JP2000230003A - 溶解速度が制御されたヒアルロン酸ゲル及びその製造方法 - Google Patents
溶解速度が制御されたヒアルロン酸ゲル及びその製造方法Info
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 ヒアルロン酸自体が本来持っている優れた生
体適合性の特徴を最大限生かしつつ、生体内での滞留時
間が所望に調節されたヒアルロン酸ゲルを提供するこ
と。 【解決手段】 中性の２５℃の水溶液中で１日後の溶解
率が５０％以下であり、３〜１４日後の溶解率が５０％
以上であることを特徴とするヒアルロン酸ゲルを構成と
する。
体適合性の特徴を最大限生かしつつ、生体内での滞留時
間が所望に調節されたヒアルロン酸ゲルを提供するこ
と。 【解決手段】 中性の２５℃の水溶液中で１日後の溶解
率が５０％以下であり、３〜１４日後の溶解率が５０％
以上であることを特徴とするヒアルロン酸ゲルを構成と
する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、溶解速度が制御さ
れたヒアルロン酸ゲル及びその製造方法に関する。
れたヒアルロン酸ゲル及びその製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】ヒアルロン酸は、β−Ｄ−Ｎ−アセチル
グルコサミンとβ−Ｄ−グルクロン酸が交互に結合した
直鎖状の高分子多糖である。ヒアルロン酸は哺乳動物の
結合組織に分布するほか、ニワトリのとさか、連鎖球菌
の夾膜などにも存在が知られている。ニワトリのとさ
か、臍帯等が抽出材料として用いられているほか、連鎖
球菌の培養物からも精製物が調製されている。天然産の
ヒアルロン酸は、分子量について多分散性であるが、種
及び臓器特異性をもたず、生体に移植または注入した場
合であっても優れた生体適合性示すことが知られてい
る。さらに、生体に適用する場合のヒアルロン酸自体の
易水溶性に由来する短所、生体内滞留時間が比較的短い
ことから、多種多様なヒアルロン酸の化学修飾物も提案
されている。
グルコサミンとβ−Ｄ−グルクロン酸が交互に結合した
直鎖状の高分子多糖である。ヒアルロン酸は哺乳動物の
結合組織に分布するほか、ニワトリのとさか、連鎖球菌
の夾膜などにも存在が知られている。ニワトリのとさ
か、臍帯等が抽出材料として用いられているほか、連鎖
球菌の培養物からも精製物が調製されている。天然産の
ヒアルロン酸は、分子量について多分散性であるが、種
及び臓器特異性をもたず、生体に移植または注入した場
合であっても優れた生体適合性示すことが知られてい
る。さらに、生体に適用する場合のヒアルロン酸自体の
易水溶性に由来する短所、生体内滞留時間が比較的短い
ことから、多種多様なヒアルロン酸の化学修飾物も提案
されている。
【０００３】これらの代表的なものとしては、ジビニル
スルホン、ビスエポキシド類、ホルムアルデヒド等の二
官能性試薬を架橋剤に使用して、得られた高膨潤性の架
橋ヒアルロン酸ゲルを挙げることができる（米国特許第
４，５８２，８６５号明細書、特公平６−３７５７５号
公報、特開平７−９７４０１号公報、特開昭６０−１３
０６０１号公報参照）。
スルホン、ビスエポキシド類、ホルムアルデヒド等の二
官能性試薬を架橋剤に使用して、得られた高膨潤性の架
橋ヒアルロン酸ゲルを挙げることができる（米国特許第
４，５８２，８６５号明細書、特公平６−３７５７５号
公報、特開平７−９７４０１号公報、特開昭６０−１３
０６０１号公報参照）。
【０００４】また、ヒアルロン酸のテトラブチルアンモ
ニウム塩がジメチルスルフォキシド等の有機溶媒に溶解
する特徴を利用したヒアルロン酸の化学的修飾方法が開
示されている（特開平３−１０５００３号）。また、ヒ
アルロン酸のテトラブチルアンモニウム塩をジメチルス
ルフォキシド中で、トリエチルアミンとヨウ化２−クロ
ロ−１−メチルピリジニウムを加え反応させ、ヒアルロ
ン酸のカルボキシル基と水酸基間でエステル結合を形成
させる方法も開示されている（欧州特許０３４１７４５
Ａ１）。
ニウム塩がジメチルスルフォキシド等の有機溶媒に溶解
する特徴を利用したヒアルロン酸の化学的修飾方法が開
示されている（特開平３−１０５００３号）。また、ヒ
アルロン酸のテトラブチルアンモニウム塩をジメチルス
ルフォキシド中で、トリエチルアミンとヨウ化２−クロ
ロ−１−メチルピリジニウムを加え反応させ、ヒアルロ
ン酸のカルボキシル基と水酸基間でエステル結合を形成
させる方法も開示されている（欧州特許０３４１７４５
Ａ１）。
【０００５】また、共有結合を形成する化学的試薬を使
用することなく、ヒアルロン酸を水に不溶化する方法と
して、ヒアルロン酸とアミノ基あるいはイミノ基を有す
る高分子化合物とを、ヒアルロン酸のカルボキシル基と
高分子化合物のアミノ基あるいはイミノ基をイオン複合
体として結合させてヒアルロン酸高分子複合体を調製す
る方法が開示されている（特開平６−７３１０３号公報
参照）。
用することなく、ヒアルロン酸を水に不溶化する方法と
して、ヒアルロン酸とアミノ基あるいはイミノ基を有す
る高分子化合物とを、ヒアルロン酸のカルボキシル基と
高分子化合物のアミノ基あるいはイミノ基をイオン複合
体として結合させてヒアルロン酸高分子複合体を調製す
る方法が開示されている（特開平６−７３１０３号公報
参照）。
【０００６】ヒアルロン酸水溶液を酸性、例えばｐＨ
２．０〜２．７の範囲に調整するとパティーゲルと呼ば
れるジェリー状に固化した状態のゲルを形成することは
知られているが、ｐＨ２．０未満では、パティーゲルは
形成されない。そして、このパティーゲルは、中性水溶
液中に投入すると速やかに溶解するので、本発明でいう
ヒアルロン酸ゲルとは異なる。
２．０〜２．７の範囲に調整するとパティーゲルと呼ば
れるジェリー状に固化した状態のゲルを形成することは
知られているが、ｐＨ２．０未満では、パティーゲルは
形成されない。そして、このパティーゲルは、中性水溶
液中に投入すると速やかに溶解するので、本発明でいう
ヒアルロン酸ゲルとは異なる。
【０００７】また、ヒアルロン酸水溶液を、ｐＨ２．０
〜３．８、２０〜８０重量％水溶性有機溶剤存在下にお
くことを特徴とするヒアルロン酸ゲルの製造方法も開示
されている（特開平５−５８８８１公報参照）。しかし
ながら、この製造方法で得られたヒアルロン酸ゲルは、
コーティング等を施さない場合には、水中に投入すると
溶解することが該公報に記載されている。
〜３．８、２０〜８０重量％水溶性有機溶剤存在下にお
くことを特徴とするヒアルロン酸ゲルの製造方法も開示
されている（特開平５−５８８８１公報参照）。しかし
ながら、この製造方法で得られたヒアルロン酸ゲルは、
コーティング等を施さない場合には、水中に投入すると
溶解することが該公報に記載されている。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】ヒアルロン酸自体が本
来持っている優れた生体適合性の特徴を最大限生かし、
かつ、生体内での滞留時間が調節されたヒアルロン酸ゲ
ルは有用である。本発明者らは、ヒアルロン酸自体の物
理化学的性質を鋭意検討してきた結果、任意の溶解速度
に制御された上記ヒアルロン酸ゲルを見出した。
来持っている優れた生体適合性の特徴を最大限生かし、
かつ、生体内での滞留時間が調節されたヒアルロン酸ゲ
ルは有用である。本発明者らは、ヒアルロン酸自体の物
理化学的性質を鋭意検討してきた結果、任意の溶解速度
に制御された上記ヒアルロン酸ゲルを見出した。
【０００９】
【課題を解決するための手段】即ち、本発明は、（１）
中性の２５℃の水溶液中で１日後の溶解率が５０％以下
であり、３〜１４日後の溶解率が５０％以上であること
を特徴とするヒアルロン酸ゲル、（２）ヒアルロン酸の
ｐＨ２〜３．５の水溶液を凍結し、次いで解凍すること
を特徴とする（１）記載のヒアルロン酸ゲルの製造方法
である。
中性の２５℃の水溶液中で１日後の溶解率が５０％以下
であり、３〜１４日後の溶解率が５０％以上であること
を特徴とするヒアルロン酸ゲル、（２）ヒアルロン酸の
ｐＨ２〜３．５の水溶液を凍結し、次いで解凍すること
を特徴とする（１）記載のヒアルロン酸ゲルの製造方法
である。
【００１０】
【発明の実施の形態】以下、本発明を詳細に説明する。
本発明に用いられるヒアルロン酸は、動物組織から抽出
したものでも、また発酵法で製造したものでもその起源
を問うことなく使用できる。発酵法で使用する菌株は自
然界から分離されるストレプトコッカス属等のヒアルロ
ン酸生産能を有する微生物、又は特開昭６３−１２３３
９２号公報に記載したストレプトコッカス・エクイＦＭ
−１００（微工研菌寄第9027号）、特開平２−２３４６
８９号公報に記載したストレプトコッカス・エクイＦＭ
−３００（微工研菌寄第2319号）のような高収率で安定
にヒアルロン酸を生産する変異株が望ましい。上記の変
異株を用いて培養、精製されたものが用いられる。
本発明に用いられるヒアルロン酸は、動物組織から抽出
したものでも、また発酵法で製造したものでもその起源
を問うことなく使用できる。発酵法で使用する菌株は自
然界から分離されるストレプトコッカス属等のヒアルロ
ン酸生産能を有する微生物、又は特開昭６３−１２３３
９２号公報に記載したストレプトコッカス・エクイＦＭ
−１００（微工研菌寄第9027号）、特開平２−２３４６
８９号公報に記載したストレプトコッカス・エクイＦＭ
−３００（微工研菌寄第2319号）のような高収率で安定
にヒアルロン酸を生産する変異株が望ましい。上記の変
異株を用いて培養、精製されたものが用いられる。
【００１１】ゲルとは、新版高分子辞典（朝倉書店 昭
和６３年）によれば、「あらゆる溶媒に不溶の三次元網
目構造をもつ高分子及びその膨潤体」と定義されてい
る。理化学辞典（岩波書店 第４版 昭和６２年）によ
れば、「ゾル（コロイド溶液）がジェリー状に固化した
もの」と定義されている。本発明で言うヒアルロン酸ゲ
ルとは、中性水溶液に少なくとも１日は難溶性であるこ
とを特徴とし、このヒアルロン酸ゲルを中性水溶液中に
投入すると、ゲル化していないヒアルロン酸と比較して
１日後に有意に難溶性を示す。難溶性は、中性の２５℃
の水溶液中でのゲルの溶解率で規定する。ここで、中性
水溶液とは、ｐＨ７に調整された緩衝能を有する生理的
食塩水である。
和６３年）によれば、「あらゆる溶媒に不溶の三次元網
目構造をもつ高分子及びその膨潤体」と定義されてい
る。理化学辞典（岩波書店 第４版 昭和６２年）によ
れば、「ゾル（コロイド溶液）がジェリー状に固化した
もの」と定義されている。本発明で言うヒアルロン酸ゲ
ルとは、中性水溶液に少なくとも１日は難溶性であるこ
とを特徴とし、このヒアルロン酸ゲルを中性水溶液中に
投入すると、ゲル化していないヒアルロン酸と比較して
１日後に有意に難溶性を示す。難溶性は、中性の２５℃
の水溶液中でのゲルの溶解率で規定する。ここで、中性
水溶液とは、ｐＨ７に調整された緩衝能を有する生理的
食塩水である。
【００１２】本発明で得られるヒアルロン酸ゲルの製造
方法は問わない。例えば、ｐＨ２〜３．５の酸性ヒアル
ロン酸溶液を凍結し、次いで解凍して形成させる方法が
ある。その他には、ヒアルロン酸濃度５重量％以上のヒ
アルロン酸酸性水溶液を中和処理前に熟成することによ
り形成させる方法がある。また、形成したヒアルロン酸
ゲルを、熱や放射線等で分解して、溶解速度を制御して
も良い。
方法は問わない。例えば、ｐＨ２〜３．５の酸性ヒアル
ロン酸溶液を凍結し、次いで解凍して形成させる方法が
ある。その他には、ヒアルロン酸濃度５重量％以上のヒ
アルロン酸酸性水溶液を中和処理前に熟成することによ
り形成させる方法がある。また、形成したヒアルロン酸
ゲルを、熱や放射線等で分解して、溶解速度を制御して
も良い。
【００１３】本発明で得られるヒアルロン酸ゲルは、ヒ
アルロン酸単独で形成されるものも含む。ここでいうヒ
アルロン酸単独とは、ヒアルロン酸以外に化学的架橋剤
や化学的修飾剤等を使用しないこと、また、カチオン性
の高分子と複合体化しないことであり、自己架橋を意味
するものである。化学的架橋剤や化学的修飾剤を使用す
ることにより、それに起因する生体適合性への悪影響が
考えられるので、ヒアルロン酸単独からなるゲルの方が
より好ましい。
アルロン酸単独で形成されるものも含む。ここでいうヒ
アルロン酸単独とは、ヒアルロン酸以外に化学的架橋剤
や化学的修飾剤等を使用しないこと、また、カチオン性
の高分子と複合体化しないことであり、自己架橋を意味
するものである。化学的架橋剤や化学的修飾剤を使用す
ることにより、それに起因する生体適合性への悪影響が
考えられるので、ヒアルロン酸単独からなるゲルの方が
より好ましい。
【００１４】ヒアルロン酸の化学的架橋剤は、ヒアルロ
ン酸のカルボキシル基、水酸基、アセトアミド基と反応
して共有結合を形成する多価化合物であり、ポリグリシ
ジルエーテル等の多価エポキシ化合物、ジビニルスルホ
ン、ホルムアルデヒド、オキシ塩化リン、カルボジイミ
ド化合物とアミノ酸エステルの併用、カルボジイミド化
合物とジヒドラジド化合物の併用を例として挙げること
ができる。ヒアルロン酸と化学的架橋剤との反応により
三次元網目構造が形成される。
ン酸のカルボキシル基、水酸基、アセトアミド基と反応
して共有結合を形成する多価化合物であり、ポリグリシ
ジルエーテル等の多価エポキシ化合物、ジビニルスルホ
ン、ホルムアルデヒド、オキシ塩化リン、カルボジイミ
ド化合物とアミノ酸エステルの併用、カルボジイミド化
合物とジヒドラジド化合物の併用を例として挙げること
ができる。ヒアルロン酸と化学的架橋剤との反応により
三次元網目構造が形成される。
【００１５】ヒアルロン酸の化学的修飾剤は、ヒアルロ
ン酸のカルボキシル基、水酸基、アセトアミド基と反応
して共有結合を形成する化合物であり、無水酢酸と濃硫
酸の併用、無水トリフルオロ酢酸と有機酸の併用、ヨウ
化アルキル化合物を例として挙げることができる。ヒア
ルロン酸の親水性基を疎水化し、ヒアルロン酸の水溶性
が減少する。
ン酸のカルボキシル基、水酸基、アセトアミド基と反応
して共有結合を形成する化合物であり、無水酢酸と濃硫
酸の併用、無水トリフルオロ酢酸と有機酸の併用、ヨウ
化アルキル化合物を例として挙げることができる。ヒア
ルロン酸の親水性基を疎水化し、ヒアルロン酸の水溶性
が減少する。
【００１６】ヒアルロン酸と複合体化するカチオン性の
高分子は、ヒアルロン酸のカルボキシル基と高分子化合
物のアミノ基あるいはイミノ基の間でイオン複合体を形
成する高分子であり、キトサン、ポリリジン、ポリビニ
ルピリジン、ポリエチレンイミン、ポリジメチルアミノ
エチルメタクリレートを例として挙げることができる。
ヒアルロン酸とカチオン性の高分子は複合体化すること
により、水に不溶化する。
高分子は、ヒアルロン酸のカルボキシル基と高分子化合
物のアミノ基あるいはイミノ基の間でイオン複合体を形
成する高分子であり、キトサン、ポリリジン、ポリビニ
ルピリジン、ポリエチレンイミン、ポリジメチルアミノ
エチルメタクリレートを例として挙げることができる。
ヒアルロン酸とカチオン性の高分子は複合体化すること
により、水に不溶化する。
【００１７】一方、ヒアルロン酸への架橋構造の導入や
ヒアルロン酸の不溶化、難溶化に直接関係しない物質
を、本発明でいうヒアルロン酸ゲルを形成させる際に添
加することはできる。ヒアルロン酸と同様に生体適合性
に優れる材料、例えば、コンドロイチン硫酸、カルボキ
シメチルセルロース等を混合、複合化してヒアルロン酸
ゲルを形成させることができるものであり、何ら制限さ
れないものである。また、ヒアルロン酸ゲルを形成させ
る際に、薬学的又は生理学的に活性な物質を添加して、
これらを含有するヒアルロン酸ゲルを形成させることも
できるものであり、何ら制限されないものである。
ヒアルロン酸の不溶化、難溶化に直接関係しない物質
を、本発明でいうヒアルロン酸ゲルを形成させる際に添
加することはできる。ヒアルロン酸と同様に生体適合性
に優れる材料、例えば、コンドロイチン硫酸、カルボキ
シメチルセルロース等を混合、複合化してヒアルロン酸
ゲルを形成させることができるものであり、何ら制限さ
れないものである。また、ヒアルロン酸ゲルを形成させ
る際に、薬学的又は生理学的に活性な物質を添加して、
これらを含有するヒアルロン酸ゲルを形成させることも
できるものであり、何ら制限されないものである。
【００１８】本発明に用いられるヒアルロン酸の分子量
は、所望の溶解速度により適宜選択されるが、約１×１
０5 〜約１×１０7 ダルトンの範囲内のものが好まし
い。また、上記範囲内の分子量をもつものであれば、よ
り高分子量のものから、加水分解処理等を介して得られ
た低分子量のものも同様に使用できる。なお、本発明に
いうヒアルロン酸は、そのアルカリ金属、例えば、ナト
リウム、カリウム、リチウムの塩をも包含する概念で使
用される。
は、所望の溶解速度により適宜選択されるが、約１×１
０5 〜約１×１０7 ダルトンの範囲内のものが好まし
い。また、上記範囲内の分子量をもつものであれば、よ
り高分子量のものから、加水分解処理等を介して得られ
た低分子量のものも同様に使用できる。なお、本発明に
いうヒアルロン酸は、そのアルカリ金属、例えば、ナト
リウム、カリウム、リチウムの塩をも包含する概念で使
用される。
【００１９】本発明で得られるヒアルロン酸ゲルは、そ
の使用目的に応じて、溶媒中に浸漬した状態、溶媒を含
ませた湿潤状態、通風乾燥、減圧乾燥あるいは凍結乾燥
等の処理を経た乾燥状態で供される。
の使用目的に応じて、溶媒中に浸漬した状態、溶媒を含
ませた湿潤状態、通風乾燥、減圧乾燥あるいは凍結乾燥
等の処理を経た乾燥状態で供される。
【００２０】ヒアルロン酸ゲルの成形加工等の処理は、
作製時には、ヒアルロン酸及び調製されたヒアルロン酸
酸性水溶液の容器や手法の選択によりシート状、フィル
ム状、破砕状、スポンジ状、塊状、繊維状、及びチュー
ブ状の所望の形態のヒアルロン酸ゲルの作製が可能であ
る。ヒアルロン酸ゲルの作製後の加工としては、機械的
粉砕による微細な破砕状や凍結、解凍によるスポンジ
状、圧延によるフィルム化、紡糸等が例示される。
作製時には、ヒアルロン酸及び調製されたヒアルロン酸
酸性水溶液の容器や手法の選択によりシート状、フィル
ム状、破砕状、スポンジ状、塊状、繊維状、及びチュー
ブ状の所望の形態のヒアルロン酸ゲルの作製が可能であ
る。ヒアルロン酸ゲルの作製後の加工としては、機械的
粉砕による微細な破砕状や凍結、解凍によるスポンジ
状、圧延によるフィルム化、紡糸等が例示される。
【００２１】
【実施例】以下、実施例により本発明を更に詳しく説明
する。なお、本発明はこれにより限定されるものではな
い。
する。なお、本発明はこれにより限定されるものではな
い。
【００２２】実施例１ 分子量が２×１０6 ダルトンのヒアルロン酸ナトリウム
を蒸留水に溶解し、１重量％のヒアルロン酸の水溶液を
調製した。調製されたヒアルロン酸の水溶液のｐＨは、
６．０であった。この水溶液のｐＨを、１Ｎ塩酸でｐＨ
２．０に調整した。このヒアルロン酸の酸性水溶液１５
ｍｌを３０ｍｌのガラスビンに入れ、−２０℃に設定し
た冷凍庫に入れた。２４時間放置した後、２５℃で解凍
した。その結果、スポンジ状のヒアルロン酸ゲルが得ら
れた。
を蒸留水に溶解し、１重量％のヒアルロン酸の水溶液を
調製した。調製されたヒアルロン酸の水溶液のｐＨは、
６．０であった。この水溶液のｐＨを、１Ｎ塩酸でｐＨ
２．０に調整した。このヒアルロン酸の酸性水溶液１５
ｍｌを３０ｍｌのガラスビンに入れ、−２０℃に設定し
た冷凍庫に入れた。２４時間放置した後、２５℃で解凍
した。その結果、スポンジ状のヒアルロン酸ゲルが得ら
れた。
【００２３】実施例２ 実施例１に於いて、分子量が６×１０5 ダルトンのヒア
ルロン酸ナトリウムを溶解してヒアルロン酸の水溶液を
調製した後、実施例１と同様の操作を行い、−２０℃に
設定した冷凍庫に入れた。２４時間放置した後、２５℃
で解凍した。その結果、スポンジ状のヒアルロン酸ゲル
が得られた。
ルロン酸ナトリウムを溶解してヒアルロン酸の水溶液を
調製した後、実施例１と同様の操作を行い、−２０℃に
設定した冷凍庫に入れた。２４時間放置した後、２５℃
で解凍した。その結果、スポンジ状のヒアルロン酸ゲル
が得られた。
【００２４】実施例３ 実施例１に於いて、−２０℃に設定した冷凍庫に１２時
間放置した後、２５℃で解凍した。その結果、スポンジ
状のヒアルロン酸ゲルが得られた。
間放置した後、２５℃で解凍した。その結果、スポンジ
状のヒアルロン酸ゲルが得られた。
【００２５】実施例４ 実施例３に於いて、分子量が６×１０5 ダルトンのヒア
ルロン酸ナトリウムを溶解してヒアルロン酸の水溶液を
調製した後、実施例３と同様の操作を行い、−２０℃に
設定した冷凍庫に入れた。１２時間放置した後、２５℃
で解凍した。その結果、スポンジ状のヒアルロン酸ゲル
が得られた。
ルロン酸ナトリウムを溶解してヒアルロン酸の水溶液を
調製した後、実施例３と同様の操作を行い、−２０℃に
設定した冷凍庫に入れた。１２時間放置した後、２５℃
で解凍した。その結果、スポンジ状のヒアルロン酸ゲル
が得られた。
【００２６】実施例５ 実施例１に於いて、調製されたヒアルロン酸の水溶液の
ｐＨを、１Ｎ塩酸でｐＨ２．５に調整した。このヒアル
ロン酸の酸性水溶液１５ｍｌを３０ｍｌのガラスビンに
入れ、−２０℃に設定した冷凍庫に入れた。２４０時間
放置した後、２５℃で解凍した。その結果、スポンジ状
のヒアルロン酸ゲルが得られた。
ｐＨを、１Ｎ塩酸でｐＨ２．５に調整した。このヒアル
ロン酸の酸性水溶液１５ｍｌを３０ｍｌのガラスビンに
入れ、−２０℃に設定した冷凍庫に入れた。２４０時間
放置した後、２５℃で解凍した。その結果、スポンジ状
のヒアルロン酸ゲルが得られた。
【００２７】実施例１〜５のヒアルロン酸ゲルの調製条
件を、表１にまとめる。
件を、表１にまとめる。
【００２８】
【表１】
【００２９】実施例６ 分子量が２×１０6 ダルトンのヒアルロン酸ナトリウム
の粉末１００ｍｇを３００ｋｇｆ／ｃｍ2 で３分間加圧
し、８ｍｍ×８ｍｍ×２ｍｍの直方体の成型物を得た。
この成型物を、スチロール製の角型容器に入れ、１Ｎの
塩酸を４００ｍｇ、ヒアルロン酸濃度にして２０重量％
になるように含浸させ容器を密閉した後、２５℃で４日
間静置保存した。その結果、直方体の透明なヒアルロン
酸ゲルが得られた。
の粉末１００ｍｇを３００ｋｇｆ／ｃｍ2 で３分間加圧
し、８ｍｍ×８ｍｍ×２ｍｍの直方体の成型物を得た。
この成型物を、スチロール製の角型容器に入れ、１Ｎの
塩酸を４００ｍｇ、ヒアルロン酸濃度にして２０重量％
になるように含浸させ容器を密閉した後、２５℃で４日
間静置保存した。その結果、直方体の透明なヒアルロン
酸ゲルが得られた。
【００３０】実施例７ 実施例６に於いて、ヒアルロン酸濃度が５重量％になる
ように１Ｎの塩酸を１９００ｍｇ含浸させた後、５℃に
設定した冷蔵庫に６日間静置保存した。その結果、直方
体の透明なヒアルロン酸ゲルが得られた。
ように１Ｎの塩酸を１９００ｍｇ含浸させた後、５℃に
設定した冷蔵庫に６日間静置保存した。その結果、直方
体の透明なヒアルロン酸ゲルが得られた。
【００３１】比較例１ 分子量が２×１０6 ダルトンのヒアルロン酸ナトリウム
の粉末を、ヒアルロン酸ゲルの溶解性試験に用いた。
の粉末を、ヒアルロン酸ゲルの溶解性試験に用いた。
【００３２】比較例２ 分子量が２×１０6 ダルトンのヒアルロン酸ナトリウム
の粉末を３００ｋｇｆ／ｃｍ2 で３分間加圧し、直方体
の成型物を得た。該成型物をヒアルロン酸ゲルの溶解性
試験に用いた。
の粉末を３００ｋｇｆ／ｃｍ2 で３分間加圧し、直方体
の成型物を得た。該成型物をヒアルロン酸ゲルの溶解性
試験に用いた。
【００３３】比較例３ 実施例４に於いて、１Ｎの塩酸の代わりに蒸留水を用い
て同様の操作を行った。その結果、透明なヒアルロン酸
ゲル状の溶液が得られた。該ヒアルロン酸溶液をヒアル
ロン酸ゲルの溶解性試験に用いた。
て同様の操作を行った。その結果、透明なヒアルロン酸
ゲル状の溶液が得られた。該ヒアルロン酸溶液をヒアル
ロン酸ゲルの溶解性試験に用いた。
【００３４】実施例６ ヒアルロン酸ゲルの溶解性試験 生理的食塩水に５０ｍＭ濃度でリン酸緩衝成分を加え、
ｐＨ７のリン酸緩衝生理的食塩水を調製した。上記の実
施例で得られたヒアルロン酸ゲルを、乾燥重量で１０ｍ
ｇのヒアルロン酸を含むヒアルロン酸ゲルに対して、５
０ｍｌのリン酸緩衝生理的食塩水の割合で、リン酸緩衝
生理的食塩水中に浸漬した。また、比較例の各形態のヒ
アルロン酸も、乾燥重量で１０ｍｇを５０ｍｌのリン酸
緩衝生理的食塩水中に浸漬した。そして、２５℃で撹拌
下のリン酸緩衝生理的食塩水中に溶出するヒアルロン酸
の割合を、リン酸緩衝生理的食塩水中のヒアルロン酸濃
度から求めた。従って、中性の２５℃の水溶液中でのヒ
アルロン酸ゲルの溶解性は、上記試験により規定される
ものである。
ｐＨ７のリン酸緩衝生理的食塩水を調製した。上記の実
施例で得られたヒアルロン酸ゲルを、乾燥重量で１０ｍ
ｇのヒアルロン酸を含むヒアルロン酸ゲルに対して、５
０ｍｌのリン酸緩衝生理的食塩水の割合で、リン酸緩衝
生理的食塩水中に浸漬した。また、比較例の各形態のヒ
アルロン酸も、乾燥重量で１０ｍｇを５０ｍｌのリン酸
緩衝生理的食塩水中に浸漬した。そして、２５℃で撹拌
下のリン酸緩衝生理的食塩水中に溶出するヒアルロン酸
の割合を、リン酸緩衝生理的食塩水中のヒアルロン酸濃
度から求めた。従って、中性の２５℃の水溶液中でのヒ
アルロン酸ゲルの溶解性は、上記試験により規定される
ものである。
【００３５】ヒアルロン酸濃度の測定 リン酸緩衝生理的食塩水中のヒアルロン酸の濃度は、Ｇ
ＰＣを使って、示差屈折率検出器のピーク面積から求め
た。
ＰＣを使って、示差屈折率検出器のピーク面積から求め
た。
【００３６】上記に従い、具体的に実施例１〜７及び比
較例１〜３のヒアルロン酸ゲルの溶解性試験を行った。
その結果を表２に示す。
較例１〜３のヒアルロン酸ゲルの溶解性試験を行った。
その結果を表２に示す。
【００３７】
【表２】
【００３８】例えば、実験Ｎｏ．１の実施例１で得られ
たヒアルロン酸ゲルの溶解率を調べると、１日経過後で
は６％の溶解率であり、３日経過後では１０％の溶解率
であり、７日経過後では２０％の溶解率であり、更に１
４日経過後では５６％の溶解率であった。即ち、１日経
過後は９０％以上のヒアルロン酸ゲルが残存していた
が、１４日後には５０％以下しか残存していない。一
方、実験Ｎｏ．５の実施例５で得られたヒアルロン酸ゲ
ルの溶解率を調べると、１日経過後では１５％の溶解率
であり、３日経過後では６１％の溶解率であり、更に７
日経過後では１００％の溶解率であり、ヒアルロン酸ゲ
ルは全て溶解している。そして、ヒアルロン酸ゲルの溶
解率は、時間にほぼ比例して増加している。それに対し
て、実験Ｎｏ．８の比較例１でのヒアルロン酸粉末の溶
解率は、１日経過後で１００％の溶解率であり、完全に
溶解した。よって、比較例（実験Ｎｏ．８〜１０）で得
られたヒアルロン酸ゲル状の溶液は水中での溶解速度が
極めて速いのに対して、本願発明のヒアルロン酸ゲル
（例えば、実験Ｎｏ．１〜７）は水中の溶解速度が遅
く、また、任意の溶解速度を有することが見出された。
そして、実施例１〜５に示すように、ｐＨ２〜３．５の
酸性ヒアルロン酸水溶液を凍結し、次いで解凍すること
によって、上記のような溶解速度が制御されたヒアルロ
ン酸ゲルが得られることが示唆された。
たヒアルロン酸ゲルの溶解率を調べると、１日経過後で
は６％の溶解率であり、３日経過後では１０％の溶解率
であり、７日経過後では２０％の溶解率であり、更に１
４日経過後では５６％の溶解率であった。即ち、１日経
過後は９０％以上のヒアルロン酸ゲルが残存していた
が、１４日後には５０％以下しか残存していない。一
方、実験Ｎｏ．５の実施例５で得られたヒアルロン酸ゲ
ルの溶解率を調べると、１日経過後では１５％の溶解率
であり、３日経過後では６１％の溶解率であり、更に７
日経過後では１００％の溶解率であり、ヒアルロン酸ゲ
ルは全て溶解している。そして、ヒアルロン酸ゲルの溶
解率は、時間にほぼ比例して増加している。それに対し
て、実験Ｎｏ．８の比較例１でのヒアルロン酸粉末の溶
解率は、１日経過後で１００％の溶解率であり、完全に
溶解した。よって、比較例（実験Ｎｏ．８〜１０）で得
られたヒアルロン酸ゲル状の溶液は水中での溶解速度が
極めて速いのに対して、本願発明のヒアルロン酸ゲル
（例えば、実験Ｎｏ．１〜７）は水中の溶解速度が遅
く、また、任意の溶解速度を有することが見出された。
そして、実施例１〜５に示すように、ｐＨ２〜３．５の
酸性ヒアルロン酸水溶液を凍結し、次いで解凍すること
によって、上記のような溶解速度が制御されたヒアルロ
ン酸ゲルが得られることが示唆された。
【００３９】
【発明の効果】以上、本発明によれば、ヒアルロン酸自
体が本来持っている優れた生体適合性の特徴を最大限生
かしつつ、生体内での滞留時間が所望に調節されたヒア
ルロン酸ゲルを提供することができる。本発明のヒアル
ロン酸ゲルにより、例えば癒着防止の用途に於いて、手
術部位によって所望の生体内滞留時間を有するものを選
択することができるようになる。
体が本来持っている優れた生体適合性の特徴を最大限生
かしつつ、生体内での滞留時間が所望に調節されたヒア
ルロン酸ゲルを提供することができる。本発明のヒアル
ロン酸ゲルにより、例えば癒着防止の用途に於いて、手
術部位によって所望の生体内滞留時間を有するものを選
択することができるようになる。
Claims (2)
- 【請求項１】 中性の２５℃の水溶液中で１日後の溶解
率が５０％以下であり、３〜１４日後の溶解率が５０％
以上であることを特徴とするヒアルロン酸ゲル。 - 【請求項２】 ヒアルロン酸のｐＨ２〜３．５の水溶液
を凍結し、次いで解凍することを特徴とする請求項１記
載のヒアルロン酸ゲルの製造方法
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03397599A JP4460662B2 (ja) | 1999-02-12 | 1999-02-12 | 溶解速度が制御されたヒアルロン酸ゲル及びその製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03397599A JP4460662B2 (ja) | 1999-02-12 | 1999-02-12 | 溶解速度が制御されたヒアルロン酸ゲル及びその製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2000230003A true JP2000230003A (ja) | 2000-08-22 |
| JP4460662B2 JP4460662B2 (ja) | 2010-05-12 |
Family
ID=12401502
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP03397599A Expired - Fee Related JP4460662B2 (ja) | 1999-02-12 | 1999-02-12 | 溶解速度が制御されたヒアルロン酸ゲル及びその製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4460662B2 (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007129828A1 (en) * | 2006-05-04 | 2007-11-15 | Seoul National University Industry Foundation | Preparation method of porous hyaluronic acid sponge for cell delivery system |
| US8193340B2 (en) | 2006-05-04 | 2012-06-05 | Seoul National University Industry Foundation | Preparation method of porous hyaluronic acid sponge for cell delivery system |
| WO2016121198A1 (ja) * | 2015-01-29 | 2016-08-04 | 株式会社リタファーマ | 水溶性ヒアルロン酸ゲル及びその製造方法 |
-
1999
- 1999-02-12 JP JP03397599A patent/JP4460662B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007129828A1 (en) * | 2006-05-04 | 2007-11-15 | Seoul National University Industry Foundation | Preparation method of porous hyaluronic acid sponge for cell delivery system |
| US8193340B2 (en) | 2006-05-04 | 2012-06-05 | Seoul National University Industry Foundation | Preparation method of porous hyaluronic acid sponge for cell delivery system |
| WO2016121198A1 (ja) * | 2015-01-29 | 2016-08-04 | 株式会社リタファーマ | 水溶性ヒアルロン酸ゲル及びその製造方法 |
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP4460662B2 (ja) | 2010-05-12 |
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