HUT73979A - Fornesyltransforase inhibiting prodrugs and pharmaceutical compositions containing them - Google Patents

Fornesyltransforase inhibiting prodrugs and pharmaceutical compositions containing them Download PDF

Info

Publication number
HUT73979A
HUT73979A HU9503984A HU9503984A HUT73979A HU T73979 A HUT73979 A HU T73979A HU 9503984 A HU9503984 A HU 9503984A HU 9503984 A HU9503984 A HU 9503984A HU T73979 A HUT73979 A HU T73979A
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
compound
formula
group
ftl
ftli
Prior art date
Application number
HU9503984A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9503984D0 (en
Inventor
Richard Marais
Caroline Joy Springer
Original Assignee
Cancer Res Campaign Tech
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Cancer Res Campaign Tech filed Critical Cancer Res Campaign Tech
Publication of HU9503984D0 publication Critical patent/HU9503984D0/hu
Publication of HUT73979A publication Critical patent/HUT73979A/hu

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with hetero atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/555—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound pre-targeting systems involving an organic compound, other than a peptide, protein or antibody, for targeting specific cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6891—Pre-targeting systems involving an antibody for targeting specific cells
    • A61K47/6899—Antibody-Directed Enzyme Prodrug Therapy [ADEPT]
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B82—NANOTECHNOLOGY
    • B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
    • B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

A találmány tárgyát prodrugok és azoknak a daganatok kezelésére való felhasználása képezi.
A prodrugok alkalmazása klinikailag nagyon értékes elgondolást jelent a rák terápiájában, minthogy, különösen, ha a prodrugot egy tumor-asszociált antigénhez kötődő monoklonális antitesthez kapcsolható enzim hatására átalakíthatjuk daganatellenes szerré, egy ilyen prodrug kombinációja egy ilyen enzim/monoklonális antitest konjugátummal, nagyon hatásos klinikai ágenst jelent. A rák terápiájának ezt a megközelítését, amelyet gyakran antitest által irányított enzim/prodrug terápiának (antibody directed enzyme/prodrug therapy = ADEPT) nevezünk, a WO 88/07378 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentésben hozták nyilvánosságra.
Újabban egy hasonló megközelítést, a VDEPT-et javasolták, amelynél a daganatsejteket az antitest/enzim konjugátum helyett olyan vírusvektorral célozzuk meg, amely tartalmaz egy olyan gént, amelyben kódolva van a prodrug aktiválására képes enzim. A gén transzkripciós úton szabályozható tumorspecifikus promoterrel vagy fokozó (enhancer) szekvenciákkal. A vírusvektor bejut a daganatsejtekbe, és kifejezi (expresszálja) az enzimet, hogy a prodrug csak a tumorsejtekben alakuljon át hatóanyaggá [Huber et al. , Proc . Natl. Acad. Sci . USA 8.8, 8039 (1991)] . Más módszer szerint a gének célba juttatására nem-vírusos módszereket is alkalmaztak. Az ilyen módszerek között szerepelnek a következők: kalcium-foszfátos koprecipitáció, mikroinjekció, liposzómák, közvetlen DNS-felvétel és receptor által közvetített DNS-transzfer. Mindezek áttekintését írja le Morgan és French Anderson [Ann.Rév.Biochem., 62 , 191 (1993)].
• ·
A GDEPT (gene directed enzyme prodrug therapy = gén által irányított enzim/prodrug terápia) kifejezést használják közösen a vírus segítségével és nem vírus útján alkalmazott célba juttató rendszerekre. Az enzimet irányíthatjuk speciális szubcelluláris helyekre, vagy működésre bírhatjuk a sejt felszínén .
Bár a GDEPT és ADEPT rendszerek növelhetik a daganatéilenes szerek koncentrációját, amelyet egy daganat helyére juttathatunk, mégis fennáll a gyógyszer-odajuttatás specificitásának növelése iránti igény. Mindkét rendszernél kiszabadulhat a hatásos gyógyszer a normális sejtek környezetébe, és azokat károsíthatja. Az ADEPT rendszer esetében ezt okozhatja az, hogy a prodrugot aktiválják olyan konjugátumok, amelyeknek nem sikerült a daganatban lokalizálódni. A GDEPT rendszernél a normális szövet átalakulása az enzim kifejeződésének maradék szintjeire vezethet a daganaton kívüli helyeken, vagy a hatásos gyógyszer kiszabadulhat a daganatsejtekből. Bár a WO 89/10140 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentésben közölnek módszereket az ADEPT rendszer specificitásának növelésére, továbbra is fennáll az igény az ADEPT és GDEPT rendszerek specificitásának javítására.
A ras-t gyakran összekapcsolják a sejtek átalakulásával. Az onkogén ras számos humán daganatban túlzottan kifejezésre jut (over-expressed), például a vastagbélrák több mint 50 %-ában, a hasnyálmirigyrákok 90 %-ában [Marsters et al., Science 260, 1937-1942 (1993)] és a tüdőrákokban is.
Kimutatták, hogy sejttenyészetekben az onkogén ras gátlása a transzformált fenotípus visszaalakulására vezet.
. . ... .
. . . · ·.,· ···· ···· ··
- 4 Ezért a ras speciális inhibitorai kifejlesztésének a képessége nagy terápiás felhasználással számolhat.
Azonban a ras megcélzásának egy lehetséges csapdája abban rejlik, hogy valamennyi normális sejtben jelen van normális, nem-mutált ras. A normális sejtekben a ras szerepe döntő. Ezért lényeges, hogy szelektív módon csak az aktivált rast gátoljuk a transzformált sejtekben.
Újabban leírták a ras farnezil-transzferáz inhibitorait, amelyek szelektív módon gátolják az onkogén ras farnezilezését [Kohl, Science, 260, 1934 (1993); James, ibid. 1937].
A találmány ilyen problémákat céloz meg a prodrugok egy olyan új csoportjával, amely a ras inhibitorok, így a farnezil-transzferáz-inhibitorok prodrugjaiból áll. Ez az enzim lényeges a ras farnezilezéséhez, ami viszont abszolút kívánalom az onkogén ras transzformáló funkciójához [Gibbs, Seminars in Cancer Bioi., 3., 383 (1992)].
A ras inhibitorok, így a farnezil-transzferáz-inhibitorok alkalmazása az ADEPT- vagy GDEPT- rendszernél így a daganat sejtek kezelésének megnövelt specificitását nyújtja. A farnezil-transzferáz-inhibitorokra alapozott prodrugok elsősorban a tumor helyén alakulnak át farnezil-transzferáz-inhibitorokká, de ugyanakkor farnezil-transzferáz-inhibitorok szabaddá válása más helyeken vagy a tumorokból nem okoz a nem-specifikus citotoxikus gyógyszerek felszabadulásával összehasonlítható mértékű citotoxicitást.
A találmány egy szempontból rendelkezésre bocsát egy (I) általános képletű prodrugot, amelyben
FTLi jelentése ras inhibitor, így egy farnezil-transzfe-
ráz-inhibitor vegyület;
PRT m számú olyan védőcsoportot jelent, amely enzim hatására lehasítható a ras inhibitorról;
m értéke 1 és 5 közötti egész szám.
A megfelelő FTLi-k közül megemlíthetjük a James és munkatársai által leírtakat (ibid), valamint a Kohl és munkatársai által leírtakat (ibid), és különösen az (la) általános képletű FTLi-ket, amelyekben
Cys jelentése ciszteinilcsoport;
A jelentése -NH-CH(R1)-COOR2 általános képletű csoport, amelyben
R egy természetesen elofordulo aminosav oldalláncát jelenti; és
R jelentese hidrogénatom, metilcsoport vagy aminocsoport .
Előnyösek azok az (la) általános képletű vegyületek, amelyekben
A jelentése -NH-CH[CH2CH(CH3)2J -COOH képletű, leucinból származtatható csoport, -NH-CH[CH2OH]-COOH képletű, szerinből származtatható csoport, -NH-CH[CH2CH2SCH3]-COOH képletű, metioninból származtatható csoport, vagy -NH-CH[CH2CH2SCH3]-CONH2 képletű, amidált metioninból származtatható csoport.
Az (la) általános képletű vegyületeket használhatjuk racém elegyek alakjában, vagy izolálhatjuk az izomereket.
Egyéb alkalmas FTLi-k közé tartoznak az (Ib) és (Ic) általános képletű vegyületek, amelyek képletében
R3 és R4 jelentése valamilyen természetesen előforduló amino sav oldallánca, így metil-, izopropil-, izobutil-, szek-butil·-, hidroxi-metil-, (metil-tio)-etil- és 1-hidroxi-etil-csoport, köztük azok oxidált formái (például a metionin-szulfoxid vagy metionin-szulfon), vagy szubsztituált vagy szubsztituálatlan alifás, aromás vagy heteroaromás csoportokat jelent, előnyösen ciklohexil-, fenil-, piridil-, imidazolilcsoportot, vagy 2-8 szénatomos telített vagy telítetlen, elágazó vagy egyenes láncú csoportokat, amelyek adott esetben szubsztituálva lehetnek valamilyen aromás vagy heteroaromás gyűrűvel;
X4 jelentése etiléncsoport, transz-viniléncsoport vagy
-0Η2-NH-csoport;
X2 jelentése -(CH2)n- általános képletű csoport, amelyben n értéke 0, 1 vagy 2.
Előnyös, ha mind R3, mind R4 jelentése szek-butil-csoport.
Az olyan (Ib) és (Ic) általános képletű vegyületek, amelyek képletében X4 jelentése -CH2-NH-csoport, előállíthatók a következő általános eljárással. Egy (IX) általános képletű vegyületet, amelynek képletében
Y4 jelentése megfelelő védőcsoport, például terc-butoxi-karbonil-csoport;
R3 jelentése azonos a fentiekben megadottakkal, amelyet a megfelelő védett aminosavból a Weinreb-amid képzésével és azután redukcióval, előnyösen lítium-alumínium-hidriddel éteres oldatban, -35°C alatti hőmérsékleten végzett redukcióval előállíthatunk, vízmentes N,N-dimetil-formamidban
- 7 reagáltatunk egy (X) általános képletű vegyülettel, amelyben R4 jelentése azonos a fentiekben megadottakkal, majd a kapott vegyületet redukáljuk, előnyösen nátrium-triacetoxi-bór-hidriddel, egy (XI) általános képletű vegyületté, amelyben Yl' r3 r4 jelentése azonos a fentiekben megadottakkal.
A (XI) általános képletű vegyületet azután trietil-amin jelenlétében reagáltatjuk egy (XII) általános képletű vegyülettel, amelyben
X2 jelentése azonos a fentiekben megadottakkal.
így egy (XIII) általános képletű vegyületet kapunk, amelynek képletében
Yf, R3, R4 és X2 jelentése azonos a fentiekben megadottakkal.
Erről a termékről azután eltávolítjuk a védőcsoportot, például vízmentes sósav etil-acetátos oldatával -25°C-on kezelve, majd reagáltatjuk egy (XIV) általános képletű vegyülettel, amelyben
Y2 és Y3 megfelelő védőcsoportokat jelentenek, például Y2 jelentése terc-butoxi-karbonil-csoport, és Y3 jelentése tritilcsoport;
[a (XIV) általános képletű vegyületeket előállíthatjuk a megfelelő védett ciszteinszármazékból a Weinreb-amid képzésével, majd redukcióval, előnyösen lítium-alumínium-hidriddel dietil-éteres oldatban, -35°C alatti hőmérsékleten végzett redukcióval], így a védőcsoport eltávolítása után egy (Ib) általános képletű vegyületet kapunk, amelyet azután adott esetben hidrolizálha tunk egy (Ic) általános képletű vegyületté.
...... ··. ···· . , , «· ··.’ .· · ··· · * • · · · *..· ···· ···· ·· ····
- 8 A fenti (lb) vagy (Ic) általános képletű vegyületeket, amelyek képletében
X -CH2-NH-csoportot jelent, előállíthatjuk a Kohl és munkatársai, valamint James és munkatársai által leírt eljárással is.
Az olyan (lb) vagy (Ic) általános képletű vegyületeket, amelyekben
X etilén- vagy transz-vinilén-csoportot jelent, előállíthatjuk a WO 94/09766 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentésben leírt eljárással.
Az FTLi-csoportok kapcsolhatók bármely olyan alkalmas védőcsoporthoz, amely valamilyen enzim segítségével eltávolítható. Az ilyen csoportokra példaként szolgálnak a WO 88/07378 vagy a WO 93/08288 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentésekben találhatók. így például a WO 93/08288 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentésben leírnak önfeláldozó (self immolative) prodrugokat, amelyek aktiválhatok egy nitroreduktáz enzim segítségével. Ezek a prodrugok a p-nitro-benzil-oxi-karbonil vegyületek származékai.
A védócsoport pontos szerkezete függg az ADEPT- vagy GDEPT-rendszer természetétől, amellyel a ras inhibitor prodrugot kívánjuk használni. Ez lehet bármely olyan alkalmas csoport, amelyet enzimmel eltávolíthatunk vagy az enzimmel módosíthatunk olyan módon, hogy a csoport instabil lesz, és önfeláldozással a hatékony ras inhibitor prodrugot szolgáltatja .
A minden egyes FTLi-csoporthoz kapcsolódó védőcsoportok száma részben az inhibitor-vegyület pontos szerkezetétől függ.
Úgyszintén függ a nem-védett FTLi és a különböző számú védőcsoporttal rendelkező FTLi viszonylagos aktivitásától, minthogy, ha további védőcsoportok a prodrug hatékonyságának csökkenését eredményezik, akkor ez növeli az FTLi és az FTLi-(PRT)m aktivitási viszonyát.
Kívánatos, hogy egy vagy két védőcsoport kapcsolódjék minden egyes FTLi molekulához, hogy a találmány szerinti vegyületet megkapjuk, bár több, így 3, 4 vagy 5 védőcsoportot is kapcsolhatunk, ha az FTLi szerkezete lehetővé teszi ilyen számú védőcsoport kapcsolódását.
Ennek megfelelően, a találmány szerinti prodrugok közé tartoznak a (II) általános képletű vegyületek, az ebben szereplő védőcsoporttal, ahol
X jelentése iminocsoport, oxigénatom vagy kénatom;
m értéke 1 és 5 közötti egész szám (például 1, 2 vagy 3);
Ph jelentése adott esetben szubsztituált feniléncsoport;
FTL olyan csoportot jelent, hogy az FTL-(XH)m általános képlet m-számú XH-csoportot tartalmazó FTLi-t jelentsen.
A nitrocsoport lehet a 2-helyzetben, bár kívánatos, hogy a feniléncsoport 4-helyzetében legyen.
Minden (II) általános képletű olyan vegyületben, amelyben m értéke 2 és 5 között van, az egyes X és Ph csoportok lehetnek azonosak vagy különbözők. Előnyös, ha azonosak.
A (II) általános képletű FTL inhibitorok közé tartoznak a fenti (la), (Ib) vagy (Ic) általános képletűek.
A feniléncsoport alkalmas szubsztituensei közé tartozik 1-4 azonos vagy különböző, a következők közül választott csopot: fluor-, klór-, bróm-, jódatom, hidroxi-, merkapto-.
.· . . · · · '··· ···» ·· ···· ··
- 10 amino-, nitrocsoport, 1-4 szénatomos alkil-, halogénezett 1-4 szénatomos alkil-, 1-4 szénatomos alkoxi-, halogénezett 1-4 szénatomos alkoxicsoport, 2-4 szénatomos alkenil-, 2-4 szénatomos alkinil- és halogénezett 2-4 szénatomos alkenilcsoport. A szubsztituensek előnyösen 1-4 számú fluoratomot jelentenek a gyűrű 2,3,5- és 6-helyzetében.
A találmány szerinti előnyös prodrugok a (Illa) általános képletűek, amelyek képletében m értéke azonos a fentiekben megadottakkal;
Ph jelentése azonos a fentiekben megadottakkal;
FTL olyan csoportot jelent, hogy az FTL-(NH2)m általános képlet m-számú aminocsoportot tartalmazó FTLi vegyületet jelentsen.
Az ilyen prodrugok közé tartoznak a fenti (Ib) és (Ic) általános képletűek, amelyek legalább egy aminocsoportot tartalmaznak. A nitrocsoport lehet 2-helyzetben, bár kívánatos, hogy a Ph-gyűrű 4-helyzetében legyen.
A találmány szerinti további előnyös prodrugok a (Illb) általános képletűek, amelyekben m értéke azonos a fentiekben megadottakkal;
Ph jelentése azonos a fentiekben megadottakkal;
FTL olyan csoportot jelent, hogy az FTL-(SH)m általános képlet m-számú merkaptocsoportot tartalmazó FTLi vegyületet j elentsen.
Az ilyen prodrugok közé tartoznak a fenti (Ib) és (Ic) általános képletűek, amelyek legalább egy merkaptocsoportot tartalmaznak. A nitrocsoport lehet 2-helyzetben, bár kívánatos, hogy a Ph-gyűrű 4-helyzetében legyen.
• ·
- 11 A találmány szerinti előnyös prodrugok a (lile) általános képletűek is, amelyekben
Ph a fentiekben megadott azonos vagy különböző csoportokat jelent;
FTL olyan csoportot jelent, hogy a (HS)-FTL-(NH2) általános képletű vegyület egy FTLi vegyületet jelentsen.
Az ilyen prodrugok közé tartoznak a fenti (Ib) és (Ic) általános képletűek. A nitrocsoport lehet 2-helyzetben, bár kívánatos, hogy a Ph-gyúrű 4-helyzetében legyen.
A (II), (Illa), (Illb) és (lile) általános képletű vegyületek prodrugként felhasználhatók egy ADEPT- vagy GDEPT- rendszerben, valamilyen nitroreduktáz enzimmel, köztük a WO 93/08288 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentésben leírt E. coli nitroreduktázzal. Bár a jelen találmány definícióját tekintve, nem függ a nitroreduktáznak a (II), (Illa), (Illb) vagy (lile) általános képletű vegyületekre gyakorolt hatásának pontos módjától, úgy véljük, hogy a p-nitro-benzil-oxi-karbonil-csoport nitrocsoportja átalakul a megfelelő amino- vagy hidroxi-amino-csoporttá és az így keletkező p-amino-benzil-oxi-karbonil-csoportot vagy p-(hidroxi-amino)-benzil-oxi-karbonil-csoportot tartalmazó vegyület az enzimatikus reakciónál alkalmazott reakciókörülmények között önmagától lebomlik, és felszabadítja a citotoxikus vegyületet, és melléktermékként p-amino-benzil-alkoholt vagy p-(hidroxi-amino)-benzil-alkoholt és szén-dioxidot képez.
A találmány szerinti p-nitro-benzil-oxi-karbonil-csoportot tartalmazó vegyületeket a szokásos módon, a kémiai szintézis önmagában ismert eljárásaival állítjuk elő. így például • · · · • · • · ·· megfelelően védett amin- vagy hidroxi-ras-inhibítor vegyületeket vízmentes körülmények között valamilyen hidrogén-klorid-akceptor, különösen valamilyen alkil-amin, így trietil-amin jelenlétében reagáltathatunk klór-hangyasav-(4-nitro-benzil)-észterrel. Ez a reakció végrehajtható valamilyen vízmentes szerves oldószerben, így kloroformban, és a keletkező (II), (Illa), (Illb) vagy (lile) általános képletű, találmány szerinti vegyületet a szokásos eljárásokkal, így kromatográfiával izolálhatjuk a szerves oldószerből. Az ADEPT-rendszerben való használathoz a prodrugnak képtelennek kell lenni a sejtekbe való belépésre, vagy csak korlátozottan rendelkezhet ezzel a képességgel, míg a GDEPT-rendszerben való felhasználáshoz a prodrugnak be kell jutni a sejtekbe. Ennek megfelelően módosításokat hajthatunk végre a prodrugon, például a benzolgyűrűn, hogy a prodrugot erősebben vagy kevésbé lipofillé tegyük. A glutaminsav savcsoportját megváltoztathatjuk, például valamilyen észtercsoporttá, hogy a vegyületet lipofilebbé tegyük.
Hasonló, valamilyen karboxipeptidáz enzimmel, így karboxipeptidáz G2-vel (CPG2-vel) aktiválható prodrugokat állíthatunk elő a (IV) általános képletű származékok alkalmazásával, amelyek képletében
Q jelentése hidrogén-, fluor-, klór- vagy brómatom, vagy az -O-(N-szukcinimid) képletű csoport;
Ph jelentése azonos a fentiekben megadottakkal;
Z jelentése -0-C(=0)- vagy -NH-C(=O)- csoport; és glu a glutaminsav (a) képletű maradékát vagy annak egy di(l-6 szénatomos alkil)-észterét (például etil- vagy
terc-butil-észterét) jelenti, hogy így megkapjuk az (V) általános képletű prodrugokat, amelyek képletében
X jelentése azonos a fentiekben megadottakkal;
és a (VI) általános képletű prodrugokat, amelyekben
FTL jelenti az FTLi vegyület olyan maradékát, hogy az
FTL-(XH)m és az FTL-(NH2)m általános képletű vegyületek jelentése azonos a fentiekben megadottakkal, és ahol m értéke azonos a fentiekben megadottakkal;
Ph, Z és glu jelentése is azonos a fentiekben megadottakkal.
Miként a fentiekben a (II), (Illa), (Illb) és (lile) általános képletű prodrugokkal kapcsolatban már említettük, az ADEPT-esetében a prodrugnak csak korlátozottan kell rendelkeznie a sejtekbe való bejutás képességével, míg a GDEPT esetében a prodrugot szükség esetén módosíthatjuk, hogy lipofilebbé tehessük, és így be tudjon jutni a sejtekbe. A glutaminsav T-karboxi-csoportját megváltoztathatjuk, például valamilyen aromás vagy heterociklusos amiddal, hogy így lipofilebb vegyületeket kapjunk.
Minden olyan (V) általános képletű vegyületnél, amelynél m értéke 2 és 5 között van, az egyes X és Ph csoportok lehetnek azonosak vagy különbözők. Előnyös, ha azonosak.
A (IV), (V) és (VI) általános képletű vegyületekben a -Zcsoport az FTL-hez kapcsolódó szubsztituens gyűrűjének 4-helyzetében van.
Előnyösek az olyan (V) és (VI) általános képletű vegyü letek, amelyek képletében FTL az (Ib) vagy (Ic) általános képletűek.
Az olyan (IV) általános képletű benzil-klór-hangyasav-észter-származékokat, amelyekben Z jelentése -NH-C(=0)-csoport , előállíthatjuk 4-(klór-metil)-fenil-izocianátból glutaminsavval vagy annak valamilyen védett származékával végzett reakcióval, például, amelyben a glutaminsav mindkét karboxicsoportja védve van etil- vagy tere-bútil-csoporttal. Alkalmas módon a reakciót valamilyen oldószerben, így metilén-dikloridban, körülbelül szobahőmérsékleten hajtjuk végre. A keletkező intermediert, a 4-(klór-metil)-fenil-ureido-glutamát-di(terc-butil-észtert) visszafolyató hűtő alkalmazásával vizes etanollal forraljuk; így kapjuk a megfelelő 4-(hidroxi-metil)-származékot, amelyet valamilyen inért oldószerben, így tetrahidrofuránban, szobahőmérsékleten bisz(triklór-metil)-karbonáttal (trifoszgénnel) reagáltatunk, hogy így adott esetben egy védett (IV) általános képletű vegyületet kapjunk. A vegyületről, amennyiben védett, a védőcsoportot trifluor-ecetsavas vagy hangyasavas kezeléssel eltávolíthatjuk.
Az olyan (IV) általános képletű benzil-klór-hangyasav-észter-származékokat, amelyek képletében Z jelentése -0-C(=0)-csoport, előállíthatjuk 4-hidroxi-benzaldehidből kiindulva az [A] reakcióvázlat szerint. Röviden összefoglalva: az (5) aldehidet bór-trifluorid-dietil-éterát komplex és metilén-diklorid elegyében, 25°C-on, körülbelül 12 órán keresztül 1,2-dimerkapto-etánnal reagáltatjuk egy 1,3-ditiolán- származék intermedierré, amelyet azután a fentiek szerint bisz(triklór-metil)-karbonáttal reagáltatunk, így a klór-hangyasav-[4-(1,3-ditiolán)-fenil]-észtert kapjuk. Ezt vízmentes tetrahidrofuránban, trietil-amin jelenlétében, szoba15 hőmérsékleten, körülbelül 5 órán keresztül di(terc-butil)-glutamát-hidrokloriddal kapcsoljuk, így N-{ [4-(1,3-ditiolán)-fenoxi]-karbonil}-glutaminsav-di(terc-butil-észtert) kapunk. A ditiolánszármazékról a védőcsoportot higany(II)-perkloráttal metanol és kloroform elegyében, körülbelül 25°C hőmérsékleten, körülbelül 5 perces reakcióval eltávolítjuk. Az aldehidszármazékot nátrium-bór-hidriddel, szobahőmérsékleten, dietil-éteres oldatban végzett enyhe redukcióval átalakítjuk a megfelelő benzil-alkohol-származékká, majd a fentiekben leírtak szerint bisz(triklór-metil)-karbonáttal átalakítjuk a megfelelő klór-hangyasav-észtér-származékká.
Az előnyös olyan (IV) általános képletű vegyületek, amelyekben Q jelentése -0-(N-szukcinimido)-csoport, a (XVI) általános képletű új vegyületek, amelyekben R5 jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport, előnyösen etil- vagy terc-butil-csoport. Ezért, a találmány egy további szempontja szerint, rendelkezésre bocsátjuk a (XVI) általános képletű vegyületeket. Ezeket a vegyületeket előállíthatjuk a 3. példában közölt vagy hasonló eljárással.
Az (V) és (VI) általános képletű vegyületek előállíthatok olyan ras inhibitorokból, amelyek tartalmaznak egy amino- vagy hidroxicsoportot, a (II) és (III) általános képletű vegyületek előállításánál a fentiekben leírt módszerekhez hasonló eljárásokkal .
Az (V) és (VI) általános képletű ras inhibitor prodrugokat a karboxipeptidázok, így a CPG2, aktiválják az enzimnek a glutaminsav-csoportot eltávolító hatásával, amelyet a visszamaradó prodrug önfeláldozása követ, a nitroreduktázokkal • · · ·
kapcsolatban a fentiekben leírtakhoz hasonló módon.
Az olyan (V) általános képletű prodrugok, amelyek képletében Z jelentése -NH-C(=0)-csoport, szintén előállíthatók olyan (VII) általános képletű összekötőcsoportok (linkers) alkalmazásával, amelyekben Ph és glu jelentése azonos a fentiekben megadottakkal. Az adott esetben szubsztituált feniléncsoport a hidroxi-metil-csoporthoz képest 4-helyzetben van szubsztituálva a glu-t tartalmazó csoporttal.
A (VII) általános képletű összekötőcsoportokat előállíthatjuk adott esetben szubsztituált 4-nitro-benzil-alkoholból, ahol az adott esetben meglévő szubsztituensek azonosak a fentiekben a feniléncsoportnál megadottakkal. A 4-nitro-benzil-alkohol hidroxicsoportját védjük, például valamilyen szerves oldószerben, szobahőmérsékleten terc-butil-difenil-klór-szilánnal végzett reakcióval; így egy adott esetben szubsztituált (4-nitro-benzil)-(terc-butil-difenil-szilil)-étert kapunk. A 4-nitro-csoportot azután aminocsoporttá redukáljuk katalitikus hidrogénezéssel vagy katalitikus hidrogén-transzferrel, például ammónium-formiáttál, valamilyen protikus oldószerben, így egy alkoholban, például metanolban vagy etanolban, katalizátor, így szénre lecsapott palládium jelenlétében.
Az aminocsoportot azután átalakíthatjuk izocianátocsoporttá, például foszgénnel, difoszgénnel vagy trifoszgénnel, valamilyen tercier szerves amin, így trietil-amin és egy 50°C-nál magasabb forráspontú aprotikus szerves oldószer, így toluol jelenlétében végrehajtott reakcióval. Az izocianátszármazékot azután reagáltatjuk egy di(l-6 szénatomos alkil)-glu• ·
- 17 tamáttal vagy annak valamilyen származékával, például di(l-6 szénatomos alkil)-glutamát-hidrokloriddal. Ezt végrehajtjuk szobahőmérsékleten, trietil-amin jelenlétében, valamilyen aprotikus szerves oldószerben, így toluolban, tetrahidrofuránban vagy metilén-dikloridban.
Más módszer szerint az aminszármazékot közvetlenül reagáltathatjuk egy egyetlen reakcióedényben végrehajtott (ohe-pot) szintézis során, trifoszgén és trietil-amin jelenlétében, valamilyen aprotikus oldószerben, így tetrahidrofuránban vagy metilén-dikloridban, a di(l-6 szénatomos alkil)-glutamáttal vagy annak valamilyen származékával.
A keletkező vegyületet a hidroxi-védőcsoport eltávolítása céljából mindkét esetben szobahőmérsékleten például tetrahidrofuránban (tetrabutil-ammónium)-fluoriddal kezeljük.
A keletkező olyan (VII) általános képletű vegyületről, amelynél a glu di(l-6 szénatomos alkil)-észter formájában van, az észtercsoportok eltávolítása céljából leválaszthatjuk a védőcsoportot, például valamilyen savval, így hangyasavval vagy trifluor-ecetsavval. A (VII) vagy (XVI) általános képletű vegyületeket kapcsolathatjuk egy hidroxi-, amino- vagy merkaptocsoportot tartalmazó FTLi-hez úgy, hogy aprotikus oldószerekben, így metilén-dikloridban és/vagy tetrahidrofuránban, valamilyen tercier szerves bázis, így trietil-amin jelenlétében, szobahőmérsékleten reagáltatjuk az FTLi-vel vagy annak aktivált származékával egy (V) általános képletű vegyületté. A vegyület di(l-6 szénatomos alkil)-észter-csoportjait, amenynyiben jelen vannak, a fent leírtak szerint távolíthatjuk el.
Annak érdekében, hogy egy FTLi-t egy -XH csoporttal a • · • . ... · • · .· .:.. ·..’ • ·· · ···· · ·
- 18 (VII) általános képletű összekapcsoló-csoporthoz köthessünk, az -XH csoportot átalakíthatjuk reaktív klór-formil-, klór-tioformil- vagy izocianátszármazékká foszgén, difoszgén vagy trifoszgén segítségével, valamilyen fázistranszfer-katalizátor, így (tetrabutil-ammónium)-hidrogén-szulfát jelenlétében. A reakciót végrehajthatjuk valamilyen bázis, így nátrium-hidroxid jelenlétében, szerves oldószerben, így toluolban, tetrahidrofuránban vagy metilén-dikloridban.
Az olyan (V) általános képletű prodrugokat, amelyek képletében Z jelentése -0-C(=0)-csoport, előállíthatjuk olyan (VIII) általános képletű összekötőcsoportok alkalmazásával, amelyekben Ph és glu jelentése azonos a fentiekben megadottakkal. Az adott esetben szubsztituált feniléncsoport a glu-t tartalmazó csoporttal a hidroxi-metil-csoporthoz viszonyítva
4-helyzetben van szubsztituálva.
Egy (VIII) általános képletű vegyület előállításához adott esetben szubsztituált 4-hidroxi-benzaldehidet 1,3-ditiánként vagy ditiolaneinként valamilyen aprotikus oldószerben, így metilén-dikloridban, bór-trifluorid-dietil-éterát jelenlétében, szobahőmérsékleten, 1,3-propánditiollal vagy
1,2-etánditiollal végrehajtott reakcióval védjük, hogy így a megfelelő 4-(1',3'-ditianil)-fenolt vagy 4-(11,3'-ditiolanil)-fenolt kapjuk. Ezt a vegyületet valamilyen aprotikus oldószerben, így toluolban, egy tercier szerves amin, így trietil-amin jelenlétében kapcsoljuk di(l-6 szénatomos alkil)-glutamil-izocianáttal a megfelelő 0-[4-(1',31-ditianil)-fenil]-N-[di(l-6 szénatomos alkil)-glutamil]-karbamáttá. A karbamátszármazékból a megfelelő aldehidszármazékot a védőcsoportnak • · · · ·· ·· - Λ · • ·· ·· · · .
• · · · · · • · · * ··«· ···· ·· ····
- 19 higany(II)-perkloráttal vagy tallium(Ilii)-nitráttal, tetrahidrofurános vagy metilén-dikloridos oldatban, szobahőmérsékleten végrehajtott eltávolításával kapjuk. Az aldehidszármazék redukciója a kívánt 0-(4-benzil-oxi)-N-[di(1-6 szénatomos alkil)-glutamil]-karbamátot szolgáltatja. Erről a védőcsoportot valamilyen savval, így trifluor-ecetsavval vagy hangyasavval végzett kezeléssel távolíthatjuk el; így az alkil-észter védőcsoportokat eltávolítva kapjuk az (V) általános képletű prodrugot.
A (VIII) általános képletű összekötő-csoportokat kapcsolhatjuk olyan FTLi vegyületekhez, amelyek szabad hidroxi-, amino- vagy merkaptocsoportot tartalmaznak, ugyanúgy, ahogy a fentiekben már leírtuk a (VII) vagy (XVI) általános képletű összekötő-csoportoknál.
Egyéb alkalmas FTLi prodrugok közé tartoznak azok, amelyekből valamilyen cukor vagy β-laktámszármazék segítségével származékot készítettünk. így például az olyan alkalmas összekötő-csoportok — amelyek kapcsolhatók az FTL-NH2, FTL-OH vagy FTL-SH típusú FTL-inhibitorokhoz — közé tartoznak a (XVII) és (XVIII) általános képletű vegyületek, amelyek képletében
R jelentése hidrogénatom vagy acetilcsoport; és
Y jelentése arilcsoport, így fenil-, benzil- vagy tolilcsoport, és ezeket a többi prodrugnál a fentiekben leírtakhoz hasonló módon állíthatjuk elő.
Egy FTLi-csoport bármely hidroxi-, amino- vagy merkaptocsoportja kapcsolható a fent leírtak szerint egy találmány ·· · ·
- 20 szerinti prodrug-gá. Kívánt esetben, prodrug előállítása céljából egynél több ilyen csoportból is képezhetünk származékot. Ha azonban prodrug képzése céljából csak egyetlen hidroxi-, merkapto- vagy aminocsoportot kell reakcióba vinni, az FTL csoport bármely további ilyen csoportját védhetjük például terc-butil- vagy adamantil-csoportokkal (hidroxicsoport esetében) vagy butoxi-karbonil-csoportokkal (aminocsoport esetében). Az ilyen védőcsoportokat kapcsolhatjuk a szakterületen ismert kémiai eljárásokkal.
Az FTLi-nek az összekötő-csoporttal reagáltatandó ilyen csoportjait derivatizálhatjuk a megfelelő halogénatomot vagy izocianátcsoportot tartalmazó formává, és azután kapcsolhatjuk a megfelelő összekötőcsoportokkal, így a (VII) vagy (VIII) általános képletűekkel. Miután az FTLi általános képletű prodrugot előállítottuk, a védőcsoportokat szokásos módszerekkel, például trifluor-ecetsavas kezeléssel eltávolíthatjuk.
Az említett prodrugok fiziológiailag elfogadható származékai közé tartoznak a sók, amidok, észterek és az észterek sói. Az észterek között szerepelnek az olyan karbonsav-észterek, amelyekben az észtercsoport karbonilcsoportot nem tartalmazó részét a következők közül választjuk: egyenes vagy elágazó láncú 1-6 szénatomos alkilcsoport (így metil-, propil-, butil- vagy terc-butil-csoport); vagy 3-6 szénatomos ciklusos alkilcsoport (például ciklohexilcsoport). A sók közül megemlítjük a fiziológiailag elfogadható bázisok sóit, például az alkalmas bázisok származékait, így az alkálifém (például nátrium), alkáliföldfém (például magnézium) sókat, az ammónium és az NR4 általános képletű bázisok (amelyekben R jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport) sóit. Egyéb sók közé tartoznak a savaddíciós sók, köztük a hidroklorid- és acetátsók. Az amidok közé tartoznak a nem-szubsztituált és mono- és diszubsztituált származékok.
A találmány rendelkezésre bocsát továbbá gyógyszerkészítményeket is. Ezek a készítmények tartalmaznak egy találmány szerinti vegyületet, egy vagy több, gyógyászatilag elfogadható hordozóval vagy hígító anyaggal együtt.
A gyógyászatilag elfogadható hordozók vagy hígító anyagok közé tartoznak azok, amelyeket a perorális vagy parenterális (így az intramuszkuláris vagy intravénás) felhasználásra alkalmas készítményeknél használunk. A készítményeket alkalmas módon egységadag formában képezhetjük, és a gyógyszerészet területén jól ismert eljárások bármelyikével készíthetjük. Ezek az eljárások tartalmazzák a hatóanyagnak az egy vagy több kiegészítő alkotórészt tartalmazó hordozóval való elegyítési lépését. A készítményeket általában úgy állítjuk elő, hogy a hatóanyagot egyenletesen és bensőségesen összekeverjük folyékony hordozókkal vagy finoman elosztott szilárd hordozókkal vagy mindkettővel, és azután, szükség esetén megformázzuk a terméket.
így például a parenterális használatra alkalmas készítmények közé tartoznak a vizes és nem-vizes steril injekciós oldatok, amelyek tartalmazhatnak antioxidánsokat, puffereket, bakteriosztatikus anyagokat és olyan oldott anyagokat, amelyek a készítményt izotóniássá teszik a szándékolt befogadó vérével; és vizes és nem-vizes steril szuszpenziókat, amelyek tartalmazhatnak szuszpendáló és sűrítő ágenseket, liposzómákat • · · • · · · • · · · · • · • · .* vagy más mikrorészecskéket tartalmazó rendszereket, amelyeket úgy terveztek meg, hogy a polipeptidet a vér komponenseihez vagy egy vagy több szervhez irányítsák.
Alkalmas liposzómák közé tartoznak például azok, amelyek a pozitív töltésű N-[1-(2,3-dioleiol-oxi)-propil]-Ν,N,N-trietil-ammónium (DOTMA) lipidet tartalmazzák; azok, amelyek dioleiol-foszfatidil-etanol-amint (DOPE) tartalmaznak, és azok, amelyek 3E-[Ν-(Ν',Ν'-dimetil-amino-etán)-karbamoil]-koleszterint (DC-Chol) tartalmaznak.
A találmány szerinti ras inhibitor prodrugokat és az antitest/enzim konjugátumokat ADEPT-rendszerben való alkalmazásra beadhatjuk egyidejűleg, de a klinikai gyakorlatban gyakran előnyösnek találták az enzim/ágens konjugátumot például egészen 72 óráig terjedő idővel, sőt egy héttel a prodrug előtt beadni, hogy így az enzim/ágens konjugátumnak alkalmat adjunk arra, hogy lokalizálódjék a célként szolgáló daganat területén. Ha így járunk el, a prodrug beadásakor a prodrug citotoxikus ágenssé való átalakulása nagyrészt azokra a területekre korlátozódik, ahol az enzim/ágens konjugátum lokalizálódott, vagyis a megcélzott daganat régiójára, és a ras inhibitor ágens idő előtti felszabadulása minimálisra csökken.
A GDEPT-rendszerekben a prodrugot rendszerint az enzimet kódoló módosított vírus alkalmazását követően adjuk be. Tipikus esetben a vírust beadjuk a betegnek és a vírusnak a fertőzött sejtek általi felvételét ellenőrizzük például a megcélzott szövet biopszia-mintájának kivételével és analízisével. Más módszer szerint a prodrugot az enzimet kódoló gént
tartalmazó bejuttatás! rendszer alkalmazását követően adjuk be.
Az ADEPT-rendszerben az enzim/ágens konjugátumnak a lokalizált és szabadon keringő aktív konjugátum viszonyában kifejezett lokalizációs fokát tovább növelhetjük a clearance és/vagy a WO 89/10140 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentésben leírt inaktivációs rendszerek alkalmazásával. Ez abban áll, hogy rendszerint a konjugátum alkalmazása után, és a prodrug alkalmazása előtt egy olyan komponenst (egy második komponenst) alkalmazunk, amely képes a konjugátumnak olyan részeihez kötődni, hogy azáltal az enzim inaktiválódjék és/vagy meggyorsítsa a konjugátum clearance-ét a vérből. Ez a komponens tartalmahaztja a rendszer enzim-komponensének egy olyan antitestjét, amely képes az enzimet inaktiválni.
A második komponens kapcsolható egy makromolekulához, így dextránhoz, egy liposzómához, albuminhoz, makroglobulinhoz vagy egy 0-vércsoportbeli eritrocitához, hogy ezáltal a második komponenst megakadályozzuk abban, hogy elhagyja az érrendszert. Ezen felül, vagy alternatív megoldásként, a második komponens tartalmazhat elegendő számú kovalensen kötött galaktózból származtatható csoportot, vagy más cukrokból, így laktózból vagy mannózból származtatható csoportot, hogy így meg tudja kötni a konjugátumot a plazmában, de el is távolítható a konjugátummal együtt a plazmából a galaktóznak vagy egyéb cukroknak a májban lévő receptorai által. A második komponenst úgy kell alkalmazni és használatra úgy megtervezni, hogy észrevehető mértékben ne juthasson be a daganat extravaszkuláris terébe, ahol inaktiválhatja a lokalizált ···· ν· konjugátumot a prodrug alkalmazása előtt vagy alkalmazása folyamán.
Mind a GDEPT-, mind az ADEPT-rendszerben a pontos adagolást természetesen egyéni klinikusnak kell megállapítania az egyéni beteg számára, és ezt viszont a prodrug és a prodrugból felszabadítandó citotoxikus ágens pontos természete szabja meg, de némi általános útmutatás megadható. Az ilyen típusú kemoterápia általában a prodrug, és vagy az enzim/ágens
konjugátum, vagy a módosított vírus parenterális alkalmazásá-
ból áll; az intravénás úton való alkalmazás gyakran a legcél-
szerűbbnek mutatkozik. Az ADEPT-rendszerekben a prodrug és a
konjugátum adagját végső soron az orvos megítélése dönti el,
aki olyan tényezőket vesz figyelembe, mint a beteg kora,
testtömege és állapota. A prodrug és a konjugátum megfelelő
adagjait Bagshawe és munkatársainak tanulmányában [Antibody,
Immunoconjugates, and Radiopharmaceuticals, 4, 915-922 (1991)] találjuk. A konjugátum alkalmas adagja 500 és 20 000 enzim egység/m2 között van (például 20 000 enzim egység/m2), és a prodrug alkalmas adagja 5 és 2000 mg/m2 között (például 200 mg/m2) lehet.
A konjugátumnak a kívánt kezelés helyén való maximális koncentrációja biztosításának érdekében általában kívánatos, hogy a két komponens alkalmazása között legalább négy óra időköz legyen. A pontos előírásokat különböző tényezők, köztük a megcélzandó tumor természete és a prodrug természete befolyásolják, de rendszerint 48 órán belül a konjugátum elégséges koncentrációja lesz jelen a kívánt kezelés helyén.
A GDEPT-rendszerekben a vírus vagy a beadott más vektor • · • ·
mennyisége olyan, hogy az enzimnek az ADEPT-rendszernél a fentiekben említetthez hasonló sejtbeli koncentrációját nyúj tsa.
Ezt klinikai vizsgálatokkal állapíthatjuk meg, amelyek során egy sorozat kísérleti adagot adunk be a betegnek, és mérjük a megcélzott sejt vagy daganat fertőződésének vagy átfertőződésének a fokát. A prodrug szükséges mennyisége hasonló lesz a ADEPT-rendszereknél lévőhöz, vagy annál nagyobb
A találmány szolgáltat még embernél és állatnál a neoplázia szabályozásában való felhasználásra szolgáló rendszert, amely tartalmaz egy olyan enzimet, amely képes egy ras inhibitor prodrugo aktív ras inhibitorrá átalakítani, és amely előnyösen össze van kapcsolva egy célba juttató ágenssel, így egy monoklonális antitesttel, amely kötődik valamilyen tumorral asszociált antigénhez; és az enzimmel együtt tartalmaz egy fentiek szerint definiált ras inhibitor prodrugot. Ha az enzim egy nitroreduktáz, a rendszer előnyösen tartalmazza az enzim alkalmas kofaktorát is. Alkalmas kofaktor lehet a nikotinsav egy ribozidja vagy ribotidja vagy nikotinamid.
A találmány oltalmi köre kiterjed az ilyen kezelést igénylő embernél vagy állatnál a neoplázia kezelésére szolgáló eljárásra, amely abból áll, hogy a befogadónak egy találmány szerinti ras inhibitor prodrug hatásos mennyiségét és egy enzimet adunk be, amely előnyösen kapcsolva van egy célba juttató ágenshez, így egy monoklonális antitesthez, amely kötődik a tumorral asszociált antigénhez. A tumorral asszociált antigének közé tartoznak a sejt felületén jelen lévő tumor-asszociált receptorok.
• ·
A találmány rendelkezésre bocsát embernél és állatnál egy, a neoplázia szabályozásában való felhasználásra szolgáló rendszert is, amely egy olyan módosított vírust alkalmaz, amely képes az emberben vagy állatban szelektív módon fertőzni a tumorsejteket, és amely vírus tartalmaz egy enzimet kódoló DNS- vagy RNS-szekvenciát; ezzel a vírussal együtt egy olyan ras inhibitor prodrugot, amely az említett enzim hatására képes átalakulni ras inhibitorrá.
A találmány oltalmi köre kiterjed az ilyen kezelést igénylő embernél vagy állatnál a neoplázia kezelésére szolgáló olyan eljárásra, amely abból áll, hogy a befogadónak egy találmány szerinti ras inhibitor prodrug hatásos mennyiségét és egy módosított vírust adunk be, amely módosított vírus képes az illető alanyban a daganatsejteket szelektív módon fertőzni, és ez a vírus tartalmazza az említett ras inhibitor prodrugot ras inhibitorrá átalakítani képes enzimet kódoló DNS- vagy RNS-szekvenciát.
A találmány oltalmi köre kiterjed az ilyen kezelést igénylő embernél vagy állatnál a neoplázia kezelésére szolgáló eljárásra is, amely abból áll, hogy a befogadónak egy találmány szerinti ras inhibitor prodrug hatásos mennyiségét és egy nem-vírus-vektor-rendszert adunk be, amely nem-vírus-vektor-rendszert szelektív módon be lehet juttatni az illető alany tumorsejtjeibe; ez a vektor-rendszer tartalmaz egy olyan enzimet kódoló DNS- vagy RNS-szekvenciát, amely képes az említett ras inhibitor prodrugot olyan hatásos ras inhibitorrá átalakítani, amely működőképesen kapcsolódik az illető enzimet az említett sejtekben hatásosan expresszáló promoterhez.
• ·
A neopláziának az ADEPT-rendszerrel végzett kezelésében való felhasználásra szolgáló különböző rendszerek adott esetben tartalmazzák a fent leírt gyorsított clearance érdekében a második komponenst is. Hasonlóképpen, a neoplázia kezelésére szolgáló fent leírt eljárások adott esetben a módszer részeként tartalmazzák a második komponens használatát, amelynek hatásos menyiségét az enzim alkalmazása után adjuk be, hogy a lokalizált és a szabadon keringő enzim arányát növeljük. A második komponens további speciális részleteit illető tájékoztatást a WO 89/10140 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentésből kaphatunk; az ilyen részletek felhasználhatók a találmányban való alkalmazásra.
A daganatsejteket szelektive fertőzni képes módosított vírusok ismeretesek a szakterületen. A szelektive fertőzni kifejezés alatt azt értjük, hogy a vírus elsősorban a daganatsejteket fertőzi, és a fertőzött nem-daganatsejtek aránya olyan, hogy a ras inhibitor prodrug alkalmazásával a nem-daganatsejtek károsodása elfogadhatóan csekély, figyelembe véve a kezelendő betegség természetét. Végülis ezt az orvos dönti el.
Az is érthető, hogy a vírus által hordozott és az enzimet kódoló DNS- vagy RNS-szekvenciák össze vannak kapcsolva alkalmas, a működtetést szabályozó olyan jelekkel, hogy az enzim működésre bírása a megcélzott daganatsejtekben menjen végbe.
A nem-vírus vektorrendszer szelektív módon bejuttatható a daganatsejtekbe, például a fent említett módszerek, így kalcium-foszfátos koprecipitáció, mikroinjekció, liposzómák, • · • · · ·
- 28 közvetlen DNS-felvétel és a receptorral közvetített DNS-transzfer alkalmazásával [Morgan & French Anderson, Annu.Rev. Biochem., 62, 191 (1993)].
A találmányban való felhasználásra alkalmas monoklonális antitestek közé tartoznak a cerbB2 antitestjei, így az ICR12 [M.A.Bakir et al . , J.Nucl.Med., 33 , 2154-21610 (1992)] és az epidermális növekedési faktor receptor antitestjei, így az ICR16 [C.J.Dean et al., Int.J.Cancer Suppl., 8, 103 (1994)].
Annak bizonyítékát, hogy a cerbB2 az átalakuláshoz ras-t igényel, megtaláljuk Ben-Levy és munkatársainak cikkében [Embo
J., 13, 3302 (1994)].
A monoklonális antitest kifejezésről a szakterületen járatosak megértik, hogy az az itt használt értelemben nemcsak a szokásos hibridóma-technikákkal előállított antitestekre vonatkozik, hanem a rekombináns módszerekkel előállított antitestekre és azok variánsaira is. Ezek közé tartoznak például a humanizált antitestek, így egy nem-humán antitest változó régióra oltott humán antitest konstans régióját tartalmazók (lásd például az EP-A-0 120 694 számú nyilvánosságra hozott európai szabadalmi bejelentést), kiméra antitestek, így humán változó leolvasási keretbe oltott nem-humán komplementaritást meghatározó régió (CDRs) rendelkezők (lásd az EP-A-0 239 400 számú nyilvánosságra hozott európai szabadalmi bejelentést) és az egyláncú antitestek. Az ilyen monoklonális antitestek fragmentumait, amelyek megtartják azoknak a célsejteket kötő aktivitását, szintén a monoklonális antitestek általános megjelölés körébe soroljuk. Ezek közé tartoznak az Fv, Fab' és F(ab')2 fragmentumok. Ide tartoznak még az ilyen • · • · · · • · · · • · · · · · • · · ·
- 29 antitestek CDR-jeira alapozott rekombináns vagy szintetikus proteinek is, így az abzimek (abzymes) (mind antitest-szerű kötő aktivitással, mind enzim-aktivitással rendelkező polipeptidek) és a diatestek (diabodies).
A találmány szerinti prodrugokat reagensként is használhatjuk in vitro rendszerekben az ADEPT- vagy GDEPT-rendszerekbe bevihető kiszemelt enzimek vagy antitestek aktivitásának tesztelésére.
így például egy olyan markert tartalmazó tumor sejtvonalat, amelyhez egy antitestet irányítunk, tenyészthetünk in vitro, majd a tenyészethez egy antitest-enzim konjugátumot adhatunk. Az enzim egyike lesz, vagy vélhetően egyike lesz azoknak, amelyek képesek egy találmány szerinti prodrugot hatásos gyógyszerré átalakítani. A prodrugot azután hozzáadjuk a tenyészethez, és mérjük a sejt-elölés vagy a sejtnövekedés gátlásának a mértékét (például úgy, hogy az életképes sejtek számának regisztrálására valamilyen vitális színezéket használunk, vagy az életképes sejtek számának meghatározása céljából a tenyészet mintájából újabb lemeztenyészeteket készítünk) .
Példák
Az alábbi 1. és 2. példákban a találmány további szemléltetését adjuk. Az 1. példa egy (lb) általános képletű vegyület előállítását mutatja be. A [B] és [C] reakcióvázlat a példák további szemléltetését szolgálja. Valamennyi kiindulási anyag, reagens és vízmentes oldószer (nitrogénatmoszféra alatti tetrahidrofurán), hacsak másként nem tüntetjük fel, az • · • · · · · · · • · · · · ·
- 30 Aldrich-cégtől való. A vékonyréteg-kromatográfiát (TLC) bevonattal előre ellátott Kieselgel 60 F254 (Merek 5735 termékszámú) lemezeken végezzük. A preparatív vékonyréteg-kromatográfiát az Analtech cégtől számrazó 20 cm x 20 cm méretű szilikagél-lemezeken hajtjuk végre. Az 4H-NMR spektrumokat dg-dimetil-szulfoxidos oldatban, Brucker AC250 (250 MHz-es) spektrométerrel, 30°C-on (303 °K) vesszük fel, hacsak másként nem adjuk meg. A J-csatolási állandók értékét Hz-ben adjuk meg.
1. példa
N-(terc-Butoxi-karbonil)-izoleucin-(N-metil-N-metoxi)-amid (12)
976 mg (10 mmol) (N-metil-N-metoxi-amin)-hidrokloridot szuszpendálunk 10 ml metilén-dikloridban, és lehűtjük -10°C-ra. Ezután a szuszpenzióhoz lassan 992 mg (1,22 ml, 10 mmol) 1-metil-piperidint adagolunk, miközben a hőmérsékletet -2°C alatt tartjuk. Ezt az oldatot -10°C-on tároljuk. Egy másik lombikban 2,290 g (9,9 mmol) N-(terc-butoxi-karbonil)-izoleucint oldunk 40 ml metilén-dikloridban, és az oldatot lehűtjük -20°C-ra. Ezután 992 mg (1,22 ml, 10 mmol) 1-metil-piperidint és 1,336 g (1,30 ml, 10 mmol) klór-hangyasav-izobutil-észtert adunk hozzá, és a hőmérsékletet -20°C alatt tartjuk. 15 perc elteltével a fentiek szerint készített (N-metil-N-metoxi-amin)-oldatot egy részletben hozzáadjuk, és az oldatot szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. Az oldatot ezután mossuk 2 x 30 ml telített ammónium-klorid oldattal, magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, és az oldószert • · • ·· ·
- 31 vákuumban ledesztilláljuk. így sárga olajat kapunk, amelyet oszlopkromatográfiával (szilikagél; 10-30 % etil-acetát hexánban) tisztítunk. így színtelen olaj alakjában 2,28 g cím szerinti N-metil-N-metoxi-amidot kapunk.
Kitermelés: 84 %.
E vegyület megismételt előállításainál a kitermelés 60 és 84 % között változik.
N-(terc-Butoxi-karbonil)-izoleucin-aldehid (13)
A fentiek szerint előállított N-(terc-butoxi-karbonil)-izoleucin-Weinreb-amidból 1,98 g-ot (7,2 mmol) oldunk 10 ml vízmentes dietil-éterben, és az oldatot lehűtjük -45°C-ra. Lítium-[tetrahidro-aluminát(III)] 1 M dietil-éteres oldatából 10 ml-t (10 mmol) adunk ezután hozzá, a hőmérsékletet -35°C alatt tartva. Az adagolás után az oldatot hagyjuk 5°C-ra felmelegedni, majd ismét lehűtjük -45°C-ra, és hozzáadunk 5,00 g nátrium-szulfát—víz (1/10)-ot, és a hűtőfürdőt eltávolítjuk. Egy óra elteltével az oldatot átszűrjük cetil-rétegen, és az oldószert vákuumban ledesztilláljuk. így színtelen olaj alakjában 1,47 g aldehidszármazékot kapunk, amelyet a következő reakcióban azonal felhasználunk, mert szobahőmérsékleten racemizálódik.
Kitermelés: 95 %.
E vegyület megismételt előállításainál a kitermelés 89 és 97 % között változik.
N-[2(S)-(terc-Butoxi-karbonil-amino)-3-metil-pentil] -izoleucin (14) • · · · · · · • · · · · · ml vízmentes metanolban 1,31 g (9,95 mmol) izoleucint szuszpendálunk, és hozzáadunk 1,133 g (0,77 ml, 9,95 mmol) trifluor-ecetsavat. Az elegyet keverjük, amíg az izoleucin egész mennyisége fel nem oldódott, majd az oldószert vákuumban lepároljuk. Az így kapott izoleucin-(trifluor-ecetsav)-sóhoz 10 ml vízmentes N,N-dimetil-formamidot adunk és utána 0,3 μτη (3 A) pórusmeretu molekulaszitat, és a (13) vegyület 5 ml vízmentes N,N-dimetil-formamidban oldott 1,47 g-ját (4,9 mmol) adjuk. 15 perc elteltével az oldathoz 1,58 g (7,45 mmol) nátrium-triacetoxi-bór-hidridet adunk, és egy éjszakán át keverjük. A kapott szuszpenziót celit-rétegen leszűrjük, 50 ml etil-acetáttal hígítjuk, és 2 x 35 ml telített nátrium-klorid-oldattal mossuk. A szerves fázist magnézium-szulfáton megszárítjuk, szűrjük, és az oldószert vákuumban lepároljuk. így sárga olaj alakjában 1,36 g cím szerinti savat kapunk.
Kitermelés: 84 %.
E vegyület megismételt előállításainál a kitermelés 67 és 88 % között változik.
N-[2(S)-(terc-Butoxi-karbonil-amino)-3-metil-pentil]-izoleucil-homoszerin-lakton (15) ml vízmentes N,N-dimetil-formamidban oldott 331 mg (1 mmol) (14)-vegyülethez 135 mg (1 mmol) hidroxi-benzotriazol-hidrátot, 260 mg (1,36 mmol) 1-[3-(dimetil-amino)-propil]-3-etil-karbodiimid-hidrokloridot és 125 mg (1 mmol) homoszerin-lakton-hidrokloridot adunk. Ezután 174 mg (0,24 ml; 1,72 mmol) trietil-amint adunk hozzá, és a reakcióelegyet egy éjszakán át keverjük. Az oldatot 25 ml etil-acetáttal hígít33 juk, 2 x 10 ml telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, szűrjük, és az oldószert vákuumban ledesztilláljuk. így sárga olajat kapunk. Ezt azután oszlopkromatográfiával (eluens: 5 % metanolt tartalmazó metilén-diklorid) és dietil-éteres oldatból hexán cseppenkénti adagolásával végzett kicsapással tisztítjuk. így fehér por alakjában 147 mg terméket kapunk.
Kitermelés: 47 %.
E vegyület megismételt előállításainál a kitermelés 41 és % között változik.
A tömegspektrumban m/z: [M+H]+ = 414
Mikroanalízis adatok:
számított % mért %
c 60,99 60,7
H 9,51 9,8
N 10,16 9,9
N-[2(S)-Amino-3-metil-pentil]-izoleucil-homoszerin-lakton-hidroklorid (16)
A (15) vegyületből 147 mg-ot (0,35 mmol) oldunk 10 ml etil-acetátban, és az oldatot lehűtjük -25°C-ra. Ezután vízmentes sósavgázt vezetünk át az oldaton, amíg a vékonyréteg-kromatográfiás (TLC) vizsgálat (eluens: 5 % metanolt tartalmazó metilén-diklorid) a reakció teljessé válását nem mutatja. Ekkor a sósav feleslegének eltávolítása céljából nitrogéngázt vezetünk át az oldaton. Ezután az oldószert vákuumban lepárol- 34 juk. így halványsárga szilárd anyag alakjában 125 mg terméket kapunk.
Kitermelés: 91 %.
E vegyület megismételt előállításainál a kitermelés 62 és 92 % között változik.
N-(terc-Butoxi-karbonil)-S-tritil-cisztein-(N-metil-N-metoxi)-amid (17)
108 mg (1,1 mmol) (N-metil-N-metoxi-amin)-hidrokloridot szuszpendálunk 10 ml metilén-dikloridban, és lehűtjük -10°C-ra. Ezután lassan, a hőmérsékletet -2°C alatt tartva, 110 mg (0,13 ml; 1,1 mmol) 1-metil-piperidint adunk hozzá. Ezt az oldatot -10°C-on tároljuk. Egy másik lombikban 464 mg (1 mmol) N-(terc-butoxi-karbonil)-S-tritil-ciszteint oldunk 20 ml metilén-dikloridban, és az oldatot lehűtjük -20°C-ra. Ezután 110 mg (0,13 ml; 1,1 mmol) 1-metil-piperidint és 144 mg (0,14 ml; 1,1 mmol) klór-hangyasav-izoleucil-észtert adunk hozzá, a hőmérsékletet -20°C alatt tartva. A fentiek szerint készített (N-metil-N-metoxi-amin)-oldatot 15 perc elteltével egy adagban hozzáadjuk, és az oldatot szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. Ezután az oldatot 2 x 15 ml telített ammónium-klorid oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, szűrjük, és az oldószert vákkumban lepároljuk. így fehér, habszerű anyagot kapunk, amelyet oszlopkromatográfiával (szilikagél; 10-30 % etil-acetátot tartalmazó hexán) tisztítunk. így fehér, habszerű anyag alakjában 406 mg (N-metil-N-metoxi-amid)-származékot kapunk.
Kitermelés: 81 %.
- 35 E vegyület megismételt előállításainál a kitermelés 81 és % között változik.
N-(terc-Butoxi-karbonil)-S-tritil-cisztein-aldehid (18)
Az N-(terc-butoxi-karbonil)-S-tritil-cisztein fentiek szerint előállított Weinreb-amidjából 406 mg-ot (0,8 mmol) oldunk 5 ml vízmentes dietil-éterben, és az oldatot lehűtjük -45°C-ra. Ezután lítium-[tetrahidro-aluminát (III)] 1 M dietil-éteres oldatából 1 ml-t (1 mmol) adunk hozzá, a hőmérsékletet -35°C alatt tartva. Az adagolás után az oldatot hagyjuk 5°C-ra felmelegedni, majd ismét lehűtjük -45°C-ra, és 1,25 g nátrium-szulfát—víz (1/10)-ot adunk hozzá, és a hűtőfürdőt eltávolítjuk. Egy óra elteltével az oldatot celit-rétegen át leszűrjük, és az oldószert vákuumban ledesztilláljuk. így fehér habszerű anyag alakjában 332 mg aldehidszármazékot kapunk.
Kitermelés: 93 %.
E vegyület megismételt előállításainál a kitermelés 84 és % között változik.
N- {2(S)-2 - [ (tere-Bútoxi-karbonil)-amino] - 3- [(tritil-tio)-propil-amino]-3-metil-pentil}-izoleucin-homoszerin-lakton (19)
A (16) vegyületből 125 mg-ot (0,32 mmol) oldunk 10 ml G vízmentes metanolban, es hozzáadunk 0,3 μχη (3 A) pórusméretu molekulaszitát, 64 mg (0,64 mmol) kálium-acetátot, 289 mg (0,64 mmol) N-(terc-butoxi-karbonil)-S-tritil-cisztein-aldehidet és 31 mg (0,48 mmol) nátrium-ciano-bór-hidridet. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 24 órán át keverjük, celit-ré····
- 36 tegen át leszűrjük, és a metanolt vákuumban ledesztilláljuk. Az így kapott maradékot oldjuk 25 ml etil-acetátban, mossuk 15 ml telített ammónium-klorid oldattal, és 15 ml telített nátrium-klorid oldattal, magnézium-szulfáton megszárítjuk, leszűrjük, és az oldószert vákuumban lepároljuk. így fehér, habszerű anyagot kapunk. Ezt azután oszlopkromatográfiával (szilikagél; 1-3 % metanolt tartalmazó metilén-diklorid) tisztítjuk. így fehér, habszerű anyag alakjában 107 mg kívánt vegyületet kapunk.
Kitermelés: 45 %.
E vegyület megismételt előállításainál a kitermelés 32 és % között változik.
A tömegspektrumban m/z: [M+H] + = 745.
2. példa
Összegezés
Két, nitroreduktázzal aktiválható ras inhibitor prodrugot állítunk elő. Ezek az N-{2(R)-2-[(4'-nitro-benzil-oxi-karbonil)-amino]-3- [ (merkapto-propil)-amino]-3-metil-pentil}-izoleucil-homoszerin-lakton (21), és az N-[2(R)-2-[(4'-nitro-benzil-oxi-karbonil)-amino]-3-{[(4'-nitro-benzil-oxi-karbonil)-tio]-propil-amino}-3-metil-pentil]-izoleucil-homoszerin-lakton (lásd a [B] reakcióvázlatot). A kiindulási anyag az N-{2(S)-2-[(tere-bútoxi-karbonil)-amino]-3-[(tritil-tio)-propil-amino] -3-metil-pnetil}-izoleucil-homoszerin-lakton (19), amely az 1. példa terméke. Erről a védőcsoportot trietil-szilán és metilén-dikloridban oldott trifluor-ecetsav segítségével távolítjuk el Graham és munkatársainak eljárásával [J.Med.
···
- 37 Chem., 37 (6), 725-732 (1994)], azzal az egyedüli eltéréssel, hogy a reakciót 4°C-on hajtjuk végre. A feldolgozás után [de nagynyomású folyadékkromatográfiás (HPLC) végső tisztítás nélkül] az így kapott (20) képletű vegyületet reagáltatjuk klór-hangyasav-(4-nitro-benzil)-észterrel. így a (21) és (22) képletű vegyületek keverékét kapjuk, amelyeket preparatív vékonyréteg-kromatográfiával választunk szét, és tisztítunk. A (22) képletű vegyület 4H-NMR spektrumából a merkaptocsoporthoz tartozó proton (az 1,0-2,0 ppm tartományban) eltűnése alátámasztja a második nitro-benzil-csoport jelenlétét.
N-{2(R)-[(2-Amino-3-merkapto-propil)-amino]-3-metil-pentil}-izoleucil-homoszerin-lakton (20)
A (19) képletű N-{2(S)-2-[(terc-butoxi-karbonil) -amino]-3-[(tritil-tio)-propil-amino]-3-metil-pentil}-izoleucil-homoszerin-laktonból 0,200 g-ot (0,148 mmol) oldunk 4°C-on 1,0 ml trifluor-ecetsavat és 0,13 g (0,18 ml; 1,1 mmol) trietil-szilánt tartalmazó 2,0 ml metilén-dikloridban. A reakcióelegyet ezen a hőmérsékleten 2 órán keresztül keverjük, majd hagyjuk felmelegedni szobahőmérsékletre, és szárazra pároljuk. A maradékot összerázzuk hexán és 6,0 ml 0,1 %-os vizes trifluor-ecetsav oldat elegyével. A vizes réteget mossuk 2x2,5 ml hexánnal, szűrjük, és 20-25°C-on szárazra pároljuk. így 0,257 g olajos maradékot kapunk, amelyet további tisztítás nélkül felhasználunk.
N-{2(R)-2- [ (4 '-Nitro-benzil-oxi-karbonil)-amino]-3-[(merkapto-propil)-amino]-3-metil-pentil}-izoleucil-homoszerin-lakton • · · · · · · * · · · · · [a (21) képletű vegyület] és N-{2(R)-2-[(41-nitro-benzil-oxi-karbonil)-amino]-3 -{ Γ(41-nitro-benzil-oxi-karbonil)-tio]-propil-amino}-3-metil-pentil]-izoleucil-homoszerin-lakton [a (22) képletű vegyület].
A fenti (20) képletű lakton-termék 0,128 g-jának 0,081 g (0,12 ml; 0,8 mmol) trietil-amint tartalmazó 2 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készített oldatához keverés közben 0,047 g (0,22 mmol) klór-hangyasav-(4-nitro-benzil)-észtert adunk. Öt óra elteltével a reakcióelegyet bepároljuk. így 0,175 g olajat kapunk. Ezt az olajat összerázzuk 3 ml etil-acetát és 2 ml víz elegyével. A szerves fázist 2 x 2 ml vízzel mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és vákuumban bepároljuk. így a (21) és (22) képletű vegyületek keverékét tartalmazó 0,070 g olajat kapunk. Ezeket a vegyületeket preparatív vékonyréteg-kromatográfiával tisztítjuk. Az alkalmazott eluens az etil-acetát:ciklohexán (3:1) elegye.
Először a (21) képletű vegyület eluálódik. Ebből 0,005 g-ot kapunk.
Kitermelés: 33 %.
Az -'-H-NMR spektrum adatai : dH: 0,73-0,90 (12H, m);1,00-1,22 (3H, m, 2H+HS); 1,25 (2H, d, J = 7,44); 1,40-1,52(3H,
m); 2,10-2,18 (1H, m); 2,30-2,82 (5H, m); 2,90-3,10 (1H, m);
4,00-4,10 (1H, m); 4,15-4,27 (1H, m); 4,30-4,42 (1H, m) ; 4,50-4,65 (1H, m); 5,40 (2H, s, CH2-benzil); 7,63 (2H, d,J =
8,70, harom2+6^' 8,24 (2H, d, Harom3+5^' ^27^43^5^7^·
A (22) képletű vegyület utána eluálódik. Ebből így 0,003 g-ot kapunk.
Kitermelés: 15 %.
····
Az !Η -NMR spektrum adatai: dH: 0,70-0,92 (12H, m) ; 1,03-
-1,20 (2H, m) ; 1,25 (2H, d, J = 6,12); 1,40-1,60 (3H, m);
2,16-2, 24 (1H, m); 2,25-2,82 (5H, m); 2,82-2,92 (1H, m) ;
3,64-3, 80 (1H, m); 4,12-4,26 (1H, m); 4,27-4,43 (1H, m) ;
4,50-4, 65 (1H, m) ; 5,16 (2H, s, CH2-S-benzil); 5,39 (2H, s,
CH2-N-benzil); 7,59 (2H, d, J = 8,30, Harom2+6, S-PhNO2); 7,61 (2H, d, J = 8,46, Harom2+6, N-PhNO2); 8,20 (2H, d, Harom3+5,
S-PhNO2); 8,21 (2H, d, Harom3+5, N-PhNO2); C35H48NgO11S.
3. példa
Összegezés
A CPG2 enzim által hasítható új ras prodrug szintéziséhez egy önfeláldozó (self-immolative) összekötőcsoport észterét terveztük kapcsolni merkapto- vagy amino-funkciós-csoportokhoz. Ez az N-'--[4(szukcinimidil-oxi-karbonil-oxi)-benzil]-N3 -[di(terc-butil)-glutamil]-karbamid [a (31) képletű vegyület] (lásd a [C] reakcióvázlatot). Ha már kapcsolódott a ras inhibitorhoz, az észter-védőcsoportokat eltávolítjuk. Példával szemléltetjük a ras inhibitorhoz vezető utat.
A (30) képletű N1-[4 -(hidroxi-metil)-fenil]-N3-[di(terc-butil)-glutamil]-karbamid intermediert a ras inhibitor gyógyszerekkel a [B] reakcióvázlat szerinti kapcsolás céljából állítjuk elő. A kiindulási (23) képletű 4-nitro-benzil-alkoholt a (24) képletű terc-butil-difenil-szilil-éter formájában védjük úgy, hogy szobahőmérsékleten N,N-dimetil-formamidos (vagy tetrahidrofurános) oldatban terc-butil-difenil-klór-szilánnal és imidazollal reagáltatjuk. A (24) képletű védett nitroszármazékot ammónium-formiáttal végrehajtott hidrogén-transzfer (10 % szénre lecsapott palládium etanolban) segítségével redukáljuk. Az így kapott (25) képletű aminszármazékot toluolos oldatban 70°C-on trifoszgénnel reagáltatjuk. így a (26) képletű megfelelő izocianátot kapjuk. A (29) képletű védett összekötő-csoportot a (26) képletű izocianát-származéknak szobahőmérsékleten, trietil-amin jelenlétében di(terc-butil)-glutamát tetrahidrofurános oldatával való reakciójával kapjuk. Más módszer szerint, a (29) képletű vegyületet a (25) képletű aminszármazéknak a (28) képletű di(terc-butil)-glutamil-izocianáttal való közvetlen kapcsolásával kapjuk, a fent leírtakkal azonos körülmények között, amikor is a (28) képletű di(terc-butil)-glutamil-izocianátot a di(terc-butil)-glutamátból trifoszgénnel és toluolos oldatban trietil-aminnal -78°C-on végrehajtott kezeléssel kapjuk. Ezt az utat választva, a (29) képletű vegyületet jó kitermeléssel kapjuk a (25) képletű aminszármazékból és di(terc-butil)-glutamátból egylépéses szintézissel. A (29) képletű vegyületről a védőcsoportot szobahőmérsékleten, tetrahidrofurános oldatban, tetrabutil-ammónium-fluoriddal távolítjuk el, és az összekötő-csoport (30) képletű di(terc-butil)-észterét oszlopkromatográfiával tisztítjuk. A (30) képletű vegyületet szobahőmérsékleten acetonitril és trietil-amin elegyében reagáltatjuk diszukcinimidil-karbonáttal. Ez a (31) képletű kívánt szukcinimidil összekötő-csoporthoz vezet. Ezt azután kapcsoljuk az 1. és 2. példa szerint előállított (20) képletű ras inhibitorral, ami a (32) képletű vegyületet eredményezi, amelyről azután hangyasavban, 4°C-on eltávolítjuk a védőcsoportot, és így kapjuk a (33) • · • · « képletű végső ras prodrugot.
Kísérleti rész (4-Nitro-benzil)-(terc-butil-difenil-szilil)-éter (24)
A (23) képletú 4-nitro-benzil-alkohol 1,00 g-jának (6,50 mmol) és 0,97 g (14,1 mmol) imidazolnak 10,0 ml N,N-dimetil-formamidos oldatához keverés közben, nitrogénatmoszférában, szobahőmérsékleten, 10 perc alatt 1,98 g (7,20 mmol) terc-butil-difenil-klór-szilánt adunk. A reakcióelegyet további 5 órán keresztül keverjük, majd 75 ml dietil-éterrel hígítjuk, 5 x 15 ml vízzel mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és vákuumban szárazra pároljuk. így olajos terméket kapunk, amely állás közben kristályosodik; ezt 70 %-os etanolból átkristá lyosítva 2,36 g szilárd anyagot kapunk.
Kitermelés: 93 %.
Az infravörös spektrum adatai: vm_x/cm 1 (film): 2931,
2857 (CH2, aszim., szim.), 1521, 1345 (N02);
Az 1H-NMR spektrum adatai: dH: 1,06 (9H, s, t-Bu); 4,92 (2H, s, CH2); 7,42-7,46 (5H, m Ph); 7,63-7,65 (7H, m, Ph+Harom2+6)' ®'23 (2H, d, J = 8,23, Harom3+5)·
A tömegspektrum adatai: MS (El) (391,54); m/z: 334 (M
- t-Bu, 100); 288 (M - t-Bu - NO2, 10); 256 (M - t-Bu - Ph, 20);
199 (Ph2SÍOH+, 100); C23H25NO3Si.
(4-Amino-benzil)-terc-butil-difenil-szilil-éter (25)
A (24) képletű vegyület 5,00 g-jának (12,77 mmol) 100 ml etanollal készített oldatához, szobahőmérsékleten, keverés közben 1,50 g szénre lecsapott 10 % palládiumot és 4,60 g
- 42 ammónium-formiátot adunk. 1,5 óra elteltével a katalizátort szűréssel eltávolítjuk, a szűrletet vákuumban szárazra pároljuk, és a maradékot összerázzuk etil-acetát és víz elegyével. A szerves réteget magnézium-szulfáton megszárítjuk és vákuumban bepároljuk. így olaj alakjában 4,24 g (25) képletű vegyületet kapunk.
Kitermelés: 92 %.
Az infravörös spektrum adatai: vmax/cm_1 (film): 3433 ,
3378 (nh2 ), 2931, 2857 (CH2, aszim., szim. ) ;
Az •^H-NMR spektrum adatai: dH: 1,00 (9H, s , t-Bu); 4,57
(2H, s, CH2); 4,98 (2H, S, széles, NH2) ; 6,52 (2H, d, J =
8,25, Harom3+5^' (2H, d, Harom2+6^; 7,42-7,46 (5H, m,
Ph); 7,62-7,65 (5H, m, Ph).
A tömegspektrum adatai: MS (El), (361,56); m/z: 361 (M+,
8); 304 ( (M - t-Bu, 100); 199 (Ph2SiOH+, 100); C23H27NOSi.
(4 -Izocianáto-benzil)-tere-butil-difenil-szilil-éter (26)
A (25) képletű vegyület 0,63 g-jának (1,70 mmol) és 0,16 g (0,60 mmol) trietil-aminnak 10 ml toluollal készített oldatához keverés közben, 70°C-on 0,18 g (1,7 mmol) trifoszgént adunk. Öt óra elteltével leszűrjük a reakcióelegyet, és a szűrletet vákuumban bepároljuk. így 0,65 g olajat kapunk.
Kitermelés: 99 %.
Ezt további tisztítás nélkül felhasználjuk.
Az infravörös spektrum adatai: v max/cm_^ (film): 2931,
2857 (CH2, aszim., szim.), 2275 (NCO).
Az ^H-NMR-spektrum adatai: dpj: 1,03, (9H, s, t-Bu) ; 4,76 (2H, s, CH2); 7,23 (2H, d, J = 8,38, Harom3+5); 7,35 (2H, d.
·· ····
- 43 Harom2 + 6) ' 7,37-7,48 (5H, m Ph) ; 7,62-7,71 (5H, m, Ph) .
A tömegspektrum adatai: MS (El), (387,55); m/z: 330 (M
- t-Bu, 52); 286 (M - t-Bu, M - t-Bu - NCO, 48); 199 (Ph2SiOH+, 100); C24H25NO2Si.
N1-[4-(terc-Butil-difenil-szililoxi-metil)-fenil]-N^-[di(terc-butil)-glutamil]-karbamid (29)
A-módszer: 0,46 g (1,55 mmol) di(terc-butil)-glutamát-hidroklorid 7 ml tetrahidrofuránnal készített oldatához 0,31 g (3,10 mmol) trietil-amint adunk. A glutamát-észterhez szobahőmérsékleten a (26) képletű izocianátszármazék 0,60 g-jának (1,55 mmol) 3 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készített oldatát adjuk. Két óra elteltével a reakcióelegyet leszűrjük, és vákuumban szárazra pároljuk. A kapott terméket oszlopkromatográfiával [etil-acetát:ciklohexán (2:1) elegy] tisztítjuk, így 0,53 g (29) képletű olajat kapunk.
Kitermelés: 53 %.
Az infravörös spektrum adatai: vmax/cm_1 (film): 3359 (NH), 2932 , 2857 (CH2, aszim., szim.), 1729 (C=O, észter), 1670 (C=O, karbamid), 1154 (C-O, str.).
Az -'-H-NMR spektrum adatai: dH: 1,03 (9H, s, t-Bu); 1,40 (9H, s, t-Bu-glu); 1,43 (9H, s, t-Bu-glu); 1,68-2,00 (2H, 2m, CH(NH)CH2); 2,18-2,32 (2H, 2m, CH2CO2-t-Bu); 4,08-4,12 (1H, m, CH(NH)CH2); 4,68 (2H, S, CH2); 6,38 (1H, d, J = 8,12, NH-glu); 7,19 (2H, d, J = 8,41, Harom3+5); 7,32-7,47 (7H, m, Ph+Harom2+6); 7,62-7,70 (5H, m, Ph); 8,54 (1H, s, NH-Ph).
A tömegspektrum adatai: MS (El), (646,90); m/z: 540 (M - t-Bu + 1, 2); 534 (M - 2t-Bu + 2, 5); 478 (M - 3t-Bu +
3, ·· ··»·
100); 199 (Ph2SiOH+, 100); C37H50N2OgSÍ.
B-mődszer: [a (29) képletű vegyület egyedényes (one pót) előállítása] : 4,14 g (14,0 mmol) di(terc-butil)-glutamát-hidroklorid és 1,39 g (4,67 mmol) trifoszgén toluolos oldatához -78°C-on 30 perc alatt, cseppenként 2,83 g (28,0 mmol) trietil-amin 10 ml toluollal készített oldatát adjuk. A reakcióelegyet hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni. Ötven perc elteltével 5-10 perc alatt a (25) képletű (4-amino-benzil)-(terc-butil-difenil-szilil)-éter 5,00 g-ját (13,8 mmol) és 1,95 ml (14,0 mmol) trietil-amint tartalmazó oldatot adunk hozzá. Húsz óra elteltével a reakcióelegyet leszűrjük, és mossuk egymás után 200 ml vízzel, 200 ml 1 %-os vizes sósavoldattal, 200 ml 1 %-os vizes nátrium-karbonát oldattal, 2 x 200 ml vízzel; majd magnézium-szulfáton megszárítjuk, és vákuumban bepároljuk. így 9,90 g olajat kapunk. Erről a termékről a védőcsoportot további tisztítás nélkül eltávolítjuk.
N1-[4-(Hidroxi-metil)-fenil]-N3-Tdi(terc-butil)-qlutamil]-karbamid (30)
Az A-módszerrel kapott (29) képletű vegyület 0,53 g-jának (0,80 mmol) 10 ml tetrahidrofuránnal készített oldatához szobahőmérsékleten (tetrabutil-ammónium)-fluorid 1 M-os tetrahidrof urános oldatából 2,5 ml-t (2,5 mmol) adunk. Három óra elteltével a reakcióelegyet vákuumban szárazra pároljuk. A kapott terméket oldjuk 20 ml etil-acetátban, 2 x 10 ml vízzel mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. így 0,40 g olajat kapunk.
·*·« .*· ·· ···· ·····♦·· · • · ··· · · * ® φ φ * Λ ···· ···· ·· >te< ·φ<·
- 45 A szilil-védőcsoportot már nem tartalmazó (30) képletű vegyület 0,38 g-ját oszlopkromatográfiával [etil-acetát:ciklohexán (3:1) elegy] tisztítjuk. így 0,093 g olajat kapunk, amely állás közben kristályosodik.
Kitermelés: 29 %.
Az infravörös spektrum adatai: v max/cm_1 (film): 3370 (széles, NH+OH), 2967 (CH3), 2930, 2857 (CH2, aszim., szim.),
1716 (C=O, észter) , 1678 (C=0, karbamid) , 1153 (C-O, str.) s, t-Bu); 1,42
Az 1H-NMR spektrum adatai: dH: 1,40 (9H,
(9H, s, t-Bu); 1,72-2,00 (2H, 2m, CH(NH)CH2); 2,20-2,31 (2H,
2m, CH2CO2-t-Bu) ; 4,10-4,18 (1H, m, CH(NH)CH2) ; 4,39 (2H, d, J
= 5,36, CH2); 4,99 (1H, t, CH2OH); 6,38 (1H, d, J = 8 , 11,
NH-glu); 7,16 (2H, d, J = 8,35, Harom3+5^ ' 7,31 (2H, d,
Harom2+6)' 8'50 (1H, s, NH-Ph).
A tömegspektrum adatai: MS (El), (408,94) ; m/z: 408 (M+,
10); 352 (M - t-Bu + 1, 4); 296 (M - 2t -Bu + 2, 14) ;
C21H32N2°6·
A B-módszernél az egylépéses reakció szolgáltatja a (29)
vegyületet, amelyet oszlopkromatográfiával tisztítunk. így
2,57 g terméket kapunk. A három lépésnek megfelelő kitermelés itt 46 %. Ezt vizes metanolból átkristályosítjuk. Ennek kitermelése: 60 % .
N3- [4 ' - (Szukcinimidil-oxi-karbonil-oxi-metil) -fenil] -N3- [di(terc-butil)-glutamil]-karbamid (31)
0,200 g (0,49 mmol) N-'--[4-(hidroxi-metil)-fenil]-N3 - [di(terc-butil)-glutamil]-karbamid (30) és 0,128 g (0,50 mmol) di(szukcinimidil)-karbonát 5,0 ml acetonitrillel készített oldatához szobahőmérsékleten azonnal 0,041 ml piridint adunk. Húsz óra elteltével a reakcióelegyet vákuumban szárazra párojuk, az olajos maradékot oldjuk 3,0 ml etil-acetátban, 3 x 3,0 ml vízzel mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és ismét bepároljuk. így 0,151 g félszilárd anyagot kapunk, amelyet oszlopkromatográfiával [az eluens: etil-acetát:ciklohexán (3:1) elegy] tisztítunk. Végül 0,088 g szilárd anyagot kapunk.
Kitermelés: 39 %.
Az infravörös spektrum adatai: v max/cni_1 (film) : 3369 (NH), 1783 (C=O, karbonát), 1726 (C=O), észter, keton), 1660 (C=O, karbamid), 1207, 1156 (C-O, str.).
Az 'H-NMR spektrum adatai: dH: 1,3 9 (9H, s, t-Bu) ; 1,42 (9H, s, t-Bu); 1,80-2,00 (2H, 2m, CH(NH)CH2); 2,22-2,35 (2H, 2m, CH2CO2-t-Bu); 2,60 (4H, s, CH2-szukcinimidil); 4,10-4,20 (1H, m, CH(NH)CH2); 4,89 (2H, s, CH2); 6,47 (1H, d, J = 8,10, NH-glu); 7,32 (2H, d, J = 8,57, Harom3+5); 7,40 (2H, d, Harom2+6^ ·
A tömegspektrum adatai: MS (El), (549,58); m/z: 506 (M+-CO2+l,50), 450 (M+-CO2-C4H8+1, 18), 394 (M+-CO2-2C4Hq+1, 60), 279 (M+-CO2-2C4H8, -hidroxi-szukcinimid+1,90); C2gH38N3O1Q.
N1-[{2(R)-[2-(4'-Benzil-oxi-karbonil)-amino-3-merkapto-propil]-amino-3-metil-pentil}-izoleucil-homoszerin-lakton] -N3-[di(terc-butil)-qlutamil]-karbamid (32)
A (20) képletű vegyület metilén-dikloridos oldatához szobahőmérsékleten, nitrogénatmoszférában, a (31) képletű N1-[4'-(szukcinimidil-oxi-karbonil-oxi-metil)-fenil]-N3-[di47 ·· ·· ·· · · ···· ······· * • · · · · · · • · · · · · (terc-butil)-glutamil]-karbamid vízmentes tetrahidrofurán és trietil-amin elegyével készített oldatát adjuk. A reakcióelegyet bepároljuk, mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és újból bepároljuk. így a (32) képletű vegyületet kapjuk.
N1-[(4-Benzilidén-malonitril-oxi-karbonil)-4-oxi-benzil]-N3-qlutamil-karbamid (33)
A (32) képletű vegyületet 4°C-on, nitrogénatmoszférában oldjuk 95 %-os hangyasavban. Huszonkét óra elteltével az oldószert vákuumban lepároljuk. így a (33) képletű vegyületet kapj uk.

Claims (24)

1. Egy, legalább egy védőcsoporthoz kapcsolódó FTLi ras inhibitor prodrugját vagy az említett prodrugnak valamilyen fiziológiailag elfogadható származékát tartalmazó vegyület, amely védőcsoport lehasítható az említett vegyületről, és így felszabadul a ras inhibitor.
2. Egy 1. igénypont szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy az FTLi egy farnezil-transzferáz-inhibitort jelent.
3. Egy 1. vagy 2. igénypont szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy FTLi olyan (la) általános képletű vegyület, amelynek képletében
Cys jelentése ciszteinilcsoport;
A jelentése -NH-CH(R1)-COOR2 általános képletű csoport, amelyben
R1 egy természetesen előforduló aminosav oldalláncát jelentheti;
R2 jelentése hidrogénatom, metil- vagy aminocsoport.
4. Egy 3. igénypont szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy a képletben
A jelentése -NH-CH [CH2CH(CH3)2J -COOH, -NH-CH(CH2OH)-COOH,
-NH-CH(CH2CH2SCH3)-COOH vagy -NH-CH(CH2CH2SCH3)-CONH2 képletű csoport.
5. Egy 1. vagy 2. igénypont szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy FTLi olyan (Ib) vagy (Ic) általános képletű vegyület, amelynek képletében
X3 jelentése etiléncsoport, transz-viniléncsoport vagy
- 49 imido-metilén-csoport;
R3 és R4 egymással azonosak vagy különbözők, és jelentésük természetesen előforduló aminosav-oldallánc, beleértve azok oxidált alakjait; vagy szubsztituált vagy szubsztituálatlan alifás, aromás vagy heteroaromás csoport;
X2 jelentése -(CH2)n- általános képletű csoport, amelyben n értéke 0, 1 vagy 2.
6. Egy 5. igénypont szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy képletében
R3 és R4 egymással azonosak vagy különbözők, és jelentésük ciklohexil-, fenil-, piridil-, imidazolilcsoport, vagy 2-8 szénatomos telített vagy telítetlen, egyenes vagy elágazó láncú csoport, amely adott esetben szubsztituálva van aromás vagy heteroaromás gyűrűvel.
7. Egy 5. vagy 6. igénypont szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy képletében
R3 és R4 jelentése egymástól függetlenül metil-, izopropil-, izobutil-, szek-butil-, hidroxi-metil-, 1-hidroxi-etil-, (metil-tio)-etil-, (metil-szulfinil)-etilvagy (metil-szulfonil)-etil-csoport.
8. Egy 5., 6. és 7. igénypontok bármelyike szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy képletében
R3 és R4 mindegyikének jelentése szek-butil-csoport.
9. Egy, az 1-8. igénypontok bármelyike szerinti (II) általános képletű vegyület, azzal jellemezve, hogy a képletben az X-ek lehetnek azonosak vagy különbözők, és jelentésük • · iminocsoport, oxigénatom vagy kénatom;
m értéke 1 és 5 közötti egész szám;
a Ph-k amelyek, ha m értéke 2-től 5-ig terjed, lehetnek azonosak vagy különbözők, és jelentésük adott esetben szubsztituált feniléncsoport; és
FTL jelentése olyan csoport, hogy az FTL-(XH)m általános képlet m számú -XH csoportot tartalmazó FTLi, és ahol a nitrocsoport a feniléncsoport 2- vagy 4-helyzetében van.
10. Egy 9. igénypont szerinti (Illa) általános képletű vegyület, azzal jellemezve, hogy képletében m értéke 1 és 5 közötti egész szám;
a Ph-k amelyek, ha m értéke 2-től 5-ig terjed, lehetnek azonosak vagy különbözők, és jelentésük adott esetben szubsztituált feniléncsoport;
FTL jelentése olyan csoport, hogy az FTL-(SH)m általános képletű vegyület m számú merkaptocsoportot tartalmazó FTLi vegyület, és amelyben a nitrocsoport a feniléncsoport 2- vagy 4-helyzetében van.
11. Egy 9. igénypont szerinti (Illb) általános képletű vegyület, azzal jellemezve, hogy képletében m értéke 1 és 5 közötti egész szám;
a Ph-k amelyek, ha m értéke 2-től 5-ig terjed, lehetnek azonosak vagy különbözők, és jelentésük adott esetben szubsztituált feniléncsoport;
FTL jelentése olyan csoport, hogy az FTL-(NH2)m általános képletű vegyület m számú aminocsoportot tartalmazó FTLi vegyület, és amelyben a nitrocsoport a fenilén• · · ·
- 51 csoport 2- vagy 4-helyzetében van.
12. Egy 9. igénypont szerinti (lile) általános képletű vegyület, azzal jellemezve, hogy képletében a Ph-k egymással azonosak vagy különbözők, és jelentésük adott esetben szubsztituált feniléncsoport;
FTL jelentése olyan csoport, hogy az (SH)-FTL-(NH2) általános képletű vegyület egy FTLi vegyületet jelent, és amelyben a nitrocsoport a feniléncsoport 2- vagy
4-helyzetében van.
13. Egy, az 1-8. igénypontok bármelyike szerinti (V) általános képletű vegyület, azzal jellemezve, hogy a képletben az X-ek lehetnek egymással azonosak vagy különbözők, és jelentésük iminocsoport, oxigénatom vagy kénatom;
m értéke 1 és 5 közötti egész szám;
FTL jelentése olyan FTL általános képletű vegyület maradéka, hogy az FTL-(XH)m általános képletű vegyület egy m számú -XH csoportot tartalmazó FTLi vegyületet j elent;
a Ph-k amelyek, ha m értéke 2-től 5-ig terjed, lehetnek azonosak vagy különbözők, és jelentésük adott esetben szubsztituált feniléncsoport;
Z jelentése -0-C0- vagy -NH-CO- csoport; és glu jelentése a glutaminsav (a) képletű maradéka vagy annak egy di(l-6 szénatomos alkil)-észtere.
14. Egy 13. igénypont szerinti (VI) általános képletű vegyület, azzal jellemezve, hogy képletében m
értéke 1 és 5 közötti egész számjegy olyan FTL általános képletű vegyület maradékát
FTL jelenti, hogy az FTL-(NH2)m általános képletű vegyület egy m számú aminocsoportot tartalmazó FTLi vegyületet jelent;
a Phk amelyek, ha m értéke 2-től 5-ig terjed, lehetnek azonosak vagy különbözők, és jelentésük adott esetben szusztituált feniléncsoport;
Z jelentése -0-C0- vagy -NH-CO- csoport; és glu jelentése a glutaminsav (a) képletű maradéka vagy annak egy di(l-6 szénatomos alkil)-észtere.
15. Egy, a 9-14. igénypontok bármelyike szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy a Ph feniléncsoport szubsztituálva van 1-4 számú, az alábbiak közül választott azonos vagy különböző csoporttal; fluor-, klór-, bróm-, jódatom, hidroxi-, merkapto-, amino-, nitrocsoport, 1-4 szénatomos alkil-, halogénezett 1-4 szénatomos alkil-, 1-4 szénatomos alkoxi-, halogénezett 1-4 szénatomos alkoxi-, 2-4 szénatomos alkenil-, 2-4 szénatomos alkinil- és halogénezett 2-4 szénatomos alkenilcsoport .
16. Egy 15. igénypont szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy a gyűrű egy vagy több helyen szubsztituálva van fluoratommal, a 2-, 3-, 5- és/vagy 6-helyzetben.
17. Egy, az 1-16. igénypontok bármelyike szerinti vegyületet egy vagy több, gyógyászatilag elfogadható hordozóval vagy higítóanyaggal együtt tartalmazó készítmény.
18. Egy, embernél vagy állatnál a neoplázia befolyásolására való felhasználásra szolgáló rendszer, azzal jellemezve, hogy tartalmaz (i) egy, az 1-16. igénypontok bármelyike szerinti vegyületet • · · · hatásos gyógyszerré átalakítani képes enzimet, amely össze van kapcsolva egy daganattal asszociált antigénhez kötődni képes célba juttató ágenssel; és (ii) egy, az 1-16. igénypontok bármelyike szerinti vegyületet.
19. Egy, embernél vagy állatnál a neoplázia befolyásolásában való felhasználásra szolgáló rendszer, azzal jellemezve, hogy tartalmaz (i) egy, az említett alanyban a daganatsejteket szelektív módon fertőzni képes módosított vírust, amely vírus tartalmaz egy enzimet kódoló DNS- vagy RNS-szekvenciát; és (ii) egy, az 1-16. igénypontok bármelyike szerinti olyan vegyületet, amely az említett enzim hatására hatásos gyógyszerré alakítható át.
20. Egy, embernél vagy állatnál a neoplázia befolyásolásában való felhasználásra szolgáló rendszer, azzal jellemezve, hogy tartalmaz (i) egy nem-vírusos célba juttató rendszert, amely képes szelektív módon fertőzni az említett alanyban a daganatsejteket, és amely célba juttató rendszer tartalmaz egy enzimet kódoló DNS- vagy RNS-szekvenciát; és (ii) egy, az 1-16. igénypontok bármelyike szerinti olyan vegyületet, amely az említett enzim hatására hatásos gyógyszerré átalakítható.
21. Egy, a 18., 19. vagy 20. igénypontok bármelyike szerinti rendszer, azzal jellemezve, hogy az enzim egy bakteriális nitroreduktáz vagy karboxipeptidáz.
22. Egy FTLi(PRT)m általános képletű vegyület — a képletben • · • ·
FTLi jelentése egy, a 3. és 5. igénypontokban meghatározott (la), (Ib) vagy (Ic) általános képletű vegyület, azzal a kikötéssel, hogy az említett vegyületek mindegyike tartalmaz legalább egy merkapto-, hidroxivagy aminocsoportot;
m értéke 1 és 5 közötti egész szám;
a PRT-k amelyek, ha m értéke 2-től 5-ig terjed, lehetnek azonosak vagy különbözők, és jelentésük az (la), (Ib) vagy (Ic) általános képletű vegyületről egy enzim hatására lehasítható védőcsoport; ahol az (la), (Ib) vagy (Ic) általános képletű vegyület a PRT-csoporthoz az említett legalább egy merkapto-, hidroxi- vagy aminocsoporton keresztül kapcsolódik — előállítására szolgáló eljárás, azzal jellemezve, hogy az említett védőcsoportokat vagy azok prekurzorát reagáltatjuk egy (la), (Ib) vagy (Ic) általános képletű vegyülettel, olyan körülmények között, amelyek egy FTLi-(PRT)m általános képletű vegyületet eredményeznek.
23. Egy 22. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az így előállított vegyület az 1-16 igénypontok bárme-
lyike szerint 24. Egy meghatározottak valamelyike. (XVI) általános képletű vegyület, azzal jelle- mezve, hogy R5 jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport. 2 5. Egy 24 . igénypont ; szerinti vegyület, azzal j elle-
mezve, hogy
R5 jelentése etilcsoport vagy terc-butil-csoport.
• · · ·
26. Egy 22. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az említett prekurzor egy 24. vagy 25. igénypont szerint meghatározott (XVI) általános képletű vegyület, és az említett eljárás tartalmazza még az alkilcsoportoknak a prekurzorról való eltávolítását is.
HU9503984A 1993-07-27 1994-07-27 Fornesyltransforase inhibiting prodrugs and pharmaceutical compositions containing them HUT73979A (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB939315494A GB9315494D0 (en) 1993-07-27 1993-07-27 Improvements relating to prodrugs

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HU9503984D0 HU9503984D0 (en) 1996-03-28
HUT73979A true HUT73979A (en) 1996-10-28

Family

ID=10739484

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9503984A HUT73979A (en) 1993-07-27 1994-07-27 Fornesyltransforase inhibiting prodrugs and pharmaceutical compositions containing them

Country Status (12)

Country Link
US (1) US5770731A (hu)
EP (1) EP0711177B1 (hu)
JP (1) JPH09500896A (hu)
KR (1) KR960703623A (hu)
AT (1) ATE361760T1 (hu)
AU (1) AU693799B2 (hu)
CA (1) CA2167480A1 (hu)
DE (1) DE69434970T2 (hu)
GB (1) GB9315494D0 (hu)
HU (1) HUT73979A (hu)
NZ (1) NZ268934A (hu)
WO (1) WO1995003830A2 (hu)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9415167D0 (en) 1994-07-27 1994-09-14 Springer Caroline J Improvements relating to cancer therapy
GB9501052D0 (en) * 1995-01-19 1995-03-08 Cancer Res Campaign Tech Improvements relating to prodrugs
GB9601640D0 (en) * 1996-01-26 1996-03-27 Cancer Res Campaign Tech Ligand directed enzyme prodrug therapy
US6656718B2 (en) 2000-07-07 2003-12-02 Cancer Research Technology Limited Modified carboxypeptidase enzymes and their use
NZ537690A (en) 2002-07-15 2009-07-31 Univ Texas Antibodies binding to anionic phospholipids and aminophospholipids and their use in treating viral infections
GB0220319D0 (en) 2002-09-02 2002-10-09 Cancer Res Campaign Tech Enzyme activated self-immolative nitrogen mustard drugs
KR101502267B1 (ko) 2007-11-09 2015-03-18 페레그린 파마수티컬즈, 인크 항-ｖｅｇｆ 항체 조성물 및 방법

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB915454A (en) * 1960-06-28 1963-01-16 Nat Res Dev Nitrogen mustards
US5340828A (en) * 1991-09-30 1994-08-23 Merck & Co., Inc. Inhibitors of farnesyl protein transferase
US5238922A (en) * 1991-09-30 1993-08-24 Merck & Co., Inc. Inhibitors of farnesyl protein transferase
US5633158A (en) * 1991-10-23 1997-05-27 Cancer Research Campaign Technology Limited Bacterial nitroreductase for the reduction of CB 1954 and analogues thereof to a cytotoxic form
US5260479A (en) * 1991-12-16 1993-11-09 Merck & Co., Inc. Inhibitors of farnesyl protein transferase
US5245061A (en) * 1991-12-16 1993-09-14 Merck & Co., Inc. Inhibitors of farnesyl protein transferase
US5420157A (en) * 1991-12-16 1995-05-30 Merck & Co., Inc. Inhibitors of farnesyl protein transferase or prodrugs thereof
GB2264492B (en) * 1992-02-27 1996-09-25 Yamanouchi Pharma Co Ltd Benzodiazepine derivatives
GB9314960D0 (en) * 1992-07-23 1993-09-01 Zeneca Ltd Chemical compounds
ATE361759T1 (de) * 1993-07-15 2007-06-15 Cancer Res Campaign Tech Verbindungen die zur herstellung von protein- tyrosin-kinase-inhibitor-prodrogen verwendet werden können

Also Published As

Publication number Publication date
AU693799B2 (en) 1998-07-09
JPH09500896A (ja) 1997-01-28
HU9503984D0 (en) 1996-03-28
WO1995003830A3 (en) 1995-04-06
US5770731A (en) 1998-06-23
EP0711177B1 (en) 2007-05-09
ATE361760T1 (de) 2007-06-15
EP0711177A1 (en) 1996-05-15
NZ268934A (en) 1997-12-19
KR960703623A (ko) 1996-08-31
WO1995003830A2 (en) 1995-02-09
DE69434970T2 (de) 2008-01-31
GB9315494D0 (en) 1993-09-08
DE69434970D1 (de) 2007-06-21
CA2167480A1 (en) 1995-02-09
AU7233394A (en) 1995-02-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0708660B1 (en) Compounds useful for preparing prodrugs of protein tyrosine kinase inhibitors
EP1948242B1 (en) Cytotoxic compounds
EP0804413B1 (en) Nitrogen mustard prodrugs with novel lipophilic protecting groups, and processes for their production
AU716920B2 (en) Enediyne compounds
HUT73979A (en) Fornesyltransforase inhibiting prodrugs and pharmaceutical compositions containing them
CA2525091A1 (en) Water-soluble shps as novel alkylating agents
US12077606B2 (en) Cyclic peptide analogs and conjugates thereof
WO1998035982A1 (en) Compounds for use in adept
JP2000502071A (ja) 薬物療法
US11325888B2 (en) Method for the synthesis of monoprotected bifunctional prodrugs and antibody drug conjugates based thereon as well as a method for preparing antibody drug conjugates
CN118804765A (zh) 基于氨基磷酸酯的psma靶向小分子药物偶联物
Surabhi Synthesis and evaluation of phosphoramide mustard prodrugs for site-specific activation

Legal Events

Date Code Title Description
DFA9 Temporary protection cancelled due to abandonment