HU204849B

HU204849B - Process for producing gnrh-antagonist decapeptide derivatives

Info

Publication number: HU204849B
Application number: HU86745A
Authority: HU
Inventors: Harry Alec Anderson; Wylie Walker Vale; Jean Edouard Frederic Rivier
Original assignee: Salk Inst For Biological Studi
Priority date: 1985-02-22
Filing date: 1986-02-21
Publication date: 1992-02-28
Also published as: AU585583B2; EP0192492A3; GR860456B; PH22616A; IE58815B1; DK79686D0; KR900007865B1; US4677193A; CA1307374C; ATE71112T1; PT82069B; PT82069A; DD247009A5; JPS61194098A; DE3683169D1; JPH0631315B2; ES552266A0; KR860006489A; IE860385L; AU5348986A

Description

A találmány olyan dekapeptid-származékok előállítására vonatkozik, melyek befolyásolják a gonadotrop hormonok elválasztását, vagy gátolják a GH elválasztását az emlősökhipofizisében.

Részletesebben, a találmány olyan peptidekre vonatkozik, amelyek jobb biológiai hatással rendelkeznek azivarmirigyfunkció serkentésében vagy ínhibeálásában és a szteroid hormonok, progeszteron, tesztoszteron elválasztásában, vagy jobb biológiai hatásúak a GH elválasztás gátlásában.

Ahipofizis egy nyél (pendiculus) útján kapcsolódik az agy alsó részén elhelyezkedő hipotalamushoz. A hipofízis termeli afollikulusstimuláló hormont (FSH) és a Iuteinizáló honnont (LH), ezeket gonadotropinoknak vagy gonadotróp hormonoknak is nevezzük Ezek a hormonok szabályozzák az ivarmirigyek működését, a tesztoszteron termelését a herékben és a progeszteron, valamint az ösztrogén termelését a petefészkekben, valamint szabályozzák az ivarsejtek képződését és érését is. A növekedési hormont (GH) is a hipofízis termeli.

Ahhoz, hogy egy hormont ürítsen a hipofízis elülső lebenye, általában az szükséges, hogy előbb kiürüljön a hormonok egy másik csoportja, melyet a hipotalamusz termel. A hipotalamusz hormonok egyike olyan faktorként hat, amely előidézi a gondadotrop hormonok elválasztását, különösen az LH-t és ezt a hormont itt GnRH-nak nevezzük, bár LH-RH-nak és LRF-nek is nevezik. GnRH-t izolálták, és megállapították, hogy egy dekapeptid, melynekszerkezete akövetkező:

pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH₂.

A peptidek olyan vegyületek, melyek két vagy több aminosavat tartalmaznak, melyekben az egyik sav karboxilcsoportja a másik sav aminocsoportjához kapcsolódik. A GnRH képlete, amint azt fent bemutattuk, összhangban van a peptidekkonvencionális ábrázolásával, ahol az amino- vagy N-végződés balról és a karboxil-, vagy C-végződés jobbról van. Az aminosavrész helyzetét úgy azonosítjuk, hogy az aminosavrészeket balról jobbra számozzuk. A GnRH esetében a glicin karboxilcsoportjának hidroxil-részét egy aminocsoporttal (NH^ helyettesítjük. Az egyes fenti aminosav-részek rövidítései konvencionálisak és az aminosav triviális nevén alapulnak, pl. pGIu= piroglutaminsav, His= hisztidin, Trp= triptofán, Ser= szerin, Tyr- tirozin, Gly- glicin, Leu= leucin, Om= omítin, Arg- arginin, Lys- lizin, Cyd- risztéin, Asn- aparginin, Thr- treonin, Pro-prolin, Phe- fenilalanin, Gluglutaminsav, Asp- aszparaginsav és Alá- alanin. A > glicin kivételével a találmány szerinti peptidek L-konf igurációban vannak, eltérő utalás hiányában.

Ha egy D-aminosawal helyettesítjük a glirint a GnRH dekapeptid vagy nonapeptid 6-os helyzetében, egy olyan GnRH analóg jön létre, melynek lényegesen í nagyobb a kötési aktivitása, így felhasználhatjuk nagyobb hatékonyságú, mind agonisták, mind antagonisták előállítására. Ha egy etil-amín-résszel, vagy hasonlóval helyettesítjüka GIy-NH₂-t a C-terminális részen, nagyobb hatóképességű agonistát nyerünk. Is- £ mertek más olyan szubsztitúciók a GnRH dekapeptiden belül, melyek antagonistákat eredményeznek, amelyeknek ínkikeáló katásuk van azlS és más gondadrotropinoknak az emlősök hipofízise általi elvá5 lasztásában. Ilyen elválasztó vagy inhibeáló hatást érünk el, ha a GnRH analógot egy emlősnek beadagoljuk intravénásán, szubkután, intra-muszkulárisan, - orálisan, perkután, pl. intranazálisan, intravaginálisan vagy késleltetett vagy időzített felszabadítási formák[0 bán.

Vannak okok, amikor az a kívánság, hogy megelőzzük az ovulációt (peteérés) a nőnemű emlősökben és olyan GnRH analógokat adagoljunk be, amelyek antagonisták a GnRH normális funkcióival szemben, vagy 5 nagy dózisban alkalmazzunk GnrH agonistákat, hogy meggátoljuk vagy késleltessük a ovulációt. Ezért a GnRH olyan analógjait vizsgálják, melyeket esetleg fogamzásgátlóként, vagy a fogamzási periódusok szabályozására használnak fel. GnRH antagonistákat felΌ használhatjuk idő előtti pubertás és méhbelhártyagyulladás kezelésére is. Az ilyen antagonisták alkalmasak a gonadotropinok szekréciójának szabályozására hím emlősökben is, és alkalmazhatók az ondóképződés (spermatogenezis) megállítására, vagyis mint hun fogamzásgátlók és a prosztata megnagyobbodás kezelésére.

Kívánatos, hogy jobb peptideket állítsunk elő, amelyekmég hatékonyabb GnRHanalógok.

A találmány tárgya eljárás olyan hatékonyabb 0 GnRH analógok előállítására, melyek közül egyesek erősen GnRH antagonisták és gátlóhatást gyakorolnak az emlősök szaporodási folyamataira, és mások hatékony GnRH agonisták.

A találmány szerint az

X-béta-D-NAL-(4Q)D-Phe-D-3PAL-Arg-D-GIu (C₆H₄OCH_e)-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH₂ általános képletű származékokat vagy gyógyszerészetileg elfogadható sóikat állítjuk elő, ahol

X1-6 szénatomos alkanoilcsoport.

) Mivel ezek a peptidek nagymértékben inhibitálni képesek azLH elválasztását, ezeket GnRH antagonistáknak nevezzük. A peptidek gátolják a nőstény emlősök ovulációját, ha igen kis mennyiségben adagoljuk a proertrusnál, és hatékonyak abban is, hogy a megter) mékenyített petesejtek reszorpcióját okozzák, ha röviddel a fogamzás után adagoljuk be. Ezek a peptidek hatékonyak hímnemű emlősök fogamzásgátló kezelésére is.

Abéta-D-NAl az alanin D-izomerjét jelenti, amely • naftilcsoporttal van szubsztítuálva a béta-szénatomon, amely 3-D-NAL-ként is jelölünk. A béta-D2NAL azt jelenti, hogy a béta-szénatom a naftáimhoz a gyűrűs szerkezet 2-heIyzetében kapcsolódik

A találmány szerint úgy járunk el, hogy valamely, a peptidkémiában önmagában ismert csoportokkal védett és/vagy gyantához kötött (I) általánosképletű dekapeptid-származékról lehasítjuk a védőcsoportokat és/vagy a gyantát, és kívánt esetben a kapott pepiidet gyógyszerészetileg elfogadható sójává alakítjuk.

A találmány szerinti kiindulási peptideket szinteti2

HU 204 849 Β zálhatjuk klasszikus oldat szintézissel, vagy szilárd fázisú technikával úgy, hogy klór-metilezett gyantát, benzhidril-amin (BHA) gyantát, metil-benzhidrilamin (MBHA) gyantát, N-alkil-amino-metil (NAAM) gyantát vagy más alkalmas, a szakmában ismert gyantát alkalmaznak. Ha klasszikus szintézist alkalmazunk, előnyös lehet, ha függetlenül kialakítjuk a keton-oldaliáncot, mielőtt az aminoavat a peptidlánc szomszédos aminosavrészeihez kapcsolódnak. A szilárd fázisú szintézist úgy végezzük, hogy lépésenként kapcsoljuk az aminosavakat a láncba, úgy ahogy az részletesen le van írva a 4 211 693 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban. Oldalláncvédő csoportokat - ezek jól ismertek a szakmában előnyösen a Ser és Arg tagok esetén alkalmaznak, ha ezek jelen vannak, valamint bizonyos szubsztituensek esetén, és előnyösen Trp esetén (kivéve, ha acilezett), mielőtt ezeket az aminosavakat a gyantán felépülő lánchoz kapcsolnánk. Ha szilárd fázisú szintézist alkalmazunk, a 6-helyzetben levő D-Glu-t előnyösen a következő csoportokkal védhetjük; Bzl (benzil-észter)-csoport, 2,6-diklór-benzil (DCB)-csoport, dinitro-fenil (Dnp)-csoport, l-hldroxi-benztriazol-benzílészter (OHbt)-csoport, 8-hidroxi-kinolin-észter (OHq)-csoport, p-nitro-benzil-oxi (ONBzl)-csoport, fenil-azo-fenil-, vagy, terc-butoxicsoport; egy ilyen szintézis a teljesen védett peptíd-gyanta intermediert eredményezi.

A találmány szerinti HnRH antagonista intermediereket a (Π) Étalános képlettel jellemezhetjük.

A Sér alkoholos hídroxilcsoportjának védőcsoportja például az acetil-, benzoil-, tetrahidro-piranil-, terc-butil-, tritil-, benzil- és 2,6-diklór-benzil-csoport, ezekközül előnyös a benzilcsoport. Alternatív módon, ha Ser a szubsztituens, egy oldallánc aminocsoport is tartalmazhat védőcsoportot, amilyen a Tos, Z vagy C1Z csoport.

X⁵ jelentése a F-Glu oldallánci karboxílcsoportjának védőcsoportja a következők közül: Bzl (benzil-észter)-csoport, 2,6-diklór-benzil-(DCB)-csoport, dinitro-fenil-(Dnp)-espport, 1 -hidroxi-benztriazol-benzílészter-(OHbt)-csoport, 8-hidroxi-kinolin-észter(OHq)-csoport, p-nitro-benzil-oxi-(ONBzl)-csoport, fenil-azo-fenil- és terc-butoxi-csoport, és előnyös a Bzl.

Az Arg oldallánci guanidincsoportjának védőcsoportja például a nitro-, Tos-, tritil-, benzll-oxi-karbonil-, adamantil-oxi-karbonil-csoport, Z és Boc-csoport. Általában aTos az előnyös.

A védöcsoportok kiválasztásának az a kritériuma, hogy a védőcsoport stabil legyen a reagenssel szemben az olyan reakciókörülmények között, melyeket az alfa-amino-védőcsoport eltávolítására választunk, a szintézis minden egyes lépésében. A védőcsoport nem hasadhat le a kapcsolás körülményei között, és a védőcsoportnak eltávolíthatónak kell lennie a kívánt amínosav-szekvencia szintézisének befejezésekor, olyan reakűiőköíülffléhyelciközött, amely nem változtatja toegaqteptÍdláhcotetóii.;

3dSaX jelentésé'ácéfilcsoport, például az N-termináD-NÁL alfa-amino-csoportja védőcsoportjaként, mimellett ezt az utolsó aminosavat a peptidlánchoz kapcsoljuk. Azonban a reakciót előnyösen a gyantára kötött peptiddel végezzük (az alfa-amino-csoport felszabadítása után, míg az oldallánc-csoportok védve maradnak), pl. úgy, hogy ecetsavval reagáltatjuk azt diciklo-hexil-karbo-dümid (DCC) jelenlétében, vagy előnyösen ecetsav-anhidriddel, vagy más alkalmas, a szÉíember számára ismert reakcióval.

A teljesen védett pepiid intermediert klasszikus oldat szintézissel állítjuk elő és ezután eltávolítjuk a védőcsoportokat a szakember számára ismert módon. A pepiid védőcsoportjainak eltávolítását, valamint a pepiid lehasítását a BHA, MBHA vagy NAAM gyantáról fluorhídrogénsawal (HF), vagy ennek ekvivalensével való kezeléssel végezzük el, olyan hőmérsékleten, amely elősegíti az aciliumion képződést az oldalláncban levő karboxilcsoporton, előnyösen kb. 20 ‘C és kb. 25 °C között, megfelelő ideig, pl. 2-3 órái‘g.Egy kívánt, aromás vegyületet - melyet a Z’ osztályból választunk ki, amilyen az anizol, mely lehasító anyagként is hat megfelelő feleslegben adunk a peptidhez hidrogénfluoridos kezelés előtt, Általában olyan mennyiségben adagolunk, mely legalább 20-szorosa a pepiid moláris mennyiségének Aciliumion jelenlétében ez a Z’ osztályba tartozó, a reakcióelegyhez adagolt vegyület úgy reagál, hogy az alifás-aromás keton oldalláncot hozza létre, melynek mechanizmusát G.Barany és R.Merrifield mutatja be a Solid-Phase-Peptide Synthesis 192-197. idézetben.

Miután a hidrogén-fluorid.ot vákuumban eltávolítottuk, a lehasított, védőcsoportokat nem tartalmazó peptidet alkalmasan éterrel kezeljük, dekantáljuk, hígított ecetsavban felvesszük, és liofilizáljuk. Ennél a pontnál kívánt esetben, apeptidetátalakíthatjúknemtoxikus sójává, például úgy, hogy n ecetsavval kezeljük.

A pepiid tisztítását ioncserés kromatqgráfiával végezzük egy CMC oszlopon, ezt követően megosztásos kromatográfiával, a következő elueíó rendszereket használva: n-butanol; 0,1 n ecetsav (1:1 térfogat arány) egy Sephadex G-25-tel töltött oszlopon, vagy HPLC-t alkalmazva, mint az a szakmában ismert és közölt: Rivier, J. és munkatársai; J. Chromatography, 288,303-328. (1984) idézetben.

A találmány szerinti peptidet gyakran gyógyszerészetileg elfogadható, nem-toxikus sók formájában adjuk be, amilyenek a savaddíciós sók, vagy fémkomplexek, pl. cinkkel, báriummal, kalciummal, magnéziummal, alumíniummal, vagy hasonlókkal képzett komplexek, (amelyeket addíciős sókként tekintünk az ilyen alkalmazás céljából), vagy a kettő kombinációja. Az ilyen addíciős sókra példák: hidroklorid, hidrobromid, szulfát, foszfát, nitrát, oxalát, fumarát, glükonát, tannát, maleát, acetát, citrát, benzoát, szukcinát, alginát, malát, aszkorbát, tartarát és hasonlóak. Apeptid vizes oldatát ismételten kezeljük pl. 1 n ecetsavval és utána liof ilizáljuk, hogy megkapjuk az ecetsavas sóját. Ha a hatóanyagot tabletta alakjában adagoljuk, a tabletta

HU 204849 Β gyógyszerészetileg elfogadható hígítóanyagot tartalmazhat, egy kötőanyagot, amilyen a tragakant, kukorícakeményítő vagy zselatin; egy porítóanyagot, amilyen az alginsav; és egy síkosítóanyagot, amilyen a magnézium-sztearát. Ha folyadék alakjában kívánjuk 5 beadni, édesítő- éslv&gy ízanyagot használhatunk a gyógyszerészetileg elfogadható hígítóanyag egy részeként és intravénás beadagolást izotóniás sóoldatban, foszfát pufferoldatokban vagy hasonlókban valósíthatjukmeg. 10

A gyógyszerkompozíciók általában egy konvencionális, gyógyszerészetileg elfogadható hordozóval együtt tartalmazzák a peptidet. Az adagolás általában kb. 1 és kb. 100 pg közötti peptid mennyiség/kg testsúly, ha intravénásán alkalmazzuk; orális adagolás 15 esetén több.

A személyek kezelése ezen peptidekkel általában ugyanolyan módon történik, mint más GnRH antagonistákkal való klinikai kezelés.

Ezek a péptidek beadhatók emlősöknek íntravéná- 20 san szubkután, intramuszkulárisan, orálisan, perkután, pl. íntranazálisan vagy intravagínálisan termékenység gátlás és/vagy szabályzás céljából és a gonadális aktivitás reverzibilis visszaszorítására való alkalmazására, mint a korai pubertás kezelésére vagy su- 25 gárkezelés, vagy kemoterápiás kezelés folyamán. A hatásos dózisok változnak az adagolási formák és a kezelt emlős fajtája szerint. Tipikus adagolási formára példa egy, a peptidet tartalmazó baktériosztatikus vizes oldat, melyet úgy adagolunk be, hogy a dózis kb 30 0,1 és 2,5 mg/kg testsúlynakmegfelelőlegyen. Apeptídet orálisan akár szilárd, akár folyadék alakjában beadhatjuk.

A találmány szerinti GnRH antagonisták hatékonyak 100 pg/testsúly kb-nál kisebb mennyiségben, ha 35 a prooestrus napján kb. délben adagoljuk, hogy meggátoljuk az ovulációt a nőstény patkányokban. Az ovuláció hosszabb visszaszorítására szükséges lehet kb. 0,1 -kb. 2,5 mg/kg testsúlytartományban adagolni. Ezek az antagonisták hatásosak arra is, hogy megállítsák a spermatogenézist, ha hím emlősöknek adagoljuk rendszeresen és így fogamzásgátlóként alkalmazhatjuk. Mivel ezek a vegyületek csökkentik a tesztoszteron szintet (nem-kívánatos következmény a normális, szexuálisan aktív hímeknél), célszerű, ha a GnRH antagonistával együtt felváltva tesztoszteront adagolunk. Ezek az antagonisták felhasználhatók arra is, hogy a gonadotropinok és szexuálszteroidok előállítását szabályozzák, más célokra, mint előbb említettük.

Példa

Az [Ac-p-D^NAL¹, (4 Cl) D-Phe², D-3PAL³, Arg⁵,D-Glu⁶ (C₆H₄OCH₃),D-Ala¹⁰]-GnRH szilárd fázisú szintézisét a következőben mutatjuk be.' Ennek a pepiidnek képlete a következő:

Ac-p-D-2NAL-(4 C1)D-Phe-D-3PAL-Ser-Arg-DGlu(C₆H₄OCH₃)-Leu-Ajrg-Pro-D-Ala-NH₂. A többi peptid-származékot hasonlóan szintetizáljuk és tisztítjuk.

Egy BHA gyantát használunk és Boc-védett D-Alat kapcsolunk a gyantához 2 órás perióduson keresztül CH₂CI₂-ben, háromszoros Boc származik felesleget és DDC-t mint aktiváló reagenst használva. A D-alanlncsoport a BHA csoporthoz egy amid kötéssel kapcsolódik.

Az egyes aminosav csoportok kapcsolását követően a mosást, a védőcsoport lehasítását és a következő aminosavrész kapcsolását a következők értelmében végezzük, egy automata készülékethasználva ésfcb. 5g gyantával kezdve:

Lépés_Reagensek és műveletek_keverési idő, perc

1	CH₂C1₂ mosás-80 ml (2x)	3
2	Metanol (MeOH) mosás-30 ml (2x)	3
3	CH₂CI₂ mosás-80 ml (3x)	3
4	50% TFA+5% 1,2-etán-dítiol CH₂CI₂-beⁿ -70 ml (2x)	' 10
5	Izopropil-alkohol+1% etánditlolmosás - 80 ml (2x)	3 ^: '
6	TEA 12,5% CH₂CI₂-ben - 70 ml (2x) MeOH mosás - 40 ml (2x)	' 5
7	MeOH mosás - 40 ml (2x)	2
8	CH₂C1₂ mosás - 80 ml (3x)	3
9	Boc-amlnosav (10 mmól) 30 mlDMF-benvagy CH₂CI₂-ben, az egyes védett aminosav oldhatóságától függően, (lx) +DCC(10mmól) CH₂Cl₂-ben	30-300
10	MeOH mosás - 40 ml (2x)	3
11	TEA 12,5% CH₂Cl₂-ben - 70 ml (lx)	?· 3 ^:
12	MeOH mosás-30 ml (2x)	· '- 3 ^{; :}
13	CH₂CI₂ mosás - 80 ml (2x)	^: 3 - '·· '

A13. lépés után, ha a szintézist manuálisan végezzük, alikvot részt veszünk ki nindhirin-próbára: ha a teszt negatív, visszamegyünk az 1. lépéshez a következő aminosav kapcsolás céljából; ha a teszt pozitív, vagy gyengén pozitív, visszamegyünk és megismételjük a 9-13 lépéseket.

Afenti sémát általábanhasználjuk a találmány szerinti peptidek minden egyes amínosavrészének kapcsolására, miután az első aminosavat kapcsoltuk. N“Boc védőcsoportot használunk minden egyes viszszamaradó aminosavra a szintézisfolyaffiótt.:

N^aBoc-p-D-NAL-t a szakmában;.ismésrt háöüsfcen rel készítünk, pl. amint az részlete£eaie'íyúq ipfa&tt

234 571 számú amerikai egyesült állam okbei véziba4

HU 204 849 Β dalmi leírásban (kibocsátva 1980. nov. 18.). Az Arg oldalláncát Tos-sal védjük. OBzl-t használunk mint oldallánc védő csoportot Ser hidroxilcsoportjához, és Bzl-t használunk D-Glu védőcsoportjaként. A D3PAL védőcsoport nélkül marad.

N“-Boc-3-D-2NAL-t végső aminosavként visszük be. A Boc-Arg (Tos)-t, melynek kicsiny az oldhatósága CH₂Cl₂-ben, egy DMF: CH₂C1₂ elegyet használva kapcsoljuk.

Miután az α-aminocsoport védőcsoportját lehasítottuk az N-végződésen, acetilezést nagy feleslegben alkalmazott, diklór-metánban oldott ecetsav-anhidriddel végezzük el. A pepiid lehasítását a gyantáról és az oldalláncok teljes felszabadítását 24 ’C-on hidrogén-fluoriddal hajtjuk végre kb. 2-1/2 óra alatt. A hasító anyagot, mint az a táblázatban látható, a hidrogén-fluoridos kezelés előtt adagoljuk, hogy a vegyes alkil-ketont előállítsuk. Miután a HF-ot vákuumban eltávolítottuk, a gyantát 50%-os. ecetsavval extraháljuk és a mosó oldatokat liofilizáljuk, mire nyers peptid port nyerünk.

A peptidet ezután ioncserélő kromatográfiával tisztítjuk CMC-n (Whatman CM 32, 0,05-0,3 mól NH₄OAc gradienst alkalmazva 50/50 metanol/víz elegyben), majd megosztásos kromatográfiával egy gél-szűrő oszlopon a következő eluens rendszert alkalmazva: n-butanol; 0,1 n ecetsav (1:1 térfogat arány).

A peptid homogenitását vékonyréteg kromatográf iát és többféle különböző oldószer rendszereket felhasználva, valamint fordított fázisú nagynyomású folyadékkromatográfiát és vizes trietil-ammóniumfoszfát-oldatot és acetonitrilt alkalmazva ítéljük meg. A nyert tistzított peptid aminosav analízise egyezik a szerkezeti képlettel, lényegében egész szám értékeket mutat minden egyes, a láncban levő aminosavra. Az optikai forgatóképességet fotoelektromos polariméterrel mérjük, mint [a] p «= -28,77° ± 1 (c = 1,50%os ecetsav).

A fenti peptidet in vivő vizsgálunk, hogy meghatározzuk a hatékonyságot nőstény patkányokban ovuláció megelőzésére vonatkozóan. Ebben a tesztben adott számú érett nőstény Sprague-Dawley patkányt, pl. hetet, melyek testsúlya 225-250 g, szubkután injekciózunk adott mikrogratnm dózisú kukoricacsíkra olajban pepiiddel, a proestrus napjának kb. a delén. Proestrus az ovuláció délutánján van. Külön nőstény patkány csoportot használunk fel kontrollként, melyeknek nem adunk be peptidet. Mindegyik kontroll nőstény patkánynál van peteérés a prooestruS estéjén; a kezelt patkányok közül megszámláltuk azokat, melyeknél ovuláció állt be.

A peptid szignifikánsan hatékonynak látszik a nőstény patkányok ovulációjának meggátlására igen kis dózisban, és teljesen hatékonynak találtuk kb 5 μg-os dózis esetén.

Claims

1. E1 járás

X- béta-D-2NAL-(4Cl)D-Phe-D-3PAL-Ser-Arg-D -Glu-(C₆H₄OCH₃)-Leu-Arg-Pro-Ala-NH₂ általános képletű dekapeptid-származékok és gyógyászerészetileg elfogadható savaddíciós sóik előállítására, ahol

XI- 6 szénatomos alkanoilcsoport, azzal jellemezve, hogy valamely, a peptidkémiában önmagában ismert csoportokkal védett és/vagy gyantához kötött (I) általános képletű dekapeptid-származékról lehasítjuk a védőcsoportokat és/vagy a gyantát, és kívánt esetben a kapott peptidet gyógyszerészetileg elfogadható savaddíciós sójává alakítjuk.

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a hasítást 2O’-nál magasabb hőmérsékleten végezzük.