HU209314B - Process for producing antibiotic l 17392 (deglucoteicoplanin) and salts thereof - Google Patents
Process for producing antibiotic l 17392 (deglucoteicoplanin) and salts thereof Download PDFInfo
- Publication number
- HU209314B HU209314B HU896773A HU677389A HU209314B HU 209314 B HU209314 B HU 209314B HU 896773 A HU896773 A HU 896773A HU 677389 A HU677389 A HU 677389A HU 209314 B HU209314 B HU 209314B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- deglucoteicoplanin
- process according
- teicoplanin
- acid
- mixture
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D498/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains four or more hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K9/00—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K9/006—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence being part of a ring structure
- C07K9/008—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence being part of a ring structure directly attached to a hetero atom of the saccharide radical, e.g. actaplanin, avoparcin, ristomycin, vancomycin
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
Description
A találmány tárgya javított eljárás az L 17 392 antibiotikumnak vagy deglukoteikoplaninnak nevezett antibiotikum valamint savakkal és bázisokkal képzett sóinak előállítására. Az eljárás során egy teikoplanin-származékot vagy egy teikoplanin jellegű anyagot kémiai úton antibiotikummá alakítunk át oly módon, hogy egy szerves poláros aprotikus oldószert tartalmazó homogén közegben - mely az oldat tömegére számított 1-20 t% vizet tartalmaz - erős szerves vagy ásványi savval, 60-100 ’C hőmérsékleten hidrolizálunk.
Az antibiotikumok mikroba elleni hatásúak, különösen a gram-pozitív baktériumokkal (például Staphilococcus és Streptococcus törzsekkel) szemben.
A teikoplanin a korábban teichomicinnek nevezett antibiotikum nemzetközi, nem bejegyzett (INN) neve. A teichomicint úgy kapjuk, hogy Anticoplanes teichomyceticus nov. sp. ATCC 31121 törzseket asszimilálható szenet, nitrogént és szervetlen sókat tartalmazó táptalajon tenyésztik (4 239 751 számú, amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás).
A fenti leírás szerint a táptalajt alkalmas, vízben nem oldódó szerves oldószerrel a szokásos módon extrahálva, majd a szerves oldószerből történő kicsapással Ab A2 és A3 faktort tartalmazó antibiotikum komplexet (teikoplanint) nyernek ki.
Az ily módon izolált antibiotikum komplex túlnyomó részét képező A2 faktort azután SephadexR oszlopkromatográfiával választják el a többi faktortól. Az Aj és az A3 faktor igen kis mennyiségben van jelen. Viszont a 2 121 401 számú nagy-britanniabeli szabadalmi leírás szerint az A2 faktor valóban olyan keverék, mely öt, egymáshoz erősen hasonló fő komponensből áll.
Fermentációs és tisztítási (pl. kromatográfiás) eljárásokkal olyan teikoplanin terméket állíthatnak elő, mely zömében A2 faktorból áll, és egy kis mennyiségű A3 faktort is tartalmaz.
Újabb vizsgálatok szerint a teikoplanin A2 faktora az (I) általános képlettel írható le, ahol R jelentése N-[(C9-C12)alifás acil]-D-glukozamin maradék,
R1 jelentése N-acetil-D-glukozamin maradék,
R2 jelentése D-mannóz maradék.
A fenti képletben minden cukorjellegü molekularész O-glukozid kötésekkel kapcsolódik a molekula törzséhez, a 0 090 578 számon közzétett Európa-bejelentésben szerepel egy ugyanilyen szerkezeti képletű anyag, melyet 41 030 antibiotikum B faktornak neveznek. Ez az anyag mikrobiológiai módszerekkel állítható elő oly módon, hogy valamely alkalmas közegben Streptomyces virginae NRRL 12 525 vagy Streptomyces virginae NRRL 15 156 törzset tenyésztik, majd a kapott terméket izoláljuk, tisztítják és komponenseikre bontják. így megkapják az A 41 030 antibiotikum komplexet, mely legalább hét faktort tartalmaz, köztük az A 41 030 B faktort.
A 119 574 és a 119 575 számú Európa-szabadalmi leírás ismerteti a teikoplanin A2 faktor részleges hidrolízisével - melynek során egy vagy két cukorrész lehasad - kapott termékeket, az L 17 054 és az L 17 046 antibiotikumot. Ezen termékeket úgy kapjuk, hogy a teikoplanin A2 faktort meghatározott körülmények között savasan hidrolizálják. Az L 17 054 hidrolízisét előnyösen 70 és 90 ’C között, 0,5 N sósavval, 15-90 perc alatt, az 17 054 hidrolízisét pedig előnyösen 70 és 90 ’C között, 1N-3N sósavval, 30-60 perc alatt végzik.
Az L 17 054 antibiotikum olyan (I) általános képletű vegyület, melyben R helyén hidrogénatom, R1 helyén egy N-acetil-D-glukozamin maradék és R2 helyén D-mannóz maradék, az L 17 046 antibiotikum pedig olyan (I) általános képletű vegyület, melyben R és R2 helyén hidrogénatom, R1 helyén-N-acetil-D-glukozamin maradék szerepel. A 301 247 számon közzétett Európa-bejelentésben de-mannosil-teikoplanin-származékok - vagyis olyan (I) általános képletű vegyületek, melyekben R és R1 jelentése a fenti és Re2 jelentése hidrogénatom - leírása található. Ezen leírásban és az igénypontokban a „teikoplanin-származék” kifejezésen az Actinoplanes teichomyceticus ATCC 31 121 tenyésztésével előállított és a 4 239 751 számú, amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás szerinti módon tisztított teikoplanin-komplexből kiválasztott anyagot, továbbá a teikoplanin A2 és A3 faktorát valamint a teikoplanin A2 faktorának minden fontos komponensét értjük. A „teikoplanin-származék” kifejezés magába foglalja a teikoplanin RS-3-at (A vegyület), melyet M Zanol és munkatársai (17th International Symposium on Chromatography, Vienna, September 25-30, 1988) írtak le, valamint a teikoplanin RS-4-et is (B vegyület), melynek leírása a 306 645 számon közzétett amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban található. Ezek olyan (I) általános képletű vegyületek, melyekben R1 és R2 jelentése a fenti, az R szubsztituens alifás acilrésze pedig 10-metil-undekanoil- vagy -dodekanoil- ill. 6-metil-oktanoil- vagy nonanoil-csoport. A „teikoplanin-származék” kifejezésen tehát minden olyan vegyületet értünk, melynek szerkezete alapvetően megegyezik a fenti (I) általános képlettel - ahol R jelentése hidrogénatom vagy N-[(C9CI2)alifás-acil]-D-glukozamin maradék, Rj jelentése hidrogénatom vagy N-acetil-D-glukozamin maradék, R2 jelentése hidrogénatom vagy D-mannóz maradék, azon feltétellel, hogy R, R1 és R2 nem lehet egyidejűleg hidrogénatom - továbbá két vagy több ilyen vegyület tetszőleges arányú keverékét és/vagy tetszőleges arányban képzett vegyületeit.
A 146 053 számon közzétett Európa-bejelentésben szerepel egy kémiai eljárás L 17 392 antibiotikum [deglukoteikoplanin], vagyis olyan (I) általános képletű vegyület, melyben R, R1 és R2 jelentése egyidejűleg hidrogénatom előállítására. Ez abból áll, hogy egy teikoplanin-származékot vagy teikoplanin jellegű vegyületet kontrollált körülmények között, erősen savas közegben hidrolizálnak. E célra protikus szerves oldószert, például alifás savat, alfa-halogénezett alifás savat, alifás vagy cikloalifás alkanolt vagy fenilszubsztituált alkanolt használnak.
A 146 053 számú Európa-bejelentés szerint egy erős, a szerves oldószerrel kompatibilis savat - például
HU 209 314 B erős ásványi vagy erős szerves savat - is kell alkalmazni, és a reakciót 20 és 100 ”C között hőmérsékleten kell végrehajtani.
A „Journal of Antibiotics”-ban [39, (10) 1430— 1442. old. (1986. okt.)] megtalálható a deglukoteikoplanin előállításának és NMR jellemzőinek leírása. A közlemény a deglukoteikoplanin előállítására vonatkozóan többféle módszert tartalmaz, melyek lényege, hogy egy teikoplanin-származékot vagy teikoplanin jellegű vegyületet poláris szerves oldószerben hidrolizálnak.
A találmány tárgya javított kémiai eljárás L 17 392 antibiotikum (deglukoteikoplanin) valamint savakkal és bázisokkal képzett sóinak előállítására, mely abból áll, hogy egy teikoplanin-származékot vagy teikoplanin jellegű vegyületet poláros aprotikus szerves oldószerben - mely lehet például N,N-dimetil-formamid (DMF), hexametil-foszforamid (HMPA) 1,3-dimetil3,4,5,6-tetrahidro-2(IH)-pirimidon (DMPV) dimetilszulfoxid (DMSO) vagy ezen oldószerek keveréke erősen savas, kontrollált körülmények között hidrolizálunk. A találmány szerinti eljáráshoz alkalmas „erősen savas, kontrollált körülmények”-en azt értjük, hogy a reakcióközeg kellőképpen savas a teikoplanin-származék vagy teikoplanin jellegű vegyület összes cukorrészeinek eltávolításához, anélkül, hogy a szubsztrát kémiai szerkezetében vagy királis centrumaiban egyéb, nem kívánatos változásokat okozna.
Ismeretes, hogy egy bonyolult szerkezetű molekulából, amilyen pl. egy glikopeptid antibiotikum, az összes cukorrészek eltávolítása mindig nagy nehézségekkel jár, mert enyhén savas körülmények között a cukorrészek eltávolítása csak részlegesen megy végbe, míg erősen savas körülmények között megindul a szubsztrát részleges lebomlása és/vagy változások állnak be a királis centrumok sztereokémiái konfigurációjában. Például az avoparcint, a valódi aglikont még sohasem sikerült izolálni.
A fentiek alátámasztására hivatkozunk a következő irodalmi forrásokra: G. A. Ellestad és munkatársai [7. of Antibiotics 36, 1683 (1983)]; G. M. Harris és munkatársai [J. Am. Chem. Soc. 105, 6915 (1983)]; W. J. McGahren és munkatársai [7. of Antibiotics 36, 1671. (1983)]. M. R. Bardone és munkatársai [J. of Antibiotics 31, 170 (1975)]; teichomycin A2 faktor hidrolizálását íiják le vizes 2N kénsavval, ill. vizes 6N sósavval 100 °C-on.
A találmány szerinti eljárásban a deglukoteikoplanint nagy (kb. 65%-os) mólarányban alkalmazzuk. Az irodalom szerint az egyes eljárások deglukoteikoplanin kihozatala attól függ, hogy milyen oldószer/reagens kombinációt használunk. Ha például oldószerként trifluor-ecetsavat, savas közegként pedig sósavat alkalmazunk, akkor a találmány szerinti eljáráséval összemérhető kihozatalt érhetünk el, míg kénsav alkalmazása esetén az ismert eljárások kihozatala a 10%-nál is kevesebb. Az ismert egyéb eljárásoknak, melyek látszólag nagy (a nyers termékre számítva 90% körüli) kihozatalt adnak, az a hátrányuk, hogy a hidrolízist heterogén közegben kell végrehajtani (az ásványi savat a kiindulási anyag folyékony, poláris oldószerrel készített szuszpenzióján kell átbuborékoltatni), és valóban nyers, igen gyenge tisztasági fokú terméket kapunk. Például a 146 053 számú Európa-szabadalmi bejelentés 4. példájában 10 g teikoplanin komplex benzil-alkoholos oldatából kiindulva, 60 °C-os hőmérsékleten, ásványi savként sósavat alkalmazva 9,2 g nyers deglukoteikoplanint kapnak.
Ezen túlmenően a reakció üzemesítése szempontjából fontos, hogy a reakciót homogén közegben hajthassuk végre, s ezáltal javuljon a termék minőségének reprodukálhatósága, vagyis a reakció folyamán jobb granulometriás homogenitást érjünk el, és kevesebb analitikai problémával kelljen szembenézni.
A találmány szerinti eljárással jó tisztasági fokú deglukoteikoplaninból jó kihozatalt érhetünk el, és a reakció homogén közegben végezhető.
Az említett „erősen savas, kontrollált körülmények között hidrolízis”-t a megfelelő oldószer, savtípus és -koncentráció valamint reakcióhőmérséklet megválasztásával érhetjük el. Tehát a találmány tárgya eljárás teikoplanin-származékoknak vagy teikoplanin jellegű vegyületeknek deglukoteikoplaninná vagy annak savakkal vagy bázisokkal képzett sóivá történő átalakítására, azzal jellemezve, hogy egy anyagot - mely lehet teikoplanin komplex, annak további tisztításával kapott bármely készítmény, teikoplanin A2 faktor, teikoplanin A3 faktor, a teikoplanin A2 faktorának bármely főkomponense, egy (I) általános képletű vegyület, ahol R jelentése hidrogénatom vagy N-[(C9-C12) alifás acil]D-glukozamin maradék, R1 jelentése hidrogénatom vagy N-acetil-D-glukozamin maradék, R2 jelentése hidrogénatom vagy D-mannóz maradék azon feltétellel, hogy R, R1 és R2 nem lehet egyidejűleg hidrogénatom; továbbá a fenti anyagok közül kettőt vagy többet tetszőleges arányban tartalmazó keverék - homogén közegben, poláros aprotikus szerves oldószerben, mely lehet pl. Ν,Ν-dimetil-formamid (DMF), hexametilfoszforamid (HMPA), l,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro2(H)-pirimidon (DMPV), dimetil-szulfoxid (DMSO) vagy ezen oldószerek keveréke, egy, a választott oldószerrel kompatibilis, erős szerves vagy erős ásványi savval, 60-100 °C közötti hőmérsékleten hidrolizálunk úgy, hogy a poláros aprotikus oldószerhez az oldat töménységére számított 1-201% vizet adunk.
Az aprotikus szerves oldószer a reakcióhőmérsékleten folyékony legyen, és képes legyen arra, hogy a teikoplanin kiindulási anyagot teljes mértékben szolubilizálja.
Aprotikus szerves oldószerként előnyösen dimetilszulfoxidot alkalmazunk.
Erős ásványi savként előnyösen sósavat, hidrogénbromidot, tömény kénsavat, vagy tömény foszforsavat alkalmazunk. Az erős szerves savak közül előnyösen alkalmazhatók az α-halogénezett kis szénatomszámú alifás savak, az alkánszulfonsavak, a polifluor-alkánszulfonsavak, a cikloalkánszulfonsavak és az arilszulfonsavak. A fentiek közül különösen előnyösen alkalmazható a trifluor-ecetsav, triklór-ecetsav, metánszulfonsav, etánszulfonsav, trifluor-metánszulfonsav, ben3
HU 209 314 Β zolszulfonsav, ciklohexánszulfonsav, kámforszulfonsav, a- és β-naftalinszulfonsav és a p-toluolszulfonsav. A tömény savakat a kiindulási anyagként használt teikoplaninhoz vagy teikoplanin jellegű vegyülethez képest előnyösen nagy tömegfeleslegben alkalmazzuk. A kénsavat és a foszforsavat általában a kereskedelemben kapható legnagyobb koncentrációban használjuk. 9598 tömeg%-os kénsav, ill. 85-98 tömeg%-os ortofoszforsav alkalmazásával kielégítő eredményeket kapunk. Az erős ásványi savakat kisebb (30-80%-os) töménységben is alkalmazhatjuk. A találmány egyik előnyös megvalósításában 98 tömeg%-os trifluor-ecetsavat vagy 98 tömeg%-os metánszulfonsavat alkalmazunk. Areakcióelegynek elegendő mennyiségű vizet kell tartalmaznia a hidrolízis sztöchiometriai igényének kielégítéséhez. Másrészt a nemkívánatos mellékreakciók például a reakciótermék lebomlása és/vagy a királis centrumok átrendeződése vagy izomerizálódása - elkerülésére a reakcióelegynek a lehető legkisebb mennyiségű vizet kell tartalmaznia.
Hogy a reakció sztöchiometriai igényeit kielégítsük, de ugyanakkor a folyamat ipari méretekben is működőképes és megfelelő sebességű maradjon, a hidrolízist a kiindulási anyagként használt teikoplaninhoz vagy teikoplanin jellegű vegyülethez viszonyítva 120 tömeg% vizet tartalmazó közegben hajtjuk végre.
A szükséges mennyiségű vizet bevihetjük a savval, vagy jelen lehet már a kiindulási anyagban. Ha gyakorlatilag vízmentes kiindulási anyagot, oldószert és savat használunk, akkor a kívánt mennyiségű vizet közvetlenül hozzáadhatjuk az oldószerhez vagy a reakcióelegyhez.
Ha ásványi savat alkalmazunk, annak végkoncentrációja a sav típusától függően általában 1 és 10 tömeg% között mozog.
A kontrollált körülmények között végrehajtott erős savas hidrolízist a következőképpen illusztrálhatjuk: a teikoplanint vagy teikoplanin jellegű vegyületet szobahőmérsékleten mólfeleslegben jelenlévő oldószerrel keverjük, majd hozzáadjuk a megfelelő savat. Ezután a reakcióelegyet a megfelelő hőmérsékleten tartva addig keveijük, míg a deglukoteikoplaninból kielégítő kihozatalt érünk el. A reakcióidőt általában a reakció lefolyásának követésére szolgáló analitikai vizsgálatokkal határozzuk meg. Az itt következő adatok általános tájékoztatásul szolgálnak, a találmány oltalmi körét nem korlátozzák. A reakcióidő a kiindulási anyagtól, az oldószerekről, az erős savtól, annak koncentrációjától és a reakcióhőmérséklettől függően általában 0,25 és 20 óra között változik. A reakcióhőmérsékletet a szóbanforgó reakciórendszemek megfelelően kell megválasztani a következő tényezők figyelembevételével: kiindulási anyagok, az aprotikus szerves oldószer, a sav típusa és koncentrációja és a komponensek kölcsönös arányai. Alacsonyabb reakcióhőmérséklet esetén általában hosszabb reakcióidőt kell alkalmazni, hogy megfelelő kihozatalt érjünk el. A kontrollált körülmények közötti erős savas hidrolízist 60 és 100 ’C közötti, a legelőnyösebben 75 és 85 ’C közötti hőmérsékleten hajtjuk végre.
Végül a reakcióelegyet keverés közben sómentesített vízbe öntjük, és egy bázis vizes oldatával, például 10%-os vizes nátrium-hidroxid-oldattal a pH-ját 10 körüli értékre állítjuk be. Ezután a reakcióelegyet leszűrjük, a kapott szilárd anyagot kevés vízzel mossuk, és 50 °C-on vákuumban két órán át szárítjuk.
A találmány egyik előnyös megvalósításában 98 tömeg%-os kénsav jelenlétében körülbelül 85 °C-os hőmérsékleten oldószerként DMSO-t alkalmazunk. A kénsav koncentrációja a reakcióelegyben végül 3 és 5% között lesz. A hidrolízissel kapott szilárd nyers termék tisztasága általában 30-35%.
A találmány egy másik megvalósítási módja szerint a fenti módon előállított nyers deglukoteikoplanint egyszerűen DMSO-víz-elegyből történő savas vagy bázisos kicsapással tisztítjuk, így a további tisztítási lépéseket elkerülhetjük.
Ismeretes, hogy a technika állásában alkalmazott hidrolizálási módszerek esetén a deglukoteikoplanint oszlopkromatográfiás úton kell tisztítani, például fordított fázisú oszlopkromatográfiával, melyhez adszorbensként szilánozott szilikagélt, eluensként pedig hidrofil keverékeket használunk.
A találmány szerinti eljárás alkalmazása esetén a nyers deglukoteikoplanin tisztítására bármely ismert módszert alkalmazhatunk, de azok a módszerek, melyek kromatografálási lépést tartalmaznak, olyan hosszú elúciós időt és olyan sok oldószert igényelnek, hogy üzemeltetésre nem alkalmasak.
A találmány szerinti eljárással előállított deglukoteikoplanin tisztítása például abból áll, hogy a deglukoteikoplanint DSMO-t és vizet tartalmazó, körülbelül 4-nél alacsonyabb vagy körülbelül 10-nél magasabb pH-jú elegyben oldjuk, majd az elegy pH-ját 6 és 8 közötti, előnyösen pH = 7-es értékre beállítva a terméket kicsapjuk, és az így kapott tiszta szilárd anyagot leszűijük.
Az oldat pH-ját azért állítjuk be 4 alatti vagy 10 feletti értékre, hogy a deglukoteikoplanin savas vagy bázisos só alakjában célszerűen kis oldószertérfogatban szolubilizáljuk, a ezáltal csökkentsük a kicsapásnál fellépő végtermék-veszteséget.
A savas só előállítására előnyösen valamely erős ásványi savat - például sósavat, hidrogén-bromidot vagy kénsavat - alkalmazunk.
Ha a deglukoteikoplanint bázisos só alakjában akarjuk feloldani, akkor előnyösen egy alkálifém-, pl. nátrium-hidroxidot alkalmazunk.
A DMSO/víz oldószerkeveréknek jól kell oldania a deglukoteikoplanin kiindulási anyagot.
Az elegyben a DMSO koncentrációja általában 30 és 70, előnyösen 40 és 60 térfogat% között van. Ezen utóbbi koncentráció-tartományba eső elegyből 1020 tömeg%-nyit alkalmazva a fent említett savas vagy bázisos pH értékeken általában 1 tömeg%-nyi nyers deglukoteikoplanint tudunk feloldani.
A találmány ezen előnyös megvalósítási módja szerint 10% vizes sósav-oldat jelenlétében - mely elegendő ahhoz, hogy a pH-t 4 körüli értékre állítsa be 40-60% DMSO/víz elegyet alkalmazunk a nyers deglukoteikoplanin feloldására (HPLC titer 30-35%).
HU 209 314 Β
Ha ezután az oldat pH-ját semleges, 6 és 8 közötti, előnyösen 7-es értékre beállítva a deglukoteikoplanint kicsapjuk, így a terméket szabad bázis alakjában kapjuk, mely további tisztítást nem igényel.
A gyakorlatilag tiszta deglukoteikoplanin HPLC titere (a 254 nm ultraibolya hullámhossznál jelentkező csúcsok %-aránya) 95%-nál magasabb, víz- és oldószertartalma 10 és 15 tömeg% között van, szervetlen maradéka pedig 0,5 tömeg%.
A találmány szerinti eljárással előállított deglukoteikoplanin fizikai-kémiai jellemzőinek leírása megtalálható a már említett, 146 053 számú Európa-szabadalmi leírásban.
Az ily módon előállított deglukoteikoplanin adott esetben általánosan ismert módszerekkel, savak vagy bázisok alkalmazásával a megfelelő sókká alakítható.
így például előállítjuk a deglukoteikoplanin egy koncentrált oldatát (például DMSO/víz elegyben), majd az oldat pH-ját max. 4-re (célszerűen egy erős savval mint például HCl-val vagy H2SO4-val) vagy legalább 10-re (célszerűen NaOH-dal vagy KOH-dal) állítjuk be, majd feleslegben hozzáadunk egy kicsapószert, például acetont vagy etil-étert 5:1-10:1 térf/térf. arányban. Ezután a csapadék formában kivált deglukoteikoplanin sót egyesítjük (például szűréssel), mossuk és szárítjuk.
A deglukoteikoplanin valamint savakkal és bázisokkal képzett, gyógyászatilag elfogadható sói hatásosan alkalmazhatók a humán- és állatgyógyászatban antimikrobiális készítmények hatóanyagaiként olyan patogén baktériumok által okozott fertőzések megelőzésére és kezelésére, melyek e hatóanyagokra érzékenyek. Ezen készítményekben a találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket alkalmazhatjuk önmagukban vagy tetszőleges arányú keverékek alakjában. A deglukoteikoplanin in vitro és in vivő hatására valamint formulázási módjaira vonatkozó adatok megtalálhatók a 146 053 számú Európa-szabadalmi bejelentésben.
A deglukoteikoplanin azonban felhasználható értékes félszintetikus teikoplanin-származékok előállításának kiindulási anyagaiként is. Ilyen származékokat említ például a 218 099 számon közzétett Európa-szabadalmi bejelentés valamint a WO 88/06600 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentés.
Az alábbi példák a találmány illusztrálására szolgálnak, annak oltalmi körét nem befolyásolják,
1. példa
Deglukoteikoplanin előállítása teikoplanin komplexből
Teikoplanin komplex (vagyis teichomycin Ab A2 és A3 faktort tartalmazó, ATCC 31 121 törzs tenyésztésével a 4 239 751 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás szerinti módon előállított antibiotikum komplex) nátrium-sójából 4,5 g-ot szobahőmérsékleten (kb. 20 ’C) 42 ml DMSO-ban és 1 ml 95%-os kénsavban (ez a teljes reakcióelegyre nézve 4,1 tömeg/térfogat%-ot jelent) szuszpendálunk.
A reakcióelegyet a teikoplanin feloldódásáig keverjük, majd 20 órán át 85 °C-os hőmérsékleten tartjuk. A hidrolízis lefolyását HPLC-vel követjük oly módon, hogy óránként 30 pg, 50-szeresre hígított mintát injektálunk be.
Miután szobahőmérsékletre lehűlt, a reakcióelegyet keverés közben 70 ml sómentesített vízbe öntjük, és 10%-os nátrium-hidroxid-oldattal pH = 7-re állítjuk be. A kapott csapadékot leszűrjük, kevés vízzel mossuk, és 50 ’C-on, vákuumban szárítjuk, így 2,74 g nyers (52% titerű) deglukoteikoplanint kapunk; moláris kihozatal 61%.
2-7. példa
Az, 1. példa szerinti eljárással, de a reakciókörülményeket az I. táblázatban felsoroltakkal helyettesítve deglukoteikoplanint állítunk elő:
I. táblázat
| Pél- da | DMSO menny. (ml) | Sav típusa és menynyisége (ml) | Sav- konc. tö- meg/tf. | Hő- mére. ’C | Kiho- zatal % | ||
| 2. | 40 | 80% | H2SO4 | 1 | 3,0 | 85 | 62 |
| 3. | 40 | 37% | HC1 | 2 | 2,0 | 85 | 62 |
| 4. | 40 | 37% | HC1 | 1 | 1,7 | 85 | 61 |
| 5. | 42 | 25% | HC1 | 2 | 1,2 | 85 | 62 |
| 6. | 42 | 95% | H2SO4 | 1 | 4,1 | 95 | 63 |
| 7. | 42 | 95% | h2so4 | 1 | 4,1 | 85 | 61 |
8. példa
A) L 17 046 antibiotikum (pszeudoaglikon) előállítása
Mechanikus keverővei és hőmérővel felszerelt 3 literes négynyakú gömblombikban 50 g teikoplanint keverés közben, szobahőmérsékleten (22-24 ’C) 2,5 1 aceton és 300 ml 30%-os vizes sósav-oldat elegyében oldunk.
A keverést 48 órán át folytatjuk, majd 3 °C-os jeges vízbe öntjük, és 20%-os vizes nátrium-hidroxid-oldat lassú hozzáadásával semlegesítjük, miközben a hőmérsékletet 10 ’C alatt tartjuk. Az acetont csökkentett nyomáson, 40 ’C hőmérsékletű fürdőben teljesen lepároljuk az oldatról, a maradékot 2 liter vízben szuszpendáljuk, majd pH = 7-en leszűrjük.
Az így kapott 33,2 g nyers, szilárd pszeudoaglikont 1,2 1 desztillált vízben - melynek pH-ját nátrium-hidroxid-oldattal 9,5-re állítottuk be - ismét feloldjuk, az oldatot szűréssel tisztítjuk, majd 10%-os vizes sósavoldattal a pH-t 6,5-re állítva a pszeudoaglikont ismét kicsapjuk. A szűréssel kapott fehér, nedves, szilárd anyagot 200 ml friss acetonnal szuszpendáljuk, újból leszűrjük, majd 20 órán át szobahőmérsékleten vákuumban szárítjuk.
54%-os kihozatallal 23,5 g-ot kapunk a cím szerinti vegyületből (HPLC titere 70%). A nyers terméket a szakmában ismert és a 146 053 számú Európa-szabadalmi bejelentésben leírt módon tisztítva 12,8 g 90%os tisztaságú cím szerinti vegyületet kapunk.
B) Deglukoteikoplanin előállítása
HU 209 314 B
Lényegében az 1. példában leírt eljárást követjük, csak teikoplanin komplex helyett a fenti módon előállított pszeudo-aglikonból 5 g-ot, oldószerként 40 ml DMSO-t, ásványi savként pedig 1 ml 95%-os kénsavat (4,1 tömeg/térfogat%) alkalmazunk, és a reakcióhőmérsékletet 20 órán át 100 ’C-on tartjuk, így 61%-s moláris kihozatallal 3,1 g-nyers deglukoteikoplanint kapunk.
9. példa
A nyers deglukoteikoplanin tisztítása
1052 g nyers, világosbarna, az 1. példa szerinti módon előállított deglukoteikoplanint keverés közben feloldunk 7,5 1 DMSO, 7,5 1 sómentesített víz és 300 ml 20%-os vizes sósav-oldat elegyében. Mikor az anyag tökéletesen feloldódott, az oldathoz további 4,5 1 vizet adunk keverés közben, majd 350 ml 20%os vizes nátrium-hidroxid-oldat hozzáadásával a pHját 7-re állítjuk be. Ezután a szuszpenziót 5 ’C-ra lehűtve 2 órán át állni hagyjuk, majd a deglukoteikoplanint szobahőmérsékleten leszűrjük és levegőn szárítjuk. 65%-os kihozatallal 525 g terméket kapunk (HPLC vizsgálati eredmény 67%, DMSO-tartalom
17%). A 19 liter anyalúg 14 g deglukoteikoplanint tartalmaz (2,5%).
A fenti eljárással a kiindulási anyagból egy újabb 1000 g-os adagot hidrolizálunk, ezúttal 65,3%-os kihozatallal 522,5 g terméket kapunk (HPLC 67,5%). A két deglukoteikoplanin mintát (525+522,5 g) összekeverjük, majd erőteljes keveréssel 15 1 acetonban szuszpendáljuk. A keverést 60 percen át folytatjuk, majd a szilárd anyagot leszűijük és megszárítjuk így 960 g terméket kapunk (HPLC eredmények: TD 71%, víz 14,6%, oldószerek: DMSO 2,5%, aceton 9%).
A visszamaradt oldószerek eltávolítására a deglukoteikoplaninból 920 g-ot 8,5 1 sómentesített vízben újraszuszpendálva további 4 órán át keverjük. Szűrés és vákuumban 30 ’C-on végzett szárítás után 805 g 80% tisztaságú deglukoteikoplanint kapunk. Az eredményeket a II. táblázatban foglaltuk össze.
A HPLC elemzést egy 254 nm-es UV detektorral és egy C. Erba RP 18,5 pm, 150x4 mm-es előtöltött oszloppal felszerelt Hewlwtt Packard készülékkel végezzük.
A mobil fázisok összetétele:
A) 0,025 M vizes NaH2PO4/CH3CN 95:5 (tfrtf)
B) 0,025 M vizes NaH2PO4/CH3CN 30:70 (tf/tf)
Π. táblázat
| Tisztítási lépések | Szilárd deglukoteikoplanin | Anyalúgok | |||||||||
| g nyers TD | HPLC vizsg. | g tiszta TD | kihozatal % | HPLC %-os területi megoszlás | tiszta TDg (kihoz. %) | HPLC %-os területi megoszlás | |||||
| TD | TC | egyéb | TD | TC | egyéb | ||||||
| Első adag hidrolízis és kicsapás | 525 | 68 | 357 | 65 | 94 | 2 | 4 | 14 (2,5) | 37 | 42 | 21 |
| Második adag hidrolízis és kicsapás | 522 | 67,5 | 353 | 65,3 | 94 | 2 | 4 | - | - | - | - |
| Aceton | 960 | 71 | 681 | 63 | 94 | 3 | 3 | 0,5 | 26 | - | 74 |
| Szuszpenziók | |||||||||||
| Víz | 805 | 80 | 644 | 60 | 95 | 1 | 4 | 3,5 (0,7) | 84 | 2,5 | 13,5 |
TD Deglukoteikoplanin
TC Teikoplanin-pszeudoaglikon 45
A kromatogramokat A oldatban 8%-tól 75%-ig változó mennyiségű B-t tartalmazó oldattal lineáris gradiens elúcióval, 45 perc alatt, 1,5 ml/perc sebességgel vettük fel.
A reakciók lefolyását HPLC-vel követtük oly mó- 50 dón, hogy meghatározott időközönként acetonitril és víz 2:8 arányú elegyével megfelelő mértékben hígított mintákat injektáltunk be.
Claims (16)
1. Eljárás deglukoteikoplanin előállítására egy teikoplanin-származéknak vagy teikoplanin jellegű vegyületnek deglukoteikoplaninná erős ásványi sav vagy 60 szerves sav alkalmazásával történő hidrolízisével, valamint eljárás a deglukoteikoplanin savakkal és bázisokkal képzett sóinak előállítására, azzal jellemezve, hogy a teikoplanin komplexet, az abból további tisztítással kapott bármely készítményt, teikoplanin A2 faktort, teikoplanin A3 faktort, a teikoplanin A2 faktorának bármely komponensét vagy egy teikoplanin jellegű (I) általános képletű vegyület - ahol
R jelentése hidrogénatom vagy [(C9-C12)alifás acil]D-glukozamin maradék,
R1 jelentése hidrogénatom vagy N-acetil-D-glukozamin maradék,
R2 jelentése hidrogénatom vagy D-mannóz maradék, azon feltétellel, hogy R, R1 és R2 nem lehet egyidejűleg hidrogénatom vagy a fenti anyagok közül kettőt vagy többet tetszőleges arányban tartalmazó keveréket homogén kö6
HU 209 314 Β zegben, poláros aprotikus szerves oldószerben - mely előnyösen Ν,Ν-dimetil-formamid, hexametil-foszforamid, 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2( 1 H)-pirimidon, dimetil-szulfoxid vagy ezen oldószerek keveréke egy, a választott oldószerrel kompatibilis, erős szerves vagy erős ásványi savval 60-100 °C közötti hőmérsékleten, a poláros aprotikus szerves oldószerhez az oldat tömegére számított 1-20 tömeg% vizet adva hidrolizálunk, majd kívánt esetben
- a kapott terméket tisztítjuk, és/vagy
- a kapott terméket ismert módon sóvá alakítjuk.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy aprotikus szerves oldószerként dimetil-szulfoxidot alkalmazunk.
3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy ásványi savként sósavat vagy kénsavat alkalmazunk.
4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy ásványi savként kénsavat alkalmazunk.
5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a reakciót 75 és 85 °C közötti hőmérsékleten hajtjuk végre.
6. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a hozzáadott sav koncentrációját a teljes reakcióelegyre számítva 1 és 10 tömeg/térf% közötti értékre állítjuk be.
7. A 4. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a kénsavat 2 és 7 tömeg/térf% közötti koncentrációban alkalmazzuk.
8. Az 1-7. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a deglukoteikoplanin tisztítására a kapott deglukoteikoplanint megfelelő pH-jú, dimetil-szulfoxidot és vizet tartalmazó oldószerkeverékben feloldjuk, ahol az oldószerkeverékben a dimetil-szufoxid koncentrációja 30-70 térfogat%, majd az oldat pH-ját semlegesre beállítva a terméket ismét kicsapjuk, és az így kapott tiszta, szilárd anyagot leszűrjük.
9. A 8. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan DMSO/víz elegyet alkalmazunk, mely 40 és 60 térfogat% közötti dimetil-szulfoxidot tartalmaz.
10. A 8. és 9. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a deglukoteikoplanint olyan DMSO-víz elegyben oldjuk, melynek pH-ját valamely erős ásványi sav hozzáadásával 4 körüli értékre állítottuk be.
11. A 10. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy ásványi savként sósavat alkalmazunk.
12. A 8. és 9. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a deglukoteikoplanint olyan DMSO-víz elegyben oldjuk, melynek pH-ját valamely alkálifém-hidroxid hozzáadásával 10 körüli értékre állítottuk be.
13. A 12. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy alkálifém-hidroxidként vizes nátrium-hidroxid-oldatot alkalmazunk.
14. A 10-13. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a deglukoteikoplanint 6-8 közötti pH-jú oldatból csapjuk ki.
15. A 10-13. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a deglukoteikoplanin kicsapását pH = 7-es oldatból végezzük.
16. A 8-15. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a deglukoteikoplanin ismételt kicsapása után kapott szilárd anyagot kétszer - először acetonnal, majd sómentesített vízzel - dekantáljuk.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP88121707 | 1988-12-27 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU896773D0 HU896773D0 (en) | 1990-03-28 |
| HUT53377A HUT53377A (en) | 1990-10-28 |
| HU209314B true HU209314B (en) | 1994-04-28 |
Family
ID=8199721
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU896773A HU209314B (en) | 1988-12-27 | 1989-12-22 | Process for producing antibiotic l 17392 (deglucoteicoplanin) and salts thereof |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5594102A (hu) |
| EP (1) | EP0376042B1 (hu) |
| JP (1) | JPH02221297A (hu) |
| KR (1) | KR900009652A (hu) |
| AT (1) | ATE135369T1 (hu) |
| CA (1) | CA2006381A1 (hu) |
| DE (1) | DE68925951T2 (hu) |
| DK (1) | DK640589A (hu) |
| ES (1) | ES2084595T3 (hu) |
| HU (1) | HU209314B (hu) |
| IL (1) | IL92826A (hu) |
| ZA (1) | ZA899773B (hu) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB8621912D0 (en) * | 1986-09-11 | 1986-10-15 | Lepetit Spa | Increasing ratio of components of anti-biotic complex |
| ATE208791T1 (de) | 1996-04-23 | 2001-11-15 | Biosearch Italia Spa | Chemisches verfahren zur herstellung von amidderivaten von a 40926 antibiotikum |
| JP4852614B2 (ja) | 2005-09-29 | 2012-01-11 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー | ビタミンｄ化合物のための放出試薬 |
| ES2795849T3 (es) | 2010-05-20 | 2020-11-25 | Hoffmann La Roche | Reactivo de liberación para compuestos de vitamina D |
| EP3467510B1 (en) | 2011-11-18 | 2022-10-26 | F. Hoffmann-La Roche AG | Release reagent for vitamin d compounds |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1496386A (en) * | 1975-03-05 | 1977-12-30 | Lepetit Spa | Antibiotics |
| US4604239A (en) * | 1982-03-24 | 1986-08-05 | Eli Lilly And Company | Antibiotics |
| GB8307847D0 (en) * | 1983-03-22 | 1983-04-27 | Lepetit Spa | Antibiotics l 17054 and l 17046 |
| US4521335A (en) * | 1983-07-13 | 1985-06-04 | Smithkline Beckman Corporation | Aglycone and pseudo-aglycones of the AAD 216 antibiotics |
| AU579120B2 (en) * | 1983-12-16 | 1988-11-17 | Gruppo Lepetit S.P.A. | Chemical process for preparing antibiotic L 17392 (deglucoteicoplanin) and its salts |
| IT1173329B (it) * | 1984-02-21 | 1987-06-24 | Lepetit Spa | Procedimento per la trasformazione quantitativa di teicoplanina a2 fattore 1 in teicoplanina a2 fattore 3 |
| GB8415093D0 (en) * | 1984-06-13 | 1984-07-18 | Lepetit Spa | Antibiotic l 17392 |
| GB8420405D0 (en) * | 1984-08-10 | 1984-09-12 | Lepetit Spa | Preparing antibiotic l 17046 |
| GB8531846D0 (en) * | 1985-12-30 | 1986-02-05 | Lepetit Spa | Antibiotic a 40926 mannosyl aglycon |
| GB8608809D0 (en) * | 1986-04-11 | 1986-05-14 | Lepetit Spa | Antibiotic |
| US4742045A (en) * | 1986-07-30 | 1988-05-03 | Smithkline Beckman Corporation | Glycopeptide antibiotics |
| EP0255299A3 (en) * | 1986-07-30 | 1988-07-20 | Smithkline Beecham Corporation | Glycopeptide antibiotics |
| GB8715735D0 (en) * | 1987-07-03 | 1987-08-12 | Lepetit Spa | De-mannosyl teicoplanin derivatives |
| GB8720980D0 (en) * | 1987-09-07 | 1987-10-14 | Lepetit Spa | Derivatives |
-
1989
- 1989-12-12 DE DE68925951T patent/DE68925951T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1989-12-12 AT AT89122875T patent/ATE135369T1/de not_active IP Right Cessation
- 1989-12-12 ES ES89122875T patent/ES2084595T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1989-12-12 EP EP89122875A patent/EP0376042B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-12-18 DK DK640589A patent/DK640589A/da not_active Application Discontinuation
- 1989-12-20 ZA ZA899773A patent/ZA899773B/xx unknown
- 1989-12-20 IL IL9282689A patent/IL92826A/xx unknown
- 1989-12-21 CA CA002006381A patent/CA2006381A1/en not_active Abandoned
- 1989-12-22 HU HU896773A patent/HU209314B/hu not_active IP Right Cessation
- 1989-12-26 KR KR1019890019475A patent/KR900009652A/ko not_active Application Discontinuation
- 1989-12-27 JP JP1336812A patent/JPH02221297A/ja active Pending
-
1995
- 1995-05-30 US US08/453,114 patent/US5594102A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK640589A (da) | 1990-06-28 |
| ZA899773B (en) | 1991-02-27 |
| HUT53377A (en) | 1990-10-28 |
| ES2084595T3 (es) | 1996-05-16 |
| ATE135369T1 (de) | 1996-03-15 |
| HU896773D0 (en) | 1990-03-28 |
| DK640589D0 (da) | 1989-12-18 |
| EP0376042B1 (en) | 1996-03-13 |
| CA2006381A1 (en) | 1990-06-27 |
| IL92826A (en) | 1994-06-24 |
| JPH02221297A (ja) | 1990-09-04 |
| DE68925951T2 (de) | 1996-07-25 |
| KR900009652A (ko) | 1990-07-05 |
| DE68925951D1 (de) | 1996-04-18 |
| IL92826A0 (en) | 1990-09-17 |
| EP0376042A1 (en) | 1990-07-04 |
| US5594102A (en) | 1997-01-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0119574B1 (en) | Antibiotic l 17046 and process for preparing it | |
| HU223946B1 (hu) | Eljárás az A 40926 glikopeptid antibiotikum-származékai és az azokat hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására | |
| JPH0352900A (ja) | ダルバヘプチドから誘導されたペンタペプチド抗生物質 | |
| HU209314B (en) | Process for producing antibiotic l 17392 (deglucoteicoplanin) and salts thereof | |
| JPH0653746B2 (ja) | 抗生物質ｌ１７３９２及びその塩の化学的製造方法 | |
| KR100243962B1 (ko) | 글리코펩티드, 이의 제조방법 및 이를 함유하는 약제 | |
| US4698418A (en) | Process for preparing antibiotic L 17046 | |
| EP0845477B1 (en) | Reducing agent for reductive alkylation of glycopeptide antibiotics | |
| HU196228B (en) | Process for production of esther derivatives of l 17046 antibioticum and medical compounds containing them | |
| EP0290922B1 (en) | Teicoplanin derivatives | |
| EP0879825B1 (en) | Derivatives of antibiotic A82846B (Chloroorienticin A) | |
| US4789661A (en) | De-(acetylglucosaminyl)-di(dehydro)-deoxy teicoplanin derivatives | |
| JP2001506281A (ja) | エリスロマイシンａオキシム溶媒和物 | |
| US6800755B2 (en) | Process for the preparation of cefixime | |
| US6218505B1 (en) | Chemical process for preparing amide derivatives of antibiotic A 40926 | |
| US5438117A (en) | Hexapeptides deriving from aglucoteicoplanin and a process for preparing them | |
| HU224610B1 (hu) | Vankoreszmicin, eljárás előállítására és gyógyszerként történő alkalmazása | |
| DE69117304T2 (de) | 38-decarboxy-38-hydroxymethylderivate von teicoplaninantibiotika, und verfahren zu deren herstellung | |
| EP0351684A2 (en) | Process for preparing N15, N15-dialkyl derivatives of teicoplanin compounds | |
| EP1399176B1 (en) | Substantially pure glycopeptide antibiotics ac-98-1; ac-98-2; ac-98-3; ac-98-4 and ac-98-5 | |
| EP0563062B1 (en) | Hexapeptides deriving from aglucoteicoplanin and a process for preparing them | |
| JPH05194307A (ja) | ベキノスタチンｂの合成法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HMM4 | Cancellation of final prot. due to non-payment of fee |