FR3136980A1 - Ogataea siamensis extract and its cosmetic uses - Google Patents
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Abstract
La présente invention concerne un principe actif cosmétique obtenu à partir d’une levure de l’espèce Ogataea siamensis et ses utilisations cosmétiques, en particulier pour diminuer l’apparition des tâches pigmentaires et améliorer l’homogénéité du teint.The present invention relates to a cosmetic active ingredient obtained from a yeast of the Ogataea siamensis species and its cosmetic uses, in particular to reduce the appearance of pigment spots and improve the homogeneity of the complexion.
Description
L’invention concerne un principe actif cosmétique obtenu à partir d’une levure de l’espèceOgataea siamensiset ses utilisations cosmétiques, en particulier pour diminuer l’apparition des tâches pigmentaires et améliorer l’homogénéité du teint.The invention relates to a cosmetic active ingredient obtained from a yeast of the Ogataea siamensis species and its cosmetic uses, in particular to reduce the appearance of pigment spots and improve the homogeneity of the complexion.
Etat de l’artState of the art
La préservation d’un teint parfait préoccupe une grande partie de la population, y compris les plus jeunes générations. Aussi, l’hyperpigmentation et l’uniformité de la peau font partie des problématiques cosmétiques les plus importantes des millenials mais également de la Gen Z. Dans de nombreuses cultures, notamment en Asie, la couleur et l’homogénéité de la peau sont des signes de beauté mais aussi de santé. Aussi, l’apparition de défauts c’est-à-dire une détérioration de l’homogénéité du teint et l’apparition de tâches pigmentaires est susceptible de fortement impacter la qualité de vie. Par ailleurs, la population est de plus en plus confrontée à un environnement favorisant l’hyperpigmentation, tel que la pollution urbaine, ou l’exposition solaire, favorisant également la glycation, facteurs de vieillissement accéléré des tissus.Preserving a perfect complexion concerns a large part of the population, including the younger generations. Also, hyperpigmentation and uniformity of the skin are among the most important cosmetic problems of millennials but also of Gen Z. In many cultures, particularly in Asia, the color and homogeneity of the skin are signs beauty but also health. Also, the appearance of defects, that is to say a deterioration in the homogeneity of the complexion and the appearance of pigment spots, is likely to strongly impact the quality of life. Furthermore, the population is increasingly confronted with an environment favoring hyperpigmentation, such as urban pollution, or sun exposure, also favoring glycation, factors of accelerated tissue aging.
D’un point de vue biologique, la pigmentation de la peau est déterminée par la teneur en mélanine, un pigment produit lors de la mélanogenèse. Ce processus naturel a lieu au niveau des mélanocytes, des cellules spécialisées présentes dans la couche basale de l’épiderme. Bien qu’en grande partie déterminée par la génétique, la pigmentation de la peau est aussi influencée par des facteurs intrinsèques et extrinsèques qui sont à l’origine de l’hyperpigmentation et de l’apparition de désordres pigmentaires.From a biological point of view, skin pigmentation is determined by the content of melanin, a pigment produced during melanogenesis. This natural process takes place at the level of melanocytes, specialized cells present in the basal layer of the epidermis. Although largely determined by genetics, skin pigmentation is also influenced by intrinsic and extrinsic factors which are the cause of hyperpigmentation and the appearance of pigmentary disorders.
Pour lutter contre ce phénomène, plusieurs types de molécules dépigmentantes ont été développées. Leur activité repose principalement sur une augmentation de l’exfoliation, une destruction des mélanocytes, un blocage du transfert des mélanosomes, une inhibition de la voie de synthèse de la mélanine ou encore la neutralisation des mécanismes oxydants inducteurs de pigmentation. Toutefois, ces solutions ne sont pas pleinement satisfaisantes, en particulier du fait de leur efficacité superficielle ou encore de leur contribution à la mélanocytotoxicité.To combat this phenomenon, several types of depigmenting molecules have been developed. Their activity is mainly based on an increase in exfoliation, a destruction of melanocytes, a blocking of the transfer of melanosomes, an inhibition of the melanin synthesis pathway or even the neutralization of oxidative mechanisms that induce pigmentation. However, these solutions are not fully satisfactory, in particular because of their superficial effectiveness or their contribution to melanocytotoxicity.
Il existe donc un besoin pour de nouveaux principes actifs cosmétiques permettant de préserver un teint homogène et de combattre l’hyperpigmentation.There is therefore a need for new cosmetic active ingredients to preserve a uniform complexion and combat hyperpigmentation.
Pour répondre à ce besoin, l’inventeur s’est intéressé à des matières premières naturelles pour développer un tel ingrédient présentant un fort potentiel pour lutter contre l’hyperpigmentation. Un intérêt particulier a été porté aux levures pour leurs capacités à produire des molécules particulières.To meet this need, the inventor was interested in natural raw materials to develop such an ingredient with strong potential to combat hyperpigmentation. Particular interest has been paid to yeasts for their abilities to produce particular molecules.
Dans ce contexte, l’inventeur s’est intéressé à une levure particulière, la levureOgataea siamensis, et a découvert qu’elle était capable de produire dans des conditions particulières de culture un fort potentiel de peptides d’intérêt capable d’agir d’une part sur la tyrosinase, enzyme limitante de la mélanogenèse, et d’autre part sur l’expression des récepteurs pro-pigmentants liés à la pollution (récepteur Ah) ou des produits de glycation (RAGE), permettant ainsi de présenter une action transversale sur les étapes de synthèse de la mélanine, et ainsi de répondre aux inconvénients de l’art antérieur.In this context, the inventor was interested in a particular yeast, the Ogataea siamensis yeast, and discovered that it was capable of producing under particular culture conditions a high potential for peptides of interest capable of acting on the one hand on tyrosinase, the limiting enzyme of melanogenesis, and on the other hand on the expression of pro-pigmentant receptors linked to pollution (Ah receptor) or glycation products (RAGE), thus making it possible to present an action transversal on the stages of melanin synthesis, and thus to respond to the disadvantages of the prior art.
Ainsi, l’invention concerne un nouveau principe actif cosmétique comprenant des peptides. Ce nouveau principe actif est obtenu à partir d’une levure appartenant à l’espèceOgataea siamensis, en particulier pour diminuer l’apparition des tâches pigmentaires, améliorer l’homogénéité du teint, et ainsi raviver l’éclat du teint. Ce nouveau principe actif cosmétique constitue, en outre, un ingrédient dérivé de matériaux naturels (selon les définitions de la norme ISO 16128), particulièrement d’intérêt dans le contexte de l’invention.Thus, the invention relates to a new cosmetic active ingredient comprising peptides. This new active ingredient is obtained from a yeast belonging to the Ogataea siamensis species, in particular to reduce the appearance of pigment spots, improve the homogeneity of the complexion, and thus revive the radiance of the complexion. This new cosmetic active ingredient also constitutes an ingredient derived from natural materials (according to the definitions of the ISO 16128 standard), of particular interest in the context of the invention.
Cette ressource biologique, à savoirOgataea siamensis(ATCC-MYA-4464), a été isolée d'une fleur en Thaïlande, et a été obtenue conformément à la réglementation ABS (accès aux ressources génétiques et partage des avantages) de la Thaïlande.This biological resource, namely Ogataea siamensis (ATCC-MYA-4464), was isolated from a flower in Thailand, and was obtained in accordance with Thailand's Access to Genetic Resources and Benefit-sharing (ABS) regulations.
La levureOgataea siamensis, également dénomméePichia si a mensis ,appartenant à la famille desPichiacéesest une levure présentant un métabolisme particulier et une capacité à synthétiser naturellement des molécules d’intérêt, en particulier des molécules soufrées. En effet, pour survivre et se développer dans la phyllosphère, certaines levures, notammentOgataea siamensis, ont mis en place des mécanismes adaptatifs, tels que la capacité à métaboliser les rares nutriments retrouvés à la surface des parties aériennes des plantes. Parmi ces nutriments, certains sont issus de la dégradation de la pectine des parois végétales des plantes. Or, la métabolisation de ces composés nécessite pour la levure de produire des molécules singulières, y compris des molécules soufrées dont le glutathion. De façon surprenante, l’inventeur a identifié cette levure particulière qui s’est révélée être particulièrement d’intérêt dans le contexte de l’invention.The yeast Ogataea siamensis , also called Pichia si a mensis , belonging to the Pichiaceae family is a yeast presenting a particular metabolism and an ability to naturally synthesize molecules of interest, in particular sulfur molecules. Indeed, to survive and develop in the phyllosphere, certain yeasts, notably Ogataea siamensis , have implemented adaptive mechanisms, such as the ability to metabolize the rare nutrients found on the surface of the aerial parts of plants. Among these nutrients, some come from the breakdown of pectin in the plant walls. However, the metabolization of these compounds requires yeast to produce unique molecules, including sulfur molecules including glutathione. Surprisingly, the inventor identified this particular yeast which proved to be of particular interest in the context of the invention.
Aussi, l’invention vise un principe actif cosmétique comprenant au moins un extrait de levure de l’espèceOgataea siamensis, caractérisé en ce que l’extrait comprend des peptides.Also, the invention aims at a cosmetic active ingredient comprising at least one yeast extract of the Ogataea siamensis species, characterized in that the extract comprises peptides.
Préférentiellement, le principe actif selon l’invention est enrichi en peptides particuliers, en l’espèce des peptides de masse molaire inférieure à 3500 Da. Avantageusement ceux-ci-représente au moins 40% en poids de matières sèches de l’extrait, selon la méthode KJELDAHL.Preferably, the active principle according to the invention is enriched in particular peptides, in this case peptides with a molar mass of less than 3500 Da. Advantageously these represent at least 40% by weight of dry matter of the extract, according to the KJELDAHL method.
De façon particulièrement avantageuse, le principe actif cosmétique selon l’invention est enrichi en peptides soufrés permettant notamment d’atténuer les tâches pigmentaires et ainsi d’unifier et de rendre le teint plus lumineux.Particularly advantageously, the cosmetic active ingredient according to the invention is enriched with sulfur peptides making it possible in particular to reduce pigmentation spots and thus to unify and make the complexion more luminous.
En particulier, les peptides comprennent au moins 1,5% de cystéine en poids du poids total des peptides.In particular, the peptides comprise at least 1.5% cysteine by weight of the total weight of the peptides.
Préférentiellement, une solution est obtenue par une première étape de bioguidage de la culture de la levure, plus préférentiellement, il s’agit d’un bioguidage par ajout de cystéine.Preferably, a solution is obtained by a first step of bioguiding the yeast culture, more preferably, it is bioguiding by adding cysteine.
Avantageusement, l’extrait est ensuite obtenu par une étape d’hydrolyse de cette solution obtenue par le bioguidage de la culture de la levure. L’extrait est ainsi préférentiellement un hydrolysat, plus préférentiellement un hydrolysat enzymatique.Advantageously, the extract is then obtained by a step of hydrolysis of this solution obtained by bioguiding the yeast culture. The extract is thus preferably a hydrolyzate, more preferably an enzymatic hydrolyzate.
Dans le contexte de l’invention, l’extrait est susceptible d’être obtenu par tout procédé d’extraction adapté, préférentiellement celui-ci comprend les étapes suivantes :
- Culture des levures de l’espèceOgataea siamensisdans un milieu adapté à leur développement et bioguidage par induction à la cystéine,
- solubilisation d’au moins 50 g/Ld e la biomasse d ’ Ogataea siamensisdans l’eau,
- hydrolyse enzymatique
- séparation de la phase soluble et insoluble et récupération de la phase soluble,
- inactivation enzymatique, et
- concentration et filtration stérilisante.
- Culture of yeasts of the Ogataea siamensis species in a medium adapted to their development and bioguidance by cysteine induction,
- solubilization of at least 50 g/L of the biomass of Ogataea siamensis in water,
- enzymatic hydrolysis
- separation of the soluble and insoluble phase and recovery of the soluble phase,
- enzyme inactivation, and
- concentration and sterilizing filtration.
Selon un autre aspect de l’invention, le principe actif cosmétique selon l’invention comprenant l’extrait décrit précédemment peut être intégré dans une composition cosmétique. Aussi, la présente invention se rapporte également à une composition cosmétique pour une application topique comprenant au moins le principe actif selon l’invention et un milieu physiologiquement acceptable, préférentiellement un milieu cosmétiquement acceptable.According to another aspect of the invention, the cosmetic active ingredient according to the invention comprising the extract described above can be integrated into a cosmetic composition. Also, the present invention also relates to a cosmetic composition for topical application comprising at least the active principle according to the invention and a physiologically acceptable medium, preferably a cosmetically acceptable medium.
Avantageusement, la composition selon l’invention comprend le principe actif selon l’invention et celui-ci représente au moins 0,1% du poids total de la composition.Advantageously, the composition according to the invention comprises the active principle according to the invention and this represents at least 0.1% of the total weight of the composition.
La composition selon l’invention est particulièrement d’intérêt pour améliorer l’homogénéité du teint, réduire l’hyperpigmentation et l’apparition des tâches pigmentaires. Aussi, selon un autre aspect, l’invention se rapporte à l’utilisation cosmétique du principe actif selon l’invention ou de la composition selon l’invention, destinée à une application topique sur la peau pour diminuer l’apparition des tâches pigmentaires, et/ou améliorer l’homogénéité du teint, et/ou raviver l’éclat du teint.The composition according to the invention is of particular interest for improving the homogeneity of the complexion, reducing hyperpigmentation and the appearance of pigment spots. Also, according to another aspect, the invention relates to the cosmetic use of the active principle according to the invention or of the composition according to the invention, intended for topical application on the skin to reduce the appearance of pigment spots, and/or improve the homogeneity of the complexion, and/or revive the radiance of the complexion.
Enfin, selon un dernier aspect, l’invention se rapporte à un procédé de fabrication particulier. Celui-ci comprend les étapes suivantes :
- Culture des levures de l’espèceOgataea siamensisdans un milieu adapté à leur développement et bioguidage par induction à la cystéine,
- solubilisation d’au moins 50 g/L de la biomasse d’ Ogataea siamensisdans l’eau,
- hydrolyse enzymatique,
- séparation de la phase soluble et insoluble et récupération de la phase soluble,
- inactivation enzymatique, et
- éventuellement concentration et filtration stérilisante.
- Culture of yeasts of the Ogataea siamensis species in a medium adapted to their development and bioguidance by cysteine induction,
- solubilization of at least 50 g/L of Ogataea siamensis biomass in water ,
- enzymatic hydrolysis,
- separation of the soluble and insoluble phase and recovery of the soluble phase,
- enzyme inactivation, and
- possibly concentration and sterilizing filtration.
D’autres caractéristiques et avantages ressortiront de la description détaillée de l’invention et des exemples qui vont suivre.Other characteristics and advantages will emerge from the detailed description of the invention and the examples which follow.
DéfinitionDefinition
Par « principe actif cosmétique » au sens de l’invention, on entend un extrait comprenant au moins une molécule, préférentiellement un ensemble de molécules présentant un effet cosmétique sur la peau, lorsqu’il est appliqué topiquement.By “cosmetic active ingredient” within the meaning of the invention is meant an extract comprising at least one molecule, preferably a set of molecules having a cosmetic effect on the skin, when applied topically.
Par « ingrédient dérivé de matériaux naturels » au sens de l’invention, on entend un ingrédient cosmétique ou un principe actif cosmétique obtenu par des procédés chimiques et/ou biologiques définis dans la norme ISO16128, ces procédés engendrent des modifications chimiques des molécules. Ces modifications chimiques sont intentionnelles.By “ingredient derived from natural materials” within the meaning of the invention, we mean a cosmetic ingredient or a cosmetic active principle obtained by chemical and/or biological processes defined in standard ISO16128, these processes generate chemical modifications of the molecules. These chemical changes are intentional.
Par « bioguidage » au sens de l’invention, on entend un procédé permettant d’induire la production ciblée de molécules d’intérêt, notamment la production de peptides soufrés, par l’apport au microorganisme, dans le contexte de l’invention à la levure de l’espèceOgataea siamensis, d’un composé élémentaire, dans le contexte de l’invention par l’induction à la cystéine.By “bioguidance” within the meaning of the invention, is meant a process making it possible to induce the targeted production of molecules of interest, in particular the production of sulfur-containing peptides, by supply to the microorganism, in the context of the invention to yeast of the species Ogataea siamensis , of an elementary compound, in the context of the invention by cysteine induction.
Par « peptides soufrés », on entend des peptides contenant au moins un acide aminé possédant un atome de soufre, en particulier la cystéine.By “sulfur-containing peptides” is meant peptides containing at least one amino acid having a sulfur atom, in particular cysteine.
Par « hydrolysat deOgataea siamensis» au sens de l’invention, on entend un principe actif issu de la levure de l’espèceOgataea siamensis, obtenu par un procédé comprenant au moins une étape d'hydrolyse deOgataea siamensis, préférentiellement une étape d’hydrolyse enzymatique.By “hydrolyzate of Ogataea siamensis ” within the meaning of the invention, is meant an active ingredient derived from yeast of the species Ogataea siamensis , obtained by a process comprising at least one step of hydrolysis of Ogataea siamensis , preferably a step of enzymatic hydrolysis.
Principe actif selon l’inventionActive principle according to the invention
La présente invention a donc pour objet un principe actif cosmétique comprenant au moins un extrait de levure de l’espèceOgataea siamensis, caractérisé en ce que l’extrait comprend des peptides.The subject of the present invention is therefore a cosmetic active ingredient comprising at least one yeast extract of the Ogataea siamensis species, characterized in that the extract comprises peptides.
Un tel principe actif est particulièrement d’intérêt et permet de répondre aux inconvénients de l’art antérieur en limitant significativement l’activité de la tyrosinase et la synthèse de mélanine, ce qui se traduit par une diminution de l’apparition des tâches pigmentaires, une amélioration de l’homogénéité du teint, un éclat du teint ravivé, et sans induire de mélanocytotoxicité. Le principe actif selon l’invention permet ainsi d’obtenir une action transversale grâce à la présence du mélange complexe de peptides dans l’extrait d’Ogataea siamensis. D’autre part, le principe actif selon l’invention se révèle également efficace dans des contextes pro-pigmentants tels que la pollution et la glycation, respectivement en inactivant le récepteur aux polluants (AhR) et en limitant l’expression du récepteur aux produits de glycation avancés ou AGEs : RAGE.Such an active ingredient is of particular interest and makes it possible to address the drawbacks of the prior art by significantly limiting the activity of tyrosinase and the synthesis of melanin, which results in a reduction in the appearance of pigment spots, an improvement in the homogeneity of the complexion, a revived radiance of the complexion, and without inducing melanocytotoxicity. The active principle according to the invention thus makes it possible to obtain a transverse action thanks to the presence of the complex mixture of peptides in the Ogataea siamensis extract. On the other hand, the active principle according to the invention also proves effective in pro-pigmenting contexts such as pollution and glycation, respectively by inactivating the pollutant receptor (AhR) and by limiting the expression of the receptor to products. advanced glycation mechanisms or AGEs: RAGE.
Avantageusement, l’effet est encore amélioré lorsque le principe actif selon l’invention est enrichi en peptides de masse molaire inférieure à 3500 Da, préférentiellement ces peptides représentent au moins 40% en poids de la matière sèche de l’extrait, selon la méthode KJELDAHL.Advantageously, the effect is further improved when the active principle according to the invention is enriched in peptides with a molar mass of less than 3500 Da, preferably these peptides represent at least 40% by weight of the dry matter of the extract, according to the method KJELDAHL.
La teneur en peptides peut être déterminée en mesurant la teneur en azote total selon la méthode de KJELDHAL (référence : Official method of analysis of the A.O.C., 12th ed. W Horwitz, E.D., New-York, 15-60, 1975). La répartition et la masse molaire des peptides peut être déterminée par chromatographie F.P.L.C. d’exclusion stérique (Fast Protein Liquid Chromatography), la quantité de chaque fraction protéique est déterminée par dosage spectrophotométrique selon la méthode de Lowry (Lowry et al., Protein measurement with the Folin reagent, J. Biol. Chem., 193, 265-275, 1951).The peptide content can be determined by measuring the total nitrogen content according to the KJELDHAL method (reference: Official method of analysis of the A.O.C., 12th ed. W Horwitz, E.D., New York, 15-60, 1975). The distribution and molar mass of the peptides can be determined by F.P.L.C. chromatography. steric exclusion (Fast Protein Liquid Chromatography), the quantity of each protein fraction is determined by spectrophotometric assay according to the Lowry method (Lowry et al., Protein measurement with the Folin reagent, J. Biol. Chem., 193, 265 -275, 1951).
Préférentiellement, la composition en acides aminés du principe actif selon l’invention est la suivante : Acide aspartique, Acide glutamique, Alanine, Arginine, Cystéine, Glycine, Histidine, Isoleucine, Leucine, Lysine, Méthionine, Phénylalanine, Proline, Sérine, Thréonine, Tyrosine, Valine.Preferably, the amino acid composition of the active principle according to the invention is as follows: Aspartic acid, Glutamic acid, Alanine, Arginine, Cysteine, Glycine, Histidine, Isoleucine, Leucine, Lysine, Methionine, Phenylalanine, Proline, Serine, Threonine, Tyrosine, Valine.
Selon un objet particulièrement préféré, l’extrait est caractérisé par la présence accrue de peptides soufrés. Aussi, l’extrait comprend préférentiellement des peptides soufrés, plus préférentiellement les peptides comprennent au moins 1,5% de cystéine en poids du poids total des peptides.According to a particularly preferred object, the extract is characterized by the increased presence of sulfur peptides. Also, the extract preferably comprises sulfur-containing peptides, more preferably the peptides comprise at least 1.5% cysteine by weight of the total weight of the peptides.
Préférentiellement, le principe actif selon l’invention est obtenu par une étape de bioguidage, plus préférentiellement une étape de bioguidage par ajout de cystéine de la culture de la levure de l’espèceOgataea siamensis, permettant ainsi de stimuler le métabolisme d’Ogataea siamensis afin d’induire la production ciblée de molécules d’intérêt, préférentiellement la production des peptides soufrés.Preferably, the active principle according to the invention is obtained by a bioguiding step, more preferably a bioguiding step by adding cysteine from the culture of yeast of the species Ogataea siamensis , thus making it possible to stimulate the metabolism of Ogataea siamensi s in order to induce the targeted production of molecules of interest, preferably the production of sulfur peptides.
Aussi, l’inventeur a mis en évidence un taux de cystéine environ 4 fois plus important dans les peptides présents dans le principe actif selon l’invention par rapport aux peptides d’un extrait d’Ogataea siamensisen l’absence de bioguidage.Also, the inventor has demonstrated a cysteine level approximately 4 times higher in the peptides present in the active principle according to the invention compared to the peptides of an extract of Ogataea siamensis in the absence of bioguidance.
L’extrait selon l’invention peut également comprendre des sucres et des cendres minérales.The extract according to the invention may also include sugars and mineral ashes.
Lorsque l’extrait selon l’invention comprend également des sucres, ceux-ci représentent au moins 12% de l’extrait, en poids de matière sèche de l’extrait. Aussi, l’extrait selon l’invention comprend préférentiellement au moins 12% de sucres, en poids de matière sèche de l’extrait, plus préférentiellement au moins 15% de sucres, en poids de matière sèche de l’extrait.When the extract according to the invention also comprises sugars, these represent at least 12% of the extract, by weight of dry matter of the extract. Also, the extract according to the invention preferably comprises at least 12% sugars, by weight of dry matter of the extract, more preferably at least 15% of sugars, by weight of dry matter of the extract.
La teneur en sucres totaux dans ledit principe actif peut être déterminée par la méthode de DUBOIS (Dubois M. et al., Analytical chemistry, 28, 3, 350-356, 1956). La teneur en sucres totaux dans le principe actif selon l’invention est exprimée en pourcentage par rapport à la matière sèche.The total sugar content in said active ingredient can be determined by the DUBOIS method (Dubois M. et al., Analytical chemistry, 28, 3, 350-356, 1956). The total sugar content in the active ingredient according to the invention is expressed as a percentage relative to the dry matter.
Les sucres présents dans l’extrait peuvent être sous forme de monosaccharides ou sous forme d’oligosaccharides. L’extrait est majoritairement constitué d’oligosaccharides de glucose.The sugars present in the extract can be in the form of monosaccharides or in the form of oligosaccharides. The extract is mainly made up of glucose oligosaccharides.
Lorsque l’extrait selon l’invention comprend des cendres minérales, le taux de cendres est préférentiellement compris entre 25 et 40% en poids du poids total de l’extrait, encore plus préférentiellement compris entre 30 et 35%. La teneur en cendres brutes peut être déterminée par la pesée des résidus issus de l’incinération des échantillons de l’hydrolysat à 550°C dans un four à moufle. La nature des minéraux contenus dans les cendres peut être déterminée par spectrométrie d’émission optique (ICP / OES). Le dosage des ions chlorure contenus dans les cendres est réalisé par chromatographie ionique. Préférentiellement, les cendres minérales contenues dans l’extrait selon l’invention comprennent du chlore, du phosphore, du potassium, du calcium, du soufre, du sodium, et du magnésium.When the extract according to the invention comprises mineral ashes, the ash content is preferably between 25 and 40% by weight of the total weight of the extract, even more preferably between 30 and 35%. The crude ash content can be determined by weighing the residues from the incineration of hydrolyzate samples at 550°C in a muffle furnace. The nature of the minerals contained in the ashes can be determined by optical emission spectrometry (ICP/OES). The dosage of chloride ions contained in the ashes is carried out by ion chromatography. Preferably, the mineral ashes contained in the extract according to the invention comprise chlorine, phosphorus, potassium, calcium, sulfur, sodium, and magnesium.
L’extrait d’Ogataea siamensisest préférentiellement un hydrolysat, avantageusement obtenu par une étape d’hydrolyse de la biomasse de la levure de l’espèceOgataea siamensis. L’hydrolysat peut être obtenu par tous types d’hydrolyse, préférentiellement par une hydrolyse enzymatique. Aussi, l’extrait selon l’invention est préférentiellement un hydrolysat enzymatique.The Ogataea siamensis extract is preferably a hydrolyzate, advantageously obtained by a step of hydrolysis of the biomass of the yeast of the Ogataea siamensis species. The hydrolyzate can be obtained by all types of hydrolysis, preferably by enzymatic hydrolysis. Also, the extract according to the invention is preferably an enzymatic hydrolyzate.
Selon un mode de réalisation particulièrement préféré, l’extrait du principe actif cosmétique selon l’invention est susceptible d’être obtenu par un procédé d’extraction comprenant les étapes suivantes :
- Culture des levures de l’espèceOgataea siamensisdans un milieu adapté à leur développement et bioguidage par induction à la cystéine,
- solubilisation d’au moins 50 g/L de la biomasse d’Ogataea siamensisdans l’eau,
- hydrolyse enzymatique
- séparation de la phase soluble et insoluble et récupération de la phase soluble,
- inactivation enzymatique, et
- éventuellement concentration et filtration stérilisante.
- Culture of yeasts of the Ogataea siamensis species in a medium adapted to their development and bioguidance by cysteine induction,
- solubilization of at least 50 g/L of Ogataea siamensis biomass in water,
- enzymatic hydrolysis
- separation of the soluble and insoluble phase and recovery of the soluble phase,
- enzyme inactivation, and
- possibly concentration and sterilizing filtration.
Le principe actif cosmétique selon l’invention peut se présenter sous forme liquide, sous forme solide ou sous forme de film.The cosmetic active ingredient according to the invention can be in liquid form, in solid form or in film form.
Lorsqu’il se présente sous forme liquide, le principe actif selon l’invention est exclusivement constitué par l’extrait d’Ogataea siamensisaccompagné de stabilisant et/ou de conservateur.When it is in liquid form, the active principle according to the invention consists exclusively of the extract of Ogataea siamensis accompanied by a stabilizer and/or preservative.
L’extrait sous forme liquide se présente préférentiellement sous forme d’une solution aqueuse limpide, incolore et présentant une odeur caractéristique. Il peut toutefois être plus coloré et/ou être décoloré par tout procédé connu de l’homme du métier.The extract in liquid form is preferably in the form of a clear, colorless aqueous solution with a characteristic odor. It may, however, be more colored and/or be discolored by any process known to those skilled in the art.
La teneur en matières sèches peut être déterminée par la pesée des résidus issus du séchage de l’extrait selon l’invention à 105°C dans une étude jusqu’à l’obtention d’un poids constant. Préférentiellement l’extrait selon l’invention sous forme liquide a une teneur en matières sèches comprise entre 10g/L et 45g/L, encore plus préférentiellement entre 18 g/L et 27 g/L.The dry matter content can be determined by weighing the residues resulting from drying the extract according to the invention at 105°C in a study until a constant weight is obtained. Preferably the extract according to the invention in liquid form has a dry matter content of between 10g/L and 45g/L, even more preferably between 18 g/L and 27 g/L.
Lorsqu’il se présente sous forme solide, le principe actif selon l’invention est préférentiellement constitué par l’extrait d’Ogataea siamensistel que précédemment décrit et par un support choisi parmi la maltodextrine, la gomme arabique, la lécithine de soja ou l’isomalt. Selon un mode de réalisation, particulièrement adapté, l’extrait représente au moins 10% en poids du principe actif et le support au plus 90% en poids du principe actif.When it is in solid form, the active principle according to the invention is preferably constituted by the extract of Ogataea siamensis as previously described and by a support chosen from maltodextrin, gum arabic, soy lecithin or 'isomalt. According to a particularly suitable embodiment, the extract represents at least 10% by weight of the active principle and the support at most 90% by weight of the active principle.
Dans le cas d’une forme solide dans laquelle le principe actif est associé à un support, les teneurs en protéines, en sucres et en cendres dans le principe actif sont modifiées, le support étant généralement constitué majoritairement de sucres.In the case of a solid form in which the active principle is associated with a support, the protein, sugar and ash contents in the active principle are modified, the support generally consisting mainly of sugars.
Le principe actif selon l’invention peut aussi être présenté sous forme d’un film. Dans ce cas, l’extrait d’Ogataea siamensisreprésente préférentiellement au moins 0,1% en poids du film.The active principle according to the invention can also be presented in the form of a film. In this case, the Ogataea siamensis extract preferably represents at least 0.1% by weight of the film.
Lorsqu’il se présente sous forme de film, le principe actif comprend :
- au moins l’extrait d’Ogataea siamensisselon l’invention.
- au moins une charge minérale, et
- au moins un polymère d’origine naturelle, et
- au moins un plastifiant, et
- au moins un tensio-actif, et
- at least the extract of Ogataea siamensis according to the invention.
- at least one mineral filler, and
- at least one polymer of natural origin, and
- at least one plasticizer, and
- at least one surfactant, and
Le polymère d’origine naturelle peut être choisi parmi la : Pectine, Gomme tamarin, Alginate, Pullulane, Psyllium, Xanthane, Guar, Tara, Caroube, Agar, Gomme arabique, Gellane, Dextran, Carraghénane, Cellulose, Konjac et le Chitosan.The polymer of natural origin can be chosen from: Pectin, Tamarind Gum, Alginate, Pullulan, Psyllium, Xanthan, Guar, Tara, Carob, Agar, Gum Arabic, Gellan, Dextran, Carrageenan, Cellulose, Konjac and Chitosan.
Le plastifiant peut être choisi parmi : Glycérol, Sorbitol, Saccharose, Erythritol, Urée, Propylène glycol et le Butylene glycol.The plasticizer can be chosen from: Glycerol, Sorbitol, Sucrose, Erythritol, Urea, Propylene glycol and Butylene glycol.
La charge minérale peut être choisie parmi : Carbonate de calcium, argile verte, kaolin, perlite, talc, silicate de magnésium, mica, sericite diatomée, silice, sulfate de calcium chlorure de calcium, chlorure de potassium, oxyde de fer et l’oxyde de zinc.The mineral filler can be chosen from: Calcium carbonate, green clay, kaolin, perlite, talc, magnesium silicate, mica, diatomaceous sericite, silica, calcium sulfate, calcium chloride, potassium chloride, iron oxide and oxide zinc.
Le principe actif sous forme de film peut comprendre en outre au moins un pigment.The active ingredient in film form may also comprise at least one pigment.
Composition cosmétique selon l’inventionCosmetic composition according to the invention
Le principe actif selon l’invention peut éventuellement être intégré dans une composition cosmétique, notamment une composition comprenant au moins 0,1% en poids dudit principe actif et un milieu physiologiquement acceptable, préférentiellement un milieu cosmétiquement acceptable.The active principle according to the invention can optionally be integrated into a cosmetic composition, in particular a composition comprising at least 0.1% by weight of said active principle and a physiologically acceptable medium, preferably a cosmetically acceptable medium.
Ces compositions peuvent se présenter notamment sous forme d’émulsions huile-dans-eau, émulsions eau-dans-huile, émulsions multiples (Eau/Huile/Eau ou Huile/Eau/Huile) qui peuvent être éventuellement des microémulsions ou des nanoémulsions, ou sous forme de solutions, suspensions, hydrodispersions, gels aqueux, poudres, ou fond de teint ou sous forme de film. Elles peuvent être plus ou moins fluides et avoir l’aspect de crèmes, émulsions, gels, masques ou tous autres aspects des cosmétiques de soin de la peau saine.These compositions may be in the form of oil-in-water emulsions, water-in-oil emulsions, multiple emulsions (Water/Oil/Water or Oil/Water/Oil) which may optionally be microemulsions or nanoemulsions, or in the form of solutions, suspensions, hydrodispersions, aqueous gels, powders, or foundation or in film form. They can be more or less fluid and have the appearance of creams, emulsions, gels, masks or any other aspect of healthy skin care cosmetics.
Il peut s’agir de compositions comprenant au moins 0,1% du principe actif liquide selon l’invention, préférentiellement entre 0,1 et 10%.These may be compositions comprising at least 0.1% of the liquid active ingredient according to the invention, preferably between 0.1 and 10%.
Ces compositions comprennent, outre le principe actif, un milieu physiologiquement acceptable tel qu’un milieu cosmétiquement acceptable, c'est-à-dire qui ne provoque pas de sensations d’inconfort pour l’utilisateur telles que des rougeurs, tiraillements ou picotements.These compositions comprise, in addition to the active ingredient, a physiologically acceptable medium such as a cosmetically acceptable medium, that is to say one which does not cause sensations of discomfort for the user such as redness, tightness or tingling.
Les compositions selon l’invention peuvent contenir comme adjuvant au moins un composé choisi parmi :
- les huiles, qui peuvent être choisies notamment parmi les huiles de silicone, linéaires ou cycliques, volatiles ou non volatiles,
- les cires, telles que l’ozokérite, la cire de polyéthylène, la cire d’abeille ou la cire de carnauba,
- les élastomères de silicone,
- les tensioactifs, de préférence émulsionnants, qu’ils soient non ioniques, anioniques, cationiques ou amphotères,
- les co-tensioactifs, tels que les alcools gras linéaires,
- les épaississants et/ou gélifiants,
- les humectants, tels que les polyols comme la glycérine,
- les colorants, les conservateurs, les charges,
- les tenseurs,
- les séquestrants,
- les parfums,
- et leurs mélanges, sans que cette liste soit limitative.
- oils, which can be chosen in particular from silicone oils, linear or cyclic, volatile or non-volatile,
- waxes, such as ozokerite, polyethylene wax, beeswax or carnauba wax,
- silicone elastomers,
- surfactants, preferably emulsifiers, whether non-ionic, anionic, cationic or amphoteric,
- co-surfactants, such as linear fatty alcohols,
- thickeners and/or gelling agents,
- humectants, such as polyols like glycerin,
- colorings, preservatives, fillers,
- tensors,
- the sequestrants,
- the perfumes,
- and their mixtures, without this list being exhaustive.
Des exemples de tels adjuvants sont cités notamment dans le Dictionnaire CTFA (International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook publié par le Personal Care Product Council).Examples of such adjuvants are cited in particular in the CTFA Dictionary (International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook published by the Personal Care Product Council).
Bien entendu, l’homme du métier veillera à choisir les éventuels composés complémentaires, actifs ou non-actifs, et leur quantité, de telle sorte que les propriétés avantageuses du mélange ne soient pas, ou sensiblement pas, altérées par l’adjonction envisagée.Of course, those skilled in the art will take care to choose any additional compounds, active or non-active, and their quantity, such that the advantageous properties of the mixture are not, or significantly not, altered by the planned addition.
Procédé d’extraction de l’extrait selon l’inventionProcess for extracting the extract according to the invention
L’extrait constituant ou contenu dans le principe actif selon l’invention peut être obtenu par tout moyen.The extract constituting or contained in the active principle according to the invention can be obtained by any means.
Selon un mode de réalisation préféré, le procédé d’extraction comprend au moins une étape d’extraction de la levure d’Ogataea siamensis, tel qu’une étape d’hydrolyse, préférentiellement une hydrolyse enzymatique.According to a preferred embodiment, the extraction process comprises at least one step of extracting the yeast from Ogataea siamensis , such as a hydrolysis step, preferably an enzymatic hydrolysis.
Préalablement au procédé d’obtention de l’extrait en tant que tel, une culture de la biomasse d’Ogataea siamensisest réalisée dans un milieu adapté à leur développement, par exemple un milieu de culture adapté, de manière classique pour l’homme de métier. La culture de la levureOgataea siamensisest également bioguidée par un apport de cystéine. Une fois la biomasse obtenue, on réalise une étape d’extraction, et préférentiellement une hydrolyse enzymatique en vue d’obtenir les molécules actives.Prior to the process of obtaining the extract as such, a culture of the biomass of Ogataea siamensis is carried out in a medium adapted to their development, for example a culture medium adapted, in a conventional manner for humans. job. The culture of the Ogataea siamensis yeast is also bioguided by a supply of cysteine. Once the biomass has been obtained, an extraction step is carried out, and preferably an enzymatic hydrolysis in order to obtain the active molecules.
Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, le principe actif selon l’invention est obtenu par la mise en œuvre des étapes suivantes :
- Culture des levures de l’espèceOgataea siamensisdans un milieu adapté à leur développement et bioguidage par induction à la cystéine,
- solubilisation d’au moins 50 g/L de la biomasse d’Ogataea siamensisdans l’eau,
- hydrolyse enzymatique
- séparation de la phase soluble et insoluble et récupération de la phase soluble,
- inactivation enzymatique, et
- éventuellement concentration et filtration stérilisante.
- Culture of yeasts of the Ogataea siamensis species in a medium adapted to their development and bioguidance by cysteine induction,
- solubilization of at least 50 g/L of Ogataea siamensis biomass in water,
- enzymatic hydrolysis
- separation of the soluble and insoluble phase and recovery of the soluble phase,
- enzyme inactivation, and
- possibly concentration and sterilizing filtration.
Les conditions d’hydrolyse et/ou de bioguidage par ajout de cystéine, sont choisies pour obtenir un extrait enrichi en peptides soufrés permettant d’obtenir un principe actif cosmétique particulièrement d’intérêt pour surmonter les inconvénients de l’art antérieur.The hydrolysis and/or bioguiding conditions by adding cysteine are chosen to obtain an extract enriched in sulfur peptides making it possible to obtain a cosmetic active ingredient of particular interest to overcome the disadvantages of the prior art.
La séparation de la phase soluble et insoluble peut être réalisée par tout moyen connu de l’homme du métier, par exemple par centrifugation, filtration ou décantation. La séparation des phases soluble et insoluble est réalisée pour récupérer la phase soluble contenant entre autres les peptides soufrés.The separation of the soluble and insoluble phase can be carried out by any means known to those skilled in the art, for example by centrifugation, filtration or decantation. The separation of the soluble and insoluble phases is carried out to recover the soluble phase containing, among other things, the sulfur peptides.
Eventuellement, une étape supplémentaire de traitement thermique peut être réalisée pour inactiver l’enzyme utilisée. Cette inactivation est alors réalisée selon les préconisations du fournisseur de l’enzyme utilisée.Optionally, an additional heat treatment step can be carried out to inactivate the enzyme used. This inactivation is then carried out according to the recommendations of the supplier of the enzyme used.
Eventuellement, le procédé comprend une étape de filtration après la récupération de la phase soluble pour éliminer les particules encore en suspension. Ainsi, cette étape de filtration permet la purification de la phase soluble récupérée et est réalisée afin de sélectionner les molécules actives.Optionally, the process includes a filtration step after recovery of the soluble phase to eliminate particles still in suspension. Thus, this filtration step allows the purification of the soluble phase recovered and is carried out in order to select the active molecules.
L’hydrolysat obtenu à ce stade peut éventuellement être encore concentré et/ou purifié, préférentiellement par des étapes d’ultrafiltration successives à travers des membranes de porosité différentes, en conservant les molécules actives à chaque étape et/ou par une méthode de type chromatographique.The hydrolyzate obtained at this stage can optionally be further concentrated and/or purified, preferably by successive ultrafiltration steps through membranes of different porosity, retaining the active molecules at each step and/or by a chromatographic type method. .
L’hydrolysat obtenu après hydrolyse et filtration, avant ou après concentration et filtration stérilisante, est un hydrolysat d’Ogataea siamensis, et constitue une première forme du principe actif selon l’invention, se présentant alors sous forme liquide.The hydrolyzate obtained after hydrolysis and filtration, before or after concentration and sterilizing filtration, is a hydrolyzate of Ogataea siamensis , and constitutes a first form of the active principle according to the invention, then being in liquid form.
L’hydrolysat obtenu peut ensuite être séché et associé ou non à un support, pour se présenter sous forme solide. Cette phase peut être réalisée par la mise en œuvre des étapes suivantes :
- un support d’atomisation, de préférence la maltodextrine, est ajouté dans l’hydrolysat d’Ogataea siamensis, d’au plus 90% (en masse/volume) ;
- cette solution est ensuite concentrée sous vide ;
- une élimination des bactéries éventuellement présentes est réalisée par traitement thermique ;
- l’atomisation permet d’obtenir une poudre.
- an atomization support, preferably maltodextrin, is added to the hydrolyzate of Ogataea siamensis , at most 90% (by mass/volume);
- this solution is then concentrated under vacuum;
- any bacteria present is eliminated by heat treatment;
- atomization produces a powder.
Les étapes des procédés décrits ci-avant, prises individuellement sont usuelles dans le domaine des extractions d’actifs à partir de matières premières naturelles et l’homme du métier est à même d’en ajuster les paramètres réactionnels sur la base de ses connaissances générales.The steps of the processes described above, taken individually, are usual in the field of extraction of active ingredients from natural raw materials and those skilled in the art are able to adjust the reaction parameters on the basis of their general knowledge. .
Utilisation cosmétiqueCosmetic use
Le principe actif selon l’invention ou la composition selon l’invention est destiné à être utilisé sur des peaux saines, en particulier comme booster d’éclat.The active ingredient according to the invention or the composition according to the invention is intended to be used on healthy skin, in particular as a radiance booster.
Aussi, l’invention se rapporte également à l’utilisation du principe actif ou de la composition, pour une application topique sur la peau, pour diminuer l’apparition des tâches pigmentaires, et/ou améliorer l’homogénéité du teint, et/ou raviver l’éclat du teint.Also, the invention also relates to the use of the active ingredient or the composition, for topical application to the skin, to reduce the appearance of pigment spots, and/or improve the homogeneity of the complexion, and/or revive the radiance of the complexion.
L’invention a donc également pour objet un procédé cosmétique de traitement de la peau pour diminuer l’apparition des tâches pigmentaires, améliorer l’homogénéité du teint, raviver l’éclat du teint qui consiste en l’application topique sur la peau saine d’une personne d’un tel principe actif selon l’invention ou d’une telle composition selon l’invention.The invention therefore also relates to a cosmetic process for treating the skin to reduce the appearance of pigment spots, improve the homogeneity of the complexion, revive the radiance of the complexion which consists of the topical application to healthy skin of 'a person of such an active principle according to the invention or of such a composition according to the invention.
Le principe actif selon l’invention ou la composition selon l’invention permet ainsi d’améliorer l’éclat du teint. En effet, chez des volontaires caucasiens et asiatiques avec une peau présentant des tâches pigmentaires au niveau du visage, après 28 jours d’applications biquotidiennes, d’une composition cosmétique contenant le principe actif, une atténuation de la visibilité des taches pigmentaires, une uniformisation et un éclaircissement du teint est observé.The active ingredient according to the invention or the composition according to the invention thus makes it possible to improve the radiance of the complexion. Indeed, in Caucasian and Asian volunteers with skin presenting pigment spots on the face, after 28 days of twice-daily applications, of a cosmetic composition containing the active ingredient, an attenuation of the visibility of pigment spots, a uniformization and a lightening of the complexion is observed.
L’invention est à présent illustrée par des exemples non limitatifs de compositions selon l’invention et par des résultats d’efficacité.The invention is now illustrated by non-limiting examples of compositions according to the invention and by effectiveness results.
Exemple 1 – Principe actif selon l’inventionExample 1 – Active principle according to the invention (PA1)(PA1)
Le principe actif de l’exemple 1 est obtenu à partir d’un extrait de levure de l’espèceOgataea siamensis. Le principe actif (PA1) est obtenu par la mise en œuvre des étapes suivantes :
- Culture des levures de l’espèceOgataea siamensis, dans un milieu adapté à leur développement et bioguidage par induction à la cystéine,
- Solubilisation d’au moins 50g/L de la biomasse d’Ogataea siamensisdans l’eau,
- hydrolyse enzymatique,
- séparation de la phase soluble et insoluble et récupération de la phase soluble,
- inactivation enzymatique, et
- concentration et filtration stérilisante.
- Culture of yeasts of the Ogataea siamensis species, in a medium adapted to their development and bioguidance by cysteine induction,
- Solubilization of at least 50g/L of Ogataea siamensis biomass in water,
- enzymatic hydrolysis,
- separation of the soluble and insoluble phase and recovery of the soluble phase,
- enzyme inactivation, and
- concentration and sterilizing filtration.
Le principe actif obtenu présente les caractéristiques analytiques suivantes :
- Teneur en matières sèches : 18,4 g/L,
- Teneur en peptides selon la méthode KJELDAHL : 7,8 g/Lg/L , soit 42,4% en poids par rapport à la matière sèche,
- Taux de cystéine : 1,5% de la fraction peptidique,
- un pH de 3,5,
- Liquide limpide, incolore et avec une odeur caractéristique.
- Dry matter content: 18.4 g/L,
- Peptide content according to the KJELDAHL method: 7.8 g/Lg/L, or 42.4% by weight relative to dry matter,
- Cysteine level: 1.5% of the peptide fraction,
- a pH of 3.5,
- Clear, colorless liquid with a characteristic odor.
Exemple 2 – Principe actif selon l’invention (PA2)Example 2 – Active principle according to the invention (PA2)
Le principe actif de l’exemple 2 est obtenu à partir d’un extrait de levure de l’espèceOgataea siamensis. Le principe actif (PA2) est obtenu par la mise en œuvre des étapes suivantes :
- culture des levures de l'espèceOgataea siamensisdans un milieu adapté à leur développement et bioguidage par induction à la cystéine,
- solubilisation d’au moins 50g/L de levures d’Ogataea siamensisdans l’eau,
- hydrolyse enzymatique,
- séparation de la phase soluble et insoluble et récupération de la phase soluble,
- inactivation enzymatique, et
- concentration et filtration stérilisante.
- culture of yeasts of the Ogataea siamensis species in a medium adapted to their development and bioguidance by cysteine induction,
- solubilization of at least 50g/L of Ogataea siamensis yeasts in water,
- enzymatic hydrolysis,
- separation of the soluble and insoluble phase and recovery of the soluble phase,
- enzyme inactivation, and
- concentration and sterilizing filtration.
Le principe actif obtenu présente les caractéristiques analytiques suivantes :
- Teneur en matières sèches : 24,8 g/L
- Teneur en peptides selon la méthode KJELDAHL : 10,4 g/L, soit 42% en poids par rapport à la matière sèche,
- Taux de cystéine : 1,5% de la fraction peptidique,
- Un pH de 3,5
- Liquide limpide, incolore et avec une odeur caractéristique.
- Dry matter content: 24.8 g/L
- Peptide content according to the KJELDAHL method: 10.4 g/L, or 42% by weight relative to dry matter,
- Cysteine level: 1.5% of the peptide fraction,
- A pH of 3.5
- Clear, colorless liquid with a characteristic odor.
ExempleExample 33 – Principe actif hors invention– Active ingredient outside the invention (HI1)(HI1)
Le principe actif de l’exemple 3 est obtenu à partir d’un extrait de levure de l’espèceOgataea siamensis. Le principe actif (HI1) est obtenu par la mise en œuvre des étapes suivantes :
- Culture des levures de l’espèceOgataea siamensisdans un milieu adapté à leur développement,
- Solubilisation d’au moins 50g/L de levures d’Ogataea siamensisdans l’eau,
- hydrolyse enzymatique,
- séparation de la phase soluble et insoluble et récupération de la phase soluble,
- inactivation enzymatique, et
- concentration et filtration stérilisante.
- Culture of yeasts of the Ogataea siamensis species in a medium adapted to their development,
- Solubilization of at least 50g/L of Ogataea siamensis yeasts in water,
- enzymatic hydrolysis,
- separation of the soluble and insoluble phase and recovery of the soluble phase,
- enzyme inactivation, and
- concentration and sterilizing filtration.
Le principe actif obtenu présente les caractéristiques analytiques suivantes :
- Teneur en matières sèches : 22,1 g/L,
- Teneur en peptides selon la méthode KJELDAHL : 8,5 g/L, soit 38,5% en poids par rapport à la matière sèche,
- Taux de cystéine : 0,5% de la fraction peptidique,
- un pH de 3,5,
- Liquide limpide, incolore et avec une odeur caractéristique.
- Dry matter content: 22.1 g/L,
- Peptide content according to the KJELDAHL method: 8.5 g/L, or 38.5% by weight relative to dry matter,
- Cysteine level: 0.5% of the peptide fraction,
- a pH of 3.5,
- Clear, colorless liquid with a characteristic odor.
Ce principe actif (HI1) diffère du principe actif selon l’invention en ce que la culture des levures de l’espèceOgataea siamensisn’a pas été induite à la cystéine.This active principle (HI1) differs from the active principle according to the invention in that the culture of yeasts of the Ogataea siamensis species has not been induced with cysteine.
ExempleExample 44 – Principe actif hors invention– Active ingredient outside the invention (HI2)(HI2)
Le principe actif de l’exemple 4 est obtenu à partir d’un extrait de levure de l’espèce Saccharomyces cerevisiae. Le principe actif (HI2) est obtenu par la mise en œuvre des étapes suivantes :
- Culture des levures de l’espèce Saccharomyces cerevisiae dans un milieu adapté à leur développement,
- Solubilisation d’au moins 50g/L de levures de Saccharomyces cerevisiae dans l’eau,
- hydrolyse enzymatique,
- séparation de la phase soluble et insoluble et récupération de la phase soluble,
- inactivation enzymatique, et
- éventuellement concentration et filtration stérilisante.
- Culture of yeasts of the species Saccharomyces cerevisiae in a medium adapted to their development,
- Solubilization of at least 50g/L of Saccharomyces cerevisiae yeasts in water,
- enzymatic hydrolysis,
- separation of the soluble and insoluble phase and recovery of the soluble phase,
- enzyme inactivation, and
- possibly concentration and sterilizing filtration.
Le principe actif obtenu présente les caractéristiques analytiques suivantes :
- Teneur en matières sèches : 21,6 g/L,
- Teneur en peptides selon la méthode KJELDAHL : 8g/L, soit 37% en poids par rapport à la matière sèche,
- Taux de cystéine : 0% de la fraction peptidique,
- Un pH de 3,5,
- Liquide limpide, incolore et avec une odeur caractéristique.
- Dry matter content: 21.6 g/L,
- Peptide content according to the KJELDAHL method: 8g/L, or 37% by weight compared to dry matter,
- Cysteine level: 0% of the peptide fraction,
- A pH of 3.5,
- Clear, colorless liquid with a characteristic odor.
Ce principe actif (HI2) diffère du principe actif selon l’invention en ce que l’espèce de levure choisie est l’espèce la plus couramment utilisée dans le domaine industriel.This active principle (HI2) differs from the active principle according to the invention in that the species of yeast chosen is the species most commonly used in the industrial field.
ExempleExample 55 – Composition selon l’invention– Composition according to the invention
Un exemple de formulation comprenant le principe actif selon l’invention sous forme de lotion éclaircissante caractérisé par une texture fraiche et non collante est présenté dans le tableau 1 ci-après.An example of a formulation comprising the active ingredient according to the invention in the form of a lightening lotion characterized by a fresh and non-sticky texture is presented in Table 1 below.
La composition de l’exemple 5 peut notamment être obtenue par le procédé suivant :
- Ajouter un à un les composants de A sous agitation modérée.
- Ajuster le pH avec B entre 4,2 – 4,5.
- Ajouter C sous agitation douce.
- Add the components of A one by one with moderate stirring.
- Adjust the pH with B between 4.2 – 4.5.
- Add C with gentle stirring.
La composition obtenue est alors sous forme d’une lotion transparente et incolore.The composition obtained is then in the form of a transparent and colorless lotion.
ExempleExample 66 – Composition selon l’invention– Composition according to the invention
Un exemple de formulation comprenant le principe actif selon l’invention sous forme de crème mains anti-tâches est présenté dans le tableau 2 ci-après.An example of a formulation comprising the active ingredient according to the invention in the form of an anti-stain hand cream is presented in Table 2 below.
La composition de l’exemple 6 peut notamment être obtenue par le procédé suivant :
- Ajouter A2 dans A1 sous agitation modérée, agiter jusqu’à homogénéité et chauffer à 80°C.
- Placer B1 sous agitation et chauffer à 80°C. Ajouter B2 dans B1 juste avant l’émulsion.
- Emulsionner B dans A sous agitation cisaillante pendant 10 minutes.
- A température ambiante, sous agitation modérée, ajouter C puis D.
- Ajuster le pH entre 5,8 et 6,2 avec E.
- Add A2 into A1 with moderate stirring, stir until homogeneous and heat to 80°C.
- Place B1 under stirring and heat to 80°C. Add B2 into B1 just before emulsifying.
- Emulsify B in A with shearing stirring for 10 minutes.
- At room temperature, with moderate stirring, add C then D.
- Adjust the pH between 5.8 and 6.2 with E.
La composition obtenue est alors sous forme d’une émulsion épaisse et brillante de couleur jaune pâle, présentant une viscosité égale à 33 600 cP et un pH de 5,8.The composition obtained is then in the form of a thick and shiny emulsion of pale yellow color, having a viscosity equal to 33,600 cP and a pH of 5.8.
ExempleExample 77 – Composition selon l’invention– Composition according to the invention
Un exemple de formulation comprenant le principe actif selon l’invention sous forme de crème visage éclaircissante présentant une texture légère et soyeuse est présenté dans le tableau 3 ci-après.An example of a formulation comprising the active ingredient according to the invention in the form of a lightening face cream having a light and silky texture is presented in Table 3 below.
La composition de l’exemple 7 peut notamment être obtenue par le procédé suivant :
- Ajouter A2 dans A1 sous agitation modérée, agiter jusqu’à homogénéité et chauffer à 80°C.
- Placer B sous agitation et chauffer à 80°C.
- Emulsionner B dans A sous agitation cisaillante pendant 10 minutes.
- A 40°C, sous agitation modérée, ajouter C, D, E et F.
- A température ambiante, ajuster le pH entre 5,0 – 5,5 avec G.
- Add A2 into A1 with moderate stirring, stir until homogeneous and heat to 80°C.
- Place B under stirring and heat to 80°C.
- Emulsify B in A with shearing stirring for 10 minutes.
- At 40°C, with moderate stirring, add C, D, E and F.
- At room temperature, adjust the pH between 5.0 – 5.5 with G.
La composition obtenue est alors sous forme d’une émulsion souple et brillante de couleur blanche, présentant une viscosité égale à 18 600 cP et un pH de 5,2.The composition obtained is then in the form of a flexible and shiny white emulsion, having a viscosity equal to 18,600 cP and a pH of 5.2.
ExempleExample 88 – Composition selon l’invention– Composition according to the invention
Un exemple de formulation comprenant le principe actif selon l’invention sous forme de fond de teint correcteur présentant une texture légère et soyeuse est présenté dans le tableau 4 ci-après.An example of a formulation comprising the active ingredient according to the invention in the form of a corrective foundation having a light and silky texture is presented in Table 4 below.
La composition de l’exemple 8 peut notamment être obtenue par le procédé suivant :
- Chauffer A1 à 85°C agiter jusqu’à homogénéité.
- Broyer A2 à la tricylindre et transférer dans A1. Ajouter A3 juste avant l’émulsification.
- Placer B sous agitation et chauffer à 75°C.
- Ajouter B dans A très lentement sous agitation vive
- Homogénéiser pendant 10 minutes sous agitation cisaillante.
- A 30°C, ajouter C et homogénéiser pendant 2 minutes sous agitation cisaillante.
- Heat A1 to 85°C stir until homogeneous.
- Grind A2 with a three-cylinder mill and transfer to A1. Add A3 just before emulsification.
- Place B under stirring and heat to 75°C.
- Add B into A very slowly with vigorous stirring
- Homogenize for 10 minutes with shearing stirring.
- At 30°C, add C and homogenize for 2 minutes with shearing stirring.
La composition obtenue est alors sous forme d’une émulsion souple et brillante de couleur beige rosé, présentant une viscosité égale à 15 680 cP.The composition obtained is then in the form of a flexible and shiny emulsion of pinkish beige color, having a viscosity equal to 15,680 cP.
EvaluationAssessment in vitroin vitro de l’effet cosmétique du principe actif selon l’inventionof the cosmetic effect of the active ingredient according to the invention
Essai 1 - Effet du principe actif selon l’invention sur sa capacité àTest 1 - Effect of the active ingredient according to the invention on its ability to limiter l’activité de lalimit the activity of the tyrosinase et la synthèse de mélaninetyrosinase and melanin synthesis ..
Cette étude vise à évaluer l’effet du principe actif selon l’invention à limiter l’activité de la tyrosinase et la synthèse de mélanine, processus clés de la mélanogénèse, impliqué dans la pigmentation. Celle-ci est, en effet, une enzyme limitante de la mélanogénèse. En parallèle de cette étude, l’impact du principe actif selon l’invention sur la viabilité cellulaire est évalué.This study aims to evaluate the effect of the active ingredient according to the invention in limiting the activity of tyrosinase and the synthesis of melanin, key processes in melanogenesis, involved in pigmentation. This is, in fact, a rate-limiting enzyme in melanogenesis. In parallel with this study, the impact of the active ingredient according to the invention on cell viability is evaluated.
Le protocole est le suivant. Les mélanocytes humains caucasiens et asiatiques sont ensemencés et incubés à 37°C dans une atmosphère contenant 5% de CO2. Puis, les mélanocytes humains caucasiens sont traités ou non avec une solution d’IBMX (3-isobutyl-1-methyl xanthine) pour stimuler l’activité mélanogénique en présence ou non du principe actif de l’invention à 0,25% et 0,50% (V/V). Les mélanocytes humains asiatiques sont quant à eux directement traités avec le principe actif selon l’invention à 0,50% et 1,00% (V/V).The protocol is as follows. Caucasian and Asian human melanocytes are seeded and incubated at 37°C in an atmosphere containing 5% CO 2 . Then, the Caucasian human melanocytes are treated or not with a solution of IBMX (3-isobutyl-1-methyl xanthine) to stimulate melanogenic activity in the presence or not of the active principle of the invention at 0.25% and 0 .50% (V/V). Asian human melanocytes are for their part directly treated with the active ingredient according to the invention at 0.50% and 1.00% (V/V).
Les cellules sont ensuite incubées à 37°C dans une atmosphère contenant 5% de CO2. Après plusieurs jours les cellules sont récupérées et comptées. Les culots cellulaires sont lysés dans du tampon sodium phosphate additionné de Triton X-100 à température ambiante.The cells are then incubated at 37°C in an atmosphere containing 5% CO 2 . After several days the cells are collected and counted. The cell pellets are lysed in sodium phosphate buffer supplemented with Triton X-100 at room temperature.
Enfin, les surnageants sont récupérés et l’activité tyrosinase quantifiée par lecture spectrophotométrique à 490 nm. Les lysats cellulaires sont centrifugés puis dissous dans une solution de NaOH, et quantifiés pour permettre le dosage de la mélanine par lecture spectrophotométrique à 490 nm.Finally, the supernatants are collected and the tyrosinase activity quantified by spectrophotometric reading at 490 nm. The cell lysates are centrifuged then dissolved in a NaOH solution, and quantified to allow the determination of melanin by spectrophotometric reading at 490 nm.
Les résultats sont présentés dans les tableaux 5 à 9 ci-après.The results are presented in Tables 5 to 9 below.
Testé à 0,5% sur mélanocytes humains caucasiens dont l’activité mélanogénique a été stimulée, le principe actif selon l’invention limite l’activité tyrosinase de 88%.Tested at 0.5% on Caucasian human melanocytes whose melanogenic activity has been stimulated, the active ingredient according to the invention limits tyrosinase activity by 88%.
Testé à 0,5% sur des mélanocytes humains caucasiens dont l’activité mélanogénique a été stimulée, le principe actif selon l’invention limite la synthèse de mélanine d’au moins 85%.Tested at 0.5% on Caucasian human melanocytes whose melanogenic activity has been stimulated, the active ingredient according to the invention limits the synthesis of melanin by at least 85%.
Testé à 1% sur des mélanocytes asiatiques, le principe actif selon l’invention diminue de 21% l’activité tyrosinase.Tested at 1% on Asian melanocytes, the active ingredient according to the invention reduces tyrosinase activity by 21%.
(x101µg / mL / cellules)Melanin production
(x10 1 µg/mL/cells)
Testé à 1% sur mélanocytes asiatiques, le principe actif selon l’invention diminue de 25% la synthèse de mélanine.Tested at 1% on Asian melanocytes, the active ingredient according to the invention reduces melanin synthesis by 25%.
Aussi, testé à 1% sur mélanocytes, le principe actif selon l’invention limite significativement l’activité tyrosinase et la synthèse de mélanine. Le principe actif selon l’invention présente donc un effet dépigmentant.Also, tested at 1% on melanocytes, the active ingredient according to the invention significantly limits tyrosinase activity and melanin synthesis. The active ingredient according to the invention therefore has a depigmenting effect.
(x106cellules)Cellular counting
(x10 6 cells)
Testé à 0,5 et 1% sur mélanocytes, le principe actif selon l’invention n’a pas d’effet cytotoxique.Tested at 0.5 and 1% on melanocytes, the active ingredient according to the invention has no cytotoxic effect.
Essai 2 - Effet du principe actif selon l’invention sur la pigmentation induite par la pollution.Test 2 - Effect of the active ingredient according to the invention on pigmentation induced by pollution.
Action sur la synthèse de la mélanineAction on melanin synthesis
Une 1èreétude vise à évaluer l’action du principe actif selon l’invention sur la synthèse de mélanine en particulier sa capacité à limiter la mélanogenèse induite par les polluants. Des études épidémiologiques ont établi une corrélation entre les signes cliniques d'hyperpigmentation cutanée et l'exposition aux polluants atmosphériques. Le benzo[a]pyrène (B[a]P), dérivé des hydrocarbures polycycliques aromatiques, est un polluant environnemental majeur qui joue un rôle crucial dans la synthèse de mélanine.A first study aims to evaluate the action of the active principle according to the invention on the synthesis of melanin, in particular its capacity to limit melanogenesis induced by pollutants. Epidemiological studies have established a correlation between clinical signs of skin hyperpigmentation and exposure to air pollutants. Benzo[a]pyrene (B[a]P), derived from polycyclic aromatic hydrocarbons, is a major environmental pollutant that plays a crucial role in melanin synthesis.
Le protocole est le suivant. Des épidermes reconstruits pigmentés sont réalisés au moyen de kératinocytes et mélanocytes humains normaux ensemencés sur des inserts puis incubés à 37°C dans une atmosphère contenant 5% de CO2. Le milieu de culture est changé tous les 2 jours. Les épidermes reconstruits pigmentés sont traités régulièrement avec une solution de B[a]P, agent émanant de la fumée de cigarette et du trafic routier, en présence ou non du principe actif de l’invention à 0,25% et 0,50% (V/V). Puis, les épidermes reconstruits sont récupérés, fixés, déshydratés et inclus en paraffine. Des coupes (4 µm) sont ensuite réalisées.The protocol is as follows. Pigmented reconstructed epidermis are produced using normal human keratinocytes and melanocytes seeded on inserts then incubated at 37°C in an atmosphere containing 5% CO 2 . The culture medium is changed every 2 days. The reconstructed pigmented epidermis are treated regularly with a solution of B[a]P, an agent emanating from cigarette smoke and road traffic, in the presence or absence of the active principle of the invention at 0.25% and 0.50%. (V/V). Then, the reconstructed epidermis are recovered, fixed, dehydrated and embedded in paraffin. Sections (4 µm) are then made.
La quantité de mélanine synthétisée est ensuite évaluée par coloration de Fontana-Masson. La mélanine correspond aux grains noirs présents sur les coupes après coloration. Le taux de mélanine produite est proportionnel aux pigments noirs présents dans les épidermes reconstruits pigmentés.The quantity of melanin synthesized is then evaluated by Fontana-Masson staining. Melanin corresponds to the black grains present on the sections after staining. The level of melanin produced is proportional to the black pigments present in the pigmented reconstructed epidermis.
Les résultats sont présentés dans le tableau 10 ci-après.The results are presented in Table 10 below.
Les épidermes reconstruits pigmentés présentent une augmentation significative de la mélanogénèse lors d’une exposition à un environnement pollué. Testé à 0,5% sur des épidermes reconstruits pigmentés pollués, le principe actif selon l’invention limite significativement la synthèse de mélanine de 98%. Le principe actif selon l’invention limite ainsi les effets néfastes de la pollution sur la pigmentation cutanée.Pigmented reconstructed epidermis exhibit a significant increase in melanogenesis upon exposure to a polluted environment. Tested at 0.5% on polluted pigmented reconstructed epidermis, the active ingredient according to the invention significantly limits melanin synthesis by 98%. The active ingredient according to the invention thus limits the harmful effects of pollution on skin pigmentation.
Etude de la translocation de l’Study of the translocation of AhRAhR ..
Une 2èmeétude vise à évaluer l’action du principe actif selon l’invention sur la translocation de l’AhR, en particulier sa capacité à limiter l’activation du facteur de transcription AhR ou récepteur aryl-hydrocarbone (Ah) suite à l’exposition des cellules à un polluant, le benzo[a]pyrène (B[a]P), un agent émanant de la fumée de cigarettes et du trafic routier.A 2nd study aims to evaluate the action of the active principle according to the invention on the translocation of the AhR, in particular its capacity to limit the activation of the AhR transcription factor or aryl-hydrocarbon (Ah) receptor following the exposure of cells to a pollutant, benzo[a]pyrene (B[a]P), an agent emanating from cigarette smoke and road traffic.
Le protocole est le suivant. Les mélanocytes humains caucasiens ou asiatiques sont ensemencés et incubés à 37°C dans une atmosphère contenant 5% de CO2. Puis, les mélanocytes humains sont traités ou non avec le principe actif selon l’invention à 0,25% et 0,50% (v/v) et incubés à 37°c dans une atmosphère contenant 5% de CO2pendant 1 heure. Les cellules sont ensuite exposées à une solution de benzo[a]pyrène contenant ou non le principe actif selon l’invention à 0,25% et 0,50% (v/v) et incubées à 37°C dans une atmosphère contenant 5% de CO2pendant quelques heures. Des extraits cellulaires sont ensuite fractionnés.The protocol is as follows. Caucasian or Asian human melanocytes are seeded and incubated at 37°C in an atmosphere containing 5% CO 2 . Then, the human melanocytes are treated or not with the active ingredient according to the invention at 0.25% and 0.50% (v/v) and incubated at 37°C in an atmosphere containing 5% CO 2 for 1 hour. . The cells are then exposed to a solution of benzo[a]pyrene containing or not the active principle according to the invention at 0.25% and 0.50% (v/v) and incubated at 37°C in an atmosphere containing 5 % CO 2 for a few hours. Cell extracts are then fractionated.
Enfin le récepteur Ah est localisé par Western Blot et les protéines sont semi-quantifiées par densitométrie. Le taux de protéine d’intérêt correspond au ratio protéine récepteur Ah/ protéine référence et est exprimé en unité arbitraire (UA).Finally, the Ah receptor is localized by Western Blot and the proteins are semi-quantified by densitometry. The protein level of interest corresponds to the Ah receptor protein/reference protein ratio and is expressed in arbitrary units (AU).
Les résultats sont décrits dans les tableaux 11 et 12 ci-après.The results are described in Tables 11 and 12 below.
En présence d’un polluant environnemental, la translocation nucléaire du récepteur Ah est significativement augmentée. Testé à 0,5% sur des mélanocytes soumis à une solution de benzo[a]pyrène, le principe actif selon l’invention limite significativement la translocation du récepteur Ah de 63% pour les mélanocytes d’origine caucasienne et de 87% pour les mélanocytes d’origine asiatique. Le principe actif selon l’invention limite ainsi la signalisation pro-mélanogénique induite par le récepteur Ah.In the presence of an environmental pollutant, the nuclear translocation of the Ah receptor is significantly increased. Tested at 0.5% on melanocytes subjected to a solution of benzo[a]pyrene, the active principle according to the invention significantly limits the translocation of the Ah receptor by 63% for melanocytes of Caucasian origin and by 87% for melanocytes of Asian origin. The active ingredient according to the invention thus limits pro-melanogenic signaling induced by the Ah receptor.
Essai 3 - Effet du principe actif selon l’invention sur la pigmentation induite par laTest 3 - Effect of the active ingredient according to the invention on pigmentation induced by glycationglycation ..
Action sur lAction on the ’activité tyrosinase et ltyrosinase activity and a synthèse de la mélaninesynthesis of melanin
Une 1èreétude vise à évaluer la capacité du principe actif selon l’invention à limiter l’activité de la tyrosinase et la synthèse de mélanine, processus clés de la mélanogenèse, dans un contexte de glycation. La glycation joue un rôle clef dans l’accélération du processus de vieillissement cutané. Les interactions AGEs-RAGE au niveau des mélanocytes perturbent la mélanogénèse en augmentant la production de mélanine, favorisant ainsi l’apparition des taches pigmentaires.A first study aims to evaluate the capacity of the active ingredient according to the invention to limit the activity of tyrosinase and the synthesis of melanin, key processes in melanogenesis, in a context of glycation. Glycation plays a key role in accelerating the skin aging process. AGEs-RAGE interactions at the level of melanocytes disrupt melanogenesis by increasing melanin production, thus promoting the appearance of pigment spots.
Cette étude est réalisée par dosage colorimétrique sur mélanocytes humains traités par une solution de méthylglyoxal (MGO). Le protocole est le suivant.This study is carried out by colorimetric assay on human melanocytes treated with a solution of methylglyoxal (MGO). The protocol is as follows.
Les mélanocytes humains caucasiens sont ensemencés et incubés à 37°C dans une atmosphère contenant 5% de CO2. Puis, les mélanocytes humains sont traités avec une solution de MGO en présence ou non du principe actif selon l’invention à 0,25% et 0,50% (V/V). Les cellules sont ensuite incubées à 37°C dans une atmosphère contenant 5% de CO2. Ensuite, les cellules sont récupérées et comptées. Les culots cellulaires sont lysés dans du tampon sodium phosphate additionné de Triton X-100 à température ambiante. Les surnageants sont récupérés et l’activité enzymatique de la tyrosinase est quantifiée par lecture spectrophotométrique à 490 nm. Les lysats cellulaires sont centrifugés puis dissous dans une solution de NaOH et la mélanine est quantifiée par lecture spectrophotométrique à 490 nm.Caucasian human melanocytes are seeded and incubated at 37°C in an atmosphere containing 5% CO 2 . Then, the human melanocytes are treated with a solution of MGO in the presence or absence of the active principle according to the invention at 0.25% and 0.50% (V/V). The cells are then incubated at 37°C in an atmosphere containing 5% CO2. Then the cells are collected and counted. The cell pellets are lysed in sodium phosphate buffer supplemented with Triton X-100 at room temperature. The supernatants are collected and the tyrosinase enzymatic activity is quantified by spectrophotometric reading at 490 nm. The cell lysates are centrifuged then dissolved in a NaOH solution and the melanin is quantified by spectrophotometric reading at 490 nm.
Les résultats sont présentés dans les tableaux 13 et 14 ci-après.The results are presented in Tables 13 and 14 below.
(µg /mL /cellules)Melanin production
(µg /mL /cells)
La mélanogenèse est significativement augmentée dans les mélanocytes humains lors d’un traitement répété par le méthylglyoxal. Testé à 0,5% sur mélanocytes soumis à une solution de méthylglyoxal, le principe actif selon l’invention limite significativement l’activité tyrosinase de 48% et la synthèse de mélanine de 81%. Ainsi, le principe actif selon l’invention limite également la mélanogenèse dans un contexte de glycation.Melanogenesis is significantly increased in human melanocytes upon repeated treatment with methylglyoxal. Tested at 0.5% on melanocytes subjected to a methylglyoxal solution, the active ingredient according to the invention significantly limits tyrosinase activity by 48% and melanin synthesis by 81%. Thus, the active principle according to the invention also limits melanogenesis in a context of glycation.
Etude de l’expression de RAGEStudy of RAGE expression
Une 2èmeétude vise à évaluer la capacité du principe actif selon l’invention à limiter l’expression de RAGE, le récepteur aux AGEs (Advanced Glycation End products). Le récepteur aux produits de glycation RAGE est exprimé par plusieurs cellules cutanées dont les mélanocytes. Après fixation des AGEs accumulés au cours du vieillissement, le récepteur RAGE active la mélanogenèse.A 2nd study aims to evaluate the capacity of the active ingredient according to the invention to limit the expression of RAGE, the receptor for AGEs (Advanced Glycation End products). The RAGE glycation endpoint receptor is expressed by several skin cells including melanocytes. After fixation of AGEs accumulated during aging, the RAGE receptor activates melanogenesis.
Cette étude est réalisée par PCR quantitative sur des mélanocytes humains caucasiens traités par une solution de méthylglyoxal (MGO), un agent induisant la production des AGEs. Le protocole est le suivant.This study is carried out by quantitative PCR on Caucasian human melanocytes treated with a solution of methylglyoxal (MGO), an agent inducing the production of AGEs. The protocol is as follows.
Les mélanocytes humains sont ensemencés et incubés à 37°C dans une atmosphère contenant 5% de CO2. Puis, les mélanocytes humains sont traités avec une solution de MGO en présence ou non du principe actif selon l’invention à 0,25% et 0,50% (V/V). Les cellules sont ensuite incubées à 37°C dans une atmosphère contenant 5% de CO2. Ensuite, les cellules sont récupérées et les ARN totaux extraits. Les ARNs ont été reverse-transcrits et les ADNs complémentaires obtenus ont été analysés par la technique de PCR quantitative. Les ARNm du témoin interne de référence ont été analysés en parallèle des ARNm de RAGE.Human melanocytes are seeded and incubated at 37°C in an atmosphere containing 5% CO 2 . Then, the human melanocytes are treated with a solution of MGO in the presence or absence of the active principle according to the invention at 0.25% and 0.50% (V/V). The cells are then incubated at 37°C in an atmosphere containing 5% CO 2 . Then, the cells are collected and total RNA extracted. The RNAs were reverse transcribed and the complementary DNAs obtained were analyzed by the quantitative PCR technique. The mRNAs of the internal reference control were analyzed in parallel with the RAGE mRNAs.
Les résultats sont décrits dans le tableau 15 ci-après.The results are described in Table 15 below.
L’expression du récepteur aux AGEs, RAGE, est significativement augmentée dans les mélanocytes humains lors d’un traitement répété par le méthylglyoxal. Testé à 0,5% sur mélanocytes soumis à une solution de méthylglyoxal, le principe actif selon l’invention limite significativement l’expression de RAGE de 92%. Le principe actif selon l’invention limite ainsi la signalisation pro-mélanogénique induite par le récepteur RAGE.The expression of the AGE receptor, RAGE, is significantly increased in human melanocytes upon repeated treatment with methylglyoxal. Tested at 0.5% on melanocytes subjected to a methylglyoxal solution, the active ingredient according to the invention significantly limits the expression of RAGE by 92%. The active ingredient according to the invention thus limits pro-melanogenic signaling induced by the RAGE receptor.
EvaluationAssessment in vivoin vivo de l’effet cosmétique du principe actif selon l’inventionof the cosmetic effect of the active ingredient according to the invention
EssaiEssay 44 - Effet du principe actif selon l’invention sur- Effect of the active ingredient according to the invention on l’apparence des tâches pigmentairesthe appearance of pigment spots
L’apparition des taches pigmentaires (lentigines) avec l’âge est fortement associée à l’exposition au rayonnement ultraviolet (UV). Cependant, un nombre croissant d’études suggèrent que d'autres facteurs environnementaux contribuent également à la formation des lentigines, tels que l’exposition à la pollution urbaine, mais également le processus de glycation, phénomène induit lors du vieillissement, qui conduit à la formation des produits de glycation (AGEs) impliqués dans l’augmentation de la mélanogenèse. De plus, la pollution urbaine, en particulier l’exposition aux particules type PM 10 et PM 2,5, favorise également le développement de lentigo.The appearance of pigment spots (lentigines) with age is strongly associated with exposure to ultraviolet (UV) radiation. However, a growing number of studies suggest that other environmental factors also contribute to the formation of lentigines, such as exposure to urban pollution, but also the glycation process, a phenomenon induced during aging, which leads to formation of glycation products (AGEs) involved in increased melanogenesis. In addition, urban pollution, in particular exposure to particles such as PM 10 and PM 2.5, also promotes the development of lentigo.
Aussi, les panels sélectionnés reposent sur la présence de taches pigmentaires, un taux élevé d’AGEs au niveau de la peau pour le panel caucasien (France), et un historique de vie d’au moins 15 ans dans une grande ville pour le panel asiatique (Chine).Also, the selected panels are based on the presence of pigment spots, a high rate of AGEs in the skin for the Caucasian panel (France), and a life history of at least 15 years in a large city for the panel. Asian (China).
L’étude sur panel caucasien a été réalisée en comparaison à l’ascorbyl glucoside, une molécule connue pour son effet dépigmentant et formulé à 2,5%. Les groupes étaient constitués de la manière suivante :
- Groupe principe actif selon l’invention: composé de 18 volontaires sains, de sexe féminin, âgés de 44 à 69 ans (âge moyen 56 ± 8 ans) présentant des taches pigmentaires au niveau du visage et un taux élevé d’AGEs (Advanced glycation end product).
- Groupe ascorbyl glucoside: composé de 12 volontaires sains, de sexe féminin, âgés de 49 à 62 ans (âge moyen 57 ± 4 ans) présentant des taches pigmentaires au niveau du visage ainsi qu’un taux élevé d’AGEs (Advanced glycation end product).
- Active ingredient group according to the invention: composed of 18 healthy female volunteers, aged 44 to 69 years (mean age 56 ± 8 years) presenting pigment spots on the face and a high level of AGEs (Advanced glycation end product).
- Ascorbyl glucoside group : composed of 12 healthy female volunteers aged 49 to 62 years (mean age 57 ± 4 years) presenting pigment spots on the face as well as a high level of AGEs (Advanced glycation end product ).
L’étude sur ce panel vise à analyser la différence de pigmentation entre une zone avec une tache et une zone adjacente sans tache.The study on this panel aims to analyze the difference in pigmentation between an area with a stain and an adjacent area without a stain.
La répartition des volontaires du panel asiatique était la suivante :
- Groupe placebo: composé de 36 volontaires sains, de sexe féminin, âgés de 30 à 62 ans (âge moyen 50 +/- 10 ans), présentant des taches pigmentaires sur le visage ainsi qu’une peau sombre et ayant vécu au moins 15 ans dans une grande ville.
- Groupe principe actif selon l’invention: composé de 35 volontaires sains, de sexe féminin, âgés de 33 à 65 ans (âge moyen 49 +/- 9 ans), présentant des taches pigmentaires sur le visage ainsi qu’une peau sombre et ayant vécu au moins 15 ans dans une grande ville
- Placebo group : composed of 36 healthy female volunteers, aged 30 to 62 years (average age 50 +/- 10 years), with pigment spots on the face as well as dark skin and having lived at least 15 years in a big city.
- Active ingredient group according to the invention: composed of 35 healthy volunteers, female, aged 33 to 65 years (average age 49 +/- 9 years), presenting pigment spots on the face as well as dark skin and having lived at least 15 years in a big city
L’étude sur ce panel vise à analyser la différence de pigmentation entre une zone avec une tache et une zone adjacente sans tache.The study on this panel aims to analyze the difference in pigmentation between an area with a stain and an adjacent area without a stain.
Pour les deux panels, les produits ont été appliqués de façon biquotidienne, en hémi-visage pendant 56 jours.For both panels, the products were applied twice daily, on the half-face for 56 days.
Les résultats sur l’évolution de l’écart de couleur entre une zone hyperpigmentée et une zone adjacente non tachée pour le principe actif selon l’invention et l’ascorbyl glucoside sur le panel caucasien sont présentés respectivement dans les tableaux 16 et 17, ci-après.The results on the evolution of the color difference between a hyperpigmented zone and an adjacent non-stained zone for the active principle according to the invention and ascorbyl glucoside on the Caucasian panel are presented respectively in tables 16 and 17, below -After.
Le principe actif selon l’invention formulé à 2,5% atténue les taches de pigmentation apparaissant avec l’âge. En effet, dès 28 jours de traitement, en comparaison au placebo, le principe actif selon l’invention réduit l’écart de couleur entre une zone tachée et une zone proche non tachée de 11,0%. Cet effet se prolonge après 56 jours de traitement, avec une réduction du contraste entre les deux zones de 9,5% observée chez 71% des volontaires.The active ingredient according to the invention formulated at 2.5% reduces pigmentation spots appearing with age. Indeed, from 28 days of treatment, compared to the placebo, the active ingredient according to the invention reduces the color difference between a stained area and a nearby unstained area by 11.0%. This effect continues after 56 days of treatment, with a reduction in contrast between the two zones of 9.5% observed in 71% of volunteers.
L’ascorbyl glucoside, molécule connue pour son effet dépigmentant, atténue également les taches pigmentaires avec une diminution de l’écart de couleur de 7,5% après 28 jours de traitement allant jusqu’à 12,9% après 56 jours de traitement. Cet effet a été observé chez 70% des volontaires.Ascorbyl glucoside, a molecule known for its depigmenting effect, also reduces pigment spots with a reduction in color difference from 7.5% after 28 days of treatment to 12.9% after 56 days of treatment. This effect was observed in 70% of volunteers.
Ainsi, le principe actif selon l’invention présente une efficacité comparable à celle de l’ascorbyl glucoside sur l’atténuation des taches pigmentaires. Cet effet est également confirmé suite à l’évaluation de l’homogénéité du teint par des experts.Thus, the active ingredient according to the invention has an effectiveness comparable to that of ascorbyl glucoside in reducing pigmentation spots. This effect is also confirmed following the evaluation of the homogeneity of the complexion by experts.
Les résultats sur l’évolution de l’écart de couleur entre une zone pigmentée et une zone adjacente non tachée du principe actif selon l’invention sur le panel asiatique sont présentés dans le tableau 18, ci-après.The results on the evolution of the color difference between a pigmented area and an adjacent area not stained with the active ingredient according to the invention on the Asian panel are presented in Table 18, below.
Le principe actif selon l’invention formulé à 2,5% atténue les taches de pigmentation de volontaires asiatiques. En effet, dès 28 jours de traitement et en comparaison avec le placebo, le principe actif selon l’invention réduit l’écart de couleur entre cette zone et une zone proche non tachée de 7,1%. Cet effet se prolonge après 56 jours de traitement avec une réduction du contraste entre les deux zones de 8,0% observée chez 79% les volontaires.The active ingredient according to the invention formulated at 2.5% reduces pigmentation spots in Asian volunteers. Indeed, from 28 days of treatment and in comparison with the placebo, the active ingredient according to the invention reduces the color difference between this area and a nearby unstained area by 7.1%. This effect continues after 56 days of treatment with a reduction in contrast between the two zones of 8.0% observed in 79% of the volunteers.
Ainsi, dès 28 jours d’application biquotidienne et en comparaison au placebo, le principe actif selon l’invention formulé à 2,5% en émulsion, réduit visiblement l’apparence des taches pigmentaires de volontaires caucasiens et asiatiques. Cet effet se prolonge après 56 jours de traitement.Thus, from 28 days of twice-daily application and in comparison to the placebo, the active ingredient according to the invention formulated at 2.5% in emulsion, visibly reduces the appearance of pigment spots in Caucasian and Asian volunteers. This effect continues after 56 days of treatment.
Essai 5 - Effet du principe actif selon l’invention sur l’éclat du teintTest 5 - Effect of the active ingredient according to the invention on the radiance of the complexion
Cette étude vise à évaluerin vivol’effet du principe actif selon l’invention formulé à 2,5% en émulsion sur l’éclat du teint en comparaison au placebo chez des volontaires caucasiens et asiatiques. Le panel caucasien et asiatique sont identiques à ceux précédemment décrits dans l’essai 4.This study aims to evaluate in vivo the effect of the active ingredient according to the invention formulated at 2.5% in emulsion on the radiance of the complexion in comparison to the placebo in Caucasian and Asian volunteers. The Caucasian and Asian panel are identical to those previously described in trial 4.
Le taux de protéines oxydées est analysé par marquage fluorescent permettant de visualiser la modification structurale irréversible des protéines qui participe à la diminution de la transmission de la lumière dustratum corneum.The level of oxidized proteins is analyzed by fluorescent labeling to visualize the irreversible structural modification of the proteins which contributes to the reduction in light transmission from the stratum corneum .
L’analyse du paramètre b*, en dehors d’une zone tachée, traduit la couleur jaune de la peau causée par la présence des produits de glycation (AGEs) de couleur brun-jaune.The analysis of the b* parameter, outside of a stained area, reflects the yellow color of the skin caused by the presence of yellow-brown glycation products (AGEs).
Enfin, un scorage de l’éclat du teint est réalisé par des experts.Finally, a complexion radiance score is carried out by experts.
Les produits ont également été appliqués de façon biquotidienne, en hémi-visage pendant 56 jours.The products were also applied twice daily, on the half-face for 56 days.
Les résultats concernant le taux de protéines oxydées sur le panel caucasien sont présentés dans le tableau 19, ci-après.The results concerning the rate of oxidized proteins on the Caucasian panel are presented in Table 19, below.
Après 28 jours d’utilisation, le principe actif selon l’invention formulé à 2,5% en émulsion diminue significativement la quantité de protéines oxydées présentes à la surface de la peau de sujets caucasiens de 10,8% en comparaison au placebo. Cet effet a été observé chez 78 % des volontaires. Cet effet s’intensifie après 56 jours de traitement biquotidien (-11,5%), et a été observé chez 76 % des sujets. En réduisant la formation de protéines oxydées, le principe actif selon l’invention améliore la transmission de la lumière à travers lestratum corneum.After 28 days of use, the active ingredient according to the invention formulated at 2.5% in emulsion significantly reduces the quantity of oxidized proteins present on the surface of the skin of Caucasian subjects by 10.8% in comparison to the placebo. This effect was observed in 78% of volunteers. This effect intensifies after 56 days of twice-daily treatment (-11.5%), and was observed in 76% of subjects. By reducing the formation of oxidized proteins, the active ingredient according to the invention improves the transmission of light through the stratum corneum .
Les résultats concernant le paramètre b*, caractéristique de la couleur jaunâtre de la peau induite par la présence d’AGEs, sur le panel caucasien sont présentés dans le tableau 20, ci-après.The results concerning the parameter b*, characteristic of the yellowish color of the skin induced by the presence of AGEs, on the Caucasian panel are presented in Table 20, below.
En comparaison au placebo, le principe actif selon l’invention formulé à 2,5% en émulsion diminue significativement de 4,2% le paramètre b*, caractéristique de la couleur jaunâtre de la peau après 56 jours de traitement. L’effet est observé chez 76% des volontaires.Compared to the placebo, the active ingredient according to the invention formulated at 2.5% in emulsion significantly reduces the b* parameter, characteristic of the yellowish color of the skin, by 4.2% after 56 days of treatment. The effect is observed in 76% of volunteers.
Les résultats concernant le scorage par des experts, sur le panel caucasien en comparaison avec l’ascorbyl glucoside sont présentés, respectivement dans le tableau 21 et 22, ci-après.The results concerning scoring by experts on the Caucasian panel in comparison with ascorbyl glucoside are presented, respectively, in Tables 21 and 22, below.
Le principe actif selon l’invention, en comparaison au placebo, améliore significativement les paramètres caractéristiques de l’éclat du teint de volontaires caucasiens. En effet, dès 28 jours de traitement, le principe actif selon l’invention formulé à 2,5% en émulsion rend le teint plus lumineux, plus frais et améliore l’aspect bonne mine en réduisant la couleur olive et la fatigue des yeux.The active ingredient according to the invention, in comparison with the placebo, significantly improves the parameters characteristic of the radiance of the complexion of Caucasian volunteers. Indeed, from 28 days of treatment, the active principle according to the invention formulated at 2.5% in emulsion makes the complexion brighter, fresher and improves the healthy glow by reducing olive color and eye fatigue.
Ces effets se prolongent après 56 jours de traitement avec une augmentation
de 9% du rayonnement de la peau et de 20% de la couleur rose chez respectivement 88% et 65% des volontaires. On observe également une diminution de la couleur olive de 11% et de l’état de fatigue des yeux de 6% chez respectivement 65% et 82% des volontaires. Ainsi, le principe actif selon l’invention améliore significativement l’éclat du teint. D’autre part, cet effet est supérieur à l’ascorbyl glucoside.These effects continue after 56 days of treatment with an increase
9% of skin radiation and 20% of pink color in 88% and 65% of volunteers respectively. We also observed a reduction in olive color by 11% and in eye fatigue by 6% in 65% and 82% of volunteers, respectively. Thus, the active ingredient according to the invention significantly improves the radiance of the complexion. On the other hand, this effect is greater than ascorbyl glucoside.
Les résultats concernant le scorage par des experts sur le panel asiatique sont présentés dans le tableau 23, ci-après.The results concerning the scoring by experts on the Asian panel are presented in Table 23, below.
Variation / Placebo (%)
Le principe actif selon l’invention, en comparaison au placebo, améliore significativement les paramètres caractéristiques de l’éclat du teint des volontaires asiatiques. En effet, dès 28 jours d’application biquotidienne, le principe actif selon l’invention formulé à 2,5% en émulsion rend le teint plus lumineux et plus frais en augmentant significativement la luminosité de la peau et la couleur rose et en diminuant la couleur olive ainsi que les couleurs marron et marron clair.The active ingredient according to the invention, in comparison with the placebo, significantly improves the parameters characteristic of the radiance of the complexion of Asian volunteers. Indeed, from 28 days of twice-daily application, the active ingredient according to the invention formulated at 2.5% in emulsion makes the complexion brighter and fresher by significantly increasing the luminosity of the skin and the pink color and by reducing the olive color as well as brown and light brown colors.
Ces effets s’intensifient après 56 jours de traitement puisque le principe actif selon l’invention formulé à 2,5% en émulsion :
- donne un teint plus frais et lumineux en augmentant significativement la luminosité de la peau de 11,1% et la couleur rose de 14,4% chez respectivement 97% et 65% des volontaires ;
- procure un éclaircissement général de la peau caractérisé par une diminution de la couleur olive de 7,4% et des couleurs marron et marron clair de respectivement -3,2% et -5,1%. Ces effets sont observés chez respectivement 91%, 53% et 76% des volontaires.
- gives a fresher and luminous complexion by significantly increasing the luminosity of the skin by 11.1% and the pink color by 14.4% in 97% and 65% of volunteers respectively;
- provides general lightening of the skin characterized by a reduction in olive color by 7.4% and brown and light brown colors by -3.2% and -5.1% respectively. These effects were observed in 91%, 53% and 76% of volunteers respectively.
Ainsi, dès 28 jours d’application biquotidienne, en comparaison au placebo et à l’ascorbyl glucoside, molécule connue pour son effet dépigmentant, le principe actif selon l’invention formulé à 2,5% en émulsion améliore l’éclat du teint de volontaires caucasiens et asiatiques. Cet effet se prolonge et s’intensifie après 56 jours de traitement.Thus, from 28 days of twice-daily application, in comparison to the placebo and ascorbyl glucoside, a molecule known for its depigmenting effect, the active ingredient according to the invention formulated at 2.5% in emulsion improves the radiance of the skin's complexion. Caucasian and Asian volunteers. This effect continues and intensifies after 56 days of treatment.
Claims (14)
- Culture des levures de l’espèceOgataea siamensisdans un milieu adapté à leur développement et bioguidage par induction à la cystéine
- solubilisation d’au moins 50 g/L de la biomasse d’Ogataea siamensisdans l’eau,
- hydrolyse enzymatique
- séparation de la phase soluble et insoluble et récupération de la phase soluble,
- inactivation enzymatique, et
- éventuellement concentration et filtration stérilisante.
- Culture of yeasts of the Ogataea siamensis species in a medium adapted to their development and bioguidance by cysteine induction
- solubilization of at least 50 g/L of Ogataea siamensis biomass in water,
- enzymatic hydrolysis
- separation of the soluble and insoluble phase and recovery of the soluble phase,
- enzyme inactivation, and
- possibly concentration and sterilizing filtration.
- Culture des levures de l’espèceOgataea siamensisdans un milieu adapté à leur développement et bioguidage par induction à la cystéine
- solubilisation d’au moins 50 g/L de la biomasse d’Ogataea siamensisdans l’eau,
- hydrolyse enzymatique
- séparation de la phase soluble et insoluble et récupération de la phase soluble,
- inactivation enzymatique, et
- éventuellement concentration et filtration stérilisante.
- Culture of yeasts of the Ogataea siamensis species in a medium adapted to their development and bioguidance by cysteine induction
- solubilization of at least 50 g/L of Ogataea siamensis biomass in water,
- enzymatic hydrolysis
- separation of the soluble and insoluble phase and recovery of the soluble phase,
- enzyme inactivation, and
- possibly concentration and sterilizing filtration.
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|---|---|---|---|
| FR2206401A FR3136980A1 (en) | 2022-06-27 | 2022-06-27 | Ogataea siamensis extract and its cosmetic uses |
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Applications Claiming Priority (2)
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| Country | Link |
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Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| FR3046539A1 (en) * | 2016-01-11 | 2017-07-14 | Soc Ind Limousine D'application Biologique | ACTIVE PRINCIPLE OF PICHIA HEEDII AND COSMETIC USE IN PARTICULAR TO FIGHT THE EFFECTS OF POLLUTION ON SKIN |
-
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- 2022-06-27 FR FR2206401A patent/FR3136980A1/en active Pending
-
2023
- 2023-06-26 WO PCT/EP2023/067233 patent/WO2024002929A1/en unknown
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR3046539A1 (en) * | 2016-01-11 | 2017-07-14 | Soc Ind Limousine D'application Biologique | ACTIVE PRINCIPLE OF PICHIA HEEDII AND COSMETIC USE IN PARTICULAR TO FIGHT THE EFFECTS OF POLLUTION ON SKIN |
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| "Official method of analysis of the A.O.C.", 1975, pages: 15 - 60 |
| DUBOIS M ET AL., ANALYTICAL CHEMISTRY, vol. 28, no. 3, 1956, pages 350 - 356 |
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Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2024002929A1 (en) | 2024-01-04 |
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