FR3075205A1 - Chitine et procede d'obtention de chitine et/ou chitosan par voie enzymo-chimique - Google Patents
Chitine et procede d'obtention de chitine et/ou chitosan par voie enzymo-chimique Download PDFInfo
- Publication number
- FR3075205A1 FR3075205A1 FR1762307A FR1762307A FR3075205A1 FR 3075205 A1 FR3075205 A1 FR 3075205A1 FR 1762307 A FR1762307 A FR 1762307A FR 1762307 A FR1762307 A FR 1762307A FR 3075205 A1 FR3075205 A1 FR 3075205A1
- Authority
- FR
- France
- Prior art keywords
- chitin
- chitosan
- insects
- cuticles
- page
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 title claims abstract description 179
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 title claims abstract description 98
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 92
- 239000000126 substance Substances 0.000 title description 3
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 claims description 80
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 34
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 34
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 29
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 29
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 27
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 27
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 27
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 claims description 26
- 238000003381 deacetylation reaction Methods 0.000 claims description 20
- 238000011084 recovery Methods 0.000 claims description 20
- 230000006196 deacetylation Effects 0.000 claims description 16
- 238000003307 slaughter Methods 0.000 claims description 14
- 238000000227 grinding Methods 0.000 claims description 12
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 8
- 108030004804 Aspartic endopeptidases Proteins 0.000 claims description 4
- 102000009422 Aspartic endopeptidases Human genes 0.000 claims description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 claims description 4
- 102000003667 Serine Endopeptidases Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000083 Serine Endopeptidases Proteins 0.000 claims description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 3
- 108090000395 Cysteine Endopeptidases Proteins 0.000 claims description 2
- 102000003950 Cysteine Endopeptidases Human genes 0.000 claims description 2
- 102000006166 Metallocarboxypeptidases Human genes 0.000 claims description 2
- 108030000089 Metallocarboxypeptidases Proteins 0.000 claims description 2
- 108090000131 Metalloendopeptidases Proteins 0.000 claims description 2
- 102000003843 Metalloendopeptidases Human genes 0.000 claims description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 2
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims 4
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims 2
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 claims 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims 1
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 57
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 33
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 30
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 30
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 30
- 239000002585 base Substances 0.000 description 27
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 25
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 19
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 18
- 239000002956 ash Substances 0.000 description 13
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 12
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 10
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 8
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 7
- 238000004061 bleaching Methods 0.000 description 7
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 7
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 6
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 6
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 6
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 235000014304 histidine Nutrition 0.000 description 6
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 241000254173 Coleoptera Species 0.000 description 5
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 5
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 5
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 5
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 5
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 235000014393 valine Nutrition 0.000 description 5
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 5
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- 241000254109 Tenebrio molitor Species 0.000 description 4
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 4
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 4
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 4
- 239000003637 basic solution Substances 0.000 description 4
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 4
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 4
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 3
- 235000002918 Fraxinus excelsior Nutrition 0.000 description 3
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101710118538 Protease Proteins 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 3
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 3
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 2
- 108091005508 Acid proteases Proteins 0.000 description 2
- 108010004032 Bromelains Proteins 0.000 description 2
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 2
- 241000238424 Crustacea Species 0.000 description 2
- 241000255925 Diptera Species 0.000 description 2
- 102000005593 Endopeptidases Human genes 0.000 description 2
- 108010059378 Endopeptidases Proteins 0.000 description 2
- 102000018389 Exopeptidases Human genes 0.000 description 2
- 108010091443 Exopeptidases Proteins 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 241000255777 Lepidoptera Species 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000002704 Leucyl aminopeptidase Human genes 0.000 description 2
- 108010004098 Leucyl aminopeptidase Proteins 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical group CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 2
- 241000238814 Orthoptera Species 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000382353 Pupa Species 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 241000219995 Wisteria Species 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 2
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 2
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 2
- 230000003311 flocculating effect Effects 0.000 description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- 230000001418 larval effect Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- -1 treatment of burns Substances 0.000 description 2
- 241001124203 Alphitobius diaperinus Species 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 102000035101 Aspartic proteases Human genes 0.000 description 1
- 108091005502 Aspartic proteases Proteins 0.000 description 1
- 208000035404 Autolysis Diseases 0.000 description 1
- 108090000145 Bacillolysin Proteins 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 241001674044 Blattodea Species 0.000 description 1
- 241000501044 Buprestidae Species 0.000 description 1
- 241000131329 Carabidae Species 0.000 description 1
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 1
- 241001481710 Cerambycidae Species 0.000 description 1
- 241000254068 Cetoniinae Species 0.000 description 1
- 108090000317 Chymotrypsin Proteins 0.000 description 1
- 102100035371 Chymotrypsin-like elastase family member 1 Human genes 0.000 description 1
- 241000255749 Coccinellidae Species 0.000 description 1
- 241000131287 Dermestidae Species 0.000 description 1
- 241001534137 Dryophthorinae Species 0.000 description 1
- 241000698776 Duma Species 0.000 description 1
- 241001414834 Ephemeroptera Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 241001466007 Heteroptera Species 0.000 description 1
- 241000257303 Hymenoptera Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 241000256602 Isoptera Species 0.000 description 1
- 241001124156 Mecoptera Species 0.000 description 1
- 241000254043 Melolonthinae Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 241001078693 Rhynchophorus ferrugineus Species 0.000 description 1
- 108010056079 Subtilisins Proteins 0.000 description 1
- 102000005158 Subtilisins Human genes 0.000 description 1
- 241001124191 Tenebrio obscurus Species 0.000 description 1
- 241000254107 Tenebrionidae Species 0.000 description 1
- 241000254113 Tribolium castaneum Species 0.000 description 1
- 241000255737 Zophobas atratus Species 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 229940025131 amylases Drugs 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000009360 aquaculture Methods 0.000 description 1
- 244000144974 aquaculture Species 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 235000019835 bromelain Nutrition 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 230000021523 carboxylation Effects 0.000 description 1
- 238000006473 carboxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 108010007119 flavourzyme Proteins 0.000 description 1
- 239000013505 freshwater Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 210000000087 hemolymph Anatomy 0.000 description 1
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 1
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 108010009355 microbial metalloproteinases Proteins 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002417 nutraceutical Substances 0.000 description 1
- 235000021436 nutraceutical agent Nutrition 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 238000009374 poultry farming Methods 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 238000011085 pressure filtration Methods 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 239000003507 refrigerant Substances 0.000 description 1
- 230000028043 self proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
- C08B37/0024—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid beta-D-Glucans; (beta-1,3)-D-Glucans, e.g. paramylon, coriolan, sclerotan, pachyman, callose, scleroglucan, schizophyllan, laminaran, lentinan or curdlan; (beta-1,6)-D-Glucans, e.g. pustulan; (beta-1,4)-D-Glucans; (beta-1,3)(beta-1,4)-D-Glucans, e.g. lichenan; Derivatives thereof
- C08B37/0027—2-Acetamido-2-deoxy-beta-glucans; Derivatives thereof
- C08B37/003—Chitin, i.e. 2-acetamido-2-deoxy-(beta-1,4)-D-glucan or N-acetyl-beta-1,4-D-glucosamine; Chitosan, i.e. deacetylated product of chitin or (beta-1,4)-D-glucosamine; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
- C08L5/00—Compositions of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08L1/00 or C08L3/00
- C08L5/08—Chitin; Chondroitin sulfate; Hyaluronic acid; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/26—Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
La présente invention se rapporte à une chitine dont la pureté par différence est supérieure à 97,75% et à un procédé d'obtention de chitine et/ou chitosan par voie enzymo-chimique.
Description
La présente invention concerne une chitine, un chitosan ainsi qu’un procédé de préparation de chitine et/ou chitosan à partir d’insectes.
Selon l’invention, par « chitine », on entend un polymère composé majoritairement d’unités glucosamine et N-acétyl-glucosamine, lesdites unités pouvant être optionnellement substituées par des acides aminés et/ou des peptides.
Par « composé majoritairement », on entend que ledit polymère comporte entre 55% et 98% en poids, de préférence entre 75 et 90% en poids d’unités glucosamine et N-acétyl-glucosamine.
La chitine serait le deuxième polymère le plus synthétisé dans le monde vivant après la cellulose. En effet, la chitine est synthétisée par de nombreuses espèces du monde vivant: elle constitue en partie l'exosquelette des crustacés et des insectes et la paroi latérale qui entoure et protège les champignons. Plus particulièrement, chez les insectes, la chitine constitue ainsi 3 à 60% de leur exosquelette.
Par « chitosan », on entend selon la présente invention les produits de désacétylation de la chitine. La limite usuelle entre le chitosan et la chitine est déterminée par le degré d'acétylation : un composé ayant un degré d’acétylation inférieur à 50% est nommé chitosan, au-delà, un composé ayant un degré d’acétylation supérieur à 50% est nommé chitine.
Les applications de la chitine et/ou du chitosan sont nombreuses: cosmétique (composition cosmétique), médicale et pharmaceutique (composition pharmaceutique, traitement des brûlures, biomatériaux, pansements cornéens, fils chirurgicaux), diététique et alimentaire (alimentation humaine notamment en œnologie et alimentation animale, plus spécifiquement en aquaculture et aviculture), technique (agent filtrant, texturant, floculant ou adsorbant notamment pour la filtration et dépollution de l'eau), etc. En effet, la chitine et/ou le chitosan sont des matériaux biocompatibles, biodégradables et non toxiques.
Usuellement, la chitine et le chitosan sont obtenus à partir des différentes espèces synthétisant la chitine, telles que celles citées ci-avant, et notamment à partir de crustacés ou d’insectes.
Il est particulièrement avantageux d’obtenir de la chitine et du chitosan à partir d’insectes, ces derniers représentant une matière première abondante et renouvelable.
L’obtention d’une chitine et/ou d’un chitosan de pureté élevée est recherchée dans de nombreuses applications, telles que par exemple en cosmétique et en pharmacie. Une pureté élevée limite notamment les risques d’allergie, de fièvre locale ou généralisée, relatifs à l’application de produits cosmétiques ou pharmaceutiques comportant de la chitine et/ou du chitosan. De telles réactions peuvent en effet être provoquées par les impuretés telles que les acides aminés résiduels, les cendres ou encore des lipides.
L’invention concerne donc une chitine dont la pureté par différence est supérieure à 97,75%.
Dans le cadre de la présente demande, pour mesurer la pureté, les teneurs en impuretés connues, à savoir en acides aminés, lipides et cendres, sont soustraites à la valeur de pureté absolue (100%) pour obtenir la valeur de la pureté estimée par différence. Ainsi, par exemple, un échantillon qui contient 30% d’acides aminés, 10% de lipides et 1% de cendres, se voit dès lors attribuer une pureté par différence de 10030-10-1=59%.
La chitine selon l’invention, qui présente une pureté par différence élevée, possède ainsi des teneurs faibles en acides aminés, lipides et cendres.
La chitine selon l’invention présente avantageusement une pureté par différence supérieure ou égale à 98%, de préférence supérieure ou égale à 98,1%.
La teneur en acides aminés de la chitine selon l’invention est de préférence déterminée selon la méthode NF EN ISO 13904 pour le tryptophane et NF EN ISO 13903 pour les autres acides aminés.
L’abondance relative, exprimée en pourcentage, peut être calculée en rapportant la teneur de chaque acide aminé à la teneur totale en acides aminés.
Dans toute la demande, lorsqu’aucune date n’est précisée pour un règlement, une norme ou une directive, il s’agit du règlement, de la norme ou de la directive en vigueur à la date de dépôt.
Les méthodes de détermination de la teneur en matière grasse (lipides) sont bien connues de l’homme du métier. A titre d’exemple et de manière préférée, la détermination de cette teneur sera effectuée en adaptant la méthode du règlement CE 152/2009.
La méthode de détermination de la teneur en cendres est bien connue de l’homme du métier. De préférence, cette teneur est déterminée selon la norme N F V18-101.
Avantageusement, la chitine selon l’invention comporte moins de 1,2% en poids d’acides aminés sur le poids sec total de chitine.
De préférence, la chitine selon l’invention comporte moins de 1% en poids, plus préférentiellement moins de 0,9% en poids, encore plus préférentiellement moins de 0,8% en poids, et encore plus préférentiellement moins de 0,75% en poids d’acides aminés sur le poids sec total de chitine.
Avantageusement, les acides aminés résiduels présents dans la chitine selon l’invention consistent en : Cystéine, Valine, Histidine, Lysine, Tryptophane ou une combinaison de deux ou plus de ceux-ci, de préférence en une combinaison de tous ces acides aminés.
Avantageusement, la chitine selon l’invention comporte moins de 2% en poids de cendres sur le poids sec total de chitine.
La chitine selon l’invention comporte de préférence moins de 1,6% en poids, plus préférentiellement moins de 1,4% en poids, encore plus préférentiellement moins de 1,2% en poids de cendres sur le poids sec total de chitine.
Avantageusement, la chitine selon l’invention comporte moins de 1% en poids, de préférence moins de 0,5% en poids, plus préférentiellement moins de 0,2% en poids de lipides sur le poids sec total de chitine.
Encore plus préférentiellement, la chitine selon l’invention ne comporte pas de lipides.
Avantageusement, la chitine selon l’invention a une masse moléculaire supérieure ou égale à 450 kg.moLI, de préférence supérieure ou égale à 500 kg.mol-1, plus préférentiellement supérieure ou égale à 600 kg.mol-1.
La masse moléculaire est déterminée grâce à la mesure de la viscosité par chute de bille.
De préférence, la masse moléculaire est déterminée selon une méthode de mesure de la viscosité par chute de bille basée sur celle décrite dans la publication suivante : « Pacheco et al. ; Structural characterization of chitin and chitosan obtained by biological and chemical methods ; Biomacromolecules ; 12, 3285-3290, 2011 ».
Cette méthode est notamment utilisée dans l’Exemple 1.
De préférence, la chitine selon l’invention est une chitine isolée.
Par chitine « isolée >>, on entend une chitine qui a été isolée où extraite de son milieu naturel.
Plus particulièrement, dans le cadre de la présente demande, la chitine est isolée ou extraite d’insectes, plus spécifiquement de cuticules d’insectes.
L’invention concerne également un chitosan dont la pureté par différence est supérieure à 97,75%.
De préférence, la pureté par différence du chitosan selon l’invention est supérieure ou égale à 98%, plus préférentiellement supérieure ou égale à 98,1%.
La pureté par différence du chitosan selon l’invention est mesurée de la même manière qu’indiqué ci-avant pour la chitine.
Avantageusement, le chitosan selon l’invention a une masse moléculaire supérieure ou égale à 250 kg.mol·1, de préférence supérieure ou égale à 300 kg.mol·1.
De préférence, le chitosan selon l’invention est un chitosan isolé.
Par chitosan « isolé », on entend un chitosan qui a été obtenu à partir d’une chitine isolée ou extraite de son milieu naturel.
Plus particulièrement, dans le cadre de la présente demande, le chitosan est obtenu à partir d’une chitine isolée ou extraite d’insectes, plus spécifiquement de cuticules d’insectes.
L’invention concerne également un procédé d’obtention de chitine et/ou chitosan, à partir d’insectes, comprenant les étapes suivantes :
- la séparation des cuticules de la partie molle des insectes, l’hydrolyse enzymatique des cuticules par une protéase, pour obtenir un résidu solide, et
- le traitement basique du résidu solide.
Le procédé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention permet l’obtention d’une chitine et/ou d’un chitosan de pureté élevée.
En outre, le procédé selon l’invention, et plus particulièrement l’étape d’hydrolyse enzymatique, permet de réduire certains inconvénients inhérents à l’étape de traitement basique subséquente, comme par exemple réduire la quantité de base utilisée lors de cette étape. Cette étape permet également la récupération d’un hydrolysat.
Par « insectes », on entend des insectes à n’importe quel stade de développement, tel qu’un stade adulte, larvaire ou un stade de nymphe (stade intermédiaire). Avantageusement, les insectes mis en œuvre dans le procédé selon l’invention sont à un stade larvaire lorsque les insectes sont des holométaboles, à un stade de nymphe (stade intermédiaire) lorsque les insectes sont des hétérométaboles, ou le cas échéant à un stade adulte.
Les insectes mis en œuvre dans le procédé selon l’invention peuvent être comestibles.
Avantageusement, les insectes préférés pour la mise en œuvre du procédé selon l’invention sont par exemple les coléoptères, les diptères, les lépidoptères, les isoptères, les orthoptères, les hyménoptères, les blattoptères, les hémyptères, les hétéroptères, les éphéméroptères et les mécoptères, de préférence, les coléoptères, les diptères, les orthoptères, les lépidoptères ou leurs mélanges, encore plus préférentiellement les coléoptères.
Les coléoptères préférentiellement mis en œuvre dans le procédé selon l’invention appartiennent aux familles des Tenebrionidae, Melolonthidae, Dermestidae, Coccinellidae, Cerambycidae, Carabidae, Buprestidae, Cetoniidae, Dryophthoridae, ou leurs mélanges.
Plus préférentiellement, il s’agit des coléoptères suivants : Tenebrio molitor, Alphitobius diaperinus, Zophobas morio, Tenebrio obscurus, Tribolium castaneum et Rhynchophorus ferrugineus, ou leurs mélanges. Encore plus préférentiellement, il s’agit de Tenebrio molitor.
Le procédé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention comprend une étape de séparation des cuticules de la partie molle des insectes.
La cuticule est la couche externe (ou exosquelette) sécrétée par l'épiderme des insectes. Elle est en général formée de trois couches : l’épicuticule, l’exocuticule et l’endocuticule.
Par « partie molle », on vise la chair (comportant notamment les muscles et les viscères) et le jus (comportant notamment les liquides biologiques, l’eau et l’hémolymphe) des insectes. En particulier, la partie molle ne consiste pas en le jus des insectes.
La séparation des cuticules de la partie molle des insectes peut être effectuée à l’aide de tout type de séparateur adapté.
Selon un premier mode de réalisation, la séparation des cuticules de la partie molle est réalisée à l’aide d’un séparateur à bande.
Selon un second mode de réalisation, la séparation des cuticules de la partie molle est réalisée à l’aide d’un filtre presse.
Cette étape de séparation des cuticules de la partie molle des insectes est plus amplement décrite dans l’étape 2 du procédé détaillé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention ci-après.
Cette séparation des cuticules de la partie molle de l’insecte permet notamment de séparer la chitine de la partie molle. En effet, les cuticules obtenues à l’issue de cette étape de séparation présentent une teneur en chitine élevée de l’ordre de 10 à 30% en poids sur le poids total de cuticules, comme indiqué ci-après.
En particulier, l’étape de séparation des cuticules de la partie molle s’effectue sans qu’aucune étape préalable de broyage des insectes, notamment sous forme de particules, n’ait été effectuée.
Le procédé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention comprend avantageusement une étape d’abattage préalable à l’étape de séparation des cuticules de la partie molle.
Cette étape d’abattage est plus amplement décrite dans l’étape 1 du procédé détaillé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention ci-après.
Avantageusement, suite à l’étape 1 d’abattage, les insectes sont directement utilisés pour la mise en œuvre de l’étape 2 de séparation des cuticules de la partie molle des insectes, c’est-à-dire que les insectes ne sont soumis à aucun traitement, tel qu’un broyage, une congélation ou une déshydratation entre l’étape 1 et l’étape 2.
Le procédé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention comprend une étape d’hydrolyse enzymatique des cuticules par une protéase, pour obtenir un résidu solide, suite à l’étape de séparation des cuticules de la partie molle des insectes.
Avantageusement, l’hydrolyse enzymatique est effectuée pendant une durée comprise entre 3 et 10 heures, préférentiellement comprise entre 4 et 8 heures.
On notera que dans le cadre de la présente demande, et sauf stipulation contraire, les gammes de valeurs indiquées s’entendent bornes incluses.
De préférence, l’hydrolyse enzymatique est réalisée à une température comprise entre 40 et 80°C, préférentiellement comprise entre 50 et 70 °C.
Avantageusement, l’hydrolyse enzymatique est réalisée à un pH compris entre 6 et 8, préférentiellement entre 6,5 et 7,5.
L’hydrolyse enzymatique peut être réalisée avec une seule protéase ou alternativement avec un mélange d’enzymes contenant au moins une protéase, plus préférentiellement un mélange d’enzymes contenant plusieurs protéases, tel qu’un mélange contenant une endoprotéase et une exoprotéase, ou une protéase et une polysaccharase.
L’enzyme ou le mélange d’enzymes est introduit(e) à une quantité allant de 0,2 à 10% en poids, préférentiellement de 1 à 8% en poids, plus préférentiellement de 3 à 7% en poids par rapport au poids de cuticules (humides) soumises à l’hydrolyse enzymatique.
En termes d’activité enzymatique, la quantité d’enzyme ou de mélange d’enzymes introduite est équivalente à une activité comprise entre 2000 et 5000 SAPU (« Spectrophotometric Acid Protease Unit »), de préférence comprise entre 3000 et
4000 SAPU, pour 100 g en poids humide, avec une humidité de 30 à 70%, de substrat à transformer, c’est-à-dire de cuticules d’insectes.
Cette étape d’hydrolyse enzymatique des cuticules est plus amplement décrite dans l’étape 3 du procédé détaillé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention ci-après.
Le procédé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention comprend une étape de traitement basique du résidu solide, suite à l’étape d’hydrolyse enzymatique des cuticules.
Avantageusement, le traitement basique est réalisé à l’aide d’une base forte.
Avantageusement, la base forte est choisie parmi l’hydroxyde de sodium ou soude, de potassium, d’ammonium. De préférence, la base forte est l’hydroxyde de sodium.
De préférence, la base utilisée pour le traitement basique est sous forme d’une solution basique aqueuse.
Dans ce cas, la concentration molaire de la base en solution aqueuse est avantageusement comprise entre 0,1 et 5 mol.L-1, de préférence comprise entre 0,5 et 2 mol.L-1, encore plus préférentiellement égale à 1 mol.L-1 (par exemple soude molaire).
De préférence, la concentration de la base est ajustée de manière à obtenir un ratio base en poids sec en g : cuticules en poids sec en g : eau en poids en g compris entre 0,1 : 0,45 : 2 et 0,8 : 0,45 : 15, de préférence d’environ 0,36 : 0,45 : 9,23.
Cette étape de traitement basique des cuticules est plus amplement décrite dans l’étape 4 du procédé détaillé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention ci-après.
Avantageusement, l’étape de traitement basique des cuticules est suivie d’une étape de récupération de la chitine.
Cette étape de récupération de la chitine est plus amplement décrite dans l’étape 5 du procédé détaillé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention ciaprès.
Optionnellement, le procédé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention comprend en outre une étape de lavage de la chitine.
Cette étape optionnelle de lavage de la chitine est plus amplement décrite dans l’étape 6 du procédé détaillé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention ciaprès.
Optionnellement, le procédé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention comprend en outre une étape de séchage de la chitine.
Cette étape optionnelle de séchage de la chitine est plus amplement décrite dans l’étape 7 du procédé détaillé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention ci-après.
La chitine pouvant être commercialisée sous forme de poudre, le procédé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention peut optionnellement comprendre une étape de broyage de la chitine.
Cette étape optionnelle de broyage de la chitine est plus amplement décrite dans l’étape 8 du procédé détaillé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention ci-après.
L’étape de broyage peut également être effectuée afin de favoriser la réaction de désacétylation, qui permet de préparer du chitosan à partir de chitine.
L’étape de désacétylation, qui vise à transformer la chitine en chitosan, n’est donc mise en œuvre que lorsque le produit souhaité est le chitosan.
Cette étape de désacétylation de la chitine est plus amplement décrite à l’étape 9 du procédé détaillé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention ci-après.
Avantageusement, l’étape de désacétylation de la chitine est suivie d’une étape de récupération du chitosan.
Cette étape de récupération du chitosan est plus amplement décrite dans l’étape 10 du procédé détaillé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention ciaprès.
Optionnellement, le procédé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention comprend en outre une étape de séchage du chitosan.
Cette étape optionnelle de séchage du chitosan est plus amplement décrite à l’étape 11 du procédé détaillé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention ciaprès.
On notera que les étapes 6 à 8, 11 mentionnées ci-avant, et décrites plus amplement dans le procédé détaillé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention ci-après, sont optionnelles. Toutefois, le procédé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention comprend avantageusement une ou plusieurs de ces étapes, de préférence toutes ces étapes.
On notera par ailleurs que les caractéristiques des étapes 1 à 11 du procédé détaillé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention, qui sont décrites ciaprès, ne sont pas limitées à une mise en œuvre dans ledit procédé détaillé, mais s’appliquent à tous les modes de réalisation du procédé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention décrits dans la présente demande, indépendamment du nombre d’étapes prévu dans ces modes de réalisation.
Ces caractéristiques s’appliquent également à un procédé particulier d’obtention de chitine et à un procédé particulier d’obtention de chitosan selon l’invention, décrits ci-après.
L’invention vise donc plus particulièrement un procédé particulier d’obtention de chitine, à partir d’insectes, comprenant les étapes suivantes :
l’abattage des insectes,
- la séparation des cuticules de la partie molle des insectes, l’hydrolyse enzymatique des cuticules par une protéase, pour obtenir un résidu solide,
- le traitement basique du résidu solide, et
- la récupération de la chitine.
Ce procédé comprend donc les étapes 1 à 5 du procédé détaillé d’obtention de chitine et/ou chitosan ci-après et avantageusement une ou plusieurs des étapes optionnelles 6 à 8 de ce procédé détaillé.
L’invention concerne également la chitine susceptible d’être obtenue par le procédé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention, ou par le procédé particulier d’obtention de chitine selon l’invention.
L’invention vise donc également un procédé particulier d’obtention de chitosan, à partir d’insectes, comprenant les étapes suivantes :
l’abattage des insectes,
- la séparation des cuticules de la partie molle des insectes, l’hydrolyse enzymatique des cuticules par une protéase, pour obtenir un résidu solide,
- le traitement basique du résidu solide,
- la récupération de la chitine,
- la désacétylation de la chitine, et
- la récupération du chitosan.
Ce procédé comprend donc les étapes 1 à 5, 9 et 10 du procédé détaillé d’obtention de chitine et/ou de chitosan ci-après et avantageusement une ou plusieurs des étapes optionnelles 6 à 8, 11 de ce procédé détaillé.
L’invention concerne également le chitosan susceptible d’être obtenu par le procédé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention, ou par le procédé particulier d’obtention de chitosan selon l’invention.
La chitine et/ou le chitosan selon l’invention ainsi que la chitine et/ou le chitosan susceptible(s) d’être obtenu(s) par un procédé selon l’invention peu(ven)t avantageusement être utilisé(s) dans diverses applications :
- dans des compositions cosmétiques, pharmaceutiques, nutraceutiques ou diététiques,
- comme biomatériaux pour traiter des brûlures en tant que seconde peau, pour réaliser des pansements cornéens ou des fils chirurgicaux,
- comme agent filtrant, texturant, floculant et/ou adsorbant notamment pour la filtration et dépollution de l'eau.
Procédé détaillé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention • Etape 1 : Abattage des insectes
Cette étape 1 d’abattage peut avantageusement s’effectuer par choc thermique, tel que par ébouillantage ou par blanchiment. Cette étape 1 permet d’abattre les insectes tout en abaissant la charge microbienne (réduction du risque d’altération et sanitaire) et en inactivant les enzymes internes des insectes pouvant déclencher une autolyse, et ainsi un brunissement rapide de ceux-ci.
Pour l’ébouillantage, les insectes, de préférence des larves, sont ainsi ébouillantés à l’eau pendant 2 à 20 minutes, préférentiellement, 5 à 15 minutes. De préférence, l’eau est à une température comprise entre 87 à 100°C, préférentiellement 92 à 95°C.
La quantité d’eau introduite lors de l’ébouillantage est déterminée de la façon suivante : le ratio du volume d’eau en ml sur le poids en g d’insecte est de préférence compris entre 0,3 et 10, plus préférentiellement entre 0,5 et 5, encore plus préférentiellement entre 0,7 et 3, encore plus préférentiellement de l’ordre de 1.
Pour le blanchiment, les insectes, de préférence des larves, sont blanchis à l’eau ou à la vapeur (buses ou lit de vapeur) à une température comprise entre 80 et 105°C, de préférence entre 87 et 105°C, plus préférentiellement entre 95 et 100°C, encore plus préférentiellement 98°C ou bien à l’eau à une température comprise entre 90 et 100°C, préférentiellement entre 92 et 95°C (par buses d’aspersion) ou en mode mixte (eau + vapeur) à une température comprise entre 80 et 130 O, de préférence entre 90 et 120°C, plus préférentiellement entre 95 et 105Ό, encore plus préférentiellement 98°C. Lorsque les insectes sont blanchis uniquement à la vapeur, le blanchiment est avantageusement réalisé dans des blancheurs à vapeur à circulation forcée (« forced steaming »). Le temps de séjour dans la chambre de blanchiment est compris entre 5 secondes et 15 minutes, préférentiellement entre 1 et 7 minutes.
Avantageusement, suite à l’étape 1 d’abattage, les insectes sont directement utilisés pour la mise en œuvre de l’étape 2 de séparation des cuticules de la partie molle des insectes, c’est-à-dire que les insectes ne sont soumis à aucun traitement, tel qu’un broyage, une congélation ou une déshydratation entre l’étape 1 et l’étape 2.
• Etape 2 : Séparation des cuticules de la partie molle des insectes
L’étape 2 a pour objectif de séparer les cuticules de la partie molle des insectes.
La séparation des cuticules de la partie molle des insectes peut être effectuée à l’aide de tout type de séparateur adapté.
Selon un premier mode de réalisation, la séparation des cuticules de la partie molle est réalisée à l’aide d’un séparateur à bande.
Par « séparateur à bande >>, on vise un dispositif permettant la séparation de la partie solide de la partie molle d’un produit, et qui comporte une bande de serrage (ou bande presseuse) et un tambour perforé.
A titre d’exemple, un séparateur à bande peut comprendre une bande de serrage et un tambour perforé, la bande de serrage entourant au moins une partie du tambour perforé.
La bande de serrage permet l’apport et l’application des insectes contre le tambour perforé de sorte à faire passer, par pression, la partie molle des insectes à travers les perforations du tambour, tandis que la partie solide des insectes (cuticules) reste à l’extérieur du tambour.
Les cuticules peuvent ensuite être récupérées à l’aide d’un couteau racleur.
A titre d’exemple, on peut citer les séparateurs à bande provenant de la société Baader, tels que les séparateurs à bande 601 à 607 (« soft separator 601 to 607 >>), ou encore les séparateurs à bande SEPAmatic® de BFD Corporation (gamme 410 à 4000V).
Avantageusement, le diamètre des perforations du tambour est compris entre 0,5 et 3 mm, de préférence entre 1 et 2 mm.
Concernant la pression, l’homme du métier est à même de déterminer la pression à exercer permettant la séparation des cuticules de la partie molle des insectes.
Selon un second mode de réalisation, la séparation des cuticules de la partie molle est réalisée à l’aide d’un filtre presse.
Un filtre presse est composé de toiles filtrantes, et permet une séparation selon le principe de filtration sous pression.
Avantageusement, le filtre presse utilisé dans le procédé d’obtention de chitine et/ou chitosan selon l’invention est un filtre presse à bandes.
Un filtre presse à bandes comporte deux bandes de serrage perforées (également appelées « toiles filtrantes »). Les insectes sont placés entre les deux bandes de serrage perforées de sorte à faire passer, par pression, la partie molle des insectes à travers les perforations des bandes de serrage, tandis que la partie solide des insectes restent entre les deux bandes de serrage perforées.
L’homme du métier est à même de déterminer le diamètre des perforations des bandes de serrage ainsi que la pression à exercer, permettant la séparation des cuticules de la partie molle des insectes.
A titre d’exemple, on peut citer le filtre presse à bandes (ou « presse à bandes ») provenant de la société Flottweg, ou encore les filtres presses à bandes de la société ATR Créations.
Cette étape de séparation des insectes se distingue d’un pressage classique pouvant être réalisé par exemple avec une presse mono-vis ou bi-vis en ce qu’elle permet une séparation (nette) de la partie molle et des cuticules des insectes et non une séparation d’un jus d’une fraction solide.
Avantageusement, la séparation des cuticules de la partie molle des insectes est effectuée à l’aide d’un séparateur à bande.
Les cuticules obtenues dans l’étape 2 comportent entre 10 et 30%, de préférence entre 15 et 25% en poids de chitine, sur le poids sec total de cuticules.
La détermination du taux de chitine est effectuée par extraction de celle-ci. A titre d’exemple, une méthode de détermination du taux de chitine pouvant être utilisée est la méthode AOAC 991.43.
• Etape 3: Hydrolyse enzymatique des cuticules par une protéase
L’hydrolyse enzymatique est effectuée par une protéase ou peptidase. Dans la présente demande, les noms ou suffixes « peptidase » et « protéase » sont utilisés indifféremment pour désigner une enzyme lysant une liaison peptidique des protéines.
Avantageusement, l’hydrolyse enzymatique est effectuée pendant une durée comprise entre 3 et 10 heures, préférentiellement comprise entre 4 et 8 heures.
De préférence, l’hydrolyse enzymatique est réalisée à une température comprise entre 40 et 80°C, préférentiellement comprise entre 50 et 70 °C.
Avantageusement, l’hydrolyse enzymatique est réalisée à un pH compris entre 6 et 8, préférentiellement entre 6,5 et 7,5.
L’hydrolyse enzymatique peut être réalisée avec une seule protéase ou alternativement avec un mélange d’enzymes contenant au moins une protéase, plus préférentiellement un mélange d’enzymes contenant plusieurs protéases, tel qu’un mélange contenant une endoprotéase et une exoprotéase, ou une protéase et une 5 polysaccharase.
De préférence, la protéase est choisie parmi le groupe constitué par les aminopepdidases, les métallocarboxypeptidases, les endopeptidases sérine, les endopeptidases cystéine, les endopeptidases aspartiques, les métalloendopeptidases.
Avantageusement, les enzymes peuvent être choisies parmi les suivantes :
Enzyme(s) | Classe | Numéro EC | Fournisseur |
Flavourzyme | Amino-peptidases | EC 3.4.11.1 | Novozyme |
Fungal protease 500 | EC 3.4.11.1 | Bio-Cat | |
FoodPro PXT | Endo-peptidases sérine | EC 3.4.21 | Dupont Danisco |
Chymotrypsine | EC 3.4.21.1 | Novozyme | |
Protamex | EC 3.4.21 | Novozyme | |
Trypsine | EC 3.4.21.36 | Novozyme | |
Alcalase | EC 3.4.21.4 | Novozyme | |
Papaïne | Endo-peptidases cystéine | EC 3.4.22.2 | Bio-Cat |
Bromelaine (ananase) | EC 3.4.22.32 | Bio-Cat | |
Prolyve NP | Endo-peptidases aspartique | EC 3.4.23 | Lyven |
Pepsine | EC 3.4.23.1 | Sigma Aldrich | |
Neutral protéase | Métallo-endo-peptidase | EC 3.4.24.28 | Bio-Cat |
FoodPro PAL | Endo-peptidase fongique acide | EC 3.4.21 | Dupont Danisco |
Pancrealyve | Exo & endo peptidase (cocktail protéases + amylases) | n.a.* | Lyven |
Izyme B A | Protéase aspartique | EC 3.4.23 | Novozyme |
Sumizyme | Cocktail enzymatique | n.a.* | Takabio - Shin |
Enzyme(s) | Classe | Numéro EC | Fournisseur |
Nihon | |||
Neutrase | Endoprotéase base de Zn de β amyloliquefaciens | EC 3.4.24 | Novozyme |
Novozyme 37071 | Protéase | n.a.* | Novozyme |
*n.a. : non applicable
Avantageusement, l’enzyme mise en œuvre lors de l’hydrolyse est une endopeptidase aspartique, telle que la Prolyve NP.
L’enzyme ou le mélange d’enzymes est introduit(e) à une quantité allant de 0,2 à 10% en poids, préférentiellement de 1 à 8% en poids, plus préférentiellement de 3 à 7% en poids par rapport au poids de cuticules (humides) soumises à l’hydrolyse enzymatique.
En termes d’activité enzymatique, la quantité d’enzyme ou de mélange d’enzymes introduite est équivalente à une activité comprise entre 2000 et 5000 SAPU (« Spectrophotometric Acid Protease Unit »), de préférence comprise entre 3000 et 4000 SAPU, pour 100 g en poids humide, avec une humidité de 30 à 70%, de substrat à transformer, c’est-à-dire de cuticules d’insectes.
Il est usuel d’exprimer l’activité enzymatique d’une protéase en SAPU.
Cette activité enzymatique est mesurée en se basant sur le principe de la mesure de libération de la tyrosine à 275 nm lors de l’hydrolyse de la caséine par une enzyme protéolytique (Valley research SAPU Assay method, par Karen PRATT).
SAPU _ (ΔΑ-ί)χΙΙ g m x 30 x C x 1
SAPU/g = une unité spectrophotométrique de protéase
ΔΑ = absorbance corrélée i = ordonnée à l’origine = volume final de réaction
M = coefficient directeur de la courbe de calibration = temps de réaction (en minutes)
C = concentration de l’enzyme (g/mL) dans la solution enzymatique ajoutée = 1 mL volume de la solution d’enzyme ajoutée
L’activité enzymatique peut également être exprimée à l’aide de l’activité spécifique d’une enzyme.
L’activité spécifique d’une enzyme est l’activité catalytique exprimée en Unité
Internationale (I.U.) par unité de masse d’enzyme (par exemple : I.U./g d’enzyme). Avantageusement, la concentration de l’enzyme ou du mélange d’enzyme mis(e) en œuvre est comprise entre 100 et 250 I.U. par gramme de matière sèche de cuticules, de préférence entre 120 et 180 I.U. par gramme de matière sèche de cuticules.
Avantageusement, l’étape d’hydrolyse enzymatique s’effectue en présence d’eau, telle que de l’eau douce.
La quantité d’eau mise en œuvre lors de l’hydrolyse enzymatique est déterminée de la façon suivante : le ratio du volume d’eau en L sur le poids en g de cuticules humides est de préférence compris entre 0,01 et 5, plus préférentiellement entre 0,05 et 2, encore plus préférentiellement entre 0,1 et 1.
L’étape d’hydrolyse enzymatique est avantageusement réalisée sous agitation.
A l’issue de la réaction d’hydrolyse enzymatique des cuticules, le milieu réactionnel est ensuite séparé, afin de récupérer un résidu solide comprenant de la chitine et un hydrolysat.
L’étape de séparation peut être réalisée par toute méthode de séparation appropriée. Ces méthodes sont connues de l’homme du métier.
A titre d’exemple, il est possible d’utiliser un extracteur de jus, tel que ceux commercialisés par la société Angel®.
Le résidu solide récupéré est avantageusement homogénéisé, par exemple par mélangeage.
• Etape 4 : Traitement basique du résidu solide
Dans l’étape 4, le résidu solide récupéré à l’issue de l’étape 3 est soumis à un traitement basique, c’est-à-dire qu’il est mis en contact avec une base (ou agent basique).
Avantageusement, le traitement basique est réalisé à l’aide d’une base forte.
Avantageusement, la base forte est choisie parmi l’hydroxyde de sodium ou soude, de potassium, d’ammonium. De préférence, la base forte est l’hydroxyde de sodium.
De préférence, la base utilisée pour le traitement basique est sous forme d’une solution basique aqueuse.
Dans ce cas, la concentration molaire de la base en solution aqueuse est avantageusement comprise entre 0,1 et 5 mol.L-1, de préférence comprise entre 0,5 et 2 mol.L-1, encore plus préférentiellement égale à 1 mol.L-1 (par exemple soude molaire).
De préférence, la concentration de la base est ajustée de manière à obtenir un ratio base en poids sec en g : résidu solide en poids sec en g : eau en poids en g compris entre 0,1 : 0,45 : 2 et 0,8 : 0,45 : 15, de préférence d’environ 0,36 : 0,45 : 9,23.
Le traitement basique est avantageusement réalisé pendant une durée comprise entre 5 et 60 heures, de préférence pendant une durée comprise entre 5 et 50 heures.
La durée du traitement basique pourra avantageusement être adaptée selon les propriétés de la chitine que l’on souhaite obtenir, telles que sa blancheur (couleur blanche).
La durée du traitement basique pourra être inférieure à 40 heures, voire inférieure à 30 heures, telle que par exemple 24 heures.
Avantageusement, le traitement basique est réalisé à une température comprise entre 60 et 100 O, de préférence comprise entre 80 et 100°C, plus préférentiellement d’environ 90°C.
Pour cela, le milieu réactionnel peut, par exemple, être chauffé à l’aide d’un bain d’huile, d’un échangeur de chaleur ou d’un système de chauffage à double enveloppe, de sorte à atteindre la température souhaitée.
L’étape de traitement basique est avantageusement réalisée sous agitation.
• Etape 5: Récupération de la chitine
L’étape 5 de récupération de la chitine, à partir du milieu réactionnel obtenu à la fin de l’étape 4, peut être réalisée par toute méthode de récupération appropriée. Ces méthodes sont connues de l’homme du métier.
A titre d’exemple, on peut citer la filtration, la centrifugation et la décantation.
Avantageusement, la récupération de la chitine est réalisée par filtration.
• Etape (optionnelle) 6: Lavage de la chitine
La chitine récupérée à l’issue de l’étape 5 est ensuite optionnellement lavée.
L’étape 6 de lavage de la chitine est avantageusement réalisée à l’aide d’eau du robinet, de préférence tiède, c’est-à-dire dont la température est comprise entre 15 et 60°C.
De préférence, le lavage est réalisé jusqu’à neutralisation du pH.
• Etape (optionnelle) 7: Séchage de la chitine
La chitine est ensuite optionnellement séchée.
De préférence, l’étape de séchage est réalisée à une température comprise entre 40 et 105°C, de préférence à environ 60 °C.
L’étape de séchage est réalisée pendant une durée comprise entre 10 et 80 heures, de préférence pendant environ 24 heures.
Avantageusement, le séchage est réalisé à l’aide d’une étuve de séchage, telle que le modèle FED 115 de la société Binder®.
Afin de préparer du chitosan à partir de la chitine, les étapes suivantes peuvent en outre être réalisées :
• Etape (optionnelle) 8: Broyage de la chitine
La chitine obtenue à l’issue de l’étape 5, 6 ou 7 est ensuite optionnellement broyée, par exemple dans un broyeur ultracentrifuge à tamis.
La production de chitosan à partir de chitine, par la réaction de désacétylation, dépend en grande partie de la taille des particules de chitine. Ainsi, un broyage très fin de la chitine avant désacétylation permet d’augmenter significativement les rendements et la vitesse de la réaction de désacétylation, comme cela est illustré dans le Tableau 1 ci-après :
Broyage 30 s | Broyage 45 s | Broyage 60 s | Broyage 120 s | |
50% des particules | < 174 pm | < 117 pm | < 95 pm | < 67 pm |
90% des particules | < 310 pm | < 244 pm | < 157 pm | < 159 pm |
DA* | 99% | 90% | 85% | 80% |
*Mesure du Degré d’Acétylation DA
Tableau 1 : Efficacité de la désacétylation selon le broyage préalable de la chitine
Les conditions de la désacétylation effectuée dans l’essai rapporté dans le Tableau 1 sont les suivantes: 4 heures de réaction, 100°C, NaOH en solution aqueuse à 30% en volume, dans un ratio chitine estimée : solution de NaOH égal à 1:20.
Par conséquent, la chitine est préférentiellement broyée à une taille de particules inférieure à 200 pm, plus préférentiellement, inférieure à 160 pm.
• Etape 9: Désacétylation de la chitine
Cette étape n’est mise en œuvre que dans le cas où l’obtention de chitosan est souhaitée.
La chitine est ensuite placée dans un réacteur où est ajoutée une base.
Avantageusement, la désacétylation de la chitine est réalisée à l’aide d’une base forte.
Avantageusement, la base forte est choisie parmi l’hydroxyde de sodium ou soude, de potassium, d’ammonium. De préférence, la base forte est l’hydroxyde de sodium.
De préférence, la base utilisée pour le traitement basique est sous forme d’une solution basique aqueuse, de préférence une solution basique aqueuse concentrée.
Dans ce cas, la concentration molaire de la base en solution aqueuse est avantageusement comprise entre 8 et 19 mol.L-1, de préférence comprise entre 10 et 15 mol.L-1, encore plus préférentiellement égale à 12,5 mol.L-1.
De préférence, la concentration de la base est ajustée de manière à obtenir un ratio base en poids sec en g : cuticules en poids sec en g : eau en poids en g compris entre 18:1 : 35 et 30 : 1 : 55, de préférence d’environ 24 : 1 : 45.
De préférence, la désacétylation est réalisée pendant 1 à 24 heures et préférentiellement 2 à 18 heures.
Avantageusement, cette désacétylation est réalisée en deux fois, avec une étape intermédiaire de neutralisation du pH. Par exemple, la désacétylation pourra être réalisée en deux fois deux heures, c’est-à-dire pendant 4 heures, avec une étape intermédiaire de neutralisation du pH intermédiaire.
La température de désacétylation se situe avantageusement entre 80 et 150°C, de préférence entre 90 et 120 Ό et plus préférentiellement à 100 O.
• Etape 10 : Récupération du chitosan
L’étape 10 de récupération du chitosan, à partir du milieu réactionnel obtenu à la fin de l’étape 9, peut être réalisée par toute méthode de récupération appropriée. Ces méthodes sont connues de l’homme du métier.
A titre d’exemple, on peut citer la filtration, la centrifugation et la décantation.
Avantageusement, la récupération du chitosan est réalisée par filtration.
Dans le cas où l’étape 8 de broyage de la chitine est mise en œuvre, le chitosan récupéré est sous forme de poudre.
Le chitosan peut ensuite subir toute opération connue de l’homme du métier permettant de le fonctionnaliser, notamment par l’ajout de radicaux (carboxylation, hydroxylation...) • Etape (optionnelle) 11 : Séchage
Le chitosan, pouvant être sous forme de poudre, est ensuite optionnellement séché entre 30 et 80 °C, avantageusement entre 50 et 70 °C, de préférence à environ 60 °C, pour obtenir du chitosan ou une poudre de chitosan ayant une teneur en matière sèche supérieure à 85%, plus particulièrement supérieure à 90%.
L’invention sera mieux comprise au vu des exemples qui suivent, qui sont donnés à titre illustratif.
EXEMPLE 1 : Procédé d’obtention de chitine selon l’invention
I. Matériel et méthodes
Des larves de Tenebrio molitor ont été utilisées. A réception des larves, ces dernières peuvent être stockées à 4°C pendant 0 à 15 jours dans leurs bacs d’élevage avant l’abattage sans dégradation majeure. Le poids des larves (âge) utilisées est variable et par conséquent leur composition peut varier, comme cela est illustré dans le Tableau 2 ci-après :
Biomasse (insectes) | mg | 23 | 35 | 58 | 80 | 108 | 154 |
Matière sèche | %* | 34 | 34 | 34,2 | 37,9 | 39,6 | 39,5 |
Cendres | O/ * /0 | 1,59 | 1,52 | 1,6 | 1,75 | 1,67 | 1,43 |
Protéines brutes | o/ * /0 | 22,6 | 22,2 | 22 | 23,2 | 23,1 | 23,2 |
Lipides | o/ * /0 | 6,62 | 6,88 | 7,98 | 10,3 | 10,9 | 11,7 |
* Les % sont exprimés en poids sec sur le poids humide de larves.
Tableau 2 : Composition biochimique des larves de Tenebrio molitor selon leur poids.
• Etape 1 : Abattage des insectes
Les larves vivantes (+4°C à + 25°C) sont convoyées en couche d’épaisseur comprise entre 2 et 10 cm, sur un tapis à bande perforé (1 mm) jusqu’à une chambre de blanchiment. Les insectes sont ainsi blanchis à la vapeur (buses ou lit de vapeur) à 98°C sous ventilation forcée ou bien à l’eau à 92-95 Ό (buses d’aspersion) ou en mode mixte (eau + vapeur). Le temps de séjour dans la chambre de blanchiment est compris entre 5 secondes et 15 minutes, idéalement 5 minutes.
La température des larves en sortie de blanchiment est comprise entre 75°C et 98°C.
• Etape 2 : Séparation de la partie molle des cuticules des insectes
Les larves, une fois blanchies, sont convoyées jusqu’à la trémie d’alimentation d’un séparateur à bande, afin de séparer les cuticules de la partie molle des larves.
Avantageusement, la séparation s’effectue immédiatement après l’abattage de manière à ce que les larves n’aient pas le temps de refroidir à température ambiante.
Le séparateur à bande utilisé est un séparateur à bande 601 de la société
Baader.
Le diamètre des perforations du tambour est de 1,3 mm.
La partie molle des insectes est récupérée dans une cuve.
Les cuticules sont récupérées à l’aide d’un couteau racleur.
Le pourcentage de matière sèche des cuticules est d’environ 35-45%.
• Etape 3 : Hydrolyse enzymatique des cuticules par une protéase
Dans 1 tricol de 2 L muni d’un réfrigérant et d’un agitateur (Heidolph® RZR1), on place 160,015 ± 0.007 g de cuticules humides obtenues à l’étape 2 (Matière sèche = 38 ± 5%), 8 g de Prolyve® NP (5 % de la masse de cuticules humides) et 1,6 L ± 0.02 L d’eau chaude. Le milieu est chauffé avec un bain marie à une température de 60 ± 2°C pendant 6 heures. Ensuite, la température est portée à 80°C pendant 15 min. Le milieu réactionnel est ensuite séparé via extracteur de jus (Angelia 7500). Pendant toute la réaction, le milieu réactionnel est soumis à une agitation de 280 rpm. Le pH est compris entre 6 et 8, de préférence entre 6,5 et 7,5. L’activité spécifique de la Prolyve® NP est de 1132,1 I.U./g d’enzyme. On utilise 8 g de Prolyve® NP, soit 9056, 8 I.U pour 160,015 ± 0.007 g de cuticules humides (Matière sèche = 38 ± 5%). La concentration de l’enzyme est donc d’environ 149 I.U./g de matière sèche de cuticules.
On obtient 58 ± 2 g de résidu solide, et un hydrolysat. Le résidu solide est mélangé pour être homogène, pesé puis mis au réfrigérateur pour la nuit. L’hydrolysat est lyophilisé.
• Etape 4 : Traitement basique du résidu solide
Dans un tricol de 2 L muni d’un réfrigérant et d’un agitateur mécanique (Heidolph® RZR1), on place le résidu solide obtenu à l’étape 3 (Matière Sèche = 44 ± 16%) et 512,05 ± 0,02 mL de solution aqueuse d’hydroxyde de sodium de concentration égale à 1 mol.L-1. Le milieu est chauffé avec un bain d’huile à une température de 90 ± 2°C pendant 24 heures.
On utilise donc environ 0,02 L de solution aqueuse d’hydroxyde de sodium par gramme de matière sèche de résidu solide.
Le ratio base en poids sec en g : résidu solide en poids sec en g : eau en poids en g est environ égal à 0,36 : 0,45 : 9,23.
• Etape 5: Récupération de la chitine
Le milieu réactionnel obtenu à l’issue de l’étape 4 est ensuite filtré (Filtre SEFAR MEDIFAB® 03-60/42) de sorte à récupérer la chitine.
• Etape (optionnelle) 6: Lavage de la chitine
La chitine récupérée à l’issue de l’étape 5 est ensuite rincée à l’eau tiède du robinet jusqu’à neutralisation du pH.
• Etape (optionnelle) 7: Séchage de la chitine
La chitine est ensuite séchée pendant 24 heures, à 60°C, dans une étuve de séchage (Binder®, modèle FP53).
On obtient ainsi 9,6 ± 0,2 g de chitine.
II. Méthodes d’analyse
Mesure de la matière sèche et du taux d’humidité
Le pourcentage de matière sèche et le taux d’humidité sont calculés de la façon suivante.
g de chitine sont pesés dans des coupelles, introduits dans une étuve de séchage (Binder®, modèle FED 115) et séchés à 105 °C pendant 24 h (ou jusqu’à séchage complet).
Le pourcentage de matière sèche est obtenu en faisant le rapport de la masse sèche de chitine après séchage sur la masse de chitine avant séchage.
Le taux d’humidité est obtenu en ôtant le pourcentage de matière sèche à la valeur de 100%.
Cette méthode de mesure peut également être utilisée pour mesurer le pourcentage de matière sèche et le taux d’humidité des cuticules.
Mesure du taux de cendres
Le taux de cendres a été déterminé selon la méthode norme NF V18-101.
Mesure de la teneur en protéines brutes
Le taux de protéines est obtenu par la méthode Dumas, avec le coefficient de conversion de 6,25, adaptée de la norme NF EN ISO 16634-1.
Mesure de la teneur en lipides ou matières grasses
Le taux de lipides est obtenu par une méthode adaptée du règlement CE 152/2009 - procédé B - SN.
Teneur et abondance relative en acides aminés
La teneur en acides aminés de la chitine selon l’invention est de préférence déterminée selon la méthode NF EN ISO 13904 ou une méthode adaptée du règlement CE 152/2009 du 27-01-2009 - SN (ces deux méthodes étant équivalentes) pour le tryptophane, et selon la méthode NF EN ISO 13903 ou une méthode issue du règlement CE 152/2009 du 27-01-2009 - SN pour les autres acides aminés (ces deux méthodes étant équivalentes).
L’abondance relative a été calculée en rapportant la teneur de chaque acide aminé à la teneur totale en acides aminés.
Teneur totale en acides aminés
La teneur totale en acides aminés a été déterminée en additionnant les valeurs individuelles obtenues pour chaque acide aminé, y compris le tryptophane.
Pureté par différence
Dans le cas de cette mesure, les teneurs en impuretés connues (acides aminés, lipides et cendres) ont été soustraites à la valeur de pureté absolue (100%) pour obtenir la valeur de la pureté estimée par différence. Par exemple, un échantillon qui contient 30% d’acides aminés, 10% de lipides et 1% de cendres, se voit dès lors attribuer une pureté par différence de 100-30-10-1=59%
Masse moléculaire de la chitine
La masse moléculaire a été déterminée selon une méthode de mesure de la viscosité par chute de bille basée sur celle décrite dans la publication suivante : « Pacheco et al. ; Structural characterization of chitin and chitosan obtained by biological and chemical methods ; Biomacromolecules ; 12, 3285-3290, 2011 ».
III. Résultats
Les propriétés de la chitine obtenue sont présentées dans le Tableau 3 cidessous.
Cendres (g/100 g MS*) | 1,11 +/- 0,25 |
Matières grasses (g/100 g MS*) | 0 +/- 0,00 |
Teneur totale en aa (g/100 g MS*) | 0,72 +/- 0,08 |
Pureté par différence (%) | 98,16+/-0,33 |
Masse moléculaire (kg.mol·1) | 642 +/- 125 |
*MS : matière sèche
Tableau 3 : Propriétés de la chitine obtenue dans l’Exemple 1
L’abondance relative en acides aminés de la chitine obtenue est présentée dans le Tableau 4 ci-dessous. Elle est exprimée en %.
Threonine (Thr) | 0,00 |
Serine (Ser) | 0,00 |
Proline (Pro) | 0,00 |
Glycine (Glu) | 0,00 |
Acide glutamique (Glu) | 0,00 |
Alanine (Ala) | 0,00 |
Cystéine (Cys) | 6,88 |
Valine (Val) | 16,51 |
Méthionine (Met) | 0,00 |
Isoleucine (Ile) | 0,00 |
Acide aspartique (Asp) | 0,00 |
Leucine (Leu) | 0,00 |
Tyrosine (Tyr) | 0,00 |
Phénylalanine (Phe) | 0,00 |
Histidine (His) | 46,78 |
Lysine (Lys) | 29,58 |
Arqinine (Arq) | 0,00 |
Tryptophane (Trp) | 0,25 |
Total | 100,00 |
Tableau 4 : Abondance relative en acides aminés de la chitine obtenue dans l’Exemple
Trois acides aminés apparaissent particulièrement résistants au procédé, à savoir la valine, l’histidine et la lysine. Ils représentent en effet plus de 93% des acides aminés résiduels.
EXEMPLE 2 : Procédé d’obtention de chitosan selon l’invention
Pour préparer le chitosan, on utilise la chitine résultant de l’étape 5, 6 ou 7 de l’Exemple 1.
• Etape (optionnelle) 8: Broyage de la chitine
La chitine a été broyée dans un broyeur ultracentrifuge à tamis à une taille de 250 pm.
• Etape 9 : Désacétylation de la chitine
La chitine est ensuite placée dans un réacteur où est ajoutée une solution de soude concentrée. L’hydroxyde de sodium en solution aqueuse à une teneur de 35% (soit une concentration d’hydroxyde de sodium en solution aqueuse de 12,5 mol/L) est ajouté selon un ratio poids en g de chitine broyée / volume en mL d’hydroxyde de sodium en solution aqueuse égal à 1 :50. La cuve est ensuite chauffée à une température de 100 O. La réaction de désacétylation est réalisée pendant 2 fois 2 heures, avec une étape intermédiaire de neutralisation du pH.
• Etape 10: Récupération du chitosan
Le milieu réactionnel obtenu à l’issue de l’étape 9 est ensuite filtré (Filtre SEFAR MEDIFAB® 03-60/42) de sorte à récupérer du chitosan.
On obtient ainsi du chitosan en poudre.
Le chitosan obtenu a une pureté par différence supérieure à 98%.
La masse moléculaire du chitosan obtenu est égale à 307 +/- 60 kg.mol-1.
• Etape (optionnelle) 11 : Séchage
La poudre de chitosan est ensuite séchée à 60°C afin d’obtenir une poudre ayant une teneur en matière sèche supérieure à 85%.
EXEMPLE 3 : Procédé d’obtention de chitine comparatif
I. Matériel et méthodes • Etape 1 : Abattage des insectes
Cette étape est identique à celle de (Exemple 1.
• Etape 2 : Séparation des cuticules de la partie molle des insectes
Cette étape est identique à celle de (Exemple 1.
• Etape 3: Traitement basioue des cuticules
Dans un tricol de 2 L muni d’un réfrigérant et d’un agitateur mécanique (Heidolph® RZR1), on place 90,02 ± 0,02 g de cuticules humides obtenues à (étape 2 (Matière Sèche = 40,1 ± 0,1 %) et 1,80 ± 0,02 L de solution aqueuse d’hydroxyde de sodium de concentration égale à 1 mol.L-1. Le milieu est chauffé avec un bain d’huile à une température de 90 ± 2 °C pendant 48 heures. Pendant toute la réaction, le milieu réactionnel est soumis à une agitation de 280 rpm.
On utilise donc environ 0,05 L de solution aqueuse d’hydroxyde de sodium par gramme de matière sèche de cuticules.
Le ratio base en poids sec en g : cuticules en poids sec en g : eau en poids en g est environ égal à 0,9 :0,45 :22.
• Etape 4: Récupération de la chitine
Le milieu réactionnel obtenu à l’issue de l’étape 3 est ensuite filtré (Filtre SEFAR MEDIFAB® 03-60/42) de sorte à récupérer la chitine.
• Etape (optionnelle) 5: Lavage de la chitine
La chitine récupérée à l’issue de l’étape 4 est ensuite rincée à l’eau tiède du robinet jusqu’à neutralisation du pH.
• Etape (optionnelle) 6: Séchage de la chitine
La chitine est ensuite séchée pendant 24 heures, à 60°C, dans une étuve de séchage (Binder®, modèle FP53).
On obtient ainsi 6.3 ± 0.2 g de chitine.
II. Résultats
Les propriétés de la chitine obtenue à l’issue de l’étape 6 sont présentées dans le Tableau 5 ci-dessous.
Cendres (g/100 g MS*) | 1,71 +/- 0,11 |
Matières grasses (g/100 g MS*) | 0 +/- 0,00 |
Teneur totale en aa** (g/100 g MS*) | 0,68 +/- 0,003 |
Pureté par différence (%) | 97,61 +/-0,14 |
*MS : matière sèche **aa : acides aminés
Tableau 5 : Propriétés de la chitine obtenue dans l’Exemple 3
L’abondance relative en acides aminés de la chitine obtenue est présentée dans le Tableau 6 ci-dessous. Elle est exprimée en %.
Thréonine (Thr) | 0,00 |
Sérine (Ser) | 0,00 |
Proline (Pro) | 0,00 |
Glycine (Glu) | 0,00 |
Acide glutamique (Glu) | 0,00 |
Alanine (Ala) | 12,48 |
Cystéine (Cys) | 5,87 |
Valine (Val) | 8,07 |
Méthionine (Met) | 0,00 |
Isoleucine (Ile) | 0,00 |
Acide aspartique (Asp) | 0,00 |
Leucine (Leu) | 0,00 |
Tyrosine (Tyr) | 0,00 |
Phénylalanine (Phe) | 0,00 |
Histidine (His) | 44,77 |
Lysine (Lys) | 28,62 |
Arginine (Arg) | 0,00 |
Tryptophane (Trp) | 0,19 |
Total | 100,00 |
Tableau 6 : Abondance relative en acides aminés de la chitine obtenue dans l’Exemple acides aminés apparaissent particulièrement résistants au procédé, à savoir l’alanine, la cystéine, la valine, l’histidine et la lysine. L’histidine, la lysine et l’alanine 10 sont les 3 acides aminés les plus résistants. Ils représentent en effet plus de 85% des acides aminés résiduels.
Claims (15)
- REVENDICATIONS1. Chitine dont la pureté par différence est supérieure à 97,75%.
- 2. Chitine selon la revendication 1, comportant moins de 1,2% en poids d’acides aminés sur le poids sec total de chitine.
- 3. Chitine selon la revendication 1 ou 2, comportant moins de 2% en poids de cendres sur le poids sec total de chitine.
- 4. Chitosan dont la pureté par différence est supérieure à 97,75%.
- 5. Procédé d’obtention de chitine et/ou chitosan, à partir d’insectes, comprenant les étapes suivantes :- la séparation des cuticules de la partie molle des insectes, l’hydrolyse enzymatique des cuticules par une protéase, pour obtenir un résidu solide, et- le traitement basique du résidu solide.
- 6. Procédé selon la revendication 5, dans lequel la séparation des cuticules de la partie molle des insectes est effectuée à l’aide d’un séparateur à bande.
- 7. Procédé selon la revendication 5, dans lequel la séparation des cuticules de la partie molle des insectes est effectuée à l’aide d’un filtre presse.
- 8. Procédé selon l’une quelconque des revendications 5 à 7, dans lequel la protéase est choisie parmi le groupe constitué par les aminopepdidases, les métallocarboxypeptidases, les endopeptidases sérine, les endopeptidases cystéine, les endopeptidases aspartiques, les métalloendopeptidases.
- 9. Procédé selon l’une quelconque des revendications 5 à 8, dans lequel le traitement basique est réalisé avec une base forte.
- 10. Procédé d’obtention de chitine, à partir d’insectes, comprenant les étapes suivantes :l’abattage des insectes,- la séparation des cuticules de la partie molle des insectes, l’hydrolyse enzymatique des cuticules par une protéase, pour obtenir un résidu solide,- le traitement basique du résidu solide, et- la récupération de la chitine.
- 11. Chitine susceptible d’être obtenue par le procédé selon l’une quelconque des revendications 5 à 10.
- 12. Procédé d’obtention de chitosan, à partir d’insectes, comprenant les étapes suivantes :l’abattage des insectes,- la séparation des cuticules de la partie molle des insectes, l’hydrolyse enzymatique des cuticules par une protéase, pour obtenir un résidu solide,- le traitement basique du résidu solide,- la récupération de la chitine,- la désacétylation de la chitine, et- la récupération du chitosan.
- 13. Chitosan susceptible d’être obtenu par le procédé selon l’une quelconque des revendications 5 à 9, 12.RÉPUBLIQUE FRANÇAISEN° d'enregistrement nationalFA 849651FR 1762307 irai — I INSTITUT NATIONALDE LA PROPRIÉTÉINDUSTRIELLERAPPORT DE RECHERCHE PRÉLIMINAIRE établi sur la base des dernières revendications déposées avant le commencement de la rechercheEPO FORM 1503 12.99 (P04C14)DOCUMENTS CONSIDÉRÉS COMME PERTINENTSRevend ication(s) concernée(s)Classement attribué à l'invention par ΙΊΝΡΙCatégorieCitation du document avec indication, en cas de besoin, des parties pertinentesCN 1 594 368 A (GUIZHOU BOKANGBIOENGINEERING [CN])
- 16 mars 2005 (2005-03-16) * page 4, ligne 21 - page 5, ligne 11 *CN 104 045 739 B (TIANJIN TIENS BIOLOG DEVCO) 11 mai 2016 (2016-05-11) * exemple 2 *CN 106 749 761 A (GUANGXI BEIBUWAN PHARMACEUTICALS CO LTD)31 mai 2017 (2017-05-31) * exemples 1-3 *DATABASE WPIThomson Scientific, London, GB;AN 2ΘΘ9-ΑΘΘ914XP002783789,WU: Preparing chitin, chitosan and its oligosaccharide, involves performing micronization for materials, grinding granules into superfine powder, de-cal cifying superfine powder, zymohydrolysis and removing protein to obtain chitin, & CN 101 144 097 A (CHONGQING BAIAO DIKE MICRO ECOLOGY TECHN)
- 19 mars 2008 (2008-03-19) * le document en entier *FR 3 031 115 Al (YNSECT [FR])1 juillet 2016 (2016-07-01) * page 2, ligne 13 - page 3, ligne 21 * * page 4, lignes 1-21 * * page 9, ligne 26 - page 10, ligne 25 *CATÉGORIE DES DOCUMENTS CITÉSX : particulièrement pertinent à lui seulY : particulièrement pertinent en combinaison avec un autre document de la même catégorieA : arrière-plan technologiqueO : divulgation non-écriteP : document intercalaire4,134,131-3,115,10-131-13C08B37/08C12P19/26DOMAINES TECHNIQUES RECHERCHÉS (IPC)C08BC08LC12PExaminateurLartigue, M & : membre de la même famille, document correspondantDate d'achèvement de la recherche13 août 2018T : théorie ou principe à la base de l'inventionE : document de brevet bénéficiant d'une date antérieure à la date de dépôt et qui n'a été publié qu'à cette date de dépôt ou qu'à une date postérieure.D : cité dans la demandeL : cité pour d'autres raisons page 1 de 2RÉPUBLIQUE FRANÇAISEN° d'enregistrement nationalFA 849651FR 1762307 irai — I INSTITUT NATIONALDE LA PROPRIÉTÉINDUSTRIELLERAPPORT DE RECHERCHE PRÉLIMINAIRE établi sur la base des dernières revendications déposées avant le commencement de la rechercheDOCUMENTS CONSIDÉRÉS COMME PERTINENTSRevend ication(s) concernée(s)Classement attribué à l'invention par ΙΊΝΡΙCatégorieCitation du document avec indication, en cas de besoin, des parties pertinentesNitar Nwe ET AL: Chitin and Chitosan from Terrestrial OrganismsIn: Chitin, Chitosan, Oligosaccharides and Their Dérivatives: Biological Activities and Applications,1 octobre 2010 (2010-10-01), CRC Press, XP055221223,ISBN: 978-1-4398-1603-5 pages 3-10, DOI: 10.1201/EBK1439816035-C1, * 1.2.2 Extraction of Chitin and Chitosan from Insects * * tableau 1.1 *1-13EPO FORM 1503 12.99 (P04C14)CATÉGORIE DES DOCUMENTS CITÉSX : particulièrement pertinent à lui seulY : particulièrement pertinent en combinaison avec un autre document de la même catégorieA : arrière-plan technologiqueO : divulgation non-écriteP : document intercalaireDOMAINES TECHNIQUES RECHERCHÉS (IPC)ExaminateurLartigue, M & : membre de la même famille, document correspondantDate d'achèvement de la recherche13 août 2018T : théorie ou principe à la base de l'inventionE : document de brevet bénéficiant d'une date antérieure à la date de dépôt et qui n'a été publié qu'à cette date de dépôt ou qu'à une date postérieure.D : cité dans la demandeL : cité pour d'autres raisons page 2 de 2ANNEXE AU RAPPORT DE RECHERCHE PRÉLIMINAIRERELATIF A LA DEMANDE DE BREVET FRANÇAIS NO. FR 1762307 FA 849651La présente annexe indique les membres de la famille de brevets relatifs aux documents brevets cités dans le rapport de recherche préliminaire visé ci-dessus.Les dits membres sont contenus au fichier informatique de l'Office européen des brevets à la date du 13- 08-2018Les renseignements fournis sont donnés à titre indicatif et n'engagent pas la responsabilité de l'Office européen des brevets, ni de l'Administration française
Priority Applications (6)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FR1762307A FR3075205B1 (fr) | 2017-12-15 | 2017-12-15 | Chitine et procede d'obtention de chitine et/ou chitosan par voie enzymo-chimique |
EP18839829.1A EP3724234A1 (fr) | 2017-12-15 | 2018-12-13 | Chitine et procédé d'obtention de chitine et/ou chitosan par voie enzymo-chimique |
US16/772,423 US11958918B2 (en) | 2017-12-15 | 2018-12-13 | Chitin and process for producing chitin and/or chitosan by the enzymatic and chemical pathway |
PCT/FR2018/053285 WO2019115970A1 (fr) | 2017-12-15 | 2018-12-13 | Chitine et procédé d'obtention de chitine et/ou chitosan par voie enzymo-chimique |
TW107145284A TW201927826A (zh) | 2017-12-15 | 2018-12-14 | 幾丁質以及酶化學製備幾丁質及/或幾丁聚醣之方法 |
US18/404,047 US20240150498A1 (en) | 2017-12-15 | 2024-01-04 | Chitin and process for producing chitin and/or chitosan by the enzymatic and chemical pathway |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FR1762307 | 2017-12-15 | ||
FR1762307A FR3075205B1 (fr) | 2017-12-15 | 2017-12-15 | Chitine et procede d'obtention de chitine et/ou chitosan par voie enzymo-chimique |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FR3075205A1 true FR3075205A1 (fr) | 2019-06-21 |
FR3075205B1 FR3075205B1 (fr) | 2020-11-06 |
Family
ID=62017386
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FR1762307A Active FR3075205B1 (fr) | 2017-12-15 | 2017-12-15 | Chitine et procede d'obtention de chitine et/ou chitosan par voie enzymo-chimique |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US11958918B2 (fr) |
EP (1) | EP3724234A1 (fr) |
FR (1) | FR3075205B1 (fr) |
TW (1) | TW201927826A (fr) |
WO (1) | WO2019115970A1 (fr) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR3060947A1 (fr) * | 2016-12-28 | 2018-06-29 | Ynsect | Procede de traitement d'insectes comprenant la separation des cuticules de la partie molle des insectes puis la separation de la partie molle en trois fractions |
FR3105261A1 (fr) * | 2019-12-19 | 2021-06-25 | Ynsect | Procédé d’obtention de chitine et/ ou de chitosan mettant en œuvre deux hydrolyses enzymatiques |
CN112062875B (zh) * | 2020-07-13 | 2022-09-23 | 宁夏大学 | 一种谷婪步甲甲壳素提取与脱色方法 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1594368A (zh) * | 2004-06-30 | 2005-03-16 | 贵州博康生物工程有限公司 | 低耗高收率高纯甲壳素的生产方法 |
CN101144097A (zh) * | 2007-09-18 | 2008-03-19 | 重庆百奥帝克微生态科技有限公司 | 一种制备甲壳素及其壳聚糖和壳寡糖的方法 |
CN104045739B (zh) * | 2013-09-29 | 2016-05-11 | 天津天狮生物发展有限公司 | 一种酶解制备几丁聚糖的方法 |
FR3031115A1 (fr) * | 2014-12-31 | 2016-07-01 | Ynsect | Production de chitine a partir d'insectes par hydrolyse enzymatique comportant une combinaison d'etapes prealables |
CN106749761A (zh) * | 2016-12-29 | 2017-05-31 | 广西北部湾制药股份有限公司 | 从虾蟹中提取甲壳素的工艺 |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2067588C1 (ru) * | 1991-09-17 | 1996-10-10 | Борис Александрович Кузин | Способ получения хитозана |
FR3031114B1 (fr) * | 2014-12-31 | 2018-01-26 | Ynsect | Procede de production de chitine par hydrolyse enzymatique avec traitement prealable avec un agent oxydant |
-
2017
- 2017-12-15 FR FR1762307A patent/FR3075205B1/fr active Active
-
2018
- 2018-12-13 EP EP18839829.1A patent/EP3724234A1/fr active Pending
- 2018-12-13 WO PCT/FR2018/053285 patent/WO2019115970A1/fr unknown
- 2018-12-13 US US16/772,423 patent/US11958918B2/en active Active
- 2018-12-14 TW TW107145284A patent/TW201927826A/zh unknown
-
2024
- 2024-01-04 US US18/404,047 patent/US20240150498A1/en active Pending
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1594368A (zh) * | 2004-06-30 | 2005-03-16 | 贵州博康生物工程有限公司 | 低耗高收率高纯甲壳素的生产方法 |
CN101144097A (zh) * | 2007-09-18 | 2008-03-19 | 重庆百奥帝克微生态科技有限公司 | 一种制备甲壳素及其壳聚糖和壳寡糖的方法 |
CN104045739B (zh) * | 2013-09-29 | 2016-05-11 | 天津天狮生物发展有限公司 | 一种酶解制备几丁聚糖的方法 |
FR3031115A1 (fr) * | 2014-12-31 | 2016-07-01 | Ynsect | Production de chitine a partir d'insectes par hydrolyse enzymatique comportant une combinaison d'etapes prealables |
CN106749761A (zh) * | 2016-12-29 | 2017-05-31 | 广西北部湾制药股份有限公司 | 从虾蟹中提取甲壳素的工艺 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
"Chitin, Chitosan, Oligosaccharides and Their Derivatives: Biological Activities and Applications", 1 October 2010, CRC PRESS, ISBN: 978-1-4398-1603-5, article NITAR NWE ET AL: "Chitin and Chitosan from Terrestrial Organisms", pages: 3 - 10, XP055221223, DOI: 10.1201/EBK1439816035-c1 * |
DATABASE WPI Derwent World Patents Index; AN 2009-A00914, XP002783789, WU: "Preparing chitin, chitosan and its oligosaccharide, involves performing micronization for materials, grinding granules into superfine powder, de-calcifying superfine powder, zymohydrolysis and removing protein to obtain chitin" * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2019115970A1 (fr) | 2019-06-20 |
FR3075205B1 (fr) | 2020-11-06 |
EP3724234A1 (fr) | 2020-10-21 |
TW201927826A (zh) | 2019-07-16 |
US20240150498A1 (en) | 2024-05-09 |
US20210070889A1 (en) | 2021-03-11 |
US11958918B2 (en) | 2024-04-16 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CA2970707C (fr) | Chitine, hydrolysat et procede de production de produit(s) d'interet a partir d'insectes par hydrolyse enzymatique | |
EP3240903B1 (fr) | Production de chitine et/ou de chitosan par hydrolyse enzymatique avec traitement préalable avec un agent oxydant | |
EP3240904B1 (fr) | Production de chitine et/ou de chitosan à partir d'insectes par hydrolyse enzymatique comportant une combinaison d'étapes préalables | |
FR3060947A1 (fr) | Procede de traitement d'insectes comprenant la separation des cuticules de la partie molle des insectes puis la separation de la partie molle en trois fractions | |
FR3075205A1 (fr) | Chitine et procede d'obtention de chitine et/ou chitosan par voie enzymo-chimique | |
FR3075204A1 (fr) | Chitine et procede d'obtention de chitine et/ou chitosan par voie chimique | |
FR3060946A1 (fr) | Procede de traitement d'insectes comprenant la separation des cuticules de la partie molle des insectes a l'aide d'un separateur a bande | |
EP4077701B1 (fr) | Procédé d'obtention de chitine et/ou de chitosan mettant en oeuvre deux hydrolyses enzymatiques | |
WO2018122353A1 (fr) | Procede de traitement d'insectes comprenant la separation des cuticules de la partie molle des insectes a l'aide d'un separateur a bande |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 2 |
|
PLSC | Publication of the preliminary search report |
Effective date: 20190621 |
|
PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 3 |
|
PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 4 |
|
PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 5 |
|
PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 6 |
|
PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 7 |