FR2970152A1 - Composition alimentaire a base d'extrait d'algues pour le traitement et/ou la prevention de la retinopathie diabetique - Google Patents
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L'invention concerne un complément alimentaire comprenant un extrait polyphénolique d'algues brunes et au moins une huile riche en acides gras polyinsaturés Oméga 3. Il peut être utilisé comme antioxydant sur les cellules de rétines, comme activateur de la sirtuine 1 ou comme réducteur du stress cellulaire rétinien induit par un taux de glucose élevé. Il peut également être utilisé pour le traitement et/ou la prévention de l'hyperglycémie chronique sur la rétine. Le polyphénol diminue le glucose plasmatique et augmente l'activité mitochondriale. Les acides gras polyinsaturés Oméga3 ont des effets bénéfiques sur l'insulino-résistance, les diabètes de type2. L'EPA (acide eicosapentaénoïque) et le DHA (acide docosahéxanoïque) sont deux acides gras polyinsaturés de la série Oméga3, bénéfiques pour la santé notamment quand ils sont apportés en profil équilibré dans une composition alimentaire.
Description
Composition alimentaire à base d'extrait d'algues pour le traitement et/ou la prévention de la rétinopathie diabétique
La présente invention concerne une composition alimentaire à base d'extrait d'algues pour le traitement et/ou la prévention de la rétinopathie diabétique. La rétinopathie diabétique est une cause importante de troubles visuels et de cécité chez l'adulte et le jeune adulte. La rétinopathie diabétique fait partie des cinq premières causes de cécité avec la dégénérescence maculaire liée à l'âge, le glaucome, la cataracte et la myopie dégénérative. La rétine est la tunique la plus profonde de l'ceil, couvrant environ 75% du globe oculaire. Elle reçoit les images et les transmet au cerveau via le nerf optique. Elle est constituée de deux couches distinctes : l'épithélium pigmenté et la rétine neurosensorielle. L'épithélium pigmenté est impliqué dans la mélanogenèse et joue un rôle métabolique essentiel pour les cellules photo-réceptrices. L'épithélium pigmenté constitue la partie externe de la barrière hémato-rétinienne séparant ainsi la rétine neurosensorielle de la choriocapillaire. Dans la rétine neuro-sensorielle, composée de sept couches cellulaires successives, il existe des cellules gliales de Müller riches en glycogène et en mitochondries. Les cellules de Müller jouent un rôle important dans la formation et le maintien de la barrière hématorétinienne. Les premières anomalies rétiniennes chez les patients diabétiques sont la perte de sensibilité au contraste, l'augmentation du flux sanguin et l'altération de la barrière hématorétinienne. L'effet hyperglycémique agit sur d'une part les cellules de l'épithélium pigmenté rétinien et d'autre part les cellules gliales, qui jouent un rôle important dans la barrière hématorétienne. Afin de réduire la glycémie, le traitement consiste à réduire la quantité de glucose par exemple en diminuant l'activité de l'alpha glucosidase qui est une enzyme digestive. Le document WO200617943 nous montre qu'il est possible d'utiliser un extrait d'algues à base d'Ascophyllum afin de réduire la glycémie. D'autre part, ce document indique que l'extrait d'algues a un effet antioxydant.
L'inconvénient de ce document est qu'il ne montre pas comment agir sur la prévention et/ou le traitement des cellules de rétine. Le resvératrol est un polyphénol présent dans des plantes terrestres, notamment des fruits, qui améliore la sensibilité à l'insuline, diminue le glucose plasmatique et augmente l'activité mitochondriale. Il est connu que le rôle bénéfique du resvératrol chez le patient diabétique est lié à son effet activateur de l'enzyme SIRT1, de la famille des sirtuines, qui est une protéine importante dans la transduction du signal de l'insuline.
Le but de la présente invention est un complément alimentaire qui permet de prévenir des effets délétères d'une hyperglycémie chronique sur la rétine.
L'invention propose un complément alimentaire comprenant un extrait polyphénolique d'algues brunes et au moins une huile riche en acides gras polyinsaturés Oméga 3. Les avantages de la présente invention sont entres autres que premièrement, les extraits polyphénoliques d'algues brunes montrent un effet protecteur contre le stress oxydatif, les perturbations mitochondriales et la diminution de l'activité de la SIRT1 induit par l'hyperglycémie sur cellules de rétine. Les algues contiennent des polyphénols dénommés phlorotannins ou polyphénols marins pour les différencier des polyphénols terrestres comme le resvératrol. Egalement, une huile riche en acides gras polyinsaturés Oméga 3, notamment une huile ou un mélange d'huiles de poissons montrent une prévention des dégâts induits par le stress hyperglycémique au niveau des cellules de rétine. Enfin, et ce point est le plus important, la combinaison d'un extrait d'algues brunes avec une huile riche en acides gras polyinsaturés Oméga 3 améliore cet effet de prévention et de réparation du stress hyperglycémique, car elle permet une meilleure biodisponibilité des polyphénols d'algues. Selon des caractéristiques avantageuses de la présente invention : - l'extrait polyphénolique est à base d'Ascophyllum spp. ou d'un mélange d'algues comprenant majoritairement de l'Ascophyllum spp. 5 l'huile ou les huiles présentent un profil équilibré et défini en EPA (acide eicosapentaénoïque) et DHA (acide docosahéxanoïque). - l'huile ou les huiles sont une huile de poisson ou un mélange d'huiles de poisson. Un complément alimentaire tel que décrit ci-dessus trouve une utilisation particulièrement bien appropriée pour le traitement et / ou la prévention des effets délétères d'une hyperglycémie chronique sur la rétine ou une utilisation contre l'apparition de rétinopathies diabétiques. 10 L'extrait d'algues brunes A est un mélange d'Ascophyllum nodosum et de Fucus vesiculosus. Le pourcentage correspond à la concentration en phlorotanins. L'extrait d'algues brunes B est un extrait polyphénolique de Fucus vesiculosus. Le pourcentage correspond à la concentration en phlorotanins. 15 On comprendra mieux l'invention à l'aide de la description faite ci-après d'un mode de mise en ceuvre de l'invention donné à titre d'exemple non limitatif, en référence aux figures annexées : - la figure 1 montre les effets antioxydants de l'extrait d'algues brunes A sur cellules de rétine soumises à un stress oxydant chimique, 20 - la figure 2 montre les effets antioxydants d'un extrait d'algues brunes A sur cellules de rétine soumises à un fort taux de glucose, - la figure 3 montre les effets protecteurs mitochondriaux de l'extrait d'algues brunes A sur cellules épithéliales de rétine soumises à un fort taux de glucose, 25 - la figure 4 montre les effets protecteurs mitochondriaux de l'extrait d'algues brunes A sur les cellules gliales de rétine soumises à un fort taux de glucose, - la figure 5 montre la succession d'étapes d'une méthode de mesure de l'effet intrinsèque d'un extrait testé sur l'activité enzymatique de la SIRT1, 30 - la figure 6 montre les effets activateurs de l'extrait d'algues brunes A sur la SIRT1 de cellules de rétine, le resvératrol étant pris comme témoin positif, - la figure 7 montre les effets activateurs de l'extrait d'algues brunes A sur la SIRT1 de cellules de rétine soumises à un fort taux de glucose, le resvératrol étant pris comme témoin positif, - la figure 8 montre les effets d'autres extraits d'algues brunes (A et B) sur la SIRT1 de cellules de rétine soumises à un fort taux de glucose.
La présente invention concerne un complément alimentaire dont le premier composant est un extrait d'algues brunes. Il est connu qu'un extrait d'algues contient des polyphénols dits marins, ceux-ci variant selon le type d'algues. Les polyphénols marins sont apparentés mais différents des polyphénols terrestres. Les polyphénols marins sont principalement des polymères de phloroglucinol et ils constituent un groupe très varié en fonction de leur structure et de leur degré de polymérisation, ce qui leur confère des activités biologiques différentes. Les algues brunes sont préférées étant donné que leur teneur en polyphénols est élevée et peut atteindre 15% en poids. Parmi les algues brunes, l'espèce Ascophyllum est préférée. Ascophyllum spp. désignera dans ce qui va suivre tous les éléments de l'espèce Ascophyllum, notamment mais pas uniquement Ascophyllum nodosum, Ascophyllum laevigatum et Ascophyllum mackayi. Parmi ces éléments de l'espèce Ascophyllum, c'est l'Ascophyllum nodosum qui est préféré pour former une partie de l'extrait d'algues. En effet, l'Ascophyllum nodosum a donné de meilleurs résultats.
La figure 1 montre une mesure des espèces réactives de l'oxygène sur cellules épithéliales de rétine, *p<0,01 comparé au contrôle. II a ainsi été constaté qu'un extrait polyphénolique d'algues brunes A, pouvant contenir avantageusement majoritairement de l'Ascophyllum nodosum, présente un potentiel antioxydant important. Au cours des travaux de recherche sur les pathologies ophtalmiques, les premiers résultats ont montré l'intérêt de cet extrait polyphénolique dans l'amélioration des fonctions physiologiques de la rétine, notamment au niveau du stress oxydatif, des états pro-inflammatoires. Ces premiers résultats positifs sur la lutte contre des troubles physiologiques d'étiologies diverses, additionnés aux effets sur la glycémie, ont orienté les travaux de la demanderesse vers la modulation du stress physiologique engendré par les états hyperglycémiques chroniques comme le diabète. Il a été alors choisi un modèle d'étude approprié pour reproduire les conditions de stress physiologique subi par les cellules de rétine chez des patients diabétiques. Les cellules sont incubées avec du milieu de culture contenant ou 5,5 mM de glucose (taux normal) ou 25 mM de glucose (fort taux) pendant 48 heures à 37°C (Yokoyama T et al., Exp Eye Res 2006;83:602-9). Un protocole de génération d'un stress lié à un fort taux de glucose a été appliqué à deux types de cellules de rétine : le premier étant des cellules to pigmentaires, autrement appelées cellules épithéliales et le second étant des cellules nerveuses ou gliales. Ce protocole permet de générer un modèle de rétinopathie diabétique. L'extrait polyphénolique A a été appliqué sur les cellules après qu'elles aient été soumises à ce fort taux de glucose. Il a été alors constaté les bénéfices 15 apportés par cet extrait polyphénolique d'algues brunes A, avantageusement majoritairement à base d'Ascophyllum nodosum. La figure 2 montre une mesure des espèces réactives de l'oxygène sur cellules épithéliales de rétine, ***p<0,001 comparé au contrôle (taux de glucose normal). On peut y constater qu'un extrait polyphénolique d'algues brunes A, 20 pouvant contenir avantageusement majoritairement de l'Ascophyllum nodosum, inhibe le stress oxydant induit par le fort taux de glucose. La figure 3 montre une évaluation des altérations mitochondriales sur les cellules épithéliales de rétine et la figure 4 sur les cellules gliales de rétine. MTT : activité de la succinate déshydrogénase mitochondriale, JC1 : potentiel 25 transmembranaire mitochondrial, ***p<0,001 comparé au contrôle (taux de glucose normal). On peut y constater qu'un extrait polyphénolique d'algues brunes A, pouvant contenir avantageusement majoritairement de l'Ascophyllum nodosum, restaure les fonctions mitochondriales altérées par le fort taux de glucose. 30 Une étape importante dans l'étude de l'extrait d'algues brunes A est la mesure de son effet sur l'activation d'un élément important dans le traitement et/ou la prévention de la rétinopathie diabétique ; ledit élément est la sirtuine 1 ou SIRT 1. Ceci sera détaillé ultérieurement en regard des figures annexées.
Le composant associé à l'extrait d'algues brunes dans la composition alimentaire selon la présente invention est au moins une huile riche en acide gras polyinsaturés Oméga3. Les acides gras polyinsaturés Oméga3 ont des effets bénéfiques sur l'insulino-résistance dans les diabètes de type 2. Ils sont présents en abondance dans la chair des poissons, notamment dans ceux des mers froides ainsi que dans la composition de certaines huiles végétales comme l'huile de colza ou l'huile de noix. L'huile ou les huiles ajoutées à la composition alimentaire à base d'extrait polyphénolique d'algues brunes sont de préférence une huile de poisson ou un mélange d'huiles de poisson, car ces huiles ont un effet bénéfique dans le métabolisme plus intéressant que les huiles végétales, qui ne contiennent pas d'EPA et de DHA comme détaillé ci-après. Dans un mode préféré de réalisation de l'invention, l'huile ou les huiles utilisées dans le complément alimentaire présentent un profil équilibré et défini en EPA (acide eicosapentaénoïque) et DHA (acide docosahéxanoïque). L'EPA (acide eicosapentaénoïque) et le DHA (acide docosahéxanoïque) sont deux acides gras polyinsaturés de la série Oméga3. Ils sont bénéfiques pour la santé notamment quand ils sont apportés de façon équilibrée dans une composition alimentaire, c'est-à-dire sans excès.
Comme précédemment mentionné, un modèle d'étude de génération d'une rétinopathie diabétique a été appliqué à deux types de cellules de rétine : pigmentaires ou épithéliales, d'un côté, et cellules nerveuses ou gliales, de l'autre. Ce modèle a permis de démontrer que des huiles riches en acides gras avaient également des propriétés bénéfiques sur la prévention des effets négatifs du glucose. Ainsi, une formulation judicieuse d'un extrait polyphénolique d'algues brunes dans au moins une huile riche en acides gras polyinsaturés Oméga 3, cette huile ayant par elle-même des bénéfices optimum sur la santé de la rétine dans un environnement hyperglucosidique, est une combinaison d'ingrédients très favorable dans la lutte contre la dégénérescence rétinienne liée au diabète, d'autant plus qu'un effet de symbiose par augmentation de la biodisponibilité des polyphénols est obtenu par une telle composition.
Dans ce qui va suivre, la sirtuine 1 pourra aussi être dénommée SIRT1, cela indifféremment. La méthode d'étude de la modulation de l'activité de la sirtuine 1 choisie par la demanderesse consiste à travailler sur des cellules. Cette méthode est montrée à la figure 5. Elle consiste en l'étape d'introduction de l'extrait à tester M dans des cellules C en culture. Après incubation, il est procédé ensuite à une lyse des cellules pour récupérer la fraction protéique représenté par F2. Dans cette fraction protéique sont présents la Sirtuine1 cellulaire S, un substrat de SIRT1 fluorescent et une NAD. Après repos de 15mn représenté par F3, on soumet le mélange à une détection fluorimétrique D d'où il est extrapolé une mesure de la modulation de l'activation de la sirtuine1. Cette méthode permet d'observer les phénomènes d'induction de réactions métaboliques cellulaires d'activation indirecte de la sirtuine via l'extrait à tester.
L'évaluation du potentiel intrinsèque activateur de sirtuine de l'extrait à tester est comparée à celui du resvératrol en tant qu'extrait de référence, l'extrait à tester étant dans le cas de l'expérimentation à base d'Ascophyllum nodosum A. Le résultat sur cellules de rétine non stressées est illustré à la figure 6, tandis que le résultat sur cellules de rétine soumises à un fort taux de glucose est illustré aux figures 7 et 8, respectivement pour l'extrait d'algues brunes d'intérêt A et pour d'autres extraits d'algues brunes A et B. Plus précisément, la figure 6 montre la modulation de l'activité de la SIRT1 des cellules épithéliales de rétine, *p<0,01 comparé au contrôle. La figure 7 montre la modulation de l'activité de la SIRT1 des cellules épithéliales et gliales de rétine, **p<0,005 comparé au contrôle (taux de glucose normal). La figure 8 montre une modulation de l'activité de la SIRT1 des cellules épithéliales de rétine.
Sur la figure 6, est représentée l'activation de la sirtuine par le Resvératrol (molécule de référence choisie comme témoin positif) et par deux concentrations d'extrait d'Ascophyllum A à 0.31% et 0.53%. En effet, on peut voir que sur l'ordonnée, la valeur du Resvératrol est supérieure à 1, ce qui indique que le s réservatrol active la sirtuine. De plus, l'extrait d'algues brunes A active la sirtuine aux deux concentrations testées. Sur la figure 7, on constate que le taux élevé de glucose diminue l'activité de la SIRT1 mais que l'extrait d'algues brunes A restaure l'activité de la SIRT1.
Le resvératrol est choisi comme témoin positif. L'extrait d'Ascophyllum nodosum agit donc directement sur les cellules oculaires pour déclencher des mécanismes de protection et de survie cellulaire liés à l'activation de la SIRT1. Sur la figure 8, on constate que l'extrait d'algues brunes A restaure l'activité de la SIRT1 diminuée par le fort taux de glucose mais pas l'extrait d'algues brunes B. L'extrait d'algues brunes A est un extrait d'Ascophyllum nodosum, et l'extrait d'algues brunes B est issu de Fucus vesiculosus. Ce résultat permet de conclure que les extraits polyphénoliques d'Ascophyllum nodosum ont une activité supérieure sur la modulation de la SIRT1. En plus des avantages précédemment mentionnés, l'utilisation d'une 15 composition à base d'un extrait d'algues avec au moins une huile riche en acides gras polyinsaturés Oméga 3 ne présente pas d'effets secondaires négatifs.
Claims (9)
- REVENDICATIONS1- Complément alimentaire comprenant un extrait polyphénolique d'algues brunes et au moins une huile riche en acides gras polyinsaturés Oméga 3.
- 2- Complément selon la revendication précédente, dans lequel l'extrait polyphénolique est à base d'Ascophyllum spp. ou d'un mélange d'algues comprenant majoritairement de l'Ascophyllum spp.. 10
- 3- Complément selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel l'huile ou les huiles présentent un profil équilibré en EPA (acide eicosapentaénoïque) et DHA (acide docosahéxanoïque).
- 4- Complément selon l'une quelconque des revendications précédentes, 15 dans lequel l'huile ou les huiles sont une huile de poisson ou un mélange d'huiles de poisson.
- 5- Complément selon l'une quelconque des revendications précédentes, utilisé comme un agent antioxydant sur les cellules de rétines.
- 6- Complément selon l'une quelconque des revendications précédentes, utilisé comme un agent activateur de la sirtuine 1.
- 7- Complément selon l'une quelconque des revendications précédentes, 25 utilisé comme un agent réducteur du stress cellulaire rétinien induit par un taux de glucose élevé.
- 8- Complément selon l'une quelconque des revendications précédentes utilisé comme un agent de traitement et/ou de prévention des effets de 30 l'hyperglycémie chronique sur la rétine.
- 9- Complément selon l'une quelconque des revendications précédentes utilisé comme un agent de traitement et/ou de prévention des rétinophathies. 20
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