HUT54697A - Process for producing sulfur- and phosphorus-containing purine derivatives and pharmaceutical compositions comprising same as active ingredient - Google Patents
Process for producing sulfur- and phosphorus-containing purine derivatives and pharmaceutical compositions comprising same as active ingredient Download PDFInfo
- Publication number
- HUT54697A HUT54697A HU903160A HU316090A HUT54697A HU T54697 A HUT54697 A HU T54697A HU 903160 A HU903160 A HU 903160A HU 316090 A HU316090 A HU 316090A HU T54697 A HUT54697 A HU T54697A
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- hydroxy
- formula
- mmol
- propoxy
- preparation
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 30
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 17
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 7
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 title claims description 4
- QCJQWJKKTGJDCM-UHFFFAOYSA-N [P].[S] Chemical compound [P].[S] QCJQWJKKTGJDCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 title 1
- 229940083251 peripheral vasodilators purine derivative Drugs 0.000 title 1
- 125000000561 purinyl group Chemical class N1=C(N=C2N=CNC2=C1)* 0.000 title 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 107
- -1 diethoxy-phosphoryl methylthio Chemical group 0.000 claims description 32
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 24
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 22
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 21
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 21
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 19
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 13
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 10
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 9
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 claims description 9
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 125000002572 propoxy group Chemical group [*]OC([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 claims description 8
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims description 7
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 claims description 6
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 claims description 6
- 125000001301 ethoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])O* 0.000 claims description 6
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 claims description 6
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 6
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 claims description 6
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 125000005042 acyloxymethyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 4
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims description 4
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 4
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000000714 pyrimidinyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- TZLZMKJVSSBDMG-UHFFFAOYSA-N 3-(6-aminopurin-9-yl)oxy-2-(diethoxyphosphorylmethylsulfanyl)propan-1-ol Chemical compound N1=CN=C2N(OCC(CO)SCP(=O)(OCC)OCC)C=NC2=C1N TZLZMKJVSSBDMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- NBHDTHQFDSCNFV-UHFFFAOYSA-N 9-[2-(diethoxyphosphorylmethylsulfanyl)ethoxy]purin-6-amine Chemical compound N1=CN=C2N(OCCSCP(=O)(OCC)OCC)C=NC2=C1N NBHDTHQFDSCNFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims 4
- WSJHICYJBNIBNT-UHFFFAOYSA-N 2-amino-9-[(2-hydroxy-2-oxo-1,4,2$l^{5}-oxathiaphosphinan-5-yl)methoxy]-3h-purin-6-one;sodium Chemical compound [Na].C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1OCC1COP(O)(=O)CS1 WSJHICYJBNIBNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims 1
- 125000002816 methylsulfanyl group Chemical group [H]C([H])([H])S[*] 0.000 claims 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 claims 1
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 claims 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 86
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 61
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 30
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 29
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 25
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 24
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 24
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 24
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 21
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 21
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 19
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 16
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 16
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 15
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 14
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 9
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 8
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- FAMRKDQNMBBFBR-BQYQJAHWSA-N diethyl azodicarboxylate Substances CCOC(=O)\N=N\C(=O)OCC FAMRKDQNMBBFBR-BQYQJAHWSA-N 0.000 description 8
- 125000004177 diethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 8
- FAMRKDQNMBBFBR-UHFFFAOYSA-N ethyl n-ethoxycarbonyliminocarbamate Chemical compound CCOC(=O)N=NC(=O)OCC FAMRKDQNMBBFBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 8
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 8
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 8
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- IYYIVELXUANFED-UHFFFAOYSA-N bromo(trimethyl)silane Chemical compound C[Si](C)(C)Br IYYIVELXUANFED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 7
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 7
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 7
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 7
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 6
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 6
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 6
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 6
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 6
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 6
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M potassium iodide Chemical compound [K+].[I-] NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000701085 Human alphaherpesvirus 3 Species 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 5
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 5
- HDZGCSFEDULWCS-UHFFFAOYSA-N monomethylhydrazine Chemical compound CNN HDZGCSFEDULWCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 4
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 4
- 244000309466 calf Species 0.000 description 4
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 4
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 4
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 4
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 229960004279 formaldehyde Drugs 0.000 description 4
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 4
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 4
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 4
- PJUIMOJAAPLTRJ-UHFFFAOYSA-N monothioglycerol Chemical compound OCC(O)CS PJUIMOJAAPLTRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 4
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 229940035024 thioglycerol Drugs 0.000 description 4
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WJKHJLXJJJATHN-UHFFFAOYSA-N triflic anhydride Chemical compound FC(F)(F)S(=O)(=O)OS(=O)(=O)C(F)(F)F WJKHJLXJJJATHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PYOKUURKVVELLB-UHFFFAOYSA-N trimethyl orthoformate Chemical compound COC(OC)OC PYOKUURKVVELLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 4
- PHCBUNJOFKZTMZ-UHFFFAOYSA-N 2-(diethoxyphosphorylmethylsulfanyl)ethanol Chemical compound CCOP(=O)(OCC)CSCCO PHCBUNJOFKZTMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 3
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 3
- 241000450599 DNA viruses Species 0.000 description 3
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000701074 Human alphaherpesvirus 2 Species 0.000 description 3
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 3
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 3
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 241000713325 Visna/maedi virus Species 0.000 description 3
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 3
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 3
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- STNNHWPJRRODGI-UHFFFAOYSA-N carbonic acid;n,n-diethylethanamine Chemical compound [O-]C([O-])=O.CC[NH+](CC)CC.CC[NH+](CC)CC STNNHWPJRRODGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 3
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 235000019256 formaldehyde Nutrition 0.000 description 3
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012442 inert solvent Substances 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- KLDVGEJFCKHJBE-JTQLQIEISA-N (2s)-3-(2-amino-6-methoxypurin-9-yl)oxy-2-(diethoxyphosphorylmethylsulfanyl)propan-1-ol Chemical compound N1=C(N)N=C2N(OC[C@H](CO)SCP(=O)(OCC)OCC)C=NC2=C1OC KLDVGEJFCKHJBE-JTQLQIEISA-N 0.000 description 2
- LPBMTXGKPMBTPE-UHFFFAOYSA-N 2-(9-hydroxypurin-6-yl)isoindole-1,3-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1=C2N=CN(O)C2=NC=N1 LPBMTXGKPMBTPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N Dimethyl ether Chemical compound COC LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000009889 Herpes Simplex Diseases 0.000 description 2
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010015780 Viral Core Proteins Proteins 0.000 description 2
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- MGSFKHKKKPNVGD-UHFFFAOYSA-N [1-(6-aminopurin-9-yl)oxy-3-hydroxypropan-2-yl]sulfanylmethylphosphonic acid Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2OCC(CO)SCP(O)(O)=O MGSFKHKKKPNVGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 2
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 2
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 2
- IRUNKQSGDBYUDC-UHFFFAOYSA-N diethoxymethyl acetate Chemical compound CCOC(OCC)OC(C)=O IRUNKQSGDBYUDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N diethylene glycol Chemical compound OCCOCCO MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethanethiol Chemical compound CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N phosphoryl trichloride Chemical compound ClP(Cl)(Cl)=O XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007505 plaque formation Effects 0.000 description 2
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 2
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 2
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- MZBIWKMCTWJLPT-UHFFFAOYSA-N 1-[chloromethyl(ethoxy)phosphoryl]oxyethane Chemical compound CCOP(=O)(CCl)OCC MZBIWKMCTWJLPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NYYLZXREFNYPKB-UHFFFAOYSA-N 1-[ethoxy(methyl)phosphoryl]oxyethane Chemical compound CCOP(C)(=O)OCC NYYLZXREFNYPKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- QMJMEKNSAZDTIH-UHFFFAOYSA-N 2,2-diethoxyethyl acetate Chemical compound CCOC(OCC)COC(C)=O QMJMEKNSAZDTIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JNDFOPDDJGCCBT-UHFFFAOYSA-N 2-(7h-purin-6-yl)isoindole-1,3-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1=NC=NC2=C1NC=N2 JNDFOPDDJGCCBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WKMBQCPTQUNCGJ-UHFFFAOYSA-N 2-[9-[2-(diethoxyphosphorylmethylsulfanyl)ethoxy]purin-6-yl]isoindole-1,3-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1=C2N=CN(OCCSCP(=O)(OCC)OCC)C2=NC=N1 WKMBQCPTQUNCGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WJSVJNDMOQTICG-UHFFFAOYSA-N 2-amino-1-[(2-methyl-4-methylidene-5-oxooxolan-2-yl)methyl]-7h-purin-6-one Chemical compound NC1=NC=2N=CNC=2C(=O)N1CC1(C)CC(=C)C(=O)O1 WJSVJNDMOQTICG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ITYBSGDZUQCDAB-UHFFFAOYSA-N 2-amino-9-[2-(diethoxyphosphorylmethylsulfanyl)ethoxy]-3h-purin-6-one Chemical compound N1=C(N)NC(=O)C2=C1N(OCCSCP(=O)(OCC)OCC)C=N2 ITYBSGDZUQCDAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CFMZSMGAMPBRBE-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyisoindole-1,3-dione Chemical compound C1=CC=C2C(=O)N(O)C(=O)C2=C1 CFMZSMGAMPBRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FCZOVUJWOBSMSS-UHFFFAOYSA-N 5-[(6-aminopurin-9-yl)methyl]-5-methyl-3-methylideneoxolan-2-one Chemical compound C1=NC2=C(N)N=CN=C2N1CC1(C)CC(=C)C(=O)O1 FCZOVUJWOBSMSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DKGIDXRLFYRRKD-UHFFFAOYSA-N 9-[(2-methyl-4-methylidene-5-oxooxolan-2-yl)methyl]-3h-purin-6-one Chemical compound C1=NC(C(N=CN2)=O)=C2N1CC1(C)CC(=C)C(=O)O1 DKGIDXRLFYRRKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSSXOMSJDRHRMC-UHFFFAOYSA-N 9H-purine-2,6-diamine Chemical class NC1=NC(N)=C2NC=NC2=N1 MSSXOMSJDRHRMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OOUMOJPQKYZQSM-UHFFFAOYSA-N C(CC)ONC=1NC(C=2NC=NC2N1)=O Chemical compound C(CC)ONC=1NC(C=2NC=NC2N1)=O OOUMOJPQKYZQSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100129500 Caenorhabditis elegans max-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000003298 DNA probe Substances 0.000 description 1
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 229940033330 HIV vaccine Drugs 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 1
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 description 1
- 235000019738 Limestone Nutrition 0.000 description 1
- JLTDJTHDQAWBAV-UHFFFAOYSA-N N,N-dimethylaniline Chemical compound CN(C)C1=CC=CC=C1 JLTDJTHDQAWBAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYNYSAARPACZQP-UHFFFAOYSA-N NC1=NC(=NC=C1NC=O)NC=O Chemical compound NC1=NC(=NC=C1NC=O)NC=O VYNYSAARPACZQP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N Phosphorous acid Chemical group OP(O)=O ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010047620 Phytohemagglutinins Proteins 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- SPWJHPINHHHCHS-UHFFFAOYSA-N [2-(diethoxyphosphorylmethylsulfanyl)-3-[6-(1,3-dioxoisoindol-2-yl)purin-9-yl]oxypropyl] acetate Chemical compound O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1=C2N=CN(OCC(COC(C)=O)SCP(=O)(OCC)OCC)C2=NC=N1 SPWJHPINHHHCHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MBYSMVMYSAVMCJ-UHFFFAOYSA-N [3-(6-aminopurin-9-yl)oxy-2-(diethoxyphosphorylmethylsulfanyl)propyl] acetate Chemical compound N1=CN=C2N(OCC(COC(C)=O)SCP(=O)(OCC)OCC)C=NC2=C1N MBYSMVMYSAVMCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003377 acid catalyst Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004423 acyloxy group Chemical group 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N ammonium formate Chemical compound [NH4+].[O-]C=O VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000010 aprotic solvent Substances 0.000 description 1
- 238000011914 asymmetric synthesis Methods 0.000 description 1
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000001246 bromo group Chemical group Br* 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000004063 butyryl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000012320 chlorinating reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000007398 colorimetric assay Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 1
- 150000004985 diamines Chemical class 0.000 description 1
- ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N diethanolamine Chemical compound OCCNCCO ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012470 diluted sample Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 150000002169 ethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 125000000268 heptanoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000003104 hexanoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 1
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000006028 limestone Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 125000005905 mesyloxy group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- SJUZRTBKERGCTK-UHFFFAOYSA-N n-(4,6-dichloro-2-formamidopyrimidin-5-yl)formamide Chemical compound ClC1=NC(NC=O)=NC(Cl)=C1NC=O SJUZRTBKERGCTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QQUWMRQAOFAKSG-UHFFFAOYSA-N n-[6-chloro-9-[2-(diethoxyphosphorylmethylsulfanyl)ethoxy]purin-2-yl]formamide Chemical compound N1=C(NC=O)N=C2N(OCCSCP(=O)(OCC)OCC)C=NC2=C1Cl QQUWMRQAOFAKSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000007899 nucleic acid hybridization Methods 0.000 description 1
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 1
- YYIJJQHZQOFVII-UHFFFAOYSA-N o-[2-(diethoxyphosphorylmethylsulfanyl)ethyl]hydroxylamine Chemical compound CCOP(=O)(OCC)CSCCON YYIJJQHZQOFVII-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 1
- 125000001181 organosilyl group Chemical group [SiH3]* 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-M phosphonate Chemical compound [O-]P(=O)=O UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000005544 phthalimido group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001885 phytohemagglutinin Effects 0.000 description 1
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 125000001501 propionyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 238000003118 sandwich ELISA Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 1
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- MVOXUONISDZOBZ-UHFFFAOYSA-N tert-butyl n-(9-hydroxy-6-methoxypurin-2-yl)carbamate Chemical compound COC1=NC(NC(=O)OC(C)(C)C)=NC2=C1N=CN2O MVOXUONISDZOBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MHYGQXWCZAYSLJ-UHFFFAOYSA-N tert-butyl-chloro-diphenylsilane Chemical compound C=1C=CC=CC=1[Si](Cl)(C(C)(C)C)C1=CC=CC=C1 MHYGQXWCZAYSLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YMBCJWGVCUEGHA-UHFFFAOYSA-M tetraethylammonium chloride Chemical compound [Cl-].CC[N+](CC)(CC)CC YMBCJWGVCUEGHA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000004187 tetrahydropyran-2-yl group Chemical group [H]C1([H])OC([H])(*)C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000002992 thymic effect Effects 0.000 description 1
- 125000005424 tosyloxy group Chemical group S(=O)(=O)(C1=CC=C(C)C=C1)O* 0.000 description 1
- 230000002110 toxicologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000759 toxicological effect Toxicity 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- GKASDNZWUGIAMG-UHFFFAOYSA-N triethyl orthoformate Chemical compound CCOC(OCC)OCC GKASDNZWUGIAMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
- C07F9/6561—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings
- C07F9/65616—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings containing the ring system having three or more than three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members, e.g. purine or analogs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Public Health (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Virology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
A találmány tárgya eljárás az antivirális hatású (I) általános képletű vegyületek - a képletben R1 jelentése hidroxil- vagy aminocsoport, jelentése hidrogénatom vagy aminocsoport, jelentése hidrogénatom, hidroxi-metil- vagy aciloxi-metil-csoport,
R4 jelentése egy (a) képletű csoport - ahol
Rg és Rg jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, adott esetben
1-6 szénatomos alkilcsoport vagy szubsztituált fenilcsoport -, és R4 együtt egy (b) képletű csoportot jelent ahol Rg jelentése a fentiekben megadott - és gyógyászatilag elfogadható sóinak előállítására, továbbá a fenti vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására.
Az EP-A 242 482. számú szabadalmi leírás (Beecham Group p.l.c.) ismertet 9-hidroxi-alkoxi-szubsztituenssel rendelkező guanin-származékokat, melyek antivirális aktivitást fejtenek ki.
Egy uj, szerkezetileg különböző vegyületcsaládot fejlesztettünk ki, melyek szintén antivirális aktivitással rendelkeznek.
A találmány tárgya tehát eljárás az (I) általános képletű vegyületek - a képletben jelentése hidroxil- vagy aminocsoport,
R2 jelentése hidrogénatom vagy aminocsoport, r3 jelentése hidrogénatom, hidroxi-metil- vagy aciloxi-metil-csoport,
R4 jelentése egy (a) képletű csoport - ahol
R5 és Rg jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, 1-6 szénatomos alkilcsoport vagy adott esetben szubsztituált fenilcsoport vágj
R3 és R4 együtt egy (b) képletű csoportot jelent ahol Rg jelentése a fentiekben megadott - és gyógyászatilag elfogadható sóik előállítására, oly módon, hogy
a) egy (11) általános képletű vegyületet egy imidazolgyürüt eredményező ciklizálási reakcióba visszük - a képletben X jelentése egy imidazolgyürüt eredményező ciklizáláshoz alkalmas csoport - mint például aminocsoport, vagy aminoszármazék, előnyösen formil-aminocsoport - vagy
b) olyan (I) általános képletű vegyületek előállítása esetén - ahol R^ jelentése hidroxil-, R2 jelentése aminocsoport egy (III) általános képletet - a képletben
Y jelentése amino- vagy 1-6 szénatomos alkilcsoport - egy
2-es helyzetű R2' szubsztituenst hordozó pirimidingyürü kialakítására képes kondenzálószer jelenlétében pirimidingyürüt eredményező gyűrűzárási reakcióba visszük,
c) egy (IV) általános képletű vegyületet egy az oldalláncot hordozó (V) általános képletű vegyülettel - a képletben Q jelentése egy távozó csoport - kondenzáljuk, a fenti (II) - (V) általános képletű vegyületekben
Rj/, r2'' r3' és R4í és R1( R2, R3 és r4 olyan csoportokat, illetve atomokat jelentenek, melyek átalakíthatók azokká és kívánt vagy adott esetben Ri',R2', r3t és/vagy R4' csoportokat, amennyiben eltérnek R^, R2, R3 és/vagy R4 jelentésétől, a megfelelő Rj, R2, R3 és/vagy R4 csoportokká alakítjuk és/vagy Rj/, R2'/ R3' és/vagy r4 < csoportokat, amennyiben jelentésük egyezik Rx, R2, R3 és/vagy R4 csoportok jelentésével, egy másik Rj_r, R2', R3' és/vagy R4r csoportokká alakítjuk, és a kapott terméket kívánt esetben gyógyászatilag elfogadható sóvá alakítjuk.
Ha Rx jelentése hidroxil- és R2 jelentése aminocsoport, akkor az (I) általános képletű vegyület egy guaninszármazék.
Ha R-l jelentése aminocsoport és R2 jelentése hidrogénatom, akkor az (I) általános képletű vegyület egy adeninszármazék.
Ha Rj jelentése hidroxilcsoport és R2 jelentése hidrogénatom, akkor az (I) általános képletű vegyület egy hipoxantinszármazék.
Ha Rí és R2 azonosan aminocsoport, akkor az (I) általános képletű vegyület egy 2,6-diamino-purin-származék.
Az (I) általános képletű vegyületek gyakran guanin- vagy adeninszármazékok.
Az acilcsoport megfelelő példái, amennyiben R3 jelentése aciloxi-metil-csoport, magukba foglalják a karboxilcsoportokat, mint például az 1-7 szénatomos alkanoilcsoportokat és az adott esetben a fenilgyürüben az R5/R6 jelentésénél az alábbiakban megadottakkal szubsztituált benzoilcsoportot.
Az acilcsoportok előnyös példái magukban foglalják az acetil-, propionil-, butiril-, heptanoil- és hexanoilcsoportokat.
R5 és Rg megfelelő példái magában foglalják a következőket: hidrogénatom, metil-, etil-, n- és izopropil-, η-, szék-, izo- és terc-buti1-csoport, fenilcsoport, amely adott esetben 1-3 atommal szubsztituált, ahol a szubsztituens lehet halogénatom, mint például fluor-, klór-, brőmatom vagy 1-4 szénatomos alkil- vagy 1-4 szénatomos alkoxicsoport, ahol az alkilcsoport a fentiekben megadottak bármelyike lehet.
Az (I) általános képletű vegyületek gyógyászatilag elfogadható sóinak példái a gyógyászatilag elfogadható savakkal, mint például hidrogénkloriddal, orto-f oszforsawal és kénsawal alkotott savaddiciós sói. A gyógyászatilag elfogadható sók magukban foglalják a szerves bázisokkal, előnyösen aminokkal, mint például etanol-aminokkal vagy diaminokkal alkotott sókat, és az alkálifémsókat, mint például nátrium- és káliumsókat.
Timikor az (I) általános képletű vegyület tartalmaz egy foszfonátcsoportot, akkor a megfelelő sók magukban foglalják a fémsókat, például az alkálifémsókat, például a nátrium- és káliumsókat, az alkáliföldfémsókat és az ammónium- vagy a szubsztituált ammóniumsókat, mint például a kis szénatomszámu alkilaminokat, mint a trietil-amint, hidroxi-szénatomszámu alkil-aminokat, mint például a 2-hidroxi-etil-amint, bisz-(2-hidroxi-etil)-amint vagy a trisz-(2-hidroxi-etil)-amint.
Megjegyezzük, hogy számos (I) általános képletű vegyület, különösen azok, amelyeknél R3 jelentése hidrogénatomtól eltérő, egy aszimmetriacentrummal rendelkeznek, és ennél fogva képesek több mint egyfajta sztereoizomer formában létezni. A találmány szerinti eljárással előállíthatok ezek a formák elkülönítve és keverékként is, ideértve a racemátkeveréket is. Az izomereket ismert módon választhatjuk el kromatográfiás módszerekkel vagy rezolválószer alkalmazásával. Mindemellett a különféle izomereket előállíthatjuk aszimmetriás szintézis úton királis intermedierek alkalmazásával.
Az (I) általános képletű vegyületek és alkálifémsóik alkothatnak szolvátokat, mint például hidrátokat és a továbbiakban ezeket is értjük az (I) általános képletű vegyületek illetve sóik alatt.
Megjegyezzük, hogy amennyiben az (I) általános képletben R1 jelentése hidroxilcsoport, akkor a vegyület az (IA) szerkezettel jellemző túlsúlyban lévő tautomer formában létezik, mikoris X jelentése előnyösen egy formil-amino-csoport, az a) eljárást kivitelezhetjük egy ciklizációs kondenzálőszer használatával, mint például dietoxi-etil-acetát vagy trietil-ortoformiát vagy fúzióval.
A b) eljárást végrehajthatjuk az EP-A-242 482. számú közzétételi iratban leírt eljárások szerint, mely anyagot beépítettük jelen bejelentésünkbe is.
A c) eljárást végrehajthatjuk a Q csoport megfelelő példáival, ideértve a halogénatomokat, mint például klór-, bróm- és jódatomot, előnyösen jódatomot alkalmazunk, vagy más olyan csoport alkalmazásával, melyek könnyedén helyettesíthetők nukleofilekkel, példának említjük a meziloxi- vagy toziloxicsoportot. A reakciót előnyösen inért oldószerben, mint például dimetil-formamidban bázis jelenlétében, mint például kálium-karbonát, 0-50 °C-on, előnyösen a környezet hőmérsékletén hajtjuk végre. Mindemellett Q jelentése lehet hidroxilcsoport és ez esetben a reakciót dehidratáló katalizátor jelenlétében hajtjuk végre. Dehidratáló katalizátorra példa a dietil-azodikarboxilát és trifenil-foszfin.
A különböző csoportok átalakítására a következő példákat soroljuk fel:
R^' — R]_
a) Egy R^ = hidroxicsoport átalakítható egy Rj_' = klóratom szubsztituenssé klórozószer, mint például foszfor-oxiklorid használatával, előnyösen tetraetil-ammónium-klorid és dimetil-anilin (savmegkötőszer) jelenlétében CH3CN oldószerben reflux hőmérsékleten. A reakciót a M.J. Robins és B. Ozanski Can. J. Chem. 59, 2601 (1981) szerint végezzük el.
b) Egy Rjy = klóratomot átalakíthatunk R^ = hidroxilcsoporttá hidrolízissel, melyet vizes ásványi sav, előnyösen hidrogénklorid sav használatával végzünk. Még előnyösebben egy szerves savat, mint például hangyasavat alkalmazunk emelt hőmérsékleten, előnyösen 70-150 °C-on, még előnyösebben 100 °C körül.
c) Egy R-l* = klóratom szubsztituenst átalakíthatunk egy R^ = aminocsoporttá ammóniával való kezeléssel, melyet kis szénatomszámu alkanolban, mint például etanolban vagy metanolban egy autoklávban 100 °C-on kb. 7 órán át végzünk. Egy másik megoldás szerint dimetil-formamidban nátrium-azidos kezelést végzünk (R^ = N3 intermediert alakítunk ki), majd metanolban ammónium-formiát/csontszenes palládiummal redukálunk.
d) Egy R]/ = alkoxicsoportot, például metoxicsoportot mint például metoxicsoportot átalakíthatunk egy R^ = = hidroxilcsoporttá a D.R. Haines, J. Med. Chem. 1987, 30, 943 és K.K. Ogilvie és H.R. Hanna, Can. J. Chem. 1984, 62 f 2702 szerinti eljárással.
e) Egy Rj/ védett aminocsoport, mint például trietil-aminocsoport átalakítható aminocsoporttá vizes ecetsavas kezeléssel, melyet előnyösen 80 %-os ecetsavval emelt hőmérsékleten kb. 80 °C-on végzünk. R^r lehet egy ftálimidocsoport is, amelyet átalakíthatunk aminocsoporttá metilhidrazinnal vagy hidrazinnal végzett kezeléssel, melyet inért oldószerben, mint például diklór-metánban környezeti hőmérsékleten hajtunk végre.
R2' ” R2
a) R2' lehet egy védett aminocsoport, mint például formil-aminocsoport, amelyet átalakíthatunk egy R2 = aminocsoporttá hidrolízissel vagy R2' lehet egy di-t-butiloxi-karbonil-amino-csoport.
R3' “ r3
a) Hidroxil- vagy hidroxil-metil-csoport átalakítható aciloxi- vagy aciloxi-metil-csoporttá önmagában ismert acilezési eljárásokkal.
b) Védett hidroxil- vagy védett hidroxil-metil-csoport átalakítható hidroxil- vagy hidroxil-metil-csoporttá önmagában ismert védőcsoporteltávolítási eljárásokkal.
Az EP-A-242 482. számú közzétételi irat megfelelő példákat sorol fel a védőcsoportokra illetve azok eltávolítására szolgáló eljárásokra. Egy különösen megfelelő védőcsoport az acetilcsoport, amely hidrolízissel eltávolítható.
R4· - R4
Amennyiben az R4 jelentésében szereplő R5 és Rg csoportok hidrogénatomtól eltérőek, akkor ezeket R5 és Rg = = hidrogénatommá alakíthatjuk dezészterező reagensekkel, mint például trimetil-szilil-bromiddal egy aprotikus oldószerben, mint például diklór-metánban vagy dimetilformamidban a környezet hőmérsékletén (lásd C. E. McKenna és mtsai, J.C.S. Chem. Comm., 1979, 739).
Az R5 és Rg csoportok egyikének hidrogénatommá történő szelektív konverzióját végrehajthatjuk hidroxid ionos kezeléssel (lásd Rabinowitz JACS 1960, 82, 4564).
Ciklusos foszfonátok, amelyeknél R3 és R4 a meghatározásnak megfelelően egymáshoz kapcsolódik, előállíthatok a megfelelő (I) általános képletű vegyületből, ahol R5 és Rg jelentése hidrogénatom és R3 jelentés ehidroxilcsoport úgy, hogy a vegyületet N,N-diciklohexil-4morfolino-karboxamidinnel és egy dehidratáló reagenssel, mint • ·
- 10 diciklohexil-karbodiimiddel reagáltatjuk.
Megjegyezzük, hogy a fenti átalakítások bármilyen kívánt vagy szükséges sorrendben végrehajthatók az előállítani kívánt (I) általános képletnek megfelelően.
A (II) általános képletű intermedierek előállíthatok a megfelelő (VI) általános képletű vegyületekből az (V) általános képletű intermediereken keresztül, amelyben Q jelentése OH-csoport, mint azt a fentiekből meghatároztuk, az EP-A-242 482. számú közzétételi iratban leírt eljárásoknak megfelelően, azaz az (V) általános képletű vegyületet, ahol Q jelentése OH-csoport ftálimido-oxi-származékká alakítjuk át, majd metil-hidrazinnal reagáltatjuk.
A (VI) általános képletű vegyületek, melyeknél jelentése klóratom és R2' jelentése aminocsoport, ismert vegyületek, melyeket leírtak a Temple és mtsai, J. Org. chem., 40 (21), 3141, 1975 műben.
Azok a (VI) általános képletű vegyületek, amelyeknél R]/ klóratom és R2' hidrogénatom, kereskedelemben hozzáférhető vegyületek.
A (III) általános képletű intermedierek előállíthatók az EP-A-242 482. számú közzétételben általánosan leírt eljárások szerint.
A (IV) általános képletű vegyületeket előállíthatjuk az EP-A-313 289. és az EP-A-319 228. számú közzétételi iratban leírtak szerint, azaz egy (VI) általános képletű vegyületből, -ahol az 5-aminocsoport formilezett egy R7ONH2 vegyülettel, ahol R7 jelentése védőcsoport - végrehajtott reakcióval. Az
Az így kapott (VII) általános képletű vegyületet ciklizálhatjuk dietoxi-metil-acetáttal és így kapjuk a (IV) általános képletű vegyületet, ahol az OH-csoport védett.
Az R7 csoport megfelelő példái magukba foglalják a benzilcsoportot, amely hidrogénezéssel eltávolítható és a tetrahidropirán-2-il-csoportot, amely 80 %-os ecetsavas kezeléssel távolítható el környezeti hőmérsékleten.
Az (V) általános képletű intermedier vegyületek, amelyeknél Q jelentése hidroxilcsoport, ismert vegyületek, vagy pedig analóg módon előállíthatok a szerkezetileg hasonló ismert vegyületekből.
Amikor R3 jelentése hidrogénatom, a vegyületek előállíthatok a megfelelő R4/CI képletű vegyületnek tioetanollal való reagáltatásával, mely reakciót bázis jelenlétében, mint például nátrium-hidrid/kálium-jodid jelenlétében végzünk egy inért oldószerben, mint például tetrahidrofuránban (lásd 1. intermedier előállítási példa).
Az (V) általános képletű vegyületek, melyeknél R3 / jelentése hidroxi-metil-csoport, előállíthatok az a) reakcióvázlat szerint.
Amennyiben R3 jelentése hidroxi-metil-csoport, akkor az (V) általános képletű intermediernek az oldalláncban található egyik hidroxilcsoport szelektív védelme szükségeltetik. Ezt megoldhatjuk trimetil-ortoformiáttal történő reagáltatással, melyet egy savkatalizátor, mint például p-toluol-szulfonsav jelenlétében végzünk.
A gyógyászatilag elfogadható sókat ismert módon állíthatjuk elő, például a savaddiciós sók esetében egy megfelelő szerves vagy szervetlen savval történő reagáltatással.
Megjegyezzük, hogy találmányunkkal eljárást szolgáltatunk az R3 helyén hidroxil-metil-csoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületek olyan eljárás előállítására, mely szerint az R3 helyén védett hidroxil-metil-csoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületről a védőcsoportot eltávolítjuk. A védőcsoport-eltávolításra megfelelő eljárásokat a fentiekben ismertettünk, ideértve az acetilcsoport eltávolítását is.
A találmány szintén szolgáltat eljárást azon (I) általános képletű vegyületek előállítására, ahol R5 és Rg jelentése hidrogénatom oly módon, hogy a megfelelő R5 és Rg helyén egyformán alkil- vagy adott esetben szubsztituált fenilcsoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületeket dezészterezzük.
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek hatásosan alkalmazhatók vírusok által okozott fertőzések kezelésénél különösen DNS vírusok és retrovírusok esetében. A DNS vírusok példái magukba foglalják a herpeszvírusokat, mint például a herpes simplex 1 és 2 tipusuakat, a varicellazoster vírust, az Epstein-Barr vírust és a citomegalovírust. A retrovírusok magukba foglalják a lentivírusokat, mint például a visna vírust és a humán immunhiányos betegséget okozó vírust (1. és 2. törzs).
A találmány szerinti vegyületek tumort okozó vírusok inhibitorai és/vagy hatásosak daganatos megbetegedéseket, mint például rákot okozó betegségek kezelésében.
A találmány szerinti vegyületeket alkalmazhatjuk gyógyászati készítmények előállítására is.
Ennek megfelelően találmányunk egy további tárgyát képezi egy olyan eljárás, mellyel az (I) általános képletű vegyületeket vagy gyógyászatilag elfogadható sóit a gyógyszerkészítmények előállításánál szokásosan alkalmazott hordozó- és/vagy vívőanyagokkal gyógyászati készítménnyé alakítjuk.
Az orálisan alkalmazható kompozíciók lehetnek szirupok, tabletták vagy kapszulák. Amikor a kompozíció tabletta formájú, bármilyen szilárd készítmények előállításához alkalmazható gyógyászati hordozót tartalmazhat, például magnézium-sztearátot, keményítőt, laktózt, glükózt, rizs- vagy lisztport vagy mészkőport.
A készítmény lehet emészthető kapszulaformáju is, például a vegyületet tartalmazó zselatinkapszula, vagy szirupformáju vagy egy oldat vagy egy szuszpenzió. A megfelelő folyékony gyógyászatilag elfogadható hordozók magukba foglalják az etil-alkoholt, a glicerint, sós vizet és vizet, mely utóbbihoz ízesítő- és szinezőszereket is adhatunk szirup formában. A vegyületeket kiszerelhetjük steril folyékony hordozóba injektálás céljára.
A készítményeket kialakíthatjuk bőr és szem helyi kezelésére alkalmas formává.
A bőr helyi kezelésére alkalmas készítmény lehet krém, % 9
- 14 oldat vagy kenőcs formájú. Ezeket a kiszerelési módozatokat ismert formulázási eljárásokkal állíthatjuk elő lásd például a gyógyászati és kozmetikai készítmények területén általánosan használt Harry-féle Cosmeticology könyvét (Leonard Hill Books and the British Pharmacopaeia).
A szem kezelésére alkalmas készítmények lehetnek szokásos szemcseppkészítmények vagy kenőcs kompozíciók.
A találmány szerinti készítmények előnyösen dózisegység formájuak és számos esetben egyszeri dózisban alkalmazhatók. Egy megfelelő dózisegység tartalmazhat 50 mg - 1 g aktív anyagot, például 100 - 500 mg-ot.
Az ilyen adagok 1-4-szer, még gyakrabban 2-3-szor alkalmazhatók naponta. A vegyületek hatásos dózisa általában 1,0 - 20 mg/testsulykg/nap általánosabban 2,0 - 10 mg/testsulykg/nap tartományban van.
A fentiekben megadott dózisszinteknél nem jelentkezik nem elfogadható toxikológiai hatás.
A találmány szerinti eljárással előállított (I) általános képletű vegyületek vagy gyógyászatilag elfogadható sóik aktív terápiás anyagok, különösen vírusos fertőzések kezelésére.
A találmány szerinti vegyületek feltehetően szinergetikus antivirális hatást fejtenek ki az interferonnal együtt alkalmazva. Ennélfogva a találmány tárgyát képezik azok a kombinációs készítmények is, melyek magukba foglalják a fenti két komponens egymást követő vagy együttes alkalmazását ugyanolyan vagy eltérő módon.
• a
- 15 * A találmány szerinti vegyületek hatékonyságát az alábbi módon vizsgáltuk.
Antivirális aktivitás vizsgálata
1. CPE inhibició teszt (replikálódó sejtek) herpes simplex vírus 1 esetében
MRC-5 sejtek (5 % újszülött borjúszérumot tartalmazó Eagle MÉM hordozóban) szuszpenzióját SC16 törzsbeli herpes simplex vírus 1-gyel fertőzzük. (Kb. egy fertőző részecske 10 sejtenként.) A fertőzött sejtszuszpenzió 100 mikroliterjeit (kb 2xl04 sejtet tartalmaznak) viszünk egy 96 lyuku mikrotiter tányér lyukjaiba, melyek egyforma térfogatban tartalmazzák a hordozóval (5 % újszülött borjúszérumot tartalmazó Eagle-féle MÉM hordozó) együtt alkalmazott vizsgálandó vegyületet. A koncentrációtartomány 200 - 0,06 yug/ml volt. A koncentráciősorozatot háromszoros hígításokkal készítettünk, így a végső koncentrációk 100 - 0,03 yug/ml között mozogtak. A tányérokat 37 °C-on 5 % széndioxidot tartalmazó nedves atmoszférában inkubáltuk 3 napon át, míg a vírus okozta citopatikus hatás a kontrolledényekben 100 %-ot el nem ért. A tányérokat formol sós vízben készült oldatával fixáltuk, majd karbolos fuxinnal színeztük. Ezután a tányérokat megvizsgáltuk, hogy meghatározzuk a vizsgált vegyület azon koncentrációját, amelynél a vírus indukált citopatikus hatás 50 %-ra csökken. (IC5Q). A nem fertőzött sejteket tartalmazó tányérokat párhuzamosan felhasználtuk a vizsgált vegyületek citotoxicitást okozó minimális koncentrációjának a meghatározásához.
* »· «« * * · » « ·« · » 4* 4* • ·· 4 « »·>· k * « A « «*
2. Plakkcsökkentő teszt a herpes simplex vírus 2-re
MRC-5 sejteket növesztünk 24 lyuku multi-funkcionális edényekben (1,5 cm lyukátmérő). A leszárított sejt egyrétegek mindegyikét a herpes simplex vírus 2 (HSV-2; MS-törzs) 100 yuliter foszfát-pufferolt sóoldatban képszült oldatával fertőzzük úgy, hogy kb. 50 fertőzőrészecske jut mindegyik lyukba. A vírust 1 órán át szobahőmérsékleten adszorbeáltatjuk. Az adszorpciót követően az oltóanyag maradékát eltávolítjuk a lyukakból és 5 % újszülött borjúszérumot és 0,9 % agarózt (A37) tartalmazó Eagle-féle MÉM hordozóval helyettesítjük. Mikor az agaróz beállt, a vizsgálandó vegyület oldatait adtuk a lyukakhoz, melyeket Eagle-féle MÉM hordozóban készítettünk el (5 % újszülött borjúszérumot tartalmaz). Mindegyik lyuk 0,5 ml fölül elhelyezkedő folyadékot kapott. A vizsgált vegyületet a következő higítási sorban alkalmaztuk: 200, 60, 20, 6 ... ... 0,6 yug/ml. így a végső koncentrációtartomány 200 yug/ml és 0,03 yug/ml között volt. A fertőzött kultúrákat 37 °C 5 % C02-t tartalmazó nedves atmoszférában inkubáltuk addig, míg a plakkok tisztán láthatóvá váltak (általában 1 nap).
3. Plakkcsökkentő teszt varicella zoster vírus-ra
MRC-5 sejteket növesztünk 24 lyuku multi-funkcionális edényekben (1,5 cm lyukátmérő). A leszárított sejt egyrétegek mindegyikét a varicella zoster vírus (VZV; Ellen törzs)) 100 yuliter foszfát-pufferolt sóoldatban készült oldatával fertőzzük úgy, hogy kb. 50 fertőzőrészecske jut mindegyik lyukba. A vírust 1 órán át szobahőmérsékleten « · ···· ·* ·>·
- 17 adszorbeáltatjuk. Az adszorpciót követően az oltóanyag maradékát eltávolítjuk a lyukakból és 5 % magzati borjúszérumot és 0,9 % agarózt (A37) tartalmazó Eagle-féle MÉM hordozóval helyettesítjük. Mikor az agaróz beállt, a vizsgálandó vegyület oldatait adtuk a lyukakhoz, melyeket Eagle-féle MÉM hordozóban készítettünk el (5 % hővel inaktivált magzati borjúszérumot tartalmaz). Mindegyik lyuk 0,5 ml fölül elhelyezkedő folyadékot kapott. A vizsgált vegyületet a következő higítási sorban alkalmaztuk: 200, 60, 20, 6 ...
... 0,6 yug/ml. így a végső koncentrációtartomány 200 yug/ml és 0,03 /ug/ml között volt. A fertőzött kultúrákat 37 °C 5 % CO2-t tartalmazó nedves atmoszférában inkubáltuk addig, mig a plakkok tisztán láthatóvá váltak (általában 5-6 nap).
Majd ezt követően a 2. és 3. tesztekből származó tenyészeteket formolos sóoldattal fixáltuk, az agaróz fedőrétegeket óvatosan mostuk, majd ezt követően a sejt egyrétegeket karbolos fuxinnal színeztük. Egy sztereomikroszkóppal összeszámoltuk a plakkokat. A vizsgált vegyületre vonatkozó IC5Q értéket (olyan hatóanyagkoncentráció, amely 50 %-ban csökkenti a plakkok kialakulását a vírus kontroll egyrétegekhez viszonyítva) kiszámítottuk. Ezen felül az egyrétegeket megvizsgáltuk a hatóanyag által okozott citotoxicitás bizonyítására. Feljegyeztük azt a minimális koncentrációt, amely citotoxicitást okozott.
4. Plakkcsökkentő teszt citomegalovírus-ra
MRC-5 sejteket növesztünk 24 lyuku multi-funkcionális edényekben (1,5 cm lyukátmérö). A leszárított sejt egyrétegek ·*·· ·« . ·· ^ _*
mindegyikét a citomegalovírus (CMV; AD-169 törzs)) 100 yuliter foszfát-pufferolt sóoldatban képszült oldatával fertőzzük úgy, hogy kb. 50 fertőzőrészecske jut mindegyik lyukba. A vírust 1 órán át szobahőmérsékleten adszorbeáltatjuk. Az adszorpciót követően az oltóanyag maradékát eltávolítjuk a lyukakból és 5 % magzati borjúszérumot és 0,9 % agarózt (A37) tartalmazó Eagle-féle MÉM hordozóval helyettesítjük. Mikor az agaróz beállt, a vizsgálandó vegyület oldatait adtuk a lyukakhoz, melyeket Eagle-féle MÉM hordozóban készítettünk el (10% hővel inaktivált magzati borjúszérumot tartalmaz). Mindegyik lyuk 1 ml fölül elhelyezkedő folyadékot kapott. A vizsgált vegyületet a következő higítási sorban alkalmaztuk: 200, 60, 20, 6 ...
... 0,6 yug/ml. így a végső koncentrációtartomány 200 yug/ml és 0,03 yug/ml között volt. A fertőzött kultúrákat 37 °C 5 % CO2_t tartalmazó nedves atmoszférában inkubáltuk addig, míg a plakkok tisztán láthatóvá váltak (általában 126 nap) .
A tenyészeteket formalinos sóoldattal fixáltuk, az agaróz fedőrétegeket óvatosan mostuk, majd ezt követően a sejt egyrétegeket karbolos fuxinnal színeztük. Egy sztereomikroszkóppal összeszámoltuk a plakkokat. A vizsgált vegyületre vonatkozó IC50 értéket (olyan hatóanyagkoncentráció, amely 50 %-ban csökkenti a plakkok kialakulását a vírus kontroll egyrétegekhez viszonyítva) kiszámítottuk. Ezen felül az egyrétegeket megvizsgáltuk a hatóanyag által okozott citotoxicitás bizonyítására. Feljegyeztük azt a minimális koncentrációt, amely citotoxicitást okozott.
·«· · • ·
5. CPE inhibiciős teszt ( lenti vírusra
Egy 96 lyuku (mélyedéses) mikrotiter tányér minden egyes lyukába 3xl04 juh plexus chorodiens sejtet (SCP) viszünk 100 /ul Eagle-féle MÉM közegben, amely 10 % inaktivált magzati borjúszérumot (FCS) tartalmazó Hanks-féle sót tartalmaz. Timikor az egyrétegek kialakultak (1 vagy 2 nap növekedést követően) azokat 200 /1 fenntartó közeggel (Eagle-féle MÉM közeg 0,5 % Hanks-féle sóval), majd 100 yul fenntartó közegben (30 TCIK5Q/ml) lévő visna vírussal (K184 törzs) fertőztük. Tesztmintákat hígítottunk további 96 lyukuzatu mikrotiter tányérokon 200-0,06 yug/ml koncentrációtartományban háromszoros higítási lépésekben. A hígított mintáknak 100 yuliterjeit vittük egyenesen a vírusfertőzött egyrétegekre a végső koncentrációtartomány ennélfogva 100-0,03 /ug/ml) majd azokat 5 %-os széndioxidot tartalmazó nedves atmoszférában inkubáltuk addig, míg a vírus inkulált citopatikus hatás (CPE) maximális nem lett a nem kezelt vírusfertőzött kontrolloknál (általában 12-14 nap). A tányérokat formolos sóoldattal fixáltuk, majd kristályviolettel színeztük. A virusindukált CPE-t mikroszkóppal határoztuk meg és a sejt egyrétegek teljes védelmét biztosító minimális koncentrációt (MIC) határoztuk meg.
6. A humán immunhiánvosságot okozó vírus (HÍV) esetében a) Sejt citotoxicitási teszt
Perifériás humán limfocitákat izoláltunk sűrűség-gradienses centrifugálással egészséges önkéntesek
··· ···· ·· ·· • · · · • · · · ·· ·· vérmintáiból. A buffy coat frakcióit a mintáknak véradó központok szolgáltatták.
A buffy coat frakciót 1:1 arányban hígítottuk steril foszfáttal pufféról sóoldattal (PBS; 50 mmol/liter nátrium-foszfát, pH = 7,4, 0,9 % nátrium-klorid) majd ezt követően Ficoll-t rétegeztünk föléje. Centrifugálást követően (30 perc 400 gén) a felülúszó réteget eldobtuk és a limfocitákat tartalmazó közbülső fázist kinyertük. A limfocitákat PBS-sel mostuk kétszer, majd végül sejttenyésztő közegben szuszpendáltuk.
Az életképességi színezést a tripánkék szinezéskizárásos eljárással határoztuk meg. A sejteknek a szuszpenzióban lévő koncentrációját és életképes sejtek százalékát számoltuk ki. Ezt követően a sejtszuszpenzió koncentrációját lxlO7 sejt/ml koncentrációra állítottuk be. Ezt a sejtszuszpenziót szövettenyésztő edényekbe vittük: a sejtszuszpenzió kétharmadát poliklonálisan aktiváltuk fitohemagglutinin adagolásával (végső koncentráció 5 /ug/ml). A sejtszuszpenzió egyharmadát nem stimuláltuk.
A limfocitákat egy inkubátorban tenyésztettük 5 %-os nedves atmoszférában 48-64 órán át 37 °C-on. Az inkubálási időszakot követően a sejteket centrifugálással gyűjtöttük össze, majd tenyésztőközegbe leszuszpendáltuk és összeszámoltuk. A stimulált és nem-stimulált sejteket 2:1 arányban egyesítettük, majd a koncentrációt kétszer 106 sejt/ml koncentrációra állítottuk be sejttenyésztő közeggel, amely 10 egység/ml humán rekombináns interleukin-2-t is tartalmazott.
Csak azokat a limfocita készítményeket alkalmaztuk további vizsgálatra, amelyekben a stimulált limfocitáknak több mint 70 %-a expresszálta a CD 25 antigént és több mint 45 %-a expresszálta a CD 4 antigént.
Ezeknek a limfocita szuszpenzióknak 100 yug-ját adtuk a mikrotiter tányérok minden egyes lyukába, amelyek a tesztvegyület higítási szériáit tartalmazták a 100 - 0,1 yumol/liter tartományban. Ezt követően a mikrotiter tányérokat 4 napon át 37 °C-on tenyésztettük.
A vegyület jelenlétében növekvő limfociták túlélését és osztódásos szaporodását kvantitatív kolorimetriás méréssel határoztuk meg. Az életképes sejteket MTT 3-4,5-(dimetil-tiazol-2-il)-3,5-difeniltetrazólium tenyésztjük, melyek redukálják ezt a sápadt sárgaszínü anyagot lila színű forazánná mitokondriális dehidrogenáz aktivitásukkal fogva.
Azok termék mennyiségét, amely sejtszám illetve sejti metabolikus aktivitást mutat fotometriásan határoztuk meg. Ezzel a módszerrel a vegyületeknek a limfocitákkal szembeni potenciális citotoxicitási és citosztatikus hatását határoztuk meg pontosan.
A mikrotiter tányérokat 5 percen át 900 g-n centrifugáltuk. A felülúszó részt eldobjuk, majd minden egyes lyuk sejtjeit 50 yuliter sejttenyésztö közegben, amely 2 ug/ml MTT-t tartalmaz, mégegyszer leszuszpendáljuk. 37 °C-on végzett inkubálást követően 100 /ul oldószert (izopropanol 0,04 mol/liter HCl-lel és 10 v% Triton 100-za.l) adunk minden
egyes lyukba. A mikrotiter tányérok rázásával a formazant szolubilizáltuk. Ezt követően a tányérokat ELISA fotométerben értékeltük kettős hullámhossz módszerrel (mérésre alkalmazott hullámhossz: 550 nm; referencia hullámhossz: 690 nm) .
Minden egyes lyukra az abszorpció különbségét számoltuk (abszorpció 550 nm - 690 nm). Ezek az adatok szolgáltatták a további citotoxicitási tesztek számolásának az alapját. Minden egyes vegyület körülbelüli CD5Q értékét (félmaximális citotoxicitási dózis) számoltuk.
b) HÍV elnyomási teszt
Perifériás humán limfocitákat preparáltunk, tenyésztettünk és gyűjtöttünk össze a fentiekben leírtak szerint. A limfocita felületi markerek meghatározását követően a nemstimulált és a mitogén stimulált sejteket 1:2 arányban egyesítettük.
Biztonsági körülmények között a sejteket HÍV standard preparátumokkal fertőztük. A sejteket centrifugálással szediméntáltűk. A felülúszó réteget eldobtuk és a sejteket HÍV oldóanyagban leszuszpendáltuk.
Ez az oltóanyag a HIV-1 vírustörzsnek egy folyékony szuszpenziója, amelyet előre vizsgáltak és egy olyan titerre állítottak be, amely a p24 vírus mag fehérje szintézisét 100 ng/ml koncentrációnál nagyobb koncentrációban eredményezi egy nap alatt a leírás szerinti négy egymást követő humán limfocitával végzett fertőzést követően.
3x10® limfocitát reszuszpendáltunk 1 ml Hív oltóanyagban, majd 37 °C-on 60 percen át inkubáltunk. Ezt követően a sejteket kétszer mostuk 50 ml tenyésztőközeggel és reszuszpendáltuk 10 egység/ml humán rekombináns interleukin-2-t tartalmazó tenyésztőközegben és így 2xl06 sejt/ml sejtkoncentrációt kaptunk. Ennek a sejtszuszpenziónak 100 yuliter-jét adtuk a vegyületek hígított oldatait tartalmazó mikrotiter tányérok minden egyes lyukába. A mikrotiter tányérokat 5 %-os széndioxidot tartalmazó nedves atmoszférában inkubáltuk 37 °Con.
Mindemellett a limfociták egy frakcióját álfertőztük ugyanazzal a víruskészítménnyel, amelyet a fertőzést megelőzően inaktiváltunk (30 perc alatt 56 °C-on).
A fertőzést követő 2., 3. és 4. napon mindegyikén a mikrotiter tányérok egyikét, amelyet 3 példányban hoztunk létre, a vírusreplikáció meghatározására készítettünk elő. A vírus RNS-t a sejten belül határoztuk meg, ahol a p24 vírus mag fehérjét a limfocita tenyészet felülúszőjában határoztunk meg. Ennek megfelelően minden egyes lyukból 150 yuliter felülúszót eltávolítottunk és azokat egy 50 yuliter/ lyuk SDS (nátrium-dodecil-szulfát, 0,08 %) tartalmazó mikrotiter tányér lyukaiba vittünk. Ezeket a tányérokat fagyasztottan tároltuk. 50 yuliter leállító oldatot (1 % SDS, 20 mmol/liter nátrium-acetát, pH = 5,0 és 200 yug/heparin) adtunk minden egyes lyukban maradó sejttenyészethez. A tányérokat fagyasztottan tároltuk.
A HÍV fertőzött sejtek által szintetizált p24 koncentrációt szendvics ELISA-módszerrel határoztuk meg még a vírus RNS koncentrációt nukleinsav hibridizációval határoztuk meg a vírus genom gag/pol régiójára vonatkozó 32P-cimkézett
DNS próbák használatával. A minták vírus antigén és RNS abszolút szintjeit a nemkezelt vírusfertőzött kontrollokhoz hasonlítottuk és a %-os inhibiciót számítottuk. Az 1-5 tesztek eredményeit az alábbi táblázatok tartalmazzák.
Antivirális aktivitás DNS vírusokkal szemben
IC50 (/ug/ml)
Példa | Herpes Simplex | Varicella Zoster vírus | Citomegalo- vírus | |
vírus 1. típus | 2. típus | |||
SC16 törzs | MS törzs | Ellen törzs | AD169 törzs | |
MRC-5 | MRC-5 | MRC-5 | MRC-5 | |
sejtekben | sejtekben | sejtekben | sejtekben | |
2 | 20 | 3,2 | 0,6 | 1,5 |
6 | 20 | 100 | 3,8 | 3,5 |
11 | 100 | 100 | 40 | 55 |
12 | 20 | NT | 4,1 | 4,3 |
/ug/ml koncentráció alatt egyik vegyület sem volt citotoxikus a tesztekben használt sejt egyrétegekre.
Antivirális aktivitás Visna vírussal szemben
Példaszám
MIC yug/ml)
100
100
0,3
Antivirális aktivitás HÍV vírussal szemben
Inhibíció a fertőzést követő
3. és 4. napon
Példaszám Koncentráció Vírus antigén Vírus RNS
3. nap 4. nap 3. nap 4. nap
2 | 10 | 0 | 77 | 0 | 69 |
6 | 10 | 86 | 48 | 85 | 61 |
A vizsgált | koncentrációnál (10 | /umol/liter) | egyik | vegyület sem |
volt citotoxikus a nem fertőzött perifériális humán limfocitákra.
A további példákkal ismertetjük találmányunkat közelebbről.
1. intermedier előállítási példa /(V) általános képletű intermedier az 1-4. példák számára/
Dietil-2-hidroxi-etil-tiometil-foszfonát
Nátrium-hidridet (1,5 g, 80 %, 50 mmol) adunk részletekben tioetanolt (3,9 g, 50 mmol) száraz tetrahidrofuránban (50 ml) készült kevert oldatához szobahőmérsékleten. A keveréket 0,5 órán át keverjük, majd frissen őrölt és szárított kálium-jodidot (0,5 g, 3,0 mmol) adunk hozzá, majd ezt követően dietil-klór-metil-foszfonát (9,3 g, 50 mml) száraz tetrahidrofuránban készült oldatát adagoljuk 5 perc alatt (exoterm reakció, a reakcióhőmérséklet 50 °C-ra emelkedik). A reakciókeveréket 80 °C-on 18 órán át keverjük. A hűtött reakcióelegyet vákuumban szárazra pároljuk, majd a maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagéltöltetet és eluensként kloroformot alkalmazva. 8,0 g (79 %) olajszerű termék formájában kapjuk a cím szerinti vegyületet. ^max (fűm) 3380, 2980, 2900, 2860, 1475 és 1440 cm ’i;
A (CDC13) 1,35 (6H, t, J 7 HZ, 2 x CH3), 2,80 (2H, d, J 13 Hz, PCH2S), 2,87 (2H, t, J 5 Hz, SCH2CH2), 3,8 (2H, széles s, CH2OH), 3,92 (1H, széles s, D2 kicserélhető, OH), 4,2 (4H, m, 2 x CH2OP), Elemanalizis a C7H17O4PS.O.5H2O képlet alapján: számított: C% 35,46; H% 7,64; M+228; talált: 35,43; 7,64; M+ NH3 Cl 229.
2. intermedier előállítási példa (II. számú intermedier az 1. és 2. példa számára)
a) N-(2-Dietoxi-foszforil-metil-tio)-etoxi-ftálimid
Dietil-azodikarboxilátot (3,8 g, 22 mmol) adunk dietil27
-2-hidroxi-etil-tiometil-foszfonát (4,5 g, 20 mmol), N-hidroxi-ftálimid (3,26 g, 20 mmol) és trifenil-foszfin (5,78 g, 22 mmol) száraz dimetil-formamidban (50 ml) készült oldatához 0,5 °C-on. A keveréket ezt követően szobahőmérsékleten keverjük 18 órán át. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk, majd a maradékot dietil-éterben (75 ml) oldjuk, majd 0-5 °C-ra hűtjük 5 órán át. A szilárd anyagot kiszűrjük, majd a szűrletet vákuumban szárazra pároljuk és a maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagél töltet és eluensként dietil-étert alkalmazva. 5,3 g (71 %) cím szerinti vegyületet kapunk sápadt olaj formájában.
Vmax (film) 2970, 2920, 2900, 1730, 1460 és 1435 cm;
(CDC13) 1,35 (6H, t, J 7 Hz, 2xCH3) , 2,85 (2H, d, J 13 Hz, PCH2S), 3,13 (2H, t, J 6,5 Hz, CH2S), 4,20 (4H, m, 2xCH2OP), 4,42 (2H, t, J 6,5 Hz, CH2ON), 7,80 (4H, m, Ar) Elemanalizis a C15H2qNO6SP képlet alapján: számított: M+ 373,0749. talált: M+ 373,0751.
b) Dietil-2-amino-oxietil-tiometil-foszfonát
Metil-hidrazint (0,56 g, 12 mmol) adunk N-2-(dietil-oxi-foszforil-metiltio)-etoxi-ftálimid (3,0 g, 8 mmol) száraz diklór-metánban készült oldatához 0-5 °C-on. A keveréket 2 órán át keverjük, majd szűrjük és az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot kromatográfiásan tisztítjuk etil-acetát . metánnal = 97 : 3 arányú eluenst alkalmazva. 1,6 g (84 %) cím szerinti vegyületet kapunk olaj formájában, ^max (fűm) 3460, 3300, 2980, 2890, 1590, 1470, 1440, 1385 és 1365 cm1 [(D3) 1,24 (6H, t, J6,5Hz, 2xCH3), 2,83 (2H, t, J
6,5 HZ, CH2S), 2,90 (2H, d, J 13 HZ PCH2S), 3,68 (2H, t, J 6,5 HZ, CH2ONH2), 4,03 (4H, m 2x CH2OP), 6,0 (2H, széles s, kicserélhető D2O, NH2).
Elemanalizis a C7H13NO4PS képlet alapján:
számított: C% 34,56; H% 7,45; N% 5,76;
talált: 34,95; 7,40; 5,63;
c) 4-Klór-6-r(2-dietoxi-foszforil-metiltio)- etoxi!-amino-2,5-diformamido-pirimidin
2-Amino-oxietil-tiometil-foszfonát (1,6 g, 6,6 mmol),
4,6-diklór-2,5-diformamido-pirimidin (2,54 g, 6,5 mmol) és diizopropil-etil-amin (1,7 g, 13 mmol) száraz diglikol-dimetil-éterben (10 ml) készült oldatát 100 °C-on 2,5 órán át hevítjük. A lehűtött reakcióelegyet szűrjük, majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk és a maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagéltöltet és diklór-metán : metanol — 97 : 3 eluenst alkalmazva. 6,9 g (30 %) cím szerinti vegyületet kapunk sárga olaj formájában.
^max (MeOH) 226 és 287 mm ( £ 9750 és 12656);
%ax (fűm) 3200, 2970, 2920, 1700, 1690, 1585, 1475 és 1415 cm-1;
ΓΗ t(CD3)2SO] 1,23 (6H, t, J 6,5 Hz, 2xCH3), 2,9 (4H, m, PCH2S és CH2S), 4,0 (6H, m 2 x CH20P és CH2ON), 8,14 (1H, s, ONH) , 9,26 (1H, széles s, CHO), 9,4 (1H, széles s, D2O kicserélhető NH), 10,8 (2H, m, D2O kicserélhető NH + CHO).
Elemanalizis a C13H21N5O4SPCI képlet alapján:
számított: M+ 441.0639 talált: M+ 441.0633.
3. intermedier előállítási példa /(V) képletű intermedier az 5 - 9. példák számára/
a) 1,3-Dibenzil-oxipropán-2-oxi-trif luor-metán-szulfonát
1,3-Dibenzoil-oxipropanol (5,4 g, 20 mmol) és 4-dimetilamino-piridin (3,0 g, 20 mmol) száraz diklór-metánban (75 ml) készült oldatát trifluor-metán-szulfonsav-anhidriddel (96,7 g, 24 mmol) kezeljük 0-5 °C-on. A keveréket 1 órán át keverjük, majd hideg vízzel mossuk és szárítjuk (MgSO4), majd szűrjük és az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagél töltetet és etilacetát : hexán =50 : 50 eluenst alkalmazva. 6,6 g (82,5 %) cím szerinti vegyületet kapunk sápadt olaj formájában.
V max (film): 3090, 3060, 3020, 2870, 1610, 1590, 1500, 1455, 1410 cm-1;
H (CDCI3) : 3,65 (4H, d, J 7Hz, 2 x OCH2), 4,5 (4H, S,
PhCH2), 5,1 (4H, kvintett J 7Hz), CH); 7,3 =10H, m, ArH) .
b) Dietil-1,3-dibenzil-oxipropán-2-tiometil-foszfonát Dietil-metil-foszfonát (1,1 g, 6 mmol) száraz tetrahidrofuránban (20 ml) készült oldatát nátrium-hidriddel (0,15 g, 6,25 mmol) kezeljük 0-5 °C-on, majd 1 órát keverjük szobahőmérsékleten. Az oldatot ezt követően 0-5 °C-ra hűtjük és 1,3-dibenzoil-oxipropán-2-oxi-trif luor-metán-szulf onát (2,65 g, 6,5 mmol) száraz tetrahidrofuránban (10 ml) készült oldatával kezeljük. A reakcióelegyet ezt követően 3 órán át keverjük. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk, majd a maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk, szilikagél töltetet és etil-acetát : hexán =60 : 40 eluenst alkalmazva.
1,9 g (74 %) cím szerinti vegyületet kapunk színtelen olaj formájában.
Vmax (fü®) | 3060, 3015, | 2980, | 2905, 2860, | 1960, | 1875, 1810, |
1605, | 1590, 1495, | 1475, | 1450, 1390 és | 1365 | m”l; |
Í{ (CDC13) 1, | 3 (6H, t, J | 7Hz, 2 | X CH3), 2,85 | (2H, | d J 13 Hz), |
PCH2S) | , 3,4 (IH, m | ., CH), | 3,7 (4H, d J | 7 HZ, | 2 X CH20), |
4,15 (4H, m, 2 x CH2), 4,5 (4H, s, CH2Ph) és 7,3 (10H, m, Ar H)
Elemanalizis a Cj22H3iO5PS képlet alapján:
számított: C% 60,25; H% 7,12 talált: 60,41; 7,33.
c) Dietil-1,3-dihidroxi-propán-2-tiometil-foszfonát
1,3-Dibenzil-oxipropán-2-tiometil-foszfonát (1,5 g, 3,4 mmol) metanolban 20 ml) készült oldatát metanolos hidrogénkloriddal (0,5 ml) kezeljük, majd %-os csontszénre felvitt palládium (1,7 g) jelenlétében hidrogénezzük addig, míg a hidrogénfelvétel megszűnik (122 ml H2 + 36 ml katalizátor felvétel). A reakcióelegyet szűrjük, majd az oldószerelegyet vákuumon eltávolítjuk. A maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk, szilikagél töltetet és diklór-metán : metanol = 95 : 5 eluenst alkalmazva. 0,7 g (80 %) cím szerinti vegyületet kapunk színtelen olaj formájában.
• ·
- 31 ^max (film) 3400, 2990, 2940, 2940, 2920, 2880, 1650, 1472, 1445, 1320 és 1390 cm1;
(CD3)SO 1,24 (tH, t, J 7 Hz 2 x CH3), 2,9 (2H, d, J 13 Hz PCH2S), 2,91 (1H, m, CH), 3,6 (4H, m, 2 X CH2OH), 4,0 (4H, m, 2 x CH2), 4,7 (2H, t J 5,5 Hz D2O kicserélhető 2 X OH) ;
Elemanalizis a C3H9O5PS képlet alapján:
számított: C% 37,20 ; H% 7,41 MH+ 259.0769;
talált: C% 36,39; H% 7,65.
d) Dietil-l-acetoxi-3-hidroxi-propán-2-tiometil-foszfonát Dietil-1,3-dihidroxi-propán-2-tiometil-foszfonát (2,1 g, 8,1 mmol) száraz tetrahidrofuránban (30 ml) készült oldatát trimetil-ortoformiáttal (3,7 g, 30 mmol) és p-toluol-szulfonsawal (0,2 g, 1 mmol) kezeljük és 18 órán át szobahőmérsékleten keverjük. 5 mol/literes hidrogénklorid savat (5 csepp) adunk az elegyhez, majd a keverést további 20 percen át folytatjuk. Az oldószert vákuumban elpárologtatjuk és a maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagél töltetet és kloroform eluenst alkalmazva. 1,8 g (75 %) cím szerinti vegyületet kapunk színtelen olaj formájában ^max (fűm) 3400, 2980, 2930, 1740, 1440, 1380 és 1240 cm~l <TH (CD3)112SO 1,24 (6H, t, J 7 Hz, 2 X CH3), 2,0 (3H, s,
CH3), 2,95 (2H, d, J 13, PCH2S), 3,2 (1H, m, CH) 3,6 (2H, m, CH20H), 4,1 (4H, m, 2 x CH2), 4,2 (2H, m, CH20Ac), 4,9 (1H, t J 5,5 Hz kicserélhető D2O-val, OH) Elemanalizis a CioH^OgPS képlet alapján:
számított: C% 40,00; H% 7,05;
talált: 39,39; 7,23.
4. intermedier előállítási példa /(V) képlet vegyületek a 12. és 13. példák számára/
a) (R)-l-Benziloxi-3~t-butil-difenil-szililoxi-propán-2-ol (S)-l-Benziloxi-3-t-butil-difenil-szililoxi-propán-2-ol (5 g, 11,9 mmol), trifenil-foszfin (3,93 g, 15 mmol) és hangyasav (0,7 g, 0,57 ml, 15,1 mmol) száraz tetrahidrofuránban (50 ml) készült oldatát 0-5 °C-ra hűtjük, majd dietil-azodikarboxilát (2,61 g, 2,35 ml, 15 mmol) száraz tetrahidrofuránban (15 ml) készült oldatával kezeljük. Az oldatot egész éjen át szobahőmérsékleten keverjük, majd 35 %-os vizes ammóniaoldattal kezelve (5 ml) pH-értéket 11-re állítjuk. Az oldatot egész éjen át keverjük, majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk. Az anyagot kromatográfiásan tisztítjuk szilikagél töltetet és eluensként hexánban készült 5 %-os aceton oldatot alkalmazva. Kitermelés: 4,7 g. Kis mennyiségű (5 %) ujrarendeződött anyagot (a második hidroxilcsoportra történő szilil vándorlás következtében) detektálunk az ÍH-NMR segítségével. A keveréket száraz tetrahidrofuránban (3 ml) oldjuk, majd imidazolt (0,076 g, 1,1 mmol) adunk. A keveréket ezt követően t-butil-difenil-szilil-kloriddal (0,3 g, 1,1 mmol) kezeljük, majd szobahőmérsékleten 3 órán át keverjük. Az oldószert elpárologtatjuk és a maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagél töltetet és eluensként hexán : etil-acetát : 90 : 10 elegyet alkalmazva. 4,2 g (84 %) cím szerinti vegyületet kapunk színtelen olaj formájában.
^max (fűm) 3450, 3060, 2920, 2860, 1470, 1450, 1430, 1390, • · «« · · ·· · » • · * · · · ·
- 33 1360 és 1110 cm-1;
ÍH NMR: H [(CD3)2SO] 0,97 (9H, s, CH3x3), 3,45 (IH, m, s
CH2 CH-ja), 3,60 (2H, m, CH2), 3,77 (IH, m, CH), 4,5 (IH, s, CH2), 4,85 (IH, d, J = 5Hz, D2O kicserélhető, OH), 7,25 - 7,5 (11H, m, ArH), 7,70 (4H, m, ArH). Elemanalizis a C25H32O3SI képlet alapján:
számított: C% 74,24; H% 7,67% talált: 74,16; 7,57.
MS. (70eV) m/z 421 (MH+); [X]D25 = + lz9° (CHC113).
b) (R) vagy (S)-l-Benziloxi-3-t-butil-difenil-szililoxipropán-2-trifluor-metán-szulfonát (R) vagy (S)-l-Benziloxi-3-t-butil-difenil-szililoxi-propán-2-ol (4,2 g, 10 mmol) és 4-dimetilamino-piridin (1,35 g, 11 mmol) száraz diklór-metánban (50 ml) készült oldatát trifluor-metán-szulfonsav-anhidriddel (3,1 g, 11 mmol) kezeljük 0-5 °C-on. A keveréket 1 órán át keverjük, majd ezt követően hideg vízzel mossuk (2x50 ml) és szárítjuk (MgSO4). Szűrést és vákuumban végzett bepárlást követően a maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk, szilikagél töltetet, eluensként etil-acetát : hexán = 5 : 95 elegyet alkalmazva. 4,4 g (80 %) cím szerinti vegyületet kapunk színtelen olaj formájában.
y max (film( 2956, 2935, 2860, 1253, 1181 és 1079 cm-1;
1H NMR:^jj (CDC13) 1,04 (9H, s, CH3x3) , 3,74 (2H, d, J = 5Hz,
CH2O), 3,87 (2H, dd, J = 5 és 2 Hz, CH2O), 4,53 (2H, s, Ph CH2O), 5,04 (IH, m, CH), 7,25 - 7,8 (15 H, m, ArH);
• · *
- 34 E-c<ZJd2'^' (CHCI3) (S)-enantiomer - -4,8°, (R)-enantiomer = + 5,4°.
c) ÍR) vagy (S) Dietil-l-benziloxi-3-t-butil-difenilszililoxi-propán-2-tiometil-foszfonát
Dietil-tiometil-foszfonát (1,33 g, 7,2 mmol) száraz tetrahidrofuránban (50 ml) készült oldatát nátrium-hidriddel (0,175 g, 7,2 mmol) kezeljük 0-5 °C-on, majd az elegyet szobahőmérsékleten keverjük 1 órán át. Ezt követően az oldatot 0-5 °C-ra hűtjük és (R) vagy (S)-l-benziloxi-3-t-butildifenil-szilioxi-propán-2-trifluor-metán-szulfonát (4,0 g, 7,2 mmol) száraz tetrahidrofuránban (20 ml) készült oldatát csepegtetjük 10 perc alatt a keverékhez. Ezt követően a reakciókeveréket 18 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk és a maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagél töltetet és eluensként etil-acetát : hexán = 20 : 80 elegyet alkalmazva. 2,8 g (66 %) cím szerinti vegyületet kapunk színtelen olaj formájában.
V max (film) 3067, 2977, 2929, 2856, 1471, 1453, 1427, 1389, 1361, 1253 és 1112 cm-1;
Ó~ H (CDCI3) 1,01 (9H, S, CH3X3), 1,29 (6H, t, J = 7 Hz
2xCH3CH2), 2,75 (2H, dd, J = 13,4 és 2 Hz, PCH2S), 3,24 (1H, m, CH), 3,78 (2H, m, CH2), 3,9 (2H, m, CH2), 4,11 (4H, m, 2xCH2CH3), 4,53 (2H, s, PhCH2 ( 7,25 - 7,5 (UH, m, ArH) 7,68 (4H, m, ArH).
Elemanalizis a C33iH433O5PSSi képlet alapján:
számított: C% 63,45; H% 7,38;
» «·· * **· · * a * · a · B • · * · <··· *» »* talált: 63,45; 7,44.
MS. (70eV): m/z = 587 (MH+) [<<]D25 (CHCI3) (R(-enantiomer = 1,03°; (S)-enantiomer = = 0°.
d) (R) vagy (S)-Dietil-3-t-butil-difenil-szililoxi-3-hidroxi-propán-2-tiometil-foszfonát (R)- vagy (S)-dietil-benziloxi-3-t-butil-difenilszililoxi-2-tiometil-foszfonát (1,1 g, 1,8 mmol) 95 %-os metanol/víz elegyben (30 ml) készült oldatához 20 %-os szénre felvitt palládiumot (3 g) adunk nitrogén atmoszférában. A keveréket ezt követően standard hőmérsékleten és nyomáson hidrogénezzük addig, míg a hidrogénfelvétel megszűnik. Az oldatot szűrjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagél tölteltet, eluensként hexán : etil-acetát =9) : 10 elegyet alkalmazva. 0,56 g (60 %) cím szerinti vegyületet kapunk színtelen olaj formájában.
V max (film) 3400, 2930, 2850, 1470, 1425, 1390, 1240 és 1110 cm-1;
(CDCI3) 1,05 (9H, s, CH3x3), 1,32 (6H, t, J = 7Hz, CH3CH2x2), 2,75 (2H, m, PCH2S), 3,1 (1H, m, CH), 3,75 4,0 (4H, m, CH2 x 2(, 4,1 (4H, CH3CH2x2-ben), 7,3 - 7,5 (6H, m, ArH) , 7,65 (4H, m, ArH) .
Elemanalizis a C24H37O5PSSi képlet alapján:
számított: C% 58,03; H% 7,51;
talált: 57,98; 6,97;
MS(70eV): m/z = 497 (MH+). [cA]D25 (CHCI3) (R)-enantiomer *«··
- 36 = +8,5°; (S)-enantiomer = -6,9°.
Az előállított (I) általános képletű vegyületeket az 1. táblázat tartalmazza. A táblázatban megadott szubsztituensek jelentését az (IB) általános képlet alapján kell értelmezni.
*·4· ·· ·« ·» » • · · * · · · « • ·· · ··« · • · · * · * » ·· ·· ·*·· »t ···
1. táblázat
A vegyület/ példa száma | B | Bb | Bj | Ba |
1 | G | EtO | H | Et |
2 | G | HO | H | H |
3 | A | EtO | H | Et |
4 | A | HO | H | H |
5 | G | EtO | CH20H | Et |
6 | G f | HO | ch2oh | H |
7 | A | EtO | CH20Ac | Et |
8 | A | EtO | ch2oh | Et |
9 | A | HO | ch2oh | H |
10 | A | och2- | Na+ | |
11 | G | och2- | Na+ | |
12 | G | HO | ch2oh | H (R)-izomer |
13 | G | HO | ch2oh | H (S)-ixomer |
G = guanin
A - adenin
1. példa
9-Γ2- (Dietoxi-foszforil-metiltio)-etoxil-guanin
a) 4-Klór-6- £(2-dietoxi-foszforil-metiltio)-etoxiJ amino-2,5-diformamido-pirimidin (0,9 g, 2,0 mmol) dietoxi-metil-acetátban (2 ml) készült oldatát 120 °C-on 2,5 órán át • ·· · ··· V • · · · · · · ·· ·· ···· ·· ···
- 38 hevítjük. A lehűtött reakcióelegyet vákuumban bepároljuk. A maradékot metanolban (5 ml) feloldjuk, ammőniaoldattal (0,880,1 ml) kezeljük, majd 15 percen át szobahőmérsékleten hagyjuk állni. Az oldatot vákuumban bepároljuk és a maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagél töltet és eluensként diklőr-metán : metanol = 98 : 2 arányú elegyet alkalmazva. Dietil-éter/aceton elegyből végzett átkristályosítást követően 0,8 g (93 %) 6-klőr-9- (2-dietoi-foszforilmetiltio)-etoxi -2-formamido-purint (0,8 g, 93 %( kapunk színtelen kristályok formájában. Olvadáspont: 74-5 °C.
*^max (MEOH) 232, 255 és 292 nm ( £ 10,454, 3556 és 4103)
V max (KBr) 3200, 3100, 2960, 2900, 1685, 1600, 1570, 1500, 1475 és 1430 cm-1;
[(CD3)2SOJ 1,23 (6H, t, [(CD3)2SO] 6,5 Hz 2 X CH3),
3,0 (2H, d, J 13 Hz, PCH2S), 3,1 (2H, t, J 5,6 Hz, CH2S) 32S), 4,0 (4H, m, 2 X CH20P), 4,6 (2H, t, (fH [(CD3)2SO]j
6,5 Hz, CH20N) 8,7 (1H, S, 8-H), 9,4 (1H, széles S, CHO), 11,3 (1H, széles s, D2O kicserélhető NH).
Elemanalizis a C13H19N5O5OSCI képlet alapján: számított:C% 36,84; H% 4,52; N% 16,52; M+ 423.0533 talált: 36,58; 4,51; 16,17; M+ 423.527.
b) 6-Klór-9-[2-(dietoxi-foszforil-metiltio)-etoxi]-2formamido-purin (0,7 g, 1,65 mmol) 80 %-os hangyasavban (10 ml) készült oldatát 80 °C-on 1,5 órán át hevítjük. A lehűtött oldatot vákuumban bepároljuk és a maradékot metanolban oldjuk, majd 0,880 ammóniávan (1 ml) kezeljük. Az oldatot 15 percen át hagyjuk szobahőmérsékleten állni. Az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, majd a maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagél töltetet és eluensként diklór-metán : metanol = 95 : 5 elegyet alkalmazva. Metanol/víz elegyből végzett kristályosítást követően 0,4 g (64 %) cím szerinti vegyületet kapunk színtelen kristályok formájában. Olvadáspont 190 - 191 °C.
^•max (EtOH) 255nm (£14,391); Vmax (KBr) 3320, 3150, 2970, 2870, 2840,
2730, 1690, 1640, 1600, 1570, 1530 and 1470 cm1 [(CD3)2SO] 1.23 (6H, t, J 7Hz, 2 X CH3), 3.01 (2H, t, J
6.5Hz, SCH2), 3.03 (2H, d, J 13Hz PCH2_S), 4.03 (4H, m, 2 X CH20P), 4.5 (2H, t, J 6.5Hz, CH2ON,), 6.6 (2H, széles s, D20 kicserélhető NH2). 7.9 (1H, s, 8-H), 10.6 (1H, széles s, D20 kicserélhető NH).
Elemanalízis a C12H2oN5sp képlet alapján:
számított: C% 37,30; H% 5,40; N% 18,12;
talált: 37,41; 5,22; 18,29 m/z (tioglicerol) 378 (MH+ 100%).
2. példa
9-[2—(Foszfono-metiltio)-etoxi]-guanin
1. módszer
Trimetil-szilil-bromidot (1,62 g, 10,6 mmol) adunk a 9-[2-(dietoxi-foszforil-metiltio(-etoxi]-guanin (0,4 g, 1,06 mmol) oldatához szobahőmérsékleten, majd a reakciókeveréket 3 órán át állni hagyjuk. Az oldószert vákuumban elpárologtatjuk és a maradékot metanolban oldjuk, majd az oldatot 5 percen át állni hagyjuk. A metanolt vákuumban elpárologtatjuk és a mara40 dékot megszilárdítjuk, majd kristályosítjuk vízből. 0,08 g (23 %) cím szerinti vegyületet kapunk színtelen kristályok formájában. Olvadáspont 253 - 3 °C.
max (EtOH) 255nm ( 11,857); ymax (KBr)
3310, 3120, 2900, 2740, 1745, 1705, 1660, 1630, 1550, 1470, and 1410 cm-1;
r H [(CD3)2SO] 2.7 (2H, d, J 13Hz PCH2S), 3.0 (2H, t, J 6.5Hz, CH2S), 4.4 (2H, t, J 6.5Hz, CH2ON), 6.6 (2H, széles s, D20 kicserélhető NH).
Elemanalízis a CgH12N5O5SP képlet alapján:
számított: C% 29.90; H% 3.76; N% 21.80% talált: 30.23; 3.96; 21.63.
2. módszer
a) 2-Di-t-butoxi-karbonil-amino-9-hidroxi-6-metoxi-purin (0,5 g, 1,3 mmol), dietil-2-hidroi-etil-tiometil-foszfonát (0,3 g, 1,3 mmol és trifenil-foszfin (0,37 g, 1,4 mmol) száraz tetrahidrofuránban (20 ml) készült oldatát 0,5 °C-ra hűtjük, majd dietil-azodikarboxiláttal (0,25 g, 1,4 mmol) kezeljük. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 18 órán át keverjük. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk, majd a maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagél töltetet és eluensként etil-acetátot alkalmazva. 0,51 g (65 %) 9-[(2-dietoxi-foszforil-metiltio)-etoxi]-2-di-t-butoxi-karbonil-6-metoi-purint kapunk ragacsos anyag formájában. Vmax (film) 2960, 2890, 2850, 1790, 1760, 1690, 1470, 1390 és 1365 cm-1.
Γ
H [(CD3)2SO] 1,22 (6H, t, J 7 Hz 2 X CH3), 1,4 (18 H, S, 6 X
CH3), 3,0 (2H, d, J 13 Hz PCH2S), 3,06 (2H, t, J 7Hz
CH2CH2S), 4,05 (4H, m, CH2OP), 4,07 (3H, s, OCH3),
4,6 (2H, t, J 7Hz OCH2CH2), 8,7 (1H, s 8-H)
Elemanalizis a C23H38N50gSP képlet alapján: számított: C% 46.69; H% 6.47; N% 11.84, talált: 46,20; 6,56; 11,34.
b) 9-[2-(Dietoxi-foszforil-metiltio)-etoxi]-2-di-t-butoxi-karbonil-amino-6-metoxi-purin (0,51 g, 0,84 mmol( száraz diklór-metánban (10 ml) készült oldatát szobahőmérsékleten trimetil-szilil-bromiddal (2,57 g, 16,8 mmol) kezeljük, majd a keveréket 3 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk és a maradékot metanolban oldjuk, majd az anyagot szárazra pároljuk. A maradékot vízből átkristályosítva 0,2 g (77 %) cím szerinti vegyületet kapunk. Olvadáspont 253 - 255 °C.
3. példa
9-Γ 2-(Dietoxi-foszforil-metiltio)-etoxi]-adenin
a) 9-Hidroxi-6-ftálimido-purin (0,5 g, 2,2 mmol), dietil2-hidroxi-etil-tiometil-foszfonát (0,45 g, 2 mmol) és trifenilfoszfin (0,52 g, 2 mmol) száraz tetrahidrofuránban (20 ml) készült oldatát -5 °C-ra hűtjük. Dietil-azodikarboxilát (0,348 g, 2,0 mmol) száraz tetrahidrofuránban (10 ml) oldatát csepegtetjük keverés közben az elegyhez, majd az adagolást követően a reakció teljessé tétele érdekében a keveréket 18 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk és a maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagél töltetet és eluensként etil-acetát : metanol = = 98 : 2 elegyet alkalmazva. 0,45 g (56 %) 9- 2-(dietoxi-foszforil-metiltio)-etoxi -6-ftálimido-purint kapunk fehér szilárd anyagként aceton/dietil-éter elegyből történő átkristályosítással. Olvadáspont 115-116 °C.
% max (EtOH) 271mm (£ 14020) (KBr) 3100,
3060, 2960, 2900, 1780, 1725, 1650, 1600, 1580, 1453,
1400, 1380, 1360, 1320, 1280, 1240, and 1200 cm-1,
H [(CD3)2SO] ii25 (6H/ J 7Hz 2 x CH3), 3,0 (2H, d, J
13Hz, PCH2S), 3,1 (2H, t, J 7Hz CH20, 4,0 (4H, m, 2 x CH2), 4,7 (2H, t, J 7HZ, CH2S), 8,1 (4H, m, Ar Η), 9.0 (1H, S, 2H), 9,1 (1H, s, 8-H).
Elemanalízis a C2QH22N50gPS képlet alapján:
számított: C% 48,87; H% 4,51; N% 14,25; talált: 48,65; 4,55; 14,23.
b) 9-[2-(Dietoxi-foszforil-metiltio)-etoxi]-6ftálimido-purin (0,56 g, 1,1 mmol) oldatát 0-5 °C-ra hűtjük és N-metil-hidrazinnal (0,86 g, 1,8 mmol) kezeljük. A keveréket 1 órán át keverjük, majd ezt követően szűrjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagél töltetet és eluensként diklőr-metán :
: metanol = 97 : 3 elegyet alkalmazva. 0,3 g (75 %) cím szerinti vegyületet kapunk színtelen kristályok formájában acetonból végzett kristályosítást követően. Olvadáspont: 93 95 °C.
^max (MeOH) 260 nm ( £ 12670) Ϋ max (KBr) 3360, 3280,
3140, 2995, 1685, 1610, 1570, 1480, 1410, 1370, 1330, 1300, és 1260 cm”l;
[(CD3)2SO] 1.25 (6H, t, J 8Hz 2 X CH3),
3,0 (2H, d, J 13Hz PCH2S), 3,1 (2H, t, J 7Hz, CH20),
4,1 (4H, m, 2 x CH2), 4,6 (2H, t, J 7Hz, CH2S), 7,4 (2H, széles s, kicserélhető D20, NH2), 8,15 (1H, s, 8,5 (IH, S 2-H), 8,4 (IH, s, 8-H),
Elemanalizis a Ci2H2qN5O4PS képlet alapján:
számított: C% 39,88; H% 5,58; N% 19,38; (M+, 361.0974) talált: 39,84; 5,51; 19,26. (M+ 361.0981)
4. példa
9-r2-(Foszfono-metiltio)-etoxi)-adenin
9-[2-(Dietoxi-foszforil-metiltio)-etoxi]-adenin (0,1 g, 0,27 mmol) száraz diklór-metánban készült oldatát brómtrimetil-szilánnal (0,46 g, 30 mmol) kezeljük szobahőmérsékleten, majd az elegyet 3 órán át állni hagyjuk.
Az oldószert csökkentett nyomáson elpárologtatjuk és a maradékot metanolban oldjuk, majd az elegyet 5 percen át állni hagyjuk. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk és a maradékot vízből átkristályosítjuk. 0,06 g (71 %) cím szerinti vegyületet kapunk színtelen kristályok formájában. Olvadáspont 211-213 °C.
y max (KBr) 3060, 2960, 1695, 1600, 1555, 1470, 1450,
1400, 1350 és 1300 cm-1;
[(CD3)2SOJ 2,7 <2H/ d J 13HZ, PCH2S), 3,1 (2H, t J 6,5Hz, CH20), 4,6 (2H, t J 6,5Hz CH2S), 7,4 (2H, széles s, kicserélhető D20-vel, NH2), 8,15 (IH, s, 2-H), 8,4 (IH, s, 8-H).
Elemanalízis a CqHi2N5O4PS képlet alapján:
számított: C% 31,47; H% 3,96; N% 22,95;
talált: 31,58; 3,92; 23,26.
5. példa
9-Γ 3-Hidroxi-2-dietoxi-foszforil-metiltio)-propoxv)-quanin
a) 2-Bisz-t-butoxi-karbonil-amino-9-hidroxi-6-metoxi-purin (0,7 g, 1,8 mmol), dietil-l-acetoxi-3-hidroxi-propán-2-tiometil-foszfonát (0,55 g, 1,8 mmol) és trifenil-foszfin (0,75 g, 2,8 mmol) száraz tetrahídrofuránban 920 ml) készült oldatát 0-5 °c-ra hütjük, majd dietil-azodikarboxiláttal (0,48 g, 2,75 mmol) kezeljük. Az oldatát egész éjen át keverjük, majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagél töltetet és eluensként etil-acetátot alkalmazva. 1,0 g (85 %) 9- 3-hidroxi-2-dietoxi-foszforil-metiltio)-propoxy -guanint kapunk sárga olaj formájában.
max (EtOH) 256nm (£ 12410) ;-/max (film) 3110, 2990, 2940, 1795,
1750, 1720, 1600, 1475, 1460, 1425, 1395 és 1370 cm-1 ;
í [(CD3)2SO] 1,21 (6H, t, J 7Hz 2 x CH3) 1,4 (18H,
S, 6 X CH3) 2,03 (3H, S, COCH3) , 3,1 (2H, d, J 13Hz PCH2S) , 3,6 (IH, m, CH) , 4,01 (4H, m, 2 X CH2), 4,07 (3H, S, OCH3), 4,4 (2H, m, CH20Ac), 4,6 (2H, m, CH2).
Elemanalízis a C26H42N5°11PS képlet alapján:
számított: C% 47,05; H% 6,38; N% 10,55;
talált: 47,25; 6,37; 10,40;
b) 9-[3-Acetoxi-2-(dietoxi-foszforil-metiltio)-propoxi]-
2-di-t-butoxi-karbonil-amino-6-metoxi-purin (0,6 g, 0,9 mmol) etanolban készült oldatát 0,5 ml 5 mól/literes sósavoldattal kezeljük, majd ezt követően refluxáltatás mellett 5 órán át hevítjük. Az oldatot hűtjük és AMBERLITE IR 240H gyantával semlegesítjük, szűrjük, majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagél töltetet és eluensként metanol : diklór-metán = 20 80 elegyet alkalmazva. Metanol/aceton elegyből végrehajtott kristályosítást követően 0,15 g (41 %) cím szerinti vegyületet kapunk színtelen kristályok formájában. Olvadáspont 144 - 146 °C.
^max (EtOH) 254 (£19,200), 265nm ( £16,150) ; -/max (KBr)
3320, 3160, 2980, 2920, 2360, 2230, 1690, 1650, 1600,
1580, 1535, 1470, 1380, és 1330 cm-1;
[(CD3)2SO] 1,25 (6H, t, J 7,0Hz 2 X CH3),
3,0 (2H, d, J 13,7Hz, PCH2S), 3,75 (2H, m, CH20H), 4,1 (4H, m, 2 X CH2), 4,4, (2H, m, OCH2), 5r0 (1H, t, j=5,5Hz, CH2CH), 6,6 (2H, széles s, kicserélhető D2Oval, NH2) 7,9 (1H, s, e-H), 10,6 (1H, széles s, kicserélhető D20-val, NH), m/z (f.a.b. + ion NoBA) 408 (MH+) Elemanalízis a Ci3J22N50gPS képlet alapján:
számított: C% 38,24; H% 5,44; N% 17,19; talált: 37,93; 5,40; 17,22.
6. példa
9-Γ 3-Hidroxi-2-foszfono-metiltio)-propoxvl-guanin
9-[3-Hidroxi-2-dietoxi-foszforil-metiltio)-propoxy]-guanin (0,15 g, 0,36 mmol) száraz dimetil-formamidban (20 ml) késztült oldatát bróm-trimetil-szilánnal (1 ml, 7,5 mmol) kezeljük szobahőmérsékleten, majd a reakcióelegyet 3 órán át keverjük. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk és a maradékot metanolban (20 ml) oldjuk, majd vákuumban bepároljuk. Tiszta ragacsos anyagot kapunk. Ezt az anyagot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk C18 szilikagél töltetet és eluensként vizet alkalmazva. A megfelelő frakciókat vákuumban töméynítjük és a terméket vízből átkristályosítjuk. 0,05 g (41 %) cím szerinti vegyületet kapunk. Olvadáspont 201 - 203 °C.
max (h2°) 253nm ( £ 13,140) ; ymax (KBr) 3300, 3130, 2900, 2320, 1710, 1640, 1590, 1450 és 1370 CirT1;
[(CD3)2S0J 275 (2H, dd, J 14 és 2Hz PCH2S), 3,3 (IH, m, CH), 3,7 (2H, m, CH20), 4,4 (2H, m, CH20H), 6,6 (2H, széles s, kicserélhető D20-val, NH2), 7,9 (IH, s, 8-H), 10,7 (IH, széles s, kicserélhető D20-val, NH) m/z (f.a.b. + v ion; tioglicerol) 352 (MH+)
Elemanalízis a CgH^^OgPS képlet alapján: számított: C% 30,77; H% 4,01 N% 19,93; talált: 30,00; 4,19; 19,49.
7. példa
9-Γ 3-Acetoxi-2-(dietoxi-foszforil-metiltio)-propoxy]-adenin
a) 9-Hidroxi-6-ftálimido-purin (0,53 g, 1,8 mmol), dietil-l~acetoxi-3-hidroxi-propán-2-tiometil-foszfonát (0,56 g, 1,8 mmol) és trifenil-foszfin (0,56 g, 2,1 mmol) száraz dimetil-formamidban (20 ml) készült keverékét 0-5 °C-ra hűtjük és dietil-azodikarboxiláttal (0,37 g, 2,1 mmol) kezeljük. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 18 órán át keverjük, majd ezt követően az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagél töltetet és eluensként etil-acetátot, majd etil-acetát : metanol = 95 : 5 arányú elegyet alkalmazva. 0,7 g (70 %) 9-£3-acetoxi-2-(dietoxi-foszforil-metiltio)-propoxyJ -6-ftálimido-purint kapunk sárga olaj formájában.
Ά max (EtOH) 271nm (L14,815); Vmax (film)
3580, 3450, 3100, 3050, 2970, 2920, 1790, 1730, 1595,
1575, 1450, 1400 és 1300 cm-1;
ζ [(CD3)2SO] 1,22 (6H, t, J 7Hz, 2 X CH3), 2,1 (3H, S,
CH3C0) , 3,2 (2H, dd, J 14 és 2Hz, PCH2S) , 3,7 (1H, m, CH) , 4|1 (4H, m, 2 X CH2), 4,5 (2H, m, CH20) 4,75 (2H, m, CHtOAc), 8,1 (4H, m, ArH) 9,0 (1H, S, 2-H), 9,1 (1H, S, 8Elemanalízis a C23H26N5O8PS képlet alapján:
számított: C% 49,02; H% 4,65; N% 12,43; M+ 563.1240 talált: 49,21; 4,93; 12,24; M+ 563.1267.
b)
9-[3-Acetoxi-2-(dietoxi-foszforil-metiltio)-propoxy]-
6-ftálimido-purint (0,7 g, 1,24 mmol) diklór-metánban készült oldatát 0-5 °C-ra hűtjük és N-metil-hidrazinnal (0,085 g, 1,84 mmol) kezeljük. Az oldatát 2 órán át keverjük, szűrjük, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot oszlopkromatográfiásan szilikagél töltetet használva 0,4 g (75 %) 9-[3-acetoxi-2-(dietoxi-foszforil-metiltio)-propoxy]-6-ftálimido-purint kapunk szíbtelkeb ragacsos anyagként.
fi max (EtOH). 260nm ( 13,820) Amax (film) 3330, 3190, ’ 2990, 2910, 1745, 1640, 1600, 1470, 1450, 1412, 1390, és 1330 cm1;
[(CD3)2S0] 1,2 (6H, t, J 7Hz 2 X CH3), 2,1 (3H, s, CH3), 2(1 (3H, s, CH3C0) , 3(1 (2H, d, J 13f5HZ, PCH2S), 3f6 (1H, m, CH) , 4,0 (4H, m, 2 X CH2), 4f4 (2H, m, CH20), 4(6 (2H, m, CH20Ac) , 7(4 (2H, széles s, kicserélhető D2O-val, NH2) 8fl (1H, s, 2-H), 8,4 (1H, S, 8-H)
Elemanalizis a CigH^NgOgPS képlet alapján:
számított: C% 41,56; H% 5,58; N% 16,16; M+ 433.1185 talált: 41,07; 5,72,- 15,67 M+ 433.1196.
8. példa
9-r3-Hidroxi-2-(dietoxi-foszforil-metiltio)-propoxvl-adenin
9-[3—Acetoxi—2-(dietoxi-foszforil-metiltio)-propoxy]-adenint (0,4 g, 0,92 mmol) etanolban (10 ml) készült oldatát 5 mol/literes sósavoldattal (0,4 ml, 2,0 mmol) kezeljük, majd 5 órán át refluxáltatás mellett telítjük. A lehűtött oldatot AMBERLITE IR 45 OH gyantán semlegesítjük, majd az oldatot szűrjük és vákuumban bepároljuk. A maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagél töltetet és eluensként kloroform : metanol = 95 : 5 arányú elegyet alkalmazva. 0,3 g (83 %) cím szerinti vegyületet kapunk színtelen ragacsos anyag formájában.
^max (EtOH) 260nm (13,700); Xnax (film) 3320, 3180,
2970, 2800, 1640, 1590, 1460, 1405, 1380, 1320 és 1290 cm-1; t(CD3)2SO] 1,2 (6H, t, J 7HZ, 2xCH3) ; 3,1 (2H, d, J
13f5Hz, PCH2S), 3(7 (1H, m, CH of CH20H), 3,9 (1H, m,
CH20H-nak a CH-ja), 4,0 (4H, m, 2 x CH2) , 4,6 (2H, m, CH20), 5,2 (1H, t, J 5.5Hz, kicserélhető D2O-val, OH), 7,4 (2H, széles s, kicserélhető D2O-val, NH2), 8,2 (1H, s, 2H) ; 8,4 (1H, s, 8-H);
Elemanalizis a C13H22N5O5PS képlet alapján: számított: C% 39,90; H% 5,66; N% 17,90; M+ 391.1079 talált: 38,70; 5,75; 18,00; M+ 391.1082.
9. példa
9- Γ3-Hidroxi-2-(foszfono-metiltio)-propoxvl-adenin
9-[3-Hidroxi-2-(dietoxi-foszforil-metiltio)-propoxy]-adenin (0,265 g, 0,67 mmol) száraz diklór-metánban (20 ml) készült oldatát bróm-trimetil-szilánnal (1,53 g, 10 mmól) kezeljük szobahőmérsékleten, majd az elegyet 6 órán át állni hagyjuk. Az oldószert csökkentett nyomás alatt eltávolítjuk és a maradékot metanolban oldjuk, majd az anyagot 5 percen át állni hagyjuk. Az oldatot csökkentett nyomáson szárazra pároljuk, majd újra feloldjuk metanolban és az oldatot
AMBERLITE IR 45 OH gyantával semlegesítjük, majd szűrjük és vákuumban bepároljuk. A maradékot vízből kristályosítva 180 mg (80 %) cím szerinti vegyületet kapunk színtelen kristályok formájában. Olvadáspont 195 - 197 °C.
'2 max (H2°) 260nm ( 14,000), ymax (KBr) 3320, 3110,
2920, 1720, 1595, 1550, 1490, 1460, 1405, 1340 és 1300 cm-1;
[(CD3)2SO] 2;70 (2H,d, J 13.5Hz, PCH2S), 3f3 (1H, m, CH), 3,7 (1H, m, CH of CH20H), 3,8 (1H, m, CH of
CH20H), 4,6 (2H, m, CH20), 7,6 (2H, br s, kicserélhető ♦ <
- 50 D2O-val,NH2), 8.2 (1H, s, 2-H), 8.46 (1H, s, 8-H).
10, példa
9-f 3-Hidroxi-2-(oxatia-foszforinán-5-il)-metoxvl-adenin-nátriumsó
9-[3-Hidroxi-2-(foszfono-metiltio)-propoxi]-adenin (0,2 g, 0,59 mmol) és N,N-diciklohexil-4-morfolino-karboxamidin (0,175 g, 0,59 mmol) terc-butanol és víz 50:50 arányú elegyében (30 ml) készült oldatát enyhe refluxáltatás mellett hevítjük. N,N-diciklohexil-karbodiimid (0,615 g, 2,98 mmol) terc-butanolban (13 ml) és dimetil-formamidban (2 ml) készült oldatát adjuk hozzá csepegtetéssel 0,5 óra alatt. A reakciókeveréket ezt követően hevítjük, majd további 5,5 órán át keverjük. A lehűtött reakciókeveréket vákuumban bepároljuk, majd a maradékot vízben oldjuk és szűrjük. A szűrletet vákuumban bepároljuk és a maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk Sephadex (DEAE, HCO3 forma) töltetet, eluensként pedig trietil-ammónium-karbonát puffer lienáris gradiens oldatát alkalmazva (0,001 - 0,2 mol/liter). 15 ml-nyi frakciókat gyűjtünk és a 36-42 frakciókat egybegyüjtjük, majd vákuumban bepároljuk. A maradékot együttpárologtatjuk etanollal (20 ml), mig a trietil-amim ki nem mutathatóvá válik (háromszori kezelés). A maradékot vízben oldjuk és Dowex 50 XA gyantával Na+ forma kezelve kapjuk a nátriumsót. Szűrést követően az oldószert vákuumban töményítjük és liofilizáljuk az anyagot. 0,140 g (60 %) cím szerinti vegyületet kapunk színtelen por formájában. Olvadáspont 300 °C.
Xmax (Η2θ) 260.4 nm (14,350); Vmax (KBr) 3200, 2950,
2895, 1700, 1610, 1470, 1415, 1340, 1305 és 1190 cm-1;
[(CD3)2SOJ 2·60 (1H/ t/ J = 15.4HZ, H of PCH2S) , 3.02 (1H, dd, J = 11.2 és 10.2Hz, H of PCH2S), 4.5 - 4.75 (4H, m, 0CH2 és OCH2CH), 7.46 (2H, s, D20 kicserélhető NH2), 8.16 (1H, s, 2-H), 8.44 (1H, s, 8-H), m/Z (FAB +ve ion, tioglicerol), 340 (MH+)
Elemanalízis a CgH^L^C^PSNa képlet alapján:
számított: C% 31,86; H% 3,26; N% 20,64; talált: 32,22; 3,49; 20,31.
11. példa
9-r3-Hidroxi-2-(oxatia-foszforinán-5-il)-metoxil-quanin-nátriumső
9-[3-Hidroxi-2-foszfono-metiltio)-propoxi]-guanin (0,2 g, 0,56 mmol) és N,N-diciklohexil-4-morfólino-karboxamidin (0,165 g, 0,59 mmol) terc-butanol és víz 50:50 arányú elegyében (30 ml) készült oldatát enyhe refluxáltatás mellett hevítjük. N,N-diciklohexil-karbodiimid (0,58 g, 2,8 mmol) terc-butanolban (13 ml) és dimetil-formamidban (2 ml) készült oldatát adjuk hozzá csepegtetéssel 0,5 óra alatt. A reakciókeveréket ezt követően hevítjük, majd további 5,5 órán át keverjük. A lehűtött reakciókeveréket vákuumban bepároljuk, majd a maradékot vízben oldjuk és szűrjük. A szűrletet vákuumban bepároljuk és a maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk Sephadex (DEAE, HCO_3 forma) töltetet, eluensként pedig trietil-ammónium-karbonát puffer lienáris gradiens oldatát alkalmazva (0,001 - 0,25 mol/liter). 15 ml-nyi frakciókat gyűjtünk és a 35-48 frakciókat egybegyüjtjük, majd • *
- 52 vákuumban bepároljuk. A maradékot együttpárologtatjuk etanollal (20 ml), mig a trietil-amim ki nem mutathatóvá válik (háromszori kezelés). A maradékot vízben oldjuk és Dowex 50 XA gyantával Na+ forma kezelve kapjuk a nátriumsót. Szűrést követően az oldószert vákuumban töményítjük és így 0,150 g (74 %) cím szerinti vegyületet kapunk színtelen kristályok formájában. Olvadáspont 300 °C.
(λ max (H20) 253.5 és 266 nm (9570 és 7610);
V max (KBr) 3390, 1700, 1610, 1460, 1370, 1210, és 1170 cm-1;
Ó'h [(CD3)2SOJ 2.16 (1H, t, J = 14Hz,H of PCH2S), 2.6 (1H, dd, J = 14 és 14Hz, H of PCH2S), 2,85 (1H, m, CHS), 4.35-4.7 (4H, m, OCH2 és OCH2CH), 7.95 (1H, s, 8-H); m/z (FAB +ve ion tioglicerol), 356 (MH+)
Elemanalízis a CgH3iN5O5OSNa | 1,5 H20 képlet alapján: | |
számított: | C% 28,27; H% 3,66; N% | 18,31; |
talált: | 28,48; 3,67; | 18,44. |
12. és | 13. példák |
(R)- vagy (S)-9-[3-Hidroxi-2-(foszfono-metiltio)-propoxi]guanin
a) 2-t-Butoxikarbonil-amino-9-hidroxi-6-metoxi-purin (0,39 g, 1,02 mmol) (R)- vagy (S)-dietil-3-t-butil-difenilszililoxi-l-hidroxi-propán-2-tio-metil-foszfonát 90,5 g, 1,0 mmol) és trifenil-foszfin (0,32 g, 1,22 mmol) száraz tetrahidrofuránban (20 ml) készült oldatát 0-5 °C-ra hűtjük, majd dietil-azodikarboxilát (0,21 g, 1,2 mmol) száraz tetrahidrofuránban (5 ml) készült oldatát adjuk hozzá. A keve-
réket szobahőmérsékleten 18 órán át keverjük, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk és a maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagél töltetet és eluensként etil-acetát : hexán =30 : 70 elegyet alkalmazva. 0,5 g (58 %) (R) - vagy (S)-9- 3-t-butil-difenil-szililoxi-2-(dietoxi-foszforil-metiltio)-propoxi-di-t-butoxikarbonil-amino-6-metoxi-purint kapunk sápadt sárga olaj formájában.
max | (film): 3070, 2980, 2930, 2860, | 1795, | 1760, 1590, 1470, |
1425, 1390, 1365 és 1250 cm-1; | |||
íh nmr | (CDC13) 1.06 (9H, S, CH3 X | 3), 1. | 3 (6H, t, |
J | = 7HZ, CH3CH2X2), 1.43 (18H, s, | CH3 X | 6), 2.75 (2H, |
m, | PCH25), 3.5 (1H, m, CH), 3.9 - | 4.2 (9H, m, |
CH3CH2 x2 + 0CH3 + CH2) 4.7 (2H, m, CH2), 7.3 - 7.5 (6H, m, ArH), 7.6 - 7.7 (4H, m, ArH). 8.0 (1H, s, 8-H).
Elemanalízis a C4QH53N5O1QPSSÍ képlet alapján: számított: C% 55,86; H% 6,79; N% 8,14; talált: 55,36 6,86; 8,11.
p25 (R)-enantiomer = + I.80; (S)-enantiomer = -1.2o;
MS. (70ev): m/z = 860.
b) (R)- vagy (S)-9- 3-t-butil-difenil-szililoxi-2-
-(dietoxi-foszforil-metiltio)-propoxi -di-t-butoxi-karbonil-amino-6-metoxi-purint (0,45 g, 0,52 mmol) adunk víz (1,5 ml) és trifluor-ecetsav (4,5 ml) keverékéhez, majd az elegyet szobahőmérsékleten 3 órán át keverjük. Az oldatot telített etanolos ammóniaoldattal kezeljük, a pH-érték 11-re való beállítása végett. Az oldatot kloroformmal (3 x 50 ml) extraháljuk, majd a szerves rétegeket egyesítjük és szárítjuk (MGSO4)· Szűrést és vákuumban végzett bepárlás után a maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk szilikagél töltetet és eluensként kloroform : metanol = 95 : 5 elegyet alkalmazva. 0,16 g (72 %) (R)- vagy (S)-2-amino-9-[2-(dietoxi-foszforilmetiltio)-3-hidroxi-propoxi]-6-metoxi-purint kapunk színtelen ragacsos anyagként.
max (film) 3340, 3220, 3120, 2980, 1620, 1585, 1500,
1480, 1450, 1390, 1330 és 1260 cm-1; 1H NMR óg H (CD)3S0 1.22 (6H, t, J 6HZ, CH3 X 2) 3.06 (2H,d,
J = 12.5Hz, PCH2S), 3.35 (1H, m, CH of CH2), 3.66 (1H, m, CH of CH2), 3.8 (1H, m, CH),3.96 (3H, s,
OCH3), 4.02 (4H, m, CH2x2), 4.46 (2H, m, CH2),
5.06 (1H, t, J = 5.5Hz, D20 kicserélhető OH), 6.6 (2H, széles s, D2O kicserélhető NH2), 8.1 (1H, s, 8-H),
Elemanalízis a C14H24N5O6PS (0.5 H20) képlet alapján: számított: C% 39,06; H% 5,80; N% 16,24;
talált: 39,03; 5,70; 15,89;
MS.(70eV): m/z = 422 (MH+); [Á]g25 (CHC13) (S)-enantiomer = +1.8o; (R)-enantiomer = -1,3°.
c) (R)- vagy (S)-2-amino-9-[2-(dietoxi-foszforilmetiltio)-3-hidroxi-propoxi]-6-metoxi-purin (0,14 g, 0,33 mmol) száraz diklór-metánban (20 ml) készült oldatát bróm-trimetil-szilánnal (0,86 ml, 1,0 g, 6,5 mmol) kezeljük, majd az oldatot 4 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Az oldószert elpárologtatjuk és a maradékot kromatográfiásan tisztítjuk Sephadex töltetet és eluensként trietil-ammónium-karbonát puffer lienáris grandiens oldatát alkalmazva (0,001 - 0,6 mol/liter). Metanol : víz = 95 : 5 arányú elegyből végrehajtott kristályosítást követően (0,105 g, 90 %) cím szerinti vegyületet kapunk színtelen kristályok formájában. Olvadáspont 300 °C.
λ max (H2°) 254nm (12,563); Vmax (KBr) 3320, 3140, 1720, 1640, 1600, 1460,1390, és 1370 cm~l;
!h NMR H [(CD3)2SO] 2.75 (2H, dd, J = 13.5 és 2Hz,
PCH2S), 3.3 (1H, m, CH), 3.6 (1H, m, CH2~nek a CH-ja),
3.8 (1H, m, CH of CH2), 4.4 (2H, m, CH20) 6.6 (2H, széles s, D20 kicserélhető NH2), 7.9 (1H, s, 8-H), 10.6 (1H, széles s, D20 kicserélhető NH);
Elemanalízis a CgH14N5O6PS (0,5 Et3N) képlet alapján: számított: C% 35,86; H% 5,37; N% 19,17;
talált: 35,82; 5,55; 19,57.
MS.(70 eV) m/z = 352 (MH+);
= °o; (R)-enantiomer = 0°.
1)2 5 (H2) (S)-enantiomer =
Claims (7)
1. Eljárás az antivirális hatású (I) általános képletű vegyületek - a képletben jelentése hidroxil- vagy aminocsoport,
R2 jelentése hidrogénatom vagy aminocsoport,
R3 jelentése hidrogénatom, hidroxi-metil- vagy aciloxi-metil-csoport,
R4 jelentése egy (a) képletű csoport - ahol
R5 és Rg jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, 1-6 szénatomos alkilcsoport vagy adott esetben szubsztituált fenilcsoport -,
R3 és R4 együtt egy (b) képletű csoportot jelent ahol R6 jelentése a fentiekben megadott - és gyógyászatilag elfogadható sóinak előállítására, azzal jellemezve, hogy
a) egy (II) általános képletű vegyületet egy imidazolgyürüt eredményező ciklizálási reakcióba visszük - a képletben X jelentése egy imidazolgyürüt eredményező ciklizáláshoz alkalmas csoport - mint például aminocsoport, vagy aminoszármazék, előnyösen formil-aminocsoport - vagy
b) olyan (I) általános képletű vegyületek előállítása esetén - ahol R3 jelentése hidroxil-, R2 jelentése aminocsoport egy (III) általános képletű vegyületet - a képletben Y jelentése amino- vagy 1-6 szénatomos alkilcsoport - egy 2-es helyzetű R2' szubsztituenst hordozó pirimidingyürü kialakítására képes kondenzálószer jelenlétében
- 57 pirimidingyürüt eredményező gyürüzárási reakcióba visszük,
c) egy (IV) általános képletű vegyületet egy az oldalláncot hordozó (V) általános képletű vegyülettel - a képletben Q jelentése egy távozó csoport - kondenzáljuk, a fenti (II) - (V) általános képletű vegyületekben Rl', r2'· r3' és r4' jelölések a megfelelő Rlz R2, R3 és R4 csoportokat jelentik, vagy olyan csoportokat, illetve atomokat jelentenek, melyek átalakíthatok azokká és kívánt vagy adott esetben Ri/,R2',
R3, és/vagy R4/ csoportokat, amennyiben eltérnek Rlf R2, R3 és/vagy R4 jelentésétől, a megfelelő Rlz R2, R3 és/vagy R4 csoportokká alakítjuk és/vagy R-jy, R2·, R3' és/vagy
R4/ csoportokat, amennyiben jelentésük egyezik Rlz R2, R3 és/vagy R4 csoportok jelentésével, egy másik Rj/, R2', R3> és/vagy R4' csoportokká alakítjuk, és a kapott terméket kívánt esetben gyógyászatilag elfogadható sóvá alakítjuk.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan vegyületek előállítására, melyeknél R3 jelentése hidroxilcsoport és R2 jelentése aminocsoport, azzal jellemezve, hogy a megfelelő kiindulási anyagot alkalmazzuk.
3. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan vegyületek előállítására, melyeknél R3 jelentése aminocsoport és R2 jelentése hidrogénatom, , azzal jellemezve, hogy a megfelelő kiindulási anyagot alkalmazzuk.
4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás olyan vegyületek előállítására, melyeknél R3 jelentése hidroximetil-csoport, azzal jellemezve, hogy a megfelelő kiindu- • ·« • « * · • ·· • ·»«
- 58 lási anyagokat alkalmazzuk.
5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás olyan vegyületek előállítására, melyeknél R5 és Rg mindegyike hidrogénatom, azzal jellemezve, hogy a megfelelő kiindulási anyagokat alkalmazzuk.
6. Az 1. igénypont szerinti eljárás
9-[2-(dietoxi-foszforil-metiltio)-etoxi]-guanin,
9-[2-(foszfono-metiltio)-etoxi]-guanin,
9- [2-(dietoxi-foszforil-metiltio)-etoxi]-adenin,
9-[3-hidroxi-2-dietoxi-foszforil-metiltio)-propoxi]-guanin,
9-[Hidroxi-2-dietoxi-foszforil-metiltio)-propoxy]-guanin
9-[3-Hidroxi-2-foszfono-metiltio)-propoxy]-guanin
9-[3-Acetoxi-2-(dietoxi-foszforil-metiltio)-propoxy]-adenin,
9-[3-hidroxi-2-(dietoxi-foszforil-metiltio)-propoxi]-adenin,
9-[3-Hidroxi-2-(foszfono-metiltio)-propoxy]-adenin,
9-[(2-hidroxi-2-oxo-l,4,2-oxatia-foszforinán-5-il)-metoxi]-adenin-nátriumsó,
9-[(2-hidroxi-2-oxo-1,4,2-oxatia-főszfórinán-5-il)-metoxi]-guanin-nátriumsó, (R) -9-[3-Hidroxi-2-(foszfono-metiltio)-propoxi]guanin (S) -9-[3-Hidroxi-2-(foszfono-metiltio)-propoxi]• ·· · ··*» · « · V · · · ·· ··«· ·4 ··· guanin előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfelelő kiindulási anyagokat alkalmazzuk.
7. Eljárás gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy az 1-6. igénypontok bármelyike szerint előállított hatóanyagot vagy azok gyógyászatilag elfogadható sóját a gyógyászati készítmények előállítására szokásosan alkalmazott vivőanyagokkal és/vagy hordozóanyagokkal és/vagy szinergetikus hatást nem mutató más hatóanyagokkal összekeverve gyógyászati készítménnyé alakítjuk.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GB898912043A GB8912043D0 (en) | 1989-05-25 | 1989-05-25 | Novel compounds |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
HU903160D0 HU903160D0 (en) | 1990-10-28 |
HUT54697A true HUT54697A (en) | 1991-03-28 |
Family
ID=10657334
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU903160A HUT54697A (en) | 1989-05-25 | 1990-05-23 | Process for producing sulfur- and phosphorus-containing purine derivatives and pharmaceutical compositions comprising same as active ingredient |
Country Status (18)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5108994A (hu) |
EP (1) | EP0399743A1 (hu) |
JP (1) | JPH0320291A (hu) |
KR (1) | KR900018095A (hu) |
CN (1) | CN1049847A (hu) |
AU (1) | AU627880B2 (hu) |
CA (1) | CA2017390A1 (hu) |
FI (1) | FI902602A0 (hu) |
GB (1) | GB8912043D0 (hu) |
HU (1) | HUT54697A (hu) |
IL (1) | IL94485A0 (hu) |
MA (1) | MA21854A1 (hu) |
NO (1) | NO902296L (hu) |
NZ (1) | NZ233781A (hu) |
PL (3) | PL285351A1 (hu) |
PT (1) | PT94128A (hu) |
ZA (1) | ZA903984B (hu) |
ZW (1) | ZW8190A1 (hu) |
Families Citing this family (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5208221A (en) * | 1990-11-29 | 1993-05-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Antiviral (phosphonomethoxy) methoxy purine/pyrimidine derivatives |
GB9205917D0 (en) * | 1992-03-18 | 1992-04-29 | Smithkline Beecham Plc | Pharmaceuticals |
US5792757A (en) * | 1994-08-04 | 1998-08-11 | Pherin Pharmaceuticals | 19-nor-pregnane steroids as neurochemical initiators of change in human hypothalamic function |
US6815480B2 (en) | 1998-10-21 | 2004-11-09 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Highly-resilient thermoplastic elastomer compositions |
WO2003072731A2 (en) * | 2002-02-21 | 2003-09-04 | Apovia, Inc. | STABILIZED HBc CHIMER PARTICLES HAVING MENINGOCCOCAL IMMUNOGENS |
ES2656615T3 (es) * | 2012-10-08 | 2018-02-27 | Dow Global Technologies Llc | Compuestos de organofósforo para espumas de poliuretano retardantes de llama |
US9528269B2 (en) | 2014-06-09 | 2016-12-27 | Johns Manville | Roofing systems and roofing boards with non-halogenated fire retardant |
US9523195B2 (en) | 2014-06-09 | 2016-12-20 | Johns Manville | Wall insulation boards with non-halogenated fire retardant and insulated wall systems |
US9815256B2 (en) | 2014-06-09 | 2017-11-14 | Johns Manville | Foam boards including non-halogenated fire retardants |
US9815966B2 (en) | 2014-07-18 | 2017-11-14 | Johns Manville | Spray foams containing non-halogenated fire retardants |
CN114588161A (zh) * | 2020-12-07 | 2022-06-07 | 四川大学华西医院 | 具有防治肺炎作用的次黄碱衍生物 |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB1523865A (en) * | 1974-09-02 | 1978-09-06 | Wellcome Found | Purine compunds and salts thereof |
US4806642A (en) * | 1984-10-05 | 1989-02-21 | Warner-Lambert Company | Purine derivatives |
US4755516A (en) * | 1984-08-24 | 1988-07-05 | Merck & Co., Inc. | Antiviral compounds |
CS263951B1 (en) * | 1985-04-25 | 1989-05-12 | Antonin Holy | 9-(phosponylmethoxyalkyl)adenines and method of their preparation |
MY101126A (en) * | 1985-12-13 | 1991-07-31 | Beecham Group Plc | Novel compounds |
GB8712744D0 (en) * | 1987-05-30 | 1987-07-01 | Beecham Group Plc | Active compounds |
US4965270A (en) * | 1987-05-30 | 1990-10-23 | Beecham Group P.L.C. | Purine derivatives |
GB8713695D0 (en) * | 1987-06-11 | 1987-07-15 | Beecham Group Plc | Process |
GB8724765D0 (en) * | 1987-10-22 | 1987-11-25 | Beecham Group Plc | Process |
PL160924B1 (en) * | 1987-11-30 | 1993-05-31 | Beecham Group Plc | Method for manufacturing new derivatives of purine |
EP0353955A3 (en) * | 1988-08-02 | 1991-08-14 | Beecham Group Plc | Novel compounds |
-
1989
- 1989-05-25 GB GB898912043A patent/GB8912043D0/en active Pending
-
1990
- 1990-05-21 EP EP90305454A patent/EP0399743A1/en not_active Withdrawn
- 1990-05-21 ZW ZW81/90A patent/ZW8190A1/xx unknown
- 1990-05-22 MA MA22120A patent/MA21854A1/fr unknown
- 1990-05-23 IL IL94485A patent/IL94485A0/xx unknown
- 1990-05-23 AU AU55842/90A patent/AU627880B2/en not_active Ceased
- 1990-05-23 NO NO90902296A patent/NO902296L/no unknown
- 1990-05-23 ZA ZA903984A patent/ZA903984B/xx unknown
- 1990-05-23 CA CA002017390A patent/CA2017390A1/en not_active Abandoned
- 1990-05-23 NZ NZ233781A patent/NZ233781A/xx unknown
- 1990-05-23 HU HU903160A patent/HUT54697A/hu unknown
- 1990-05-23 PT PT94128A patent/PT94128A/pt not_active Application Discontinuation
- 1990-05-23 US US07/528,575 patent/US5108994A/en not_active Expired - Fee Related
- 1990-05-24 FI FI902602A patent/FI902602A0/fi not_active Application Discontinuation
- 1990-05-24 KR KR1019900007552A patent/KR900018095A/ko not_active Application Discontinuation
- 1990-05-25 PL PL28535190A patent/PL285351A1/xx unknown
- 1990-05-25 CN CN90103233A patent/CN1049847A/zh active Pending
- 1990-05-25 JP JP2134228A patent/JPH0320291A/ja active Pending
- 1990-05-25 PL PL28938290A patent/PL289382A1/xx unknown
- 1990-05-25 PL PL28938190A patent/PL289381A1/xx unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU627880B2 (en) | 1992-09-03 |
CN1049847A (zh) | 1991-03-13 |
EP0399743A1 (en) | 1990-11-28 |
MA21854A1 (fr) | 1990-12-31 |
CA2017390A1 (en) | 1990-11-25 |
PT94128A (pt) | 1991-01-08 |
JPH0320291A (ja) | 1991-01-29 |
NZ233781A (en) | 1992-09-25 |
ZA903984B (en) | 1991-06-26 |
US5108994A (en) | 1992-04-28 |
PL289381A1 (en) | 1991-11-04 |
NO902296L (no) | 1990-11-26 |
AU5584290A (en) | 1990-11-29 |
FI902602A0 (fi) | 1990-05-24 |
PL289382A1 (en) | 1991-11-04 |
HU903160D0 (en) | 1990-10-28 |
GB8912043D0 (en) | 1989-07-12 |
ZW8190A1 (en) | 1991-02-06 |
PL285351A1 (en) | 1991-07-15 |
NO902296D0 (no) | 1990-05-23 |
KR900018095A (ko) | 1990-12-20 |
IL94485A0 (en) | 1991-03-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CA2297294C (en) | Phosphonomethoxymethylpurine/pyrimidine derivatives | |
KR950009195B1 (ko) | 항 비루스성 포스포노메톡시알킬렌 푸린 및 피리미딘 유도체 | |
US5688778A (en) | Nucleoside analogs | |
US5854228A (en) | Antiviral phosphonomethoxyalkylene purine and pyrimidine derivatives | |
CA1340909C (en) | Purine derivatives and use thereof in therapy | |
US5356886A (en) | Antiviral phosphono-alken derivatives of purines | |
US5208221A (en) | Antiviral (phosphonomethoxy) methoxy purine/pyrimidine derivatives | |
US5302585A (en) | Use of chiral 2-(phosphonomethoxy)propyl guanines as antiviral agents | |
FI113539B (fi) | Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten puriinien ja pyrimidiinien tyydyttymättömien fosfonaattijohdannaisten valmistamiseksi | |
HUT54697A (en) | Process for producing sulfur- and phosphorus-containing purine derivatives and pharmaceutical compositions comprising same as active ingredient | |
US5247085A (en) | Antiviral purine compounds | |
CA2224710A1 (en) | Phosphonate nucleotide derivatives | |
AU2002315625B2 (en) | 6-2'-(phosphonomethoxy)alkoxy pyrimidine derivatives having antiviral activity | |
AU617724B2 (en) | 9-(2-(Phosphonomethoxy)Ethoxy) Purine derivatives, intermediates and use as pharmaceuticals | |
EP0452935B1 (en) | Chiral 2-(phosphonomethoxy)propyl guanines as antiviral agents | |
AU672994B2 (en) | Liponucleotides of seco-nucleosides, their preparation and their use as anti-viral drugs | |
EP0405748A1 (en) | Phosphonoderivative of purine with antiviral activity | |
CA2015671C (en) | Phosphonomethoxytetrahydrofuranyl-purine/pyrimidine derivatives | |
AU646594B2 (en) | Nucleoside analogs | |
KR20070018868A (ko) | Hiv 감염 치료에 유용한 뉴클레오사이드 포스포네이트유도체 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
DFC9 | Refusal of application |