HUT74881A - N-alkyl peptide chelate formers, their metal comlexes with radionuclides, processes for producing them and radio-pharmaceutical compositions containing these compounds - Google Patents

N-alkyl peptide chelate formers, their metal comlexes with radionuclides, processes for producing them and radio-pharmaceutical compositions containing these compounds Download PDF

Info

Publication number
HUT74881A
HUT74881A HU9601140A HU9601140A HUT74881A HU T74881 A HUT74881 A HU T74881A HU 9601140 A HU9601140 A HU 9601140A HU 9601140 A HU9601140 A HU 9601140A HU T74881 A HUT74881 A HU T74881A
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
cys
formula
ile
asp
leu
Prior art date
Application number
HU9601140A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9601140D0 (en
Inventor
Ludger Dinkelborg
Bernd Noll
Steffi Noll
Paul-Eberhard Schulze
Hartmut Spies
Original Assignee
Diagnostikforschung Inst
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Diagnostikforschung Inst filed Critical Diagnostikforschung Inst
Publication of HU9601140D0 publication Critical patent/HU9601140D0/hu
Publication of HUT74881A publication Critical patent/HUT74881A/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D457/00—Heterocyclic compounds containing indolo [4, 3-f, g] quinoline ring systems, e.g. derivatives of ergoline, of the formula:, e.g. lysergic acid
    • C07D457/04—Heterocyclic compounds containing indolo [4, 3-f, g] quinoline ring systems, e.g. derivatives of ergoline, of the formula:, e.g. lysergic acid with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached in position 8
    • C07D457/06—Lysergic acid amides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
    • A61K51/088—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins conjugates with carriers being peptides, polyamino acids or proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C327/00—Thiocarboxylic acids
    • C07C327/20—Esters of monothiocarboxylic acids
    • C07C327/26—Esters of monothiocarboxylic acids having carbon atoms of esterified thiocarboxyl groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D457/00—Heterocyclic compounds containing indolo [4, 3-f, g] quinoline ring systems, e.g. derivatives of ergoline, of the formula:, e.g. lysergic acid
    • C07D457/10—Heterocyclic compounds containing indolo [4, 3-f, g] quinoline ring systems, e.g. derivatives of ergoline, of the formula:, e.g. lysergic acid with hetero atoms directly attached in position 8
    • C07D457/12—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
    • C07J41/0033—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005
    • C07J41/0072—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005 the A ring of the steroid being aromatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J51/00—Normal steroids with unmodified cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton not provided for in groups C07J1/00 - C07J43/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/57536—Endothelin, vasoactive intestinal contractor [VIC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0806—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0827—Tripeptides containing heteroatoms different from O, S, or N

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Description

A találmány N-alkil-peptid-kelátképzőkre, e kelátképzök radionuklidokkal alkotott fémkomplexeire, e fémkomplexek előállítására és ezen vegyületeket tartalmazó radioterápiás készítményekre vonatkozik.
A találmány vonatkozik továbbá olyan radioterápiás készítményekre, amelyek ezeket a kelátokat fémekkel képzett komplex alakban tartalmazzák, azok diagnosztikai készleteire, amelyekben a kelát komplextől eltérő alakban is lehet, és az technécium- vagy réniumionok hozzáadása útján komplex vegyületté alakítható, továbbá ilyen készítmények diagnosztikai és terápiás célú alkalmazására.
Radioaktív izotópokkal jelzett anyagokat mindenekelőtt a gyógyászati diagnosztikában alkalmaznak belső szervek alakjában vagy működésében bekövetkezett változások vagy a testben lejátszódó kóros folyamatok változásainak megállapítására. Ilyen jellegű alkalmazás esetén a betegnek formuláit készítményt adnak be többek között a radioaktív anyagot tartalmazó injekciós oldat alakjában. Alkalmas detektorokkal (így γ-kamerával) a kibocsátott sugárzás regisztrálása útján leképezhetők az illető szervek, kóros folyamatok és azoknak a testben bekövetkező változásai; a szervekben vagy véredényekben bekövetkező különösen nagy mértékű dúsulások esetén gyógyászati készítményként szolgálnak.
Az elmúlt években növekedett az igény sajátos, radioaktív módon jelzett kémiai vegyületek iránt, amelyek úgynevezett hordozómolekulákhoz (így szteroidokhoz, antitestekhez, lipidekhez és proteohormonokhoz) kapcsolhatók és az úgynevezett „célzott hatóanyag” („Drug Targeting”) elve alapján hat83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 • ·
- 3 nak. Daganatok diagnózisa és gyógyítása, valamint receptorok megjelenítése (így szteroidkonjugátumok, antitestek és hasonlók) szempontjából különös érdeklődésre tartanak számot olyan anyagok, amelyek képesek átjutni a sejtfalon és a vér-agy-gáton, továbbá szervek működésének vizsgálatára, így szervátültetés előtt és után lefolytatott vizsgálatra és érbántalmak felderítésére szolgáló anyagok. A radioterápiás készítmény nagyobb szelektivitása és ezzel összefüggésben a megcélzott szervben radionuklid szignifikáns dúsulása érdekében számos radionuklid számára komplexképzőket fejlesztettek ki és kapcsoltak szövetekre vagy anyagcserére jellemző hordozómolekulákhoz. Gyógyászati célra igény mutatkozik a rénium radioaktív izotópjának alkalmazási lehetőségei iránt.
A leggyakrabban alkalmazott radionuklid a 99mTc, amely kedvező fizikai tulajdonságai (mentesség korpuszkuláris sugárzástól, kedvező fizikai felezési idő, 140 keV γ-sugárzás) és ennek következtében a csekély sugárterhelés alapján különösen megfelel in vivő diagnosztikai célú izotópként. A 99mTc gazdaságosan kinyerhető nuklidgenerátorokból [99mTc]-pertechnekát alakjában. 99mTc-kelátok kinyerésére a pertechnekátot alkalmas redukálószerek (így többek között SnCI2 és S2O4 2') útján alacsonyabb oxidációs fokú alakra hozzuk, amelyben a 99mTc kelátképzőkkel vagy proteinekkel komplex vegyületeket képez. Potenciális kelátképzők 99mTc-rnal való jelzésére és a klinikai gyakorlat igényeit szolgáló készletek előállítására sajátos eljárásokat fejlesztettek ki és ismertettek. Proteinek ily módon 99mTc-rnal jelezhetők közvetlenül a protein donorcsoportjain (többek között amino-, amid- és tiolcsoporton) keresztül [J.
83416-7319/VO/LZs
P96 01140 • ·
- 4 Nucl. Med. 27, 685 (1986)] vagy komplexképzők bevitele útján [US 4 479 930; Fritzberg, A. R. és munkatársai: J. Nucl. Med.
27, 957 (1986)].
A ciklusos aminok csoportjában is fejlesztettek ki komplexképzőket [Troutner, D. E. és munkatársai: J. Nucl. Med. 21, 443 (1980); DE-3 911 816]. Ugyancsak ismertettek ciklámokat [Ketring, A. R. Troutner, D. E. és munkatársai: J. Nucl. Med., 21, 443-448 (1980); Int. J. Nucl. Med. Bioi. 11, 113 (1984); Volkert és munkatársai: Applied Radiat. Isot., 33, 891-896 (1982)], N2O2-rendszereket [Pillái, M. R. A. Troutner, D. E. és munkatársai: Inorg. Chem. 29, 1850 (1991)], valamint N2S2-rendszereket [Bormans, G. és munkatársai: Nucl. Med. Bioi. 17, 499 (1990)] és N3S-rendszereket (EP-A-0 173 424 és EP-A-0 250 013).
Valamennyi felsorolt komplexképző azonban jelentős hátrányt mutat. A ciklámok és a szakirodalomból ismert N2O2-rendszerek [Pillái, M. R. A. és munkatársai: Inorg. Chem. 29, 1850-1856 (1990)] jelzéséhez is 10 és 13 közötti pH-értékek szükségesek. Ezekben a rendszerekben nincsenek továbbá olyan reakcióképes csoportok, amelyek lehetővé teszik a biomolekulákkal, illetve proteohormonokkal történő összekapcsolást. N2S2- és N3S-rendszerek ugyan kielégítő stabilitást mutatnak bizonyos esetekben, azonban csak egyszerű kiválasztási folyamatok tanulmányozására alkalmasak, mint amilyen a vizelet kiválasztása (EP-A-0 250 013). Jelenleg is folynak kutatások a szakirodalomból ismert MAG3 előállításának (EP-A-0 250 013) - ami a jelzéshez 100 °C hőmérsékletre történő hevítést igényel [Bannister, K. M. és munkatársai: J. Nucl.
83416-7319/VO/LZs
P96 01140 • ·
- 5 Med. 31, 1568-1573 (1990)] - egyszerűsítésére (WO 91/16076), ezek azonban még nem jutottak a klinikai kísérletek fázisáig.
N2S2-komplexek [Bormans, G. és munkatársai: Nucl. Med. Bioi. 17, 499 (1990)] esetén az elkészítés és a beadás közötti eltarthatóság 1 óránál rövidebb, ami jelentős hátrány. Ezen a területen is vannak törekvések a hátrányok kiküszöbölésére [Merryn, W. és munkatársai: Applied. Radiat. Isot. 42, (7), 607-612] - eddig azonban még klinikai adatok nélkül.
Az eddig ismertté vált komplexképzők egységes szerkezetűek, ezért diagnosztikai szempontból csupán egyetlen célra alkalmazhatók. A molekulaváltozatok az alapváz helyettesítőire korlátozódnak, ezért nem tesznek lehetővé széles körű gyógyászati alkalmazást, ami a komplex változatainál lehetséges lenne. Az egyes komplexek előállítása és tudományos vizsgálata terén tehát ezek a megoldások költségesek.
A találmány feladata technéciummal és réniummal szobahőmérsékleten széles pH-tartományban komplexeket képező rövid láncú N-alkil-peptid-kelátképzők kidolgozása, amelyekkel mind ionos, mind nemionos komplexek képezhetők, amelyek nem mutatják az ismert 99mTc- és 180, 188Re-komplexek hátrányait.
Ennek során egyidejűleg teljesíteni kell e vegyületek emberekben történő alkalmazása szempontjából a sugárdózis, stabilitás és oldhatóság terén fellépő előfeltételeket. Ezzel egyidejűleg a találmány feladata lehetőleg egyszerű eljárás kidolgozása e vegyületek előállítására, továbbá a találmány szerinti vegyületek/konjugátumok és fémkomplexeik klinikai alkalmazását szolgáló készlet/formulálás rendelkezésre bocsátása.
83416-7319/VO/LZs
P96 01140 • · • « * * · · · ··· ·· · · · ·· ···· ·· · · ·
- 6 A találmány értelmében ezt a feladatot azáltal oldjuk meg, hogy (I) általános képletü vegyületeket és azok gyógyászatilag elfogadható savakkal vagy bázisokkal képzett sóit bocsátjuk rendelkezésre
R3-S-CH2-CO-NR1-[CH2-CO-NH]n-CH2-CO-R2 (I) amely képletben n értéke 0, 1 vagy 2,
R1 jelentése 1-20 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport, amely adott esetben 1-3 oxigénatommal megszakított vagy helyettesített, és amelyhez adott esetben láncvégi -COOH, -OH vagy -NH2 képletü csoport kapcsolódik, amely adott esetben glikolsavval vagy glikolsav-észterrel vagy -éterrel észterezett vagy éterezett - ahol az észterek vagy éterek legfeljebb 18 szénatomos karbonsavakkal vagy alkoholokkal vannak kialakítva - vagy fenilvagy ciklohexilcsoport, amely adott esetben a 4-es helyzetben -COOH, -NH2 vagy -OH képletü csoporttal van helyettesítve, amely adott esetben 1-6 szénatomos karbonsavakkal vagy alkoholokkal észterezett, éterezett vagy amidált vagy halogénatommal helyettesített,
R2 jelentése halogénatom, halogén-metil-, metil-karboxil-, trifluor-metil-karboxil-csoport, -NH2 vagy -OH képletü csoport - ahol az R2=OH esetében képzett karboxilcsoport vagy közvetlenül vagy legfeljebb 8 szénatomos α,ω-hidroxi-karbonsavval lefolytatott észterezés után annak láncvégi karboxilcsoportján keresztül biológiailag hatásos molekulával, szteroiddal, ergolinszármazékkal, benzodiazepinszármazékkal, kolecisztokininnel, peptiddel, protein83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 « · » · · ·»» * ··· *9 9 · * »· ···· ·· * ··
- 7 nel, proteohormonnal, aminocukorral, endotelinnel, endotelinszármazékkal, endotelin-antagonistával vagy endotelinfragmentummal észterezett vagy amidéit (II) vagy (Ila) általános képletü csoport, ahol
R4 jelentése metilén-, propenilén-amino-, propinilén-amino-, metilén-amino- vagy metilén-oxi-csoport, és
R8 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport, (III) vagy (Illa) általános képletü csoport, ahol
R5 jelentése -NH-, -NH-CO-N<, -NH-CO-NH- képletü csoport vagy metilén-oxi-csoport,
R6 jelentése hidrogén- vagy halogénatom vagy metilcsoport, és
R7 jelentése hidrogénatom vagy legfeljebb 6 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport,
R3 jelentése hidrogénatom, acetil-, benzoil-, p-metoxi-benzil-, acetamido-metil-, benzamido-metil-, trimetil-acetamido-metil-, hidroxi-acetil-, etoxi-etil-, etil-tio- vagy tritilcsoport vagy könnyen lehasítható kénvédőcsoport, azzal a megkötéssel, hogy az (I) általános képletü vegyületek N-[2-(benzoil-tiol)-acetil]-N-ciklohexil-glicintől eltérőek.
Meglepő módon olyan vegyületcsoportot találtunk, amelynek révén nemcsak a fenti hátrányok kerülhetők el, hanem 99mTc+5-kornplexekként N3S -> N2SO -> S2O2 -> N2S2-N-alkil-peptid-komplexrendszerek átmenetét jelenti, és ezáltal széles tartományban alkalmazható komplexképzőként.
A (X) általános képlet az
R3S-CH2-CO-NR1[CH2-CO-NH]2-CH2-CO-R2
83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 általános képletü vegyületből N3S-N-alkil-peptid-komplexet mutat a (semleges) 99mTc-rnagban, a (XI) általános képlet az
R3S-CH2-CO-NR1[CH2-CO-NH]1-CH2-COOH általános képletü vegyületből N2OS-N-alkil-peptid-komplexet mutat a (semleges) 99mTc-rnagban, a (XII) általános képlet az
R3S-CH2-CO-NR1[CH2-CO-NH]0-CH2-COOH általános képletü vegyületből O2S2-N-alkil-peptid-komplexet mutat a (negatív töltésű) 99mTc-magban, és végül a (XIII) általános képlet az
R3S-CH2-CO-NR1[CH2-CO-NH]0-CH2-CO-R2 általános képletü vegyületből N2S2-N-alkil-peptid-komplexet mutat (a pozitív töltésű) 99mTc-rnagban.
A molekulavariáció révén keletkező komplexek biológiai viselkedésük tekintetében meglepően széles tartományt és egyezést mutatnak. E típusú vegyületek - bioligandumhoz kapcsolva olyan receptormegjelenítésre alkalmazhatók, amelyeket 99mTc-vegyületek esetén eddig nem ismertettek, és kitűnően alkalmazhatók érbántalmakkal kapcsolatos foltok megjelenítésére és a vesefunkció mérésére, amelynek során a vegyületek bioaktív ligandumokhoz kötött állapotban lehetnek.
Előnyösek azok a vegyületek, ahol R1 jelentése -CH2-(CH2)m-CH2- általános képletü csoport, amely képletben m értéke 1-től 14-ig terjedő szám, vagy R1 jelentése fenil-, p-fenil-amin-, ciklohexil-amin-, ρ-hidroxi-fenil-, 4-hidroxi-ciklohexil-, p-halogén-fenil- vagy 4-halogén-ciklohexil-csoport.
Előnyösek ezenkívül azok az (I) általános képletü vegyületek, ahol R1 jelentése -(CH2)q-OOC-CH2-OOC-(CH2)r-CH3 álta83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 lános képletű csoport, amely képletben q és r értéke egymástól függetlenül 1-től 16-ig terjedő egész szám.
Különösen előnyösek azok a (I) általános képletű vegyületek, ahol R1 jelentése 1-6 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport vagy p-bróm-fenil-csoport.
Előnyösek továbbá azok az (I) általános képletű vegyületek, amely képletben R2 jelentése (II) vagy (Ha) általános képletű csoport, ahol
R4 jelentése metilén-, propenilén-amino-, propinilén-amino-, metilén-amino- vagy metilén-oxi-csoport, és
R8 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport.
E szteroidok közül előnyösek a 17a-etinil-ösztradiolok vagy 3-metil-étereik.
Az ösztradiol egyik 17a-etinil-csoportja eténnel is kapcsolódhat. Az étin- és eténcsoportok sorrendje felcserélhető; az étin- vagy eténcsoportok megkétszerezése is célszerű. A kelátképző és az ösztradiolmolekula között fontos egy bizonyos minimális távolság, előnyösen egy merev étin- vagy eténcsoport annak érdekében, hogy az oldallánc ne lehessen visszahajló térbeli elrendezésben.
Ha az (I) általános képletű vegyület kötődése az ösztradiolváz ezen előnyös 17a-helyzetében következik be, a kapott kelátkomplex-bioligandum-vegyületek biológiai aktivitásában csak csekély csökkenés várható [Epperly M. W. és munkatársai: J. Steroid Biochem. Molec. Bioi. 39, 5A, 729-734 (1991)].
Ezen ösztrogén-kelát-komplexek nagy jelentősége abban a tulajdonságukban rejlik, hogy áthatolnak a sejtfalon és az ösztrogénreceptorra rakódnak. Ez különösen azon (I) általános
83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 • · képletű komplexképzőkre érvényes, ahol n értéke 2. 99mTc+5 esetén ezek az N3S-komplexek az N1-alkilezés következtében a Tc-magban semlegesek [lásd a (X) általános képletet). Míg töltéssel rendelkező komplexek, így N3S-komplexek tio-acetil-glicil-gIicil-glicil-O-észter típusú 17a-etinil-kelát szteroidként (saját kísérleteink szerint) nem képesek áthatolni a sejtfalon, a találmány szerinti N1-alkilezett komplexek (N1=metilcsoport) áthatolnak a sejtfalon, és intravénás injektálás után a méhben feldúsulnak. A dúsulás mértéke - vér/méh hányados alakjában kifejezve - 0,2. A dúsulás mértéke az N1-alkil-lánchosszúság, illetve a szubsztituensek függvényében változtatható. Ezáltal a SPECT-eljárás útján lehetségessé válik emlőelváltozások korai felismerése. Ehhez különösen előnyös a 10. példa szerinti vegyület.
Előnyösek továbbá azok az (I) általános képletű vegyületek, ahol R2 jelentése (III) vagy (Illa) általános képletű csoport, amely képletekben
R5 jelentése -NH-, -NH-CO-N<, -NH-CO-NH- vagy metilén-oxi-csoport,
R6 jelentése hidrogén- vagy halogénatom vagy metilcsoport, és
R7 jelentése legfeljebb 6 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport.
Ezek a (III) és (Illa) általános képletű vegyületek ergolinszármazékok.
Ezen ergolinszármazékok közül előnyös a 8a-amino-6-metil-ergolin, amely adott esetben a 2-es és/vagy 6-os helyzetben alkilcsoporttal helyettesített lehet, éspedig a 2-es hely83416-7319/VO/LZs
P96 01140 zetben 1 szénatomos vagy a 6-os helyzetben 1-3 szénatomos alkilcsoporttal és/vagy a 2-es helyzetben metilcsoporttal vagy halogénatommal. Az ergolin 8-as helyzetű helyettesítője az aNH2 csoporton kívül β-ΟΗ2Ο- vagy ocNH-CO-N< vagy aNH-CO-NH- képletü csoport is lehet.
A találmány szerinti (I) általános képletü vegyületekben a láncvégi kénatomhoz R3 csoport kapcsolódik. Ez az R3 csoport a kénatomra nézve védőcsoport, amelyre a találmány szerinti (I) általános képletü vegyületek szintézise során szükség van. Egy ilyen védőcsoportnak könnyen lehasíthatónak kell lennie. Alkalmas R3 csoportok többek között az acetil-, benzoil-, p-metoxi-benzil-, acetamido-metil-, benzamido-metil-, trimetil-acetamido-metil-, hidroxi-acetil-, etoxi-etil- vagy tritilcsoport. Különösen előnyös a benzoilcsoport.
A találmány továbbá radioaktív fémionok találmány szerinti (I) általános képletü vegyületekkel képzett fémkelátkomplexei, ahol R1, R2 és R3 jelentése a fenti. Alkalmas radioaktív fémionok többek között a Te, Re, Cu, Ga, Gd, Y és In elemek radioizotópjainak ionjai. A radionuklid kiválasztását az (I) általános képletü vegyületekkel képzett találmány szerinti fémkelátkomplexek kívánt alkalmazása szabja meg.
Radiodiagnosztikai vagy radioterápiai célra alkalmazott radionuklidok eltérőek.
Ehhez előnyösen a Te és Re elemek izotópjainak radioaktív fémionjait használjuk.
Különösen előnyös a 99mTc radioizotóp.
A találmány továbbá konjugátumok, amelyek (I) általános képletü vegyületeket vagy a Te, Re, Cu, Ga, Gd, Y és In ele83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 mek radioaktív fémionjainak (I) általános képletü vegyületekkel alkotott fémkelátkomplexeit és megbetegedett szövetekben vagy daganatokban szelektív módon dúsuló anyagokat tartalmaznak, amelyek között kovalens kötés van, és amelyek karboxi- vagy aminocsoportokat tartalmazó anyagok, így peptidek, proteinek, antitestek vagy azok fragmentumai esetén amid alakjában, vagy hidroxicsoportokat tartalmazó anyagok, így zsíralkoholok esetén észter alakban vagy aldehidcsoportokat tartalmazó anyagok esetén imid alakban vannak.
Előnyösek a megbetegedett szövetben dúsuló peptidekkel, így endotelinekkel, endotelinek rész-szekvenciáival, endotelin-analógokkal, endotelinszármazékokkal vagy endotelin-antagonistákkal képzett konjugátumok.
Különösen előnyösek az (I) általános képletü vegyületekkel és a megbetegedett szövetben dúsuló peptidekkel képzett konjugátumok, ahol a peptidek szekvenciái a következők:
Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-Tyr-Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-T rp-Leu-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-Tyr-Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-T rp,
Cys-Thr-Cys-Phe-Thr-Tyr-Lys-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-Tyr-Tyr-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-T rp,
83416-7319/VO/LZs
P96 01140
Cys-Ser-Ala-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Ala-Val-Tyr-Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
Cys-Ser-Cys-Asn-Ser-Trp-Leu-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-Tyr-Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
I I
Cys-Ser-Cys-Lys-Asp-Met-Thr-Asp-Lys-Glu-Cys-Leu-Asn-Phe-Cys-His-GIn-Asp-Val-Ile-T rp,
I I
Ala-Ser-Cys-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-Tyr-Phe-Ala-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
Ala-Ser-Ala-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Ala-Val-Tyr-Phe-Ala-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-T rp-Leu-Asp-Lys-Glu-Ala-Val-Tyr-Phe-Ala-His-Leu-Asp-Ile-Ile-T rp,
Cys-Val-Tyr-Phe-Cys-His-LeuAsp-Ile-Ile-Trp,
N-acetil-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Ala-Val-Tyr-Phe-Ala-His-Leu-Asp-Ile-Ile-T rp, vagy a
His-Leu-Asp-Ile-Ile-T rp rész-szekvenciák vagy a ciklo-(DT rp-DAsp-Pro-DVal-Leu), ciklo-(DGIu-Ala-alloDIIe-Leu-DTrp) ciklikus aminosavszekvenciák.
83416-7319/VO/LZs
P96 01140 • ·
- 14 A találmány továbbá eljárás a találmány szerinti (I) általános képletü vegyületek előállítására
R3-S-CH2-CO-NR1-[CH2-CO-NH]n-CH2-CO-R2 (I) az N-[2-(benzoil-tio)-acetil]-N-ciklohexil-glicin kivételével, amely képletben n értéke 0, 1 vagy 2,
R1 jelentése 1-20 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport, amely adott esetben 1-3 oxigénatommal megszakított vagy helyettesített, és amelyhez adott esetben láncvégi -COOH, -OH vagy -NH2 képletü csoport kapcsolódik, amely adott esetben glikolsavval vagy glikolsav-észterrel vagy -éterrel észterezett vagy éterezett - ahol az észterek vagy éterek legfeljebb 18 szénatomos karbonsavakkal vagy alkoholokkal vannak kialakítva - vagy fenilvagy ciklohexilcsoport, amely adott esetben a 4-es helyzetben -COOH, -NH2 vagy -OH képletü csoporttal van helyettesítve, amely adott esetben 1-6 szénatomos karbonsavakkal vagy alkoholokkal észterezett, éterezett vagy amidált vagy halogénatommal helyettesített,
R2 jelentése halogénatom, halogén-metil-, metil-karboxil-, trifluor-metil-karboxil-csoport, -NH2 vagy -OH képletú' csoport - ahol az R2=OH esetében képzett karboxilcsoport vagy közvetlenül vagy legfeljebb 8 szénatomos α,ω-hidroxi-karbonsavval lefolytatott észterezés után annak láncvégi karboxilcsoportján keresztül biológiailag hatásos molekulával, szteroiddal, ergolinszármazékkal, benzodiazepinszármazékkal, kolecisztokininnel, peptiddel, proteinnel, proteohormonnal, aminocukorral, endotelinnel, endotelin83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 származékkal, endotelin-antagonistával vagy endotelinfragmentummal észterezett vagy amidéit (II) vagy (Ila) általános képletü csoport, ahol
R4 jelentése metilén-, propenilén-amino-, propinilén-amino-, metilén-amino- vagy metilén-oxi-csoport, és
R8 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport, (III) vagy (Illa) általános képletü csoport, ahol
R5 jelentése -NH-, -NH-CO-N<, -NH-CO-NH- képletü csoport vagy metilén-oxi-csoport,
R6 jelentése hidrogén- vagy halogénatom vagy metilcsoport, és
R7 jelentése hidrogénatom vagy legfeljebb 6 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport,
R3 jelentése hidrogénatom, acetil-, benzoil-, p-metoxi-benzil-, acetamido-metil-, benzamido-metil-, trimetil-acetamido-metil-, hidroxi-acetil-, etoxi-etil-, etil-tio- vagy tritilcsoport vagy könnyen lehasítható kénvédőcsoport.
Az eljárás során úgy járunk el, hogy
a) glicin diketo-piperazin-származékát vagy
b) glicint halogén-karbonsav-halogeniddel és ezt követően (VI) általános képletü aminnal
R1 - NH2 (VI)
- amely képletben R1 jelentése az 1. igénypontban megadott - , majd újból halogén-karbonsav-halogeniddel és végül (IV) általános képletü vegyülettel
R3 - SH (IV)
83416-7319/VO/LZs
P96 01140
- amely képletben R3 jelentése az 1. igénypontban megadott reagáltatunk, vagy egy (V) általános képletü vegyületet
NH2-CH2-CO-R2(V)
- amely képletben R2 az 1. igénypontban megadott - egy halogén-karbonsav-halogeniddel és ezt követően (VI) általános képletü aminnal
R1 - NH2(VI)
- amely képletben R1 jelentése az 1. igénypontban megadott - , újból halogén-karbonsav-halogeniddel, végül pedig egy (IV) általános képletü vegyülettel
R3 - SH(IV)
- amely képletben R3 jelentése az 1. igénypontban megadott reagáltatunk, és adott esetben a kapott vegyületet gyógyászatilag elfogadható savval vagy bázissal sójává alakítjuk.
A találmány szerinti (I) általános képletü vegyületeket úgy is előállíthatjuk, hogy egy találmány szerinti (I) általános képletül vegyületből indulunk ki, amely képletben n értéke 0 vagy 1, ezt a vegyületet láncvégi csoportot tartalmazó vegyülettel reagáltatjuk, és ezáltal a fenti vegyülethez történő kapcsolás útján R2 csoportot alakítunk ki. Ennek során olyan találmány szerinti (I) általános képletü vegyületeket képezünk, ahol n értéke 1 vagy 2. Ez azt jelenti, hogy a találmány szerinti (I) általános képletü vegyületek láncának egy részét a hozzákapcsolt R2 csoporttal biztosítjuk.
83416-7319/VO/LZs
P 96 01140
A találmány ezenkívül radioaktív fémionok találmány szerinti (I) általános képletü vegyületekkel képzett találmány szerinti fémkelátkomplexeinek előállítása.
Az (I) általános képletü vegyületek átalakítása - adott esetben az R3 csoport előzetes vagy egyidejű lehasításával ismert módon folytatható le.
A Te és Re elemek radioaktív fémionjainak (I) általános képletü vegyületekkel alkotott fémkelátkomplexei előállítása során pertechnekát vagy perrenát alakjában lévő 99mTc-ot vagy Re-ot redukálószer és adott esetben segédligandum jelenlétében (I) általános képletü vegyülettel
R3-S-CH2-CO-NR1-[CH2-CO-NH]n-CH2-CO-R2 (I)
- amely képletben R1, R2 és R3 jelentése a fenti - reagáltatunk, azzal a megkötéssel, hogy az (I) általános képletü általános képletü vegyület az N-[2-(benzoil-tio)-acetil]-N-ciklohexil-glicintől eltérő.
Különleges találmányi jelentősége van a vegyületek és komplexeik meglepő variálhatóságának. Olyan (I) általános képletü vegyületek esetén, ahol n=2, N3S-rendszert kapunk. Ha n értékét 2 helyett 1-nek választjuk, meglepően nagy komplexstabilitású N2SO-N-alkil-rendszert kapunk. Végül n = 0 esetén az N^-N-alkil-rendszerből a komplexképzés során olyan kelátkomplex képződik, amely részint N2S2-N-alkil-rendszer, részint további dimerként O2S2-N-alkil-komplex anélkül, hogy a komplexet kovalens hídkötés kapcsolná össze.
Az új vegyületek klinikai alkalmazása kémiai variálhatóságuk és a komplexképzés változatai folytán rendkívül széles körű.
83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 • ·
- 18 Napjainkig sem ismeretes olyan eljárás, amely ateroszklerozis kezdeteként foltok képződését - in vivő - képszerűen megjeleníti. Az ateroszklerozis népbetegség és a szívkoszorúér-megbetegedés előzetes szakasza, az iparilag fejlett államok népességének mintegy 40%-a ennek következtében hal meg. Ezért különös jelentőséget kap, ha egyszerű eszközökkel elérhetővé válik az érbántalmak képszerű megjelenítése. A találmány szerinti N-alkil-kelátok így az ateroszklerozis okozta véredénybetegségek korai felismeréséhez alkalmazhatók.
Állatkísérletekben (I) általános képletü vegyületek intravénás beadása után a foltokban és a nem károsodott véredényben fellépő aktivitás hányadosa 1:5 volt (lásd az 1. és 2. ábrát), ahol az (I) általános képletben R2 jelentése endotelin, endotelin rész-szekvenciája, endotelin-analóg, endotelinszármazék vagy endotelin-antagonista. Az állatkísérletekhez WHHL típusú házinyulakat használtunk, amelyekben mesterségesen kiváltott ateroszklerotikus véredényváltozások voltak: a WHHL típusú nyulakban LDL receptorok hiánya vagy funkciózavara miatt a vér magas LDL-szintje miatt ateroszklerotikus véredényváltozások alakulnak ki.
Rendkívül meglepő volt, hogy a komplex - 6 szénatomos R1-alkillánca következtében fellépő - lipofil jellege ellenére már 3 óra múlva a tapasztalt mértékű kiválasztás lépett fel. Az aorta tartományában lévő érbántalmak autoradiográfiás úton feltűnően jól jeleníthetők meg. A molekulák zsírszerűsége következtében adott affinitás mutatkozik a foltokhoz vagy azok receptoraihoz, amelynek mértéke olyan nagy, hogy a vegyületnek a vérben - a máj által történő kiválasztás következtében 83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 csökkenő koncentrációja ellenére a foltokhoz történő tapadás megőrződik.
A véredények ateroszklerotikus változásainál a foltokhoz való affinitást az R1-alkil-csoport változtatása útján befolyásolhatjuk. Ily módon az R1 helyén lévő csoport tulajdonságai révén a lipofil jelleg szabályozható, és R2 szabad karboxilcsoport alakjában egyidejűleg biztosítja a jó vízoldhatósághoz szükséges előfeltételt. Az R2 helyén lévő szabad karbonsav helyett azonban ezen karboxilcsoport amino-szén-hidrogénnel lefolytatott amidálása is hozzájárulhat a vízoldhatósághoz.
Ismeretes, hogy proteinek, különösen rövid láncú proteohormonok, így endotelinek elvesztik hatékonyságukat, ha hozzájuk kovalens kötéssel kelátképző kapcsolódik. Teljesen váratlan volt ezért a találmány szerinti vegyületek viselkedése endotelinekhez, azok antagonistáihoz vagy fragmentumaihoz történő kovalens kapcsolás esetén (11. és 12. példa).
A találmány szerinti (I) általános képletü N-alkil-komplexképzők endotelinekkel kelátképzési előfokozatból történő generálásának itt bemutatott típusa ilyen komplexképzési helyek generálásának új eljárása. Az (I) általános képletü új N-alkil-komplexek stabilitása megfelel az ismert N3S-komplexekének.
Ateroszklerozis diagnosztizálásához ismertettek behatolásmentes eljárásokat, különösen radioaktív jódizotóppal végzett jelzést használva. így leírtak radioizotópokkal jelzett antitesteket vagy jelzett „kis sűrűségű lipoproteineket (LDL), amelyek az ateroszklerotikus érfaltartományokhoz kötődnek [Lees és munkatársai: J. Nucl. Med. 24, 154-156 (1983); Kaliman és munkatársai: Circulation 72, 300 (1985); Virgolini és munkatár83416-7319/VO/LZs
P96 01140 • · · ·
- 20 sai: Eur. J. Nucl. Med., 18, 944-947 (1991)]. Ezek az eljárások azonban jelentős hátrányokat mutatnak, ilyenek többek között az antitestek szervezetre gyakorolt antigén hatása, valamint a hosszú (több napra kiterjedő) időtartam, amelyre szükség van ahhoz, hogy a beteg véréből az LDL-t izolálják, tisztítsák és jelzéssel ellássák. Ezek a nagy molekulák azonban mindenekelőtt a vérben mutatott nagy felezési idejükkel tűnnek ki, amely - az egész testben fellépő nagy háttérsugárzással együtt megnehezíti az ateroszklerotikus érbántalmak lokalizálását, vagy akár lehetetlenné is teheti azt. Az irodalomban beszámoltak az LDL-proteinrész szintetikus rész-szekvenciáiról (apo-B-100), amelyek ugyan még kötődnek az anteroszklerotikus foltokhoz, azonban a vérben felezési idejük lényegesen rövidebb, és javított jel/zaj viszonyt mutatnak [Shih és munkatársai: Proc. Natl. Acad. Sci., 87, 1436-1440 (1990)]. A folthoz mutatott túl csekély affinitás és/vagy ezen peptideknek a foltokban lévő kötési helyeinek túl csekély sűrűsége miatt az ateroszklerozis eredményes in vivő diagnózisát ezekkel az apo-B-peptidekkel sem lehetett megvalósítani.
Ezen vegyületek esetén általános a radioaktív 123I hátránya. Ezek a ciklotronban történő előállítás miatt a nehéz hozzáférhetőség, a 13 óra fizikai felezési idő, továbbá a könnyű lehasíthatóság a szervezetben. így meglepő volt, hogy a találmány szerinti (I) általános képletü vegyületek az endotelin NH-csoportjához történő kovalens kötés és a 99mTc-mal való komplexképzés után az ateroszklerotikus foltokban jó dúsulást mutattak. Különösen feltűnő az az előny, hogy n = 1 és n=0 esetén a vegyületek kovalens kötéssel az endotelinekhez kap83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 csolódva amidképzés útján új N-alkil-peptid-komplexképzöket generálnak, adott esetben a mindenkori endotelin alkalmas helyzetű NH- és SH-csoportjainak részvételével.
A találmány szerinti vegyületeknek dopaminergiás bioaktív molekulákkal történő reakciója során ezeknek az ergolinsorból származó vegyületeknek a receptoraffinitása meglepő módon nem szűnik meg, hanem már az előállítás előzetes szakaszaiban - a D2-receptorhoz mutatott affinitással vagy anélkül - az agy kellő mértékű átjárhatóságát sikerült elérni, ami lehetővé teszi a D2 - receptorok megjelenítését. Az agyban lévő receptorok 99mTc+5- komplexekkel történő megjelenítésére tett kísérletek eddig eredménytelenek maradtak. így 8a-amino-6-metil-ergolin merkapto-acetil-glicil-glicil-glicinnel 8a-amiddá történő reakciója és 99mTc+5-mal történő komplexképzés esetén (Wistar típusú) patkányba történő intravénás injektálás után annak felvétele nem volt kimutatható az agyban.
Ezzel szemben ha a reakciót a találmány szerinti (I) általános képletü vegyületekkel folytatjuk le, amely képletben R1 jelentése metilcsoport, és az amidálást vagy észterezést az R2 csoporton keresztül folytatjuk le [(VIII) általános képletü vegyületek], analóg körülmények között a dózis 0,1-0,5%-a dúsul fel az agyban.
Olyan komplexek esetén, ahol n = 1 és n=0, új N-alkil-peptid-komplex-szerkezetek képződnek, amelyek a bioaktív molekulával együtt hatva meglepő módon dopaminergiás vegyületek szerkezetét utánozzák, és az agyban nagy mértékben dúsulnak, ami felhasználható a D-receptorok megjelenítéséhez [(IX) általános képletü vegyületek].
83416-7319/VO/LZs
P96 01140 * « · ·«· · • · · « · · · «« ···· · · · ·*
A találmány szerinti vegyületek előállítása a szakember számára ismert eljárásokkal történik [A Speciálist Periodical Report; Amino-acids, Peptides and Proteins; The Chemical Society, Burlington House, London, W1V0BN]. Olyan vegyületek előállítása során, ahol R1=CH3 és R2=OH, szarkozinból indulunk ki, és ezt klór-acetil-kloriddal reagáltatjuk. A kapott klór-acetil-szarkozint szokásos módon tiobenzoesavval reagáltatva olyan szerkezeteket kapunk, ahol n=0; (A) általános képletű vegyületek.
R3S-CH2-CO-N-(CH2-CO-NH)0-CH2-COR2 (A)
CH3
Olyan vegyületeket, ahol n=2, oly módon állítunk elő, hogy a glicin diketo-piperazinját klór-acetil-kloriddal reagáltatjuk. A kapott klór-acetil-glicil-glicint ezután N-metil-aminnal vagy hosszabb láncú csoportok bevitele céljából - N-alkil-aminokkal, feni l-am inokkal, alkil-oxa-alkil-aminokkal, cikloalkil-am inokkal vagy glicin-glikolsav-észterrel reagáltatjuk. Klór-acetil-kloriddal történő ismételt reagáltatást, majd tiobenzoilezést követően olyan vegyületeket kapunk, ahol n=2; (B) általános képletű vegyületek.
R3S-CH2-CO-N-(CH2-CO-NH)2-CH2-COR2 (B)
R1
R1 ennek során lehetővé teszi a szarkozil nitrogénatomján kialakított változatokat.
A megfelelő vegyületeket - ahol n = 1 - úgy kapjuk, hogy a glicin sóit N-védett szarkozilvegyületekkel reagáltatjuk vagy
83416-7319/VO/LZs
P96 01140 • « * · V ··· · ··· ·· ··· · ···· 4« · *·
- 23 glicint klór-acetil-kloriddal reagáltatunk, majd a klór-metil-csoportot ezt követően aminollzisnek vetjük alá. Klór-acetil-kloriddal lefolytatott ismételt reakció, majd tiobenzilezés útján kapjuk azokat a vegyületeket, ahol n = 1; (C) általános képletü vegyületek.
R3S-CH2-CO-N-(CH2-CO-NH)1-CH2-COR2 (C)
R1
Az (A), (B) és (C) általános képletü vegyületek szokásos módon reagálnak aminocsoportokat vagy hidroxilcsoportokat tartalmazó reakciópartnerekkel. Ebből a célból az (A) - (C) általános képletü vegyületeket N-metil-pirrolidonban oldjuk, BOP [B. Castro és munkatársai: Tetrahedron Letters 14, 1219 (1975)] vagy TBTU [Knorr és munkatársai: Tetrahedron Letters 30, 1927 (1989)] alkalmazásával előaktiváljuk, majd az aminokomponenssel reagáltatjuk. Észterezést előnyösen diciklohexil-karbodiimiddel folytatunk le dimetil-amino-piridin jelenlétében. Bioligandumként esztrogént tartalmazó vegyületek szintézise során olyan esztrogénből indulunk ki, amely a 17a-helyzetben már telítetlen helyettesítőt, így propargil-amin- vagy propargil-alkohol-csoportot tartalmaz, és ezt az ismertetett módon (A)-(C) általános képletü vegyülettel reagáltatjuk.
Az (A)-(C) általános képletü vegyületeket peptidekkel, különösen endotelinszármazékokkal a peptidkémiában szokásos módszerekkel vagy hagyományosan oldatban, előnyösen dimetil-formamidban, dimetil-acetamidban, N-metil-pirrolidonban, dimetil-szulfoxidban vagy e komponensek elegyeiben reagáltatjuk. A szilárd fázisú eljárás alkalmazásakor az aminokompo83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 • · w * · · · * «« ···· ·· * ·· nens acilezését szokásos körülmények között szintézisgyantán is lefolytathatjuk. A szintézisgyantáról történő lehasítás útján a kívánt vegyületeket kapjuk. Preparatív tisztítást - szükség esetén - kromatográfiás úton végezhetünk RP 18 típusú oszlopon víz/acetonitril-gradiens mellett, ahol az eluálószer 0,1 tömeg0/© trifluor-ecetsavat tartalmaz.
Aminocsoportokat vagy hidroxilcsoportokat tartalmazó ergolinokkal lefolytatott reakció esetén a peptidekkel oldatban lefolytatott reakciók analógiájára jártunk el. A reakciókat N-metil-pirrolidonban folytattuk le. A preparatív tisztítás szintén a peptidekre megadott módon történt.
A további R4 csoportokat a védett (A)-(C) általános képletú dipeptidek felépítése után kapjuk, amelynek során R1-et NH2-CH2CI, NH2-CH2-CH=CHI vagy NH2-CH2-C=CI képletú vegyülettel történő aktiválás után reagáltatjuk, ahol R2=OH, és a palládium-O-reakciót követően a 17a-etinil-szteroidot a kívánt komplexképzővel C-C kötés által kovalens módon összekapcsoljuk.
A komplexet előnyösen vizes közegben, 6 és 9 közötti pH-értéknél és szobahőmérsékleten képezzük nátrium-pertechnekát redukciója útján, amit többek között ón(II)-kloriddal vagy ditioniddal folytatunk le adott esetben segédligandumokon, így nátrium-citráton vagy nátrium-tartaráton keresztül, amelynek során az R3 védőcsoportot már előzőleg vagy in situ lehasítjuk.
Az R2=OH esetén keletkező R2 karboxilcsoport aktiválása vagy a karboxilcsoport NCS- vagy hasonló reakcióképes csoporttal történő helyettesítése azt eredményezi, hogy peptidkelátokat kovalens módon nagyobb proteinhez vagy proteo83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 hormonokhoz, endotelinekhez, endotelin-analógokhoz, endotelin-antagonistákhoz, endotelinszármazékokhoz, endotelinek rész-szekvenciáihoz kapcsolunk és utólag képezünk komplexeket.
Az előállítási eljárás leírásában ismertetett módon a találmány szerinti 99mTc- és 186,188Re-komplexek szobahőmérsékleten, semlegestől gyengén lúgos pH-ig terjedő kémhatású közegben átkelátozással (többek között heptaglukonát-99mTc-komplexen keresztül) vagy átkelátozás nélkül 95%-ig terjedő kitermeléssel állíthatók elő. A kapott komplexek szabad kation révén könnyen képeznek sót, ami jó vízoldhatóságot eredményez.
A fémkomplexek előállítása során a védőcsoport lehasítása szakember számára ismert eljárásokkal történik [T. N. Greene, John: Protective groups in organic synthesis, Wiley and Sons, 1981],
Humándiagnosztikai alkalmazás esetén szokásosan 370-1850 MBq, előnyösen 740-1480 MBq használatos. Az emberen történő alkalmazáshoz a találmány szerinti vegyületeket készlet alakjában készítjük elő. A készlet legalább egy (I) általános képletü kelátképzőt tartalmaz szabad vagy ligandumokhoz kötött alakban.
A találmány továbbá „hideg”-készlet, amely (I) általános képletü kelátképzőt tartalmaz szabad alakban vagy bioaktív molekulához, így ergolin-, ösztradiol- vagy endotelinszármazékhoz kapcsolva, és amely képes fématomot megkötni.
Gyakran jelentős nehézségekhez vezet a köztitermékeken a szintézis lefolytatásához alkalmazott védőcsoportok lehasítá83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 • ·
- 26 sa. Éppen peptidekhez kapcsolt kelátképzők károsodnak az -S-védőcsoport (R3) lehasításával egyidejűleg lejátszódó peptidlánchasadás útján, illetve képződnek a továbbiakban már nem hasznosítható molekulaszegmensek, ezért annál meglepőbb volt, hogy hidrogén/Pd/CaCO3 egyidejű jelenléte esetén, tehát hidrogénezési körülmények között lefolytatott védőcsoport-lehasítás során a szokásosan alkalmazott lúgos kémhatású anyagok jelenlétében nagy, akár 80%-ig terjedő mértékű lehasadás lép fel.
A szabad kelátkomplexek szintézisében bekövetkező ezen jelentős javulás azért nagy jelentőségű, mert ezáltal a védőcsoportok lehasítása megtörténhet a készlet formulálása előtt, és a védőcsoportmentes kelátképzők kinyerése műszakilag jelentősen javul. A 3. példában ismertetjük a találmány szerinti lehasítási eljárást. Míg a lúgos kémhatású anyagokkal végzett szokásos lehasítás során csak nagyon nehezen elválasztható elegyet kaptunk, a lúgos kémhatású anyagokkal hidrogén/Pd/CaCO3 jelenlétében lefolytatott védőcsoport-lehasítás közelítőleg 100%-os anyagkitermelést eredményezett, ahol a kívánt anyag részaránya meghaladta a 80%-ot.
Példaként megemlítjük, hogy az aminokkal, illetve alkoholokkal történő reakciót a karbonsav (R2=OH) aktiválása útján folytatjuk le, ennek során a szakember által ismert eljárásokat alkalmazunk.
Aktivált csoportokra példaként nevezhetők meg a savkloridok, vegyes anhidridek [Org. Prep. Proc. Int. 7, 215 (1975)], és aktivált észterek [Adv. Org. Chem. B, 472], A biomolekulákkal való összekapcsolás történhet közvetlenül vagy
83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 • ·
- 27 kapcsolótagon keresztül, ezzel összefüggésben a karbodiimid-módszert említjük [Fieser: Reagents fór Organic Synthesis 10, 142], Az összekapcsolást oly módon végezzük, hogy a kelét és a biomolekula között kovalens kötést alakítunk ki.
Biomolekulaként szteroidokat alkalmazva előnyösen a 17a-helyzetben helyettesített ösztradiolszármazékokat használunk. Ilyen vegyületek szintézisét az ösztradiol 17a-etinil-származékai esetére a szakirodalom ismerteti [Blickenstaff A.: Steroids 46, 889 (1985); USP 462.426]. Láncvégi NH2- vagy OH-csoportot és 17a-propargil-helyettesítőt tartalmazó ösztradiol származékok szintézisét is ismertették [Blickenstaff és munkatársai: Steroids 48, 223 (86); Brandes, A. és munkatársai: Disszertáció 87-01441 (1986), University of Illinois; D. Poirier és munkatársai: J. Steroids. Biochem. Molec. Bioi. 38, 6, 759-774 (1991)].
A szakirodalom áttekinti a kettes és hármas kötések öszszekapcsolását többek között a palládium-O-reakció szerint [Aldrich: Chimica Acta, 15, 1, (1982); Shunichi Murahashi és munkatársai, Stephen A. Godleski: Tetrahedron Letters, 22, 24, 2247-2250 (1981); Tetrahedron Letters, 29, 24, 2973-2976 (1988)]. Olyan (I) általános képletü vegyületet, amelynek képletében R2=-NH-CH2-C=CH, a megadott irodalmi helyek értelmében kapcsolunk össze többek között 17a-(2-halogén-etinil)-ösztradiollal.
A szakirodalomból ismert, hogy a 6-metil-8-helyettesített ergolin típusú ergotalkaloidák széles tartományban rendelkeznek kémiai változatokkal anélkül, hogy napjainkig felismerhető lenne a hatás és a 8-as helyzetű helyettesítők közötti össze83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 • · · · · · * • · · · · · ♦ ··· ·· · · · • · · · ·· ·· · · ·
- 28 függés [B. Berde és Η. O. Schild (szerkesztők): Ergot Alkaloids and Related Compounds, Springer-Verlag, Berlin, Heidelberg,
New York, 1978],
Előnyös dopaminergiás ligandum az ergolin. A 8-as helyzetben helyettesített ergolinok szintéziseiről a szakirodalom áttekintést ad [B. Berde és Η. O. Schild (szerkesztők): Ergot Alkaloids and Related Compounds, Springer-Verlag, Berlin, Heidelberg, New York, 1978, II. fejezet, J. Ruisemmann és P.
A. Stadlerj.
Előnyösen a δα-amino-, illetve δβ-hidroxi-metil-ergolinnal végzett reakciót használjuk. Ezt R2 helyén aktivált csoporttal folytatjuk le, amely többek között lehet benzotriazol-1-il-tetrametil-urónium-tetrafluor-borát, vagy alkalmazhatjuk az ismert karbodiimid-eljárást is.
A találmány értelmében n=1 és n=0 esetében komplexképzőkkel, illetve részleges komplexképzőkkel az ergolin 8a-amino- és 6-N-metil-csoportjában lévő nitrogénatom bevonásával új komplexeket generálunk.
A találmány továbbá a fémkelátok alkalmazása diagnosztikai és/vagy gyógyászati készítményekhez, amelyek legalább egy találmány szerinti (I) általános képletü kelátot tartalmaznak adott esetben a gyógyászatban szokásos adalékanyagok mellett.
A humán gyógyászatban való alkalmazáshoz a találmány szerinti vegyületek „hideg”- vagy „éles”-készlet alakjában vannak kiszerelve. A készlet szabad vagy kötött alakban legalább egy (I) általános képletü kelátképzőt tartalmaz, ahol a ligandumok előnyösen az ergolinok, ösztradiolok, endotelinek, rövid
83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 ·· ·
- 29 láncú szintetikus peptidek és kolecisztokininek osztályából származnak.
A találmányt a következőkben példákkal szemléltetjük.
Általános komplexképzés nátrium-glükonáttal 99mTc-glükonát előállítása ml 99mTc-eluátumot adunk 2 ml 0,1 mol/l koncentrációjú nátrium-glükonát-oldathoz, majd (0,01 mol/l koncentrációjú sósavban lévő) 10 μΙ 0,01 mol/l koncentrációjú SnCI2-oldattal reagáltatjuk. Ezt követően vékonyréteg-kromatográfiás eljárással (DC) vizsgáljuk a pertechnekát-redukció teljes lefolyását. DC (szilikagél/aceton): 99mTc-glükonát Rf: 0-0,1;
99mTcO4' Rf: 0,9.
1. példa [99mTc]-merkapto-acetil-szarkozin előállítása
1. lépés: klór-acetil-szarkozin ml 1 mol/l koncentrációjú nátrium-hidroxid-oldatban 0,07 mól szarkozint oldunk, és 0 °C hőmérsékleten részletekben hozzáadott 0,08 mól klór-acetil-kloriddal és 110 ml 1 mol/l koncentrációjú nátrium-hidroxid-oldattal reagáltatjuk. 45 perc múlva az adagolást befejezzük, és a reakcióelegyet 20 ml 5 mol/l koncentrációjú sósavoldattal megsavanyítjuk.
A terméket csökkentett nyomáson száraz állapot eléréséig betöményítjük, és a maradékot három alkalommal 50 ml hideg acetonnal extraháljuk. Az acetont csökkentett nyomáson eltávolítjuk, és a maradékot 100 ml dietil-éterrel extraháljuk. A dietil-étert elpárologtatjuk, és a visszamaradó olajat kevés dietil-éterrel felvesszük és intenzív keverés közben kristályosítjuk (kitermelés: 77%).
83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 • ·« · ·
DC: (szilikagél/2:1:1 térfogatarányú butanol - vízmentes ecetsav - víz) Rf: 0,65 (jódos bepárlás).
2. lépés: benzoil-merkapto-acetil-szarkozin
750 ml metanolban védőgáz-atmoszféra alatt 0,02 mól klór-acetil-szarkozint oldunk szobahőmérsékleten keverés közben. A kapott oldathoz lassan 0,041 mól tiobenzoesav 20 ml metanolban készített és nátrium-metiláttal semlegesített oldatát csepegtetjük, és a keverést további 12 órán át folytatjuk.
Az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk, és a maradékot 2 mol/l koncentrációjú sósavoldatban felvesszük. A reakciótermék barna olaj alakjában csapódik ki, amit a fölötte lévő oldattól elválasztunk és kloroformmal extrahálunk. A kloroformot csökkentett nyomáson eltávolítjuk, és a maradékhoz dietil-étert adunk. Hűtés és intenzív keverés közben a reakciótermék kicsapódik, amelyet szűrünk és agyagtányéron szárítunk. pH-mérés közben lefolytatott titrálás és az IR-spektrum szerint a reakciótermék 60% metil-észter és 40% szabad aminosav elegyéből áll.
3. lépés: a védőcsoport lehasítása
0,08 mmol kapott elegyet 2 ml abszolút metanolban szuszpendáltatunk, 2 mg (5 tömeg%-os) Pd/CaCO3 katalizátort adunk hozzá, majd 66 kPa hidrogénnyomás alatt keverés közben 0,13 mmol nátrium-metilát 1 ml abszolút metanolban készített oldatával reagáltatjuk. A keverést 15 percen át folytatjuk, majd az oldatot metanolos Dowex 50WX8 útján semlegesítjük. A katalizátort és a gyantát szűréssel eltávolítjuk, a kapott anyagot liofilizáljuk, és a szennyeződéseket 2 ml benzollal
83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 • · extraháljuk. Ezt követően a benzolt elválasztjuk, és a kapott anyagot etanolból liofilizáljuk.
A kapott, észterből és szabad savból álló termékelegyet Sephadex G10 típusú oszlopon elválasztjuk. A kromatográfiás eljárás (oszlop: 14 x 1000, 20 ml/h, Rl-detektor) során a merkapto-acetil-szarkozin-metil-észter a 2. frakcióként választható el (vesd össze az 1.a példával).
Merkapto-acetil-szarkozin
DC: (szilikagél/2:1:1 térfogatarányú butanol - vízmentes ecetsav - víz) Rf: 0,7 (ninhidrin)
RP 18/metanol Rf: 0,85 (ninhidrin) 1H NMR (DMSO): TMS δ 2,9 (SH, 1H), δ 3,1 (N-CH3, 3H), δ 3,9 (-CH2, 2H).
N-Metil-MAG1 jelzése ml 99mTc-glükonát-oldathoz 200 μΙ vízben oldott 1 mg N-metil-MAG1-ot adunk. 15-20 perc reakcióidő után a tisztaságot szilikagélen 60/95% etanollal lefolytatott DC útján ellenőrizzük. Az aktivitás nagy része (80%-a) az Rf=0,1 értékhez rendelhető, további csúcsok jelennek meg Rf=0,2 (10 %) és Rf=0,4 (10%) esetén. Az elektroferogramban anionos Tc-MAG1-komplex mutatható ki, amelynek relatív mozgékonysága (uPerteChn./uTcMAGi) 0,2.
.a példa
Az 1. példa 3. lépésében kapott reakcióelegyének elválasztása során színtelen olajként 20% merkapto-acetil-szarkozin-metil-észterhez jutunk.
83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 • « • ·
2. példa
Merkapto-acetil-hexil-amíno-ecetsav előállítása
1. lépés: hexil-amino-ecetsav
0,021 mól klór-ecetsavat 0,1 mól hexil-aminnal reagáltatunk, és a reakcióelegyet 5 napon át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezt követően a viszkózus szirupot 500 ml acetonban elkeverjük, ennek során fehér lemezkék alakjában 2,1 g reakciótermék kristályosodik ki (kitermelés: 63%).
DC: (szilikagél/2:1:1 térfogatarányú butanol - vízmentes ecetsav - víz) Rf: 0,6 (ninhidrin).
2. lépés: klór-acetil-hexil-amino-ecetsav
0,01 mól hexil-amino-ecetsavat 10 ml 1 mol/l koncentrációjú nátrium-hidroxid-oldatban oldunk, lehűtjük, majd 0 °C hőmérsékleten egymást követően 1,5 ml (1 ml=0,012 mól) klór-acetil-kloridot és 20 ml 1 mol/l koncentrációjú nátrium-hidroxid-oldatot adunk hozzá. 30 perc múlva a reakció befejeződik, ezt követően a keverést még 30 percen át enyhe melegítés közben folytatjuk. A reakcióelegyet 3 ml 5 mol/l koncentrációjú sósavoldattal megsavanyítjuk, és a kicsapódó barna olajat elválasztjuk.
Az olajat forró vízzel többször extraháljuk, és a kapott színtelen olajat további tisztítás nélkül használjuk fel a szintézis következő lépésében.
DC: (szilikagél/2:1:1 térfogatarányú butanol - vízmentes ecetsav - víz) Rf: 0,75 (jódos bepárlás).
3. lépés: benzoil-merkapto-acetil-hexil-amino-ecetsav
0,018 mól klór-acetil-hexil-aminosavat nitrogénatmoszféra alatt 500 ml metanolban keverünk. 0,036 mól tiobenzoesavat
83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 • · nátrium-metiláttal semlegesítünk és 30 perc alatt az oldathoz adagolunk. A keverést védőgáz alatt további 12 órán át folytatjuk. A metanolt csökkentett nyomáson eltávolítjuk, a maradékot 2 mol/l koncentrációjú sósavoldattal megsavanyítjuk, majd a kicsapódó sárga olajat elkülönítve 370 mg terméket kapunk.
DC: (sziIikagéI/2:1:1 térfogatarányú butanol - vízmentes ecetsav - víz) Rf: 0,5.
3. példa [99mjc]-merkapto-acetil-szarkozil-diglicin előállítása
1. lépés: klór-acetil-diglicin
Egy 250 ml térfogatú háromnyakú lombikban 10 g glicin-aldehidet 50 ml 2 mol/l koncentrációjú nátrium-hidroxid-oldatban szobahőmérsékleten oldunk. 45 perc múlva az oldatot 0 °C hőmérsékletre hűtjük, és a keverés és hűtés folytatása közben váltakozva 11,1 g klór-acetil-kloridot és 24 ml 5 mol/l koncentrációjú nátrium-hidroxid-oldatot csepegtetünk hozzá. Az adagolást 45 perc múlva befejezzük. Ezt követően 40 ml 5 mol/l koncentrációjú sósavoldatot adunk a reakcióelegyhez, ennek során az oldat színtelenné válik és a termék kezd kikristályosodni. A reakcióelegyet 1 órán át 0 °C hőmérsékleten állni hagyjuk, majd a folyadékot leszívatjuk. A kristályokat hideg vízzel több alkalommal mosva és forró vízből átkristályosítva 5 g terméket kapunk.
Az anyalúgot csökkentett nyomáson betöményítjük. A csapadékot vízből átkristályosítva 2,5 g terméket kapunk, olvadáspont: 173 °C.
DC: (szil i ka g é I/4:1:1 térfogatarányú n-butanol - vízmentes ecetsav - víz) Rf: 0,75 (jódos bepárlás).
83416-7319/VO/LZs
P96 01140 • · « · · · · • · · ··« · • · ···· «· · · ·
- 34 IR (szilárd állapotban KBr-ban):
Vc = o 1636, 1676; 1550; vcooh 1708 cm
2. lépés: szarkozil-diglicin g klór-acetil-diglicinhez 15 ml 33 tömeg%-os vizes metil-amin-oldatot adunk és két napon át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezt követően az oldatot csökkentett nyomáson szirupsűrűség eléréséig betöményítjük, a szirupot vízfürdőn felmelegítjük és 50 ml forró etanolt adunk hozzá. A keletkező csapadékot hidegen hagyjuk leülepedni, majd G4 típusú üvegszűrőn keresztül leszívatjuk. A csapadékot 43 ml forró vízben oldjuk és 43 ml forró etanolt adunk hozzá. A termék kikristályosodik, leszívatás és liofilizálás után 3 g 237 °C olvadáspontú terméket kapunk (kitermelés: 60%).
DC: (szilufol/4:1:1 térfogatarányú n-butanol - vízmentes ecetsav - víz) Rf: 0,3 (ninhidrin).
IR (szilárd állapotban KBr-ban):
Vq-q 1620, 1650; Önh 1540; vqqq^ 1672 cm 1H NMR (DMSO): TMS δ 2,8 (N-CH3, 3H), δ 3,8-4,1 (-CH2-, 6H).
3. lépés: klór-acetil-szarkozil-diglicin
Szobahőmérsékleten 2 g szarkozil-diglicint 10 ml 1 mol/l koncentrációjú NaOH-oldatban oldunk, majd 0 °C hőmérsékleten keverés közben váltakozva 1 ml klór-acetil-kloridot és 16 ml 1 mol/l koncentrációjú NaOH-oldatot adunk hozzá 30 percen belül. A keverést további 30 percen át folytatjuk, a reakcióelegyet 5 g 5 mol/l koncentrációjú HCI-oldattal megsavanyítjuk, és a terméket csökkentett nyomáson száraz állapot eléréséig betöményítjük. Az ennek során képződő kristályokat forró vízben
83416-7319/VO/LZs
P96 01140 • ·
- 35 oldjuk, majd az oldathoz etanolt adunk. A kicsapódó nátrium-kloridot szűrés útján eltávolítjuk, és a szűrletet csökkentett nyomáson betöményítjük. Egyenként 30 ml forró acetonnal végzett többszöri kezeléssel a kívánt terméket extraháljuk, az acetont csökkentett nyomáson eltávolítjuk, majd a maradékot kevés vízzel felvéve és liofilizálva 1,1 g 74 °C olvadáspontú terméket kapunk (kitermelés: 53%).
DC: (sziIufóI/4:1:1 térfogatarányú n-butanol - vízmentes ecetsav - víz) Rf: 0,7 (jódos bepárlás).
IR (szilárd állapotban KBr-ban):
vc=o 1655; Önh 1550; vcqoh 1730 cm
4. lépés: benzoil-merkapto-acetil-szarkozil-diglicin g klór-acetil-szarkozil-diglicint 140 ml analitikai tisztaságú metanolban keverés közben védőgáz alatt oldunk szobahőmérsékleten.
Egy Erlenmeyer-lombikban 0,8 g tiobenzoesavat 3 ml metanolban oldunk és nátrium-metiláttal semlegesítünk. Ezt az oldatot keverés közben védőgáz-atmoszféra alatt lassan a kiindulási oldathoz csepegtetjük, és a keverést további 12 órán át folytatjuk. Az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk, és a maradékot 2 mol/l koncentrációjú sósavoldattal felvesszük. Leszívatás és meleg vízzel semleges kémhatásúra történő mosás után 20 ml kloroformmal, 20 ml acetonitri11eI és 20 ml dietil-éterrel végzünk mosást, és a maradékot csökkentett nyomáson szárítva 0,83 g 134 °C olvadáspontú terméket kapunk (kitermelés: 61 %).
DC: (szilufol/4:1:1 térfogatarányú n-butanol - vízmentes ecetsav - víz) Rf: 0,8 (jódos bepárlás).
83416-7319/VO/LZs
P 96 01140
- 36 IR (szilárd állapotban KBr-ban):
vc=o 1620; δΝΗ 1550; vcooh 1720 cm
5. lépés: merkapto-acetil*szarkozil-diglicin
A védőcsoport lúgos lehasítása
A védőcsoport szokásos eljárás szerinti, nátrium-metiláttal történő lehasítása erősen elszennyeződött végterméket eredményezett, amelynek csupán mintegy 25%-a volt merkapto-acetil-szarkozil-diglicin. Egy nem azonosított melléktermék mellett ezen elszappanosítás során főleg merkapto-acetil-szarkozin és diglicin keletkezik. A kívánt terméket csak csekély kitermeléssel kapjuk.
Hidrogénezési körülmények között lefolytatott lúgos lehasítás
0,08 mmol anyagot 2 ml vízmentes metanolban szuszpendáltatunk, 2 mg (5 tömeg%-os) Pd/CaCO3 katalizátort adunk hozzá, és 60 kPa hidrogénnyomáson keverés közben 0,13 mmol nátrium-metilát 1 ml vízmentes metanolban lévő oldatával reagáltatjuk. A keverést 15 percen át folytatjuk, majd az oldatot metanolos Dowex 50WX8 útján semlegesítjük. A katalizátort és a gyantát szűréssel eltávolítjuk, a kapott anyagot liofilizáljuk és 2 ml benzollal extraháljuk. Ezt követően a benzolt elválasztjuk, és a kapott anyagot etanolból liofilizálva színtelen olaj alakjában 10,2 mg terméket kapunk (kitermelés: 61%).
DC: (szíIufol/4:1:1 térfogatarányú n-butanol - vízmentes ecetsav - víz) Rf: 0,4 (ninhidrin).
RP 18/ metanol
Rf = 0,8 (ninhidrin).
IR (szilárd állapotban KBr-ban):
83416-7319/VO/LZs
P96 01140 • ·
Vqxq 1650, 1680; δ^κ 1550; vqqqh 1745 cm 1H NMR (DMSO): TMS δ 2,8 (SH, 1H), δ 3,0 (N-CH3, 3H), δ 3,5-4,1 (-CH2, 8H), δ 8,1-8,2 (CO-NH-, 2H).
[9emTc]-merkapto-acetil-szarkozil-diglicin ml 99mTc-glükonát-oldathoz a 4. lépésből származó 0,4 mg tiszta anyag 0,5 ml vízben lévő oldatát adjuk. 30 perc múlva a reakció teljesen lejátszódik.
DC (60 típusú szilikagél, 95 térfogat% etanol): két komponenst kapunk - Rf: 0-0,1 (40%), Rf: 0,8 (60%).
Elektroforézis (pH = 7,0): mindkét komponens anionként vándorol.
4. példa [99mTc]-merkapto-acetil-hexil-g licil-d iglicin szintézise
1. lépés: hexil-gIicil-digIicin
0,0048 mól klór-acetil-dilgicinhez 0,05 mól hexil-amint és 5 ml etanolt adunk, és az elegyet állni hagyjuk. 6 nap múlva az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk. Az olajos maradványt 50 ml acetonhoz adjuk és felmelegítjük. Lehűtés után a sárga oldatot elválasztjuk, és a fehér maradványt 5 ml acetonnai ismételten mossuk. A terméket agyagtányéron szárítva
610,5 mg cím szerinti vegyületet kapunk (kitermelés: 47%).
DC: (szilufol/2:1:1 térfogatarányú n-butanol - vízmentes ecetsav - víz) Rf: 0,3 (ninhidrin).
RP 18 / metanol, Rf: 0,7 (ninhidrin).
2. lépés: klór-acetil-hexil-glicil-diglicin
0,0022 mól hexil-gIicil-digIicint 5 ml 1 mol/l koncentrációjú nátrium-hidroxid-oldatban oldunk, és a kapott oldatot 30 percig szobahőmérsékleten keverjük. Ezt követően az oldatot lehűt83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 ···
- 38 jük. 0 °C hőmérsékleten 30 percen át váltakozva 0,3 ml klór-acetil-kloridot és 4 ml 1 mol/l koncentrációjú nátrium-hidroxid-oldatot adunk hozzá. Ezt követően a keverést hűtés nélkül 30 percen át folytatjuk.
mol/l koncentrációjú sósavoldattal történő megsavanyitás után az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk, és a terméket sárga olaj alakjában kapjuk. Egyenként 100 ml forró acetonnal történő többszöri extrahálás után az acetont csökkentett nyomáson eltávolítjuk, és a maradékból 30 ml acetonnal zagyot képezünk. Az edény alján lévő fehér lerakódást agyagtányéron szárítva 311 mg terméket kapunk (kitermelés: 40%).
DC: (szíIufóI/2:1:1 térfogatarányú n-butanol - vízmentes ecetsav - víz) Rf: 0,75 (jódos bepárlás).
3. lépés: benzoil-merkapto-acetil-hexil-glicil-diglicin
0,00089 mól klór-acetil-hexil-glicil-diglicint 70 ml (mikroelektronikai rendeltetésre speciális tisztaságú) metanolban oldunk és (N2) védőgáz alatt keverünk. 0,002 mól tiobenzoesavat 5 ml metanolban oldunk és 0,4 ml nátrium-metanoláttal semlegesítünk. Ezt az oldatot védőgáz alatt lassan az első oldathoz adjuk, majd a keverést további 12 órán át folytatjuk. A metanolt csökkentett nyomáson eltávolítjuk, és a maradékot 2 mol/l koncentrációjú sósavoldattal felvesszük. A sósavat szintén csökkentett nyomáson eltávolítjuk, a maradékot vízzel mossuk, és a mosóvizet dekantálással eltávolítjuk. A viszkózus maradékhoz kevés metanolt adunk, ezt követően a termék kicsapódik. Acetonitrillel történő mosás és agyagtányéron végzett szárítás után 253,3 mg terméket kapunk (kitermelés: 67%).
83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 • · * · · · · · · • · · ·· ··» ·· ·«·· ·· · ··
- 39 DC: (szíIufol/2:1:1 térfogatarányú butanol - vízmentes ecetsav
- víz) Rf: 0,8 (UV).
4. lépés: markapto-acetil-hexil-g licil-diglicin
0,064 mmol (28,8 mg) benzoil-merkapto-acetil-hexil-glicil-diglicint 2 ml metanolban szuszpendáltatunk, 2,7 mg (5 tömeg%-os) Pd/CaCO3 katalizátort adunk hozzá, és a kapott elegyet hidrogénező berendezésbe visszük át. A berendezés egyik lombikjába 0,04 ml nátrium-metanolátot és 1 ml metanolt viszünk be. A berendezést evakuáljuk, majd hidrogénnel öblítjük.
A metanolátot a szuszpenzióhoz adjuk, és a keverést 60 kPa hidrogénnyomáson 15 percen át folytatjuk. Az oldatot metanolos Dowex 50WX8 útján megsavanyítjuk, a gyantát redős szűrőn keresztül (argonharang alatt) szűrjük, metanollal mossuk, ezt követően liofilizálást végzünk. A maradékot 3 alkalommal egyenként 4 ml benzollal extraháljuk, a benzolt dekantálással eltávolítjuk, a maradékot ismét etanollal felvesszük és liofilizáljuk. Sephadex típusú oszlopon végzett tisztítás után 9,8 mg terméket kapunk (kitermelés: 42%).
DC: (szilufol/2:1:1 térfogatarányú butanol - vízmentes ecetsav
- víz) Rf: 0,5 (ninhidrin).
1H NMR (DMSO): TMS δ 1,2 (-CH3, 3H), δ 3,1 (SH, 1H), δ 3,2 (N-CH2, 10H), δ 3,7 (-CH2, 6H) δ 3,8 (CH2-SH, 2H), δ 8,2-8,5 (-NH, 2H).
[99mTc]-merkapto-acetil-hexil-glicil-dig licin ml 99mTc-glükonát-oldathoz 400 μΙ 0,1 mol/l koncentrációjú NaOH-oldatot és 30 μΙ 4. lépés szerinti oldatot (1,63 mg/100 μΙ víz) adunk. 40 perc időtartamú állás után a reakcióelegyet 2 ml (7,0 pH-jú) 0,1 mol/l koncentrációjú nátrium-foszfát-puffer83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 « · • · • « · ·· · · ··« ·· ··· • · ···· ·· Β ··
- 40 -oldattal semlegesítjük. A reakcióelegy legalább 2 órán keresztül stabil.
DC (60 típusú szilikagél; 95 térfogat% etanol) Rf: 0,7 (95%). Elektroforézis (pH=7,0 mellett): vándorlás anion alakjában.
4a példa [99mTc]-merkapto-acetil-hexil-glicil-diglicin dúsulása WHHL típusú nyulak aortáinak ateroszklerotikus foltjaiban 99,9 GBq (2,7 mCi) 4. példa szerint jelzett anyagot foszfáttal pufferolt sóoldatban 1 ml térfogatra hígítottunk, és egy narkotizált WHHL típusú nyúlnak az egyik fülben lévő vénán keresztül beadtuk (Rompun/Ketavet (1:2). A beadást követő 5 óra múlva a nyulat megöltük, és lefolytattuk mind az aorták autoradiográfiás vizsgálatát, mind Sudan lll-színezékkel történő festését az ateroszklerotikus foltok megjelenítése céljából (1. ábra). A normál és ateroszklerotikus érfal-tartományok közötti dúsulási tényező a foltok kialakulásától (a Sudán III-színezékkel történő megfestődéstől) függően 3 és 5 között volt. Az in vivő megjelenítést a 2. ábra mutatja be egy WHHL típusú nyúl esetén.
5. példa
S-Bzl-acetil-Sar-Gly-Gly-[8a-ergolinil-amid] előállítása ml N-metil-pirrolidonban 200 mg S-BzI-acetil-Sar-Gly-Gly-OH-t és 161 mg benzotriazol-1 -il-tetrametil-urónium-tetrafluoro-borátot oldottunk, majd 172 μΙ diizopropil-etil-amint adtunk hozzá. 3 perc múlva a színtelen oldatot 120 mg 8a-amino-ergolin kevert oldatához csepegtettük. A vörösesbarna oldatot szobahőmérsékleten további 4 órán át keverjük, ennek során a
83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 ···· ·· ···· ~· ··»· • · « · · » • ·* · ··· 4 ··· ·· · * · ·* ···· ·· « '» reakció lefolyását HPLC útján követjük VYDAC C18 típusú (4,6 x 250 mm) oszlop és 25 perc alatt 10->60 térfogat% B eluálószer-komponens gradiens alkalmazása mellett (az eluálószer A komponense: 1000 ml víz + 2 ml trifluor-ecetsavanhidrid, az eluálószer B komponense: 500 ml acetonitril 100 ml víz + 1 ml trifluor-ecetsavanhidrid).
A reakcióelegyet további előkezelés nélkül (40 x 300 mm méretű) VYDAC típusú oszlopon preparatív módon elválasztjuk 20 perc alatt 20->30 térfogat% B komponens gradiens mellett (ahol az eluálószer összetétele a fenti). Ezt követően liofilizálás útján 75 mg terméket kapunk. Tömegspektrometriás vizsgálattal a várt molekulatömeget kaptuk.
6. példa
S-BzI-acetil-thT-hexilJ-Gly-Gly-Gly-lSa-ergolinil-amid] előállítása mg S-BzI-acetil-fN’-hexilj-Gly-Gly-Gly-OH-t és 40 mg benzotriazol-1 -il-tetrametil-urónium-tetrafluoro-borátot 0,6 ml N-metil-pirrolidonban szuszpendáltattunk és 17,2 μΙ diizopropil-etil-amin hozzáadása útján oldatba vittünk. Ezt az oldatot 30 mg 8a-amino-ergolin 0,4 ml N-metil-pirrolidonban lévő oldatához csepegtettük. 4 óra múlva a reakcióelegyet feldolgoztuk. A nyers reakcióelegyet (az 5. példában ismertetett módon) preparatív kromatográfiás eljárással kezeltük. Az ezt követő liofilizálás útján 30 mg pszeudokristályos kívánt terméket kaptunk. Tömegspektrométeres vizsgálat a várt molekulatömeget eredményezte.
83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 ·· · ·
7. példa
S-Bzl-acetil-Sar-Gly-[8a-ergolinil-amid] előállítása
180 mg S-BzI-acetil-Sar-Gly-OH-t és 161 mg benzotriazol-l-il-tetrametil-urónium-tetrafluoro-borátot 1 ml N-metil-pirrolidonban oldottunk és 172 μΙ diizopropil-etil-amint adtunk hozzá. 3 óra múlva a színtelen oldatot keverés közben 120 mg 8a-amino-ergolin oldatához csepegtettük. A vörösesbarna oldatot szobahőmérsékleten további 4 órán át kevertük, és - az 5. példában ismertetett módon - feldolgozva és kromatografálva 70 mg (pszeudokristályos) terméket kaptunk. Tömegspektrométeres vizsgálat a várt csúcsot mutatta.
8. példa
S-Bzl-acetil-Sar-[8a-ergolinil-amid] előállítása
120 mg S-BzI-acetil-Sar-OH-t és 161 mg benzotriazol-1-il-tetrametil-urónium-tetrafluoro-borátot 1 ml N-metil-pirrolidonban oldottunk és 172 μΙ diizopropil-etil-amint adtunk hozzá. A reakciót az 5. példában ismertetett módon lefolytatva a feldolgozás és elválasztás után 52 mg pszeudokristályos vegyületet kapunk; tömegspektrométeres vizsgálat a várt tömegcsúcsot mutatja.
9. példa
3,17p-Dihidroxi-17a-[5-(S-benzoil-tio-acetil-szarkozil-gíicil)-amino-pent-1-en-3-in]-1,3,5-ösztratrién előállítása ml toluolban szuszpendált 130,0 mg 17P-hidroxi-17a-jód-vinil-1,3,5-ösztratién-3-tetrahidropiranil-éter szuszpenziójához 0,35 g S-benzoil-tioacetil-szarkozil-glicil-propargil-amidot, 11,0 mg benzil-trietil-ammónium-kloridot, 11,5 mg tetrakisz-(trifenil
83416-7319/VO/LZs
P96 01140 • ·
- 43 -foszfin)-palládium(0)-ot és 9 mg réz(l)-jodidot adunk, és a kapott elegyet 90 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyhez vizet adunk, toluollal extraháljuk és szárítjuk. Az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk, a maradékot 10 ml tetrahidrofuránban felvesszük, 5 ml etanolban lévő 190 mg piridínium-para-toluolszulfonsavat adunk hozzá, majd visszacsepegő hűtő alatt 3 órán át forraljuk. Ezt követően az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk, és a cím szerinti vegyületet szilikagél töltetű oszlopon (8:1 térfogatarányú) metilén-klorid/metanol eleggyel tisztítva 30%-os kitermeléssel kapjuk.
DC (5:5 térfogatarányú CH2CI2/MeOH) Rf: 0,4.
10. példa
3,17p-Dihidroxi-17a-[N-(benzoil-tio-acetil-szarkozil-g I ici l)-ami no-propin-1 ]-1,3,5-ösztratrién előállítása
110 mg 17p-hidroxi-17a-propargil-amino-1,3,5-ösztratrién-3-tetrahidropiranil-éter 3 ml DMF-ban lévő szuszpenziójához 3 ml DMF-ban 350 mg S-benzoil-tio-acetil-szarkozil-glicint adunk. A kapott elegyet 24 órán át 100 °C hőmérsékleten védőgáz alatt keverjük. 10 ml tetrahidrofurán hozzáadása után a kikristályosodott anyagot leszívatjuk és csökkentett nyomáson betöményítjük. A maradékot 20 ml tetrahidrofuránban felvesszük, 3 ml etanolban oldott 100 mg piridínium-para-toluolszulfonsavat adunk hozzá, majd 1 órán át visszacsepegő hűtő alatt forraljuk. Az oldószer eltávolítása után kis nyomású szilikagél oszlopon (1:8 térfogatarányú) metanol/metilén-klorid rendszerben lefolytatott tisztítás után 71 mg terméket kapunk.
DC (5:5 térfogatarányú CH2CI2/MeOH) Rf: 0,6.
83416-7319/VO/LZs
P96 01140 • · * * · · · · « ·· ···· *· ·
11. példa ml DMF-ban 344 μΙ diizopropil-etil-amin hozzáadása mellett 0,001 mól S-BzI-acetil-Sar-Gly-OH-t és 322 mg benzotriazol-1-il-tetrametil-urónium-tetrafluoro-borátot oldunk. A benzotriazolil-észter képződése érdekében 5 percen át előaktiválást végzünk, majd a tiszta oldatot 33 mmol védett His(Trt)-Leu-Asp(OBut)-Ile-Ile-Trp-gyantához adjuk. A szuszpenziót 1 órán át keverjük, majd DMF-dal több alkalommal mossuk, leszívatjuk és szárítjuk. A szárított gyantát ezután - a védőcsoportoknak a termékről történő lehasítása céljából - szokásos módon TFA/tisztítóanyag útján kezeljük. A tisztítást az 5. példában ismertetett módon folytatjuk le.
A 10. példának megfelelően kapott vegyületet az általános eljárás (1. példa) szerint 99mTc-mal komplex vegyületté alakítjuk.
12. példa
Sasrin-gyantán előállított 0,010 mól His(Trt)-Leu-Asp(OBut)-Ile-Ile-Trp-OH-t DMF/NMP elegyében 0,010 mól diizopropil-etil-amin hozzáadása mellett oldunk, és keverés közben 3 ml DMF-ban oldott 0,010 mól - a 11. példa szerint előkészített - S-BzI-acetil-Sar-OH-t adunk hozzá. A kapott elegyet 2 órán át keverjük, majd az oldószert eltávolítjuk. A kapott maradékot vízzel elkeverjük, leszívatjuk, mossuk és szárítjuk. A védőcsoportokat szokásos módon eltávolítjuk, majd az elegyet dietil-éterbe öntve a terméket kapjuk. A tisztítást az 5. példában ismertetett módon folytatjuk le.
83416-7319/VO/LZs
P 96 01140 • ·
- 45 S-Bzl-acetil-[N14-bróm-fenil]-Gly-Gly-Gly-0H
1. lépés: klór-acetil-diglicin
Egy 250 ml térfogatú háromnyakú lombikban szobahőmérsékleten 10 g glicinanhidridet oldunk 50 ml 2 mol/l koncentrációjú nátrium-hidroxid-oldatban. 45 perc múlva a még zavaros oldatot 0 °C hőmérsékletre hűtjük, és keverés közben váltakozva 11,1 g (7,8 ml) klór-acetil-kloridot és 24 ml 5 mol/l koncentrációjú nátrium-hidroxid-oldatot csepegtetünk hozzá. Az adagolást 45 perc múlva befejezzük. Az oldat halvány rózsaszínűre színeződik. 40 ml 5 mol/l koncentrációjú sósavoldat hozzáadása után az oldat elszíntelenedik, és az anyag kezd kikristályosodni. Az elegyet 1 órán át 0 °C hőmérsékleten állni hagyjuk, majd a csapadékot leszívatjuk. A csapadékot hideg vízzel több alkalommal mosva és forró vízből átkristályosítva 5 g 173-174 °C olvadáspontú terméket kapunk.
Az anyaglúgot csökkentett nyomáson betöményítjük, majd a maradékot szintén vízből átkristályosítva 2,5 g 173 °C olvadáspontú terméket kapunk.
A termék tömege összesen 7,5 g (kitermelés: 41%).
DC: (szilufol/4:1:1 térfogatarányú n-butanol - vízmentes ecetsav - víz).
2. lépés: 4-bróm-fenil-triglicin
0,0144 mól klór-acetil-diglicint 20 ml etanolban és 20 ml 1 mol/l koncentrációjú NaOH-oldatban lévő 0,029 mól 4-bróm-anilinnal 7 órán át visszacsepegő hűtő alatt forralunk. Az oldószer csökkentett nyomáson való eltávolítása után a visszamaradó maradékot egyenként 50 ml meleg acetonnal háromszor extraháljuk. A visszamaradó terméket forró vízből átkristá83416-7319A/O/LZs
P96 01140 • · 4· • · · •· · · •4 4444·· lyosítjuk. A kapott nyers terméket a 3. lépésben használjuk fel (kitermelés: 60%).
3. lépés: 4-bróm-fen il-triglicin klór-acetilezése
Szobahőmérsékleten 0,01 mól 4-bróm-fenil-triglilcint 10 ml 1 mol/l koncentrációjú NaOH-oldatban oldunk, majd 0 °C hőmérsékleten keverés közben felváltva 0,012 mól klór-acetil-kloridot és 20 ml 1 mol/l koncentrációjú NaOH-oldatot adunk hozzá 30 perc alatt. A keverést további 30 percen át folytatjuk, az elegyet 5 mol/l koncentrációjú sósavoldattal megsavanyítjuk, majd a terméket csökkentett nyomáson száraz állapot eléréséig betöményítjük. Az ennek során kapott kristályokat forró vízben oldjuk, és a kapott oldathoz etanolt adunk. A kicsapódó nátrium-kloridot szűréssel eltávolítjuk, és a szűrletet rotációs bepárlóval betöményítjük. Egyenként 30 ml forró acetonnal végzett többszöri kezelés útján a kívánt terméket extraháljuk, az acetont csökkentett nyomáson eltávolítjuk, és a maradékot kevés vízzel felvéve és liofilizálva a kívánt terméket kapjuk (kitermelés: 50%).
DC: (szilufol/2:1:1 térfogatarányú n-butanol - vízmentes ecetsav - víz) Rf: 0,6.
4. lépés: S-Bzl-acetil-[N1-bróm-fenilJ-Gly-Gly-Gly-OH
0,01 mól klór-acetil-terméket 140 ml metanolban keverés közben és védőgáz alatt szobahőmérsékleten oldunk. Ehhez 0,02 mól tiobenzoesavat 20 ml metanolban oldunk, nátrium-metiláttal semlegesítünk, majd keverés közben védőgáz alatt lassan a fenti oldathoz csepegtetünk, és a keverést további 12 órán át folytatjuk. Az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk, és a maradékot 2 mol/l koncentrációjú HCI-oldatban fel83416-7319/VO/LZs
P96 01140 • · · · vesszük. Az ennek során képződő kristályokat leszívatjuk, majd meleg vízzel semlegesre mossuk. Ezt követően 20 ml kloroformmal, 20 ml acetonitrillel és 20 ml dietil-éterrel lefolytatott mosás és a maradék csökkentett nyomáson történő szárítása útján a terméket kapjuk (kitermelés: 60%).
5. lépés: tio-acetíl-tN’-bróm-fenilj-Gly-Gly-Gly-OH
0,00 mmol 4. lépés szerinti anyagot 2 ml vízmentes metanolban szuszpendáltatunk, 2 mg (5 tömeg%-os) Pd/CaCO3 katalizátort adunk hozzá, és 66 kPa hidrogénnyomáson keverés közben 1 ml abszolút metanolban lévő 0,13 mmol nátrium-metiláttal reagáltatjuk. A keverést 15 percen át folytatjuk, majd az oldatot metanolos Dowex 50WX8 útján semlegesítjük. A katalizátort és a gyantát szűréssel eltávolítjuk, a terméket liofilizáljuk és 2 ml benzollal extraháljuk. Ezt követően a benzolt elválasztjuk, és a terméket etanolból liofilizáljuk. A tisztítást preparatív HPLC útján folytatjuk le.
DC: (szilufol/2:1:1 térfogatarányú butanol - vízmentes ecetsav - víz) Rf: 0,8.
Kitermelés: 40%.
mTc-[Tioacetil-(N1-bróm-fenil)-Gly-Gly-Gly-OH
Az általános komplexképzésről az 1. példa előtt leírtak szerint a tioacetil-[N1-bróm-fenil]-Gly-Gly-Gly-OH-t [99mTc]-glükonát-készítménnyel reagáltatjuk.

Claims (18)

  1. Szabadalmi igénypontok
    1. (I) általános képletü vegyületek és azok gyógyászatilag elfogadható savakkal vagy bázisokkal alkotott sói
    R3-S-CH2-CO-NR1-[CH2-CO-NH]n-CH2-CO-R2 (I) az N-[2-(benzoil-tio)-acetil]-N-ciklohexil-glicin kivételével, amely képletben n értéke 0, 1 vagy 2,
    R1 jelentése 1-20 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport, amely adott esetben 1-3 oxigénatommal megszakított vagy helyettesített, és amelyhez adott esetben láncvégi -COOH, -OH vagy -NH2 képletü csoport kapcsolódik, amely adott esetben glikolsavval vagy glikolsav-észterrel vagy -éterrel észterezett vagy éterezett - ahol az észterek vagy éterek legfeljebb 18 szénatomos karbonsavakkal vagy alkoholokkal vannak kialakítva - vagy fenilvagy ciklohexilcsoport, amely adott esetben a 4-es helyzetben -COOH, -NH2 vagy -OH képletü csoporttal van helyettesítve, amely adott esetben 1-6 szénatomos karbonsavakkal vagy alkoholokkal észterezett, éterezett vagy amidált vagy halogénatommal helyettesített,
    R2 jelentése haiogénatom, halogén-metil-, metil-karboxil-, trifluor-metil-karboxil-csoport, -NH2 vagy -OH képletü csoport - ahol az R2=OH esetében képzett karboxilcsoport vagy közvetlenül vagy legfeljebb 8 szénatomos α,ω-hidroxi-karbonsavval lefolytatott észterezés után annak láncvégi karboxilcsoportján keresztül biológiailag hatásos molekulával, szteroiddal, ergolinszármazékkal, benzodia83416-7319/VO/LZs
    P 96 01140 • · · · zepinszármazékkal, kolecisztokininnel, peptiddel, proteinnel, proteohormonnal, aminocukorral, endotelinnel, endotelinszármazékkal, endotelin-antagonistával vagy endotelinfragmentummal észterezett vagy amidéit -, (II) vagy (Ila) általános képletü csoport, ahol
    R4 jelentése metilén-, propenilén-amino-, propinilén-amino-, metilén-amino- vagy metilén-oxi-csoport, és
    R8 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport, (III) vagy (Illa) általános képletü csoport, ahol
    R5 jelentése -NH-, -NH-CO-N<, -NH-CO-NH- képletü csoport vagy metilén-oxi-csoport,
    R6 jelentése hidrogén- vagy halogénatom vagy metilcsoport, és
    R7 jelentése hidrogénatom vagy legfeljebb 6 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport,
    R3 jelentése hidrogénatom, acetil-, benzoil-, p-metoxi-benzil-, acetamido-metil-, benzamido-metil-, trimetil-acetamido-metil-, hidroxi-acetil-, etoxi-etil-, etil-tio- vagy tritilcsoport vagy könnyen lehasítható kénvédőcsoport.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti vegyületek, ahol R1 jelentése 1-6 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport vagy p-bróm-fenil-csoport.
  3. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti vegyületek, ahol R2 jelentése CH3-O- képletü csoport.
  4. 4. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti vegyületek, ahol R2 jelentése (II) vagy (Ila) általános képletü csoport, amely képletekben
    R4 metilén- vagy propilén-amino-csoport, és
    83416-7319/VO/LZs
    P 96 01140
    R8 jelentése hidrogénatom.
  5. 5. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti vegyületek, ahol R2 jelentése (III) vagy (Illa) általános képletü csoport, amely képletekben
    R5 jelentése -NH- képletü csoport,
    R6 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport, és
    R7 jelentése metil-, etil- vagy n-propilcsoport.
  6. 6. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti vegyületek, ahol R3 jelentése hidrogénatom vagy benzoilcsoport.
  7. 7. Az 1. igénypont szerinti
    17a-[5-(merkapto-acetil-szarkozil-glicil-amino-1 -penten-3-inil]-ösztra-1,3,5(10)-trién-3,17 β-diol,
    6-N-metil-8a-amino-[8a-N-(tio-acetil-szarkozil-glicil-glicil)]-ergolin,
    6-N-metil-8oc-amino-[8a-N-(tio-acetil-szarkozil)]-ergolin,
    6-N-metil-83-hidroxi-metilén-[0-(tio-acetil-szarkozil-glicil-glicil)]-ergolin és
    6-N-metil-8p-hidroxi-metilén-[O-(tio-acetil-szarkozil-glicil)J-ergolin.
  8. 8. A Te, Re, Cu, Ga, Gd, Y és In elemek radioaktív fémionjainak fémkelátkomplexei (I) általános képletü vegyületekkel és azok gyógyászatilag elfogadható savakkal vagy bázisokkal alkotott sóival
    R3-S-CH2-CO-NR1-[CH2-CO-NH]n-CH2-CO-R2 (I) az N-[2-(benzoil-tio)-acetil]-N-ciklohexil-glicin kivételével, amely képletben n értéke 0, 1 vagy 2,
    83416-7319/VO/LZs
    P 96 01140 ·· · «
    - 51 R1 jelentése 1-20 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport, amely adott esetben 1-3 oxigénatommal megszakított vagy helyettesített, és amelyhez adott esetben láncvégi -COOH, -OH vagy -NH2 képletü csoport kapcsolódik, amely adott esetben glikolsavval vagy glikolsav-észterrel vagy -éterrel észterezett vagy éterezett - ahol az észterek vagy éterek legfeljebb 18 szénatomos karbonsavakkal vagy alkoholokkal vannak kialakítva - vagy fenilvagy ciklohexilcsoport, amely adott esetben a 4-es helyzetben -COOH, -NH2 vagy -OH képletü csoporttal van helyettesítve, amely adott esetben 1-6 szénatomos karbonsavakkal vagy alkoholokkal észterezett, éterezett vagy amidált vagy halogénatommal helyettesített,
    R2 jelentése halogénatom, halogén-metil-, metil-karboxil-, trifluor-metil-karboxil-csoport, -NH2 vagy -OH képletü csoport - ahol az R2=OH esetében képzett karboxilcsoport vagy közvetlenül vagy legfeljebb 8 szénatomos α,ω-hidroxi-karbonsavval lefolytatott észterezés után annak láncvégi karboxilcsoportján keresztül biológiailag hatásos molekulával, szteroiddal, ergolinszármazékkal, benzodiazepinszármazékkal, kolecisztokininnel, peptiddel, proteinnel, proteohormonnal, aminocukorral, endotelinnel, endotelinszármazékkal, endotelin-antagonistával vagy endotelinfragmentummal észterezett vagy amidált -, (II) vagy (Ha) általános képletü csoport, ahol
    R4 jelentése metilén-, propenilén-amino-, propinilén-amino-, metilén-amino- vagy metilén-oxi-csoport, és
    R8 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport,
    83416-7319/VO/LZs
    P 96 01140 (III) vagy (Illa) általános képletü csoport, ahol
    R5 jelentése -NH-, -NH-CO-N<, -NH-CO-NH- képletü csoport vagy metilén-oxi-csoport,
    R6 jelentése hidrogén- vagy halogénatom vagy metilcsoport, és
    R7 jelentése hidrogénatom vagy legfeljebb 6 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport,
    R3 jelentése hidrogénatom, acetil-, benzoil-, p-metoxi-benzil-, acetamido-metil-, benzamido-metil-, trimetil-acetamido-metil-, hidroxi-acetil-, etoxi-etil-, etil-tio- vagy tritilcsoport vagy könnyen lehasítható kénvédőcsoport.
  9. 9. A 8. igénypont szerinti fémkelátkomplexek, amelyekben a radioaktív fémionok a Te és Re elemek izotópjai.
  10. 10. A 8. vagy 9. igénypont szerinti fémkelátkomplexek, amelyekben a radioizotóp 99mTc.
  11. 11. A 8. igénypont szerinti [99mTc]-merkapto-acetil-szarkozin, [99mTc]-merkapto-acetil-szarkozil-diglicin, [99mTc]-rnerkapto-acetil-hexil-glicil-diglicin és [99mTc]-merkapto-acetil-N1-[4-bróm-fenil]-glicil-glicil-glicin.
  12. 12. Konjugátumok, amelyek (I) általános képletü vegyületeket vagy a Te, Re, Cu, Ga, Gd, Y és In elemek radioaktív fémionjainak (I) általános képletü vegyületekkel alkotott fémkelátkomplexeit és megbetegedett szövetekben szelektív módon dűsuló anyagokat tartalmaznak, amelyek között kovalens kötés van, és amelyek karboxi- vagy aminocsoportokat tartalmazó anyagok, így peptidek, proteinek, antitestek vagy azok fragmentumai esetén amid alakjában, vagy hidroxiesoportokat tar83416-7319/VO/LZs
    P 96 01140 • · · · talmazó anyagok, fgy zsíralkoholok esetén észter alakban vagy aldehidcsoportokat tartalmazó anyagok esetén imid alakban vannak.
  13. 13. A 12. igénypont szerinti konjugátumok, amelyek a megbetegedett szövetben dúsuló anyagokként peptideket, így endotelint, endotelinek rész-szekvenciáit, endotelin-analógokat, endotelinszármazékokat vagy endotelin-antagonistákat tartalmaznak.
  14. 14. A 12. igénypont szerinti konjugátumok, amelyek a következő szekvenciájú peptideket
    II
    Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-Tyr-Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    II
    Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-T rp-Leu-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-Tyr-Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    II
    Cys-Thr-Cys-Phe-Thr-Tyr-Lys-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-Tyr-Tyr-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    Cys-Ser-Ala-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Ala-Val-Tyr-Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    I I
    Cys-Ser-Cys-Asn-Ser-T rp-Leu-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-Tyr-Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    83416-7319/VO/LZs
    P 96 01140
    Cys-Ser-Cys-Lys-Asp-Met-Thr-Asp-Lys-Glu-Cys-Leu-Asn-Phe-Cys-His-GIn-Asp-Val-Ile-T rp,
    Ala-Ser-Cys-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-Tyr-Phe-Ala-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    Ala-Ser-Ala-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Ala-Val-Tyr-Phe-Ala-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-T rp-Leu-Asp-Lys-Glu-Ala-Val-Tyr-Phe-Ala-His-Leu-Asp-Ile-Ile-T rp,
    Cys-Val-Tyr-Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp,
    N-acetil-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Ala-Val-Tyr-Phe-Ala-His-Leu-Asp-Ile-Ile-T rp, vagy a
    His-Leu-Asp-Ile-Ile-T rp rész-szekvenciájú peptidet, vagy a ciklo-(DTrp-DAsp-Pro-DVal-Leu), ciklo-(DGIu-Ala-alloDIIe-Leu-DTrp) ciklikus aminosavszekvenciájú peptideket tartalmazzák.
  15. 15. Eljárás (I) általános képletü vegyület előállítására, azzal jellemezve, hogy
    a) glicin diketo-piperazin-származékát vagy
    b) glicint halogén-karbonsav-halogeniddel és ezt követően (VI) általános képletü aminnal
    R1 - NH2 (VI)
    83416-7319/VO/L2s
    P96 01140 • t * ·
    - amely képletben R1 jelentése az 1. igénypontban megadott - , * majd újból halogén-karbonsav-halogeniddel és végül (IV) álta4 lános képletü vegyülettel
    R3 - SH(IV)
    - amely képletben R3 jelentése az 1. igénypontban megadott reagáltatunk, vagy egy (V) általános képletü vegyületet
    NH2-CH2-CO-R2(V)
    - amely képletben R2 az 1. igénypontban megadott - egy halogén-karbonsav-halogeniddel és ezt követően (VI) általános képletü aminnal
    R1 - NH2(VI)
    - amely képletben R1 jelentése az 1. igénypontban megadott - , újból halogén-karbonsav-halogeniddel, végül pedig egy (IV) általános képletü vegyülettel
    R3 - SH(IV)
    - amely képletben R3 jelentése az 1. igénypontban megadott reagáltatunk, és adott esetben a kapott vegyületet gyógyászatilag elfogadható savval vagy bázissal sójává alakítjuk.
  16. 16. Eljárás a Te és Re elemek radioaktív fémionjai (I) általános képletü vegyületekkel alkotott fémkelátkomplexeinek előállítására, azzal jellemezve, hogy pertechnekát vagy perrenát alakjában lévő 99mTc-ot vagy Re-ot redukálószer és adott esetben segédligandum jelenlétében (I) általános képletü vegyülettel
    R3-S-CH2-CO-NR1-[CH2-CO-NH]n-CH2-CO-R2 (I)
    83416-7319/VO/LZs
    P 96 01140
    - amely képletben R1, R2 és R3 jelentése az 1. igénypontban megadott - reagáltatunk, azzal a megkötéssel, hogy az (I) általános képletü vegyület az N-[2-(benzoil-tio)-acetil]-N-ciklohexil-glicintől eltérő.
  17. 17. Készlet radiofarmakológiai készítmény előállítására, amely szilárd állapotban vagy oldat alakjában lévő, egy az 1-7. igénypontok bármelyike szerinti, (I) általános képletü vegyületből vagy egy a 12-14. igénypontok bármelyike szerinti konjugátumból, valamint redukálószerből és adott esetben segédligandumból, továbbá a fenti vegyületek pertechnekát- vagy perrenátoldat alakjában lévő 99mTc-mal vagy Re-mal történő reakciójára vonatkozó előírást tartalmazó használati utasításból áll.
  18. 18. Radioterápiás készítmény receptorok és receptortartalmú szövet és/vagy ateroszklerotikus foltok behatolásmentes in vivő megjelenítésére és/vagy a veseműködés vizsgálatára, amely egy a 8-10 igénypontok bármelyike szerinti vegyületet vagy egy a 12-14. igénypontok bármelyike szerinti konjugátumot, valamint adott esetben a gyógyászatban szokásos adalékokat tartalmaz, ahol a vegyületet egy a 17. igénypont szerinti készletben pertechnekát- vagy perrenátoldat alakjában lévő 99mTc-mal vagy Re-mal állítjuk elő.
HU9601140A 1993-11-01 1994-10-27 N-alkyl peptide chelate formers, their metal comlexes with radionuclides, processes for producing them and radio-pharmaceutical compositions containing these compounds HUT74881A (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE4337600A DE4337600A1 (de) 1993-11-01 1993-11-01 N-Alkyl-Peptidchelatbildner, deren Metallkomplexe mit Radionukliden, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende radiopharmazeutische Zusammesetzungen

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HU9601140D0 HU9601140D0 (en) 1996-07-29
HUT74881A true HUT74881A (en) 1997-02-28

Family

ID=6501750

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9601140A HUT74881A (en) 1993-11-01 1994-10-27 N-alkyl peptide chelate formers, their metal comlexes with radionuclides, processes for producing them and radio-pharmaceutical compositions containing these compounds

Country Status (11)

Country Link
EP (1) EP0726909A1 (hu)
JP (1) JPH09508351A (hu)
KR (1) KR960705842A (hu)
CN (1) CN1134158A (hu)
AU (1) AU681919B2 (hu)
CA (1) CA2173844A1 (hu)
DE (1) DE4337600A1 (hu)
HU (1) HUT74881A (hu)
NO (1) NO961743D0 (hu)
WO (1) WO1995012610A1 (hu)
ZA (1) ZA948411B (hu)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6241963B1 (en) * 1995-10-19 2001-06-05 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Dopamine and serotonin transporter ligands and imaging agents
US6162378A (en) * 1999-02-25 2000-12-19 3D Systems, Inc. Method and apparatus for variably controlling the temperature in a selective deposition modeling environment
US6171578B1 (en) 1999-04-14 2001-01-09 Diatide, Inc. Benzodiazepine derivatives for imaging thrombi
BR0111158A (pt) 2000-05-12 2004-04-06 Genzyme Corp Composto e sais fisiológicos do mesmo, método para tratar uma condição mediana por tnf-a em um paciente

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ZA811340B (en) * 1980-06-09 1982-03-31 Morton Norwich Products Inc N-(cycloalkyl)amino acid compounds
WO1992019274A1 (en) * 1991-05-08 1992-11-12 Mallinckrodt Medical, Inc. Technetium chelates to be used for determining the renal function
JPH0570484A (ja) * 1991-09-12 1993-03-23 Hitachi Chem Co Ltd ペプチドおよびその塩
DE69332470D1 (de) * 1992-02-06 2002-12-12 Biosynthema Inc Liganden zur verbesserung der metallchelatbildungskinetik
DK0641222T3 (da) * 1992-05-21 2000-12-11 Diatide Inc Peptider mærket med technetium-99m til trombeafbildning
DE4311021A1 (de) * 1993-03-31 1994-10-27 Diagnostikforschung Inst Bifunktionelle Chelatbildner, deren Technetium- und Rhenium-Komplexe, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende radiopharmazeutische Mittel

Also Published As

Publication number Publication date
CN1134158A (zh) 1996-10-23
ZA948411B (en) 1995-06-30
JPH09508351A (ja) 1997-08-26
NO961743L (no) 1996-04-30
KR960705842A (ko) 1996-11-08
CA2173844A1 (en) 1995-05-11
AU8103894A (en) 1995-05-23
DE4337600A1 (de) 1995-05-04
AU681919B2 (en) 1997-09-11
WO1995012610A1 (de) 1995-05-11
HU9601140D0 (en) 1996-07-29
NO961743D0 (no) 1996-04-30
EP0726909A1 (de) 1996-08-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE69408145T2 (de) Hydrazine mit einer n3s konfiguration als radionukleide chelatoren
EP0108406B1 (en) Bifunctional chelating agents
JP3602848B2 (ja) ヒドラジノ型ｎ▲下２▼ｓ▲下２▼キレート化剤
JP2000515514A (ja) 放射性金属元素結合ペプチドの類似化合物
EP0831938B1 (en) Radiolabeled peptide compositions for site-specific targeting
CN109438517B (zh) 一种与羰基金属核心配位的双功能连接剂的配合物及其制备方法
JPH04505022A (ja) 診断または治療に使用する放射性同位元素で標識した蛋白質
AU691806B2 (en) Chelating agents of the type XN1S1O1 for radioactive isotopes, metal complexes thereof, and their use in diagnosis and therapy
Gorshkov et al. “2+ 1” Dithiocarbamate–isocyanide chelating systems for linking M (CO) 3+(M= 99mTc, Re) fragment to biomolecules
SK2094A3 (en) Somatostatine polypeptides, method of their preparing and using
CA2232391A1 (en) Bifunctional sulfide-containing sulfonamide-chelating agents such as xsns for radioactive isotypes
CA2232340A1 (en) Bifunctional nicotinamide-chelating agents such as n2s2 for radioactive isotopes
WO1994022491A1 (de) Bifunktionelle chelatbildner und ihre anwendung in der radiopharmazeutik
US5534497A (en) Technetium chelates to be used for determining the renal function
HUT74881A (en) N-alkyl peptide chelate formers, their metal comlexes with radionuclides, processes for producing them and radio-pharmaceutical compositions containing these compounds
CA2232315A1 (en) Bifunctional sulfide-containing sulfonamide-chelating agents such as s2 ny for radioactive isotopes
WO2022126275A1 (en) Radiolabeled compounds targeting the prostate-specific membrane antigen
CN113368264B (zh) 放射性标记肉桂霉素，其制备方法及其用途
AU698824B2 (en) Technetium-sulphonamide complexes, their use, pharmaceutical agents containing the latter, as well as process for the production of the complexes and agents
JPH05148283A (ja) テクネチウム−およびレニウムキレート、それを含有する診断剤、それを含有する腫瘍治療のための医薬品およびその製造方法
US5858327A (en) Hydrazino-type N2 S2 radionuclide chelating compounds
HUT73853A (en) Type s3n2 chelators for radioactive isotopes, their metal complexes and their diagnostic and therapeutical use
Xiuli et al. An improved synthesis of S-benzoyl mercaptoacetyltriglycine as BFCA and the labeling of IgG with carrier-free 188 Re
SHU et al. Synthesis of a tritiated human growth hormone releasing peptide
Pollack et al. Hydrazino-type N 2 S 2 chelators

Legal Events

Date Code Title Description
DFC4 Cancellation of temporary prot. due to refusal