FR2999385A1 - Formulations liquides et stables de gibberellines - Google Patents

Abstract

La présente invention porte sur une solution liquide comprenant au moins un régulateur de la croissance des plantes et au moins un solvant aprotique polaire choisi dans le groupe consistant en les composés de formule I, II, III et leurs mélanges, dans laquelle: -R1 et R2 représentent indépendamment H ou un groupe alkyle ayant moins de 5 atomes de carbone -R3, R4 et R5 représentent chacun indépendamment un groupe alkyle ayant moins de 5 atomes de carbone -R6 représente un groupe alkylidène linéaire ou ramifié ayant moins de 5 atomes de carbone, et sur ses applications.

Description

FORMULATIONS LIQUIDES ET STABLES DE GIBBERELLINES Domaine technique de l'invention L'invention porte sur de nouvelles formulations qui sont des solutions liquides d'agents régulateurs de la croissance des plantes, en particulier de la famille des Gibbérellines, et plus particulièrement de l'acide Gibbérellique communément appelé GA3, et sur leurs utilisations pour le traitement des plantes, arbres fruitiers, fruits, légumes, fleurs et graines.

Arrière-plan technologique de l'Invention: Les régulateurs de croissance des plantes sont des phytohormones bien connues, utilisées pour promouvoir, influencer et induire la levée de la dormance, la germination des graines, la croissance, la floraison, la croissance des fruits afin d'obtenir les effets souhaités tels que des fruits plus fermes, plus colorés, de taille uniforme, d'augmenter les rendements, la taille et la qualité des fruits et légumes, pour contrôler l'éclaircissage des fruits, pour améliorer la maturité en retardant le développement du fruit, en réduisant le brunissage, pour avancer la floraison, interrompre la dormance et stimuler la germination, rallonger la période de cueillette en hâtant la maturité, contrôler ou ralentir la sénescence des plantes dans leur ensemble ou de certains organes. Les principales classes de régulateurs de croissance des plantes comprennent l'acide abscisique (ABA), les auxines, notamment l'acide 1-naphthalène acétique (NAA) et l'acide indole-3-butyrique (IBA), l'éthylène, les cytokinines (CKs) telles que la kinétine, la benzyladénine ou la zéatine et les gibbérrellines (GAs); et d'autres hormones telles que les brassinostéroïdes, l'acide salicylique, les jasmonates, les strigolactones et les karrikines. Les gibbérellines constituent l'une des classes 5 majeures de phytohormones naturelles qui sont produites industriellement par fermentation d'une levure naturelle, Gibberella fujikuroi. Les gibbérellines sont des diterpénoïdes acides qui ont en commun un noyau gibbane (I) et qui diffèrent les unes des autres par la nature des 10 substituants et par leur degré d'insaturation. noyau gibbane (I) En 2009, 126 gibbérellines étaient identifiées (J- L.Spring and 0.Viret Revue Suisse Vitic.Hortic.Vol 41(2):95-101.2009). Cependant, en raison de leur facilité 15 de production et de leur efficacité biologique, seules trois d'entre elles présentent un intérêt commercial: GA3 (il) ou acide gibbérellique, GA4 ou gibbérelline A4 (III) et GA7 ou gibbérelline A7 (IV), les deux dernières étant produites sous forme de mélange. GA3 est la gibbérelline 20 principalement utilisée. Les gibbérellines sont efficaces en très faibles concentrations et leurs effets biologiques sont très sensibles aux conditions d'utilisation et aux dosages.

GA3-Acide Gibbérellique-(111) GA4-Gibbérelline A4-(11I) GA7-Gibbérelline A7-(IV) Malheureusement les gibbérellines sont très peu solubles dans l'eau et en solution aqueuse elles s'hydrolysent quelque soit le pH, pour former des dérivés de gibbérellines moins actifs ou non actifs. Leur hydrolyse en solutions aqueuses en fonction du pH et de la température a largement été étudiée (I Kuhr -Biotika, Slovenka, Lupca , 23 fév., 1962 ; JC Du Preez, XM Qian, SG Kilian - Biotechnology Techniques vol 7 ,n°5 Mai 1993 p.391-396) et certaines voies de dégradation ont été proposées par les auteurs, selon le schéma 1 suivant.

Neutre à légère me alcalin 4 CO2H GA3-Acide Gibbérellique Neutre aqueux HOgee - H OH CO2H CO2H CO2H IsoGA3- Acide 3-lsoGibbérellique (V) 1 Fortemen alcalin HO,, HO co2 co2 Na Na Sel disodique du 2,3,7-trihydroxy 4-ène 1,10-diacide (VI) (schéma 1) Ga',-Acide Gibbérellènique (VII) I50°C acide ou 100°C Neutre GB-Acide alloGibbérique (VIII) Acide Gibbérique (IX) 100°C Acid dilué CO2H OH Dans des conditions légèrement alcalines, l'acide gibbérellique s'isomérise en acide isogibbérellique (V), 5 lequel, en conditions fortement basiques, consomme deux équivalents de la solution alkaline pour former le sel de l'acide 2,3,7-trihydroxy-1-méthy1-8-méthylène-gibb-4-ène 1,10-dicarbonique (VI) ( Cross , 1960 ). L'acide gibbérellènique (VII) se forme à partir de solutions aqueuses d'acide gibbérellique laissées au repos 5 pendant un certain temps à la température ambiante (Moffat, 1960). L'acide allogibbérique inactif (VIII) se forme à partir de l'acide gibbérellique et à partir de l'acide gibbérellènique en solutions aqueuses neutres ou bien à 10 50°C ou bien à ébullition (Cross, 1954- Brian, 1958) Les acides allogibbérique, gibbérellènique et gibbérellique donnent l'acide gibbérique (IX) dans des acides dilués à ébullition (Grove & Mulholland, 1960). Compte tenu du fait que les gibbérellines 15 s'hydrolysent quelque soit le pH, il n'est pas possible d'avoir des formulations liquides aqueuses stables au stockage. Les gibbérellines sont donc mises à disposition des cultivateurs principalement sous forme de formulations solides. Les formulations solides sont cependant plus 20 coûteuses à produire et présentent certains inconvénients. Les poudres solubles et poudres mouillables de gibbérelline produisent des poussières lors de leur manipulation ce qui présente un risque pour la santé de ceux qui les manipulent. Les formulations solides sont souvent très 25 lentes à se dissoudre et forment parfois des agglomérats non dissous qui lors de la pulvérisation bouchent les embouts de pulvérisation. Il existe également des comprimés effervescents de gibbérellines, mais ces comprimés sont sensibles à 30 l'humidité et peuvent perdre leur activité lors du stockage. Ils sont également connus comme nécessitant un temps très long pour se dissoudre totalement.

Pour surmonter les difficultés des formulations solides, des formulations de granules solubles dans l'eau (WSG water soluble granule formulations) ont récemment été développées avec succès. Cependant elles restent largement plus coûteuses que des formulations liquides. Il existe dans le commerce des formulations liquides de gibbérellines. Celles-ci sont dissoutes dans des alcools inférieurs tels que le méthanol, l'éthanol ou l'isopropanol, à une concentration inférieure à 4%p/v, par exemple pour GA3, ou dans le tétrahydrofurfuryl alcool ou des glycols, notamment le propylène glycol, pour les mélanges de GA4 et GA7. Ces produits commerciaux sont destinés à être dilués juste avant l'application par pulvérisation.

Cependant, les formulations de GA3 dans les alcools inférieurs présentent des inconvénients importants. Du fait de leur caractère inflammable, ils doivent être déclarés en tant que tels avec des restrictions mentionnées sur l'emballage et les étiquettes. Ils causent des problèmes de sécurité lors de la fabrication, de l'emballage, du transport et du stockage. En outre, le méthanol est classifié comme neurotoxique et affecte le système nerveux central. Comme les alcools inférieurs ont des points d'ébullition faibles et des pressions de vapeur élevées, ils sont référencés dans la Directive 1999/13/CE du Conseil du 11 mars 1999 relative à la réduction des émissions de composés organiques volatils dues à l'utilisation de solvants organiques dans certaines activités et installations. Le problème est d'autant plus aigu lorsqu'ils sont présents sous forme de formulations commerciales, car lors de leur application, les utilisateurs sont exposés à des volumes très importants de ces solvants.

Les classifications du tétrahydrofurfuryl alcool (THFA) des formulations de GA4+7 ne sont pas meilleures. Le THFA est classifié dans le SGH (Système général harmonisé de classification et d'étiquetage des produits chimiques des Nations Unies) en catégorie 2 comme provoquant des irritations des yeux et proposé par l'ANSES comme une substance suspectée d'être toxique pour la reproduction (classement Repr.de catégorie 2 selon le règlement européen sur la classification et l'étiquetage des substances chimiques n°1272/2008) pour les effets sur la fertilité et le développement de la descendance (Avis de l'ANSES-saisine n°2010-SA-0320-Classification européenne du THFA). Le propylène glycol qui n'est pas classifié et est un solvant plus sûr, permet cependant uniquement des formulations ayant de faibles concentrations en GA4,7 et présentant une très faible stabilité au stockage. Il existe par conséquent un réel et important besoin de mettre à disposition des formulations liquides de régulateurs de croissance des plantes, notamment de gibbérellines qui soient stables au stockage, non classées et non agressives pour l'environnement. EP 1094708 enseigne des formulations de concentrés émulsifiables (emulsifiable concentrate (EC)) ou d'émulsions huile-dans-eau (oil in water emulsion (EW)) de formulations de GA5 hydrogéné liquide dans un mélange de solvants comprenant une part d'huile végétale et 5 à 30% d'ester d'acide gras comme co-solvants et des esters d'acide lactique et d'au moins 0,5% de triglycérides à base d'acide carboxylique en C2-C30 polyéthoxylés et/ou d'ester d'acide gras de sucre alcool polyéthoxylé et au moins 0,1% d'une autre formulation auxiliaire, mais ces formulations sont sensibles à la chaleur et compliquées à fabriquer.

US6,756,344 enseigne qu'un sel d'amine grasse de GA3 peut être solubilisé dans des esters d'huiles végétales telles que l'oléate d'éthyle en tant que solvant pour produire une formulation de liquide de GA3. Au moins 3% d'un émulsifiant supplémentaire est nécessaire pour permettre la dispersion de cette formulation lipophile dans l'eau. Dans ces formulations un mélange de sels de diméthylcocoamine et d'oléylamine d'acide gibbérellique est solubilisé dans un mélange de solvants comprenant 40 à 80 % d'un mélange 80/20 d'éthyl comprend comme 3 jusqu'à 11% font l'objet limitée par la de glycol éthers. d'investigations et leur Directive 1348/2008. oléate et méthyl oléate. La formulation co-solvants et réducteurs de viscosité, de utilisation est Cependant, ces derniers US2005/0288188 enseigne que certains tensio-actifs peuvent être utilisés comme solvants de formulations liquides de régulateur de croissance de plantes à une concentration de 50-90%. L'exemple 1 de cette demande décrit une formulation à 2% de GA3 comprenant 49% de polyéthylène Glycol (200 Ethylène Oxyde) PEG 200 et 49% d'amine de suif (15 EO). Malheureusement, les amines de suif sont classifiées comme étant nocives pour les humains et toxiques pour l'environnement. US2006/0172890 enseigne qu'un mélange de solvants comprenant 70-90% d'ester d'acide lactique et 10-30% d'alcool polyvalent peut avantageusement être utilisé dans une formulation de type solution liquide de gibbérellines. Cependant, les alcools polyvalents mentionnés sont des polyols linéaires ou ramifiés et des sucres alcools : glycérol, propylène glycol, éthylène glycol, érythritol, pentaérythrithol, mannitol, thréitol ou sorbitol. Même si la substitution des alcools inférieurs par un tel mélange de solvants est une amélioration importante, elle ne permet pas d'obtenir des solutions liquides chimiquement stables. Résumé de l'invention: De façon surprenante et inattendue, il a été trouvé 5 que certains solvants très spécifiques permettaient d'obtenir des solutions liquides chimiquement stables de régulateurs de croissance des plantes. En conséquence, l'invention porte sur une formulation de type solution liquide, stable, en particulier chimiquement stable, de 10 régulateur de croissance de plantes, comprenant au moins un agent régulateur de la croissance des plantes, et au moins un solvant polaire aprotique choisi dans le groupe consistant en les composés de formule I, II, III et leurs mélanges, 15 P3 I ,N ,R6, _...0 R4- -----. ------ ..--R5 CI 0 HO (I) 20 où: -R1 et R2 représentent indépendamment H un groupe alkyle ayant moins de 5 carbones -R3, R4 et R5 représentent indépendamment un groupe alkyle ayant moins de 5 carbones 25 -R6 représente un groupe alkylidène linéaire ou ramifié ayant moins 5 carbones.

Par "groupe alkyle ayant moins de 5 atomes de carbone", on entend un alkyle choisi dans le groupe consistant en méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, n-butyle, isobutyle, sec-butyle, tert-butyle, n-pentyle, méthy1-1-butyle, méthy1-2-butyle, méthy1-3-butyle, 1,1-diméthyl-propyle, 1,2-diméthylpropyle, 2,2-diméthylpropyle et (1-éthyl)- éthyle. De préférence, ledit groupe alkyle est un groupe méthyle. Par "groupe alkylidène ayant moins de 5 atomes de carbone", on entend tout groupe alkyle divalent linéaire ou ramifié ayant moins de 5 carbones, tels que ceux choisis dans le groupe comprenant méthylidène, éthylidène, 1,2éthylidène, propylidène, 1-méthy1-1,2-éthylidène, 1,3- propylidène, 2,2-propylidène, butylidène, 1-éthy1-1,2- éthylidène, 1-méthy1-1,3-propylidène, 1,4-butylidène, 1- méthyl-propylidène, 1,2-diméthy1-1,2-éthylidène, 2-méthylpropylidène, 1,1-diméthy1-1,2-éthylidène and 2-méthy1-1,3- propylidène. De préférence, ledit groupe alkylidène est le 1-méthy1-1,3-propylidène également connu sous le nom 1,3- butylidène. Lesdites formulations sont des solutions liquides (SL). Dans la présente description, on utilisera indifféremment les appellations "formulations liquides de l'invention" ou "solutions liquides de l'invention".

Les composés de formule (I), (II) et (III) sont sûrs et d'une totale innocuité, ils ne présentent pas de risque. Les formulations selon l'invention confèrent donc une amélioration en ce qui concerne le respect de la santé humaine et des opérateurs lors de la fabrication de ces formulations et lors de leur application sur les cultures. Les formulations selon l'invention mettant en oeuvre les solvants (I), (II), (III) ou leurs mélanges, sont stables selon la norme de stabilité accélérée (CIPAC MT 46.3) des propriétés physico-chimiques et des données requises par le règlement CE 1107/2009. Ainsi l'invention propose des formulations liquides 5 qui sont des solutions liquides stables et sûres de régulateurs de croissance qui ne sont pas classifiées. Le régulateur de la croissance des plantes est choisi dans le groupe comprenant l'acide abscisique (ABA), les auxines, les cytokinines, les gibbérrellines, les 10 brassinostéroïdes, l'acide salicylique, les jasmonates, les strigolactones, les karrikines et leurs mélanges. Les régulateurs de croissance des plantes de la famille auxines pouvant être mis en oeuvre dans les formulations de l'invention sont l'acide 1-naphtalène 15 acétique (1-NAA) (CAS:86-87-3), le 1-naphtalène acétamide (1-NAD) (CAS:86-86-2), l'acide 1-naphtyloxyacétique, l'acide 4-indole-3-yl-butyrique (IBA), l'acide indole-3-ylacétique. De façon particulière, on met en oeuvre l'acide 1-naphtalène acétique (NAA), ou le 2-(1-naphty1)-acétamide 20 (NAD). A titre de cytokinines, on peut citer la kinétine, la 6-benzylaminopurine, l'isopentényladénine et la zéatine. Les régulateurs de croissance de plantes de la famille des Gibbérellines mises en oeuvre dans les formulations de 25 l'invention sont: -l'acide gibbérellique (CAS 77-06-5), 1,4a-lactone de l'acide(104213,4aa,4b13,10)-2,4a,7-trihydroxy-1-méthyl-8- méthylène-gibb-3-ène-1,10-dicarboxylique, qui présente la formule structurelle: HO -la gibbérelline A4 (CAS 468-44-0), 1,4a-lactone de 1'acide(104213,4aa,4b13,10)-2,4a-dihydroxy-1-méthyl-8- méthylène-gibbane-1,10-dicarboxylique, qui présente la 5 formule structurelle: -la gibbérelline A7 (CAS 510-75-8), 1,4a-lactone de l'acide(104213,4aa,4b13,10)-2,4a-dihydroxy-1-méthyl-8- méthylène-gibb-3-ène-1,10-dicarboxylique, qui présente la 10 formule structurelle: HO`f H \ CO21-1 La gibbérelline est choisie dans le groupe comprenant l'acide gibbérellique (GA3), la gibbérelline A4 (GA4), la gibbérelline A7 (GA7) et leurs mélanges. 15 De préférence, la gibbérelline est l'acide Gibbérellique (GA3). Les régulateurs de croissance mentionnés ci-dessus peuvent être utilisés seuls ou en mélanges. Ils peuvent également être utilisés avec des engrais et/ou des 20 nutriments. A titre de nutriments, on peut citer le bore, le manganèse, le magnésium et les acides aminés.

Ainsi, selon un mode de réalisation particulier, les formulations selon l'invention peuvent en outre comprendre un engrais, un nutriment et leurs mélanges, en vue de son application simultanée, séquentielle ou en alternance.

Les compositions de l'invention sont particulièrement appropriées pour des formulations comprenant au moins une gibbérelline. Dans un mode de réalisation spécifique de l'invention, le solvant aprotique polaire est le solketal de formule I 10 avec R1=R2=CH3: HO Formule I Le Solketal est également connu sous la dénomination isopropylidène glycérol ou 4-hydroxyméthy1-2,2'-diméthyl15 1,3-dioxolane. Dans un autre mode de réalisation spécifique de l'invention, le solvant aprotique polaire est le 1,2- glycérol-formal également connu sous la dénomination 4- hydroxy-méthy1-1,3-dioxolane de Formule I avec R1=R2 =H ..-----, 0 0 / 20 HO Formule I Dans un autre mode de réalisation de l'invention le solvant aprotique polaire est le 1,3-glycérol-formal également connu sous la dénomination 4-hydroxy-1,3-dioxane de Formule II où R1=R2=H OH Formule II Dans un mode de réalisation préféré de l'invention, le solvant aprotique polaire est un mélange en n'importe quelles proportions de 1,2- et 1,3-glycérol formal. Plus particulièrement, le solvant est un glycérol formal technique qui est un mélange de 50 à 60 % de 1,3-glycérol et de 40 à 50 % de 1,2-glycérol formal. Lesdits produits sont disponibles dans le commerce auprès de nombreuses sociétés. Les glycérol formals techniques sont des liquides non classifiés, limpides, clairs et sans odeur. Ces liquides sont, dans la plupart des conditions, stables et non corrosifs. Ils sont d'une totale innocuité et utilisés comme vecteurs notamment pour des préparations injectables utilisées dans l'industrie vétérinaire. Dans un autre mode de réalisation de l'invention, le solvant aprotique polaire est le méthy1-5-(diméthylamino)2- méthy1-5-oxo-pentanoate (CAS n°1174627-68-9), un solvant de formule (III) vendu par la Société Rhodia sous la marque Rhodiasolv Polarclean. Les formulations stables de régulateurs de croissance des plantes, notamment de gibbérelline, selon l'invention peuvent en outre comprendre un ou plusieurs co-solvants. Lesdits co-solvants sont d'une innocuité totale et n'affectent pas la durée de vie ou la stabilité accélérée au stockage des formulations de régulateurs de croissance de plantes, notamment de gibbérelline.

Dans les solutions liquides de l'invention, le cosolvant est choisi dans le groupe consistant en l'eau, un solvant polaire aprotique d'une totale innocuité, miscible dans l'eau, et leurs mélanges.

Le co-solvant polaire aprotique, miscible dans l'eau est choisi dans le groupe comprenant le diméthyl sulfoxyde (DMSO), les glycols d'une innocuité totale tels que le propylène glycol, le triéthylène glycol et leurs mélanges. Le DMSO est particulièrement intéressant et préféré 10 dans les formulations selon l'invention. Ainsi, selon un autre mode de réalisation, les formulations selon l'invention comprennent du DMSO comme co-solvant. L'eau comme co-solvant, peut être utilisé jusqu'à 15%, 15 de préférence 10% en volume du volume total de la solution liquide. A ces concentrations, la stabilité chimique est assurée. Avantageusement, les formulations stables de régulateur de croissance selon l'invention, comprennent un 20 agent régulateur de croissance des plantes, notamment une gibbérelline, au moins un solvant choisi parmi le glycérol-formal, le solketal, le Rhodiasolv Polar clean, et leurs mélanges, et un co-solvant aprotique polaire choisi dans le groupe comprenant DMSO, propylène glycol, eau et 25 leurs mélanges. Dans un mode de réalisation préféré, les formulations stables de gibbérelline de l'invention comprennent l'acide gibbérellique (GA3), le glycérol-formal en tant que solvant et l'eau comme co-solvant. Dans un autre mode de réalisation, les formulations stables de 30 Gibbérelline comprennent l'acide gibbérellique (GA3), le glycérol-formal comme solvant et le DMSO comme co-solvant. Dans un autre mode de réalisation, les formulations stables de gibérelline de l'invention comprennent l'acide gibbérellique (GA3), le glycérol-formal comme solvant et un mélange de DMSO et de propylène glycol comme co-solvants. Dans un autre mode de réalisation particulier, les 5 formulations stables de gibbérelline de l'invention comprennent l'acide gibbérellique (GA3), le méthy1-5- (diméthylamino)-2-méthy1-5-oxopentanoate comme solvant et le DMSO comme co-solvant. Dans un autre mode de réalisation particulier, les formulations stables de gibbérelline de 10 l'invention comprennent l'acide gibbérellique (GA3), le méthy1-5-(diméthylamino)-2-méthy1-5-oxopentanoate comme solvant et un mélange de DMSO et de propylène glycol comme co-solvants. Dans encore un autre mode de réalisation particulier, les formulations stables de gibbérelline de 15 l'invention comprennent l'acide gibbérellique (GA3) et le glycérol-formal comme solvant seul. Dans un autre mode de réalisation, les formulations stables de gibbérelline de l'invention comprennent l'acide gibbérellique (GA3), le méthy1-5-(diméthylamino)-2-méthy1-5-oxopentanoate comme 20 solvant seul. Les formulations de type solutions liquides stables de régulateurs de croissance des plantes, notamment de gibbérelline, selon l'invention peuvent comprendre des agents de formulation non classifiés, classiquement 25 utilisés dans des compositions phytosanitaires, connus par l'homme du métier, tels que des agents dispersants, des agents émulsifiants, des agents mouillants, des agents anti-mousse et des conservateurs. Ils peuvent être utilisés seuls ou en mélange. Des agents tensio-actifs sont 30 notamment des sorbitan gras polyalkoxylés comme le Tween 20 ou Tween 80. Des agents émulsifiants qui peuvent être mentionnés sont des agents tensio-actifs connus pour donner une émulsification stable. Ils comprennent des esters et éthoxylates de sorbitan, des alcools ethoxylés, éthoxylates d'acide gras (PEG esters), alkyl imidazolines grasses, bétaines et tristyryl phénol polyéthoxylé gras (Emulsogen or Soprophor 1S54-), huile de ricin éthoxylée (alkamuls 0R36), tri-secbutylphénol éthoxylé (Sapogenat 1180), acides gras éthoxylés, esters d'acides gras éthoxylés, alcools gras éthoxylés, amines grasses éthoxylées, alkylphénols éthoxylés, alkylarylphénols éthoxylés, halogénures de tétraalkylammonium, halogénures trialkylarylammonium, alkylamine sulfonates, alkylpolyglucos ides. Selon un mode de réalisation spécifique, les formulations de gibbérellines selon l'invention 15 comprennent: - de 1 à 100 g/L, de préférence de 10 à 50 g/L, et encore plus préférentiellement de 15 à 35g/L d'au moins un agent régulateur de croissance des plantes choisi dans le groupe comprenant l'acide abscisique 20 (ABA), les auxines, les cytokinines, les gibbérrellines, les brassinostéroïdes, l'acide salicylique, les jasmonates, les strigolactones, les karrikines et leurs mélanges, de préférence au moins une gibbérelline; éventuellement avec un 25 engrais et/ou un nutriment; - de 20 à 99,9% p/p, de préférence de 30 à 98% p/p, et plus préférentiellement encore de 45 à 96% p/p d'un solvant choisi dans le groupe consistant en les composés de formule (I), (II) ou (III) et leurs 30 mélanges, de préférence glycérolformal ou Rhodiasolv Polarclean; - de 0 à 5,0% p/p, de préférence de 0,5 à 3% p/p, et plus préférentiellement encore de 1 à 2 % p/p d'un agent de formulation choisi dans le groupe comprenant des agents dispersants, des agents émulsifiants, des agents mouillants, des agents anti-mousse et des conservateurs, de préférence un émulsifiant ou un agent mouillant; - de 0 à 60% p/p, de préférence 5 à 50% p/p, et encore plus préférentiellement encore de 10 à 40% p/p d'un co-solvant choisi dans le groupe consistant en l'eau, un solvant aprotique polaire et leurs mélanges, ledit solvant aprotique polaire, miscible dans l'eau étant choisi dans le groupe comprenant le diméthyl sulfoxyde (DMSO), les glycols tels que le propylène glycol, le triéthylène glycol; de préférence le DMSO. Selon un mode de réalisation spécifique, la formulation de l'invention est une formulation de gibbérelline qui comprend: - de 5 à 40 g/1, de préférence de 10 à 30 g/L et plus préférentiellement encore de 15 à 25 g/L d'acide gibbérellique (GA3) ; - de 500 à 1200 g/L, de préférence de 850 à 1180 g/L et plus préférentiellement encore de 900 à 1100 g/L de glycérol formal ou Rhodiasolv Polar clean - de 0 à 150 g/L, de préférence de 3 à 120 g/L et plus préférentiellement encore de 5 à 100 g/L d'eau; - de 0 à 100 g/L, de préférence de 1 à 75 g/L, et plus préférentiellement encore de 5 à 50 g/L d'au moins un agent émulsifiant ou dispersant.

Selon un autre mode de réalisation, la formulation stable de Gibbérelline comprend: - de 5 à 40 g/1, de préférence de 10 à 30 g/L et plus préférentiellement encore de 15 à 25 g/L d'acide gibbérellique (GA3) ; - de 150 à 1200 g/L, de préférence de 350 à 1180 g/L et plus préférentiellement encore de 500 à 800 g/L de glycérol formal ou Rhodiasolv Polar clean; - de 0 à 900 g/L, de préférence de 5 à 750 g/L, et plus préférentiellement encore de 50 à 600 g/L d'un mélange 50/50 de DMSO et de propylène glycol. - de 0 à 100 g/L, de préférence de 1 à 75 g/L, et plus préférentiellement encore de 5 à 50 g/L d'au moins un agent émulsifiant ou dispersant.

Les solutions liquides stables de l'invention de régulateurs de croissance des plantes, et notamment de gibbérelline, sont couramment préparées dans un équipement classique par mélange des composants liquides de la formulation sous agitation a la température ambiante jusqu'à l'obtention d'une solution claire, homogène et limpide. Les solutions liquides selon l'invention sont physiquement et chimiquement stables, selon les propriétés physico-chimiques et données requises par le règlement CE 25 1107/2009. Au sens de la présente invention, sont considérées comme chimiquement stables, des formulations de type solutions liquides dont les teneurs en substances actives après vieillissement à 54°C pendant 14 jours ne sont pas 30 réduites de plus de 5%.

Cette stabilité chimique est représentative de la stabilité chimique à température ambiante pendant 2 ans exigée par les autorités réglementaires. Sont considérées comme physiquement stables, des formulations de type solutions liquides qui, après vieillissement pendant 2 semaines à 54°C, 1 semaine à 0°C et après stockage pendant 2 ans à la température ambiante satisfont les exigences du règlement CE 545/2011 et de SANCO/11803/2010 Rev. 7.

Les formulations de type solutions liquides selon l'invention sont utiles pour contrôler la croissance et influencer les processus de développement de la croissance des plantes dans leur globalité et/ou de certains organes spécifiques, tels que les graines, les tiges, les feuilles, les fleurs et les fruits; stimuler l'allongement des tiges en stimulant la division cellulaire et l'allongement cellulaire, stimuler le bourgeonnement et la floraison; interrompre la dormance des graines de certaines plantes telles que les pommes de terre qui demande une stratification ou une germination induite par la lumière; stimuler l'expression du sexe, comme par exemple induire le caractère mâle chez les fleurs dioïques, provoquer un développement parthénocarpique ou sans graines des fruits; retarder et ralentir la sénescence des feuilles et de certains fruits tels que les agrumes, stimuler l'expression et la production enzymatique dans la germination de céréales par mobilisation des réserves de graines. Le taux d'application des formulations SL de l'invention dépend de l'utilisation et du but recherché, du mode d'application, du développement de la floraison et de la culture à traiter. Il peut varier dans de très larges proportions de 1 à 100 g/ha de régulateur de croissance des plantes, exprimés en gibbérelline matière-active. La dilution des formulations de type solution liquide de régulateur de croissance des plantes, notamment de gibbérelline, à des concentrations de 1 à 100 Plpm, destinées à une application par pulvérisation est faite 5 juste avant l'application. La solution liquide selon l'invention peut être appliquée selon différents protocoles ou programmes de traitement. Dans un mode de réalisation préféré, la solution est appliquée, après avoir été diluée, par 10 pulvérisation, notamment pulvérisation foliaire ou par absorption racinaire. Lorsque la composition comprend une seconde substance active, les deux substances actives peuvent être appliquées en combinaison c'est-à-dire simultanément, ou bien elles peuvent être appliquées 15 successivement ou séquentiellement, c'est-à-dire selon des programmes particuliers d'application en extemporané. L'invention porte également sur un procédé de traitement des plantes, légumes, arbres fruitiers, graines, fleurs, fruits, comprenant l'application sur les plantes 20 d'une solution liquide de régulateur de croissance des plantes telle que définie précédemment. Les exemples suivants permettront à l'homme du métier de mieux comprendre l'invention en référence aux modes de réalisation préférés. 25 EXEMPLES Exemples 1: Formulation liquide Stable d'acide Gibbérellique avec Glycérol-formal et eau Du glycérol formal technique, de l'eau et du Tween 20 30 LQ ont été mélanges sous agitation à la température ambiante, puis de l'acide Gibbérellique à 90,8% a été ajouté lentement sous agitation, et l'agitation a été maintenue à la température ambiante jusqu'à dissolution complète. On a ainsi obtenu une formulation liquide stable, claire, limpide, physiquement et chimiquement stable, en conformité avec les directives réglementaires des données sur les propriétés physiques et chimiques des produits de protection des plantes. L'aspect, le pH et la masse volumique ont été notés 10 et les formulations fraichement préparées ont été soumises à une chromatographie liquide haute performance (HPLC) pour vérifier leur teneur en GA3. Test de stabilité à froid: les formulations fraichement préparées ont été stockées à -5°C pendant 1 15 semaine puis l'aspect et la présence de particules solides ou de cristaux a été vérifiée. Ce test est plus contraignant que le test CIPAC MT 36.3 requis par les directives réglementaires qui demande un stockage de 7 jours à 0°C. 20 Test de stabilité accélérée les formulations fraichement préparées ont été testées au vieillissement à 54°C pendant 14 jours, l'aspect a été vérifié et la teneur en GA3 a été mesurée par HPLC. Exemple 1A Exemple 1B Ex. comparative 1C Glycérol-Formal 206,63 g 185,10 g 163,56 g Eau 21,50g 43,02g Tween 20 LCQ 4,32 g 4,29 g 4,30 g 90.8% GA3 4,09 g 4,09 g 4,16 g Masse volumique 1,210 g/mL 1,1935 g/mL 1,1745 g/mL pH 4,51 4,20 4,01 Teneur en GA3 18,2 g/L 18,4 g/L 18,6 g/L (formulations fraichement préparées) Aspect Solution limpide et Solution limpide et Solution limpide et incolore incolore incolore Stabilité à froid (7jours/- Solution limpide - pas de Solution limpide - pas de Solution limpide - pas de 5°C) particules solides ni de particules solides ni de particules solides ni de cristaux cristaux cristaux Aspect après stockage (14 jours/54°C) Solution limpide et Solution limpide et Solution limpide et incolore incolore incolore Teneur en GA3 après vieillissement 14 jours/54°C 17,9 g/L 17,6 g/L 17,2 g/L Diminution de la teneur en GA3 -1,7% -4,4% -7,7% Les variations des teneurs en matière active des formulations de l'invention étaient respectivement de 1,7% et -4,4 %, c'est-à-dire inférieure aux -5% acceptés par les directives réglementaires. Ces produits, après vieillissement étaient toujours dans les limites des spécifications exigées. Les exemples montrent que le Glycérol formal seul peut être utilisé pour produire des formulations liquides d'acide Gibbérellique très stables.

Ils montrent également qu'il est possible d'ajouter jusqu'à 10% d'eau sans altérer profondément la stabilité au stockage de ces formulations. De tels produits ne nécessiteront aucune classification pour être mis sur le marché, et donc aucun étiquetage imposé par le système général harmonisé SGH (en anglais GHS :Globally Harmonized System of Classification and Labelling of Chemicals of the United Nations), ou par les Directives ou règlements communautaires.

Exemple 2 : formulation liquide stable d'acide Gibbérellique avec du Glycérol-formal et un mélange de cosolvants 79,23 g de propylène glycol et 79,38 g de diméthyl sulfoxyde ont été mélanges pour préparer un mélange 50/50 de co-solvants. Puis 105,64 g de glycérol formal technique et 5,50 g de Tween 20 LQ ont été ajoutés sous agitation à la température ambiante, puis 5,32 g d'un acide Gibbérellique à 90,8% ont été ajoutés lentement sous agitation. L'agitation a été maintenue à la température ambiante jusqu'à dissolution complète. Une solution claire, limpide et incolore a ainsi été préparée: masse volumique : 1,120 g/mL pH = 5,30. teneur en GA3 mesurée par HPLC : 20,1 g/L Stabilité accélérée: la formulation fraichement préparée de l'exemple 2 a subi un test de vieillissement à 54°C pendant 10 2 semaines, après vieillissement, l'aspect a été évalué et la teneur en GA3 a été mesurée par HPLC. Teneur en GA3 mesurée par HPLC après vieillissement accéléré: 19,2 g/L , ce qui correspond à une diminution de - 4,3% par rapport à la formulation fraichement préparée et 15 est en dessous des -5% acceptés par les directives réglementaires. On a ainsi obtenu une formulation liquide stable, à 20,1 g/L d'acide gibbérellique GA3, claire, limpide, physiquement et chimiquement stable, en conformité avec les 20 directives réglementaires sur les propriétés physiques et chimiques des produits de protection des plantes, par dissolution de GA3 dans un mélange de Glycérol formal et de solvants aprotiques polaires. De tels produits ne nécessiteront aucune 25 classification pour être mis sur le marché, et donc aucun étiquetage imposé par le système général harmonisé SGH ou par les Directives ou règlements communautaires. Exemple 3 Formulation liquide stable d'acide Gibbérellique avec Rhodiasolv Polar clean comme solvant 30 Dans 287,60 g de Rhodiasolv Polar clean, 5,99 g de Tween 20 LQ ont été ajoutés sous agitation à la température ambiante. Puis, 6,39 g d'acide Gibbérellique à 90.8% ont été ajoutés sous agitation. L'agitation a été maintenue à la température ambiante jusqu'à dissolution complète. Une solution claire, limpide et incolore a ainsi été préparée: masse volumique : 1,044 g/mL pH = 5,4. teneur en GA3 mesurée par HPLC : 28,2 g/L Stabilité accélérée: la formulation fraichement préparée de l'exemple 3 a subi un test de vieillissement à 54°C pendant 10 2 semaines, après vieillissement, l'aspect a été évalué et la teneur en GA3 a été mesurée par HPLC. Teneur en GA3 mesurée par HPLC après vieillissement accéléré: 28,4 g/L, ce qui correspond à une variation de 0,7% par rapport à la formulation fraichement préparée et 15 est en inférieure aux 5% acceptés par les directives réglementaires. On a ainsi obtenu une formulation liquide stable, à 28,2 g/L d'acide gibbérellique GA3, claire, limpide, physiquement et chimiquement stable, en conformité avec les 20 directives réglementaires sur les propriétés physiques et chimiques des produits de protection des plantes, par dissolution de GA3 dans Rhodiasolv Polar clean. De tels produits ne nécessiteront aucune classification pour être mis sur le marché, et donc aucun 25 étiquetage imposé par le système général harmonisé SGH ou par les Directives ou règlements communautaires. Exemple comparatif: Formulation liquide stable d'acide gibbérellique dans du propylène glycol seul. Dans 263,65 g de propylène glycol, 5,52 g de Tween 20 30 LQ ont été ajoutés sous agitation à la température ambiante. Puis, 5,85 g d'acide gibbérellique à 90,8% ont été ajoutés lentement sous agitation à la température ambiante. L'agitation a été maintenue à la température ambiante jusqu'à dissolution complète. Une solution claire, limpide et incolore a ainsi été préparée: masse volumique : 1,0355 g/mL pH = 4,7. teneur en GA3 mesurée par HPLC : 21,6 g/L Stabilité accélérée: la formulation fraichement préparée de l'exemple comparatif a subi un test de vieillissement à 54°C pendant 14 jours, après vieillissement, l'aspect a été 10 évalué et la teneur en GA3 a été mesurée par HPLC. Teneur en GA3 mesurée par HPLC après vieillissement accéléré: 20,3 g/L, ce qui correspond à une diminution de - 6,1% par rapport à la formulation fraichement préparée et est au dessus des -5% acceptés par les directives 15 réglementaires. Le propylène glycol seul ne permet donc pas d'obtenir des formulations liquides chimiquement stables au sens des directives réglementaires. 20

Claims (12)

1. REVENDICATIONS1- Solution liquide comprenant au moins un régulateur de la croissance des plantes et au moins un solvant aprotique polaire choisi dans le groupe consistant en les 5 composés de formule I, II, III et leurs mélanges, HCI IR2 R1 OX0 R3 I _....NR6, 0 ---.---_,------ R4 ------- ------. 'R5 OH 0 0 (I) 00 WO dans laquelle: -R1 et R2 représentent indépendamment H ou un groupe 10 alkyle ayant moins de 5 atomes de carbone -R3, R4 et R5 représentent chacun indépendamment un groupe alkyle ayant moins de 5 atomes de carbone -R6 représente un groupe alkylidène linéaire ou ramifié ayant moins de 5 atomes de carbone 15
2. 2- Solution liquide selon la revendication 1, dans laquelle le régulateur de la croissance des plantes est choisi dans le groupe comprenant l'acide abscisique (ABA), les auxines, les cytokinines, les gibbérrellines, les brassinostéroïdes, l'acide salicylique, les jasmonates, 20 les strigolactones, les karrikines et leurs mélanges.
3. 3- Solution liquide selon la revendication 1 ou 2, dans laquelle le régulateur de la croissance des plantes est choisi dans le groupe comprenant l'acide 1-naphtalène acétique (1-NAA), le 1-naphtalène acétamide (1-NAD), 25 l'acide 1-naphtyloxyacétique , l'acide
4. 4-indole-3-yl- butyrique (IBA), l'acide indole-3-yl-acétique, la kinétine,la 6-benzylaminopurine, l'acide gibbérrellique (GA3), la gibbérelline A4 (GAI) , la gibbérelline A7 (GA7) et leurs mélanges. 4- Solution liquide selon l'une quelconque des 5 revendications 1 à 3, dans laquelle le solvant aprotique polaire est choisi dans le groupe comprenant le 4- hydroxyméthy1-2,2'-diméthy1-1,3-dioxolane, le 4-hydroxyméthy1-1,3-dioxolane, le 4-hydroxy-1,3-dioxane, le
5. 5- (diméthylamino)-2-méthy1-5-oxopentanoate de méthyle et 10 leurs mélanges. 5- Solution liquide selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, dans laquelle le solvant aprotique polaire est choisi dans le groupe comprenant le 4-hydroxyméthy1-1,3-dioxolane, le 4-hydroxy-1,3-dioxane, et leurs 15 mélanges.
6. 6- Solution liquide selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, qui comprend en outre au moins un cosolvant choisi dans le groupe consistant en l'eau, un solvant polaire aprotique, miscible dans l'eau, et leurs 20 mélanges.
7. 7- Solution liquide selon la revendication 6, caractérisée en ce que le co-solvant est choisi dans le groupe comprenant le DMSO, le propylène glycol, le triéthylène glycol, l'eau et leurs mélanges. 25
8. 8- Solution liquide selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, qui comprend comme substances actives, outre le régulateur de croissance, un engrais et/ou un nutriment.
9. 9. Solution liquide selon l'une quelconque des 30 revendications 1 à 8, qui comprend:- de 1 à 100 g/L, de préférence de 10 à 50 g/L, et encore plus préférentiellement de 15 à 35g/L d'au moins un agent régulateur de croissance des plantes choisi dans le groupe comprenant l'acide abscisique (ABA), les auxines, les cytokinines, les gibbérrellines, les brassinostéroïdes, l'acide salicylique, les jasmonates, les strigolactones, les karrikines et leurs mélanges, de préférence au moins une gibbérelline; éventuellement avec un engrais et/ou un nutriment; - de 20 à 99,9% p/p, de préférence de 30 à 98% p/p, et plus préférentiellement encore de 45 à 96% p/p d'un solvant choisi dans le groupe consistant en les composés de formule (I), (II) ou (III) et leurs mélanges, de préférence glycérolformal ou Rhodiasolv Polarclean; - de 0 à 5,0% p/p, de préférence de 0,5 à 3% p/p, et plus préférentiellement encore de 1 à 2 % p/p d'un agent de formulation choisi dans le groupe comprenant des agents dispersants, des agents émulsifiants, des agents mouillants, des agents anti-mousse et des conservateurs, de préférence un émulsifiant ou un agent mouillant; - de 0 à 60% p/p, de préférence 5 à 50% p/p, et encore plus préférentiellement encore de 10 à 40% p/p d'un co-solvant choisi dans le groupe consistant en l'eau, un solvant aprotique polaire et leurs mélanges, ledit solvant aprotique polaire, miscible dans l'eau étant choisi dans le groupe comprenant le diméthyl sulfoxyde (DMSO), les glycols tels que le propylène glycol, le triéthylène glycol; de préférence le DMSO.
10. 10. Solution liquide de gibbérelline qui comprend: de 5 à 40 g/1, de préférence de 10 à 30 g/L et plus préférentiellement encore de 15 à 25 g/L d'acide gibbérellique (GA3) - de 500 à 1200 g/L, de préférence de 850 à 1180 g/L et plus préférentiellement encore de 900 à 1100 g/L de glycérol formai ou Rhodiasolv Polar clean - de 0 à 150 g/L, de préférence de 3 à 120 g/L et plus préférentiellement encore de 5 à 100 g/L d'eau; de 0 à 100 g/L, de préférence de 1 à 75 g/L, et plus préférentiellement encore de 5 à 50 g/L d'au moins un agent émulsifiant ou dispersant.
11. 11. Solution liquide de gibbérelline qui comprend: - de 5 à 40 g/1, de préférence de 10 à 30 g/L et plus préférentiellement encore de 15 à 25 g/L d'acide gibbérellique (GA3) ; de 150 à 1200 g/L, de préférence de 350 à 1180 g/L et plus préférentiellement encore de 500 à 800 g/L de glycérol formai ou Rhodiasolv Polar clean; de 0 à 900 g/L, de préférence de 5 à 750 g/L, et plus préférentiellement encore de 50 à 600 g/L d'un mélange 50/50 de DMSO et de propylène glycol. de 0 à 100 g/L, de préférence de 1 à 75 g/L, et plus préférentiellement encore de 5 à 50 g/L d'au moins un agent émulsifiant ou dispersant.
12. 12- Procédé de traitement des plantes, légumes, arbres fruitiers, graines, fleurs, fruits, comprenant l'application sur les plantes d'une solution liquide de régulateur de croissance des plantes telle que définie à 5 l'une quelconque des revendications 1 à 11. 10