて計算した。その結果は以
下の表２に示す通りであった。

【０１９２】

【表２】

【０１９３】試験例３ カテプシンＳ阻害活性測定法 ヒトカテプシンＳの発現および精製 ＧｅｎＢａｎｋに報告されているＳ３９１２７というヒ
ト前立腺由来プロカテプシンＳと相同の配列をＰＣＲ法
にて前立腺ｃＤＮＡライブラリーよりクローニングし、
昆虫細胞発現ドナープラスミドｐＦＡＳＴＢＡＣ１（ギ
ブコ社製）に６×ヒスチジンタグを同一読み込み枠にな
るように組み替えた。市販されているＢＡＣ−ＴＯ−Ｂ
ＡＣバキュロウイルス発現システム（ギブコ社製）の説
明書の通りドナープラスミドから発現用バキュロウイル
スを作製し、Ｓｆ９昆虫細胞に感染させた上でヒト由来
プロカテプシンＳを昆虫細胞内に発現させた。細胞抽出
液よりＴＡＬＯＮアフィニティカラム（クローンテック
社製）を用いて濃縮と精製を行い、ＳＤＳ−ＰＡＧＥに
て４０ｋＤａの単一バンドを確認した。Ｄ．Ｂｒｏｏｍ
ｅ等が報告（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏ
ｌ．５，ｐｐ．７８９−７９１（１９９６））している
方法の通り活性化型カテプシンＳに変換し、以後のカテ
プシンＳの阻害活性測定実験に供した。

【０１９４】カテプシンＳ阻害活性測定 ２．５ｍＭのＥＤＴＡ二ナトリウム塩を含有し、１００
ｍＭのリン酸一水素二ナトリウムおよび１００ｍＭのリ
ン酸二水素一カリウムからなる緩衝液（ｐＨ７．３）に
ジチオトレイトールを２ｍＭの濃度となるように加え、
さらに昆虫細胞由来ヒト活性型カテプシンＳを加え、４
μｇ／ｍｌの酵素溶液を調製した。一方、上記の緩衝液
にカルボベンゾキシ−Ｌ−バリン−Ｌ−バリン−Ｌ−ア
ルギニン−４−メチルクマリン−７−アミド（バッケム
社製）を４０μＭの濃度となるように加え、基質溶液を
調製した。また、ジメチルスルホキシドに溶解した測定
検体の１０ｍＭ溶液を上記緩衝液（ｐＨ７．３）により
段階希釈し測定検体溶液とした。測定検体溶液５μｌ、
基質溶液２５０μｌおよび酵素溶液２５０μｌをこの順
番に混合し、室温で３０分間インキュベートした。反応
液に１００ｍＭのモノクロロ酢酸ナトリウム、３０ｍＭ
の酢酸ナトリウムおよび７０ｍＭの酢酸からなる反応停
止液（ｐＨ４．３）５００μｌを加えて反応を停止し
た。プロテアーゼにより遊離した７−アミノ−４−メチ
ルクマリンを含む反応液の蛍光強度をＦ−３０００形分
光蛍光光度計（日立製作所製）を用いて励起波長３８３
ｎｍ、蛍光波長４６０ｎｍで測定し、次式によって阻害
率を求めた。尚、最初にマイクロウエル内に５００μｌ
の反応停止液を加えた上で反応に供した物を陰性対照、
測定検体溶液に代えて前記緩衝液５μｌを加えた物を陽
性対照とした。

【０１９５】阻害率（％）＝〔１−（検体値−陰性対照
値）／（陽性対照値−陰性対照値）〕×１００

【０１９６】測定検体の各最終溶液内濃度における一連
のプロテアーゼ活性阻害値から、５０％阻害濃度をＧｒ
ａｐｈｐａｄ ＰＲＩＳＭ ｓｏｆｔｗａｒｅ（グラフ
パッドプリズム社製）を用いて計算した。その結果は以
下の表３に示す通りであった。

【０１９７】

【表３】

【０１９８】試験例４ パパイン阻害活性測定法 ２．５ｍＭのＥＤＴＡ二ナトリウム塩を含有し、１００
ｍＭのリン酸一水素二ナトリウムおよび１００ｍＭのリ
ン酸二水素一カリウムからなる緩衝液（ｐＨ６．８）に
ジチオトレイトールを６ｍＭの濃度となるように加え、
さらにパパイア由来パパイン（シグマ社製）を加え、１
５０ｎｇ／ｍｌの酵素溶液を調製した。一方、上記の緩
衝液にカルボベンゾキシ−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−
アルギニン−４−メチルクマリン−７−アミド（ペプチ
ド研製）を１２０μＭの濃度となるように加え、基質溶
液を調製した。また、ジメチルスルホキシドに溶解した
測定検体の１０ｍＭ溶液を上記緩衝液（ｐＨ６．８）に
より段階希釈し測定検体溶液とした。９６ウエルマイク
ロタイタープレート内で、測定検体溶液５０μｌ、基質
溶液５０μｌおよび酵素溶液５０μｌをこの順番に混合
し、室温で３０分間インキュベートした。反応液に１０
０ｍＭのモノクロロ酢酸ナトリウム、３０ｍＭの酢酸ナ
トリウムおよび７０ｍＭの酢酸からなる反応停止液（ｐ
Ｈ４．３）１００μｌを加えて反応を停止した。プロテ
アーゼにより遊離した７−アミノ−４−メチルクマリン
を含む反応液の蛍光強度をＳｐｅｃｔｒａＭＡＸ ＧＥ
ＭＩＮＩ９６ウエル蛍光プレートリーダー（モレキュラ
ーデバイス社製）を用いて励起波長３８３ｎｍ、蛍光波
長４６０ｎｍで測定し、次式によって阻害率を求めた。
尚、最初にマイクロウエル内に１００μｌの反応停止液
を加えた上で反応に供した物を陰性対照、測定検体溶液
に代えて前記緩衝液５０μｌを加えた物を陽性対照とし
た。

【０１９９】阻害率（％）＝〔１−（検体値−陰性対照
値）／（陽性対照値−陰性対照値）〕×１００

【０２００】測定検体の各最終溶液内濃度における一連
のプロテアーゼ活性阻害値から、５０％阻害濃度をＧｒ
ａｐｈｐａｄ ＰＲＩＳＭ ｓｏｆｔｗａｒｅ（グラフ
パッドプリズム社製）を用いて計算した。その結果は以
下の表４に示す通りであった。

【０２０１】

【表４】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 31/522 Ａ６１Ｋ 31/522 Ａ６１Ｐ 43/00 １１１ Ａ６１Ｐ 43/00 １１１ Ｃ０７Ｃ 237/22 Ｃ０７Ｃ 237/22 Ｃ０７Ｄ 213/56 Ｃ０７Ｄ 213/56 213/74 213/74 473/08 473/08 (72)発明者 徳武 巧記 長野県南安曇郡豊科町大字南穂高6845−４ 細井マンションＢ−３ (72)発明者 赤羽 敏 長野県松本市笹賀4246 Ｆターム(参考） 4C055 AA01 BA01 BA06 BA28 BA43 BA52 BA53 CA01 CA02 CA06 CA28 CA43 CA52 CA53 CB02 CB08 CB10 DA01 DA06 DA28 DA43 DA52 DA53 DB02 DB08 DB10 4C086 AA01 AA02 AA03 BC17 CB07 MA01 MA04 NA14 ZA01 ZA16 ZA33 ZA54 ZA59 ZA89 ZA96 ZA97 ZB08 ZB15 ZB26 ZC20 4C206 DB13 DB41 FA44 GA06 GA36 MA01 MA04 NA14 ZA01 ZA16 ZA33 ZA54 ZA59 ZA89 ZA96 ZA97 ZB08 ZB15 ZB26 ZC20 4H006 AA01 AA03 AB20 AB21 AB24 AB27 AB28 BJ20 BJ50 BM30 BM72 BN10 BN30 BP10 BP30 BR10 BS10 BT12 BV22 BV24 BV62

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】一般式 【化１】 〔式中のＲ¹ は低級アルキル基であり、Ｙは低級アルキ
   レン基であり、Ｒ² は水酸基、置換基として１〜３個の
   ハロゲン原子、水酸基、低級アルキル基、低級アルコキ
   シ基、カルボキシ低級アルコキシ基または低級アルコキ
   シカルボニル低級アルコキシ基を有していてもよいアリ
   ール基またはアリール低級アルコキシ基であり、Ｚは酸
   素原子、イミノ基または式 【化２】 で表される基であり、Ｒ³ は水素原子、低級アルキル
   基、アリール基、ピリジル基、置換基として水酸基、低
   級アルキル基、低級アルコキシ基、カルボキシ低級アル
   コキシ基または低級アルコキシカルボニル低級アルコキ
   シ基を有していてもよいアリール低級アルキル基、ピリ
   ジル低級アルキル基または式 【化３】 （式中のｍは１〜６の整数である）で表される基であ
   り、ｎは１〜３の整数であり、＊が付された炭素原子は
   Ｒ配置の炭素原子、Ｓ配置の炭素原子またはその混合物
   を示す〕で表されるシクロアルカンカルボン酸アミド誘
   導体またはその薬理学的に許容される塩。
2. 【請求項２】一般式 【化４】 〔式中のＲ¹ は低級アルキル基であり、Ｒ⁴ は置換基と
   して１〜３個のハロゲン原子を有していてもよいアリー
   ル基であり、Ｒ⁵ はピリジル低級アルキル基または式 【化５】 （式中のｍは１〜６の整数である）で表される基であ
   り、ｎは１〜３の整数であり、＊が付された炭素原子は
   Ｒ配置の炭素原子、Ｓ配置の炭素原子またはその混合物
   を示す〕で表される請求項１記載のシクロアルカンカル
   ボン酸アミド誘導体またはその薬理学的に許容される
   塩。
3. 【請求項３】一般式 【化６】 （式中のＲ¹ は低級アルキル基であり、Ｒ⁴ は置換基と
   して１〜３個のハロゲン原子を有していてもよいアリー
   ル基であり、ｎは１〜３の整数であり、＊が付された炭
   素原子はＲ配置の炭素原子、Ｓ配置の炭素原子またはそ
   の混合物を示す）で表される請求項１記載のシクロアル
   カンカルボン酸アミド誘導体またはその薬理学的に許容
   される塩。
4. 【請求項４】一般式 【化７】 〔式中のＲ¹ は低級アルキル基であり、Ｒ⁴ は置換基と
   して１〜３個のハロゲン原子を有していてもよいアリー
   ル基であり、Ｒ⁵ はピリジル低級アルキル基または式 【化８】 （式中のｍは１〜６の整数である）で表される基であ
   り、＊が付された炭素原子はＲ配置の炭素原子、Ｓ配置
   の炭素原子またはその混合物を示す〕で表される請求項
   ２記載のシクロアルカンカルボン酸アミド誘導体または
   その薬理学的に許容される塩。
5. 【請求項５】一般式 【化９】 （式中のＲ¹ は低級アルキル基であり、Ｒ⁴ は置換基と
   して１〜３個のハロゲン原子を有していてもよいアリー
   ル基であり、＊が付された炭素原子はＲ配置の炭素原
   子、Ｓ配置の炭素原子またはその混合物を示す）で表さ
   れる請求項３記載のシクロアルカンカルボン酸アミド誘
   導体またはその薬理学的に許容される塩。
6. 【請求項６】３−（４−イソプロピルシクロヘキシルカ
   ルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル−Ｎ−
   〔３−（３−ピリジル）プロピル〕酪酸アミド、３−
   （４−ｎ−ブチルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−
   ２−オキソ−４−フェニル−Ｎ−〔２−（４−ピリジ
   ル）エチル〕酪酸アミド、３−（４−ｎ−ブチルシクロ
   ヘキシルカルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニ
   ル−Ｎ−〔３−（４−ピリジル）プロピル〕酪酸アミ
   ド、３−（４−ｎ−ブチルシクロヘキシルカルボニルア
   ミノ）−２−オキソ−４−フェニル−Ｎ−〔３−（３−
   ピリジル）プロピル〕酪酸アミド、３−（４−ｎ−ブチ
   ルシクロヘキシルカルボニルアミノ）−Ｎ−〔３−
   （１，３−ジメチル−２，６−ジオキソ−１，２，３，
   ６−テトラヒドロプリン−９−イル）プロピル〕−２−
   オキソ−４−フェニル酪酸アミドおよびその光学活性体
   から選択される請求項４記載のシクロアルカンカルボン
   酸アミド誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
7. 【請求項７】３−（４−イソプロピルシクロヘキシルカ
   ルボニルアミノ）−２−オキソ−４−フェニル酪酸、３
   −（４−ｎ−ブチルシクロヘキシルカルボニルアミノ）
   −４−（３，４−ジクロロフェニル）−２−オキソ酪酸
   およびその光学活性体から選択される請求項５記載のシ
   クロアルカンカルボン酸アミド誘導体またはその薬理学
   的に許容される塩。
8. 【請求項８】請求項１記載のシクロアルカンカルボン酸
   アミド誘導体またはその薬理学的に許容される塩からな
   る医薬。