FR2939198A1 - Procede d'evaluation de l'etat de la chevelure - Google Patents

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Abstract

L'invention concerne un procédé non thérapeutique utile pour l'évaluation de l'état d'une chevelure, caractérisé en ce qu'il comprend au moins les étapes suivantes : i. disposer d'au moins un follicule pileux de ladite chevelure, ii. analyser au niveau dudit follicule pileux la teneur en au moins un analyte consistant en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine, et iii. comparer la teneur obtenue à l'issue de l'étape ii. avec au moins une teneur de référence pour le ou les analyte(s).

Description

La présente invention se rapporte au domaine du soin des cheveux. L'invention a pour objet un procédé d'évaluation de l'état de la chevelure d'un sujet par la détermination d'un état de carence du follicule pileux en un analyte consistant en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine. La présente invention se rapporte en outre à un procédé cosmétique d'amélioration des fibres kératiniques et en particulier de la chevelure d'un sujet comprenant au moins la détermination d'un état de carence en un tel analyte puis la supplémentation dudit sujet en fonction de ladite carence. L'invention a également pour objet un dispositif d'évaluation de l'état de la chevelure d'un sujet ainsi qu'un kit permettant la mise en oeuvre du procédé cosmétique selon l'invention.
Par analyte , on entend un acide aminé libre ou un peptide du follicule pileux provenant essentiellement des cellules vivantes de la racine du cheveu. Par fibres kératiniques , on entend selon l'invention, des fibres d'origine humaine ou animale telles que les cheveux, les poils, les cils, la laine, l'angora, le cachemire ou la fourrure. Bien que l'invention ne soit pas limitée à des fibres kératiniques particulières, il sera néanmoins fait plus particulièrement référence aux cheveux. Les cheveux sont produits dans des follicules pileux formés d'une gaine épithéliale d'origine épidermique et d'un bulbe pileux contenant des kératinocytes bulbaires en état de division permanent pendant les phases de croissances du cheveu. Le cheveu est constitué principalement de 85-90 % de protéines.
De très nombreuses compositions cosmétiques contenant des acides aminés, en particulier la glutamine, l'arginine ou des peptides comme la cystine et/ou de la taurine existent pour le soin du cuir chevelu. Par exemple, le document EP 1 515 712 propose l'administration par voie orale de la taurine et/ou de l'hypotaurine et/ou leurs sels acceptables utile dans le traitement et la prévention du vieillissement de l'unité pilo-sébacée et/ou de l'alopécie. Le document WO 99/62462 décrit une composition pour l'application topique sur le cheveu, pour le traitement ou la prévention de leur altération comprenant (i) du cholestérol, et (ii) un agent bénéfique pour les cheveux à base d'un mélange d'un acide aminé et d'un acide gras, plus particulièrement de L-arginine et d'acide oléique.
Le document WO 2007/068400 décrit quant à lui une composition pour les cheveux qui comprend un mélange de sucre, d'un acide aminé aliphatique et d'un acide aminé de base. Ces compositions sont plus particulièrement destinées au traitement des cheveux secs, abîmés et ou démontrant des difficultés de maniabilité.
En revanche, ces documents ne sont aucunement concernés par la détection d'une carence quelconque en l'un et/ou l'autre de ces éléments pour permettre précisément un ajustement optimisé d'une supplémentation à cette carence. Certes, dans le domaine de la nutrition, on sait analyser des acides aminés au niveau du plasma pour apprécier leur biodisponibilité et suppléer si nécessaire à leur carence. De même, la mesure des acides aminés libres est effectuée couramment chez l'animal au niveau de certains tissus comme la cornée, le foie, et le rein par exemple pour caractériser les modifications produites par un stress ou une altération du métabolisme. Toutefois, à la connaissance des inventeurs, aucune méthode d'analyse appliquée directement au follicule pileux n'est, à ce jour, proposée. Le document EP 0 567 536 décrit, pour sa part, un procédé de diagnostic d'un état de vieillissement cellulaire ou d'inflammation de kératinocytes, reposant sur l'analyse d'un follicule pileux, le marqueur étant choisi parmi la catalase, le glutathion et les glutathions peroxydases. En revanche, ce document n'est pas concerné par la détection d'une carence en acides aminés spécifiques ou dérivés d'acides aminés et a fortiori ne donne pas de solution pour surmonter un tel état de carence. Il n'existe donc pas à ce jour de méthode simple, rapide, fiable et non invasive permettant un diagnostic capillaire de l'état d'une chevelure d'un sujet. En particulier, il subsiste un besoin en moyens aptes à permettre une caractérisation des constituants essentiels du follicule pileux et un ajustement en conséquence d'une typologie bioanalytique de ce follicule de sorte à offrir une adaptation personnalisée des traitements cosmétiques et une méthode d'évaluation des performances de traitements cosmétiques, en particulier des traitements cosmétiques mis en oeuvre à la suite de cette analyse. Il existe également un besoin de fournir un procédé d'évaluation de l'état de la chevelure d'un sujet par la détermination d'un état de carence en un analyte, de façon à être à même d'identifier les apports nécessaires en ledit analyte en terme de nature et de teneur correspondante, pour prévenir et/ou pallier à une altération de l'état de la chevelure, ou pour évaluer les performances de traitements cosmétiques, en particulier des traitement cosmétiques mis en oeuvre à la suite de cette analyse.
Il demeure aussi un besoin d'un dispositif d'évaluation de l'état d'une chevelure d'un sujet d'utilisation simple et rapide permettant de doser un analyte essentiel à la chevelure consistant en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine. La présente invention répond à ce besoin, en proposant précisément un nouveau procédé permettant d'évaluer l'état de la chevelure d'un sujet par dosage d'un analyte contenu dans le follicule pileux, cet analyte consistant en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine et pouvant comprendre en outre au moins un acide aminé dit naturel ainsi que d'autres peptides détaillés ci-après. Les inventeurs ont ainsi constaté que l'évaluation de la teneur en un analyte tel que la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine s'avère un outil de diagnostic particulièrement intéressant à au moins deux titres. Elle permet, d'une part, d'identifier d'éventuelles carences, prédictives d'une altération de l'état de la chevelure d'un sujet et, d'autre part, d'évaluer les performances de traitements cosmétiques, en particulier des traitements cosmétiques mis en oeuvre à la suite de cette analyse.
Les inventeurs ont ainsi mis au point un mode de diagnostic permettant d'ajuster de façon personnalisée les quantités requises en ledit analyte de manière à remédier à une altération de l'état d'une chevelure donnée. Plus précisément, l'invention a pour objet un procédé non thérapeutique utile pour l'évaluation de l'état d'une chevelure, caractérisé en ce qu'il comprend au moins les étapes suivantes : i. disposer d'au moins un follicule pileux de ladite chevelure, ii. analyser au niveau dudit follicule pileux la teneur en au moins un analyte consistant en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine, et iii. comparer la teneur obtenue à l'issue de l'étape ii. avec au moins une teneur de référence pour le ou les analyte(s).
A l'issue de cette dernière étape, il peut être établi un diagnostic de l'état de la chevelure. Ainsi, au regard de la différence constatée entre la valeur obtenue à l'issue de l'étape ii. et celle référencée pour la teneur de référence généralement représentative d'une chevelure saine, c'est-à-dire dénuée en carence quelconque au niveau de ces composants, il est possible d'ajuster si nécessaire, un traitement capillaire, notamment en terme de posologie par exemple. Le follicule pileux mis en oeuvre en étape (i) est, pour des raisons évidentes, mis en oeuvre sous une forme isolée du cuir chevelu à l'égard duquel on cherche à établir un bilan capillaire. 30 L'invention a encore pour objet un procédé non thérapeutique pour caractériser l'aptitude d'une chevelure à répondre à un traitement capillaire et/ou déterminer l'efficacité d'un traitement capillaire à l'égard d'une chevelure comportant au moins les étapes suivantes : i. Disposer d'au moins un premier follicule pileux de ladite chevelure, ii. Analyser au niveau dudit follicule pileux la teneur en au moins un analyte consistant en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine, iii. Renouveler les étapes i et ii sur un deuxième follicule pileux de ladite chevelure, et iv. Comparer les résultats obtenus à l'issue des étapes ii. et iii., lesdits premier et second follicules pileux correspondant à des stades de traitement capillaires différents. Au sens de la présente invention, un traitement capillaire, couvre tout traitement destiné à avoir un effet bénéfique au niveau de la chevelure d'un sujet. Ce traitement peut être administré par voie topique ou orale. Ce traitement peut être également réalisé par microinjection, associé ou non à un appareil expérimental annexe, apte à générer par exemple un rayonnement infra-rouge ou des ultra-sons. Selon une première variante de réalisation, le follicule pileux de l'étape (i) est représentatif d'une chevelure n'ayant pas été sujette à un traitement, notamment capillaire à la différence du follicule pileux de l'étape (iii). Selon une seconde variante de réalisation, les follicules pileux des étapes (i) et (iii) sont tous deux représentatifs d'une chevelure sujette à un traitement, notamment capillaire, notamment à des stades temporels différents du traitement. L'invention a également trait à un dispositif utile pour l'évaluation de l'état d'une chevelure d'un sujet par analyse qualitative et/ou quantitative d'au moins un analyte, au niveau d'un follicule pileux comprenant au moins : - un milieu liquide, destiné à être mis en contact avec au moins un follicule pileux, - un premier réactif apte à extraire du follicule pileux au moins un analyte consistant en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine, et - un second réactif propice à la caractérisation qualitative et/ou quantitative du ou desdits analyte(s) considéré(s). Par milieu liquide , on désigne tout liquide permettant de recueillir l'analyte, par exemple en le dissolvant, en le fixant ou en le transformant. Le milieu liquide peut être par exemple choisi dans le groupe constitué par : l'eau, une solution aqueuse, une solution contenant un tampon, une solution hydro-alcoolique, une solution huileuse, une huile, un solvant organique, le chloroforme, l'acétate d'éthyle, les alcools, les solvants chlorés, l'acétone, les esters courts, les mélanges d'eau et de méthanol, de chloroforme et d'éthanol, cette liste n'étant pas limitative. Il peut en outre comporter un éluant, un fixateur.
Ce milieu liquide peut être disposé dans un organe de collecte. Dans cette alternative, le follicule pileux à analyser est immergé dans le milieu liquide contenu dans l'organe de collecte. Par second réactif , on désigne tout composé en solution ou non, apte à interagir avec l'analyte, et de par cette interaction à permettre de qualifier et/ou quantifier l'analyte considéré. Selon une variante de réalisation, le second réactif peut être un indicateur colorimétrique et la réaction sera alors constatée visuellement. Selon une autre variante, le second réactif peut être une enzyme telle que par exemple une aminooxydase apte à interagir avec l'analyte recherchée. La réaction est ensuite contrôlée par une méthode de détection conventionnelle relevant des compétences de l'homme de l'art. Selon encore une autre variante, le second réactif peut être un antigène ou un anticorps apte à interagir avec l'analyte considéré. La réaction peut être dans ce cas contrôlée par un test tel qu'Elisa. L'invention a enfin pour objet un kit destiné notamment à améliorer l'état d'une chevelure chez un sujet comprenant un dispositif d'évaluation tel que défini précédemment et au moins un actif susceptible d'être administré audit sujet pour pallier une carence en au moins un analyte consistant en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine. Ces actifs peuvent être conditionnés de manière isolée, les uns des autres ou sous la forme de plusieurs types de mélanges. Il est par ailleurs entendu dans le cadre de la présente invention que la supplémentation en un tel actif peut consister en un apport tant par voie orale que topique voire par microinjection en au moins un analyte consistant au moins en la taurine, l'acide 30 glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine ou en un de leurs dérivés, typiquement un de ses précurseurs ou un de ses métabolites. Dans le cadre de la présente invention, la supplémentation s'entend également d'un ajout de nutriments au régime alimentaire d'une personne, sous forme d'aliments spécifiques ou de tout complément alimentaire sous toute 25 forme galénique appropriée à l'administration orale telle que les comprimés pour maintenir un bon état de la chevelure ou prévenir son altération. Les actifs considérés selon l'invention sont plus particulièrement dédiés à une administration par voie topique.
De ce qui précède, il ressort donc que l'invention permet de disposer d'un moyen relativement simple pour effectuer un diagnostic ou une évaluation cosmétique de l'état d'une chevelure en vue de remédier à ses éventuelles altérations dues à des carences en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine. Le procédé s'avère efficace sur toute nature de cheveux. L'invention s'étend à des applications humaines mais aussi vétérinaires, en particulier pour les animaux de compagnie. Un état de chevelure altéré peut notamment se manifester par une altération de l'état du cuir chevelu, par le vieillissement de la chevelure, par une altération du volume de la chevelure, de son aspect de brillance, de sa capacité à conserver un brushing, une augmentation de la chute des cheveux ou état alopécique et une détérioration de la qualité des cheveux telle que une baisse de leur aptitude à résister à la casse, la présence de fourches, une baisse de leur dureté, une diminution de leur diamètre. Pour un vieillissement du cheveu , on peut comprendre les différentes manifestations de l'âge sur le cheveu, à savoir l'apparition d'un blanchissement des cheveux ou canitie, l'accélération de leur chute et une baisse dans leur renouvellement ou encore une diminution de densité de la chevelure. Un état alopécique se traduit plus particulièrement par une chute partielle ou totale des cheveux chez un individu. Les personnes chez qui un état alopécique se manifeste peuvent, en particulier, être victime d'alopécie diffuse comme par exemple l'alopécie androgénétique ou alopécie séborrhéique ou encore calvitie commune due à un excès d'androgènes (hormones mâles). Ce type d'alopécie est héréditaire et donc progressif, irréversible et responsable de la plupart des calvities. On constate dans ce type d'alopécie, principalement chez les hommes, que dans la zone constituant le sommet du crâne (vertex), les cycles de production du cheveu s'arrêtent parfois précocement, phénomène qui n'est pas observé pour les zones du pourtour du crâne, et en particulier de la nuque. Dans un nombre important de cas, la chute précoce des cheveux survient chez des sujets prédisposés génétiquement, il s'agit alors d'une alopécie andro-chrono-génétique ; cette forme d'alopécie concerne notamment les hommes.
PROCEDE D'EVALUATION DE L'ETAT DE LA CHEVELURE D'UN SUJET Le procédé selon l'invention est notamment utile pour évaluer l'état d'une chevelure d'un sujet plus particulièrement, l'état de vieillissement de la chevelure, l'état de volume de la chevelure, l'aspect de brillance de la chevelure, la capacité à conserver un brushing, la chute des cheveux ou état alopécique et la qualité des cheveux telle que leur aptitude à résister à la casse, la présence de fourches, leur dureté, leur diamètre. Le nombre de cheveux nécessaire à l'évaluation peut varier par exemple de 1 à 10 cheveux.
Ce nombre de cheveux est avantageusement ajusté au regard des valeurs de référence imposées par le procédé selon l'invention. Par exemple, si la valeur de référence en alanine est rapportée pour un follicule pileux unique, la valeur évaluée pour six follicules sera révisée en conséquence pour être représentative également d'un unique follicule. La quantité de cheveux à analyser peut être de l'ordre de 10 mg.
Selon un mode de réalisation particulier de l'invention, ces cheveux peuvent être issus d'au moins une des deux zones : vertex et nuque, voire les deux zones. Le ou les follicule(s) pileux correspondant(s) peu(ven)t être immergé(s) dans un milieu liquide à des fins de conservation ou de transport notamment. Le procédé selon l'invention peut être mis en oeuvre par le consommateur lui-même ou par un professionnel dans un centre spécialisé, notamment un institut de beauté ou sur un lieu de vente, par exemple. Selon un mode de réalisation, le dosage peut être immédiat, c'est-à-dire être réalisé juste après le prélèvement. En quel cas, l'opérateur sera généralement le sujet ou le coiffeur. Selon un autre mode de réalisation de l'invention, l'échantillon peut être analysé ultérieurement et être envoyé par exemple à un centre d'analyse pour une analyse du ou des follicule(s) prélevé(s). Ce mode de réalisation est particulièrement avantageux lorsque les analyses nécessitent des outils de mesure, tels que des séparations chromatographiques ou des spectromètres de masse, ne pouvant être mis en oeuvre dans le cadre d'une analyse à domicile par le sujet lui-même.
Le détail de méthodes d'analyse, pouvant être mis en oeuvre dans des laboratoires, des teneurs en acides aminés libres, peptides, protéine et certains de leurs dérivés est donné ci-après. Typiquement, le milieu liquide, tel que défini plus haut, peut comprendre des additifs tels qu'un système tampon et/ou un ou des agents de chélation (ex : EDTA).
Le milieu liquide peut comprendre ou non un réactif tel que détaillé ci-après. Le volume de milieu liquide est généralement de l'ordre de 0,1 ml. Une fois le prélèvement effectué, le milieu liquide comprenant le ou les follicule(s) pileux donnant l'échantillon, est propice à l'analyse considérée.
L'analyte constitué en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine fait partie du groupe constitué par les acides aminés libres, les peptides, certains de leurs dérivés et leurs mélanges. L'analyte peut être unique ou être constitué de plusieurs des entités appartenant aux familles citées ci-dessus, par exemple 2, 3, 4, 5, 6 ou 7. L'analyte peut également être constitué de la totalité des acides aminés, peptides ou dérivés peptidiques considérés dans l'invention. Dans cette hypothèse, le procédé selon l'invention procure un profil complet des acides aminés présents au niveau du follicule pileux considéré ou encore un aminogramme complet des follicules pileux. Alternativement, le procédé peut donner accès à un profil partiel en acides aminés, peptides ou dérivés peptidiques d'intérêt. Bien entendu, plus le nombre d'analyte évalué est important, plus l'évaluation de l'état de la chevelure est fine et précise et il sera alors possible de répondre de la façon la plus appropriée à la spécificité de la chevelure testée en termes de carence détectée. Selon un de ses aspects, l'invention comprend le cas où le profil complet des analytes est réalisé, à l'image de l'exemple donné ci-après dans le tableau B. Dans ce cas, l'analyse est avantageusement effectuée non pas grâce au dispositif d'évaluation également objet de la présente invention, mais par mise en oeuvre de techniques classiques de laboratoires rappelées ci-après.
Analyte La taurine est un dérivé d'acide aminé également connu sous le nom d'acide 2-aminoéthanesulfonique. La taurine est connue pour son utilisation dans le traitement et la prévention du vieillissement de l'unité pilo-sébacée et/ou de l'alopécie, décrite dans le document EP 1 515 712. Selon un mode de réalisation de l'invention, l'analyte comprend outre la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine un, deux, voire trois autre(s) analyte(s) faisant partie du groupe constitué par les acides aminés libres, les peptides, les protéines et certains de leurs dérivés. 30 Concernant les acides aminés naturels libres, on distingue l'alanine, l'arginine, l'asparagine, l'acide aspartique, la cystéine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine, l'histidine, l'isoleucine, la leucine, la lysine, la méthionine, la phénylalanine, la proline, la sérine, la thréonine, le tryptophane, la tyrosine, la valine, la citrulline, l'ornithine.
Selon un mode de réalisation particulier de l'invention, le ou les acide(s) aminé(s) libre(s) additionnellement compris dans l'analyte peu(ven)t être choisi(s) parmi l'acide aspartique, la sérine, la proline, la valine, la thréonine, la lysine et la leucine. Les peptides sont avantageusement des enchaînements d'au plus 25 acides aminés. Parmi les peptides dont la détection peut être déterminante pour l'établissement de l'évaluation conforme à la présente invention, on distingue en particulier le glutathion qui est un tripeptide d'acide glutamique, de cystéine et de glycine et la cystine qui est un dipeptide de deux cystéines reliées par un pont disulfure. Par la fonction thiol du radical de la cystéine, le glutathion peut exister sous une forme réduite, on parle de glutathion réduit ou il peut exister sous une forme oxydée dans laquelle deux molécules de glutathion sont liées par un pont disulfure, on parle alors de glutathion oxydé. Selon un mode de réalisation, un des deux analytes de la paire est un acide aminé choisi parmi les acides aminés définis précédemment et l'autre est un dérivé d'acide aminé choisi parmi les dérivés d'acides aminés définis précédemment. Selon un autre mode de réalisation, un des deux analytes de la paire est un acide aminé choisi parmi les acides aminés définis précédemment et l'autre est un peptide choisi parmi les peptides définis précédemment. Selon un mode de réalisation particulier de l'invention, outre la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine, l'analyte comprend au moins un autre analyte, notamment un peptide, et notamment le glutathion réduit.
Selon un mode de réalisation particulier de l'invention, l'analyte constitué en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine comprend en outre au moins l'un des autres analytes choisis parmi le glutathion réduit, l'acide aspartique, la sérine, la proline, la valine, la thréonine, la lysine, la leucine, l'histidine, la citrulline, l'arginine, la tyrosine, l'asparagine, l'isoleucine, la phénylalanine, l'ornithine, la méthionine, le glutathion oxydé et la cystine. Selon un mode de réalisation particulier de l'invention, outre la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine, l'analyte comprend au moins un autre analyte choisi parmi le glutathion réduit, l'acide aspartique, la sérine et la proline.
Selon un mode de réalisation, l'analyte est formé d'une paire de deux analytes, cette paire étant choisie parmi la taurine et l'acide glutamique, la taurine et le glutathion réduit, la taurine et la glutamine, la taurine et la glycine, la taurine et l'alanine, l'acide glutamique et la glutamine, l'acide glutamique et la glycine, l'acide glutamique et l'alanine, l'acide glutamique et l'acide aspartique, l'acide glutamique et la sérine, l'acide glutamique et la proline, le glutathion réduit et la glutamine, le glutathion réduit et la glycine, le glutathion réduit et l'alanine, la glutamine et la glycine, la glutamine et l'alanine, la glutamine et l'acide aspartique, la glutamine et la sérine, la glutamine et la proline, la glycine et l'alanine, la glycine et l'acide aspartique, la glycine et la sérine, la glycine et la proline, l'alanine et l'acide aspartique, l'alanine et la sérine, l'alanine et la proline. Selon un mode de réalisation particulier de l'invention, les deux analytes de la paire sont choisis parmi la taurine et l'acide glutamique, la taurine et la glutamine, la taurine et la glycine, la taurine et l'alanine, la taurine et l'acide aspartique, la taurine et la sérine, la taurine et la proline.
Selon encore un autre mode de réalisation, un des deux analytes de la paire est un peptide choisi parmi les peptides définis précédemment et l'autre est un dérivé d'acide aminé choisi parmi les dérivés d'acides aminés définis précédemment. Avantageusement, il s'agit de la taurine et du glutathion réduit. Selon un mode particulier de réalisation, on évalue l'état de carence de la taurine seule, de la glutamine seule, de l'acide glutamique seul ou du glutathion réduit seul ou bien de la taurine et de la glutamine, de la taurine et de l'acide glutamique, de la taurine et du glutathion réduit, de la glutamine et de l'acide glutamique, de la glutamine et du glutathion réduit ou enfin de l'acide glutamique et du glutathion réduit. Selon une variante de réalisation, l'analyse est effectuée au niveau du follicule pileux d'un sujet de sexe féminin et vise à apprécier au moins les teneurs en glutathion réduit, glutamine, leucine, asparagine et tyrosine. Une telle analyse s'avère particulièrement intéressante pour sanctionner une prédisposition à l'alopécie et/ou un état alopécique voire une chute de cheveux chez un sujet de sexe féminin. Selon une autre variante de réalisation, l'analyse est effectuée au niveau du follicule pileux d'un sujet de sexe masculin et vise à apprécier au moins les teneurs en acide glutamique, thréonine, asparagine et alanine. Une telle analyse s'avère particulièrement intéressante pour sanctionner une prédisposition à l'alopécie et/ou un état alopécique voire une chute de cheveux chez un sujet de sexe masculin.
Selon, encore une autre variante de réalisation, l'analyse est effectuée au niveau du follicule pileux d'un sujet de sexe masculin et vise à apprécier au moins les teneurs en glycine, valine, sérine et thréonine. Une telle analyse s'avère particulièrement intéressante pour sanctionner un vieillissement capillaire chez un sujet de sexe masculin.
Selon encore une autre variante de réalisation, l'analyse est effectuée au niveau du follicule pileux d'un sujet de sexe féminin et vise à apprécier au moins les teneurs en acide glutamique, glutathion réduit et thréonine. Une telle analyse s'avère particulièrement intéressante pour sanctionner un vieillissement capillaire chez un sujet de sexe féminin. Le diagnostic obtenu selon l'invention peut être qualitatif ou quantitatif. Dans le cas d'un diagnostic quantitatif la teneur en analyte peut être avantageusement exprimée au regard de la quantité totale du matériel analysé et généralement figuré par la gaine épithéliale externe. Le diagnostic qualitatif est généralement établi par référence à un aminogramme de référence représentatif d'une chevelure non sujette à un quelconque désordre. Cet aminogramme de référence peut ou non être spécifique au sujet faisant l'objet du diagnostic.
Toutefois, selon un autre mode de réalisation, ce diagnostic peut être également effectué en se référant à un aminogramme établi pour le même sujet, soit préalablement à la prescription d'un traitement dédié à pallier un désordre capillaire soit au cours d'un tel traitement de manière précisément à sanctionner l'efficacité de ce traitement au cours du temps et de pouvoir procéder si nécessaire à son réajustement.
Il existe de nombreuses approches de séparation, identification et quantification des analytes conformes à l'invention et en particulier des acides aminés. Ces approches sont chromatographiques, électrophorétiques ou encore liées à la masse propre de chaque composé. Ces approches peuvent être utilisées seules ou en combinaison et avec ou sans traitement chimique de l'échantillon (dérivation chimique). Pour une réponse sans ambiguïté de l'identité des analytes, la méthode présente avantageusement de la spécificité, pour permettre de distinguer les analytes contenus dans l'échantillon.
Dérivation chimique La spécificité peut être obtenue par dérivation chimique des analytes. Ces dérivations, dans le cas des séparations chromatographiques, peuvent être réalisées avant la colonne (dérivation pré-colonne), dans la colonne (dérivation on-colonne) ou encore après la colonne de séparation (dérivation post-colonne).
La dérivation pré-colonne est l'approche la plus courante et la plus diversifiée en matière de réactifs chimiques. On distingue dans le tableau A ci-dessous les moyens de dérivation chimiques pré-colonne des acides aminés ainsi que les méthodes de détection et de séparations qui peuvent être utilisées. Parmi les moyens de dérivations chimiques, on peut citer les réactifs suivants : O-Phtaldialdéhyde, Phénylisothiocyanate, 4,4-N,N-Diméthylaminoazobenzène-4'-isothiocyanate, Chlorure de 5-Diméthylaminonaphtalène-l-sulfonyl, Chlorure de 4-Diméthylaminoazobenzène-4'- sulfonyl, Chloroformate de 9-Fluorénylmethyl , Naphtalène-2,3-dicarboxaldéhyde, Fluorescamine, Fluoroscein isothiocyanate, 3-(p-carboxybenzoyl)quinolinecarboxyaldéhyde, 3-(4 carboxybenzoyl)-2- quinolinecarboxyaldéhyde, 3 -(4- tétrazolbenzoyl)- 2- quinolinecarboxyaldéhyde, 1-Méthoxycarbonylindolizine-3,5-dicarbaldéhyde, 2-(9-Anthryl)éthyl chloroformate, 6-Aminoquinolyl-N-hydroxy-succinimidyl carbamate, Chlorure de carbazole-N-(2-méthyl)acétyl, Chlorure d'acridone-N-acétyle, Chlorure de carbazole-9-acétyle , Chlorure de carbazole-9-propionyle, Tétramethylrhodamine isothiocyanate, 2,4-Dinitrofluorobenzène, 9-isothiocyanatoacridine et Benzylisothiocyanate.
TABLEAU A Réactif de dérivation chimique Détection Séparation O-Phtaldialdéhyde UV-Fl RP HPLC, MEKC Phénylisothiocyanate UV RP HPLC, MEKC, CEC 4,4-N,N-Diméthylaminoazobenzène-4'- Vis RP HPLC isothiocyanate Chlorure de 5-Diméthylaminonaphtalèn-1-sulfonyl UV-Fl RP HPLC, MEKC Chlorure de 4- Diméthylaminoazobenzène-4'- Vis RP HPLC sulfonyl Chloroformate de 9-Fluorénylmethyle Fl RP HPLC, MEKC Naphtalène-2,3-dicarboxaldéhyde Fl RP HPLC, MEKC, CEC Fluorescamine UV-Fl RP HPLC, CE Fluoroscein isothiocyanate Fl RP HPLC, MEKC 3-(p-carboxybenzoyl)quinolinecarboxyaldéhyde Fl MEKC 3-(4- carboxybenzoyl)-2- Fl MEKC quinolinecarboxyaldéhyde 3 -(4- tétrazolbenzoyl)-2- Vis-Fl MEKC quinolinecarboxyaldéhyde 1-Méthoxycarbonylindolizine-3,5-dicarbaldéhyde Vis-Fl RP HPLC, CE, MEKC 2-(9-Anthryl)éthyl chloroformate UV-Fl RP HPLC, MEKC 6-Aminoquinolyl-N-hydroxy-succinimidyl Fl RP HPLC, MEKC carbamate Chlorure de carbazole-N-(2-méthyl)acétyl Fl RP HPLC Chlorure d'acridone-N-acétyle Fl RP HPLC Chlorure de carbazole-9-acétyle Fl RP HPLC Chlorure de carbazole-9-propionyle Fl RP HPLC Tétramethylrhodamine isothiocyanate Fl MEKC 2,4-Dinitrofluorobenzène UV CE 9-isothiocyanatoacridine UV RP HPLC Benzylisothiocyanate UV RP HPLC où les significations des abréviations sont les suivantes : UV : ultra-violet FI : infra-rouges Vis : visible RP : chromathographie haute performance en phase inverse CE : électrophorèse capillaire MEKC : chromatographie micellaire CEC : électro-chromatographie capillaire L'O-Phtaldialdéhyde, le 1,2 naphtoquinone-4-sulfonate et la Fluorescamine sont également utilisables en dérivation post-colonne. La dérivation post-colonne présente l'avantage d'être plus reproductible que la dérivation pré-colonne. Avantageusement, on utilise la ninhydrine comme agent de dérivation post ou pré- colonne dans le procédé selon l'invention. La dérivation on-colonne est une approche plus récente. Elle est essentiellement utilisée associée aux méthodes de séparations électro-chromatographiques. Le 1,2-naphtoquinone-4-sulfonate et plus récemment l'O-phtaldialdéhyde sont utilisés comme réactifs pendant la phase de séparation dans la colonne en électrophorèse capillaire. Néanmoins cette méthode de dérivation peut présenter des problèmes de reproductibilité.
Méthodes de séparation des analytes L'ensemble des techniques à la disposition de l'homme du métier peut être utilisé pour séparer les analytes, en particulier les acides aminés dans le cadre du procédé selon la présente invention. A ce titre, on cite comme moyen de séparation, identification et quantification : • la chromatographie en phase liquide à haute performance (abrégée HPLC) à échange d'ions avec différents supports tels que, par exemple, des colonnes en phase inverse (on parle de chromatographie en phase liquide à haute performance en phase inverse abrégée RP HPLC), des colonnes échangeuses de cations, des colonnes échangeuses d'anions ; • la chromatographie en phase gazeuse (abrégée GC) souvent couplée à la spectrométrie de masse ; • la spectrométrie de masse (abrégée MS) ; • l'électrophorèse capillaire (abrégée CE) ; et • l'électro-chromatographie avec en particulier l'électro-chromatographie capillaire (abrégée CEC) et l'électro-chromatographie micellaire (abrégée MEKC).
La chromatographie en phase liquide à haute performance en phase inverse sépare les acides aminés par un gradient eau/solvants organiques qui détermine leurs temps de rétention. Elle est utilisée associée à la dérivation pré-colonne.
La chromatographie en phase liquide à haute performance à échange d'ions (abrégée IEX HPLC), anions ou cations, permet la séparation des acides aminés. Les temps de rétentions répondent à un gradient de tampons salins. Elle peut être utilisée associée à la dérivation pré- ou post-colonne. Dans le cadre de la présente invention, la chromatographie en phase liquide à échange d'ions avec une détection post colonne à la ninhydrine est particulièrement préférée. L'électrophorèse capillaire peut être associée aux dérivations pré et on-colonne où la séparation s'effectue en fonction du flux électro-osmotique, pH dépendant et sous l'effet d'un potentiel électrique.
L'électro-chromatographie est associée aux dérivations pré et on-colonne. Elle dérive de la CE. La MEKC utilise un détergent au dessus de sa concentration micellaire critique et le temps de migration dépend du coefficient de partage entre la phase aqueuse et la phase micellaire. La phase de la colonne est appelée pseudo-stationnaire. La CEC est la technique la plus récente et permet pour le moment de ne séparer que 18 acides aminés sur des colonnes capillaires. Il existe des moyens qui ne nécessitent pas de dérivation chimique comme la spectrométrie de masse en tandem par exemple. Chaque analyte se différencie d'un autre par son rapport masse/charge mesuré ainsi que son profil de fragmentation par MS. Enfin, les techniques de chromatographie liquide à haute performance en phase inverse ainsi que l'électrophorèse capillaire peuvent être couplées à la spectrométrie de masse. Selon un mode particulier de réalisation de l'invention, on utilise la dérivation post-colonne. Avantageusement, on fait suivre cette dérivation par une séparation sur colonne échangeuse de cations permettant la quantification des analytes, en particulier des acides aminés, avec une limite de détection suffisamment basse pour être réalisable à partir de faibles quantités d'échantillons. Ce mode particulier de réalisation de l'invention présente l'intérêt d'utiliser des systèmes dédiés aux analyses des analytes conformes à l'invention, très stables, ce qui est un atout supplémentaire permettant une meilleure reproductibilité des analyses comparé à un instrument plus polyvalent.
Le résultat de l'analyse et/ou des informations relatives à l'échantillon adressé au centre d'analyse ou laboratoire d'analyse peuvent alors être transmis à l'expéditeur de l'échantillon, par exemple à l'individu testé, par courrier ou encore par un réseau informatique (intranet ou internet) et/ou téléphonique, afin d'être reçu par exemple sur un ordinateur personnel ou un terminal portable.
L'invention s'étend également au mode de réalisation selon lequel l'analyse est également effectuée par le sujet lui-même à l'aide du dispositif d'évaluation selon la présente invention, décrit plus en détail ci-après. L'étape de comparaison avec la teneur standard du même analyte chez un sujet sain peut être effectuée sur un point de vente ou dans un institut de beauté. Elle peut alternativement être effectuée au domicile du consommateur. Selon une première variante, cette étape de comparaison est menée en comparaison de la teneur standard du même analyte chez un sujet sain. Selon un aspect de cette variante de l'invention, différents standards, par exemple sous forme de tableaux de référence, peuvent être disponibles, correspondants aux références d'un sujet sain ayant le même âge que le sujet à plus ou moins 4 ans, voire à plus ou moins 3 ans, plus particulièrement à plus ou moins 2 ans. La comparaison peut être menée en fonction d'au moins un critère commun entre le sujet à évaluer et le sujet sain, choisi parmi le sexe, l'âge, l'espèce, la race, le type de fibres kératiniques, de préférence le sexe. Ainsi, selon un autre aspect de cette variante de l'invention, la comparaison s'effectue à partir de données relatives à un sujet sain de même sexe que le sujet. Des valeurs moyennes standard ou encore de référence peuvent être obtenues, après étude préalable, chez un nombre représentatif d'individus comparables représentant des échantillons de populations présentant des chevelures altérées ou non. L'étape de comparaison de la teneur en ledit analyte chez le sujet sur lequel porte l'évaluation avec la teneur standard du même analyte chez un sujet sain peut être menée grâce à des références, par exemple sous forme de tableaux, comportant des données sur la teneur en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine, chez un sujet sain.
A titre illustratif, le tableau B suivant donne le profil complet en analyte moyen, réparti en fonction du sexe des sujets testés. Il s'agit d'un profil de référence .
TABLEAU B Glutamine Thréonine Pic HPLC Proline Valine 2,7 Phénylalanine Méthionine Glutathion oxydé Pic HPLC Citrulline Ornithine Histidine Arginine Cystine Hommes jeunes non alohécique 0.7 " 0 0J 12" ,7 "() 1,7 1,1 1,1 Lysine Leucine 7 7 Taurine Acide Glutamique Glutathion réduit Acide Aspartique Sérine Glycine Alanine Hommes jeunes non alorécique 16,7 "o 11,4` 10,4 5,9 'or 5Me 54ä 3,1 29i', Tyrosine Asparagine Isoleucine Les pourcentages massiques sont indiqués en fonction de la somme totale des analytes considérés. La méthode employée pour obtenir ces résultats est celle décrite plus en détail dans l'exemple 1.
Ces résultats ont été obtenus grâce à une étude sur 267 sujets (125 hommes et 142 femmes). Selon une deuxième variante, la comparaison s'effectue avec des références comportant des données sur la teneur en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine, correspondant à divers types et/ou degrés d'altération d'une chevelure. Selon cette variante, le procédé permet une évaluation affinée de l'état de la chevelure humaine, à savoir donnant des indications spécifiques sur l'état du cuir chevelu, l'état de vieillissement de la chevelure, l'état de volume de la chevelure, l'aspect de brillance de la chevelure, la chute des cheveux et la qualité des cheveux telle que leur aptitude à résister à la casse, la présence de fourches, leur dureté, leur diamètre. En particulier, l'ampleur de la variation de valeur entre la teneur d'un analyte donné chez le sujet sur lequel porte l'évaluation selon la présente invention, comparativement en la teneur en ledit analyte chez le sujet sain de référence, peut permettre de conclure sur des états de carence, notamment prédictifs des altérations visées ci-dessus, comme cela est détaillé ci-après. 20 Toujours selon cette deuxième variante, les références peuvent être également fonction de l'âge et/ou du sexe du sujet. L'invention permet avantageusement de constater que des carences différentes sont observées chez des sujets atteints d'alopécie selon qu'il s'agisse d'hommes ou de femmes. L'invention a ainsi permis d'établir qu'une supplémentation en acide glutamique 25 chez l'homme peut être avantageuse pour pallier à une carence en cet acide constatée dans le cas d'une alopécie. Selon un mode de réalisation particulier, que l'on se place dans la première ou la deuxième variante telles qu'exposées ci-dessus, l'étape de comparaison peut être effectuée à partir de références imprimées, par exemple sous forme de tableaux de références. 30 Alternativement, l'étape de comparaison peut être effectuée à partir de références affichées à l'écran d'un ordinateur. Encore alternativement, l'étape de comparaison est effectuée de manière automatisée. Ainsi, l'étape de comparaison peut être menée à l'aide d'outils informatiques. Le 15 cas échéant, le traitement des données peut être effectué par un serveur distant. Ledit serveur peut ensuite transmettre des informations à l'institut de beauté ou au consommateur directement.
L'invention se rapporte également à un procédé cosmétique d'amélioration de la chevelure d'un sujet comprenant les étapes suivantes : i. Prélèvement au moins un follicule pileux du sujet, ii. Analyse de la teneur d'au moins un analyte contenu dans la chevelure consistant en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine, iii. Comparaison de la teneur en ledit analyte avec la teneur standard du même analyte chez un sujet sain ou comparaison de la teneur en ledit analyte avec des références comportant des données sur la teneur en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine, correspondant à divers types et/ou degrés d'altération d'une chevelure, iv. Supplémentation du sujet en ledit analyte en fonction de l'écart constaté à l'étape (iii) précédente. L'invention a encore pour objet, selon un autre de ses aspects, un procédé pour la prescription d'un traitement, notamment cosmétique, ce procédé comportant l'étape consistant à prescrire au moins un produit, notamment pour une supplémentation cosmétique, en fonction du résultat d'une analyse du ou des follicule(s) prélevé(s) au cours du procédé tel que défini plus haut. Les étapes (i) à (ii) sont telles qu'elles ont été décrites ci-dessus. Relativement à la mise en oeuvre de l'étape (iii), le procédé cosmétique selon la présente invention peut comprendre une étape de comparaison de la teneur en ledit analyte avec la teneur standard du même analyte chez un sujet sain. Alternativement, l'étape (iii) peut consister à comparer le résultat obtenu à l'étape (ii) avec une pluralité de références, par exemple sous forme de tableaux, représentatives chacune d'un état de chevelure donné. Ledit état de chevelure donné peut traduire par exemple des degrés d'altération d'une chevelure en rapport avec l'état du cuir chevelu, l'état de vieillissement de la chevelure, l'état de volume de la chevelure, l'aspect de brillance de la chevelure, la chute des cheveux ou l'état alopécique et/ou la qualité des cheveux telle que leur aptitude à résister à la casse, la présence de fourches, leur dureté et/ou leur diamètre.
Comme exposé ci-dessus, le traitement des données utiles à la comparaison peut être effectué par un serveur distant. Ledit serveur peut ensuite transmettre des informations au consommateur, notamment un résultat d'analyse, lequel peut être accompagné par une prescription d'un produit, voire par la fourniture d'un produit personnalisé, le serveur ayant par exemple communiqué, par exemple par l'intermédiaire d'un réseau, des informations à un centre de fabrication. Le produit de supplémentation personnalisé peut comporter par exemple les quantités et ratios adéquats en acides amines, peptides, protéines ou dérivé peptidique pour lesquels une carence aura été identifiée, calculés en fonction de l'évaluation précédemment menée. Le produit de supplémentation peut comprendre, au lieu de l'analyte lui-même, un de ses précurseurs, métabolites ou dérivés. Il peut s'agir généralement d'acides essentiels et/ou d'acides aminés non essentiels. Typiquement, la citrulline peut être remplacée par l'arginine, ou encore certains acides aminés non essentiels peuvent être remplacés par des acides aminés essentiels comme la phénylalanine par la tyrosine. De même, le glutathion réduit peut être remplacé par ses analogues ou précurseurs antioxydants. Des exemples de tels analogues du glutathion réduit sont la taurine, l'acide ascorbique, préférentiellement sous forme oxydée biodisponible, polyphénols de thé vert, pépins de raisins, vitamine E. C'est le pouvoir antioxydant notamment mesuré par le test au DPPH, couramment utilisé dans l'industrie agroalimentaire, qui permet de déterminer quels sont les composés analogues du glutathion réduit.
Des exemples de précurseurs du glutathion réduit sont l'acide glutamique, à raison d'un pour un, la cystine à raison de 0,5 pour 1, la méthionine à raison d'un pour un, et l'alanine à raison d'un pour un. Les acides aminés du produit de supplémentation peuvent se présenter sous leur forme D ou L, de préférence L.
Ce produit de supplémentation pourra prendre toute forme appropriée adaptée à un usage externe ou à une administration par voie orale. Ainsi, pour ce qui est de l'usage externe, il peut s'agir d'un shampoing, d'un après-shampoing, d'un produit de soin ou de conditionnement des cheveux, dont les formulations peuvent être variées : sprays, mousses, lotions, gels.
Pour ce qui est de l'administration par voie orale, il peut s'agir d'une poudre, d'un sirop, de gélules, de comprimés, de boissons (eau enrichie en acides aminés, de jus de fruits enrichis en acides aminés, par exemple. A titre d'ingrédient pouvant être mis en oeuvre dans une composition de supplémentation adaptée aux besoins du sujet révélés par le dispositif d'évaluation selon l'invention, on peut utiliser la taurine et/ou l'hypotaurine, qui en est un métabolite. On peut utiliser également leurs sels acceptables dans de telles compositions orales. Dans la mesure où les compositions sont destinées à être administrées à un sujet, ces sels sont bien entendu choisis pour leur totale innocuité. A ce titre, conviennent tout particulièrement à l'invention les sels alcalins ou alcalinoterreux, en particulier les sels de magnésium, manganèse, fer II ou zinc. Selon l'invention, l'hypotaurine, ou la taurine sont utilisées à des doses journalières allant de 0,5 à 4000 mg par jour, de préférence 10 à 500 mg par jour, les doses adaptées à chaque sujet étant bien entendu définies au regard du résultat de l'évaluation selon la présente invention. Typiquement, la dose journalière est comprise entre 50 à 150 mg par jour. Les doses indiquées dans la présente description sont les doses en équivalent taurine. Egalement à titre d'exemple, une carence chez un individu à hauteur de 20 % de la teneur physiologique normale en acide glutamique pour un sujet d'un âge compris entre 45 et 55 ans, quel que soit son sexe peut être traitée par une supplémentation de cet individu en acide glutamique ou l'un de ses dérivés ou métabolites, à hauteur de 10 mg/Kg/jour X 0,2 en équivalent acide glutamique pendant 8 semaines. (la dose nutritionnelle journalière recommandée pour un adulte pour un acide aminé est de l'ordre de 10 mg/jour/kg). Selon une échelle de grandeur, des valeurs en deçà des valeurs standards attendu chez un sujet sain (en valeur absolue, c'est-à-dire les dosages montrant une diminution par rapport à la valeur standard) en acide glutamique, thréonine, asparagine et/ou alanine peuvent être en particulier prédictives d'un état alopécique ou d'un état de dégradation de la qualité des cheveux. Cette dégradation de la qualité des cheveux peut se manifester par des cheveux mous, cassants, ternes, affinés, l'apparition de fourches, une perte de vigueur des fibres kératiniques, de volume et de brillance de la chevelure.
Des compositions de supplémentation respectant le ratio standard, par exemple émanant du tableau B précédent, peuvent ainsi être utiles pour pallier ces états de carence et donc prévenir et/ou traiter la chute des cheveux chez l'homme et la femme, et améliorer la qualité des cheveux chez l'homme et la femme.
De tels traitements peuvent, bien entendu, être affinés en fonction de l'âge, grâce à des mesures standards préalablement effectuées dans un échantillon représentatif d'individus d'un âge voisin. D'autres ingrédients usuels peuvent être mis en oeuvre dans le produit personnalisé de supplémentation. Des indications sur les compositions de supplémentation sont données dans la description qui suit dans le paragraphe relatif au kit destiné à améliorer l'état de la chevelure d'un sujet. L'invention vise également un procédé pour déterminer l'efficacité d'un traitement cosmétique effectué sur un sujet, notamment d'un traitement destiné à améliorer l'état d'une chevelure ou à prévenir son altération, comportant les étapes suivantes : i. Prélèvement d'au moins un follicule pileux du sujet, ii. Analyse de la teneur en un analyte consistant en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine, iii. Traitement cosmétique, iv. Renouvellement des étapes i et ii sur une chevelure traitée, et v. Comparaison des résultats avant et après traitement.
L'invention se rapporte en particulier à un dispositif d'évaluation de l'état d'une chevelure d'un sujet par détermination d'un état de carence en un analyte consistant en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine, comportant un moyen de prélèvement d'au moins un follicule pileux, un organe de collecte dudit follicule pileux comprenant un milieu liquide, un ou des réactif(s) permettant d'extraire du follicule pileux ledit analyte, et un indicateur colorimétrique, la mise en contact dudit liquide comprenant ledit analyte extrait avec l'indicateur colorimétrique permettant de produire une réaction observable, notamment un changement visuel. L'organe de collecte peut être une cavité, une cuve ou un tube comprenant le milieu liquide permettant de recueillir le ou les follicule(s) pileux prélevé(s). La cavité, la cuve ou le tube peut être réalisé(e) dans une matière transparente, notamment une matière plastique transparente. Il ou elle peut être muni(e) d'un obturateur de type capuchon amovible destiné à être ôté au moment de la réalisation de l'évaluation. Le dispositif peut comporter un conditionnement stérile, permettant d'éviter une contamination préalablement à l'obtention de l'échantillon.
Le moyen de prélèvement peut être par exemple, un instrument d'épilation, une pince à épiler. Il faudra veiller à ce que ces moyens de prélèvement permettent de retirer le bulbe pileux. En effet, le dosage en analyte porte, selon un mode de réalisation particulier de l'invention, sur la gaine épithéliale externe du follicule pileux. L'analyse de l'échantillon permet de renseigner le sujet testé sur les éventuelles carences en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine à l'origine d'une éventuelle altération de l'état de sa chevelure, notamment tant en terme de type de carence que de son degré.
La mise en contact de l'échantillon avec un réactif peut permettre d'extraire du follicule pileux ledit analyte lorsque ledit réactif est mis en présence de l'analyte ou d'une concentration déterminée d'analyte. A titre de réactif convenant pour la mise en oeuvre de l'invention on peut notamment citer la ninhydrine. Comme précisé précédemment, il peut également s'agir d'une enzyme, un antigène ou un anticorps. Selon un mode de réalisation particulier de l'invention, le dispositif peut comporter un réactif par nature de dosage, à savoir en fonction de l'analyte à tester, par exemple conditionné dans des sachets individuels hermétiques. Selon un autre mode de réalisation de l'invention, le réactif peut être directement présent dans le milieu liquide ou encore être conditionné séparément pour être mis en contact avec l'échantillon au moment de chaque utilisation. La mesure ou évaluation de la teneur en analyte peut bien entendu être réalisée à l'aide de différentes méthodes directement lié à la nature du réactif retenu. On peut ainsi envisager de caractériser l'abondance en analyte(s) au sein de l'échantillon, par une méthode de dosage de type physique, comme par exemple diffusion de la lumière, turbidité, de type chimique, physico-chimique ou encore de type immunologique. Toutefois, dans la mesure où le dispositif est plus particulièrement destiné à une utilisation dans un institut de beauté ou par le consommateur directement, il est avantageux de mettre en oeuvre un mode de détection par colorimétrie.
Selon cette alternative, on peut mettre en présence tout ou partie de l'échantillon avec une quantité efficace d'un composé, encore dénommé ci-après "indicateur colorimétrique", susceptible d'interagir avec celui-ci et de manifester cette interaction selon un mode colorimétrique. Il peut s'agir soit d'une apparition de couleur soit de la modification, voire disparition de sa couleur initiale.
La mise en contact de l'indicateur colorimétrique avec tout ou partie de l'échantillon peut requérir au préalable la dilution de l'échantillon. Cette option est bien entendu fonction de la nature de l'indicateur colorimétrique et est généralement prescrite dans le protocole d'utilisation de l'indicateur colorimétrique.
A titre d'exemples d'indicateurs colorimétriques on peut notamment citer la ninhydrine. Selon un mode de réalisation particulier de l'invention, le ou les indicateurs colorimétriques est ou sont fixé(s), notamment par adsorption, sur un support solide par exemple sur une ou plusieurs bandelettes pouvant être pourvues de zones aptes à changer de couleur en fonction de la ou des teneur(s) en analyte(s), à l'image par exemple du papier pH. La mise en contact se fait alors par imprégnation du support avec tout ou partie de l'échantillon. L'intensité de la couleur obtenue à l'issue de la mise en contact a en outre pour avantage de pouvoir être parallèlement un indicateur de la concentration en analyte, sous réserve de disposer, avec l'indicateur coloré retenu, d'un étalonnage correspondant.
Pour les raisons évoquées précédemment, ce mode de détection de type colorimétrique est particulièrement intéressant en termes de facilité de manipulation et de rapidité de lecture. Selon un mode de réalisation particulier de l'invention, le dispositif est caractérisé en ce qu'il est muni de références comportant des données sur la teneur en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine correspondant aux teneurs standards chez un sujet sain ou à divers types et/ou degrés d'altération d'une chevelure ou d'un appareil de mesure pour permettre l'analyse de la teneur en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine. Selon une variante, une échelle colorimétrique peut être utilisée afin de faciliter la détection visuelle du changement de couleur et/ou de qualifier l'abondance relative en analytes. Cette variante donne ainsi accès à une analyse semi-quantitative. Le dispositif peut comporter une échelle colorimétrique, voire plusieurs échelles colorimétriques en fonction du nombre d'analytes ayant fait l'objet de l'évaluation, comportant un marquage propre à indiquer directement le degré de la carence en ledit analyte.
Le dispositif peut également être pourvu de tableaux de références comme aide à la détermination des carences multiples et peuvent être associés à des états d'altération de la chevelure spécifiques, à des standards de typologie bioanalytique nécessitant des traitements adaptés en conséquence.
Ce changement de couleur peut être détecté visuellement et/ou au moyen d'un appareil, par exemple un chromamètre ou autrement encore, notamment à l'aide d'un scanner. Selon une autre variante, le dispositif est tel que les références consistent en une ou plusieurs échelles comportant un marquage apte à indiquer directement le type et/ou le degré d'altération de la chevelure du sujet et/ou la nature et le degré de l'état de carence. L'ensemble des récipients constituant le dispositif sont obturés lors de leur conditionnement. Les modes d'obturation sont ajustés de manière à être propices à une ouverture aisée au moment de la réalisation de l'évaluation et, le cas échéant, à une libération contrôlée de leur contenu par l'adaptation d'un embout compte-goutte par exemple. Cette dernière option est notamment intéressante pour l'étape de mise en contact de l'échantillon avec le réactif ou encore de la détection par colorimétrie. Le dispositif selon l'invention comprend en outre avantageusement une notice d'utilisation dictant à l'utilisateur les consignes à suivre pour la réalisation du test. D'une manière générale, le protocole à suivre peut impliquer les étapes suivantes : - la mise en présence de cheveux avec la solution de prélèvement pour donner l'échantillon, - la mise en présence de l'échantillon avec un ou des réactifs, - si nécessaire, l'exposition du récipient contenant l'échantillon à une source de chaleur, le cas échéant sous agitation, de manière à porter l'échantillon à une température supérieure à 50 °C voire 100 °C pendant un délai déterminé, par exemple environ 15 minutes pour un chauffage à 100 °C, - si nécessaire, la dilution de l'échantillon, à l'issue de cette étape de chauffage, - l'introduction d'une quantité donnée de cet échantillon dans le récipient contenant l'indicateur colorimétrique ou inversement d'une quantité donnée de l'indicateur colorimétrique dans ledit échantillon, et - la lecture du résultat en se référant, le cas échéant, à une échelle colorimétrique. Cette échelle colorimétrique peut être fournie au sein du dispositif voire être présentée au niveau du conditionnement même du dispositif. On peut également envisager de fournir avec le dispositif une échelle ou nuancier permettant de doser qualitativement et/ou quantitativement les analytes extraits en fonction de l'intensité de couleur obtenue à l'issue de l'évaluation. Le dispositif selon l'invention peut également contenir des cheveux de référence pour guider l'utilisateur sur la quantité de cheveux à prélever.
Ce dispositif peut par exemple délivrer une information non numérique du type follicule pileux présentant une carence en taurine , accompagnée d'un score compris entre n et m, où n et m sont des échelles correspondant à doses journalières préconisées pour pallier à cet état de carence.
Selon un mode de réalisation particulier de l'invention, l'utilisateur peut évaluer les carences en analyte conforme à la présente invention avant et après traitement cosmétique de sorte à évaluer l'effet du traitement cosmétique sur l'état de sa chevelure.
L'invention est relative à un kit destiné à améliorer l'état d'une chevelure d'un sujet comprenant un dispositif d'évaluation tel que décrit ci-dessus et les ingrédients utiles à la préparation d'une composition de supplémentation adaptée aux besoins du sujet révélés par le dispositif d'évaluation. Alternativement, l'invention est relative à un kit destiné à améliorer l'état d'une chevelure d'un sujet comprenant un dispositif d'évaluation tel que décrit ci-dessus et une composition de supplémentation. Dans cette variante, l'utilisateur peut évaluer les carences de sa chevelure et/ou l'état d'altération de la chevelure correspondante avant l'utilisation de la composition puis après celle-ci et en comparant les résultats déterminer l'effet du traitement sur l'état de sa chevelure. Le kit selon la présente invention peut alors être utilisé afin de déterminer une posologie dudit produit de supplémentation, par exemple un nombre d'applications de la composition par intervalle de temps ou une quantité à appliquer s'il s'agit d'une composition topique ou à ingérer s'il s'agit d'une administration orale. Ce kit peut être utilisé dans un institut de beauté ou à domicile. La composition de supplémentation peut prendre la forme d'une composition de soin et/ou de conditionnement des cheveux, d'un shampoing ou d'un après-shampoing, c'est-à-dire être destiné à un usage externe ou encore prendre la forme d'un complément alimentaire, par exemple sous la forme de poudre ou d'un sirop. Dans le cas d'un shampoing, la composition d'un kit comprenant deux compartiments. Typiquement, ce kit peut comprendre un compartiment avec les Acides Aminés et un autre contenant un ou des tensioactifs.
Dans les deux cas, le kit peut comprendre une base de composition de supplémentation, qui pourra être ajustée en fonction des résultats du dispositif d'évaluation par ajout d'ingrédients conditionnés à cet effet, par exemple dans des sachets individuels hermétiques. Des indications sur le mode opératoire pourront avantageusement être portées dans une notice d'utilisation jointe au kit selon l'invention.
La base de composition de supplémentation sera, selon le cas une composition de soin et/ou de conditionnement des cheveux c'est-à-dire être destiné à un usage externe ou encore prendre la forme d'un complément alimentaire, par exemple sous la forme de poudre ou d'un sirop.
Lorsque la base de composition de supplémentation est une composition de soin et/ou de conditionnement des cheveux, d'un shampoing ou d'un après-shampoing, elle peut comprendre les ingrédients usuels pour de telles compositions, connues en soi de l'homme de l'art. A ce titre on cite notamment les agents tensioactifs classiques, les agents de conditionnement, tels que les agents conditionneurs cationiques, des composés régulateurs de viscosité tels que des électrolytes, ou des agents épaississants et des silicones. Les compositions peuvent comprendre un milieu physiologiquement acceptable. Ce milieu comprend préférentiellement de l'eau et peut être constitué uniquement d'eau. Le milieu peut également comprendre un mélange d'eau et d'un solvent cosmétiquement acceptable tel qu'un alcool inférieur en C1-C4, tel que l'éthanol, l'isopropanol, le tertio-butanol, le n-butanol, les polyols comme le propylèneglycol, les éthers de polyol ; et leurs mélanges. Lorsque la base de composition de supplémentation est un complément alimentaire, il peut comprendre des ingrédients usuels et connus en soi par l'homme de l'art. Un tel complément alimentaire peut comprendre des ingrédients additionnels tels que des vitamines comme la vitamine A, la vitamine B6, du zinc, des flavonoïdes, des régulateurs de séborrhée tels que le zinc.
L'invention pourra être mieux comprise à la lecture de la description détaillée qui va suivre, d'exemples de mise en oeuvre non limitatifs, et à l'examen du dessin annexé, qui fait partie intégrante de la description, et sur lequel : - la figure 1 représente de manière schématique, en perspective, un dispositif de conditionnement d'un kit destiné à l'améliorer l'état d'une chevelure, - la figure 2 représente un exemple de kit destiné à l'améliorer l'état d'une chevelure d'un sujet comprenant un dispositif d'évaluation selon la présente invention et les ingrédients utiles à la confection d'une composition de supplémentation adaptée aux besoins du sujet révélés par le dispositif d'évaluation, - la figure 3 représente de manière schématique un dispositif de chauffage pouvant être utilisé pour porter les cheveux prélevés et la solution de prélèvement à une température prédéfinie, - La figure 4 est une vue schématique en coupe axiale d'une variante de réalisation d'un dispositif de conditionnement permettant de réaliser le mélange extemporané du milieu liquide et du réactif, - La figure 5 illustre le traitement à distance de la confection d'une supplémentation adaptée aux résultats de l'évaluation des carences et/ou de l'état de la chevelure d'un sujet associé. Un kit permettant d'améliorer l'état d'une chevelure peut être proposé, par exemple à l'utilisateur, dans une boite 1 contenant, comme on peut le voir sur la figure 2, un récipient 2 contenant le réactif d'extraction, un tube 3 ou autre récipient destiné à recevoir les cheveux ou la méchette de cheveux et le milieu liquide, un sachet 4 ou autre dispositif de conditionnement, comprenant l'analyte, ou un des dérivés, un de ses précurseurs ou un de ses métabolites, par exemple la taurine, un récipient 5 contenant l'indicateur colorimétrique, une notice d'utilisation éventuelle 6 et une échelle colorimétrique 7 permettant à l'utilisateur d'apprécier la couleur finale du mélange en fin de réaction. Le kit est donc représenté ici de manière simplifiée, où l'on ne dose qu'un unique analyte, par exemple la taurine. Le kit peut servir à un usage unique ou au contraire comporter des quantités suffisantes de réactifs pour permettre la caractérisation de plusieurs méchettes. Dans une variante non illustrée le kit contient également un outil de prélèvement des cheveux, de préférence une pince à épiler.
Dans une variante non illustrée, la notice 6 est remplacée par des indications figurant sur la boite 1. Il peut en être de même de l'échelle colorimétrique 7, laquelle peut figurer sur la notice ou sur la boite 1, voire sur le récipient 5, le cas échéant. Dans une autre variante non illustrée, l'indicateur colorimétrique est fixé sur un support à l'image du papier pH.
Dans encore une autre variante non illustrée, le kit comprend un flacon gradué ou une dosette de sorte à pouvoir mesurer la quantité nécessaire à la confection de la composition de supplémentation. Dans l'exemple de la figure 2, le milieu liquide ne contient pas dans le récipient 2 le réactif, mais on ne sort pas du cadre de la présente invention lorsque le milieu liquide comprend déjà avant l'utilisation le réactif d'extraction. Pour porter la solution d'extraction avec une méchette M dans le tube 3 à une température prédéfinie, on peut utiliser un appareil de chauffage 9, représenté schématiquement à la figure 3.
On a représenté à la figure 4 un exemple de dispositif de conditionnement 20 agencé pour stocker séparément le milieu liquide 21 et le réactif d'extraction 22 tout en permettant leur mélange ultérieur. Le dispositif 20 comporte par exemple un corps 23 et une partie amovible 24 agencée pour se fixer sur le corps 23, par exemple par vissage ou encliquetage. La partie amovible 24 comporte une base 25 pourvue d'une lèvre annulaire d'étanchéité 26 s'appliquant sur le corps 23 et d'un rebord 27 servant de support à un opercule 28 permettant d'isoler le réactif 22 du milieu liquide 21 durant le stockage. La partie amovible 24 comporte également une partie supérieure 29 sur laquelle l'utilisateur peut appuyer pour briser l'opercule 28 et provoquer l'expulsion du réactif d'extraction 22 dans le corps 23 et son mélange avec le milieu liquide 21. La partie supérieure 29 comporte, dans l'exemple illustré, dans sa portion centrale, un relief 30 de préférence de forme pointue permettant de perforer l'opercule 28. Ce dernier est par exemple constitué par un film thermosoudé à sa périphérie sur le rebord 27. La partie supérieure 29 est par exemple fixée par encliquetage ou thermosoudage sur la partie de base 25, après mise en place du réducteur 22. Pour utiliser le dispositif représenté à la figure 4, l'utilisateur peut retirer la partie amovible 24 et introduire la méchette dans le corps 23, de façon à l'exposer à la solution d'extraction 21. Le corps 23 peut être disposé dans un appareil de chauffage comme illustré à la figure 3. Une fois l'opération d'extraction terminée, l'utilisateur peut remettre en place la partie amovible 24 sur le corps 23 et appuyer sur la partie supérieure 29 pour provoquer la rupture de l'opercule 28 et l'adjonction du réactif d'extraction 22 dans le milieu liquide 21. Le dispositif selon l'invention d'évaluation de l'état d'une chevelure d'un sujet n'est pas représenté mais correspond en réalité aux illustrations précédemment détaillées à l'exception de l'absence de tout ingrédient et conditionnement par exemple de type sachet 4 permettant la confection extemporanée d'un produit de supplémentation adapté en fonction des résultats de l'analyse. Dans l'exemple de la figure 5, le tube 3 comprenant la méchette M ou le tube 21 illustré précédemment comprenant également le réactif d'extraction 22, est envoyé ou déposé dans un laboratoire d'analyse 40, qui peut le cas échéant réaliser un profil complet en analyte et procéder à l'étape de comparaison soit avec les teneurs standards chez un sujet sain, soit comparer, de préférence de façon automatisée avec des profils types correspondants à des états d'altération de la chevelure précis. Le cas échéant, le traitement des données peut être effectué par un serveur distant 41, auquel par exemple les résultats d'analyse sont fournis sous forme d'un tableau standardisé en fonction du nombre de dosages effectués, à savoir en fonction du profil complet ou partiel de l'analyse. Ce serveur 41 peut ensuite transmettre des informations au consommateur, notamment un résultat d'analyse, lequel peut être accompagné par la prescription d'un produit de supplémentation, voire par la fourniture d'un produit de supplémentation personnalisé 44, le serveur 40 ayant par exemple communiqué, par exemple par l'intermédiaire du réseau 42, des informations à un centre de fabrication 43. Le produit de supplémentation 44 comporte par exemple les ingrédients permettant de pallier les carences précédemment évaluées, à l'origine de l'altération de l'état de la chevelure. Dans l'ensemble du texte, y compris les revendications, l'expression comportant un doit se comprendre comme étant synonyme de comportant au moins un , sauf si le contraire est spécifié.
Exemple 1 : Détermination de la taurine et des acides aminés libres dans les gaines externes de follicule pileux L'analyse des acides aminés naturels, certains de leurs métabolites et de petits peptides (notamment le glutathion) présents dans des gaines externes de follicules pileux, est effectuée par séparation sur une colonne remplie d'une résine échangeuse de cations. L'élution se fait en fonction de l'augmentation progressive du pH et de la force ionique des éluants, ainsi que de la variation de la température de la colonne. Une réaction post-colonne avec la ninhydrine est ensuite mise en place à 135 °C donnant ainsi une coloration pourpre avec l'ensemble des acides aminés excepté avec la proline et ses dérivés donnant une coloration jaune. Un colorimètre permet de détecter les acides aminés à deux longueurs d'onde, 570nm pour tous les acides aminés sauf la proline et ses dérivés détectables à 440nm. La durée d'une analyse (réalisée avec un analyseur d'acides aminés Hitachi L8800) est constituée de trois cycles : un cycle d'élution des différents acides aminés (105 minutes), un cycle de rinçage (15 minutes) puis d'équilibration de la colonne (30 minutes).
1.1. Réactifs et solutions à préparer Réactifs : Solution commerciale standard d'acides aminés sigma Asparagine (sigma, réf. :70-47-3) 20 25 30 5 10 15 Glutamine (Sigma, réf : 56-85-9)) Glutathion réduit (Flu(a, réf: 70-18-8) Glutathion oxydé (Fluka, réf: 27025-41-8) O-Phospho-l-sérine (Sigma, réf 407-41-0) 0-Phosphoryl-éthanolamine (Sigma, réf 1071-23-4) Acide chlorhydrique 1N Kit Ninhydrine /tampon (Hitachi, réf 142-05051) : ces réactifs sont prêts à l'emploi Solutions à préparer : -Tampon citrate de lithium pH 2 : 0.07M Ac citrique, H2O 10 g hydroxyde de lithium, H2O 1.26g H2O mQ qsq à 1000ml Ajuster à pH 2 (avec HC1 #N) -Tampons d'élution : Tampon 1 Tampon 2 Tampon 3 Tampon 4 Tampon 5 EAU DISTILLEE 700 mL 700 mL 700 mL 700 mL 700 mL CITRATE DE LITHIUM 5.73 g 9.80 g 8.79 g 9.80 g LITHINE 8.40 g CHLORURE DE 1.24 g 6.36 g 26.62 g 38.15 g LITHIUM ACIDE CITRIQUE 19.90 g 12.00 g 11.27 g 3.3 g ETHANOL 30 mL 30 mL 100 mL 30 mL ALCOOL 5 mL 5 mL 3mL BENZYLIQUE 2,2'-THIODIETHANOL BRU 35 4 mL 4 mL 4 mL 4 mL 4 mL ACIDE CAPRYLIQUE 0.1 mL 0.1 mL 0.1 mL 0.1 mL 0.1 mL TOTAL 1000 mL 1000 mL 1000 mL 1000 mL 1000 mL Concentration Li+ 0.09 0.255 0.721 1 0.2 pH 2.8 3.7 3.4 4.1 -Réactifpost-colonne : mélange ninhydrine-tampon Ces réactifs sont prêts à l'emploi. Ils sont disponibles chez ScienceTec (14205051) 5 sous forme d'une bouteille contenant 1L de ninhydrine et une autre 1L de tampon dont les compositions et les mises en oeuvre sont décrites ci-dessous. ETAPES REACTIFS QUANTITES 1 1-METHOXY-2-PROPANOL 978,5 ml 2 NINHYDRINE 38,5 g Ninhydrine 3 Opération de dégazage via un gaz 5 minutes inerte 4 BOROHYDRURE DE SODIUM 80,5 mg Opération de dégazage via un gaz 5 minutes inerte 1 EAU DISTILLEE 671 ml 2 ACETATE DE LITHIUM 407 g Tampon 3 ACIDE ACETIQUE 245 ml 4 1-METHOXY-2-PROPANOL 801 ml 5 Opération de dégazage via un gaz 10 minutes inerte -Solutions étalons d'acides aminés : 1) Etalon commercial sigma à 0,05 mole/ml + O-Phospho-l-sérine et 10 0-Phosphoryl-éthanolamine à 0,05gmol/ml : (étalon 1 contenant 40 acides aminés). Cette solution est conservée à 4 °C. 2) Solution étalon de Glutamine-Asparagine-Glutathion réduit-Glutathion oxydé à 0.05 mole/ml : (étalon 2). Cette solution doit être préparée extemporanément.
Les solutions étalons (1 et 2) sont mises en solutions dans un tampon pH 2 permettant de charger positivement les fonctions amines puis sont filtrées sur filtre Millex 0,45 m, dans des vials de 2 mL. - Préparation de l'essai : Après réception des échantillons (homogénats de 1 à 10 follicules pileux prélevés par épilation dans un volume de 120 l de tampon à pH2), leur conservation se fait à -20 °C. Leur décongélation s'effectue progressivement à 4 °C. Les tubes sont vortexés et centrifugés. La quantité de surnageant prélevée est comprise entre 50 à 80 l à l'aide d'une micropipette de précision, et transvasée dans des inserts de 100 l.
1.2. Analyse de l'échantillon - Une analyse par chromatographie phase liquide échangeuse d'ions avec détection post-colonne à la ninhydrine est utilisée. - La phase mobile est constituée de sel de lithium, permettant de séparer les acides aminés naturels ainsi que certains de leurs dérivés et de petits peptides (notamment le glutathion). La séparation des acides aminés se fait en fonction de l'augmentation progressive du pH et de la force ionique des éluants, ainsi que de la variation de la température de la colonne. - Une réaction post-colonne avec la ninhydrine est ensuite mise en place dans un coil chauffé à 135 °C donnant ainsi une coloration pourpre avec tous les acides aminés, excepté avec la proline et ses dérivés donnant une coloration jaune. Un colorimètre permet de détecter les acides aminés à deux longueurs d'onde, 570 nm pour tous les acides aminés sauf la proline et ses dérivés détectables à 440 nm. - La durée d'une analyse est constituée de trois cycles : un cycle d'élution des différents acides aminés (110 minutes), un cycle de rinçage (15 minutes) puis d'équilibration de la colonne (30 minutes). - Un dosage direct avec un étalon externe permet de quantifier chaque acide aminé. Un étalon contenant l'ensemble des acides aminés est préparé. L'injection de celui- ci à une unique concentration permet de tracer pour chaque acide aminé une droite d'étalonnage passant par l'origine avec un point étalon, ceci étant permis étant donné la reproductibilité du système. Néanmoins, un étalon est préparé une fois par semaine et est injecté tous les 8 échantillons afin de contrôler la fiabilité des résultats. 1.3. Mise en oeuvre Conditions chromatographipues : *Colonne : longueur 60 mm, diamètre 4,6 mm, remplie avec la résine 2622SC conditionnée sous la forme lithium. *L'élution s'effectue selon les modalités décrites ci-après. TABLEAU I TAMPONS D'ELUTION (total 100 %) DEBIT (mL/min) ETAPES TEMPS TEMPERATURE (minutes) 1 2 3 4 5 COLONNE (°C) pompe pompe Eluant Ninhydrine/Tampon 1 0 100 38 0.35 0.35 2 10 30 3 17.9 4 18 80 20 5 20.5 52 6 29.5 70 30 7 31.6 10 90 8 39 45 9 43 100 43.1 11 51 70 12 51.1 100 13 67 45 14 73 73.1 100 16 92 70 17 107 18 107.1 100 19 112 120 38 21 120.1 100 22 122 23 150 TEMPERATURE REACTION NINHYDRINE : 135 °C *Le volume injecté est de 25 l pour les solutions étalons.
Les protocoles développés ci-dessus ont été mis en oeuvre pour établir les 10 amminogrammes de plusieurs populations qui sont décrites dans les exemples qui suivent. Exemple 2: Profil d'acides aminés libres du follicule pileux pour deux populations hommes alopéciques ou non, jeunes et/ou âgés
Le tableau 2 rapporté ci-après, donne les valeurs en acides aminés, peptides ou 15 dérivés de peptides, analysés respectivement.
Les valeurs sont rapportées en pourcentage molaire (quantité d'un acide aminé sur la somme des quantités en acides aminés, peptides et dérivés de peptides.
TABLEAU 2 Hommes Hommes Hommes non Hommes non alopéciques alopéciques alopéciques alopéciques jeunes âgés âgés jeunes Taurine 16,7 % 18,3 % 18,1 % 17,8 % Acide Glutamique 11,4 % 10,4 % 12,2 % 10,9 % Gluthation réduit 10,4 % 10,4 % 12,1 % 11,5 % Glutamine 9,8 % 9,3 % 8,8 % 9,0 % Alanine 5,9 % 5,7 % 6,4 % 5,8 % Glycine 6,2 % 6,0 % 5,2 % 5,5 % Proline 3,1 % 3,8 % 4,7 % 4,6 % Acide Aspartique 5,0 % 5,6 % 4,6 % 5,9 % Sérine 5,4 % 5,3 % 4,1 % 4,9 % Valine 2,9 % 2,7 % 2,6 % 2,5 % Thréonine 2,7 % 2,4 % 2,2 % 2,3 % Lysine 2,3 % 2,3 % 2,2 % 2,3 % Leucine 2,2 % 2,0 % 2,0 % 1,9 % Histidine 2,0 % 1,9 % 1,6 % 1,8 % Arginine 1,7 % 1,6 % 1,5 % 1,5 % Tyrosine 1,2 % 1,2 % 1,4 % 1,4 % Citrulline 1,5 % 1,5 % 1,2 % 1,5 % Phenylalanine 1,1 % 1,1 % 1,0 % 1,0 % Asparagine 1,7 % 1,2 % 0,9 % 1,0 % Isoleucine 1,1 % 1,0 % 0,9 % 0,9 % Ornithine 0,7 % 0,8 % 0,6 % 0,8 % Méthionine 0,5 % 0,4 % 0,4 % 0,4 % Glutathion oxydé 0,3 % 0,2 % 0,2 % 0,2 % Cystine 0,1 % 0,1 % 0,1 % 0,1 % Les résultats témoignent d'une variation significative entre les aminogrammes établis pour chacune des populations.
Exemple 3 : Profil d'acides aminés libres chez la femme saine vs. une femme 10 présentant une carence corrélée à un vieillissement capillaire et plus particulièrement une altération de la qualité du cheveu Le tableau 3, rapporté ci-après, donne les valeurs en acides aminés, peptides ou dérivés de peptides, analysés respectivement pour les deux populations analysées.5 TABLEAU 3 Femmes non alopéciques Femmes non alopéciques âgées jeunes Taurine 16,4 % 17,5 % Acide Glutamique 10,3 % 12,0 % Glutamine 9,1 % 9,3 % Gluthation réduit 9,0 % 10,5 % Acide Aspartique 7,0 % 4,5 % Glycine 6,7 % 6,1 % Sérine 6,2 % 5,7 % Alanine 5,8 % 6,1 % Proline 3,2 % 2,7 % Thréonine 2,7 % 3,0 % Valine 2,6 % 2,8 % Lysine 2,3 % 2,4 % Histidine 2,3 % 2,2 % Leucine 2,2 % 2,0 % Citrulline 1,9 % 1,4 % Arginine 1,8 % 1,5 % Asparagine 1,4 % 1,6 % Tyrosine 1,2 % 1,0 % Phenylalanine 1,1 % 1,1 % Isoleucine 1,0 % 1,0 % Ornithine 0,8 % 0,8 % Méthionine 0,4 % 0,4 % Glutathion oxydé 0,3 % 0,3 % Cystine 0,1 % 0,1 % Ces résultats témoignent d'une variation significative entre les aminogrammes 5 établis des deux populations. 10 Exemple 4 : Profil d'acides aminés libres chez l'homme sain vs. un homme présentant une carence corrélée à un vieillissement capillaire et plus particulièrement une altération de la qualité du cheveu Le tableau 4, rapporté ci-après, rapporte les valeurs en acides aminés, peptides ou dérivés de peptides, analysés respectivement pour les deux populations analysées et qui figurent déjà dans le tableau 2 ci-dessus.
TABLEAU 4 Hommes non Hommes alopéciques âgés alopéciques âgés Taurine 18,1 % 17,8 % Acide Glutamique 12,2 % 10,9 % Gluthation réduit 12,1 % 11,5 % Glutamine 8,8 % 9,0 % Alanine 6,4 % 5,8 % Glycine 5,2 % 5,5 % Proline 4,7 % 4,6 % Acide Aspartique 4,6 % 5,9 % Sérine 4,1 % 4,9 % Valine 2,6 % 2,5 % Thréonine 2,2 % 2,3 % Lysine 2,2 % 2,3 % Leucine 2,0 % 1,9 % Histidine 1,6 % 1,8 % Arginine 1,5 % 1,5 % Tyrosine 1,4 % 1,4 % Citrulline 1,2 % 1,5 % Phenylalanine 1,0 % 1,0 % Asparagine 0,9 % 1,0 % Isoleucine 0,9 % 0,9 % Ornithine 0,6 % 0,8 % Méthionine 0,4 % 0,4 % Glutathion oxydé 0,2 % 0,2 % Cystine 0,1 % 0,1 % Les résultats témoignent d'une variation significative entre les aminogrammes des deux populations.
Exemple 5 : Profil d'acides aminés libres chez la femme saine vs. une femme présentant une carence corrélée à un désordre capillaire et plus particulièrement une alopécie Le tableau 5, rapporté ci-après, donne les valeurs en acides aminés, peptides ou 5 dérivés de peptides, analysés respectivement pour les deux populations analysées. TABLEAU 5 Femmes alopéciques Femmes non âgées alopéciques âgées Taurine 18,7 % 16,4 % Acide Glutamique 11,3 % 10,3 % Glutamine 6,9 % 9,1 % Gluthation réduit 6,0 % 9,0 % Acide Aspartique 6,6 % 7,0 % Glycine 7,3 % 6,7 % Sérine 6,7 % 6,2 % Alanine 6,1 % 5,8 % Proline 3,3 % 3,2 % Thréonine 2,6 % 2,7 % Valine 3,6 % 2,6 % Lysine 2,5 % 2,3 % Histidine 2,0 % 2,3 % Leucine 1,9 % 2,2 % Citrulline 2,1 % 1,9 % Arginine 1,7 % 1,8 % Asparagine 0,6 % 1,4 % Tyrosine 1,0 % 1,2 % Phenylalanine 1,0 % 1,1 % Isoleucine 1,1 % 1,0 % Ornithine 0,8 % 0,8 % Méthionine 0,4 % 0,4 % Glutathion oxydé 0,2 % 0,3 % Cystine 0,0 % 0,1 % Les résultats témoignent d'une variation significative entre les aminogrammes dE deux populations. s

Claims (27)

  1. REVENDICATIONS1. Procédé non thérapeutique utile pour l'évaluation de l'état d'une chevelure, caractérisé en ce qu'il comprend au moins les étapes suivantes : i. disposer d'au moins un follicule pileux de ladite chevelure, ii. analyser au niveau dudit follicule pileux la teneur en au moins un analyte consistant en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine, et iii. comparer la teneur obtenue à l'issue de l'étape ii. avec au moins une teneur de référence pour le ou les analyte(s).
  2. 2. Procédé selon la revendication 1, comprenant en outre l'analyse d'au moins un analyte annexe choisi parmi le glutathion réduit, l'acide aspartique, la sérine, la proline, la valine, la thréonine, la lysine, la leucine, l'histidine, la citrulline, l'arginine, la tyrosine, l'asparagine, l'isoleucine, la phénylalanine, l'ornithine, la méthionine, le glutathion oxydé et la cystine. 15
  3. 3. Procédé selon la revendication 1 ou 2 dans lequel l'analyse est effectuée au niveau du follicule pileux d'un sujet de sexe féminin et vise à apprécier au moins les teneurs en glutathion réduit, glutamine, leucine, asparagine et tyrosine.
  4. 4. Procédé selon la revendication 1 ou 2 dans lequel l'analyse est effectuée au niveau du follicule pileux d'un sujet de sexe masculin et vise à apprécier au moins les teneurs en 20 acide glutamique, thréonine, asparagine et alanine.
  5. 5. Procédé selon la revendication 1 ou 2 dans lequel l'analyse est effectuée au niveau du follicule pileux d'un sujet de sexe masculin et vise à apprécier au moins les teneurs en glycine, valine, sérine et thréonine.
  6. 6. Procédé selon la revendication 1 ou 2 dans lequel l'analyse est effectuée au 25 niveau du follicule pileux d'un sujet de sexe féminin et vise à apprécier au moins les teneurs en acide glutamique, glutathion réduit et thréonine.
  7. 7. Procédé selon la revendication 1 ou 2, utile pour la caractérisation de l'état du cuir chevelu de ladite chevelure, l'état de vieillissement de ladite chevelure, l'état de volume de ladite chevelure, l'aspect de brillance de ladite chevelure, la capacité de ladite chevelure à 30 conserver un brushing, d'une chute de cheveux, d'une qualité des cheveux telle que leur aptitude à résister à la casse, la présence de fourches, leur dureté et/ou leur diamètre.
  8. 8. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel la teneur de référence est la teneur de l'analyte considéré chez un sujet sain et notamment du 10même âge que le sujet à plus ou moins 4 ans, voire à plus ou moins 3 ans, plus particulièrement à plus ou moins 2 ans.
  9. 9. Procédé selon la revendication précédente, dans lequel le sujet sain a le même sexe que le sujet.
  10. 10. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel la teneur obtenue à l'issue de l'étape ii, est comparée à au moins deux valeurs de référence représentatives respectivement d'une teneur dudit analyte à deux stades temporels différents.
  11. 11. Procédé selon la revendication précédente, dans lequel les références sont fonction de l'âge et/ou du sexe du sujet.
  12. 12. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel l'étape de comparaison est effectuée par référence à des données imprimées.
  13. 13. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, dans lequel l'étape de comparaison est effectuée par référence à des données affichées à l'écran d'un ordinateur.
  14. 14. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, dans lequel l'étape de comparaison est effectuée de manière automatisée.
  15. 15. Procédé non thérapeutique pour caractériser l'aptitude d'une chevelure à répondre positivement à un traitement capillaire et/ou déterminer l'efficacité d'un traitement cosmétique à l'égard d'une chevelure comprenant au moins les étapes consistant à : i. Disposer d'au moins un premier follicule pileux de ladite chevelure, ii. Analyser au niveau dudit follicule pileux la teneur d'au moins un analyte consistant en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine, iii. Renouveler les étapes i. et ii. sur un deuxième follicule pileux de ladite chevelure, et iv. Comparer les résultats obtenus à l'issu des étapes ii. et iii., lesdits premier et second follicules pileux correspondant à des stades de traitement différents.
  16. 16. Procédé selon la revendication précédente, dans lequel le premier follicule pileux est représentatif d'une chevelure n'ayant pas subi de traitement et le second follicule pileux est représentatif de ladite chevelure ayant subi au moins un traitement.
  17. 17. Procédé selon la revendication 15, dans lequel les premier et second follicules pileux sont tous deux représentatifs de la même chevelure ayant subi au moins un traitement mais à des stades temporels différents du traitement.
  18. 18. Procédé selon l'une quelconque des revendications 15 à 17, comprenant en outre l'analyse d'un analyte annexe choisi parmi le glutathion réduit, l'acide aspartique, lasérine, la proline, la valine, la thréonine, la lysine, la leucine, l'histidine, la citrulline, l'arginine, la tyrosine, l'asparagine, l'isoleucine, la phénylalanine, l'ornithine, la méthionine, le glutathion oxydé et la cystine.
  19. 19. Dispositif utile pour l'évaluation de l'état d'une chevelure par analyse au niveau d'un follicule pileux de ladite chevelure de la teneur en au moins un analyte consistant en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine, comportant au moins un milieu liquide destiné à être mis en contact avec au moins un follicule pileux, un premier réactif apte à extraire dudit follicule pileux ledit analyte, et un second réactif apte à caractériser qualitativement et/ou quantitativement ledit analyte extrait.
  20. 20. Dispositif selon la revendication 19, dans lequel ledit second réactif est un indicateur colorimétrique.
  21. 21. Dispositif selon la revendication précédente, dans lequel l'indicateur colorimétrique est fixé sur un support solide, par exemple sur une ou plusieurs bandelettes pouvant être pourvues de zones aptes à changer de couleur en fonction de la ou des teneur(s) en analyte(s).
  22. 22. Dispositif selon l'une des revendications 19 à 21, caractérisé en ce qu'il est muni de références comportant des données sur la teneur en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine correspondant aux teneurs standards représentatifs d'un sujet sain et/ou de divers types et/ou degrés d'altération d'une chevelure ou d'un appareil de mesure pour permettre l'analyse de la teneur en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine.
  23. 23. Dispositif selon la revendication précédente, dans lequel les références consistent en une ou plusieurs échelles comportant un marquage apte à indiquer directement le type et/ou le degré d'altération de la chevelure du sujet et/ou la nature et le degré de l'état de carence.
  24. 24. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 19 à 23, utile pour analyser en outre au moins un analyte annexe choisi parmi le glutathion réduit, l'acide aspartique, la sérine, la proline, la valine, la thréonine, la lysine, la leucine, l'histidine, la citrulline, l'arginine, la tyrosine, l'asparagine, l'isoleucine, la phénylalanine, l'ornithine, la méthionine, le glutathion oxydé et la cystine.
  25. 25. Kit dédié au soin de la chevelure d'un sujet comprenant un dispositif d'évaluation selon l'une quelconque des revendications 19 à 24 et au moins un actif susceptible d'être administré audit sujet pour pallier une carence en au moins un analyte consistant en au moins la taurine, l'acide glutamique, la glutamine, la glycine ou l'alanine.
  26. 26. Kit selon la revendication 25 contenant plusieurs actifs conditionnés de manière isolée les uns des autres ou sous la forme de plusieurs types de mélanges.
  27. 27. Kit selon la revendication précédente, dans lequel l'actif est dédié à une administration par voie topique.
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