JP2000016987A - 活性型ビタミンｄ誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 新規な活性型ビタミンＤ誘導体の提供。 【解決手段】 本活性型ビタミンＤ誘導体は次の一般式
(Ｉ) 【化１】 （式中、ＡおよびＢは、その一つがカルボニル基（Ｃ
Ｏ）で他の一つがメチレン基（ＣＨ₂）であるものとす
る）で示され、優れた骨量改善作用、分化誘導作用、細
胞増殖抑制作用、免疫調整作用を有する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は優れた骨量改善作用、分
化誘導作用、細胞増殖抑制作用、免疫調整作用を有する
新規な活性型ビタミンＤ誘導体とその製造方法およびこ
の新規な活性型ビタミンＤ誘導体を有効成分とする医薬
に関する。

【０００２】

【従来の技術】活性型ビタミンＤ誘導体には骨量改善作
用、分化誘導作用、細胞増殖抑制作用、免疫調整作用等
を有するものが知られており活発に研究されている（En
docrine Rev., 16,200（1995）等参照）。しかしなが
ら、これ等の化合物には副作用として血中カルシウム濃
度上昇作用に基づく高カルシウム血症を生じるものがあ
ることが知られている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】したがって、高カルシ
ウム血症を生じることなく、優れた骨量改善作用、分化
誘導作用、細胞増殖抑制作用、免疫調整作用等を有する
活性型ビタミンＤ誘導体を見いだすことが求められると
ころである。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記した
課題を解決すべく鋭意研究した結果、次に述べる一般式
(Ｉ)で示される化合物が血中カルシウム濃度上昇作用と
いう副作用が弱いにも拘わらず強い骨量改善作用、分化
誘導作用、細胞増殖抑制作用および免疫調整作用を有す
ることを見いだし本発明を完成するに至った。

【０００５】すなわち、本発明は一般式(Ｉ)

【化４】 （式中、ＡおよびＢは、その一つがカルボニル基（Ｃ
Ｏ）で他の一つがメチレン基（ＣＨ₂）であるものとす
る）で示される活性型ビタミンＤ誘導体に関する。

【０００６】さらに、本発明は上記一般式(I)の活性型
ビタミンＤ誘導体において、Ａがカルボニル基で、Ｂが
メチレン基である活性型ビタミンＤ誘導体に関する。さ
らに、本発明は上記一般式(I)の活性型ビタミンＤ誘導
体において、Ａがメチレン基で、Ｂがカルボニル基であ
る活性型ビタミンＤ誘導体にも関する。

【０００７】本発明はまた、一般式(II)

【化５】 （式中、ＡおよびＢは、その一つがカルボニル基で他の
一つがメチレン基であるものとする）で示される活性型
ビタミンＤ誘導体前駆体を紫外線照射に付し、次いで熱
異性化することよりなる、一般式(Ｉ)

【化６】 （式中、ＡおよびＢは上記した意味を有する）で示され
る活性型ビタミンＤ誘導体の製造方法にも関する。

【０００８】また、本発明は上記一般式(Ｉ)の活性型ビ
タミンＤ誘導体を有効成分とする医薬、特に骨量改善
薬、分化誘導薬、細胞増殖抑制薬、または免疫調整薬で
ある医薬に関する。

【０００９】本発明のこれらの化合物はいずれも新規化
合物であり側鎖部を構成するスルホン誘導体と１α位に
水酸基を有するステロイド誘導体とのカップリングと、
引き続き必要な側鎖部の修飾を行い、得られた前駆体ス
テロイドの一般式(II)の化合物を紫外線照射に付し、つ
いで熱異性化することによって製造されるものである。
このようにして得られた一般式(Ｉ)の活性型ビタミンＤ
誘導体の２４及び２５位の立体配置はＲ体でもＳ体で
も、またはそれらの混合物であってもよい。

【００１０】本発明の活性型ビタミンＤ誘導体である一
般式(Ｉ)において、Ａがメチレン基であり、Ｂがカルボ
ニル基である化合物、すなわち、(２４Ｒ,２５Ｒ)−１
α,２５−ジヒドロキシビタミンＤ₄ ２６,２８−ラクト
ン（以下「化合物（Ｉ−ａ）」と呼ぶ）は次の反応スキ
ーム１に示される工程により製造することができる。

【００１１】

【化７】

【００１２】

【化８】

【００１３】この反応スキームＩに示されるように、フ
ェニルスルホン誘導体である化合物(III)（J. Org. Che
m., 58, 1496（1993）参照）の３級水酸基を選択的に脱
水して得られる化合物(Ｖ)と、ステロイドの２２−ヨ−
ド体の４−フェニル−1,２,４−トリアゾリン−３,４−
ジオン（以下「ＰＴＡＤ」という）付加体である化合物
(VII)（Bull. Chem. Soc. Jpn.，62, 2599（1989)）と
を塩基の存在下カップリングして化合物(VIII)とした
後、側鎖トリオール誘導体(IX)に変換し、これを２６−
カルボン酸誘導体である化合物(Ｘ)に変換した後、加水
分解することにより目的化合物の対応する前駆体の化合
物（II−ａ）を得た。この化合物（II−ａ）を常法によ
り、紫外線照射、熱異性化を行ない、目的の活性型ビタ
ミンＤ誘導体である化合物（Ｉ−ａ）を得た。この活性
型ビタミンＤ誘導体の２５位エピマーは化合物(Ｘ)の代
わりに化合物(XI)を用いて得ることが出来た。またこの
化合物の２４位エピマーは化合物(Ｖ)のエナンチオマー
の化合物(VI)を使用することにより同様に合成すること
が出来た（反応スキ−ム１参照）。

【００１４】本発明の活性型ビタミンＤ誘導体である一
般式(Ｉ)においてＡがカルボニル基であり、Ｂがメチレ
ン基である化合物、すなわち、(２４Ｓ,２５Ｒ)−１α,
２５−ジヒドロキシビタミンＤ₄ ２８,２６ラクトン
（以下「化合物（Ｉ−ｂ）」と呼ぶ）は次の反応スキー
ム２に示される工程により製造することができる。

【００１５】

【化９】

【００１６】すなわち、化合物（Ｉ−ａ）の合成と同様
に、まず化合物(Ｖ)と化合物(VII)とを縮合して化合物
(XIII)とし、次いで側鎖二重結合をエポキシ化し、加水
分解して得られる二つのヒドロキシル基をアセトニドで
保護して化合物(XIV)とした。この化合物(XIV)の２４位
ヒドロキシメチル基をアルデヒド、カルボン酸及びその
エステルに順次変換し、化合物(XV)とした。この化合物
(XV)を酸性条件下、保護基を除去すると同時にラクトン
環が形成され、５,７−ジエン体である化合物（II−
ｂ）を得ることができた。この５,７−ジエン体である
化合物（II−ｂ）を高圧水銀灯等を用いて紫外線を照
射、さら熱異性化を行ない目的の化合物（Ｉ−ｂ）を得
た。２５位エピマ−は化合物(XV)の代わりに化合物(XV
I)を用いて製造することができた。また対応する２４−
エピマーはスルホン誘導体である化合物(Ｖ)の代わりに
化合物(VI)を用いることで達成することが出来た（反応
スキーム１および反応スキ−ム２参照）。

【００１７】このようにして得られた本発明の活性型ビ
タミンＤ誘導体は医薬、具体的には、骨量改善薬、分化
誘導薬、細胞増殖抑制薬または免疫調整薬としての用途
のために用いられる。さらにより具体的には骨量改善薬
として骨粗鬆症等の治療に、分化誘導および細胞増殖抑
制薬として癌等の治療に、免疫調整薬として癌、自己免
疫疾患等の治療または臓器移植の際に用いられる。

【００１８】活性型ビタミンＤ誘導体の骨量改善作用、
分化誘導作用、細胞増殖抑制作用および免疫調整作用
は、それぞれの作用のメカニズムは不明であるが、それ
ぞれの作用の強さに正の相関関係がある。また、本発明
の活性型ビタミンＤ誘導体は、１,２５−ジヒドロキシ
ビタミンＤ₃レセプターに対する結合性が弱く、副作用
である血中カルシウム濃度の上昇が弱い。

【００１９】これらの化合物は、経口的に、または非経
口的に投与され得るが、通常成人に対しては、１日あた
り０.０１μｇ〜１０００μｇ、好ましくは０.１μｇ〜
１００μｇの量で投与される。本化合物の製剤化に当た
っては、種々の剤形に製剤化することが可能であって、
例えば、錠剤、顆粒剤、散剤、液剤例えば注射剤などの
剤形が可能である。

【００２０】以下に本発明の活性型ビタミンＤ誘導体の
合成例、本発明の活性型ビタミンＤ誘導体の効果を示す
試験例および本発明の活性型ビタミンＤ誘導体の製剤例
を実施例によって示すが、これにより本発明が限定され
るものではない。

【００２１】

【実施例】 実施例１ （３Ｓ）−３−メチル−２−
スルホニルメチル−３−ブテン−１−オ−ル（化合物
(Ｖ)） 化合物(III)（５５ｇ）をピリジン（６００ml）に溶か
し、ベンゾイルクロリド（３０ｇ）を０℃で加えた。室
温で１夜攪拌した後、酢酸エチルで抽出、１０％塩酸、
ブラインで洗浄、乾燥し、濃縮した。残留物をエーテル
（２０００ml）に溶かし、メタンスルホニルクロリド
（５０ｇ）を０℃で加え１時間攪拌した。トリエチルア
ミンを同温度で加え、室温で１夜攪拌した。ブラインで
洗浄、乾燥後、濃縮した。残留物に１０％ＫＯＨ−エタ
ノール溶液（１５０ml）を加え、室温で１時間攪拌し
た。水を加え、酢酸エチルで抽出、ブラインで洗浄、乾
燥し、濃縮した。残留物（３０ｇ）をジメチルホルムア
ミド（以下「ＤＭＦ」という）（１５０ml）に溶かし、
イミダゾール（１５ｇ）、トリメチルシリルクロリド
（１５ｇ）を加え５０℃で１時間攪拌した。酢酸エチル
で抽出、ブラインで洗浄後、濃縮した。残留物をシリカ
ゲルクロマトグラフィーで精製し、標題の化合物(Ｖ)を
３６ｇ得た。¹ H-NMR（CDCl₃）δ：1.70(3H,s), 3.87(1H,m), 3.23,
3.44（各1H,m), 3.68-3.78(2H,bs), 4.75, 4.90（各1H,
m), 7.60-7.91(5H,m)。

【００２２】実施例２ （２４Ｓ）−５α,８α−（４
−フェニル−３,５−ジオキソ−１,２,４−トリアゾリ
ン）−６,２５−エルゴタジエン−１α,３β,２８−ト
リオールトリアセテート（化合物(VIII)） 化合物(Ｖ)（１０.０ｇ）をテトラヒドロフラン（以下
「ＴＨＦ」という）（１００ml）に溶かし、−４０℃に
冷却した。１.６Ｍ ｎ−ブチルリチウム（以下「ｎ−Ｂ
ｕＬｉ」という）(２０ml）、１,３−ジメチル−２−イ
ミダゾリノン（以下「ＤＭＩ」という）(５ml）を加え
３０分間攪拌した。化合物(VII)（１０.０ｇ）のＴＨＦ
溶液（５０ml）を同温度で加えた後、０℃で２時間、室
温で１時間攪拌した。飽和ＮＨ₄Ｃｌ水を加え、酢酸エ
チルで抽出、ブラインで洗浄後、濃縮した。残留物をメ
タノール（１００ml）に溶かし、Ｎａ₂ＨＰＯ₄（５
ｇ）、５％Ｎａ−Ｈｇ（６０ｇ）を加え一夜室温で攪拌
した。水銀を分離し、反応液を酢酸エチルで抽出、ブラ
インで洗浄後、乾燥、濃縮した。残留物を９０％エタノ
ール（５０ml）に溶かし、ｐ−トルエンスルホン酸（以
下「ｐ−ＴｓＯＨ」という）（２００mg）を加えて５０
℃で４時間加熱、攪拌した。クロロホルムで抽出、ブラ
インで洗浄、乾燥後、濃縮した。残留物をピリジン（３
０ml）に溶かし、無水酢酸（２５ml）を加え、９０〜１
００℃で８時間加熱、攪拌した。酢酸エチルで抽出、１
０％塩酸、飽和ＮａＨＣＯ₃液、ブラインで洗浄後、濃
縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製
し、標題化合物(VIII)を８.５ｇ得た。¹ H-NMR（CDCl₃）δ：0.83(3H,s), 0.95(6H,m), 1.65(3
H,s), 2.02-2.04(9H,m), 3.20(1H,m), 4.21(2H,m), 4.7
9(1H,m), 4.84(1H,m), 5.12(1H,m), 5.90(1H,m), 6.21,
6.40（各1H,ABq), 7.41(5H,m)。

【００２３】実施例３ （２４Ｒ,２５Ｒ）−１α,３
β,２８−トリアセトキシ−２５−ヒドロキシ−エルゴ
スタ−５,７−ジエン−２６−カルボン酸メチルエステ
ル（化合物(Ｘ)） 化合物(VIII)）（５.５ｇ）をクロロホルム（１００m
l）に溶かし、ｍ−クロロ安息香酸（以下「ｍ−ＣＰＢ
Ａ」という）（５ｇ）を加え、室温で１夜攪拌した。５
％Ｋ₂ＣＯ₃液、次いでブラインで洗浄し、濃縮した。残
留物（５.５ｇ）をＴＨＦ（１００ml）に溶かし、０.１
Ｎ Ｈ₂ＳＯ₄（５０ml）を加え、５５〜６０℃で５時間
攪拌した。酢酸エチルで抽出、飽和ＮａＨＣＯ₃水、次
いでブラインで洗浄後、濃縮し、残留物をシリカゲルク
ロマトグラフィー精製し、化合物(IX)を４.１ｇ得た。
化合物(IX)（４.０ｇ）をジクロロメタン（１００ml）
に溶かし、トリエチルアミン（２０ml）を加えた。Ｐｙ
・ＳＯ₃（１０ｇ）のジメチルスルホキシド（以下「ＤＭ
ＳＯ」という）（１００ml）溶液を滴下し、室温で１時
間攪拌した。酢酸エチルで抽出、ブラインで洗浄後、濃
縮した。残留物にｔ−ブタノール（１００ml）、２−メ
チル−２−ブテン（１５ml）を加え、ＮａＨ₂ＰＯ₄（３
ｇ）とＮａＣｌＯ₂（３ｇ）の水溶液（２０ml）を滴下
した。室温で１時間攪拌後、酢酸エチルで抽出、ブライ
ンで洗浄後、乾燥し、濃縮した。残留物にメタノール
（１００ml）を加え、反応液の色が淡黄色になるまでト
リメチルシリルジアゾメタンを加えた。酢酸エチルで抽
出、ブラインで洗浄後、濃縮した。残留物（２.５ｇ）
をキシレン（２５ml）に溶かし、１,８−アザビシクロ
〔５.４.０〕−ウンデセン（以下「ＤＢＵ」という）
（２ml）を加え、１時間加熱還流した。ブラインで洗浄
後、濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー
で精製し、化合物(Ｘ)を１.０ｇ、化合物(XI)を０.９ｇ
得た。¹ H-NMR (X)（CDCl₃）δ：0.78(3H,s), 0.96(6H,m), 1.4
1(3H,s), 2.02-2.03(9H,m), 3.22(1H,m), 3.82(3H,s),
4.22(2H,m), 5.22(2H,m), 5.48(1H,m), 5.65(1H,m)。¹ H-NMR (XI)（CDCl₃）δ：0.76(3H,s), 0.96(6H,m), 1.
40(3H,s), 2.02-2.03(9H,m), 3.24(1H,m), 3.85(3H,s),
4.21(2H,m), 5.23(2H,m), 5.48(1H,m), 5.66(1H,m)。

【００２４】実施例４ （２４Ｒ,２５Ｒ）−１α,３
β,２５−トリヒドロキシビタミンＤ₄２６,２８−ラク
トン（化合物（Ｉ−ａ）） 化合物(Ｘ)（１.０ｇ）に１０％ＫＯＨ−エタノール溶
液（１０ml）を加え、４０℃で２時間攪拌した。水を加
え、酢酸エチルで抽出、ブラインで洗浄後、濃縮し、残
留物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、化合物
（II−ａ）を０.７ｇ得た。¹ H-NMR（CDCl₃）δ：0.83(3H,s), 0.96(3H,s), 1.02(3
H,d), 2.00(3H,s), 3.74(1H,m), 4.08(1H,m), 5.37(1H,
m), 5.66(1H,m)。 化合物（II−ａ）（２００mg）をＴＨＦ（５００ml）に
溶かし、高圧水銀灯（４５０Ｗ）で１０分間紫外線照射
した。反応液を濃縮し、残留物にエタノール（１０ml）
を加え１時間、加熱還流した。エタノールを濃縮し、残
留物をＨＰＬＣで精製し、標題の化合物（Ｉ−ａ）を２
８ｍｇ得た。¹ H-NMR（CDCl₃）δ：0.56(3H,s), 1.04(3H,d), 1.4 4(3
H,s), 4.14(1H,m), 4.36(1H,m), 4.92(1H,m), 5.29(1H,
m), 6.02, 6.40（各1H, ABq)。

【００２５】実施例５ （２４Ｒ,２５Ｓ）−１α,３
β,２５−トリヒドロキシビタミンＤ₄２６,２８−ラク
トン 化合物(XI)（０.９ｇ）を実施例４と同様に処理して標
題化合物を２２ｍｇ得た。¹ H-NMR（CDCl₃）δ：0.56(3H,s), 1.05(3H,d), 1.42(3
H,s), 4.12(1H,m), 4.36(1H,m), 4.91(1H,m), 5.32(1H,
m), 6.02, 641（各1H,ABq)。

【００２６】実施例６ （２４Ｓ）−２８−アセトキシ
−５α,８α−（４−フェニル−３,５−ジオキソ−１,
２,４−トリアゾリジン）−６−エルゴステン−１α,３
β−ジオール １,３−ビステトラヒドロピラニルエーテ
ル（化合物(XIII)） 化合物(Ｖ)（１０.０ｇ）をＴＨＦ（１００ml）に溶か
し、−４０℃に冷却した。１.６Ｍ ｎ−ＢｕＬｉ（２０
ml）、ＤＭＩ（５ml）を加え３０分間攪拌した。化合物
(VII)（１０.０ｇ）のＴＨＦ溶液（５０ml）を同温度で
加えた後、０℃で２時間、室温で１時間攪拌した。飽和
ＮＨ₄Ｃｌ水を加え、酢酸エチルで抽出、ブラインで洗
浄後、濃縮した残留物をメタノール（１００ml）に溶か
し、Ｎａ ₂ＨＰＯ₄（５ｇ）、５％Ｎａ−Ｈｇ（６０ｇ）
を加え一夜室温で攪拌した。水銀を分離し、反応液を酢
酸エチルで抽出、ブラインで洗浄後、濃縮した。残留物
をピリジン（５０ml）に溶かし、無水酢酸（５ml）を加
え、９０℃で１時間攪拌した。飽和ＮａＨＣＯ₃溶液、
次いでブラインで洗浄後、濃縮した。残留物をシリカゲ
ルクロマトグラフィーで精製し、標題化合物(XIII)を１
２.５ｇ得た。¹ H-NMR（CDCl₃）δ：0.83((3H,s), 0.96(6H,m), 1.65(3
H,s), 2.03(3H,s), 3.20(1H,m), 3.48(2H,m), 3.72(1H,
m), 3.92(2H,m), 4.39(1H,m), 4.78(2H,m), 4.80(1H,
m), 4.89(1H,m), 4.93(1H,m), 6.21,6.40（各1H, ABq),
7.41(5H,m)。

【００２７】実施例７ （２４Ｓ）−２８−メトキシカ
ルボニル−１α,３β−ビステトラヒドロピラニロキシ
−５α,８α−（４−フェニル−３,５−ジオキソ−１,
２,４−トリアゾリジン）−６−エルゴステン−１α,３
β,２５,２６−テトロール ２５,２６−アセトナイド
（化合物(XV)） 化合物(XIII)（１２ｇ）をクロロホルム（１５０ml）に
溶かし、ｍ−ＣＰＢＡ（６ｇ）を加えて、室温で２時間
攪拌した。５％Ｋ₂ＣＯ₃液、次いでブラインで洗浄後、
濃縮した。残留物（１２ｇ）をＴＨＦ（１５０ml）に溶
かし、０.５ＮＨ₂ＳＯ₄（２０ml）を加えて、５０℃で
６時間攪拌した。クロロホルムで抽出、飽和ＮａＨＣＯ
₃液、次いでブラインで洗浄後、乾燥、濃縮した。残留
物をアセトン（１００ml）に溶かし、モレキュラーシー
ブ（４Ａ）（５ｇ）、ｐ−ＴｓＯＨ（１００mg）を加え
た。室温で２時間攪拌後、酢酸エチルで抽出した。ブラ
インで洗浄後、乾燥し、濃縮した。残留物をジクロロメ
タン（１５０ml）に溶かし、３,４−ジヒドロ−２Ｈ−
ピラン（以下「ＤＨＰ」という）（６ｇ）、ピリジニウ
ム−ｐ−トルエンンスルホナート（以下「ＰＰＴＳ」と
いう）（３００mg）を加えて、室温で５時間攪拌した。
ブラインで洗浄、乾燥後、濃縮した。残留物（５.４
ｇ）に１０％ＫＯＨ−エタノール（５ml）を加え、室温
で２時間攪拌した。酢酸エチルで抽出、ブラインで洗
浄、乾燥後、濃縮した。残留物（４.７ｇ）をジクロロ
メタン（１５０ml）に溶かし、トリエチルアミン（２０
ml）を加えた。Ｐｙ・ＳＯ₃（１２ｇ）のＤＭＳＯ（１５
０ml）溶液を滴下し、室温で１時間攪拌した。酢酸エチ
ルで抽出、ブラインで洗浄後、濃縮した。残留物にｔ−
ブタノール（１００ml）、２−メチル−２−ブテン（１
５ml）を加え、ＮａＨ₂ＰＯ₄（４ｇ）とＮａＣｌＯ
₂（４ｇ）の水溶液（４０ml）を滴下した。室温で１時
間攪拌後、酢酸エチルで抽出、ブラインで洗浄後、乾燥
し、濃縮した。残留物にメタノール（１００ml）を加
え、反応液の色が淡黄色になるまでトリメチルシリルジ
アゾメタンを加えた。酢酸エチルで抽出、ブラインで洗
浄後、濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィ
ーで精製して化合物(XV)を１.４ｇ、化合物(XVI)を１.
２ｇ得た。¹ H-NMR (XV)（CDCl₃）δ：0.78(3H,s), 0.95(6H,m), 1.
16(3H,s), 1.55(6H,s), 3.47(2H,m), 3.72,(1H,m), 3.9
3(2H,m), 4.78(2H,m), 4.93(1H,m), 6.22, 6.41（各1H,
ABq), 7.41(5H,m)。¹ H-NMR (XVI)（CDCl₃）δ：0.78(3H,s), 0.97(6H,m),
1.15(3H,s), 1.54(6H,s), 3.47(2H,m), 3.71(1H,m), 3.
95(2H,m), 4.78(2H,m), 4.94(1H,m), 6.22, 6.40（各1
H、ABq), 7.41(5H,m)。

【００２８】実施例８ （２４Ｓ,２５Ｒ）−１α,３
β,２５−トリヒドロキシビタミンＤ₄２８,２６ラクト
ン（Ｉ−ｂ） 化合物(XV)（１.０ｇ）を９５％エタノール（１０ml）
に溶かし、ＰＰＴＳ（２００mg）を加え、１時間加熱還
流した。クロロホルムで抽出、ブラインで洗浄、乾燥
後、濃縮した。残留物にキシレン（２０ml）、ＤＢＵ
（２ｇ）を加えて、１時間加熱還流した。ブラインで洗
浄後、濃縮し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー
で精製し、化合物（II−ｂ）を０.６ｇ得た。この５,７
−ジエンである化合物（II−ｂ）（２００mg）をＴＨＦ
（５００ml）に溶かし、高圧水銀灯（４５０Ｗ）で１０
分間紫外線を照射した。反応液を濃縮し、残留物にエタ
ノール（１０ml）を加え１時間、加熱還流した。エタノ
ールを濃縮し、残留物をＨＰＬＣで精製し、標題の化合
物（Ｉ−ｂ）を２９ｍｇ得た。¹ H-NMR（CDCl₃）δ：0.65(3H,s), 0.94(3H,d), 1.22(3
H,s), 4.22(1H,m), 4.44(1H,m), 5.01(1H,m), 5.34(1H,
m), 6.02, 6.39（各1H,ABq)。

【００２９】実施例９ （２４Ｓ,２５Ｓ）−１α,３
β,２５−トリヒドロキシビタミンＤ₄２８,２６ラクト
ン 化合物(XVI)（１.０ｇ）を実施例８と同様に処理して標
題の目的化合物を２４ｍｇ得た。¹ H-NMR（CDCl₃）δ：0.66(3H,s), 0.99(3H,d), 1.23(3
H,s), 4.22(1H,m), 4.42(1Hm), 5.11(1H,m), 5.44(1H,
m), 6.01, 6.41（各1H,ABq)。

【００３０】次に本発明の化合物の薬理効果を試験例に
よって示す。 試験例１ 化合物（Ｉ−ａ）および化合物（Ｉ−ｂ）の
１,２５−ジヒドロキシビタミンＤ₃レセプターに対する
親和性 本発明の活性型ビタミンＤ誘導体の１,２５−ジヒドロ
キシビタミンＤ₃レセプター（以下「ＶＤＲ」という）
に対する親和性を以下に示すレセプターラジオイムノア
ッセイ法（ＲＲＡ法）で検討した。ニワトリ小腸ＶＤＲ
２５ｍｇを０.３Ｍ塩化カリウムを含む５０ｍＭリン酸
バッファー（pH 7.4）１００ｍｌに溶解し、その５００
μlに〔³H〕ラベルされた１,２５−ジヒドロキシビタミ
ンＤ₃（以下「ＶＤ」という）１００００ｄｐｍおよび
各々種々の濃度の本発明のビタミンＤ誘導体化合物（Ｉ
−ａ）または化合物（Ｉ−ｂ）を加えて４℃で、２４時
間インキュベートした。その後、０.２５％デキストラ
ン−活性炭を２００μl添加して反応を止め、遠心分離
して得た上澄み５００μlの放射能を測定し、ＶＤＲに
結合した活性型ビタミンＤ誘導体の濃度と放射能の相関
曲線を作成した。上記相関曲線より、放射能が活性型ビ
タミンＤ誘導体が存在しないときの¹/₂となる場合の活
性型ビタミンＤ誘導体の濃度（Ｂ／Ｂ_Ｏ０.５）を算出
し、基準としたＶＤのＢ／Ｂｏ ０.５における濃度を１
としたときに、化合物（Ｉ−ａ）および化合物（Ｉ−
ｂ）の濃度をＶＤＲに対する相対結合能とした。結果を
表１に示す。

【００３１】

【表１】

【００３２】試験例２ 化合物（Ｉ−ａ）および化合物
（Ｉ−ｂ）の分化誘導活性 ヒト骨髄性白血病細胞（ＨＬ−６０）の分化誘導の指標
として化合物（Ｉ−ａ）および化合物（Ｉ−ｂ）のＮＢ
Ｔ還元能を測定した。ヒト骨髄性白血病細胞（ＨＬ−６
０）を１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ−１６４０培地で２
×１０⁵ cell／mlとなるように調整し、種々の濃度のＶ
Ｄ、および本発明のビタミンＤ誘導体化合物を添加し４
日間培養した。遠心分離して細胞を回収し、上澄みを除
いた後、０.２％ＮＢＴ、２００ng／ml ＴＰＡ（phorbo
l 12-myristate 13-acetate）を添加し３７℃で２０分
間インキュベートした。ＮＢＴが還元されて青く染まっ
た細胞（以下「ＮＢＴ還元能陽性細胞」という）数を測
定し、全細胞数に対する割合(％)を算出した。結果を表
２に示す。

【００３３】

【表２】

【００３４】試験例１および試験例２より本発明の活性
型ビタミンＤ誘導体は、その分化誘導活性が既知化合物
の活性型ビタミンＤ₃と同程度であるにも拘わらず、副
作用であるＶＤＲとの結合能が２／100〜３／100と少な
く、ＶＤＲ結合能と比例関係にある血中カルシウム濃度
上昇作用は弱い。

【００３５】次に本発明の化合物の製剤例を示す。 実施例１０ 錠剤の調製 化合物（I−ａ） １ｍｇ 乳糖 適量 結晶セルロース ５０ｇ シクロデキストリン ２０ｇ ステアリン酸マグネシウム ２.５ｇ 合 計 ２５０ｇ 上記した成分を均一に混和し、直打用粉末とした。これ
をロータリー式打錠機で一錠２５０ｍｇの錠剤１０００
錠を調製した。

【００３６】実施例１１ 注射剤の調製 化合物（I−ｂ） １ｍｇ ポリソルベート ２００ｍｌ プロピレングリコール ８００ｍｌ 塩化ナトリウム ２０ｇ 水酸化ナトリウム 適量 注射水 適量 上記した各成分を均一に混和し、全量を３０００ｍｌと
した。得られた溶液を無菌操作によりアンプルに３ｍｌ
ずつ分注しアンプルを溶閉した。

【００３７】実施例１２ 顆粒剤入りカプセル剤の調製 化合物（I−ａ） １ｍｇ 乳糖 適量 結晶セルロース ５０ｇ シクロデキストリン ２０ｇ ステアリン酸マグネシウム １ｇ 合 計 １００ｇ まず、上記した化合物（Ｉ−ａ）を少量のエタノールに
溶解し、次いで全体を均一に混和し、顆粒機にかけて顆
粒剤を調製した。これを１カプセル当たり０.５ｇ封入
したカプセル２００個を調製した。

【００３８】

【本発明の効果】本発明によって提供される新規な活性
型ビタミンＤ誘導体は、試験例１、２から見られるよう
に、副作用である血中カルシウム濃度上昇作用が弱いに
も拘わらず強い分化誘導作用を示し、優れた骨量改善作
用、分化誘導作用、細胞増殖抑制作用、免疫調整作用を
有する医薬としての効果が期待される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） // Ｃ０７Ｃ 401/00 Ｃ０７Ｃ 401/00

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 一般式(Ｉ) 【化１】 （式中、ＡおよびＢは、その一つがカルボニル基（Ｃ
   Ｏ）で他の一つがメチレン基（ＣＨ₂）であるものとす
   る）で示される活性型ビタミンＤ誘導体。
2. 【請求項２】 一般式(II) 【化２】 （式中、ＡおよびＢは、その一つがカルボニル基（Ｃ
   Ｏ）で他の一つがメチレン基（ＣＨ₂）であるものとす
   る）で示される活性型ビタミンＤ誘導体前駆体を紫外線
   照射に付し、次いで熱異性化することよりなる、一般式
   (Ｉ) 【化３】 （式中、ＡおよびＢは上記した意味を有する）で示され
   る活性型ビタミンＤ誘導体の製造方法。
3. 【請求項３】 請求項１記載の活性型ビタミンＤ誘導体
   を有効成分とする医薬。
4. 【請求項４】 骨量改善薬である請求項３記載の医薬。
5. 【請求項５】 分化誘導薬である請求項３記載の医薬。
6. 【請求項６】 細胞増殖抑制薬である請求項３記載の医
   薬。
7. 【請求項７】 免疫調整薬である請求項３記載の医薬。