FR3044870A1 - Appat rodonticide comprenant du difenacoum, procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles et procede d'obtention - Google Patents
Appat rodonticide comprenant du difenacoum, procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles et procede d'obtention Download PDFInfo
- Publication number
- FR3044870A1 FR3044870A1 FR1562176A FR1562176A FR3044870A1 FR 3044870 A1 FR3044870 A1 FR 3044870A1 FR 1562176 A FR1562176 A FR 1562176A FR 1562176 A FR1562176 A FR 1562176A FR 3044870 A1 FR3044870 A1 FR 3044870A1
- Authority
- FR
- France
- Prior art keywords
- difenacoum
- enantiomer
- bait
- configuration
- rodenticide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000006010 Difenacoum Substances 0.000 title claims abstract description 201
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 title claims abstract description 70
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 33
- FVQITOLOYMWVFU-UHFFFAOYSA-N Difenacoum Chemical compound O=C1OC=2C=CC=CC=2C(O)=C1C(C1=CC=CC=C1C1)CC1C(C=C1)=CC=C1C1=CC=CC=C1 FVQITOLOYMWVFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 title description 2
- NZOWVZVFSVRNOR-UHFFFAOYSA-N difenacoum Chemical compound OC=1OC2=CC=CC=C2C(=O)C=1C(C1=CC=CC=C1C1)CC1C(C=C1)=CC=C1C1=CC=CC=C1 NZOWVZVFSVRNOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 201
- 239000003128 rodenticide Substances 0.000 claims abstract description 143
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 45
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract description 30
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 claims abstract description 25
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 claims description 18
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 16
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 13
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 11
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 claims description 7
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 claims description 7
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 claims description 7
- SBTVLCPCSXMWIQ-UHFFFAOYSA-N (3,5-dimethylphenyl) carbamate Chemical compound CC1=CC(C)=CC(OC(N)=O)=C1 SBTVLCPCSXMWIQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 6
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims description 6
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims description 6
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 5
- 231100001160 nonlethal Toxicity 0.000 claims description 5
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 5
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000004464 cereal grain Substances 0.000 claims 2
- KSOVGRCOLZZTPF-QMKUDKLTSA-N (1s,2s,3r,4r)-3-[[5-fluoro-2-[3-methyl-4-(4-methylpiperazin-1-yl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]bicyclo[2.2.1]hept-5-ene-2-carboxamide Chemical compound N([C@H]1[C@H]([C@@]2([H])C[C@@]1(C=C2)[H])C(N)=O)C(C(=CN=1)F)=NC=1NC(C=C1C)=CC=C1N1CCN(C)CC1 KSOVGRCOLZZTPF-QMKUDKLTSA-N 0.000 abstract description 23
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 33
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 18
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 11
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 11
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 10
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 8
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000001119 rodenticidal effect Effects 0.000 description 6
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 6
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 6
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 5
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 4
- VWTINHYPRWEBQY-UHFFFAOYSA-N denatonium Chemical compound [O-]C(=O)C1=CC=CC=C1.C=1C=CC=CC=1C[N+](CC)(CC)CC(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C VWTINHYPRWEBQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 4
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 4
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 4
- 230000014508 negative regulation of coagulation Effects 0.000 description 4
- 235000020374 simple syrup Nutrition 0.000 description 4
- 125000005329 tetralinyl group Chemical group C1(CCCC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 4
- -1 1,2,3,4-tetrahydro-1-naphthyl Chemical group 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 229960001610 denatonium benzoate Drugs 0.000 description 3
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 3
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 3
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 3
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 3
- 244000060011 Cocos nucifera Species 0.000 description 2
- 235000013162 Cocos nucifera Nutrition 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 2
- 108010009736 Protein Hydrolysates Proteins 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 2
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 2
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 2
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 2
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 2
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 2
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 2
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 2
- 229940040511 liver extract Drugs 0.000 description 2
- 238000002552 multiple reaction monitoring Methods 0.000 description 2
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 238000005375 photometry Methods 0.000 description 2
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 2
- 241000208140 Acer Species 0.000 description 1
- 235000010319 Acer grandidentatum Nutrition 0.000 description 1
- 235000010328 Acer nigrum Nutrition 0.000 description 1
- 235000002629 Acer saccharinum Nutrition 0.000 description 1
- 235000010157 Acer saccharum subsp saccharum Nutrition 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 1
- VEUZZDOCACZPRY-UHFFFAOYSA-N Brodifacoum Chemical compound O=C1OC=2C=CC=CC=2C(O)=C1C(C1=CC=CC=C1C1)CC1C(C=C1)=CC=C1C1=CC=C(Br)C=C1 VEUZZDOCACZPRY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 241000723382 Corylus Species 0.000 description 1
- 235000007466 Corylus avellana Nutrition 0.000 description 1
- 240000003133 Elaeis guineensis Species 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 240000004658 Medicago sativa Species 0.000 description 1
- 235000017587 Medicago sativa ssp. sativa Nutrition 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 235000019482 Palm oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 1
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 1
- 235000019484 Rapeseed oil Nutrition 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UHFFFAOYSA-N Rohrzucker Natural products OCC1OC(CO)(OC2OC(CO)C(O)C(O)C2O)C(O)C1O CZMRCDWAGMRECN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000000111 Saccharum officinarum Species 0.000 description 1
- 235000007201 Saccharum officinarum Nutrition 0.000 description 1
- 244000228451 Stevia rebaudiana Species 0.000 description 1
- 235000019486 Sunflower oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000895 acaricidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000642 acaricide Substances 0.000 description 1
- 239000010775 animal oil Substances 0.000 description 1
- 239000003698 antivitamin K Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 238000012550 audit Methods 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 235000019658 bitter taste Nutrition 0.000 description 1
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 1
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000002498 deadly effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 235000021323 fish oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 230000003370 grooming effect Effects 0.000 description 1
- 239000010903 husk Substances 0.000 description 1
- 239000002917 insecticide Substances 0.000 description 1
- 229960004903 invert sugar Drugs 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000003801 milling Methods 0.000 description 1
- 235000014571 nuts Nutrition 0.000 description 1
- 239000002540 palm oil Substances 0.000 description 1
- 235000021400 peanut butter Nutrition 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 1
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 1
- 235000008476 powdered milk Nutrition 0.000 description 1
- 244000062645 predators Species 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N rebaudioside A Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N 0.000 description 1
- 239000004627 regenerated cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000011343 solid material Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 235000012069 sugar maple Nutrition 0.000 description 1
- 239000002600 sunflower oil Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 235000021147 sweet food Nutrition 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 235000019871 vegetable fat Nutrition 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 238000003260 vortexing Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
- C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
- C07D311/42—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms in positions 2 and 4
- C07D311/44—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms in positions 2 and 4 with one hydrogen atom in position 3
- C07D311/46—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms in positions 2 and 4 with one hydrogen atom in position 3 unsubstituted in the carbocyclic ring
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
- A01N43/02—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms
- A01N43/04—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom
- A01N43/14—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom six-membered rings
- A01N43/16—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom six-membered rings with oxygen as the ring hetero atom
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Dentistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Catching Or Destruction (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
L'invention concerne un appât rodonticide comprenant du difénacoum et au moins un excipient comestible pour des rongeurs cibles nuisibles, caractérisé en ce qu'il comprend un stéréo-isomère de configuration, dit énantiomère E1, du difénacoum, à l'exclusion d'un mélange racémique dudit énantiomère E1 et d'un stéréo-isomère de configuration, dit énantiomère E4, du difénacoum ; - ledit énantiomère E1 présentant par analyse chromatographique de difénacoum comprenant quatre stéréo-isomères de configuration, effectuée dans des conditions décrites ci-après, un temps de rétention t1 ; - ledit énantiomère E4 présentant par analyse chromatographique de difénacoum comprenant quatre stéréo-isomères de configuration, effectuée dans ces mêmes conditions, un temps de rétention t4 ; t1 et t4 étant de valeur telle que t1 < t2 < t3 < t4 ; t2 et t3 étant les temps de rétention des stéréo-isomères de configuration du difénacoum distincts dudit énantiomère E1 et dudit énantiomère E4, ladite analyse étant réalisée à la température de 23,4°C.
Description
APPÂT RODONTICIDE COMPRENANT DU DIFÉNACOUM, PROCÉDÉ DE LUTTE CONTRE DES RONGEURS CIBLES NUISIBLES ET PROCÉDÉ D’OBTENTION L'invention concerne un appât rodonticide comprenant un stéréo-isomère de configuration du difénacoum et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles dans lequel on utilise un tel appât rodonticide. L’invention concerne aussi un procédé d’obtention de stéréo-isomères de configuration du difénacoum. L’invention concerne donc le domaine technique de la lutte contre le développement de populations de rongeurs cibles nuisibles.
Il est connu d’utiliser des appâts rodonticides faisant office de poison pour des rongeurs cibles nuisibles. On sait de EP 2 090 164 que le difénacoum est un anticoagulant de deuxième génération agissant à simple dose. On connaît aussi des appâts rodonticides et des procédés permettant de lutter contre des rongeurs nuisibles. Un tel appât rodonticide comprend par exemple du difénacoum dans une proportion massique de 50 mg par kilogramme (0,005 %, 50 ppm) d’appât. En particulier, WO93/01712 décrit des appâts rodonticides comprenant du difénacoum à 0,0025 % ou 0,005 % (en poids) sous forme de granulés connus sous le nom "Klerat pellets" et conditionnés dans un sachet en papier et imprégné de benzoate de dénatonium à titre d’agent d’amertume.
Un tel appât est cependant susceptible d’être consommé par des animaux autres que des rongeurs cibles nuisibles lorsqu’il est mis à la disposition de rongeurs cibles nuisibles. Il peut être consommé directement (consommation primaire) par des animaux domestiques ou des animaux de compagnie. Il peut aussi être consommé accidentellement par des humains susceptibles de débarrasser ledit appât de son sachet imprégné de benzoate de dénatonium. Une telle consommation peut produire chez ces animaux domestiques, chez ces animaux de compagnie ou chez des humains un empoisonnement qui peut être létal.
En outre, une fraction du difénacoum de ces appâts rodonticides peut être ingérée (consommation secondaire) par des animaux -notamment par des oiseaux- prédateurs de rongeurs nuisibles affaiblis ayant consommé un tel appât rodonticide ou par des animaux charognards de rongeurs nuisibles morts d’avoir consommé un tel appât rodonticide. Cette consommation secondaire est susceptible d’entraîner à terme la mort de ces animaux prédateurs ou charognards qui peuvent être des animaux -notamment des oiseaux-appartenant à des espèces protégées. L’invention vise donc à pallier ces inconvénients en proposant un appât rodonticide comprenant un stéréo-isomère de configuration du difénacoum et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles qui sont efficaces pour contrôler les populations de rongeurs cibles et dont la mise en œuvre est en accord avec les règles de bon usage -notamment vis à vis de la protection des oiseaux, et en particulier des rapaces-. L’invention vise aussi à proposer un appât rodonticide comprenant un stéréo-isomère de configuration du difénacoum et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles qui sont susceptibles de pouvoir être utilisés à faible dose de difénacoum et qui sont respectueux de l’environnement, de la santé humaine et des animaux non cibles -notamment des oiseaux-. L’invention vise aussi à proposer un appât rodonticide comprenant un stéréo-isomère de configuration du difénacoum et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles qui sont efficaces même à dose réduite de difénacoum. L’invention vise aussi à proposer un appât rodonticide comprenant un stéréo-isomère de configuration du difénacoum et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles qui sont susceptibles de pouvoir être utilisés pour lutter contre des rongeurs cibles nuisibles résistants à des appâts rodonticides connus. L’invention vise aussi à proposer une alternative à des substances et des appâts rodonticides connus.
Pour ce faire, l'invention concerne un appât rodonticide comprenant du difénacoum et au moins un excipient comestible pour des rongeurs cibles nuisibles, caractérisé en ce qu’il comprend un stéréo-isomère de configuration, dit énantiomère El5 du difénacoum, à l’exclusion d’un mélange racémique dudit énantiomère Ej et d’un stéréo-isomère de configuration, dit énantiomère E4, du difénacoum ; - ledit énantiomère Ei présentant par analyse chromatographique d’une composition de difénacoum comprenant quatre stéréo-isomères de configuration du difénacoum effectuée dans des conditions décrites ci-après, un temps de rétention ti ; - ledit énantiomère E4 présentant par analyse chromatographique d’une composition de difénacoum comprenant quatre stéréo-isomères de configuration du difénacoum effectuée dans ces mêmes conditions, un temps de rétention t4 ; ti et t4 étant de valeur telle que t4 < t2 < t3 < t4 ; t2 et t3 étant les temps de rétention des stéréo-isomères de configuration du difénacoum distincts dudit énantiomère Ei et dudit énantiomère E4, ladite analyse étant réalisée à la température de 23,4°C et dans les conditions suivantes : o avec une colonne pour chromatographie liquide à haute pression de dimensions 150 x 2 mm, et renfermant une phase stationnaire chirale constituée de particules poreuses de cellulose tris(3,5-diméthylphénylcarbamate), lesdites particules étant d’une taille moyenne de 3 pm et présentant une taille moyenne de pores de 1000 À ; o en utilisant, à titre de phase mobile liquide, un mélange formé de méthanol (A) et d’eau comprenant de l’acide formique en proportion volumique de 0,1% dans l’eau (B), avec un rapport volumique A/B de 93/7, avec un débit de 0,25 mL/min dans la colonne de chromatographie ; o par injection dans la colonne de chromatographie d’un volume de 1 pL de composition de difénacoum à une concentration de 1 pg de difénacoum par millilitre d’acétonitrile.
Dans tout le texte : - le terme «difénacoum» désigne le 3-(biphényl-4-yl)-l-(4-hydroxycoumarin-3-yl)-1,2,3,4-tétrahydronaphtalène ou 3-(biphényl-4-yl-
l,2,3,4-tétrahydro-l-naphtyl)-4-hydroxycoumarine, aussi nommé 2-hydroxy-3-[3-(4-phénylphényl)-l-tétralinyl]-4-chroménone dans la nomenclature IUPAC ("International Union of Pure and Applied Chemistry"). Le difénacoum est de formule (I) développée ci-après :
(i); dans laquelle sont représentés les numéros des carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalène ; - le terme « stéréo-isomères » désigne des isomères de même formule semi-développée, mais dont la position relative des atomes diffère dans l’espace. On désigne par « stéréo-isomères de configuration » les stéréo-isomères dont la conversion de l’un en l’autre de ces stéréo-isomères de configuration nécessite une rupture/reformation d’une liaison covalente interatomique. Ainsi, on désigne par « stéréo-isomères de configuration », les stéréo-isomères qui ne sont pas des isomères de conformation (ou « rotamères », dont la conversion de l’un en l’autre des isomères de conformation s’accompagne uniquement d’une rotation d’une partie de la molécule selon l’axe d’une liaison σ (sigma) formée par recouvrement axial d’orbitales) ; - le terme « quantité » s’entend d’une quantité molaire, d’une quantité massique ou d’une quantité volumique. Les proportions sont donc des proportions d’une quantité molaire rapportée à une quantité molaire, d’une quantité massique rapportée à une quantité massique, ou d’une quantité volumique rapportée à une quantité volumique ; - le terme « sensiblement » indique, de façon habituelle, qu'une caractéristique structurelle ou fonctionnelle ne doit pas être prise comme marquant une discontinuité abrupte, qui n'aurait pas de sens physique, mais couvre non seulement cette structure ou cette fonction, mais également des variations légères de cette structure ou de cette fonction qui produisent, dans le contexte technique considéré, un effet de même nature, sinon de même degré ; - les expressions « chromatographie liquide à haute pression » ou « chromatographie liquide à haute performance » (« CLHP ») désignent la chromatographie « HPLC » pour « High Performance Liquid Chromatography », et ; - l’expression « temps de rétention » désigne la durée, mesurée au sommet du pic de chromatogramme, pendant laquelle un composé est retenu sur une colonne de chromatographie. L’invention concerne donc un appât rodonticide comprenant dudit énantiomère Ei, à l’exclusion d’un mélange racémique dudit énantiomère Et et dudit énantiomère E4, c'est-à-dire à l’exclusion d’un appât rodonticide dans lequel ledit énantiomère Ei et ledit énantiomère E4 sont en mélange équimoléculaire et non optiquement actif.
On évalue les quantités respectives dudit énantiomère E, et dudit énantiomère E4 dans l’appât rodonticide, par exemple, par analyse chromatographique du difénacoum de l’appât rodonticide dans les conditions précitées, en réalisant une détection quantitative des énantiomères des diastéréoisomères du difénacoum en sortie de colonne séparative, par exemple par photométrie ou spectrophotométrie d’absorption, en ajustant la concentration en difénacoum et le volume d’injection aux fins d’obtenir une détection optimale et en mesurant la valeur de l’aire sous le pic de chaque énantiomère Ei et E4. Il est aussi possible de doser ledit énantiomère Ei et ledit énantiomère E4 de toute composition comprenant du difénacoum en réalisant une détection par spectrométrie de masse en sortie de colonne séparative, chaque énantiomère du difénacoum présentant la même masse. L’invention concerne donc un appât rodonticide comprenant dudit énantiomère Ei, à l’exclusion d’un mélange racémique dudit énantiomère Ei et dudit énantiomère E4. Les inventeurs ont observé que l’analyse de difénacoum par chromatographie liquide à haute pression dans les conditions décrites ci-dessus fait apparaître quatre signaux ou pics correspondant à quatre composés de même formule chimique développée et correspondant à la formule (I) du difénacoum.
Ils ont déterminé, par l’analyse de préparations de difénacoum comprenant des proportions variables des deux diastéréoisomères du difénacoum, que deux des signaux détectés correspondent à l’un des diastéréoisomères du difénacoum, les deux autres signaux correspondant à l’autre diastéréoisomère du difénacoum. Ils ont déterminé que les deux composés correspondant au signal présentant un temps de rétention (ti) de valeur la plus faible et de l’ordre de 17,2 min et au signal présentant un temps de rétention (t4) de valeur la plus élevée et de l’ordre de 25,2 min correspondent aux deux énantiomères (Ei et E4) de l’un des diastéréoisomères, dit diastéréoisomère DL4, du difénacoum. Les deux composés correspondant au signal présentant un temps de rétention (t2) de valeur de l’ordre de 18,2 min et au signal présentant un temps de rétention (t3) de valeur de l’ordre de 23,5 min correspondent aux deux énantiomères (E2 et E3) de l’autre des diastéréoisomères, dit diastéréoisomère D2;3, du difénacoum. Ainsi, dans ces conditions expérimentales, l’ordre d’élution des énantiomères du difénacoum est tel que ti < t2 < t3 < t4. L’un des deux diastéréoisomères du difénacoum est un stéréo-isomère de configuration du difénacoum dans lequel les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalène du difénacoum sont de même configuration absolue et l’autre des deux diastéréoisomères du difénacoum est un stéréo-isomère de configuration du difénacoum dans lequel les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalène du difénacoum sont de configurations absolues distinctes. Les configurations absolues des carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalène du difénacoum sont définie selon les règles séquentielles de priorité et la nomenclature de Cahn, Ingold et Prelog (CIP).
La valeur du temps (ti) de rétention dudit énantiomère Ei est comprise entre 16,3 min et 17,3 min et peut varier dans cette plage selon les conditions opératoires, notamment selon les conditions de température de la colonne. La valeur du temps (t2) de rétention dudit énantiomère E2 est comprise entre 16,9 min et 18,7 min et peut varier dans cette plage selon les conditions opératoires, notamment selon les conditions de température de la colonne. La valeur du temps (t3) de rétention dudit énantiomère E3 est comprise entre 20,4 min et 23,5 min et peut varier dans cette plage selon les conditions opératoires, notamment selon les conditions de température de la colonne. La valeur du temps (t4) de rétention dudit énantiomère E4 est comprise entre 22,2 min et 25,3 min et peut varier dans cette plage selon les conditions opératoires, notamment selon les conditions de température de la colonne.
Les valeurs des temps de rétention ti, t2, t3 et t4 sont susceptibles de varier selon des variations des conditions chromatographiques et notamment avec la température de la colonne de chromatographie. Cependant, dans ces conditions chromatographiques, l’ordre d’élution des stéréo-isomères de configuration du difénacoum reste inchangé.
Ledit énantiomère Ei est donc obtenu sous une forme isolée et séparée dudit diastéréoisomère D2.3 et sous une forme isolée et séparée dudit énantiomère E4. Les inventeurs ont réalisé une telle séparation par chromatographie liquide à haute pression sur colonne chirale LUX® Cellulose-1 (00L-4458-B0, phenomenex®, Le Pecq, Lrance). Le cas échéant, il est possible de réaliser successivement plusieurs étapes de chromatographie liquide à haute pression sur colonne chirale aux fins d’obtenir la quantité dudit énantiomère E, recherchée à la pureté souhaitée. Les inventeurs ont démontré qu’il est possible de réaliser une telle séparation par chromatographie liquide à haute pression sur colonne chirale préparative de plus grandes dimensions -notamment de diamètre intérieur supérieur à 2 mm- et dans laquelle la phase stationnaire présente une granulométrie supérieure à 3 pm.
Dans un procédé de séparation analytique des énantiomères -notamment desdits énantiomères Ei et E4 -, il est possible de détecter lesdits énantiomères en sortie de colonne chromatographie liquide à haute pression par spectrométrie de masse en tandem (MS/MS) en mode d’ionisation négative par électronébulisation (ESI, « ElectroSpray Ionization »). La température du gaz nébuliseur est de 350°C et son débit est de 8 L/min. La pression du gaz nébuliseur est portée à 2700 hPa. En particulier, on détecte les transitions MRM («Multiple Reaction Monitoring » m/z 443,1 —» 293,1 avec une énergie de collision à 37 eV et m/z 443,1 —> 135,1 avec une énergie de collision à 37 eV correspondant aux signaux du difénacoum.
Les inventeurs ont observé que les diastéréoisomères du difénacoum n’ont pas la même rémanence hépatique chez des rongeurs cibles nuisibles et que ledit diastéréoisomère DL4 est le diastéréoisomère du difénacoum qui est le plus rémanent dans le foie de rongeurs cibles, notamment de rongeurs cibles nuisibles. Ils ont observé que ledit diastéréoisomère DL4 d’un appât rodonticide selon l’invention, lorsqu’il est ingéré par un rongeur cible nuisible, disparait du foie du rongeur cible nuisible ayant consommé un tel appât selon l’invention moins rapidement que ledit diastéréoisomère D2>
Les inventeurs qui sont parvenus à séparer ledit énantiomère Ei et ledit énantiomère E4 et à isoler ledit énantiomère Ei ont aussi découvert que ledit énantiomère Ei présente : - une activité anticoagulante plus élevée que l’activité anticoagulante dudit énantiomère E4, et aussi plus élevée que les activités anticoagulantes des deux énantiomères dudit diastéréoisomère D2,3, et ; - une rémanence dans le foie de rongeurs cibles nuisibles auxquels dudit énantiomère Ei a été administré, supérieure à la rémanence dans le foie de rongeurs cibles nuisibles dudit énantiomère E4 et supérieure à la rémanence dans le foie de rongeurs cibles nuisibles de chaque énantiomère dudit diastéréoisomère D2,3-
Ainsi, ledit énantiomère Ei permet la réalisation d’appâts rodonticides selon l’invention présentant une efficacité rodonticide élevée pour une quantité de difénacoum réduite. De tels appâts rodonticides sont donc plus efficaces que des appâts connus à même quantité de difénacoum.
De tels appâts rodonticides sont susceptibles de pouvoir être utilisés pour lutter contre des populations de rongeurs cibles nuisibles résistants à des traitements rodonticides connus.
Avantageusement et selon l’invention, ledit énantiomère Ei présente dans l’appât rodonticide une quantité supérieure à la quantité dudit énantiomère E4 dans l’appât rodonticide. Ledit diastéréoisomère D14 est majoritairement sous forme dudit énantiomère Ei dans l’appât rodonticide. Avantageusement, un appât rodonticide selon l’invention comprend du diastéréoisomère D14 majoritairement sous forme dudit énantiomère Ei et un excipient comestible pour des rongeurs cibles nuisibles.
Dans tout le texte, l’expression « ledit diastéréoisomère D1;4 est majoritairement sous forme dudit énantiomère E,» signifie que le rapport de la quantité (massique, molaire ou volumique) dudit énantiomère Ei sur la quantité (massique, molaire ou volumique correspondante) dudit diastéréoisomère Di)4 (sous toutes ses formes énantiomères) est supérieur à 50%.
Ainsi, en particulier dans un appât rodonticide selon l’invention : - le rapport de la quantité dudit énantiomère Ei sur la somme de la quantité dudit énantiomère Ei et de la quantité dudit énantiomère E4 est supérieur à 0,5 (supérieur à 50 %) ; - le rapport de la concentration dudit énantiomère Ei sur la somme de la concentration dudit énantiomère Ei et de la concentration dudit énantiomère E4 est supérieur à 0,5 (supérieur à 50 %), et ; - la proportion dudit énantiomère Ei dans l’appât rodonticide est supérieure à la proportion de dudit énantiomère E4.
Avantageusement et selon l’invention, l’appât rodonticide comprend une quantité dudit énantiomère Ei supérieure à la quantité dudit énantiomère E4.
Avantageusement et selon l’invention, l’appât rodonticide comprend une quantité dudit énantiomère E, telle que le rapport de cette quantité sur la somme de la quantité dudit énantiomère E, et de la quantité dudit énantiomère E4 présents dans l’appât rodonticide est supérieur à 50%, notamment supérieur à 60%, en particulier supérieur à 70%, plus particulièrement supérieur à 80%, de préférence supérieur à 90%, plus préférentiellement supérieur à 95%, particulièrement préférentiellement supérieur à 98%, encore plus préférentiellement supérieur à 99% ou de l’ordre de 100%.
Dans un mode particulier de réalisation, avantageusement et selon l’invention, l’appât rodonticide comprend une quantité dudit énantiomère Ei telle que le rapport de cette quantité sur la somme de la quantité dudit énantiomère Ei et de la quantité dudit énantiomère E4 présents dans l’appât rodonticide est supérieur à 75 %, de préférence compris entre 85 % et 100 %, plus préférentiellement compris entre 90 % et 98 %.
Dans un autre mode de réalisation, avantageusement et selon l’invention, l’appât rodonticide comprend une quantité dudit énantiomère Ei telle que le rapport de cette quantité sur la somme de la quantité dudit énantiomère Ei et de la quantité dudit énantiomère E4 présents dans l’appât rodonticide est compris entre 98 % et 100 %. L’invention concerne donc un appât rodonticide dans laquelle ledit diastéréoisomère Dl4 est majoritairement sous forme dudit énantiomère E,. L’appât rodonticide peut aussi comprendre une quantité dudit énantiomère E4 telle que le rapport de cette quantité sur la somme de la quantité dudit énantiomère Ei et de la quantité dudit énantiomère E4 présents dans l’appât rodonticide est inférieur à 50 %, notamment inférieur à 25 %, préférentiellement compris entre 0 % et 25 %, en particulier inférieur à 10 %. L’appât rodonticide peut être sensiblement exempt dudit énantiomère E4, c’est à dire que ledit énantiomère E4 peut éventuellement être présent dans la composition mais seulement à l’état de traces. L’appât rodonticide selon l’invention peut aussi être sensiblement exempt dudit diastéréoisomère D23, c’est à dire que ledit diastéréoisomère D23 peut éventuellement être présent dans la composition mais seulement à l’état de traces.
Avantageusement et selon l’invention, le difénacoum est majoritairement sous forme dudit énantiomère Ei dans l’appât rodonticide. L’appât rodonticide comprend donc une quantité dudit énantiomère Ei telle que le rapport de cette quantité sur la quantité du difénacoum dans l’appât rodonticide est supérieur au rapport de la quantité dudit énantiomère E4 sur la quantité du difénacoum dans l’appât rodonticide et supérieur au rapport de la quantité de chaque énantiomère dudit diastéréoisomère D2 3 sur la quantité du difénacoum dans l’appât rodonticide.
Ainsi, en particulier, dans un appât rodonticide selon l’invention : - le rapport de la quantité dudit énantiomère Ei sur la quantité du difénacoum est supérieur à 0,25 (supérieur à 25 %) ; - le rapport de la quantité dudit énantiomère Ei sur la somme des quantités de chacun des énantiomères dudit diastéréoisomère Di;4 et de chacun des énantiomères dudit diastéréoisomère D2 3 est supérieur à 0,25 (supérieur à 25 %) ; - le rapport de la concentration dudit énantiomère Ei dans l’appât rodonticide sur la concentration du difénacoum dans l’appât rodonticide est supérieur à 0,25 (supérieur à 25 %) ; - la proportion dudit énantiomère Ei dans l’appât rodonticide est supérieure à la proportion de chacun des énantiomères dudit diastéréoisomère D2,3 dans l’appât rodonticide et dudit énantiomère E4 dans l’appât rodonticide.
Avantageusement et selon l’invention, l’appât rodonticide comprend une quantité dudit énantiomère Ei telle que le rapport de cette quantité sur la quantité du difénacoum dans l’appât rodonticide est supérieur à 25%, notamment supérieur à 50%, en particulier supérieur à 70%, plus particulièrement supérieur à 80%, de préférence supérieur à 90%, particulièrement préférentiellement supérieur à 95%, plus préférentiellement supérieur à 98%, encore plus préférentiellement supérieur à 99% ou de l’ordre de 100%.
Dans un mode particulier de réalisation, avantageusement et selon l’invention, l’appât rodonticide comprend une quantité dudit énantiomère Ei telle que le rapport de cette quantité sur la quantité du difénacoum dans l’appât rodonticide est supérieur à 70 %, de préférence compris entre 80 % et 100 %, plus préférentiellement compris entre 90 % et 100 %.
Dans un autre mode de réalisation, avantageusement et selon l’invention, l’appât rodonticide comprend une quantité dudit énantiomère Ei telle que le rapport de cette quantité sur la quantité du difénacoum dans l’appât rodonticide est compris entre 95 % et 99 %.
Dans un autre mode de réalisation particulier, avantageusement et selon l’invention, l’appât rodonticide comprend une quantité dudit énantiomère Ei telle que le rapport de cette quantité sur la quantité du difénacoum dans l’appât rodonticide est supérieur à 95%.
Dans un autre mode de réalisation, avantageusement et selon l’invention, l’appât rodonticide comprend une quantité dudit énantiomère Ei telle que le rapport de cette quantité sur la quantité du difénacoum dans l’appât rodonticide est compris entre 98% et 100 % -bornes incluses-.
Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux selon l’invention, l’appât rodonticide comprend une quantité dudit énantiomère Ei telle que le rapport de cette quantité sur la quantité du difénacoum dans l’appât rodonticide est sensiblement de l’ordre de 100 %.
Avantageusement, un appât rodonticide selon l’invention comprend une quantité massique de difénacoum telle que le rapport (proportion massique) de cette quantité massique de difénacoum sur la quantité massique de l’appât rodonticide est inférieur à 50 ppm -c’est-à-dire inférieur à 50 mg de difénacoum par kilogramme d’appât rodonticide-. Avantageusement, le rapport de cette quantité massique sur la quantité massique d’appât rodonticide est supérieur à 1 ppm. Avantageusement, le rapport de cette quantité massique sur la quantité massique d’appât rodonticide est compris entre 1 ppm et 50 ppm (1 mg à 50 mg de difénacoum par kilogramme d’appât rodonticide), notamment compris entre 1 ppm et 40 ppm (1 mg à 40 mg de difénacoum par kilogramme d’appât rodonticide), en particulier compris entre 1 ppm et 25 ppm (1 mg à 25 mg de difénacoum par kilogramme d’appât rodonticide), de préférence compris entre 1 ppm et 15 ppm (1 mg à 15 mg de difénacoum par kilogramme d’appât rodonticide).
Avantageusement, un appât rodonticide selon l’invention comprend une quantité dudit énantiomère E, telle que le rapport de cette quantité sur la quantité du difénacoum dans l’appât est supérieur à 70%, plus particulièrement supérieur à 80%, de préférence supérieur à 90%, particulièrement préférentiellement supérieur à 95%, plus préférentiellement supérieur à 98%, encore plus préférentiellement supérieur à 99% ou de l’ordre de 100%, et du difénacoum en proportion massique inférieure à 30 ppm par rapport à l’appât.
Avantageusement et selon l’invention, l’excipient comestible pour des rongeurs cibles nuisibles est choisi pour permettre une consommation de l’appât par des rongeurs cibles nuisibles. Avantageusement et selon l’invention, chaque excipient comestible est non létal pour des rongeurs cibles nuisibles. L’excipient comestible n’est pas rodonticide en lui-même.
Avantageusement et selon l’invention, l’excipient comestible comprend au moins un aliment choisi dans le groupe formé des graines de céréale -notamment des graines de céréale décortiquées-, des moutures de graines de céréale, des farines de graines de céréale, des flocons de graines de céréale, du son de céréales et des graines non céréalières, par exemple des graines de luzerne -notamment sous forme décortiquée, sous forme de mouture, sous forme de farine, sous forme de flocons ou de son-. L’excipient comestible peut comprendre tout support susceptible d'être consommé par des rongeurs cibles nuisibles.
Avantageusement, l’excipient comestible comprend au moins un aliment choisi dans le groupe formé des aliments d’origine végétale et des aliments d’origine animale. Avantageusement, l’excipient comestible comprend au moins un aliment choisi pour stimuler l’appétit des rongeurs cibles nuisibles. En particulier, cet aliment est choisi dans le groupe formé de graines d’une ou de plusieurs céréales, de graines décortiquées d’une ou de plusieurs céréales, des moutures de graines d’une ou de plusieurs céréales, des flocons de graines d’une ou de plusieurs céréales, du son d’une ou de plusieurs céréales et des farines de graines d’une ou de plusieurs céréales. À titre d’exemple, on choisit les céréales dans le groupe formé de l'avoine, du blé, de l'orge, du maïs, du soja et du riz.
Avantageusement, l’aliment est choisi dans le groupe formé des aliments sucrés. Par exemple, il peut s’agir d’aliments comprenant au moins un sucre choisi dans le groupe formé du saccharose, du lactose, du fructose et du glucose. Il peut s’agir d’un sirop de sucre -par exemple, d’un sirop de sucre obtenu par hydrolyse de l'amidon- ou d’un sirop de sucre obtenu par hydrolyse de saccharose (sirop de sucre inverti), ou d’un sirop de sucre de betterave, ou d’un sirop d'érable ou d’un sirop de canne à sucre, ou d’un sirop obtenu à partir d’une plante du genre stevia.
Avantageusement, l’aliment est choisi dans le groupe formé des flocons et de la farine de l’albumen de noix de coco (coprah).
Avantageusement, l’aliment est choisi dans le groupe formé des noix, des noisettes et des amandes -râpées et/ou en poudre-.
Avantageusement, l’aliment est choisi dans le groupe formé des graisses végétales, des huiles végétales (par exemple huile de colza, graisse de soja, huile de tournesol, beurre de cacao, huile d'arachides, beurre d'arachides, huile de maïs, huile de palme), des graisses animales et des huiles animales (beurre, saindoux, huile de poisson).
Avantageusement, l’aliment est choisi dans le groupe formé des protéines d’origine végétale et des protéines d’origine animale. À titre d’exemple, on peut citer par exemple le lait en poudre -notamment le lait écrémé en poudre-, les œufs -notamment les œufs en poudre-, les hydrolysats de protéines d’origine animale et les hydrolysats de protéines d’origine végétale.
Avantageusement et selon l’invention, l’appât rodonticide est choisi dans le groupe formé des appâts solides comprenant du difénacoum et un excipient comestible solide. Avantageusement, l’appât rodonticide est un solide à l’état divisé, par exemple sous forme de boulettes ou de granulés. Avantageusement, l’appât rodonticide peut être un solide sous forme de bloc ou de pâte susceptibles d’être consommés par les rongeurs cibles nuisibles ou d’un matériau solide susceptible d’être rongé par les rongeurs cibles nuisibles. Avantageusement, l’appât rodonticide solide selon l’invention peut se présenter sous forme d’un bloc rigide, d’un bloc semi-rigide, d’une mousse, d’une poudre ou d’un gel.
Avantageusement, l’appât rodonticide se présentant sous forme d’une poudre, sous forme d’une mousse ou sous forme d’un gel est adapté pour pouvoir souiller la fourrure du(de) rongeur(s) cible(s) nuisible(s) et pour pouvoir être ingérée par celui(ceux)-ci lors de son(leur) toilettage.
Il peut s’agir d’un appât rodonticide solide comprenant du difénacoum, à l’exclusion d’un mélange racémique dudit énantiomères Ei et dudit énantiomère E4. Il peut aussi s’agir d’un appât rodonticide solide comprenant du difénacoum dans lequel la quantité dudit énantiomère Ei est supérieure à la quantité dudit énantiomères E4. Il peut aussi s’agir d’un appât rodonticide solide comprenant du difénacoum et dans lequel le difénacoum est majoritairement sous forme dudit énantiomère E^
Avantageusement et selon l’invention, l’appât rodonticide est choisi dans le groupe formé des appâts liquides comprenant du difénacoum et un excipient comestible liquide. L’appât rodonticide est alors une boisson pour des rongeurs cibles nuisibles. Il peut s’agir d’une solution de difénacoum dans un solvant du difénacoum, à l’exclusion d’un mélange racémique dudit énantiomère Ei et dudit énantiomère E4. Il peut aussi s’agir d’une solution de difénacoum dans un solvant du difénacoum et dans laquelle ledit diastéréoisomère D14 est majoritairement sous forme dudit énantiomère E^ Il peut aussi s’agir d’une solution de difénacoum dans un solvant du difénacoum et dans laquelle le difénacoum est majoritairement sous forme dudit énantiomère E^
Il peut aussi s’agir d’une suspension de difénacoum à l’état solide dans un milieu liquide. Il peut aussi s’agir d’une émulsion de difénacoum dans un milieu liquide. L’invention concerne donc aussi un appât rodonticide comprenant dudit énantiomère E1? à l’exclusion d’un mélange racémique dudit énantiomère Ei et dudit énantiomère E4, le difénacoum de l’appât rodonticide étant optiquement actif. Il n’est cependant pas exclu que le difénacoum de l’appât rodonticide selon l’invention, comprenant dudit énantiomère Ei, à l’exclusion d’un mélange racémique dudit énantiomère Ei et dudit énantiomère E4, soit lui-même optiquement inactif.
Avantageusement, l’appât rodonticide comprend au moins un colorant. Un tel colorant permet en particulier de donner audit appât rodonticide une couleur aisément détectable et identifiable par une personne manipulant l’appât rodonticide.
Avantageusement, l’appât rodonticide comprend au moins un conservateur apte à assurer sa conservation lors de son stockage. Avantageusement, l’appât rodonticide comprend au moins un composé amérisant, par exemple du type benzoate de dénatonium -aussi connu sous le nom de « Bitrex® »- et destiné à réduire les risques de consommation accidentelle par des organismes non-cible.
Avantageusement, dans une variante particulière, l’appât rodonticide selon l’invention comprend exclusivement du difénacoum à titre de substance rodonticide. En particulier, l’appât rodonticide selon l’invention est exempt de toute autre substance anticoagulante à usage rodonticide distincte du difénacoum. Cependant, dans cette variante selon l’invention, l’appât rodonticide peut comprendre toute substance anti-nuisible autre qu’un rodonticide, telle qu’une substance insecticide et/ou acaricide.
Avantageusement, dans une autre variante particulière, l’appât rodonticide selon l’invention comprend du difénacoum à l’exclusion d’un mélange racémique dudit énantiomère Ei et dudit énantiomère E4 et au moins une autre substance distincte du difénacoum à titre de substance rodonticide. Cette autre substance rodonticide distincte du difénacoum peut être une autre substance anticoagulante -notamment du type anti-vitamine K ou non- ou une autre substance rodonticide non anticoagulante. L’invention concerne aussi un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles, dans lequel on dissémine une quantité d’appât rodonticide comprenant du difénacoum et au moins un excipient comestible pour des rongeurs cibles nuisibles, caractérisé en ce qu’il comprend un stéréo-isomère de configuration, dit énantiomère E1? du difénacoum, à l’exclusion d’un mélange racémique dudit énantiomère Ei et d’un stéréo-isomère de configuration, dit énantiomère E4, du difénacoum ; - ledit énantiomère Ei présentant par analyse chromatographique d’une composition de difénacoum comprenant quatre stéréo-isomères de configuration du difénacoum effectuée dans des conditions décrites ci-après, un temps de rétention tj ; - ledit énantiomère E4 présentant par analyse chromatographique d’une composition de difénacoum comprenant quatre stéréo-isomères de configuration du difénacoum effectuée dans ces mêmes conditions, un temps de rétention t4 ; ti et t4 étant de valeur telle que t4 < t2 < t3 < t4 ; t2 et t3 étant les temps de rétention des stéréo-isomères de configuration du difénacoum distincts dudit énantiomère Ei et dudit énantiomère E4, ladite analyse étant réalisée à la température de 23,4°C et dans les conditions suivantes : o avec une colonne pour chromatographie liquide à haute pression de dimensions 150 x 2 mm, et renfermant une phase stationnaire chirale constituée de particules poreuses de cellulose tris(3,5-diméthylphénylcarbamate), lesdites particules étant d’une taille moyenne de 3 pm et présentant une taille moyenne de pores de 1000 À ; o en utilisant, à titre de phase mobile liquide, un mélange formé de méthanol (A) et d’eau comprenant de l’acide formique en proportion volumique de 0,1% dans l’eau (B), avec un rapport volumique A/B de 93/7, avec un débit de 0,25 mL/min dans la colonne de chromatographie ; o par injection dans la colonne de chromatographie d’un volume de 1 pL de composition de difénacoum à une concentration de 1 pg de difénacoum par millilitre d’acétonitrile. L’invention concerne aussi un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles dans lequel on dissémine une quantité d’appât rodonticide selon l’invention, ladite quantité d’appât étant suffisante pour être rodonticide.
Avantageusement et selon l’invention, on dissémine une quantité d’appât rodonticide comprenant une quantité dudit énantiomère Ei supérieure à la quantité dudit énantiomère E4. On dissémine une quantité d’appât rodonticide comprenant dudit diastéréoisomère D, 4 majoritairement sous forme dudit énantiomère Ei, c’est-à-dire du stéréo-isomère de configuration du difénacoum le moins retenu sur une colonne de chromatographie liquide à haute pression dans les conditions définies ci-dessus. Dans un tel procédé, avantageusement et selon l’invention, le difénacoum est majoritairement sous forme dudit énantiomère E^ Dans un tel procédé, on dissémine une quantité de difénacoum réduite (l’appât étant faiblement dosé en substance rodonticide), l’appât présentant cependant une efficacité rodonticide suffisante.
Avantageusement et en variante selon l’invention, on choisit en combinaison : l’excipient comestible ; une proportion dudit énantiomère Ei par rapport audit diastéréoisomère D14 ; une proportion dudit énantiomère E, par rapport au difénacoum ; une proportion massique de difénacoum dans l’appât rodonticide, et ; une quantité d’appât disséminé ; de façon que des rongeurs cibles nuisibles consomment une quantité de difénacoum suffisante pour être létale pour lesdits rongeurs cibles nuisibles consommant dudit appât au cours d’une période unique de 24 heures consécutives.
Un appât rodonticide selon cette variante de l’invention est un appât mortel en une seule prise ou « one-shot » en anglais. Avantageusement et selon cette variante de l’invention, la proportion massique du difénacoum dans l’appât est comprise entre 15 ppm et 50 ppm.
Avantageusement et dans une autre variante selon l’invention, on choisit en combinaison : l’excipient comestible ; une proportion dudit énantiomère Ei par rapport audit diastéréoisomère D14 ; une proportion dudit énantiomère Ei par rapport au difénacoum ; une proportion massique de difénacoum dans l’appât rodonticide, et ; une quantité d’appât disséminé ; de façon que des rongeurs cibles nuisibles consomment une quantité de difénacoum ; o non létale pour des rongeurs cibles nuisibles, c’est-à-dire généralement non létale pour les rongeurs cibles nuisibles, consommant dudit appât pendant une période de 24 heures consécutives, et ; o suffisante pour être létale pour des rongeurs cibles nuisibles consommant dudit appât pendant plusieurs périodes de 24 heures.
Avantageusement et selon l’invention lesdites périodes sont consécutives
Cette autre variante de l’invention vise donc aussi un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles dans lequel on dissémine une quantité d’appât rodonticide choisie pour être létale pour des rongeurs cibles nuisibles consommant durablement cet appât rodonticide et généralement non létale pour des rongeurs ou des animaux non cibles consommant accidentellement cet appât rodonticide. On parle alors d’un procédé de lutte « multi-doses » ou, en anglais, « multi-feeding ». Dans un tel procédé selon l’invention, la consommation d’appât rodonticide par un rongeur cible nuisible pendant une durée de 24 heures est insuffisante pour entraîner la mort dudit rongeur, alors qu’une consommation répétée d’appât rodonticide pendant au moins deux jours consécutifs permet d’entraîner la mort du rongeur cible nuisible.
Cette autre variante de l’invention vise donc un procédé de lutte contre une population de rongeurs cibles nuisibles dans lequel on met à disposition des rongeurs cibles nuisibles une quantité d’appât rodonticide susceptible d’être ingérée par les rongeurs cibles nuisibles, ladite quantité d’appât rodonticide étant suffisante pour tuer des rongeurs cibles nuisibles consommant ledit appât rodonticide pendant plusieurs jours.
Avantageusement, dans cette autre variante d’un procédé selon l’invention, on adapte la quantité d’appât rodonticide disséminé, la proportion massique de difénacoum par rapport à l’appât rodonticide et la proportion dudit énantiomère Ei par rapport audit diastéréoisomère Dl 4 pour que la consommation de l’appât rodonticide soit létale pour des rongeurs cibles nuisibles consommant quotidiennement de l’appât pendant au moins 2 périodes de 24 heures -notamment de 3 à 7 périodes-, lesdites périodes étant consécutives.
Avantageusement, dans cette autre variante d’un procédé selon l’invention, la proportion dudit énantiomère Ei étant supérieure à 95% -notamment de l’ordre de 100%- par rapport au difénacoum, la proportion massique de difénacoum par rapport à l’appât rodonticide est comprise entre 2 ppm et 20 ppm -notamment de l’ordre de 10 ppm-.
Dans un procédé selon l’invention, on met à disposition des rongeurs cibles nuisibles une quantité d’appât rodonticide suffisante pour satisfaire quotidiennement l’appétit des rongeurs cibles nuisibles, ledit appât rodonticide comprenant majoritairement dudit énantiomère Ei par rapport audit diastéréoisomère Di>4 et par rapport au difénacoum.
Dans un procédé selon l’invention, on adapte la quantité d’appât rodonticide disséminé, la proportion dudit énantiomère Ei par rapport audit diastéréoisomère D1;4 et la proportion massique du difénacoum total par rapport à l’appât rodonticide de façon à permettre une consommation d’appât rodonticide pendant plusieurs jours par des rongeurs cibles nuisibles, tout en limitant : les risques d’intoxication primaire de mammifères et oiseaux non cibles susceptibles de ne consommer qu’occasionnellement et accidentellement un tel appât rodonticide ; les risques d’intoxication secondaire, par exemple des prédateurs des rongeurs cibles, susceptibles de consommer des rongeurs -morts ou vifs-cibles ayant ingéré une quantité dudit appât. L’invention concerne aussi un procédé chromatographique de séparation des stéréo-isomères de configuration -notamment dudit énantiomère Ei et dudit énantiomère E4 et des énantiomères E2 et E3 dudit diastéréoisomère D2>3- du difénacoum. L’invention concerne donc un tel procédé chromatographique de séparation à température ambiante des stéréo-isomères de configuration du difénacoum, dans lequel : o on choisit une colonne pour chromatographie liquide à haute pression de dimensions 150 x 2 mm, et renfermant une phase stationnaire chirale constituée de particules poreuses de cellulose tris(3,5-diméthylphénylcarbamate), lesdites particules étant d’une taille moyenne de 3 o pm et présentant une taille moyenne de pores de 1000 A ; o on choisit, à titre de phase mobile liquide, un mélange formé de méthanol (A) et d’eau comprenant de l’acide formique en proportion volumique de 0,1% dans l’eau (B), avec un rapport volumique A/B de 93/7 ; o on introduit en tête de la colonne de chromatographie une composition liquide comprenant dudit énantiomère Ei, puis ; o on fait passer la phase mobile avec un débit de 0,25 ml7min dans la colonne de chromatographie et à la suite de la composition liquide, et on collecte séparément chaque fraction de phase mobile, chaque fraction de phase mobile comprenant un stéréo-isomère de configuration du difénacoum. L’invention concerne aussi un stéréo-isomère de configuration du difénacoum obtenu par un procédé selon l’invention. L'invention concerne également un appât rodonticide comprenant un stéréo-isomère de configuration du difénacoum, un procédé de lutte contre les rongeurs cibles nuisibles et un procédé d’obtention de stéréo-isomères de configuration du difénacoum caractérisés en combinaison par tout ou partie des caractéristiques mentionnées ci-dessus ou ci-après. D'autres buts, caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront à la lecture de la description suivante et des exemples donnés à titre uniquement non limitatif et qui se réfèrent aux figures annexées, dans lesquelles : - la figure 1 est un chromatogramme en chromatographie liquide haute pression du difénacoum et des quatre stéréo-isomères de configuration du difénacoum séparés et analysés séparément les uns des autres ; - la figure 2 est une représentation graphique d’une analyse comparative de la rémanence hépatique dudit diastéréoisomère D14 et dudit diastéréoisomère D2,3 chez le rat ; - la figure 3 est une représentation graphique en histogramme d’une analyse comparative de l’activité anticoagulante de chacun des stéréo-isomères de configuration du difénacoum ; - la figure 4 est une représentation graphique en histogramme d’une analyse comparative de la rémanence hépatique chez le rat de chacun des stéréo-isomères de configuration du difénacoum, et ; - la figure 5 est une représentation graphique d’une analyse comparative de la rémanence hépatique chez le rat de chacun des stéréo-isomères de configuration du difénacoum. A. Séparation des stéréo-isomères de configuration du difénacoum par chromatographie liquide à haute pression sur colonne chirale
Les inventeurs ont résolu le problème complexe et non résolu à ce jour de la séparation des stéréo-isomères de configuration du difénacoum. Ils sont parvenus à réaliser une séparation analytique de ces stéréo-isomères de configuration par chromatographie liquide à haute pression (haute performance) sur une colonne chirale LUX® Cellulose-1 (phenomenex, Le Pecq, France) de dimension 150 x 2 mm et comprenant une phase stationnaire chirale constituée de particules poreuses de cellulose tris(3,5-diméthylphénylcarbamate), d’une granulométrie de 3 pm et d’une porosité de 1000 Â et en utilisant, à titre de phase mobile liquide, un mélange formé de méthanol (A) et d’eau comprenant de l’acide formique en proportion volumique de 0,1% dans l’eau (B), avec un rapport volumique A/B de 93/7. Le débit de la phase mobile dans la colonne est de 0,25 mL/min et la séparation est réalisée à température ambiante.
La solution contenant le difénacoum à analyser est à une concentration de 1 pg de difénacoum par millilitre d’acétonitrile et est filtrée sur une membrane de cellulose régénérée de seuil de coupure de 0,2 pm. Le volume de solution contenant l’échantillon à analyser injecté sur la colonne est de 1 pL. La détection est réalisée par spectrométrie de masse en tandem (MS/MS) par ionisation (ESI, « Electro-Spray Ionization ») en mode négatif ou par photométrie ou par spectrophotométrie selon la sensibilité requise.
Par exemple, on détecte les stéréo-isomères de configuration du difénacoum en sortie de colonne chromatographie liquide à haute pression par spectrométrie de masse en tandem (MS/MS) en mode d’ionisation négative par électronébulisation (ESI, « ElectroSpray Ionization »). La température du gaz nébuliseur est de 350°C et son débit est de 8 L/min. La pression du gaz nébuliseur est portée à 2700 hPa. En particulier, sont détectées les transitions MRM («Multiple Reaction Monitoring » m/z 443,1 —> 293,1 et m/z 443,1 —> 135,1 correspondants aux signaux du difénacoum.
Un chromatogramme représentatif de la séparation des quatre stéréo-isomères de configuration du difénacoum est représenté en figure IA. Le chromatogramme dudit énantiomère Ei à l’état isolé selon l’invention est représenté en figure 1D, le chromatogramme dudit énantiomère E2 dudit diastéréoisomère D2 3 à l’état isolé est représenté en figure IB, le chromatogramme dudit énantiomère E3 dudit diastéréoisomère D2 3 à l’état isolé est représenté en figure IC et le chromatogramme dudit énantiomère E4 dudit diastéréoisomère D] 4 à l’état isolé est représenté en figure 1E. On obtient chaque stéréo-isomères de configuration du difénacoum par prélèvement successif de chaque fraction correspondant au temps d’élution de chaque stéréo-isomère de configuration du difénacoum en sortie de la colonne de chromatographie puis élimination du solvant, par exemple par évaporation. B. Rémanence hépatique des diastéréoisomères du difénacoum chez le rat
On réalise une étude comparative de la rémanence hépatique dudit diastéréoisomère DL4 et dudit diastéréoisomère D2 3 chez le rat. On utilise cinq lots de 6 rats (OFA Sprague Dawley, Charles River, Saint germain sur l’Arbresle, France) mâles et femelles d’une masse moyenne de 200 g. À J0, on administre per os à chacun des rats un mélange de stéréo-isomères de configuration du difénacoum comprenant 44% dudit diastéréoisomère D2 3 et 56% dudit diastéréoisomère Dl4 en solution dans un mélange formé de 95 % d’huile végétale et de 5 % de diméthylsulfoxyde (DMSO). Ledit diastéréoisomère D23 est un mélange racémique de l’énantiomère E2 et de l’énantiomère E3 dudit diastéréoisomère D23 et ledit diastéréoisomère Dl 4 est un mélange racémique dudit énantiomère E, et dudit énantiomère E4. La quantité totale de difénacoum administrée à chaque rat est de 3,4 mg de difénacoum par kilogramme de rat. À Jl, J3, J5, J7 et J9 on euthanasie 6 rats (3 mâles et 3 femelles). On prélève et on pèse les foies prélevés. B.l. Extraction du difénacoum des foies prélevés B.1.1. Homogénéisation de l’échantillon de foie
On pèse avec précision de l’ordre de 0,525 g (±0,025 g) de foie des rats obtenus au point B.) que l’on place dans un tube en polypropylène de 50 mL. On ajoute 10 mL d’acétone et on soumet la suspension à une homogénéisation au moyen d’un homogénéisateur/disperseur Ultra-Turrax® pendant une durée de l’ordre de 30 secondes. On rince la tige de Γhomogénéisateur/disperseur à l’eau chaude puis 2 fois avec 20 mL d’acétone dans un tube en polypropylène. On centrifuge l’homogénat pendant 5 min à une vitesse de centrifugation de 3000 rpm (rotation par minute). On collecte et on transvase le surnageant dans un tube à essai. On soumet l’échantillon à une évaporation sous un flux d’azote (N2) à la température de 40°C de façon à former un extrait sec. B.1.2. Élimination des lipides
Dans le tube contenant l’extrait sec, on ajoute 1 mL d’acétonitrile de façon à solubiliser l’extrait sec. On lave la solution d’acétonitrile 2 fois successivement avec 1 mL d’hexane. L’extrait débarrassé des lipides est séché sous un flux d’azote (N2) à la température de 40°C, puis repris avec 0,5 mL de méthanol et solubilisé par agitation sous vortex. On ajoute ensuite 0,5 mL d’eau ultra-pure (Milli-Q). L’échantillon est homogénéisé sous vortex. B.1.3. Extraction du difénacoum sur phase solide (« SPE, Solid Phase Extraction »)
On fait passer 1 mL de dichlorométhane (CH2Ct2), puis 1 mL de méthanol (CH3OH), puis 1 mL d’eau ultra-pure (Milli-Q) sur une cartouche Oasis HLB lcc (WAT094225, Waters). On dépose ensuite l’extrait de foie débarrassé des lipides (lmL CH30H/H20 Milli-Q) et contenant le difénacoum en tête de la cartouche préalablement conditionnée. L’extrait de foie pénètre dans la cartouche par gravité au contact de la phase solide de la cartouche. On dépose en tête de cartouche 1 mL de solution de lavage formée de méthanol (CH3OH) et d’eau ultra-pure (H20) en proportion volumique de 90/10. On sèche la cartouche par aspiration sous vide connectée en partie basse de la cartouche. On dépose ensuite en tête de cartouche 1 mL de solution d’élution formée de dichlorométhane (CH2Cf2) et de méthanol (CH3OH) en proportion volumique de 90/10 et on collecte en bas de cartouche un éluat comprenant le difénacoum. On évapore le solvant de l’éluat sous un flux d’azote (N2) à la température de 40°C. On reprend l’échantillon dans 0,5 mL et on filtre la solution d’acétonitrile contenant le difénacoum sur filtre 0,2 pm. B.2. Analyse des diastéréoisomères du difénacoum
On analyse la solution d’acétonitrile contenant le difénacoum par chromatographie liquide à haute pression sur colonne chirale comme décrit au point A.) et on dose la quantité de chacun des stéréo-isomères de configuration du difénacoum dans le foie.
Les résultats représentés en figure 2 sont exprimés en nanogramme de diastéréoisomère du difénacoum par gramme de foie et représentés en fonction du temps exprimé en jours. La concentration hépatique dudit diastéréoisomère D14 est représentée par un carré () plein et la concentration hépatique dudit diastéréoisomère D2;3 est représentée par un cercle (O) ouvert. On observe que ledit diastéréoisomère D14 présente une rémanence hépatique plus élevée que la rémanence hépatique dudit diastéréoisomère D2;3 qui a sensiblement disparu du foie des rats dès 5 jours après ingestion. B.3. Analyse des stéréo-isomères de configuration du difénacoum
Les résultats sont présentés en figure 5 dans laquelle les valeurs correspondant audit énantiomère Ei sont représentées sous forme de losanges (♦) pleins, les valeurs correspondant audit énantiomère E4 sont représentées sous forme de ronds (O) ouverts, les valeurs correspondant à l’énantiomère E3 dudit diastéréoisomère D23 sont représentées sous forme de triangles (Δ) ouverts et les valeurs correspondant à l’énantiomère E2 dudit diastéréoisomère D2 3 sont représentées sous forme de losanges (O) ouverts. Dès J5, le seul stéréo-isomère de configuration résiduel dans le foie des rats est ledit énantiomère E1? les autres stéréo-isomères de configuration n’étant présents qu’à l’état de traces. C. Traitement de rats avec chaque stéréo-isomère de configuration du difénacoum
On utilise quatre lots équivalents de rats « OFA Sprague s
Dawley » mâles de masse comprise entre 180 et 220 g. A JO, on administre per os au moyen d’une sonde gastrique : - à chacun des rats d’un premier lot, une quantité d’une solution dudit énantiomère E, dissout dans un mélange formé de 95 % d’huile végétale et de 5 % de DMSO correspondant à une quantité de 1,5 mg de difénacoum par kilogramme de rat ; - à chacun des rats d’un deuxième lot, une quantité d’une solution dudit énantiomère E4 dissout dans un mélange formé de 95 % d’huile végétale et de 5 % de DMSO correspondant à une quantité de 1,5 mg de difénacoum par kilogramme de rat ; - à chacun des rats d’un troisième lot, une quantité d’une solution de l’énantiomère E3 dudit diastéréoisomère D23 dissout dans un mélange formé de 95 % d’huile végétale et de 5 % de DMSO correspondant à une quantité de 1,5 mg de difénacoum par kilogramme de rat ; - à chacun des rats d’un quatrième lot, une quantité d’une solution dudit énantiomère E2 dudit diastéréoisomère D2 3 dissout dans un mélange formé de 95 % d’huile végétale et de 5 % de DMSO correspondant à une quantité de 1,5 mg de difénacoum par kilogramme de rat. C.l. Efficacité anticoagulante de chaque énantiomère des diastéréoisomères du difénacoum AJ+1, J+3, J+7 etJ+14 après administration de la solution d’énantiomère, on prélève, dans des tubes de prélèvement comprenant du citrate (3,2 %), 3 mL du sang d’un rat anesthésié à l’isoflurane puis euthanasié. On centrifuge les tubes à 2000 g pendant 10 minutes et on récupère la fraction plasmatique. On analyse le temps de coagulation (temps de Quick) du plasma au moyen du kit "Neoplastine CI Détermination of Prothrombin Time" (Diagnostica Stago, Asnières, France) par mesure sur un Thrombotimer option 2 plus (Behnk Electronik, Norderstedt, Allemagne).
Les résultats sont représentés en figure 3 dans laquelle les valeurs correspondant audit énantiomère Ei dudit sont représentées par des colonnes à hachures horizontales, les valeurs correspondant à l’énantiomère E2 dudit diastéréoisomère D2 3 sont représentées en colonnes blanches, les valeurs correspondant audit énantiomère E3 dudit diastéréoisomère D2 3 sont représentées en colonnes noires et les valeurs correspondant audit énantiomère E4 sont représentées en colonnes hachurées verticalement. Il est à noter que la valeur normale du temps de coagulation de rats non traités est de 10 à 20 secondes. T/administration (JO) per os de chaque énantiomère à raison de 1,5 mg par kilogramme de rat provoque une augmentation du temps de quick des rats à J1 (de l’ordre de 100 sec). Le temps de quick du sang de rats traités avec une posologie de 1,5 mg dudit énantiomère Ei selon l’invention par kilogramme de rat atteint la valeur de 300 sec à J3 pour redescendre à 70,2 à J7. Les temps de quick des rats traités avec une dose de 1.5 mg d’énantiomère E2, ou avec une dose de 1.5 mg d’énantiomère E3, ou avec une dose de 1.5 mg d’énantiomère E4 retrouvent une valeur normale dès J3. C.2. Rémanence hépatique de chaque énantiomère des diastéréoisomères chez le rat
On prélève le foie des rats et on extrait le difénacoum comme décrit au point A.) ci-dessus. On quantifie chaque stéréo-isomère de configuration du difénacoum contenu dans le foie selon la méthode décrite au point A.2.) ci-dessus. Les quantités de chaque stéréo-isomères de configuration du difénacoum retenu dans le foie sont exprimées en microgramme d’énantiomère par gramme de foie et sont représentées figure 4 dans laquelle les valeurs correspondant audit énantiomère Ei sont représentées en colonnes à hachures horizontales, les valeurs correspondant audit énantiomère E4 sont représentées en colonnes à hachures verticales, les valeurs correspondant à l’énantiomère E2 dudit diastéréoisomère D2)3 sont représentées en colonnes blanches et les valeurs correspondant audit énantiomère E3 dudit diastéréoisomère D2 3 sont représentées en colonnes noires. L’énantiomère E, est le stéréo-isomère de configuration du difénacoum le plus rémanent dans le foie de rats.
Il va de soi que l’invention peut faire l’objet de nombreuses variantes de réalisation et applications. En particulier, un appât rodonticide et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles sont sujets à des infinités de variantes tant dans la formulation de l’appât que dans les modes de mise en œuvre du procédé.
Claims (10)
- REVENDICATION S 1/- Appât rodonticide comprenant du difénacoum et au moins un excipient comestible pour des rongeurs cibles nuisibles, caractérisé en ce qu’il comprend un stéréo-isomère de configuration, dit énantiomère Ei, du difénacoum, à l’exclusion d’un mélange racémique dudit énantiomère E! et d’un stéréo-isomère de configuration, dit énantiomère E4, du difénacoum ; - ledit énantiomère Ei présentant par analyse chromatographique d’une composition de difénacoum comprenant quatre stéréo-isomères de configuration du difénacoum effectuée dans des conditions décrites ci-après, un temps de rétention ti ; - ledit énantiomère E4 présentant par analyse chromatographique d’une composition de difénacoum comprenant quatre stéréo-isomères de configuration du difénacoum effectuée dans ces mêmes conditions, un temps de rétention t4 ; ti et t4 étant de valeur telle que h < t2 < t3 < t4 ; t2 et t3 étant les temps de rétention des stéréo-isomères de configuration du difénacoum distincts dudit énantiomère Ei et dudit énantiomère E4, ladite analyse étant réalisée à la température de 23,4°C et dans les conditions suivantes : o avec une colonne pour chromatographie liquide à haute pression de dimensions 150 x 2 mm, et renfermant une phase stationnaire chirale constituée de particules poreuses de cellulose tris(3,5-diméthylphénylcarbamate), lesdites particules étant d’une taille moyenne de 3 pm et présentant une taille moyenne de pores de 1000 Â ; o en utilisant, à titre de phase mobile liquide, un mélange formé de méthanol (A) et d’eau comprenant de l’acide formique en proportion volumique de 0,1% dans l’eau (B), avec un rapport volumique A/B de 93/7, avec un débit de 0,25 mL/min dans la colonne de chromatographie ; o par injection dans la colonne de chromatographie d’un volume de 1 pL de composition de difénacoum à une concentration de 1 pg de difénacoum par millilitre d’acétonitrile.
- 2/- Appât selon la revendication 1, caractérisé en ce que ledit énantiomère Ei présente dans l’appât rodonticide une quantité supérieure à la quantité dudit énantiomère E4 dans l’appât rodonticide.
- 3/ - Appât selon l’une des revendications 1 à 2, caractérisé en ce que le difénacoum est majoritairement sous forme dudit énantiomère Ei dans l’appât rodonticide.
- 4/ - Appât selon l’une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce qu’il comprend une quantité dudit énantiomère Ei telle que le rapport de cette quantité sur la quantité du difénacoum dans l’appât rodonticide est supérieur à 25%.
- 5/ - Appât selon l’une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce qu’il comprend une quantité dudit énantiomère Ej telle que le rapport de cette quantité sur la quantité du difénacoum dans l’appât rodonticide est supérieur à 95%.
- 6/ - Appât selon l’une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce qu’il comprend une quantité massique de difénacoum telle que le rapport de cette quantité massique de difénacoum sur la quantité massique de l’appât rodonticide est inférieur à 50 ppm.
- 7/ - Appât rodonticide selon l’une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que l’excipient comestible comprend au moins un aliment choisi dans le groupe formé des graines de céréale, des moutures de graines de céréale, des farines de graines de céréale, des flocons de graines de céréale, du son de céréales et des graines non céréalières.
- 8/ - Procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles, dans lequel on dissémine une quantité d’appât rodonticide comprenant du difénacoum et au moins un excipient comestible pour des rongeurs cibles nuisibles, caractérisé en ce qu’il comprend un stéréo-isomère de configuration, dit énantiomère Ei, du difénacoum, à l’exclusion d’un mélange racémique dudit énantiomère Et et d’un stéréo-isomère de configuration, dit énantiomère E4, du difénacoum ; - ledit énantiomère Εχ présentant par analyse chromatographique d’une composition de difénacoum comprenant quatre stéréo-isomères de configuration du difénacoum effectuée dans des conditions décrites ci-après, un temps de rétention ΐχ ; - ledit énantiomère E4 présentant par analyse chromatographique d’une composition de difénacoum comprenant quatre stéréo-isomères de configuration du difénacoum effectuée dans ces mêmes conditions, un temps de rétention t4 ; ΐχ et t4 étant de valeur telle que ίχ < t2 < t3 < t4 ; t2 et t3 étant les temps de rétention des stéréo-isomères de configuration du difénacoum distincts dudit énantiomère Εχ et dudit énantiomère E4, ladite analyse étant réalisée à la température de 23,4°C et dans les conditions suivantes : o avec une colonne pour chromatographie liquide à haute pression de dimensions 150 x 2 mm, et renfermant une phase stationnaire chirale constituée de particules poreuses de cellulose tris(3,5-diméthylphénylcarbamate), lesdites particules étant d’une taille moyenne de 3 pm et présentant une taille moyenne de pores de 1000 Â ; o en utilisant, à titre de phase mobile liquide, un mélange formé de méthanol (A) et d’eau comprenant de l’acide formique en proportion volumique de 0,1% dans l’eau (B), avec un rapport volumique A/B de 93/7, avec un débit de 0,25 mL/min dans la colonne de chromatographie ; o par injection dans la colonne de chromatographie d’un volume de 1 pL de composition de difénacoum à une concentration de 1 pg de difénacoum par millilitre d’acétonitrile.
- 9/ - Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce qu’on choisit en combinaison : - l’excipient comestible ; - une proportion dudit énantiomère Εχ par rapport audit diastéréoisomère D) 4 ; - une proportion dudit énantiomère Εχ par rapport au difénacoum ; - une proportion massique de difénacoum dans l’appât rodonticide, et; - une quantité d’appât disséminé ; de façon que des rongeurs cibles nuisibles consomment une quantité de difénacoum suffisante pour être létale pour lesdits rongeurs cibles nuisibles consommant dudit appât au cours d’une période unique de 24 heures consécutives.
- 10/ - Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce qu’on choisit en combinaison : - l’excipient comestible ; - une proportion dudit énantiomère Et par rapport audit diastéréoisomère D1>4 ; - une proportion dudit énantiomère Et par rapport au difénacoum ; - une proportion massique de difénacoum dans l’appât rodonticide, et; - une quantité d’appât disséminé ; de façon que des rongeurs cibles nuisibles consomment une quantité de difénacoum ; o non létale pour des rongeurs cibles nuisibles consommant dudit appât pendant une période de 24 heures consécutives, et ; o suffisante pour être létale pour des rongeurs cibles nuisibles consommant dudit appât pendant plusieurs périodes de 24 heures.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR1562176A FR3044870B1 (fr) | 2015-12-11 | 2015-12-11 | Appat rodonticide comprenant du difenacoum, procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles et procede d'obtention |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR1562176 | 2015-12-11 | ||
| FR1562176A FR3044870B1 (fr) | 2015-12-11 | 2015-12-11 | Appat rodonticide comprenant du difenacoum, procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles et procede d'obtention |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FR3044870A1 true FR3044870A1 (fr) | 2017-06-16 |
| FR3044870B1 FR3044870B1 (fr) | 2020-01-10 |
Family
ID=55862885
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FR1562176A Active FR3044870B1 (fr) | 2015-12-11 | 2015-12-11 | Appat rodonticide comprenant du difenacoum, procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles et procede d'obtention |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| FR (1) | FR3044870B1 (fr) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0147052A2 (fr) * | 1983-12-14 | 1985-07-03 | Imperial Chemical Industries Plc | Agents rodenticides |
| WO1996027598A1 (fr) * | 1995-03-06 | 1996-09-12 | Implico B.V. | Procede de preparation d'un compose rodenticide/anticoagulant |
-
2015
- 2015-12-11 FR FR1562176A patent/FR3044870B1/fr active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0147052A2 (fr) * | 1983-12-14 | 1985-07-03 | Imperial Chemical Industries Plc | Agents rodenticides |
| WO1996027598A1 (fr) * | 1995-03-06 | 1996-09-12 | Implico B.V. | Procede de preparation d'un compose rodenticide/anticoagulant |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ARIENS E J: "STEREOCHEMISTRY: A SOURCE OF PROBLEMS IN MEDICINAL CHEMISTRY", MEDICINAL RESEARCH REVIEWS, NEW YORK, NY, US, vol. 6, no. 4, 1 January 1986 (1986-01-01), pages 451 - 466, XP000573748, ISSN: 0198-6325 * |
| VAN HEERDEN P S ET AL: "Efficient Asymmetric Synthesis of the Four Diastereomers of Diphenacoum and Brodifacoum", TETRAHEDRON, ELSEVIER SCIENCE PUBLISHERS, AMSTERDAM, NL, vol. 53, no. 17, 1 April 1997 (1997-04-01), pages 6045 - 6056, XP004105831, ISSN: 0040-4020, DOI: 10.1016/S0040-4020(97)00254-8 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FR3044870B1 (fr) | 2020-01-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FR3022111A1 (fr) | Composition comprenant de la bromadiolone, appat rodonticide et procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles | |
| FR3045046B1 (fr) | Stereo-isomere de configuration de la bromadiolone, composition et appat rodonticide le comprenant et procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles | |
| FR3045047B1 (fr) | Stereo-isomere de configuration de la bromadiolone, composition et appat rodonticide le comprenant et procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles | |
| FR3044870A1 (fr) | Appat rodonticide comprenant du difenacoum, procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles et procede d'obtention | |
| FR3045050B1 (fr) | Stereo-isomere de configuration de la difethialone, composition et appat rodonticide le comprenant et procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles | |
| EP3386305B1 (fr) | Composition et appât rodonticide comprenant de la diféthialone, procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles | |
| FR3044873A1 (fr) | Appat rodonticide comprenant du brodifacoum et procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles | |
| FR3045042A1 (fr) | Stereo-isomere de configuration du flocoumafene, composition et appat rodonticide le comprenant, procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles | |
| EP3386964A1 (fr) | Stéréo-isomère de la bromadiolone, composition et appât rodonticide le comprenant et procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles | |
| FR3045040A1 (fr) | Stereo-isomere de configuration du flocoumafene, composition et appat rodonticide le comprenant, procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles | |
| FR3045043A1 (fr) | Stereo-isomere de configuration du flocoumafene, composition et appat rodonticide le comprenant, procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles | |
| FR3044871A1 (fr) | Appat rodonticide comprenant du brodifacoum et procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles | |
| FR3044874A1 (fr) | Appat rodonticide comprenant du brodifacoum et procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles | |
| FR3045041A1 (fr) | Stereo-isomere de configuration du flocoumafene, composition et appat rodonticide le comprenant, procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles | |
| FR3044872A1 (fr) | Appat rodonticide comprenant du brodifacoum et procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles | |
| WO2017097745A1 (fr) | Stéréo-isomère de configuration de la diféthialone, composition et appât rodonticide le comprenant et procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles | |
| FR3044875A1 (fr) | Appat rodonticide comprenant du brodifacoum et procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles | |
| FR3045051A1 (fr) | Stereo-isomere de configuration de la difethialone, composition et appat rodonticide le comprenant et procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles | |
| FR3045044A1 (fr) | Composition et appat rodonticide comprenant du flocoumafene, procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles | |
| FR3045048A1 (fr) | Stereo-isomere de configuration de la difethialone, composition et appat rodonticide le comprenant et procede de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 2 |
|
| EXTE | Extension to a french territory |
Extension state: PF |
|
| PLSC | Publication of the preliminary search report |
Effective date: 20170616 |
|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 3 |
|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 4 |
|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 5 |
|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 6 |
|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 7 |
|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 8 |
|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 9 |