FR2993183A1 - Composition de substitut osseux injectable - Google Patents

Abstract

La présente invention concerne une composition de substitut osseux injectable qui comprend : - une phase liquide comprenant de l'eau stérilisée ; - une phase solide qui contient : . une première phase solide comprenant : * 10 à 90 % d'hémihydrate de sulfate de calcium alpha en poids par rapport au poids total de ladite première phase solide; * 10 à 90 % de phosphate de calcium en poids, sous forme de particules sphériques poreuses, par rapport au poids total de ladite première phase solide; * optionnellement de 0,1 à 20% d'au moins un accélérateur ou d'un retardateur de prise en poids par rapport au poids total de ladite première phase solide ; . une deuxième phase solide comprenant 0,1 à 20 % d'au moins un plastifiant par rapport au poids de la phase liquide, le ratio phase liquide/phase solide étant compris entre 0,4 et 0,8 mL/g, de préférence entre 0,5 et 0,7 mL/g. L'invention concerne aussi un procédé de préparation de ladite composition et un kit destiné à sa préparation.

Description

La présente invention concerne une composition de substitut osseux injectable. Les compositions de substitut osseux injectable représentent aujourd'hui une part considérable du marché des substituts osseux. Elles sont 5 bioactives, résorbables et présentent un effet de prise. En effet, ces compositions de substituts osseux qui sont implantables par injection répondent aux besoins de la chirurgie mini-invasive et présentent les avantages suivants : - Ces compositions s'adaptent parfaitement aux formes des 10 lacunes osseuses. Cela permet un contact plus étroit avec les tissus osseux et évite le déchaussement que l'on peut observer avec des blocs ou des granulés. En effet, pour être implantés, les blocs doivent être retaillés de manière à correspondre approximativement à celle de la lacune à 15 combler. Les granulés sont empilés de manière aléatoire pour remplir la lacune. De plus, avec ces techniques de blocs ou de granulés, l'os nouvellement formé ne se stabilise qu'au bout de plusieurs mois dans la lacune osseuse. 20 - Elles sont constituées de cristallites très fines et sont donc plus résorbables que les matériaux frittés à base de phosphate de calcium, dont les phases les plus résorbables ne se substituent qu'au bout de quelques mois. - Il est possible de mélanger pendant le gâchage un principe 25 actif comme un agent de croissance ou un antibiotique. - Elles durcissent après l'implantation, ce qui permet de les implanter par voie mini-invasive. Il existe des compositions de substituts osseux injectables qui sont constituées essentiellement de phosphate de calcium. Cependant, de telles 30 compositions présentent souvent les inconvénients suivants : - Elles sont difficilement injectables à travers une seringue ; - Leur prise est lente pour la majorité; - Elles ont une faible cohésion après injection dans un site ouvert, 35 - Elles sont peu recolonisées par l'os en raison de leur faible porosité ; - Elles sont peu résorbables. Il existe aussi des compositions de substituts osseux injectables qui sont constituées essentiellement de sulfate de calcium. De telles compositions ont généralement une résorption trop rapide pour permettre une recolonisation du défaut osseux par l'os néoformé. A cet égard, la publication intitulée « No effect of Osteoset ®, a bone graft substitute on bone healing in humans », Acta Orthopedia, 2002, 73(5) : 575-578 de Petruskevicius détaille cet inconvénient occasionné par des compositions de substituts osseux contenant essentiellement du sulfate de calcium. En effet, la résorption du sulfate de calcium seul est trop rapide par rapport à la vitesse de repousse de l'os naturel (dans le cas de la présente invention, le tibia). En conséquence, il a été observé que le groupe de patients sans substitut osseux possédait davantage d'os naturellement renouvelé que celui dans lequel avait été implanté un substitut à base de sulfate de calcium. De la même manière, la publication intitulée « In vivo evaluation of calcium sulfate as a bone graft substitute for lumbar spinal fusion » The Spine Journal, 12 Novembre 2001, 395-401 de Paul A Glazer, démontre que le sulfate de calcium se résorbe sous 4 semaines après implantation chez le lapin et qu'aucune reconstruction osseuse n'est observée.

En outre, il existe aussi des compositions de substituts osseux injectables qui comprennent de l'hémihydrate de sulfate de calcium, un agent plastifiant tel que I'HPMC et de l'os déminéralisé. A cet égard, la demande internationale WO 2004/000334 Al décrit une telle composition de substitut osseux injectable. Cependant, du fait de son origine naturelle, l'emploi d'os déminéralisé dans une composition de substitut osseux injectable présente des risques de mauvaise décontamination ou de déminéralisation pouvant être vecteurs de contaminations, ou transmettre des maladies osseuses au patient dans lequel a été implanté le substitut osseux. C'est pourquoi, il n'est pas avantageux d'injecter des compositions de substitut osseux qui comprennent de l'os déminéralisé. Il existe donc un réel besoin de disposer d'une composition de substitut osseux injectable qui pallie l'ensemble des inconvénients détaillés ci-dessus. La présente invention propose une composition de substitut osseux injectable qui remplit parfaitement ces objectifs.

En effet, la composition de substitut osseux injectable selon l'invention est cohésive et facilement injectable. Elle présente en outre l'avantage de présenter un temps de travail et un temps de prise adaptés aux besoins chirurgicaux, à savoir un temps de travail supérieur à 4 minutes et un temps de prise de l'ordre de 30 minutes. Par temps de travail, on entend le temps dont dispose le chirurgien 5 pour injecter la composition de substitut osseux dans la lacune avant qu'elle ne durcisse. La présente invention a pour premier objet une composition de substitut osseux injectable qui comprend : - une phase liquide comprenant de l'eau stérilisée ; 10 - une phase solide qui contient : - une première phase solide comprenant : ^ 10 à 90 % d'hémihydrate de sulfate de calcium alpha en poids par rapport au poids total de ladite première phase solide; 15 ^ 10 à 90 % de phosphate de calcium en poids, sous forme de particules sphériques poreuses, par rapport au poids total de ladite première phase solide; ^ optionnellement de 0,1 à 20% d'un 20 accélérateur ou d'un retardateur de prise en poids par rapport au poids total de ladite première phase solide ; - une deuxième phase solide comprenant 0,1 à 20 % d'au moins un plastifiant en poids par rapport au 25 poids de la phase liquide, le ratio phase liquide/phase solide étant compris entre 0,4 et 0,8 mL/g, de préférence entre 0,5 et 0,7mL/g. Avantageusement, le phosphate de calcium se présente sous la forme de particules sphériques microporeuses. Cette forme sphérique est tout 30 à fait appropriée pour l'injectabilité de la composition de substitut osseux selon l'invention. La répartition granulométrique de granules de phosphate de calcium est de manière préférée la suivante : D10 est supérieur ou égal à 40 micromètres ; D50 est compris entre 70 micromètres et 90 micromètres, et D90 35 est inférieur ou égal à 150 micromètres.

L'hémihydrate de sulfate de calcium alpha se présente sous la forme d'une poudre. De plus, les inventeurs ont découvert un effet synergique entre l'hémihydrate de sulfate de calcium alpha et le phosphate de calcium 5 particulièrement avantageux pour l'ostéogenèse une fois que la composition de substitut osseux selon l'invention a été injectée dans le corps du patient. Plus précisément, lors de la préparation du mélange des composés de la phase solide dans la phase liquide, l'hémihydrate de sulfate de calcium alpha qui est une poudre forme autour des granules de phosphate de calcium 10 une matrice qui durcit au contact de l'eau en formant du dihydrate de sulfate de calcium. Après injection de la composition selon l'invention, et du fait des vitesses de résorption différentes de l'hémihydrate de sulfate de calcium alpha et du phosphate de calcium (l'hémihydrate de sulfate de calcium alpha se résorbe en quelques semaines alors que le phosphate de calcium se résorbe 15 au bout d'une année), la matrice d'hémihydrate de sulfate de calcium alpha se résorbe en quelques semaines pour laisser place à un réseau de pores interconnectés de phosphate de calcium qui va être un support de croissance stable pour l'os néoformé. Ces pores sont les espaces entre les granules de phosphate de calcium dont la taille est propice à la repousse osseuse. 20 De plus, les granules de phosphate de calcium étant eux-mêmes microporeux, une fois l'hémihydrate de sulfate de calcium alpha résorbé, l'adhésion des cellules osseuses et leur croissance dans le réseau de granules de phosphate de calcium sont favorisées. En d'autres termes, l'espace entre les granules de phosphate de 25 calcium permettra aux ostéoblastes de venir reconstruire l'os à l'intérieur du substitut. Les microporosités favoriseront la pénétration des fluides et donc la résorption totale du substitut osseux à long terme. De plus, l'association de l'hémihydrate de sulfate de calcium alpha avec le phosphate de calcium permet de s'affranchir de la nécessité que la 30 composition de substitut osseux injectable comprenne de l'os déminéralisé. Ainsi, comme expliqué ci-dessus, cela sécurise l'innocuité de la composition substitut osseux injectable pour le patient. Aussi, la composition de substitut osseux injectable selon l'invention présente les caractéristiques techniques suivantes : 35 - Un temps de travail supérieur à 4 minutes. Cela permet au chirurgien de disposer de suffisamment de temps pour mettre en forme le substitut osseux et préparer le site d'implantation ; - Le temps de prise est d'environ 30 minutes ; - La résistance à la compression est environ comprise entre 4 et 8 MPa : le substitut osseux selon l'invention résiste à l'environnement constitué par le corps humain (pression sanguine, dissolution, désintégration par les fluides humains...). Par « eau stérilisée », on entend que l'eau a été distillée et qu'elle 10 est stérile et à pH neutre. Il s'agit de l'eau couramment utilisée dans le domaine technique des compositions de substitut osseux injectable. Le plastifiant a pour fonction de modifier la rhéologie de la composition de substitut osseux injectable de manière à rendre la composition plus homogène et à limiter la quantité d'eau stérilisée requise pour que ladite 15 composition puisse être injectée à l'aide d'une seringue. L'ajout du plastifiant permet d'augmenter la viscosité de la composition de substitut osseux injectable selon l'invention. En l'absence de plastifiant dans la composition de substitut osseux injectable selon l'invention, on observerait une ségrégation entre la phase solide et la phase liquide. La composition risquerait donc de ne 20 pas être homogène. Le plastifiant est avantageusement choisi parmi les dérivés de cellulose, et plus préférentiellement dans le groupe constitué par le carboxymethylcellulose, l'hydroxy-propyl-methyl-cellulose (HPMC), le méthylcellulose (MC), l'hydroxyethylcellulose (HPC), l'hydroxypropylcellulose, 25 l'ethylcellulose (EC), l'acétate butyrate de cellulose. Le plastifiant peut aussi être choisi parmi des alcools à haut poids moléculaire tels que le glycérol, les alcools vinyliques, l'acide stéarique ou l'acide hyaluronique. De manière préférée, le plastifiant est l'hydroxy-propyl-methyl30 cellulose (HPMC). La composition de substitut osseux injectable peut en outre comprendre au moins un accélérateur de prise tel que choisi parmi le chlorure de sodium, le sulfate de sodium, le sulfate de potassium, le BMA (à savoir un mélange de gypse et d'amidon) ou encore le gypse broyé ou un retardateur de 35 prise tel que le sulfate de calcium dihydraté.

Dans un mode de réalisation de l'invention, la composition de substitut osseux injectable comprend en outre au moins un agent thérapeutique. Avantageusement, il s'agit d'un agent ayant un effet bactéricide ou bactériostatique tel que les tetracyclines (la tetracycline hydrochloride), la gentamicine, la tobramycine, ou encore des sels d'argent ou des sels de cuivre. Il peut aussi s'agir d'un agent thérapeutique ayant une action sur le métabolisme osseux tel que les sels de strontium, les peptides ou encore les facteurs de croissance. La composition de substitut osseux injectable peut aussi comprendre au moins un agent radio-opaque tel que du carbonate de strontium, de l'iohexol, de l'iopamidol, ou encore de la metrizamide. L'agent radio-opaque permet au substitut osseux d'être visible à la radiologie après l'implantation. Cela permet donc de réaliser un suivi de la résorption de l'implant.

La présente invention concerne aussi un procédé de préparation de la composition de substitut osseux injectable telle que décrite ci-dessus qui comprend les étapes suivantes : On dispose dans une première seringue d'une quantité appropriée de la phase liquide de ladite composition de substitut osseux injectable. On dispose dans une deuxième seringue d'une quantité appropriée de la phase solide de ladite composition de substitut osseux injectable. 0 n fixe les deux seringues bout à bout à l'aide d'un connecteur. On dispose les seringues horizontalement de manière à ce que la phase solide s'étale dans la deuxième seringue. On pousse sur le piston de la première seringue remplie de la phase liquide en tirant simultanément sur le piston de la deuxième seringue remplie de la phase solide. On agite énergiquement la deuxième seringue de manière à obtenir un mélange homogène de la phase solide et de la phase liquide dans ladite deuxième seringue. On effectue au moins une fois le transfert du mélange d'une seringue à l'autre, afin de parfaire l'homogénéisation du mélange. De manière avantageuse, le transfert est effectué trois à quatre fois. Ensuite, on démonte le système et on fixe une aiguille sur ladite seringue. La composition de substitut osseux est alors prête à l'injection.

La composition de substitut osseux injectable est ainsi immédiatement prête à l'injection une fois le mélange terminé. Il n'y a donc pas de perte de temps ou de manipulations supplémentaires pour le chirurgien avant l'implantation du substitut osseux. De plus, il n'y a pas de risques de contamination externe.

L'injectabilité de la composition de substitut osseux selon l'invention est aisée durant les 10 premières minutes. Cela laisse donc au chirurgien quelques minutes entre la préparation et l'injection de ladite composition de substitut osseux. La quantité de composition de substitut osseux selon l'invention qui 15 peut être injectée est comprise entre environ 1 cm3 et 8 cm3. La présente invention concerne aussi un kit destiné à la préparation d'une composition de substitut osseux injectable selon la présente invention telle que décrite ci-dessus, ledit kit comprenant : - un premier récipient (par exemple une ampoule) rempli 20 d'une phase liquide de ladite composition ; - un deuxième récipient (par exemple une seringue) rempli d'une phase solide de ladite composition. Avantageusement, le kit selon l'invention comprend en outre deux seringues, un connecteur de seringues, un bouchon de seringue, une aiguille 25 et au moins une ampoule d'eau stérilisée. Des expérimentations ont été réalisées sur une composition de substitut osseux selon l'invention qui comprenait : - une phase liquide d'eau stérilisée ; - une phase solide qui contenait : 30 - une première phase solide contenant 50% d'hémihydrate de sulfate de calcium alpha en poids par rapport au poids total de ladite première phase solide ; 50% de phosphate de calcium, sous la forme de granules poreuses et sphériques, en poids par rapport au poids 35 total de ladite première phase solide; - une deuxième phase solide contenant 10% d'HPMC en poids par rapport au poids de la phase liquide, et le ratio phase liquide/phase solide était de 0,6 mL/g.

Etant donné que la dose de stérilisation (par irradiation gamma) a une influence sur les propriétés de la composition de substitut osseux selon l'invention, les deux séries d'essais de caractérisation suivantes ont été réalisées : - une 1ière série à la dose minimale de stérilisation, à savoir à 20-25 10 kGy ; - une 2ième série à la dose maximale, à savoir à 40-50 kGy. Les échantillons des 1ière et 2ième série étaient strictement identiques quant à leur composition, seule la dose d'irradiation était différentes. 15 Les valeurs de 20-25 kGy et de 40-50 kGy ont été choisies de manière à se situer de part et d'autre de la dose standard appliquée sur de tels produits qui est de 25-40 kGy et donc d'étudier les caractéristiques de composition de substitut osseux avec des doses d'irradiation aux valeurs extrêmes (inférieure et supérieure). 20 A partir de ces deux séries d'essais de composition de substitut osseux selon l'invention, on a mesuré : i. Le temps de travail ; ii. Le temps de prise ; iii. La résistance en compression. 25 A) Description du protocole de mesure du temps de travail : L'essai a été réalisé à l'aide d'une machine de compression qui avait les caractéristiques suivantes : - Capteur de force : 100kN, 30 - Force: ± 2%- Vitesse d'avancement = 2,5 ± 0,6 mm/min L'échantillon a été préparé de la manière suivante : L'eau stérilisée était contenue dans une ampoule. La capsule a été ôtée de l'ampoule. L'ampoule a été vissée sur l'embout d'une Père seringue vide. 35 De l'eau a été aspirée plusieurs fois en effectuant des va-et-vient avec le piston de la seringue de manière à éliminer les bulles d'air.

On a prélevé environ 2 mL d'eau stérilisée, puis l'ampoule a été dévissée de la seringue. On a rejeté l'excédent d'eau stérilisée pour ne garder dans la seringue que 1,2 mL.

On a ôté le bouchon d'une deuxième seringue qui contenait la phase solide décrite ci-dessus. On a fixé les deux seringues bout à bout à l'aide d'un connecteur. Les seringues ont été disposées horizontalement de manière à ce que la poudre s'étale dans la 2ième seringue.

On a poussé sur le piston de la 'Père seringue tout en tirant simultanément sur le piston de la 2ième seringue. Au moment où l'eau stérilisée est entrée en contact avec la poudre, le chronomètre a été déclenché. On a agité énergiquement l'ensemble constitué par les deux seringues et le connecteur de manière à obtenir un mélange homogène de la 15 poudre et de l'eau stérilisée. Une fois homogénéisé, le mélange a été transféré trois fois d'une seringue à l'autre. Puis, tout le mélange a été rassemblé dans une seule seringue. Ensuite, les deux seringues ont été déconnectées. 20 Une aiguille a été vissée sur la seringue contenant le mélange. La seringue a été disposée dans un support sous la forme d'un tube en PVC disposé dans la machine de compression et configuré de manière à ce que la contrainte en compression ne soit appliquée que sur le piston de la seringue. 25 Une contrainte en compression a été appliquée sur le piston de la seringue, avec une vitesse de déplacement de 2,5 mm/min. La force résultante a été mesurée en fonction du temps. Le chronomètre a été arrêté au moment où la force atteinte était de 120 N (ce qui correspond à une force humaine manuelle maximale). 30 Le temps ainsi déterminé par le chronomètre correspondait au temps de travail. On a obtenu un temps de travail de 16 minutes pour la 1ière série d'essais et de 32 minutes pour la 2ième série d'essais. On peut en conclure que le temps de travail d'une composition de 35 substitut osseux selon l'invention soumis à une dose d'irradiation standard se situera entre environ une quinzaine de minutes et une demi-heure ; ce qui correspond à une durée suffisamment longue pour laisser au chirurgien le temps de préparer le site d'implantation avant d'injecter ladite composition de substitut osseux.

B) Description du protocole de mesure du temps de prise VICAT : Cet essai a été réalisé conformément à la norme ASTM C472. L'appareil Vicat est muni d'une aiguille, sur laquelle repose une masse normée. Cette aiguille a été déposée sur la surface de l'échantillon de 10 composition de substitut osseux selon l'invention durant sa prise. Le degré d'enfoncement de l'aiguille dans l'échantillon a permis de déterminer l'état d'avancement de la prise. Pour ce faire, les échantillons ont été préparés de la même manière que pour la mesure du temps de travail. 15 De même, le chronomètre a été déclenché au moment où l'eau est entrée en contact avec la poudre. Une fois le mélange homogénéisé, les deux seringues ont été déconnectées. La composition de substitut osseux selon l'invention a été coulée 20 lentement dans des alvéoles prévues à cet effet, de manière à éviter la formation de bulles. Les alvéoles ont été remplies jusqu'à ras-bord. Ensuite, les échantillons ont été mis à l'étuve à 37°C. Lorsqu'il s'est écoulé 40 minutes sur le chronomètre, les 25 échantillons ont été sortis de l'étuve et ont été disposés sur le plateau de l'appareil Vicat. A la surface de chaque échantillon a été déposée délicatement l'aiguille de l'appareil Vicat. Puis, l'aiguille a été lâchée complètement. La mesure a été réitérée toutes les 5 minutes. 30 Le temps de prise Vicat est le temps au bout duquel l'aiguille ne s'enfonce plus jusqu'au fond de l'échantillon. Le temps de prise Vicat pour la lière série d'essais était de 51 minutes et de 59 minutes pour la 2ième série d'essais. Ainsi, on conclut que la composition de substitut osseux selon 35 l'invention durcit en moins d'une heure, c'est-à-dire avant que le patient ne se remette en mouvement La composition de substitut osseux selon l'invention peut donc parfaitement s'intégrer dans un mode opératoire sans en altérer son déroulement.

C) Description du protocole de mesure de la résistance en compression : Capteur de force : 100kN, Force: ± 2% Vitesse d'avancement = 1,0 ± 0,01 mm/min L'essai de résistance en compression a consisté à déterminer la 10 résistance en compression d'une éprouvette cylindrique de composition de substitut osseux injectable selon l'invention (hauteur = 15mm et diamètre = lOmm). Les échantillons ont été préparés de la même manière que pour les mesures de temps de travail et de prise détaillées ci-dessus. 15 Une fois le mélange homogénéisé, les deux seringues ont été déconnectées. La composition de substitut osseux injectable selon l'invention a été coulée dans des moules préalablement huilés, de manière à éviter la formation de bulles dans le moule. 20 Un peu de composition de substitut osseux injectable dépassait hors du moule pour compenser le retrait. Au bout d'une heure, la surface de la composition de substitut osseux injectable a été égalisée avec du papier abrasif de manière à ce que la surface de la composition de substitut osseux injectable puisse être 25 parfaitement alignée avec celle du moule. Les compositions de substitut osseux injectable ont été démoulées puis disposées à l'étuve à 45°C pendant au moins 12 heures. Cela constituait les échantillons de cette expérimentation. Les échantillons n'ont été sortis de l'étuve qu'au moment de la 30 mesure de la résistance en compression. La mesure a été réalisée en appliquant une contrainte en compression sur l'échantillon à une vitesse de 1 mm/min jusqu'à rupture de l'échantillon. La résistance en compression était la contrainte maximale atteinte 35 durant la mesure. La résistance en compression pour la 1ière série d'essais était de 5 MPa et de 6 MPa pour la 2ième série d'essais.

Ces résistances de compression ainsi obtenues sont particulièrement appropriées pour que le substitut osseux selon l'invention résiste à l'environnement constitué par le corps humain (pression sanguine, dissolution, désintégration par les fluides humains...).5

Claims (9)

1. REVENDICATIONS1. Composition de substitut osseux injectable qui comprend : - une phase liquide comprenant de l'eau stérilisée ; - une phase solide qui contient : - une première phase solide comprenant : ^ 10 à 90 % d'hémihydrate de sulfate de calcium alpha en poids par rapport au poids total de ladite première phase solide; ^ 10 à 90 % de phosphate de calcium en poids, sous forme de particules sphériques poreuses, par rapport au poids total de ladite première phase solide; ^ optionnellement de 0,1 à 20% d'au moins un accélérateur ou d'un retardateur de prise en poids par rapport au poids total de ladite première phase solide ; - une deuxième phase solide comprenant 0,1 à 20 % d'au moins un plastifiant en poids par rapport au poids de la phase liquide, le ratio phase liquide/phase solide étant compris entre 0,4 et 0,8 mL/g, de préférence entre 0,5 et 0,7mL/g.
2. 2. Composition de substitut osseux injectable selon la revendication 1, caractérisée en ce que ledit plastifiant est choisi dans le groupe constitué par le carboxymethylcellulose, l'hydroxy-propyl-methyl-cellulose (HPMC), le méthylcellulose (MC), l'hydroxyethylcellulose (HPC), l'hydroxypropylcellulose, l'ethylcellulose (EC), l'acétate butyrate de cellulose, le glycérol, les alcools vinyliques, l'acide stéarique, l'acide hyaluronique.
3. 3. Composition de substitut osseux injectable selon la revendication 2, caractérisée en ce que le plastifiant est l'hydroxy-propyl-methyl-cellulose (HPMC).
4. 4. Composition de substitut osseux injectable selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que ladite composition comprend en outre au moins un agent thérapeutique.
5. 5. Composition de substitut osseux injectable selon la revendication 4, caractérisée en ce que ledit agent thérapeutique est choisi dans le groupe constitué par la tetracycline hydrochloride, la gentamicine, la tobramycine, les sels d'argent, les sels de cuivre, les sels de strontium, les peptides, les facteurs de croissance.
6. 6. Composition de substitut osseux injectable selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que ladite composition comprend en outre au moins un agent radio-opaque choisi dans le groupe constitué par le carbonate de strontium, l'iohexol, l'iopamidol, la metrizam ide.
7. 7. Procédé de préparation de la composition de substitut osseux injectable selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce 15 que ledit procédé de préparation comprend les étapes suivantes : - On dispose dans une première seringue d'une quantité appropriée de la phase liquide de ladite composition de substitut osseux injectable. - On dispose dans une deuxième seringue d'une quantité 20 appropriée de la phase solide requise de ladite composition de substitut osseux injectable. - 0 n fixe les deux seringues bout à bout à l'aide d'un connecteur. - On dispose les seringues horizontales de manière à ce que 25 la phase solide s'étale dans la deuxième seringue. - On pousse sur le piston de la première seringue remplie de la phase liquide en tirant simultanément sur le piston de la deuxième seringue remplie de la phase solide. - On agite énergiquement la deuxième seringue de manière à 30 obtenir un mélange homogène de la phase solide et de la phase liquide dans ladite deuxième seringue. - On effectue au moins une fois le transfert du mélange d'une seringue à l'autre.
8. 8. Kit destiné à la préparation d'une composition de substitut osseux injectable selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, ledit kit comprenant : - un premier récipient rempli d'une phase liquide de ladite composition ; - un deuxième récipient rempli d'une phase solide de ladite composition.
9. 9. Kit selon la revendication 8, caractérisé en ce que ledit kit 10 comprend en outre deux seringues, un connecteur de seringues, un bouchon de seringue, une aiguille et au moins une ampoule d'eau stérilisée.