JP2000511181A

JP2000511181A - ２，２′―（１―メチル―１，２―エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕の製造方法

Info

Publication number: JP2000511181A
Application number: JP09542583A
Authority: JP
Inventors: フィリオン，リチャード; エー．エレンバース，スティーブン
Original assignee: Sanofi SA
Current assignee: Sanofi SA
Priority date: 1996-05-30
Filing date: 1997-05-19
Publication date: 2000-08-29
Also published as: NO985551L; EP0782983A2; AU3008497A; NO985551D0; CA2252606A1; WO1997045110A1; BR9710170A; US5693673A

Abstract

(57)【要約】ａ）塩酸アミノグアニジンをメチルグリオキサールアルデヒドまたはメチルグリオキサールジメチルアセタールと反応させ；そしてｂ）酸性水性イソプロピルアルコール媒質からの再結晶により２，２’−（メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を精製することによる、２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕の製造方法。

Description

【発明の詳細な説明】２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕の製造方法発明の背景発明の分野本発明は、癌または進行した悪性疾患の治療方法において有用である、不純物が大幅に減少された２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕の製造方法に関する。最新の報告化合物２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕は、１，１’−〔（メチルエタンジイリデン）ジニトリロ〕ジグアニジン、ピルブアルデヒドビス（アミジノヒドラゾン）、ミトグアゾンおよびメチルグリオキサルビスグアニルヒドラゾン、メチルＧＡＧまたはＭＧＢＧといった数種の名称で知られており、下式により表される。ＭＧＢＧおよびその塩は、下記の特許明細書と刊行物により例示されるように、1950年代からの従来技術において様々な病気に対する使用について開示されている。白血病L1210および腺癌755を有する齧歯類におけるＭＧＢＧの抗腫瘍活性がFr eelander他，Cancer Res．18，360(1958)により初めて報告された。特公昭51-044643号明細書は、感染、膵臓壊死および造血壊死を予防または治療するのに有効な魚類ウイルス病に対する薬剤としてのＭＧＢＧおよびその塩を開示している。特公昭50-029520号明細書は、インフルエンザウイルスに対して用いられるＭＧＢＧおよびその塩を開示している。米国特許第4,201,788号明細書は、非悪性増殖性皮膚病の治療のためのＭＧＢＧを開示している。ＭＧＢＧは、細胞のポリアミン枯渇を引き起こす、ポリアミン生合成の鍵酵素であるＳ−アデノシルメチオニンデカルボキシラーゼ（ＳＡＭＤ）を阻害することが知られている。しかし、ＭＧＢＧに関する調査は、許容できない程度の毒性を明らかにした。観察されるＭＧＢＧの毒性作用（その一部は或る動物種に特有である）には、胃腸毒性、遅延型および致死的低血糖症、肝および腎障害、骨髄抑制、下痢および静脈炎か挙けられる。それらの作用はＭＧＢＧ治療を受けたヒト患者にも広く見られた。その上、ヒトに特有である幾つかの毒性作用も証明された。それらの毒性作用としては、食道炎、潰瘍性咽頭炎、喉頭炎、胃炎、陰唇粘膜腫大、結膜炎、粘膜炎、紅斑、水腫、落屑性皮膚炎、および体重減少を伴う著しい食欲不振が挙げられる。日程スケジュール通りにＭＧＢＧを投与した患者は、しばしば致命的となる副作用との危険な闘いの後でしか急性白血病に緩解を示さなかった。多くの患者では、何らかの有益な結果が認められる前に治療を中断せざるをえなかった。 Knight他はCan．Treat．Rep.，63，1933-1937(1979)において、毒性レベルが投薬スケジュールに関連しており且つ管理できることを見出した。米国特許第4, 520,031号明細書は、毒性を減らすためのそのような投薬スケジュール関連管理の問題を扱っている。上記特許明細書に記載された投薬スケジュール管理は、ＭＧＢＧがポリアミン生合成に関して阻害作用を発揮するという仮定に基づいていた。生理学的に達成できるＭＧＢＧの効果は、ポリアミンであるスペルミジンの合成を触媒するＳ−アデノシルメチオニンデカルボキシラーゼの阻害に関連するかもしれない。スペルミジンはＤＮＡ合成の開始に重要な役割を果たすと思われる。研究の結果、ＭＧＢＧが媒介するＤＮＡ合成の抑制がスペルミジン枯渇とプトレシン蓄積に関連づけられることが証明された。ポリアミンが重要な役割を果たすと思われる別の領域は、ＲＮＡ合成、特に転移（ｔ）ＲＮＡの合成である。ｔＲＮＡのメチル化はポリアミンにより直接剌激され得る。特に着目される発見は、腫瘍性（新形成）組織がメチル化ｔＲＮＡの程度の点で正常組織と異なるという報告である。ここでもまた、スペルミジンが重要な役割を果たすようである。ポリアミンの蓄積は、正常組織と腫瘍性組織の両方において、最適速度でのＤＮＡ合成に不可欠な要件であるらしい。よって、迅速な代謝回転を有する組織（皮膚、G.I.粘膜および骨髄）において観察されるＭＧＢＧの毒性は、ポリアミン合成の阻害および共に最終的に細胞の複製を調節する物質であるＲＮＡやＤＮＡのその後の枯渇に直接関連するのかもしれない。しかしながら、(1)癌患者の大部分においてポリアミンが過剰に排出される；(2)効果的な化学療法中または後にポリアミン、特にスペルミジンが腫瘍細胞から放出されるが、この放出は排泄物および血清中濃度に初期ピークを有し、次いで正常値へと降下する；および(3 )骨髄（または他の正常組織）毒性のみを生じ且つ抗腫瘍効果を持たない化学療法は、ポリアミン排出の有意な増加を引き起こさない、という強力な証拠がある。後者の観察結果は、癌細胞が正常細胞よりも（より大きいＤＮＡ合成速度を有するものでさえも）ずっと高レベルのポリアミンを有すること、または効果的な療法が癌細胞中のポリアミン合成に対してより一層特異的な効果を生じるということを示唆するだろう。よって、スペルミジンの枯渇はＭＧＢＧの作用と関係がある。ヒトに対して行った実験において、臨床的に観察された毒物学的効果は、毎日の投薬の繰り返しの蓄積作用のせいであるとされた。この毒性の蓄積または増加は、おそらくヒトではＭＧＢＧの尿排泄に極端に長い期間が必要であることによって説明されるだろう。Ｃ¹⁴−ＭＧＢＧを使ったヒトでの生物学的利用能（バイオアベイラビリティ）研究は、20分間に渡る１回の静脈内輸液後、放射能が血漿から迅速に消失したこと、および３週間の延長期間に渡り薬剤のほぼ60％が尿中に変わらずに排泄されたことを示した。これらのデータは、ＭＧＢＧが組織に蓄積しそして組織沈着物からゆっくりと浸出されて排泄に至ることを示唆する。様々な腫瘍の治療においてＭＧＢＧを使って相当多数の研究を行った後、特許権者は、許容できるレベルに毒性を減らしながら高い治療指数を達成するには週間投与スケジュールが最も効果的であると結論づけた。従って、一週間おきに投与する250mg／mg〜1000mg／m²のＭＧＢＧの用量範囲が様々な腫瘍の治療に対して立証された。上記用量範囲は毒性副作用を減らし且つ様々な腫瘍の治療法を与えるけれども、ＭＧＢＧの長期蓄積はまだ更なる研究および／または治療修正を必要とする問題である。本出願人は、毒性副作用を更に減らすという目的で広範囲に渡るＭＧＢＧの研究を行った。これらの研究の過程で、ＭＧＢＧが比較的多量の不純物を含み、それがＭＧＢＧの毒性副作用の原因となり得ることを発見した。従って、ＭＧＢＧおよびその塩の中に存在する不純物を同定しそしてその量を減らすために、多大な努力を費やした。グアニルヒドラゾンの調製方法はBaiocchi他、J．Med．Chem.，６，431 (1963 )および0liverio，Denham，J．Pharm．Sci.,52，202(1963)により記載されている。この方法は、アミノグアニジン塩を、水性媒質または水性アルコール媒質中で触媒量の酸の存在下で対応するカルボニル化合物と反応させることを含んで成る。この方法は市販の重炭酸アミノグアニジンを使用し、次のように説明される。グアニルヒドラゾンの一般的調製法 125mlの水に溶かした0.11モル（15ｇ）の重炭酸アミノグアニジンの溶液に、該溶液のｐＨが７より低くなるまで所望の酸をゆっくり添加した（発泡を防ぐために数滴のアミルアルコールを加えた）。その溶液を濾過して微量の不溶性固体を除去した。次いで適当なカルボニル化合物を約60℃で弱酸性濾液に添加した。使用したカルボニル化合物の量は、アミノグアニジン対カルボニル機能の比が１：１となるような量であった。カルボニル化合物が水性混合物中に溶けなかったら、反応混合物が均一になるまでエタノールを加えた。次いで該溶液を室温で16 時間攪拌した。沈澱が生成したら、濾過により固体生成物を単離した。そうでなかったら、固体残渣が得られるまでメタノール、エタノールおよび溶媒混合物を使って反応混合物を蒸発せしめた。グアニルヒドラゾンの回収率は低かった。低収率に加えて、得られた生成物は比較的多量の不純物を含むことがわかった。実験本発明者らは、不純物を同定および定量するのに様々な方法を使ってミトグアゾン二塩酸塩の分析方法を開発した。１つの分析方法は、高性能液体クロマトグラフィーを含んだ。クロマトグラフィー不純物レベルを測定する面から考えると、高度の特異性は着目の潜在種の全部が検出可能であるという信頼性を提供する。プロセス不純物および分解産物を含むそれらの種がそのままクロマトグラフィー系に注入するには適さない場合、通常次の２つの広義カテゴリーのうちの１つに位置づけることができる１または複数の技術を使ってストレス付加試料に関して特異性試験が行われる： (a) 分析物ピークから更なる情報を引き出すための特殊検出系の使用。 (b) 第一が確実性のもとでの系であり、第二が、その異なる選択性により、第一の場合に同時溶出する種を分割すると期待される系である、補足的分離技術間での比較の一形態。第一カテゴリーの技術の例としては、分析物ピーク全体の種々の位置からそれぞれＵＶ／可視スペクトルまたは質量スペクトルを得ることにより同時溶出する種の検出に潜在的に備える、ダイオード配置と質量分析検出器の使用が挙げられる。第二カテゴリーの技術としては、分析物ピークを異なる特異性の第二固定相上に向ける流れ切替え（フロースイッチ）装置の使用、または確証されている系からの結果と薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）のような第二のクロマトグラフィー技術からの結果との比較が挙げられる。装置および薬品ＨＰＬＣデータは、種々のKontron(Watford，Herts)やWaters(Watford，Herts )社製のポンプ、オートサンプラー、カラムオーブンおよび検出器モデルを使って得られた。ＨＰＬＣデータはMultichrom（商標）Vl.8-2（LabSystems，Altrin gham，Cheshire）を使って処理した。ＵＶ／可視吸収スペクトルはHP 1040ダイオード配置検出器（Hewlett Packard，Bracknell，Berks.）を使って捕捉した。光ストレス付加（キセノン源、窓ガラスを通したもの）は、Haraeus Su ntest（商標）（Alplas Technology，Oxford）にて実施した。ＨＰＬＣ用アセトニトリルはRathburn Chemicals（Walker-burn，Scotland）から入手し、ＨＰＬＣ用ヘプタンスルホン酸（ナトリウム塩）、および無機化学薬品はBDH Limited （Poole，Dorset）から入手した。ＡＣＶＡ〔４，４’−アゾビス（４−シアノ吉草酸）、ラジカル開始剤、酸化ストレスを模擬する暴露〕はAldrich(Gillingh am，Dorset)から入手した。ミトグアゾン二塩酸塩と精製水は自社内で得た。ストレス試料調製ミトグアゾン二塩酸塩の試料（約370mg、塩基250mgと等価）を50mlのメスフラスコ中に正確に秤量し、下記に与える条件に従ってストレスを付加した。ストレス付加は、最高７日間または20〜50％分解に達するまで続けた。ストレス付加後、必要ならば試料を中和し、そして、精製水で容量希釈してＴＬＣ分析用の〜５ mg（塩基）／ml溶液を得た。該溶液のアリコートを精製水で希釈してＨＰＬＣによる不純物測定用の〜１mg（塩基）／ml溶液を得た。最後に、前記溶液のアリコートをＨＰＬＣ移動相中で希釈してＨＰＬＣアッセイ用の〜0.01mg（塩基）／ml 溶液を得た。ストレス条件熱：試料を80℃で７日間維持した。酸性：試料に10mlの0.1Ｍ塩酸を加え、該溶液を70℃で７日間維持した。塩基性：試料に10mlの0.1Ｍ水酸化ナトリウムを加え、該溶液を70℃で２日間維持した。水性：試料に10mlの精製水を加え、該溶液を70℃で７日間維持した。酸化：10mlの0.1Ｍ水性ＡＣＶＡ溶液を加え、試料を40℃で７日間維持した。光：試料に約15,000キロルクス(klx)時間の合計照射量を与えた（ＵＶで）。アッセイ：１ｇ／ｌのヘプタンスルホン酸（ナトリウム塩）を含み且つ濃オルトリン酸によりpH3.0に調整した0.05Ｍオルトリン酸二水素カリウム緩衝液（89容量％）とアセトニトリル（11容量％）とから成る移動相を使って、試料を25cm×内径0.46cmのHypersil BDS C8 5μｍカラム(Anachem，Luton，Beds.)上での定組成クロマトグラフィーにかけた。流速は２ml／分であり、検出波長は283nmであり、注入容量は20μｌであり、そしてカラム温度は40℃であった。正確に調製された外部標準〔公称0.01mg（塩基）／ml 〕に関して試料を定量した。不純物法：クロマトグラフィー条件は、210nmの検出波長を使用すること以外はアッセイの時と同じであった。主として特定のプロセス不純物を評価するためには、85容量％対15容量％の水性移動相対アセトニトリル移動相の比を用いる第二のＨＰＬＣ系を使用した。正確に調製された外部標準〔公称0.01mg（塩基）／ml〕に関して不純物を定量した。ＴＬＣ法各試料20μｌをシリカゲルＴＬＣプレート（Merck 60F₂₅₄）上にスポットした。プレートをアセトニトリル／水酸化アンモニウム（SG 0.88）／水（90:5:5容量％）移動相中で10cmの高さまで展開した。短波長紫外光（254nm）下と、ニトロプルシド（ナトリウム）−フェリシアニド噴霧試薬による処理後の両方で、希薄ミトグラゾン二塩酸塩スポットに対して不純物を評価した。結果公称ミトグアゾン二塩酸塩濃度0，80％，100％および120％を表す三重反復試料を分析した。得られた結果を表Ｉに与える。表Ｉ回収率データ表Ｉ（続き）回収率データＨＰＬＣアッセイ^*：データの最小二乗法回帰分析は99.8％の平均正確度を与えた（相関係数0.99935）。ストレス付加試料の分析ストレス付加試料をＨＰＬＣにより分析し、一方でクロマトグラフィー不純物濃度をＨＰＬＣとＴＬＣにより測定した。クロマトグラフィーデータを表IIに与える。表II ストレス付加ミトグアゾン二塩酸塩のクロマトグラフィー分析と不純物データＨＰＬＣ，ＴＬＣおよび質量分析法を使って、出発原料中に含まれるかまたは製造工程中に生成される不純物を同定しそして定量した。本発明者らは、ジアミノグアニジン関連不純物が合計ＭＧＢＧ二塩酸塩不純物レベルの70％以上を占めることを発見した。不純物生成の一般的反応スキームとそれらの化学名は以下の通りである。1,3-ジアミノグアニジン不純物Ｄ：R₁＝H，R₂＝CH₃ 不純物Ｅ：R₁＝CH₃，R₂＝H 不純物Ｆ：R₁＝H，R₂＝CH₃，R₃＝CH₃，R₄＝H 不純物Ｇ：R₁＝CH₃，R₁＝H，R₃＝H，R₄＝CH₃ 不純物Ｈ：R₁＝H，R₂＝CH₃，R₃＝H，R₄＝CH₃ ここでＤ＝〔２−〔（アミノイミノメチル）ヒドラゾノ〕プロピリデン〕カルボンイミド酸ジヒドラジド。Ｅ＝〔２−〔（アミノイミノメチル）ヒドラゾノ〕−１−メチルエチリデン〕カルボンイミド酸ジヒドラジド。Ｆ＝ビス〔２−〔（アミノイミノメチル）ヒドラゾノ〕−１−メチルエチリデン〕カルボンイミド酸ジヒドラジド。Ｇ＝ビス〔２−〔（アミノイミノメチル）ヒドラゾノ〕プロピリデン〕カルボンイミド酸ジヒドラジド。Ｈ＝〔２−〔（アミノイミノメチル）ヒドラゾノ〕−１−メチルエチリデン〕〔２−〔（アミノイミノメチル）ヒドラゾノ〕プロピリデン〕カルボンイミド酸ジヒドラジド。本出願と同日に出願した同時係属出願DN 70493、出願番号08/655,521号において、反応パラメーターを研究し、最終生成物中の不純物を減らすために変更した。前記同時係属出願（全内容が参考として組み込まれる）は、２，２’−（１− メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕の製造方法を開示しており、該方法は a) 重炭酸アミノグアニジンを水に懸濁しそして該懸濁液を濾過することにより重炭酸アミノグアニジンから不純物を除去し； b) 濾過した重炭酸アミノグアニジンを水性反応媒質中でメチルグリオキサールジメチルアセタールと反応させて２，２’−（メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を生成し；そして c) 酸性水性イソプロパノール媒質からの再結晶により２，２’−（メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を精製する工程を含んで成る。この方法の必須工程は、重炭酸アミノグアニジンを水に懸濁しそして懸濁液から不純物を濾別することによる重炭酸アミノグアニジンからの不純物の除去である。本発明者らは、出発原料として重炭酸アミノグアニジンを使う代わりに塩酸アミノグアニジンを使用して、水性反応媒質中でメチルグリオキサールジメチルアセタールと反応させることにより、２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を製造できることを発見した。それに続く精製工程を含むこの方法は、少なくとも純度99.5％である最終生成物を提供する。発明の要約高度に純粋な２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を獲得する方法は、次の段階： a) 水約0.5〜３部（好ましくは約0.93部）と水混和性有機溶媒約０〜３部（好ましくはイソプロピルアルコール約0.75部）の混合物中に塩酸アミノグアニジン１部を溶かし； b) 該溶液のpHを濃塩酸で約０〜５（好ましくは約０〜１）に調整し： c) 約０〜50℃（好ましくは25〜30℃）の温度で、該溶液にメチルグリオキサールアルデヒド約0.25〜１部（好ましくはメチルグリオキサールジメチルアセタール約0.5部）を添加し； d) 反応混合物を周囲温度で約１〜48時間（好ましくは約１〜16時間）攪拌し； e) 反応混合物に水混和性有機溶媒約0.5〜20部（好ましくはイソプロピルアルコール約５部）を添加して固体の２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を生成せしめ； f) 固体の粗製２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を濾過により収集しそしてそれを有機溶媒１〜 10部（好ましくはイソプロピルアルコール１〜２部）で洗浄し；そして g) 所望により精製前に45℃の真空オーブン中で粗製最終生成物を乾燥するを含んで成る。粗製２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕の精製方法は、次の段階を含んで成る： h) 粗製化合物を脱イオン水約0.5〜４部（好ましくは脱イオン水約２部）に溶かし； i) 水混和性有機溶媒約0.5〜２部（好ましくはイソプロパノール約１部）を添加し； j) 該溶液のpHを濃塩酸で約０〜５（好ましくは０〜１）に調整し； k) 脱イオン水0.1〜２部を添加しそして該溶液の温度を約28〜32℃に維持しながら、該溶液を約0.5〜２時間攪拌し； l) 該溶液を濾過して不溶性不純物を除去し； m) 濾過した溶液に水混和性有機溶媒約0.5〜10部（好ましくはイソプロピルアルコール約５部）を添加して化合物を沈澱させ； n) 混合物を約０〜25℃（好ましくは約10℃）に冷却し； o) 固体生成物を濾過により集め、そしてそれを有機溶媒0.5〜10部（好ましくはイソプロピルアルコール１部）で洗浄し；そして p) 精製した生成物を乾燥させる。発明の詳細な説明本明細書において使用する時、２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を合成し精製する方法は、その塩酸塩一水和物、二水和物および半水和物形態をはじめとする様々な形態の合成と精製にも関し、且つそれらを包含する。２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を合成し精製する方法において、好ましくはイソプロピルアルコールが使われる。しかしながら、使用できる他の水混和性有機溶媒として、メタノール、エタノール、ｎ−プロピルアルコール、テトラヒドロフラン、酢酸、ジメチルホルムアミド、アセトニトリルおよびジメチルスルホキシドまたはそれらの混合物が挙げられる。塩酸アミノグアニジン、メチルグリオキサールアルデヒドおよびメチルグリオキサールジメチルアセタールは、Aldrich Chemical Co．などから市販されており、またそれらを当業界で既知の方法により製造することも可能である。２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を合成し精製する典型例（実施例１）により本発明を例証する。実施例１（Ａ）合成塩酸アミノグアニジン60.0ｇを脱イオン水56mlとイソプロピルアルコール36ｇに溶かした。濃塩酸を添加することにより、該溶液のpHを約０〜１に調整した。反応温度を25〜30℃に維持しながら30.96ｇのメチルグリオキサールジメチルアセタールを1.5〜３時間に渡り添加した。次いで反応混合物を周囲温度で更に16 時間攪拌した。240ｇのイソプロピルアルコールを加え、反応混合物を10℃に冷却した。反応工程中に形成した粗生成物を濾過により集め、90mlのイソプロピルアルコールで洗浄した。洗浄した濾過残渣を45℃のオーブン中で一晩乾燥した。収量は理論収量の87％であった。（Ｂ）精製（Ａ）で得られた粗生成物79.3ｇを35℃で脱イオン水159gに溶かした。その溶液に60.7gのイソプロピルアルコールを加え、次いで濃塩酸を加えることによりp Hを０〜１に調整した。pH調整した溶液を、その温度を28〜32℃に維持しながら且つ10mlの脱イオン水を加えながら１時間攪拌した。混合物を濾過し、機械的汚れ粒子などの不純物を除去した。次いで312ｇのイソプロピルアルコールを溶液に加えて生成物を沈澱させた。沈澱した生成物を含む混合物を８〜12℃に冷却し、約15分間攪拌した。次いで精製生成物を68mlのイソプロピルアルコールで洗浄し、45℃の真空オーブン中で乾燥した。精製生成物の収量は理論収量の67.5％であった。１）重炭酸アミノグアニジンをメチルグリオキサールジメチルアセタールと反応させることにより、または２）塩酸アミノグアニジンをジメチルグリオキサールジメチルアセタールと反応させることにより製造した、精製２，２’−（１− メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕の試料をHPLCにより分析した。比較結果を表IIと表IIIに与える。表II ＭＧＢＧの製造に使用した重炭酸アミノグアニジンのロット分析結果およびそれを使って製造したＭＧＢＧの分析結果表III ＭＧＢＧの製造に使用した塩酸アミノグアニジンのロット分析結果およびそれを使って製造したＭＧＢＧの分析結果塩酸アミノグアニジンは重炭酸アミノグアニジンよりも低レベルの不純物を含むことがわかり、より高品質のＭＧＢＧを与えた。塩酸アミノグアニジンを使って本発明に従って製造されたＭＧＢＧの純度は99.9％ほどの高純度であることがわかった。そのような高純度のＭＧＢＧは癌や他の疾患の治療用医薬組成物に非常に適する。本発明をそれの幾つかの好ましい態様に関して詳細に記載してきたが、本発明の精神および範囲内で変更および修正を行えることは理解されるだろう。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＡＬ，ＡＭ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】 1. ２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕の製造方法であって、次の段階： a) 水約0.5〜３部と水混和性有機溶媒約０〜３部の混合物中に塩酸アミノグアニジン１部を溶かし； b) 前記溶液のpHを濃塩酸で約０〜５に調整し； c) 約０〜50℃の温度で、該溶液にメチルグリオキサールアルデヒドまたはメチルグリオキサールジメチルアセタール約0.25〜１部を添加して反応混合物を得； d) 前記反応混合物を周囲温度で約１〜48時間攪拌し； e) 前記反応混合物に水混和性有機溶媒約0.5〜20部を添加して固体の粗製２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を生成せしめ； f) 粗製２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を濾過により収集しそしてそれを有機溶媒１〜10部で洗浄し； g) 粗製２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を水約0.５〜４部に溶かし； h) 該溶液に水混和性有機溶媒約0.5〜２部を添加し； i) 該溶液のpHを約０〜５に調整し； j) 水約０〜２部を添加しそして該溶液の温度を約28〜32℃に維持しながら、該溶液を約0.5〜２時間攪拌し；k) 該溶液に水混和性有機溶媒約0.5〜10部を添加して２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を沈澱させ； l) 該混合物を約０〜25℃に冷却し； m) 固体の２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を濾過により集め、そしてそれを有機溶媒0.５〜10 部で洗浄し；そして n) 精製２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を乾燥させるを含んで成る方法。 2. 請求項１の方法により製造された２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕。 3. 哺乳類における癌または悪性疾患の治療方法であって、請求項２の化合物を含有する医薬組成物の有効量を前記哺乳類に投与することを含んで成る方法。 4. ２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕の製造方法であって、次の段階： a) 水約0.93部とイソプロピルアルコール約0.75部の混合物中に塩酸アミノグアニジン１部を溶かし； b) 該溶液のpHを濃塩酸で約０〜１に調整し； c) 25〜30℃の温度で、該溶液にメチルグリオキサールジメチルアセタール約0. 5部を添加し； d) 該溶液を周囲温度で約１〜16時間攪拌し； e) 反応混合物にイソプロピルアルコール約５部を添加して固体の２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を生成せしめ； f) 固体の粗製２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を濾過により収集しそしてそれをイソプロピルアルコール１〜２部で洗浄し； g) 粗製２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を約２部の水に溶かし； h) イソプロピルアルコール約１部を添加し； i) 該溶液のpHを濃塩酸で０−１に調整し； j) 水０〜２部を添加しそして該溶液の温度を約28〜32℃に維持しながら、該溶液を約0.５〜２時間攪拌し； k) 該溶液を濾過してそこから不溶性不純物を除去し； l) 濾過した溶液にイソプロピルアルコール約５部を添加して２，２’−（１− メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を沈澱させ； m) 該混合物を約10℃に冷却し； n) 固体の２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を濾過により集め、そしてそれをイソプロピルアルコール１部で洗浄し；そして o) ２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕を乾燥させるを含んで成る方法。 5. 請求項４の方法により製造された２，２’−（１−メチル−１，２−エタンジイリデン）ビス〔ヒドラジンカルボキシミドアミド〕。 6. 哺乳類における癌または悪性疾患の治療方法であって、請求項５の化合物を含有する医薬組成物の有効量を前記哺乳類に投与することを含んで成る方法。