FR3014902A1 - ENZYMATIC EXTRACT OF HELIX ASPERSA FOR DIGESTIVE COMFORT - Google Patents
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Abstract
L'invention concerne un extrait enzymatique obtenu à partir d'une espèce choisie parmi Helix aspersa, Helix pomatia, Helix lucorum ou leur combinaison présentant une activité cellulase et une activité β 1-3 glucanase.The invention relates to an enzymatic extract obtained from a species selected from Helix aspersa, Helix pomatia, Helix lucorum or their combination having cellulase activity and β 1-3 glucanase activity.
Description
Extrait enzymatique d'Helix aspersa pour le confort digestif. 1. Domaine de l'invention Le domaine de l'invention est celui des additifs alimentaires.Enzymatic extract of Helix aspersa for digestive comfort. FIELD OF THE INVENTION The field of the invention is that of food additives.
Plus précisément, l'invention concerne un extrait enzymatique d'Helix aspersa pour améliorer le confort digestif des mammifères monogastriques. L'invention concerne également un procédé d'obtention d'un tel extrait enzymatique. 2. Art antérieur Les individus monogastriques, comme l'homme, le chat ou le chien, peuvent connaître des troubles digestifs douloureux tels que les ballonnements, les flatulences, une augmentation significative du volume des selles, des diarrhées... Ces troubles sont souvent causés par la consommation d'aliments difficiles à digérer par l'organisme. En particulier, les mammifères monogastriques tels que l'homme, le chat, le chien...ne possèdent pas les enzymes digestives nécessaires pour dégrader les fibres contenues dans les aliments. Par exemple, l'homme et autres espèces monogastriques sont incapables de digérer le squelette cellulosique des végétaux et les polysaccharides non amylacés présents dans les céréales. On peut trouver des bactéries méthanogènes dans le colon de l'homme qui permettent de dégrader partiellement les fibres alimentaires, dont fait partie le squelette en cellulose des végétaux, en produisant du méthane. Or, l'accumulation de méthane dans le tube digestif conduit à des ballonnements et aux flatulences. La présence de gaz dans l'intestin distend la paroi intestinale ainsi que le péritoine, ce qui peut être extrêmement douloureux. De plus, les fibres alimentaires permettent de transporter l'eau le long du tube digestif afin qu'elle puisse être réabsorbée par l'intestin. Elles permettent également de stimuler le péristaltisme digestif. On comprend aisément qu'une surconsommation de fibres alimentaires ou une susceptibilité individuelle aux fibres entrainent des spasmes et des ballonnements douloureux, ainsi que des flatulences gênantes. L'industrie alimentaire produit des aliments riches en fibres, soit parce qu'ils contiennent naturellement des aliments riches en fibres, soit parce que de telles fibres sont introduites dans les aliments afin de pouvoir provoquer la sensation de satiété. En particulier, les aliments destinés aux animaux de compagnie contiennent un pourcentage pondéral de fibres compris entre 5% et 15%. Les chiens et les chats notamment n'ont pas l'appareil enzymatique nécessaire au niveau de leur tube digestif pour dégrader les fibres contenues dans les aliments qui leurs sont destinés. Ils développent donc les troubles digestifs évoqués ci-dessus. Or, les fibres alimentaires présentent un réel intérêt pour la bonne santé de l'homme et des mammifères monogastriques et, en particulier, un rôle protecteur dans certaines pathologies comme le cancer. Il est connu de prescrire des comprimés à base de charbon ou de montmorillonite pour absorber les gaz intestinaux, que ce soit à titre préventif ou curatif. Toutefois, les comprimés de charbon ont tendance à colorer les tissus et les selles, et ne font que pallier les conséquences liées à une mauvaise digestion des fibres sans en améliorer la dégradabilité. En d'autres termes, il n'existe pas, à la connaissance du Déposant, de moyens naturels d'améliorer la dégradabilité intestinale des fibres et polysaccharides non amylacés, afin d'améliorer le confort digestif. 3. Objectifs de l'invention L'invention a notamment pour objectif, dans au moins un mode de réalisation, un composé permettant de faciliter la digestion chez les individus monogastriques.More specifically, the invention relates to an enzymatic extract of Helix aspersa for improving the digestive comfort of monogastric mammals. The invention also relates to a process for obtaining such an enzymatic extract. 2. Prior Art Monogastric individuals, such as humans, cats or dogs, may experience painful digestive disorders such as bloating, flatulence, a significant increase in stool volume, diarrhea ... These disorders are often caused by eating foods that are difficult for the body to digest. In particular, monogastric mammals such as man, cat, dog ... do not have the digestive enzymes necessary to degrade the fibers contained in food. For example, humans and other monogastric species are unable to digest the cellulosic skeleton of plants and non-starch polysaccharides present in cereals. Methanogenic bacteria can be found in the human colon that partially degrade dietary fiber, which includes the cellulose skeleton of plants, producing methane. However, the accumulation of methane in the digestive tract leads to bloating and flatulence. The presence of gas in the intestine distends the intestinal wall as well as the peritoneum, which can be extremely painful. In addition, dietary fiber can transport water along the digestive tract so that it can be reabsorbed by the intestine. They also stimulate digestive peristalsis. It is easy to understand that overconsumption of dietary fiber or individual susceptibility to the fibers cause painful spasms and bloating, as well as uncomfortable flatulence. The food industry produces high-fiber foods, either because they naturally contain foods rich in fiber, or because such fibers are introduced into food in order to cause the sensation of satiety. In particular, pet food contains a weight percentage of fibers of between 5% and 15%. Dogs and cats in particular do not have the necessary enzymatic device in their digestive tract to degrade the fibers contained in the food that is intended for them. They therefore develop the digestive disorders mentioned above. However, dietary fiber is of real interest for the good health of humans and monogastric mammals and, in particular, a protective role in certain diseases such as cancer. It is known to prescribe tablets based on charcoal or montmorillonite to absorb intestinal gas, whether preventive or curative. However, charcoal tablets tend to stain tissue and stool, and only mitigate the consequences of poor fiber digestion without improving the degradability. In other words, to the knowledge of the Applicant, there are no natural means of improving the intestinal degradability of non-starch fibers and polysaccharides, in order to improve digestive comfort. 3. OBJECTIVES OF THE INVENTION The invention particularly aims, in at least one embodiment, a compound for facilitating digestion in monogastric individuals.
Un autre objectif de l'invention est de mettre en oeuvre, dans au moins un mode de réalisation, un procédé de fabrication d'un tel extrait. L'invention a encore pour objectif de fournir, dans au moins un mode de réalisation, l'utilisation d'un tel extrait pour la formulation de compositions alimentaires ou de compléments alimentaires destinés à l'homme ou l'animal. 4. Exposé de l'invention Ces objectifs, ainsi que d'autres qui apparaîtront par la suite, sont atteints à l'aide d'un extrait enzymatique obtenu à partir d'une espèce choisie parmi Helix aspersa, Helix pomelo, Helix lucorum ou leur combinaison présentant une activité cellulase et une activité p 1-3 glucanase.Another object of the invention is to implement, in at least one embodiment, a method of manufacturing such an extract. The invention also aims to provide, in at least one embodiment, the use of such an extract for the formulation of food compositions or food supplements for humans or animals. 4. OBJECT OF THE INVENTION These objectives, as well as others which will appear subsequently, are achieved with the aid of an enzymatic extract obtained from a species chosen from Helix aspersa, Helix pomelo, Helix lucorum or their combination exhibiting cellulase activity and p 1-3 glucanase activity.
Ainsi, l'invention repose sur une approche tout à fait nouvelle et originale de proposer un extrait naturel permettant de dégrader les fibres insolubles et les polysaccharides non amylacés contenus dans l'alimentation afin de faciliter la digestion. Plus exactement, l'extrait selon l'invention présentant une activité cellulase et une activité p 1-3 glucanase permet d'une part de limiter voire éliminer les inconvénients liés à la consommation des fibres contenues dans l'alimentation, et notamment celles issues des végétaux, mais également d'améliorer l'absorption des nutriments. En d'autres termes, en dégradant de manière enzymatique les fibres alimentaires, les phénomènes de flatulences et de gonflement du volume des selles sont éliminés, ou à tout le moins, considérablement réduits. Les douleurs associées à la production de gaz sont donc éliminées. De plus, une alimentation trop riche en fibres peut avoir des impacts négatifs sur l'absorption des aliments : en effet, de nombreux nutriments se retrouvent piégés dans les selles, en particulier les protéines. Les fibres accélérant le transit intestinal, ces nutriments ne peuvent être efficacement absorbés par le colon et l'absorption d'énergie s'en trouve donc diminuée. L'extrait selon l'invention, en dégradant les fibres alimentaires et les polysaccharides non amylacés, permet au colon d'avoir le temps et d'avoir accès aux nutriments pour les absorber. On entend par « nutriment » des fragments alimentaires obtenus après digestion partielle par les enzymes digestives.Thus, the invention is based on a completely new and original approach to provide a natural extract for degrading insoluble fiber and non-starch polysaccharides contained in the diet to facilitate digestion. More exactly, the extract according to the invention exhibiting a cellulase activity and a p 1-3 glucanase activity makes it possible on the one hand to limit or even eliminate the drawbacks related to the consumption of the fibers contained in the diet, and in particular those resulting from plants, but also to improve the absorption of nutrients. In other words, by enzymatically degrading the dietary fiber, the phenomena of flatulence and swelling of the stool volume are eliminated, or at least considerably reduced. The pains associated with the production of gas are therefore eliminated. In addition, a diet that is too rich in fiber can have negative impacts on the absorption of food: in fact, many nutrients are trapped in the stool, especially proteins. Fibers accelerate the intestinal transit, these nutrients can not be effectively absorbed by the colon and the absorption of energy is thus diminished. The extract according to the invention, by degrading dietary fiber and non-starch polysaccharides, allows the colon to have the time and access to nutrients to absorb them. The term "nutrient" means food fragments obtained after partial digestion by digestive enzymes.
De préférence, l'extrait enzymatique est obtenu à partir d'Helix aspersa. Dans un mode de réalisation intéressant, l'extrait selon l'invention se présente sous la forme d'une poudre. Une telle présentation permet de faciliter le stockage, la conservation et l'utilisation de l'extrait dans le cadre d'un procédé industriel ou privé. Par exemple, il est possible de produire l'extrait selon l'invention sous forme de poudre qui pourra être utilisé sous forme réhydratée par un industriel afin d'être incluse dans une composition alimentaire, humaine ou animale. L'extrait sous forme de poudre peut également être utilisé directement par les propriétaires d'animaux, par exemple en étant saupoudrée sur la nourriture de leur animal. L'extrait selon l'invention peut enfin être encapsulée dans des gélules pour être administré à un humain souffrant d'inconfort digestif.Preferably, the enzymatic extract is obtained from Helix aspersa. In an interesting embodiment, the extract according to the invention is in the form of a powder. Such a presentation makes it easier to store, preserve and use the extract in the context of an industrial or private process. For example, it is possible to produce the extract according to the invention in powder form which can be used in rehydrated form by an industrialist to be included in a food composition, human or animal. The extract in powder form can also be used directly by pet owners, for example by being sprinkled on the food of their animal. The extract according to the invention may finally be encapsulated in capsules to be administered to a human suffering from digestive discomfort.
De préférence, l'extrait selon l'invention présente une activité enzymatique de la cellulase comprise entre 630 u/g.sec et 750 u/g.sec, et une activité enzymatique de la p 1-3 glucanase comprise entre 240 u/g.sec et 350 u/g.sec. L'activité enzymatique de la cellulase et de la p 1-3 glucanase sont déterminées par la mesure de l'augmentation, en fonction du temps, du pouvoir réducteur de l'extrait selon l'invention testé sur une solution contenant soit de la carbaméthylcellulose, soit de la lamarinine, à pH 5,5 à 40°C. Le dosage se base sur l'accroissement de l'activité réductrice lors de l'hydrolyse. Les sucres réducteurs sont dosés par spectrophotométrie après réaction avec le réactif spécifique DNS (dinitrosalicylique).Preferably, the extract according to the invention has an enzymatic activity of cellulase of between 630 u / g.sec and 750 u / g.sec, and an enzymatic activity of p 1-3 glucanase of between 240 u / g. .sec and 350 u / g.sec. The enzymatic activity of cellulase and p 1-3 glucanase are determined by measuring the increase, as a function of time, of the reducing power of the extract according to the invention tested on a solution containing either carbamethylcellulose or lamarinine at pH 5.5 at 40 ° C. The assay is based on the increase of the reducing activity during the hydrolysis. The reducing sugars are determined by spectrophotometry after reaction with the specific DNS reagent (dinitrosalicylic).
Une unité d'activité u correspond à 1 micromol/minute de glucose. L'activité spécifique u/g est obtenue en rapportant l'activité u à la quantité d'extrait sec dans l'échantillon dosé, et l'activité u/g.sec est calculée en rapportant l'activité spécifique au temps de mesure exprimé en seconde. Avantageusement, l'extrait enzymatique aqueux selon l'invention est obtenu à partir d'hépatopancréas d'escargots de l'espèce Helix aspersa. L'hépatopancréas est un sous-produit de l'industrie alimentaire riche en enzymes. Un autre objet de la demande concerne une composition comprenant l'extrait enzymatique selon l'invention pour l'amélioration de la digestion et/ou la réduction des flatulences et du volume des selles.One unit of activity u corresponds to 1 micromol / minute of glucose. The specific activity u / g is obtained by relating the activity u to the amount of dry extract in the measured sample, and the activity u / g.sec is calculated by relating the specific activity to the measurement time expressed in second. Advantageously, the aqueous enzymatic extract according to the invention is obtained from hepatopancreas snails of the species Helix aspersa. Hepatopancreas is a by-product of the enzyme-rich food industry. Another object of the application relates to a composition comprising the enzymatic extract according to the invention for improving digestion and / or reducing flatulence and stool volume.
Dans un mode de réalisation avantageux, la composition comprend l'extrait enzymatique selon l'invention pour l'amélioration de la digestion et/ou la réduction des flatulences chez l'homme, ladite composition comprenant entre 50% et 75% en poids dudit extrait enzymatique par rapport au poids total de la composition. Un dosage adapté pour un humain adulte est d'environ 150 mg/jour.In an advantageous embodiment, the composition comprises the enzymatic extract according to the invention for improving digestion and / or reducing flatulence in humans, said composition comprising between 50% and 75% by weight of said extract. enzymatic relative to the total weight of the composition. A suitable dosage for an adult human is about 150 mg / day.
Une telle composition peut être par exemple sous forme de capsules ou de comprimés, comme alicament, afin de faciliter la digestion de manière chronique ou ponctuelle. Une telle composition peut également être une composition alimentaire industrielle comprenant l'extrait selon l'invention afin de rendre ladite composition alimentaire plus digeste.Such a composition may for example be in the form of capsules or tablets, as a food, in order to facilitate the digestion chronically or punctually. Such a composition may also be an industrial food composition comprising the extract according to the invention in order to make said food composition more digestible.
Dans un autre mode de réalisation avantageux, la composition comprend l'extrait enzymatique selon l'invention pour l'amélioration de la digestion et/ou la réduction des flatulences chez le chien et/ou le chat, ladite composition comprenant entre 0,05% et 0,1% en poids dudit extrait enzymatique par rapport au poids total de la composition. Ainsi, il est intéressant d'intégrer l'extrait selon l'invention dans les compositions alimentaires pour animaux de compagnie afin de faciliter leur confort digestif et améliorer l'absorption des nutriments contenus dans leurs aliments. A titre d'exemple, les compositions selon l'invention peuvent être des croquettes pour chien ou chat comprenant l'extrait selon l'invention à une concentration pondérale comprise entre 0,05% et 0,1%. L'extrait selon l'invention est en effet suffisamment efficace pour se contenter d'une faible quantité. L'invention a également pour objet un procédé de fabrication d'un extrait enzymatique selon l'invention à partir d'escargots congelés choisis parmi les espèces Helix aspersa, Helix pomelo, Helix lucorum ou leur combinaison, ledit procédé comprenant les étapes de : a. préparation d'un mélange comprenant de l'eau purifiée et lesdits escargots congelés ; b. broyage desdits escargots dans ledit mélange ; c. extraction enzymatique en phase aqueuse à température ambiante ; d. séparation liquide-solide ; e. séchage par atomisation, lyophilisation ou flux d'air chaud. De préférence, l'étape de mélange se fait dans les proportions suivantes massiques suivantes : 1/4 d'escargots congelés, avec leurs coquilles, pour 3/4 d'eau purifiée, par rapport au poids total du mélange. On calcule la proportion massique selon la formule suivante : Proportion massique de X = masse de X/ masse totale du mélange. Avantageusement, l'étape de séchage est mise en oeuvre par flux d'air chaud dont la température comprise entre 30-45°C. Ce procédé permet de conserver l'efficacité des enzymes tout en optimisant l'étape de séchage et en étant une méthode peu couteuse en comparaison de la lyophilisation.In another advantageous embodiment, the composition comprises the enzymatic extract according to the invention for the improvement of digestion and / or the reduction of flatulence in dogs and / or cats, said composition comprising between 0.05% and 0.1% by weight of said enzymatic extract relative to the total weight of the composition. Thus, it is advantageous to integrate the extract according to the invention into pet food compositions in order to facilitate their digestive comfort and improve the absorption of the nutrients contained in their food. By way of example, the compositions according to the invention may be kibble for dogs or cats comprising the extract according to the invention at a concentration by weight of between 0.05% and 0.1%. The extract according to the invention is indeed effective enough to be content with a small amount. The subject of the invention is also a method for manufacturing an enzymatic extract according to the invention from frozen snails chosen from the species Helix aspersa, Helix pomelo, Helix lucorum or their combination, said process comprising the steps of: . preparing a mixture comprising purified water and said frozen snails; b. grinding said snails in said mixture; vs. enzymatic extraction in aqueous phase at room temperature; d. liquid-solid separation; e. spray drying, lyophilization or hot air flow. Preferably, the mixing step is in the following proportions by mass: 1/4 frozen snails, with their shells, for 3/4 purified water, relative to the total weight of the mixture. The mass proportion is calculated according to the following formula: Mass ratio of X = mass of X / total mass of the mixture. Advantageously, the drying step is carried out by hot air flow whose temperature is between 30-45 ° C. This method makes it possible to maintain the efficiency of the enzymes while optimizing the drying step and being an inexpensive method in comparison with lyophilization.
De préférence, le procédé selon l'invention comprend en outre une étape de concassage desdits escargots de l'espèce avant l'étape de préparation du mélange ou avant l'étape de broyage. Ainsi, le broyage s'en trouve facilité et l'extraction enzymatique est plus efficace.Preferably, the method according to the invention further comprises a step of crushing said snails of the species before the step of preparing the mixture or before the grinding step. Thus, the grinding is facilitated and the enzymatic extraction is more efficient.
Dans un mode de réalisation intéressant, le procédé selon l'invention comprend en outre une étape de concentration par évaporation sous vide, après l'étape de séparation liquide - solide et avant l'étape de séchage. Cette étape optionnelle permet d'améliorer considérablement l'efficacité du procédé et d'augmenter significativement le taux de matière sèche.In an interesting embodiment, the method according to the invention further comprises a step of concentration by evaporation under vacuum, after the liquid-solid separation step and before the drying step. This optional step considerably improves the efficiency of the process and significantly increases the dry matter content.
Dans un autre mode de réalisation intéressant, le procédé selon l'invention comprend en outre une étape de filtration après l'étape de séparation liquide-solide. Avantageusement, l'étape d'extraction enzymatique en phase aqueuse est réalisée par agitation pendant 1 heure. De préférence, l'étape de séparation liquide-solide est réalisée par centrifugation à une vitesse d'environ 4000 tours par minute. L'extrait selon l'invention peut également être obtenu par d'autres méthodes bien connues de l'homme du métier. Un autre objet de l'invention est l'utilisation d'un extrait enzymatique obtenu à partir d'escargots choisi parmi les espèces Helix aspersa, Helix lucorum, Helix pomatia ou leur combinaison pour la fabrication d'une composition permettant de réduire le volume de gaz et/ou le volume des selles. 5. Description d'un mode de réalisation de l'invention Le principe général de l'invention repose sur l'utilisation d'un extrait enzymatique d'escargots de l'espèce Helix aspersa, Helix pomatia et/ou Helix lucorum pour la formulation de compositions alimentaires, destinées à l'homme ou l'animal, et/ou de composition pharmaceutiques. L'extrait selon l'invention permet d'une part de dégrader les fibres contenues dans les aliments ce qui permet de réduire le volume des selles, des flatulences et du niveau de douleur associé à ces désagréments, et d'autre part d'améliorer l'absorption des nutriments par le colon. 5.1 Préparation d'un extrait d'Hélix aspersa selon l'invention On prépare un extrait d'Helix aspersa à l'aide du procédé d'extraction aqueuse selon l'invention. Pour ce faire, 50 kg d'escargots congelés appartenant à l'espèce Helix aspersa sont mélangés à 150 L d'eau purifiée dans une cuve stérile, à température ambiante, afin de procéder à la décongélation douce des escargots. Le mélange subit ensuite une étape de broyage pour casser la structure des escargots. En fonction des équipements, il pourra éventuellement être envisagé de procéder à une étape préalable de concassage hors de l'eau pour faciliter le broyage. Le mélange est ensuite agité pendant 1 heure à température ambiante. Cette étape correspond à une extraction aqueuse des tissus de l'escargot : les enzymes contenues dans les tissus de l'escargot, et notamment son hépatopancréas, sont libérées dans le mélange. Le mélange subit ensuite une étape de séparation liquide-solide soit par filtration avec une toile de Nylon, soit par centrifugation. De préférence, cette étape de séparation liquide-solide se fait par centrifugation à 4000 rpm pendant 5 minutes. Cette étape permet de séparer les déchets du surnageant contenant les enzymes. Eventuellement, il est possible de procéder à une étape de filtration supplémentaire si de petits déchets subsistent dans le surnageant. A ce stade, on obtient un surnageant clair. De préférence, le surnageant est soumis à une évaporation sous vide afin d'éliminer l'eau superflue et de concentrer les enzymes dans le surnageant. Plus précisément, le surnageant est injecté soit dans un évaporateur rotatif sous vide, soit dans un évaporateur sous vide à colonne. L'évaporation se fait ainsi pendant une durée comprise entre 4 et 6 heures, à une température finement contrôlée comprise entre 40°C et 45°C. Ainsi, l'étape de séchage est facilitée. Cette plage de température permet de sécher le surnageant sans endommager les enzymes et altérer leur activité.In another advantageous embodiment, the method according to the invention further comprises a filtration step after the liquid-solid separation step. Advantageously, the enzymatic extraction step in the aqueous phase is carried out by stirring for 1 hour. Preferably, the liquid-solid separation step is carried out by centrifugation at a rate of about 4000 rpm. The extract according to the invention can also be obtained by other methods well known to those skilled in the art. Another subject of the invention is the use of an enzymatic extract obtained from snails chosen from the species Helix aspersa, Helix lucorum, Helix pomatia or their combination for the manufacture of a composition making it possible to reduce the volume of gas and / or stool volume. 5. DESCRIPTION OF AN EMBODIMENT OF THE INVENTION The general principle of the invention is based on the use of an enzymatic extract of snails of the species Helix aspersa, Helix pomatia and / or Helix lucorum for the formulation food compositions, intended for humans or animals, and / or pharmaceutical compositions. The extract according to the invention makes it possible on the one hand to degrade the fibers contained in the food which makes it possible to reduce the volume of the stool, the flatulence and the level of pain associated with these inconveniences, and on the other hand to improve absorption of nutrients by the colon. 5.1 Preparation of a Helix Aspersa Extract According to the Invention An extract of Helix aspersa is prepared using the aqueous extraction method according to the invention. To do this, 50 kg of frozen snails belonging to the species Helix aspersa are mixed with 150 L of purified water in a sterile tank, at room temperature, to gently defrost snails. The mixture then undergoes a grinding step to break the snail structure. Depending on the equipment, it may be possible to consider proceeding to a preliminary crushing step out of the water to facilitate grinding. The mixture is then stirred for 1 hour at room temperature. This step corresponds to an aqueous extraction of the snail tissues: the enzymes contained in the snail tissues, and in particular its hepatopancreas, are released into the mixture. The mixture then undergoes a liquid-solid separation step either by filtration with nylon cloth or by centrifugation. Preferably, this liquid-solid separation step is by centrifugation at 4000 rpm for 5 minutes. This step separates the waste from the supernatant containing the enzymes. Optionally, it is possible to carry out an additional filtration step if small waste remains in the supernatant. At this stage, a clear supernatant is obtained. Preferably, the supernatant is evaporated under vacuum to remove excess water and concentrate the enzymes in the supernatant. More specifically, the supernatant is injected either into a rotary evaporator under vacuum or into a column vacuum evaporator. The evaporation is thus carried out for a period of between 4 and 6 hours, at a finely controlled temperature of between 40 ° C. and 45 ° C. Thus, the drying step is facilitated. This temperature range makes it possible to dry the supernatant without damaging the enzymes and altering their activity.
Enfin, le surnageant, éventuellement concentré, est soumis à une étape de séchage. De préférence, on procède à un séchage par flux d'air dont la température ne dépasse pas 45°C. Ainsi, la qualité et l'activité des enzymes sont préservées. L'étape de séchage peut être faite sur un support inerte tel que la maltodextrine. On peut également prévoir des étapes ultérieures de pressage ou 30 d'encapsulation de l'extrait d'Helix aspersa en poudre pour fabriquer des compléments alimentaires pour l'homme.Finally, the supernatant, optionally concentrated, is subjected to a drying step. Preferably, drying is carried out by air flow whose temperature does not exceed 45 ° C. Thus, the quality and activity of the enzymes are preserved. The drying step can be done on an inert carrier such as maltodextrin. Further steps of pressing or encapsulating the powdered Helix aspersa extract can also be provided to make dietary supplements for humans.
Les activités des enzymes cellulases et (3 1-3 glucanase sont évaluées par toute méthode bien connue de l'homme de l'art. L'extrait d'Helix aspersa selon l'invention comprend environ 75% de protéines, 12% de glucides, 3% de lipides et 8% de cendres. Le pH mesuré est à 7,1. Les analyses de solubilité ont montré que la poudre était totalement soluble dans l'eau. L'activité enzymatique de l'extrait selon l'invention n'est pas altérée par un passage à l'étuve à 70°C pendant 20 minutes. L'extrait produit par le procédé selon l'invention se présente sous forme d'une poudre fine de couleur blanc-crème. Cette poudre se caractérise par une odeur et une saveur neutres. Ainsi, l'extrait d'Helix aspersa selon l'invention se présente sous la forme d'une poudre : les poudres sont plus faciles à stocker à température ambiante, plus stable et plus facile à utiliser dans le cadre d'un procédé industriel. Par exemple, il suffit de diluer la poudre dans de l'eau purifiée pour obtenir une solution à pulvériser, par exemple à la surface de croquettes pour animaux. On peut donc concevoir des compositions alimentaires pour animaux comprenant entre 0,05 et 0,1% en poids d'extrait selon l'invention, par rapport au poids total de la composition alimentaire. Les propriétaires de chiens et de chats peuvent également utiliser la poudre pour saupoudrer directement la nourriture de leur animal et améliorer ainsi sa digestibilité.The activities of the cellulase and 3 1-3 glucanase enzymes are evaluated by any method well known to those skilled in the art.The Helix aspersa extract according to the invention comprises about 75% proteins, 12% carbohydrates. 3% lipids and 8% ash The measured pH is 7.1 Solubility analyzes showed that the powder was totally soluble in water The enzymatic activity of the extract according to the invention The extract produced by the process according to the invention is in the form of a fine powder of creamy white color, which is characterized by the fact that it is passed through the oven at 70 ° C. for 20 minutes. Neutral odor and taste Thus, the extract of Helix aspersa according to the invention is in the form of a powder: the powders are easier to store at room temperature, more stable and easier to use in the For example, it is sufficient to dilute the powder in purified water for r obtain a spray solution, for example on the surface of animal kibble. It is therefore conceivable for animal feed compositions comprising between 0.05 and 0.1% by weight of extract according to the invention, relative to the total weight of the food composition. Owners of dogs and cats can also use the powder to sprinkle food directly from their pet and thus improve its digestibility.
Il est à noter que le même procédé peut être appliqué pour la synthèse d'un extrait à partir d'escargots appartenant aux espèces Helix pomelo ou Helix lucorum, ou en mélangeant des escargots appartenant à n'importe laquelle de ces trois espèces pour fabriquer un extrait enzymatique selon l'invention. 5.2 Protocole de mesure des activités enzymatiques L'activité des enzymes cellulase et (3-1-3-glucanase est mesurée grâce au protocole suivant. L'extrait sec préparé conformément au paragraphe 5.1 est dilué au 1/5ème dans un tampon acétate à 100 mmol/L, pH 5.5. On prépare en parallèle une solution de carbaméthyl-cellulose à 10 g/L et une solution de lamiranine à 10 g/L, dans du tampon acétate 100 mmol/L, pH5.5. La laminarine a pour formule générale (C6H1205)n avec n compris entre 25 et 30. La solution de laminarine permet de doser l'activité de la (3 1-3 glucanase tandis que la solution de carbaméthyl-cellulose permet de doser l'activité de la cellulase. Brièvement, à 0,4 ml de solution de laminarine ou de carbaméthyl-cellulose, on ajoute 0,1 ml de l'extrait selon l'invention dilué. Les mélanges obtenus sont ensuite homogénéisés. On prépare ainsi plusieurs échantillons afin de réaliser une cinétique d'activité. La cinétique est faite sur 20 minutes, en incubant toutes les 5 minutes un échantillon à 40°C. Une fois la cinétique terminée, on ajoute 0,5 ml de DNS à chaque échantillon. Les tubes sont ensuite incubés pendant 5 min à 100°C puis brutalement refroidis dans un bain-marie d'eau froide. 2 mL d'eau déminéralisée sont ajoutés à chaque échantillon avant de lire l'absorbance au spectrophotomètre à 250 nm. En parallèle, une courbe d'étalonnage au glucose est réalisée en suivant le même protocole.15It should be noted that the same method can be applied for the synthesis of an extract from snails belonging to the species Helix pomelo or Helix lucorum, or by mixing snails belonging to any of these three species to make a snail. enzymatic extract according to the invention. 5.2 Enzymatic Activity Measurement Protocol The activity of the cellulase and (3-1-3-glucanase) enzymes is measured by the following protocol: The dry extract prepared in accordance with paragraph 5.1 is diluted 1: 5 in 100% acetate buffer. mmol / L, pH 5.5 A solution of carbamethylcellulose at 10 g / l and a solution of lamiranine at 10 g / l are prepared in parallel in acetate buffer 100 mmol / l, pH 5.5. general formula (C6H1205) n with n between 25 and 30. The laminarine solution makes it possible to determine the activity of the 1-3 1-3 glucanase while the carbamethylcellulose solution makes it possible to determine the activity of the cellulase. Briefly, to 0.4 ml of solution of laminarine or carbamethylcellulose, 0.1 ml of the extract according to the diluted invention is added, the mixtures obtained are then homogenized, thus preparing several samples in order to achieve kinetics. The kinetics are made over 20 minutes, incubating a sample at 40 ° C every 5 minutes. Once the kinetics are complete, add 0.5 ml of DNS to each sample. The tubes are then incubated for 5 min at 100 ° C. and then brutally cooled in a cold water bath. 2 mL of demineralized water is added to each sample before reading the spectrophotometer absorbance at 250 nm. In parallel, a glucose calibration curve is carried out following the same protocol.
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2763589C1 (en) * | 2021-07-07 | 2021-12-30 | Владимир Владимирович Евсейченко | Method for producing powder extract from grape snail |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FR3014902B1 (en) | 2020-06-26 |
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