EP2661181A1 - Composition alimentaire a base d'extrait d'algues pour le traitement et/ou la prevention de la retinopathie diabetique - Google Patents

Composition alimentaire a base d'extrait d'algues pour le traitement et/ou la prevention de la retinopathie diabetique

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EP2661181A1
EP2661181A1 EP12702573.2A EP12702573A EP2661181A1 EP 2661181 A1 EP2661181 A1 EP 2661181A1 EP 12702573 A EP12702573 A EP 12702573A EP 2661181 A1 EP2661181 A1 EP 2661181A1
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EP
European Patent Office
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oil
extract
omega
oils
brown algae
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Withdrawn
Application number
EP12702573.2A
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German (de)
English (en)
Inventor
Marc Hemon
Roxane Fagon
Mélody DUTOT
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YS LAB
Original Assignee
YS LAB
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Publication date
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Publication of EP2661181A1 publication Critical patent/EP2661181A1/fr
Withdrawn legal-status Critical Current

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    • A61K36/02—Algae
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    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics

Definitions

  • the present invention relates to a food composition based on algae extract for the treatment and / or prevention of diabetic retinopathy.
  • Diabetic retinopathy is an important cause of visual disturbances and blindness in adults and young adults. Diabetic retinopathy is one of the top five causes of blindness with age-related macular degeneration, glaucoma, cataracts, and degenerative myopia.
  • the retina is the deepest tunica of the eye, covering about 75% of the eyeball. She receives the images and transmits them to the brain via the optic nerve. It consists of two distinct layers: the pigmented epithelium and the neurosensory retina.
  • the pigmented epithelium is involved in melanogenesis and plays an essential metabolic role for photoreceptor cells.
  • the pigmented epithelium constitutes the outer part of the blood-retinal barrier separating the neurosensory retina from the choriocapillaris.
  • the neuro-sensory retina composed of seven successive cell layers, there are Muller glial cells rich in glycogen and mitochondria. Muller cells play an important role in the formation and maintenance of the blood-brain barrier.
  • the first retinal abnormalities in diabetic patients are loss of contrast sensitivity, increased blood flow, and impaired blood-wall barrier.
  • the hyperglycemic effect acts on the one hand the cells of the retinal pigmented epithelium and on the other hand the glial cells, which play an important role in the blood-brain barrier.
  • the treatment consists in reducing the amount of glucose, for example by decreasing the activity of alpha-glucosidase, which is a digestive enzyme.
  • WO200617943 shows us that it is possible to use a seaweed extract based on Ascophyllum to reduce blood sugar.
  • this document indicates that the algae extract has an antioxidant effect.
  • the disadvantage of this document is that it does not show how to act on the prevention and / or treatment of retinal cells.
  • Resveratrol is a polyphenol found in terrestrial plants, including fruit, which improves insulin sensitivity, decreases plasma glucose, and increases mitochondrial activity. It is known that the beneficial role of resveratrol in the diabetic patient is related to its activating effect of the SIRT1 enzyme, family sirtuins, which is an important protein in the signal transduction of insulin.
  • the purpose of the present invention is a dietary supplement which prevents the deleterious effects of chronic hyperglycemia on the retina.
  • the invention provides a dietary supplement comprising a polyphenolic extract of brown algae and at least one oil rich in Omega 3 polyunsaturated fatty acids.
  • Oils rich in Omega 3 in the context of the present invention are oils containing a total mass percentage of Omega 3, in any class and including ALA (alpha linolenic acid), ⁇ (eicosapentaenoic acid) and / or DHA ( docosahéxanoic acid), based on the total oil mass of at least 9%.
  • Examples of vegetable oils rich in Omega 3 include flaxseed oil, camelina oil, walnut oil, hemp oil, rapeseed oil or oil. of basil.
  • the advantages of the present invention are among others that, firstly, the polyphenolic extracts of brown algae show a protective effect against oxidative stress, mitochondrial disturbances and the decrease of the SIRT1 activity induced by hyperglycemia on retinal cells.
  • Algae contain polyphenols called phlorotannins or marine polyphenols to differentiate them from terrestrial polyphenols such as resveratrol.
  • an oil rich in Omega 3 polyunsaturated fatty acids in particular an oil or a mixture of fish oils, show a prevention of the damage induced by the hyperglycemic stress at the level of the retina cells.
  • an oil rich in Omega 3 polyunsaturated fatty acids in particular an oil or a mixture of fish oils, show a prevention of the damage induced by the hyperglycemic stress at the level of the retina cells.
  • the combination of a brown algae extract with an oil rich in Omega 3 polyunsaturated fatty acids enhances this effect of prevention and repair of hyperglycemic stress, because it allows a better bioavailability of polyphenols seaweed.
  • the polyphenolic extract is based on Ascophyllum spp. or a mixture of algae mainly comprising Ascophyllum spp.
  • the oil or oils have an EPA (eicosapentaenoic acid) content of from 1 50 to 450 mg / g and advantageously from 280 to 320 mg / g of oil.
  • EPA eicosapentaenoic acid
  • the oil or oils have a DHA (docosahexanoic acid) content of 100 to 300 mg / g and advantageously from 180 to 220 mg / g of oil.
  • DHA docosahexanoic acid
  • oil or oils are a fish oil or a mixture of fish oils.
  • a dietary supplement as described above finds a particularly suitable use for the treatment and / or prevention of the deleterious effects of chronic hyperglycemia on the retina or use against the occurrence of diabetic retinopathies.
  • Brown algae extract A is a mixture of Ascophyllum nodosum and Fucus vesiculosus. The percentage corresponds to the phlorotanin concentration.
  • Brown algae extract B is a polyphenolic extract of Fucus vesiculosus. The percentage corresponds to the phlorotanin concentration.
  • FIG. 1 shows the antioxidant effects of brown algae extract A on retinal cells subjected to chemical oxidative stress
  • FIG. 2 shows the antioxidant effects of a brown algae extract A on retinal cells subjected to a high level of glucose
  • FIG. 3 shows the mitochondrial protective effects of the brown algae extract A on retinal epithelial cells subjected to a high level of glucose
  • FIG. 4 shows the mitochondrial protective effects of brown algae extract A on glial retinal cells subjected to a high level of glucose
  • FIG. 5 shows the succession of steps of a method for measuring the intrinsic effect of a tested extract on the enzymatic activity of SIRT1,
  • FIG. 6 shows the activating effects of brown algae extract A on SIRT1 of retinal cells, resveratrol being taken as a positive control
  • FIG. 7 shows the activating effects of the brown algae extract A on SIRT1 of retina cells subjected to a high level of glucose, resveratrol being taken as a positive control
  • FIG 8 shows the effects of other brown algae extracts (A and B) on SIRT1 from retinal cells subjected to high glucose levels.
  • the present invention relates to a food supplement whose first component is a brown algae extract.
  • an algae extract contains so-called marine polyphenols, which vary according to the type of algae.
  • Marine polyphenols are related but different from terrestrial polyphenols.
  • the marine polyphenols are mainly polymers of phloroglucinol and they constitute a very varied group according to their structure and their degree of polymerization, which confers them different biological activities.
  • Brown algae are preferred because their polyphenol content is high and can be up to 15% by weight.
  • Ascophyllum is preferred. Ascophyllum spp. designate in the following all the elements of the species Ascophyllum, including but not limited to Ascophyllum nodosum, Ascophyllum laevigatum and Ascophyllum mackayi. Among these elements of the Ascophyllum species, Ascophyllum nodosum is preferred to form part of the algae extract. Indeed, Ascophyllum nodosum gave better results.
  • Figure 1 shows a measurement of reactive oxygen species on retinal epithelial cells, * p ⁇ 0.01 compared to control. It has thus been found that a polyphenolic extract of brown algae A, which may advantageously contain mainly Ascophyllum nodosum, has a significant antioxidant potential.
  • a protocol for generating high glucose stress has been applied to two types of retinal cells: the first being pigment cells, otherwise known as epithelial cells and the second being nerve or glial cells. This protocol makes it possible to generate a model of diabetic retinopathy.
  • the polyphenol A extract was applied to the cells after they were subjected to this high level of glucose. It was then noted the benefits provided by this polyphenolic extract of brown algae A, advantageously mainly based on Ascophyllum nodosum.
  • Figure 2 shows a measurement of reactive oxygen species on retinal epithelial cells, *** p ⁇ 0.001 compared to control (normal glucose level). It can be seen that a polyphenolic extract of brown algae A, which may advantageously contain mainly ascophyllum nodosum, inhibits the oxidative stress induced by the high level of glucose.
  • Figure 3 shows an assessment of mitochondrial alterations on retinal epithelial cells and Figure 4 on retinal glial cells. MTT: activity of mitochondrial succinate dehydrogenase, JC1: mitochondrial transmembrane potential, *** p ⁇ 0.001 compared to control (normal glucose level). It can be seen that a polyphenolic extract of brown algae A, which may advantageously contain mainly Ascophyllum nodosum, restores the mitochondrial functions altered by the high level of glucose.
  • Brown Algae Extract A An important step in the study of Brown Algae Extract A is the measurement of its effect on the activation of an important element in the treatment and / or prevention of diabetic retinopathy; said element is sirtuin 1 or SIRT 1. This will be detailed later with reference to the appended figures.
  • the component associated with the brown algae extract in the food composition according to the present invention is at least one oil rich in omega 3 polyunsaturated fatty acids.
  • Omega3 polyunsaturated fatty acids have beneficial effects on insulin resistance in type 2 diabetes. They are abundant in the flesh of fish, especially in cold seas, as well as in the composition of certain vegetable oils such as lemon rapeseed oil or walnut oil.
  • the oil or oils added to the food composition based on polyphenolic extract of brown algae are preferably a fish oil or a mixture of fish oils, because these oils have a beneficial effect in the metabolism more interesting than vegetable oils, which do not contain EPA and DHA as detailed below.
  • the oil or oils used in the food supplement have EPA (eicosapentaenoic acid) contents of 1 50 to 450 mg / g and DHA (docosahéxanoic acid) of 100 to 300. mg / g of oil.
  • EPA and DHA are two polyunsaturated fatty acids from the Omega3 series. They are beneficial for health especially when they are brought in a balanced way in a food composition, that is to say without excess.
  • Such fish oils which have optimum Omega 3 contents for the targeted applications can be obtained according to the methods described in OCL article March / April 2004-Oilseeds, Fatty Bodies, Lipids, vol. 1 1, No. 2, p1 25.
  • Sirtuine 1 may also be called SIRT1, regardless.
  • the method of studying the modulation of the activity of sirtuin 1 chosen by the applicant consists of working on cells. This method is shown in FIG. 5. It consists of the step of introducing the test extract M into C cells in culture. After incubation, the cells are then lysed to recover the protein fraction represented by F2. In this protein fraction, S-cell Sirtuinel, a fluorescent SIRT1 substrate and a NAD are present. After standing 15 minutes represented by F3, the mixture is subjected to a fluorimetric detection D from which is extrapolated a measurement of the modulation of the activation of sirtuinel.
  • This method makes it possible to observe the phenomena of induction of cellular metabolic reactions of indirect activation of sirtuin via the extract to be tested.
  • the evaluation of the sirtuin intrinsic activatory potential of the extract to be tested is compared with that of resveratrol as a reference extract, the extract to be tested being in the case of the experiment based on Ascophyllum nodosum A.
  • the result on unstressed retinal cells is shown in FIG. 6, whereas the result on retinal cells subjected to a high glucose level is illustrated in FIGS. 7 and 8, respectively for the brown algae extract of interest. A and for other extracts of brown algae A and B.
  • Figure 6 shows the modulation of SIRT1 activity of retinal epithelial cells, * p ⁇ 0.01 compared to control.
  • Figure 7 shows the modulation of SIRT1 activity of epithelial and glia retinal cells, ** p ⁇ 0.005 compared to control (normal glucose level).
  • Figure 8 shows a modulation of the SIRT1 activity of retinal epithelial cells.
  • FIG. 6 shows the activation of sirtuin by Resveratrol.
  • brown algae extract A restores the activity of SIRT1 decreased by the high level of glucose but not the extract of brown algae B.
  • the brown algae extract A is an extract of Ascophyllum nodosum
  • B algae extract is derived from Fucus vesiculosus. This result leads to the conclusion that the polyphenolic extracts of Ascophyllum nodosum have a higher activity on the modulation of SIRT1.
  • composition based on an algae extract with at least one oil rich in Omega 3 polyunsaturated fatty acids does not have any negative side effects.

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Abstract

L'invention concerne un complément alimentaire comprenant un extrait polyphénolique d'algues brunes et au moins une huile riche en acides gras polyinsaturés Oméga 3. Il peut être utilisé comme antioxydant sur les cellules de rétines, comme activateur de la sirtuine 1 ou comme réducteur du stress cellulaire rétinien induit par un taux de glucose élevé. Il peut également être utilisé pour le traitement et/ou la prévention de l'hyperglycémie chronique sur la rétine. Le polyphénol diminue le glucose plasmatique et augmente l'activité mitochondriale. Les acides gras polyinsaturés Oméga3 ont des effets bénéfiques sur l'insulino-résistance, les diabètes de type2. L'EPA (acide eicosapentaénoïque) et le DHA (acide docosahéxanoïque) sont deux acides gras polyinsaturés de la série Oméga3, bénéfiques pour la santé notamment quand ils sont apportés en quantité optimale dans une composition alimentaire.

Description

Composition alimentaire à base d'extrait d'algues pour le traitement et/ou la prévention de la rétinopathie diabétique
La présente invention concerne une composition alimentaire à base d'extrait d'algues pour le traitement et/ou la prévention de la rétinopathie diabétique.
La rétinopathie diabétique est une cause importante de troubles visuels et de cécité chez l'adulte et le jeune adulte. La rétinopathie diabétique fait partie des cinq premières causes de cécité avec la dégénérescence maculaire liée à l'âge, le glaucome, la cataracte et la myopie dégénérative.
La rétine est la tunique la plus profonde de l'œil, couvrant environ 75% du globe oculaire. Elle reçoit les images et les transmet au cerveau via le nerf optique. Elle est constituée de deux couches distinctes : l'épithélium pigmenté et la rétine neurosensorielle. L'épithélium pigmenté est impliqué dans la mélanogenèse et joue un rôle métabolique essentiel pour les cellules photoréceptrices. L'épithélium pigmenté constitue la partie externe de la barrière hémato-rétinienne séparant ainsi la rétine neurosensorielle de la choriocapillaire. Dans la rétine neuro-sensorielle, composée de sept couches cellulaires successives, il existe des cellules gliales de Muller riches en glycogène et en mitochondries. Les cellules de Muller jouent un rôle important dans la formation et le maintien de la barrière hématorétinienne.
Les premières anomalies rétiniennes chez les patients diabétiques sont la perte de sensibilité au contraste, l'augmentation du flux sanguin et l'altération de la barrière hématorétinienne.
L'effet hyperglycémique agit sur d'une part les cellules de l'épithélium pigmenté rétinien et d'autre part les cellules gliales, qui jouent un rôle important dans la barrière hématorétienne.
Afin de réduire la glycémie, le traitement consiste à réduire la quantité de glucose par exemple en diminuant l'activité de l'alpha glucosidase qui est une enzyme digestive. Le document WO200617943 nous montre qu'il est possible d'utiliser un extrait d'algues à base d'Ascophyllum afin de réduire la glycémie. D'autre part, ce document indique que l'extrait d'algues a un effet antioxydant. L'inconvénient de ce document est qu'il ne montre pas comment agir sur la prévention et/ou le traitement des cellules de rétine.
Le resvératrol est un polyphénol présent dans des plantes terrestres, notamment des fruits, qui améliore la sensibilité à l'insuline, diminue le glucose plasmatique et augmente l'activité mitochondriale. Il est connu que le rôle bénéfique du resvératrol chez le patient diabétique est lié à son effet activateur de l'enzyme SIRT1 , de la famille des sirtuines, qui est une protéine importante dans la transduction du signal de l'insuline. Le but de la présente invention est un complément alimentaire qui permet de prévenir des effets délétères d'une hyperglycémie chronique sur la rétine.
L'invention propose un complément alimentaire comprenant un extrait polyphénolique d'algues brunes et au moins une huile riche en acides gras polyinsaturés Oméga 3.
Les huiles riches en Oméga 3 dans le cadre de la présente invention sont des huiles contenant un pourcentage total massique en Oméga 3, toute catégorie confondue et notamment l'ALA (acide alpha linolénique), ΙΈΡΑ (acide eicosapentaénoïque) et/ou le DHA (acide docosahéxanoïque), par rapport à la masse totale d'huile d'au moins 9%. Parmi les huiles végétales riches en Oméga 3, on peut citer à titre d'exemple l'huile de lin, l'huile de cameline, l'huile de noix, l'huile de chanvre, l'huile de colza ou l'huile de basilic.
Les avantages de la présente invention sont entres autres que premièrement, les extraits polyphénoliques d'algues brunes montrent un effet protecteur contre le stress oxydatif, les perturbations mitochondriales et la diminution de l'activité de la SIRT1 induit par l'hyperglycémie sur cellules de rétine. Les algues contiennent des polyphénols dénommés phlorotannins ou polyphénols marins pour les différencier des polyphénols terrestres comme le resvératrol.
Egalement, une huile riche en acides gras polyinsaturés Oméga 3, notamment une huile ou un mélange d'huiles de poissons montrent une prévention des dégâts induits par le stress hyperglycémique au niveau des cellules de rétine. Enfin, et ce point est le plus important, la combinaison d'un extrait d'algues brunes avec une huile riche en acides gras polyinsaturés Oméga 3 améliore cet effet de prévention et de réparation du stress hyperglycémique, car elle permet une meilleure biodisponibilité des polyphénols d'algues.
Selon des caractéristiques avantageuses de la présente invention :
- l'extrait polyphénolique est à base d'Ascophyllum spp. ou d'un mélange d'algues comprenant majoritairement de l'Ascophyllum spp.
l'huile ou les huiles présentent une teneur en EPA (acide eicosapentaénoïque) de 1 50 à 450 mg/g et avantageusement de 280 à 320 mg/g d'huile.
l'huile ou les huiles présentent une teneur en DHA (acide docosahéxanoïque) de 100 à 300 mg/g et avantageusement de 1 80 à 220 mg/g d'huile.
l'huile ou les huiles sont une huile de poisson ou un mélange d'huiles de poisson.
Un complément alimentaire tel que décrit ci-dessus trouve une utilisation particulièrement bien appropriée pour le traitement et / ou la prévention des effets délétères d'une hyperglycémie chronique sur la rétine ou une utilisation contre l'apparition de rétinopathies diabétiques.
L'extrait d'algues brunes A est un mélange d'Ascophyllum nodosum et de Fucus vesiculosus. Le pourcentage correspond à la concentration en phlorotanins. L'extrait d'algues brunes B est un extrait polyphénolique de Fucus vesiculosus. Le pourcentage correspond à la concentration en phlorotanins.
On comprendra mieux l'invention à l'aide de la description faite ci-après d'un mode de mise en œuvre de l'invention donné à titre d'exemple non limitatif, en référence aux figures annexées :
- la figure 1 montre les effets antioxydants de l'extrait d'algues brunes A sur cellules de rétine soumises à un stress oxydant chimique,
- la figure 2 montre les effets antioxydants d'un extrait d'algues brunes A sur cellules de rétine soumises à un fort taux de glucose, - la figure 3 montre les effets protecteurs mitochondriaux de l'extrait d'algues brunes A sur cellules épithéliales de rétine soumises à un fort taux de glucose,
- la figure 4 montre les effets protecteurs mitochondriaux de l'extrait d'algues brunes A sur les cellules gliales de rétine soumises à un fort taux de glucose,
- la figure 5 montre la succession d'étapes d'une méthode de mesure de l'effet intrinsèque d'un extrait testé sur l'activité enzymatique de la SIRT1 ,
- la figure 6 montre les effets activateurs de l'extrait d'algues brunes A sur la SIRT1 de cellules de rétine, le resvératrol étant pris comme témoin positif,
- la figure 7 montre les effets activateurs de l'extrait d'algues brunes A sur la SIRT1 de cellules de rétine soumises à un fort taux de glucose, le resvératrol étant pris comme témoin positif,
- la figure 8 montre les effets d'autres extraits d'algues brunes (A et B) sur la SIRT1 de cellules de rétine soumises à un fort taux de glucose.
La présente invention concerne un complément alimentaire dont le premier composant est un extrait d'algues brunes.
Il est connu qu'un extrait d'algues contient des polyphénols dits marins, ceux-ci variant selon le type d'algues. Les polyphénols marins sont apparentés mais différents des polyphénols terrestres. Les polyphénols marins sont principalement des polymères de phloroglucinol et ils constituent un groupe très varié en fonction de leur structure et de leur degré de polymérisation, ce qui leur confère des activités biologiques différentes. Les algues brunes sont préférées étant donné que leur teneur en polyphénols est élevée et peut atteindre 1 5% en poids.
Parmi les algues brunes, l'espèce Ascophyllum est préférée. Ascophyllum spp. désignera dans ce qui va suivre tous les éléments de l'espèce Ascophyllum, notamment mais pas uniquement Ascophyllum nodosum, Ascophyllum laevigatum et Ascophyllum mackayi. Parmi ces éléments de l'espèce Ascophyllum, c'est l'Ascophyllum nodosum qui est préféré pour former une partie de l'extrait d'algues. En effet, l'Ascophyllum nodosum a donné de meilleurs résultats. La figure 1 montre une mesure des espèces réactives de l'oxygène sur cellules épithéliales de rétine, *p<0,01 comparé au contrôle. Il a ainsi été constaté qu'un extrait polyphénolique d'algues brunes A, pouvant contenir avantageusement majoritairement de l'Ascophyllum nodosum, présente un potentiel antioxydant important.
Au cours des travaux de recherche sur les pathologies ophtalmiques, les premiers résultats ont montré l'intérêt de cet extrait polyphénolique dans l'amélioration des fonctions physiologiques de la rétine, notamment au niveau du stress oxydatif, des états pro-inflammatoires.
Ces premiers résultats positifs sur la lutte contre des troubles physiologiques d'étiologies diverses, additionnés aux effets sur la glycémie, ont orienté les travaux de la demanderesse vers la modulation du stress physiologique engendré par les états hyperglycémiques chroniques comme le diabète.
II a été alors choisi un modèle d'étude approprié pour reproduire les conditions de stress physiologique subi par les cellules de rétine chez des patients diabétiques. Les cellules sont incubées avec du milieu de culture contenant ou 5,5 mM de glucose (taux normal) ou 25 mM de glucose (fort taux) pendant 48 heures à 37<C (Yokoyama T et al., Exp Eye Res 2006;83:602-9).
Un protocole de génération d'un stress lié à un fort taux de glucose a été appliqué à deux types de cellules de rétine : le premier étant des cellules pigmentaires, autrement appelées cellules épithéliales et le second étant des cellules nerveuses ou gliales. Ce protocole permet de générer un modèle de rétinopathie diabétique.
L'extrait polyphénolique A a été appliqué sur les cellules après qu'elles aient été soumises à ce fort taux de glucose. Il a été alors constaté les bénéfices apportés par cet extrait polyphénolique d'algues brunes A, avantageusement majoritairement à base d'Ascophyllum nodosum.
La figure 2 montre une mesure des espèces réactives de l'oxygène sur cellules épithéliales de rétine, ***p<0,001 comparé au contrôle (taux de glucose normal). On peut y constater qu'un extrait polyphénolique d'algues brunes A, pouvant contenir avantageusement majoritairement de l'Ascophyllum nodosum, inhibe le stress oxydant induit par le fort taux de glucose. La figure 3 montre une évaluation des altérations mitochondriales sur les cellules épithéliales de rétine et la figure 4 sur les cellules gliales de rétine. MTT : activité de la succinate déshydrogénase mitochondriale, JC1 : potentiel transmembranaire mitochondrial, ***p<0,001 comparé au contrôle (taux de glucose normal). On peut y constater qu'un extrait polyphénolique d'algues brunes A, pouvant contenir avantageusement majoritairement de l'Ascophyllum nodosum, restaure les fonctions mitochondriales altérées par le fort taux de glucose.
Une étape importante dans l'étude de l'extrait d'algues brunes A est la mesure de son effet sur l'activation d'un élément important dans le traitement et/ou la prévention de la rétinopathie diabétique ; ledit élément est la sirtuine 1 ou SIRT 1 . Ceci sera détaillé ultérieurement en regard des figures annexées.
Le composant associé à l'extrait d'algues brunes dans la composition alimentaire selon la présente invention est au moins une huile riche en acide gras polyinsaturés Oméga3.
Les acides gras polyinsaturés Oméga3 ont des effets bénéfiques sur l'insulino-résistance dans les diabètes de type 2. Ils sont présents en abondance dans la chair des poissons, notamment dans ceux des mers froides ainsi que dans la composition de certaines huiles végétales comme l'huile de colza ou l'huile de noix.
L'huile ou les huiles ajoutées à la composition alimentaire à base d'extrait polyphénolique d'algues brunes sont de préférence une huile de poisson ou un mélange d'huiles de poisson, car ces huiles ont un effet bénéfique dans le métabolisme plus intéressant que les huiles végétales, qui ne contiennent pas d'EPA et de DHA comme détaillé ci-après.
Dans un mode préféré de réalisation de l'invention, l'huile ou les huiles utilisées dans le complément alimentaire présentent des teneurs en EPA (acide eicosapentaénoïque) de 1 50 à 450 mg/g et en DHA (acide docosahéxanoïque) de 100 à 300 mg/g d'huile. De manière avantageuse, ΙΈΡΑ est compris dans l'huile à une teneur de 280 à 320 mg/g et le DHA à une teneur entre 180 et 220 mg/g. L'EPA et le DHA sont deux acides gras polyinsaturés de la série Oméga3. Ils sont bénéfiques pour la santé notamment quand ils sont apportés de façon équilibrée dans une composition alimentaire, c'est-à-dire sans excès. De telles huiles de poisson qui présentent des teneurs en Oméga 3 optimales pour les applications visées, peuvent être obtenues conformément aux procédés décrits dans l'article OCL Mars/Avril 2004-Oléagineux, Corps Gras, Lipides, vol. 1 1 , n ° 2, p1 25.
Comme précédemment mentionné, un modèle d'étude de génération d'une rétinopathie diabétique a été appliqué à deux types de cellules de rétine : pigmentaires ou épithéliales, d'un côté, et cellules nerveuses ou gliales, de l'autre. Ce modèle a permis de démontrer que des huiles riches en acides gras avaient également des propriétés bénéfiques sur la prévention des effets négatifs du glucose.
Ainsi, une formulation judicieuse d'un extrait polyphénolique d'algues brunes dans au moins une huile riche en acides gras polyinsaturés Oméga 3, cette huile ayant par elle-même des bénéfices optimum sur la santé de la rétine dans un environnement hyperglucosidique, est une combinaison d'ingrédients très favorable dans la lutte contre la dégénérescence rétinienne liée au diabète, d'autant plus qu'un effet de symbiose par augmentation de la biodisponibilité des polyphénols est obtenu par une telle composition.
Dans ce qui va suivre, la sirtuine 1 pourra aussi être dénommée SIRT1 , cela indifféremment.
La méthode d'étude de la modulation de l'activité de la sirtuine 1 choisie par la demanderesse consiste à travailler sur des cellules. Cette méthode est montrée à la figure 5. Elle consiste en l'étape d'introduction de l'extrait à tester M dans des cellules C en culture. Après incubation, il est procédé ensuite à une lyse des cellules pour récupérer la fraction protéique représenté par F2. Dans cette fraction protéique sont présents la Sirtuinel cellulaire S, un substrat de SIRT1 fluorescent et une NAD. Après repos de 15mn représenté par F3, on soumet le mélange à une détection fluorimétrique D d'où il est extrapolé une mesure de la modulation de l'activation de la sirtuinel .
Cette méthode permet d'observer les phénomènes d'induction de réactions métaboliques cellulaires d'activation indirecte de la sirtuine via l'extrait à tester. L'évaluation du potentiel intrinsèque activateur de sirtuine de l'extrait à tester est comparée à celui du resvératrol en tant qu'extrait de référence, l'extrait à tester étant dans le cas de l'expérimentation à base d'Ascophyllum nodosum A. Le résultat sur cellules de rétine non stressées est illustré à la figure 6, tandis que le résultat sur cellules de rétine soumises à un fort taux de glucose est illustré aux figures 7 et 8, respectivement pour l'extrait d'algues brunes d'intérêt A et pour d'autres extraits d'algues brunes A et B.
Plus précisément, la figure 6 montre la modulation de l'activité de la SIRT1 des cellules épithéliales de rétine, *p<0,01 comparé au contrôle. La figure 7 montre la modulation de l'activité de la SIRT1 des cellules épithéliales et gliales de rétine, **p<0,005 comparé au contrôle (taux de glucose normal). La figure 8 montre une modulation de l'activité de la SIRT1 des cellules épithéliales de rétine. Sur la figure 6, est représentée l'activation de la sirtuine par le Resvératrol
(molécule de référence choisie comme témoin positif) et par deux concentrations d'extrait d'Ascophyllum A à 0.31 % et 0.53%. En effet, on peut voir que sur l'ordonnée, la valeur du Resvératrol est supérieure à 1 , ce qui indique que le réservatrol active la sirtuine. De plus, l'extrait d'algues brunes A active la sirtuine aux deux concentrations testées.
Sur la figure 7, on constate que le taux élevé de glucose diminue l'activité de la SIRT1 mais que l'extrait d'algues brunes A restaure l'activité de la SIRT1 . Le resvératrol est choisi comme témoin positif. L'extrait d'Ascophyllum nodosum agit donc directement sur les cellules oculaires pour déclencher des mécanismes de protection et de survie cellulaire liés à l'activation de la SIRT1 .
Sur la figure 8, on constate que l'extrait d'algues brunes A restaure l'activité de la SIRT1 diminuée par le fort taux de glucose mais pas l'extrait d'algues brunes B. L'extrait d'algues brunes A est un extrait d'Ascophyllum nodosum, et l'extrait d'algues brunes B est issu de Fucus vesiculosus. Ce résultat permet de conclure que les extraits polyphénoliques d'Ascophyllum nodosum ont une activité supérieure sur la modulation de la SIRT1 .
En plus des avantages précédemment mentionnés, l'utilisation d'une composition à base d'un extrait d'algues avec au moins une huile riche en acides gras polyinsaturés Oméga 3 ne présente pas d'effets secondaires négatifs.

Claims

REVENDICATIONS
1 - Complément alimentaire comprenant un extrait polyphénolique d'algues brunes et au moins une huile riche en acides gras polyinsaturés Oméga 3.
2- Complément selon la revendication précédente, dans lequel l'extrait polyphénolique est à base d'Ascophyllum spp. ou d'un mélange d'algues comprenant majoritairement de l'Ascophyllum spp. 3- Complément selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel l'huile ou les huiles présentent une teneur en EPA de 1 50 à 450 mg/g et avantageusement de 280 à 320 mg/g d'huile.
4- Complément selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel l'huile ou les huiles présentent une teneur en DHA de 1 00 à 300 mg/g et avantageusement de 180 à 220 mg/g d'huile.
5- Complément selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel l'huile ou les huiles sont une huile de poisson ou un mélange d'huiles de poisson.
6- Utilisation du complément alimentaire selon l'une quelconque des revendications précédentes, comme antioxydant sur les cellules de rétines. 7- Utilisation du complément alimentaire selon l'une quelconque des revendications précédentes, comme activateur de la sirtuine 1 .
8- Utilisation du complément alimentaire selon l'une quelconque des revendications précédentes, comme réducteur du stress cellulaire rétinien induit par un taux de glucose élevé.
9- Utilisation du complément alimentaire selon l'une quelconque des revendications précédentes pour le traitement et/ou la prévention des effets de l'hyperglycémie chronique sur la rétine. 10- Utilisation du complément alimentaire selon l'une quelconque des revendications précédentes pour le traitement et/ou la prévention des rétinophathies.
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