FR3111355A1 - Dispositif de support de tubes utilisés pour l’analyse d’échantillons par des techniques d’amplification d’acides nucléiques et procédé d’utilisation d’un tel dispositif - Google Patents
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Abstract
Dispositif de support de tubes utilisés pour l’analyse d’échantillons par des techniques d’amplification d’acides nucléiques et procédé d’utilisation d’un tel dispositif
Contenu de l’abrégé.
L’invention concerne un dispositif comprenant :- un plateau (7) de support pour des tubes recevant des échantillons à analyser, ce plateau (7) présentant des trous (8) adaptés pour recevoir chacun un tube en appui sur la surface supérieure et avec son fond faisant saillie du plateau ;- un couvercle (10) muni de cheminées (11) aménagées selon une répartition similaire à la répartition des trous du plateau, ce couvercle (10) étant conçu pour occuper au moins une position de superposition au-dessus du plateau (7), de manière que le couvercle puisse être assemblé de manière amovible au plateau pour former un ensemble unitaire de maintien des tubes et positionner les cheminées (11) au-dessus des tubes pour servir au guidage des embouts de pipettes pénétrant à l’intérieur des tubes.
Figure pour l’abrégé : Fig. 1.
Description
La présente invention concerne le domaine technique des dispositifs utilisés pour manipuler des tubes recevant des échantillons biologiques à analyser.
Le dispositif conforme à l’invention concerne de manière générale le process des échantillons en vue de leur analyse, dans le domaine de la microbiologie. Il trouve des applications particulièrement avantageuses pour aider à la manipulation des tubes recevant des échantillons biologiques à analyser par des techniques d’amplification d’acides nucléiques telle que la Réaction de Polymérisation en Chaîne (ou « PCR ») (Polymerase Chain Reaction) et des procédés similaires.
Les techniques d’amplification des acides nucléiques sont des techniques bien connues dans l’art antérieur. Ces techniques et notamment la PCR mettent en œuvre différentes étapes pour préparer et analyser des échantillons biologiques, notamment des étapes de réhydratation de réactifs, de mélange de réactifs avec l’échantillon, de centrifugation, d’amplification et de détection. Cette technique utilise des tubes qui sont pré remplis par des réactifs et fermés chacun par un bouchon d’obturation. Ces tubes sont destinés à recevoir les échantillons biologiques à analyser. Ces tubes sont manipulés par des dispositifs adaptés afin de réaliser les différentes étapes de cette technique.
Dans l’art antérieur, il existe de nombreux dispositifs pour assurer la mise en œuvre de la technique PCR tout en permettant la manipulation simple et sécurisée des tubes lors de la réalisation des différentes étapes de cette technique.
Par exemple, le document CN 107868752 décrit un dispositif comportant une plaque de support pour des tubes d’échantillons à analyser, destinée à être supportée par un socle pourvu d’une embase de positionnement dans une machine d’analyse. Ce dispositif comporte également un couvercle muni de pattes destinées à être fixées de manière magnétique au socle, de sorte que la plaque de support des tubes est immobilisée entre le socle et le couvercle. Par ailleurs, ce couvercle est pourvu de trous de passage pour un embout d’une pipette, aménagés en correspondance des tubes. Un tel dispositif permet de manutentionner simultanément un ensemble de tubes pour son chargement et son positionnement dans la machine d’analyse.
Cependant, un tel dispositif ne permet pas de garantir l’immobilisation des tubes sur le socle. En effet, le système d’assemblage du couvercle au socle par une force magnétique ne permet pas de développer un effort d’assemblage suffisant lorsque les tubes supportés par un tel dispositif subissent notamment l’opération de centrifugation. Par ailleurs, la présence du couvercle au-dessus des tubes rend encore plus complexe l’opération de dépôt à l’intérieur des tubes qui est une opération délicate à mener à bien puisque la pipette doit assurer le dépôt à l’intérieur des tubes, d’une goutte de faible volume typiquement de 5 à 10 microlitres.
Le brevet US 7 329 393 décrit un dispositif de support de tubes d’échantillons à analyser, adapté pour subir une opération de centrifugation. Un tel dispositif comporte un couvercle destiné à être fixé à une embase par un système d’assemblage à vis et entre lesquels sont interposés un plateau de réception de tubes et un bloc support. Si un tel dispositif permet un maintien efficace des tubes lorsqu’ils subissent l’opération de centrifugation, les opérations de montage et de démontage s’avèrent relativement longues à mener à bien. Il s’ensuit que l’utilisation d’un tel dispositif est limitée en pratique à cette opération de centrifugation. Par ailleurs, un tel dispositif n’apporte pas de solution au problème du dépôt des échantillons à l’intérieur des tubes.
Un objet de l’invention est de remédier aux inconvénients de l’art antérieur en proposant un dispositif de support pour des tubes destinés à recevoir des réactifs nécessaires à une réaction d’amplification et des échantillons biologiques à analyser, un tel dispositif étant apte à être mis en œuvre de manière simple et efficace pour différentes opérations préalables ou pendant une réaction d’amplification.
Un objet de l’invention est de proposer un dispositif de support pour des tubes recevant des réactifs nécessaires à une réaction d’amplification et des échantillons biologiques à analyser, conçu pour immobiliser les tubes de manière simple et sûre même lors d’une opération de centrifugation tout en permettant une sécurisation de l’opération de dépôt à l’intérieur des tubes.
Pour atteindre de tels objectifs, l’objet de l’invention vise à proposer un dispositif comprenant :
- un plateau de support pour des tubes recevant des échantillons à analyser, ce plateau présentant une face supérieure et une face inférieure et des trous aménagés selon une répartition déterminée en débouchant dans ces deux faces et adaptés pour recevoir chacun un tube en appui sur la surface supérieure et avec son fond faisant saillie de la face inférieure du plateau ;
- un couvercle présentant une face supérieure et une face inférieure, muni de cheminées aménagées selon une répartition similaire à la répartition des trous du plateau, ce couvercle étant conçu pour occuper au moins une position de superposition au-dessus du plateau, de manière que le couvercle puisse être assemblé de manière amovible au plateau pour former un ensemble unitaire de maintien des tubes et positionner les cheminées au-dessus des tubes pour servir au guidage des embouts de pipettes pénétrant à l’intérieur des tubes.
- un plateau de support pour des tubes recevant des échantillons à analyser, ce plateau présentant une face supérieure et une face inférieure et des trous aménagés selon une répartition déterminée en débouchant dans ces deux faces et adaptés pour recevoir chacun un tube en appui sur la surface supérieure et avec son fond faisant saillie de la face inférieure du plateau ;
- un couvercle présentant une face supérieure et une face inférieure, muni de cheminées aménagées selon une répartition similaire à la répartition des trous du plateau, ce couvercle étant conçu pour occuper au moins une position de superposition au-dessus du plateau, de manière que le couvercle puisse être assemblé de manière amovible au plateau pour former un ensemble unitaire de maintien des tubes et positionner les cheminées au-dessus des tubes pour servir au guidage des embouts de pipettes pénétrant à l’intérieur des tubes.
Selon une caractéristique avantageuse, le couvercle est conçu pour occuper une position de superposition au-dessous du plateau pour placer les cheminées afin qu’elles assurent le maintien du fond des tubes faisant saillie de la face inférieure du plateau.
De plus, le dispositif selon l’invention peut comporter en outre en combinaison au moins l’une et/ou l’autre des caractéristiques additionnelles suivantes :
- le plateau et le couvercle sont réalisés dans des matériaux translucides ou transparents ;
- le plateau et le couvercle comportent un système d’assemblage amovible ;
- le plateau et le couvercle comportent chacun une plaque délimitée par deux bords tombés longitudinaux parallèles entre eux et raccordés entre eux par deux bords tombés transversaux parallèles entre eux ;
- le plateau et le couvercle comportent en tant que système d’assemblage amovible, deux pattes aménagées dans les bords tombés transversaux du couvercle et coopérant chacune avec un logement complémentaire aménagé dans chacun des bords tombés transversaux du plateau pour réaliser un emboîtage élastique ;
- les bords tombés du couvercle et les bords tombés du plateau comportent des parties d’emboîtement destinées à être emboîtées entre elles de sorte que lorsque le couvercle est assemblé avec le plateau en étant au-dessus du plateau , l’empreinte du couvercle délimitée par ses bords tombés est égale à l’empreinte du plateau délimitée par ses bords tombés ;
- des parties d’emboîtement du couvercle et du plateau sont aménagées avec un système détrompeur pour assurer un sens de montage du couvercle sur le plateau ;
- le couvercle comporte à partir de sa face supérieure, un système de centrage pour le plateau en appui par ses bords tombés sur le couvercle, la hauteur des bords tombés du plateau étant adaptée pour assurer l’engagement des cheminées sur une partie de la hauteur des tubes à partir de leur fond ;
- le système de centrage est aménagé en retrait des bords tombés du couvercle pour recevoir les bords tombés du plateau de sorte que l’empreinte du couvercle délimitée par ses bords tombés est égale à l’empreinte du plateau délimitée par ses bords tombés ;
- les cheminées du couvercle comportent des butées de limitation de l’enfoncement des embouts des pipettes afin que les embouts viennent sensiblement jusqu’à la paroi interne du fond des tubes ;
- les cheminées s’élèvent chacune en saillie à partir de la plaque du couvercle ;
- les cheminées délimitent chacune une ouverture présentant à partir de la face supérieure du couvercle, une section de forme tronconique s’ouvrant par sa plus grande section, sur la face supérieure du couvercle pour servir de guidage à l’embout des pipettes ;
- le plateau comporte des nervures d’appui s’élevant en saillie à partir de la face supérieure du plateau pour servir d’appui à un élément d’appui d’une machine d’analyse ;
- le plateau et le couvercle sont réalisés dans des matériaux translucides ou transparents ;
- le plateau et le couvercle comportent un système d’assemblage amovible ;
- le plateau et le couvercle comportent chacun une plaque délimitée par deux bords tombés longitudinaux parallèles entre eux et raccordés entre eux par deux bords tombés transversaux parallèles entre eux ;
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- des parties d’emboîtement du couvercle et du plateau sont aménagées avec un système détrompeur pour assurer un sens de montage du couvercle sur le plateau ;
- le couvercle comporte à partir de sa face supérieure, un système de centrage pour le plateau en appui par ses bords tombés sur le couvercle, la hauteur des bords tombés du plateau étant adaptée pour assurer l’engagement des cheminées sur une partie de la hauteur des tubes à partir de leur fond ;
- le système de centrage est aménagé en retrait des bords tombés du couvercle pour recevoir les bords tombés du plateau de sorte que l’empreinte du couvercle délimitée par ses bords tombés est égale à l’empreinte du plateau délimitée par ses bords tombés ;
- les cheminées du couvercle comportent des butées de limitation de l’enfoncement des embouts des pipettes afin que les embouts viennent sensiblement jusqu’à la paroi interne du fond des tubes ;
- les cheminées s’élèvent chacune en saillie à partir de la plaque du couvercle ;
- les cheminées délimitent chacune une ouverture présentant à partir de la face supérieure du couvercle, une section de forme tronconique s’ouvrant par sa plus grande section, sur la face supérieure du couvercle pour servir de guidage à l’embout des pipettes ;
- le plateau comporte des nervures d’appui s’élevant en saillie à partir de la face supérieure du plateau pour servir d’appui à un élément d’appui d’une machine d’analyse ;
Un autre objet de l’invention est de proposer un procédé d’utilisation d’un dispositif conforme à l’invention dans le cadre d’un processus réalisant une amplification d’acides nucléiques.
L’objet de l’invention vise à proposer un procédé d’utilisation d’un dispositif conforme à l’invention, dans le cadre d’un processus réalisant une amplification d’acides nucléiques, mettant en œuvre des tubes destinés à recevoir des échantillons biologiques à analyser, le procédé consistant :
- à insérer dans les trous d’un plateau, des tubes pré-remplis par un réactif lyophilisé ou liquide et fermés chacun par un bouchon muni d’une fente autorisant par déformation élastique, le passage d’un embout d’une pipette, le bouchon étant en appui sur la surface supérieure du plateau ;
- à placer un couvercle dans une position de superposition au-dessus du plateau et à l’assembler de manière amovible au plateau pour former un ensemble unitaire de maintien des tubes et avec des cheminées positionnées au-dessus des tubes.
- à insérer dans les trous d’un plateau, des tubes pré-remplis par un réactif lyophilisé ou liquide et fermés chacun par un bouchon muni d’une fente autorisant par déformation élastique, le passage d’un embout d’une pipette, le bouchon étant en appui sur la surface supérieure du plateau ;
- à placer un couvercle dans une position de superposition au-dessus du plateau et à l’assembler de manière amovible au plateau pour former un ensemble unitaire de maintien des tubes et avec des cheminées positionnées au-dessus des tubes.
Selon un exemple préféré de mise en œuvre, le procédé consiste :
- à introduire l’embout d’une pipette d’injection d’un liquide à travers les cheminées du couvercle qui servent de guidage à l’embout pour pénétrer à travers les bouchons et à l’intérieur des tubes ;
- à délivrer l’échantillon dans les tubes à l’aide de la pipette ;
- et à retirer l’embout de la pipette des tubes, des bouchons et des cheminées.
- à introduire l’embout d’une pipette d’injection d’un liquide à travers les cheminées du couvercle qui servent de guidage à l’embout pour pénétrer à travers les bouchons et à l’intérieur des tubes ;
- à délivrer l’échantillon dans les tubes à l’aide de la pipette ;
- et à retirer l’embout de la pipette des tubes, des bouchons et des cheminées.
Avantageusement, le procédé consiste à introduire l’embout de la pipette d’injection jusqu’à une butée portée par les cheminées du couvercle afin que l’embout vienne sensiblement jusqu’à la paroi interne du fond des tubes.
Selon une variante de réalisation, un film apte à être perforé par un embout d’une pipette est interposé entre les bouchons et le couvercle, avant l’assemblage entre le plateau et le couvercle, de manière à servir de témoin de remplissage des tubes par la solution aqueuse.
Selon une autre variante de réalisation, un film apte à être perforé par un embout d’une pipette est placé sur la surface supérieure des cheminées du couvercle.
Selon une étape du procédé, l’ensemble unitaire de maintien des tubes entre le couvercle et le plateau est introduit dans une machine de centrifugation notamment verticale pour assurer une opération de centrifugation du contenu des tubes.
Selon l’invention, après la réalisation de l’opération de centrifugation :
- le couvercle est désolidarisé du plateau et déposé sur un plan de pose ;
- le plateau est placé dans une position de superposition au-dessus du couvercle de manière à engager le fond des tubes faisant saillie de la face inférieure du plateau dans les cheminées du couvercle afin qu’elles assurent le maintien des tubes ;
- les bouchons des tubes sont retirés pour être remplacés par des bouchons optiques pour permettre de réaliser une opération d’amplification des acides nucléiques contenus dans les tubes ;
- à placer le couvercle dans une position de superposition au-dessus du plateau et à l’assembler de manière amovible au plateau pour former un ensemble unitaire de maintien des tubes.
- le couvercle est désolidarisé du plateau et déposé sur un plan de pose ;
- le plateau est placé dans une position de superposition au-dessus du couvercle de manière à engager le fond des tubes faisant saillie de la face inférieure du plateau dans les cheminées du couvercle afin qu’elles assurent le maintien des tubes ;
- les bouchons des tubes sont retirés pour être remplacés par des bouchons optiques pour permettre de réaliser une opération d’amplification des acides nucléiques contenus dans les tubes ;
- à placer le couvercle dans une position de superposition au-dessus du plateau et à l’assembler de manière amovible au plateau pour former un ensemble unitaire de maintien des tubes.
Selon une autre étape, le procédé consiste :
- à charger l’ensemble unitaire de maintien des tubes dans une machine d’analyse ;
- à enlever le couvercle par rapport au plateau de support des tubes ;
- à maintenir les tubes contre le plateau, par un élément d’appui de la machine d’analyse, lors d’une opération de chauffage des tubes ;
- et à réaliser l’opération d’amplification du contenu des tubes par la machine d’analyse.
- à charger l’ensemble unitaire de maintien des tubes dans une machine d’analyse ;
- à enlever le couvercle par rapport au plateau de support des tubes ;
- à maintenir les tubes contre le plateau, par un élément d’appui de la machine d’analyse, lors d’une opération de chauffage des tubes ;
- et à réaliser l’opération d’amplification du contenu des tubes par la machine d’analyse.
Description des modes de réalisation
Tel que cela ressort des dessins, l’objet de l’invention concerne un dispositif 1 destiné à être utilisé avantageusement dans le cadre d’un processus d’amplification d’acides nucléiques telle qu’une Réaction de Polymérisation en Chaîne ou analogue, mettant en œuvre des tubes 2 destinés à recevoir des échantillons biologiques à analyser et des réactifs nécessaires à une réaction d’amplification. Chaque tube 2 est pré-rempli par un réactif lyophilisé ou un réactif liquide. Par réactif, on entend toute substance ou mélange de substances nécessaire(s) à la mise en œuvre d’une réaction d’amplification. Classiquement, les réactifs sont des enzymes, nucléotides, des primers, des sondes et autres composants nécessaires à l’amplification. Dans le cas de la PCR, on utilise un mix PCR qui contient les composants nécessaires à la PCR tels que des enzymes, des nucléotides, des ions, un tampon.
On entend par échantillon une petite partie ou petite quantité séparée d’une entité par un acte soustractif dénommé habituellement prélèvement, à des fins d’analyse. L’échantillon peut être d’origine humaine, animale, végétale ou environnementale. Il peut correspondre à un prélèvement de fluide biologique (sang total, sérum, plasma, urine, liquide céphalo-rachidien, sécrétion organique), un prélèvement tissulaire ou des cellules isolées. Il peut être d’origine industrielle, soit, selon une liste non exhaustive un prélèvement d’air, un prélèvement d’eau, un prélèvement effectué sur une surface, une pièce ou un produit en cours de traitement ou manufacturé, un produit d’origine alimentaire. Cet échantillon peut éventuellement avoir subi un traitement préalable, impliquant par exemple des étapes de lyse, de mélange, de dilution ou encore de broyage, en particulier si l’entité de départ est à l’état solide. L’échantillon déposé dans les tubes peut donc être sous forme liquide. L’échantillon biologique analysé est, en général, susceptible de - ou suspecté de - contenir au moins un micro-organisme cible.
Chaque tube 2 présente un corps tubulaire 2t dont la partie inférieure est fermée de manière à présenter un fond 2f à partir de cette extrémité inférieure fermée. Chaque tube 2 présente une partie supérieure 2s adaptée pour être équipée d’un bouchon 3 d’obturation du tube. Ce bouchon 3 est muni d’une fente 4 adaptée pour permettre par déformation élastique, le passage d’un embout 5 d’une pipette d’injection d’une solution liquide à l’intérieur du tube 2.
Conformément à l’invention, le dispositif 1 comprend un plateau 7 de support pour les tubes 2 présentant une face supérieure 7s et une face inférieure 7i (Fig. 2 et 8). Ce plateau 7 comporte des trous 8 aménagés pour déboucher dans la face supérieure 7s et la face inférieure 7i. Chaque trou 8 est adapté pour recevoir comme illustré aux Fig. 6, 7 et 10, un tube 2 inséré à l’intérieur du trou 8 et en appui, sur la surface supérieure 7s du plateau tandis que le fond 2f du tube fait saillie de la face inférieure 7i du plateau 7 (Fig. 7).
Les trous 8 sont aménagés dans le plateau 7 selon une répartition déterminée. De préférence, les trous 8 sont aménagés selon des rangées et des colonnes. Typiquement, le plateau 7 comporte huit rangées de trous 8 référencés de A à H et douze colonnes de trous 8 référencés de 1 à 12 c’est-à-dire 96 trous.
Conformément à l’invention, le dispositif 1 comprend également un couvercle 10 présentant une face supérieure 10s et une face inférieure 10i, et muni de cheminées 11 délimitant intérieurement des ouvertures 12 débouchant chacune sur la surface supérieure 10s et la surface inférieure 10i du couvercle (figures 1 et 3). Ces cheminées 11 ou ouvertures 12 sont aménagées selon une répartition similaire à la répartition des trous 8 du plateau 7 de sorte qu’en position de superposition du plateau 7 et du couvercle 10, les trous 8 du plateau 7 coïncident ou sont alignés avec les ouvertures 12 des cheminées 11. Dans l’exemple illustré, le couvercle 10 comporte huit rangées de cheminées 11 référencées de A à H et douze colonnes de cheminées 11 référencées de 1 à 12 c’est-à-dire 96 cheminées 11 ou ouvertures 12.
Conformément à l’invention, le couvercle 10 et le plateau 7 sont adaptés pour coopérer ensemble dans une première position d’empilement ou de superposition et également, avantageusement dans une deuxième position d’empilement ou de superposition adaptée chacune pour la mise en œuvre d’étapes spécifiques du processus d’analyse des échantillons biologiques contenus dans les tubes. Le couvercle 10 est conçu pour occuper au moins une position de superposition au-dessus du plateau 7 de manière à être assemblé de manière amovible au plateau pour former un ensemble unitaire de maintien des tubes par la face inférieure du couvercle et positionner les cheminées 11 au-dessus des tubes pour servir au guidage des embouts de pipettes (Fig. 1, 4, 5, 6, 7). Selon une caractéristique avantageuse de réalisation, le couvercle 10 est conçu pour occuper une deuxième position correspondant à une position de superposition du couvercle 10 au-dessous du plateau 7, dans laquelle les cheminées 11 sont placées de manière à assurer le maintien du fond des tubes faisant saillie de la face inférieure 7i du plateau 7 (Fig. 8, 9, 10).
Selon une variante préférée de réalisation, le plateau 7 et le couvercle 10 présentent une forme rectangulaire. Le plateau 7 comporte une plaque 7p délimitée par deux bords tombés longitudinaux 7l parallèles entre eux et raccordés entre eux par deux bords tombés transversaux 7t parallèles entre eux (Fig. 2). La plaque 7p du plateau est ainsi pourvue selon toute sa périphérie, des bords tombés 7l, 7t formant une bordure continue s’étendant en saillie à partir de la face inférieure 7i du plateau. Le plateau 7 est destiné à être en appui sur un plan de pose S par le rebord de cette bordure continue de sorte qu’avantageusement, la hauteur des bords tombés 7t, 7l formant cette bordure est sensiblement plus haute que la longueur des tubes 2 faisant saillie de la face inférieure 7i du plateau lorsque les tubes 2 sont supportés par le plateau (Fig. 7).
Il est à noter que la face inférieure 7i du plateau 7 présente une surface plane tandis que la face supérieure 7s du plateau est pourvue de collerettes 7c entourant chacune un trou 8 et permettant le positionnement des tubes 2 (Fig. 1). Selon une caractéristique avantageuse de réalisation, le plateau 7 comporte des nervures d’appui 7n s’élevant en saillie à partir de la face supérieure 7s du plateau pour assurer un appui homogène à un élément d’appui d’une machine d’analyse. Comme cela sera expliqué en détail dans la suite de la description, ces nervures d’appui 7n servent de compensation angulaire lorsque la répartition des tubes 2 est hétérogène sur le plateau 7. Tel qu’illustré à la Fig. 8, les nervures d’appui 7n s’élèvent en saillie à partir de la face supérieure 7s du plateau à proximité et parallèlement aux deux bords tombés transversaux 7t du plateau.
De manière similaire, le couvercle 10 comporte une plaque 10p délimitée par deux bords tombés longitudinaux 10l parallèles entre eux et raccordés entre eux par deux bords tombés transversaux 10t parallèles entre eux (figures 1 et 3). La plaque 10p du couvercle 10 est ainsi pourvue selon toute sa périphérie, des bords tombés 10l, 10t formant une bordure s’étendant en saillie à partir de la face inférieure 10i du couvercle. Il est à noter que la face inférieure 10i du couvercle présente une surface plane tandis que la face supérieure 10s du couvercle est pourvue des cheminées 11. Dans l’exemple illustré, les cheminées 11 s’élèvent en saillie à partir de la plaque 10p du couvercle. Bien entendu, il peut être prévu que les cheminées 11 se trouvent réalisées complétement par la plaque 10p du couvercle de sorte que la face supérieure 10s de la plaque 10p présenterait une surface plane. Dans cette forme de réalisation, la plaque 10p du couvercle possède une épaisseur constante et chaque cheminée 11 est formée par la paroi délimitant l’ouverture 12 et dont la hauteur correspond à l’épaisseur de la plaque 10p du couvercle 10.
Il doit être considéré que chaque cheminée 11 délimite par sa paroi interne, une surface de guidage pour l’embout d’une pipette lors de l’opération de dépôt d’un liquide à l’intérieur du tube. Chaque ouverture 12 d’une cheminée 11 présente ainsi une section et une forme adaptées pour assurer cette fonction de guidage. Telle que cela ressort de la Fig. 7, chaque ouverture 12 d’une cheminée 11 présente à partir de la face supérieure 10s du couvercle, une section de forme tronconique 11a s’ouvrant par sa plus grande section, sur la face supérieure 10s du couvercle. Par exemple, cette section tronconique 11a se prolonge par une section tubulaire 11b s’ouvrant sur la face inférieure 10i du couvercle 10. Selon une caractéristique avantageuse, la section tronconique 11a des cheminées est adaptée pour assurer également l’engagement du fond des tubes 2 qui généralement présente également une section tronconique (Fig. 10).
Selon une caractéristique avantageuse de réalisation, les cheminées 11 du couvercle 10 comportent des butées 11c de limitation de l’enfoncement des embouts 5 des pipettes afin que les embouts viennent sensiblement jusqu’à la paroi interne du fond des tubes (Fig. 7). Par exemple, les butées 11c sont formées par le rebord supérieur des cheminées 11 sur lequel viennent en contact des ailettes 5a des embouts 5 des pipettes. Dans cette position de butée, l’extrémité distale de l’embout 5 de la pipette se trouve à proximité de la paroi du fond du tube, sécurisant ainsi l’opération de dépôt du liquide à l’intérieur du tube 2. En effet, lors d’un dépôt d’un faible volume, il est nécessaire de faire toucher la goutte sur la paroi interne du tube afin d’éviter que celle-ci ne reste accrochée à l’embout de la pipette. Son transfert est ainsi effectué de façon certaine selon les bonnes pratiques d’utilisation d’une pipette.
Selon une variante préférée de réalisation, le plateau 7 et le couvercle 10 sont réalisés dans des matériaux translucides ou transparents. Typiquement, le plateau 7 et le couvercle 10 sont réalisés généralement en polycarbonate, mais pourrait être aussi en polypropylène, polyéthylène haute densité.
Selon une caractéristique de l’invention, le plateau 7 et le couvercle 10 comportent un système d’assemblage amovible 13 permettant que le couvercle 10 et le plateau 7 soient solidarisés ensemble pour former un ensemble unitaire de maintien des tubes 2. Dans cette position assemblée, le couvercle 10 occupe une position de superposition au-dessus du plateau 7, avec le couvercle 10 qui est en appui sur le plateau 7 et avec la plaque 10p du couvercle située au-dessus de la plaque 7p du plateau. Le système d’assemblage amovible 10 est aussi adapté pour que le couvercle 10 et le plateau 7 puissent être désolidarisés aisément afin qu’ils puissent être manipulés de manière indépendante et positionnés par exemple pour occuper une autre position empilée. Le système d’assemblage amovible 13 peut être réalisé de toute manière appropriée. Dans l’exemple préféré de réalisation illustré sur les dessins, le système d’assemblage amovible 13 est du type à emboîtage élastique.
Selon l’exemple de réalisation illustré sur les dessins, le plateau 7 et le couvercle 10 comportent en tant que système d’assemblage amovible 13, deux pattes 13a aménagées dans les bords tombés transversaux 10t du couvercle 10 et coopérant chacune avec un logement complémentaire 14 aménagé dans chacun des bords tombés transversaux 7t du plateau 7 pour réaliser un emboîtage élastique. Tel que cela ressort des Fig. 1, 3, 4 et 5, chaque bord tombé transversal 10t du couvercle 10 comporte deux découpes 10tf délimitant entre elles, une patte 13a déformable élastiquement. Chaque patte 13a est pourvue à son extrémité libre, sur sa surface interne, d’une nervure 13b destinée à s’engager dans le logement complémentaire 14 qui délimite une surface de butée 14a pour la nervure 13b (Fig. 5). Lorsque les pattes 13a du couvercle 10 sont bloquées par les surfaces de butée 14a du plateau 7, la face inférieure de la plaque 10p du couvercle se trouve positionnée au-dessus et à proximité ou au contact des bouchons des tubes 2 supportés par le plateau 7. Dans cette position, les tubes 2 sont immobilisés, entre le plateau 7 et le couvercle 10.
Selon une caractéristique avantageuse de réalisation, les bords tombés 10t, 10l du couvercle 10 et les bords tombés 7t, 7l du plateau 7 comportent des parties d’emboîtement respectivement 10tm, 10tf, 10lm, 10lf et 7tm, 7tf, 7lm, 7lf destinées à être emboîtées entre elles de sorte que, lorsque le couvercle 10 est assemblée avec le plateau 7 en étant au-dessus du plateau 7, l’empreinte du couvercle 10 délimitée par ses bords tombés 10t, 10l est égale à l’empreinte du plateau 7 délimitée par ses bords tombés 7t, 7l. Dans cette position illustrée à la Fig. 4, l’ensemble unitaire constitué par le couvercle 10 et le plateau 7 est un solide parallélépipédique avec des surfaces latérales planes formées par les bords tombés 10t, 10l du couvercle alignés avec les bords tombés 7t, 7l du plateau.
L’emboîtement entre les bords tombés 10t, 10l du couvercle 10 et les bords tombés 7t, 7l du plateau 7 peut être obtenu à l’aide des parties d’emboîtement 10tm, 10tf, 10lm, 10lf et 7tm, 7tf, 7lm, 7lf réalisées de toute manière appropriée. Dans l’exemple de réalisation illustré sur les Figures, chaque bord tombé longitudinal 7l du plateau 7, comporte deux parties d’emboîtement 7lf dite femelle formées par des logements aménagés dans les bords tombés longitudinaux 7l et réalisées de part et d’autre d’une partie d’emboîtement dite mâle 7lm. Chaque bord tombé longitudinal 10l du couvercle 10 comporte deux parties d’emboîtement 10lm dites mâles délimitées de part et d’autre par une partie d’emboîtement dite femelle 10lf réalisée par une découpe. Les deux parties d’emboîtement mâles 10lm et la partie d’emboîtement femelle 10lf de chaque bord tombé longitudinal 10l du couvercle 10 sont destinées à s’emboîter respectivement dans les deux parties d’emboîtement femelles 7lf et dans la partie d’emboîtement mâle 7lm de chaque bord transversal 7t du plateau 7. Bien entendu, les parties d’emboîtement femelles 10lf et les parties d’emboîtement mâles 10lm du couvercle présentent des formes congruentes ou complémentaires respectivement aux parties d’emboîtement mâles 7lm et aux parties d’emboîtement femelles 7lf plateau 7.
De manière analogue, chaque bord tombé transversal 10t du couvercle 10 comporte deux parties d’emboîtement dites femelles 10tf formées par les découpes réalisées de part et d’autre d’une partie d’emboîtement mâle réalisée par la patte 13a, ces découpes 15 laissant subsister jusqu’à chaque coin, une partie d’emboîtement mâle 10tm. Les deux parties d’emboîtement femelles 10tf et les trois parties d’emboîtement mâles 13a, 10tm de chaque bord tombé transversal 10t du couvercle 10 sont destinées à s’emboîter respectivement dans deux parties d’emboîtement mâles 7tm et dans trois parties d’emboîtement femelles 7tf de chaque bord tombé transversal 7t du plateau 7. Les trois parties d’emboîtement femelles 7tf de chaque bord tombé transversal 7t du plateau 7 sont par exemple des logements aménagés dans ces bords tombés transversaux 7t du plateau 7. Bien entendu, les parties d’emboîtement femelles 10tf et les parties d’emboîtement mâles 13a, 10tm du couvercle 10 présentent des formes congruentes ou complémentaires respectivement aux parties d’emboîtement mâles 7tm et aux parties d’emboîtement femelles 7tf du plateau 7.
Selon une caractéristique avantageuse de réalisation, les parties d’emboîtement du couvercle 10 et du plateau 7 sont aménagées avec un système détrompeur pour assurer un sens de montage du couvercle sur le plateau. Selon l’exemple de réalisation illustré sur les Figures, les deux parties d’emboîtement 7lf femelles d’un bord tombé longitudinal du plateau 7 et par suite les deux parties d’emboîtement mâles 10lm correspondantes du couvercle sont aménagées de manière dissymétrique. Tel que cela ressort par exemple de la Fig. 1, la longueur prise selon un bord longitudinal d’une partie d’emboîtement femelle 7lf du plateau (respectivement d’une partie d’emboîtement mâle 10lm) est différente de la longueur de l’autre partie d’emboîtement femelle 7lf du plateau (respectivement de l’autre partie d’emboîtement mâle 10lm). Une telle réalisation dissymétrique des parties d’emboîtement autorise le montage du couvercle 10 sur le support 7 selon un seul sens.
Comme indiqué précédemment, le couvercle 10 est conçu pour occuper une deuxième position d’empilement correspondant à une position de superposition du couvercle 10 au-dessous du plateau 7 (Fig. 8, 9 et 10). Dans cette deuxième position de superposition, le plateau 7 est en appui sur la face supérieure 10s du couvercle 10, par le rebord de ses bords tombés 7t, 7l. Selon une caractéristique préférée de réalisation, le couvercle 10 comporte à partir de sa face supérieure 10s, un système de centrage 17 pour le plateau 7 de manière que le couvercle 10 et le plateau 7 soient solidarisés ensemble au moins dans un plan horizontal.
Selon une variante préférée de réalisation, le système de centrage 17 est aménagé de sorte que l’empreinte du couvercle 10 délimitée par ses bords tombés 10t, 10l est égale à l’empreinte du plateau 7 délimitée par ses bords tombés 7t, 7l. En d’autres termes, les bords tombés longitudinaux 10l et transversaux 10t du couvercle 10 sont situés à l’aplomb ou dans le prolongement respectivement des bords tombés longitudinaux 7l et transversaux 7t du plateau. Tel que cela ressort plus précisément de la Fig. 8, le système de centrage 17 est aménagé en retrait des bords tombés du couvercle 10 pour recevoir les bords tombés du plateau 7 de sorte que les bords tombés 10t, 10l du couvercle 10 sont alignés avec les bords tombés 7t, 7l du plateau 7.
Dans l’exemple illustré, le système de centrage 17 comporte une rainure 17a aménagée à partir de la face supérieure 10s du couvercle 10, en s’ouvrant en périphérie de la plaque 10p du couvercle pour permettre l’engagement des bords tombés longitudinaux 7l et transversaux 7t du plateau. Cette rainure 17a délimite ainsi un rebord 17b de centrage pour les bords tombés longitudinaux 7l et transversaux 7t du plateau. Par exemple, ce rebord de centrage 17b peut être prolongé ponctuellement, au niveau de chaque coin du couvercle 10, par des plots 17c de centrage s’élevant en saillie à partir de la face supérieure du couvercle 10. Il est à noter qu’il peut être prévu que le rebord de centrage 17b du couvercle 10 possède une section adaptée pour réaliser avec la section délimitée par la surface interne des bords tombés du plateau 7, un ajustement serré conduisant à une solidarisation complète du plateau 7 avec le couvercle 10. Le plateau 7 et le couvercle 10 forment ainsi un ensemble unitaire dans cette deuxième position d’empilement.
Dans cette deuxième position d’empilement, la hauteur des bords tombés 7t, 7l du plateau 7 est adaptée pour assurer l’engagement des cheminées 11 du couvercle sur une partie de la hauteur des tubes 2 à partir de leur fond (figure 10). L’engagement des tubes 2 par leur fond à l’intérieur des ouvertures 12 des cheminées 11 assure un centrage des tubes évitant leur basculement notamment lors de l’exécution de différentes interventions sur les tubes et/ou les bouchons, comme cela sera expliqué en détail dans la suite de la description.
Il ressort de la description qui précède que le dispositif 1 conforme à l’invention comporte deux éléments séparés pouvant être solidarisés ensemble dans deux positions d’empilement différentes pour permettre la manipulation des tubes en vue d’assurer l’accomplissement de diverses étapes de traitement des échantillons biologiques, contenus dans ces tubes. Il est à noter que des tels dispositifs 1 peuvent être gerbés ou empilés les uns sur les autres dans l’une ou l’autre position de superposition.
Le dispositif 1 conforme à l’invention est particulièrement adapté pour être utilisé dans le cadre d’un processus réalisant une amplification d’acides nucléiques tel que la Réaction de Polymérisation en Chaîne ou analogue, mettant en œuvre des tubes 2 destinés à recevoir des échantillons biologiques à analyser. Chaque tube 2 peut être pré-rempli par un réactif lyophilisé ou liquide. Il est à noter que le contenu de chaque tube 2 peut avoir également subi une ou plusieurs étapes de traitement, telle une opération de lyophilisation. Chaque tube 2 ainsi pré-rempli est obturé à l’aide d’un bouchon 3 pourvu d’une fente 4 autorisant par déformation élastique, le passage d’un embout 5 d’une pipette.
Le procédé de mise en œuvre du dispositif 1 consiste :
- à insérer dans les trous 8 du plateau 7, les tubes 2 pré-remplis par un réactif et fermés chacun par un bouchon 3 muni d’une fente et en appui sur la surface supérieure 7s du plateau 7 ;
- à placer le couvercle 10 dans une position de superposition au-dessus du plateau 7 (Fig. 1) et à assembler de manière amovible, le couvercle 10 au plateau 7 pour former un ensemble unitaire (Fig. 4).
- à insérer dans les trous 8 du plateau 7, les tubes 2 pré-remplis par un réactif et fermés chacun par un bouchon 3 muni d’une fente et en appui sur la surface supérieure 7s du plateau 7 ;
- à placer le couvercle 10 dans une position de superposition au-dessus du plateau 7 (Fig. 1) et à assembler de manière amovible, le couvercle 10 au plateau 7 pour former un ensemble unitaire (Fig. 4).
L’assemblage du couvercle 10 au plateau 7 est réalisé de manière simple par le rapprochement du couvercle 10 par rapport au plateau 7. Lors de ce rapprochement, les pattes élastiques 13a sont déformées élastiquement vers l’extérieur jusqu’à ce que les nervures 13b des pattes élastiques 13a pénètrent dans les logements 14 pour être bloquées par les surfaces de butée 14a du plateau 7. Il est à noter que lors de cette opération d’assemblage, le couvercle 10 est guidé en coulissement sur le plateau 7 par la coopération des parties d’emboîtement du couvercle 10 avec les parties d’emboîtement du plateau 7.
Dans cette position d’assemblage, la face inférieure 10i de la plaque 10p du couvercle 10 est positionnée au-dessus des bouchons des tubes 2 supportés par le plateau 7 pour les maintenir en position. Dans cette position, les tubes 2 sont immobilisés ou bloqués, entre le plateau 7 et le couvercle 10 et les cheminées 11 du couvercle 10 sont positionnées au-dessus des tubes 2 (Fig. 7).
L’étape suivante de la préparation d’un échantillon en vue d’une Réaction de Polymérisation en Chaîne ou analogue consiste à introduire l’embout 5 d’une pipette d’injection d’un liquide à travers les cheminées 11 du couvercle et les fentes 4 des bouchons 3 de manière à déboucher à l’intérieur des tubes 2 (Fig. 6 et 7). Il doit tout d’abord être noté que les cheminées 11 guident l’opérateur à positionner correctement l’embout de la pipette pour assurer son introduction à l’intérieur des tubes 2. En effet, l’opérateur introduit dans l’ouverture 12 des cheminées 11, l’embout 5 qui se trouve guidé pendant toute sa course, à savoir en approche du bouchon 3 par la portion de forme tronconique 11a, lors de sa pénétration dans la fente 4 du bouchon qui se déforme élastiquement, et à l’intérieur du tube 2.
Avantageusement, la course de la pipette est limitée par les butées 11c des cheminées 11 de sorte que l’extrémité distale de l’embout de la pipette se trouve à proximité, voire en contact de la paroi du fond du tube. L’embout de la pipette est idéalement positionné à proximité de la paroi du tube de manière à assurer l’opération de dépôt du liquide à l’intérieur du tube 2. Cette opération de dépôt qui est une opération délicate à mener à bien puisque le liquide à déposer est généralement une goutte de faible volume typiquement de 5 à 10 microlitres, est ainsi sécurisée.
Après avoir délivré le liquide dans les tubes 2 à l’aide de la pipette, l’opérateur retire l’embout de la pipette, des tubes 2, des bouchons 3 et des cheminées 11. Le liquide délivré est l’échantillon. Un réactif nécessaire à l’amplification peut également être ajouté.
Il est à noter que la transparence du plateau 7 et du couvercle 10 donne la possibilité à l’opérateur de voir le code couleur à l’intérieur des tubes 2.
Selon une variante de réalisation, il est à noter qu’un film apte à être perforé par un embout d’une pipette est placé sur le couvercle 10 de manière à servir de témoin de remplissage des tubes 2 par le liquide. Ce film non représenté sur les dessins peut être placé sur la surface supérieure des cheminées 11 du couvercle 10.
Selon une autre variante de réalisation, avant l’assemblage entre le plateau 7 et le couvercle 10, un film apte à être perforé par un embout d’une pipette peut être interposé entre les bouchons 3 et le couvercle 10, de manière à servir de témoin de remplissage des tubes 2 par le liquide. Ce film non représenté sur les dessins peut être déposé directement sur la surface supérieure 7s du plateau pourvue des bouchons 3.
Cet ensemble unitaire avec les tubes 2 immobilisés entre le couvercle 10 et le plateau 7 peut être introduit dans une machine de centrifugation de tous types connus en soi pour assurer une opération de centrifugation du contenu des tubes 2. Selon un avantage du dispositif 1 conforme à l’invention, le dispositif 1 peut être chargé dans une machine de centrifugation verticale sans risque de fuites des tubes. Le caractère compact du dispositif 1 facilite les opérations de chargement et déchargement du dispositif 1.
Après la réalisation de l’opération de centrifugation, le contenu des tubes 2 est destiné à subir une réaction d’amplification des acides nucléiques contenus les tubes à l’aide d’une machine d’analyse de tous types connus en soi, classiquement un thermocycleur. Selon une variante de mise en œuvre, les bouchons 3 obturant les tubes 2 sont remplacés par des bouchons optiques avant l’opération d’analyse du contenu des tubes.
A cet effet, le couvercle 10 est désolidarisé du plateau 7 et déposé sur un plan de pose S. Cette opération est relativement facile à mener à bien puisqu’il suffit d’écarter les pattes élastiques 13a pour dégager les nervures 13b des logements 14 et de soulever selon un mouvement de translation, le couvercle 10 par rapport au plateau 7. Après avoir mis en appui le couvercle 10 sur un plan de pose S, par ses bords tombés 10l, 10t, le plateau 7 est placé dans une position de superposition au-dessus du couvercle 10 de manière à engager le fond des tubes faisant saillie de la face inférieure du plateau dans les cheminées 11 du couvercle afin qu’elles assurent le maintien des tubes. Tel que cela ressort plus précisément de la Fig. 10, chaque fond des tubes 2 est engagé dans l’ouverture 12 des cheminées 11 évitant tout mouvement de basculement lors de l’opération de retrait des bouchons remplacés par des bouchons optiques pour la réalisation de l’opération d’analyse du contenu des tubes. Il est à noter que l’opération d’analyse du contenu des tubes peut être menée à bien sans changer les bouchons 3 munis d’une fente et obturant initialement les tubes.
Pour réaliser l’amplification des acides nucléiques contenus dans les tubes 2, l’ensemble unitaire constitué par le plateau 7 de support des tubes 2 assemblé avec le couvercle 10 est chargé dans la machine d’analyse. Dans le cas où les bouchons ont été remplacés par des bouchons optiques, le plateau 7 est dégagé du couvercle 10 de manière que le couvercle 10 puisse être placé au-dessus du plateau 7 et solidarisé ensemble à l’aide du système d’assemblage amovible 13 comme déjà expliqué. Cet ensemble unitaire permet de charger facilement et en toute sécurité, l’ensemble des tubes 2 dans la machine d’analyse.
Le couvercle 10 du dispositif 1 est retiré du plateau 7 de manière à permettre le chauffage des tubes 2 et l’opération d’analyse. A cet effet, un élément d’appui de la machine d’analyse tel que son couvercle maintient les tubes 2 contre le plateau 7 tout en assurant un bon contact des tubes avec le bloc chauffant de la machine d’analyse et notamment avec les puits de réception des tubes aménagés dans le bloc chauffant. Avantageusement, le couvercle de la machine d’analyse vient en contact sur les nervures d’appui 7n du plateau 7. L’opération d’amplification des acides nucléiques contenus dans les tubes 2 peut donc être menée à bien par la machine d’analyse.
Il est à noter que pendant le cycle d’amplification, les tubes 2 sont serrés dans le bloc chauffant par l’élément d’appui de la machine d’analyse. En fin de cycle, il est possible de décharger de la machine d’analyse, les tubes 2 grâce au plateau 7. Cela permet ainsi de retirer simultanément et aisément l’ensemble des tubes 2 ayant subi la réaction.
Claims (22)
- Dispositif comprenant :
- un plateau (7) de support pour des tubes (2) recevant des échantillons à analyser, ce plateau (7) présentant une face supérieure (7s) et une face inférieure (7i) et des trous (8) aménagés selon une répartition déterminée en débouchant dans ces deux faces et adaptés pour recevoir chacun un tube en appui sur la surface supérieure et avec son fond faisant saillie de la face inférieure du plateau ;
- un couvercle (10) présentant une face supérieure (10s) et une face inférieure (10i), muni de cheminées (11) aménagées selon une répartition similaire à la répartition des trous du plateau, ce couvercle (10) étant conçu pour occuper au moins une position de superposition au-dessus du plateau (7), de manière que le couvercle puisse être assemblé de manière amovible au plateau pour former un ensemble unitaire de maintien des tubes et positionner les cheminées (11) au-dessus des tubes pour servir au guidage des embouts de pipettes pénétrant à l’intérieur des tubes. - Dispositif selon la revendication 1, selon lequel le couvercle (10) est conçu pour occuper une position de superposition au-dessous du plateau (7) pour placer les cheminées (11) afin qu’elles assurent le maintien du fond des tubes faisant saillie de la face inférieure du plateau.
- Dispositif selon l’une des revendications 1 ou 2, selon lequel le plateau (7) et le couvercle (10) sont réalisés dans des matériaux translucides ou transparents.
- Dispositif selon l’une des revendications 1 à 3, selon lequel le plateau (7) et le couvercle (10) comportent un système d’assemblage amovible (13).
- Dispositif selon l’une des revendications précédentes, selon lequel le plateau (7) et le couvercle (10) comportent chacun une plaque (7p, 10p) délimitée par deux bords tombés longitudinaux (7l, 10l) parallèles entre eux et raccordés entre eux par deux bords tombés transversaux (7t, 10t) parallèles entre eux.
- Dispositif selon la revendication 5, selon lequel le plateau (7) et le couvercle (10) comportent en tant que système d’assemblage amovible, deux pattes (13a) aménagées dans les bords tombés transversaux du couvercle et coopérant chacune avec un logement complémentaire (14) aménagé dans chacun des bords tombés transversaux du plateau pour réaliser un emboîtage élastique.
- Dispositif selon l’une des revendications 5 ou 6, selon lequel les bords tombés du couvercle (10) et les bords tombés du plateau (7) comportent des parties d’emboîtement (10tm, 10tf, 10lm, 10lf et 7tm, 7tf, 7lm, 7lf) destinées à être emboîtées entre elles de sorte que lorsque le couvercle (10) est assemblé avec le plateau (7) en étant au-dessus du plateau (7), l’empreinte du couvercle (10) délimitée par ses bords tombés (10t, 10l) est égale à l’empreinte du plateau (7) délimitée par ses bords tombés (7l, 7t).
- Dispositif selon la revendication précédente, selon lequel des parties d’emboîtement (10tm, 10tf, 10lm, 10lf et 7tm, 7tf, 7lm, 7lf) du couvercle (10) et du plateau (7) sont aménagées avec un système détrompeur pour assurer un sens de montage du couvercle (10) sur le plateau (7).
- Dispositif selon l’une des revendications 5 à 8, selon laquelle le couvercle (10) comporte à partir de sa face supérieure (10s), un système de centrage (17) pour le plateau (7) en appui par ses bords tombés sur le couvercle (10), la hauteur des bords tombés (7l, 7t) du plateau étant adaptée pour assurer l’engagement des cheminées (11) sur une partie de la hauteur des tubes à partir de leur fond.
- Dispositif selon la revendication précédente, selon laquelle le système de centrage (17) est aménagé en retrait des bords tombés (10l, 10t) du couvercle (10) pour recevoir les bords tombés du plateau de sorte que l’empreinte du couvercle délimitée par ses bords tombés est égale à l’empreinte du plateau délimitée par ses bords tombés.
- Dispositif selon l’une des revendications précédentes, selon lequel les cheminées (11) du couvercle (10) comportent des butées (11c) de limitation de l’enfoncement des embouts des pipettes afin que les embouts viennent sensiblement jusqu’à la paroi interne du fond des tubes.
- Dispositif selon l’une des revendications 5 à 11, selon laquelle les cheminées (11) s’élèvent chacune en saillie à partir de la plaque (10p) du couvercle (10).
- Dispositif selon l’une des revendications 5 à 12, selon laquelle les cheminées (11) délimitent chacune une ouverture (12) présentant à partir de la face supérieure (10s) du couvercle, une section de forme tronconique (11a) s’ouvrant par sa plus grande section, sur la face supérieure (10s) du couvercle pour servir de guidage à l’embout des pipettes.
- Dispositif selon l’une des revendications précédentes, selon lequel le plateau (7) comporte des nervures d’appui (7n) s’élevant en saillie à partir de la face supérieure (7s) du plateau pour servir d’appui à un élément d’appui d’une machine d’analyse.
- Procédé d’utilisation d’un dispositif conforme à l’une des revendications 1 à 14, dans le cadre d’un processus réalisant une amplification d’acides nucléiques, mettant en œuvre des tubes (2) destinés à recevoir des échantillons biologiques à analyser, le procédé consistant :
- à insérer dans les trous (8) d’un plateau (7), des tubes pré-remplis par un réactif lyophilisé ou liquide et fermés chacun par un bouchon (3) muni d’une fente (4) autorisant par déformation élastique, le passage d’un embout (5) d’une pipette, le bouchon étant en appui sur la surface supérieure du plateau ;
- à placer un couvercle (10) dans une position de superposition au-dessus du plateau (7) et à l’assembler de manière amovible au plateau pour former un ensemble unitaire de maintien des tubes et avec des cheminées (11) positionnées au-dessus des tubes. - Procédé selon la revendication précédente, selon lequel il consiste à :
- introduire l’embout (5) d’une pipette d’injection d’un liquide à travers les cheminées (11) du couvercle qui servent de guidage à l’embout pour pénétrer à travers les bouchons (3) et à l’intérieur des tubes (2) ;
- délivrer l’échantillon dans les tubes à l’aide de la pipette ;
- et retirer l’embout (5) de la pipette des tubes (2), des bouchons (3) et des cheminées (11). - Procédé selon la revendication précédente, selon lequel il consiste à introduire l’embout (5) de la pipette d’injection jusqu’à une butée (11c) portée par les cheminées (11) du couvercle (10) afin que l’embout vienne sensiblement jusqu’à la paroi interne du fond des tubes.
- Procédé selon l’une des revendications 16 ou 17, selon lequel un film apte à être perforé par un embout d’une pipette (5) est interposé entre les bouchons (3) et le couvercle, avant l’assemblage entre le plateau et le couvercle, de manière à servir de témoin de remplissage des tubes par le liquide.
- Procédé selon l’une des revendications 16 ou 17, selon lequel un film apte à être perforé par un embout d’une pipette (5) est placé sur la surface supérieure des cheminées (11) du couvercle (10).
- Procédé selon l’une des revendications 15 à 19, selon lequel l’ensemble unitaire de maintien des tubes entre le couvercle (10) et le plateau (7) est introduit dans une machine de centrifugation notamment verticale pour assurer une opération de centrifugation du contenu des tubes.
- Procédé selon la revendication précédente, selon lequel, après la réalisation de l’opération de centrifugation :
- le couvercle (10) est désolidarisé du plateau (7) et déposé sur un plan de pose ;
- le plateau (7) est placé dans une position de superposition au-dessus du couvercle (10) de manière à engager le fond des tubes faisant saillie de la face inférieure du plateau dans les cheminées (11) du couvercle afin qu’elles assurent le maintien des tubes ;
- les bouchons (3) des tubes sont retirés pour être remplacés par des bouchons optiques pour permettre de réaliser une opération d’amplification des acides nucléiques contenus dans les tubes ;
- à placer le couvercle (10) dans une position de superposition au-dessus du plateau (7) et à l’assembler de manière amovible au plateau pour former un ensemble unitaire de maintien des tubes. - Procédé selon l’une des revendications 20 ou 21, selon lequel, le procédé consiste :
- à charger l’ensemble unitaire de maintien des tubes dans une machine d’analyse ;
- à enlever le couvercle (10) par rapport au plateau (7) de support des tubes ;
- à maintenir les tubes contre le plateau, par un élément d’appui de la machine d’analyse, lors d’une opération de chauffage des tubes ;
- et à réaliser l’opération d’amplification du contenu des tubes par la machine d’analyse.
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