HUE034491T2 - Az arabidosis thaliana növény specifikus arabinóz transzportere pentóz-fermentáló élesztõk létrehozására - Google Patents

Claims (6)

1. Szabadalmi igénypontok

   1. Növényi pentóz transzportért kódoló nukleinsav-szekvenciál tartalmazó inikleinsav-molekuki aikáímnzíi«> sejt transzformálására, ahoi a transzformálás lehetővé teszi, hogy sejt L-arahinózt vegyen: ifelí ahol a sejt élesztő sejt, és ahol a növényi pentóz transporter olyan aroinosav-szekveneiát tartalmaz, atnely legalább 70%, előnyösen legalább 80%, előnyösebben legalább 90% azonosság« a SEQ E) NO: ! szerinti- aminasav^szekvepeiával és m vitro és/vagy in vívó pentóz transzport funkciója van. 3v Äz 1. igénypont szerinti alkalmazás! ahoi a növényi pentóz transzportét' in vitro és/yágy MMvo L«arabíftő?i írtniszpórtái és nem transzportál D-glükózt.
2. 3. Az I. vagy 2 igénypont szerinti alkalmazás, ahol a növényi peníöz transzporter aminosav-szekvenciája a SEQ ID NO: 1 szerinti.
3. 4. Az 1-3. igénypont szerinti alkalmazásáig ahöl a növényi pántoz transzportért kódoló Mkleotid-szekvenc«. olyan nukleofid-szekvenciát tartalmaz, amely legalább 70%, előnyösen legalább 80%, előnyösebben legalább 90% azonosság!) a SEQ !D NO: 2 szerinti aminosav-szekvenciával.
4. 5. Az előző igénypontok bármelyike: szerinti alkalmazás, ahol a nikleißsavssÄveheia olyan :míkiemsáv expressziéi. konstrukció, amely szabályozó szekvenciákat: tartalmaz tnnködőképesen kapcsoiían a növényi pentóz transzportért kódoló nukleinsav-s/ekvenciával, és/vagy ahoi a tutklcinsav expressziós konstrukció továbbá 5’ és/vagy 3’ felismerő szekvenciákat és/vagy szelekciós markereketis tartalmaz. ó. Az. előző igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol az, élesztő seji a következők által akotoli csoportból kiválasztott nemzetség tagja: SncchnromyceSy Kluy\>enmrLex. Candida. PL hűt Schmoxamharomycÿx, Hans&mtla, Rloeckcm, Sdmamiotnyces, Arxtih és Yarrowia. es előnyösen következők által alkotott csoportból : kiválasztott faj tagja: S. cemisiae, S. éuMcd, '$; bmmti. V exigmis, Ά mmmm, S-dítmmims; K. loads,, M mm'xiäms, K, fmgffis. H. polymorphe}, P. pwtord és Y. hpolvnea.
5. 7. ÁZ előző igénypontok bártítélyfeszerinti alkalmazás, ahol a sej! továbbá atabinő/ inetabolikus útvonalba íiartözó fehérjéket kórlál^'lpklálli^p^ivenciakat is tartalmaz.
6. 8. Az előző igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás - E-arabinózt tartalmazó biológiai anyag átalakítására és metabohsrlisára, Különösen rekombmáns fermentálására. - biológiai alapú vegyszerek és bio üzemanyagok előállítására, - bioalkoholok, előnyösen bioetanoi és/vagy btobutanol előállítására 9. élesztő sejt, amely transzformálva van a következőkéi tartalmazó nukleútsav expressziós konstrukcióval: (a) növényt peníóz'transzpertert kódoló nukleínsav-szekvencia, ahol a növényi pentôz·: transzporté!' olyan, arninosav-szék véne iát tartalmaz,- amely legalább 70%, előnyőse» legalább 80%, előnyösebbe» legalább 9Q% azonosság« a SEQ'îDMO: 1 szerinti antinosav--szekvenciával és in vitro ésAagy in vivő pentóz transzport íbnkciöja van, (b) szabályozó elemek működőképeseit kapcsoltan a »ukieinsav-szekvendával, lehetővé léve a növényi pontoz, transzporté!' expresszátóciását az élesztő sejtben, ahol a nukleínsav.expressztós konstrukció expressziója képessé teszt az élesztő sejtet L-arabinóz felvételére, és ahol az élesztő sejt iúítermell a TAU {transzaklolazj gént és expresszálja az araA (L-arabinózdzömeráxj, araB 0.,-rtfeuíökmázj és araD (L-rtbulózrS-P-á-epíroe-ráz.) gént, HL A 1(1, Igénypont szerinti éiésztö sejt, ahol azélesztő sejt: transzformálva van az !·.% igénypontok bármelyikében idei múlt n»kkmsay-t»okv a' ivat. és^vagy ajtói ag élesztössgt a 6. vagy 2,:igénypöifbá« definiált; 11. A 9. vagy Hl, igénypont szerinti élesztő sejt, amely továbbá egy vagy több olyan enzimet is expresszál, ötnélyék képessé teszik a sejtet egy vagy több további anyagcseretermék termelésére, az .anyagcseretermék előnyösen a biológiai alapú u-gyszeíd, vagy bio üzemanyagok közöl van kiválasztva. 12. A 9-11, igénypontok ho mely tke szét inti élesztő sejt alkalmazása - {^arabiH&St tátfilina^ iiplőgtóf ;py«g.Âîbkftâsâra és niéttibölíxáiásara, különösen rekomhináns fermentálására, - biológiai alapú vegyszerek és bio üzemanyagok előállítására, - bioalkoholok, előnyöset! htoetario! ésrvagy biobutanoi előállítására, 13. kijárás bíoaikohoí előállítására, amely eljárás magában foglalja a következő lépéseket: {áj k-arabifföz teást tartábpázó közeg átalakítását a 9-11. igénypittok bármelyik®; szerinti amely az L -arahinózt bioaikohollá alakítja át, t b) adott esetben a bioalkohol kinyerését, és/vagy biobmanoi 1:4, Eljárás anyagcseretermék előállítására, amely eljárás magában foglalja a kővetkező lépéseket; (a) L-arabinóz forrást tartalmazó közeg átalakítását a 9-11 igénypontok bármelyike szerinti sejtteh amely az L-arabinózt az anyagcsereiermékké alakítja át, (b) adott esetben az anyagcseretermék kinyerését, az anyagcseretermék előnyösen a kővetkezők által alkotott csoportból van kiválasztva: biológiai-alapú vegyszerek vagy bio üzemanyagok, mint például tejsav, ecetsav. borostyánkósav, almasav, l-butanoL iaohutanoi, 2-btuanol, más. alkoholok, aminosavak, 1,3-propűndtoI, etilén, glicerin, (i-laktám antibiotikum vagy eefsloKjxsnn. aikánok, törpének, ízoprenoiöok vagy az aroorfadién prekitrzor molekula vagy az artemizinin ma lánaeílenes szer, t:S> & II.- vagy 14. igénypont szerinti eijávás, ahöl a közeg toyáhbi szénförrasl is tartalmaz., előnyösen h«xM, előnyösebben glükózt.